Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Биохимический состав и фармакологические свойства масел облепихи и каперсов колючих, произрастающих в Таджикистане
- Ученая степень
- доктора медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.25
Оглавление диссертации Рахимов, Исматулло Фатхуллоевич :: 2006 :: Душанбе
ВВЕДЕНИЕ.
I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Применение облепихи в народной медицинев качестве лекарственного растения.
1.2 Ботаническая характеристика облепихи и биологически активные вещества, входящие в её состав.
1.3 Биохимические и фармакологические свойства облепихового масла.
1.4 Применение облепихового масла в медицине.
1.5 Ботаническое описание и биологически активные вещества каперсов колючих.
П МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Обшие методы.
2.2 Частные методы.
2.2.1 Определение содержания каротина в облепиховом масле.
2.2.2 Определение сумм токоферолов в облепиховом масле.
2.2.3 Определение неомыляемых веществ.
2.2.4 Выделение и количественное определение гликозидов в каперсах колячих.
2.2.5 Выделение и"количественное определение алколоидов в корнях каперсов.
2.2.6 Выделение и количественное определение сапонинов в корнях каперсов.
2.2.7 Выделение и количественное определение флавоноидов в каперсах.
2.2.8 Выделение и количественное определение кумаринов в каперсах.
2.2.9 Выделение и количественное определение жирного масла в плодах каперсов колючих.
2.2.10 Выделение и количественное определение полисахаридов в каперсах.
2.2.11 Определение содержания связанных полисахаридов.
2.3 Фармакологические методы.
2.3.1 Изучение противовоспалительного действия облепихового масла.
2.3.2 Изучение влияния облепихового масла на модельзаболевания язвы желудка.
2.3.3 Изучение механизма действия облепихового масла.
2.3.4 Метод определения влияния облепихового масла на артериальное давление.
2.3.5 Изучение влияния облепихового масла на биоэлектрическую активность сердца.
2.3.6 Изучение влияния облепихового масла на желчеотделение.
2.3.7 Действие облепихового масла на моторную и секреторную функции желудка.
2.3.7.1 Изучение влияния облепихового масла на моторную функцию желудка.
2.3.7.2 Изучение влияния облепихового масла на секреторный аппарат желудка.
2.3.8 Изучение острой токсичности облепихового масла.
2.3.9 Изучение хронической токсичности облепихового масла.
Ш СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Изучение химического состава облепихи и каперсов колючих.
3.1.1 Изучение условий произрастания облепихи.
3.1.2 Химический состав плодов и масла облепихи Западного Памира.
3.1.3 Характеристика флавоноидов, содержащихся в листьях и плодах облепихи.
3.1.4 Качественный анализ природных соединений растения каперса колючего.
3.1.5 Идентификация природных соединений из каперсов колючих.
3.1.6 Получение галеновых препаратов из цветков, плодов и корней каперсов колючих.
3.2 Фармакологическое изучение облепихового масла.
3.2.1 Изучение активности суммарных препаратов из плодов и листьев облепихи Западного Памира.
3.2.2 Токсические свойства облепихового масла.
3.2.2.1 Изучение острой и хронической токсичности облепихового масла.
3.2.2.2 Патоморфологическое исследование органов белых крыс и собак, получивших различные виды облепихового масла.
3.2.3 Специфическая активность облепихового масла.
3.2.3.1 Противовоспалительное действие облепихового масла.
3.2.3.2 Активность облепихового масла на модели язвы желудка.
3.2.3.3 Механизм действия облепихового масла на модели экспериментального воспаления.
3.2.4 Влияние облепихового масла на функции жизненно важных органов.
3.2.4.1. Влияние облепихового масла на артериальное давление и дыхание.
3.2.4.2 Влияние облепихового масла на биоэлектрическую активность сердца.
3.2.4.3. Влияние облепихового масла на желчеотделение.
3.2.4.4 Влияние облепихового масла на моторную функцию желудка.
3.2.4.5 Влияние облепихового масла на секреторный аппарат желудка.
3.3. Фармакологическая активность масла каперсов.
Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Рахимов, Исматулло Фатхуллоевич, автореферат
Актуальность проблемы. В последние 60 лет особенного развития получило такое направление в медицине, как лечение синтетическими лекарственными препаратами, которые в большинстве случаев проявляют строго определённую активность. Поскольку организм человека представляет собой сложную саморегулирующуюся систему, то лечение моно лекарствами оказывает воздействие не только на больные, но и на здоровые органы, что приводит к подавлению и снижению общих защитных свойств организма. Применение для лечения лекарственных растений, содержащих большой набор биологически активных веществ, проявляющих многоплановое действие с общим мягким положительным эффектом и не вызывают нарушения иммунно-химических реакции организма, является щадящим методом лечения, который позволяет сохранить мобилизационные свойства организма.
Всё это объясняет возросший интерес к лекарственным препаратам из растений. Вследствие этого ведутся широкие исследования по выделению, установления химической структуры и свойств природных веществ, ответственных за фармакологическую активность лекарственных растений. И в первую очередь внимание исследователей обращено к тем растениям, которые издавна применяются в народной медицине. Именно к таким растениям относятся облепиха и каперсы колючие.
Плоды и листья облепихи издавна применялись в народной медицине в качестве противоцинготного, отхаркивающего, противоожогового, болеутоляющего средства, применялись при ревматизме, заболеваниях желудка и язвенной болезни.
Самым ценным продуктом переработки облепихи является обледиховое масло, внимание к которому в последние годы постоянно возрастает не только в фармакологии, но и в пищевой промышленности и косметологии. Лечебный эффект облепихового масла обычно объясняют наличием в нём витаминов, каротиноидов, токоферолов и целого ряда других биологически активных веществ.
Возросшая потребность в препаратах растительного происхождения требует увеличения их производства, в том числе и облепихового масла. Добиться этого можно двумя путями: использованием новых регионов произрастания облепихи и усовершенствованием технологии его получения.
Значительная часть зарослей облепихи в Таджикистане сосредоточена в Горно-Бадахшанской области на высоте 2000-3500 м. над уровнем моря. Такие экстремальные условия произрастания облепихи, характеризующиеся высокой инсоляцией с большим процентом ультрафиолета, резкой сменой температур, пониженным содержанием кислорода и т.д. могут влиять на содержание, соотношение и природу биологически активных веществ в ней.
Поэтому химическая характеристика облепихи и оценка её с точки зрения лекарственного сырья являются весьма актуальными и позволят решить вопрос о возможности использования Горно-Бадахшанской области в качестве источников ресурсов для получения облепихового масла, а изучение химического состава облепихи позволит провести систематическое фармакологическое изучение облепихового масла.
Также была разработана новая технология получения облепихового масла экстракцией органическими растворителями фреоном-12 и н-гексаном. В соответствии с требованиями экспертных комиссий ВОЗ даже при изменении одного фрагмента технологического процесса получения вещества, препарат должен быть подвергнут полному фармакологическому анализу с целью подтверждения отсутствия побочных явлений и сохранения специфической активности. Кроме того, имеющаяся разрозненность экспериментальных и клинических данных по изучению облепихового масла, отсутствие результатов по полному изучению фармакологической активности механизма действия облепихового масла, а также широкое применение в практической медицине без экспериментального обоснования указывают на необходимость систематического фармакологического изучения облепихового масла. В связи вышеизложенным проведение систематического фармакологического изучения облепихового масла, получаемого различными методами, является весьма актуальным и имеет большое практическое и теоретическое значение.
Другим растением, привлекающим внимание исследователей, являются каперсы колючие, которые издавна применялись в народной медицине как ранозаживляющее средство при желудочно-кишечных заболеваниях, а также в качестве желчегонного и болеутоляющего средства. До настоящего времени систематического химического и
И* фармакологического исследования не проводилось. В связи с этим исследование химического состава каперсов колючих с целью выявления биологически активных веществ, ответственных за специфическое фармакотерапевтическое действие, проведение фармакологических исследований и стандартизация сырья по основным группам действующих веществ является достаточно актуальной задачей.
Цель и задачи исследовании. Целью настоящего исследования являлось изучение содержания биологически активных веществ облепихи и каперсов колючих, произрастающих в Таджикистане, экспериментальное изучение фармакологической активности и возможного механизма действия облепихового масла, проведение фармакологических исследований различных групп экстрактов каперсов колючих, определение перспективности их применения в практической медицине.
Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:
• Изучить химический состав различных органов облепихи и каперсов колючих, произрастающих в Таджикистане
• Изучить токсические свойства облепихового масла
• Изучить специфическую активность и механизм действия облепихового масла
• Изучить влияние облепихового масла на функции жизненно важных органов
• Изучить язвозащитную и противовоспалительную активность масла каперсов
• Определить перспективность применения облепихового масла и масла каперсов в практической медицине
Положения, выносимые на защиту.
• Результаты фитохимического изучения различных форм облепихи, произрастающих на Западном Памире
• Фармакологическая активность суммарных флавоноидных препаратов плодов и листьев облепихи
• Результаты изучения фармакологической активности облепихового масла, полученного методом диффузии и масел, полученных экстракцией органическими растворителями фреоном-12 и н-гексаном
• Результаты изучения химического состава каперсов колючих
• Результаты фармакологического изучения масла каперсов колючих в сравнении с маслом облепихи, полученным методом диффузии. Научная новизна. Впервые проведены фитохимические исследования облепихи, произрастающей на Западном Памире по поймам рек Ванч, Пяндж, Гунт, Шохдара. Дана химическая характеристика флавоноидов листьев и плодов этой облепихи; проведено сравнение по формам в зависимости от высоты произрастания. Впервые дана фармакологическая характеристика и изучен биохимический механизм действия облепихового масла, полученного экстракцией фреоном-12 и гексаном по сравнению с маслом Бийского витаминного завода, полученным методом диффузии. Показан лучший язвозаживляющий эффект облепихового масла, полученного по новой технологии, над маслом Бийского витаминного завода, что объясняется меньшим содержанием свободных кислот в маслах, полученных по новой технологии. Изучен химический состав плодов, листьев и корней каперсов колючих, произрастающих в Таджикистане. Впервые изучен химический состав жирного масла каперсов. Разработана объективная методика стандартизации данного препарата. Впервые изучен состав полисахаридов плодов каперсов. Впервые проведены фармакологические исследования жирного масла плодов каперсов для выявления противоязвенной и противовоспалительной активности. Изучена динамика : выхода экстрактивных веществ в зависимости от природы и концентрации экстрагента в процессе экстракции плодов, корней и цветов каперсов колючих.
Практическая значимость работы. Показано, что облепиха Западного Памира как лекарственное сырьё является перспективной для промышленного использования. Дана характеристика форм как-селекционного материала и три формы отобраны для введения в культуру. Суммарные флавоноидные препараты из плодов и листьев облепихи являются практически нетоксичными, относятся к витаминным препаратам и проявляют слабый гипотензивный и противовоспалительный эффекты, Облепиховое масло, полученное по новой технологии методом экстакции фреоном и гексаном, на основании представленных экспериментальных данных и отчётов клиник по изучению активности всех видов облепихового масла разрешено фармакологическим комитетом Минздрава СССР для широкого клинического применения (протокол № 11 от 29 мая 1982 г.) Полученные экспериментальные данные позволяют использовать плоды каперсов в качестве источника получения лекарственного препарата, обладающего ранозаживляющей активностью при лечении заболеваний органов пищеварения. Разработана методика получения жирного масла плодов каперсов экстракцией сжиженным газом хладоном -12 в замкнутом цикле, разработаны проект ВФС "Плоды каперсов колючих", "Масло плодов каперсов". Фармакологические исследования показали отсутствие токсичности и наличие выраженной противоязвенной активности масла плодов каперсов.
Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на II съезде фармацевтов Таджикистана (Душанбе, 1987). Симпозиуме по использованию лекарственных растений в современной медицине (Прага, 1989), интернациональном симпозиуме по облепихе (Сиань, Китай, 1989).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано работ Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на страницах машинописного текста, содержит таблиц, рисунков, состоит из введения, трёх глав (обзор литературы, материалов и методов исследования, собственных исследований), заключения, выводов, списка литературы, включающего источников и приложения.
Заключение диссертационного исследования на тему "Биохимический состав и фармакологические свойства масел облепихи и каперсов колючих, произрастающих в Таджикистане"
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Лекарственные препараты растительного происхождения обычно характеризуются достаточно широким диапазоном действия, что объясняется наличием в них значительного количества физиологически активных веществ. Многие растения среднеазиатского региона, издавна применяющиеся для употребления в пищу и в качестве лекарственных растений, остаются к настоящему времени недостаточно изученными по химическому составу и особенностям фармакологического действия. Важной и актуальной является перспектива расширения ассортимента лекарственных препаратов нашей республики за счет использования богатой сырьевой базы местной флоры. Применение комплексного подхода к выделению из различных органов растений физирлогически активных веществ и их всестороннему химическому изучению позволит получить более подробную информацию о составе исследуемых растений, а также поставить на научную основу знания народной медицины. Одними из таких растений являются облепиха и каперсы колючие.
Облепиха в качестве лекарственного растения используется очень давно. Официальная медицина разрешила применение облепихового масла в качестве противоязвенного препарата. Однако, до настоящего времени не определены вещества, ответственные за специфическую фармакологическую активность облепихового масла, что позволило бы более точно дозировать его при использовании в качестве противоязвенного препарата и разработать новые лекарственные препараты на основе другого сырья.
В Таджикистане имеются значительные заросли облепихи, большая часть которых находится в Горно-Бадахшанской автономной области на высоте 2000-3500 м над уровнем моря. Такие экстремальные условия произрастания облепихи, характеризующиеся высокой инсоляцией с большим процентом ультрафиолета, резкой сменой температур, пониженным содержанием кислорода и т.д., могут оказывать влияние на содержание, соотношение, а возможно, и на природу биологически активных веществ, содержащихся в ней. Вследствие этого химическая характеристика облепихи и оценка ее с точки зрения лекарственного сырья позволяет решить вопрос о возможности ее использования в качестве источника ресурсов для получения облепихового масла.
В связи с этим первым этапом данного исследования являлось изучение содержания биологически активных веществ в плодах облепихи Западного Памира, выделение и идентификация веществ фенольной природы, в частности, флавоноидов с целью их дальнейшего практического использования.
В целом ряде работ ( Девятнин В.А., Ободовская Д.А., 1955; Жамъянсан Я., 1973; Имамалиев Г.Н., Пантелеева Е.И., 1980; Ободовская v V- "Z ** «Г
Д.А., Девятнин В.А., 1952; Трибунская А.Я. и др., 1970; Трофимов Т.Т., 1967; Шапиро Д.К. и др., 1979; Шишкина Е.Е., 1966; Шнайдман Л.О., 1973; Шугам Н.А., 1969; Darrner G., 1952; Horman В., 1941 ) было показано, что содержание различных биологически активных веществ в плодах облепихи зависит от района ее произрастания, которые различаются по природно-климатическим условиям.
Основываясь на этих данных, мы первоначально изучили климатические условия районов произрастания облепихи на Западном Памире - долины рек Пяндж, Ванч, Гунт и Шахдара. Для этого были использованы данные метеостанций, отнесение которых было сделано косвенно, поскольку метеостанции не располагались в районах сбора облепихи.
Первой технической характеристикой плодов облепихи, собранных в различных районах, которую мы изучали, был показатель масличности в пересчете на сырой вес. Проведенное нами исследование масличности форм облепихи, произрастающих в есстественных зарослях на Западном Памире показало, что изученные формы облепихи отличаются более высоким содержанием масла по сравнению со всеми изученными до сих пор формами, произрастающими в других регионах.
По данным Е.Е. Шишкиной (1966) масличность плодов Алтайской облепихи составляет 3,28-6,95% на 100 г сырого веса, Чулышманской -2,84-4,03%, Саянской - 2,5-3,87%, Тяныианьской - 1,91-4,41%, Даурской -2,23-3,27%. В плодах облепихи Северного Азербайджана содержание масла составляло 3,49-4,75% (Шапиро Д.К. и др., 1978), Северо-Западного Азербайджана - 1,89-3,6% (Али-Заде З.М. и др., 1978), Абхазской облепихи - 5,03% (Церевитинов Ф.В., 1949). Масличность облепихи, произрастающей в низовьях реки Катунь составляла 3,4-6% (Букин В.Н., 1937), сортов, выведенных на Алтайской опытной станции - 4,7-8,9% (Пантелеева Е.И., 1977), а форм, собранных на Селенгинском массиве в Бурятии - 4,94-6,19% (Пантелеева Е.И., 1977).
Наши исследования показали, что в Поймах рек Пяндж, Ванч растут высокомасличные формы с содержанием масла, в основном от 7,18 до 15,1% при содержании в них влаги от 52,6 до 64%, по поймам рек Шахдара и Гунт отмечалась более низкая масличность форм облепихи - от 5% до 8,5% при более высокой влажности - от 64,9 до 73,4%.
Результаты изучения масличности форм облепихи Западного Памира позволили обнаружить наличие корреляции между масличностыо и влажностью плодов облепихи: чем больше сухих веществ, тем больше масличность, поэтому цифры по масличности в расчете на сырую массу желательно приводить совместно с расчетом масличности на сухую массу, который устраняет влияние влажности, но при этом происходит нарушение соотношения масла на сырую массу и на сухое вещество.
Вследствие этого наиболее объективной оценкой масличности в плодах может являться накопление масла в 100 плодах в расчете на сырой вес.
Из 54 изученных нами форм облепихи только 13 (24%) содержали масла менее 7% в расчете на сырую массу. Вследствие этого облепиху
Западного Памира можно отнести к ценному материалу, пригодному для селекции, но при этом необходимо отбирать формы, накапливающие наибольшее количество масла на 100 плодов и имеющие наибольшее количество мякоти. Чем выше эти показатели, тем ценнее форма с точки зрения накопления масла. К таким формам из 54 изученных можно отнести ИК-5, ИК-16, ИК-17, ИК-19, ШХ-19. Эти формы содержали в 100 плодах достаточно большое количество сухой мякоти (4,4-6,4 г) и наибольшее количество масла (1,8-2,2 г). Исходя из этого, формы ШХ-19 и ИК-19 рекомендованы для введения в культуру.
При проведении исследований нами были отмечены колебания масличности по годам, что согласуется с данными других авторов (Пантелеева Е.И., 1977; Шишкина Е.Е., 1966), полученными для различных форм алтайской облепихи.
Мы также исследовали плоды облепихи изучаемых форм на содержание водорастворимых витаминов, в частности аскорбиновой кислоты, которое в исследуемых формах варьировалось в широких пределах и составляло от 102 до 508 мг на 100 г сырого веса. Причем формы с содержанием аскорбиновой кислоты выше 200 мг на 100 г плодов составляли 50%.
Установлено, что содержание витамина С в плодах облепихи зависит от разнообразия форм, степени зрелости и места произрастания. В Средней Азии плоды облепихи содержат 150-200 мг% витамина С, на Урале - 114-133 ыг%, в Литве - 367 мг%, в Латвии - 139 мг% (Буткус В.Ф., Сташаускайте С.А., 1964; Гутманис К.К., 1964; Павлов Н.В., 1947; Трибунская А.Я., 1964), в облепихе, произрастающей в Талды-Курганской области, среднее содержание аскорбиновой кислоты составляло 54-284 мг% (Елисеев И.П. и др., 1979 ), такие же большие различия в содержании витамина С отмечались у облепихи, произрастающей в дельте Дуная - от 20 до 229 мг% (Шапиро Д.К. и др., 1978 ), бедной витамином С оказалась Кавказская облепиха - 25 мг% (Шапиро Д.К. и др., 1978). Наиболее богатыми витамином С были плоды облепихи, собранной по побережью Балтийского моря, Тироле, Баварских Альпах, Верховьях Рейна, в которых содержание витамина С доходило до 900 мг%.
Проведенные нами исследования показали, что формы облепихи, которые произрастают на верхней границе ее обитания (долина реки Гунт, 3450 м над уровнем моря ) имели высокое содержание витамина С - 314-508 мг на 100 г плодов, на высоте 2630 м над уровнем моря - 188-339 мг%. Исходя из этого было сделано заключение о том, что на верхней границе произрастания облепихи отмечается максимальное содержание витамина С. Для формы ПМ-1, произрастающей в пойме реки Памир на высоте 3450 м, соблюдалась та же закономерность, однако, у форм ШХ-, произрастающих в пойме реки Шахдара и В- , произрастающих в долине реки Ванч, такая закономерность не прослеживалась.
Таким образом, на основе данных литературы и наших исследований полученный разброс в данных по содержанию аскорбиновой кислоты можно считать результатом специфики формы облепихи.
Показателем непредельности масла и в какой-то степени, его F-витаминной активности, является его йодное число. Данные литературы показывают, что йодное число для масла облепихи, произрастающей в различных районах, находится в пределах 65-83 (Горяев М.И. и др., 1972; Жа.мъянсан Я., 1973; Ручкин В.Н., 1929; Трофимов Т.Т., 1967; Шугам Н.А. 1969 ). Результаты наших исследований показали, что йодное число находилось в пределах 59-76: для облепихи, произрастающей в пойме реки Ванч - 59-70, в пойме реки Пяндж - 60-73, Шахдары - 66-76, Гунта -62-74 и приближались к усредненным значениям масла Бийского витаминного завода, с побережья Балтийского моря - 70 и из Забайкалья -65. Следовательно, йодное число для исследованных форм облепихи колеблется в зависимости от районов произрастания облепихи.
Также нами были определены и родановые числа масел, полученных из изучаемых форм облепихи. Разница между йодным и родановым числами составляла - 1-2, что свидетельствовало о преобладании в масле облепихи Памира кислот с одной двойной связью типа олеиновой.
Кислотное число является показателем свободных кислот и составляло в зависимости от формы, 1, 1-5, 7. Однако, встречались и формы с кислотным числом выше 8,0, что могло быть результатом раннего сбора плодов.
Определение числа омыления показало, что масло из памирской облепихи близко по этому показателю к маслам монгольской и алтайской облепихи и составляет 173-227. Это позволило нам определить средний молекулярный вес кислот, входящих в состав глицеридов облепихового масла. Полученные значения за исключением двух форм соответствовали шггерат^фным данным (Жамъянсан Я., 1973; Шугам Н.А., 1969).
Такой показатель масла облепихи, как сумма каротиноидов, колебался не только по формам, но и по годам и составляло 78-426 мг в 100 г, содержание^ -каротина составляло 11-37,1%. Причем формы облепихи с содержанием ^ - -каротина более 30% были отмечены нами впервые.
Облепиховое масло уступает по содержанию токоферолов только маслу пшеничных зародышей и рассматривается как препарат витамина Е (Шнайдман Л.О., 1950; Шнайдман JI.O., Шугам Н.А., 1966). Установлено, что накопление токоферолов возрастает по мере усиления интенсивности УФ-раднации и на высоте 3500 м над уровнем моря превышает таковое на высоте 1200 м (Золотницкая С.Я., Акапян Г.О., 1960).
В связи с этим мы впервые изучили накопление суммы токоферолов в масле облепихи Западного Памира. Содержание токоферолов определялось в масле облепихи, полученном из 18 форм растения, произрастающих в долинах рек Ванч, Шахдара, Пяндж и один образец М-80 сорта "Масличная", выращенный в Памирском ботаническом саду на высоте 2000-3430 м над уровнем моря.
Полученные результаты показали, что формы облепихи Западного Памира отличаются высоким содержанием токоферолов, которое составляло 323-387 мг на 100 г масла (9 форм), 178-276 мг (5 форм), 409680 мг (3 формы), а сорт "Масличная" сохранил то же содержание токоферолов, что и на Алтае - 179 мг. Было определено содержание^ -токоферола в маслах, полученных из трех форм облепихи и составляло 48,7-65,6%.
В неомыляемую часть масла облепихи входят токоферолы, каротиноиды, стеролы, терпеноиды, высокомолекулярные спирты и целый ряд соединений с еще не установленным строением. По сумме неомыляемых веществ в облепиховом масле можно приблизительно судить о наличии веществ, ответственных за специфическую фармакологическую активность облепихового масла.
Имеющиеся в литературе данные о содержании неомыляемой части в маслах из различных форм облепихи являются довольно противоречивыми. В ряде работ (Жамъянсан Я., 1973 ; Наврузов Э. Н., 1981; Шнайдман Л.О., 1973; Шугам Н.А., 1969 ): для сорта "Дар Катуни" -3,3%, сортов "Селенга" и "ТЭС-1" - 3,7 и 3,5%, соответственно, для масла облепихи, произрастающей в Азербайджане - 3,3%, в плодовой мякоти алтайской облепихи - 3,23%. Л.И. Вигоровым было обнаружено около 1% неомыляемых веществ (Вигоров Л.И., Суменкова Т.Н., 1973). В связи с этим было изучено содержание неомыляемой части в масле облепихи Западного Памира, которое составляло 1,1-3,0%.
Из всего вышеизложенного можно заключить, что облепиха, произрастающая в долинах рек Ванч, Шахдара является перспективной для селекции неомыляемых веществ, формы из долин рек Пяндж и Ванч являются самыми высокомасличными, а почти все изученные формы облепихи являются высококаротиноидными. Поэтому вывод о том, что все изученные нами районы до высоты 3400 м над уровнем моря можно рассматривать как перспективные для введения в культуру облепихи, является вполне обоснованным.
Было показано (Пантелеева Е.И., 1977), что влияние УФ-радиации на процессы роста и развития растений заключаются в их торможении за счет накопления в них эндогенных факторов роста, почти нацело-полностью состоящих из фенольных соединений типа флавоноидов, кофейной и хлорогеновой кислот. Поэтому следовало ожидать накопления фенольных соединений в облепихе, произрастающей на Западном Памире.
В связи с этим, плоды и листья облепихи, произрастающей по поймам рек Шахцара, Ванч, Гунт, Пяндж и Памир были исследованы на содержание суммы флавоноидов. Проведенные исследования показали, что содержание флавоноидных веществ в листьях по формам было различным и составляло 310-2138 мг на 100 г воздушно-сухой массы. Содержание флавоноидов в листьях облепихи снижалось с увеличением высоты ее произрастания, а содержание флавоноидов в плодах облепихи не зависело от высоты ее произрастания.
Флавоноидный состав плодов облепихи, произрастающей в различных местах отличается друг от друга. Например, в плодах монгольской облепихи были идентифицированы кверцетин, изорамнетин, кемпферол, 5, 7, 3, 4-тетраоксифлавон-О-З-ув -рутинозид (рутин), кверцетин-7-0-рамнозид, 3-0-метиловый эфир кверцетина, изорамнетин-3-jg-Д-глюкозид, изорамнетин-3-0-рутинозид (Пурве О. и др., 1982), а в плодах облепихи, собранной в окрестностях Алма-Аты, были обнаружены мирицетин, кверцетин, изорамнетин, изокверцетин, З-О^-Д-глюкопиранозид изорамнетнна, изорамнетин-З-О^-Д-глюкопиранозидо-/2-МА^-Д-глюкопиранозид (Мухамедьярова М.М., Чумбалов Г.К., 1979). Также для различных районов произрастания различаются по своему набору и флавоноиды, выделенные из листьев облепихи. Например, в листьях облепихи, собранной в Бурятии, были обнаружены изорамнетин-3-0-^-Д-глюкопиранозид-(7)-0-^-Ь-рамнопи-ранозид и изорамнетин
Распутина Д.Б. и др., 1975), а также изорамнетин и кемпферол-З-В-Д-глюкопиранознд (астрагалин); листья облепихи, собранной в окрестностях Алма-Аты, содержали кверцетин, кемпферол, изорамнетин, мирицетин, изорамнетин-З^В-Д-глюкофу-ранозидо-б^Б-Д-глюкопиранозид, кверцетин-З^-Д-глюкопиранозид (изокверцетин).
Нами, с помощью адсорбционной распределительной хроматографии из плодов облепихи было выделено 6 индивидуальных флавоноидных соединений, которые были идентифицированы как изорамнетин, изорамнетин-3-0^-Д-глюкопиранозил(6-^1)-0-0(-Ьрамнопиранозид (нарциссин), изорамнетин-3-0^5-Д-глюкопиранозид, рутин, кверцетин, мирицетин. С применением этого же метода из листьев облепихи, мы выделили 7 флавоноидных соединений, идентифицироваиных как изорамнетин, изорамнетин-3-0^#-Д-глюкофуранозид, изорамнетин-7-0;ДД-глюкофкранозид, изорамнетин-3-7-О-^-Д-глюкопиранозид, кемпферол. Причем мы впервые из листьев облепихи выделили два соединения кемпферол-З-О^-Д-глюкопиранозида, ацетилированных в углеводном остатке.
Проведенные химические и биологические исследования облепихи, произрастающей на Западном Памире, позволили рекомендовать три ее формы доя введения в культуру. Также было установлено, что все районы произрастания облепихи на Западном Памире до высоты 3500 м над уровнем моря являются перспективными для разведения плантаций облепихи. С целью проведения фармакологического скрининга были разработаны суммарные препараты флавоноидов из листьев и плодов облепихи.
Изучение токсических свойств разработанных препаратов показало, что при их пероралыюм введении в дозе 500-2500 мг/кг массы животного изменений в поведенческих реакциях животных, рефлекторной и нервно-мышечной деятельности отмечено не было. Максимально переносимой являлась доза 2500 мг/кг. На основании классификации токсичности веществ при введении под кожу и в брюшную полость такие препараты относятся к практически нетоксичным.
Внутривенное введение разработанных препаратов в дозах 10, 25 и 50 мг/кг вызывало у животных снижение артериального давления, начинающееся через 10-15 сек после введения и продолжающееся в течение 15-30 мин. Частота и амплитуда сердечных сокращений и дыхательных движений при этом не изменялись. В экспериментах на изолированных отрезках кишки крыс было показано, что оба препарата спазмолитической активности не проявляли. Введение препаратов в дозах 5-10 мг/кг вызывало торможение секреции желчи продолжительностью до 3 часов. Введение обоих суммарных препаратов в дозе 100 мг/кг способствует ослаблению интенсивности развития формалинового воспалительного отека, однако, по силе противовоспалительного эффекта оба препарата уступают бутадиону. Таким образом, суммарные препараты флавоноидов из листьев и плодов облепихи относятся к практически нетоксичным веществам, обладающим гипотензивной и противовоспалительной активностью.
Применение неомыляемой фракции облепихового масла при лечении ожоговой раны привело к полной эпителизации области раны, появлению новообразованных дериватов кожи, в частности, хорошо выраженных волосяных луковиц, в отличие от животных, которых лечили подсолнечным маслом, маслом Бийского витаминного завода, пальмитатом и олеатом^ -ситостерина и их смесью. Таким образом, показано, что за наличие специфической биологической активности у облепихового масла отвечает его неомыляемая часть.
Как было показано в литературном обзоре (Ободовская Д.А., 1957; Шишкина Е.Е., 1968, 1978) и в некоторых других работах (Шнайдман JI.0 , Фондаренко А.Ф., 1964) в плодах облепихи содержится большое количество биологически активных веществ, необходимых человеческому организму, среди которых обнаружены витамины С, Е, Р, каротиноиды, фосфолипиды, стерины, фолиевая кислота, флав'оноиды и другие.
В настоящее время основным продуктом переработки плодов облепихи является облепиховое масло, применяемое в качестве лекарственного препарата широкого спектра действия.
Люди издавна применяли облепиховое масло для лечения ран, ожогов, обморожения, цинги, трахомы. В современной медицине рекомендовано применение облепихового масла для лечения лучевых поражений кожи и слизистых оболочек, атеросклерозов (Олзийхутаг А., 1969). Сообщалось (Блинова Н.М., Базарный В.Ф., 1966; Коноплева В.Г., 1963; Паскарь Н.П., 1973; Файман Б.А., 1968, 1970, 1971; Файман Б.А., Кошель Ю.А., 1975; Филимонова Л.Д., 1971) о применении облепихового масла в гинекологической практике, для противоопухолевой профилактики, жирового и холестеринового обмена.
- - < «• -I
В результате клинических и экспериментальных исследований было показано, что облепиховое масло проявляет болеутоляющую и эпителизирующую активность, способствует ускорению регенерации эпителиальных и мышечных тканей, что позволило рекомендовать его для лечения язв желудка и двенадцатиперстной кишки (Машковский Н.Д., 1977).
Однако, из анализа литературных данных следует, что применение облепихового масла при лечении многих заболеваний не имеет экспериментального обоснования. Вследствие этого, проведение таких исследований имеет теоретическое и практическое значение, так как их результаты позволят получить характеристику воздействия на органы и системы организма, изучить механизм этого воздействия, рекомендовать наиболее оптимальные способы применения.
На протяжении последних 20-25 лет облепиховое масло широко применяется при лечении целого ряда заболеваний (Акулин И.А., 1958; Алиева Т.С., 1976; Власов В.В., 1970; Файман Б.А., Кошель Ю.А., 1975; Фой A.M., Попова С. Д., 1946; Юдкина Л.Н., 1954). Однако, вырабатываемого фармацевтической промышленностью облепихового масла недостаточно для удовлетворения медицинских нужд. Это обусловлено целым рядом причин: трудностями заготовки и транспортировки сырья, устаревшей технологией производства облепихового масла. В связи с этим была разработана новая технология получения облепихового масла методом экстракции органическими растворителями фреоном-12 и н-гексаном. Однако, полного фармакологического изучения облепихового масла, получаемого по новой технологии, проведено не было.
Исходя из вышеизложенного и в связи с требованиями экспертных комиссий ВОЗ, предусматривающими проведение полного экспериментального обследования препарата при изменении даже фрагмента технологического процесса его получения для подтверждения ъ* . отсутствия побочного действия и сохранения специфической активности одной из задач нашего исследования являлось экспериментальное изучение биологической активности облепихового масла, полученного методом экстракции фреоном и гексаном в сравнении с официально применяемым маслом Бийского витаминного завода, получаемым методом диффузии.
В исследованиях, проведенных в Институте гастроэнтерологии АН Республики Таджикистан (Линчевская А.А., 1976; Мансурова И.Д., Бободжанова М.Б., 1976) было показано, что облепиховое масло оказывает значительное защитное действие на гладкий эндоплазматический ретикулум, в котором в основном находится цитохром Р-450, гидроксилирующий лекарственные вещества и являющийся стабилизатором биологических мембран.
В связи с этим, первым этапом фармакологического изучения облепиховых масел явилось изучение их специфической активности при экспериментальном воспалении.
В результате проведенных исследований было обнаружено, что применение облепихового масла с лечебной целью не оказывало влияния на экссудативную фазу воспаления. Однако, облепиховые масла, полученные как экстракцией, так и диффузией, на 21-30 сутки после введения в организм способствовали торможению развития воспалительного процесса в подкожной клетчатке белых мышей и ослабляли формирование в этот период барьерных механизмов очага воспаления.
Изучение противоязвенной активности всех исследуемых видов облепихового масла и подсолнечного масла было проведено на модели экспериментальной, комбинированной язвы желудка у крыс. На 3 сутки эксперимента во всех сериях опытов у животных отмечалось появление ' дефектов слизистого слоя в виде эрозий и язв.
Патоморфологическое исследование стенок желудка крыс, которые лечению не подвергались, во все сроки забоя (7, 14, 21, 28 и 30 сутки) показало, что воспалительная инфильтрация сохраняется, признаков регенерации не отмечается.
Введение подсолнечного масла способствовало большему, чем в предыдущей контрольной группе животных, лечению не подвергавшихся, усугублению воспалительного процесса. Подсолнечное масло никакого санирующего эффекта на слизистую оболочку желудка опытных жтвотных не оказывало. Объяснением этому может служить то, что в состав подсолнечного масла входит большое количество полиеновых жирных кислот, которые являются дополнительными субстратами для процессов свободно-радикального окисления, продукты которого инициируют окисление мембран эпителиальных клеток желудка (Morrin R.J., 1967).
Ежедневное введение масла Бийского витаминного завода в желудок опытных животных способствовало началу с 14 суток процессов регенерации, которые отчетливо нарастали к 30 суткам. Однако, наличие круглоклеточной инфильтрации в подслизистом слое свидетельствовало о сохранении элементов воспаления. Масла облепихи, полученные методами экстракции, стимулировали рост молодой ткани начиная с 7 суток. К 30 суткам в стенке желудка уже не отмечалось элементов воспаления ( таблица 57 ).
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2006 года, Рахимов, Исматулло Фатхуллоевич
1. Абдусаматов А., Хамидходжаев С.Н., Юнусов С.Ю., О динамике накопления алколоидов рода Ungernia «Химия природных соединений» 1971, № 1., стр.60-64.
2. Абдуталыбов М.Г., Асланов С.М. Наврузов Э.Н., Химический состав плодов облепихи, произрастающей в Азербайджане, Растительные ресурсы, 1978, т.14, вып.2. стр.220-222
3. Акопов И.Э., Кровоостанавливающие растения, Ташкент, 1981, стр.296.
4. Акулин И.А., Облепиховое масло в лечении ожогов. Сов. Медицина, 1958, № 11, стр.137-138.
5. Алиева Т.С., Применение облепихового масла в комплексе лечения больных язвенной болезнью желудка и 12-перстной кишки., Азербайджанский мед. журнал-1976, № 7, стр~45-47
6. Али-Заде З.М., Имамалиев Г.Н., Азизов Ф.М., Кафаров Н.М. Формовое разнообразие облепихи в Северо-западном Азейбаджане. «Растительные ресурсы».-1978.-Т. 14.-Вып. 1 .-стр.64-66.
7. Алиханова Р.И., Ушбаева К.У., Дутова В.А. Препараты облепихи в клинике. «Здравохранение Казахстана».-1973.-№7.-стр.73.
8. Альперн Д.Е. Воспаление.-М., 1959.
9. Ю.Артемьева М.В., Каррыев М.О., Мещеряков А.А., Гордиенко В.П. Новый флавоноловый гликозид кверцетин-7-0-ггаокорамнозид из Capparis spinosa L. «Изв. АН Турк. ССР. Сер. физико-технических, химических и геологических наук».-1981.-№3. стр. 123-125.
10. П.Асланов С.М., Наврузов Э.Н. "Масло из жома" Hippophae rharrmoides L "Химия природных соединений", 1976, №5. стр.625.
11. Бабкин Б.П.,"секреторный механизм пищеварительных желез". JI.-1960
12. Базарон Э.Г., Цыбикова Д.Ц., "Облепиха-лечебное средство индотибетской медицины" Растительные ресурсы, 1978, Том 14, Вып.1 стр.67-69.
13. Балаховский С.Д., "Проблемы витаминологии" Вестник АН СССР-1957, Том 9.
14. Бамфорд К., Дженкинс А., "Образование и стабилизация свободных радикалов" -М, 1962
15. Бекенская А.И. "К методу получения настойки шиповника " Советская медицина - 1940, №15, стр28
16. Белинский M.JI., "Элементы количественной оценки фармакологического эффекта" Л., 1963
17. Бережная Г.А., "Биосинтез ацилодержащих липидов в созревающих плодах облепихи крушиновидной (Hippophae rhamnoides L), Автореферат диссертации док. биологическихнаук. Москва, 2000, стр, 48
18. Бережная Г.А., Елисеев И.П., Верещагин А.Г., "Динамика содержания и жирнокислотного состава липидов в созревающих плодах облепихи" Тез. конф. "Исследование облепихи и облепихового масла", Новосибирск, Изд-во Сибирского отделения АН СССР, 1987, стр 23
19. Бережная Г.А., Елисеев И.П., Цыдендамбаев В.Д., Верещагин А.Г., "Определение жирнокислотного состава и количественного содержания липидов в плодах облепихи" Прикладная биохимия и микробиология, 1988, Том 24, Вып. 2, стр. 568-572
20. Бережная Г.А., Озеринина О.В., Верещагин А.Г., Цыдендамбаев В.Д., "Динамика состава триацилглицеридов в мезокарпе созревающих плодов облепихи" Физиология растений, 1997. Том 44, №3, стр.338-346
21. Бережная Г.А., Цыдендамбаев В.Д., Верещагин А.Г., "Абсолютное содержание и жирнокислотный состав суммарных липидов итриацилглицеринов из плодов облепихи крушиновидной" Тез. V Всесоюзного биохимического съезда М., Наука, 1985, Том 3 стр. 95
22. Бережная Г.А., Цыдендамбаев В.Д., Верещагин А.Г., "Накопление липидов в созревающих плодах облепихи", Тез, Ш съезда Всесоюзного общества физиологов растений, Минск, сентябрь, 24-29,1990, стр. 15
23. Бесчетпов В.П., "Селекционная оценка облепишников Талды-Курганской области", Вестник с/х-ных наук Казахстана, 1978, № 8, стр.123
24. Блинова Н.М., Базарный В.Ф.,"Лечение облепиховым маслом травматических повреждений роговой оболочки", Актуальные вопросы клинической медицины, Красноярск, 1966, стр. 418-420
25. Богацкая Л.Н., Лыгина Т.И., "Фармакологическая характеристика галаскорбина", Врачебное дело, I960, № 2 стр.203
26. Букин В.Н.,"Витамины, распространение, природа и свойства" ,- -г » ,
27. Пищепромиздат, М-Л, 1937 №2 стр.2
28. Букин В.Н., "Витамины" Пищепромиздат М., 1941, стр29
29. Буткус В.Ф., Сташаускайте С.А., "Содержание аскорбиновой кислоты в интродуцированных и дикорастущих плодово-ягодных растениях Литовской ССР" ТР., II Всес. семинара по биологически активным веществам плодов и ягод, Свердловск, 1964, стр.73-77
30. Василенко Ю.К., "Биологическая химия" М., Высшая школа, 1978, стр. 286-300
31. Ведмеденко А.Т., "Регенеративные свойства облепихового масла", Офтальмологический журнал, 1959 № 1 стр. 48-49
32. Ветров П.П., Гарная С.В., Долгоненко Л.Г., "Распределение содержания липофильных веществ и суммы каротиноидов в растительном сырье", Химико-фармацевтический журнал, 1989 №3, стр.320
33. Ветров П.П., Драник Л.И., Прокопенко А.П., "Использование сжиженных газов для экстракции растительного сырья", Фармацевтичник, Журнал, 1974, №5, стр. 80-85
34. Вигоров Jl.И., Суменкова Т.Н.,"Кумарины в плодах садовых растений", ДАН СССР, 1973, Т.208, № 6, стр.1484
35. Владимиров Ю.А., Арчанов И.И.,"Перекисное окисление липидов в биологических мембранах", М. 1972
36. Власов В.В.,"Облепиховое масло в лечении поверхностных ожогов кожи", Вестник дерматологии и венерологии., 1979, № 6 стр.69-72
37. Волынский Б.Г., Бетдер К.И., Фрейдман С.Л., "Лекарственные растения в научной и народной медицине", Изд-во Саратовского университета, 1967, стр. 382-383
38. Воронин В.В., "Воспаление", Тбилиси, 1959
39. Гаммерман А.Ф., Кадаев Г.Н., Шулинская М.Д., и др., "Облепиха" Лекарственные растения, М., 1976, стр.317
40. Гатин Ж.И.,"Облепиха", М., 1963
41. Глазунова Е.М.,Гачечиладзе Н.Д., Бондарь В.В.,Корзинников Ю.С./'Биохимическое изучение облепихи Западного Памира", Биология, биохимия и фармакология облепихи, Новосибирск, Наука, 1983, стр.31-36
42. Городецкая Н.М., "Предварительные данные об эффективности лечения язвенной болезни облепиховым маслом", Вопросы витаминологии, Барнаул, 1959, стр.321
43. Горшкова С. Г., "Семейство Лоховые" Elaeagnaceae, Флора СССР, 1949, Том. 15
44. Горяев М.И.,Алиханова Р.И./'Некоторые данные об антибактериальном действии облепихи крушиновой", Здравоохранение Казахстана, 1972, № 2 стр.52
45. Горяев М.И.,Алиханова Р.И."Облепиха, её состав и лечебные свойства", Здравоохранение Казахстана, 1971, № 6 стр.73-75
46. Горяев М.И.,Алиханова Р.И., Быков Ю.С., "Масло плодов облепихи крушиновой", Здравоохранение Казахстана, 1972, № 10 стр.34
47. Государственная Фармакопея СССР, М., Медицина, Изд. X., 1968, стр.1080
48. Гречишкина А.П.,"0 механизме тормозящего влияния жира на желудочную секрецию", Tp.II научной конференции по вопросу "Проблемы жира в питании", Л., 1962, стр. 135-138
49. Гудвин Т., "Сравнительная биохимия каротиноидов", М., 1954
50. Гужва Н.Н., Лукъянчикова М.С.,Казаков Н.Л., "Флавоноиды", Astragalus levied и A. Sevancensis "Химия природных соединений", 1983, №4, стр.529
51. Гульмамадов Г., "Влияние естественной УФ-радиации на активность*- «чэндогенных регуляторов роста у ячменей на Памире в связи с ростовыми процессами: Автореферат диссертации канд. биологических наук, Душанбе, 1975, стр.25
52. Гуревич С.К., "Применение облепихового масла в офтальмологии", Вестник офтальмологии. 1956 № 2, стр. 30
53. Гурская Л.И., "Типы желудочной секреции и их диагностическое значение, М., 1964
54. Гурский Ю.Д., "О верхнем пределе произрастания деревьев и кустарников в Горно-Бадахшанской автономной области" , Ботанический журнал, 1959, Том 44, Вып. 8, стр. 1160-1161
55. Гусакова-Фёдорова Н.Я., Селезнева Е.Д., "Лечение эрозии шейки матки облепиховым маслом", Акушерство и гинекология, 1955, № 5, стр. 57-58
56. Гусева А.Р.,Нестюк М.Н., "К методике определения флавоновых веществ в растениях", Биохимия, 1958. Том 18, Вып. 4, стр. 480-483
57. Гутманис К.К. "Содержание витамина С и каротина в плодах интродуцированных деревьев и кустаршшэв Латвийской ССР", Тр. II
58. Всесоюзного семинара по биологически активным веществам плодов и ягод., Свердловск, 1964, стр. 73-77
59. Дамиров И.А., Исламов Н.А., Халилов Д.С., "Некоторые результаты изучения лекарственной флоры Азербайджана", Научные труды Азербайджанского мед. института к 50-летнему юбилею АТМИ им. Нариманова, Баку, 1981, стр.164
60. Дамиров И.А., Прилипко Л.И., Шукюров Д.З., Керимов Ю.Б., "Лекарственные растения Азербайджана", Баку, Маариф, 1983, стр. 274
61. Девятнин В.А.,"Методы химического анализа в производстве витаминов", М., медицина, 1964, стр. 54
62. Девятнин В.А., "Витамины в плодах" Природа, 1957, № 10, стр. 126-127
63. Девятнин В.А., Захарова М.П., "Облепиха" Природа, 1955, № 9, стр. 26-29 64 Девятнин В.А., Захарова М.П., "О витаминной ценности плодовоблепихи", Пищевая промышленность СССР, 1944, № 5-6
64. Девятнин В.А., Ободовская Д.А., "Облепиха (Полезное дикорастущее растение), Природа, 1955, № 9, стр. 101-102
65. Добрынина В.И., "Биологическая химия", М., Медицина, 1976, стр. 513
66. Доспехов Б.А.,"Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований), Изд-во "Колос", М., 1979, стр. 320337
67. Дубинин М.С.,Алиханова Р.И., "Облепиха Казахстанская" Тр. Алматинского мед института, 1970, Том 26, стр. 428-429
68. Дубров А.П., "Генетические и физиологические эффекты действия УФ-радиании на высшие растения", М., Наука, 1968, стр. 250
69. Ebtv шенко А.Ф.,"Облепиха как" высокоценная витаминная культура", Автореферат канд. наук М., 1950
70. Елисеев И.П., Фефелов В.А., Скорикова Е.Ю., "Морфологическая и биохимическая изменчивость облепихи в Талды Курганской области", Растительные ресурсы, 1979, т. 15, Выи.4, стр. 540-544
71. Ермаков А.И., "Методы биохимического исследования растений", Издательство "Колос", JL, 1972, стр.455
72. Жамъянская Я., "Биологически активные вещества плодов облепихи Монгольской народной республики и их промышленное использование. Автореферат диссертации канд. биологических наук М., 1973, стр.25
73. Жмырко Т.Г., Гигиенова Э.И., Умаров А.У., "Витамина масел плодов Hippophae rhamnoides L "Химия природных соединений, 1978, № 3, стр.313
74. Журавлев Р.И., Филиппов Ю.И.,"Материалы второй Всесоюзной конференции по экспериментальной курортологии и физиотерапии", М., 1970, стр.83
75. Заводская И.С., "Механизм резерпиновых язв", Бюлл. экспериментальной биологии и медицины, 1964, № 2, стр. 78-80
76. Заводская И.С., Манина А.А., "Ранние признаки нейрогенной дистрофии стенки желудка и влияние на них нейротропных средств", Бюлл. экспериментальной биологии и медицины, 1967, № 3, стр. 75-77
77. Заводская И.С., Морева Е.В., "Роль катехоламинов в развитии нейрогенных дистрофий", Нервная трофика и дистрофический процесс, Киев, 1969, стр.64-66
78. Закиров К.З., "Ключ для определения семейства флоры Средней Азии.
79. Запрягаева В.И., "Дикорастущие плодовые Таджикистана", М., JI., Наука, 1964, стр.557-559
80. Запрягаева В.И., "Лесные ресурсы Памиро-Алтая", Л., Наука, 1976, стр. 433-435
81. Захаров A.M., Буряев К.И., "Поиски растений, содержащих биологически активные вещества, по флоре Средней Азии и Казахстана" Растительные ресурсы, 1968, Т.4, Вып. 2 стр. 243
82. Зегельман А.Б., Климова Н.Н.,Андронов В.А.,Рославцев С.А.,"Экстракция облепихового масла жидкими органическими растворителями"
83. Исследования в области органической и биологической химии, ДГПИ, Душанбе, 1981, стр.30
84. Золотницкая С.Я.,Акапян Г.О., "О влиянии ультрафиолетового облучения на репродуктивное развитие и синтез токоферолов в растениях" ДАН Арм. ССР, I960, Т.31, Вып.З
85. Иваненко Е.Ф.,"Биохимия витаминов", Киев, Высш. школа, 1970, стр. 158-160
86. Игнатьев Б.Д./'Концентрат каротина из облепихи" Докл. АН СССР. Новая серия, 1949, Т-65, № 3, стр. 323-324
87. Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В.,"Параметры токсикотерапии промышленных ядов при однократном воздействии, М., Медицина, 1977, стр. 197
88. Иконников С.С. "Новые данные о флоре Памира" Проблемы ботаники,-1960, Т.5, стр.237-242
89. Имамалиев Г.Н.,Пантелеева Е.И., "Характеристика некоторых форм облепихи, распространенных в предгорьях Большого Кавказа (Азербайджанская ССР), Растительные ресурсы, 1980, Т. 16, Вып.4, хтр. 547-549
90. Калашникова В.П., "Изменение обмена фолиевой кислоты при внешнем облучении на фоне различного питания", Вопросы питания, 1960, №4, стр. 48-53
91. Карер П., "Курс органической химии", Государственное научно-техническое издательство химической литературы, Л. 1960
92. Каурова Л.В., "Влияние плодов облепихи крушеновидной и облепихового масла на желудочную секрецию в норме и при экспериментальной язве", Автореферат дисертации кап. мед. наук, Иркутск, 1974
93. Каурова Л.В.,"Влияние плодов облепихи крушиновой и облепихового масла на желудочную секрецшо собак", Научные труды Иркутского мед. института, 1969, Вып. 96, стр. 62-66
94. Козлова Л.М.,"К фитохимии пустырника пятилопастного", Фармация, 1967, №6, стр. 23
95. Колесников Д.Г., Комиссаренко Н.Ф., "Кумарины борщевика сибирского Heracleum sibiricum, Медицинская промышленность, 1961, №6, стр. 32-35
96. Кондрашов В.Т., "К методике описания дикорастущих форм облепихи", Растительные ресурсы, 1977. Т.13, Вып.1, стр. 140-144
97. Коноплева В.Г., "О лечении маслом ~ облепихи субатрофных и атрофичных назофарингитов", Сб. трудов Новосибирского отд. Всероссийского общества отоларингологов, 1963, Вып. 1, стр. 128
98. Косова Г.В., Колье О.Р., Тарусов Б.Н., "Физико-колйчественные аспекты возбуждения и проведения". Труды МОИП, 1970, Т.45, стр. 83
99. Костенникова З.П., Панова Т.А., Долотенкова Т.М., "Спектрофотометрическое определение флавоноидов в цветках арники", Фармация, 1985, №2, стр. 51-52
100. Кошелев Ю.А., Агеева Л.Д.,Гребцова З.Г., "Вопросы технологии производства облепихового масла и пути её совершенствования". Витаминные растительные ресурсы и их использование", М. 1977, стр.304308t
101. Кретович B.Jl., "Основы биохимии растений", М., Высшая школа. 1971, стр.463
102. Крюков B.C., "Современные методы анализа токоферолов", Сельское хозяйства за рубежом, Издательство "Колос", 1975, стр. 60-63
103. Кхандуджа К.А., Есаков Т.Д. "Исследование роли витамина А в• химическом канцерогенезе молочной железы", Бюллетеньэкспериментальной биологии и.медицины, 1979, №3, стр.273-275
104. Ларин И.В., "Кормовые растения СССР", Лениздат, 1953, стр.257
105. Ленинджер А.,Биохимия. "Молекулярные основы структуры и функций клетки", Издательство "Мир", М., 1974, стр. 221-223,226
106. Леутский К.М., "Витамин А", Издательство Львовского Госуниверситета, 1959, стр.58
107. Линчевская А.А., "К механизму действия облепихового масла", Медицинская биохимия. Тез. Докл. 2-ой Конференции биохимиков Республик Средней Азии и Казахстана, Фрунзе. 1976, стр. 110-112
108. Литвиненко В.И., Попов Т.П., Аммосов А.С., "Дифференциальная УФ-спектроскопия флавоноидов", Фарм. журнал, 1976, № 6, стр.20-28
109. Мамадризохонов А., "Действие ультрафиолетовой радиации солнца налрост, развитие и транспирацшо листьев ячменя в условиях Западного Памира", Автореф. диссертации канд. биологических наук, Душанбе, 1973, стр.22
110. Мансуров И.И./'Фармакологические исследования действия алкалоидов стахидрина. илинина и асафетидина на свертываемость крови, М., 1973
111. Мансурова И.Д., Бободжанова М.Б., "Влияние облепихового масла на цитохром Р-450 при острой этаноловой интоксикации", Экспериментальная патология печени. Душанбе, 1978, Вып.З, стр.113
112. Масленникова Г.В., "Результаты лечения больных глоссальгией облепиховым маслом", Стоматология, 1968, № 3, стр. 86-88
113. Матросова Е.М., "Двигательная деятельность желудка и её связь с секрецией желудка", М-Л, Наука, 1964, стр.188
114. Махлаюк В.П., "Облепиха крушиновая", Лекарственные растения в народной медицине, Саратов, 1967, стр. 265-266
115. Машковский М.Д., Масло облепихи, Лекарственные средства, Справочник, 1977, том. 2, стр. 6
116. Медведев П.Ф. Пищевые растения СССР. стр. 137
117. Менкин В., "Динамика воспаления. Анализ механизма инфекционных процессов", М., 1948
118. Митюков А.Д., Напетко Н.Л., Щелирук С.Г., "Облепиха крушиновидная, Дикорастущие плоды, ягоды и их применение", Минск, 1975, стр. 87-89
119. Мухамедьярова М.М., Чумбалов Т.К., Полифенолы Hippophae rlmmnoides, Химия природных соединений, 1979, № 7, стр. 854
120. Наврузов Э.Н., "Химия природных соединений". 1981, №1 стр. 98-99
121. Насонова В.А., Сигидин Я.А., (СССР), Трнавский К., Выкидал М., (ЧССР). "Фармакотерапия в ревматологии", М., Медицина, 1976, стр. 215
122. Ободовская Д.А., "Облепиха как сырьё для витаминной промышленности" М., 1957
123. Ободовская Д.А., Девятнин В.А., "Характеристика плодов алтайской облепихи как сырьё для витаминной промышленности" , Бюлл. техн. информ. (Центральный институт витаминной промышленности). 1952, №6, стр. 9-12
124. Озеринина О.В. Бережная Г.А., Елисеев И.П., Верещагин А.Г.,"Состав и строение триацилглицеринов из мякоти плодов облепихи", Прикладная биохимия и микробиология., 1988, Том 24, Вып.З, стр. 422-429
125. Озеринина О.В., Бережная Г.А., Елисеев И.П., Верещагин А.Г.,"Состав и строение триацилглицеринов семян Hippophae rlmmnoides, Химия природных соединений, 1987 №1 стр. 52-57
126. Озеринина О.В., Бережная Г.А., Елисеев И.П., Верещагин А.Г., "Состав и строение триацилглицеринов плодов облепихи из различных районов произрастания", Физиология растений, 1997, том 44, №1, стр. 74-82
127. Ойвин И.А., "Механизм образования барьерной функции воспаления", Совр. пробл. морфол. физиолог, и патолог. АН Грузинской ССР, Тбилиси, 1962, стр.243
128. Ойвин И.А., "О биологическом значении воспалительного отека" Бюлл. экспериментальной биологии и медицины, 1954, Том 59, № 2, стр. 29
129. Олзийхутаг А., "Влияние облепихового масла на клиническое проявление и показатели липидного обмена у больных атеросклерозом и на течении экспериментального атеросклероза", Дис. канд. мед. наук, М., 1969
130. Определение витаминов А, Е и каротиноидов в кормах, преператах и биологических объектах (Методические указания), ВНИТИП,Загорск, 1978, стр.24
131. Павлов Н.В., "Растительное сырьё Казахстана, (Растения, их вещества и использование). М.,-Л., АН СССР, 1947, стр.363-364
132. Пантелеева Е.И., "Культура облепихи в Алтайском крае, Автореферат, дис. канд. с/х наук Л.Пушкин, 1977, стр.21
133. Паскарь Н.П "Лечение облепиховым маслом некоторых ЛОРзаболеваний", Вестник Оториноларингологии, 1973, № 3, стр. 40-42
134. Петряев Е.Д., "Лекарственные растения Забайкалья", Чита, ГИЗ, 1952, стр.141
135. Пильман Э., "Наша облепиха", Байкал, 1961, №5, стр. 125-126
136. Попов А.П.,"Лекарственные растения в народной медицине", Киев, Здоровье, 1970, стр. 161-173
137. Потапова И.М. Гачечиладзе Н.Д., Юсуфбеков Х.Ю., "Флавоноиды облепихи западного Памира", Биология, биохимия и фармакология облепихи, Новосибирск, Наука, 1983, стр. 36-42
138. Проскурнина А.Ф., Уткин Л.М., "Ool стахидрина в растении лагохилус", Медицинская промышленность СССР, 1960, № 9, стр.30
139. Пурве О., Жамъянская Я., Маликов В.М., Балдин Т., "Флавоноиды Hippophae rhamnoides L., произрастающей в Монголии", Химия природных соединений,19, №3, стр.403-404
140. Пухальская Е.Г., Петрова М.Ф., Меньшиков Г.П.,"5-окситриптамин из Hippophae rhamnoides как противоопухолевый препарат в опытах на животных" , Бюлл. экспериментальной биологии и медицины, 1960, том.50 № 10, стр. 105-110
141. Пшуков Ю.Т., Муравьев Й.А. "Равновесный метод определения экстрактивных веществ в растительном сырье", Фармация, 1987, № 6 стр. 17
142. Распутина Д.Б., Комиссаренко Н.Ф., Цыбикова Д.Ц. "Изорамнетин и астрагалин из листьев Hippophae rhamnoides L, Химия природных соединений, 1976, №1, стр.97
143. Распутина Д.Б.,Комиссаренко Н.Ф., Цыбикова Д.Ц., Папанова А.Ш., "Флавоноиды листьев Hippophae rhamnoides L, Химия природных соединений, 1975, №1, стр.96-97
144. Рожков М.И., Смирнов Н.Е., "Витаминные растения, М., Пищепромиздат, 1956, стр. 40-48
145. Руководство по методам исследования в маслобойной и масложировой промышленности. ВНИИЖ, Л. Том 1, кн.2, стр. 817, 1967
146. Ручкин В.Н. "Облепиха", Сибирское плодоводство и огородничество, 1927, №1 стр.14
147. Ручкин В.Н., "Материалы к познанию химического состава растений. Химический анализ плодов и масла Hippophae rhamaoides L, Омск, Изд-во Сиб. института с/х и лесоводства, 1929, стр.13
148. Саленко В.Л.,Сидельников В.Н., Трошков М.Л.,Ралдугин, В.А., Пентегова В.А., "Химическое исследование Hippophae rhamnoides L, Основные компоненты неомыляемой части экстракта жома плодов, Химия природных соединений, 1982, №3, стр. 328-332
149. Скляревский Л.Я., "Облепиха крушиновидная", Целебные свойства пищевых растений, М.,1975, стр. 153-155
150. Соколова В.Е.,Васильченко Е.А.,Любарцева Л.А.,Хромова Т.О., Измайлова И.К., Шенгур В.Ф., "К вопросу о некоторых видах биологического действия флавоноидов" Тез., докл. IV Всесоюзного симпозиума по фенольным соединениям, Ташкент, Фан, 1982, стр.46-47
151. Сперанская Е.Н., "Методики операций на собаках и проведения хронических опытов в физиологии, М-Л., 1953.
152. Станюкович К.В., "Растительность гор СССР"-Душанбе, Дониш, 1973, стр. 265,329,377,416.
153. Тарасова Л.С., "Полифенолы как потенциальные антисклеротические средства", Фенольные соединения и их биологические функции, М.,Наука. 1968, стр. 371-377
154. Ташев С.А., Исмаилов А.М.,"Изучение сапогенинов корней bypsophia bicolon, Химия природных соединений, 1987, №1 стр. 138-139
155. Трибунская А.Я., "Витамины в ягодах Среднего Урала, Тр., II Всесоюзного семинара по биологически активным веществам плодов и ягод, Свердловск, 1964, стр. 128-136
156. Трибунская А.Я., Вигоров Л.И., Степанова В.А., "Новые данные по биологически активным веществам плодов и масла облепихи", Облепиха в культуре, Барнаул, 1970
157. Тринус Ф.П., Мохфт Н.А.,Клебанов Б.М., "Нестероидные противовоспалительные средства" Киев, Здоровье, 1975, стр.239
158. Трофимов Т.Т., "Облепиха в культуре", М, МГУ, 1967
159. Турова А.Д./'Лекарственные растения СССР и их применение", М, Медицина, 1974, стр.245
160. Файман Б. А., "Лечение облепиховым маслом ран в оториноларингологии", Материал юбилейной военно-научной конференции врачей Сибирского военного округа, Новосибирск, 1970, стр.40
161. Файман Б.А., "Применение облепихового масла при лечении' ЛОР заболеваний, Автореф. дис. канд. мед. наук, Омск, 1971
162. Файман Б.А., "Применение облепихового масла при некоторых заболеваниях Лор органов (предварительное сообщение), Сб. научных работ врачей Сибирского военного округа, 1967, Вып. 4, стр. 261-264
163. Файман Б.А.,Кошель Ю.А., "Облепиховое масло и его применение в медицине, Барнаул, 1975
164. ПО.Файман Б.А.,Орлов В.И., Антибактериальные свойства облепихового масла", Матер, юбилейной военно-научной конф. врачей Сибирского военного округа, Новосибирск, 1970, стр.41-42
165. Филимонова Л.Д./'Применение облепихового масла при местном лечении ожогов у детей", Травматизм у детей, Саратов, 1971, стр.181-182
166. Флора СССР. М.-Л., Издательство АН СССР, 1939, 1949.
167. Флора Таджикиской ССР, Л., Наука, 1975
168. Фой A.M.,Попова С.Д./'Лечебное значение каротинового облепихового масла в гинекологии" Сб. научных работ, Красноярский Госмединститут, 1946, стр.194-197
169. Хайдаров Х.М., Исупов С.Д., Исмаилов М.А., "Математическое выражение равновесного метода определения экстрактивных веществ из корней Capparis spinosa L., Матер, респ. научн.-практич. конф. "Проблемы фармацевтов Таджикистана",-Душанбе, 1991, стр.312
170. Хайс И.М., Мацек К., "Хроматография на бумаге" М., Иностранная литература, 1962, стр.852
171. Холматов К.Х., "Содержание аскорбиновой кислоты у некоторых дикорастущих растений Ургутского района", Тр. Ташкентского фармацевтического института, Ташкент. 1957, Том1, стр.181
172. Ходжиматов М.Х.,Бобоходжаева С.М., "Содержание и качественый состав биологически активных веществ в Conium maculatum L., Изв. АН Тадж. ССР, Отд. биолог, наук., Душанбе, 1976, №2, стр.43-46
173. Холматов К.Х., Юсупова М.С., "Микроскопическое исследование отдельных органов каперсов калючих", Ташкент, Вопросы фармакологии и фармакогнозии, 1974, Вып.2, стр. 101
174. Хотин А.А., "Облепиха крушиновидная", Лекарственные растения СССР, М., 1967, стр. 353-355
175. Цветкова И.В., "Нейраминовая кислота и её значение в организм", Вопросы медицинской химии, 1961, Том.7, №1, стр. 1-16
176. Цветкова И.В., "Расщепление нейраминовой кислоты гомогенатом и экстрактами семенных желез крыс", Вопросы медицинской химии, 1961, Том.7, №5, стр. 528-531
177. Перевитинов Ф.В.,"Химия и товароведение свежих плодов и овощей", М., Госторгиздат, 1949, стр. 192-195
178. Ципин И.Ф., "Атлас лекарственных растений", М., 1962
179. Чукаева В.Н., Гуревич А.И., Ушакова М.Т., "К изучению биологической активности масла облепихи и его компонентов", Материалы совещания по витаминам из природного сырья, Куйбышев, ЦБТИ, 1964, стр. 172-177
180. Шамрай Е.Ф., "К проблеме взаимодействия витаминов С и Р. Галаскорбин, его химические, биологические и терапевтические свойства", Сб. научн. трудов, Киев, Госмедиздат УССР, 1963, стр.275
181. Шапиро А.И.,Филиппова O.K., "О бактерицидных свойствах некоторых растительных масел", Журн. микробиология, эпидемиология и иммунобиол., 1947, №10, стр. 26
182. Шапиро Д.К., Гаранович И.М.,Анихимовская Л.В., "Биохимическая и морфологическая характеристика облепихи, произрастающей в дельте Дуная" Растительные ресурсы, 1979, том.15, Вып.4, стр. 544-548
183. Шапиро Д.К., Гаранович И.М.,Анихимовская Л.В.,Нарижная Т.И.,- а» ^
184. Вересковский В.В., "Биохимическая и морфологическая характеристика перспективных форм облепихи Северного Азербайджана", Растительные ресурсы, 1978, Том. 14, Вып.1, стр.60-63
185. Шевшок Л.А., Авакумов В.М., "Экспериментальное изучение влияния некоторых образцов облепихового масла на процессы репаративной регенерации", Фармакологическая регуляция регенераторных процессов, Йошкар-Ола, 1979, стр.270-271
186. Шилов П.И., Яковлев Т.Н., "Справочник по витаминам", М., Медгиз, 1960
187. Шишкина Е.Е., "Биохимический состав плодов" Облепиха, М., 1978, стр.173-177
188. Шишкина Е.Е. "Содержание масла в плодах облепихи различного географического происхождения" Тр. III Всесоюзного семинара по биологически активным веществам плодов и ягод" , Свердловск, 1968, стр.314-318
189. Шишкина Е.Е. "Сравнительное физиолого-биохимическое изучение некоторых азиатских форм облепихи", Дисс. кан. биол.наук, Алтайская опытная станция садоводства, 1966, стр.101
190. Шишкина Е.Е. "Сырое варенье из облепихи", Бюлл. научно-техн. информ. Алтайской плодово-ягодной опытной станции, 1957, №1, стр.36
191. Шнайдман J1.0. "Производство витаминов", М., Пищевая промышленность, 1973, стр.370-379
192. Шнайдман J1.0. "Производство витаминов из животного и растительного сырья, М., Пищепромиздат, 1950, стр.323
193. Шнайдман JI.O., Фондаренко А.В., "Стерины и их идентификация", Матер, совет, по витаминам из природного сырья, Куйбышев, 1964
194. Шнайдман Л.О.,Шугам Н.А., "Исследование и идентификация токоферолов в плодах и масле облепихи", Известия высших учебных заведений, Пищевая промышленность, 1966, №2, стр.60-63
195. Шугам Н.А., "Изучение биологически активных веществ облепихи", Дис. канд. биологических наук. М., 1969
196. Юдкина Л.Н.,"Лечение маслом облепихи некоторых заболеваний кожи", Об изучении развития производительных сил горного Алтая-Горно-Алтайск, 1961, стр.210-212
197. Юдкина Л.Н.,"Опыт применения масла облепихи при некоторых кожных заболеваниях", Вестник дерматологии и венерологии, 1954, №2, стр.20
198. A new alkaloid from root bark of Capparis decidua / Uddin A. V., Asis-ur-Rahman A.S., Ajmal N.M., Usman G. // Naturforshen. -1986.- vol. 41.- p. 10331035
199. Alpin-Slater R.B., Morris R.S. Vitamin E and lipid metabolism // Adv. Lipid Res. -1963,- №1. p. 183-210
200. Aminoff D. The determination of free sialic acid in the presence of the bound compound // Virology 1959.- v.7- №3.- p. 355-357
201. Ayala W., Moore E., Hess J. The purple color reactions given by diphenylamine reagent I with normal and rheumatic fever serum // J. Clin. Invest. 1951,-v. 30 - №3.- p. 781-785h
202. Berezhnaya G.A., Ozerinina O.B., Eliseev I.P., Tsydendambaev V.D., Vereshchagin A.G. Developmental changes in the Absolute Content and Fatty Acid Composition of Acyl Lipids of Sea Buckthorn Fruits // Plant Physiol. Bioehem. -1993- v.31. p. 323-332
203. Boyes D.E., Crean G.P., Watkinson G. Studies in the rates of epithelial cell exfoliation from gastric mucosa in nonnal and in ulcer subjects // Gut. -1971 -№12.-p. 867
204. Cliio R.S., Tappel A.L. Inactivation of RNA-se and other enzymes by peroxidating lipid and by malonaldehyde // Biochemistry -1969.- v. 8.- №7.- p. 2827-2830
205. Croft D.n. Gastric cell turn over studies. // Topics in gastroenterology. -1973,-p. 58-64
206. Darmer G. Der Sanddonn als Wild unci Kulturpflanze Leipzig 1952
207. Domschke W., Demling L. Hlenovite latky v zaludky u zaludecniho avanoctikovehouredu-patofisiologicke ofazky a vliv leceni // Vnitri Lek. 1974-v.20- №7- p. 625-630
208. Honnan B. Die Sanddornbeere die beste naturliche Vitamin -C2 -Spenderin Munchen, 1941 -S 81
209. Hollender F. The two components mucous barrier // Arch. Intern. Med. -1954 -v. 93-p. 107-120
210. Johnston В., Lindup W.E., Shiflingford J.S., Smith M., Parke D.N. The pharmacological biochemistry of carbonoxolone. It's effects on gastric mucus // Fourth Symposium on Carbenoxolone. 1975- p. 3-27- 'z *> t
211. Lucy J. Functional and structural aspects of biological membranes: A suggested structural role of vitamin E in the control of membrane permeability and stability // Ann. N.J. Acad. Sci. 1972 - v. 209.- p. 6-11
212. Morrin R.J. Longevity hepatic lipid peroxidation and hepatic fatty acid composition of mice fed saturated or unsaturated fats-supplemented diets // Experiential 1967.- v. 23- №12- p. 1003-1004
213. Mabry T.S., Markham K.R., Thomas M.B. The systematic identification of flavonoid // Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg-New York, 1970,- 354 p.
214. Ozcrinina O.B., Berezhnaya G.A., Eliseev J.P., Vereshchagin A.G. Composition and Structure of Triacylglycerols from the Sea Buckthorn // Biochem. And microbiol. -1988,- v.24.- p. 350-357
215. Samnelsson В., Cranstrom E., Hamberg M. Abstracts of the 7-th International Congress of Biochemistry Tokyo, 1967. -E-73. - p. 739
216. Svennerholm L. Estimation of sialic a^msTCalorinietric researcinolhydrochlorid acid method // Biochem. Biophis. Acta.- 1957, v. 24. -p.604
217. Warren L. The thiobarbituric acid assay of sialic acid // J. Biol. Chem.1959,-v. 234 -p. 1971
218. Wregandt H. Structure and function der Ganglioside // Angewandt chem. -1969,- Bd.80- s. 89-97
219. Winzler R.J. Glycoprotein in plasma // Ciba Foundation Symposium on the chemistry and biology of mucopolysacharides . London, 1958,- p. 245-250