Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Белки плазмы крови и субполяционный анализ лимфоцитов при хронических заболеваниях верхнего отдела желудочно-кишечного тракта

А .МЛ:

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ КАЗАХСКОЙ ССР

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, МИКРОБИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

На правах рукописи

КАЙШИБЕКОВ Екпин Базаргалиевич

БЕЛКИ ПЛАЗМЫ КРОВИ И СУБПОПУЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ ЛИМФОЦИТОВ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ВЕРХНЕГО ОТДЕЛА ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА

(14.00.36 — Аллергология л иммунология)

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Алма-Ата — 1991

Работа выполнена в Научном Центре региональных проблем питания АМН СССР.

Научные руководители: — доктор мсдпштскнх наук,

профессор И. Г. ЦОП

— доктор медицинских наук, Л. Т. ШАРМА НО В

Официальные оппопепты: — доктор медицинских наук,

профессор С. М. ПЛЕШКОВА

- доктор медицинских паук, Р. М. РУЗЫБАКИЕВ

Ведущее учреждение: Институт Иммунологии Д13 СССР.

Защита состоится « № » е^а^е^^оЛ 1991 гола и час,

на заседании специализированного совета К079.05.01 при НИИ эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Л13 КазССР. (480002, г. Алма-Ата, ул Макатаева, 34).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ПИП эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Д13 КазССР.

Автореферат разослан « » Л 1991 года

Ученый секретарь специализированного сонета, кандидат медицинских наук

II. М. НУРКИНА

ТД9Л

(ссертаций

ОБШ.ЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Известно,что заболевания органов пищеварения, обусловленные нарушением деятельности желудочно-кишечного тракта,воспалительно-дистрофическими процессами в тканях и иммунными сдвигами,сопровождаются количественными и функциональными изменениями клеток иммунной системы .нарушением баланса иммуноглобулинов и различных функциональных групп белков (Bienenstock J. ot al.,1986; Лэгинол A.C., 1986; Сапроненков П. М. , 198?). Однако, до настоящего времени недостаточно изучена взаимосвязь иммунологических и биохимических параметров крови с характером патологических процессов у больных с хроническими заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта.

Между тем.иммунохимический анализ сыворотки крови,проведенный с учетом всего комплекса метаболических сдвигов,характерных для данной патологии имеет большую диагностическую и прогностическую ценность. Особенно актуальны такие исследования для населения Казахстана и в целом страны,где в общей структуре заболеваемости, хронические болезни верхнего отдела желудочно-кишечного тракта занимают одно из ведущих мест по частоте и распространенности (Григорьев IL Я и со-авт. , 1989; Колычева Е Я. ,1979).

Цели и задачи. Исходя из вышеизложенного,целью настоящей работы явилось: комплексное исследование количественного содержания иммуноглобулинов, факторов комплемента и других функциональных групп белков плазмы крови,количественно-функциональная оценка лимфоцитов периферической крови у больных с воспалительными и злокачественными заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишэчного тракта с установлением роли указанных белков и их патогенетической значимости при диагностике, прогнозировании течения и исхода заболеваний. Реализация поставленной цели потребовала решение следующих задач:

1. Изучить количественное содержание иммуноглобулинов ' (IgA.lßM,IgQ).факторов комплемента СЗ и С4 в периферической крови больных хроническим ээофзгитом,язвенной болезнью ур-лудка и двенадцатиперстной кишки, раком пищевода и желудка с использованием ишунохимичеокого метода кинетической нефело-

ме,трии.

2. Определить содержание в крови транспортных белков крови (альбумина,трансферрина, церулоплазмииа), белков острой фазы воспаления (альфа-1-антитрипсина и альфа-2-макроглобулина), а также аполипопротеинов А и В,холестерина и триглице-ридов при хронической и опухолевой патологии верхнего отдела пищеварительного тракта.

3. Оценить функциональную активность лимфоцитов периферической крови исследованных групп больных методом бласт-ной трансформации лимфоцитов цельной крови в отвит на стимуляцию ФГА, а также определить количественное содержание в крови отдельных субпопуляции лимфоцитов - CD4.CD8,соотношения CD4/CD8.CD20 с помощью лазерной проточной цитофлюоримет-рии.

4. Выяснить с использованием корреляционного и регрессионного анализа характер взаимосвязей между содержанием отдельных функциональных групп белков, количественными и функциональными параметрами лимфоцитов, триглицеридов и холестерина в сыворотке крови, определить их патогенетическую значимость при указанных заболеваниях.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование количественных и функциональных иммунологических и биохимических параметров и отдельных функциональных групп белков крови с использованием современных методов иммунохи-мического анализа ( кинетическая нефелометрия,проточная ци-тофлюориметрия и др.). Установлена тесная интегрированная связь иммунных сдвигов с характером изменении белков .участвующих в метаболических процессах. Показано,что в сыворотке крови больных хроническим гастритом с сохраненной секрецией содержание иммуноглобулинов М и G,трансферрина и альбумина выше,а церулоплазмииа ниже по сравнению с аналогичными параметрами у больных раком желудка. Корреляционный анализ выявил наличие обратных связей между количеством иммуноглобулинов е сыворотке больных раком пищевода и желудка и экспрессией CD20 ан-игена-маркера В лимфоцитов. Установлена высокая степень достоверности регрессионной связи между содержанием церулоплазмииа и иммуноглобулина А в сыворотке крови больных

раком жлудка, иммуноглобулина А и альбумина в крови больных эрозивным эзофагитом,хроническим гастритом и язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки. Кроме того,наблюдалась высокая степень достоверности регрессионной связи меаду уровнем иммуноглобулина 0 и транспортных белков в сиворотке крови обследованных больных. Подавление пролиферативной активности лимфоцитов цельной крови в ответ на <1>ГА у больных раком пищевода сопровождалось повышением соотношения СШ/СОВ ликЩюци тов по удельной флюоресценции. У больных с предопухолевой и опухолевой патологией обнаружена общая тенденция к иовшению экспресии СО4 антигена лимфоцитов на фоне снижения процентного содержания данной популяции клеток.

Практическая значимость работы. Результаты проведенного исследования являются научной основой для разработки новых подходов к дифференциальной диагностике воспалительных, пре-допухолевых и опухолевых заболеваний верхнего отдела желудочно-кишечного тракта, методов их терапии, основанной на комплексном учете иммунных нарушений с характером метаболических сдвигов при указанных заболеваниях. Полученные результаты используются в учебном процессе на кафедре гастроэнтерологии Алма-Атинского института усовершенствования Ера-чей, курсе иммунологии Алма-Атинского медицинского института, работе ряда научно-исследовательских лабораторий г. Алма-Аты.

Положения, выносимые на защиту:

- Соотношения основных изотипов иммуноглобулинов и факторов комплемента в периферической крови и характер их количественных сдвигов у больных е предопухолевой и опухолевой патологией пищеварительного тракта связани с патофизиологическими и клиническими особенностями указанных заболеваний, сопровоздаюшдася нарушением иммуного гомеостаза

- Взаимосвязь иммуноглобулинов, транспортных белков, белков острой Фазы воспаления, аполинопротеинов в сиворотке крови отражает патогенез развития воспалительных и опухолевых процессов и верхнем отделе желудочно-кишечного тракта и указывает на интегрировании«™ иммуноп-зтогенетичрских механизмов с метаболическим!! изменениями при укаяншшх вабодегл-

ниях.

- Уровень сывороточных иммунноглобулинов крови у боль-' ных с патологией пищеварительного тракта в значительной степени зависит от количественного содержания В лимфоцитов, а также от состояния общей белоксинтезирующей функции различных клеток организма. Изменения гуморального иммунитета у больных хроническими и опухолевыми заболеваниями пищеварительного тракта сопряжены с функциональным состоянием имму-нокомпетентных клеток и зависят от баланса основных регуля-торных популяций лимфоцитов в крови.

Публикация и апробация работы.По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: всесоюзном семинаре "Физиология пищеварения и всасывания'Ч г. Краснодар, 1990 г.), межреспубликанской конференции "Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии (г. Ашхабад, 1991) .межреспубликанской конференции "Актуальные вопросы питания и проблемы алиментарно зависимых заболеваний в республиках Средней Азии и Казахстане'Ч г. Карим, 1990г. ), на конференции молодых ученых "Conference of young scientists on impotent issues of modern nutrition science" (г. Алма-Ата, НЦ РПП,1990),на межвузовской конференции молодых ученых и студентов КазГУ(г. Алма-Ата, 1990).

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 131 страницах машинописи,состоит из введения,обзора литературы, описания материалов и методов исследования,результатов собственных исследований,заключения в форме общего обсуждения полученных результатов,выводов и списка литературы,включающего 64 отечественных и 125 иностранных истопников. Работа иллюстрирована 14 таблицами и 3 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Общая характеристика клинического материала. Исследование проведено на 282 больных,находившихся на стационарном лечении в гастроэнтерологическом отделении 1-дорожной больницы г. Алма-Аты,а также в отделении лекарственной терапии Казахского НИИ онкологии и радиологии МЗ Каз.ССР

- Б -

(1986-1990ГГ).

Больные были распределены по следующим клиническим группам :- хронический гастрит с сохраненной секрецией (48); - хронический гастрит с секреторной недостаточностью (47); -эрозивный ззофагит (16);- язвенная болезнь желудка (20); -язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки (99); - рак пищевода (36);- рак желудка (16). Среди больных хроническим гастритом и язвенной болезнью преобладали лица молодого и среднего возрастов от 25 до 50 лет (76%). Заболевания чаще встречались у мужчин(78% случаев). Среди больных онкологической патологией основную часть составили лица старше 50 лет (средний возраст 60,45-1,21 лет), из них 73,8и - мужчины.

Периферическую кровь получали из локтевой вены в одно и тоже время утром натощак. Сыворотку крови отделяли центрифугированием при 1500д 10 мин. на центрифуге К-3 (,)пе1Бк1,ГДР). Мононуклеарные клетки получали общепринятым методом из гепаринизированной венозной крови путем седиментации на градиенте плотности ПсоП-Рацие 1.077 г/см (РИагшспа, Швеция).

В работе использовались следующие методы: с помощью кинетической нефелометрии проводилось иммунохимическое исследование в сыворотке крови больных с заболеваниями верхнего отдела пищеварительного тракта следующих функциональных групп белков: - иммуноглобулины (1иА, 1уМ, ^й) (Л. А. Малкина и др. ,1990); - факторы комплемента (СЗ И С4) (Ртк. Р. еЬ а1. ,1989); - белки острой фазы воспаления-ингибиторы протеаз (альфа-I- антитрипсин и альфа-2-макроглобулин); - транспортные белки (альбумин, трансферрин.церулоплазмин) (СИг^егизоп & еЬ а1. ,1989); - аполипопротеины А и В (АсЫрИзоп. еЬ а1. ,1989), а также определение холестерина и триглицеридов (совместные исследования с Лукьяновой К. И ); радиометрически!! метод оценки пролиферативного ответа лимфоцитов цельной крови на ФГА (В1оетепа Я еЬ а1. ,1989). Фгнотииирование лимфоцитов проводили на проточном цитофлюориметре ЕРЮЗ-З (ГоиИег.США) (совместные исследования с Асшбековой А. Т.).

- 6 -СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

В таблице 1 приведены результаты исследования гуыо-рального иммунитета у больных с заболеваниями верхнего отдела лклудочно-кишечного тракта. Как видно но таблицы наибольшее содержание иммуноглобулинов A,M,G среди обследованных лиц наблюдалось в крови больных хронический гастритом с сохраненной секрецией. При этом увеличение !gA но сравнению с больными эрозивным эзофагнтом (Р<0.01) и язеышой болезнью двенадцатиперстной киши (Р< 0.02) статистически достоверно. Следует отметить,что подобная картина характерна и дли уровня IgM в крови больных хроническим гастритом с сохраненной секрецией,величина которого выпе по сравнению с больными эрозивным эзофагнтом (Гч 0.001), яэвошюй1 болезнью двенадцатиперстной кпшкии (P.O.001) и ¡келудка (Рп 0.01). Такте повышено содержание igM у болышх хроническим гастритом с секреторной недостаточностью но сравнению с больными эрозивным эзофагнтом (Р<0.05). В отношении IgG установлено,что уровень данного иммуноглобулина в крови больных хроническим гастритом с сохраненной секрецией патологически высок и значительно превышает таковой у больных эрозивным эзофагнтом.раком пищевода (Р<0.001) ,а такие язвенной болезнью и раком желудка (Р<0. 05). Обращает па себя внимание тот Факт,что и у Оолшых хроническим гастритом с секреторной недостаточностью концентрация IgG в крови достоверно выше, чем у больных раком пищевода и желудка,эрозивным - эзофагнтом и язвенной болезнью (Р<0.001). Сравнительный анализ спектра иммуноглобулинов у больных с предопухолевой и -опухолевой патологией ввшьил достоверное снижение указанных белков при эрозивном эзофаги-те, раке пищевода я желудка по сравнению с хроническим гастритом и язвенной болезнь». Это явление мотет быть результатом подавления иммуноглобулкпсинтетической функции Б лимфоцитов, а такте количественным снижением клеток, секретнрук-сдах данные белки. Уровень этих клеток сопряги с чксп^ссисе маркерных белков на их поверхности, среди которых достаточно специфичны!.! для в ли»10цит0б является е!!ч1-!1 "h'thivu

Т»блиц>> Т.

Иммуноглобулины в крови 7 больных с заболеваюшяш шщэварихельного тракта

Имммуноглобулины (мг/дл)

Группы больных

1еА 1ем

(70 - 312 ) (65 - 352 ) ( 639 - 1349 )

1. фонический гастрит с 301.9 + 32.6 213.2 + 24.6 1546.1 + 84. 8

сохраненной секрецией П-35 П=35 П-35

Е. Хронический гастрит с 230.5 + 16.7 167.8 + 20. 4 1326.05 + 73.9

секреторной недостаточностью п-37 П-37 п-37

3. Эрозивный ээофагит 175.0 + 22.9 103. 7 + 19.9 868.05 + 123.9

п-15 П-15 П-14

4. Язвенная болезнь желудка 259,7 + 44.5 133. 9 + 13.0 1291. 3 + 70. 4

п-14 П-14 П-14

5. Язвенная болезнь двенадцати- 217.6 + 12.8 119.5 + 7.3 1177.1 + 47. 7

перстной кишки П-73 п-74 п-74

5. Рак пищевода 243.9 + 47.2 69.7 +11.1 1025.6 + 105.9

п-18 П-18 п-18

7. Рак желудка 253. В + 62.3 35.4 + 21.4 996.3 + 195.8

П-10 п-10 п-9

р 1,3< 0,01 р 1,3;1,5< 0.001 р 1,3;1,6< 0.001

р 1,5< 0.02 р 1,4< 0.01 р 2,3; 3,4< 0.01

р 2,3< 0.05 Р 1,4;2,6;1,7< 0.05

I

-л

I

С020. Нами методом лазерной проточной цитофлуориметрни с использованием моноклональных антител В1Н01 проводилась количественная оцети степени экспрессии дифференцировочного кластера С0"Ю на мембране В лимфоцитов у больных с хронической и опухолевой патологией пищеварительного тракта.

Таблица 2.

Параметры флюоресценции В-лимфоцитов крови у больных с заболеваниями пищеварительного тракта.свягавиихся с мопеклоначышмп антителами ВП-:01 к антигенному кнастеру стео

Группы больных СОЯХ)

II п>эги"1 2

1. Хронически!! гастрит 13 63.54+0.09

2. Эрозивный озоФагит

3. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки

4. Рак пищевода

5. Рак яолудка

6. Допори

11 70.19 + 9.54

29 17 10

30

62. 90+4. Сб 71. 41+7. 39 60. 82+5. 97 50. 85+3. 09

10. 59+2. 24 7. 48+1. 12

10. 84+1. 43 7. 49+0. 91 5. 53+0. 53 12. 41+1. 07

р2, 6< 0. 01 рЗ,5<-0.05 р3,б<0. 05 р4,6<0. 05 р5,6--0.001

р1. 5<0. 05 р2,6<-0. 01 рЗ,5--0.4)1-р5,б< 0.001 Р4.6- 0.001

Как видно из таблицы 2, процентное содер.тлипе клеток, эксп-рессируюшлх данный антиген.у бол;,и-,к роке« пищевода и «елуд-ка, а также эрозивным эзо<|«гатом бихо суЕК-ствешп ш»с по сравнению с группой здоровых доноров, и больных хроннч'ч:!;'.!« гастритом и язвенной болезнью. Следовательно. мп,«шо ложить определенную, 1-:;аиь,о',рязь -м.*>ду пнкярикмм' уровнем' иммуноглобулинов И НИЗКИМ ЧИОГЛЙ КЛОГС;К, их с^кр^гигу^х-Вместе с тем, на:.', представляете:-!. 'что стлп»пь '-ксп? »сски

Таблица 3

Параметра фяюаресценшга хеотертк.сзгпрессорнъсс/цитотоксических Т-.хш4фоци¥Оя у больных с заболеваниями пищеварительного тракта.

сое СИ4 С04/СЕ8

зутатн больных: П

юеап У. теап % пеап У»

. Хронический гастрит 13 74.1+7.0 24.8=2.6 52.7+4.2 33.9+3.6 0.68+0.04 1.57+0.23

Эпозижый эзофаги? 10 86.4+6.3 30.1+3.7 64.5+5.7 33.5+3.3 0.74+0.04 1.15+0.14

. Язвенная болезнь 1венядцатаперетной кишки 27 егл+з.7 24.4+1.4 60.8+4.5 32.4+1.9 0.72+0.04 1.49+0.Г4

. Рпк пищевода 18 75.6+4.1 27.2+2.0 57.4+4.3 32.9+2.2 0.75+0.04 1.40+0.19

. Ра* желудка 10 84.6+6.2 27.1+2.6 62.5+5.5 38.5+4.6 0.73+0.03 1.74+0.03

Донора 50 71.4+2.5 23.0+0.9 50.2+2.5 37.0+1.2 0.6&+0.02 1.78+0.11

р 2,6<0.05 р 3,6<0.05 Р 3,6 <0.05

- ю-

мембранных антигенов В лимфоцитов может отражать и функциональную активность указанных клеток. Корреляционный анализ подтвердил существование достаточно высоких (с учетом большого числа наблюдении!!) обратных связей меоду уровнями иммуноглобулинов и параметрами mean CD20 В лимфоцитов.

Полученные результаты подтверждают вероятность существования прямой связи между секрецией иммуноглобулинов и про-лиферативной активностью В лимфоцитов. В связи с этим, представлял интерес анализ иммунорегуляторного индекса и оценки пролифзративного ответа лимфоцитов на митоген.

Как видно из таблицы 3. в крови больных эрозивным ззо-фагитом наблюдается достоверное снижение процентного содержания CD4/CD8 лимфоцитов по сравнению с донорами. Этот показатель ,а также отношение средних каналов флюоресценции у онкологических оставались в пределах нормы. Однако, оценка удельной флюоресценции (mean/%)позволила еыявить значительное повышение соотношения указанного параметра CD4/CD8 лимфоцитов во всех клинических группах и особенно у больных раком пищевода и желудка по сравнению с донорами. Высокое соотношение удельных флюоресценции CD4/CD8 лимфоцитов.вероятно связано с повышенной примированностыо. лимфоцитов во всех клинических группах, особенно у онкологических больных.

Нами проведена радиометрическая оценка лимфопролифера-тивного ответа на ФГА у больных с патологией органов пищеварения Как видно, достоверно высокое значение индекса стимуляции во всех исследованных группах больных наблюдалось при стимуляции ФГА в концентрации 10.0 мкг/мл ( Рис.1 ). При этой дозе митогена у доноров индекс стимуляции лимфоцитов ( 58. 64-3. 58 %. ) достоверно превосходил это значение у больных атрофическим гастритом (30.89=10.40 X ),язвенной болезнью ( 36.72-7.65% ) и раком пищевода (14.7Е-4. 40 I) со значением достоверности Р< 0.001. Причем, индекс стимуляции был досто-. верно выше у больных язвенной болезнью по сравнению с раком пищевода. При субоптимальной дозе СГЛ (5 мкг/мл) достоверное уменьшение мптогенного ответа лимфоцитов отмечо.чось у больных язвенной болезнью двеими-.пшррстиой кишки (13.'"0 =1. у6 t) и раком пищевода (8.07-1.70 %) по сравнению с донецкой

27557о ю.о

Доза ФГА Ь'КГ/мл)

Проли^ерптитаыП отпат лимфоцитов нп ФГА. у болышх с з^болегянмями пте»ярительного трпктл

---До|'орн ; -о- язветпя болезнь 12 п/к ;

—Д— р.*к пиче^оц.«; —»»— лтро&шегкиП гястрят

группой Р< 0.05 и Р< О. 001 соответственно. При минимальной дозе ФГА-2,5 мкг/мл не наблюдалось достоверного различия в митогенном ответе лимфоцитов у больных с указанными заболеваниями. Таким образом,существенные различия функциональной активности лимфоцитов уже имели место при субоптимальной дозе митогена. У больных атрофическим гастритом при спонтанном включении метки не наблюдалось достоверных различий по сравнению с донорами и остальными группами больных. Аналогичная картина наблюдалась .и при стимуляциии дозой митогена 2,5 мкг/мл. Однако при субоптимальной дозе фитогемагглютини-иа(5,0 мкг/мл) у этих больных было обнаружено достоверное снижение ыитогенной активности лимфоцитов у больных атрофическим гастритом по сравнению с контрольной группой . Повышенное значение индекса стимуляции у больных сатрофическим гастритом по сравнению с остальными исследуемыми группами больных, вероятно,свидетельствует о повышенном пролифератив-ном потенциале иммунных клеток,обусловленном воспалительным процессом, характерным для этой нозологии. Однако при максимальной дозе митогена наблюдалось некоторое торможение про-лиферативной активности клеток, что может быть обусловлено, в частности, влиянием иммуносупрессирующих факторов, действие которых, как видно реализуется при высоких дозах митогена.

В таблице 4 представлены результаты иммунохимического определения белкового спектра крови больных. Установлено,что содержание альбумина у больных раком пищевода и желудка,а также у больных эрозивным эзофагитом низкое, тогда как, у больных хроническим гастритом с сохраненной секрецией оно достоверно выше по сравнению с таковым у больных хроническим гастритом с секреторной недостаточностью,раком желудка и пищевода (Р< 0,001). Необходимо отметить,что снижение содержания альбумина в крови больных с неонлазией сопровождается относительным уменьшением количества различных изотипов иммуноглобулинов . Следует отметить,что у больных эрозивным ээофагиюм низка концелтрация в сыворотке не только альбуминов, но и иерулоплазмина -другого транспортного белка,уменьшение уровня которого так же,как и альбумина,сьидетнлкчтвует

TI ^______4

Хаблмцл ^

Ci.""'.! KÇOC'.I бОЛЬлЫХ С S¿CúZS32itiÍSí£í IKiyHï'C'iîTS.liKOrO TpSKTä.

ajsßyMinj трансфер? uopy "лг ■•m

i'Ç' ( ИГ/ДЛ ) ( ÎC/Ï.1 ) г , ff/ДД )

г 27 -51 ) ( 204. - S ) ( 21 - E3 )

1 r, -j il'vrci'uîî 49. 9 т ,4 371. S + 24. S 20. 0 + 2. g

■ п=23 n=23 n-5

•7 .Xr 0 ;Í, ï С Kl ^л г2схс:гг с со 7 j. 2. ,0 315.3 + i.'4. о 22. 6 -f о 0

с " '.. ¿tcqhc'iî недостаточность» п=3-1 rv=i9 r- 47

3. s, гофапп: 27. 2 + 3, . о - 20. z1 -f 4

¡1=15 П" =15

л j i -j н:;гл Ce. 47.0 + 3, .5 305.6 + 15. g 26. 6 + 2

п-15 n=ll n= =3

0» ft;-; -нпл 6c 5 'ii д25 u2д12дтл 43.05 + ' 1.5 q 15. 9 23. •'3 + 1 .3

г-с2 p— :31

»» - 31. S + 2 .5 - 8 i- w. 5

П~17 n= ла

... голудал 31.13 + 4.5 - 30. 2 T 5. 0

fc=lQ rv»10

со

I

5 1,2;1,7;4,5;5,5< 0.01 о 1,5< 0.05 p l,3;l,S;2,4;3,5î< 0. COI ? 2,2;4,7;£,7< 0.05

- 14 -

об эндогенной недостаточности питания.

Как нам представляется, комплекс этих обстоятельств (низкий уровень белков на фоне элементов иммунодефицита) может явиться одной из причин, предрасполагающих больных эрозивным эзофагитом к опухолевой трансформации.

Содержания в сыворотке крови другого транспортного белка - транеферрина,напротив у больных хроническим гастритом с сохраненной секрецией повышено.

Таким образом, у больных с патологией верхнего отдела желудочно-кишечного тракта имеет место изменение баланса транспортных белков -альбумина,транеферрина, церулоплазми-на,связанная по всей видимости с нарушением белоксинтезирую-щей функции организма.

Проведенный частотный анализ распределения больных с низким содержанием в сыворотке крови иммуноглобулина М (ниже 83 ng-Zctl ), альбумина ( ниже 28 mg/dl ) еще раз подчеркнул диагностическую й прогностическую значимость одновременного анализа иммунных и транспортных белков крови. Так,среди 35 больных раком пищевода и лелудка одновременное снижение им-мунохимических показателей отмечалось у 15 ( 43% ); при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки - у 3 из 30 больных ( 10Z ),а среди больных хроническим гастритом - вообще не встречалось. Оценка критерия хи-квадрат позволила установить, что значимость различий между больными с неоплазией верхнего отдела пищеварительного тракта и другими группами больных по данному критерию составила 86.4,что свидетельствовало о достоверности различий с вероятностью Р< 0.01. Корреляционный и регрессионный анализ между иммунными и транспортными белками кроьи у больных с патологией верхнего отдела пищеварительного тракга выявил,что число достоверных корреляционных связей мевду иммунными в транспортными белками крови с уровнем значимости Р< 0.01 среди онкологических больных составляло 24, в то время как у больных язвенной болезнью лишь 14. Расчет корреляционного графа-суммы всех парных коэффициентов корреляций с уровнем выше 0.50 показал,что у больных раком пнщеБидэ и желудка данный статистический показатель составлял 14.1,я при язвенной болезни - 6.4. Высокий корре-

ляционный граф у онтологических больных свидетельствовал о польщенной степени связанности между иммунными и транспорт -ними белками в указанной группе. Параметры линейкой регрессии t,кладу содержанием иммуноглобулинов и других функциональных групп белков в крови больных с заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта свидетельствуют о тем,что в группе больных раком желудка наблюдалась высокая степень достоверности регрессионной связи между церулоплазмином и IgA .Кроме того .надо отметить большую стабильность коэффициента (В) линейной регрессии при различных нозологиях.что свидетельствовало о стабильности связи между церулоплазмином и IgA. Статистически значимые связи медду уровнем IgA и альбумином в крови обнаруживались при эрозивном ззофагчте,хроническом гастрит!? с секреторной недостаточностью и язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Высокая степень достоверности регрессионной связи наблюдалась «саду IyrG и транспортными белками. Причем, высокая стабильность коэффициента (В) при Есех ногологпях отмечалась у альбумина. Статистически значимые связи ме.тду I^G и трзнсферршюм обнаруживались' у больных язвшюй болезнью л хроническим гастритом. Таким образом, проведенный анализ позволил выявить специфические особенности белкового спектра крови у больных с онкологической и хронической патологией верхнего отдела пищеварительного тракта. Так,' установлено одновременное снижение уровней иммуноглобулинов и транспортных белков в крови, больных раком пищевода и »»лулка. .Достаточно высокая корреляционная и регрессионная связь мекду указанными функциональными группами белков ¡qior.ii позволяет использовать определение этих показателей при диагностике заболеваний и прогнозирования его течения.

В ц»лон, иолу'юннш результаты свидетельствуют о тесной интегриротнностл иммунных сдвигов с характером изменении |>л:сов .участвующих в метаболических процессах. Это указывает на ге.гпг>'Н''Тич£с:1;уь> значимость обнару.тепнык количествен-№>-<1ункш«?иальш« изменений л иммуннол системе при. различных вид"-,;: гапмпгии органов пиянвареш!я. На диаграмме (2.3) нред-стагл-'ны гпннда об изменениях различных функциональных групп

Риг.2 ИШШЮГРАША БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГАСТРИТОМ С СОХРАНЕННОЙ СЕКРЕЦИЕЙ ( А ) И РАКШ ЖЕЛУДКА ( Б )

1яС

Риг.'З НММУНОГРАММЛ БОЛЬНЫХ ЭРОЗИВНЫМ ЭЗСШГИТШ ( А ) И РАКОМ ПИЩЕВОДА ( Б )

белков .клеток крови у больных с заболеваниями жглудочно-кишечного тракта. Показатели содержания исследуемых параметров плазмы крови у здоровых людей обозначены линией круга. Если для больных хроническим гастритом (Рис.2), патогенез которого связан с воспалительным процессом,характерно повышенное содержите 1^6 при относительно нормальных величинах 1дА и 1цМ,тО'У больных раком лелудка наблюдается резкое снижение 1дО до контрольного уровня и некоторое снижение иммуноглобулина М по сравнению с'больными хроническим гастритом. Весьма противоположные . тендеции наблюдаются для транспортных белков. Так,у больных хроническим гастритом содержание в плазме крови альбумина и аполипопротеина В находятся в пределах нормы при попиленном содержании церулоплазмина и аполипопротеина А. В то время как у больных раком келудка уровень в плазме крови церулоплазмина и аполипопротеина А повышается до нормы, а уровень альбумина резко снижается. 'Гго касается субпопуляции лимфоцитов экспрессирующих С020,С03 и С04 антигены, то существенные изменения имели место у хелперной популяции лимфоцитов Лак, если у больных хроническим гастритом а плазме крови наблюдается низкое содержание данной субпопуляции, то у больных раком желудка она повышена относительно нормы при незначительных изменениях клеток .экспрессирующих 0Д8 и одао антигены.

У Сольных эрозивным азофагитом и у больных раком пищевода, изменений транспортных белков и иммуноглобулинов носили однонаправленный характер за исключением и церулоплазмина. Как видно и хелперная популяция лимфоцитов у больных эрозивным эзофагитоы была пил;, а у больных раком пищевода выше нормы,при незначительных изменениях клеток экспрессирующих СД8 и СД20 антигены. Таким образом,указанное сходство изменении этих параметров у больных эрозивным эзофагитом и раком пищевода шлет иметь определенный патогенетический смысл, от-ралая предоп,ухо левый потенциал урозивного ззпфагига.

БЫВ О ,П и

1. У Солшнх эуозиьиим эьодогитсм,раком ¡пт^'пч и а*-

ЛУДКЦ В ОТЛИЧИ" ПГ бОДЫШХ ХрпШ(ЧеСК11М ГЧГТрЩГМ ИМ«-';1!' м-? ¡.то

паралельное снижение в сыворотке крови иммуноглобулинов М ,6 и альбумина.

2. Низкий уровень церулонлазмина в сыворотке крови у болышх хроническим гастритом с сохраненной секрецией сопровождался повышенным содержанием 1{гА, 1гМ, альбумина ,тран-сферрина при сопаставлении с параметрами больных раком пищевода и желудка.

3. Корреляционный и регрессионный анализ позволили установить высокий уровень связей между иммуноглобулинами и транспортными белками (альбумином, трансферрином, церулоплаэ-мином),а также аполиипопротеинами плазмы крови при хронической и опухолевой патологии верхнего отдела пищеварительного тракта.

4. Установлены обратные корреляционные связи между количеством иммуноглобулинов в сыворотке больных раком пищевода и келудка и экспрессией СБ20 антигена - маркера В-лимфоцитов.

5. У больных с предопухолевой и опухолевой патологией обнаружно повышение зкспресии СЮ4 антигена лимфоцитов на фоне снижения процентного содержания данной популяции клеток.

6. Подавление пролиферативной активности лимфоцитов цельной крови в ответ на ФГА у болышх с раком пищевода сопровождалось зачительным повышением соотношения С04/С08 лимфоцитов по удельной флюоресценции.

СПИСОК РАБОТ ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шарманов А. Т. .Лукьянова К Е .Кайшибеков Е. Б. Белки плазмы крови: иммунохимический анализ методом кинетической нефелометрии и клиническое значение при хроническом гастрите и язвенной болезни //Актуальные вопросы биохимии человека и животных. - Алма- Лта, 1990. -С. 45-54..

2. Кайшибеков Е. Б., Шарманов Л. Т. Иммунный статус и атонические изменения у больных язвенной болезнью - Тез. дога. . Межвузовской конференции молодых ученых и студентов КазГУ им. С. М. Кирова. - Алма-Ата, 1990 •■ С. 19-20.

3. Шарманов Л. Т.,Ким Б. И. , Курмангалинова И. А. .Кайшибеков Е. Б. Взаимосвязь между отдельными функциональными груп-

пами белков крови и витаминной обеспеченностью людей в условиях высокогорья. - Тез. докл. Конф. Актуальные вопросы питания и проблемы алиментарнозависимых заболеваний в республиках Средней Азии и Казахстане. - Карши, 1990. - С. 86-88.

4. Шарманов А. Т. , АсылбекоЕа Д. Т., Кайшибеков Д. Т. ,Кур-мангалинова И. А. Клеточные иммунные механизмы и белки крови при заболеваниях верхнего отдела пищеварительного тракта -Тез. докл. J5 Всесоюзной конф. - Краснодар, 1990. - С. 654-655.

5. Sharmanov А. Т. .Saparov A. S. .Kaishibekov Е. В. Immunologic function and metabolic disorders in patients with pathology of alimentary tract - 10 th Mseting of European Federation of Immunological Societies: Abstracts. Edinburg, 1990.

6. Sharmanov A. T.,Ktonakhov В. V.,Saparov A. S. , Kaishibe-kov E. B.Nutrition and immunity: clinical arid experimental aspects.-American Symposium,Abstracts. Most important issues of modern nutrition science.-Alma-Ata,1990.-P.65-6?.

■7. Kaishibekov E. B. .Gendrikson L.N. .Lukjanova K. P. , Sharmanov A. T. Imrmnoproteins and biochemical markers of nutritional status in patients with and without gastrointestinal neoplasia-Conference of young scientists on important issues of modern nutrition sciense,Abstracts - Alma-Ata,1990.

- P. 18-19.

8. Кайшибеков E. В. .Мухамбетьярова Л. P. , Асылбекова Д. Т., Шарманов АЛ. Оценка иммунного статуса у больных с заболеваниями верхнего отдела пищеварительного тракта. -Тез. докл. конф. -Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии в аридной зоне.

- Ашхабад.-1991.-С. 91-92.

9. (&йшибеков Е. В. Даше нов ЕЛ1. .Курмангшалинова И. А. , Шарманов А. Т. Значение иммунных белков крови у больных с предоиухолевой и опухолевой патологией пищеварительного трата.

- Тез. доо. Всесоюзного симпозиума "Прогресс в лечении злокачественных новообразовании".- Чимкент.-1991.-С. 196.