Автореферат и диссертация по медицине (14.03.10) на тему:Диагностическое значение различных лабораторных методов выявления трихомоноза у мужчин

ДИССЕРТАЦИЯ
Диагностическое значение различных лабораторных методов выявления трихомоноза у мужчин - диссертация, тема по медицине
Cапожкова, Жанна Юрьевна Москва 2010 г.
Ученая степень
кандидата медицинских наук
ВАК РФ
14.03.10
 
 

Оглавление диссертации Cапожкова, Жанна Юрьевна :: 2010 :: Москва

ОГЛАВЛЕНИЕ.

СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА IКЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫЕ ПОДХОДЫ К ВЫЯВЛЕНИЮ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРИХОМОНОЗА У МУЖЧИН (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Особенности лабораторной диагностики трихомонадной инфекции у мужчин с учетом полиморфизма Tr.vaginalis.

1.2. Эффективность выявления Tr.vaginalis при исследовании биоматериала, полученного из различных отделов мочеполовой системы мужчин.

1.3 Сравнительная характеристика лабораторных методов выявления трихомонадной инфекции в популяции лиц мужского пола.

ГЛАВА II ХАРАКТЕРИСТИКА НАБЛЮДЕНИЙ И МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Данные о пациентах, включенных в исследования.

2.1.1 Общая характеристика обследуемых групп.

2.2 Материал исследования.4 Г

2.3 Методы исследования.

2.3.1 Микроскопический метод окрашенного мазка (МОМ).45'

2.3.2 Культурально-микроскопическое исследование «Vagicult».

2.3.3 Непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ).

2.3.4 Микроскопия окрашенного осадка центрифугата эякулята (МОЭя)

2.3.5 Статистический анализ.

ГЛАВА III РЕЗУЛЬТАТЫ СРАВНИТЕЛЬНОГО АНАЛИЗА ЛАБОРАТОРНЫХ МЕТОДОВ ВЫЯВЛЕНИЯ ТРИХОМОНОЗА У МУЖЧИН В РАЗЛИЧНОМ БИОМАТЕРИАЛЕ (СОБСТВЕННЫЕ НАБЛЮДЕНИЯ).

3.1 Результаты выявления трихомонад у мужчин в уретральном отделяемом, в первой порции мочи, в секрете предстательной железы, в цельном эякуляте.

3.2 Результаты выявления трихомонад у мужчин в эякуляте: в цельном и после центрифугирования микроскопическим методом, РНИФ и культурально-микроскопическим диагностикумом «Vagicult».

3.2.1 Результаты выявления трихомонад у мужчин в окрашенном центрифугате эякулята микроскопическим методом.

3.2.2 Результаты выявления трихомонад у мужчин в окрашенном осадке центрифугата эякулята культурально-микроскопическим диагностикум «Vagicult».

3.2.3 Результаты выявления трихомонад у мужчин реакцией непрямой иммунофлюоресценцией (РНИФ).

3.2.4 Диагностическое значение РНИФ1 и «Vagicult» в осадке центрифугата эякулята.

3.3 Параметры эякулята при обнаруженной Tr.vaginalis.

3.4 Диагностически значимые цитоморфологические критерии идентификации различных морфотипов Tr.vaginalis в окрашенном осадке эякулята.

3.5 Математическая модель формирования ошибочного заключения о наличии Tr.vaginalis в образце по микроскопической картине.

3.5.1. Теоретическая оценка эффективности модели.

3.5.2. Алгоритм микроскопической диагностики. Калькулятор риска ошибочного заключения.

3.5.3. Документированный архив изображений с цитологических препаратов различных морфотипов Tr.vaginalis с использованием математически рассчитанной диагностической-ценности признаков.

3.6. Результаты,сравнительной оценки информационной значимости культурально-микроскопического диагностикума «Vagicult», РНИФ в осадке центрифугата эякулята.

3.6.1 Информационная значимость культурально-микроскопического диагностика «Vagicult» для выявления Tr.vaginalis в осадке центрифугата эякулята.

3.6.2. Информационная значимость РНИФ-для выявления Tr.vaginalis в осадке центрифугата эякулята.;.i.

3.6.3. Сравнение информационной значимости методов выявления Tr.vaginalis в осадке центрифугата эякулята.

3.7. Алгоритм диагностики урогенитального трихомоноза у мужчин с жалобами при отсутствии Tr.vaginalis в результате микроскопии окрашенного мазка уретрального отделяемого.

 
 

Введение диссертации по теме "Клиническая лабораторная диагностика", Cапожкова, Жанна Юрьевна, автореферат

Актуальность темы.

Показатели заболеваемости инфекций, передаваемых половым путем (ИППП) по-прежнему остаются на высоком уровне (WHO, ГМЦ РОССТАТ, 2007-2008). В структуре ИППП первое место занимает урогенитальный трихомоноз. В последние десятилетия показатели заболеваемости трихомонозом в РФ не имеют тенденции к снижению. У мужчин данная патология выявляется значительно реже, чем .у женщин — соотношение достигает 1:4 (Grimer Н., 1949; Вейнеров И.Б., Рожинский JIM., 1956; Sutcliffe S et al. 2006; NehaNanda et al. 2006). ВОЗ констатирует, что y мужчин 11% уретритов негонококковой этиологии вызваны Trichomonas vaginalis (Tr.vaginalis). В 30% случаев трихомонадный уретрит негонококковой этиологии протекает в острой форме, в 60-70% - в хронической форме или бессимптомно. Кроме уретры при трихомонозе у 30-50% мужчин поражаются семенные пузырьки, предстательная железа, бульбоуретральные (куперовы) железы, мочевой пузырь, почечные лоханки. По данным разных авторов хроническая трихомонадная инфекция может приводить к бесплодию, облегчению передачи ВИЧ-инфекции, повышению риска возникновения рака предстательной железы (Молочков В.А., 2000; Раводин P.A., 2005; Теличко И.Н., 2007; Johnston VJ et al. 2008, Shafir SC et al.,2009).

На протяжении многих десятилетий исследователи занимались изучением структурно-функциональных характеристик Tr.vaginalis типичной грушевидной формы (Беднова В.Н., 1989; Овчинников Н.М., Делекторский В.В., 1986; Васильев M. М.,1990; Benchimol M.,2004). Другие нетипичные морфологические формы Tr.vaginalis до сих пор описаны и изучены недостаточно полно. Сложность лабораторно-диагностических процедур при трихомонозе связана с идентификацией различных морфологических форм простейших в клиническом материале, а также с их дифференцировкой от других клеточных элементов (Дмитриев Г.А., 2003; Petrin D. et al., 1998; Krieger J.N. et al., 1999). Несмотря на то, что исследователи признают наличие различных форм трихомонад, Приказы Минздрава и методические материалы по лабораторной диагностике трихомоноза регламентируют идентификацию Tr. vaginalis исключительно при наличии типичных морфо-тинкториальных форм во избежание ошибок,: носящих характер гипердиагностики. В существующей ситуации важно получение светооптических цитоморфологических характеристик различных морфотипов трихомонад. Но метод световой микроскопии имеет определенные ограничения и в значительной степени зависит от профессионализма и опыта исследователя. Для объективной интерпретации диагностической значимости микроскопических критериев перспективным направлением могут быть математические подходы в оценке четко описанных цитоморфологических признаков Tr.vaginalis, ценность каждого из которых и их сочетаний в постановке диагноза будет определена количественно.

Данные о заболеваемости урогенитальным трихомонозом зависят исключительно от результатов лабораторных исследований. Многообразие методов лабораторной диагностики трихомоноза наряду с положительным' эффектом, в определенной' мере, приводит к разночтению результатов исследований. В доступной литературе отсутствует сравнительный анализ: информативной значимости методов, применяемых в диагностике урогенитального трихомоноза у мужчин, что, в свою очередь, вызывает разноречивую оценку их чувствительности и специфичности (Липова Е.В., 2004): Диагностические свойства лабораторных методов варьируют в широких, пределах и зависят от целого ряда факторов: длительности заболевания, локализации воспалительного процесса, и соответственно, выбора оптимального биоматериала для исследования, правильности соблюдения преаналитического этапа лабораторного тестирования и других. Существующая ситуация требует усовершенствования системы анализа, выбора наиболее информативных методов, создания оптимальных алгоритмов лабораторной диагностики трихомоноза. Последнее невозможно без глубокого сравнительного изучения: диагностической точности отдельных методов^ как традиционных, так и претендующих на практическое внедрение.

В этой связи научный анализ и разработка направлений, способных повысить эффективность лабораторной диагностики урогенитального трихомоноза у мужчин, являются актуальными. Цели и задачи.

Цель: повышение эффективности диагностики урогенитального трихомоноза у мужчин путем оптимизации взятия биоматериала больных и рационального использования лабораторных методов.

Для достижения поставленной цели было намечено решение следующих задач:

1. Выявить наиболее информативный биоматериал для диагностики урогенитального трихомоноза у мужчин.

2. Создать математическую модель описания характерной микроскопической картины с учетом диагностической ценности признаков.

3. Разработать калькулятор рисков ошибочного заключения о наличии трихомонадного процесса.

4. Оценить диагностическую эффективность различных методов выявления Tr.vaginalis: микроскопического, реакции непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ), культурально-микроскопического исследования диагностикумом «Vagicult» в осадке эякулята.

5. Разработать алгоритм диагностики урогенитального трихомоноза у мужчин при отсутствии Tr.vaginalis в окрашенных препаратах из уретрального отделяемого.

6. Создать документированный архив изображений различных морфотипов Tr.vaginalis в центрифугате эякулята.

Новизна исследования:

На основании научного анализа на большом числе наблюдений установлено, что исследование осадка центрифугата эякулята является наиболее информативным в диагностике трихомоноза мужчин.

С помощью метода логистической регрессии построена математическая модель вероятной микроскопической картины для определения значения различных микроскопических признаков в постановке диагноза трихомоноза.

Разработан калькулятор рисков формирования ошибочного заключения о наличии трихомонадного процесса.

Показано, что для выявления Tr.vaginalis в осадке центрифугата эякулята из методов, вошедших в данное исследование, наиболее эффективными являются микроскопический метод совместно с культурально-микроскопическим исследованием диагностикумом

Vagicult».

Разработан алгоритм лабораторной диагностики трихомоноза у мужчин при отсутствии Tr.vaginalis (светооптический уровень исследования) в окрашенных мазках из уретрального отделяемого.

Установлены цитоморфологические критерии идентификации различных морфотипов Tr.vaginalis в окрашенном осадке центрифугата эякулята.

Практическая значимость работы:

Микроскопическое и культурально-микроскопическое диагностикумом «Vagicult») исследование осадка центрифугата эякулята, окрашенного по Маю-Грюнвальду-Гимзе, могут быть рекомендованы в практику клинико-диагностических лабораторий для выявления Tr.vaginalis у мужчин.

Применение математической модели поможет повысить диагностическую значимость микроскопического метода путем объективной оценки признаков.

Калькулятор рисков формирования ошибочного заключения о наличии трихомонадного процесса может служить вспомогательным диагностическим инструментом в практической работе врачей клинико-диагностических лабораторий.

Алгоритм обследования мужчин с подозрением на трихомоноз может быть использован в практике клинико-диагностических лабораторий для подтверждения или исключения диагноза «урогенитальный трихомоноз»: при наличии симптомов урогенитальной инфекции и отсутствии Tr.vaginalis в окрашенных мазках из отделяемого урогенитального тракта.

Архив цитологических изображений различных морофотипов трихомонад в осадке центрифугата эякулята может служить основой разработки справочно-информационного пособия для практической работы врачей клинической лабораторной диагностики.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Диагностическое значение различных лабораторных методов выявления трихомоноза у мужчин"

ВЫВОДЫ

1. В диагностике трихомоноза у мужчин исследование осадка центрифугата эякулята является в 2,6 раза более эффективным методом, по сравнению с анализом цельного эякулята (отличия достоверны (р<0,001). Достоверных отличий выявления трихомонад в цельном эякуляте и уретральном отделяемом, а также первой порции мочи, секрете предстательной железы всеми используемыми методами не отмечено (р>0,05).

2. Математические подходы в оценке комплекса цитоморфологических признаков Tr.vaginalis способствуют объективной интерпретации диагностической значимости микроскопических критериев, исключая вероятность ошибки в 98,5% случаев.

3. В диагностике трихомоноза путем исследования осадка эякулята чувствительность метода «Vagicult» составила 98,3%, специфичность - 81,4%, и поэтому метод не может быть рекомендован в качестве самостоятельного метода для выявления трихомоноза у мужчин.

4. Исследование осадка эякулята с помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции показало специфичность диагностического теста — 90,9%, чувствительность - 72,5%, и поэтому метод может быть рекомендован только в качестве дополнительного в диагностике трихомоноза у мужчин.

5. Разработан алгоритм лабораторного обследования мужчин на трихомоноз, позволяющий увеличить чувствительность лабораторной диагностики в выявлении трихомонад на 21% .

6. На основании исследования документированного архива показано, что достоверность микроскопического заключения с использованием математической модели увеличилась на 6,7 %.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Микроскопическое и культурально-микроскопическое (диагностикумом «Vagicult») исследование осадка центрифугата эякулята, окрашенного по Маю-Грюнвальду-Гимзе, может быть рекомендовано для выявления Tr.vaginalis у мужчин.

2. Математическая модель и созданный на ее основе калькулятор рисков формирования ошибочного заключения о наличии трихомонадного процесса могут быть использованы в практической работе врачей клинико-диагностических лабораторий для снижения риска формирования ошибочного заключения о наличии Tr.vaginalis.

3. Алгоритм обследования мужчин с подозрением на трихомоноз может быть использован в практике клинико-диагностических лабораторий для подтверждения или исключения диагноза «урогенитальный трихомоноз»: при наличии урогенитальных жалоб у мужчин, но при отсутствии у пациентов Tr.vaginalis в окрашенном мазке уретрального отделяемого.

4. Архив цитологических изображений различных морофотипов трихомонад в осадке центрифугата эякулята может служить основой дальнейшей разработки справочно-информационного пособия для практической работы врачей клинической лабораторной диагностики.

5. Врач клинической лабораторной диагностики должен учитывать возможность диагностических ошибок Tr.vaginalis в осадке эякулята, быть осторожным в установлении положительного диагноза и воспользоваться предположительным цитологическим заключением: «требуется дальнейшее дообследование пациента для подтверждения или исключения диагноза».

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Cапожкова, Жанна Юрьевна

1. Андрейчев В.В., Грицаенко В.А. Хронический урогенитальный трихомоноз у мужчин как микст-инфекция: лабораторная диагностика и клинико-микробиологические особенности// Вестник постдипломного медицинского образования.-2009. № 1, - С. 62-63.)

2. Абдумаликов P.A. Комплексный способ терапии больных мочеполовым трихомониазом: Автореф. дисс. канд.мед.наук. М., 1995.-16 с.

3. Баткаев Э.А., Рюмин Д.В. Урогенитальный трихомониаз//Лечащий врач.- 2002, -№12, -с.64-70.

4. Беднова В.Н., Погорельский Л.В., Васильев М.М. и др. Тактика обследования и терапии больных инфекционными урогенитальными заболеваниями, осложнёнными дисбактериозом (пособие для врачей). М.: Медицина, 1996. -14,16,19-21,24,32 с.

5. Борисов Л. Б., Козьмин-Соколов Б. Н., Фрейдлин И. С. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. Москва: Медицина, 1993. — 7-9 с.

6. Вахнина Т.Е. Совершенствование лабораторной диагностики мочеполового трихомониаза: Автореф. дисс.канд. биол. наук. М., 1990.— 8,11,13- 15,21 с.

7. Глыбочко П.В., Пляченко Д.А., Софьин B.C., Лобанова A.B. Влияние лазерного, СВЧ- и КВЧ-излучений на Trychomonas vaginalis в условияхнепрерывного культивирования И Вестник Волгоградского медицинского университета. -2007. № 2. - С.24-27.

8. Грицаенко В.А., Иванов Ю.Б., Андрейчев В.В. Особенности клинико-микробиологической диагностики хронического урогенитального трихомоноза у мужчин.//Справочник заведующего КДЛ. 2009, №7. С.37-45.

9. Гусейнов В.А. Мужское бесплодие при трихомониазе // Здоровье мужчины. 2003. - № 4 (7). - С. 95-97.

10. Дмитриев Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. М., 2003.; Красносельских Т.В., Савичева A.M., Соколовский Е.В., Игнатовский A.B.// Первый Российский конгресс дерматовенерологов.- Спб., 2003.-Т.2.-С.17-18.).

11. Дмитриев Г.А. Качество лабораторной диагностики инфекций, передаваемых половым путем. Генитальные инфекции. 2006, №5.

12. Дмитриев Г.А., Сюч H.A. Мочеполовой трихомониаз (клинико-лабораторное обследование и ведение пациентов) — Москва: Медицинская книга, 2005. 128 с: ил.

13. Иванов A.M., Теличко И.Н., Раводин P.A. и др. Актуальные проблемы диагностики урогенитального трихомониаза. Журн. дерматовенерологии и косметологии, 2004; 1: 17-22.

14. Иванов A.M. Актуальные проблемы диагностики урогенитального трихомоноза / A.M. Иванов, И.Н. Теличко, P.A. Раводин, Н.В. Раздольская, Ю.Г. Горбунов // Журн. дерматовенерологии и косметологии. 2004. - № 1. - С. 17-21.

15. Иванов А.М. Способ микроскопии мазка для выявления T.vaginalis / А.М. Иванов, И.Н. Теличко, P.A. Раводин, Н.В. Раздольская // Удостоверение на рационализаторское предложение № 8894/4 от 11.06.2004 г. ВМедА, 7.10.2004 г.t117

16. КисинаВ.И., БедноваВ.Н., Погорельская JI.B. Тактика обследования и терапии больных инфекционными урогенитальными заболеваниями, осложненными дисбактериозом. Пособие для врачей. Москва: Медицина, 1996.-14-22 с.

17. Кишкун A.A. Современные технологии повышения качества клинической лабораторной диагностики.- М.:РАМЛД, 2005 г. С. 110-119.

18. Клименко Б. В. Трихомониаз. Москва: Медицина, 1987.-33, 41, 44, 160, 164, 165, 169, 170-174, 176,179 с.

19. Клименко Б.В. трихомониаз мужчин, женщин и детей. Санкт-Петербург: Сюжет, 2001.185с.

20. Козлюк A.C., Козлюк В.А.//Инфекции, передаваемые половым путем.-2001.-№6.-С.26-28.

21. Козлюк A.C., Козлюк В.А.//Уретриты у мужчин.- 2006. С.93-96.

22. Копылов В. М., Бочкарев Е.Г., Говорун В.М., Рюмин Д.В., Липова Е.В., Баткаев Э.А. Урогенитальный трихомониаз. Актуальные вопросы диагностики и лечения (пособие для врачей), 5-е издание (стереотипное). — Москва-2005г.

23. Межевитинова Е.А. Трихомонадный вульвовагинит: клиника, диагностика и лечение-Москва: Медицина, 1999. С. 17-22,24,25 с.

24. Меньшиков В.В. Экономические аспекты лабораторной диагностики при модернизации здравоохранения. Москва: Здоровье и Общество,2006 г.-С.221-226.

25. Миронова И.И., Романова Л.А., Долгов В.В.- Общеклинические исследования (моча, кал, ликвор, эякулят).- Москва-2005 г. С. 165-195.

26. Мол очков В. А. Урогенитальный трихомониаз и ассоциированные уретрогенные инфекции (эпидемиология, клиника, диагностика, лечение,профилактика) // Российский журнал кожных и венерических болезней. — 2000.-№3.-С. 48-56.

27. Мошкин A.B., Долгов В.В.-Обеспечение качества в клинической лабораторной диагностике. Руководство для специалистов клинической лабораторной диагностики. Москва: Медиздат,2004г.С.21-23.

28. Овчинников Н.М., Делекторский В.В. Ультраструктура возбудителей венерических заболеваний и ее клиническое значение. — М., Медицина,1986. — 224 с. Павловский E.H. Организм как среда обитания // Природа. 1934. —№ 1. —с.80 —91.

29. В.Ф.Войно-Ясенецкого и 65-летию КрасГМА. -Красноярск, 2007.- С.272-273.

30. Приказом Минздрава СССР № 936 от 12.07.85., "Об унификации лабораторных методов исследования в диагностике гонореи и трихомониаза".

31. Приказ Министерства Здравоохранения СССР №1570 4 декабря 1986г. «Об улучшении выявления больных гонореей и трихомониазом в акушерских и гинекологических отделениях (палатах, кабинетах), женских консультациях и урологических кабинетах поликлиник»

32. Приказ Минздрава РФ N 286 от 7 декабря 1993 "О совершенствовании контроля за заболеваниями, передаваемыми половым путем".

33. Приказ Минздрава и социального развития РФ №173 от 28 февраля 2005 г. «Об увтерждении стандарта медицинской помощи больным трихомонозом»

34. Раводин P.A. Мочеполовой трихомоноз: этиология; классификация, клиника, диагностика, лечение / P.A. Раводин, И.Н. Теличко // Медлайн экспресс. 2006: - № 1 (185). - С. 40-46.

35. Свищева Т.Я. Раку можно противостоять. — М.: "Дион", 1998.- 190 с.

36. Спиридонов В.Е., Саларев В.В., Чернякова Н.И. Современные методы лабораторной диагностики урогенитального микоплазмоза и трихомонадной инфекции// Российский журнал кожных и венерических инфекций.- 2008. № 5, - С. 76-77.

37. Теличко И.Н. Цитоморфологические особенности Т. vaginalis / И.Н. Теличко, А.М. Иванов, А.Б. Криворучко, О.В. Гаврилова, Е.В. Ходосевич // Материалы IV науч.-практ. конф. памяти проф. A.JI. Машкилейсона. М., 2006. -С. 143-144.

38. Теличко И.Н. Особенности диагностики мочеполового трихомоноза / И.Н. Теличко, P.A. Раводин, A.M. Иванов, Н.В. Раздольская // Клинич. дерматология и венерология. 2006. - № 3. - С. 17-20.

39. Теличко И.Н. Современный взгляд на микроскопический метод диагностики мочеполового трихомоноза / И.Н. Теличко, A.M. Иванов, Н.В. Раздольская, А.Б. Криворучко // Клинич. дерматология и венерология. 2007. -№ 2. - С. 28-32.

40. Чураков A.A., Куличенко А.Н., Суворов А.П., Глыбочко П.В., Кутырев В.В. Сравнительная оценка диагностической значимости методов лабораторной диагностики трихомониаза// Медицинская паразитология.-2005.- №3, С.22-25.)

41. Шакиров М. Т. Заболевания, передаваемые половым путем, у мужчин -гомосексуалистов (клинико-лабораторное, медико-социологическое, электронно-микроскопическое исследование): Автореф. дисс.мед. наук. -М., 1991.-9-18,24,30 с.

42. Шаповалова O.B. Лабораторные методы диагностики гонореи, трихомоноза и уреаплазмоза//Дерматолопя та венеролопя. 2001. №2 (12). С.24-29.

43. Шкарупета М.М., Копылов В. М., Байцур М.В., Портнова Н.И. -Урогенитальный трихомониаз. Пособие для врачей, 5-е издание (переработанное и дополненное). Под общей редакцией В.М.Говоруна — Москва-2009 г.

44. Addis et al. "Host and Tissue Specificity of Trichomonas vaginalis Is Not Mediated by Its Known Adhesion Proteins" Infection and Immunity 68(7):4358-4360 (2000).

45. Alderete et al. "Trichomonas vaginalis Genetic Analysis of Cell Adherence" Abstract from CRISP website for Grant No. 2R21AI043940-05, Fiscal year 2003.

46. Alonzo and Pepe "Using a Combination of Reference Tests to Assess the Accuracy of a New Diagnostic Test" Statistics in Medicine 18:2987-3003 (1999).

47. Benchimol et al. "Structure and Division of the Golgi Complex in Trichomonas vaginalis and Tritrichomonas foetus" European Journal of Cell Biology 80:593-607 (2001).

48. Bibbo M, Klump WJ, DeCecco J, Kovatich AJ: Procedure for immunocytochemical detection ofP16INK4Aantigen in thin-layer, liquid-based specimens. Acta Cytol 2002, 46: 25-29.

49. Black ER, Bordley DR, Tape TG, Panzer RJ. Diagnostic Strategies for Common Medical Problems, 2nd Ed. Philadelphia: American College of Physicians-American Society of Internal Medicine; 1999. p 255-268.

50. Borchardt K.A., Zhang M.Z, Shing H, Flink К: A comparison of the sensitivity of the In Pouch Т.У, Diamond's and Trichosel media for detection of Trichomonas vaginalis. Genitourin. Med, 73(4): 297-98, 1997.

51. Borchardt K.A., al-Haraci S., Maida N. Prevalence of Trichomonas vaginalis in a male sexually transmitted disease clinic population by interview, wet mount microscopi, and the In Pouch TV test. // Genitourin Med. 1995. — Vol. 71. -P. 405-406.

52. Bowden F.J., Garnett G.P. Trichomonas vaginalis epidemiology and analyzing a model of treatment intervention // Sex Transm. Infekt. — 2000 — Aug; 76(4). — P. 248-256.

53. Bricheux et al. "Evidence for an uncommon a-actinin protein in Trichomonas vaginalis" Molecular and Biochemical Parasitology 95:241-249 (1998).

54. Burstein GR, Zenilman JM. Nongonococcal urethritis: A new paradigm. Clin Infect Dis 1999;28:S66-73.

55. Cates W; the American Social Health Association Panel. Estimates of the incidence and prevalence of sexually transmitted diseases in the United States. Sex Transm Dis 1999;26:52-7.

56. Centers for Disease Control and Prevention, Workowski KA, Berman SM. Sexually Transmitted Diseases Treatment Guidelines, 2006. MMWR Recomm Rep 2006;55:1-94.

57. Cevahir N, Kaleli I, Kaleli B.: Evaluation of direct microscopic examination, acridine orange staining and culture methods for studies of Trichomonas vaginalis. Mikrobiyol Bui. 2002 Jul-Oct;36(3-4):329-35.

58. Clark CG, Diamond LS: Methods for cultivation of luminal parasitic protists of clinical importance. Clin. Microbiol. Rev, 15(3): 329-41, 2002.

59. Cotch M.F., Pastorek J.G. Trichomonas vaginalis associated with low birth weight and preterm delivery. The vaginal Infections and Prematurity Study Group //Sex. Transm. Dis. — 1997. — Vol. 24. — 353 — 360.

60. Curr Opin Infect Dis. 2008 Feb; 21(l):56-64. Global epidemiology and control of Trichomonas vaginalis. Johnston VJ, Mabey DC.Hospital for Tropical Diseases, London School of Hygiene and Tropical Medicine, London, UK.

61. Dawn G, Sharma M, Kumar B, Malla N. Prevalence of microorganisms in patients with non-gonococcal urethritis from North India. Indian J Sex Transm Dis 1995;16:9-14.

62. Dennis et al. "Meta-Analysis of Measures of Sexual Activity and Prostate Cancer" Epidemiology 13:72-79 (2002).

63. Estrada et al. "Reporting and Concordance of Methodologic Criteria Between Abstracts and Articles in Diagnostic Test Studies" JGIM 15:183-187 (2000).

64. European Search Report for EP 03746064.9; dated Mar. 22, 2007.

65. Gardner W.Jr., Culberson D., Bennet B. Trichomonas vaginalis in prostate gland.Arch.Pathol.Lab.Med.1986; 110:430-432.

66. Gerbase AC, Rowley JT, Mertens TE. Global epidemiology of sexually transmitted diseases. Lancet 1998;351: 2-4.

67. Goldsmid J., Davies N. Venereal trichomoniasis role for men // Int. J. G. Med. 1996. - Vol. 63, № 4. - P. 262-264.

68. Hawkes S, Santhya KG. Diverse realities: Sexually transmitted infections and HIV in India. Sex Transm Infect 2002;78(Suppl. I):i31-9.

69. Henry JB. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 19th Ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company; 1996. p 1278.

70. Hobbs MM, Kazembe P, Reed AW, et al. Trichomonas vaginalis as a cause of urethritis in Malawian men. Sex .Transm Dis 1999;26:381-7.

71. Honigberg B.M. Trichomonads of importance in human medicine //J. P. Kreiger (ed.), Parasitic protozoa. Academic Press, Inc., New York. — 1978. P. 275 - 454.

72. Hook EW, 3rd. Trichomonas vaginalis~no longer a minor STD. Sexually Transmitted Diseases 1999;26:388-9.

73. International Search Report corresponding to International application No. PCT/US03/09474, mailed Jul. 21, 2003.

74. Jackson DJ, Rakwar JP, Chohan B, et al. Urethral infection in a workplace population of east African men: evaluation of strategies for screening and management. J Infect Dis 1997; 175:833-8.

75. Joyner, J., J. Douglas, S. Ragsdale, M. Foster, and F. Judson. 2000. Comparative prevalence of infection with Trichomonas vaginalis among men attending a sexually transmitted diseases clinic. Sex. Transm. Dis. 27: 236240. Medline.

76. Kazemi H, Yasaee F, Bandehpour M, Syed N, Mehrabi Y, Rayabnejad M, Mansouri M, Givgard S, Ghazi M, Baseri H: Diagnosis of Trichomonas infection by urine PCR analysis compared to wet mount microscopic screening. J. Med. Sei. 4(3): 206-9, 2004.

77. Kengne, P., F. Veas, N. Vidal, J. L. Rey, and G. Cuny. 1994. Trichomonas vaginalis: repeated DNA target reaction diagnosis. Cell. Mol. Biol. 40:819831. Medline.

78. Khan JO. Walker BD. Acute human immunodeficiency virus type I infection. N Engl J Med 1998;339:33-39.

79. Klebanoff, M., J. C. Carey, J. C. Hauth, S. Hillier, R. P. Nugent, E. Thorn, et al. 2001. Failure of metronidazole to prevent preterm delivery among pregnant women with asymptomatic Trichomonas vaginalis infection. N. Engl. J. Med. 345:487-493

80. Krieger et al. "Clinical Manifestations of Trichomoniasis in Men" Annals of International Medicine 118(11):844-849 (1993).

81. Kuberski T. Trichomonas vaginalis associated with nongonococcal urethritis and prostatitis. Sex.Transm.Dis.1980; 7: 135-136.

82. Kucknoor et al. "Adherence to Human Vaginal Epithelial Cells Signals for Increased Expression of Trichomonas vaginalis Genes" Infection and Immunity 73(10):6472-6478 (2005).

83. Laga, M., A. Manoka, M. Kivuvu, B. Malele, M. Tuliza, N. Nzila, et al. 1993. Non-ulcerative sexually transmitted diseases as risk factors for HIV-1 transmission in women: results from a cohort study. AIDS 7:95-102.Medline.

84. Lannino A, Testa P Local treatment of vaginitis due to T. vaginalis. Comparative studies on methyl-partricin and metronidazole // Minerva Ginecol. — 1975. — Nov; 27 (II). — P. 929-932.

85. Lehker and Sweeney "Trichomonad Invasion of the Mucous Layer Requires Adhesins, Mucinases, and Motility" Sex Transm. Inf. 75:231-238 (1999).

86. Levi MH, Torres J, Pina C, Kielin RS: Comparison of the In Pouch T.V culture system and Diamond's modified medium for detection of Trichomonas vaginalis. J. Clin. Microbiol, 35(12): 3308-10, 1997.

87. Loo CK, Gune S: Trichomonas vaginalis in urine cytology. Acta Cytol 2000, 44: 484-485.

88. Matyszko E, Januszko T. Detection of Trichomonas vaginalis in men, Zakladu Higieny Instytutu Medycyny Spolecznej AM w Biafymstoku// Zakladu Higieny Instytutu Medycyny Spolecznej AM w Bialvmstoku.Pol Tyg Lek. -1991 Dec 26-30;46(50-52):997-9.)

89. Neha Nanda, Ross G Michel, George Kurdgelashvili, Karen A Wendel. (2006) Trichomoniasis and its treatment. Expert Review of Anti-infective Therapy 4:1, 125

90. O'Brien et al. "Molecular Characterization of a Third Malic Enzyme-Like AP65 Adhesin Gene of Trichomonas vaginalis" Microbial Pathogenesis 20:335-349(1996).

91. Ohkawa M, Yamaguchi K, Tokunaga S, Nakashima T, Fujita S. The incidence of Trichomonas vaginalis in chronic prostatitis patients determined by culture using a newly modified liquid medium. J Infect Dis 1992; 166:1205-6.

92. Ohlemeyer CL, Hornberger LL, Lynch DA, Swierkosz EM. Diagnosis of Trichomonas vaginalis in adolescent females: InPouch TV culture versus wet-mount microscopy. J Adolescent Health 1998;22:205-208.

93. Pantanowitz L, Cao QJ, Goulart RA, Otis CN. Diagnostic utility of pi 6 immunocytochemistry for Trichomonas in urine cytology. CytoJournal 2005;2:11

94. Petrin Dino et al. //Clin.Microbiol.Rev. -1998. -Vol.11. -P.300-317.

95. Ponce De Leon et al. "Relation Between Buccal Protozoa and pH and Salivary IgA in Patients with Dental Prothesis" Rev. Inst. Med. Trop. S. Paulo 43(4):241-242 (2001).

96. Price MA, Zimba D, Hoffman IF, et al. Addition of treatment for trichomoniasis to the syndromic management of urethritis in Malawi: a randomized clinical trial. Sex Transm Dis 2003;30:516-22.

97. Rasmussen S.E., Nielsen M.H., Lind I., Rhodes J.M. Morphologicahstudies of the cytotoxicity of Trichomonas vaginalis to normal human vaginal epithelial cells in vitro //Genitourin. Med. — 1986. — Vol. 62. — P. 240 — 246.

98. Razdolskaya N. Peculiarity of the clinical isolates of Trichomonas vaginalis / N. Razdolskaya, 0. Gavrilova, A. Ivanov, I. Telichko, A. Krivoruchko // Protistology An International Journal. 2007. - Vol.5, №1. - P. 66

99. Rosenblatt et al. "Sexual Factors and the Risk of Prostate Cancer" American Journal of Epidemiology 153(12):1152-1158 (2001).

100. Sang H, Zhou WQ> Ni RZ, Gao JP. Advances in the study of trichomoniasis in men.// Department of Dermotology, Nanjing General Hospital of Nanjing

101. Command, PLA, Nanjing, Jiangsu 210002, China. ZhonehuaNan Ke Xue. 2002;8(l):61-3.

102. Saxena, S., and R. Jenkins. 1990. Prevalence of Trichomonas vaginalis in men at high risk for sexually transmitted diseases. Sex. Transm. Dis. 18: 138-142.

103. Scheler O, Glynn B, Parkel S, Palta P, Toome K, Kaplinski L, Remm M, Maher M, Kurg A. Fluorescent labeling of NASBA amplified tmRNA molecules for microarray applications; BMC Biotechnol. 2009 May 15;9:45.

104. Shahmanesh M, Moi H, Lassau F, Janier M (2009). 2009 European Guideline on the Management of Male Non-gonococcal Urethritis. Int J STD AIDS 20: 458-464

105. Simpson TW, Burgess DE, Zenilman J: Trichomoniasis In: Protozoal disease, Gilles HM. 1st edition. Georgina Bentliff, Great Britain, 667-82, 1999.

106. Sood S, Mohanty S, Kapil A, Tolosa J, Mittal S. In Pouch TV ™ culture for detection of Trichomonas vaginalis. Indian J Med Res 2007;125:567-71.

107. Stary et al. "Detection of Trichomonas vaginalis on Modified Columbia Agar in the Routine Laboratory" Journal of Clinical Microbiology 40(9):3277-3280 (2002).

108. Sorvillo F, Kerndt P. Trichomonas vaginalis and amplification of HIV-1 transmission. Lancet 1998;351:213-4.

109. Stary et al. "Detection of Trichomonas vaginalis on Modified Columbia Agar in the Routine Laboratory" Journal of Clinical Microbiology 40(9):3277-3280 (2002).

110. Sutcliffe et al. "Plasma antibodies against Trichomonas vaginalis and subsequent risk of prostate cancer" Abstract of poster presented at the 4th Annual

111. American Association for Cancer Research International Conference entitled "Frontiers in Cancer Prevention Research." Baltimore, MD, Oct. 30-Nov. 2, 2005.

112. Sutcliffe et al. "Plasma antibodies against Chlamydia trachomatis, human papillomavirus, and human herpesvirus type 8 in relation to prostate cancer: a prospective study" Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 16(8): 1573-80 (2007).

113. Swygard H, Sena A.S, Hobbs M.M, Cohen M.S: Trichomoniasis: clinical manifestations, diagnosis and management. Sex. Transm. Infect., 80: 91-5; 2004.

114. Thomason JL, Gelbart SM. Trichomonas vaginalis. Obstet Gynecol 1989;74:536-41.

115. Wasserheit "Epidemiological Synergy: Interrelationships between Human Immunodeficiency Virus Infection and Other Sexually Transmitted Diseases" Jn. Sex. Trans. Dis. 19:61-77 (1992).

116. Watson-Jones et al. "High prevalence of trichomoniasis in rural men in Mwanza, Tanzania: results from a population based study" Sex. Transm. Inf. 76:355-362 (2000). f

117. Wendel KA, Erbelding EJ, Gaydos CA, Rompalo AM. Use of urine polymerase chain reaction to define the prevalence and clinical presentation of Trichomonas vaginalis in men attending an STD clinic. Sex Transm Infect 2003; 79:151-3.

118. Werle, E., C. Schneider, M. Renner, M. Volker, and W. Fiehn. 1994. Convenient single-step, one tube purification of PCR products for direct' sequencing. Nucleic Acids Res. 22:4354-4355

119. World Health Organization. Global prevalence and incidence of selected curable sexually transmitted infections. 2008. WHO/ HIV-AIDS/ 2008.02/ CDS/ CSR/EDC/ 2008.10.