Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Возрастная иммунореактивность организма нутрий при вакцинации против стрептококкоза

государственная комиссия совета министров ссср по продовольствию и закупкам

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ имени К. И. СКРЯБИНА

На правах рукописи БАЛИАШВИЛИ Левам Отарович

ВОЗРАСТНАЯ ИММУН О РЕАКТИВНОСТЬ ОРГАНИЗМА НУТРИЙ ПРИ ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ СТРЕПТОКОККОЗА

16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

москва 1990

Работа выполнена в Московской ордена Трудового Крас ного Знамени ветеринарной академии имени К. И. Скрябин;

Научный руководитель — доктор ветеринарных наук, прс фессор Конопаткин А. А.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, профессор Сидоров М. А.

2. Кандидат ветеринарных наук, доцент Дзюбак А. П.

Ведущая организация — Витебский ордена «Знак Почета

ветеринарный институт имени Октябрьской революции.

Защита диссертации состоится «/$ » . М^рТ^ . . 1991 г. в «/С?» часов на заседании специализированного сс вета К-120.36.05 по присуждению ученой степени кандидат наук в Московской ордена Трудового Красного Знамени ве теринарной академии имени К. И. Скрябина (109472, Москвг ул. Академика Скрябина, 23. Тел. 377-93-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ака демии. л

Автореферат разослан « » .йрР'&р^Л^ < 1991 г

Учёный секретарь специализированного совета — 1

/^¿^едосеева Т. Н,

СЕШ XAPAKTHPiiGT'iKA РАБОТЫ

Актуальность тема. Зеторкнярвое обелуюгааийе зверовоистча при соврокелакх масштабах сто развития жоет весь?.:а актуальное значение в рентабельности звероводческих Ферм. Продукция отечественных звероводческих хозяйств занимает видное место как в t/cs-дународкой торговле, так и внутри Советского Союза.

Весьма перспективным направлением в ото:: отрасли является нугриеводство, получавшее з последние годи широкое распространение во иногих республиках напей страны з государственных,кооперативных предприятиях и в личных хозя*ствах граждан.

Однако практика эксплуатации имеющихся нутриеводпгскйи Ферм я хозяйств показывает, что одним из существенных факторов, препятствующих развит:!» отрасли, являются инфекциочкие болезни, в частности стрептококкоз. Поэтому ведутся интенспвя&е исследования по изучению биологических и антигенных свойств возбудителя стрептококкоза нутрий и изыскании э#ектавнях лечебных и профилактических средств (З.С.Андреева, А.^.БраудеД988;Л.П.Пвт ров, 1988; В.А.ЕсепенокД983; г.Michael et al, 1939; Лнсуанст.ч Парадес лаолос АртуроДЭЗО; '«¡.Р.Зашакидзе ,1990).

Б этом плане особое значение приобрело изучение исход;:сго состояния иг.глунореактизности организма как необходимо;! предпосылки правильного плакирования специхическо:: прстхлактлки ч оценки ее эс^ектлвнссти.

Цель и задали исследования. В настоящее время в нутриеводчео-ких хозяйствах иаае:5 страну успедко проходит производственно«* испытание диактиваровэкно'Ч ьакцинн против стрептококкоза нутрий, предложенной З.А.Зсепенко;.? (1238). Однако лодсо&пдс не :- ■ ледовагой о потенциальных эозькжнсстях этого препарата с позиции современных представлений об :;м::/нсреачтивнозгл орг.чи.'.гят нутрий автором не проводилось. Неясным такхе остается ро.г.оя о возрасте :.<ивотных, под.тедад/.х вакцинации, и досго?е?ЯаХ ркях шаунолсгическЛ перестройки при форгярсяанкп псегг'■"•:::-нального ию.унктета. /¡сходя из вышеизложенного, цаль :-:аьг: боты заключалась в изучении закономерностей Лорнирования ио~-расткей имчунологическон реактивности организма нутряс в сн-.о-генезе и научного обоснования возможности вкюш.*ц:.;к я.« :г?ст стрептскоккоза в икмунолсглчесяи и эпнзоотологичеекп обетованные сроки»

для дост.исеизя эго:1 пел:; необходимо было ретшть следующие ьадачл:

-цзучлть динамику гистологических показателе::, фагоцитарной рзакции, бактерицидно1.; активности и белковой карт пни сыворотки кроил у нутрн': в онтогенезе;

-дать оценку плазыоаиа-арко:, реакции в органах а&ьунной сис-■хеш, а tcji.se популяция:/. 1- и 3-лл;-а.,.оцнтов периферической кро-зл нутрлГ: в онтогенезе;

-изучить онтогенетические особенности июлунологлчеакон реактивности организма нутрий, вакцинированных против стрептокок-коза в разллчные зозристние перлода их развития;

-выяснить оптйкальние срокк вакцинации животных с учетом возрастно; лидгнорсакглвкостж и эпизоотологическ.м особенностей стрелтококкоза нутри".

Ьаучл^; коь.'.зна работа состоит в том, что впервые проведено комплексное исследоваяае физиологических, иак.уноясх'ичееккх - л биохимических показателей у нутрий в различная периода их онтогенетического развития. Определены нормативные показатели,отра-хаглцяе анунологкческа!! статус данного вала зивотнах. Подобран о^Фектлвный кетод получения лкм1сш<тов из кров.', нутрий, позво-ЛмШцйИ .чснользоьать данную суспензию ддя'ваделения и тестирований Т- л о-клеток. .йучена особенности колострального игдлуните-тн у «снят, полученных от вакцинированных против стрептококкоза омыок. Установлена особенности динамка гуморальных и клеточных ^акторов обще:: л специфической икдунореактивности у нутрий,приел 1:../, и риадлчник. возрасте и дана оценка их иммунологической зпач.писсти при стрепгококкозе. Предложены оптимальные сроки вакцинации против стрептококкоза.

Практическая ценность работы. Результата полученных исследований свидетельству*/! о том, что вакцинация нутрий против стрептококкоза в 30-4с-днеэном возрасте иььтунологичеокп и эпизоото-логпчески ооосизвада, поскольку способствует предотвращению заболеваемости и аоследушщй гибели наиболее восприимчивой возрастной группа данного вида жиеотних. Отсутствие кодострально-Го ..;.^лун,:гета к 30-ыу дн:о жизни л вполне ®£орылроьавааяся к это ¡.у возрасту лк.сунная система подтверждает целесообразность предложение? нами схе&ы вакцинации с ищунодогическах позиций.

-г-

Апробация работы. Основные положения дмссерташ! ¿:»лсжены и об-сукдены на научных отчетных ко»;ереяцкях Г.ГЗА (1938-.Л99 гг.'.на Ь'ежка'1 едраяьиом совещанка сотрудников кафедр .«гжробйологли, ш-русодогл.ч, паразитологии г лаборатории болезней молодняка. Публикации ♦ По теме диссертации опубликовано 2 статьи. Объем структура дпссертацл.;. ^иосертац/я излочока на г.гра лицах кгивгноплсвого текста ;; состоит из следующих разделов: йрс-декия, обзора литературы, собственных исследований, ойсутдсяля результатов, выводов, практических предложений. Работа сллгогрч рована 19 таблицами, II рисунками. Описок литературы содержит источников, из которых иностранных.

собственные ^следования

материалы л кетодо исследования Экспериментальная часть работы выполнена в производственных и лабораторных условиях в период 1957-1990 гг. на кафедре эпизоотологии !.ЗА и на нутриеводческо;1 ферме зверосовхоза "Гавела" Телавского района Грузинской ССР. Работа являлась частью комплексной плановой теки кафедры эпизоотологии ¡ЗА по изучению стрептококкоза нутрий (план 1ЫР 1986-1290 гг., задание 4.04).

Методическую разработку поставленных задач вели с, позиции современного учения об икмунореактивности оргаплзка аквотни*.

В опыте было использовано 403 ну г о и-", различного возраста, из них: в однодневном возрасте были исследованы 18 голов; « .19-дневно.м - 5; в 30-дневном - 124; в 45-дневном - 121; в -цкч.-ч-ном - 124; в 4-, 6-, 12-, ?л-месячном возрасте по 5 голов в каждом, а также 485 белых шдеи.

Был подобран ряд общих и специальных г.етедов исследования,-при покоэд которых можно было наиболее полно судить об изменениях гуморальных и клеточных факторов защиты э онтогенезе нутрий и в данамяке вакцинации, а также о состоянии нг..;,:унптегп к возбудителя стрептококкоза нутрий. 3 соответствии с эг.:м пр:н.:е~ нены следующие материалы и кетода исследования:

- гематологические: определение количества зригоори.'ов (улн-рух) , гемоглобина (г?), леикспитоз (тыс/'/.чл) и ле.'.ке-'п'Пр-но:"* фор^лн ('") (Кудрявцев А.А. и др., 1969; У..;. 1971);

- б.ю.сгаческие: определение количества о"ч;его ба'ка (г") и

его фракций (альбуминов, альфа-, Сета-, гаыла-глобуланов)(г:')

(ло.чдрахин ;:.П. и др., 1985);

- имлупоб/.ологические: определение бактерицидно!: активности сыворотки крови {*,), фагоцитарной реакции кейтрофилов (фагоцитарная активность, фагоцитарньй индекс, фагоцитарное число),клеточное реакции (плазмоцитарная реакция, соотноаекие Т- и 3-лим-«юцитов), уровень специфических антител (РдП) (Смирнова О.В., /узь'.глна Т. А., 195$; Зовк А..С., 1970; Покровская II., 1965; Поляков Я.Е., 1985).

- контрольное заражение животных и тест серозащита на белых

для оценки напряженности специфического иммунитета у нутрий после вакцинации и последующей оптимизации режима иммунопро -филактмки била проведена вакцинация 30 нутрий различного возраста.

вакцинацию проводили инактивированной ГОА-формолвакциной претив стрептококкоза нутрий, согласно "Временного наставления пэ применению Еакцины против стрептококкоза нутрий", одобренного научно-методической комиссией ША и утвержденного проректором по научна?, работе профессором А.З.ларовим II.CW.S8 (авторы нас таг; л ели я доцент Б.А.Есепенок, профессор А.А.донопаткин).

Вали'.нацал проволидн в два раза с 6-ти дневный интервалом' лило'.: 1 .. 1,1, -„'л внугрлкыяечно. Контрольными сроками шжуноло-г;;ческо." заа»зты организма нутрай от стрептококкоза явились 21 день и 3 месяца после иммунизации. Поскольку к настоящему времени кот объективных лабораторних критериев, отражающих напряженность пмыутгета при стрептококкозе, мы использовали какос-ноьноа тест серозачпты на белых швах и реакцию диффузной преципитации (РДП), а также непосредственное заражение вакцинированных .чйвотнах атшеаял вирулентного стрептококка группы С.

^да непосредственного зар&ыишя вакцинированных нутрий штамме;.: вяруленткого стрептококка группы С било сформировано '4 гругаш мгвотних. 3 п«рьу« волдо 15 нутрии, привитых в 30-,

11 о!;-Д1иеног.. возрасте (по 6 голов), заражение которых про-внг-одалось через Щ день посте вакцкппоки; вторую группу, аналогичную 1-0 составу, зарамалп соответственно через 3 месяца. В контрольная группах из ь з-дрггшгних лутри.: все заболели с ти-Ейчними клиничзоклИ.-.л признаками стрептококкоза и пели.

-ч-

Подопитйые кивотнке были размещены в изолированных клетках (по 5 голов) в соотзетств;!и с возрастной категорией. Условия кормления и содержания были идентичны. Заражение проводили ьнут рибркшшко суточной бульонной культурой вирулентного штзкма "К" стрептококка в объеме 1,0 мл, что составляло (10 ^д^) ЮСООм.т. За животным-.! велось клиническое наблюдение в течение 20 дней с учетом количества заболевших и павших.

Сыворотки, полученные через 21 день и 3 месяца после вакцинации нутрии в 30-, 45- и 60-дневном возрасте вводили внутри-бршинно по 5 белы?/1 шлам в дозе 0,5 г/л при одновременном введении 0,5 мл внутрибрюшпнно 10 высоковирулентной культуры стрептококка группы С (5000 м.т.). Б качестве контроля слукили сыворотки аналогичных возрасти« групп (по 3 головы в каждой) непривитых нутрий. Клиническое наблюдение за подопытными кашами велось в течение 5 дней. При этом учитывались показатели заболеваемости и летальности.

3 экспериментальной части работы ог подопытных и контрольных животных взято 720 проб крови, 78 из них было использовано для гематологических исследовании; 81 - для биохимических исследований; 169 - для определения бактерицидной активности; ЮЭ для проведения фагоцитарной реакции; 108 - для определения популяции Т- и 3-лимфоцитоз; 78 проб сыворотки для тесте сероза-щпты на белых шах; 37 - для РДП и 132 пробы материала (селезенка, лимфоузлы внутренних органов, туловища и регионарные) -для цитоморфологического исследования.

Экспериментальные материалы математически обработаны в соответствии с методическими рекомендациями Е.¡Л.Маркина (1330).

Формирование возрастной иммунореактивнооти организма нутрий в онтогенезе

Исследования были направлены на комплексное изучение возрастных изменений: морфологического и белкового состава крови, ее бактерицидной активности и фагоцитарной реакции, плаз:,унитарной реакции з лиг.хроидных органах и содержания I- и З-лхЛз-цитов в крови со дня рождения до 6-месячнсто и з дзух группах 12- и 24-месячного возраста.

Для постановки опыта взяли 27 однодневках щенков гутрил. В первый день исследовали 10 :цошссп, при. достххеняи 15-дто-

ного, 1-, 2-, 4- и 6-месячного возраста исследовали по 5 голов. Отдельно бнло сформировано две группы нутрий 12- и 24-месячного возраста по 5 голов в каждо:'; группе. Всего было использовано 37 нутрий.

Динамика показателей морфологического состава крови. У нутрий наиболее значительные изменения в уровне изучаемых показате лей происходят в первые 4 месяца жизни. Число эритроцитов возрастает за этот срок с4,71+0,II млнДжл до 7,97+0,11 иян/мкл, концентрация гемоглобина увеличивается с 10,12+0,21 г7, до 15,82+ 1,4 г'1. Минимальные значения этих показателей приход1 лтся на 15 день. После этого срока количество эритроцитов и гемоглобина повышается а соответствует: в 1-мнсячном возрасте 5,66+0,13 ылн/ккл и 9,60+0,59 т% и в 6-масячном возрасте - 8,26п),07 млн/мкл и 15,44+0,11 г1. ' .

Количество лейкоцитов в течение первого месяца жизни нутрий с 6,12+0,31 тыс/мкл увеличивалось до 8,76+0,15 тыс/мкл (Р<0,05), а затем постепенно уменьшалось, достигая к ¿-месячному возрасту 5,82+0,33 тыс/мкл (Р<0,35). Кровь новорожденных щенят имела непрофильный профиль, сменяющийся в первые две недели жизни резко лищюцитарным (41,22т£ ,21:1), который сохранялся до 4-ыесячного возраста. У взрослых нутрий на фоне явной тенденции к уменьшению количества лейкоцитов, увеличивалось процентное содержание нелтра^илов, особенно сегментоядерных, а количество лимфоцитов уменьшалось до 43,52+1,44» (12 мес.). Возрастные количественные изменения других клеток белой крови нутрий были незначительными.

Результаты изучения возрастной динамики белкового состава сыворотки кропи. Оощее количество.белка в сыворотке крови и его фракции в онтогенезе претерпевают существенные изменения. У новорожденных нутрий до приема молозива в сыворотке крови количество общего белка весьма низкое - 2,10x1), 07 г^. После сосания матерей его концентрация значительно увеличивается, особенно в первые сутки жизни щенят, и к 15-му дню достигает шкси&альной величины - 5,0x1),6 г-*. По мере роста щенят белковый уровень постепенно снижается и достигает к .¿-месячному возрасту о,56+ 0,06 И (Р<0,05). После отъема концентрация общего белка вновь увеличивается до 6,07+0,5 г1 (Р< 0,05) и на таком уровне сохраняется до взрослого возраста (12-^4 мес.).

3 сыворотке крови однодневных щенят количество альбуминов уменьшается до 16,20+0,62? (при рождении - 21,30+0,411 Р<0,05), затем закономерно повышается, достигая к ЗО-дневнопу возрасту 51,43+0,73i. У взрослых особей содержание белков этой фракции вновь уменьшалось до 38,01+0,14? - 40,20+0,311. У новорожденных нутрии до приема молозива в сыворотке.крови преобладают глобулины - 73,721, из них альфа-глобулины - 59,40+1,211.

3 ранний неонатальный период концентрация альфа-глобулинов уменьшается до 19,01+0,611 (Р< 0,05). и на этом уровне сохраняется почт:; во все периоды онтогенеза, за исключением 1-месячного возраста, когда находили их уменьшение - 13,67+р,52з(Р<0,05).

Своеобразные изменения происходят с гакма-глобулиновой фракцией. Ее появление связано с приемом молозива. 3 первые ке сутки низ ни количество гамма-глобулинов достигает 45,42+0,93'-! (Р<0,01). К 15-му дню лызнл этот показатель снизился до 18,41+ 0,41j и оставался низким до месячного возраста (13,23+0,301).й последующие сроки исследования количество гамма-глобулинов постепенно возрастало, составив в 2-месячном возрасте 15,21+0,42?, в 4-месячном - 20,41+0,50, в 6 месяцев - 23,82+0,63',?, в 12 месяцев - 22,53+0,4К и в 24 месяца25,01+0,52?.

Таким образом, в сызоротке крови установлена прямая зависимость мезду концентрацией общего бйлка и гам/л-глобулинамп ;j обратная между общим белком и альбуминами.

Бактерицидная активность сыворотки крови и характооистика фагоцитарной реакции. Было установлено, что у новорожденных пенят до приема молозива сыворотка крови обладает более низкой бактерицидно:-1 активностью, а нейтрофилы крови проявляет атабкЛ фагоцитоз к обоим тест-клкробак: к E.C0IÍ бактерицидная активность сыворотки крови была 11,31+1,971, а $агоцитарная активность неЯтрорлов - 17,5+0,31; со стрептококком гр. С эти показатели были соответственно 10,56^1,391 к 12,5+0,6'. Через сутки эти показатели резке чозрастала: с B.CoIS бактеркиядная активность - 39,81+3,14,1 и «фагоцитарная активность - 36,0+1,4'' и со стрептококком гр. С соответственно 29,54+3,351 и 2,3,1+2,-У'. J-»-тем эти показатели относительно E.C0IÍ сохранялись на довольно высоком уровне в течение всего срока нзблздензя кч?.>. Несколько иную картину наблэдали в п\:>г/нолог г-:еско'. позьегг ке организма относительно стрептококк®, гр. С. Н^ютрл г:а го,

что дйнсшка фагоцитоза а бактерицидной активности крови в первые'15 дней характеризовались в обоих случаях аналогично;", зако-номеоностью, цифровые значения показателей, со стрептококком были значительно ниже, г в возрасте 1-8 месяцев изменения в сторону увеличения были недостоверны (Р >0,05)• Полученные данные свидетельствуют о менее выраженных адаптивных факторах естественно"' резистентности организма нутрий к возбудителю стрептокок -коза, по сравнению с.килечной палочкой.

Развитие плазмоиитарно" реакции льшюидных органов ¡;утоии. Анализ данных, отражающих, плазмоцитаркую реакцию в онтогенезе (табл.1), показал, что у новорожденных ще"нков в селезенке находится не более 23 клеток плазмоцитарного ряда. С возрастом у нутрий общий уровень плазмоцитарной реакции закономерно и достоверно повылался, пои этом имлунобластическая активность наиболее выра-йенно проявилась в 1-4-месячном возрасте в селезенке и лимфоузлах внутренних органов, туловища 1: головы, а в о-' и 24-месячном - в лимфоузлах тазовых конечностей, ¿атем процесс дифференцпровки плазмобластов в сторону зрелых плазматических клеток заметно усиливался. Зрелые лащециты'в отдельных лимфоузлах составляли 30-40«, что указывало на переход реакции в • илазкецнтарную. В селезенке же этот процесс начинался уке с 15-дневного возраста.

Первое возрастное усиление в селезенке плазмоклеточной реакции в 15-дневном возрасте «окно объяснить появлением в организме продуктов метаболизма, возникающих в результате коренного изменения обмена веществ после рождения (стресс-реакция новорожденных) и поступления в организм извне гетерологических антигенов, к которым организм нутрий не имеет материнских антител. Повторное усиление плазмоклеточной активности после 2-ьчзсячиого возраста, видимо, было связано с ослаблением и пос-леду£Ц,нм полным угасанием колостралььсго ик/унитета, после отсадки щенков'.

Зозп'.сгявк характеристика популяции Т- и '¡-клеток^перп^ь-рпческой крови нутрий. Болыуо ч^огь лш; оцптсв цеьксв неона-т:1г.ьного возраста составлю» Т-клетк.: (5,;,1^>,С») л кеньлуы -Н-клсТкп и-,5,1^0,0 ;). ;; месячному возрасту состяоленле обеих популяций лии оилтов находилось прпцерно ья одинаковом уровне (45,4^1'-■), а затем проаоходпло постепенное их изменение в

Таблица I

Плазмоклеточная активность селезенки и лимфатических узлов в онтогенезе

Органы и ткани

3 о з р а о т

Лимфоузлы тазовых конечностей

Лимроузли туловища п головы"

Лиыаоузлн внутренних орга нов

Селезенка

¡1 дн. !1о да.! I кес. !:г мес.!4 мес. !бмес. !13мес. !24мес

-&)' - 36 оЗ 34 63 64 73

I 3 5 7 33 аЗ

— - ее 31 83 75 35

4 12 8 • 9 У 34

- _ 122 131 146 95 13о

' 7 ¿5 13 ■1 З'З 36

137 144 1У-1 15'7 11а 1.3

0 7 31 ?и 39 За 4а: <18

Примечание: числитель - клетка илазмониторпег о ряда знаменатель - зрелые плазмоциты х) - материал не исследовался

сторону увеличения 3-клеток (до 63,4мЕ,Ь'а) и уменьшение г-л.л.;-фоцитов (33,3+1 ,&?.). Такая закономерность свидетельствует о более выраженных Т-клеточных реакциях иммуногенеза иа ранней стадии развитая организма нутрии. Преваларуюдал пролааерация З-лимроцитоз в более поздние сроки, по-видимому связана с интенсивным поступлением в этот период .у из ни различных ант..генных раздражителен.

Состояние материнского (пассивного) иммунитета у денят,полученных от вакцинированных в период беременности самок. 3 процессе изучения особенности передачи специфических антител от матери потомству было установлено, что а сыворотках новооожден-ных кенят до сосания матерей препппитннов не содержатся, а через сутки уровень антител .уже составляет 1:34- - 1:1.:3, что соответствует таковым у матерел в период менс-ния.

:1а 30-а день ж,:зни Щенков распределение тигров нарьирега-;ю в пределах 1:4 - 1:64, паи законешрном дальне.наем онисенпп к отъему 1.-3 Щг,*

Следующий эксцср:а.енг бил направлен на изучение панаектна-

. них свойств сыворотки щенят в дунашке подсосного периода, а также выявление возкожиой коррелятивной связи между их иммунологической защитой и уровнем специфических антител. Полученные результаты показали, что при введении белы;.'; мышам сыворотки, полученной от ¡денков на 30-?., 45-!1, 60-И дне аизна, все зараженные стрептококке,V: май погибли в течение 3-х дней, причем положительно" коррелятивно;': связи между уровнем антител в РДП и их зккуяологаческо;; защитой не отмечалось.

Результаты изучения иммунологической реактивности организма щенят Еутря!*„различного возраста пои вакцинации против стоептокоукоза. 3 данной серии опытов сравнительно изучали поствакцинальнке реакции и состояние иммунитета у щенков нутрий, привитых в 30-, 45- и 60-дневном возрасте ГОА-форколвак-циней против стрептококкоза.

3 морфологическом составе крови у животных, находящихся в опытных.и контрольных группах достоверных различий не отмечалось (р>0,05). Изменения количества гемоглобина и эритроцитов в опытных и контрольных группах нутрии в течение всего срока исследования фактически отражали динамику этих показателей в онтогенезе. Так, если до вакцинации количество гемоглобина и эритроцитов составило 9,6+0,3 г%\ 5,7+0,1 млн/мкл (I го); ИД; 0,5 т%, 6,7+0,1 млн/мкл (П гр) и 11,4+0,1 г%, 6,9+0,1 млн/мкл (Ш гр), то к 20-му дню после вакцинации соответственно 10,0+0,.' гй; 6,4+0,7 млн/мкл (I гр); 10,9+1,2 г%; 7,0+0,4 млн/мкл (П гр' 11,7+0,5 т%; 6,9+0,1 г/дн/мкл. 3 то же время, сопоставляя качественное соотношение лейкоцитов, обмечали особо выпаленный на 15-20-й после прививки закономерный лейкоцитоз у всех подопытных животных. До вакцинации количество лейкоцитов составляло 8,8+0,1 тыс/мкл (I гр); 8,6+0,3 тыс/мкд (П гр); 7,9^0,2 тис/мг_ (и! гр). К концу срока наблюдения эти показатели находились в пределах 23,1+1,8 тыс/мкл (I гр), 26,7+0,1 тыс/мкл (П гр) и 26,8+Ш,7 тыс/мкл (Ш гр). Независимо от количественных изменений лейкоцитов у всех привитых нутрии проявлялся моноцитоз (3,5+0,1£ - I гр.; 3,4^0,3-2 - П гр., 3,5+0,2? - ¿1 гр.) против исходного (2,Эч),2.'; 2,7+0,1^; 2,1+0,11).

3 поствакцикальны? период количество палочкоядерных лейкоцитов закономерно возрастало, в особенности у животных I и П групп, с Ю-го пс день наблюдения. Однако к 20-1,у дню эти

показатели у зсех животных находились примерно на одном уровне 10,2+0,72 (I гр.), 10,5+1,21! (П гр.), 10,Он!,91! (Л го,).

Бактерицидная активность сывороток крови у вакцинированных нутрий закономерно возрастает во всех опытных группах к обоим тест-микробам. Однако динамика этих показателей различна. По отношению к Е.СоИ после резкого увеличения бактерицидной активности сывороток крови на 1и-й день поело вакцинации этот показатель в дальнейшем не изменятся. К 20-му дню бактерицидная активность в 1-й группе составила 58,41+0,305; во 2-й группе 56,81+С,2'5; в Л-Г: группе 59,31+1,73'! С? > 3,05).

Несколько иную картину наблюдали в-процессе изучения бактерицидно!- активности сыворотки крови з отношении стрептококка группы С. После резкого возрастания бактерицидно.': активности сыворотки на 10-й день (с 15,91+3,ОН до бо,71+3,31? в I груп-•пе; с 16,11+2,03« до 69,01+4,ОН во В группе и с 15,82+;;, 57.» до 65,83+4,014 в Ш группе) этот процесс не прекращался, в результате бактеркцйдность в отношении стрептококка оказалась намного выше по сравнению с таковой к Е.ОоН . В результате, на 20-й день исследования эти показатели составили в 1-й группе 92,32+0,оН; во П-£: группе 90,32+2,32?; в ¿-й группе 93,42+ 2,01'?, что свидетельствует об избирательном действии сывороток вакцинированных нутрии к 51гер1:ососсиа г^»»« С-

Характеризуя динамику фагоцитарной реакции в организме непривитых нутрий, следует отметить выр&тсеннув Лагоцитарную активность лейкоцитов по отношению к Е.ОоН (42,01+1,91) в сравнении со стрептококком группы С (21,44+1,22). 3 дальнейшем после вакцинации наблюдали обратную картину: незначительное увеличение фагоцитарной реакции в тест-системе с д.Сои (в I группе ¿А - 48,01^1,42; во П группе - 49,01+1,5; в 0 группе -47,83+1,51;.СП в л группе - 5,61+0,22; -во П группе - 5,21+0,52; в 1Л группе - <1,31+0,31; в I группе - 4,22+0,32; во П гр. -5,1110,31; в й гр,- 4,11+0,21) и отчетливо выраженное - со стрептококком группы С в I гр. - 59,33+0,31; во П гр. -1)4,01+2,31; в Л гр. - 57,31+;;,21; в I гр. - 3,71+0,31; во II гр. - о,72+0,4 ;; в Л гр. - 7,1x^,22; -Л в ,. гр. - 5,11+0,63; во П гр. - о.Ох+О.о;.'; в Л гр. - 4,»3x0,81). Причем, абсолютные показатели а 1-й, П-п л .:1-й группах практически не отличались на Ю-1:, 15-;' и -2С—.> дп.: исследования (Р>0,05).

-а-

Анализ полученных данных приводит к выводу, о закономерных изменениях бактерицидной активности'и д-агоцит&рной реакции в крови вакцинированных: против стрептскоккоза нутрий, причем OTU показатели в конкретно:»; случае отражают не только сбиую.но и специфическую перестройку организма.

Количество общего белка у ккмуниззрованных против стрепто-коккоза нутрий на протяжении всего эксперимента было выае, чек у непривитых. 'Лопчегл, независимо ст возраста нивотных, находящихся в опытах, достоверная разница в динамике этого показателг не установлена (?70,05). Наиболее значимым по степени проявления и длительности было изменение концентрации гагд/а-глобулино! Эта фракция у всех привитых нутрп"; повысилась на 10-й. день цунизация до 28,84),7 в I-; группе, 29,84,5 во П-Р. группе; 27,32.0,1 в .П-л группе, и оставалась на относительно высоком • уровне в последующем.

У а;енят 30-днсвного возраста количество альфа-глобулинов составляло I3,6^0,5'S, в 45-дневком возрасте - 19,4+0,31, в 60-дневно;л возрасте - k2,C+Ü,4#, На 10-8 день после прививки во всех подопытных группах эта фракция белка возросла: в 1-й группе - до 25,0x0,5?, во П-;т гр. - до 23,44,7?, в ш гр. -до 25,14,21!. К 20-му дна исследования этот показатель закономерно снижался и составил з 1-й группе 21,3+1,5:3, во П-й группе 22,7+0,4=?, в d-Я группе 21,2+и,7>.

В противоположность динамике альфа- и гамма-глобулиновых фракций в процессе иммуногенеза, в I-": и П-й группах количество бета-глобулинов снизилось после вакцинации, а в Ш-п группе, наоборот, повысилось. Причем исходные цифри (до вакцинации) составляли различные величины: I гр. 18,7+0,4'^; П - 18,3+0,51; Ш - I4,6+0,2¿. количество альбуминов у нутрий, вакцинированных против строптококкоза, на протяжении всего эксперимента было ниже, чем у контрольных(невакцинированных) нутрий..Белковый коэффициент через 10 дней после вакцинации снизился с 1,08 до 0,40 в 1-Я группе, с U,83 до 0,43 во П-й гр. и с 0,96 до 0,44 в Ш-п группе. •

Клеточная реакция организма нутрий в процессе иммуногенеза. Результаты исследования свидетельствуют о развитии плазг.ю-цктарной реакции на IQ-2 день после прививки,в регионарных и

-М-

отдаленныхлжроузлнх, а также сжм ante. активно оно

протекала в лимфоузлах, регпопарм-.л к :.ecvy bi-f-xu-;т.-. - :сол;;-'=-ство иммунокомпетентных клеток i» средне?-: у?.э;;;:-; i.n".:n в 5-¡Q раз и достигало числа 330-355. ■ ц:•.• v ¡.т:.л;-и-;ть дов^ьно активное участие в а'жуномой-ояоглнеохо^ лрс-дееое се.'.<чз«;к если до вакцинации з 50 полях зрения у&хоянтл -I';-'- .-лиг;лое;<;1<? клетки, то к 10-му дню их количестве у^ллЧйиаяе.'У. дс -и на таком уровне оставалось в точение всего осс-ч.ч наел Зравшп'бдышй анализ плаэмоклеточно1 ип.п: » зи.-.нлл.о;.-;/ о: возрасти©'/ кат»ггор::д по/;влты<: jubotkoc U'w д.1:., >.. ль., ■•:■ - ^i1.-' показал, что изменения а морфогенезе- зльл&ткчесг.:.: чгм.".л (,— !07 cuaoci'&e'.t.oie количественные л качественнее пс:-.; .vi---■ . >л-ределяютоя оба»." закономерность».

Отражая динамику;!- .: Р-лнм^ошлрр в гн-р.-: L1_1LI

закцинлреваиных нутрии, следует отметить :<з:, ин^нг.с- ;•. .;i;.c-_í-яии клеточных элементов у всех яивотных, паходлл.'.-'сч в <..-,•;..,

з сторону возрастания Т-лимфоцитов по orno пен/.:;) 'j-'tac ;•>:. •____с

прививки эти показатели равнялись в ЗС-дневнок lAípnev'.': Т -II, II, В - 45,9-í; в 45-дневном возрасго: Т - 40,1"', Ъ ~ Н з" 60-дневном - Т - 38,421, 3 - 54,981, а через 10 дней вакцинации соответственно в перъо::- группе: .Т - 7i,I1, > -w второй: 0- 66,31, 3 - 23,11; в третьей: Т - 52,1?, 3 -52,4?. Б дальне''аем относительное количество 3-лимфоцитов пос-?епеано увеличивалось, однако преобладающими клетками за весь 1ериод наблюдения оставались Т-лиадсциты.

Результаты экспериментального заражения и тест серозааип: ta белых мышах. Тест серозациты на белых мшах показал, что !ри вакгшацаи нутрии в 30-дневном возрасте их сиворотка, по-гученкая на 2L-\: день после прививки, завдала белых ыздеН пуп .кспер:!ыенг,альио]» зарнчеили вирулентное культурой стрептококка, [есколько кеньае vao иасюлеваэмоатл на 1.2,0^,по летальнсста -:а 33,3»), чом сиволотка .лпвоплл:, вакцднкревантгх в более отар-.ем возрасте (55 л 60 дна.':). Через 3 месяца после вакцинации аболеваемость в 1-:'. группе (нугр-и, вакч-шлрозанлко в 30-днев-ом возрасте) составила в,0'\ л.л'лльносгь - ¿с:,С •; но второй нутиии, вакцинированные л 4э-дкеаноь. яозразте) - 12,0''. л 16,7?; третьей - £0,0". и 2О,о' соответственно. Эти показатели во сех контрольных группах в период доследования были достаточно

стабильными и в среднем составляли по заболеваемости 87,7+7,7: и по летальности 89,9ёо,3?.

Результата проверка иммунитета методом экспериментальном заражения нутрий показал/;, что в 1 группе через 21 день после вакцинации им\;уиными оказались все зараженные сзоби. Однако, клйняюск^е наблюдение за животными выявило среди зараяеншх в оО-дковиом возрасте 2 головы (на 8 к 1С день) с признаками угнетения, отсутствием аппетита, повышением температуры тела на 1,2°0 и носов ,... истечением серозного характера. Через 2 дня эти симптом;-: исчезли.

Аналогична?, клинический симптомокомплекс наблюдался у ед: ничных животных и в двух других возрастных группах (45 и 60 дней), что кокет быть свидетельством недостаточно сформировавшегося илцуклтета к этапу сроку.

Наличие иммунитета через 3 месяца после вакцинации отмечалось практически у всех животных, причем одинаковой напряженности. Тем не менее и в данном случае в каждо;: возрастной группе находилось по одному животному с признакам;; легкого недомогания л серохно-слизпстого истечения из носа в течение 2-; дне;!. Не исключая коррелятивной зависимости между клиническим состоянием нутрий и показателями их кммунореактнвности, нами была взята кровь от всех заболевдих животных (7 голов) для последующего определения бактерицидно;'; активности сыворотки и постановки фагоцитарно;'; реакции. Контролем служили сыворотки одновременно привитых, клинически хдоровых нутрии (7 голов 3 качестве тест-микроба использовали микроорганизм.", стрептоко; коза группы С штамм "К". Полученные результаты свидетелъствов: ли о достоверном расхождении средних величин в подопытных гру] пах (Р<0,05). Бактерицидная. активность сыворотки крови от болыых животных составила 36,5+2,7.?, фагоцитарная активность 29,7+1,2:'!. Клинически здоровых соответственно 91,8+0,31 к 5о,1>1,С'?, что подтверждает ранее выявленную нами закономерность с наличии положительно!; коррелятивной связи мелсду напряженностью иммунитета и .этими показателями у привитых против стрептококкоза нутрий.

-М-

У Ы 3 0 л

1. ¿ия нормального ||-изаолох'..ческого ¿оотоккхя '.'релого организма иутраК характерны еледу;.ъ:.к; гематологические пскилатзлл: содержание эритроцитов 7,5-8,1 млн/мил, т"'я.:ог.".с.бкпз - -3,015,1 г", лейкоцитов - о,о-7,Ь Тис/ыа у. яеитрооильный ^рсщгль яейкоп.ормулы. Наиболее зкачтаыше йзкенекпд в ь.ори логкчос-ком составе кров;; происходят в ранни"! (¿'-16 да.) нсеп'.г'лыгии период их раз-чггпя: увеличивается количество лейкоцитов, лейкоцитарные- прарилъ крови становится резно лш^оцчт&пнш.; 1,21:;!) и" сохрпнн&тся до 4-цес.тшого возраста.

2. Протеинограмма коворакдеииих ¡';он:-'.ов нутонп

ся низким содержанием общего белка (.1, [0+1»,и? ггО и и-.:"•/готяп ?м гамма-глобулинсво": фракция. 3 неопг.т.'льнк!' период ...ез.;с во. растает количество общего белка (у,о.)п'),-'.3 г*5) преягц'.тизт; ••н:>с .чд счет гаша-глобул/.нов (4о,4^,Э г'). Н-злх.: ято£ .рзпц.-.', и специфические антитела (преципитив^) к Ж).;с5уд. «-л* .лрепо-коккоза, щенки нутряЗ полуют о коло-t-.se и.

3. У' шейков нутрий отъемного возраст.'.. (1-.-. :,;;с.) о.ч:-:„•.•,'..; г-ся протеинемия (о, 36+0,10 г % ?< с, и-) за счет уг-лглй»» >.;;« .V» л.;-чества гаика-глобуланов (:3,«31Э,31) в рез^ль-;:..-^ Салдов.^: коэффициент с 0,х9 увеличивается до - ,03. .фг. .с.» ,< месячном возрасте способствует увеличений общего оллкг. и сыворотке крови в основном за счет га.'.^л-глобулинолой ?р,-«кпйй.

4. Плазмонптаркая активность ^п.:/.уноко;.:петентаыд. органов и тканей нутрии иеснаташюго возраста выр.тгена слабо г. нсс/.т плазмобластпческ.;й характер. О возрастом .-.'.изо?них прол.Фирац.1л и ди-рференцировка клеток плазкопатарного ряда в сторон)" зрзлых форм усиливается и к :';-м месяцам достпг'ает уровня, своГ.стьенно-го для взрослого организма. После при вошек ГОА-фсриолвякчпк;.;' против стрептококкоза и?луношр?>огенез наиболее алпшю ¡троте-кает в лимфоузлах, регионарных к ¡.-¡осту введения жишлш, ; в селезенке, причем независимо от возраста вакцинированных животных (в .30 дн., 45 дн., 60 д.ч.), достоверной раль-цч в характере плазмоцнтнрно..1 реакции не. уотаноилеио.

Р. В периферическс" крови нутрий на рааяе;. стзда.: ризьат;.я основную часть лищоцитов составляют Т-клзтка (6^,1^0,5?). К 30-дневноку возрасту соотношение поиуляцлЗ Т- л В-лимфоцитов находится на одинаковом уровне. 3 более старшем возрасте пре-

вгигдрувдгаг. явллмгся З-л/лооавгк 133,4+1 .

6. Установлена кеодхгсгаовая закеиекликссть в динамике бакте ригидной активное/я кронх и йагоцлтзркой реакции но отношению ; С.Сол-с и с^;г'ер1ососсиз г^» 3. Ви.'шат зависимость ме:?,1у эткш декэзатзл.'.:. ! (о тссг-к,ульу.уро: С1гвр*оеоосиа гр. С) и нап-рдчч'кность;;; лммуь/.гета у гЛ'кцнннрораннкх против стрептококкоза нутрий -

7. Из уеглчоБлгчо пат.слтельнс-'. яоррсляг/вноЛ свуяи мозду пргьсктпьнлмл свойств:.:/с-'воротки нутрий -с ы:.г. гр. С

и ууовкем пигцппп:.'руичин антител, применительно к тосту серо-защптн на белых г/нлмх. и связи с чем реакция ди'хузионнон пре-аипиацлй не кшег служить при стренгококкозе критерием сценки ик/-,'нологическсго статуса, организма, прлвнтях :;с:во гных.

8. Закызнапгл нутрий поогив стоеатококкоза в возрасте Зи-45 к 60 дней: кс оказывает отрицательного влияния на иммунобиологические показатели организма и приводит к (нормированию прочного итауннтета. Пра зксперикентольнок заражении таких, животных не выявлено достоверной разницы в напряженности их ки^ните-га.

9. Вакцинация нугриГ в всзрасте30-45 дней аимунологлческа к эплзоотолсгически обоснована, поскольку предохраняет от заболевания и последующей гибели наиболее восприимчивую к стреп-тскоккозу возрастную группу кивотных, а также не препятствует проведению профилактических прививок против других инфекционных болезней.

Сведения о практическом использовании полученных автором научных результатов

1. Материалы изучения р-изиологичсских, биохимических и иммунологических показателей у нутрий в онтогенезе переданы ветеринарному отделу Еверопрома СССР для дальнейшего расдростра-Н01ШЯ среди ветеринарных специалистов нутриеводческю: хозяйств, в качестве справочного материала при оценке клшкко-пъмунологи-ческого статуса.

2. Данные диссертации били использована при разработке "Временного наставления по применению вакцины против стрептококкоза нутрии ^ормолтадроокисьалгаглршиевой".

-и-