Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Устойчивость возбудителя казеозного лимфаденита к физико-химическим и биологическим факторам

3 од

I ЛПР |593 улнистеротво сельского хозяйства а ярэдовольстзхя

Российской Федерация

Саокий государственнкЗ ввторкиарнна институт

На правах рукопасн

ЗАЕОЛОВДК Александр Вэсильезяч

Ш 615:616-002,71:636.3

устойчивость боббудитвш казеозного лишдщпа К ФЯЗИКО-ЖЙЧЕЯШ и шошгзческиы фактора?.!

16.00.03 - вогарвнараая изкробяологая.Еарусогогяя, спязоотсяогвя, маколохет и тшунологдя

АВТОРВГЕРАТ

дяссвртащш на согсканяо ученой степени кандидата ватеряяарных наук

Омск.1993

Работа выполнена на кафедре ветеринарной макробиологии,вирусологии к иммунологии Омского государственного ветеринарного института в 1989-1992 гг.

Научный рукоасдитель

Заслуженный деятель коуки Российской Федерации, доктор ветеринарных наук, профессор Н.М.Колшев

Официальные оппоненты:

Доктор ветеринарных каук,профессор В.Г.Ощэпков Кандидат ветеринарных наук, старыкй научныЗ оотруднкк В.Н.Аржакоа.

Ведущая организация - Казанский ордена Ленина ветеринарный институт им. Н.Э.Баумана.

Защита диссертации состоится * 1993 г. в

/

10 часов на заседании епоцналяаировапкого совета К 120.48.01 ири Омском государственной ввтершаряом институте (644007, г.0мск-7, ул.0ктябрьская,92).

С диссертацией ыокно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан _1993 г.

Ученый секретарь специализированного _

совета, кандидат ветеринарных наук, / )

допент Б.М.Барабанов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Казеозний лиыфаденит овец, как инфекционная болезнь, известен ветеринарным специалистам с конца прошлого столзтея и .зарегистрирован во многих странах ыира.

Возбудитель был впервые описан в 1888 году французским ветеринарным врачоы Эдмондои Исвдор Зтвеи Нокардом. Три года спустя (1891), в Будапеште Пуго фон Прайц выделил едш&чную бактерию из абсцесса почка овца» и возбудитель стал извэстен как Bacillus

Preles-Iiocard.

В настоящее время этот микроб входит в группу коринефоршшх бактерий и называется Corynebacterium pseudotuberculosis ( а

болезнь, вызываемая этим возбудителем, .- казеозннм лимфаденитом. Болезнь ш*еет в настоящее время тенденция к распространению, протекает, .энзоотически и наносит значительный экономически!» ущерб овцеводству ( С.С,Brown, Н.J.Olander,1987J.

Способность возбудителя казеозного лимфаденита выживать в почва и на предметах среды обитания овец обеспечивает ого долгое присутствие во Енешней среде. В то se время известно, что яэ одного грамма гноя вскрывшегося наруяу гнойно-некротического очага больной овцы выделяется Ix ТО4 - 5х107 микробных клеток ^pseudotuberculosis ^ что С0Эдаат условия для заражения здоровых животных ( H.R.Nairn, J.P.Poberteon,1974).

. В Австралии казаозиыЯ лимфаденит стал основным заболеванием овец. Только по этой причине в семидесятые годи США, Канада, Англия и Япония отказались от экспорта баранины. Это обстоятельство привлекло внимание ученых к проблеме казеозного лтафадонптя ( 3.3.Sutherland et nl.,19G7).

В нашей стране до настоящего времени проблеме казеозного лимфаденита не уделялось должного внимания.

Омский государственный ветеринарный институт определил приоритетное направление по изучению этой проблемы. В институте создана лаборатория^которой ведется более 10 лет научно-исследовательская работа по комплексному изучению казеозного лимфаденита, изысканию новых методов диагностики, мер борьбы и профилактики.

Остаются недостаточно наученными вопросы, связанные с рас-прострарением болезни в различных природно-климатических условиях. В отечественной и зарубежной литературе имеются разноречивые сведения о выживаемости .возбудителя казеозного лимфаденита овец в объектах внешней среды. Не научена полностью его устойчивость к физическим, химичаским и биологическим факторам.

Все это затрудняет выбор правильного направления по уничтожению возбудителя казеозного лимфаденита в Энзоотических очагах.

Рель и задачи исоле,довзкиЙ. Целью дисоертационной работы явилось изучение выживаемости возбудителя казеозного лимфаденита овец в объектах внешней среды, определение его устойчивости к физико-химическим и биологическим фактора! и разработка режимов дезинфекции кошар;

В соответствии о этим были поставлены задачи:

I. Изучить сроки выживаемости возбудителя казеозного лимфаденита овец в объектах внешней ореды.

. 2. Изучить устойчивость возбудителя казеозного лимфаденита овец к некоторым физическим, химическим и биологическим факторам.

3. Определить чувствительность корянебактерий я хямиотера-певтнческим препаратам. ''

4. Определить бактерицидные концентрации дезинфектантов на

С. р«гис1о1;и'!'ггси1о''.1г.

5. Изучать влияние дезинфоктантов на ультраструктуру корянебактерий. '

6. Изыскать двзипфектанты и разработать режимы дезинфекции кошар, контамшшрованннх возбудителем казеозного лимфаденита овец.

Научная новизна работ». Впервые в условиях Сибири изучена выживаемость С. раси<1о1:иЪогси1о81з в объектах внешней среди и определена устойчивость к физическим, химическим и биологическим факторам.

Определена чувствительность корзнебактерий к химиотерапезтз-чэским препаратам.,

. Изучена ультраструктуряая характеристика корпнебактерлЯ после воздействия дезинфектантов. .. •

Разработаны способы я параметры дезинфекции нсгаар пря казеоз-нсм ли?4>аденита овец с использованием различных препаратов.

Прпктпчеокоя и теорета^зокпя ркпчпмость работа, Установлена закономерность устойчивости корзнебактерий в зависимости от действия физических, химических и биологических факторов внешней среди, Установлена.динамика,изменения .в. структура клеток коркне-бактеряй а зависимости о-т концентрация дезинфектантов. .

На основания дашшх, подменных з результате исследований, разработаны рекомендация по дезинфекции зивотноводческих поые-пеш;Д пря казеознсм дэлфадензто осея»

А/щсфция работы. Основные материалы диссертационной работы доложены на Ученом сосете Омского государственного ветеринарного института (1991-1292 гг.), Е Всесоюзной научной конференции цо эпизоотологии (г.НоЕосЕбарск,19Э1), Межрегиональной конференции молодых ученых, посвященной 40-летпю Киргизского сельскохозяйственного института (Бишкек,1952)..

Публикации. По материалам диссертации опубликовано пять печатных работ.

. Объем работн и структура. Диссертация изложена на 240 .страницах машинописного текста и шмочает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов,выводы, практические предложения, список литературы и приложение. Работа иллюстрирована 46-ю таблицами, 20-ю рисунками и 97-ю фотографиями,

СОБСТВЕКШЕ ИССЛВДОБАШШ

Мдтдридлц п >,-етонн идследор.арий. Исследования проводили с 1389 по 1992 год в лабораториях кафедры микробиологии, вирусологии и шллунодогни Омского государственного ветеринарного института и в овцеводческом совхозе "Память Мельникова" Черлакского района Омской областа.

Объектом исследований являлись овцы, а также помещения (кошары) хозяйства, неблагополучного по казеозному лимфадениту.Отбор проб патологического материала проводился на Омском,Исиль-кульском к Калачшюком мясокомбинатах.

Материалом ясследовааия служили .четыре музейных штамма: с.рзси <1оЬиЪргои1ос18 74, 146, 70, 209, дедоннровашша в П1КИ

М.В.Заблотных, Н.М.Колычевым и И.Г.Трофиыоакм, а такие штаммы с.pai»uaotuborculo.3i.- д| 37, 51, 69, 214, 220, выделенные от больных овец в хозяйствах Омской области, отнесенные по гомологии пуклеоидвнх последовательностей ДИК к трем основном группам (1,П, Ш) (Б.А.Фошш, С.К.Артшин, Й.С.Борясв-нно, И.Г.Трофимов,1989),по фенотипическим признакам к м-5-J- формам (Ю.Заболотннх,1989). Для сопоставления в лабораторных. и производственных опытах использовали контрольно-санитарные штамин rjt.aureui 20SP и n.coii i-t?.

Выделение и культивирование коринебактерий осуществляли на мяеопептонком агаре (ГШ), кровяном агаре (КА), кроЕяном теллурп-товом агаре (КТА), снворогочно-теляуритовом агаре (СТА) и мясопептонном бульоне (МНЕ), рН сред 7,2-7,4.

Для изучения викиваемостк коринебактерий во внешней среде использовали почву (стерильную и нестерильную).

Образцы стерильных и нестерильных почв, коитаминиронанные двухмиллиардными взвесями o.pseuaotubercuio.iiK из расчета 0,1 мл на I г почвы, помещали в жестяные банки высотой 15 см и вкапывали в почву избранного участка на уровне ее поверхности. Таким образом, указанные образцы проб находились в естественных условиях.

С нелыо выделения 3,pseudotubprcnioíd.i из почв проб использовали общепринятые методики о применением питательной среды -сывороточно-теллуритового агара.

Для определения выживаемости культур возбудителя казаозного лимфаденита в воде брали стерильную и нзстеряльнув отстоявпутя воду. Проводили ее обсеменение смывом двухсуточной ягзроее^ культуры и хранили при различных тег-яерятурннх услояиях. Периоличсии;;

(через месяц) из образцов воды делали высевы по 0,5 мл на чашки Петри со средой СТА.

Для изучения сроков выживаемости'штаммов иа поверхности железа, дерева и бетона брали тест-объекты размером 10x10x2 см. . В день постановки.опыта, на теот-объекты наносили взгесь кори-небактерий 2хЮ9 ы.т. по 0С0 мутности с ияактивиров.анной сывороткой лошади, используемои в качестве белковой запиты,в соотношении 1:1 по дйа миллилитра на тест, равномерно распределяли с помощью пипетки в стерильном боксе до полного высыхания. На аналогичные теот-объект.ы наносили .суспензию гнойного содержимого очага от больной овцы, содержащую С.раеи<)о<:иЪегси1о81о, разведенную 1:10. 0,5$-ным раствором иаи1 . Тест-объекты устанавливали под навесы.

С обсемененных тест-объектов.периодически путем.смыва тампонами брали пробы и производили посев на питательные среды МПА, ШБ и СТА,КТА.. . .

Выживаемость культур о.рвеийогиьогсЩогЛп в патологическом материале изучали путем взятия очагов из пораженного органа больных овец,которые хранили в условиях холодильной камеры (-Ю-12°С), при комнатной температуре (+18,+24°С) и в условиях внешней среды.

Выживаемость о .р« »ибо 1; иЪ о г с и 1 о я 1 я определяли путем высева из патматериала на питательные среды (СТА и ШБ).

. Колониеобразущув СПОСОбНООТЬ КУЛЬТУР С.раеиЗофЬегси1ов1.п

и концентрацию микроорганизмов в гнойное содержимом-специфических очагов изучали при .¡закладке и. через каждый, месяц хранения.

Для определения сроков выживаемости возбудителя казеозного . лимфаденита в глубокой несменяемой подстилке брали соответствуйте

пробы на глубине 5-10 см и помешали в колбы объемом 200 мл,часть которых стерилизовала в течение ЭО минут приЯ27°С и 1,5 ат; затем наносили 2-миллиардную взвесь корияебактерий и хранили в пе-оташпшаемом помещении в условиях, приближенных к кошарам.

Еизнесдособность с.рвоийо-ЬиЪегеигоЩп опредоляли в стерильных фекалиях овец путем контаминярования их возбудителем с последующим погружением кусочков фекалий в МПЕ и культивированием прй(37°С в течение 5 суток к с пересевом на СТА.

Определение устойчивости штаммов С.рзеи<1о1:иЪегси1ос1п 8 нагреванию на водяной банэ в сравнении с санитзрио-контрольными микроорганизмами: стафилококком и килечной палочкой, - проводили по методике: "О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики", утвержденной Государственным Агропромышленным Комитетом СССР 7 января 1987 г.

Изучение действия солнечных и ультрафиолетовых лучей на с.рзеи-аогиЪегси1огг1в проводили путем подсчета колоний, образовавшихся на питательной среде после воздействия лучей и культивирования в течение двух суток при +37°С, сравнивая с количеством образовавшихся колоний в контрольных чашках, но подвергнутых обработке.

Устойчивость-чувствительность коринебактерий к химиотерапев-тическим препаратам изучала методом диффузии в агара с.помощью бумажных дисков (антибиотики) и методом серийных разведений в жидкой питательной среде (антибиотики, сульфаниламиды и нитро-фураны). ... .

Изучение бактерицидных свойств дезинфицирующих препаратов на с.рясиао-киЪогси1оо1я проводили по методике, утвержденной Главней

управлением ветеринарии Госагропрсма СССР от 7 января 1987 г.: "О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики".

Исследования включали 6 этапов:

- приготовление взвеси коршебактерий;

- приготовление батистовых тестов, обсемененных корвнебакте-риями;

- приготовление серийных разведений испытуемых препаратов;

- определение бактерицидного разведения препарата;

- определение действия дезинфектаитов на субмикроскопическпо структуры С.рвеийо*иЬсгси1оя1о в бактерицидных,пороговых и минимально переносимых концентрациях в сравнения с санитаряо-нонтроль-ными штаммами стафилококка и кишечной палочки; .

- оценка бактерицидной активности дезосрадств на поверхности тест-объектов. .. ..

Производственные опыты по испытанию эффективности дезссредств были проведешь » овцеводческом совхозе "Память Мельникова" Чер-лакского района Омской облэстз, неблагополучном по казеозному лимфадениту овец. .

Перед дезинфекцией проводили обследование кошар (стен,железных конструкций, Еерегородок из дерева) на контаминацию микроорганиз мои рода корянебактерлй.

Проверка качества дезинфекции проводилась прямым методом по штаммам с,рпеиДоЪиЪстси1оп1п и косвенный контроль качества дезинсекции проводила работники Черлакской районной ветеринарной бактериологической лаборатории.

Дезинфекцию проводили влажным методом (ДУК) при отсутствии янвотных.

Математическую обработку проводили по специальным программам "Вар-Ан-2И и "Достоверность I" (Астанин Л.Н. и др.,1986) на программирующем калькуляторе MK-6I.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАН!!?!

Выживаемость 0.рзaud оtubcrculо"iв в поЧГ.е, вопе. на одшртах. дереве, ботоне. кэлезэ, в патологическом материале. подстилке и Фекалиях, Изучение выживаемости птанмов C.pecudotuberculorio в стерильной почве о учетом почвенно-климатичеокях, сезонных особенностей показалоtчто коркнебэктерак з стерильных почвах могут выживать от S52 до 518 суток, а вирулентность штаммов может сохраняться до 210 суток, однако в период длительного пребывания в почве онижается способность восстанавливать теллурит калия.

В нестерильней почве срок выживания коринебактерий сокращается до IBO суток.

Корипебактерин способны вшивать в опилках от 25 до 220 суток, в зависимости от температурных факторов.

На дереве, бетоне и железе продолжительность выживаемости с биологической защитой превышает 94 суток.

В подстилке и фекалиях овец чистые культуры, по нашим наблюдениям, могут жить в сапрофитном состоянии более года (срок наблюдения) и размножаться.

Коринебактеряи в вода при темперят-ре +24°С вы.^ииагт боляе 490 суток (срок наблюдения), сохраняя при этом свои брологичосга»1 свойства до высыхания воды. Б замороженном состоянии лпгио

сят стадию кристаллизации (120 размораживаний) с сохранением биологических свойств и выживают более 662 суток (срок наблюдения).

Установлено,что в одном грамме гноя в очагах пораженных органов (печень, легкие, лимфатические узлы) содержится от Зх107-10" микробных тел возбудителя со всеми биологическими свойствами. При длительном хранении патматериала и плюсовых температурах (+20°С-24°С) и в условиях внешней среды гнойные очаги, содержащие с.ряси-йо^иЪегси1оа1п , подвергаются воздействию различных факторов, в том числе высушиванию, что приводит к снижению числа кизнеспособ-ных клеток и на 320-390 сутки коринебактеряи погибают.

. Примером длительного хранения - более 1421 суток (срок наблюдения) могут служить гнойно-некротические очаги, содержащие С.раеийо1;иЪегси1ос1о в холодильной камере (-Ю-12°С). В этих условиях микроорганизмы, находясь в анабиотическом состоянии, хорошо сохраняют свои культуралыше, тинкториальные, биохимические и вирулентные свойства, легко поренооят многократное размножение (более 200 раз).

Устойчивость с«расиаогиЪегсигоа1а к ацт?»биотикам.дульФанилд-м1'1тнь'м и нитоо^уранорым препаратам. При изучении устойчивости С.р8с-адо*:иъогси1ос1з к 15 антибиотикам методом дийузпл в агоре с применением дисков установили, что наиболее чувствительны п -Формы, менее 11-формы. Наибольшей устойчивостью обладают з-фор-мы.

Ьыло установлено,что с,рпсиао^ЪсгоиХов1о устойчивы к поли-мккелну И, стрептомицину, ристомяця.ну, оксацяллину, умеренно чувствительны к неомипг.ну, бензилпенициллину, ампициллину,, чувстви-толыш к гентаыипину, лавомацетину, линкомицяну, тетрациклину,эрит-

ромицину, монсмицину, олеандомицину и карбенициллину.

Наиболее сильным бактерицидным действием к штаммам с.рвтло-гиЪегси1оя!з обладают гентамицин, этолий, терепеутан, граиици-дин С, цефперазон и фосфоыигшя. Нктрафураны (фурациллан, фу раз о-лидон, фурадонин, фуракрилин и фуркос) оказывали такое ке действие, как антибиотики. Из группы сульфаниламидов (сульгин,фтало-зол, сульфадикетоксин, норсульфазол, трибрисен, микс-10) мотаю выделить комплексный препарат микс-10, а из макролидов - тилан, которые в концентрации 11,27 мкг на I мл оказывали бактерицидное дейстЕие.

Устойчивость с.рясиаогиЬегсц1оа1я к нагреванию. Наии исследования показали,что возбудитель казеозного лимфаденита является устойчивым и выдерживает температуру +60°С от 30 до 45 минут, температуру 65°С выдерживает от 10 до 20 минут и 70°С - до 2 минут в зависимости от форм, н-формы более устойчивы по сравнению с J -формой и Б -формами.

Устойчивость значительно возрастает при биологическо? защите микробных клеток в виде инактивировашюй сыворотки крови лошади и суспензии гнойного очага, содержащего возбудителя казеозного лимфаденита овец.

Устойчивость кошшебактеаи?* к 'действию солнечных и ультрафиолетовых лучдй. При влиянии солнечных ультрафиолетовых лучей на суспензии культур без защиты и с защитой, мы отметили различия в бактерицидном действии при увеличении экспозиции. Абсолютная гибель микробных клеток наступала при воздействии солнечных лучей через СО минут, УОЛ- более чем через 30 минут.

Устойчивость к УФЛ агаровых культур и микроорганизмов в суспензии гнойного очага показывает более высокую устойчивость микробов из суспензии гноя.

Разработка методов обеззарат-ивания врзбудителя казеозного лимфаденита в объектах внешней' соелн. В лабораторных условиях была изучена устойчивость девяти штаммов С.рпоиао1;иъсгси1оп1з к наиболее часто применяемым в производственных условиях дезинфицирующим средствам: едкому натру, лизолу, глутаровому альдегиду, формальдегиду, хлорамину Б, осветленному раствору хлорной извести, содержащий активного, хлора, феносмолину и щелочному отходу гальванического производства одного из Омских заводов.

Исследования методом серийного разведения показал;!,что чувствительность изучаемых штаммов зависела от форм: з -формы и кишечная палочка более чувствительна к растворам дезинфектантов. Более устойчивыми оказались -т -формы, Л -формы, а также стафилококк.

Однако наблюдается вариабельность бактерицидного действия препаратов, на С.роеидо^Ъ®:гси1оя1а в зависимости от вида и концентрации дезинфектанта. Так, 0,728*-ный раствор едкого натра является бактерицидным для штаммов с. ра еиаогиЪегси! о.-п г- для т. аигеив - 1,02^-ная и б.сои - 0,189. Бактерицидное действие лизола на штаммы с.роеиаоШЪегсиХое1о и усигсив отмечено в концентрации - 0,928, а на кишечную палочку - .0,472.

Более низкие бактерицидные концентрации отмечены у глутаро-вого альдегида на с.рпе^о1;иЬегси1о.';1я _ 0,132, стафилококк -0,185, и кишечную палочку - 0,094.

Бактерицидным для c.paeudotubercuionto я at.rureus оказался 0,51^-ный раствор формальдегада, для ".coll - 0.714.

Высокая чувствительность штаммов «.pacudotubercuioeis отмечена к раствору хлорамину Б - 0,0586$, стафилококка, кишечной палочка - 0,0418$.

Несколько ниже бактерицидная активность осветленного раствора хлорной извести, она составляла 0,52$ для c.paoudotubereiUonie 0,189, 0,135 соответственно для 3t.aureus п е.coll.

Раствор феносмолйна, оказывал бактерицидное действие на c.pseudotubcrcuioflia и ¡St.aureus в концентрации - 0,371, на й.сои _ 0,135.

Бактерицидная концентрация для штаммов коринебактерий,стафилококков и килечной палочки щелочного отхода гальванического производства аналогична бактерицидному действии едкого натра.

Нашими исследованиями установлены закономерности з устойчивости штаммов к дезосредствам в зависимости от фено--и..генетических свойств. Штамм 70 R - по устойчивости к дезосредствам не отличается от стафилококка, в то время как птамми А'.'" 209 П, 220 я, 146 5 были менее резистентны, чем стафилококки, но (?< 0,05) более устойчивы, чем кишечная палочка, т.е. занимают промежуточное положение.

Штаммы ii№ 37J , G9 3 , 74 П, 214 R , 61 Я менее устойчивы, чем стафилококки и не отличаются по чувствительности от килечной палотал.

Действие едкого натра, лизола, йеносмоляна. глутапового альдегида на тльтраструктуру клетки о.рз cud otubarcшоя

Сравнительный анализ коринебактерий различных штаммов: 37-?

и 146 8 , 70 н ; стафилококка и кишечной палочки после воздействия лизолом различных концентраций (минимально переносимой,пороговой и бактерицидной) показывает, что лизол действует на изученные нами штаммы бактериальных клеток следующим образом: нарушает ультраструктуру клеточной стенки и цитоплазматической мембраны, что усиливает проникновение его внутрь клеток, резко уплотняет цитоплазму к действует на ДНК, А затем разрушаются клетки: путем лкзиаа, либо образования плотных бесструктурных форм, лишенных клеточной стенки и нуклеоида..

Феносмолин в минимально переносимой и пороговой дозе вызывает значительные изменения коринебактерий всех трех штаммов, а также стафилококка и килечной палочки.

У всех исследованных нами бактерий при пороговой и бактерицидной дозах локально или на значительном протяжении разрушается цитоплазкатическая мембрана. Такие, нарушения поверхности слоев приводят к двум процессам. Часть цитоплазмы выходит наружу через поврежденные участки, что наиболее выражено у стафилококка, а де-винфектант проникает в глубь клеток. Следовательно, феносмолин вызывает разрушение клеточной стенки, первоначально влияя на ее осмиофильные слои (липидные компоненты),- а затем цитоплазматической мембраны. Проникая в цитоплазму, вызывает изменения, и агрегацию белоксинтезирующего аппарата клеток с последующим локальным лизисом этих участков. Характер изменения нуклеоида варьирует как у различных штаммов коринебактерлй, так и у стафилококка и кишечной палочки. Процесс разрушения завершается преобладанием мелких плотных бесструктурных образований без клеточной стенки » нуклеоида и

возникновения ¿газированных. форм.

Глутаровый альдегид в минимально переносимой дозе но впаивает выраженных изменений в изучаемых бактериальных клетках.

Увеличение концентрации глутзропого альдегида до пороговой и бактерицидной вызывает постепенное уплотненно цитоплазма и нуклео-ида и затем приводит к появлении различных деструктивных форм.

Бактерицидная и в определенной степени пороговая концентрация изменяет динамику процессов связывания.глутарового альдегида с веществами ¡слетки. Увеличивается скорость связывания и образуются грубые нестойкие комплексы, что проявляется в ультраструктурной организации клеток н виде разнообразных форм их распада.

Проведенные нами исследования потазываат, что едкий натр уже в минимально переносимой концентрации вызывает глубокие изменения клеток корикебактерий и кишечной палочки. Деструктивные процессы протекают очень быстро, захватывая все клеточные структуры.

возбудителем кззеозного дгвм$;аденита..

Разработка параметров дезинфекции в лабораторных условиях показала,что высокую бактерицидную активность на тест-объектах (железо, дерево, бетон) с (белковой) защитой проявили следующие растворы: едкий катр 4$-ной концентрации, 4^-пый Феносыолин, 5$-ннй лизол, 2^-ный глутаровый альдегид, 2*-ный формальдегид, 3*-ный раствор хлорной извести, 2^-иый раствор хлорамина Б к 3$-ный раопзор отхода технической щелочи. При снижении концентрации вышеперечисленных растворов приводило к выделению штам/оо С.рэбшю*;иь<?геи1оз1в 0 изучаемых обгектов.

Производственные опыты по дезинфекции кошар в совхозе "Память Мельникова" испытуемыми дезосредстваыи а отработанных в лабораторных условиях концентрациях показали.что 4$-ный раствор едкого натра наденно обеззараживает кошары при расходе I л/м^ и температуре 70°С в течение трех часов." Такой же результат показал и 5%-ный. раствор лизола при расходе. I л/м^ и экспозиции 6 часов. 4/ь-ный раствор феносмолияа .проявлял высокую бактерицидную активность в лабораторных условиях, но недостаточную активность на поверхности тост-объектов в производственных условиях. Повышение концентрации феносмолина до Ъ% соответствовало высокой бактерицидной активности, при которой все .тест-объекты были обеззаражены.

3^-ная концентрация раствора отходов промышленной.щелочи не обеспечивала в производственных условиях 10С$ гибели исследуемых культур на тест-обьектах, повышение концентрации до 4$-тов соответствовало высокой степени качества дезинфекции.

выводы/

X. Полученные данные о длительном сохранении о.рвеисюгиъегси-в 0бъеадах внешней среды дают основание обратить внимание ветеринарных специалистов на проведение комплекса мер, направленных на уничтожение коринебактерлй в объектах животноводческих ферм, так как .своевременно не обеззараженные объекты могут быть одной из причин длительной стационарности очага инфекции и эпизоотических вспышек. .. .

2. Сроки ввдвания возбудителя казэозного лимфаденита овеп находятся в зависимости от фенотипических свойств штаммов,структуры

объектов, в которых находится микроб, условий хранения я биологических сеойств защитной среды.

Ц.рзс\:с1о^йогои1оя18 способен выживать в почве до 513, водо -490, опилках - 94, дереве - 109, бетоне - 03, железе - 69, патологическом материале - 1407, подстилке - 66 и фекалиях - 512 суток.

3. Нагревание бактериальной взвеси а воде до температуры £0, 65, 70°С вызывало гибель с.раеи<1огиЪегси1оэ19 в течение 45, 20 и 2 кинут соответственно.

Прямые солнечные и ультрафиолетовые лучи в 99,8$ случаях инак-тивируат штаммы 0\рясиао^Ъегси1аз1о з точение 60-30 минут.

Устойчивость штаммов к физическим факторам повышается з зависимости от характера защитной среды.

4. Бозбудптель с. рзеи<1огиЬегси1ся!з устойчив к полимихсану .',!, стрептомицину, ристомишшу, оксацпллину. Умеренно чувствителен к неомидину, бензилпенициллину, ампициллину. Чувствителен .к гентами-цяну, левомицетину, олеандомицкну, ланкомкдину; тотрацкзуио« мицияу, карбонигошшяу и моноыицину.

5. Наиболее сильным антимикробным эффектом в отношения корине-бактерип обладают ген.тамицин, отоний, терепеутан, грамицидин О, цефперазон и фссфоккцин. Препараты, из катрафурановой группы: фура-цнллин, фуразолздон, фурадонин, фуракрзшш, фуркос.оказывают примерно одинаковое бактерицидное.действие. При сопоставлении препарата Микс-10 и сульфаниламидов (сульгин, фтазозол, сульфометодокслн, норсульфазол, трибрисен) наиболее выраженное бактерицидное действие показал комплексный препарат Микс-Ю.

Г{ -формы корянебактерай более чувствительны к антимикробным препаратам, чем 3 -формы.

6. Из дезинфицирующих препаратов наибольшей бактерицидной активностью по отношению к корияебактериям обладает хлорамин Б. По силе бактерицидного действия за ним следует феиосмолин и глутаровый альдегид. По убывающей - лизол, хлорная известь, едкий натр, отход щелочи, формалин.

7. Электронно-микроскопические исследования показали,что бактерицидные концентрации разрушают ДНК и структурные элементы клеток, пороговые и минимально переносимые концентрации вызывают менее выраженные изменения в структуре клеток коринебактерий. ... ,

Я -формы коринебактерий менее подвержены действию дезвнфектен-тов, чем и в-формы... ...

8. Эффективными средствами для дезинфекции к опар при казеозном лимфадените овец являются: 2%-тй раствор хлорамина Б, 2'1-ный раствор глутарового альдегида, 4^-иый раствор едкого натра, подогретого до 70°С, 5^-ный раствор лизола, 5^-аий раствор фекосколина, 3$-ный раствор хлорной извести, 2^-най раствор формалина и 4^-ный раствор -/ехнического отхода щелочи.

9. Полученные результаты дают основание считать,что контрольно--санитпрьь'м макроорганизмом при проведении текущей дезинфекции в неблагополучном по казеозному лимфадениту овец хозяйстве должен служить стафилококк.

При контроле качества заключительной дезинфекции целесообразне использопать прямой метод обнарукекня коринебактерий (посев на сывороточно-гедлурлтовый или кровяной теллурйтовый агар).

практические шадошаи

I. Для дезинфекции объектов внешней среда контаминированных

возбудителем казеозного лимфаденита овец, предложен 4%-ныЪ раствор технической щелочи (отходи гальванического производства) ПС

О

завода транспортного машиностроения г.Омска) из расчета I лДг и экспозиции 3 часа.

2. Разработаны влаяныа методы дезинфекции кошар,неблагополучных по казеозному лимфадениту овец. Предложены:

- 5^-ная .эмульсия лизола, I л/v?, экспозиция б часов, 4.^-ныИ горячий (70°С) раствор едкого натра из расчета I л/м"* при экспозиции 3 часа и 5%-ная эмульсия феносмолина из расчета I л/м2 при экспозиции 3 часа, а также 2$-ний раствор хлорамина Б,3$-ный раствор хлорной извести, 2%~тШ раствор глутарового альдегида и 2%-аи% раствор формальдегида при расходе I л/ы и экспозиции 3 часа.

3. Материалы по ультраструктурэ G.pnpiidotub'-re-яi"1,устойчивости их к физико-химачвским факторам, а такге методы дезинфекции при казеозном лимфадените применяются а учебном процессе кафедр микробиологии и эпизоотологии Омского государственного института ветеринарной медицины я рекомендуются для использования в других зооветеринарных учреждениях.

СПИСОК ШУЕЯШШЕиХ РАБОТ

1. Заболотных А.Б., Заболотных М.В. Выживаемость возбудителя казеозного лш^аденитя овец в объектах внешней среди // Тезиса дсклздое И! Всесоюзной конференция по эпизоотологии.- Новосибирск, 1391,- С.361-363.

2. Трофимов И.Г., Заболотных A.B., Захаров В.Д,-. .Чесиог-

ский А.К. Применение отходое промышленного производства для дезинфекции животноводческих помоиенкй /У Омский центр нвуч.»о-?-хнй-

ческой информации, Омск,- 1991.

S. Трофимов К,Г., Борасенко И.С., Киселев Е.В.,Заболотных A.B. Колония-образующая способность чистых'культур c.peeudotuberculosie и концентрация микроорганизмов в гнойном содержимом специфических • очагов при казеозном лимфадените овец // Распространение, лечение я профилактика инфекционных и инвазионных болезней кивотннх: Науч. тр./0мСХИ,1993.-В печ)

4. Трофимов К.Г., Киселев Е.В., Борисенко И.С., Заболот-

ных A.B. Устойчивость возбудителя казеозного лимфаденита к ультрафиолетовым лучам // Распространение, лечение и профилактика инфекционных и инвазионных болезней животных: Науч.тр./ ОмСХИ.- Омск.-1993.-В печ.

5. Колычев Н.М., Трофимов И.Г., Ощелков В.Г., Заболотных A.B., Заболотных М.В.., Борисенко И.С., Ватутин A.A., Фомин Б.А. Казеозный лимфаденит овец // Журнал Ветеринария. - В сеч.

¿йл/. uz ?и/> JOO СПи /9«3г.