Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Сравнительная оценка эффективности вакцинных и диагностических препаратов при туберкулезе крупного рогатого скота

РГ6 од

ЛПР ISl:-;

Зютстерство сельского гозяйетва Роеайсгев ©едерацаа Ггззвэе Зправлеппе всепгз дчебшл заведешь toar - ПетерСаргсета ветеркпзрша нлститдт

Ез крав аз рдкописа •

Хгзаггзха ftaaiaraâ Езхгйлгшкч

W 0Î3:516-Ç92.5-OS4:S35.2

етшшш сцеш эсешивноста шшщеш з дяагвостнчЕсш п?Епа?атсз

'ерз ШШЗЯЕЗЕ шшго рйгйтого chtft.

15.00.03 - автерлнаряая ' иикробкология, аярдсологвз. . эпизоотология, ыгсзлагга в юиунологиа.

MTOPECEFflT "

ззссертат па соясканке дчевой степзнз ваялздата вгтеритраах лазя..

Саакт - BeïEpôspr — 1934 г.

Зикястерство сельского хозяйства Российской Федерации Главное Эправлекие высвих дчебннх заведений Санкт - Петербдргский ветеринарный инститдт

На правах рдкопнси

Коваленко Анатолий Ннхайловгч

ЯДК 619:616-002.5-084:636.2

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ВШЩНШ К ДИАГНОСТИЧЕСКИ ПРЕПАРАТОВ т "ГЗБЕРКЗЯЕЗЕ КРНШОГО РОГАТОГО СКОТЙ.

16.00.03 - ветеринарная микробиология, зирдсология, эпизоотология, иикология и иниунология.

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарнвх надк..

Санкт - Петербдрг - 1394 г.

V

Работа выполнена в отделе по изучении туберкулеза сельскохозяйственных животных института экспериментальной и клинической ветеринарной медицины Украинской академии аграрных наук, кафедре эпизоотологии Санкт-Петербургского ветеринарного института. Центре физико-химических иссле- ^ доЕаний и высокочастотных измерений НИИ микропрепаратов г.Киев.

Научный руководитель-доктор ветеринарных наук, профессор академик РАСХН В.П. Эрбан.

Официальные

оппоненты; доктор ветеринарных наук, профессор

А.А. Евглевский доктор ветеринарных наук й.Я. Борисенкова

Ведущее учреядение - Казанский ветеринарный институт.

Зашла-состоится • 1994 года

в 14 часов на заседании специализированного совета Д. 120.20.02 Санкт-Петер.бургского ветеринарного института по адресу: 196084, Санкт-Петербург, Московский пр..112.

С диссертацией' мохно ознакомится в библиотеке Санкт- -Петербургского ветеринарного' инcтцтyía. Реферат разослан "/£' 1994 года.

Ученый секретарь специализированного

совета, кандидат ветеринарных' наук Ззвиова О.В.

з -

1 05Ш ХАРАКТЕРИСТИКА РЙБОТН

Актуальность tsbs. В разработки и совершенствование иер пс ccpt-es с туберкулезом крупного рогатого скота весомый вклад е:г«сли многие отечественные и зарубежные исследователи ( Вишневский П.П.. 1928.1930.1937;Гизатулин Х.Г.. СвФин Miß.. 1979.; Гово: ' ров A.M. 1954: Кассич Й.Я.,_ 1982:' Кокуричев П.И'., 1940: Кузин А.И. .1982.1987: Овдненко Н.П., 1986: Сафин МЛ.,1981,1986.1337; Нрбан ¡.П..; Хвйкин Б,5.,1968,1339; Чиробокова K.M.,1373; Цуревский S.E. .1980; Ickossu М.К., 1S3S.1937,1953: Berejren S.A., 1977,1981 и ДР.). '

Неаду тек. туберкулез, как зооантропонозное заболевание, столетиями остается социальной я экономической проблемой. В, мире нет страна, где 8и зта инфекция не регистрировалась а человека или аивотнвх. Такие крупные страна СНГ, как Россия. Казахстан.Украина, Беларусь яесатилетияни является неблагополучными по тубер-кудегу крупного рогатого скота (.Кассич В.Я.. 1320:К8р:танова Б.С1. 1991: Тк.аченко ft.fi., 1385: Урбан В.П.. Ниробокова Л.И., Данко BJ, • i98? и др.).

СуиествуЕцаа эпизоотическая ситуации во^ кногом обусловлена несовершенство* пропшозпизоотических мероприятий, недостаточной . изученность® биологии возбудителя инфекции и зпизоотологнческого значения разная его форм, иммунитета и эпизоотологии болезни.

Одной из проблей в научной и практической ветеринарной "фтизиатрии является разработка новых л совершенствование старых методов диагностика-, а такае препаратов для спглигпеской профилактики нфекций.

П* яненив Хййкина Б.Я..8аз«пова Й.З., Сафин» КЛД 1385); Еьг-левского АЛ, £1990, 1932) вакцивопрофилактика при туберкулезе

/ . .

- 4 -

крдпного рогатого скота является эффективных средством в профилактике болезни, а ее разработка находится линь в зачаточном состоянии.

Многие исследователи, однако, отрицает целесообаразность ее применения < Кассич В.Я..1990; 1аров А.Н.. 1372; (уревский В.Е., 1980),Тех не менее,'сломная эпизоотическая обстановка по туберкулезу, изменявшиеся хозяйственно-экономические и экологические условия содержание животных требуют коррекции подходов к ременив системы противоэпизоотических мероприятий. Вот почему изучение этого вопроса является весьма актуальным и легло в основу намих исследований. ; '

Цель и задачи исследований. В систему профилактических и оздоровительных мероприятий необходимо внести коррективы с .учетом лестных условий, а определив возмояность и целесообразность применения существующих, ' разработать новые специфические средства защиты крупного рогатого скота от заражения туберкулезом. Для этого необходимо было режйть-следующие задачи:

- изучить эпизоотическую .ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота.в Украине и эффективность проводимых противотуберкулезных мероприятий; ,

■- провести оценкд показаний ЙДП при применении различных аллергенов у морских свинок-и крупного рогатого скота по тубер- . кулезу в эксперименте . и производственных условиях;

- изучить эффективность системы-мероприятий с использованием вакцинных препаратов:ВСе, туберкулезного анатоксина:

- сконструировать новый вакцинный препарат и изучить в экспериментальных условиях его свойства:

- внести прадлоаения в систему противоэпизоотических меропри-

• ятий с использование» средств специфической профилактики. Яадчягя йовшмй. Сконструирован новцй вакцинный препарат против -туберкулеза крупного рогатого скота, •■ Изучены его свойства и иммуногенноетъ в сравнительно» аспекте с ВС6 и . туберкулезная . анатоксинов. Препарат обеспечивает более выраженнный иммунологический эффект.

Доказана более выраженная специфичность безальбумозного туберкулина по сравнении с ППД туберкулином для выявления заранен-внх туберкулезои гп'вотннх.

Впервые для сравнительной оценки изучаемых и разрабатываемых вакцинных и диагностический препаратов использованы физико-химические истоды: инфракрасная ($.;.) и ультрафиолетовая (УФ) спектроскопия, рентгеяоепектральний аикроанализ и растровая электронная

ншфоскспяя.

Впергаэ з ветеринарной науке бня изучен химический состав яееледовагтах заг.щ-ш и аллергенов соврекенншш Физическими «е-тэдгда ПК л 80 спектроскопия, рентгеноспектрального аикроана-и растровой электронной микроскопии. Были обнарукены раз-гичаа их с-нзгзсо-хипчесяхх свойств и характера поверхностей вн-сугекних капель.

Вргзтоссгл! хртаостъ рэбэта. Результата исследований могут бить пепользегаии длз дадьнейпей разработки новой сиг тема протдвот^бгркулезних мероприятий -с использованием предлогенных, вновь созданных гсряпаЦзтов - вакцины ПКП-1 и безальбумозного туберкулина.

йяробецкя рзйотя. Осногнае материала диссертационной ребогв долонеиы и 'Обсуздснц ::з конференций молодых, ученых е^теранзркоя ведицани Укрлшш ( Харьзто, 1992г.), Первом международном скипо-зпуме .•¡анжалогоз ( Йосква.1932г.), Зченоа Совете института экс-

- s -

периментальной и клинической ветеринарной медицины (1991-92-93). заседании кафедры эпизоотологии Санкт-Петербургского ветеринарного институтаС 1993 ).

Публикации. По результатам диссертационной работы опубликовано три печатных работы и 3 сданы в печать.

Диссертационная работа изложена на 170 страницах нашинописно-го текста и содернит 31 рисунок, 14 таблиц. Состоит из введения, обзора литературы, методики и результатов исследований, обсуждения, -выводов, предложений и списка литературы. Использовано 312 источников литературы, из них 272 отечественных и 40 зарубежных. Основные полояения диссертационной работы, выносимые на защиту: результаты изучения особенностей эпизоотического процесса, при проведении оздоровительных мероприятий с использованием вакцины 'BCS;

- материалы по оценке иммунитета у морских свинок и телят, иммунизированных вакциной BCG,'туберкулезным анатоксином и новым вакцинным препаратом; " • •

- оценка .состояния гуморального иммунитета, ПЧЗТ у морских свинок й телят при поствакцинальноа иммунитете и экспериментальном туберкулезе. . ■ ,

2. " СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и методы исследований.

Работа выполнена в 1991^1995 годы,' Исследования проводили лаборатории по изучении туберкулеза- сельскохозяйственных аивотив лаборатории патоморфологии Института экспериментальной и клиничб кой ветеринарной медицины и на кафедре эпизоотологии Санкт-Петег > . бургского ветеринарного института.

Особенности эпизоотического процесса при проведении оздорс вительных мероприятий с использованием вакцины BCG изучали в Hi

- ? -

копальскои я Васильковскон районах Днепропетровской области.

Физкхо-хякические свойства сакцишшх и диагностических пре-- паратов исследовали з Центре хккико-фязических исследований и гщсокочастотшх изаерений ЛИЙ -лкропрепаратов,(г. Киев).

йла внполпсж'.я поставленных задач были использованы обце-пркнятнэ экпоотологетеский, статистгэтвсккй, клинический, иинупо-лоппескяе. патологсаиатоинпс'сппй, а такге кикробиологическне я гистологические зстода исследоваий.

При ог.сяиа спзяхо-хяккческкх свойств кзучаэвих вакцин и аллергенов яспзльзоваяз г;етодн спектроскопии, рентгеноспсктралышго микроанализа и растровой электронной нккроскопии.

Ддя аздченна эпазооткчсско:: сктуацип и эффективности противо-тнЗеркдлсзиах агреграятнй использованы дашшз ветеринарной статистика Гласвстдпрз ЙСХП, ветотдолоп областей и отдельных хозяйств Зкраякн за 1381 - 1332 гсда. Пгзчпо-ароизводствепннй опит проводили з п-збаагспплдчаоа по тибсркдлезд хозяйстве.

ярозедеикз сразяитсльпсй оценкя кротсктивних свойств вак-цква ЗС», г^ссэдлсзйого гпатохскла и .продхегеяиого нани протизо-ЛДОрвддезсого ийкплскспого препарата 1Ш1-1, бало использовало 49 сеяно:! я 28 ';слаг. Ясрсккх свинок я телят отбирали для потев да пр"иц;!П9 еладогоз. • •

Статпстпчесхьп-обработкд получениях результатов прокол::"" ча гсрсоязяькой Ж таш 1В2 - РС/ЙТ с яедользовавиоа пакета

2.2. 8ЙШЙ алязоотачЕсш СОТШЦИ НО ТЗОЕГШЕЗЗ КРУПНОГО

регатогз шта в чтят я резшгмш применения ведг-

33 2с5 3 снстене 8р0тшг5бвдйсезш. кероиризш.

Нскклскск?:3 аяаяяз зяотоотячосксй ситуации по тдберкцлозц чшшшго рогатого скота в реелдблнке в разрезе всех областей за

1981-1932 годы позволил выявить три особенности распространенна инфекции: пространственно - временную изменчивость эпизоотической стуации, тенденции к снижении ежегодного выявления числа неблагополучных пунктов, относительную стабилизации частота выявления животных с патолпгоанатомическими изменениями, характерными для туберкулеза среди убойных хивотнах и эпизоотического процесса. Если в 1986 году било выявлено 197 новых неблагополучных пунктов, то в 1987 г. их было 115, в 1988г.- 144, в 1989г.- ИЗ. в 1990г. -119, в 1991г.- 97 и в 1992г.- 90. Первостепенное воздействие на распространение возбудителя туберкулеза оказывавт животные с вы-рахенным туберкулёзным процессом - активные источники возбудителя инфекции. Таких животных среди реагирующих на туберкулин ежегодно, в последние 7 лет. выявляли от 9,6 до 12,92. Эти сведения, а так-зе данные о выявлении в" 1992 гаду болыего числа неблагополучных пунктов, чем оздоровленныхfсвидетельствунт о сложной эпизоотической ситуации по тдйеркулеэд в Зкранне.

Наиболее высокий ксэфициент напряженности эпизоотической ситуации в 1981 V 1985 гг. был в Днепропетровской, Николаевской, Одесской и Херсонской областях. В 1986 - 1992 гг. К этой категории отнесены Киевская и Луганская области.

Зпизоотологйческие исследования показали, что традиционные 1 методы оздоровления ферм крупного рогатого скота от туберкулезной инфекции, основанные на выявлении и ддалении животных, реагирда-щих по туберкулиновой'пробе часто не давт результатов, а эпизоотические очаги становятся стационарными. Это требовало введения в судествугчуа систему борьбы с туберкулезом новых организационных и специальных мер, в том числе использования вакцинных препаратов.

Изучение опыта по борьбе с туберкулезом путем, использования юзокомасятабной иммунизации животных вакциной BCG при одновреме-

ннон проведении всего кокшгекса оганизационно-хозяйствеппах и ве~ теркиарпо - санитаривх вер во всех хозяйствах Никопольского района Днепропетровской области показало, что за пять лет в 31 раз уиеньгилось числа реагирующего яа туберкулин крупного рогатого скота, з.частота впявлениа туберкулезных извенений при ветсанякс-пертизе дСойянх зявотнкх с 818 в 1388 г, до прекращения^ ' зяэтлепяя тгковнх гетоткых.

3 Крпнкчансхсн районе ( контроль ), где оздоровительные не-рвщяшта срозо-кги .чгтедоа аллергических исследований а удале-пкеа реггирузглх особей, зз гнализпруеинй период увеличилась частота вягзгекм нгготк"«, давних реакция на туберкулин с одно-вГ'егеякгн пвг5пчег.кея ::оличестви гивотнах с актгткааи форкака тнйзркулгза.

Та::к!1 ийраэоа. сляг ::алачяя ккауяитата у зизотпах, вакц'ши-рсвйкпет ВСЕ го вжгливт сокиетш.

2.3. СРЙЕКНТЕЯЬШ ОЦЕНКА £<МШШГЕШНХ СВОЙСТВ ВйКЦИНН SCG й Ш>0Ш0та5ЕРКЗ£ЕЗ:ШГВ ШТСКСЙЙЙ M МОРСКИХ свинках !! ТШШ.

"ляпзяпо ""кукагенпг'х свойств закцкпз BCS лротивотуберку-."вс::пга скатохсг.ча, предложенного й.й.'Евглевскиы d качестве вак-

щяп превгдеко нэки с зхсссрскентальнкх »¡славная на корских

/

с:.- п тегзтгх. 1

Зстажшсао. что оба яргпарата обяпдаат шшдногсюшкз свойствах», беззреяш я se cçassàîiaT токсичного действия- на гивотиах.

'После otaftems аакзап SCC в ергепнзке аорсяих свинок (первая ояктвгя группа) ввела aseto ответная ккнуипаа реакцяя в органах систем шндвчтета.

Зэтяеивз з сслсзеягв хяргктеризсзалксь яоропо раззитики &ц:гздахя1 с крдгакян реактквпахя цеатрачз. йпогда весь ципр

был заполнен бластаыи. Отчетливо выражена структура синусов.В тимусе корковое вещество представлено компактно прилегавшими тимо-цитаии, а мозговое вещество занимало неболмув площадь и било плотно заполнено клетками. В лимфоузлах иммунная активация была слабая, фолликула содержали скопления властных клеток.

В легких наблюдалась болыое количество скоплений пиронино-фильных клеток, местами несколько крупных м плотных разрос:-зв мо-нонуклеарннх клеток с плотными ядрами и пиронинофильной цитоплазмой, уменмение в размерах алызеол я иебольвие утолщения мелаль-веолярних перегородок.

9 еивотнвх, иммунизированных противотуберкулезным анатоксинов (вторая опытная группа), изменения в селезенке характеризовались хорово развитыми сливавшимися фолликулами с умеренными реактивными центрами. Наблюдались мелкие сосуда с периваскулярными муфтами из пиронинофильшн клеток. В фолликулярной зоне обнаруживали бластные клетки с болъвим количеством митозов' и молодые клетки лимфоидндго типа. '. .

В тимусе наблюдали активное развитие коркового вещества, вн-теснягтего мозговое, сохраниввееся в виде островков, т.е. имела место выраженная активация тимуса.

Б печени балочная структура гепатоцитов сглагена, они набухав, округлые. йегбалочнВе пространства не определялась. -

Легкие имели утолщенные . меЕадьвеолярнне перегородки с частичным сдавливанием альвеол. Больсое количество мелких сосудов

г

и бронхиол было окружено 3-5 рядами бластов. йаблсдали значительные перибронхиальние отеки и скопления пирснинофильных плазматических клеток.

8 фолликулах лиифоцзлов обнаруживали крупные реактивные центры, заполненные больанм количеством бластов. Отмечалось ок-

- и -

рдгзевие и отделение клеток синдсов, расжяревие их просветов, Обнаружена аякотине тяжи. заполненные цитоплазматическими клетка-зи.

3 контрольная (ненкиунизир^анннх) морских свинок существенна! норфологических изменений во внутренних органах не обна-ругено.

В опыта во определенна наличка а напряженности иммунитета спзтаза зиготным спустя дэз несяца после повторной вакцинации Э2ЭДШ2Я подкожно пзвесь яа сазиологическон растворе возбудителя тдберхулгза бачьего вида (атака Uallae) - в дозе .0,00001 кг/мл.

3 течгзхя овзта проводили клинические, гематологические и аллйргэтескйв йссяедсзаяза.

I 33 дна после заргаегш у гявотяых первой и контрольной груза волосяной покроз потдскиел. В этот период у одной .самки' пемзой а двух третьей группы родилось нежизнеспособное потоаство. anrsSsee на зтсрзЗ-третнА день. -

3 'fopcrax сэзхзя зторой грвппя плянические проявления инфех-отсутсгзогалз до 43-го дня после заражения. Поззе волосяной яззроз газатгтяс твскаел я становился влагнна. Приплод, получетгай S7. ~::zoi'riz птсрс.1 гругпз, оставался зхзнеспособния.

К SO-зд послз зарззоказ, в срздкса па одну головд. поте-' Г:! з Е5ССЕ злвопгах ЕгрвсЗ, зторой а .третьей групп составил:; 0, 33 гразз, а я ЙЭ- trj дна cootsstctbshsw 31, 10, 79.

X 30-нз акз посзз заразежз. начался падез аорских свинок

i

кштрогъяоа греяга, и 50-sg два-- взкошфоватшя ВС6, к 00-му -зжзсвзгрозгшЕ! пзютгзотдберязлеэпнз асзтозсвиоа,- 9 животных вп:шаеапз гщгпп гаела зссто раэпаа степень вшзиваеыости мпрс-тгл csskbk. X исяцз этата сна состаэгзга з первой группе - 502. зтсрзЗ - СО*:, т^гтьаЯ - 402.

Патологаиорфолагкческое исследования паввих и умерщвленных морских свинок, показали, что у животных контрольной группа видимые визуально патолагоаиатоимческне аарааевмз внутренних органов туберкулезного Характера обнаружены у 80?, *з них у 502 - тяжелой степени. 9 свинок опвтных групп изменения обнаружены в 602 случаев, причем только у одной свинки из каждой группы имели место сильно выраженные туберкулезные изменения.

Бактериологическими исследованиями возбудитель туберкулеза в бактериальной и I.-формах выделен от 9-ти животных контрольной группы, и от 6-ти первой и второй групп. При посеве на полужидкуп полусинтетическу» питательнув среду для выделения 1-форм, нами обнаружен характерный нежный облаковидннЯ рост в виде мелких взвезенных колоний, напомжшщих макнув крупд, чаце в верхних слоях питательной среды. При микроскопии зтих культур наряду с дефектными по клеточной стенке формами разных размеров, встречались бактериальные кислотоустойчивые и некислотоустойчивке формы.

В нативнык препаратах ■ обнаруживали {.-колонии гетерогенной зернистости со специфическими телами различной величины а оптической плотности, а также шаровидные зернистые тела разных размеров. '

При гистологических исследованиях патслагческого материала органов животных установлено, что у морских свинок контрольной группы имело место развитие туберкулезных гранулем я отсутствие иммунологических реакций в селезенке. 3 животных первой и второй групп интенсивность туберкулезных поражений по сравнении с контролем была в 2 раза веньве. а в селезенке имела место четко - ^ выраженная иммунологическая реакция.

Для изучения превентивных свойств вакцин на трех интактныж, не реагирующих на туберкулин, телятах был поставлен опыт. Телдт

дважды вакцинировали: первой грдппы- вакциной ВСС, второй-протй-вотуберкуяезным анатоксином. Через 15 дней после вакцинации телят подопытных и контрольной груш помечали на неблагополучна ®ер*д. Телята находились в контакте с инфицированиям животными на протяжении 10 кесрцев. Остановлено. что g двух телят контрольной группы тела место реакция на тдберкдлин, g одного из них при послеубойном осмотре обнаружены патологоанатоммческие изменения и выделена культура возбддитеяя тдберхдлеза^ g подопытных животных заражение тдберкдлезом не установлено.

Исследования, по дстановленип реакций организма на введение вакцины показали, что g иимднизированных животных имело место по-внмение уровня общего белка в сыворотке крови с 41 по 1SS день опята при максимальном показателе на 34 день исследований в группе животных,вакцинировании ВСС до 74+5 г/я, противотдберкдлезным анатоксином до 79±4 г/л, a g ненммдннвх телят этот показатель был равен 60±1 г/я.

Организм опытных животных неоднозначно реагировал на испытуемые вакцинные препарата выработкой иммдногяобдлипов. В сыворотке крови телат первой грщшн ихело место достоверное поважеине IgM с 54 по 155 день после иммунизации Ср=0.001 - 0,004), второй группы с 41 по 155 день tp=0,05 - 0,001. Показатель увеличения концентрации анатител I'jG на эакцннд ВСС достигал статистически значимых величин лазь к 41 днв Ср=0,04), а на протявотдберкдлез-ннй анатоксин- с 41 по 155 день (р=0,05 па 41, 0,006 на 54. 0,001 - 3s, 0,02 на 155 день). Доказатзльствоа ннмунного ответа на введение туберкулезные антигена служат даннне- повыаениа в снворотке .крови цнркулирупцих ккадишгх кокплекспэ штггея-антитело- в 2,7 и 2,4 раза.

Рездльтатн, полученные при выполнена зксперикентзлышх кохп-

лексюпс исследований на иорских свинках и телятах, позволит сделать за:гначение, что обе испытанные вакцина стимулирувт иандннув систему ннвотюгж и поввиавт их устойчивость к заболевание к особенно а" зараленяя тдберкдлезоы. Кидание реакции у яивотннх. вагукхзяроваянях противотуберкулезная анатоксинам, были более вн-ргзшМ) что обусловило их оовавенндх устойчивость в развития гк-тшжого инфекционного процесса.

Однако, спатн показали, что обе вакздша не обеспечивает сто-процгнтидв защиту от зарваення в заболевания.

2.4. КОЙСТРЗНРОЗаШЕ КОМЛЯНКСНОГО Б8КЩШНЗГ0 ПРОТИВОТНБЕРКН-ЙЕЗЗОГО ПРЕПАРАТА.

Ланкне по Езучезяз: ааадаогеткх свойств вакцинных препаратов побдд&аа вас к вовструнроваяна ¡токбицхреэашшй вакцины. Ера зтоа бивэ испсяьэстно три коняоавпта: бактериальная вакцина DCS. аяато$ска-взяиш5а-Ератгпзотнб£ркул£31ша анатоврхя к в качества клиуноиодуяатсра - слхалснд растзтегьвегс првясяоздениа. Пра ¡треаедешш аргдзар.чтегыщггзссхсдозашга гакцтз была составлена в вроаорциза: елна доза воздета ЕС£, гдохеиагиоа для вакцинации крупного рагазого скота, едгш деза г:шск«ш-Бакц;:шг и 0,? им зя-кзлоида. . "

. В rases соотнагг;кз незшокгитоз вавдгва база .шштааа т, морских свиизз, а затез s ка телзтгх. Зстшюлено, что aainiaâ î.vee '.рат ХщштЕзотдЗеркиягзнай вйаиенссза препарат ПКП-i î бгзе-г.гдеп, на обладает раздрааакуи днйсгЕкгк* а тсксйчнсстьз. йзу-5-за* с ааадиогешкы свойств вродлазгянсго препарата прозодздосъ па сз£2£, аналогично исползоваяваЭ при яроЕсдсют опатез с-вак-цяшзя ВСЕ я проткзе-цберкулйзкаа азатокскиои. Hps зтоа все опа- . ты стагнля параллельно на трез гриппа* еибогквс с БСС. врстезо-туберкуягзпаа енатокеявгз и врепаратеа IL'iïï-i. Е поадъа Сяо- •

химических и гистонорфологических исследований установлено. что все показатели иммунного ответа организма на введение предложенного препарата были значительно лучже выражена, чей на действие предыдущих вакцин. Так. например, концентрация 1я И в сыворотке крови вакцинированных животных была на высоком уровне са-хый продолжительный промежуток времени - 114 дней. Для сравнения: максимум этого показателя у животных, иммунизированных анатоксином, отмечался на протяжении 55-ти дней, а вакциной ССС -13-ти дней. Самый стремительный подьем уровня 1в С в крови телят иммунизированных ПКП-1 наблюдался с 13-го по 41 день опята. 9 животных других групп максимум этого показателя был пиже, повы-венке происходило более плавно, а уиеньженке было более интенсивным. Высокая концентрация 1ц ? в сыворотке крови телят, вакцинированных 11X11-1 держалась в течении 114 дней, иммунизированных ВСС - 13-ти. противотуберкулезным анатоксином - 101 день.

Весьма показательными оказались данные при определении содержания в сыворотке крови ЦИК: у телят иммунизированных испытуемым препаратом максимально высокий уровень образования комплексов антиген-антитело выявлен на 41 деиь после вакципацин, вакцинированных ВСЕ - на 34, а противотуберкулезкнн анатоксином на 96 день. Стабильно высокий уровень этого показателя у животных первых двух групп длился 114, 100 дней.'9 телят третьей грд-ппа пик высокой концентрации иммунных комплексов снензлся резким падеккеа. • ' . .

При экспериментальной заражении морских свиней, иммунизированных препаратов ПКП - 1, у четырех наблздали очень слабые туберкулезные поражения внутренних органов. От зтих свинок был выделен возбудитель туберкулеза как в бактериальной, так и I -формах. 3 остальных свинок никаких видимых патояогоанатокичес-

-16 - ■

кзвенышй не обнарузено и возбудитель не викелен. В контрольной группе заболело туберкулезом восеиь из десяти цорсикх сзпапп, ыз гах с очень тявелов $ораой шфекцношогв процесса -пять. От девяти зкоткаж, незаЕшгкко от степени поракеям снут-ргшш органов, Сала подучена культура сзбдатеяя туберкулеза.

3 течгаш ошта все йорские свгшги периодически проверялись гзирпгаесйой тдЗсрквягпшиой пробои. Юйкэеттеяыгаа реЕкгт»:: бм о&згруЕепз качапая с 30-го лая после заражения у четнрсх корскад Б группе Гг'.иатт, ияхупизхровгшшх БСЁ реагкровалс ссгь, а теЗсревясзшн анатокскяоа -сесть голов.

. Оадзч«щзз регзеьтагн ессясдозшшй дзет основание полагать, что првтввотвЗсркзгззаЗ захгагешжай препарат оказвяся более ггдгвге ывка.

3 «взгах ла телятах, где ^агзеаго естественное зараггеш охотках ери содергакга гл вместе с йейЕагсзолзчглак яо тайер-гулезу, йпли ПЗЛЦЧ25Ш еяеэдгцге результата.

Злвотвке» гзкшшкрссаваде, кйанлгке^л Ергизрстси, .гакагк: решзцй за азедеш» препарата из прог&тя. За о^гка зкежрк^ен га а игбггщаш вг нстаиовяеаэ к едсага «вчгз. аайолшжяз ааравйшя. .Здании " яря тдбсрадяЕалзаояг ка ''1-й день опита ыо лвшесьво реагирсз.5ло одно гкзвтное, с :: ¡хзду гта-!0С2 тсяя ¡¡лт&зигйгыгти^часхЕиа с гестологдчоскк^к ислехавидица. т.^сгеиесазш пасло цСеа т 23?-й дань ¡лглз, иг обизрдаеио взвгвзй вяутрешшх оргалог, гаразггерзшх дгя тиберкуаеза, бак тар::олсп?чссЕле нсьедзваяка &аяк.огрг:цзтелышй результат.

Б кентрояьаой хруапг па тдйеридют реагировало -двое гаво1 нш., а вря \jfios у одного из еис сбиаругеки глтологоаиатп2шче(

хзйвнеим и взйеяепа к^ьтсра возбудителя тдберкияеза.

. Ъжвертеягъхьша исследовакетк! дмваовяеио, что гргдли;

• - 22 -

менять вакцинации как вспомогательный метод оздоровления 1 стада

от туберкулеза.

Пршонвкя производству.

1. Провеет комиссионное испытание безальбумоэного туберкулина в пирокок производственной опыте и организовать . его производство,

I, В систему оздоровительных мероприятий по ликвидации тубер-- хулеза в стационарных эпиэоот!. веских очагах высоким уровней зараввнности аивотиых целесообразно внедрить вакцинации.

3. Провести кокиссионннй опыт по определений инмуногеннах свойств противотуберкулезного анатоксина и прэпарата ПКП-1 и внедрить их э производство.

Работа опубяисвгннм по теме диссертация:

1.Коваленко А.Н.,9рбан В.П. 0собливост1 туберкульознога процесу у аорсьвих свикок, веплеких . вакцянош ВСЕ та протитуберкальознии' анатоксином.//-8атер1али кооервнцП володих вчених 1 спец1ал1с-т 1 в ЙкраГни. Хврк1в - .1992. с.30 - 31.

I.Коваленко О., Урбан а.П. Данавика развития тиберкулеэного процесса у аарских свинок и кроликов. // Доклад на первом международно» симпозиуме лзнямалогов. Сборник " Ланиналогия Лосква - 1333. 1.с-63. ' •

3.Коваленко Я,й,, Урбан З.П. Изучэние специфической профилактики туберкулеза крупного рогатого скота на карских сэиаках. •// Доклад \ пергок иевдунарадкой симпозиуме ланявалогов. Сборник " Ланимлогия " Москва 1993, 1,с«64.

4.Коваяеиио АХ.Зрбан В.П. Дан1 про 1йуяогвнн1 властмост! вакци-

3. В экспериментальных исследованиях на морских свинках и телятах доказано, что иммунизация животных повывает их устойчивость к заражениа и заболевания, что подтверждено при искусственном заражении морских свинок и естественной инфекции на телятах.

4. Ч иммунизированных животных развивается комплекс иммунных реакций, выражавшихся в пролиферативчых изменениях в органах иммунной системы. повышенное сыворотке крови содержания IвМ ,

и циркулирушшх иммунных комплекс рв.

5. 9 иммунизированных телят,помещенных в неблагополучную . по туберкулезу группу в течении 10 месяцев не установлено ни одного случая заражзния при комплексном исследовании - убое, бактериологическом исследовании на бактериальные и Л.-$ормы.

В то же вракя, в контроле заражение установлено у 152 телят. -что подтверждено выделением возбудителя.

6. При сравнительном исследовании результатов вакцинации морских свинок и телят ВСЕ и противотуберкулезным анатоксином ответные иммунные реакции более выражены на противотуберкулезный анатоксин. Однако оба препарата не обеспечивает 1С0£ зациты. ;

7. Сконструированная комплексная вакцийа по всем показателям оказалась более ик'муногенной. Коэфициент эффективности иммунопрофилактики пра экспериментальной оценке вакцинных"лрепаратов на морских свинках соответствовал 0,25 при' иммунизации ПКП-1 и 0,16 - ВС6 и противотуберкулезным анатоксином.

8. Аллерген нобого типа, разработанный профессором Евглевс-ким ft.fi. - безальбумозный туберкулин, при эксперементальных исследованиях' оказался более специфичным и чувствительным, чем 1Щ.

9. ' В общей системе оздоровительных мероприятий при тубррку-дезе крупного рогатого скота, особенно в стационарных эпизоотических очагах, и высокой уровне зараженности целесообразно при-

нннй комплексный препарат абсолвтно безвреден, ареактявен и более выраженно защипает вакцинированных животных от заражения и заболевания туберкулезом, чей вакцина ВСС и противотуберкулезный анатоксин.

2.5. ИЗУЧЕНИЕ СЕНСИБИЛИЗИР90Щ СВОИСТ ВАКЦИННЫХ ПРЕПАРАТОВ И ПОКАЗАТЕЛЕЙ АДП ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ Т9БЕРК9ЛЕЗЕ 9 тЗНИЗИРОВЙШШ И ИНТПКТШ МОРСКИХ СВИНОК.

Многочисленные данные литературы и нажи собственные исследования дапт основания считать, что аллергическая диагностическая проба- со старыми аллергенами С альттуберкулином и ППД )в настоящее время утратила свое былое значение. В силу того, что резко изменились условия содержания ж эксплуатации животных, породный состав и уровень их продуктивности, возросло количество снльно-действущих препаратов и ухуджилась экологическая ситуация, в организме крупного рогатого скота проязосли глубокие наружения прежде всего обмена веществ, что в своп Ьчередь определяет состояние иммунной системы каждой ссоби. Резко возросло как количество веществ и Факторов, сенсибилизирувщих организм, так и км-жунодепрессантов. подавляющих его защитные*, в том числе и аллергические реакции. В силу этих причин практика дже давно отказалась считать туберкулиновую пробу метогом надежной диагностики туберкулеза и рассматривать ее как эпизоотический тест для оценки благополучия стада. Метод может быть использован как ориентировочный при проведении более точных исследований.

Вот почему лпбые предложения по получении и применении новых вариантов аллергенов и их тщательное изучение представлявт интерес. Зто и послужило основанием для проведения нами исследований

i

по изучении аллергических свойств лвбезно предоставленного нам профессором Евглевским А.А. нового аллергена,'условно названного

- 18 -

безаяъбдгжзшнз тдберкдлишш..

Ка первой этапв били изученн свойства этого препарата в срав-псзу.н с снпдскаетх бнофабршой Ш1Д тдберкдлинои. Для изучения Еспагьзовалн гетодв пкеракрасяой и ультрафиолетовой спектроскопия, рентгекаспектрального кякроаиалЕэа я растровой электронной шгроскотан.

Рездльтатв ^снтгена-скектралытго какроапализа изучаема аллергенов, подтверждает откоснтелыщв ня идентичность ас злс;;ст-Ео^д состаод. Сек примерно в одккакавах количествах содеркат углерод, кислород а натрий. Однако в безальбукозноа туберкулине содержатся в больаек количестве атезн кальцка и ^аргатеа, а в .ШЭД-{утя илскопигагсгкх - еосдорз и хлора.

Бри щ;ос::втро .поверхностей сйсузапакх капель безальбукоэнсго • с ЩД тцберкдлкнов в растровой элеутрояноа кикрсскопс, с персам кз них кроскатрнззатся редко разбросгнине кояглездратв, по сорае а виду аавер:шост;: налеэшагцйе перепкавде касточ;:и, а и пленке ЕЩг лЗразсвааяс густо р&яолопепкгк быст^пов, напоакаких про-сяпаг зерна. В дльтрафиолетовой час г7. спектра пропдеигния в беэ-альйдиазесга туйецкдлииа г&ест мсто полней край р.оглодспий, ко-тграй качзшаетса в обдаст:; 363 в;:. В г.та.-ггрг пропуспашм 1Щ дпя ягакозитаскх и шхзгдэсши споатрайьйса даапа&оне полной исгго-азоёке но аабдгйалась. Болгс тоге, з '«бластк 220 зп: 45ра-сдотвдаг достаточна яатенхиише полоса аролдеканнж.

йтязчышаз физахс-аьйстгскшз рьзличаа в кздчаоакг объектах, сбдслсзлекг: р¿¡эких состазок. йэгМ1Д>в:с2,д, этеа доапг ебъясиать выдвлзппае различия с реакциях организма на ах ьведе-. югз. :. ■

образе«, презедепнне фкзкко - хкьшческие исследования показала, что повкй препарат по своей природе отличаетса от НПД