Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Специфическая профилактика в системе противобруцеллезных мероприятий у северных оленей

р Г о ОД

о * ~ Г ' 7 " На правах рукописи

ЛАЙШЕВ КАСИМ АНВЕРОВИЧ

СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА В СИСТЕМЕ 1РОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ У СЕВЕРНЫХ ОЛЕНЕЙ (теоретическое, экспериментальное и практическое обоснование)

Специальность 16.00.03. Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Норильск, 1998

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте сельского хозяйства

Крайнего Севера

Научные консультанты: Доктор биологических наук, академик РАСХН, профессор Забродин Василий

Александрович

Доктор ветеринарных наук, профессор Днмов Сергей Константинович

Официальные оппоненты: Доктор ветеринарных наук Хоч Афанасий Андреевич Доктор ветеринарных наук Хлыстунов Анатолий Георгиевич Доктор ветеринарных наук Красиков Александр Пантелеевич

Ведущее учреждение - Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных

Защита диссертации состоится «¿У» е-^т&с)/^ 1998 г. в 10 часов н; заседании диссертационного совета Д.020.23.01 в Институте экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока

Адрес института: 633128 Новосибирская обл., Новосибирский р-он, п. Краснообск, СО РАСХН, (ИЭВСиДВ) С диссертацией можно ознакомиться в ЦНСХБ СО РАСХН

Автореферат разослан «£_$_» с<х>£> <- 1998 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета, доктор ветеринарных наук

А. А. Самоловов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1 Актуальность проблемы

В реализации программы по увеличению производства продуктов [вотиоводства на Крайнем Севере значительное место принадлежит хдиционной сфере применения труда коренных народностей домашнему гневодству.

На территории России в настоящее время насчитывается около 80% (2,2 н.) мирового поголовья домашних и 40% (0,9 Млн.) диких северных оленей.

Значительным тормозом в дальнейшем развитии отрасли являются зличные инфекционные заболевания, среди которых особое место принадлежит уцеллезу.

Бруцеллез северных оленей широко распространен в хозяйствах асноярского края, Тюменской, Магаданской, Камчатской областей, в спублике Саха; его регистрируют в некоторых районах Иркутской, Читинской и 1урской областей. Установлено наличие бруцеллезной инфекции в таймырской, котской и якутской популяциях диких северных оленей.

Экономический ущерб при бруцеллезе складывается цз потерь за счет вышенной яловости и абортов у важенок, рождения слабого, жизнеспособного молодняка, вынужденной выбраковки и убоя клинически льных и серопозитивных животных, нарушения нормальной хозяйственной ятельности в условиях карантинных ограничений в неблагополучных стадах, полнительных затрат на проведение диагностических и оздоровительных ро приятии.

Ранее многими учеиьши (И.М.Голосов> 1956, 1963; В. А.Забродин, 1973, 75; А.Ф.Пинигин, 1965, 1971; Н.Н.Давыдов, 1966; А.А.Хоч, 1968, 1996; В.Лысков, 1981; Р.Б.Вашкевич, 1967, 1976 и др.) изучены вопросы изоотологш, микробиологии, биохимии возбудителя бруцеллеза северных еней, разработаны методы диагностики, комплекс мер профилактики и борьбы йнной инфекцией, предусматривающий и использование вакцин.

Однако борьба с бруцеллезом северных оленей - процесс длительный, ганизационно трудный. Его особенности связаны со спецификой технологии еневодства, наличием природных очагов, сложными условиями проведения геринарно-профилакгических и ветеринарно-санитарных мероприятий.

Поэтому рациональные схемы специфической профилактики бруцеллез противоэпизоотическая эффективность которых доказана рядом исследователе на других животных (К.М.Салмаков, 1987; И.А. Косилов, 1992; А.А.Новицки; 1989; С.К.Димов, 1993; А.Г.Хлыстунов, 1995; А.П.Красиков, 1996; А.А.Хо 1996; И.П.Никифоров, 1996; В.М.Авилов, 1997; П.КАракелян, 1997 и др.), оленеводстве, с учетом описанной специфики данной отрасли животноводств приобретают особо важную роль.

Однако такие схемы специфической профилактики, которые б соответствовали современной концепции "управляемых" инфекций, получивше широкое признание в эпидемиологии и эпизоотологии (ВДБеляков с соавт 1964-1993; Б.Л.Черкасский, 1986; И.А.Бакулов с соавторами, 1986; В.Д.Беляко 1989; С.И.Джупина, 1992; В.П. Урбан, 1992; С.К.Димов, 1993), при бруцелле: северных оленей до сих пор отсутствуют. Это и определило выбор тем исследований

1.2. Цель и задачи исследований

Цель исследований. С современных теоретических позиций провест комплексное изучение проблемы оптимизации специфической профилактш бруцеллеза северных оленей, и на основе полученных данных разработат соответствующие рекомендации и практические предложения.

При этом в задачи исследований входило:

1.Провести анализ эпизоотической ситуации бруцеллеза домаппо северных оленей и диких животных на Енисейском Севере, включая комплексн< изучение бруцелл, циркулирующих в природном очаге.

2.На основе полученных результатов, с учетом особенностей технолог! ведения отрасли, разработать концепцию оптимизации специфическс профилактики бруцеллеза северных оленей.

3.Исходя из разработанной концепции, изучить вакцины из штамм« В. abortus 19 и 82 для специфической профилактики бруцеллеза северных оленей определением их оптимальной дозы, уровня реактогенности, антигенност иммуногенносги и противоэпизоотической эффективности, в экспериментальнь и производственных условиях.

4.Изучить в экспериментальных и производственных услови) возможность использования для специфической профилактики бруцелле: северных оленей вакцинных препаратов из видоспецифических штаммов.

1.3. Научная новизна

В результате проведенных исследований:

¡.Разработана концепция специфической профилактики бруцеллеза ¡еверных оленей на основе изучения эпизоотической ситуации бруцеллеза (омашних оленей и диких животных в природном очаге, включая комплексное пучение бруцелл, циркулирующих в этом регионе, с учетом современных теорий шизоотического процесса, саморегуляции паразитарных систем, природной матовости и особенностей ведения отрасли.

2.Установлены оптимальные дозы вакцин из штаммов В.аЬоПиБ 19 и 82 1ля специфической профилактики бруцеллеза северных оленей. Доказана [аиболыпая противоэпизоотическая эффективность использования вакцины из птамма В.аЬогиш 19 по схеме, предусматривающей ежегодную иммунизацию и «иммунизацию всего поголовья с полным охватом стада.

3.На большом фактическом материале подтверждено мнение многих течественных и зарубежных исследователей о наличии при бруцеллезе северных аеней видоспецифического возбудителя (В.гаг^Геп) и его широкой циркуляции | природном очаге у других видов животных, представляющих эпизоотическую и пидемическую опасность.

4.Изучена возможность применения вакцин из видоспецифических цтаммов для специфической профилактики бруцеллеза северных оленей; юлучены результаты, свидетельствующие о перспективности дальнейших ^следований в этом направлении.

1.4. Теоретическая и практическая значимость

Результаты проведенных исследований по проблеме бруцеллеза северных леней дополняют новыми научными фактами теории эпизоотического процесса, аморегуляции паразитарных систем и природной очаговости. Они могут быть спользованы в научных исследованиях, направленных на дальнейшую птимизацию специфической профилактики, как бруцеллеза, так и других нфекционных заболеваний, а также в учебном процессе.

1олученные данные по оптимизации доз вакцин из штамма В.аЬоПиБ 19 и. 82 ашли отражение в проектах наставлений по применению вакцин и оответствующих рекомендациях и находятся на рассмотрении в Департаменте етеринарии МСХ и П Российской Федерации

1.5. Апробация работы

Основные материалы диссертационной работы были доложены обсуждены: на XI1 Всесоюзной конференции по природной очаговости болези (Новосибирск, 1989), Всесоюзной конференции «Актуальные вопро профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больны (Новосибирск, 1989), научно-практической конференции «Пробле: оленеводства Магаданской области» (Магадан, 1990), Международн симпозиуме «Проблемы патологии и охраны здоровья диких животш экологическое взаимодействие болезней диких и сельскохозяйственн животных» (Астрахань, 1992), научно-практической конференции «Концеш сохранения здоровья человек на Крайнем Севере» (Норильск, 1995), науч] практической конференции «Развитие оленеводства на Европейском Ceacj (Архангельск, 1997), IX Международном симпозиуме «Реконструю гомеостаза» (Красноярск, 1998), региональных координационных совещани семинарах исполнителей НИР по проблеме бруцеллеза сельскохозяйственн животных (Омск, 1991, 1992).

Основные положения, выводы и практические предложения, изложен* в диссертации, обсуждены на Ученом Совете НИИСХ Крайнего Севера ежегодно представлялись в отчетах НИР (1982-1996).

1.6. Публикации результатов исследований

По теме диссертационной работы опубликовано 28 статьей и тезисо сборниках научных трудов и материалах Всесоюзных и Республиканских науч! конференций и совещаний, в других научных изданиях.

1.7. Внедрение результатов исследований

Материалы исследований , найти отражение в с ист противобруцеллезных мероприятий, внедренной в оленеводческих хозяйст Енисейского Севера и других регионов страны.

Подготовлены и направлены на рассмотрение в Департам ветеринарии МСХ и П Российской Федерации проекты наставлений вакцщ штаммов В. abortus 19 и 82, а также в соответствующие рекомендации оптимизации противобруцеллезных мероприятий в оленеводстве.

По результатам исследований подготовлены научно-методичес рекомендации по проблеме специфической профилактики бруцеллеза север: оленей, которые рассмотрены и одобрены на бюро отделения ветерина{

цицины РАСХН для использования в научных исследованиях и учебном эцессе. .

1.8. Основные положения, »ыиоснмыС на защиту

¡.Концепция оптимизации специфической профилактики бруцеллеза ¡ерных оленей на основании современных теорий эпизоотического процесса, ю регуляции паразитарных систем и природной очаговости, с учетом )бенностей технологии ведения отрасли.

2.Результаты изучения эффективности оптимальных доз вакцин из аммов В.аЬоПш 19 и 82 для специфической профилактики бруцеллеза ¡ерных оленей в экспериментальных и производственных условиях.

3.Материалы, подтверждающие циркуляцию в стадах домашних оленей и ких животных на Енисейском Севере самостоятельного видоспецифического $будителя, а также возможность использования вакцин, изготовленных из ^специфических штаммов.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследбваний

Работа проводилась в Лаборатории по изучению бруцеллеза северных :ней Научно-исследовательского института сельского хозяйства Крайнего вера (НИИСХ К С), в Таймырской окружной ветеринарной лаборатории, в гневодческих хозяйствах региона, на отсгрельных точках госпромхоза аймырский" и агрофирмы "Пясино", на биостационарах НИИСХ Крайнего вера.

Распространение бруцеллеза среди домашних северных оленей выясняли гем анализа ветеринарной отчетности Государственной ветеринарной сети и овеДения клинйко-серологических обследований.

Анализ эпизоотической ситуации в популяции диких северных оленей оводился путем собственных исследований и обобщения доступных гературных и архивных материалов, аэровизуального обследования шещения животных.

Проведен анализ отчетов по ветеринарно-санитарной экспертизе более О тыс. диких северных оленей, отстрелянных на промысловых точках.

Серологическим методом обследованы 1730 проб сыворотки крови от ких оленей, а бактериологическим - 1056 проб биологического материала.

Изучен материал от 276 тушек диких белых песцов, добытых в ареале иродного очага бруцеллеза на Таймыре.

При определении степени зараженности, как домашних, так и диких северных оленей из серологических тестов применяли: реакцию с роз-бенгал антигеном (РБП), реакцию агглютинации (РА); реакцию связывания комплемента (РСК).

Бактериологическукц диагностику производили методом посева биологических объектов на мясо-пептоцный печеночный глюкозо-глицериновый агар на экстракте из рленьей печени, приготовленный по прописи ЛенНИВИ (П.А.Триленко, 1965) в модификации НИИСХ Крайнего Севера (В.А.Забродин, 1973).

Видовую дифференциацию культур бруцелл проводили методами, рекомендованными подкомитетом по таксономии бруцелл и объединенным комитетом ФАО/ВОЗ по бруцеллезу (1986).

В научные контролируемые опыты по изучению оптимальных доз вакцин из штамма 19 были включены 304 оленя, а по вакцине 82 - 520 оленей.

Иммунизацию, заражение животных в целях проверки иммунитета, отбор биоматериала для бактериологически^ исследований, посевы на питательные среды, типизацию выделенных культур осуществляли^ ho общепринятым методикам. i

На основании анализа полученных результатов по изучению реакгогенности, агглютиногерности и иммуногенности различных Доз вакцин из штаммов В.abortus 19 и В.abortus 82 устанавливали оптимальные дозы биопрепаратов для северных оленей.

Для изучения профилактической эффективности установленных оптимальных доз вакцин из штаммов 19 и 82 в производственных оленеводческих стадах иммунизированы и рсим^унизированы вакциной из штамма 19 - 9448 голов, из штамма 82 - 234^4 домашних северных оленей.

При разработке видоспецифической вакцины для северных оленей из штамма B.rangiferi (B.suis биовар 4) были изучены 269 культур, выделенных от различных видов животных, и идентифицированы как бруцеллы «оленьего» вида.

По завершению исследований была изготовлена экспериментальная вакцина, которую проверили на приживаемость, безвредность, напряженность и длительность иммунитета на лабораторных животных и северных оленях.

Кроме того, определяя оптимальную дозу экспериментальной вакцины, давали оценку ее противоэпизоотической эффективности по общепринятым методикам.

При проведении данных работ были использованы около 1000 абораторных животных и 96 домашних оленей.

Методики отдельных экспериментов, научно-производстбенных опытов и аблюдений изложены в соответствую щих разделах диссертации.

Часть исследований проведейа совместно с сотрудниками НЙИСХ Срайнего Севера Вагиной Л. А., Забродиной Е.ф., Афанасьевым В.П.

2,2. Результаты исследований

2.2.1. комплексное обоснование широкого использования средств специфической профилактики в системе противОбруцеллезных мероприя1*ий у северных оленей

2.2.1.1. Природно-климатические и социально- экономические факторы, влияющие на эпизоотическую ситуацию бруцеллеза

Географическое расположение Таймырского автономного округа ;оответствует 67 °15'.- 77 0 43' северной широты и 80°35'.- 114р восточной вдлготы. Общая площадь территории округа составляет 904,6 тыс. км2.

Климат Таймьфского автономного округа Ьтличаегся тродолжигельностью и суровостью зимнего периода с резкими колебаниями температуры воздуху, длительной полярной ночью, обилием сильных ветров, тург, глубоким снежным, покровом и кратковременным летнйм периодом с незначительным оттаиванием почтенной мерзлоты.

В целом по региону отрицательные температуры держатся в течение 10 мсс (с сентября по июнь), а вбзмоЖные понижения температуры ниже 0°С регистрируются в течение всего года.

Животный мир Таймыра представлен 31 видом наземных и 4 видами морских млекопитающих, из которых самыми массовыми йвляются дикий :еверный олень, белый песец, волк, росомаха, мышевидные грызуны.

Оленеводство является неотъемлемой частью сельского хозяйства Крайнего Севера, так как имеет большое значение не только в формировании собственной продовольственной базы и укреплении северных хозяйств, но и большое социальное значение, создавая сферу приложения исторически сложившихся навыков большинства коренных народностей. Кроме того, оленеводство способствует вовлечению в хозяйственный оборот растительных ресурсов, которые не могут быть использованы другими видами животных. Анализ развития домашнего оленеводства на Енисейском Севере за последние семь - десять лет дает основание утверждать, что масштабные организационно-хозяйственные мероприятия, связанные с

реструктуризацией оленеводческого производства, имеют негативные последствия для отрасли: наблюдается сокращение численности животных, снижение производства мяса. Все это отрицательно сказывается на социально-экономическом положении аборигенов Севера.

Таким образом, очевидно влияние йриродно-климатических и резко меняющихся социально-экономических условий на эпизоЬтическую ситуацию, в том числе бруцеллеза домашних оленей, особенно в связи с реструктуризацией отрасли. Очевидна и необходимость оптимизации противобруцеллезных мероприятий в оленеводстве, и, прежде всего, схем специфической Профилактики, применительно к робым условиям.

2.2.1.2 Анализ эпиздоти4есной ситуации бруцеллеза домашних и диких животных ца Енисейском Севере

Результаты серологичеЬких Исследований дймапшйх оленей на бруцеллез в Таймырском автономном округе прйдедены в табл. 2.2.1.2.1.

Результаты эпизоотологического анализа показывают, что обострения эпизоотической ситуации по бруцеллезу происходят, прежде всего, в стадах домашних оленей, где не осуществляются в должном объеме диагностические исследования, своевременно це проводятся ветеринарно-санцтарные мероприятия и при этом допускаютря контакты сб стадами домашних оленей соседних бригад и с дикимй северными оленями.

При этом следует рсобо подчеркнуть отсутствие какой-либо системы использования вакцин в комплексе противобруцеллезных мероприятий в течение всего периода существования оленевЬдства.

На территории Таймырского и Эвенкийского автономных Округов, северо-западных райоцов Республики Саха обитает крупнейшая популяция диких северных оленей, названная ''таймырской".

Высокая численность и постоянные миграции диких северных оленей в весенне-летний и летне-осенний периоды в значительной мере определяют состояние эпизоотической ситуации по особо опасным инфекционным заболеваниям, в том числе и по бруцеллезу (рис. 2.2.1.2.1.).

Анализ результатов ветеринарно-санитарной экспертизы 462047 туш животных, отстрелянных на промысловых точках, показывает, что в отдельные годы от 0,09 до 1,57% животных имели клинические признаки бруцеллеза, а наибольшее их количество регистрировали в 1992 г.

Однако мы считаем, что эти цифры не полностью отражают картину зараженности бруцеллезной инфекцией диких северных оленей.

Таблица 2.2.1.2.1.

Динамика результатов исследования эпизоотической ситуации по бруцеллезу в оленеводческих хозяйствах Таймырского автономного округа (количество положительно реагирующих, %)

Хозяйство Год исследования

1975 19871988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996

Усть-Енисейский район

"Тухард" "Заря Таймыра" "Северный" 31,9 9,6 6,9 6,0 6,7 9,1 9,5 9,5 12,2 2,6 0,08 2 9,1 2,5 2,8 2,4 3,1 3,1 8,5 5,1 7,3 4,5 2,8 - - 2,6 - - ....

Всего по району 30,3 6,7 4,2 4,2 4,9 6,6 9,0 7,3 9,8 3,55 2,4

Хатангский район

"Новорыбный" "Арктический" "Попигайский" "Ары-Мас" "Хетский" 1,8 2,6 3,7 4,6 1,7 0,1 0,0 0,0 0,0 0,0 1,8 7,5 1,4 1,1, 0,9 0,7 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,6 4,5 1,8 1,1 0,9 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 2,5 2,2 1,7 1,6 0,0 0,05 0,05 1,2 0,0 0,0 0,0 6,2 1,5 1,3 1,6 0,4 0,1 0,2 4,8 3,5 -

Всего по району 4,5 1,9 1,8 1,6 0,4 0,05 0,05 1,2 0,7 0,0 0,6

Дудинский район

опх "Потаповское" "Хантайский" 20,7 1,9 1,1 0,6 0,5 0,3 0,2 0,2 0,0 0,0 0,0 9,2 5,5 4,7 3,1 2,5 1,3 2,4 2,4 1,4 0,0 5,2

Всего по району 14,9 3,7 2,9 1,85 1,5 0,8 1,3 1,3 0,7 0,0 2,6

Зссго по округу 16,6 4,1 3,4 2,5 2,3 2,2 3,4 4,9 3,5 1,2 1,9

- районь; зимовок диких оленей;

- летовкр дшщх олейей;

- направления весенних миграций;

- пути осенних миграций;

" районы домашнего оленеводства; ^ -неблагополучные по бруцеллезу хозяйства

- граница природного очага бруцеллеза

Рис. 2.2.1.2.1. Эпизоотическая карта по бруцеллезу в олереводчес» хозяйствах и пути миграции диких северных олеь на Енисейском Севере

Наши данные при экспериментальных отстрелах диких севернкк оленей показывают, что ''клинический бруцеллез" встречается значительно чапЬ, чети его регистрируют на промысловкх точках. Например, в 1989 г. при осмотр 348 туш дйких северных оленей у 9 хоров (из 91год.) был обнаружен хрЬш^еский фибринозно-гнойный орхйт бруцеллезной этиологии, животное ¡дали положительный результат по комплексу серологических реакций,. из патологического материала 1 особей были выделены культуры "оленьего" рида.

При исследовании 1817 проб сывороток крови диких оленей по комплексу серологических реакций в Отдельное годы от 13,3 до 35,9% особей давали положительный результат.

При бактериологическом исследовании материала от 1077 оленей, как имевших, так чаще и не кмевших клинические признаки бруцеллеза, были выделены 52 (0,04%) культуры бруцелл, которые по своим морфологическим, и культурально-биохимическим и другим изученным свойствам были идентифицированы как В.гаг^Геп (В^хИв, бйовар 4).

Следует отметить, что в последние годы (1989-1995) Среди серопозитивных оленей до ЗО-ЗЗ^о составил мрлбдаяк в возрасте 8-20 мес, что говорит об "омоложении" бруцеллеза в популяции.

Для изучения влйящя пойуляЦии Диких северных оленей на эпизоотическую ситуацию по бруцеллезу в домашнем оленеводстве мь^ сравнили пути миграции диких оленей с расположением пастбищ оленеводческих хозяйств Таймыра (рис.2.2.1.2.1).

На фоне зараженности бруцеллезом диких северных оленей следует отметить и циркуляцию возбудителя бруцеллезной инфекции среди других представителей фауны изучаемого региона, в основном плотоядных животных. Так, при бактериологическом исследований патологического материала, белых песце®, росомах, волков и других хищных выделено более 20 культур "оленьего " вида, что говорит о широком распространении бруцеллеза среди диких животных.

2,2.1.3. Эпидемиологическое значение бруцеллеза северных оленей

Исследования коренного населения, проведенные в ОПХ "Потаповское", показали (табл. 2.2.1.3.1.), что большинство коренных жителей поселка живут в тундре и постоянно контактируют с домашними северными олешщи.

Часть жителей участвует в плановых убоях животных, поэтому контакт с животными непосредственный.

Всего было обследовано серологическим (реакция агглютинации I Хеддельсона) и аллергическим (реакция Бюрне) методами 73 человека.

Результаты исследований показывают, что наибольшее количестве положштЬно реагирующих людей на бруцеллез отмечается в группе оленеводо! и охотников. Это закономерно, так как представители даннбй группы имею1 постоянный контакт с источником инфекции - северными олейями (домашним! или дикимй). '

Таблиц^ 2.2.1.3.1.

Результаты исследований коренных жителей ОПХ «г!отаповское» на __бруцеллез

Всего обследовано, Положительно реагировали,

Профессиональные чел. чеА, (%)

группы

Оленеводы 14 6 (42,8)

Охотнйки 11 4 (36,4)

Разнорабочие 15 3 (20,0)

Рыбаки 16 1 (6,25)

Служащие 12 3 (25,0)

Учащиеся 5 2 (40,0)

Всего 1з 19,(26,0)

Основным источником заражения людей явхкются северные олени, пуп заражения - контактный, алимекгарйый и аэрогенный, а наиболее благоприятны! перибды дМ инфицирования - отел и забой животных.

Таким образом, из наших данных следует( что бруцеллез встречаете; довольно Часто у людей, связанных с северными оленями, особенно 9ред] оленеводов, в то же время рз^ененйе течения эпизоотической ситуации в стад прЫо пройорцйонально влияет и на эпидемическую обстановку.

Следовательно, качество проводимых противобруцеллезных мероприлги в оленеводческих хозяйствах, в том числе и уровень специфическо] профилактики, влияет на эпидемическую обстановку по бруцеллезу-в ресионе.

2.2.1.4. Результаты комплексного изучения бруцелл, циркулирующих у разных видов животных природного очага бруцеллеза северных оленей

Рассматривая бруцеллезную инфекцию на Енисейском Севере, ка: природно-очаговое заболевание, в своей работе мы провели исследования га всестороннему изучению биологической характеристики бруцелл, выделенных н только от домашних и диких северных оленей, но и от других представителе] фауны Таймыра.

Всего изучено 269 культур, в том числе: от домашних оленей - 101, от диких

(енрй - 89, от волков - 34, от роЬомах - 6, от диких песцоЬ - 20, от клеточных хцов - 4, от собак - 14, от горностая - 1 культура.

В качестве контроля использовали референтные йгга^ммы В.те1е1еш15 зМ, В;аЬогИ15 544, Ц.бШб 1330 и эталонный В.гаг^Геп 181.

Изучение оленьих культур, независимо от источника выделения, лсазаЛо, что все ойи аэробы и кульТурально-морфологичбски типичные эуцеллы, в основном ¿аходйтся в стабильной Э-форме. В то же время выявлены /льтуры, имеющие признаки дйссоциации: так, в результате изучений 269 гтаммов бруцелЛ 23 культуры (8,5 %) имели разную степень диссоциации, ричем измененные формы в большинстве случаев выделялись от плотоядных квотных. Появление Измененных форм бруцелл можно свкзать с изменениями эеды обитания возбудителя бруцеллеза.

' По способности продуцировать сероводород большинство культур :роводородоне}-ативны (86% на Печеночном цгаре и 74% на агаре Альбими). 'аиболкшре количестве! штаммов, продуцирующих Н28, получено от домащних и иких северных оленей. Особенно низкой сероводородообршугоудей активностью, ли даже полным ее отсутствием, характеризовались штампы бруцелл от хищных квотных (из 65 культур всеТо 10 Сероводородопозитивйые).

При изучении редуцирующей способности штаммов, выделенных в очаге леньего бруцеллеза, в отношений красок нами установлено, чТо бруцеллы от о'мащних и диких живбтных проявляли выражению толерантность к тиоцину.

, Бактериосгатичёское действие основного фуксина зависело от с^нцентраций красите лк Так, еслк в концентрации 1:160000 только один штамм е( вырос, тб в Максимальной концентрацйи фуксина (1:50000), 29 (11,1 %) ультур не росли (в основном от представителей дикой фауны).

МеТилвиолет тормози^ развитие абсолютного большинства штаммов руцелл.

Наличие роста в среде с добавлением сафранина О также обратно ропорционально зависело от дозы красителя. Если в разведении 1:5000 выросла олько 41 культура, то при разведении 1:20000 - 224.

Изучение антигенной структуры бруцелл в различных реакциях показало, то все выделенные культуры обладали хорошими агглютинабельными и гглютиногеннымй свойствами. Так, в реакции с моноспецифическими ыворотками бруцеллы оленьего вида имели в своем составе как М, так и А нтигены. В этом Они четко отличались от референтных штаммов.

При изучении отнощекия штаммов оленьего ввда к фагу Тб было установлено, что большинство культур - 181 (82,3%) - лизировалось фагом в дозе 104RTD, несколько слабее степекь лйзиса бьша выражена в дозе 1RTD.

Результаты Исследования чувствительности к антибиотикам оленьих культур, выделенных от различных видов животных, показывают их одно!ипность. Йаиболее четко бакгериосФатическое действие было обнаружено при йспрльзовании антибйотикОв пенициллина, эритромицина и полймиксина М, что свидетельствует о различиях в чувствительности iio сравнению с референтнкми штаммами и даже позволяет дифференцировать их от бруцелл других видов, в частности от В.suis.

И^ученйе мстабрлкческЬй активности бруцелл оленьего вида убедительно свидетельствует об их Однородности и весша существенных различиях по сравнении} с референтными штаммами. Так, отличительная особенности От В suis по оксцдйзной акгйвнрети состояла в менее высокой скорости окисления оленьими культурайи глутаминовой кислоты и в отсутствии или слабом окисленри dl-аланина, 1-acnapnika и 1-аспа|эагиновой кислбты.

Особой интерес прй изучении метаболизма оленьих штаммов представляют результаты по Изучению у^еазной активности, так Как наряду с количественными различиями выявлена и неодинаковая устойчивость уреазы оленьих культур и реферектцых штаммов B.suis в зависимости от pH сред^, что позволяет дифференцировать эти штаммы.

Матеркалы Исследования йо изучению вирулентности и патогенности штаммов, выделецньк в природном очаге бруцеллеза прказалк, что большинство культур (67,5%) име^от йыеркую вирулентность, пркчем культуры от домашних северных оленей более вирулентные, чем от диких животных.

Однотйпнрсгь ку.^ьтурально4,шрф0логических, тинкториальных, биохимический свойств' и окислительного " метаболизма Штаммов бруцелл, выделенных. из организма домашних, диких северных оленей и различных хищников (волк, песец, росомаха, собака), указывает на общность их происхождения.

В подтверждение самостоятельности данного вида можно добавить результаты о стабильности свойств оленьих культур в процессе хранения их на питательных средах и после пассажей через организм разных видов животных. В пользу выделения бруцелл "оленьего" вида в самостоятельную группу говорит факт своеобразия очагов бруцеллеза северных оленей, так как циркуляция

Знного возбудителя происходит вне зависимости от других зльскохозяйственных животных.

.2.1.5. Изучение путей U способов заражения бруцеллезом оленей в естественных условиях

В результате проведенных исследований наци бьщи выделены культуры г домашних! дркйх северных оленей и плотоядных >ртотных из лимфатических злов, внутренних органов, абортированных плрдов, околс^плодных вод, гменников, матки, почек, мочи. Это свидетельствует о том, что данныр виды квотных являются потенциальными источниками заражения бруцеллезом,

Ocodemro эпизотически опасны для домашних северных оленей другие ольные домашние олени и их Дикие сородичи. Именно у этих жротнык мы ыделили цайбрльшее количество культур бруцелл (190). , 1

Среди плотоядных животных самое большое количество культур эзбудитедя бруцеллеза выделено у волков и белых песцов (сортйетфзенно 34 и

Попадание возбудителя во внешнюю среду при абрртах рбдтверж^ает тот акт, что из абортированных плодов, околоплрдных вод и матки выделено 35 ультур.

На возмбжнрсть выделегац возбудителя <р мочой указывают факты золированнк бруцелл из мочи и почек в 15 случаях.

Следует отметить эпизротическую опасность выделения возбудителя с олоком, так ка|с из вымени бьир выделено 33 культуры.

Заражение среней половым путем подтверждают факты выделения озбудитедя бруцеллеза из семенников (72 культуры), Кроме тогр, из пораженных гменникор возбудитель может пчпадать во внешнюю среду с гнойными стечениями, тцк как при обширных орхоэпидидймитах на мощбнке. образуются вищц, через ко\орьщ вытекает гнойный экс^датч

2.2.1.6. Опыты по выживаемости B.rangiferi в почве

Для обсеменения тест объектов мы использовали три штамма B.rangiferi, ыделенных от домашних и диких северных оленей и плотоядных животных (О-09, 0-389, П-449), свойства которых предварительно изучили по схеме )АО/В03; все они относились к бруцеллам "оленьего" вида. I результате проведенных исследований было установлено, что бруцеллы в гплый период года в поверхностном слое суглинистой почвы сохраняли свою сизнеспособность до 30 дней, в супесчаной - от 42 до 46

дней. На глубине 5-10 см возбудитель сохранял свою жизнеспособность дольше суглинистой - до 67 дней, а супесчаной - 84-90 дней.

В холодное время фруцеллы сохраняли cfeoip жизнеспособность е дольше: в поверхностном слор суглинистой прчвы - До 235 дней, в супесчаной -242 до 248 дней; на глубине срыше 10 см - до 250 и 264 дней соответственно.

Таким Образом, в условиях Крайнего Севера при низкйх температурах 10... -49°С) возбудитель оленьего бруцеллеза, независимо от источш выделения (домашний, дикий северный олень, плотоядные животные), сохраш свою жизнеспособность более длительной время (от 235 до 264 дней), чем л более теплой погоде (до 90 дней).

2.2.1.7. Опыты по искусственному заражению домашних севернь оленей штаммами бруцелл, выделенных от диких животных

Для того, чтобы доказать роль дщсих северных оленей й пдотоядн животных в эпизоотической цепи оленьего бруцеллеза, мы провели исследован по искусственному заражению домашних северных ол?Ней рггаммами 6pynej выделенных от представителей дикой фауны.

Для этого мы искусственно заразили 16 оленей культурами бруцелл 389 и П-449. Культура 0-389 бьща выделена из Семенника дикого севернс оленя, культура П-449 г получена из заглоточного лимфатического узда беле песца.

Подкожное введение этих культур бруцедл вызвало заболевание у вс опытных домашних оленей (клинические, проявления, йатоморфологические гистологические изменения, серопозитивцость к выделение культур лимфатических узлов ij внутренних органов). Это подтверждает способное заражаться бруцеллезом домашних оленей от диких живо+ных.

2.2Л.8. Анализ результата* при/менйнияпрогЬивобруцёллвзных мероприятий без использования средств специфической

профилактики

Производственную апробацию "безвакцинной схемы" борьбы бруцеллезом северных оленей мы проводили в хозяйствах Магаданской области

По результатам эпизоотологических исследований в 1982-1983 гг. Магаданской области неблагополучными по бруцеллезу были объявлены 26 ( 39 занимающихся оленеводством) совхозов с основным поголовьем 543,6 ть оленей.

За период 1982-1989 гг. были полностью оздоровлены только 8 (30,2%) хозяйсп

которые находились за пределами природного очага Оленьего б^уцелЛеза. В 18 оленеводческих хозяйствах, несмотря нй проведенные работы по оздо|эовлению, благополучие достигнуто не было, а в отдельных оленеводческих совхозах ("Анадырский", "22 съезда КПСС", "Турваургин", им. 4° лет Ьктября и др.) количество положительно реагйруюМих на бруцеллез животных заметно возросло.

ТакПм образом, из приведенных материалов очевидно, что надежное оздоровление олекеводческйх хозяйств от бруцеллеза без применения вакцин неэффективно, а в условиях Природного очага инфекции - невозможно.

2.2.19. Разработка концепции оптимизации специфической профилактики бруцеллеза сеёерных оленей с пдзиции теорий Эпизоотического процесса, саморегуляции рёразйтаркых систем, природной очаговости, технологических осоёецнбстей отрасли и новых социально-экономических и эпидцмицеЬких условий

Первоначально мы попытались схематически представить варианты развития эпизоотического и процесса бруцеллеза животных в зависимости от наличия ици отсутствия перманентного иммунитета (рис. 2,2,1.9.1)1.

Из приведенной с^емы оДнозначно ясна роль перманентного иммунитета в управлении эпизоотический процессом бруцеллеза северных олейей,

Широкое использование средств специфической профилактика! у северных оленей, особенно на взрослом поголовье, одерживалось и Продолжает сдерживаться, на наш взгляд, по причйне массового проявления Провоцирующих свойств варйш.

Дело в том, что в оленьих стаДах, гДе процесс перезаражения никогда, по-видимому, не останавливался, стадия резерваций возбудителя, как правило, не сопровождается никакой манифестацией, тем более клинической. Следовательно, можно уменьшить внешнее проявление "реактогеНных" свойств вакцины за счет оптимизации дозы и метода введения иммунопрецарата, предварительно снизив уровень инфицированное™ стад перед прививкой с помощью общих ветеринарно-санигарных мероприятий (направленных на нейтрализацию механизма передачи), диагностики (выявление бруцеллоносителей), санации организма оленей. Эти вопросы изучены на других видах животных.

Популяции неиммунных животных с циркулирующими в нцх бруцеллами на разных стадиях изменчивости

гв

/

КБ

\

В,

Популяции иммунных до\4ащних северных оленей (перманентный иммунитет) с циркулирующими бруцеллами

Б—► вг——* Кб-^ Р-► I

Элиминация

Рис. 2.2.1.9.1.Концептуальная модель развития эпизоотического процесса бруцеллеза в популяциях животных при наличии и отсутствии иммунитета

При выборе протквобруцел.1езного иммунопрепарата (особенно в иродйых очагах бруцеллеза) необходимо особо отметить, что грундимМунитЬт и рманентный иммунитет доллйш обеспечиваться высокоИммун6генн1ши кцин^ми.

Особый интерес дай дальнейшего Изучения представляют вакцины из еньих штаммов, так как они адаптированы к Организму оленй и, йозмолсно, цут влиять на проблему "чистой )эеактогеш<ости", еслй она существует;.

Диагностика прй бруцеллезе северных оленей Может быть использована шь в целях эцизоотологическогО контроле; и в этом отношений перСпектйвно именение реакции иммуноДиффузии (РИД с ОПС-антйгеном).

При внедрении средств специфической профилактики в северном гневЬдствб необходимб учитывав технологические особенНости.отраслц. ,

По сложившейся технологии ведения отрасли основные организационно-шкхНзенные, зоотехнические ■ и ветеринарно-санитарные мероприятия полняются при лрйведении коральных работ ("корализация"). К 4тим эальйым работам необходимо "привязать" иммунизацию оленей этивобруцелдезными вакцинамк, что в практических условиях выполнить ;нь трудно (особеннЬ с одновременным взятйем и исследованием крови от )% взрослых животньЬс).

Наиболее оптимкльньш сроком для иммунизации как взрослых оленей, и ; и мОлодняка против бруцеллеза является "августовский кораль".

^.2.2. Результаты кзучейия вакцин из штаммов Й.аЬоМш 19 и 82 для специфической профилактики бруцеллеза СенерНых дле^ей

1.2.1. Рёзультат^) экдпериментовпо определению Оптимальных доз ёакцины из штамма В.аЬоПиз 19.

Для определения реактогенности, агглютиногенности и иммуногенности цины из штамма 19 в различных дозах нами были проведены два ггролируемых опыта.

В первом опы+е 119 оленей иммунизировали вакциной из штамма ЬоЛш 19 в дозах от 2,5, 5,0, 10,0, 20,0, 40,0 и 80 млрд. м. к.

Клинические наблюдения показали, что введение вакцины в большинстве штуемых доз действует угнетающе в первые дни после иммунизации.

Через 10-18 дней йосле иммунизации у одного оленя и! 2-й (5,0 млрд. м. к.) группы (5,9%) и у трех оленей в Каждой 3-6-й (10,0, 20,0, 4(1,0 и 80,0 млрд. м. к.) группах (11^8%) Отмечали образований прекарпальных бурситов и серозных тендовагийитов пальцевой сгибателей грудной и тазОвой кЬнечностей.

Результату исследован!« сывороток крови опытных Ьлерей цо РБП и РСК показыра&т, ч!о во всех опытных группах отмечёно резкое повышение количества положительно реагирующих ^швотнЫх через 7-14 дней после иммунизации. Скорость снижения числ^ серопозитивных оленей зависела от дозы введенного вакцинного антигена, рднакр, да^е через 360 дней пооле вакцинации от 40 до 80% животных реагировало положительно.

Скорость накопления агглютцнйнор и гемагглютининор у прибитых животных аналогична. Максимальный уровень накоплен^ антител отмечали на 21-й день подле иммунизации. В дальнейшем прослеживается снижение уровня антител, которое наиболее вьфажено у животных 1-й группы (2,5 млрд. м,к.) В этой же группе через 360 дней после иммунизации все животное реагировали отрицательно или сомнительна Титр гемагглютининов в одни и те же сроки исследование более чем в 2 разй превыщал титр специфических агглютининов.

Анализ ^ета опсоно-<|>агрцитцрной активности нейтрофцЛов у оленей опытных групп показывал, , что прослеживалась г^рямопропорциональная зависимость актирнбсти нейтрофшЬв От ,дозы введейжи| вакцины, однако, различия !эти не достоверны (Р < 0,5). ;

При проверке напряженности иммунитета у оленей, Приви1ых разными дозами вакцин^ из ¿гтамма В.аЬогц1з 19, установлено, что черёз 3 месяца поел« вакцинации вйе олени 1-3-й опытных групп (2,5, 5,0, II),0 млрд. м. к.; противостояли искусственному заражен^по. В 4-6-й группах (2с/ ,0 40,0. 80,0 млрд м. к.) напряженность иммунитета у животных была Ниже (66,6%), однако ) заразившихся животных отмечали регионарную форму инфекции. Индек< инфицированности у этих животных составлял 10,5-11,1%.

Через 6 мес и 9 мес после иммунизации количество животных противостоящих заражению, во всех опытных группах составляло соответугвеню 66,6% и 33,3%, индекс инфицированности варьировал в пределах 9,09-18,4%, не у всех заразившихся животных регистрировал^ регионарную форму инфекции Через 12 мес прорыв иммунитета наблюдали у 66,6-75,0% животных, при этол отмечали регионарную форму инфекции, а индекс инфицированности составля: 14,6-21,1%.

Таким образом, во все сроки проверки напряженность иммунитета у ¡ивотных, привитых разными дозами вакцины из штамма 19, не зависела от озы введенной вакцины.

Результаты РИФ и РНаТ, по сравнению с методом прямого актериологйческОга посева, почти идентичны и по ним можно судить о апряженности иммунитета у привитых животных г!ри проверке с помощью скусственного заражения. Однако эти исследования могут быть достоверны элько при условии полной элиминации вакцинного штамма из организма животного.

Таким образом, по первому опыту Мы установили, что наиболее ерспективными для дальнейшего изучения являются дозы 2,5 и 5,0 млрд. м. к., и ни были повторно проверены во втором опыте.

Как й в первом опыте, после введения вакцины из штамма 19 й дозах 2,5 5,0 млрд. м. к., Не наблюдали ни одного случая поствакцинальных осложнений.

У привитых оленей регистрировали ярко выраженный ммуннологНческий ответ с появлением в сыворотке крови специфических гглютининов и комплемейт связывающих антител: через 360 дней после акцинации количество положительно реагирующих оленей по РБП составляло 7,0-65,8%, à по РСК - 60,2-76,8%. Через 360 дней все привитые животные еагировали по РА отрицательно Нли сомнительно.

Ревакцинация животных аналогичной вакциной в тех же дозах вьрывает горичный иммунный ответ, но скоросй. снижения специфических антител более ысокая.

Напряженность иммунитета через 6 мес после вакцинации всех опытных пеней составляла 91,6%., а индекс инфицированностй - 9,5%, в то время, как в онтрольной группе животных введение вирулентного штамма вызвало 100%-е аражение при индексе инфицированное™ 43,8%.

' На основании двух контролируемых опытов можно сделать вывод о дабой реактогенности и агглютиногенности малых доз вакцины из штамма abortus 19 для северных оленей; о высокой напряженности создаваемого ммунитета (через 6 мес до 90% животных предохранялось от заражения), и о еобходимости применения вакцины 19 в дозе 2,5 млрд. м.к.

12.2.2. Результаты экспериментов по определению оптимальных доз вакцины из штамма В.abortus 82.

[ля проведения опыта была отобрана группа оленей (162 гол.), которых акцинировали вакциной из штамма 82 в дозах 5, 10,25, 50,100

млрд. м. к.

Клинические наблюдения показали, что введение вакцины в первые 2 дня вызывает угнетение оленей. Через 3-4 недели после иммунизации некоторых животных 3-5-й опытных групп (25,0 50,0 100,0 млрд. м. к) л наблюдали поствакцинальные осложнения в виде прекарпальных бурситов тендовагинитов пальцевых сгибателей передних и задних конечностей (10-15% общего числа оленей в группе).

Результаты бактериологического исследования показали, что к 30-му Д1 вакцинный штамм хорошо расселялся и приживался в организме оленей.

Наибольшая обсемененность лимфатических узлов и паренхиматозш органов Отмечена у животных 1 и 2-й груНп (5 и 10 млрд. м. к.), инде инфицированности у них составлял 47,1-48,6%, но через 90 дцей пос иммунизации вакцинный нггамм высевался только у животных 5-й группы (1 млрд. м. к.) из региойарных лимфатических узлов.

Серологические исследования сыворотки крови у опытных олен показали, что у всех животных проявлялся ярко выраженный Иммунный ответ введение вакцины

По РБП и РСК жйвотные дЛительно сохраняли серорозитивность. Так. 1-2-й груйпах (5 и 10 Млрд. м, к.), только через 360 /щей 100% живота реагировали отрицательно, а 50% оленей 5-й группы (100 млрд. м. к,) и в эт срок давали положительный результат.

По РА титры агглютининов угасали значительно быстрее, и через 1 дней после прививки животные 1-2-й групп (5 и 10 млрд. м. к.) реагиррва отрицательно или сомнительно.

Через 3 и 6 мес после вакцинации у привитых животньрс наблюдала максимальная напряженность иммунитета: до 75-100% оленей противостоя искусственному заражению. . -

Проверка напряженности иммунитета через 9 и 12 мес после введен вакцинного штамма выявила значительное снижение иммуногенности у вс иривитькживотных (до 25%) при индексе инфицированности 30,9-36,6%.

Таким образом, результаты первого контролируемого опыта показш что вакцинный штамм 82 слабо реакгогенен, хорошо приживается в организ северных оленей, быстро элиминирует, вызывает у привитых животных яр выраженный иммунный ответ и создает напряженный иммунитет до 6 мес. При сравнении различных доз вакцины из штамма 82 установлено, что доза млрд. м. к. наиболее перспективна для применения, так как уже через 180 дне

в РА регистрировали только сомнщ-ельцо реагирующих живртных, иммунитет через 3 и б мес после вакцинации составлял 75%.

Для изучение оптимальной дозы вакцины из штамма 82 (10 млрд. м. к.) нами был проведен второй острей контролируемый опыт.

Как и в Первом опыте, введение вакцины 82 в дозе 10 млрд. м.к. не вызырало у привиты.^ олецей поствакцинальных осложнений.

Исследование сыворотки крови по комплексу серологических реакций показало, что через 180 дней после прививки титр агглютининов был менее 1:25, и тодько несколько проб nd РА реагировало сомнительно. Через 270 дней все иммунизированные алени реагировали отрицательно в РА, а через 360 дней - и по РБПиРСК. ' • 1

После ревакцинации количество серопозитивных животных возросло, но уже через 90 дней их количество составляло менее 20%, а через 180-240 дней - не превышало 5%. i ' ,

При проверке Напряженности иммунитета наибольшее числр иммунных оленей регистрировали через 3 и 6 мес после вакцинации - 65,4-86,7%, индекс инфицированное™ не превышав 12,8-15,4%.

Т^ким образом, на основании прцведенных исследований можно считать оптимальной дозой вакцины из дггамма B.abörtus 82 -10 млрд. м.к.

2.?.2.3. Результаты изучения противрэпи?оотиче$кой эффективности вакцины из щтамма B.abörtus 19 в оптимальной дозе для иммунизации и реиммунизации северных оленей в производственных условиях

ПротивоэпизротичрСкуто эффективность Оптимальной дозы вакцины из штамма В,abortus 19 рдя иммунизации и последующих рецммуризаций северных оленей изучали в оленеводческих хозяйствах Хатангского района Таймырского автономного округа. .

Всего были подвергнуты вакцинации и ревакцйнацйи 12 олецеводческих бригад с общим поголовьем около 10 тыс. оленей, однако реструктуризация оленеводства не позволила в отдельных хозяйствах проследить влияние прививок на изменения эпизоотической обстановки, поэтому в качестве наглядногр примера мы остановились на двух хозяйствах - "Новорыбный" и "Арктический".

В июне 1989 г., по согласованию с управлением ветеринарии Красноярского края, всех животных в хозяйствах иммунизировали вакциной из штамма B.abörtus 19 в дозе 2.5. млрд. м.к. и в последующем ежегодно ревакцинировали до 1994 г.

В целях определения противоэпизоотической эффективности вакцины из штамма 19 мы изучили эпизоотическую ситуацию в «вакцинированных»

хозяйствах, в целом по округу и в хозяйствах, где вакцина применялась (совх( "Хантайский" и "Заря Таймыра").

Нами бьщо отмечено, что в целом по Таймырскому автономному округу 1989 г. (начало прививок в "Новорыбном" и "Арктическом") выявлялось 2,5' положительно реагирующих животных от числа исследованных, в 1992 г. - 3.44 в 1993 г - 4,9%, то есть за исследуемый период количество серопозитивных 1 бруцеллез оленей не только не уменьшилось, а даже увеличилось в 2 раз Аналогично протекал эпизоотический процесс и в совхозах "Хантайский" (1989 реагировало 3,1%, в 1996 г. - 5,2%) и "Заря Таймыра" (в 1989 г. -2,4%; 1998 г 2,8%)

В «вакцинированных» хозяйствах в течение 3-х лет значителы снизилось, количество положительно реагирующих оленей, и эпизоотически ситуация ртала благоприятной.

Однако в 1996 г., то есть через 2 года после последней реиммунизации, "Новорыбном" и "Арктическом" вновь подвились положительно реагирующие т бруцеллез олени (1,8% и 0,6% соответственно). Это Связано с тем, что на ба: вышеуказанных хозяйств были созданы многочисленные рбщинно-родовь предприятия, и фермеры отказались от последующих ревакцинаций, "л отрицательно сказалось на эпизоотической ситуации.

Итак, приведенные материалы свидетельствуют о высоком уровт противоэпизоотической эффективности схемы тотального применения вакцины I штамма 19 в северном оленеводстве как для первичной иммунизации, так и до ежегодных реиммунизаций.

2.2.4. Перспективы и тенденции дальнейшей оптимизации специфической профилактики бруцеллеза северных оленей

2.2.4,1. Результаты предварительного изучения вакцины из видослецифического штамма для специфической профилактики бруцеллеза северных рленей

На основании исследований штаммов, относящихся к В.гап^еп CB.su биовар 4), были отобраны культуры для дальнейшего их изучения с цель: возможного применения для специфической профилактики бруцеллеза севернь оленей. '

Согласно требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам, о* должны хорошо приживаться в организме иммунных животных, быст[ элиминировать, быть слабо вирулентными, слаба агглютиногенными и выем иммуногенными. Поэтому всем этим требованиям в полной мере отвечай диссоциированные штаммы.

Для изготовления видоЬпецифической вакцины мы отобрали пять имов (С-226, 0,-111, В-2б9, В-213, В-348), которые находились в оц4пфованны,ч Я- или ЯБ-формах, и изучили их на морских свинках и рных оленях.

Результаты опытов по изучению приживаемости и длительности «нения в организме морских свинок отобранных штаммов (С-226, С-227, В-В-209, В-348) показали, чтб только штаммы С-226, С-227, В-209 хорошо киваются, генерализованная форма инфекции развивается до 30 дней, в нейшем бруцеллы элиминируют и к 90-120 организм полностью бождается от возбудителя.

При изучении иммуногешщх свойств штаммов установлено, что у :ких свинок, которым ввели штаммы С-226, С-227, через 90-180 дней после инации регистрировали полный или частичный прорыв иммунитета.

У животных, привиты* Штаммом В-209, к 3-му месяцу в 100% случаев 1ботался напряженный иммунитет, а через 6 мес количество иммунных этных, йосле введения вирулентного штамма в дозе 5 и 10 МИД, составило ветственно 57,1 и 37,0.%.

Таким образом, штамм В-209 оказался наиболее перспективным для льзования его в качестве вакцинного.

Исследования по изучению стабильности биологических свойств [^Геп В-209 показали, чтб при многократном пассажировании через низм морских свинрк (10) и северных оленей (3) морфологические, туральные и тинкториальные свойства культур в результате пассажирования (зменились. У пассированных культур сохранились признаки диссоциации ожительная проба с трипафлавином, реакция термопреципитации и солевой ютинации с 2,5-10,0%-ми растворами натрия хлорида). Незначительно ичилось число колоний в НБ-фОрме. Если у исходной культуры таких ний было 1-5%, то с 6 и до 10 пассажей на морских свинках их количество авляло 5-7%.

При пассажировании через северных оленей количество оптированных колоний оставалось стабильным.

Для изучения свойств В.гап^еп В-209 на северных оленях была ширована группа животных (162 гол.), которым ввели штамм B.rangiferi Вв различных дозах (5, 10, 30, 60, 125 млрд. м. к.).

яические наблюдения за опытными оленями показали, что введение штамма 19 не вызывало ярко выраженных изменений общего состояния животных; он ипо расселялся и приживался в организме северных оленей: индекс «цированности через 15 дней после

иммунизации составил 38,3-70,1% и зависел от дозы введенной вакцины, а чере 35 дней бруцеллы элиминировали почти у всех опытных животных. Только у дву оленей, которым ввели дозу 125 млрд. м. к., индекс инфицированности составля 6,4%.

Серологические исследования подтвердили, что вакцина В-20 слабоагглютиногенна. Накопление агглютининов и комплемент связывающи антител происходило в течение 15-30 дней после прививки (особенно у животны? привитых дозой 30-125 млрд. м. к.).

Через 90 дней после прививки у животных, которым инъецировал культуру в дозе 5 млрд. м. к., доля положительно реагирующих Оленей и превышала 35%, а через 180 дней все животные реагировали отрицательно. Пр дозе 60 и 125 млрд. м. к. количество серопозитивных оленей сохранялось боле длительный период.

При проверке напряженности иммунитета у оленей опытных груп установлено, что через 3 и 6 мес 75-100% животных противостояли заражение при введении вирулентного штамма в дОзе 10 МИД, что подтверждает высою иммуногенные свойства данной вакцины. Через 12 мес. количество олене) противостоящих заражению, снизилось до 25%.

Таким образом, проверка штампа B.rangiferi В-209 на северных олеш показала перспективность его использования в качестве вакцинного.

Оптимальной дозой следует считать дозу 5 млрд. м. к. В этой дозе цггам не вызывает поствакцинальных осложнений; через 180 дней после прививки в< опытные олени отрицательно реагируют по комплексу серологических реакций, до 6 мес создается достаточно напряженный иммунитет.

2.2.4.2. Сравнительные испытания вакцин из штаммов B.rangifer

В-209 и B.abortus 19, 82 в производственных условиях

Данные исследования мы провели в неблагополучном по бруцелле оленеводческом хозяйстве - ОПХ "Потаповское", где вакцинировали и ежегод] ревакциннровали оленей следующими вакцинами и дозами: бригады N 1 B.rangiferi В-209 (5 млрд. м. к.), N2 - B.abortus 19 (2,5 Млрд. м. к.) и N 3 B.abortus 82 (10 млрд. м. к.)

Для контроля мы наблюдали за эпизоотической обстановкой i бруцеллезу в соседнем совхозе" Тухард" - бригада N 7, где вакцинацию проводили.

Иммунизация оленей указанными выше вакцинами в оптимальных дозах вызывала поствакцинальных осложнений.

Скорость снижения уровня специфических противобруцеллезных антител вакцинированных и ревакцинированных оленей, находящихся в пагополучных стадах, несколько ниже, по сравнению с данными, ученными в контролируемых опытах, но через 12 мес после прививки все яи по РА реагировали отрицательно, за редким исключением - сомнительно.

Для изучения противоэпизоотической эффективности через определенные ки производили убой вакцинированных оленей и отбор биологического ериала для бактериологических исследований. Во все сроки исследований ж наблюдений до 36 мес) эпизоотические штаммы не высевались.

При изучении противоэпизоотической эффективности вакцин из штаммов 09, 19 и 82 следили за течением стельности и отелов в сравнении с акцинированным стадом.

Сравнивая показания, можно отметить улучшение показателей в неводческих бригадах, где применяли вакцины из штамма В-209, 19 и 82: за года в этих стадах в 1,8-4 раза снизилось количество абортов, в 1,8-2,5 раза -ло мертворожденных телят, яловость уменьшилась на 4,1-4,6%.

В контрольной бригаде №7 совхоза "Тухард" эти показатели ухудшились, количество абортов увеличилось в 1,6 раза, мертворожденных -в 2,1 раза, а вость возросла на 5,1%.

Для подтверждения противоэпизоотической эффективности вакцин из immob B.rangiferi В-209 - 5 млрд. м. к. В. abortusl9 в дозе 2,5 млрд. м. к., 3ortus 82 - 10 млрд. м. к. мы провели сравнительный анализ эпизоотической гановки в стадах до и после применение вакцин

В бригаде №1 вакцинация позволила снизить количество серопозитивных ней через 1 год с 3,54 до 2,8%., а через 24 мес - до 0,6%, т.е. почти в 6 раз. шенение вакцин в других бригадах показало, что клинически больных ютных не выявлено, а количество положительно реагирующих животных в це №2 (шт. 19) снизилось более чем в 6,5 раза, в стаде №3 (шт. 82) - й 3 раза.

В контрольной бригаде № 7 совхоза "Тухард" за 3-летний период вились животные с клиническими признаками бруцеллеза, и 11,35% ледованных оленей реагировали положительно.

им образом, сравнительные испытания по изучению возможности применения оспецифического штамма B.rangiferi В-209 при проведении тивобруцеллезных мероприятий позволяют утвердительно говорить об зективности данной вакцины.

3. выводы

1. Бруцеллез северных оленей на Енисейском Севере впервые зарегистрирован у домашних оленей в 1948 г., а у диких - в 1960 г., но до сих пор имеет значительное распространение в оленеводческих хозяйствах. По нашим данным, в хозяйствах Таймырского автономного округа зараженность животных в 1994-1996 гг. составляла 1,9-5,0% от числа исследованных.

2. На Енисейском Севере, как и на других территориях (Чукотский автономный округ, Республика Саха, Аляска) сформировался природный очаг по бруцеллезной инфекции.

В эпизоотической цепи распространения заболевания находятся домашние, дикие северные олени и плотоядные животное. Высокая численность (более 600 тыс. бсобей), регулярные сезонные миграции и интенсивная зараженность бруцеллезом (до 22%) диких северных оленей, постоянные пастбищные контакты создают благоприятные условия для распространения бруцеллезной инфекции в регионе.

Главные пути передачи заболевания - половой и алиментарный. Это связано с вольной гаремной случкой у оленей, а также с продолжительным периодом низких температур, при которых возбудитель бруцеллеза длительно сохраняется, не теряя своих вирулентных свойств

3. Однотипность культурально-морфологических, тинкгориальных, биохимических свойств и окислительного метаболизма штаммов бруцелл, выделенных из организма домашних, диких северных оленей и различных плотоядных (волк, песец, росомаха, собака), указывает на общность их происхождения.

Полученные данные позволяют нам присоединиться к мнению исследователей о самостоятельности вида бруНелл, паразитирующих на северных оленях, тютнести их к саАюстоятелыНому .виду В.гап^Геп.,

4. Результаты ретроспективного анализа эпизоотической и эпидемической ситуации бруцеллеза о зонах развитого оленеводства свидетельствуют в том, что. с учетом технологических особенностей оленеводства и наличия природных очагов бруцеллезной инфекции, оздоровление оленьих стад от бруцеллеза без использования вакцин не имеет перспектив.

5. Разработанная на основе известных принципов управления эпизоотическим процессом концепция специфической профилактики бруцеллеза северных оленей учитывает всю специфику отрасли и предусматривает создание грундиммунитета и перманентного иммунитета в неблагополучных и угрожаемых

топуляциях. домашних северных оленей с помощью рациональных схем шмунизации.

6. Использование ранее рекомендуемых доз вакцин из штаммов 3.abortus 19 и 82 (8,0 и 50,0 млрд. м.к.) вызывало у привитых животных тоствакцинальные осложнения в виде прекарпальных бурситов и тендовагинитов.

7. Вакцинный штамм B.abörtus 82 оказался слабо реактогенным; в дозе 10 млрд. м. к. вызывал у привитых животных ярко выраженный иммунный ответ й создавал достаточно напряженный иммунитет в течение 6 мес (73,3%).

8. На основе контролируемых опытов и производственных испытаний для неверных оленях установлена оптимальная доза вакциИы из штамма B.abörtus 19 -2,5 млрд. м-к

Вакцина в этой дозе Не вызывает у привитых животных поствакцинальных осложнений; специфические противобруцеллезные антитела регистрируются в низких тиграх и угасают в течение 9-12 мес после вакцинации (особенно агглютинины). Напряженность иммунитета в течение 6 мес была на уровне 91,6%.

9. В производственных условиях применение вакцины из штамма 19 в оленеводческих хозяйствах как для первичной иммунизации, так и ежегодных реиммунизаций позволила достичь оздоровления уже через 2 года после начала прививок, тогда как в большинстве хозяйств без использования вакцин эпизоотическая ситуация ухудшилась.

10. Предварительно проведенные исследования показали перспективность использования штамма B.rangiferi (B.suis биовар 4) В-209 в качестве вакцинного, Оптимальной дозой данной вакцины для северных оленей следует считать 5 млрд. м. к. В этой дозе штамм не вызывает поствакцинальных осложнений, элиминация культуры из организма привитых животных происходила в течение 30 сут. Через 180 дней после прививки все опытные олени отрицательно реагировали по комплексу серологических реакций^-и до б мес создавался достаточно напряженный иммунитет (75%).

11. В контролируемых производственных опытах количество положительно реагирующих животных в неблагополучном стаде снизилось при ежегодном в течение 3-х лет применении B.abörtus 19 более чем в 6,5 раза, B.abörtus 82 - в 3 раза. B.rangiferi (B.suis биовар 4) В-209 - почти в 6 раз.

4 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании полученных результатов предлагаем:

1. На первом этапе при наличии сложной эпизоотической ситуации бруцеллезу в оленеводческих хозяйствах необходимо использовать в систе противобруцеллезных мероприятий для иммунизации и рсиммунизации наибох им муно генную вакцину из агглютиногенного штамма 19 в сочетании общехозяйственными и ветеринарно-санитарными мероприятиями.

2. На втором этапе, при стабилизации эпизоотической ситуации бруцеллезу, реиммунизацию целесообразно проводить вакцинами слабоагглютиногенных штаммов (82 и В-209), как наиболее технологичных позиции возможности осуществления эпизоотического контроля. Возможное практического использования вакцин из оленьих штаммов может бы определена после дополнительных исследований.

3. Наиболее технологичными и экологически безопасными д проведения иммунизации северных оленей против бруцеллеза могут быть убит вакцины, необходимость широкого внедрения которых в ветеринарную практь очевидна.

4. Разработанная схема специфической профилактики бруцелж северных оленей (включая и концептуальное обоснование) одобрена рекомендована для использования в практических и научных цел Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ (25.05.1998 г.) и Бюро отделен ветеринарной медицины РАСХН (15.09.1996 г.).

5. СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лайшев К.А., Хрусталев A.A., Вагина Л.А. Профилактическ эффективность малых доз вакцины B.abortus 19 для северных оленей // Проблег оленеводства Магаданской области.: Тез. докл. науч.-практ. конф,- Магад; 1988,- С. 35.

2. Лайшев К.А., Архангельский H.A. Факторы неспецифическ резистентности у северных оленей // Зоотехния.- 1988,- № 6,- С. 45-46.

3. Лайшев К.А, Лайшев А.Х., Соломонова Л.Д., Хрусталев A.¿ Соломаха СУ.И.., Вагина Л. А. Эпизоотология некоторых инфекционных инвазионных' болезней в Таймырской популяции северных оленей Эпизоотология, диагностика и лечение болезней животных в Заполярье: Hay техн. бюлл./ВАСХНИЛ,-Новосибирск, 1988,- С. 24-31.

4. Лайшев К.А., Хрусталев A.A., Лебедева С.М., Афанасьев В.П., Ваги Л. А. Иммунологическая реактивность организма северного оленя на введен разных доз вакцины B.abortus // Эпизоотология, диагностика и лечение болезне!

ивотных в Заполярье: Науч.-техн. бюлл./ ВАСХНИЛ.- Новосибирск, 1988.- С. 1-34.

5. Лайшев К.А, Хрусталев A.A., Лебедева С.М., Афанасьев В.П., Вагина .А. Иммунологический ответ оленей, привитых малыми дозами вакцины из тамма // Экспериментальная и клиническая иммунология на Востоке страны.: ез. докл. науч. конф. - Чита, 1989,- С. 67.

6. Лайшев К.А., Лайшев А.Х., Запорожченко В .Я., Лапшин С.Е., Масалов I.M., Шейко В.И. Бруцеллез северных оленей в Магаданской области // овершенствование технологии и повышение экономической эффективности ¡верного оленеводства: Науч.-техн. бюлл. / ВАСХНИЛ.- Новосибирск, 1989,- С. 1-27.

7. Лайшев К:А., Хрусталев A.A. Плюснина Л.О. Динамика антител у 1еней, иммунизированных разными дозами вакцины из штамма B.abortus 19. // овершенствование технологии и повышение экономической эффективности ¡верного оленеводства: Науч.-техн. бюлл. / ВАСХНИЛ.- Новосибирск, 1989.- С. 7-33.

8. Лайшев К.А., Лайшев А.Х., Соломонова Л.Д. Природные очаги ¡которых инфекционных и инвазионных заболеваний на севере Красноярского эая: Тез. докл. 12-й Всесоюз конф. по природной очаговости болезней. -овосибирск, 1989.- С.78-79.

9. Лайшев К.А., Лайшев А.Х. Хрусталев A.A. Профилактика бруцеллеза ¡верных оленей и борьба с ним // Методические рекомендации,- Новосибирск, т.-17 с.

10. Лайшев К.А., Лайшев А.Х. Ветеринарные проблемы в оленеводстве // истема ведения агропромышленного производства на Енисейском Севере на ?91-1995 гг.,- 1990,-С. 154-163.

11. Лайшев К.А., Лайшев А.Х., Запорожченко В.Л.,' Хрусталев A.A., пецифическая профилактика бруцеллеза северных оленей // Домашний ¡верный олень: вопросы экологии, морфологии, ветеринарии: Сб. науч. тр.-овосибирск, 1991,- С. 17-27.

12. Лайшев К.А., Лайшев А.Х., Запорожченко В.Я., Шейко В.И. Краевая шзоотология и пути оздоровления от бруцеллеза оленеводческих хозяйств в [агаданской области // Домашний северный олень: вопросы экологии, орфологии, ветеринарии: Сб. науч. тр.- Новосибирск, 1991,- С. 27-34.

13. Лайшев К.А., Афанасьев В.П., Ликонцева Н.В. Опсоно-фагоцитарная ¡акция нейтрофилов у северных оленей, привитых разными дозами вакцины их тамма 19 // Домашний северный олень: вопросы экологии, морфологии, ¡теринарии: Сб. науч. тр.-Новосибирск, 1991,- С. 35-38.

14. Лайшев К.А., Лайшев А.Х., Соломонова Л.Д., Хрусталев A.A., оломаха О.И., Серков В.А. Взаимоотношения домашних и диких северных теней современная эпизоотологическая ситуация в ареале

Таймырской популяции // Ресурсы, экология и рациональное использование дикю северных оленей в СССР Сб. науч. тр.- Новосибирск, 1991,- С. 22-33.

15. Лайшев К.А., Лайшев А.Х. Инфекцгонная патология диких животны? на севере Красноярского края // Проблемы пателогии животных и экологическое воздействие болезней диких и сельскохозяйственных животных: Тез. докл междунар. симп,- Астрахань, 1992,- С. 67.

16. Лайшев К. А., Лайшев А.Х. К проблеме охраны здоровья населении Енисейского Севера, включая НПР, от опаешх зооантропонозов //Науч. тр. Ковдепция сохранения здоровья на Крайнем Ceiepe.- Норильск, 1995,- С. 34-35.

17. Лайшев К.А., Лайшев А.Х. Особенности борьбы с бруцеллезов северных оленей // Ветеринария,- № 8,- С. 23-27.

18. Лайшев К.А., Лайшев А.Х., Колппциков Л.А. Эпизоотологическа; обстановка в популяции диких северных олене1 на Таймыре // Ветеринария.- К 9.-С. 11-16.

19. Лайшев К.А., Шелепов В.Г., КечинВ.П. Эпизоотическая ситуация ш особоопасным заболеваниям в Таймырской шиуляции диких северных оленей / Вестник Международной академии наук экологии и безопасносп жизнедеятельности.- 1997,- № 5,- С. 77-83.

20. Лайшев К.А., Шелепов В.Г., Мухэгев А.Д., Лайшев А.Х. Северно! оленеводство. Технологические процессы в домашнем оленеводстве,- М., 1997. 296 с.

21. Лайшев К. А., Лайшев А.Х. Результаты эпидемиологически: исследований на бруцеллез местного населения в ОПХ "Потаповское // Бюл. СО РАМН,- 1997,-№ 1.-С. 125-128.

22. Лайшев К.А., Забродина Е.Ф., Кечга В.П. Бруцеллез северных олене] .- Норильск, 1997,- 6 с.

23 Лайшев К.А,, Шелепов В.Г., Кечин В.П. Научно-обоснованная систем мероприятий по профилактике и борьбе с бруцеллезом северных оленей . Норильск, 1997,- 26 с.

24. Лайшев К.А., Забродина Е.Ф. Результаты изучения ферментативно] активности B.rangiferi (В. suis биовар 4) // Мат. совещ.: Оленеводств Европейского Севера,- Архангельск, 1998,- С. 31-42.

25. Лайшев К.А., Забродина Е.Ф. Сюйства бруцелл, выделенных о различных видов животных на Таймыре // Мат. совещ.: Оленеводств Европейского. Севера.- Архангельск, 1998,- С. 41- 50.

26. Лайшев К.А., Хрусталев A.A. Эпизоотическая ситуация по бруцеллез северных оленей и закономерности течения икфекции на Енисейском Севере ; Мат. совещ.: Оленеводство Европейского Ceeepi.- Архангельск, 1998,- С. 50-57.

27. Лайшев К. А. Методологические аспекты изучения бруцелллеза зерных оленей // Вестник Международной академии наук экологии и зопасности жизнедеятельности.- 1998,- № в.- С. 70-81.

28. Лайшев К.А., Димов С.К. Концепция специфической профилактики уцеллеза северных оленей // Матер. 9-го Международ, симпозиума: конструкция гомеостаза,- Красноярск, 1

Подписано к печати 09. 06. 1998 г. Формат 60x84 1/16 Объем 2,0 печ. Л. Тираж 100 экз.