Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.01) на тему:Разработка составов и технологий получения лекарственных форм Декоп

На правах рукописи

Климова Евгения Игоревна

РАЗРАБОТКА СОСТАВОВ И ТЕХНОЛОГИЙ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ДЕКОЛ.

15.00.01 - технология лекарств и организация фармацевтического дела

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

ии^453215

Москва-2008 г

003453215

Диссертационная работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) РАСХН

Научный руководитель:

Доктор фармацевтических наук, профессор

Демина Наталья Борисовна

Официальные оппоненты:

Доктор фармацевтических наук, профессор

Кандидат фармацевтических наук

Давыдова Валентина Николаевна Суслина Светлана Николаевна

Ведущая организация:

Башкирский государственный медицинский университет

Защита состоится «У » 9 2008 г в 14 часов на заседании

диссертационного совета Д 006.070.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) РАСХН по адресу: 117216, г. Москва, ул. Грина, 7

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЛАР по адресу: 117216, г.Москва, ул. Грина, 7

Автореферат разослан « С » иА.^-5 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета<---^--- /?

Д 006.070.01,

доктор фармацевтических наук [/

А.И.Громакова

Актуальность темы

Хронические заболевания опорно-двигательного аппарата (ОДА) являются одной из наиболее частых патологий, занимая второе место по частоте после артериальной гипертензии. Боль, связанная с поражением суставов, чаще имеет хронический характер, различный генез (воспалительный, механический, сосудистый), что требует непрерывной многолетней терапии для улучшения качества жизни больных.

Основным методом лечения большинства этих заболеваний является применение нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП). Эти средства зарекомендовали себя как высокоэффективные, имеющие помимо жаропонижающего, отчетливый анальгетический и противовоспалительный эффект. Однако применение НПВП имеет и свои ограничения. Большинство из них оказывают нежелательное воздействие на бронхи (бронхоспазм), желудочно-кишечный тракт (диспепсии, эрозии, язвы, которые могут осложняться кровотечением), почки, что выражается в уменьшение экскреции натрия, а при длительном применении - на микроциркуляцию и агрегацию тромбоцитов.

Создание эффективных лекарственных средств для лечения ОДА, обладающих минимальными побочными эффектами - одна из актуальных проблем фармацевтической технологии. Растительные препараты наиболее полно отвечают современным медико-биологическим требованиям, так как обладают высокой эффективностью, хорошей переносимостью, отсутствием побочных эффектов, что позволяет их использовать для профилактики и лечения заболевания у всех возрастных групп. Перспективным растительным сырьем в этой области является сабельник болотный, известный своими целительными свойствами в народной медицине.

Учеными ВИЛАРа в ходе фитохимического исследования подземных органов сабельника болотного определены основные параметры экстракции биологически активных веществ (БАВ) из растительного сырья, позволяющие получить готовый продукт со стабильными показателями качества. Разработан оригинальный противовоспалительный сухой экстракт из сабельника болотного корневищ с корнями Comarum palustre, семейства розоцветные (Rosaceae). Приоритет научных исследований подтвержден патентом от 02.08.2006 № 2006127837 «Способ получения средства,

обладающего противовоспалительной и диуретической активностью».

Фармакологами определены разовая и суточная дозы экстракта необходимые для профилактики и лечения воспалительных заболеваний ОДА. Причем показано, что для достижения максимального фармакологического эффекта следует проводить комбинированную терапию, сочетающую пероральный прием и наружное применение сабельника болотного экстракта сухого (СБЭС). В связи с этим актуальна и своевременна разработка пероральной и наружной лекарственных форм на его основе.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы является разработка научно-обоснованных составов, технологий получения и методов стандартизации таблеток и геля Декоп для комплексного лечения воспалительных заболеваний.

Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи:

изучить физико-химические, структурно-механические и технологические свойства сабельника болотного экстракта сухого и вспомогательных веществ;

на основании проведенных исследований обосновать и разработать состав таблеток и геля Декоп;

разработать методики качественного и количественного анализа таблеток и геля Декоп;

изучить профиль высвобождения «in vitro» суммы полифенольных соединений из таблеток Декоп и установить влияние вспомогательных веществ на этот процесс;

методом, основанным на диализе через полупроницаемую мембрану изучить скорость перехода суммы полифенольных соединений в диализную среду и определить влияние типа основы на данный процесс;

исследовать стабильность таблеток и геля Декоп в процессе хранения для обоснования сроков годности;

на основании полученных результатов разработать проекты ФСП и составить опытно-промышленные регламенты на таблетки и гель Декоп;

провести токсикологическое изучения таблеток и геля Декоп.

Научная новизна исследования

На основании экспериментального изучения технологических и физико-химических свойств сабельника болотного экстракта сухого, а также вспомогательных веществ, используемых в работе, предложена технология получения таблеток Декоп, отвечающих заданным параметрам и современным нормам качества.

Впервые, полученные данные в результате экспериментального исследования структурно-механических свойств полимеров, используемых в качестве основ (ареспол, \Valocel С 10000, \Valocel НМ) и гелевых систем позволили разработать оптимальный состав и технологию получения лекарственной формы - геля Декоп.

Разработаны методики сквозной стандартизации полифенольных соединений в таблетках и геле Декоп и определены их метрологические характеристики.

Проведение теста «Растворение» показало характер влияния вспомогательных веществ на профиль кривых высвобождения, что представляет интерес для разработки твердых дозированных форм, содержащих сухие экстракты, полученные из лекарственного растительного сырья.

Методом, основанным на диализе через полупроницаемую мембрану на аппарате «Лопасть над диском», изучена скорость перехода полифенольных соединений из образцов гидрогелей в диализную среду. В ходе проведения анализа установлено влияние типа основы на этот процесс.

Экспериментально подтвержден и описан характер влияния пропиленгликоля на интенсивность перехода БАВ, на примере полифенольных соединений из гидрогеля через полупроницаемую мембрану. Показана перспективность его использования в качестве корректора биофармацевтических свойств геля.

Практическая значимость работы.

На основании проведенных исследований разработаны:

ГТ__гЬ/^ГТ — ,,гг„гг_______тт________

- ири^л! па и 1 аил и 1 ли Д^лии«,

- Проект ФСП на «Гель Декоп»;

- Опытно-промышленные регламенты на производство таблеток и геля Декоп.

Основные положения, выносимые на защиту

- результаты изучения физико-химических и технологических характеристик СБЭС и вспомогательных веществ, используемых в работе;

- результаты по обоснованию состава, соотношения компонентов и технологии получения таблеток и геля Декоп;

- результаты разработки методик стандартизации таблеток и геля Декоп;

- результаты высвобождения полифенольных соединений из таблеток Декоп;

- результаты определения реологических характеристик гелей Декоп различных составов;

- результаты изучения перехода полифенольных соединений через полупроницаемую мембрану из гелей Декоп различного состава;

- результаты изучения стабильности и установления сроков годности разработанных лекарственных форм Декоп.

Апробация работы

Основные положения диссертационной работы доложены на VII Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (г. Москва, 2006 г.), XIV российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва 2007 г.) и конференции «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической промышленности» (Пятигорск, 2008).

Связь темы диссертационной работы с планом научных работ учреждения.

Работа выполнена по «Программе фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению развития агропромышленного комплекса РФ» на 2008-2010 гг.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ. Структура и объем диссертации

Диссертационная работа изложена на 130 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, трех глав экспериментальной части, выводов, списка литературы,

включающего 150 источников, в том числе 35 иностранных, приложений. Работа содержит 22 рисунка и 15 таблиц.

Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цели и задачи исследования, представлены научная новизна и практическая значимость работы.

Первая глава посвящена описанию преимуществ сухих экстрактов и особенностей получения лекарственных форм на их основе. Проведен анализ номенклатуры лекарственных препаратов растительного происхождения с сухими экстрактами. Отражены особенности современных вспомогательных веществ, используемых при получении таблеток и гелей. Описан механизм трансдермального переноса веществ и факторы, определяющие скорость их диффузии.

Глава вторая содержит сведения о СБЭС, вспомогательных веществах, приборах и методиках проведения исследований.

В главе третьей представлены данные по изучению физико-химических и технологических характеристик объектов исследования. Теоретически и экспериментально обоснован состав и технология получения таблеток. Изложены результаты разработки методик качественного и количественного анализа БАВ таблеток Декоп.

Глава четвертая включает разработку мягкой лекарственной формы на основе СБЭС. Исследован переход полифенольных соединений через полупроницаемую мембрану и показан характер влияния основ и пропиленгликоля на данный процесс. Представлено изучение стабильности и определены сроки годности геля Декоп.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ 1. Объекты и методы исследования

Объектом исследования служили сабельника болотного экстракт сухой, полученный из корневищ с корнями, лактоза (ОСТ 49 63-85), лудипресс (ФС 42-08803-98), микрокристаллическая целлюлоза (ч^ п^о 1ао-уу), мс1илцеллюлоза видорас ширимая (мц) (1 У

2231-107-05742755-96), крахмал картофельный (ГОСТ 7699-78), коллидон УА-64, стеарат кальция (ТУ 6-09-4223-76), аэросил Я972У (ГОСТ 14922-77), старк 1500 (соотв. ивР, ЕР), эксплосол (соотв. ЕР, ВР, иБР), ареспол (ТУ 2219-005-29053342-97), триэтаноламин (ТУ 609-2448-72), \Valocel НМ 4000 РА 2910 (соотв. ЕР, ВР, ивР), \Valocel

С 10000 (соотв. ЕР, BP, USP), глицерин (ФС 42-2202-84), пропиленгликоль (ФС 42-1242-96), кислота сорбиновая (ТУ 6-14358-76).

Форму, размер и структуру поверхности частиц определяли под микроскопом Olympus Сх41 (Филиппины) с помощью программного обеспечения Image Scope S, FEI company Philips.

Для снятия реологических показателей использовали ротационный визкозиметр типа «Реотест-2».

Идентификацию полифенольных соединений осуществляли методом хроматографии в тонком слое сорбента (ТСХ) на пластинках «Sorbfil ПТСХА-ПА» размером 10x10 см. Обнаружение зон адсорбции производили после высушивания и обработки хроматограммы 1 % спиртовым раствором железа окисного хлорида.

Количественное определение полифенольных соединений проводили методом прямой спектрофотометрии на спектрофотометре Сагу 100 Sean Varían (США) в кюветах с толщиной поглощающего слоя 1 см.

Высвобождение полифенольных соединений из таблеток Декоп изучали на приборе типа «Вращающаяся корзинка» фирмы «Sotax АТ6» (Швейцария) с использованием в качестве среды растворения воды очищенной, объемом 500 мл, скорость вращения корзинок - 100 об/мин.

Переход полифенольных соединений из гелей Декоп «in vitro», методом диализа проводили согласно методике описанной в фармакопеи США 27, на аппарате «Лопасть над диском» марки DT 6 фирмы ERWEKA. В качестве диализной среды использовали воду очищенную, объемом 500 мл; скорость вращения лопастей составила 100 об/мин.

Статистическая обработка экспериментальных данных проведена в соответствии с требованиями ГФ XI изд., вып. 1 стр. 199.

2. Разработка состава и технологии получения таблеток Декоп

Факторами, определяющими поведение субстанции в процесс получения и хранения таблеток, являются их физико-химические, структурные и технологические свойства.

Полученные данные о структуре, размерах частиц сабельника болотного экстракта сухого, их форме и рельефе поверхности (рисунок 1) свидетельствуют об неудовлетворительных

технологических показателях, что подтверждено экспериментально (таблица 1).

15,4 мкм 2800 мкм 3220 мкм

Рис. 1. Фотографии частиц сабельника болотного экстракта сухого

Таблица 1

Технологические показатели СБЭС

Показатели Значения

Влажность, % 2,8 ±0,2

Сыпучесть, г/с 2,1 ±0,2

Угол естественного откоса, град 34,0 ±2,0

Прессуемость 3,0 ±0,5

Насыпная плотность, кг/м3:

свободное падение 585,0 ±27,0

после уплотнения 840,0 ± 40,0

Наблюдения за стабильностью экстракта при относительной влажности воздуха 100% показали, что по истечении 5 часов объект увеличивал массу за счет абсорбции влаги, тем самым внешний вид и консистенция экстракта менялись. Причем необратимая потеря качества происходит в узком диапазоне влажности экстракта - от 4,3 % до 4,8 %, что следует учесть при получении твердой лекарственной формы, ведь переувлажнение экстракта может привести к ^лудшснш-и иыпучс^ги таблеточной массы и налипанию таблеток к пресс-форме (рисунок 2).

Продолжительность, ч

Рис. 2. Влагопоглощение СБЭС (при относительной влажности воздуха 100 %) и изменение физических характеристик и внешнего вида при увеличении влажности экстракта

Результаты исследования технологических характеристик СБЭС свидетельствует о том, что данная субстанция не может быть использована в технологии без добавления хорошо текучих и влагосберегающих компонентов.

На первом этапе разработки технологии получения таблеток изучена возможность использования метода прямого прессования, ввиду известных преимуществ этой технологической схемы. Полученные результаты отражены в таблице 2.

Таблица 2

Технологические характеристики таблеточных смесей для прямого

прессования

Компоненты Сыпучесть, г/с Угол естеств откоса, град Пресс-суемость Насыпная плотность, кг/м3

Свободное падение После уплотнения

СБЭС Лактоза 3,2 ± 0,5 42,0 ± 4,0 3,3 ± 0,4 576,0 ±26,0 853,0 ±52,0

СБЭС МКЦ 4,1 ±0,5 38,0 ±3,0 4,1 ±0,3 587,0 ±33,0 825,0 ± 46,0

СБЭС Лудипресс 8,3 ± 1,0 27,0 ± 0,5 6,0 ± 0,8 820,0 ±47,0 943,0 ±61,0

СБЭС Лактопресс 7,6 ±0,8 32,0 ± 2,0 6,5 ± 0,9 615,0 ±24,0 876,0 ± 50,0

Как видно из данных таблицы, технологические показатели полученных масс улучшились по сравнению с порошком СБЭС, однако, вместе с тем, образцы не соответствовали необходимым параметрам для получения из них таблеток.

В связи с этим для улучшения технологических характеристик таблетируемой массы и показателей качества таблеток смесь вспомогательных веществ гранулировали влажным способом с последующим добавлением в нее сухого экстракта. В качестве увлажняющих агентов использовали воду очищенную, 96 % этиловый спирт, крахмальный клейстер, раствор метилцеллюлозы, раствор коллидона УА-64 (таблица 3).

Таблица 3

Составы таблеточных смесей, полученных методом влажной

грануляции

Компоненты № состава таблеток

1 2 3 4 5

СБЭС 0,200 0,200 0,200 0,200 0,200

Лактоза 0,216 0,225 0,225 0,179

МКЦ 100 0,075

Спирт этиловый 96% 0,042

Р-р крахмала 5% 0,047

Р-р МЦ 3% 0,034

Р-р МЦ 7% 0,029

Р-р Коллидон УА-64 5% 0,033

Эксплосол 0,030

Аэросил Я972 V 0,005

Кальция стеарат 0,002 0,002 0,002 0,002 0,002

Масса таблетки 0,460 0,474 0,461 0,410 0,345

Характеристика гранулятов, полученных методом влажной грануляции, представлена в таблице 4.

и

Таблица 4

Технологические характеристики гранулятов различных составов, полученных методом влажной грануляции

№ состава Значения показателей

Влажность % Сыпучесть г/с Пресс-суемость Насыпная плотность кг/м

Свободное падение После уплотнения

1 6,3 ± 0,2 9,2 ± 0,3 5,8 ±0,8 586,0 ±23,0 837,0 ± 48,0

2 5,2 ± 0,3 11,0 ±0,5 7,0 ±0,9 670,0 ±34,0 840,0 ± 45,0

3 4,7 ± 0,3 6,4 ± 0,2 4,2 ± 1,0 572,0 ±20,0 792,0 ±38,0

4 5,0 ±0,2 12,5 ±0,4 8,3 ±0,7 593,0 ± 19,0 856,0 ±48,0

5 4,8 ± 0,2 13,0 ±0,8 9,1 ±0,7 656,0 ±37,0 891,0 ±39,0

Полученные данные свидетельствуют о том, что составы обладали удовлетворительными качествами, а наилучшими показателями влажности, сыпучести и прессуемости в совокупности обладал состав, увлажненный коллидоном УА-64, содержащий МКЦ, эксплосол (обеспечивающий распадаемость лекарственной формы в жидкой среде) и аэросил И. 972 V (предназначенный для оптимизации текучести гигроскопичных и когезивных порошков).

В таблице 5 представлены характеристики таблеток составов, использованных в дальнейших исследованиях.

Таблица 5

Технологические характеристики таблеток, полученных методом влажной грануляции

№ состава Внешний вид Прочность, кГс Прочность на истирание, % Распадаемость, мин Отклонение от средней массы, %

2 Таблетки круглой формы, ровные светло-коричневого цвета мраморные 7,0 ± 1,0 98,3 ± 0,2 9,5 ± 1,0 ±4,3

4 12,0 ± 1,0 99,4 ±0,1 16,0 ± 1,5 ±3,7

5 10,0 ± 1,0 99,2 ±0,1 11,5 ± 1,0 ±4,5

Приведенные результаты показывают, что все три образца имеют допустимое отклонение в массе не более 5 %, обладают необходимой прочностью, однако, таблетки образца № 2 имеют критическое значение показателя распадаемость.

Следующим этапом явилась разработка методик качественного и количественного анализа полифенольных соединений.

С целью обеспечения сквозной стандартизации от сырья к лекарственному средству, при разработке методов анализа полифенольных соединений в таблетках Декоп, использовали методики, разработанные ранее для сабельника болотного экстракта сухого, которые адаптировали к данной лекарственной форме.

Для установления подлинности предусмотрено проведение качественных реакции на наличие двух групп биологически активных веществ: полисахаридов и полифенольных соединений, а также ТСХ-анализа со стандартным образцом (+)-катехина.

Количественное определение суммы полифенольных соединений в пересчете на (+)-катехин в таблетках Декоп осуществляли спектрофотометрическим методом. Относительная ошибка методики не превышает ± 3,63 % (таблица 6)

Таблица 6

Метрологические характеристики методики количественного определения суммы полифенольных соединений в пересчете на _ (+)-катехин в таблетках Декоп__

Б X Б' Б Р,% Т(ПР) АХ Е, %

9 0,0895 0,000021 0,00454 95 2,23 0,0032 ±3,63

Отсутствие систематической ошибки методики подтверждено в опытах с добавками (+)-катехина непосредственно к навеске таблетки. Полученные результаты приведены в таблице 7.

Таблица 7

Результаты опытов с добавками (+)-катехина в навеску массы растертых таблеток Декоп

Найдено Добавлено Должно быть, Найдено, Относительная ОЛ ишпипи, /У

соединений в таблетке, г Г

0,0879 0,021 0,1089 0,1112 + 2,12

0,0892 0,039 0,1282 0,1242 -3,16

0,0887 0,062 0,1507 0,1557 + 2,90

0,0883 0,084 0,1462 0,1435 -2,78

На основании проведенного анализа 5 опытных партий таблеток Декоп установлена норма содержания полифенольных соединений в пересчете на (+)-катехин 0,0875 ± 5 % г в таблетке.

Изучение высвобождения суммы полифенольных соединений из таблеток Декоп представляет особый интерес и является следующим этапом исследования.

Как видно из результатов, представленных на рисунке 3 таблетки всех составов равномерно высвобождают БАВ, однако профиль высвобождения состава 3 значительно ниже остальных (в раствор перешло около 56 % активного вещества за 45 минут), что не соответствует требованию нормативной документации.

На основании изучения высвобождения полифенольных соединений из таблеток и с учетом того, что использование крахмального клейстера может способствовать микробной контаминации лекарственной формы, перспективным следует считать образец, приготовленный с использованием увлажняющего агента коллидона VA-64.

время, мин. состав 2 -•— состав 4 состав 5

Рис. 3. Высвобождение суммы полифенольных веществ из таблеток Декоп разных составов 2,4,5 (составы см. таблицу 3)

Технологическая схема получения таблеток методом влажной грануляции представлена на рисунке 4.

ВР 1.2. Подготовка помещений

ВР 1.3. Подготовка персонала

ВР 1.4. Подготовка технической одежды

ВР2.1. Взвешивание

ВР 2.2. Просеивание

ВР 2.3. Приготовление гранулирующего агента

ТП 3.1. Увлажнение

ТП 3.2. Влажное гранулирование

ТП 3.3. Сушка гранулята

ТП 3.4. Сухое гранулирование

ТП 3.5. Опудривание гранулята Кх Кт

ТП 4.1. Таблетирование

ТП 4.2. Обеспыливание таблеток КхКт

УМО 5.1. Фасовка таблеток

УМО 5.2. Упаковка

ПО 6.1 Размол

некпнпипипнных тябиеток

ВР 1. Санитарная подготовка производства

■

Потери

ТП 3. Получение массы для таблетирования

■и

Отходы

Потери

ТП 4. Таблетирование и отбраковка

УМО 5. Фасовка и упаковка таблеток

ни о. газмол

некондиционных

таблеток

Отходы

Потери

Некондиционные таблетки

Потери

На склад

На ТП 3.

Рис. 4. Технологическая схема производства таблеток Декоп

Таким образом, в результате проведенного исследования предложены оптимальный состав и технология получения таблеток Декоп.

На основании результатов изучения стабильности при хранении установлен срок годности таблеток - 2,5 года в упаковке, предусмотренной проектом нормативной документации.

Полученные экспериментальные данные заложены в основу проекта фармакопейной статьи предприятия «Таблетки Декоп по 0,2»

По данным токсикологического исследования препарат согласно действующей классификации относится к малотоксичным. Сабельника болотного экстракт сухой, являющийся субстанцией для получения таблеток Декоп, в фармакологических исследованиях, проведенных с использованием различных экспериментальных моделей на животных, показал выраженную противовоспалительную активность.

3. Разработка состава и технологии получения геля Декоп

Фармакологическое изучение СБЭС, проведенное в ГУ НИИ ВИЛАР, показало, что для проведения эффективной терапии ОДА необходимо комплексное использование внутренней и наружной лекарственных форм. Для обеспечения резорбции, с одной стороны и отсутствия токсичного воздействия на организм в целом с другой, в качестве наружной формы выбран гель, который, как известно, характеризуется также комфортным нанесением и стабильностью при хранении.

Важнейшие показатели качества геля: структурно-механические характеристики, стабильность, высвобождающая способность и, следовательно, терапевтическая активность определяются свойствами носителей. В этой связи проведен подбор основообразующих компонентов и их оптимальных концентраций.

В качестве основ исследовали: редкосшитый акриловый полимер (ареспол), гидроксипропилметилцеллюлозу (\Valocel НМ 4000 РА 2910) и натрий карбоксиметилцеллюлозу (\Valocel С 10000 РА).

В качестве пластификаторов и стабилизаторов влажности в гель ввели пропиленгликоль (10 %) и глицерин (5 %), консервантом служила сорбиновая кислота (0,2 %).

Для выбора оптимальной концентрации носителя большое теоретическое и практическое значение имеют его структурно-механические свойства, которые влияют на терапевтические и потребительские качества гелей.

Известно, что реологические показатели геля зависят от ряда факторов, основными из которых являются физико-химические свойства компонентов и лекарственного вещества. Изучение влияния СБЭС на эффективную вязкость гелевой системы на примере ареспола показано на рисунке 5.

Исходя из данных литературы концентрация ареспола, для получения геля составила 1,5 %.

Данные реологических исследований, приведенные на диаграмме, показали, что сухой экстракт понижает вязкость основы ареспола. Вероятно, это явление связано с гигроскопичностью СБЭС, который обладает способностью связывать и удерживать значительное количество воды за счет Сахаров, входящих в его состав.

Полученные данные послужили обоснованием концентрации ареспола как основы геля с СБЭС - 1,75 %

Основываясь на рекомендациях производителя, диапазон концентраций гелевых основ \Valocel НМ и \Valocel С 10000 составил от 3 до 5 %.

1,5% 1,75%

ареспол ареспол

Концентрации ареспола

Рис. 5. Влияние СБЭС на эффективную вязкость основ ареспола различных концентраций

Представило интерес изучение структурно-механических свойств гелей, полученных с использованием \Valocel НМ и \Valocel С 10000. При этом определены следующие реологические параметры: касательное напряжения сдвига, эффективная вязкость и тиксотропность.

Для изучения тиксотропных свойств основ строили кривые кинетики деформации гидрогелей в координатах: скорость сдвига -напряжение сдвига в области изменения градиентов скорости течения от малых к большим и от больших к малым скоростям (рисунок 6).

Соответствующие кривые вязкости показывают то, что вязкость снижается с увеличением скорости сдвига в результате одновременного разрушения структуры и нарушения молекулярной ориентации. Когда во второй части эксперимента скорость сдвига постоянно снижается, вязкость возрастает в гораздо меньшей степени, чем она падала ранее. У образца на основе \ValoceI С 10000

А

о со

-«Км

0 100 200 300 400

Касательное напряжение сдвига, Па

—«—прямой —«—обратный

0 100 200 300 400

Касательное напряжение сдвига, Па

♦ прямой —в—обратный

Рис. 6. Реограммы течения гелевых систем на различных основах: А - \Valocel С 10000, Б - \Valocel НМ

петли более широкие, что свидетельствует о наличии более выраженных тиксотропных свойств и характеризует данную систему, как обладающую лучшей намазываемостью и способностью выдавливаться из туб.

Сравнительный анализ всех гигроскопических свойств сухого оптимальную концентрацию основ 3,5 %, а для \Valocel С 10000 4,5%.

полученных систем, с учетом экстракта, позволил установить - для \Valocel НМ она составила

Стандартизацию геля Декоп проводили по модифицированным методикам, аналогичным таковым на таблетки Декоп.

В ходе исследований было установлено, что основы гелей искажают результаты количественного определения биологически активных веществ.

Для исключения влияния основ гелей количественное определение полифенольных соединений в препарате проводили после предварительного разрушения гелевой структуры, для этого основу осаждали, выпавший в осадок полимер отделяли фильтрацией. Осаждение ареспола проводили добавлением к водному раствору препарата насыщенного раствора калия хлорида, \Valocel НМ разрушали спиртом этиловым 96 %, а \Valocel С 10000 -кислотой хлороводородной разведенной.

Относительная ошибка предложенной методики количественного определения не превышает ±3,56 %, что свидетельствует об удовлетворительности ее воспроизводимости.

Таблица 8

Метрологические характеристики методики количественного определения суммы полифенольных соединений в геле Декоп

р X Б2 Б Р,% ад дх Е, %

9 1,98 0,000021 0,00453 95 2,23 0,0032 ±3,56

Отсутствие систематической ошибки методики подтверждено в опытах с добавками (+)-катехина непосредственно к навеске геля. Полученные результаты приведены в таблице 9.

Таблица 9

Результаты опытов с добавками (+)-катехина в навеску геля

Найдено Добавлено Должно быть, Найдено, Относительная

полифенольных (+)-катехина, г г ошибка, %

соединении в г

геле,г

0,0401 0,0105 0,0506 0,0516 + 2,04

0,0399 0,0221 0,0620 0,0609 - 1,78

0,0403 0,0305 0,0703 0,0716 + 1,90

0,3990 0,0221 0,0620 0,0609 - 1,78

С помощью разработанной методики проведен анализ 5 опытных серий геля Декоп и установлена норма содержания полифенольных соединений не менее 1,75%. Кроме того, определен срок хранения геля в алюминиевых тубах 2 года.

Результаты диализа свидетельствуют о том, что полифенольные соединения равномерно переходят в диализную среду из гелей всех составов, однако из геля, полученного на основе \¥а1осе1 С 10000, наблюдается практически полный переход активных веществ - 97,6 % в диализную среду за меньший отрезок времени - за 4,5 часа.

Особый интерес представляет выяснение возможного влияния пропиленгликоля на процесс диализа. Результаты исследования на примере геля, полученного на основе \Valocel С 10000, представлены на рисунке 7.

100 -| 80 -60 -40 -20 -

30 60 90 120 150 180 210 240 270 300

время, мин

гель без пропиленгликоля —♦—гель с пропиленгликолем

Рис.7. Профили кривых перехода суммы полифенольных соединений из геля на основе \Valocel С 10000

На основании полученных данных можно предположить, что на первом этапе гель проявляет осмотическую активность, поскольку происходит его набухание в ячейке, а количество прошедшего лекарственного вещества через мембрану не велико. Скорость диализа полифенольных соединений на этой стадии у обоих составов практически идентична.

Действие пропиленгликоля становится заметным через два часа эксперимента: из состава с пропиленгликолем за это время в

диализную среду переходит около 55 % активных веществ, а из второго состава - 40 %.

В дальнейшем диализ протекает равномерно, однако из геля, в состав которого введен пропиленгликоль, наблюдается практически полный переход полифенольных веществ, превышая скорость и полноту диализа из геля второго состава на 30 %.

Полученные экспериментальные результаты свидетельствуют о том, что пропиленгликоль усиливает процесс переноса действующего вещества через мембрану, тем самым увеличивая его фармацевтическую доступность, что имеет особое значение для мягких лекарственных форм резорбтивного действия.

Обобщение полученных данных о структурно-механических характеристиках гелевых систем, результатов диализа и технологичности получения, позволяет рекомендовать оптимальным состав, с использованием основы \Valocel С 10000. Технологическая схема получения геля приведена на рисунке 8.

Таким образом, на основании проведенных исследований разработана мягкая лекарственная форма на основе СБЭС - гель Декоп.

Полученные результаты анализа данной лекарственной формы положены в основу проекта ФСП «Гель Декоп», в который включены следующие разделы: описание, подлинность, количественное определение, масса содержимого упаковки, рН, эффективная вязкость, микробиологическая чистота, упаковка.

В результате токсикологического изучения геля Декоп при длительном наружном применении на кожу крыс, обладает резорбтивным действием, не проявляя при этом токсического влияния на основные органы и системы организма, не раздражает кожу.

Рис. 8. Технологическая схема производства геля Декоп

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Проведено исследование физико-химических, технологических и структурно-механических свойств сабельника болотного экстракта сухого и современных вспомогательных веществ, используемых в работе. Полученные данные позволили разработать составы лекарственных форм Декоп таблеток и геля.

2. Разработаны методики стандартизации полифенольных соединений в таблетках и геле Декоп методом прямой спектрофотометрии с использованием в качестве стандарта (+)-катехина. Определены метрологические характеристики методик.

3. Изучены профили кривых высвобождения «in vitro» суммы полифенольных соединений из таблеток Декоп, установлен характер влияния вспомогательных веществ, что способствовало обоснованию оптимального состава.

4. Методом, основанным на диализе через полупроницаемую мембрану на аппарате «Лопасть над диском», изучена скорость перехода полифенольных соединений в диализную среду из образцов гелей. В ходе проведения анализа выявлено влияние типа основы, а также экспериментально изучен характер влияния пропиленгликоля на интенсивность перехода БАВ из гидрогеля. В результате показана перспективность его использования в качестве корректора фармацевтической доступности гидрогелей.

5. В результате исследования стабильности лекарственных препаратов Декоп установлены сроки годности для таблеток -два с половиной года и для геля - два. На основании полученных результатов разработаны проекты ФСП и составлены опытно-промышленные регламенты на лекарственные формы Декоп таблетки и гели.

6. По данным токсикологического исследования, разработанные лекарственные формы Декоп согласно действующей классификации относятся к малотоксичным. Установлено, что гель Декоп обладает резорбтивным действием, что являлось одним из основных требований предъявляемых к разрабатываемой лекарственной форме.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Климова Е.И., Охотникова В.Ф., Демина Н.Б. Разработка состава и технологии получения таблеток с сабельником болотным экстрактом сухим. / Материалы VII Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» 23-26 ноября - М., 2006. - С.243.

2. Климова Е.И. Охотникова В.Ф. Сокольская Т.А. Влияние технологии получения таблеток на основе сабельника болотного экстракта сухого на их биофармацевтические характеристики. / Тезисы докладов XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - М., 2007. - С. 828.

3. Разработка состава и технологии таблеток с экстрактом сабельника болотного / Климова Е.И., Демина Н.Б, Сокольская Т.А. и др. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - № 3. С.27-33.

4. Климова Е.И., Демина Н.Б, Сайбель O.JI. Разработка метода стандартизации геля, содержащего сабельника болотного экстракт сухой. / Труды научно-практической конференции «Фармация из века в век» часть III анализ и стандартизация лекарственных средств. - Санкт-Петербург, 2008. - С. 56-59.

5. Климова Е.И., Охотникова В.Ф., Демина Н.Б. Исследование высвобождения биологически активных веществ из гелей, содержащих сабельника болотного экстракт сухой, полученных на различных основах. / Сб. Пятигорской государственной фармацевтической академии. - Пятигорск, 2008. - С.157-159.

6. Климова Е.И., Сайбель O.JI. Разработка методик качественной и количественной оценки полифенольных соединений в таблетках, содержащих сабельника болотного экстракт сухой. / Сб. Пятигорской государственной фармацевтической академии. - Пятигорск, 2008. - С.267-269.

Заказ №38/11/08 Подписано в печать 06 11.2008 Тираж 100 экз. Уел пл. 1,5

ООО "Цифровичок", тел (495) 797-75-76, (495) 778-22-20 'л^'у/ www.cfr.nj; е-таИ:info@cfr.ru

Хронические заболевания опорно-двигательного аппарата (ОДА) являются одной из наиболее частых патологий, занимая второе место по частоте после артериальной гипертензии. Боль, связанная с поражением суставов, чаще имеет хронический характер, различный генез (воспалительный, механический, сосудистый), что требует непрерывной многолетней терапии для улучшения качества жизни больных.

Основным методом лечения большинства этих заболеваний является применение нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП). Эти средства зарекомендовали себя как высокоэффективные, имеющие помимо жаропонижающего, отчетливый анальгетический и противовоспалительный эффект. Однако применение НПВП имеет и свои ограничения. Большинство из них оказывают нежелательное воздействие на бронхи (бронхоспазм), желудочно-кишечный тракт (диспепсии, эрозии, язвы, которые могут осложняться кровотечением), почки, что выражается в уменьшение экскреции натрия, а при длительном применении — на микроциркуляцию и агрегацию тромбоцитов [27,51,117].

Создание эффективных лекарственных средств для лечения ОДА, обладающих минимальными побочными эффектами — одна из актуальных проблем фармацевтической технологии. Растительные препараты наиболее полно отвечают современным медико-биологическим требованиям, так как обладают высокой эффективностью, хорошей переносимостью, отсутствием побочных эффектов, что позволяет их использовать для профилактики и лечения заболевания у всех возрастных групп. Перспективным растительным сырьем в этой области является сабельник болотный, известный своими целительными свойствами в народной медицине.

Учеными ВИЛАРа в ходе фитохимического исследования подземных органов сабельника болотного определены основные параметры экстракции биологически активных веществ (БАВ) из растительного сырья, позволяющие получить готовый продукт со стабильными показателями качества. Разработан 6 оригинальный противовоспалительный сухой экстракт из сабельника болотного корневищ с корнями Comarum palustre, семейства розоцветные (Rosaceae). Приоритет научных исследований подтвержден патентом от 02.08.2006 № 2006127837 «Способ получения средства, обладающего противовоспалительной и диуретической активностью» [27,7073].

Фармакологами определены разовая и суточная дозы экстракта, необходимые для профилактики и лечения воспалительных заболеваний ОДА. Причем показано, что для достижения максимального фармакологического эффекта следует проводить комбинированную терапию, сочетающую пероральный прием и наружное применение сабельника болотного экстракта сухого (СБЭС). В связи с этим актуальна и своевременна разработка пероральной и наружной лекарственных форм на его основе.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы является разработка научно-обоснованных составов, технологий получения и методов стандартизации таблеток и геля Декоп для комплексного лечения воспалительных заболеваний.

Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить физико-химические, структурно-механические и технологические свойства сабельника болотного экстракта сухого и вспомогательных веществ; на основании проведенных исследований обосновать и разработать состав таблеток и геля Декоп; разработать методики качественного и количественного анализа таблеток и геля Декоп; изучить профиль высвобождения «in vitro» суммы полифенольных соединений из таблеток Декоп и установить влияние вспомогательных веществ на этот процесс;

- методом, основанным на диализе через полупроницаемую мембрану изучить скорость перехода суммы полифенольных соединений в диализную среду и определить влияние типа основы на данный процесс; исследовать стабильность таблеток и геля Декоп в процессе хранения для обоснования сроков годности; на основании полученных результатов разработать проекты ФСП и составить опытно-промышленные регламенты на таблетки и гель Декоп; провести токсикологическое изучения таблеток и геля Декоп.

Методы исследования

В работе использованы физико-химические, технологические, структурно-механические и микробиологические методы.

Научная новизна исследований

На основании экспериментального изучения технологических и физико-химических свойств сабельника болотного экстракта сухого, а также вспомогательных веществ, используемых в работе, предложена технология получения таблеток Декоп, отвечающих заданным параметрам и современным нормам качества.

Впервые, полученные данные в результате экспериментального исследования структурно-механических свойств полимеров, используемых в качестве основ (ареспол, Walocel С 10000, Walocel НМ) и гелевых систем позволили разработать оптимальный состав и технологию получения лекарственной формы — геля Декоп.

Разработаны методики сквозной стандартизации полифенольных соединений в таблетках и геле Декоп и определены их метрологические характеристики.

Проведение теста «Растворение» показало характер влияния вспомогательных веществ на профиль кривых высвобождения, что представляет интерес для разработки твердых дозированных форм, содержащих сухие экстракты, полученные из лекарственного растительного сырья.

Методом, основанным на диализе через полупроницаемую мембрану на аппарате «Лопасть над диском», изучена скорость перехода полифенольных соединений из образцов гидрогелей в диализную среду. В ходе проведения анализа установлено влияние типа основы на этот процесс.

Экспериментально подтвержден и описан характер влияния пропиленгликоля на интенсивность перехода БАВ, на примере полифенольных соединений из гидрогеля через полупроницаемую мембрану. Показана перспективность его использования в качестве корректора биофармацевтических свойств геля.

Практическая значимость работы.

На основании проведенных исследований разработаны:

- Проект ФСП на «Таблетки Декоп»;

- Проект ФСП на «Гель Декоп»;

- Опытно-промышленные регламенты на производство таблеток и геля Декоп.

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы доложены на VII Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (г. Москва, 2006 г.), XIV российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва 2007 г.) и конференции «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической промышленности» (Пятигорск, 2008).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Положения, выдвигаемые на защиту:

- результаты изучения физико-химических и технологических характеристик СБЭС и вспомогательных веществ, используемых в работе;

- результаты по обоснованию состава, соотношения компонентов и технологии получения таблеток и геля Декоп;

- результаты разработки методик стандартизации таблеток и геля Декоп;

- результаты высвобождения полифенольных соединений из таблеток Декоп; результаты определения реологических характеристик гелей Декоп различных составов; результаты изучения перехода полифенольных соединений через полупроницаемую мембрану из гелей Декоп различного состава;

- результаты изучения стабильности и установления сроков годности разработанных лекарственных форм Декоп.

Связь темы диссертационной работы с планом научных работ учреждения.

Диссертационная работа выполнена по «Программе фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению развития агропромышленного комплекса РФ» на 2008-2010 гг.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, трех глав экспериментальных исследований, общих выводов, списка литературы и приложения. Содержит 128 страниц печатного текста, 15 таблиц, 22 рисунка. Библиографический указатель включает 150 источника, из которых 28 на иностранных языках.

Общие выводы.

1. Проведено исследование физико-химических, технологических и структурно-механических свойств сабельника болотного экстракта сухого и современных вспомогательных веществ, используемых в работе. Полученные данные позволили-разработать составы лекарственных форм Декоп таблеток и геля.

2. Разработаны методики стандартизации полифенольных соединений в таблетках, и геле Декоп методом прямой спектрофотометрии с использованием & качестве стандарта (+)-катехина. Определены метрологические характеристики методик.

3. Изучены профили кривых высвобождения «in vitro» суммы полифенольных соединений из таблеток Декоп, установлен характер влияния вспомогательных веществ, что способствовало обоснованию оптимального состава.

4. Методом, основанным на диализе через полупроницаемую мембрану на аппарате «Лопасть над диском», изучена скорость перехода полифенольных соединений в диализную среду из^ образцов гелей. В ходе проведения анализа выявлено влияние типа основы, а также экспериментально изучен характер влияния пропиленгликоля на интенсивность перехода БАВ из гидрогеля. В результате показана перспективность era использования в качестве корректора фармацевтической доступности гидрогелей.

5. В результате исследования стабильности лекарственных препаратов Декоп установлены сроки годности для таблеток — два с половиной года и для геля — два. На основании полученных результатов разработаны проекты ФСП и составлены опытно-промышленные регламенты на лекарственные формы Декоп таблетки и гели.

6. По данным токсикологического исследования, разработанные лекарственные формы Декоп согласно действующей классификации относятся к малотоксичным. Установлено, что гель Декоп обладает резорбтивным действием, что являлось одним из основных требований предъявляемых к разрабатываемой лекарственной форме.