Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Средства и методы специфической профилактики болезней птиц вирусной этиологии

4. ВЫВОДЫ

1. В качестве продуцента живой вакцины против НБ предложен новый мезогенный штамм "ГАМ-61". По основным свойствам (антигенному составу, иммунобиологическим и физико-химическим характеристикам) он соответствует эталонным штаммам вируса НБ. Отличие этого штамма от других известных представителей мезогенной группы заключается в отсутствии остаточной вирулентности для цыплят младших возрастных групп и выраженной иммуногенности при различных методах вакцинации. Штамм генетически стабилен, нереверсибелен, способен к горизонтальной передаче не иммунной птице.

2. Разработана и освоена технология изготовления живой лиофилизированной вакцины из штамма "ГАМ-61". Вакцина безвредна, антигенно активна и иммуногенна при аэрозольном, интраназальном, внутримышечном и энтеральном методах введения. Резистентность у большинства привитых цыплят наступает в течение 72-96 часов. Иммунитет после двух-трехкратного применения вакцины сохраняется до полутора лет. Срок годности вакцины при температуре хранения 4-6° С не менее 18 мес. Для оценки иммуногенности препарата предложен метод сероконверсии.

3. Разработана и освоена технология изготовления живых сухих вирусвакцин против ИББ из штаммов "Винтерфилд 2512" и "БГ\ Вакцинные штаммы нереверсибельны, не вызывают атрофию фабрициевой бурсы (ИАБ>0,7) и не обладают иммунносупрессивным действием. Благодаря выраженному антигенному соответствию большинству полевых изолятов, циркулирующих на территории РФ, вакцины из данных штаммов обладают более высокой эффективностью в производственных условиях по сравнению с аналогичными зарубежными препаратами. Вакцинация в комплексе с веггеринарно-санитарными мероприятиями позволяет ликвидировать заболевание и предотвратить появление новых случаев ИББ.

4. Схемы применения вакцины необходимо оптимизировать для каждого крупного хозяйства в зависимости от периода полураспада материнских антител, варьирующего от 2,5 до 5,5 сут, и уровня пассивных антител в момент проведения вакцинации, который не должен превышать 7,0 в РН или 2,6-2,69 ^ в ИФА. Продолжительность посгвакциналь-ного иммунитета составляет 90 сут, что обеспечивает защиту привитых цыплят в течение всего восприимчивого к ИББ периода.

5. Вакцина из штамма "Винтерфилд 2512" предназначена для применения в угрожаемых по ИББ хозяйствах. При двукратном введении с интервалом 10-14 сут методом выпаивания в дозе 4,0 ^ ТЦДИ вакцина вызывает образование вируснейтрализующих антител в титре 8,0-9,0 и обеспечивает защиту 90-100 % привитых цыплят.

6. Для размножения вакцинного штамма "Винтерфилд 2512" наиболее подходящими системами являются 9-10 сут СПФ-куриные эмбрионы или первичная культура из их тканей (ФЭК). Инфицирующая доза вируса составляет 0,1-1,0 ТЦД50/кл, обеспечивая его накопление в титре не менее 7,0 ^ ТЦД!0. Для оценки иммуногенности и безвредности серий вакцины предложен метод расчета индексов атрофии бурсы привитых и контрольных цыплят в сочетании с определением протективного уровня антител (не менее 7,0 1о^ в РН).

7. Вакцина из искусственно-аттенуированного штамма "БГ" предназначена для применения в хозяйствах, расположенных в зонах распространения высоковирулентных возбудителей ИББ. Штамм способен активно размножаться в организме цыплят и вызывать умеренную постваксиальную реакцию, не оказывая иммуносупрессивного действия. Двукратное пероральное, интраназальное или окулярное введение вакцины в дозе 2,0 1% ЭИД50 вызывает индукцию вируснейтрализующих антител в титре 4,0 и > 10^ (> 2,7 ^ в ИФА) и обеспечивает устойчивость цыплят к заражению в экспериментальных и полевых условиях в течение 90-100 дней.

8. Единственной биологической системой для репродукции штамма "БГ' являются 10-ти сут СПФ - куриные эмбрионы, инфицируемые на ХАО в дозе 1,0-2,0x104-0 ЭИД!0. Вирус размножается в тканях и оболочках эмбриона, накапливаясь до титра 4,5-5,0 ЭЛД50. Лнофшшзированная вакцина сохраняет активность в течение 12-24 мес при температуре 4-6°С и минус 20"С. Для контроля иммуногенности вакцины предложен метод экспериментального заражения привитых цыплят, коррелирующий с уровнем антительного ответа в РН и ИФА.

9. Разработана технология изготовления и биологического контроля инактивирован-ной вакцины "ОВАК" против синдрома снижения яйценоскости-76, включающая накопление вируса в утиных эмбрионах, его инактивацию ДЭИ (0,05-0,3 %, 37+р,5°С, 24-48 ч), нейтрализацию избытка реагента тиосульфатом натрия, сорбирование антигена на 1 %-ном ГОА или 0,4-0,5%-ном аэросиле при рН 7,4-7,6. Препарат не теряет активности в течение 12 мес, создает иммунитет через 2-3 недели после однократного введения и защищает птицу от инфицирования в течение всего репродуктивного периода. В сравнении с отечественными и импортными аналогами вакцина "ОВАК" является наиболее антигенно активной и иммуногенной; обеспечивает выработку антител на уровне 5,0-8,73 \cig2 и предотвращает снижение продуктивности в среднем на 13%. Высокая иммуногенность вакцины "ОВАК" обусловлена использованием для ее изготовления отечественного эпизоотического штамма "Бр 93" и введения в одну прививную дозу не менее 12 1о§2 ГАЕ вирусного антигена.

10. Штаммы аденовируса уток, вызывающие синдром снижения яйценоскости кур, антигенно не однородны и отличаются между собой по ГА-антигену на 25-40 %.

11. Предложена для серийного производства и практического применения живая куль-туральная вакцина против ВГУ, выпускаемая в нативной и лиофилизированной формах. Технология изготовления включает роллерное культивирование вируса в 2%-ной суспензии эксплантатов тканей утиных эмбрионов с последующей гомогенизацией и лиофилиза-цией. Срок годности нативной вакцины - 6 мес, лиофилизированной - 12-15 мес. При внутримышечном введении в дозе 4,0 ЭИД50 вакцина надежно предохраняет от заболевания взрослых уток-матерей и их потомство в течение всего периода естественной восприимчивости.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Внедрены в ветеринарную практику живые вирусвакцины против НБ из штамма "ГАМ-61", ИББ из штаммов "Винтерфилд 2512" и "БГ", ВГУ из штамма "ВГНКИ-К" и инактиви-рованная вакцина против ССЯ-76 "ОВАК". Все вакцины зарегистрированы в РФ, производятся серийно на биологических предприятиях страны и широко используются в птицеводческих хозяйствах России и стран СНГ.

Для ветеринарных лабораторий и специалистов птицехозяйств предложены новые "Методические указания по определению уровня антител к вирусу ныокаслской болезни в реакции торможения гемагглютинации (РТГА)", которые предназначены для аргументированного обоснования схем профилактики НБ, ретроспективной диагностики данного заболевания, типирования гемагглютинирующих изолятов, а также серологического мониторинга за циркулирующими возбудителями ныокаслской болезни.

6. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Заключительный отчет "Определить основные биологические характеристики и методы контроля штамма "А(в)ВН", испытать его антигенную активность и иммуногенность при различных методах введения" (1991-1993) № Гос.регистрации 01910034974.

2. Смоленский В.И., Горева И.П.,Родин Ю.В., Руденко Т.В. Поствакцинальная инфекция у цыплят, иммунизированных вирусом ньюкаслской болезни. // Сб.научн.тр.ВГНКИ,1994, 56, 214-218.

3. Руденко Т.В., Смоленский В.И., Горева И.П., Родин Ю.В. Совершенствование методики контроля вакцин против НБ // Сб. науч. тр.ВГНКИ, 57, 1995,56-63.

4. Смоленский В.И., Горева И.П., Родин Ю.В., Руденко Т.В. Сухая вирусвакцина против ньюкаслской болезни из мезогенного штамма "ГАМ-61" ("А(в)ВН") // Ж. "Ветеринария", 1995, 5, 8.

5. Руденко Т.В., Смоленский В.И., Горева И.П., Родин Ю.В. Совершенствование методики контроля вакцин против НБ. // Сб. науч. тр. ВГНКИ, 57, 1995,56-63.

6. Смоленский В.И., Горева И.П., Родин Ю.В., Руденко Т.В. Сухая вирусвакцина против ньюкаслской болезни из мезогенного штамма "ГАМ-61" ("А(в)ВН") // Ж. "Ветеринария", 1995, 3,8

7. Заключительный отчет "Совершенствование методики контроля иммуногенности вакцин против НБ" (1994-1996) № Гос.регистрации 01940007075.

8. Смоленский В.И., Руденко Т.В. Механизм формирования иммунитета при использовании вакцины против ньюкаслской болезни из штамма "ГАМ-61" // Тезисы доклада науч-но-произв.конф., поев. 100-летию со дня основания Курской биофабрики, Курск, 1996, 298-300.

9. Сюрин В.Н., Смоленский В.И., Бондарь В.В., Григорьев В.И., Коротеев Л.М. Препараты для профилактики ньюкаслской болезни и оспы птиц // кн. "Курская биофабрика. К 100-летию биол.пром. России, 1986-1996", Курск, 1996,502-517.

10. Михальский Г.А., Горева И.П., Смоленский В.И., Родин Ю.В., Руденко Т.В. Штамм Paramyxovirus, используемый для изготовления вакцина против ньюкаслской болезни кур / / Патент № 2055890, 1996 г.

11. Смоленский В.И., Руденко Т.В., Родин Ю.В., Горева И.П. Разработка и испытание новой вакцины против ньюкаслской болезни. // Ж. "Вестник ветеринарии", 1998,2, 75-82.

12. Родин Ю.В., Руденко Т.В., Смоленский В.И., Горева И.П., Родин В.В. Оценка эпизоотической ситуации и особенности специфической профилактики при ньюкаслской болезни // Ж. "Вестник ветеринарии", 1998,2, 66-75.

13. Руденко Т.В., Смоленский В.И. Иммунопрофилактика ньюкаслской болезни в пти-цехозяйствах // Ж. "Ветеринария", 1998, 12, 18-20 .

14. Грибанов О.Г., Перевозчикова Н.А., Старов С.К., Смоленский В.И., Руденко Т.В. Штаммовая дифференциация вируса ньюкаслской болезни с помощью обратной транскрип-ции-ПЦР и секвенирования: смена популяции // Ж. Молекулярная биология, 1998 (в печати).

15. Заключительный отчет "Провести сравнительную оценку и отобрать из мезоген-ных штаммов вируса НБ наименее реактогенный для изготовления вакцины" (1986-1990) № Гос.регистрации 01860104284.

16. V.I.Smolensky, T.V.Rudenko, I.P.Goreva, Yu.V.Rodin. New "GAM-61" strain vaccine against Newcastle disease // Pr.XI th Internation congress of the World Veterinary Poultry Association, Budapest, 1997, 207.

17. Smolensky V.I., Skotnikova T.A. Newcastle disease vaccine: perfection of production and application method // Pr. XI th Internation congress of the World Veterinary Poultry Association, Budapest, 1997,213.

18. Gribanow O.G., Starow S.K., Smolensky V.I., T.V.Rudenko.,V.V.Drygin, A.A. Cusew. The study of russian strains of Newcastle disease virus. // Pr.10 th European poultry conference, Jerusalem, Israel, 1998, 78.

19. Смоленский В.И., Норкина C.H., Полежаев Ф.И., Григорашева И.Н. Сравнительная оценка антигенной активности и иммуногенности экспериментальных вакцин из различных штаммов вируса болезни Гамборо // Сб.науч.тр. ВГНКИ, 1995,57,262-267.

20. Борисов А.В., Кузнецов В.Н., Кузнецов Ю.В., Гусев А.А., Смоленский В.И., Норкина С.Н. Иммуногенность различных живых вакцин против инфекционной бурсальной болезни птиц // Мат. Всерос. Научно-практич. конференции ВНИИЗЖ "Вирусные болезни с/ х животных", Владимир, 1995,233.

21. Борисов А.В., Кузнецов В.Н., Кузнецов Ю.В., Федосеев К.Ю., Гусев А.А., Смоленский В.И., Норкина С.Н. Отработка схем иммунизации птицы против инфекционной бур-сальной болезни вирусвакциной сухой из штамма "БГ" // Мат. Всерос. Научно-практич. конференции ВНИИЗЖ "Вирусные болезни с/х животных", Владимир, 1995,234.

22. Муляк С.В., Смоленский В.И. Вакцинопрофилактика инфекционной бурсальной болезни в неблагополучных хозяйствах // Ж. "Ветеринария", 1996,7,29-32.

23. Муляк С.В., Смоленский В.И. Вакцинопрофилактика шфекцшжн бурсальшп хво-роби в небеспечних птахогосподарствах // Мат. мЬквуз1вскШ Hayxosoi конференцп, 1996, 47-49.

24. Смоленский В.И, Норкина С. Н. Изучение антигенных свойств вакцины против болезни Гамборо из штамма "Винтерфилд 2512 // Тезисы доклада научно-произв. конференции, посвящ. 100-летию со дня основания Курской биофабрики, Курск, 1996,227-229.

25. Заключительный отчет "Изучение иммунобиологических свойств вакцинных штаммов вируса болезни Гамборо" (1994-1996) № Гос. регистрации 01960006555.

26. Борисов А.В., Кузнецов В.Н., Гусев А.А., Кузнецов Ю.В., Смоленский В.И., Норкина С.Н. Штамм "БГ" вируса инфекционной бурсальной болезни птиц и вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц // Патент № 2127602, 1997 г.

27. Смоленский В.И. Разработка средств специфической профилактики инфекционной бурсальной болезни.// Материалы научной сессии РАСХН "Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России ( к 100-летнему юбилею ВИЭВ), М.,1999. (в печати).

28. Smolensky V.I., Borisov A.V., Drygin V.V., Scherbakova L.O., Bortuk Y.A. Peculiarities of epidemiological signs of infectious bursal disease (IBD) in Russia // Pr. 10 th European poultry conference, Jerusalem, Israel, 1998, 79.

29. Smolensky V.I, Borisov A.V., Drygin V.V., Scherbakova L.O., Bortuk Y.A. Profilactic of infectious bursal disease in Russian Federation. // Pr. 10 th European poultry conference, Jerusalem, Israel, 1998, 78.

30. Борисов A.B., Кузнецов В.Н., Гусев A.A., Кузнецов Ю.В., Смоленский В.И., Норки-на С.Н. Вакцина против инфекционной бурсальной болезни // Патент № 2127604, 1998 г.

31. Борисов A.B., Борисов В В., Гусев A.A., Кузнецов В.Н., Михалишина З.Я., Смоленский В.И., Норкина С.Н. Инактивированная вакцина против инфекционной бурсальной болезни птиц // Патент № 2127603, 1998 г.

32. Смоленский В.И., Осидзе Н.Г. Сравнительная эффективность отечественных и импортных вакцин в хозяйствах стационарно неблагополучных по синдрому снижения яйценоскости кур // Тезисы доклада научно-произв.конференции, поев. 100-летию со дня основания Курской биофабрики, Курск, 1996,293-296.

33. Смоленский В.И., Осидзе Н.Г. Эффективность вакцины ОВАК против синдрома снижения яйценоскости // Сб. научн.тр. ВГНКИ,1996, 59,56-63.

34. Смоленский В.И., Вертинская К.К. Использование димерэтиленэмина для инактивации аденовирусов крупного рогатого скота // Сб.научн. тр. МВА "Проблемы молекулярной биологии и патологии", М., 1979,106,91-95.

35. Осидзе Н.Г., Смоленский В.И., Лагунов В.И., Зайцев Ю.И., Кис Т.Б. Вакцина "ОВАК" против синдрома снижения яйценоскости-76 птиц // Патент № 2097066, 1997.

36. Осидзе Н.Г., Гендон Ю.З., Сюрин В.Н., Анджапаридзе О.Г., Смоленский В.И. Способ изготовления эмбрион вакцины против гриппа птиц // Авторское свидетельство № 577882, 1977.

37. Сюрин В.Н., Смоленский В.И., Смирнова Л. П.Ю Демкина М.М., Каспарьянц С.А., Сапожникова А.И., Дьяконова Е.Б. Способ культивирования вирусов // Авт. свидет. № 1559702 , 1989 г.

38. Smolensky V.l., Panin A.N. Current situaion and prospects of poultry Breeding in Russia // Collection of Abstracts XVII International symposium , Porec, 1995, 9-12.

39. Кис Т.Б., Смоленский В.И., Нестифорова M.B. Сохранность протективных свойств лиофилизированной и нативной вирусвакцины против гепатита утят из штамма "ВГНКИ-К // Сб. научн. трудов ВГНКИ, 1994,55,182-186.

40. Кис Т.Б., Смоленский В.И., Нестифорова М.В Культивирование вакцинного вируса гепатита утят в эксплантатах утиных эмбрионов // Сб.научн.трудов ВГНКИ, 1994,55, 219-224.

41. Нестифорова М.В., Кис Т.Б., Смоленский В.И., Трубицын Б.И., Зубцова P.A. Способ изготовления вакцины против вирусного гепатита утят // Патент № 2035918, 1995.

42. Кис Т.Б., Смоленский В.И. Изучение антигенной и иммуногенной активности производственных серий культуральной вакцины против гепатита утят из штамма "ВГНКИ-К // Тезисы доклада научно-произв.конференции, поев. 100-летию со дня основания Курской биофабрики, Курск, 1996,141-144.

43. Заключительный отчет "Разработать и внедрить культуральную вирусвакцину против гепатита утят" (1986 -1989). № Гос.регистрации 01860104283.

44. Смоленский В.И. Современное состояние проблемы специфической профилактики вирусного гепатита утят. // Материалы научной сессии РАСХН "Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России (к 100-летнему юбилею ВИЭВ), М.,1999. (в печати).