Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Устойчивость тутового и дубового шелкопрядов к болезням и неблагоприятным факторам среды

НАЦИОНАЛЬНЫ)! АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ УКРАИНЫ

РГЗ 0/1

На правах рукописи

ГОЛОВКО ВАЛЕРИЙ АЛЕКСЕЕВИЧ кандидат ветеринарных наук

УДК 638.252 +638.22

УСТОЙЧИВОСТЬ ТУТОВОГО И ДУБОВОГО ШЕЛКОПРЯДОВ К БОЛЕЗНЯМ И НЕБЛАГОПРИЯТНЫМ ФАКТОРАМ СРЕДЫ

16.00.03 — петеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

НАЦИОНАЛЬНЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ УКРАИНЫ

На правах рукскшсп

ГОЛОВКО ВАЛЕРИЙ АЛЕКСЕЕВИЧ кандидат ветеринарных наук

УДК 633.252'. +638.22.

УСТОЙЧИВОСТЬ ТУТОВОГО И ДУБОВОГО ШЕЛКОПРЯДОВ К БОЛЕЗНЯМ И НЕБЛАГОПРИЯТНЫМ ФАКТОРАМ СРЕДЫ

16.00.03— ветеринарная микробиология,, вирусология, эпизоотология ¡1 иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Работа выполнена в отделе устойчивости и защиты от болезнен тутовог шелкопряда Института шелководства Украинской академии аграрных наук Институте микробиологии и иммунологии им. И. И. Мечникова Министерств; здраг,сохранения Украины

Научные консультанты:

Доктор биологических наук, профессор, академик АН ВШ, заслуженны деятель науки и техники Украины В. Г. ШАХБАЗОВ Доктор медицинских наук, профессор, академик АН ВШ, заслуженны деятель науки и техники Украины Ю. Л. ВОЛЯНСКИИ

Официальные оппоненты: Доктор ветеринарных наук, профессор В. П. ЛИТВИН

Доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки и техни ки Украины, А. Б. БАИДЕВЛЯТОВ

Доктор биологических наук, профессор, академик АН ВШ Е. Н. БЕЛЕЦЬКИЙ

Ведущее предприятие—Институт ветеринарной медицины Украинско! академии аграрных наук

Защита диссертации состоится ¿Л^у/ 1996 г.

О чягпв на заседании специализированного совета Д-120.71.03 при Па циональном аграрном университете по адресу: 252041, г. Киев-41, ул. Героев обороны, 15

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета. Автореферат разослан «. 1996 г.

Ученый секретарь специализированного совета

доктор ветеринарных наук, профессор В. А. БОРТНИЧУК

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Потребность многих стран мира в натуральном шелке постоянно возрастает. По данным FAO его ежегодное производство составляет 90—100 тыс. тонн, а к 2000 году должно увеличиться до 150—200 тыс. тонн (данные конференции лелководов стран Азии, Таиланд, 1989). В 1991 г. (Дж. Шевансн,. 1992) мировое производство составило около 70 тыс. тонн, при этом рост происходит благодаря двум странам — Китаю и Индии,. ia долю которых, соответственно, приходится 34 и 20 тыс. тонн лелка сырца.

В других странах, таких как Япония, среднегодовое производство составляет 8 тыс. тонн, в Бразилии — 2 тыс. тонн, в Узбекистане— 2,7 тыс. тонн, Туркменистане — 300 тонн, Таджикистане---¡30 тонн, Кнргизстане— 1100 тонн, Украине— 100 тони.

В настоящее время реально существует общий дефицит миро-юго производства шелка по сравнению с его потребностью.

Натуральный шелк является ценнейшим сырьем не только для екстильной промышленности, он также широко используется в медицинской, ветеринарной и других областях народного хозянст- . ia. Климатические условия Украины весьма благоприятны для ин-енсивного развития шелководства, и это обстоятельство приобретет особое значение в настоящее время, когда основные производители натурального шелка оказались за ее пределами.

Одно из основных условий повышения рентабельности шел ко-юдства состоит в улучшении биологических показателей тутового■ [ дубового шелкопрядов. Ныне, когда на основе достижений ми-ювой и отечественной селекции, особенно тутового шелкопряда, юлучены высокопродуктивные породы и гибриды, коконы которых соответствуют современным технологическим требованиям, лнмн-№ру:ощим фактором остается 'низкая устойчивость шелкопряда к. олезням и неблагоприятным факторам ерзды. Положе .Hue осложняется ухудшением ветертшарно-санитарного состояния в услошь х гренопроизводства, экологической обстановки в большинстве ре-ионов Украины, а шелкопряд, будучи пойкилотермным организ-[ом, весьма чувствителен к (неблагоприятным влияниям среды.

Попытки решения проблемы борьбы с болезнями шелкопряда редпринималшеь многими исследователями, начиная с Л. Пасте-а (Я. Всйзер, 1972; Е. Н. Михайлов, 1976, 1984; И. А. Кнричен-

ко, 1977, 1987; R. Sato, H. Vatanabe, 1986; Al. Kobavashi, 1990; Л. Ф. Кашкарова, 1994 и др.). Тем не менее, потери е шелководстве от болезней тутового шелкопряда по-прежнему значительны.

Переход шелководства на путь интенсификации обострило проблему создания высокопродуктивных 'пород и гибридов шелкопряда, обладающих повышенным адаптивным потенциалом. Поэтому решение задачи целенаправленного повышения устойчивости шелкопрядов к экстремальным факторам среды и различным патогенам приобретает сегодня особое теоретическое и практическое значение. Изложенное определяет актуальность избранного 'направления исследований, использование ¡в едином комплексе ветеринарных, генетических, микробиологических и иммунологических подходов для обоснования рациональных методов и средств борьбы с инфекционными заболеваниями шелкопрядов.

Цель работы. С учетом анализа эпизоотической ситуации в шелководстве Украины разработать комплекс средств и методов профилактики и борьбы с болезнями тутового и дубового шелкопрядов и повышения их устойчивости к неблагоприятным условиям среды.

Задачи исследований. Для достижения указанной цели были по ставлены следующие задачи:

1. Провести анализ эпизоотической ситуации по болезням туто вого шелкопряда.

2. Провести микробиологическое 'исследование тутового шелко пряда в промышленном и племенном шелководстве.

3. Разработать меры профилактики и борьбы с пебриной тутово го шелкопряда.

4. Провести скрининг химиотерапевтических препаратов и оне нить возможность я эффективность использования их в шелковод сгве.

5. Изучить с (позиций иммунологии природу устойчивости туто вого « дубового шелкопрядов к инфекционным болезням н разрабо тать методы защиты.

6. Определить эффективность методов прогнозирования устойчи вости различных пород и гибридов шелкопрядов к инфекционный агентам.

7. Разработать систему мероприятий, направленных на повыше ние устойчивости, профилактику и борьбу с болезнями шелкопряд?

Научная новизна работы. Впервые проведен подробный аналн эпизоотической ситуации в племенном и промышленном шелковод стве в различных регионах Украины.

Путем 'микробиологических и иммунологических исследовани -установлены особенности иммунной системы шелкопрядов, обуслав » ливающие степень устойчивости его к стрессовым факторам и па тогенам.

Проведен скрининг противомикробиых средств для хнмиопроф! .лактнки и химиотерапии болезней тутового шелкопряда, дана и оценка перспективности использования в шелководстве.

С иелыо повышения резистентности шелкопрядов определено зна-ение генетических п эпигенетических факторов устойчивости их инфекционным болезням и неблагоприятным условиям окружающей среды.

Разработан метод тестирования различных пород п гибридов 1елкопряцов с целыо прогнозирования их жизнеспособности.

Создана породная группа дубового шелкопряда, отличающаяся т исходных форм полной моновольтннпостыо п глубокой осенне-п.мней днапаузой куколок.

Теоретическая и практическая ценность работы. Да г. комплекс-ый анализ причин снижения продуктивности и гибели шелкопряда а выкормках. Подробно охарактеризована этиологическая структу-а инфекционных заболевании тутового шелкопряда в различных егионах Украины. Теоретически обоснованы и внедрены в иракти-у способы профилактики и борьбы с этими заболеваниями, прове-ен скрининг эффективности противомнкробных препаратов, пер-пектизпых для дальнейшего использования в шелководстве. Боль-юе теоретическое значение имеет комплексная характеристика ме-анизмов иммунитета и резистентности у шелкопрядов. Проведений теоретический анализ природы устойчивости тутового и дубово-э шелкопрядов к воздействию неблагоприятных факторов внешней эеды и к возбудителям инфекционных заболевании послужил особой для разработки системы и комплекса мероприятий, плправ-енных на снижение гибели шелкопрядов и повышение эффектпвко-ги отрасли шелководства, которое имеет большое практическое качение. Большую практическую ценность представляет разработ-а и использование метода прогнозирования устойчивости шелко-ряда на ранних стадиях его развития.

Внедрение результатов исследований. Основные результаты ис-1едованин внедрены в шелководческую практику в виде изданных ассовым тиражом и переданных производству Системы мероприя-ш по оптимизации технологических процессов разведения тутового шелкопряда, профилактике и борьбе с болезнями (Методические ре-эмеидацшг предназначены для специалистов гренажных заводов, зецхозов, колхозов, совхозов, фермерских и других хозяйств), а зкже Комплекса ветеринарно-санитариых мероприятии по профи-актике и борьбе с болезням« тутового шелкопряда в племенном ц эомышлешюм шелководстве на всех стадиях его развития (Л\ето-гческие рекомендации для руководителей н специалистов в облл-ш шелководства).

Разработанные способы обеззараживания племенной и иромыш-амюй грены, а также дезинфекции шелководческих помешдмпш и 1зентаря внедрены на Миргородском гренажном заводе Полтаьс-зи области, в Кумовском шелкосовхозе Харьковской области п Ба-дшевском шелкосовхозе Киевской области. Ряд этих разработок виде Рекомендаций передан для апробации и внедрения в стра-

ны ближнего и дальнего зарубежья (Грузию, Казахстан, Тадж! кистап, Узбекистан, Болгарию, Китай).

Материалы работы вошли в изданную диссертантом монографи! и энциклопедический словарь, в подготовленную к- изданию Учебну книг)? для шелководов, а также используются в соответствующи лекционных курсах на кафедре генетики Харьковского госуниверс: тета и Харьковского зооветеринарного института, на курсах повь шення квалификации при Институте шелководства УЛАН, pañoi иых и областных семенарах шелководов.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены па годи' иых заседаниях ученого Совета Украинского научно-исследовател] ского 'института шелководства (1989—19961, Научно-практическо конференции ученых и специалистов центральных районов Кита (Сиань, 1990), Годичном собрании Союза шелководов Болгари (Враца, 1990), Республиканской конференции «Ветеринарная м< дицина» (Харьков, 1990), Заседании Ученого Совета Цептральног управления шелководства Индии (Бангалор, 1991), Междунаро; ном симпозиуме по актуальным проблемам мирового шелководств (Харьков, 1991), Международном конгрессе энтомологов (Пекш 19Э2), Совещании ученых и специалистов-шелководов Румынског шелководческого объединения «Серикаро<м» (Бухарест, 1992), V съезде Энтомологического общества Украины (Харьков, 1992), К< ординационном Совете по шелководству стран СНГ (Харьков, 1993^ " II съезде микробиологов (Одесса, 1994), Международной конфере! аш; по экологическим проблемам и прогнозированию (Болгари: Враца, 1995), Международной научной конференции, посвященио 150-летию со дня рождения И. И. Мечникова (Харьков, 1995).

Публикации. Основные положения диссертации изложены в 7 печатных научных трудах, в том числе в 3 книгах, 2 монография и 4 методических рекомендациях, 2 публикациях в зарубежных и: даннях. Получен патент на изобретение (№ 2026434) и авторскс свидетельство (№ 1805559). Принята к рассмотрению Госкомитето по изобретениям Украины заявка на выдачу патента на Способ з; щиты шелкопряда от инфекционных заболеваний (№ 94086565).

Личный вклад диссертанта в получении научных результато] которые выносятся на защиту. В диссертационной работе лично с< искателем осуществлены: обоснование необходимости прозелени выполненных исследований; создание научного центра по изучени проблемы устойчивости шелкопрядов я защите нх от болезней н всех технологических этапах; разработка тематических планов, р; бочих программ и методов исследований; проведение экспериме! тов, анализ и обобщение полученных результатов, подготовка ш учных работ к опубликованию; пропаганда и внедрение результ; тов исследований в шелководчество. Отдельные фрагменты рабе по микробиологическим исследованиям шелкопряда выполнены coi местпо с кандидатом вет. наук И. А. Кириченко, по скринингу прс тивомикробных средств для защиты шелкопряда от болезней —

кандидатом мед. наук В. Ф. Дьяченко, по прогнозированию устойчивости к болезням — с доктором бпол. наук, профессором В. Г. Шах-базовым.

На основании выполненных исследований диссертантом на защиту выносятся следующие положения:

1. Анализ эпизоотической ситуации по болезням тутового шелкопряда в шелководстве Украины, связанных с недостаточной устойчивостью шелкопрядов к болезням и неблагоприятным условиям среды.

2. Результаты микробиологических исследовании тутового шелкопряда в промышленном и племенном шелководстве на всех стадиях онтогенеза.

3. Эффективные в шелководстве препараты, которые выявлены путем сравнительного изучения 64 антимикробных веществ с учетом скорости формирования резистентности к. ним возбудителей болезней шелкопрядов.

4. Особенности иммунной системы в связи с генетическими различиями и физиологическим состоянием тутового шелкопряда.

5. Прогнозирование неспецнфической устойчивости китайского дубового шелкопряда.

6. Генетические различия пород и гибридов тутового шелкопряда по устойчивости к болезням и неблагоприятным условиям среды.

7. Метод прогнозирования неспецнфической устойчивости пород и гибридов тутового шелкопряда.

8. Комплекс мер, направленных на повышение устойчивости и борьбу с болезнями тутового шелкопряда.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 8 глав, заключения, выводов, практических предложений и приложений.

Работа содержит 329 страниц машинописного текста, включая 43 таблицы, 12 графиков. В списке литературы приведено 360 наименований.

В первой главе, являющейся обзором литературы, приводятся данные о биологических основах -современного шелководегва, болезнях тутового и дубового шелкопрядов и методах из защиты, а также о механизмах и способах прогнозирования устойчивости к болезням и неблагоприятным факторам среды. Во второй главе описаны материалы и методы исследований, в третьей — микробиологические исследования тутового шелкопряда в промышленном и племенном шелководстве, эпизоотическая ситуация по ядерному полнэдрозу и пебрине и меры борьбы с ними. С четвертой по шестую главы изложены скрининг химнотерапевтических препаратов и иммунологические исследования, в седьмой главе показана леслецифйческая устойчивость китайского дубового шелкопряда, в восьмой главе анализируется роль генетических факторов, приводятся новые методы прогнозирования устойчивости.

2* 7

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

■Материалы и методы исследовании

Работа выполнялась в 1989—1996 гг. на базе Института шелководства Украинской академии аграрных наук и Института микробиологии и иммунологии им. И. И. Мечникова Министерства здравоохранения Украины.

Основными объектами исследовании служили породы и межпородные гибриды тутового шелкопряда, находившиеся па разных стадиях развития (грена, гусеницы разных возрастов, куколки, имаго, коконы), а также китайский дубовый шелкопряд (Antheraea pernyi G. M.) и микроорганизмы — возбудители болезней шелкопряда.

Генетические различия в показателях иммунитета и песпецифичес-кой резистентности изучались, в основном, на породах Белококонная-1, Белококонная-2, Украинская-11 и Украинская-14 « на гибридных комбинациях этих пород.

ХАРАКТЕРИСТИКА ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В ЭКСПЕР1ШЕНТАХ ПОРОД И ГИБРИДОВ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА

Наименование генотипов Жизнеспособность, IV /0 Масса ко кона, г Шелко- ИОСНОГ.ТЬ коконов, % Урожай коконов с 1 г гусениц, кг Длина 1111 ги, м

Б-]ул. 92,5 1,90 17,5 4,35 745

Б-2ул 93.0 1,92 17,4 4,49 760

Б-1улХБ-2ул 94,0 1,95 18,0 4,65 815

Б-2удХБ-1ул 94,5 2,00 17,8 4,77 830

Укр.-Н 96,0 2,02 24,0 4,66 1340

Укр,-14 94, i 2,05 24,3 4,50 1354

Укр.-11ХУкр.-14 94,2 2,20 24,9 4,85 1490

Укр.-14ХУкр.-П 94,0 2,12 24,5 4,30 1405

В качестве противомикробных средств использовали различные препараты химической и биологической прирЬды. Определена чувствительность возбудителей болезней шелкопряда к антибиотикам (пенициллицы, цефалоспо,рины, аминогл'икозиды, ^гетрациклииы, левомицетин, ристомицин, рифампицин, фузидин, полимиксин), суль-

фамидам, шггрофурапа.м, производным хииолипа и четвертичного аммония, питроммидазола, поверхностно-активным веществам и комплексообразователям, красителям и кислотам, различным продуктам растительного и животного происхождения (всего 64 препарата).

В целях изучения устойчивости пород и гибридов тутового шелкопряда к бактериальным и вирусным инфекциям, а также при испытании противомикробных средств в грепопроизводсгве и па выкормках, в опытах были использованы следующие музейные и полевые штаммы микроорганизмов:

1. Возбудители бактериозов:

— Bacillus thuringfiensis var. dendroiimus u Вас. thuringiensis таг. galleriae (возбудители бациллярного кишечного токсикоза);

— Вас. bombyeis (возбудитель мертвенности);

— Serratia marcescens (возбудитель септицемии);

— Streptococcus bombyeis (возбудитель чахлости).

2. Возбудитель ядерного полиэдроза (желтухи) — Baculovirus bombyeis.

3. Возбудитель мускардины ■—Beauveria bassiana.

При изучении устойчивости тутового шелкопряда к ядерному полиэдрозу был использован в опытах полевой штамм возбудителя — Baculovirus bombyeis, выделенный от погибших особей шелкопряда.

Объектом фагоцитоза служил золотистый стафилококк (штамм № 209).

При изучении эпизоотической ситуации руководствовались методами, описанными в общей эпизоотологии (И. А. Бакулов, А. Д. Третьяков, 1979). Микробиологические исследования проводил)? согласно методам, изложенным в руководствах по микробиолога« и вирусологии (Г. Л. Селибер, 1962; М. О. Бпргер, 1972: Дж. Мейиелл, Е. Мейнелл, 1967), 'микологии (И. А, Дудка и др., 1982) и шелководству (Е. Н. Михайлов, 1959, 1984). Выделенные от тутового шелкопряда микроорганизмы идентифицировали на основании изучения культуральио-морфологнческих и биохимических свойств с использованием определителей В. И. Полтева (1969) и Д. Берги (1980).

При проведении выкормок гусениц тутового шелкопряда, иа-пильонажа и других этапов его разведения применялись методы, изложенные в руководствах С. М. Гершензона, П. А. Ковалева (1959), П. А. Ковалева, А. А. Шевелевой (1960), И. А. Кириченко и др. (1991).

Антибактериальную активность препаратов определяли методами диффузии в агаре и серийных разведений (В. Браун, 1968). В первом случае используемые микроорганизмы засевали на агар в чашки Петри, затем накладывали диски с антибактериальным не-

шеством. Через 24—48 часов роста в термостате учитывали размер зоны задержки роста микроорганизмов вокруг диска, по которой определяли активность препарата: малая активность (зона до 12 мм), средняя (12—18 мм), высокая (более 18 мм).

При использовании метода серийных разведений в пробирки со средой вносили испытуемое вещество и засевали культуру исследуемого возбудителя. Через 24—48 часов учитывали наличие или отсутствие видимого роста микроорганизмов.

Испытание противомикробных средств на выкормках гусениц тутового шелкопряда проводили в 2 вариантах: «до заражения гусениц», т. е. с профилактической целью, и «после заражения» — с лечебной. Заражали гусениц во 2-й день IV возраста чистыми бактериальным» культурами и их смесью, а также полевым штаммом вируса желтухи, выделенными из погибших от этих. заболеваний гусениц тутового шелкопряда, строго дозируя заражаемую взвесь и корм. Титр заражаемой вирусной взвеси," определяемой с помощью камеры Горяева — 20 тыс. микробных клеток/мм3. Титр бактериальной взвеси — 50 млн. микробных клеток/см3, который определяли с помощью оптических стандартов мутности микроорганизмов Государственного НИИ стандартизации и контроля мед. биопрепаратов им. Л. А. Тарасевича. Растворами испытуемых препаратов обрабатывали корм (2 раза в сутки в течение двух дней) перед раздачей гусеницам шелкопряда путем равномерного смачивания, не допуская их стекаиия. Гусеницам контрольной группы, зараженным аналогично опыту, корм смачивали стерильной водой без применения препаратов.

Скорость формирования резистентности устойчивых форм микроорганизмов к антибактериальным препаратам изучали путем многократных пассажей на питательных средах, содержащих возрастающие количества испытуемых веществ (С. М. Навашин, И. П. Фомина, 1982).

При изучении биохимических свойств и ферментативной активности .микроорганизмов использовали полоски хроматогрэфической бумаги (система индикаторная бумажная — СИБ), содержащие субстрат с соответствующим (индикатором (углеводы, аминокислоты, ферменты, индол, сероводород и др.).

Резистентность у гусениц тутового шелкопряда определяли на основании изучения комплементолодобиой активности гемолимфы и гетерофильных гемолизинов согласно «Руководству по иммунологии» (под ред. О. Г. Вязова и М. К. Ходжгева, 1987). Содержание фибронектина в гемолимфе и ее интерфероноподобную активность определяли методом иммуиоферментного анализа, изложенного в «Инструкции по определению фибронектина и интерферона иммуноферментным методом» (М., 1991). Содержание в гемолимфе рецепторных белков определяли согласно «Методические рекомендации по определению И-белков в сыворотке (плазме)

крови человека» (М., 1989). Определение иммуноглобулинов проводили с помощью метода иммунодиффузпи в агаре по методу Ман-чипи согласно Инструкции «Определение иммуноглобулинов» (М., 1991).

Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) определяли с помощью реакции преципитации с 3,5 и 7 % раствором полиэтилен-гликоля согласно «Справочнику по лабораторным методам исследования» под ред. В. В. Меньшова (М., 1987).

При определении фагоцитарной активности клеток гемолимфы гусениц шелкопрядов ее центрифугировали при 1500 об./мин в течение 10 мин. В полученную клеточную взвесь добавляли 0,1 мл культуры стафилококка, содержащей 1 млрд. микробных клеток, выдерживали в течение 30 мин при 25 °С, готовили мазки, которые окрашивали по Романовскому-Гимза.

Изучение противомикробиых свойств препаратов в отношении возбудителей инфекционных болезней тутового шелкопряда проводили по методам, описанным М. Д. Машковским П977) и К. С, Шадурским (1977).

Прогнозирование устойчивости шелкопрядов к болезням и неблагоприятным факторам среды осуществляли методом термотестирования, основанным на кратковременном прогреве грены в водной среде, а гусениц и куколок — в воздушном термостате при экспозиции 20 ¡мин, при температуре от 42 до 49 °С в зависимости от генотипа и стадии развития шелкопрядов.

Для прогнозирования жизнеспособности гусениц использовали низкотемпературный тест (Л. М. Акименко, А. 3. Злотин, М. Е. Брас-ланекий, 1977). Этот метод основан на воздействии на гусениц III возраста температуры в пределах 5—6°С. После охлаждения определяли скорость восстановления двигательной реакции гусениц. Гусеницы, которые быстрее восстанавливали двигательную функцию, характеризовались более высокой жизнеспособностью и продуктивностью.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА В ПРОМЫШЛЕННОМ ШЕЛКОВОДСТВЕ

Природно-климатические условия, созданная инфраструктура и материальная база производства шелкосырья в Украине позволяет успешно развивать отрасль шелководства. Вместе с тем, в последние годы в связи с экономическим кризисом в отрасли, ухудшением экологической обстановки, различными нарушениями технологических параметров в гренопроизводстве и на выкормках no-

il

вышается опасность инфекционных заболеваний тутового шелкопряда, среди которых распространенными являются ядерный полиэдр оз (желтуха), бактериозы, пебрина, мускардина, а также смешанные инфекции. При исследовании патматериала тутового шелкопряда, отобранного на промышленных выкормках в неблагополучных по болезням шелкопряда хозяйствах различных областей Украины, изучая микроорганизмы не только в кативных препаратах, но и окрашенных специальными красителями, а также используя бактериологические и- микологические методы, и путем биопробы, особенно при вирозах и микроспоридиозах, выявлено 367 зараженных образцов (табл. 1), что составляет 64,4 % от количества исследованных. Среди выявленных инфекций наибольший удельный вес занимает желтуха в виде моноинфекции (54 %) л вместе-с бактериозами (30,2%) и мускардинон (2,2%).

Таблица Г

РЕЗУЛЬТАТЫ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПАТМАТЕРИАЛА ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА С ПРОМЫШЛЕННЫХ ВЫКОРМОК В УКРАИНЕ (1975—1994 гг.)

Выя ¿лги о Среди выявленных зараженных

зараженных образцов обнаружены

образцов инфекции 7с

Область о н моноинфекции смешанные

13 з га ^ 3 са к я

§§ к-во % КЗ К 1 о о. <У о. <0 а 2 О) « я 2 4 гз

Ч й н с, а X н а л \о и >» з§ о К к ~ о

Винницкая 15 9 60,0 11,1 _ 88,9

Днепропетровская 75 50 66,7 48,0 12,0 — 40,0 —

Донецкая 20 13 65,0 76,9 15,4 —. 7,7 —

Запорожская 59 40 67,8 70,0 20,0 — 10,0 —

Киевская 19 10 52,6 30,0 — 60,0 10,0 —

Кировоградская 69 48 69,6 62,5 — 10,4 27,1 —

Крымская АР 56 ЗЭ 69,6 35,9 10,3 —■ 53,8 —

Николаевская 16 8 50,0 12,5 — —. 87,5 —

Одесская 59 44 74,6 47,7 9,1 2,3 40,9 —

Полтавская 52 23 44,2 47,8 4,4 21,7 17,4 8,7"

Харьковская 61 39 63,9 76,9 2,6 5,1 7,7 7,7

Черниговская 8 5 62,5 20,0 — 20,0 — 60,0

Черкасская 17 10 58,8 70,0 — — 3-0,0 —■

Херсонская 44 29 65,9 59,6 13,8 27,6

Всего в Украине 570 Зв7 64,4 54,0 7,1 6,5 30,2 2,2

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА В ПЛЕМЕННОМ ШЕЛКОВОДСТВЕ

При производстве грены — наиболее ранней стадии развития шелкопряда — на ее поверхности ¡накапливается различная микрофлора, особенно бактериальная, что снижает ее качество и ведет к возникновению болезней на выкормках.

В результате исследований 400 партий грены тутового шелкопряда 12 пород, 14 гибридов и 6 тетрагибридов установлена ее зараженность бактериальной флорой на 99—100 %. При идентификации микроорганизмов, выделенных с поверхности грены, установлена различная их видовая принадлежность: Вас. thuringiensis var. galleriae, Вас. thuringiensis var. dendrolinms, Str. bombycis, Staph, aureus, Вас. pseudoanthracis, Вас. filaris, Вас. laterosporus, т. e. возбудители бактериозов тутового шелкопряда. Кроме того, при исследовании грены, полученной из коконов, в партиях которых, был,л поверхностно пятнистые и мускардшшые, выделены гриб мускардины (Beauveria bassiana) и вирус желтухи (Baculovirus bombycis) .

В результате анализа оживления грены, зараженной бактериальной флорой и грибом мускардины, происходит заметное снижение ее оживления, а при инфицировании смесью этих микроорганизмов этот показатель снижается до 55,8 %. Установлено, что при заражении грепы различной бактериальной флорой и грибом мускардины жизнеспособность шелкопряда снижается почти в 1,5 раза, а при заражении'дополнительно и вирусом желтухи — в 2 раза.

С целью выяснения зараженности тутового шелкопряда и на других стадиях онтогенеза, выявления возможных путей передачи инфекционного начала были проведены микроскопические его исследования (табл. 2). При анализе результатов микроскопических исследований тутового шелкопряда и а различных стадиях его развитая с целью обнаружения инфекций установлено, что среди выявленных 2744 зараженных образцов наиболее часто выделялись возбудители бактериозов (50,7%) и вирусной желтухи (30,1%). Эти (инфекции выявлены на всех стадиях развития шелкопряда в образцах патматериала, отобранного в зоне деятельности всех гренажных заводов Украины. Гриб мускардины наиболее часто обнаруживался в исследуемых бабочках шелкопряда и только в пат-материале из зоны деятельности Миргородского грензавода в Б5,4 % и Молочанского — в 44,6 % случаев. Среди выявленных 782 зараженных образцов ¡из коконов кара-пачах, характерных для бактериозов, в 61,5 % обнаружен вирус желтухи и в 30,7 % — бактериальная флора, т. е. смешанная инфекция, и на первый план выступают вирозы.

Таблица 2

РЕЗУЛЬТАТЫ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИИ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА НА ГРЕНАЖНЫХ ЗАВОДАХ УКРАИНЫ (1992-199-1 п.)

Возбудители инфекций, обнаруженные в зараженных образ цах:

Выяв- желтухи мускарднны бактериозов

Стадии развития шелкопряда лено зараженных образцов, шт. всего I II III всего 1 II всего I 11 III

1С-¡30 % % 7о 7о к-30 % п/ й % К-ИО % 0' /0 % • %

Гусеницы 165 117 70,9 23,9 38,5 37,6 9 5,5 77,8 22,2 39 23,6 35,9 25,6 38,5

Куколки 267 93 34,8 83,9 12,9 3,2 10 3,8 80,0 20,0 164 61,4 95,7 4,3 —

Бабочки 1530 135 8,8 8-8,1 10,4 1,5 418 29,3 55,4 44,6 947 61,9 98,1 0,5 1,4

Коконы кара-пачах 7Э2 481 61,5 88,6 11,0 0,4 61 7,8 — ¡00,0 210 30,7 82,1 15,8 2,1

Всего: 2714 826 30,1 78,8 15,0 6,2 528 19,2 49,8 50,2 1390 50,7 03,3 4,3 2,4

Примечание: I — Миргородский Полтавской, II — Молочзнскнй Запорожской областей; III — Симферопольский Крымской АР грензаводы.

ЭПИЗООТИЧЕСКАЯ СИТУАЦИЯ ПО ПЕБРИНЕ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА И ЭФФЕКТИВНЫЕ МЕРЫ БОРЬБЫ

Установлено, что в 1972 г. зарегистрирован спорадический случай заболевания тутового шелкопряда пебринои на промышленной выкормке в совхозе им. 50-летия Октября Черниговской обл.

В 1974—1976 гг. отмечены случаи заболевания шелкопряда пебринои в племенных хозяйствах Украины. Спустя более 10 лет пебрина тутового шелкопряда проявилась в 1988—1990 гг. в племенных хозяйствах всех грензаводов Украины — Молочанского грепзавода Запорожской и Миргородского Полдавской областей и Симферопольского Крымской АР. За 1988—1990 гг. только одной зараженной племенной грены выбраковано 68 партий, чем нанесен огромный экономический ущерб.

Проведен комплекс разработанных противопозематозных мероприятий, включающих диагностику возбудителя болезни, микроанализ шелкопряда на всех стадиях развития, перевод грепопронзвод-ства на смешанный способ приготовления промышленной грены (по технологии микроанализа дефектных бабочек и неллюляриым способом), технологические приемы по отбору образцов для исследований, ветеринарно-санитарные меры, направленные на выявление эпизоотических очагов и источников пебрины и их ликвидацию в условиях племенных выкормок и гренажных заводов. Эго позволило оздоровить гренажные заводы и племенные выкормки их зоны деятельности от пебрины, сохранить эпизоотическое благополучие по этому опасному микроспоридиозпому заболеванию тутового шелкопряда в Украине (табл. 3).

Таблш{а 3

РЕЗУЛЬТАТЫ АНАЛИЗА ЭПИЗООТИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ ПО ПЕБРИНЕ НЛ ПЛЕМЕННЫХ ВЫКОРМКАХ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА В УКРАИНЕ

Годы Племенные районы Племенные хозяйства Зараженные выкормки шелкопряда (очаги) И с с л е д у е м ы и м а те р1 1 э л с наличием спор пебрины

1 2 3 4 5

Зона деятельности Молочанского грензавода Запорожской области

1990

1991

1992 1993—1995

2 0а

16 13

9 0

•;уколкп, бабочки-самки гусеницы IV возраста, бабочкн-самкн бабочки-самки

Продолжение табл. 3

Зона деятельности Л1иргородского 1рензавода Полтавской области

1890 1991—1995

5 / кара-пачах, куколки, I бабочки-самки

0 I О

Зона деятельности Симферопольского грензавода Крымской АР

1990

1991 1992—1995

10

6 о

16

гусеницы III—V г.оз-растоа, кара-пачак, куколки, бабочки-самки гусеницы V возраста, бабочки-самки

6

О

0

* Пебрнна па племенных выкормках шелкопряда не зарегистрирована. При Госконтроле в ¡1)92—1996 гг. грены, приготовленной грензанодамн Украины,, возбудитель пебрнны не обнаружен.

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ

ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА К ПРОТИВОМИКРОБНЫМ СРЕДСТВАМ

Исследованиями установлено, что выраженным действием в отношении взятых в опыт тест-культур обладали амнноглнкозидыг макролпды и рифампицин, хотя их активность варьировала. Среди аминогликозидов самыми активными оказались аминощш и сизо-мицин, среди макролндов — эритромицин. Незначительный лроти-вомикробный эффект отмечен у тетрациклинов и ристомищша.

В испытанных дозах (до 100 ЕД в диске) все антибиотики пе-нициллинового ряда оказались неактивными в отношен пи взятых в опыт тест-микробов, оба варианта возбудителей бациллярного кишечного токсикоза были не чувствительны к кефзолу, клафорану„ фузидину и полимиксину. Что касается чувствительности возбудителей к сульфаниламидам, нитрофу,ранам и производным нитронми-дазола, то норсульфазол и сульфален в I % концентрации рост бактерий и грибов не ингибировалн, а возбудитель мускардинк был чувствителен к производным имидазола, оказавшимися весьма действенными и в отношении других тест-микробов. Среди интрофу-ранов наиболее активным был фурагин. Фуразолидон же и фура-1 донин не ингибировалн рост чудесной палочки, проявляя в то же время активность в отношении грамположительных бактерий. Препараты йода и органических красителей оказались весьма действенными в отношении большинства взятых в опыт тест-микробов.

Весьма чувствительными были тест-микробы к детергентач. к комплексонам (табл.4).

Таблица 4

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ БАКТЕРИОЗОВ И МУСКАРДИНЫ К ДЕТЕРГЕНТАМ И КОМПЛЕКСОНАМ (М+т)

Диаметр задержки зоны роста, мм, для

Препарат* В. thuringiensis B. bom-bvds Serval ia maroes-coi13 Streptococcus bombyeis Beauv. bassiana

var. gal-leriae var. deii-drolimus

Хлоргсксиднн Катамин Диоксидин Трнлон-Б Декаметоксин 35.04:2.8 27.0±3.1 33.04-2.5 24.04-1.0 31.0+2.9 36.0+3.1 28.0+1.9 35.0±2.9 23.0+1.2 33.0+1.0 32.0+2.4 27.0+1.4 35.0+2.6 22.0 + 1.9 29.0±2.I 27.0+1.5 30-.0+29 30.0+1.8 23.0.^3.; 28.0+2.7 30.0±2.1 24.0+1.8 30.0+2.7 22.0Ü.6 26.0Ü.9 43.0+5.2 21.0+1.8 30.0+1.9 X 26.0+1.8

Примечание: X—• зона задержки роста отсутствует; * 1% концентрация.

Уксусная, щавелевая н янтарная кислоты не ингниировали рост тест-микробов. Возбудитель мускардины проявил высокую чувствительность к фенолу, сорбиновон и антранилозой кислотам.

Антимикробные свойства наиболее активных соединений :былл изучены методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде и установлена их минимальная подавляющая концентрация (МПК). Наиболее активными выявлены диоксидин, нп-тазол, декаметоксин, сорбиновая кислота н катамин (табл. 5).

Таблица 5

АКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТОВ В ОТНОШЕНИИ СМЕШАННОЙ КУЛЬТУРЫ СПОРОГЕННЫХ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ БАКТЕРИОЗОВ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА (М+т)

Препараты Антибактериальная активность

зона задержки роста, мм МПК, мт/мл

Сорбшювая кислота 26.0+3.4 2.5±0.18

Антрашгловая кислота 22.0+4.1 3.2+0.4

Трнлон-Б 1S.0+0.9 ' 2,2+0.3

Катамин 24.0+1.7 1.2+0.16

Диоксидин 29.0+2.2 0.7+0.21

Нитазол 25.0+1.9 0.7—0.31

Декаметоксин 28.0±2.6 0.9+0.27

Гипохлорит (контроль) 14.0+0.5 2.5+0.4

ВОЗНИКНОВЕНИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ БОЛЕЗНЕЙ ШЕЛКОПРЯДА К ПРОТИВОМИКРОБНЫМ ПРЕПАРАТАЛ1

Исследована скорость возникновения лекарственной устойчивости возбудителей болезней к декамегоксину, диоксидину и нита-золу в сравнении с гентамицином, дегмиаом и роккалом. Пр'и многократных пересевах культур микробов на средах с возрастающими количествами химиопрепаратов сравнительно быстро появлялись устойчивые штаммы к дегмину, диоксидину и нитазолу; несколько медленнее — к гентамицину и роккалу. /Медленнее всего формируется резистентность к декаметоксину, что определяет его преимущество перед другими препаратами (рис. 1). 70

60

50

' 40

30

20

10

О

О 10 20 30

—-1, . .-2 . 3 . ......4 .........5 . -6

Рис. 1. Скорость формирования устойчивости В. ЬотЬуаз к иротивоуикробиым

препаратам:

по оси абсцисс — количество пассажей; по оси ординат — кратность снижения

чувствительности

Существенных морфологических, культуральных и биохимических отличий исходных тест-культур от устойчивых не выявлено, что позволяет считать сформировавшуюся в процессе пассажей резистентность истинной.

1 - десашеЬохгп

2 - (ПохШп

. 3 - пИаго!

4 - веп1аЕ1С1п

5 - (Зевайп

6 - госса1

1_ __———■

ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАЗЛИЧНЫХ ПРОТИВОМИКРОБНЫХ СРЕДСТВ В БОРЬБЕ С ИНФЕКЦИОННЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА

С профилактической и лечебной целыо при заболеваниях шелкопряда бактериозами испытаны нитазол, декаметоксин, хлорофил-липт, биомос-ВЖ, ДП и СР-К к др. на гусеницах шелкопряда, зараженных возбудителями бактериозов.

В результате испытаний биомоса-ВЖ, декаметокснна и нптазо-ла с профилактической целью отмечено снижение гибели гусениц тутового шелкопряда на 12—16 %, увеличение числа полученных коконов, в том числе сортовых (табл. 6).

Таблица 6

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТОВ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИИ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА БАКТЕРИОЗАМИ

Погибших особей

Препарат и его концентрация, Штам- * Все- в т. ч. на стадии га о Ы

мы* ь. о я 1- о

% с. со н Н го гусеницы куколки ^ г ■ £ о а са т 3 а*

1 2 3 4 5 6 7 8 9

Бпомос-ВЖ 1 № 1 250 81 81 12 58,3

0.1 № 2 250 84 84 — 11 63,6

'3 500 2 — 2 87 94,3

смесь 333 51 50 1 47 93,6

2 № 1 250 92 92 — 8 75,0

№ 2 250 8Г> 83 2 8 62.5

№ 3 500 2 1 1 98 90,8

смесь 333 59 58 1 31 90,3

Цекаметоксин 1 № 1 230 90 90 — 9 55,6

0.05 № 2 250 92 92 — 8 62,5

№ Э 500 9 8 1 91 87,9

смесь 333 47 47 — 45 86,7

2 № 1 250 75 75 — 10 60,0

.\Г» 2 250 90- 90 — 10 80,0

№ 3 500 4 2 о 96 97,9

смесь 333 55 55 — 26 84,6

Нитазол 1 № 1 250 87 87 — 13 33,8

0.05 № 2 250 95 95 — 5 60,0

№ 3 500 1 — 1 89 92,1

смесь 333 47 47 — 51 88,2

2 № 1 250 81 80 1 8 75,0

Л® 2 250 93 93 — 7 58,6

№ 3 500 7 5 о 89 98,0

смесь 333 77 75 2 21 83,3

Продолжение табл. 6

I 2 з 4 5 6. 7 8 9

Стерильная вода— № 1 250 92 92 8 75,0

Контроль 1 № 2 250 96 96 — 4 50,0

(с заражением) № 3 500 3 — 3 97 89,7

смесь 338 63 63 — 36 80,6

Контроль 2 85,2

(интактный) 95

* jN 1—В. thuring. var. galleriac, N 2—В. thuring. var. dendrolimus, N 3—B,

bombvcis; смесь штаммов микроорганизмов (№ 1, № 2; № 3). ** млн. микробных клеток/мл; 1 вариант — до заражения; 2 вариант— после заражения.

Хлорофиллипт оказался более эффективным при использовании его с лечебной целью — снижение гибели гусениц шелкопряда на 13—19% (табл. 7). Препарат N° 7 (эвкаван) в концентрации 0,005 % проявив высокую профилактическую и лечебную, активность, обеспечив снижение гибели гусениц шелкопряда ка 15—27 %, при большем урожае коконов и высоком их качестве.

Таблица 7

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ХЛОРОФИЛЛИПТА И ЭВКАВАНА НА ЗАРАЖЕННЫХ ГУСЕНИЦАХ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА ВОЗБУДИТЕЛЕМ БАКТЕРИОЗОВ

Препарат и er концентрация, о % Вариант Титр* Всего Погибших oct в т. ч. н гусеницы збей, % а стадии куколки Всего снято здоровых коконов, шт. Сортовых, %

Хлорофил- 0.02 I 50 29,3 26.7 2.6 103 94.2

липт 0.05 50 38,7 35.3 3.4 91 86.8

0.02 2 50 20,0 18.0 2.0 117 85.5

0.05 50 14,0 13.4 0.6 122 94.3

Препарат 0.02 1 50 18,0 13.4 4.6 126 91.3

№ 7 0.05 50 . 6,7 2.7 4.0 143 89.5

(эи'каван) 0.02 2 50 25,3 20.0 5.3 i 17 83.5

0.05 50 6,4 4.0 2.4 140 93.0

Стерильная вода 98

(контроль) 50 33,3 32.0. 1.3 93.0

* млн. .микробных клеток/мл смеси штаммов микроорганизмов (В. inuring, var. galleriae, В. thuring. var. dendrolimus, В. bombycis). 1 »црпант — до заражения; 2 вариант — после заражения.

Результаты испытания различных препаратов на гусеницах тутового шелкопряда, зараженных вирусом желтухи, представлены в табл. 8 и 9.

Таблица 8

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ЖЕЛТУХИ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА (М+т)

Препарат Концгнтра- 1ШЧ, % Погибших особей от желтухи iici стадии гусеницы л куколки, % Сортовых kokohü.i, % Шелконос-чость коконов, %

БНО¥ос — З'/К 0,01 24,0+1,2 76,0 18,7

0,1 46,0-1-1,2 54,0 19,2

БК 0,0005 23,4+0,7 78,0 18,0

0,005 24,6 + 0,7 75,4 19,0

Декгч;ет(жсш! 0,05 30,6 + 0,7 . 69,4 18,6

0,5 52,6+2,4 47,4 18,3

дп 20.0 40,0+2,1 60,0 18.6

ла 8 0,01 31,4± 1,4 68,6 18,6

0,1 42,0+1,2 58,0 18,5

Пнтаэол 0,05 30,6+0.7 69,4 19,1

СР - К 20,0 38,6 + 1,4 61,1 19 2

Л» 9 0,01 32,6+0,7 67,4 19.0

0,1 24,0+1,2 76,0 19,2

Кош роль—стер, зодл 44.6+0,7 55,4 18,8

Таблица 9

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТОВ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИИ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА ЖЕЛТУХОЙ (М+т)

Препарат Концентрация, % ' I ' ; ■ особей от желтухи на стадии гусеницы н куколки, % Сортовых кокоиоз, % Шелко-носность коконов, %

Бно« ос — В Ж 0,01 34,0+1,2 66,0 18,7

0,1 36.6 + 1,8 63',4 18,9

БК 0,0005 22,0+1,2 76,6 19,0

0,005 32,0+2,1 68,0 18,3

Декаг:етоксц({ 0,05 33,4+1,4 66,6 18,9

0,5 46,0+1,2 54',0 17,9

ДП 20,0 26,0+1,2 74,0 19,0

№ 8 0,01 28,0:+2,4 72,0 19,4

0,1 39,4+1,6 60,6 18,2

Ннтааол 0,05 23,4 + 0,7 76,6 19,7

СР - К 20,0 25,4+0,7 74,6 19,0

Ла е 0,01 30,0+2,4' 70,0 18,0

. 0,1 24,6±0,7 75,4 18,9

Контроль — стерильная

вода 46,6 + !,4 53,4 18,4

Из данных табл. 8 видно, что для профилактики этого вирусного заболевания выявлены эффективные препараты в соответствующих концентрациях, обеспечивающие снижение гибели шелкопряда на 13—21 %. Так, препарат БК в концентрациях 0,0005 и 0,005 % обеспечивает снижение гибели шелкопряда на 20,0—21,2%, а следовательно, больше получено сортовых коконов; препараты био-мос-ВЖ в 0,01 %, препарат № 9 в 0,1 %—снижение гибели шелкопряда на 20,6 %; препараты декаметокоин и нитазол в 0,05 %-нои концентрации — на 14,0%, препарат № 8 в 0,01 %-ной концентрации— на 13,2% по сравнению с зараженным контролем.

При заболевании тутового шелкопряда желтухой на выкормке, кроме отмеченных препаратов в соответствующих концентрациях (биомос-ВЖ и № 8 в 0,01 %, БК в обеих концентрациях, декаме-токсин и нитазол в 0,05 %, препарат № 8 в 0,01 % и № 9 в обеих концентрациях), обеспечивающих снижение гибели на 12,6—24,6 %, эффективными для лечебной цели оказались препараты ДП и СР-К в концентрации 20 %, снижающие гибель шелкопряда на 20,6— 21,2% (табл.9).

Таким образом, выявлены эффективные препараты и экспериментально отработаны режимы их применения для профилактики и лечение желтухи на выкормках тутового шелкопряда, обеспечивающих снижение гибели гусениц на 12,6—24,6 %.

Весьма важными в комплексе ветеринарно-противоэпизоотичес-ких мероприятий являются меры, направленные на разрыв цени передачи инфекционного начала. Проведены опыты по обеззараживанию тест-объектов, 'искусственно обсемененных возбудителями бактериозов и микозов шелковичных червей. Опыты выполнены в различных вариантах температурных режимов, ориентации поверхностей обеззараживаемых тест-объектов, экспозиции, способов обработки.

Результаты экспериментов с использованием влажной обработки различных поверхностей помещений и 'инвентаря применительно к шелководческим хозяйствам выявили высокую дезинфицирующую активность глутарового альдегида и эстостерилов в сравнении с применявшимся ранее 3 % формальдегидом, что подтверждено при их использовании и в условиях производства.

Наиболее перспективными для ¡влажной дезинфекции шелководческих помещений и инвентаря при бактериозах, мускардине и желтухе оказались эстостерил-У в концентрациях 0,2—0,3 % и глута-ровый альдегид в концентрациях 1,5—2 %, при экспозиции 1 и 3 часа соответственно.

Составлены и апробированы рецепты глугарового альдегида в смеси с хлорной известью ,и аммиачной селитры с хлорной известью, позволяющие методом газации поверхностей (тест-объектов) достигнуть высокой степени их обеззараживания при обсеменении как возбудителями бактериозов, так и грибом мускардины.

При изучении возможностей разрыва путей передачи инфекцион-юго начала мускардииы, ядерного полнэтроза и бактериозов по-:редством обработки грены'тутового шелкопряда антимикробными трепаратами установлено, что весьма эффективными оказались препараты эстостсрила и декаметоксин в 0,035—0,06 % при экспозиций 20 мин. Диоксидин, иитазол и кислоты существенно уступают :;м по эффективности. Антраннловая и сорбиновая кислоты весьма зктнвны по отношению к 'возбудителю мускардииы. Обработка туто-зого шелкопряда па стадии грены препаратами эстостерил-1 и эсто-:терил-У (концентрация 0,04%, экспозиция 10 мип), оказавшимися наиболее эффективными для борьбы с бактериальной, вирусной, мнкроспоридиозной н грибной инфекциями, не оказывает отрицательного влияния на жизнеспособность грены н гусениц шелкопряда, урожай ¡и качество коконов.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ФАКТОРОВ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ГУСЕНИЦ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА ВЕСЕННЕЙ И ЛЕТНЕЙ ВЫКОРМОК

При сопоставлении факторов резистентности тутового шелкопряда весенней и летней выкормок у пород Б1 и Б2 и гибридов Б1ХБ2 н Б2ХБ1 установлено, что гуморальные показатели резистентности (ЦИК) и комплементоподобная активность гемолимфы гусениц в летнюю выкормку выше, чем в весеннюю. Напротив, фагоцитарная активность и содержание в гемолимфе фибронектина — индикатора функции макрофагов, — летом ниже (табл. 10).

Таблица 10

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ФАКТОРОВ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ГУСЕНИЦ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА ВЕСЕННЕЙ И ЛЕТНЕЙ ВЫКОРМОК (М+т)

Весна Лето

Фактор Б2 Б1ХВ2 Б2 Б1ХБ2

Комплементоподобная активность, тем. ед. ЦИК 3,5 % ЦИК 7 % Фнбронектин, нг/мл Фагоциты, % 0,169ч=0.01 0,157 + 0.02 0,247+0,03 90,7+12,24 0,148+0,003 0,075±0,005 0,360+0,30 50,15+3,89 0,321+0,005 0,440+0,01 0,560 ±0,04 16,39+0,01 0,510+0,0 0,660+0,05 0,740+0,04 21,62+0,02

21,6+1,76 29.0i2.27 24,0+1,3 16,0+0,09

Указанные различия связаны, по-видимому, с особенностями развития весенней и летней грены, условиями выкормки, качеством весеннего и летнего листа шелковицы.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ГУСЕНИЦ РОДИТЕЛЬСКИХ ПОРОД

И ГИБРИДОВ

Экспериментально установлено, что у гусениц шелкопряда гиб ридных комбинаций резистентность в большинстве своем равна ил превосходит родительские породы (табл. 11). Это подтверждаете: и по фагоцитозу, где гибрид Б1ХБ2 значительно превосходит и устойчивости исходные породы Б1 и Б2 (рис. 2).

Таблица t.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ГУСЕНИЦ РОДИТЕЛЬСКИХ ПОРОД И ГИБРИДОВ (М+т)

Порода Гибриды

Показатель

Б1 Б2 Б2ХБ1 Б1ХБ2

Комплемепто- 0,322 ±0,001 0,321+0,005 0,317±0,001 0,5Ю±!Х0

подобнан актив-

ность, тем. ед.

ЦИК 3>,5 % 0,570+0,358 0,440+0,01 0,580+0,10 0,660+0,0 5.

ЦИК 7 % 0,560±0.40 0,560±0,04 0,7-50 ±0,02 0,735±0',04

Фибронектин, 19,96+0,25 16,39±0,01 13,24+0,01 26,6'2+0',02

нг/мл

Фагоциты, % 34,00+1,79 24,00 ±1,30 17,00+1,52 16,00+0,09

ВЛИЯНИЕ ЭКДИСТЕРОНА НА ФАГОЦИТОЗ КЛЕТОК ГЕМОЛИМФЫ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА

При применении гормона экдистерона с целью 'изучения механизмов неспецифической резистентности тутового шелкопряда г его влияния на фагоцитоз клеток гемолимфы установлено, что } гусениц шелкопряда родительской породы Б2 введение малых и больших доз этого гормона вызывает однотипную реакцию. Она характеризуется существенным увеличением числа активных фагоцитов, снижением числа пролейкоцитов, относительной стабильностью макронуклеоцитов >и суммарным процентом активных лейкоцитов (рис. 3).

У гибридов Б2ХБ1 установлено увеличение активных пролейкоцитов, микронуклеоцитов, резкое нарастание процента фагоцитирующих лейкоцитов. При этом исходный уровень активных лейкоцитов у гибридов Б2ХБ1 был :в 2 раза ниже аналогичного показателя у гусениц породы Б2.

Применение экдистерона показало, что реактивность системы фагоцитирующих лейкоцитов у гусениц шелкопряда Б2ХБ1 колн-

Рис. 2. Фагоцитарная активность различных типов клеток у родительских пород.

и гибридов. I —Б2, II —Б2ХБ1, III —Б1, IV —Б1ХБ2

чественно и качественно отличается от исходной породы Б2. Е1 воздействие приводит у них к резкой активации суммарного фар цитоза, что свидетельствует о значительном функциональном р зерзе.

Риг. 3. Влияние различных доз экднстсрона на фагоцитоз у родительской пород

Б2 н гибрида Б2ХБ1: 1 — 52 (малая), II — Б2 (большая), III —Б2ХБ1 (малая), IV— Б2ХБ1 (большая

ВЛИЯНИЕ НЕДОКОРМА НА РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ГУСЕНИЦ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА

При изучении влияния недокорма на резистентность гусени тутового шелкопряда установлено (табл. 12), что этот фактор вь зывает существенную реакцию организма шелкопряда по большш етву показателей резистентности у гибрида Б1ХБ2, характериз\ ющегося увеличением комплементоподобной активности гемолшмф (4-53), содержанием в ней гемолизинов (+66), интерфероноподо* пых субстанций (+37), ЦИК 3,5 % (+23) и существенным сниж< пнем уровня фибронектина, ЦИК 7 % и фагоцитарной активности Реакция организма на недокорм у гусениц шелкопряда пород, Б2 не выходит за пределы 6—16 % от .исходного уровня. Следов:

1ыю, реактивность и адаптационная пластичность у гибрида ХБ2 при недокорме выше, чем у гусениц родительской породы . Выявлено также, что ¡недокорм вызывает в гемолимфе гусениц ^ительской породы Б2 появление реиепторных белкоз и, напро-з, резко снижает их уровень у гибрида Б2ХБ1. Это свндетель-)ует о том, что исходный уровень адаптации и норма реакции "анпзма шелкопряда у пород и гибридов различны, причем у ХБ1 реакция протекает в направлении минимизации напряжении.

Таблш-а 12

ВЛИЯНИЕ НЕДОКОРМА НА ПОКАЗАТЕЛИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА (ВЕСЕННЯЯ ВЫКОРМКА) (А\±т)

Порода и гибрид

Показатель Б2 Б1ХБ2

опыт контроль опыт контроль

мпйементо-цобпая акгнв-:ть, гем. ед. иолизшш, 1. ед. ;бронектнн, 'мл терфероиопо-5ная актпя-:ть, иг/мл Ж 3,5 % Ж 7 % гоцитоз: гоцнты, % ;лые днффе-ицированные сткп 0,179'.±0,01 0,210+0,009 81,3 + 9,73 0,169+0,01 0,190+0,01 90,71+: 12.24 0,230+0,01 * * * 0,250+0,01 ••И".* 27,1 ±4,3-6 0,148+0,003 0,153+0,005 50,2±3,-89

0,329+0,02 0,133+0,01 0,282 + 0,03 29,5+1,47 53,0+3,26 0,329 + 0,04 0,157+0,02 0,247+0.03 21,6+1,76 62,0+2,26 0,43+0,02 0,092+0,02 0,105 + 0,01 17,0±1,52 44,4+22,4 0,593+0,01 0,075+0,006 0,360+0,30 29,0±2,27 60,0+3,07

Р<0.05; ** Р<0.01; *** Р<0.001, где Р — значение вероятности

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОИ УСТОЙЧИВОСТИ КИТАЙСКОГО ДУБОВОГО ШЕЛКОПРЯДА

Показано, что межлинейные гибриды являются важным спосо->м повышения жизнеспособности дубового шелкопряда (табл. 13).

Таблица

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ПЛОДОВИТОСТЬ И ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ ЛИНИИ И ¡МЕЖЛИНЕЙНЫХ ГИБРИДОВ ДУБОВОГО ШЕЛКОПРЯДА НА РАЗНЫХ СТАДИЯХ РАЗВИТИЯ (М±ш)

Линии и Плодовитость, Оплодогьо- Выход Ó а <и CJ

гибриды 5'S С. 2s шт. реиность яиц, °/о гусениц, % s 2 2 —

í 8 йд

Линии:

9 190,3+7,2 98,1+0,15 100+1,01 56,1

(ДХД)

II 14 221,7+9,4 96,5+0,03 85,3+3,07 50,(

(ДХД)

III 9 198,4 ±8,5 96,6+0,09 88,4 + 2,06 69,(

(ДХГ)Х(ДХД) 72.8+2..20

IV 9 175,5+7,6 90,2+0,13 76, £

(ДхГ)х(ДхГ)

Среднее 198,5 ±7,4 95,4+0,12 86,6+2,30 62,<

Гибриды:

V 4 249,5 + 8,2 98,4+0,18 98,7+2,7 75,С

(IXIII)

VI 4 199,7 ±7,9 92,5+0,09 97,3+3,1 64,С

(IIIXl)

VII 4 203,1+6,9 97,6 ±0,23 9? Л+3,2 83,0

(IV xl)

VIII 4 199,3±6,1 98,7+0,15 96,4+2.8 86,0

(Ilxlll)

IX 2 213,6+5,9 97,9+0,09 98,4+2,5 61,5

(IIIXII)

X 3 223,5+8,1 99,5+0,11 98,0+2,8 73,С

(IIXIV)

XI 10 211,6+7,4 97,2 ±0,12 95,4+3,2 78,0

(IVXII)

Среднее 214,33+5,2 97,2+0,13 97,5+2,10 74,3t

** + *

Р<0.001, где Р—значение вероятности

Применение метода термотестирования грены дубового шелке и,ряда позволяет определить комбинационную способность лини межлинейной гибридизации и их различия в неспецифпческой ус тойчивости (табл. 14).

При изучении клеточного иммунитета путем определения фаго цитарной активности разных форменных элементов гемолимфы ус тановлено (рис. 4), что фагоцитарная активность у китайского ду бового шелкопряда отличается наличием макронуклеоцнтов, чт(

олне согласуется с данными, полученными для тутового шелко-яда. Кроме того, фагоцитарная активность отмечена также у олейкоцигов, микронуклеоцнгов и фаг^читов.

Таблиц 14

ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА ТЕРМОТЕСТА ДЛЯ ГРЕНЫ ЛИНИИ И МЕЖЛИНЕИНЫХ ГИБРИДОВ КИТАЙСКОГО ДУБОВОГО ШЕЛКОПРЯДА (М±т)

Кол-во rioßiup-ностей Среднее число оживших Я'ЛЦ 1' контроле, гит. Контроль, % Термотест (47,5 °С; 20 мин) Процент к контролю

нии 4! 1S0,3±7,2 100 66,2±4.3' 34,79

жлннеиныс

>риды 33 223,54:8,1 100 185,6+6,5 83,04

« ■

li

В *

Проленкоцпты, % Макрон-цнты. % Микрон-циты, % Эозипофилы, %1 Фагоциты, % Эноцнтопды, %

Рис. 4. Фагоцитарная активность клеток гемолимфы китайского дубового

шелкопряда

УСТОЙЧИВОСТЬ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА К БОЛЕЗНЯМ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЗАРАЖЕНИИ

С целью выявления генетических различий в устойчивости шел-тряда к болезням при искусственном заражении сравнение пробили между породами Б1 и Б2, их реципрокными гибридами >вого поколения н породами Украинская-11 и Украинская-14 и реципрокными гибридами. В результате установлено (рис. 5), ) относительно новые породы Украинская-11 • и Украппская-14 и тучениые на :их основе гибриды, в сравнении со старыми порода Б2 ул. и Б2 ул. и их гибридными комбинациями проявляют тее высокую устойчивость к бактериальным заражениям.

1 2 3 4 5 6 7 8

|Н1лето, ж В лето, б ВВ весна. ж ¡22 весна, б

Рис. о. Сравнительная устойчивость пород и гибридов тутового шелкопряда

искусственному заражению бактериозами и ядерным нолчэдрозом-1 —Б1, 2 — Б2, 3 — Б1ХБ2, 4—Б2ХБ1, 5 —Укр.-П, 6-Укр.-!4, 7-Укр.-14 ХУкр.-П, 8 —Укр.-11ХУкр.-14

100

Генотипы

Рлс. 6. Сравнительная устойчивость пород и гибридов тутового шелкопря

определяемая по методу термотеста: 1-Б1, 2-Б2, 3-Б1ХБ2, 4 —Б2ХБ1, 5 —Укр.-П, 6-Укр.-14, 7-Укр.-1 ХУкр.-П, 8 — Укр.-11 ХУкр.-14

Эти результаты свидетельствуют о зависимости устойчивости туевого шелкопряда к болезням от генотипа 'и от эффекта гетеро-ica.

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ УСТОЙЧИВОСТИ ТУТОВОГО ШЕЛКОПРЯДА МЕТОДОМ ТЕРМОТЕСТА

При анализе результатов термотестнрованпя грены пород н :брндов тутового шелкопряда (рис. 6) установлено, что среди изуми ых пород более высокой устойчивостью к коротким тепловым ^ »здействпем отличается по первой комбинации порода Белококои-1я-2, а по второй — Украинская-14. Гибридные эмбрионы, в ставший с родительскими породами, оказались более устойчивыми, бнаружены также некоторые различия между реципрекными гиб-(дами. Так, гибрид Б2ХБ1 оказался более резистентен, чем 1ХБ2, а гибрид Украинская-11 хУкраипская-14 и рецнпрокньш [ачптельно устойчив ее, чем гибриды первой комбинации, и бо-}е устойчив гибрид, когда материнской формой является порода кравиская-14.

Метод тер,мтестироваиия па стадии грены прост и доступе!! и )зволяет объективно характеризовать различия в тсплоустойчизо--и пород и гибридов шелкопряда.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Одной из основных причин, наносящих большой урон отрасли, $ляется гибель гусениц от болезней. В связи с этим была изуче-1 эпизоотическая ситуация но основным болезням тутового шел->пряда, а также скрининг и всестороннее изучение большого чис-i антимикробных веществ, ири котором выявлены наиболее эф-ективные препараты для практического применения.

Изучение устойчивости тутового и дубового шелкопрядов к бойням показало наличие у них клеточного и гуморального имму-ггета, а также зависимость резистентности пород и гибридов от нетнческой характеристики и факторов окружающей среды. Эк-териментально показало повышение устойчивости гетерознсных бридов и се снижение при инбридинге. Резистентность у дубово-

шелкопряда связана с вольтпиносгью и резко снижается при ¡рушении температурного оптимума развития.

На основанип полученных данных изучена природа неспецифи-скон устойчивости шелкопряда и 'показано, что она детерминиро-iiia генетически и наследуется полигешю, резко повышается у бридов первого поколения в результате эффекта гетерозиса. Ре-¡стентпость шелкопрядов в онтогенезе зависит от многих факто-)в внешней среды, па всех стадиях развития.

В итоге проведенной ,работы разработаны система профилакт, .ки и комлекс мер борьбы с болезнями, способы повышения усто; чивости и продуктивности тутового я дубового шелкопрядов, 41 будет способствовать более успешному развитию отрасли шелк водства в Украине.

ВЫВОДЫ

1. Анализ эпизоотической ситуации показал, что наиболее ра прострапенным заболеванием тутового шелкопряда является яде цый полиэдроз, который зарегистрирован во всех шелководчесы регионах Украины. Регистрируются также бактериозы, пебрииа уускардина.

2. Основными причинами гибели гусениц тутового шелкопряд на выкормках в хозяйствах Украины являются инфекционные б лезни и недостаточная устойчивость шелкопряда к заболеваниям неблагоприятным факторам внешней среды.

3. При микроскопических исследованиях патологического мат риала тутового шелкопряда в промышленном шелководстве уст новлеко, что ядерный полиэдроз (желтуха) выявлен в монои; фекцин (54 %) и вместе с бактериозами (30,2 %) и мускардшк (2,2%).

4. Анализ исследований тутового шелкопряда в племенном ше ководстве на всех стадиях онтогенеза показал, что ¡наибольшу опасность представляют вирозы, бактериозы и их ассоциации.

5. В результате сравнительного изучения 64 антимикробна препаратов в отношении патогенных для тутового шелкопряда во будителей (болезней выявлены эффективные антибиотики: амик цин, сизомицин, эритромицин, а также препараты йода, красител карболовая, сорбиновая и анграниловая кислоты, детергенты хлорофиллипт. Наибольшая чувствительность возбудителей бакт риозов и мускардины отмечена к диоксидину, нитазолу и декам токсину, что позволило эти соединения рекомендовать для практ ческого использования.

6. Наиболее быстрое привыкание возбудителей инфекционных з болеваний тутового шелкопряда В. thuringiensis, В. bombyeis, S bombyeis, Serratia marcescens наблюдается к дегмину, диоксидип нитазолу и в меньшей степени —'к гентамицину и роккалу. Форм: рование устойчивости бактерий и бацилл к декаметоксину происх дит наиболее медленно.

7. Препараты глутаровый альдегид, эстостерил, декаметокси нитазол и хлорофиллипт рекомендованы как антисептики и дезн фектанты для использования в шелководстве." Наиболее высоку активность проявили хлорофиллипт и эстостерил, которые не ок зывают отрицательного влияния на жизнеспособность грены и г сениц шелкопряда.

Ь. Установлено, что у гусениц тутового и дубового шелкопря-ов имеется протнвоинфекционная защита, обусловленная клеточным и гуморальным факторами иммунитета. Иммунные свойства азных пород и плбридов существенно различны в норме и особен-о в субэкстремальных условиях. Реакции гетерозиспых гибридов аиболее пластичны н адекватны.

9. При выявлении и прогнозировании неспецифической устойчи-ости различных пород и гибридов тутового и дубового шелкопря-ов эффективными методами оказались термо- и холодовой тесты. 1р1гменение этих методов, а также искусственного заражения гу-ениц позволили выявить наиболее устойчивые породы и гетеро-исные гибридные комбинации.

Установлено, что неспецифическая резистентность китайского убового шелкопряда существенно не отличается от тутового.

10. Проведенные исследования явились научной основой при азработке системы профилактики и комплекса мероприятий, на-равленных на повышение устойчивости и продуктивности шелко-рядов, снижение их гибели на всех этапах развития.

]]. Применение комплекса разработанных противонозематозных ероприятнй при заболевании тутового шелкопряда пебриной в лемеином шелководстве Украины позволило оздоровить гренаж-ые заводы и хозяйства и сохранить эпизоотическое их благопо-учие.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для выявления и прогнозирования неспецифической устойчи-зсти тутового шелкопряда применены новые методы: термо- и хордовой тесты.

2. Разработана, издана массовым тиражом и внедряется систе-а мероприятий по оптимизации технологических процессов разве-гиш тутового шелкопряда, профилактике и борьбе с 'болезнями.'

3. Издан и передан производству т виде методических рекомендаций Комплекс ветеринарно-санитарных (Мероприятий по профи-1кт:ике и борьбе с болезнями тутового шелкопряда в племенном и замышленном шелководстве.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Головко В. А., Кириченко И. А. Актуальные проблемы ветеринарок ; шелководстве // Тез. докл. Респ. конф. «Ветеринарная медицина, экономике скис, социальные и экологические проблемы».— Харьков,— 1990,—С. 290.

2. Головко В. А. Опыт ведения шелководства в Китае // Шелк.— 1991.-ЛЬ 2.— С. 27.

3. Головко В. А. Современной состояние развития шелководства с СНГ /, Тез. докл. Междунар. сими. «Актуальные проблемы мирового шелководсгвл;*,-Харьков,—1992,—С. 11 — 12.

4. Головко В. А. Определение разиокачественностп генетических линий туте виг о шелкопряда по множественным формам глюкозо-1-фо:фагазы // Тез. док.4 Междунар. симп. «Актуальные проблемы мирового шелководства».— Харьков — 1992.— С. 48—49.

5. Головко В. А. Гетерогенность культур тутового шелкопряда и проблем! устойчивости в техноценозе // Тез. докл. Междунар. симп. «Актуальные пробле мы мирового шелководства».— Харьков.— 19;92.— С. 95—96.

6. Головко В. А. Итоги работы Украинского научно-исследовательского ннс.п тута шелководства и перспективы исследований по программе ¿Кокон» // Шелк.-1992,— № 1.—С. 22.

7. Головко В. А. Об итогах работы Международного симпозиума «Агауа.н ныг проблемы мирового шелководства» // Шелк.— 1992.— № I.— С. 31—33.

8. Головко В. А. Шелководство и урбанизация биосферы Ц Тез. док. Междунар. симп. «Актуальные проблемы мирового шелководства».— Харькои.--1992,— С. 98.

9. Головко В. О. До питания розробкн тесту на стшккть культур ц.ч»вк< винного шовкопряда до умов середовшца мешкання // Шо'зкшнпцтво.— 1992,-Впп. 19,—С. 5—7.

10. Головко В. О. Про розвиток шовювшщтва та його наукове забезцечепн в Китайсьюй Народшй Республод // Шовювництво.— 1992.— Внп. 19.— С. 31—3

11. Головко В. А., Волянский Ю. Л. К проблеме резистентности возбудитель инфекционных процессов в ветеринарии и медицине н перспективы создан;.1 ног.ых химиопрепаратов // Тез. докл. Междунар. симп. «Актуальные проблем мирового шелководства».— Харьков.— 1992.— С. 97—98.

12. Головко В. А., Беспалов Ю. Г., Антипенская Л. В., Волянский Ю Определение степени резистентносгн гусениц шелкопряда на основе компьютерно: анализа рнтмологнческих параметров их индуляции // Тез. докл. Междуна симп. «Актуальные проблемы мирового шелководства».— Харьков.— 1932.— С. 9

13. Головко В. О., Волянськпй Ю. Л., Шахбазов В. Г. Застосунання ш нслопчннх гуморальннх та клтшнпх4метод!в для ош'нки стчйкогя шошюшг-шо шовкопряда до неспрнятлнвих умов // Тези допов1дей IV з'Тзду Укра!иськ.) ентомолопчного товариства.— Харкш.— 1992.— С. 44.

14. Головко В. О., Волянськпй Ю. Л., Шахбазов В. Г. Чутливюгь гее шта.м'в збудннк1в хвороб шовковнчного шовкопряда до антибактер1алытх пр Паратов // Тези допов'ден IV зЧзду Укра1нського ентомолопчного товариства,-Харкав,— 19Э2.— С. 43.

15. Головко В. О., Кириченко I. О., Дмитрова О. В., Клпменк.о В. В. Шля. в','ведения пбшдав шовковнчного шовкопряда стШких до вфуоу ядерного ко. етрсзУ // Тези доповщей IV з'1зду Украшського ентомолопчного топарпства. ХяркГв,— 1992,—С. 45.

16. Головко В. А., Злотпн А. 3., Кириченко И. А. Система мероприятий оптимизации технологических процессов разведения тутового шелкопряда, ш фнлактике н борьбе с болезнями (Методические рекомендации для специалист '■-■-'мжных заводов, спецхозов, колхозов, фермерских и др. хозяйств).— Харькс РИП «Оригинал», 1992.—58 с.

17. Головко В. А., Злотпн А. 3., Мохан Мурарц Джа. Русско-украин« английский словарь по шелководству,—Харьков: РИП «Оригинал», 1992.-73

!8. Голоако В. Л., Пилипенко Б. Ф., Злотин А. 3. и др. Разработка нового видл биологической активной добавки из куколок тутового шелкопряда // Шелк.— 1992.— № 5,—С. 12.

19. Злотш О. 3., Головко В. О., Хпрнченко В. М. 1 ¡и. Шляхи оптнвтаци технологи греновнробшщтва та знижения собшартост1 гренн // Тези допошдеи IV зЧзду УкраТнського снтомолопчного товариства.— Харюв.— 1992.— С. 60—67.

20. Кириченко I. О., Г'олопко В. О., Крузе I. Ентомопатогепт мжрорганЬтП! греня шовковичного шовкопряда 1 ефективннй зас1б П дезннфекшТ // Тези допо-ш'дей IV з'Узду Украшського снтомолопчного товариства.— Харыв.— 1992.— С. 73-74.

21. Клименко В. В., Головко В. А. Бнотехнологическое шелководство // Тез. докл. Междунар. симп. «Актуальные проблемы мирового шелководства».— Харьков.— 1992.— С. 56—57.

22. Клименко В. В., Спиридонова Т. Л., Фролова Н. М, Плугзру И. Г., Головко В. А. н др. Гетерозиготность и гетерозис в шелководстве // Тез. докл. Междунар. симп. «Актуальные проблемы мирового шелководства».— Харьков.—

1992,- С. 55—56.

23. Коничев А. С., Коничева А. П., Урванцева Г. А., Головко В. А. Множественные формы фосфатаз в гемолимфе личинок тутового шелкопряда н некоторых видах стрекоз // Тез. докл. Междунар. симп. «Актуальные проблемы мирового шелководства».— Харьков.— 1992.— С. 60—61.

24. Браславский М. Е., Головко В. А., Акнменко Л. М., Стоцкпй М. И. Продуктивность популяций тутового шелкопряда, завезенных из Китая в условиях Украины // Известия Харьковского энтомологического общества.— Харьков,—1993.—Т. 4,—Вып. 1,— С. 142—145.

25. Браславский М. Е., Головко В. Л., Акнменко Л. М. и др. Биологические и технологические показатели индийских пород в условиях Украины // Материалы научно-практ. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства.—■ Харьков: РИП «Оригинал», 1993,—С. 81—83.

26. Головко В. А. О результатах научных исследований но программе «Кокон» в Украине // Материалы научно-пракг. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП «Оригинал», 1993.— С. 7—14.

27. Головко В. А. Повышение устойчивости тутового шелкопряда — важнейший фактор реализации его продуктивности // Материалы научно-практ. копф. «Проблемные вопросы развития шелководства».:—Харьков: РИП «Оригинал»,

1993.-С. 125—133.

28. Головко В. Л., Волянскнй Ю. Л., Кириченко И. А. и др. Новые протнво-мнкробные средства для борьбы с бактериозами тутового шелкопряда // Материалы научно-практ. копф. «Проблемные вопросы развития шелководства»,— Харьков: РЙП «Оригинал», 1993.—X. 163'—165.

29. Головко В. А., Волянскнй Ю. Л., Васильев Н. В. и др. Характеристика факторов иммунитета у гусениц тутового шелкопряда // Материалы научно-ппакт. конференции «Проблемные вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП «Оригинал», 19931—С. 118—120.

30. Головко В. А., Злотин А. 3. Шелководство: стратегия XXI века // Шелк,— 1993,— № 5—6,—С. 35—36.

31. Головко В. А., Кириченко И. Л. Инфекционные болезни тутового шелкопряда в шелководческих регионах мира // Материалы научно-практ. копф. «Проблемные вопросы развития шелководства». Харьков: РИП «Оригинал», 1993.—• С. 121—126.

32. Головко В. О., Клименко В. В. Сучасш папрями дослщжень терморе-знстентност! шовкопряда // В1сник аграрий науки,— 1993.—■№ 7.— С. 93—96.

33. Головко В. А., Кириченко И. А., Злотнн А. 3. Эпизоотическая ситуация по псбринс в Украине и эффективность комплекса оздоровительных мероприятий // Материалы научно-практ. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».—'Харьков: РИП «Оригинал», 1993'.—'С. 133—136.

34. Головко В. А., Кириченко И. А., Клименко В. В. Устойчивость партено-клонов и гибридов тутового шелкопряда к провокации ядерного полиэдроза

тепловым шоком // Материалы паучпз-пракг. конф. «Проблемные бопоосы развит»^ шелководства»,—Харьков: РИП «Оригинал», 1993,—С. .140—144.

35. Головко В. А., Кириченко И. АЛ Шахбазов В.' Г. и др. Устойчивость пород и гибридов тутового шелкопряда к бактериальной и вирусной инфекциям /'/' Материалы иаучно-практ. конференции «Проблемные вопросы развития шелководства»,—Харьков: РИП «Оригинал», 1993 — С. 144—145.

36. Головко В. А., Кириченко И. А., Клименко В. В. Желтухоустойчивость партеноклонов и гибридов тутового шелкопряда // Материалы иаучао'-практ. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП «Оригинал», 1993.— С. 146—150.

37. Головко В. А., Кнрнченко И. А., Щербак В. Н. и др. Испытание препаратов надуксусной кислоты для обеззараживания грепы тутового шелкопряда ог бактериальной и грибной инфекции // Материалы научно-практ. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП «Оригинал», 1ЙЙЗ.— С. 155—159.

38. Головко В. А., Кириченко И. А., Кучер Н. С. и др. Испытание поена ратин для профилактики и борьбы с ядерным полиэдрозом тутового шелкопряда //' Материалы научно-практ. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП «Оригинал», 199-3,— С. 160—163.

39. Головко В. А., Надтока В. Л., Кириченко И. А. и др. Скрининг активных противомнкробных средств растительного происхождения в отношении возбудителей бактериальных болезней тутового шелкопряда // Материалы нгучно-нракт. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП «Оригинал», 1933,—С. 166—168.

40. Головко В. А., Мухина О. Ю., Злотпн А. 3. Биостимуляторы, как фактор повышения устойчивости и продуктивности тутового шелкопряда.— Харьков: РИП «Оригинал», 1993.— 48 с.

41. Головко В. А., Мухина О. Ю., Злотпн А. 3. и др. Ног.ыд подход к применению биостимуляторов на выкормках тутового шелкопряда ,'/ .Материалы на'.'чно-пракг. конф. «Проблешше вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП «Оригинал», 1993,—С. 113+-115.

42. Кириченко И. А., Головко В. А. Комплекс ветерннарио-сашп арных мероприятий по профилактике и борьбе с болезнями тутового шелкопряда н племенном и промышленном шелководстве (Метод, рекомендации).— Харьков: РИП «Оригинал», 1993,— С. 32.

43. Крузе И. Э., Тимотеус X. Р., Хинрнкус Т. X., Головко В. А., Киркчси-ко И. А. ц др. Препараты надуксусной кислоты для шелководства // Материалы научно-практ. конференции «Проблемные вопросы развития шелководегза».— Харьков: РИП «Оригинал», 1990,— С. 151 — 154.

44. Пнлнпенко Б. Ф., Головко В. А., Зотова В. Ф. Получение биологически активных веществ из куколки тутового шелкопряда // Материалы научнз-г.ракт. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».— Харьков: РИП ,;0')л-пшал», 1993,—С. 75—76.

45. Плугару И. Г., Плугару Р. И., Головко В. А. Выявление перспективных гибридов тутового шелкопряда с помощью термического партеногенеза // Известия АН Республики Молдова (серия биологические и химические hsvkk).— 1993.— № 2,—С. 75—79.

46 — Плугару И. Г., Плугару Р. И., Головко В. А. и др. Создание высоко-гегерознсных гибридов тутового шелкопряда, перспективных для промышленного шелководства // Материалы научно-практ. конф. «Проблемные вопросы развития шелководства».—'Харьков: РИП «Оригинал», 1993.—'С. 97—100.

47. Головко В. О., Кириченко I. О., Шахбазов В. Г. i ¡н. Пор1вняльна стжкють ношд i пбрид1в шовковичного шовкопряда проти бактер1апышх те aipycuoi жфекнн // Шовмвництво.— 1994.— Внп. 20.— С. 46—48.

48. Головко В. О., Кириченко I. О., Щербак В. М., Дейнгка О. О. Високо-ефективнлй препарат i cnocio його застосу'вання для знезаражения гренп шопко-впчного шовкопряда // Шовювинцтво.— 1994.—Вип. 20.— С. 49—53.

49. Головко В. А., Кириченко И. А., Чмутова Е. В. Препараты надукеусиой. сне.чоты п диальдегндов для дезинфекции объектов шелководства // Шелк — 1<КМ,—№ 5—6,—С. 15—16.

50. Головко В. О., Пилипеико Б. Ф., Злотш О. 3. Розробка нового виду нолгпчно-актнвноТ добавки з лялечок шовковнчного шопкопрята // Шовкпишцт-зо,— 199+.— Вии. 20,—С. ЗФ-Зб.

51. Надтока В. Л., Кириченко I. О., Головко В. О., Шульга Н. М. Ефек-штясть препарат1в рослпнного походжепия для боротьби з бактериозами шовко-знчного шовкопряда ,// Мжробюлопчний журнал.— 1994.— Т. 56.—4.— С. 70.

52. Головко В. А. Пути повышения резистентности тутового шелкопряда к "юдсзням и неблагоприятным факторам среды.— Харьков: РИП «Оригинал», 1995,— 174 с.

53. Головко В. А., Злотин А. 3., Кириченко И. А., Плугару И. П. Энцикло-тедж>ескнй словарь по шелководству.— Харьков: РИП «Оригинал», 1995.— 221 с.

54. Головко В. О., Кириченко 1. О. Протнмжробш препарчтц для боротьби ) бактерюзами на вигод1влях шовковнчного шовкопряда // 1нформацшн;ш бю-тз;ч'!!ь 1нстнтуту експернментальноГ клннчпоГ ветерннарноГ меднцннн.— Харк1в.— 1995 —С. 63.

55. Головко В. О., Кириченко I. О, Ефектнвт препарата для боротьби з ¡пфекшею шовкопряда в гренажному виробнпцтв) // 1пформлц|Г{1Ша бюлетеш. 1ист1П\'ту експернменталыю! клппчно1 ветеринарно! мсднтшн. — Харк1в.— 1995.— С. 04."

55. Головко В. А., Чепурная Н. П., Злотин А. 3. Селекция п контроль качества культур насекомых.—'Харьков: РИП «Оригинал», 19915.— 173 с.

57. Головко В. О., Злотш А. 3., Бойчук Ю. Д., Чепурпа II. П. Програма гуртч:в юннх шовковод1в (Методнчш рекомендацц для студентов сьльськогоспо-даяських факультет« вуз ¡в та вчител!в шк1л).— Харкш: РВП «Орипнал», 1995.— 29 г.

38. Злотин А. 3., Головко В. А. Техническая энтомология. Русско-укранпский толковый словарь.— Харьков: РИП «Оригинал», 1995.— 186 с.

59. Кириченко И. А., Головко В. А., Суханова И. П. Бактериологические исследования грены тутового шелкопряда и изучение выделенных микроорганизмов // Шелк.— 1995.— № 1—2,—С. 12—13.

60. Браславс.кий М. Е., Головко В. А., Ляшенко Ю. В. и др. Значение методов математического прогнозирования при создании исходных популяций в ходе селекционной работы // Материалы докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретнч. основы н реализация идей Лун Пастера и И. И. Мечникова п шелководстве).— Харьков,— 1995,— С. 30—34.

61. Брас.тавскнй М, Е., Головко В. А., Вишшченко И. И., Стойкий М. И. Изменение основных биологических показателей тутового шелкопряда в племенном гренопронзводстве // Материалы докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретнч. основы ¡> реализация идей Лун Пастера и И. Мечникова в шелководстве).— Харьков,— 1996.— С. 52—56.

г.2. Воляпскнп Ю. Л., Надтока В. Л., Кириченко И. А., Головко В. А. Высокоэффективные препараты для борьбы с инфекционными болезнями шелкопряда — в гренажное производство // Материалы докл. Междунар. научной кои^ереншш, посвященной 150-летшо со дня рождения И. И. Мечникова.-г-Хпиз.ков— 1996,— С. 3—8.

63. Головко В. О. Проблемн та перспективи розвитку шозюзннцтва в УкраТ-н' // Пропозши'я.— 1996.— № Г.—С. 42.

-54. Головко В. А. Значение исследований Лун Пастера и Ильи Мечникова для решения актуальных задач шелководства и ветеринарии // Материалы докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретнч. основы и реализация идей Луи Пастера и И. Мечникова в шелководстве).—'Харьков.— 1996.— С. 3—8.

65. Головко В. А., Волянский Ю. Л., Надтока В. Л., Кириченко И. Л. и др Новые средства для снижения заболеваемости шелкопряда и повышение ег< продуктивности // Материалы докл. Междунар. научной конференции, поевя щенной 150-летию со дня рождения И. И. .Мечникова.— Харьков.— 1996.—С. 77—78

66. Головко В. А., Браславскпй М. Е., Злотнн А. 3. п др. Значение иеспе цифнческой устойчивости пород и гибридов тутового шелкопряда в повышенш продуктивности шелководства // Материалы докл. Междунар. научной конфе реинпн, посвященной 150-летшо со дня рождения И. И. Мечникова (секция теоретич. основы и реализация идей Луи Пастора и И. Мечникова в шелко. водстве).— Харьков,— 1996.— С. 9—15. .

67. Головко В. А., Шахбазов В. Г., Пилипенко Б. Ф. Перспективы культурь китайского дубового шелкопряда в условиях Украины // Материалы докл. Меж дунар. научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения И, И. Меч ннкова (секция: теоретич. основы н реализация идей Лун Пастера и И. Мечникова в шелководстве). —Харьков.— 1996.— С. 16—20.

68. Головко В. А., Кириченко И. А., Шахбазов В. Г. Защита от болезне] я повышение неспецифической устойчивости тутового шелкопрчда в условия* Украины // Материалы докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летию со дни рождения И. И. Мечникова (секция: теоретич. основы и реализация идей Лун Пастера и И. Мечникова в шелководстве).— Харьков.— 1996.— С. 34—39.

69. Злотин А. 3., Головко В. А., Безъязычная О. В., Шапозал Л. Н. Использование тутового шелкопряда для бноиндикации инсектицидов // Матерналь докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летню со дня рож деипя И. И. Мечникова (секция: теоретич. основы и реализация идей Лун Пастера и И. Мечникова в шелководстве).— Харьков.— 1996.— С. 39—42.

70. Кириченко И. А., Головко В. А., Волянский Ю. Л. и др. Обоснованна методических и методологических подходов борьбы с инфекционными болезням!, в шелководстве н их практическое применение // Материалы докл. Междунар научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения И. И. Мечникова (секнпя: теоретич. основы и реализация идей Лун Пастера и И. Мечников1. I! Шелководстве).— Харьков.— 1996.— С. 62'—65.

71. Кириченко И. А., Головко В."А., Суханова И. П., Чмутоза Е. В. Эпизоотическая ситуация по бактериальным ц вирусным заболеваниям тутового шелкопряда в Украине // Материалы докл. Междунар. научной конференции, по-езященной 150-летню со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретич. основы и реализация идей Луи Пастера п И. Мечникова в шелководстве).— Харьков,—1996,—С. 90—9-4.

72. Кириченко И, А., Головко В. А„ Аретинская Т. Б., Булавлна О. И Способ борьбы с инфекциями тутового и дубового шелкопрядов в племенном и промышленном шелководстве // Материалы докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летию со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретич. основы н реализация идей Луи Пастера и И. Мечникова в шелководстае) .— Харьков,—1996 —С. 94—96.

73. Кириченко И. А., Головко В. А., Свергун Ю. Ф., Бунина Е. Н. Эффективность сочетанного применения УФИ эрнтемного н бактерицидного диапазона для борьбы с бактериозами и микозами тутового шелкопряда в гренажном производстве ,// Материалы докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летню со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретич. основы п реализация идей Луп Пастера и И. Мечникова в шелководстве).— Харьков — 1998.— С. 97—99.

74. Клименко В. В., Головко В. А. Биотехнология и тутозый шелкопряд //' Материалы докл. Междунар. научной конференции, посвященной 150-летт-) сс дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретич. основы и реализация идей Лун Пастера и И. .Мечникова в шелководстве).— Харьков.— 1996,—С. 134—136

75. Мухина О. Ю., Головко В. А., Злотин А. 3. Повышение устойчивости тутового шелкопряда К экологическим факторам путем оптимизации примспеккя

шсстнмуляторов // Материалы докл. Междунар. научной конференции, посзя-иенной 150-летшо со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретнч. основы 1 реализация идей Луи Пастера и И. Мечникова в шелководстве).— Харьков.— 1990.— С. 15&— 162.

76. Чепурная Н. П., Головко В. А., Злотпн А. 3., Кириченко В. П., Гала-кпл О. В. Новый принцип оценки качества племенных и промышленных культур гпового шелкопряда // Материалы докл. Междунар. научной конференции, но-вященнои 150-летшо со дня рождения И. И. Мечникова (секция: теоретнч. хиовы и реализация идей Лун Пастера н И. Мечникова в шелководстве) — Чарьков.— 1995,— С. 85—90.

77. Shaklibazov V. G., Goiovko V. A. Bazele genetice ale rezistei viermilor go naiase la bo!i si factori nefavorabili ge magiu // Megicina veterinara si cresterea uiimalelor.— 1992.— Anul. XLII.—N 2,—P. 11—12.

■ 78. Goiovko V. A., Zlotin A. Z., Kiriclienko I. A. et al. Stadies on the causes )f linger cocoon emergence and ways of their avoidance // Acta Agricultural 3oreali — occidenialis Sinica, China.— 19Э2.— Vol. 1,—N2. — P. 39-Г2.

Головко В. Л. Устойчивость тутового и дубового шелкопрядов к болсзгти неблагоприятным факторам среды.

Диссертация па соискание ученой степени доктора ветеринарных наук ь специальности 16.00.03 — ветеринарная -микробиология, вирусология, эпизоотолоп и иммунология. Национальный аграрный университет Украины, Кнев, 1996 г.

Защищается диссертационная работа, в которой содержатся результат экспериментальных исследований относительно изучения эпизоотической ептуащ по болезням тутового шелкопряда, проведения скрининга и всестороннего из; ченпя большого числа антимикробных средств, изучения устойчивости тутово! п дубового шелкопрядов к болезням и неблагоприятным факторам среды.

Установлено, что наиболее распространенными болезнями тутового шелк' пряда является ядерный полиэдроз, пебрина, бактериозы и ыускардина. Выявлен и рекомендованы эффективные антимикробные средства. Показано, что у тутов< го и дубового шелкопрядов противоинфекционная защита обусловлена клеючны • н гуморальным факторами иммунитета. Для выявления и прогнозирования кест "¡ф:1Члской устойчивости шелкопрядов разработан и широко применен термотес Разработаны и внедряются в производство Система и Комплекс мероприятий i оптимизация технологических процессов разведення тутового шелкопряда, npi фллактпке и борьбе с болезнями.

V. A. Golovko. Oaken and Chinese Silkworm Resistance against Diseases ai Unfavourable Eiiviropmenial Factors.

The thesis for the degree of Ph. D. (Veterenary) in 16.00.03 speciality-Vctcrenary Microbiology, Virology, Epizootology and Immunology. National Agr rian University of the Ukraine, Kiev, 1996. -

The thesis which contains the results of experimental researches concernir study of epizootic situation with respect to silkworm deseases, screening and comprehensive study of a large number of antimicrobial means, study of oak< and Chinese silkworm resistance against diseases and unfavourable enviropment factors is defended.

Nuclear polyhedrosis, pebrine and muscardine have been found to be the mo wide-spread diseases of the Chinese silkworm. Efficient antimicrobial means hai been developed and recommended. Antimicrobial resistance of the oaken and Chine: silkworm has been shown to be depended on cellular and humoral factors ' immunity. Thermotest has been developed and widely used for revealing ar forecasting non-specific resistence of silkworm. The System and Complex of moasi res for optimization of technological processes of silkworm breeding, for diseas; p.-ophylaxis and control have been developed and is applying in production.

Сдано а набор 23.04.96 г. Подписано в печать 5.05.96 г. 84x60'/16. Бума! типографская № 1. Гарнитура литературная. Печать высокая. Усл. печ. л. 2, Уч. изд. л. 2,7 Зак. 1349. Тир. 100.

Харьков-52, ул. Конева 10/2. Типография № 2.