Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:Создание и исследование стабильных препаратов антиастматического действия для детей

I 5 1 * 3 •

Всесоюзное объединение "Союзфармацип" при Министерстве здравоохранения СССР

ВСЕСОЮЗНЫЙ

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ФАРМАЦИИ

На правах рукописи

ПАНОВ ВЯЧЕСЛАВ АНАТОЛЬЕВИЧ

ОЗДАНИЕ И ИССЛЕДОВАНИЕ СТАБИЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ АНТИАСТМАТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ДЛЯ ДЕТЕЙ

Специальность 15.00.01 - технология лекарств и организация фармацевтического дела

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Москва - 1991

Работа выполнена во Всесоюзном научно-исследовательском институте фармации В/О "Союзфармация" при Министерстве здравоохранения СССР, Научный руководитель - доктор фармацевтических наук, ст, науч. сотр. ВНШБ М.М. Аслаханова.

- доктор фармацевтических наук, ст. науч. сотр. А.И. Артемьев;

- кандидат фармацевтических наук, ст. науч. сотр. К.В. Алексеев. Ведущее учреждение - Московская медицинская академия

на заседании специализированного совета № Д.074.28.01 при Всесоюзной научно-исследовательском институте фармации (Москва, 117418, ул. Красикова, 34).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всесоюзного научно-исследовательского института фармации. Автореферат разослан " "^у " /Ъбй^гЯ 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат фармацевтических наук,

старший научный сотрудник Л.М. Боброва

Официальные оппоненты:

им. И.М. Сеченова.

Защита состоится

ОНШ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ ¿рйЩадЬНОСГЬ ПРОБЛЕМЫ. Расаяренве нскзнклатуры готокп яэ-

»стввккых средств ПрОШ£м«КНОГО кзготовявппя я СОЭрГЯЭКСТЗЗВа*-» суг^сзадсзра локаиствэнкых фо|»| ка основе часто повторяющейся гтенпор&льной рецептуры является важной задачей фараацэвттас-й технологии, поеводящей значительно повисать стабильность, {активность лекарств и продлить юс срок годности.

В связи с возросаин ассортиментом лоиарствзтшх средств, а юсе вввду того, что враедда назначается кокбшшроваквое леча* а, вклпчеюзве в себя назначена» препаратов равлз^шзс фарагэ-рапэвтичесгях групп, значительно возросла сложность аястсзао» льной рецептуры. Её изучение показывает, что во шгогпх рзгпо* х страна пркмекяэтся ярописи слошшх яорозаов, содержг^ах да* дрол, эуфиллин в сочетании с эфедрином { порезка по простел зягинцева).

Широкое распространение данной прописи порояков об-ьясшггтея и, что в последнее время кая за рубежом, так и в келай'стрзкэ ачительно возросла заболеваемость бронхиальной астмой в снягп возросшей аллергизацней населеюш. Аллергические вайаеэвакая и , шергичесхие реакции затаит одйо на ввдуцях мост в ялюшзах 1тсюа болезней. По данным института педиатрам АНН ОХР, т долэ ■ого заболевания приходится до 20 случаев на 1000 обследованиях •тей.

Приведенные факты свидетельствует о вирохом и обоснованием ¡пользовании препаратов антиастматмчесхого действия. Однако по* иакк ка основе эуфиллина и димедрола, изготовляемые в аптеках, следствие физико-химической несовместимости компонентов быстро гсыреваот, комкуются, в результата чего нарушается сыпучесть в »меняется цвет порошков. Это противоречит требованиям РБ XI ¡дания, статья "Порошки".

Поэтому создание и исследование стабильных препаратов антиастматического действия для детей являются актуальными' проблемам имеющими важное научно-практическое значение.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ И ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью данного исследования являлась разработка рациональных составов и технолс гни получения стабилизированных многокомпонентных порошков антиастматического действия и гранулированной формы этих порошков в однодозовой упаковке.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

-изучить физико-химические и технологические свойства многс компонентных порошков антиастматического действия;

-разработать рациональную технологию получения многокомпонентных порошков антиастматического действия;

-изучить возможность приготовления на их основе стабильной лекарственной формы гранулированных порошков в однодозовой упаковке;

-апробировать существующие и при необходимости разработать новые методики анализа действующих веществ в лекарственных форме -провести физико-химические, биофармацевтические исследования, а также исследования специфической активности и биологической безвредности лекарственных форм антиастматического дейс: вия;

-провести исследования по подбору оптимального упаковочногс материала при разработке однодозовых порошков;

-изучить стабильность лекарственных форм антиастматическогс действия в процессе длительного хранения;

-разработать нормативно-техническую документацию по приготс ленив, анализу и хранению порошков бинарного состава» содержаида ауфиллин, димедрол| афадрин а условиях адтвк.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. С учетом физико-химических и технодогичес-к свойств лекарственных веществ, входящих в многокомпонентные рошки антиастыатического действия, разработаны стабильные ле-рственныв формы для детей. Подобран стабилизирующий агент-ааро-л, позволяющий значительно увеличить сроки годности лекарствен-х форм. В результате проведенных биологических и биофариацев-ческих исследований установлено, что введение аэросила как ста-лизатора в состав порошков увеличивает их биодоступность с олонгирущим эффектом, при »том повывая терапевтическую эффяк-вность.

С использованием электронной микроскопии и спектрального «лиза установлен механизм стабилизирующего действия. Показано «обладание физической стабилизации, которая наиболее предпочтительна физиологически и целесообразна с позиций биоф&рыации и звродности лекарственных препаратов.

Приоритет исследований подтвержден авторским свидетельством изобретение № 1507392 " Антиастматическое средство

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. На основании проведенных ис-едований разработан.! и внедреш:

-технология, анализ и хранение стабилизированных пороакоз основе ауфиллина и димедрола в условиях аптек ("Методические азания по приготовлению, анализу и хранение порошков, содер-19а зуфиллин с димедролом, в условиях аптек", утвержденные '0 "Союзфармация" 18.09.89 г.; "Методические указания по зигоговлению, анализу ж хванению порошков Звягинцева в ус-эвиях аптек", утвержденные Б/0 "Союзфармация" 19.09.89 г.);

-устройство для использования в газовой хроматографм, по-

оляющее определять лекарственные вещества в биологических жид-

стях без экстрагирования органическими растворителями

(.рационализаторское преддоганме на "Устройство для проведения аналива биологических и екстрактивных объектов в газовой хрома тографни" » 35(626) от 27.И.1985 г.). ПОЛОЖЕНИЯ, ВВДВИГАЕМЫЕ НА ЗАИрГГУ:

-состав и технология стабильных порошков антиастыагнческо действия на основе еуфиллина и димедрола;

-состав н технология гранулированных пороаков в однодозое усановк®, соаданных на основе пороаков по прописи Звягкнцова • ревультаты исследований физико-химических, технологичес ках, биологических и биофараацовтических свойств стабилизировс шх соровков антиастматического действия;

-ревультаты исследований физико-химических, технологических, биологических и биофарцацевтических свойств гранулированных воровков в однодововой упаковке.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения работы долокэил на: У Всероссийском съезде фармацевтов, Ярославль, 1967 г.; научной конференции ВНИИФ, Москва, 1967 г.

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликовано с со«и торами 6 статей.

СВЯЗЬ ЗАДАЧ ИССЛЕДОВАНИЯ С ПРОБЛЕМНЫМ ПЛАНОМ ДОШЦШИ-ЧЕСКИХ НАУК. Диссертационная работа выполнена в лаборатории т< нологии лекарственных средств аптечного ивготовления ВНИИ фармация Минздрава СССР в соответствии с планом научно-исследовательских работ, * гос. регистрации 01.84.0000631, 01.66.00105' соответствует Всесоввкой проблеме "Фармацевтическая технологи: и биофармация" научного совета 9 48.02 по фармации АМН СССР, соответствует профиля специализированного ученого совета * Д 074.28.01 по специальности 15.00.01. - технология лекарст м оргаижвацхя фармацевтического дела.

ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ЛИССЕРТАЩИ. Диссертация изложена на 132 границах и состоит из введения, обзора литературы,' экспериментальных исследований (3 главы)„ общих выводов, списка литерату-а и приложения. Работа иллюстрирована 16 таблицами и 20 рисун-ами. Библиография включает III источников литературы, из кото-ых 36 - иностранных.

Во введении обоснована актуальность, работы, сформулированы ель и задачи исследования, показаны научная новизна; теорета-еская и практическая значимость исследований, внедрение их ре-ультатов в практику.

В главе I представлен анализ отечественной и зарубежной итературы, позволяющий, раскрыть современное состояние проблемы ; конкретизировать задачи, требующие теоретической и эксперяыен-•альной проработки.

В главе II описаны материалы и методы исследования. Приведены разработанные и модифицированные методики количественного шределения, а также физико-химические, биологические и биофар-яацевтические методы изучения исследуемых лекарственных средств.

В главе III приведены исследования по стабилизации много-сомпонентных порошков антиастматического действия. Изложены теоретические положения механизма стабилизации аэросилом порошков. Содержится описание экспериментальных исследований влияния аэросила на физико-химические, технологические и микробиологи-теские характеристики порошков, а также на биодоступность и специфическую активность. Проведены исследования по определению острой токсичности, местнораздражающего действия и кумулятивных свойств многокомпонентных порошков антиастматического действия.

Глава I/ посещена. разработке и исследованию гранулированной лекарственной формы порошков антиастматического действия в однодозовой упаковке. Уделено внимание подбору вспомогательных веществ, способствующих стабилизации технологических и фиэико-оси мических свойств порошков. В главе изложены также результаты 6т ^ахыацевтического и биологического изучения гранулированных поро ков. Для создания однодозовых упаковок были использованы широко применяемые для этих целей полимерные материалы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

I. Объекты и метода исследования

Объектами исследования служили лекарственны® вецества, впрок используемы® при лечении бронхиальной астмы у детей: зуфиллин, димедрол, офодрин, а также вспомогательные вещества: аэроснд, cs хар, стеариновая кислота, кальция стеарат, магния карбонат основ ной, натрия гвдрокарбонат, магния окись, декстран, глюкоза. Все перечисленные воцества отвечали требованиям соответствую^ Й нор* иативно-технической документации. В качестве исследуемых упаковс mot матераалов для однодозовых упаховок гранулированных пороако! использованы полимерные материалы, разреигнные к применению в фармация.

В процессе исследования в соответствии с поставленными задачами ксаольвован комплекс различных физико-химических, биофар-нацевтшсеских и биологических методов исследования, характорм-»уждаг свойства, стабильность н специфическую активность изучаема препаратов.

Для решения поставленных задач считали необходимым разработать идх модифицировать методики количественного определения лекарственных веществ в лекарственных формах. Для количественного определены содержания действующа: веществ разработана хромат о-

поктрофатсметрнчаская методика. При атом относительная есабка предаяения но прввшала ¿ 7,055. Разработана иатодияа овладела* 21я »уфиллина и димедрола в крови яра совместном присутствии иэ*-одои газовой хроматография (хроматограф "Хрся-4"). Относитодь-!зл саибка определения эуфиллина составляет - 2,9^, для дей»д* >ола - 7,556 в условиях "ин витро".

Для полукояичестпенной оценки дойствугар« веществ приманят си емнссконшй « рентгеновский флворэсцзитныЯ иэтод. Для вдзггш-» [¡акации и определения стабильности лвкарствзнках препаратов в ]роцэссз хранения были разработаны иэтодика с использованием т* рода хроматографии в тонкои слое сорбента.

Технологические характеристики ворозков били изучены во cía* цущнм показателям: насыпная масса, сыпучесть, угол естественного откоса. При отом были использованы общепринятые в фармоцев?и~ ческой практике методики. Микроструктуру пороаков изучали с ко* мощь» электронного сканирующего микроскопа "Супер ?вМИ-РЗМ" (фяр-ма "Акааи",Япония) с разрезавшей способностью X 10000 крат.

Фармакокинетику лекарственных веществ в крови опрэделядн на кивотных (кролики породы тиизилла ) с покодьо разработанных методик с использованием газовой хроматографии. Изучекзе гипотензивного действия препаратов проводили путем измерения артериального давления у крас бескровным методом в хвостовой артерии с помочью полуавтоматического измерителя марки К-209 ( Япония ).

Биологическое исследование многокомпонентных пороаков антиастматического действия включало изучение специфической активности и биологической безвредности. Изучение специфической актов« ности проводили на морских свинках с помоцью экспериментально разработанной модели бронхоспазма. Изучение биологической безвредности включало исследование возможного токсического, маетно-раздражающего действия на организм животных ( крысы, кролики ).

Кумулятивный эффект препаратов изучали на крысах путем определения индекса кумуляции.

2, Разработка я исследование стабильных порошков антиастматического действия Многокомпонентные порошки антиастматического и антигиста-минного действия (на основе эуфидлина я димедрола) широко применяются в терапевтической практике при лечении бронхиальной астмы у детей я в больших количествах изготавливаются в аптеках.

Однако сочетание димедрола с эуфиллином в одном порошке является нестабильным вследствие кислотно-щелочного взаимодействия мевду гядрохлоридом димедрола, обладающим кислотными свойствами, и э тиленди амином, входящим в состав эуфиллина и обладающим основными свойствами. В результате физико-химической несовместимости порошки теряют сыпучесть, отсыревают с последующа! пожелтением. Современное состояние фармацевтической технологии позволяет устранить нестойкость лекарств с помощью ж лплек-са вспомогательных веществ и технологических приёмов. Используемые в качестве стабилизирующих агентов вспомогательные вещества должны обладать большой удельной поверхностью, способностью предотвращать отсыревание и должны быть разрешены к применению в медицине. Среди подобных веществ наибольшее применение нашли: декстран, белая глина, магния окись, высушенная лактоза, аэро -сил. Эти вспомогательные вещества и были использованы нами для стабилизации порошков антиастматического действия- в количествах от 0,5 до 5,0 массовых процентов. Первоначальная оценка стабилизирующего эффекта и предварительный выбор оптимальной концентрации применяемых добавок проводили путем визуального наблюдения за внешним видом порошков (цветом, запахом), а также определением сыпучести. В результате установлено, что только до-

явление аэросила в концентрации от 0,5 до 5,0 массовых процен-ов замедляло или предотвращало отсыревание порошков, они со-раняли способность сыпаться, а следовательно,дозироваться. Другие используемые вспомогательные вещества не оказывали ста-илизирующего действия.

Так как при визуальном наблюдения в процессе хранения за :орошками антиастматического действия с аэросилом в различных юнцентрациях наилучшие показатели наблюдались у порошков с ;обавкой стабилизатора в количестве 5 массовых процентов, ре-шо было дальнейшие исследования проводить именно с этой кон-;еятрацией аэросила.

Влияние аэросила на технологические показатели оценивали утем изучения сыпучести, насыпной массы и угла естественного тиоса порошков до и после введения аэросила. Определение сыпу-есги и насыпной массы проводили с использованием вибровороя-и, обеспечивающей равномерное высыпание порошка. Введение аэро-ила позволило увеличить сыпучесть и насыпную массу порошков, а акае уменьшить величину естественного откооа в 2 раза (табли-;а I). Бсё это свидетельствует о высокой сыпучести стабилиздро-анных порошков.

В дальнейшем было проведено исследование сыпучести и на-ыпной массы порошков в процессе хранения. При анализе нестаби-изироваяных порошков установлены значительные колебания сыпу-естя. Причем колебания сыпучести непропорциональны во време-и: она то возрастает, то снижается. В значениях сыпучести ло-ошков наблюдается значительный разброс, так как при хранении зменение сыпучести связано не просто с увеличением или уменьше-ием времени равномерного высыпания порошка из воронка а само оп-еделенне становится затруднительный и результаты определений

Таблица I

Влияние аэросила на технологические характеристики порошков антиастматического действия

Пропись Сыпучесть, г/о Угол естественного откоса, град. Насыпная масса, 103кг/м3

Эуфиллин-0,1 Дшедрол-0.02 Сахар-0,1 2,1 55 0,377

Эуфиллин-0,1 дамедрол-0,02 Сахар-0,1 Аэрооил-0,01 5,5 29 0,447

Эуфиллин-0,03 Димедрол-0,01 Эфедрин-0,01 Сахар-0,2 2,3 50 0,375

Эуфиллин-0,03 Димедрол-0,01 Эфедрин-0,01 Сахар-0,2 Аэросил-0,011 5,8 28 0,432

невоспроизводимы вследствие образования значительных по величине комков, препятствующих высыпанию порошков из воронки. Дня порошков, стабилизированных 5 массовыми процентами аэросила, характерно постоянство значений сыпучести в течен® 30 дней (срок наблюдения). Аналогичные результаты были получены при определении насыпной массы порошков. Таким образом, аэросил предотвращает отсыревание порошков, улучшает их технологические характеристики.

Учитывая, что стабильность порошков характеризуется также физико-химической стабильностью, проявляющейся в отсутствии

аструктивниг процессов в инегекемпенватных переюхах, нала била 1зрабетана метедхка определения деструктжвнмг хгиененхЗ ле-1рстввнних веществ в процессе хранения о яоаежьвоаягаем грека-»графии в тенкец елее сорбента на пластинках "Сыуфм УФ 254". ютеыа растворителей : бутмацвтат-цвтакм-25;» раствор ашошеа 30:50:5). После вмоушявашш пластинок на воздухе зоны адоербшш зследуемых веществ проявлялись в ультрафиолетовом свете прж дая-

а ваяны 254 ям. Определены велячияи Пф всех кеыпейвнтвв, равна : для дамвдрала -0,60; эуфиллжна -0,47; эфадряяа гддреглеря-а -0,18. В результате исследований установлено, что в яеотабя-изярованных порошках: на хроматеграфячвекой пявстжнке появляется опаднятальное пятно через 6-10 дней после приготовления порезов. дополнительного пятна -0,89 (рис.1). Эта свидетельствует Тонкослойная хроматеграмма лекаретеэнных веществ в зтабыжзярованннх и нестабждязярованшк порошка!

©

8 О

0>

0

0 & &

1

2 3 4-5

- димедрол; 2 - эуфиллин; 3 - эфедржна глдроыордд;

- стабилизированные порошки; 5 - нестабдлязированыае порошка.

Рис.1

о появлении в порошках продуктов разложения. В стабилизированных порошках при соблюдении тех же условий и срока хранения появление дополнительных пятен не наблюдается, что свидетельствует о стабильности аэросялсодержащих порошков при хранении.

Раздельное количественное определение димедрола, эуфиллина и эфедрина гидрохлорида при совместном присутствии в процессе хранения проводили разработанным нами хромато-спектрофотометри-ческим методом. Изменение количественного содержания компонентов в порошках, содержащих и не содержащих стабилизатор, представлено в таблице 2. Из таблицы видно, что количественное содержани эуфиллина, димедрола и эфедрина гидрохлорида в стабилизировании порошках не изменяется в процессе хранения, между тем как в нест билизированных порошках наблюдается изменение в количественном содержания димедрола.

Механизм стабилизирующего действия аэросила в порошках изучали с помощью современных инструментальных методов исследования.

Электронно-микроскопическое исследование, проведенное с помощью электронного сканирующего микроскспа"Супер МИНИ-РЭМ"(Япония), показало, что микроструктура стабилизированных и нестабили-зированных порошков различна. В отсыревающих порошках наблюдается образование углубленна в виде кратеров, кристаллы разрушаются, становятся меньше в 4 раза, идет деструкция. В стабилизированных порошках аэросил образует на поверхности лекарственных веществ защитный слой, частицы аэросила больше накапливаете на "активных" местах (на углах, трещинах и т.д.), где электростатические силы проявляются сильнее, чем в плоскости, где они образуют более равномерный защитный слой.

Методой ''^-спектроскопии установлено, что при совместном

Таблица 2

Количественное содержание эуфиллина, димедрола и эфедрина гидрохлорида в многокомпонентной порошковой смеси по прописи Звягинцева в процессе хранения (определение проводи» лось хромато-спектрофотометрическим методом)

Состав : Количественное содержание компонентов, г, (среднее

порошка ' значение 5 определений) при сроке хранения

:свежеприго- : 5 дней : 10 дней : I месяц : 3 месяца : 6 месяцев ,

.товленный : : : t-

... Ci

Эуфиллин-О,2:0,2004*0,0007 :0,2013*0,0064:0,1986*0,0058:0,1980*0,0093:0,1980*0,0084:0,1978*0,0063 i Димедрол-0,05:0,0536*0,0018 :0,0482i0,0021:0,0491±0,0017:0,048li0,0019:0,0473±0,0020:0,038li0,0017 Э федрин-0,025:0,0264*0,0015 : 0,0256*0,0012:0,0258*0,0014; 0,0249*0,0014:0,0258*0,0013:0,02*9*0,0015

?уфиллин-0,2 :0,1992^0,0054 :0,2001*0,0081:0,1983*0,0069:0,1987*0,0073:0,1988*0,0068:0,1979+-0,0072 Димедрол -0,05:0,0524*0,0017 : 0,0483*0,0016:0,0492*0,0021:0,0502*0,0018:0,0489*0,00X9:0,0495*0,0015 Э.федрин-0,025:0,0253*0,0013 -.0,0243*0,0015:0,0254*0,0014:0,0249*0,0012:0,0252*0,0015:0.0249*0,0013 Аэросил-0,014: - : : - : - :

присутствии эуфиллина и димедрола происходит отщепление этилен-диамина от эуфиллина. На это указывает появление в ИК-спектре полосы при 3394 см"^, соответствующей валентному колебанию свободной аминогруппы в первичных аминах. Отсутствие в ИК-спектре полос поглощения, отвечающих гидрохлоридам (2700-2200 см-^)« которые хорошо проявляются в спектре одного димедрола, свидетельствует об отщеплении от молекулы димедрола HCl.

Таким образом, при совместном присутствии эуфиллияа и димедрола происходит их взаимодействие с выделением в зону реакций этилендиамина и хлористого водорода. Образующаяся при этом влага, по-видимому, катализирует эти процессы. В стабилизирован ных 'порошках ИК-спектр исходных компонентов не изменился, следовательно, взаимодействие между компонентами не происходит.

При оценке качества лекарственных средств важная роль отво дится результатам микробиологического контроля, в том чгсле и испытанию на микробиологическую загрязненность. Микробиологичес кие исследования показали, что изучаемые порошки не являются благоприятной средой для развития микроорганизмов. Таким образом, аэросил ингибирует химическое.взаимодействие между ингреди ентами; физико-химические и микробиологические показатели стаби лизированянх порошков остаются неизменными в процессе хранения.

Биофармацевтическое изучение порошков антиастматического действия Многочисленными биофармацевтическимв исследованиями доказз но активное влияние вспомогательных вещес^ не только на физике химические свойства, но и биодосгупность лекарственных средств.

В связи с этим нами были проведе-и; исследования по изуче нию влияния аэросила на высвобождение лекарственных веществ при совместном присутствии.

Леи изучении биодостудности порошков методом "ин виво" разработана гааохроматографическая методика одновременного определения эуфиллина и димедрола при совместном присутствии. Использован хроматограф "Хром - 4" с пламенно-ионизационным детектором, колонка стеклянная ( 50 X 0,3 см); сорбент -3$ Декскл-410 на супелкопорте (фракция 100-120 меа.). Хроматогрвьгма смеси эуфиллина с димедролом представлена на рнс. 2.

Хроматограыма шеей ауфиллина с дкчздролом

з а л о мин

I - эуфиллин; 2 - димедрол

Рис. 2

В эксперименте было задействовано 20 кроликов породы чишилла массой 3,300-2,800 кг. Порошей вводили натощак непосредственно через зонд в яедудок в виде взвеси в дозировке 5 мг/кг

димедрола и 20 мг/кг эуфиллина. Через определенные промежутки времени из ушной вены кроликов бралась кровь, в которой проводилось количественное определение димедрола и эуфиллина методом газовой хроматографии. Основные фармакояияетические параметры димедрола и эуфиллина в порошках представлены в таблице 3.

Таблица 3

Фармакокинетические параметры димедрола и эуфшшина

Фармако-кинетические параметры Порошки без стабилизатора Порошки со стабилизатором

димедрол эуфиллин димедрол эуфиллин

Я 45,5 105,5 ■ 56 127,5

С1 макс. 95,20 (83,77-106,63) 384,8 (370,25-399,35) 114,4 (104,51-124,29) 440,4 (425,53-455,21)

^2 макс. - 509,8 (495,53-524,07) - 545,8 (528,84-562,76)

£ I макс 30 45 45 45

£ 2 макс - 150 - 150

Т1 150 270 1В0 300

Обозначение:

5 -площадь под кривой, мкг/мд.'мин; С£шкс -первая максимальная концентрация, мкг/мл; С2 шкс -вторая максимальная концентрация, мкг/мл; £ ^ макс -время достижения первой максимальной концентрации, мин ; £ 2 шкс -время достижения второй максимальной концентрации, дан ; Т^-время последнего обнаружения препарата в крови, мин.

Как видно из таблицы 3, введение аэросила в порошки повышает уровень концентрации препаратов в крови и пролонгирует время

их последнего обнаружения на 30 минут, что весьма важно, учитывая быструю утилизацию эуфиллина и димедрола в организме.

Определение биологической безвредности порошков антиастматического действия Биологическое исследование стабилизированных аэросилом порошков в сравнении с нестабшгизированными включало изучение острой токсичности, общетоксического и местнораздражающего действия, кумулятивных свойств порошков, а также их специфической активности. Исследования проводились на базе ВНЙХФИ им. Ордаоникидзе (лаборатория токсикологии). Определение острой токсичности порошков проводили на нелинейных белых мышах-самках массой 18-20 г и оаспородных белых крысах-самцах массой 220-240 г . Порошки вводили перорально через зонд в желудок в виде взвеси в 1% крахмальной слизи. Расчёт г^Дзд проводили по методу Литчфилда и Уилкоксона. Изучение осгрой токсичности стабилизированных аэросилом порошков в сравнении с нестабилизироваяными при перораць-ном введении показало, что добавление аэросила в состав порошков не изменяет их токсичность.

Изучение общетоксического и местнораздражающего действия стабилизированных порошков в сравнении с нестабилизироваяными проводили в опытах на крысах-самцах массой 300-350 гт. Порошки вводили перорально через зонд в желудок в виде взвеси в 1% крахмальной слизи в максимально переносимых дозах при повторном введении в течение 3 дней. Контрольные животные получали 1% крахмальную слизь. Общетоксическое действие порошков оценивали по выживаемости, общему состоянию, динамике массы тела и массе внутренних органов. По окончании эксперимента животных забивали, вскрывали, исследовали макроскопически; определяли массу сердца, печени, почек, селезёнки, надпочечников, тимуса и семенников;

слеаисту» жвлуцка исследовали под микроскопом ЫЕС - 10. Даияе обрабатывали методом вариационно! отатхетикх и» Стьвдвнту.

Д.оле 3 введшей стабххиахрованных х нест&билнэироваяшх порошков saxe sa 2-3 краен в каждой груше. Выжившие подешшше вяаезхыв ne сеотеяято в неведению не втлнчадвсь ет вентральных. К лещу эксперимента наблюдалось падение шасси тога в ебехх педе-пнтанх грушах - примерно на 10^ ет исходной. Вскратиа, визуальное хосхедеванхе s взвешхвание внутренних органов шшетных не нвлмш кахвх-лхбе существенных раалхчхй иеаду педепытшшх к контрольным! крысамж.

Иссхедевавже сдхвхстей обмета желудка подопытных крыс с вшядыо микроскопа МБС-ЭД какхх-лхбо патологических изменений но гаши. Сххахотая обычного цвета, блестящая, цела на всем протяжен», схладчатооть выражена хорошо. Полнокровия, гхдеромщЕ, пете-xxfi ж другхх нарушений мнкр»циркуляции не обнаружен».

Таким обрааем, порошки антиастматичвскоге действия, стабилизированные хне стабилизированные.аэросилом, введенные в.макси-шш переносимей деве (примерно в 35 раз превышающей максимальную сутогную деву порошков в клинике) повторно в течение 3 дней ирисам, приводит к снижению выживаемости животных, потере кассы тела, не не вызывает каких-либо изменений, выявляемых прл визуальном макроскопическом исследовании, не изменяют массу внутренних органов х не обладают местнераздражавщкм действием.

Изучение кумулятивных; свойств многокомпонентных порошков ант! астматического действия проводили путем определения индекса куму-хяции.

Индекс кумуляции рассчитывали по формуле

доза при однократном введении; МПИ^- максякально передос-ная доза при Т1 введении;Т1- число введений препарата, из издавших гибель животных.

Исследования показали, что введение в состав порсакоэ аорз-сила не влияет на кумуляции пороаков.

На экспериментально разработанной модели бронхоспагма в опэ» те на 30 морских свннказс установлена антнастыатическая акткс-ность стабилизированных портков димедрола с зуфзллиием. Послана целесообразнасть введения пороаков с прсфигистачесвеЯ цэяаэ, предотвращающего наступление бронхоспаэна.

В эксперименте на 30 кроликах изучено влпяааэ стабшгагкро* ванных пороаков на артериальное давление зкзотг^сс. Установгеяо, что ¿орсзки при введении кроликам в дозе 20 ыт/вг для еуфзляп» и 5 мг/кг для динедрола снижают артериальное даялешю !:а через 45 минут после введения. Выявленный гипотенамвииЯ ®фф»ат является обратимым. Установлена тенденция к угедачзнвэ глаотва» зивного эффекта у стабасмзированних пороаков ^рис. 3).

Артериальное давление кроликов, получаваих стйбихяЕарэ-ванные порошки спазмолитического действия

AD 420; мм РТ.С.Т.

100 -во -60 • 40-20-■

0|--------------,-1

О 4555 55 70 90 110 430 150

I - без аэросила; 2-е аэросилом; 3 - контроль

Рис. 3

Л

г ■ з

Приоритет исследований по применении многокомпонентных порошков аытмастматического действия, стабилизированных аеросилом, подтвержден авторским свидетельством * 1507392, разрешением Фармакологического комитета Минздрава СССР на применение ааросила в порошках, применяемых в детской практике ( № 2II-3I57-2548 от 11.07.87т.) и утверждёнными В/О "Союзфармаюая" методическими указе икямн для практических работников ( утв.18.09.Ш г. и 19.09.89 г.).

3. Разработка гранулированной формы пороаков антиастмати-чеекого действия в однодоэовой упаковке

С цель» выбора оптимального состава гранулированных пороаков мсдольаовали вспомогательные вещества, вироко применяемые в технологии лекарственных форм.

Было приготовлено несколько десятков различных сочетаний составов гранулированных пороаков. Полученные гранулы расфасовывала в однодозовые упаковки из полиетиленцеллофановой пленки марки ПЦ-2 я в укупоренные пластмассовыми крышками стеклянные флаконы ("пенициллиновые склянки"). Первоначальный выбор этих двух упаковочных материалов обусловлен удобством визуального наблюдения за препаратами. Образцы хранили при комнатной температуре и при повышенной ( в термостате при 30°С и 50°С).

В процессе хранения анализировали внешний вид и сыпучесть гранулированных пороаков.

В результате исследований установлено, что при одмееременном гранулировании всех входящих компонентов. грануляты быстро кед-тепт. Поэтому было решено проводить раздельное гранулирование* ; сначала эуфиллина с вспомогательными веществами, потом отдельно »федрина и димедрола с вспомогательными веществами, а затем оба гранулята смешивали. При раздельном гранулировании порошки сохранялись более длительное время.

- 21 -

Нами было также установлено, что при использовании в качестве грану лирущей яидкост»- растворов втилового спирта rpa¿gr-» ли сохраняется значительно лучзе.

На основании проведенных исследований выбраны несколько про« пнсей гранулированных пороаков в однодоэовой упаковке, сохраняв* цих внешний вид и сыпучесть в течение 228 дней хранения при температуре 50°С (относительная влажность воздуха , что соответствует 5 годам хранения при температура 20° Q.

С цель» определения эффективности создан: за гранулированных пороаков были проведены фяанко-хишгеэсанэ, тезнологпчзсгяо, биофармацевтические и биологические иссгадовагшя гранул, праготоэ» ленных по следующей прописи: еуфаллин - 0,03; магния карбонат - 0,14;

грану лир. 4$ растзороы аэроснла а 95¡í етиловем спирте вфадрин - 0,01; димедрол • 0,01; сазароза - 0,3;

гранул. ^ раствороа аароснла в 95$ втиловса спирта стеариновая кислота - 0,005.

Биофармацевтическоо изучение гранулированных порозко» проводили в опытах "ин вигро" на отечественном приборе типа "вращаюиаяся корзинка" для определения скорости растворения действующих веществ из таблеток и капсул.

При етом установлено, что кинетика высвобождения лекарственных вецеств из гранулированных пороаков существенно не отличает» ся от кинетики высвобождения еуфиллкка, димедрола, ефедрина и* стабилизированных многокомпонентных порожков по прописи Звягинцева.

- 22 -

Биологическое исследование гранулированных порошков включало определение острой токсичности. Изучение острой токсичности грацухированных пороаков в сравнении со стабилизированными много Еошзокантньсл! порошши по прописи Звягинцзва при пероральном введении показало, что наличке в гранулированных порозках вспомогательных вещаств (карбонат магния, стеариновая кислота) не ивмэняет юс токсичность.

Выбор упаковочного материала и условий хранения гранулированных пороаков

Анализ свойств различных материалов, которые могут быть использованы в качестве упаковочных для гранулированных пороаков выявил положительные стороны полимерных материалов, заплхгсах^ю-ся в их высокой химической стойкости, достаточной прочности к эластичности, простоте переработки.

В качестве исследуемых упаковочных материалов мы использовали полиэтнлсицадлофановую пленку марки ПЦ-2; бумагу, ламинированную полиэтиленом; комбинированный материал целлофан - поли-етилен - фольга - поливтилен. Пакеты изготавливали на малине "Молния" для термосваривания пленочных материалов. В качестве контрольной упаковки служили герметично укупоренные пластмассовыми колпачками стеклянные флаконы. Образцы хранили при комнатной температуре и при повышенной (в термостате при 50°С) в условиях относительной влажности воздуха 60%.

В процессе хранения анализировали следующие показатели порошков: внешний вид, сыпучесть, количественное содержание лекарственных веществ, а также наличие деструктивных элементов.

Периодичность контроля гранулированных порошков, хранящихся в термостате при 50°С, составляла 23 сут, что соответствует 6 мес хранения при температуре 20°С. В результате исследова-

- 23 -

ний установлено, что при хранении гранулированных пороаков в однодозовой упаковке из бумаги, ламинированной полиэтиленом, через 228 суток экспериментального "ускоренного хранения" при 60°С ( что соответствует 5 годам хранения при комнатной температура ), наблюдается некоторое пожелтение гранулированных пороаков.

Хранение гранулированных пороаков в других видах упаковки (ПЦ-2; целлофан - полиэтилен - фольга - полиэтилен; стекляшзе флаконы) при 50°С не приводит к каким-либо »¡жжениям во шкзнеа виде, сыпучести, количественном содераанни лекарственных веществ, а также не происходит деструктивных изменений дагэ чэрез 228 дней.

Параллельно проводились исследования гранулированных порез* ков, хранившихся в естественных условиях.

По результата эксперимента установлено, что чзрез 3 года хранения в естественных условиях (срок наблядения) гранулированных пороаков в однодозовых упаковках из полиэтиленцзллофановой пленки марки ПЦ-2; из бумаги, ламинированной полиэтиленом; из комбинированного материала целлофан - полиэтилен - фольга - поли* этилен, а такие хранившихся в герметично унупоранкых стеклянных флаконах, не происходит каких-либо изменений. Внезний вид остается постоянным во всех видая упаковки - это белые гранулы, сладко-горьковатого вкуса; сыпучесть гранулированных пороаков равна 7,0 г/с; количественное содержание лекарственных веществ остается без изменений на протякешш 3 лет; при-проведении тонкослойной хроматографии не наблюдается появления каких-либо деструктивных изменений. Таким образом, в результате наших исследований разработана стабильная лекарственная форма порошков антиастматического действия в виде гранул в однодозовой упаковке.

Разработан лабораторный регламент приготовлении гранулированных порошков антиастматического действия в однодозовой упаковке.

- 24 -ВЫВОДЫ

1. Научены физико-химические и технологические свойства пороаков антиастматического действия; показана их нестабильность, что трахается визуально в их быстром отсыревании и пожелтении. Методом хроматографии в тонкой слое сорбента установлено образование, в процессе хранения пороаков, продуктов разложения. Методом екстрахционной фотометрии установлено уменызение количественного содержания действующих веществ в нестабилизированных ворошках.

2. Проведены исследования по стабилизации отсыревавших пороаков антиастматического действия. Показано, что введение аэросила » состав пороаков значительно улучшает и стабилизирует химические, физико-химические и технологические показатели пороаков, что подтверждено методами електронной микроскопии, ИК-сдеюгроскопии и тонкослойной хроматографии.

3. Изучен механизм стабилизирующего действия евросила в по-ровках. Методом электронной микроскопии установлена защитная роль авросила в образовании обволакивающего еффекта; аэросил ннгкбкрует взаимодействие между лекарственными веществами. Преобладает физическая стабилизация, которая является предпочтительной и наиболее физиологически целесообразной с позиций био-фавмации и безвредности лекарственных препаратов.

4. Изучение биофащацевтических свойств порошков антиастматического действия методами "ин виво" и "ин витро" позволило установить, что введение стабилизатора в состав порошков увеличивает их биодоступность с пролонгирующим эффектом, что повышает их терапевтическую эффективность.

5. Биологические исследования по определению острой токсичности, обцетоксического и ыесткораздражавцего действия,вду-

лятивкых свойств антиастматических поротков показали, что ввода» нив аоросила в качество стабилизатора, но влняэт на токсичность пороаков, не оказывает мветнораздрадае^зго действия, нз иа»ня-ст ивдекс кумуляции.

6. На разработанной нами экспериментальной модели брелхо-спазма у животных показана антиастматичесяал активность порса* ков, стабилизированных аэросилом. Показана целесообразность введения порошков с профилактической цвльв, продотврз^аг^зго наступление бронхоспазма.

7. В опытах на кроликах установлена тенденция я увоюгеэкзэ гипотензивного гффзкта у стабилизированных порезяов.

8. Рентгеновским флпорасцанпши и гмиссионнзд цзтодт-^и по* казано, что аэросил не всасывается в кровь и гелудо*гно~2Е2з*£2й1 тракт и не кумулируатся внутренними органами.

9. Разработана технология приготовления грану.1ированных порошков в однодозовой упаковке на основе стабилизированных многокомпонентных порошков по прописи Звягинцева.

Изучены их фиэико-хишгавские и технологические свойства. Установлено отсутствие качественных и количественных игиэнэкнй лекарственных вецеств при длительном хранении. Баофармацэвта-ческие исследования гранулированных пороаков показали, что кинетика высвобождения лекарственных веществ не отличается от кинетики высвобождения эуфиллина, димедрола, »федрина из многокомпонентных порошков.

Показана биологическая безвредность разработанных гранул в однодозовой упаковке.

10. В качестве упаковочного материала для гранулированных

порошков антиастматического действия могут использоваться поли-

•тиленцеллофановая плёнка марки ПЦ-2 и комбинированный материал: целлофан - поливтилен - фольга - полиэтилен, в которых гранулированные порошки остаются стабильными в течение не менее 5 лет. При использовании в качестве упаковочного материала бумаги, ламинированной полиэтиленом,срок годности гранул составляет 3 года.

II. По результатам проведенных исследований разработаны и утверждены ВО "Союзфармация": "Методические указания по приготовлению, анализу и хранению порошков, содержащих эуфиллин с димедролом, в условиях аптек" (18.09.89 г.); "Методические указания по приготовлению, анализу и хранению порошков по прописи Звягинцева в условиях аптек" (19.09.89 г.); получено авторское свидетельство > 1507392 на изобретение "Антиастматическое средство"; утверждено рационализаторское предложение на "Устройство для проведения анализа биологических и экстрактивных объектов в газовой хроматографи^1; получено разрешение Фармакологического комитета МЗ СССР на применение аэросила в порошках, применяемых в детской практике С » 211-3157-2548 от 11.07.87 г.).

Основное содержание диссертации отражено в следующих работах:

1. Изучение стабилизирующего действия аэросила в бинарных пороаковьас смесях методом хроматографии в тонких слоях сорбента*

-Ы.,1986. -Деп. ВНИИТИ 18.08.86, № 5819 - 13.

2. Гаэохроматографическое определение эуфиллина и димедрола при совместном присутствии// Современные методы химико-токсикологического анализа: Тр. I ИМИ. - М., 1986. - С.164-167.

3. Разработка рациональной технологии многокомпонентных порошков с использованием стабилизирующих средств // Матер. У Всеросс. съезда фармацевтов: Тез. докл. - Ярославль, 1987. - С. 205.

4. Разработка технологии контроля качества многокомпонентных порошков по прописи Звягинцева// Совершенствование методологии, практические внедрения исследований по фармации: Сб. научн. трудов.- М., 1989. - С.159-163. - рукопись деп. во БНИИМ и МТИ, № 17256.

5. A.c. 1507392. Ан тиас гма тич ее ко е средство// Открытия. Изобретения. - 1989. - № 34.

6. К оценке биологических свойств порошков, стабилизированных аэросилом// Синтетические и биологические полимеры в фа.^лации: Научн. тр. ВНИ®.-1990. - Т. Ш111. - С.58-62.