Автореферат и диссертация по медицине (14.04.01) на тему:Разработка комплексных лекарственных препаратов для лечения хронической венозной недостаточности
- Ученая степень
- кандидата фармацевтических наук
- ВАК РФ
- 14.04.01
Автореферат диссертации по медицине на тему Разработка комплексных лекарственных препаратов для лечения хронической венозной недостаточности
на правах рукописи
ои
САПОЖКОВА МАРИЯ БОРИСОВНА
РАЗРАБОТКА КОМПЛЕКСНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ ВЕНОЗНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ
14.04.01 - технология получения лекарств
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата фармацевтических наук
о о А О г 7П17
Москва-2012 г.
005046729
Диссертационная работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российском университете дружбы народов» Министерства Образования Российской федерации.
Научный руководитель:
Кандидат фармацевтических наук, доцент
Официальные оппоненты:
Доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий лаборатории готовых лекарственных форм ГУ НИИ Фармакологии им. В.В. Закусова РАМН
Кандидат фармацевтических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории технологии
лекарственных форм Отдела фармацевтической технологии ГНУ ВИЛАР Россельхозакадемии
Ведущая организация:
ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации
Суслина Светлана Николаевна
Алексеев Константин Викторович
Джавахян Марина Аркадьевна
Защита состоится 2012 г. в 14 часов на заседании
диссертационного совета Д 006.070.01 во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) РАСХН (117216, г. Москва, ул. Грина, 7) по адресу: 123056, г.Москва, ул. Красина д. 2. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЛАР по адресу: 117216, г. Москва, ул. Грина, 7.
Автореферат разослан за ¿-¿-¿¿М-Р 2012 г
Ученый секретарь
диссертационного совета .____
Д 006.070.01, .7/, ,
доктор фармацевтических наук ;/ - Громакова А. И.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Создание и внедрение новых и эффективных лекарственных средств отечественного производства является одним из приоритетных направлений фармацевтической науки. В последние годы существует тенденция к разработке новых комплексных лекарственных препаратов для терапии социально значимых заболеваний, что позволяет расширить спектр фармакологической активности данных лекарственных препаратов.
Заболевания вен конечностей являются распространенной сосудистой патологией, социальная значимость которой обусловлена распространением заболевания у 15-20% взрослого населения, 40% из которых находятся в возрасте от 40 до 50 лет. Исследования, проведенные различными Европейскими научными центрами, показывают, что хроническая венозная недостаточность (ХВН) среди женщин составляет 25-33%, среди мужчин - 1020%. Терапия сосудистых патологий, таких как ХВН, включает применение в комплексе венотонизирующих биологически активных веществ, например, флавоноидов (кверцетина, изокверцетрина, кемпферола, рутина и других), содержащихся в растительных субстанциях, в том числе в винограда листьев экстракте сухом (ВЛЭС), и обладающих широким спектром фармакологической активности (Тюкавкина H.A., Птицын A.B., Еремина A.B.). Результаты проведенных в 2004 году клинических испытаний ВЛЭС в составе зарубежного препарата Антистакс позволили выявить высокую терапевтическую активность субстанции ВЛЭС, при этом разработка новых отечественных лекарственных препаратов на его основе, как для местной, так и для системной терапии ХВН является актуальной задачей фармации.
В этой связи актуальна разработка аппликационной лекарственной формы с сочетанием ВЛЭС и гепарина, обладающего антикоагулянтной и противовоспалительной активностью, зарекомендовавшего себя в терапии ХВН (Ройман Е.В.). При этом целесообразность разработки данного лекарственного препарата отечественного производства так же обусловлена отсутствием аналогов с данной комбинацией фармацевтических субстанций на фармацевтическом рынке. Для системной терапии ХВН целесообразна разработка пероральной лекарственной формы в виде капсул с ВЛЭС и аскорбиновой кислотой (АК), обладающей синергическим действием с флавоноидами ВЛЭС, направленным на укрепление сосудистых стенок.
Таким образом, разработка аппликационного и перорапьного комплексных лекарственных препаратов на основе высокоактивных фармацевтических субстанций для профилактики и терапии ХВН является своевременной и актуальной.
Цель исследования - разработка составов и технологий производства геля «Экливин» с комбинацией ВЛЭС и гепарина, капсул «Экливин» с комбинацией ВЛЭС и аскорбиновой кислоты для применения в комплексной профилактике и терапии ХВН.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Разработать состав и технологию производства геля «Экливин» на основании изучения физико-химических свойств фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ.
2. Изучить технологические свойства фармацевтических субстанций и их сочетаний со вспомогательными веществами. Разработать состав и технологию производства капсул «Экливин».
3. Разработать или модифицировать методики качественного и количественного анализа фармацевтических субстанций в лекарственных формах «Экливин» с целью стандартизации.
4. На основании полученных результатов разработать нормативную документацию на лекарственные препараты - проекты ФСП и опытно-промышленные регламенты.
5. Изучить стабильность разработанных " лекарственных форм для обоснования сроков годности.
6. Изучить биофармацевтические характеристики разработанных лекарственных форм.
7. Изучить специфическую активность и биологическую безопасность геля «Экливин».
Связь задач исследования с проблемным планом научно-исследовательских работ. Диссертационная работа направлена на выполнение национального проекта «Здоровье», выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ кафедры Общей фармацевтической и биомедицинской технологии Медицинского факультета ФГБОУ ВПО «Российского университета дружбы народов». Исследования проводились в рамках государственного контракта № 16.552.12.7002.
Научная новизна. Впервые разработан и обоснован состав геля с ВЛЭС и гепарином на основании подбора системы растворителей, обеспечивающей промоцию всасывания фармацевтических субстанций, а так же системы антиоксидантов для стабилизации фенольных соединений в геле. На основании изучения технологических и физико-химических свойств фармацевтических субстанций и гелеобразователей предложена оригинальная рациональная технология получения лекарственного препарата «Экливин, гель для наружного применения». Теоретически обоснован состав и разработана технология получения капсул «Экливин», содержащих ВЛЭС и аскорбиновую кислоту, на основании изучения технологических свойств фармацевтических субстанций с различными вспомогательными веществами. В результате исследований в состав лекарственного препарата введены вспомогательные вещества, обеспечивающие необходимые структурно-механические и медико-биологические характеристики лекарственной формы.
Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин для сквозного контроля субстанции ВЛЭС и лекарственных препаратов «Экливин». Модифицированы методики
количественного определения гепарина (биологическим методом) и определение аскорбиновой кислоты (методом ВЭЖХ).
Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований:
- Разработаны состав и технология производства препаратов «Экливин, гель для наружного применения» и «Экливин, капсулы»;
- Подготовлены опытно-промышленные регламенты на производство лекарственных препаратов «Экливин, гель для наружного применения» (№01899876-М-41-11) и «Экливин, капсулы» (№01899876-Т-19-11);
- Составлены проекты фармакопейных статей предприятия на препараты «Экливин, гель для наружного применения» и «Экливин, капсулы» для ЗАО «Московская фармацевтическая фабрика».
Проведено доклиническое изучение специфической активности и биологической безопасности геля «Экливин».
Публикации материалов исследований. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 3 статьи, входящие в перечень периодических изданий, рекомендуемых ВАК.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы и результаты исследований представлены и доложены на I, II, III Международной студенческой научной конференции «Клинические и теоретические аспекты современной медицины» (Москва, 2009, 2010,2011 гг.), Четвертой Всероссийской конференции - школы «Фундаментальные вопросы масс-спектрометрии и её аналитические применения» (Звенигород, 2010).
Положения, выдвигаемые на защиту:
- результаты исследований по обоснованию составов и технологий получения геля и капсул «Экливин» для лечения и профилактики ХВН;
- результаты проведения комплексных исследований, включающих изучение технологических, физико-химических, реологических и биофармацевтических характеристик геля и капсул «Экливин»;
- результаты изучения стабильности лекарственных форм для обоснования сроков годности;
- результаты доклинического изучения специфической активности и биологической безопасности препарата «Экливин, гель для наружного применения».
Объём и структура диссертации.
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания методов и материалов исследования, двух экспериментальных глав, заключения, общих выводов, библиографии и приложений. Библиография включает 156 литературных источников, из них 55 на иностранных языках.
Работа изложена на 197 стр. машинописного текста и содержит 2 схемы, 51 таблицу и иллюстрирована 29 рисунками.
Во введении обоснована актуальность диссертационной работы, изложены цели и задачи исследования, показано научное и практическое значение диссертации.
В обзоре литературы (глава 1) рассматриваются сведения об этиологии, патогенезе и лекарственной терапии ХВН; представлены характеристики лекарственных веществ (ВЛЭС, гепарина, аскорбиновой кислоты), обоснование их применения, а так же даны характеристики лекарственных форм - геля и капсул, способы производства и номенклатура лекарственных форм.
Во второй главе дана характеристика материалов исследования, методов и приборов, используемых в работе.
В третьей главе изложены результаты по подбору системы растворителей, основы и антиоксидантов для разработки состава и технологии получения геля «Экливин», результаты изучения стабильности лекарственного препарата, а так же результаты по изучению специфической активности и биологической безопасности геля «Экливин».
В четвертой главе изложены результаты изучения технологических свойств фармацевтических субстанций и их сочетаний со вспомогательными веществами для разработки состава и технологии получения капсул «Экливин» и результаты изучения стабильности лекарственного препарата.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Объекты и методы исследования
Объектами исследований служили лекарственные субстанции: винограда листьев экстракт сухой (НД 54871), гепарин (НД 42-13181-04), аскорбиновая кислота (JICP-006666/08-150808), а так же вспомогательные вещества, соответствующие требованиям нормативной документации.
Для идентификации флавоноидов и количественного определения консервантов использовали хроматографию в тонком слое сорбента Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на рутин в препаратах проводили на спектрофотометре Lambda, определение аскорбиновой кислоты проводили с использованием ВЭЖХ хроматографа Аквалон Стайлер System UW104. Количественное определение гепарина проводили биологическим методом на базе Испытательного центра лекарственных средств «Биотехнология». Масс-спектры лекарственных веществ и препаратов получили с помощью масс-спектрометра JMS-T100LP на базе Центра коллективного пользования Российского университета дружбы народов (ЦКП РУДН). Изучение реологических параметров гелей проводили с помощью ротационного вискозиметра Брукфильда DV-II + (EVT, Brookfield Engineering Laboratories, США) на базе НИИ Пластических масс имени Г.С. Петрова. Изучение высвобождения флавоноидов из геля проводили методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану по Крувчинскому. Технологические и биофармацевтические исследования лекарственных субстанций и препаратов проводили на базе ЦКП РУДН с использованием сканирующего электронного микроскопа (JEOL JSM - 6490LV), тестеров для определения насыпной плотности порошков (Erweka «SVM 102»), тестера для
определения характеристик гранулята (Erweka «GT»), аналитической просеивающей машины (Retsch «AS 200»), системы распадаемости (Sotax «DT 2») и системы контроля растворения (Distek «Evolution 6100») твердых лекарственных форм. Микробиологические исследования проводили на базе микробиологической лаборатории ЗАО «Московская фармацевтическая фабрика». Изучение специфической активности . и безопасности геля «Экливин» проводили на базе ЦКП РУДН. Статистическая обработка экспериментальных данных проведена в соответствии с требованиями ГФ XII.
Разработка состава и технологии получения геля «Экливин»
Среди средств аппликационной терапии - гель является формой, обеспечивающей максимальную степень высвобождения лекарственных веществ, а так же местное воздействие на поверхностно расположенные патологически измененные сосуды. Выбор концентраций лекарственных веществ основывался на рекомендациях ЕМЕА (European Medicines Agency) при местном применении для ВЛЭС (3%) и на основе традиционно используемых концентраций для гепарина (300 ME).
Для обоснования состава и разработки технологии получения лекарственной формы необходимо было изучить свойства лекарственных субстанций. Винограда листьев экстракт сухой представляет собой легкий пылящий гигроскопичный порошок, красно-коричневого цвета, значение рН 5,5 10% водного раствора. Экстракт содержит комплекс фармакологически активных полифенольных соединений, известных своей термо-, влаго-, светочувствительностью и легкой окисляемостью. Гепарин представляет собой натриевую соль сульфатизированного глюкозаминогликана, по внешнему виду это гигроскопичный порошок белого или почти белого цвета, легко растворимый в воде, значение рН 6,5 1 % водного раствора.
На первом этапе исследований была изучена растворимость субстанций в монорастворителях и системах растворителей (вода очищенная (ВО), диметилсульфоксид (ДМСО), пропиленгликоль (ПГ), спирт этиловый (СЭ), ПЭГ-400 и смеси ВО:ДМСО, ВО:СЭ, ВО:ПГ, ПГ:СЭ, ПГ:СЭ:ВО, СЭ:ПЭГ-400 в различных соотношениях и при различной температуре). Установлено, что ВЛЭС легко растворим в воде очищенной, не зависимо от её температуры, растворим в ДМСО и ПГ, умеренно растворим в СЭ 95% и ПЭГ-400. Гепарин растворим в ВО, умеренно - в смесях ВО: ПГ, ВО: СЭ, плохо растворим в спиртах (СЭ 95%, ПГ). Несмотря на то, что субстанции хорошо растворимы в ВО, но, учитывая лабильность фенольных соединений ВЛЭС, в качестве дисперсионной среды геля выбрана водно-спиртовая система (ВО: ПГ: СЭ 95% = 15:3:2), обеспечивающая приемлемую растворимость фармацевтических субстанций в терапевтически значимых концентрациях, а так же промоцию всасывания лекарственных веществ через кожу за счет ПГ.
В настоящее время одной из наиболее современных гелевых основ являются редкосшитые акриловые полимеры (РАП), обеспечивающие
фармацевтическую доступность лекарственных веществ, а так же хорошие потребительские свойства геля (намазываемость, экструзию из туб). В качестве основы геля «Экливин» были использованы три марки РАП -карбопол 980, карбопол икгег 10, карбопол ЕТБ 2020. Для подбора концентрации полимера, проведено изучение влияния системы растворителей на вязкость гелевых систем, которое показало, что 1% концентрация полимеров является наиболее приемлемой в данной системе растворителей. Исследовано влияние фармацевтических субстанций на вязко-пластичные свойства гелей полимеров Установлено, что ВЛЭС оказывает существенное влияние на реологические параметры гелей на основе РАП, смещая рН нейтрализованного геля карбопола с 6,8 до 5,7, что проявляется в разжижении 1% геля карбопола с ВЛЭС (рис.1.). Гепарин натрия практически не влияет на значение эффективной вязкости гелей карбопола (рис. 2).
Y t- Г -—Гель с ВЛЭС 1% (ЕГО 2020) Гель с ВЛЭС 1% (980) -*- Гель с ВЛЭС 1% (Шгег 10) -к- Гель РАП 1% (ЕГО 2020) -А-Гель РАП 1 % (980) -•- Гель РАП 1% (иКгег 10)
// !
V /
у 1.
/ /
/ /
À*. /
1500 2000 2500 3000 Касательное иагряжение сдвига Па
Рис. 1. Влияние ВЛЭС на вязко-пластичные свойства 1% гелей РАП
-*- Карбопол 980 1%. —- Карбопол 380 1%, -*- Карбопол ETD 2020 1%. прямая Карбопол ETD 2020 1%. обратная Карбопол UKrez 10 1%. прямая -« Карбопол UKrez 10 1%, обратная
/ /
/ /
/ У
/ "
/ //
/¿î щ
Касательное непрякенив сс
Рис.2. Влияние гепарина на вязко-пластичные свойства гелей различных марок карбополов
В ходе экспериментов, установлено, что карбопол 980 быстрее набухает, в отличие от марок Ш^ег 10 и ЕТТ) 2020, что делает его наиболее технологичным структурообразователем. Кроме того, учитывая данные производителя о том, что при производстве данного полимера используется более безопасный растворитель, в качестве гелеобразователя был выбран карбопол 980.
Для подбора концентрации карбопола 980 изучены структурно-механические свойства 1,5%, 1,7% и 2,0% гелей с комплексом субстанций. В ходе исследований установлено (рис. 3.), что с точки зрения структурно-механических свойств наиболее приемлемой концентрацией карбопола 980 в геле является 1,7%. Использование полимера в концентрации более 1,7% приводит к получению высоковязких гелей, что в свою очередь затрудняет экструзию из туб. Введение карбопола 980 в меньшей концентрации приводит к образованию текучих систем.
Касательное напряжение сдвига. Па
Рис. 3. Зависимость эффективной вязкости от касательного напряжения сдвига образцов геля «Экливин» с различным содержанием карбопола 980
В технологии получения гелей на основе РАП традиционно могут использоваться различные подходы на этапе нейтрализации дисперсии полимера. При разработке технологии геля «Экливин» показано, что нейтрализацию дисперсии РАП рационально проводить до введения растворов активных веществ. При таком способе нейтрализации не наблюдается перехода окраски геля из красно-коричневой в зеленую, что обусловлено взаимодействием фенольных соединений экстракта (антоцианов) с нейтрализующим агентом (триэтаноламином (ТЭА)). В эксперименте был подобран рН геля карбопола (6,8) и соотношение карбопол: ТЭА (1:1,1), при котором так же не наблюдается изменения цветности, при этом гель карбопола обладает значением эффективной вязкости, приближенным к максимальному при рН 7,0.
В процессе изучения стабильности геля при хранении обнаружено уменьшение числовых показателей флавоноидов, что объясняется их склонностью к окислению. С целью предварительного выбора антиоксидантов для закладки образцов на хранение была изучена стабильность модельных образцов гелей с различными антиоксидантами (табл. 1.).
Таблица 1.
Подбор антиоксидантов для стабилизации флавоноидов
№ Серия геля V Используемый антиоксидант Срок хранения (дата анализа)
0 мес. (03.06.09) 1 мес. (07.07.09) 3 мес. (08.09.09) 6 мес. (11.12.09)
1. с. 010609 Контроль (без антиоксиданта) 0,251 0,239 0,213 0,210
2. с. 020609 0.5% ионол 0,258 0,235 0,230 0,219
3. с.030609 1,0% ионол 0,261 0,255 0,213 0,210
4. с. 040609 0,2% натрия метабисульфит 0,258 0,261 0,250 0,245
5. с.050609 0,2% натрия метабисульфит, 0,05% динатрия эдетат 0,262 0,263 0,261 0,262
В ходе эксперимента подобрана система антиоксидантов, состоящая из 0,2% натрия метабисульфита и 0,05% динатрия эдетата, позволяющая стабилизировать флавоноиды в гелевой системе.
В результате исследований по изучению фармацевтической доступности методом равновесного диализа через полупроницаемую мембрану по Крувчинскому установлено, что лимитирующим фактором диализа веществ являются свойства мембраны, что делает невозможным оценку высвобождения гепарина, а так же искажает показатели, увеличивая время диализа суммы флавоноидов в пересчете на рутин. Полученные результаты представлены на рисунке 4. Кривая, описывающая высвобождение суммы флавоноидов в пересчете на рутин по данному методу, имеет классический характер, и к 4 часам высвобождение суммы флавоноидов в пересчете на рутин достигает
Время, ч
Рис. 4. Кинетика высвобождения флавоноидов в пересчете на рутин из геля «Экливин»
При проведении микробиологических исследований установлена целесообразность введения композиции консервантов нипагина и нипазола в традиционных для аппликационной лекарственной формы концентрациях. В результате микробиологических исследований установлено, что гель не обладает антимикробным действием и по микробиологической чистоте соответствует ГФ XII категории 2.
На основании экспериментальных исследований разработан гель «Экливин» следующего состава:
Наименование компонента_
Винограда листьев экстракт сухой (в пересчете на безводную
субстанцию) (НД 54871)................................................
Гепарин натрия (в пересчете на безводную субстанцию)
(НД 42-13181-04)...................................'.......................
Карбопол 980 (Еиг.РЬ.)...................................................
Триэтаноламин (ТУ 6-09-2448-86).....................................
Пропиленгликоль (ТУ 6-09-2434-81).................................
Спирт этиловый ректификованный 95% (ФС 42-3072-00).........
Натрия метабисульфит (ТУ 2142-050-00206457-99)...............
Динатрия эдетат (ГОСТ 10652-73)....................................
Нипагин (ФС 42-1460-89)..............................................
Нипазол (ФС 42-2079-91)...............................................
Вода очищенная (ФС 42-2619-97)....................................
* для субстанции с активностью 120 Ед\мг
Содержание, г
3,0
0,25* 1,7
1,87 (до рН 6,8) 15,0 10,0 0,2 0,05 0,08 0,02 до 100,0
Технология производства геля заключается в набухании карбопола 980 в воде, добавлении раствора консервантов, нейтрализации полимера ТЭА и последу ющем добавлении растворов антиоксидантов и лекарственных веществ в подобранной системе растворителей. Технологическая схема представлена на рис. 5.
ВР 2.1. Санитарная подготовка помещений
ВР 2.2. Подготовка персонала к работе
ВР 2.3. Подготовка аппаратуры и оборудования
ВР 3.1. Прием и распределение сырья
ВР 3.2. Взвешивание компонентов
ТП 4.1.Приготовление раствора ВЛЭС
ТП 4.2.Приготовление раствора гепарина
ТП 4.3.Приготовление раствора консервантов
ТП 4.4.Приготовление раствора антиоксидантов
ТП 5.1. Набухание РАП в воде
ТГ1 6.1. Введение раствора консервантов к дисперсии РАП
ТП 6.2. Нейтрализация дисперсии "РАП : вода: раствор консервантов"
ТП 6.3. Гомогенизация
ТП 7.1. Введение раствора
антиоксидантов
ТП 7.2. Введение раствора
ВЛЭС
ТП 7.3. Введение раствора
гепарина
ТП 7.4. Гомогенизация
УМО 8.1. Фасовка геля
Кх Км
УМО 8.2. Упаковка
ВР. 1. Подготовка воды
очищенной
ВР.2. Санитарная подготовка
производства
Сточные воды
ВР 3. Подготовка сырья
КтКм
ТП.4. Приготовление
растворов компонентов
ТП 5. Приготовление дисперсии "РАП : вода"
ТП 6. Приготовление геля РАП Кт; Км
ТП 7. Приготовление геля
Кт, Кх, Км
1
УМО 8. Фасовка и упаковка
Готовый продукт. Карантинное хранение
Потери
механич
еские
Потери
механич
еские
Потери
механич
еские
Потери
механич
еские
Потери
механич
еские
На склад
*
Рис. 5. Технологическая схема производства геля «Экливин»
Изучена стабильность геля «Экливин» при хранении в течение 2 лет и 3 месяцев, составлен проект ФСП «Экливин, гель для наружного применения».
Количественную оценку лекарственных веществ в геле проводили: для ВЛЭС - спектрофотометрическим методом определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин (рис. 6), для гепарина - биологическим методом.
Шауйепдтлт
Рис. 6. Спектры поглощения анализируемых растворов ВЛЭС и лекарственных препаратов «Экливин» по методике определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин
На базе ЦКП РУДН проведены токсикологические исследования, в результате которых установлено, что гель «Экливин» не обладает раздражающим и сенсибилизирующим действием. В результате доклинического изучения специфической активности геля «Экливин» установлено, что лекарственный препарат обладает противовоспалительным действием. Полученные результаты могут служить основанием для проведения клинических испытаний геля «Экливин».
—М— Раствор экстракта —е Раствор СО руте
Разработка состава и технологии получения капсул «Экливин»
Лекарственная форма капсулы является наиболее адекватной формой для внутреннего применения термо- и гидролитически неустойчивых веществ. Выбор концентраций лекарственных веществ основывался на данных клинических исследований зарубежного препарата «Антистакс» (капсулы) для ВЛЭС (180 мг) и на основе традиционно используемых концентраций для аскорбиновой кислоты (30 мг).
На первом этапе исследований по разработке капсулированной лекарственной формы были изучены технологические характеристики лекарственных субстанций ВЛЭС и аскорбиновой кислоты (табл. 2 ).
Таблица 2.
Характеристики лекарственных субстанций_
Показатель Значение показателя
ВЛЭС АК АК измельченная
Форма и размер частиц Округлая, от 10 до 100 мкм Пластинчатая, от 100 до 250 мкм Пластинчатая, от 10 до 130 мкм
Фракционный состав 0-10 мкм - 3% 10-50 мкм - 15% 50-100 мкм - 88% 100-250 мкм -12% 250-500 мкм-0% 0-10 мкм-2% 10-50 мкм - 5% 50-100 мкм - 14% 100-250 мкм-27% 250-500 мкм - 73% 0-10 мкм - 10% 10-50 мкм - 42% 50-100 мкм - 89% 100-250 мкм - 11% 250-500 мкм-0%
Угол естественного откоса,0 56 62 60
Сыпучесть, г/с 3,0 2,0 2,8
Насыпная плотность до уплотнения, г/мл 0,56 0,747 0,765
Насыпная плотность после уплотнения, г/мл 0,653 0,902 0,906
Способность порошка к уплотнению 3,0 10,5 10,0
Коэффициент прессуемости 14,3 17,2 15,6
Влагосодержание. % 5,4 4,9 4,9
Представленные в таблице 2 данные свидетельствуют о слабой сыпучести лекарственных веществ, что делает необходимым введение вспомогательных веществ.
С помощью электронной сканирующей микроскопии получены микрофотографии частиц ВЛЭС и АК (рис. 7 а и б), показывающие разнородность формы и размера частиц веществ.
а б в
Рис. 7. Микрофотографии фармацевтических субстанций: а - ВЛЭС, б - аскорбиновой кислоты, в - аскорбиновой кислоты измельченной Для достижения однородности распределения лекарственных веществ в капсульной массе в технологическую схему производства капсул нами введена стадия измельчения веществ, которая позволяет получить изодиаметрические частицы АК (рис.7 в). I
На основе литературных данных осуществлен выбор следующих наполнителей: лактоза моногидрат, лактоза безводная, микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) 102, МКЦ 200, лудипресс, просолв, крахмал картофельный, прежелатинизированный кукурузный крахмал. Принимая во внимание, что основной компонент капсул - ВЛЭС, обладает гигроскопичностью и составляет 50% от массы содержимого капсулы, нами были приготовлены образцы капсульных масс в различными вспомогательными веществами в соотношении 1:1 (табл.3.).
Таблица 3.
Характеристика капсульных масс и капсул с ВЛЭС_____
№ состава Наполнитель в составе капсульной смеси с ВЛЭС Характеристики капсульной масс Характеристика капсул
Сыпучесть, г/с Угол естест. откоса, 0 Насыпная плотность, г/мл Распада-емость. мин Растворение за 45 мин, % (флавоноиды)
до упл. после упл.
1. Лактоза моногидрат 32,2 45 0,608 0,711 5,5 81
2. Лактоза безводная 5,6 30 0,595 0,717 5,3 84
3. МКЦ 102 38 0,483 0,609 5,1 79
4. Лудипресс 7,0 31 0,552 0,658 5,7 80
5. Картофельный крахмал 2,2 55 0,657 0,791 4,9 79
6. Просолв 4,4 46 0,460 0,560 5,0 80
7. МКЦ 200 6,7 34 0,492 0,604 5,3 78
8. Преж.кукуруз. крахмал 13,0 31 0,585 0,697 4,9 85
Из представленных в таблице 3 данных установлены оптимальные показатели сыпучести для образцов №2, 4, 7, 8, однако, состав №4, хотя и обладает хорошей сыпучестью, является неоднородным, как и образцы составов №1,3, 5, 6.
Таблица 4.
Технологические характеристики капсульных масс
ВЛЭС и АК с наполнителями
сз со СО Й Содержание на одну капсулу Характеристики капсульной массы Характеристика капсул
Сыпучесть, г/с Угол естест. откоса, Насыпная плотность, г/мл Распа даемо сть, мин Растворение за 45 мин, %
до упя. после упл.
У. ВЛЭС 180 мг: АК 30 мг: Лактоза безв. 150 мг 20,5 39 0,639 0,739 5,5 Флавоноиды - 79 Аскорб.к-та- 76
10. ВЛЭС 180 мг: АК 30 мг: МКЦ 200 150 мг 6,5 38 0,545 0,662 5,3 Флавоноиды - 77 Аскорб.к-та - 74
11. ВЛЭС 180 мг: АК 30 мг: Прежея. кукурузный крахмал 150 мг 10,2 35 0,585 0,697 4,9 Флавоноиды - 85 Аскорб.к-та - 82
Были изучены характеристики капсульных масс с комбинацией ВЛЭС и АК (табл. 4.). По результатам высвобождения активных веществ из капсул в качестве наполнителя был выбран прежелатинизированный кукурузный крахмал.
Таблица 5.
Составы капсульных масс и их характеристики
Компонентный состав Номер состава и содержание компонентов, мг в одной капсуле
12 13 14 15
ВЛЭС 180 0 180,0 180,0 180.0
Аскорбиновая кислота 30.0 30,5 30,0 ЗО.Ь
МКЦ 200 36.0 36,0 36,0 зб;о
Прежел. кукурузный крахмал 114,0 110,4 113,3 109,7
Аэросил - 3,6 - 3,6
Магния стеарат - - 0,7 0,7
Масса содержимого капсул 360,0 360,0 360,0 360,0
1ехнологические характеристики капсульной массы
Сыпучесть, г\с 10,3 11,2 12,3 13,6
Угол ест. откоса," зЗ 3i Зб
Насыпная плотность До упл. После упл. 0,585 0.686 0,589 0,693 0,589 0,697 0,602 0,710
Характеристики капсул
гаспадаемосгь, мин э,0 5,0 5,4 5,1
Растворение за 45 мин. % Флавоноиды Аскорбиновая кислота 87 83 86 81 83 81 88 82
В ходе дополнительных исследований в состав капсульной смеси для улучшения реологических показателей введены МКЦ 200, магния стеарат и аэросил (табл.5.).
Одним из показателей качества готовой лекарственной формы согласно требованиям ГФ ХП является однородность дозирования компонента, содержащегося в дозе менее 50 мг. Известно, что на однородность распределения компонентов оказывают влияние как дополнительное введение
вспомогательных веществ, так и режим смешивания. В процессе разработки состава и технологии производства капсул «Экливин» для обеспечения однородности аскорбиновой кислоты в объеме капсульной смеси нами были апробированы два режима смешивания компонентов.
Режим смешивания №1: К прежелатинизированному кукурузному крахмалу добавили АК -> перемешивали 5 мин -> к смеси добавили МКЦ 200 -> перемешали 5 мин -> добавили ВЛЭС -> перемешивали 5 мин -> добавили магния стеарат и аэросил -> перемешали 10 мин.
Режим смешивания №2: К МКЦ 200 добавили АК -> перемешали 5 мин -> добавили часть прежелатинизированного кукурузного крахмала -> перемешали 5 мин -> добавили ВЛЭС -> перемешали 5 мин -> добавили оставшуюся часть прежелатинизированного кукурузного крахмала -> перемешали 5 мин -> добавили магния стеарат и аэросил -> перемешали 10
мин.
Таблица 6.
Результаты определения однородности дозирования
№ анализа Содержание АК в образце, г Отклонение от нормируемого содержания АК,%
Режим 1 Режим 2 Режим 1 Режим 2
1 0,0306 0,0306 + 2,0 + 2.0
2 0,0251 0,0310 -13,3 + 3,3
3 0,0260 0,0290 - 16,6 -3,3
4 0,0315 0,0293 + 5,0 -2,3
5 0,0335 0,0308 +12,0 + 2,7
6 0,0313 0,0318 + 4.3 + 6.0
7 0,0279 0,0299 -7,0 -0,4
8 0,0253 0,0313 -15,7 + 4.3
9 0,0243 0,0290 -19,0 -3,3
10 0,312 0,0304 + 4,0 +1.3
По результатам экспериментов выбран режим смешивания компонентов №2, обеспечивающий однородное распределение аскорбиновой кислоты в объеме массы для капсулирования (табл.7).
В ходе проведенных исследований разработан состав капсул «Экливин»:
Наименование компонента Содержание в одной капсуле, мг
Винограда листьев экстракт сухой (в пересчете на безводную
субстанцию) (НД 54871)....................................................... 180,0
Аскорбиновая кислота (в пересчете на безводную субстанцию)
(Л СР-006666/08-150808)........................................................ 30,0
Целлюлоза микрокристаллическая 200 (ВФС 42-3728-99)........ 36,0
Прежелатинизированный кукурузный крахмал (Еиг.РЬ.)........... 109,7
Аэросил 200 (ГОСТ 14922-77)........................................... 3,6
Магния стеарат (ТУ 6-09-16-1533-90).................................. 0,7
Масса содержимого капсулы 360,0 мг
Наполнение производили на ручной капсулирующей машинке Ре1:оп (Бельгия), что позволило дозировать смесь в капсулы №0.
По результатам исследований разработана технологическая схема производства капсул «Экливин» (рис.7.).
Рис. 7. Технологическая схема производства капсул «Экливин»
Биофармацевтическую оценку капсул проводили согласно ГФ XI по тестам «Распадаемость» и «Растворение». Результаты теста «Распадаемость» показали, что среднее время распадаемости капсул составляет 5 минут. Высвобождение суммы флавоноидов в пересчете на рутин из капсул согласно тесту «Растворение» за 45 мин составляет 88%, аскорбиновой кислоты - 82%. При этом за 60 минут происходит полное растворение (100%) лекарственных веществ (рис. 8.).
О 10 20 30 40 50 60 70 80
Время, МИН
—♦ - Кривая высвобождения суммы флавоноидов в
пересчете на рутин —•— Кривая высвобождения аскорбиновой кислоты
Рис.8. Кривые высвобождения лекарственных веществ из капсул
Изучена стабильность препарата при хранении в течение 2 лет и 3 месяцев, по результатам исследований составлен проект ФСП «Экливин, капсулы». Количественную оценку лекарственных веществ в капсулах проводили: для ВЛЭС - спектрофотометрическим методом определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин (рис. 6), для аскорбиновой кислоты -методом ВЭЖХ (рис.9).
«V
2000
1900 §
I
1000
500
_______
Ек|
В 1 1 ) I 1 I Т ннк
Рис.9. Хроматограмма количественного определения аскорбиновой кислоты в капсулах
Общие выводы:
1. На основании изучения физико-химических и структурно-механических свойств лекарственных и вспомогательных веществ разработан состав и технология производства геля «Экливин».
2. Теоретически обоснован и экспериментально разработаны состав и технология производства капсул «Экливин», содержащих ВЛЭС и кислоту аскорбиновую.
3. Разработаны методики спектрофотометрического количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин при 410 нм для ВЛЭС, геля и капсул «Экливин». Модифицированы методики количественного определения гепарина (биологическим методом), количественного определения аскорбиновой кислоты (методом ВЭЖХ) и методика идентификации флавоноидов (методом ТСХ).
4. Разработаны проекты" ФСП и опытно-промышленные регламенты на производство препаратов «Экливин, гель для наружного применения» (№01899876-М-41 -11) и «Экливин, капсулы» (№01899876-Т-19-11).
5. Изучена стабильность геля и капсул «Экливин». Установлено, что срок годности препаратов составляет 2 года.
6. Методом равновесного диализа по Крувчинскому изучена кинетика высвобождения суммы флавоноидов в пересчете на рутин из геля «Экливин», установлено, что за 4 часа высвобождается 80%. По результатам теста «Растворение» установлено, что за 45 минут из капсул высвобождается 88% суммы флавоноидов пересчете на рутин и 82% аскорбиновой кислоты, при этом в 60 минутам растворение достигает 100%.
7. Проведенные токсикологические исследования геля «Экливин» показали, что препарат не обладает раздражающим и сенсибилизирующим действием. В результате доклинического изучения специфической активности геля «Экливин» установлено, что препарат обладает противовоспалительной активностью.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:
1. Сапожкова М.Б. (Каплун МБ.) Разработка состава, технологии и стандартизации мягкой лекарственной формы из сухого экстракта листьев красного винограда // Материалы IV Международной Пироговской студенческой научной медицинской конференции. Вестник Российского Государственного медицинского университета. -2009. - №3. - с.28.
2. Сапожкова М.Б. (Каплун М.Б.) Разработка состава и технологии и анализ конкурентоспособности мягкой лекарственной формы с сухим экстрактом из листьев красного винограда// Материалы Международной студенческой научной конференции «Клинические и теоретические аспекты современной медицины». - 2009.- с.70.
3. Дубенцева О.М., Сапожкова М.Б. (Каплун М.Б.), Калмыкова Т.П., Суслина С.Н. Разработка и исследование геля с композицией экстракта листьев красного винограда и гепарина // Материалы II Международной студенческой научной конференции «Клинические и теоретические аспекты современной медицины»,- 2010. - с.211.
4. Сапожкова М.Б. (Каплун М.Б.), Дубенцева О.М., Калмыкова Т.П., Суслина С.Н. Разработка и" исследование аппликационной формы с экстрактом листьев красного винограда// Материалы 4-й Всероссийской с международным участием научно-методической конференции «Фармобразование-2010» - «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Поиск новых физиологически активных веществ». - 2010. - с. 169.
5. Базаркина О.В., Грибкова Е.И., Сапожкова М.Б. (Каплун М.Б.) Рынок средств, применяемых для профилактики и лечения хронической венозной недостаточности // Consilium Provisorum. -2010. -№2 [64]. - с. 27-31.
6. Сапожкова М.Б. (Каплун М.Б.), Овчаров М.В., Хомяков Ю.Ю., Суслина С.Н., Чернецова Е.С. Изучение состава экстракта листьев винограда и мягкой лекарственной формы с композицией экстракта и гепарина методом масс-спектрометрии DART // Сборник Четвертой Всероссийской конференции-школы «Фундаментальные вопросы масс-спектрометрии и её аналитические применения». -2010. - с.98.
7. Sapozhkova M.B. (Kaplun М.В.), Ovcharov M.V., Homyakov U.U., Suslina S.N., Chernetsova E.S. The investigation of composition extract grape leafs and semi-solid dosage form with combination of extract and heparin by mass-spectrometry DART // Сборник Четвертой Всероссийской конференции-школы «Фундаментальные вопросы масс-спектрометрии и её аналитические применения». -2010 - с. 148.
8. Сапожкова М.Б. (Каплун М.Б.) Разработка методики стандартизации мягкой лекарственной формы с экстрактом винограда // Материалы III Международной студенческого научно-практической конференции «Клинические и теоретические аспекты современной медицины». - 2011- с. 176.
9. Сапожкова М.Б., Жарова Н.Г., Калмыкова Т.П., Дрогова Г.М., Суслина С.Н. Совершенствование методики определения флавоноидов в метаболоме растений и комплексном лекарственном препарате на их основе // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии,- 2012. - №5. - с.3-8.
10. Сапожкова М.Б., Калмыкова Т.П., Суслина С.Н. Исследования по разработке технологии получения противоварикозного геля // Химико-фармацевтический журнал. -2012.-№5,-с. 35-38.
11. Сапожкова М.Б., Суслина С.Н., Абрамович P.A. Разработка состава капсул с экстрактом листьев винограда и аскорбиновой кислотой // Естественные и технические науки,- 2012. - №2- с. 193-195.
Подписано в печать: 25.07.2012 Объем: 1,0 усл.пл. Тираж: 100 экз. Заказ № 67 Отпечатано в типографии «Реглет» 119526, г. Москва, ул. Новослободская, д. 20, стр. 4 (495) 971-77-88; www.reglet.ru
Оглавление диссертации Сапожкова, Мария Борисовна :: 2012 :: Москва
Перечень условных обозначений.
Введение.
Глава 1. Теоретические аспекты разработки комплексных лекарственных препаратов для профилактики и лечения хронической венозной недостаточности (обзор литературы).
1.1. Патогенез и фармакотерапия хронической венозной недостаточности
1.2. Винограда листьев экстракт сухой.
1.3. Гепарин.
1.4. Аскорбиновая кислота.
1.5. Гели как перспективная лекарственная форма.
1.6. Капсулы. Современный взгляд на лекарственную форму.
Введение диссертации по теме "Технология получения лекарств", Сапожкова, Мария Борисовна, автореферат
Создание и внедрение новых и эффективных лекарственных средств отечественного производства является одним из приоритетных направлений фармацевтической науки. В последние годы существует тенденция к разработке новых комплексных лекарственных препаратов для терапии социально значимых заболеваний, что позволяет расширить спектр фармакологической активности данных лекарственных препаратов.
Заболевания вен конечностей являются распространенной сосудистой патологией, социальная значимость которой обусловлена распространением заболевания у 15-20% взрослого населения, 40% из которых находятся в возрасте от 40 до 50 лет. Исследования, проведенные различными Европейскими научными центрами, показывают, что хроническая венозная недостаточность (ХВН) среди женщин составляет 25-33%, среди мужчин - 1020%. Терапия сосудистых патологий, таких как ХВН, включает применение в комплексе венотонизирующих биологически активных веществ, например, флавоноидов (кверцетина, изокверцетрина, кемпферола, рутина и других), содержащихся в растительных субстанциях, в том числе в винограда листьев экстракте сухом (ВЛЭС), и обладающих широким спектром фармакологической активности, описание которой представлено в работах Тюкавкиной H.A., Птицына A.B., Ереминой A.B. [35, 73, 92]. Результаты проведенных в 2004 году клинических испытаний ВЛЭС в составе зарубежного препарата Антистакс позволили выявить высокую терапевтическую активность субстанции ВЛЭС, при этом разработка новых отечественных лекарственных препаратов на его основе, как для местной, так и для системной терапии ХВН является актуальной задачей фармации.
В этой связи актуальна разработка аппликационной лекарственной формы с сочетанием ВЛЭС и гепарина, обладающего антикоагулянтной и противовоспалительной активностью, зарекомендовавшего себя в терапии ХВН [77]. При этом целесообразность разработки данного лекарственного препарата отечественного производства так же обусловлена отсутствием аналогов с данной комбинацией фармацевтических субстанций на фармацевтическом рынке. Для системной терапии ХВН целесообразна разработка пероралыюй лекарственной формы в виде капсул с ВЛЭС и аскорбиновой кислотой (АК), обладающей синергическим действием с флавоноидами ВЛЭС, направленным на укрепление сосудистых стенок.
Таким образом, разработка аппликационного и перорального комплексных лекарственных препаратов на основе высокоактивных фармацевтических субстанций для профилактики и терапии ХВН является своевременной и актуальной.
Цель и задачи исследования. Целью исследования явилась разработка составов и технологий производства геля «Экливин» с комбинацией ВЛЭС и гепарина, капсул «Экливин» с комбинацией ВЛЭС и аскорбиновой кислоты для применения в комплексной профилактике и терапии ХВН.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Разработать состав и технологию производства геля «Экливин» на основании изучения физико-химических свойств фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ.
2. Изучить технологические свойства фармацевтических субстанций и их сочетаний со вспомогательными веществами. Разработать состав и технологию производства капсул «Экливин».
3. Разработать или модифицировать методики качественного и количественного анализа фармацевтических субстанций в лекарственных формах «Экливин» с целью стандартизации.
4. На основании полученных результатов разработать нормативную документацию на лекарственные препараты - проекты ФСП и опытно-промышленные регламенты.
5. Изучить стабильность разработанных лекарственных форм для обоснования сроков годности.
6. Изучить биофармацевтические характеристики разработанных лекарственных форм.
7. Изучить специфическую активность и биологическую безопасность геля «Экливин».
Связь задач исследования с проблемным планом научно-исследовательских работ. Диссертационная работа направлена на выполнение национального проекта «Здоровье», выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ кафедры Общей фармацевтической и биомедицинской технологии Медицинского факультета ФГБОУ ВПО «Российского университета дружбы народов». Исследования проводились в рамках государственного контракта № 16.552.12.7002.
Научная новизна.
Впервые разработан и обоснован состав геля с ВЛЭС и гепарином на основании подбора системы растворителей, обеспечивающей промоцию всасывания фармацевтических субстанций, а так же системы антиоксидантов для стабилизации фенольных соединений в геле. На основании изучения технологических и физико-химических свойств фармацевтических субстанций и гелеобразователей предложена оригинальная рациональная технология получения лекарственного препарата «Экливин, гель для наружного применения». Теоретически обоснован состав и разработана технология получения капсул «Экливин», содержащих ВЛЭС и аскорбиновую кислоту, на основании изучения технологических свойств фармацевтических субстанций с различными вспомогательными веществами. В результате исследований в состав лекарственного препарата введены вспомогательные вещества, обеспечивающие необходимые структурно-механические и медико-биологические характеристики лекарственной формы.
Разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин для сквозного контроля субстанции ВЛЭС и лекарственных препаратов «Экливин». Модифицированы методики количественного определения гепарина (биологическим методом) и определение аскорбиновой кислоты (методом ВЭЖХ).
Практическая значимость работы.
На основании проведенных исследований:
Разработаны состав и технология производства препаратов «Экливин, гель для наружного применения» и «Экливин, капсулы»;
Подготовлены опытно-промышленные регламенты на производство лекарственных препаратов «Экливин, гель для наружного применения» (№01899876-М-41-11) и «Экливин, капсулы» (№01899876-Т-19-11);
Составлены проекты фармакопейных статей предприятия на препараты «Экливин, гель для наружного применения» и «Экливин, капсулы» для ЗАО «Московская фармацевтическая фабрика».
Проведено доклиническое изучение специфической активности и I биологической безопасности геля «Экливин».
Публикации материалов исследований.
По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 3 статьи, входящие в перечень периодических изданий, рекомендуемых ВАК.
Апробация работы.
Основные положения диссертационной работы и результаты исследований представлены и доложены на I, II, III Международной студенческой научной конференции «Клинические и теоретические аспекты современной медицины» (Москва, 2009, 2010, 2011 гг.), Четвертой Всероссийской конференции - школы «Фундаментальные вопросы масс-спектрометрии и её аналитические применения» (Звенигород, 2010).
Положения, выдвигаемые на защиту: результаты исследований по обоснованию составов и технологий получения геля и капсул «Экливин» для лечения и профилактики ХВН; результаты проведения комплексных исследований, включающих изучение технологических, физико-химических, реологических и биофармацевтических характеристик геля и капсул «Экливин»; результаты изучения стабильности лекарственных форм для обоснования сроков годности; результаты доклинического изучения специфической активности и биологической безопасности препарата «Экливин, гель для наружного применения».
Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.01. «Технология получения лекарств». Результаты проведенных исследований соответствуют области исследований специальности, конкретно по пунктам 3 и 4 паспорта «Технология получения лекарств».
Объём и структура диссертации.
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания методов и материалов исследования, двух экспериментальных глав, заключения, общих выводов, библиографии и приложений. Библиография включает 156 литературных источников, из них 55 на иностранных языках.
Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка комплексных лекарственных препаратов для лечения хронической венозной недостаточности"
Общие выводы.
1. На основании изучения физико-химических и структурно-механических свойств лекарственных и вспомогательных веществ разработан состав и технология производства геля «Экливин».
2. Теоретически обоснован и экспериментально разработаны состав и технология производства капсул «Экливин», содержащих ВЛЭС и кислоту аскорбиновую.
3. Разработаны методики спектрофотометрического количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин при 410 нм для ВЛЭС, геля и капсул «Экливин». Модифицированы методики количественного определения гепарина (биологическим методом), количественного определения аскорбиновой кислоты (методом ВЭЖХ) и методика идентификации флавоноидов (методом ТСХ).
4. Разработаны проекты ФСП и опытно-промышленные регламенты на препараты «Экливин, гель для наружного применения» (№01899876-М-41-11) и «Экливин, капсулы» (№01899876-Т-19-11).
5. Изучена стабильность геля и капсул «Экливин». Установлено, что срок годности препаратов составляет 2 года.
6. Методом равновесного диализа по Крувчинскому изучена кинетика высвобождения суммы флавоноидов в пересчете на рутин из геля «Экливин», установлено, что за 4 часа высвобождается 80%. По результатам теста «Растворение» установлено, что за 45 минут из капсул высвобождается 88% суммы флавоноидов пересчете на рутин и 82% аскорбиновой кислоты, при этом в 60 минутам растворение достигает 100%.
7. Проведенные токсикологические исследования геля «Экливин» показали, что препарат не обладает раздражающим и сенсибилизирующим действием. В результате доклинического изучения специфической активности геля «Экливин» установлено, что препарат обладает противовоспалительной активностью.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Сапожкова, Мария Борисовна
1. Алексеев К.В. Теоретическое и экспериментальное обоснование применения редкосшитых акриловых полимеров в технологии мягких лекарственных форм (мазей и гелей) и биопрепаратов: Автореф. дис. докт. фармац. наук. М., 1993.-59 с.
2. Алексеев К.В., Бондаренко О.Л., Демишев В.Н., Алюшин М.Т. // Особенности набухания редкосшитых акриловых полимеров// Фармация. -1988.-№4-с. 23-26.
3. Алюшин М.Т. //Роль новых вспомогательных веществ в совершенствовании технологии мягких лекарственных форм \\ Фармация 1980. - т.29.-№1-с.51-52.
4. Алюшин М.Т., Алексеев К.В., Ли В.Н. Редкосшитые акриловые полимеры в фармации // Фармация. 1986. - №1. - С. 71-76.
5. Андрияшкии А.В., Черкашин М.А. Варикозная болезнь нижних конечностей. Общие вопросы диагностики и лечения// РМЖ. Хирургия. Урология. История медицины.
6. Аркуша А.А. Исследование структурно-механических свойств мазей с целыо определения оптимума консистенции: автореф. дисс. канд. фармац. наук. -Харьков., 1982.-c.22.
7. Башрова B.JL, Демина Н.Б., Куличенко Н.А, Мази. Современный взгляд на лекарственную форму// Фармация. №2, 2002. - с.24.
8. Беликов В.В., Точкова Т.В Реакция комплексообразования в анализе флавоноидов\\ Фенольные соединения и их физиологические свойства.- Алма-Ата, 1973.- с. 168.
9. Белоусов, В. А. Характер уплотнения порошковых материалов при прессовании / В.А. Белоусов, В.Б. Федин, Н.П. Поддубная // Хим. -Фарм. Журн. -1978. -№ 3. С. 133 - 139.
10. Беляев Н., Махров В.И., Беляев С.А. Варикозная болезнь нижних конечностей (традиционные и новые технологии лечения). М., 2001.
11. Блажей А, Шутий Л. Фенольные соединения растительного происхождения,- М., 1977.
12. Богачев В. Ю. Системное лечение хронической венозной недостаточности нижних конечностей.// Consilium provisorum.-2002.-т.2.-№ 2.
13. Богачев В.Ю. // Фармакотерапия хронической венозной недостаточности нижних конечностей. //Consilium medicum.- 2003.-Т.5, № 4.
14. Богачев В.Ю. Топические (местные) лекарственные формы в лечении заболеваний вен Consilium medicum. - 2005.- т.7, №2.
15. Богачев В.Ю. Хроническая венозная недостаточность нижних конечностей: современные принципы лечения// Consilium medicum. 2003. -т.5. - №5.
16. Борзунов, Е.Е. Исследования в области физико-химической механики таблетирования лекарственных порошковых веществ/Е.Е. Борзунов//Автореф. Дисс. на соиск. докт. фарм.н. Киев, 1971. - 315с.
17. Борисенко, Ю.Б. Современное состояние и перспективы развития методов производства таблеток (производство таблеток с пленочным покрытием) / Ю.Б. Борисенко, Н.А. Бугрим // Обзорн. инф. ЦБНТИ медпром., сер. «Хим.-фарм.пром.». 1976. - № 1. С. 18 - 20.
18. Государственная Фармакопея XII издания, ОФС 42-0137-09 «Степень сыпучести порошков».
19. Грецкий В.М., Цагарейшвили Г.В. Носители лекарственных веществ в мазях — Тбилиси, 1979.
20. Гунько В.Г. Проблема рационального подбора вспомогательных веществ в мазях с учетом их назначения // Современные аспекты создания и исследования лекарственных форм: Тез. Докл. Всес. Конф., Баку, 1984. -С.87-89.
21. Государственная Фармакопея XI издания.
22. Дитковская, А.Г. Создание таблеток триметазидина методом прямого прессования / А.Г. Дитковская и др. // Фармация. 2007. - № 3. - С. 22-24.
23. Драник Л.И. Некоторые направления развития мягких лекарственных форм \\ Актуальные вопросы поиска и технологии лекарств: Тез.доклад.респ.науч.конф.,3-5 сент. 1981.- Харьков, 1981. с. 111.
24. Езерский, М.Л. Об измерении сыпучести порошков антибиотиков/ М.Л. Езерский // Хим.-фармац. журнал. 1970. - № 7. - С. 54 - 57.
25. Емшанова C.B., Рябова Л.К., Зуев А.П., Тюляев И.И., Садчикова Н.П. Разработка таблетинованной формы противотуберкулёзного препарата \\ Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2005. - №2.- с. 173-178.
26. Емшанова, C.B. Использование метода прямого прессования в технологии таблеток золпидема / C.B. Емшанова и др. // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация.- 2006. N 2,-С. 173- 178.
27. Запрометов М.Н. Биохимия катехинов. М.: Наука, 1964. - 295 с.
28. Заявка 2627113 ФРГ, А61 К9/64. Капсулы для дозированной выдачилекарственных средств и способ их изготовления /Lederer F., Meyer R.F., Bloch
29. E.; Заявл. 16.06.76; опубл. 28.01.77 //ИЗР.- 1977.- Вып. 5, N 2,- С. 109.
30. Зимина, И.А. Разработка состава и технологии препарата ноотропного инейропротективного действия/ И.А. Зимина и др. // Биомедицинскиетехнологии. 2004. № 24. - С. 83-87.
31. Калмыкова Т.П., Керманиан Ф., Охотникова В.Ф. //Разработка состава и технологии получения линимента алпизарина // Химико-фармацевтический журнал. 2003. - Т.37, №5. - С. 48-50.
32. Кириенко А.И., Григорян P.A., Золотухин И.А. Современные принципы лечения хронической венозной недостаточности // Consilium medicum. 2003. -т.5. - №6.
33. Киселева T.JI. Основные тенденции развития натуротерапии и гомеопатии а России // Традиционная медицина-2007 / Сборник научных трудов конгресса, 1-3 марта 2007 г., Москва. М.: ФНКЭЦ ТМДЛ Рос-здрава, 2007. - С. 9-14.
34. Кисличенко В. С., Кузнецова В. Ю., Ярошенко И. В. Виноград культурный. Аналитический обзор // Провизор. 2007, №15.
35. Климова Е.И. Разработка составов и технологий получения лекарственных препаратов Декоп: дис. . канд. фарм. наук. М., 2008.
36. Ковшова Н.В. Разработка состава и технологии лекарственных форм бемитила : автореферат дис. . кандидата фармацевтических наук : 15.00.01 / Н.В. Ковшова. Москва, 2009 - 22 с.
37. Коржавых, Э.А. Номенклатура лекарственных форм: справочное пособие / Э.А. Коржавых// М., 2004. - С. 126.
38. Кудрякова Э.А., Молдавер Б.Л., Марченко Л.Г., Цветкова Ю.А. // Исследование возможности получения гелей нового отечественногоредкосшитого акрилового полимера «Ареспол» // Фармация на современном этапе проблемы и достижения, 2000,-ч. 1 -с.207-217
39. Кудрякова Э.А., Молдавер Б.Л., Марченко Л.Г., Цветкова Ю.А. // Исследование возможности получения гелей нового отечественного редкосшитого акрилового полимера «Ареспол» // Фармация на современном этапе проблемы и достижения, 2000,-4.1 -с.207-217.
40. Кудрякова Э.А., Молдавер Б. Л., Марченко Л.Г., Цветкова Ю.А. Реологические свойства гелей редкосшитого акрилового полимера "Ареспол" // Фармация на современном этапе проблемы и достижения, 2000, - 4.1 - С. 212 -217.
41. Кузнецов А.Н., Богачев В.Ю., Золотухин И.А. Роль местных средств в терапии хронической венозной недостаточности нижних конечностей./ Consilium Medicum. 2007.-Т.9.- №7.
42. Кукес В. Г. Клиническая фармакология. М. 2006. - 938 с.
43. Куцик Р. В., Зузук Б. М., Дьячок В. В. Каштан конский (Aesculus hippocastanum L.) // Провизор. 2002. -№4.
44. Лакин K.M., Крылов Ю.Ф. Биотрансформация лекарственных веществ.- М., 1981.
45. Ланкин В.З. Тихазе А.К., Каминный А.И., Беленков Ю.Н., Антиоксиданты и атеросклероз: Критический анализ проблемы и направление дальнейших исследований // Патогенез. 2004,- № 1. - С. 71 -86.
46. Лечение хронической венозной недостаточности препаратом Венза /Богданец Л.И., Аракелян B.C., Сапелкин C.B., Калинина Е.В. // Ангиология и сосудистая хирургия. 2005. -т.11. - №3. - С.55-59.
47. Лоуренс Д. Р., Бенитт П. Н. Клиническая фармакология. М., 1991.
48. Ляпунов H.A., Воловик Н.В. Создание мягких лекарственных форм на различных основах. Сообщение 2. Исследование реологических свойств гелей, образованных карбомерами // Фармаком. 2001. - №2. - с. 1-9.
49. Майданник В. Г. Педиатрия: Учебник для студентов высших мед. учеб. заведений III—IV уровней аккредитации. Харьков, 2002. - 1125 с.
50. Маринина Т.Ф., Савченко Л.Н., Кононихина Н.Ф. Подбор оптимального состава основ при создании мазей защитного и лечебного действия. // Научные труды НИИФ, том XXXVII, ч.1, -1997г. Москва, с. 166-170.
51. Медведев Ж. Витамин С — средство от цинги или от болезней старости // Еженедельник 2000 2008 - т.415 - №21.
52. Методические рекомендации. МР 2.3.1.2432-08. Нормы физиологических потребностей в энергии пищевых веществах для различных групп населения Российской Федерации. 2008.
53. Мусалатов Х.А., Силин Л.Л., Бровкин C.B. Клиническая эффективность применения Лиотон-100 и Фастум-геля при повреждения мягких тканей конечностей. // Клинические исследования лекарственных средств в России.-2001.-N 2.-С.22-24.
54. Никитин A.A., И.А. Панкова// Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений.-Л.:«Наука». 1982. с. 159-164.
55. Никульников П. И., Влайков Г. Г. ,.Гуч А. А. //ХВН при варикозной болезни нижних конечностей. Патогенез. Лечение.// Здоров'е Украши. -№92. -2004.
56. Оклей Д. В., Штрыголь С. Ю. Хроническая венозная недостаточность: аспекты рациональной фармакотерапии // Провизор.- 2009.- №4.
57. Оклей Д.В., Штрыголь С.Ю., Степанова С.И. Консервативное лечение и профилактика хронической венозной недостаточности.// Рациональная фармакотерапия. 2008. - №4.
58. Папазова H.A. Разработка составов и технологии геля клотримазола и геля кетоконазола: дис. на соиск. учен. степ, к.фарм.н. (15.00.01)/ H.A. Папазова.- СПб., 2004.
59. Пилько Е.К. Исследование стабильности лекарственных препаратов и пути ее повышения. // Автореф. Дис. . д.ф.н. Москва, 1992. 58 с.
60. Покровский A.B., Сапелкин C.B. Хроническая венозная недостаточность нижних конечностей — современные проблемы диагностики, классификации, лечения // ангиология и сосудистая хирургия. 2003. -т.9. - №1. С. 13-16.
61. Птицын А. В. Технология выделения флавоноидов винограда Vitis vinifera сорта "Изабелла" для косметики и изучение их свойств: дис. . кандидата химических наук: 03.00.23/А.В. Птицын.- Москва, 2007.
62. Разуваев Н.И.// Комплексная переработка вторичных продуктов виноделия.-М., 1975.
63. Рамендик Г.И. Масс-спектрометрия // Горная энциклопедия.- 1987.- Т.З с. 266-267.
64. Раневое покрытие Гелепран в лечении венозных язв / Кириенко А.И., Шулутко A.M., Богданец Л.И., и др. // Хирургия. 2006. - №4. - С.71-72.
65. Ройман Е.В. Антитромбические средства местного применения // Справочник поликлинического врача. 2007. - №12.- с.65-66.
66. Савельева B.C. Флебология. // Руководство для врачей.- М.: Медицина.-2001.
67. Семкина O.A. Разработка состава и технологии мягких лекарственных форм эвкалимина: Дис. .к.ф.н. (15.00.01)/ O.A. Сёмкина. Москва, 2005.- 192 с.-81
68. Слепнев М.В. Технология экстемпоральных мазей с применением редкосшитых акриловых полимеров: Дис. .к.ф.н. (15.00.01) / Слепнев М.В. -Санкт-Петербург, 2004.
69. Слюсар О.И Разработка составов и технологии мягких лекарственных форм ранозаживляющего действия с левомицетином и метилуацилом: Дис. .к.ф.н. (5.00.01)/О.И. Слюсар.-Москва, 2001.- 191 с.
70. Создание мягких лекарственных средств на различных основах. Сообщение 2. Исследование реологических свойств мазей на водорастворимых основах / Н.А. Ляпунов, Е.П. Безуглая, А.Г. Фадейкина, А.А. Лысокобылка // Фармаком. -1999. №6.-С. 10-16.
71. Стойко Ю.М, Гудымович В.Г. //Топические средства в комплексном лечении хронической венозной недостаточности нижних конечностей.// Consilium medicum.- 2007.- т.9.-№ 1.
72. Стойко Ю.М., Замятина А.В.Патогенетические аспекты консервативной терапии хронической венозной недостаточности у беременных// Consilium medicum. 2007. -т.9. - №6.
73. Суслина С.Н. Разработка составов и технологии мазей и геля с маслом Витон для лечения воспалительных и аллергических заболеваний кожи: Дис. . .к.ф.н. (5.00.01) / С.Н. Суслина. Москва, 2000. - 186 с.
74. Тенцова А.И. Современные аспекты использования вспомогательных веществ в фармацевтической технологии: научн.обзор. //обзор.информ. ВНИИМИ.Сер.: Фармакология и фармация.-М. 1981.-72с.
75. Тенцова А.И., Грецкий В.М. Современные аспекты исследования и производства мазей. М. : Медицина.- 1980. - 192 с.
76. Тенцова А.П., Алюшина М.Т. Полимеры в фармации М.:Медицина,1985.-с.256.
77. Томашевская О.Ю. Фармакогностическое изучение и стандартизация иглицы шиповатой и сухого экстракта на ее основе: дис. . канд. фарм. наук. -М., 2009.
78. Берлянд A.C., Тюкавкина H.A. Стандартизация и контроль качества лекарственных средств: учебное пособие.-Москва. -2008. 384 с.
79. Ушкалова Е.А. Фармакокинетические лекарственные взаимодействия // Новая аптека. 2001. - № 10. - С. 17-23.
80. Хроническая венозная недостаточность нижних конечностей как общемедицинская проблема / Савельев B.C., Кириенко А.И., Богачев В.Ю. и др.// Consilium medicum 2004.-том 6.-№6.- с. 433-436.
81. Цагарейшвили Г.В., Головкин В.А, Грошовый Т.А. Биофармацевтические, фармакокинетические и технологические аспекты создания мягких лекарственных форм. // Тбилиси: Мецниереба, 1987.-263 с.
82. Цыганок С.С., Парахонский А.П. //Эффективность экстракта красных листьев винограда в лечении хронической венозной недостаточности нижних конечностей.//Успехи современного ествествознания.-2008.-№ 7.
83. Шашков В. С., Модин А. Ю. Проблемы экспериментальной и клинической фармакологии венотонизирующих веществ // Фармакол. и токсикол.— 1990.— Т. 53, N4.—С. 9-13.
84. Щербаков В.Г. // Биохимия и товароведение масличного сырья./ М., 1991. ЮГЯблоков Е.Г., Кириенко А.И., Богачев В.Ю. Хроническая венозная недостаточность. М., 1999. - 126 с.
85. Babar A., P. J. Chickhale, and F. M. Plakogiannis, Pharm. Acta Helv., 1991. -№66.- p.322.
86. Bagchi D., Bagchi M., Stohs S. et al. Free radicals and grape seed proanthocyanidins extract: importance in human health and deasese prevention // Toxicology. 2000. - 148, №2-3. - p. 187-197.
87. Bei Jiang, James T. Lyles, Kurt A. Reynertson, Fredi Kronenberg and Edward J. Kennelly Stability Evaluation of Selected Polyphenols, J. Agric. Food Chem., 2008, 56(20), pp 9510-9519.
88. Bell, J.R.C.; Donovan, J.L.; Wong, R.; Waterhouse, A.L.; German, J.B.; Walzem, R.L.; Kasim-Karakas, S.E. (+)-Catechin in human plasma after ingestion of a single serving of reconstituted red wine.W Am. J. Clin. Nutr. 2000.-№71.- pp. 103-108.
89. Bezanger-Beauquesne L., Pinkas M., Torek M. Vitis vinifera. Фитотерапия в современной практике.// Maloine.- 1986.-p.443
90. Bonina F. P., Montenegro L. Int. J. Pharm.- 1992. №82.-p. 171.
91. Carpentier P. H., Cornu-Thenard A., Uhl J. F. et al. Appraisal of the information content of the С classes of CEAP clinical classification of chronic venous disorders: a multicenter evaluation of 872 patients // J. Vase. Surg. 2003.- №37. -pp.827-833.
92. Chen Q., Graham Espey M., Sun A. Y., Levine M. Pharmacologic doses of ascorbate act as a prooxidant and decrease growth of aggressive tumor xenografts in mice // PNAS 2008. - v.l05 - № 32- p. 11105-11109.
93. Diez-Sales O, Garrigues TM, Herraez JV, Belda R, Martin-Villodre A, Herraez M: In vitro percutaneous penetration of acyclovir from solvent systems and Carbopol 971-P hydrogels: infl uence of propylene glycol. \\J Pharm Sci.- 2005.-№94.-pp. 1039-1047.
94. Eberhardt R. T., Raffetto J. D. Chronic venous insufficiency // Circulation. -2005.-№ 111(18).- pp. 2398-2409.
95. Golledge J., Quigley F. G. Pathogenesis of varicose veins // Eur. J. Vase. Endovasc. Surg. 2003.-№ 25 (4).-pp. 319-324.
96. Gschwandtner M. E., Ehringer II. Microcirculation in chronic venous insufficiency // Vase. Med. 2001.- №6,- pp. 169-179.
97. Hernandez-Jimenez, A.; Gomez-Plaza, E.; Martinez-Cutillas, A.; Kennedy, J.A. Grape skin and seed proanthocyanidins from Monastrell x Syrah grapes. J. Agric. Food Chem.- 2009.- №57.-pp. 10798-10803.
98. Hertog M.G., Kromhout D., Aravanis C. et al. Flavonoides intake and longterm risk of coronary heart desease and cancer in seven countries study // Arch. Intar.Med. 1995.-№155.-p.381-386.
99. Huang, D.; Ou, B.; Prior, R.L. The chemistry behind antioxidant capacity assays. \\ J. Agric. Food Chem.- 2005.- №53.-pp. 1841-1856.
100. Karadeniz F.; Durst R.W.; Wrolstad R.E. Polyphenolic composition of raisins. \\ J. Agric. Food Chem.- 2000.- №48.- pp.5343-5350.
101. Kiesewetter H., rt al, Efficacy of Orally Administered Extract of Red Vine Leaf AS 195 (folia vitis vinferae) in Chronic Venous Insufficiency. \\ Arzneimittel-Forschiing Drug Research.-2000. №50.-pp. 109-117.
102. Kubin A., Kaudela K., Jindra R. et al., Dehidroascorbic acid in urine as a possible indicator of surgical stress // Ann Nutr Metab. 2003. - v. 47 - p. 1-5.
103. Lin H.R., Sung K.S, Carbopol/pluronic phase change solutions for ophthalmic drug delivery. \\ J-Control-Release. 2000.- № 3. pp. 379-88.
104. Lubrisol. Буклет компании «Product guide and regulatory owerview», 2011.
105. Makris, D.P.; Boskou, G.; Andrikopoulos, N.K.; Kefalas, P. Characterisation of certain majorpolyphenolic antioxidants in grape (Vitis vinifera) stems by liquid chromatography-mass spectrometry. \\ Eur. Food Res. Technol.- 2008.- №226.- pp. 1075-1079.
106. Manach C., Scalbert A., Morand С., Rémésy С., Jiménez L. Polyphenols: food sources and bioavailability \\ American Journal of Clinical Nutrition.-2004.- Vol. 79.-№ 5.-pp. 727-747.
107. Mezzetti A., Guglielmi M. D., Pierdomenico S. D. et al., Increased syntematic oxidative stress after elective endarterectomy: relation to vascular healing and remodelling // Arterioscler Thromb Vase Biol 1999. - Vol. 19 - pp. 2659-2665.
108. Middleton E.Jr. Flavonoids in the living system. \\ New York: Plenum Press, 1998,- 179 p.
109. Mikirova N.A., Ichim Thomas E., and RiordanNeil H. Anti-angiogenic effect of high doses of ascorbic acid // J Transi Med.- 2008. №6. - p. 50.
110. Monograph on Vitis Vinifera L. var. tinctoria, folium \\ European Medicines Agency, committee on herbal medicinal products 2010.-ЕМА/НМРС/16635/2009/Rev. 1. -2009.
111. Moroney M.A., Alcaraz M.J., Forder R.A. et al. Selectivity of neutrophil 5-lipoxygenase and cyclo-oxygenase inhibition by an anti-inflammatory flavonoidesglucoside and related aglycone flavonoides // J. Pharm. Pharmacol. 1998. - №40. -p.787-792.
112. Nigdikar S.V. Consumption of red wine polyphenols reduced the susceptibility of low-density lipoproteins to oxidation in vivo // Am. J. Clin. Nutr. 1998.-№68.-p.258-265.
113. Pace-Asciak C.R. et al. The red winw phenolic trans-resveratrol and quercetin block human platelets aggregation and eicosanoid synthesis: Implication for protection against coronary health disease // Clinica Chemica Acta. 1995. - №235. -p. 207-219.
114. Pastrana-Bonilla E., Akoh, C.C., Sellappan, S., Krewer, G. Phenolic content and antioxidant capacity of muscadine grapes \\ J. Agric. Food Chem. -2003.- 51.-pp. 5497-4503.
115. Patent EP 1 000 603 B1 «Use of surface-active citric acis esters for stabilization flavones, flavanones or flavonoides, and synergetic mixtures, cosmetic and dermatological preparations containing them».
116. Patent US 2009/ 0130035 Al «Stabilized preparation comprising phenolic compounds and benzophenones».
117. Patent US 6485727 Method for treatment of chronic venous insufficiencies using an extract of red vine leaves.
118. Patent WO 2009/ 030151 A9 «Stabilized anthocyanin compositins».
119. Peri C., Pompei C. An assay of different phenolic fractions in wines // Am.J.Enol.Vitic. 1971. - №22,- c.55-58.
120. Personelle J., Bolivar de Souza Pinto E., Ruiz R. O. Injection of vitamin A acid, vitamin E., and vitamin C for treatment of tissue necrosis // Aesthetic Plast Surg -1998-Vol, 22-P. 58-64.
121. Porzio S., Caselli G., Pellegrini L., Pallottini V., Del Rosario M., Coppola A. et al. Pharmacol. Res.-1998. №37.-p. 41.
122. Pryor W.A. Cigarette smoke radicals and the role of the free radicals in chemical carcinogenicity // Environ Health Perspect. 1997. - 105. - p.875-882.
123. Rivero-Perez, M.D.; Muniz, P.; Gonzalez-Sanjose, M.L. Contribution of anthocyanin fraction to the antioxidant properties of wine.W Food Chem. Toxicol. 2008,- №46.-pp. 2815-2822.
124. Saito V., Hosoyama H., Agira t. Et al Antiulcer activity of grape seed extract and procyanidins // J. Agric. Food Chem. 1998. - 46.- p. 1460-1464.
125. Sargeant L. A., Wareham N. J., Bingham S. et al., Vitamin C and hyperglycemia in the European Prospective Investigation into Cancer-Norfolk (EPIC-Norfolk) study: a population-based study // Diabetes Care 2000. - vol. 23 - p.726-732.
126. Sasazuki S, Sasaki S, Tsubono Y, Okubo S, Hayashi M, Tsugane S.Effect of vitamin C on common cold: randomized controlled trial // Free Radic Res. 2010.- -№44(11)- p. 1359-1368.
127. Sinha V. R., Pal Kaur M. Permeation Enhancers for Transdermal Drug Delivery Drug Development and Industrial Pharmacy.-2000.-№26 (1 l).-pp.l 131-1140.
128. Sugibayashi K., Nakayama S., Seki T., Hosoya K., Morimoto Y., J. Pharm. Sei.- 1992.-№81.-p.58.
129. Tyler V. E. Herbal remedies//Journal of Pharmacy Technology. 1995. -V.ll.-P.214-220.
130. Van Golde PM, Sloots et al. The role of alcohol in the anti low density lipoprotein oxidation activity of red wine. \\ Atherosclerosis.- 1999.- №147.-pp.365- 370.
131. Welin-Berger K., Neelissen J.A., Bergenstahl B. The effect of rheological behaviour of a topical anaesthetic formulation on the release and permeation rates of the active compound // Sweden. Eur-J-Pharm-Sci.- 2001.- № 3. p. 309-18.
132. Xia E., Deng G., Guo Y., Li H. Biological Activities of Polyphenols from Grapes. \\ Int. J. Mol. Sci. -2010.- №11.- p. 622-646.