Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Совершенствование диагностики и мер борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота и свиней
Лкадекня аграрных наук Республика Беларусь
Белорусский научно-исследовательский институт эхсперинеитаяьной ветеринарии им.С.Н.Выяехвсского
ДО 619:616.932.21:636.2+636.4
РГб од
О 9 Г~'Г
РУКАЧИХ Иван Иванович
СОВЕР02НСТВОВАНИЕ ДИАГНОСТИКИ Н HHP БОРЬБЫ С ТУБЕРКУЛЗЗОН КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Н СБИНКЗ
L6.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология
А В Т О Р В а В Р А г
i
Диссертации на сонсюание ученой степени дохтора ветеринарных
Нянек 1997
Работа выполнена в лаборатории туберкулеза Велорусског научно-исследовательского института экспериментальной ветерина рии ик.С.Н.Вышелесского.
Научные консультанты - доктор ветеринарных наук Лысенко А.
Доктор медицинских наук, профессор Титов Л.П.
Официальные оппоненты:
Доктор ветеринарных наук; профессор Луцевич Л.М. Доктор биологических наук,'профессор Ерооов А.Я. Доктор медицинских наук ' Батяи A.B.
л
Оппонирующая организация - Витебская государственная а*адеки
. ветеринарной медицины
Завита состоится "2Ц* а 1997 года в ^*"часо
на заседании специализированного совета по защите диссертаци при Белорусском научно-исследовательском институте эксперииен талькой ветеринарии им.С.Я.Вышелесского {223020, Минский район п/о Куицевщина, ВелНИИЭБ).
С'диссертацией мохно ознакомиться в библиотеке Бело^усско
е>
го научно-исследовательского института экспериментальной вете ринарии им.с.Н.Вышелесского.
Автореферат разослан * 1997 года.
- Ученый секретарь
специализированного совета по загенте диссертаций, доктор ветеринарных наук, профессор
ОБЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Устойчивое развитие янвотноводства имеет для республики наиаагнейиее значение. Отрасль дает почти 60 процентов валового продукта АПК. От состояния продуктивности Животноводческих ферм во многой зависит эффективность экономики хозяйств я благополучие населения страны. Вагное значение для успешного развития животноводства имеет ветерииарно-санитарный надзор, обеспечивавший его благополучие по заразным я незаразным заболеваниям еивотных.
йэ инфекционных болезней туберкулез крупного рогатого скота наносит значительный экономический ущерб животноводству и, как зооантропоноз, представляет опасность для популяции человека.
Несмотря на относительную) стабилизации эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота за последние го-ды^эта проблема по-прегнему занимает одно нз первых мест в животноводстве. При аллергическом исследовании скота на туберкулез еаегодно выявляется 48-50 тысяч реагирующих на туберкулин ¡киаотных, причем основное их количество (95-97%) приходится на благополучные по туберкулезу хозяйства. При этом следует отметить, диагноз на туберкулез при проведении последукцих комплексных исследований в большинстве случаев не подтверждается. Поэтому необходимо созераенствованиэ су^2стзуг~!!х п разра-Зотка новых средств и методоз дифференциальной диагностики, з первуа очередь прижизненной, с цояьв сохранения продуктивных животных, а такге методов быстрого а эффективного оздоровления зоголов^я при возникновении туберкулезной инфекции а хозяйства (на Ферме, в стаде).
Известно, что сенсибилизация организма и развитие реакции на туберкулин у крупного рогатого скота а других видов гязотшгх я птиц могут вызывать атипичные минобанторгот (А.Я.Заров, 1969, 1989; О.В.Мартма, К.К.ТЯхнас, 1975, 1978; А.Х.Найманов, 1981, 1993; Р.В.Тузова, 1975, 1933; А.А.Солонехо, 1976, 1984; Э.Я.Кассгч 1990; Ан.А.Нвглевсквй, Ал.А.ЕзгяезскиЙ, 1987; \.й.3авгородннй, 1987, 1997; А.Н.Ходун, 1988, 1397; А.П.Лысен-со, 1984, 1994; 2.Н.Нипуоп, 1959; Ь.А.Согпег, 1581; Н.Вшвагс-сик, 1981; М.Ь.МопадЬап е! а1., 1994).
в
г
Кроме того, в ряде случаев атипичные кикобактерии и возбудитель туберкулеза ногут вызывать смешанную иикобактериальную инфекцию с развитием сенсибилизации по клеточному типу - гиперчувствительности замедленного типа.{А.О.Бокун, 1976; Н.А.Александров, 1979;, Г.В.Чепик, 1980; В.В.Андрущенко, 1984; Н.М.Мандро, 1988; В.в.Мартынов, А.В.Нартинов, 1991; В.J.Duffield, J.В.Korton, D.Hoffman, 1989). Таким образок, внутрнкожная аллергодиагностика с туберкулином приводит к необоснованному убо-э отдельных реагировавших на туберкулин животных и соответственно увеличению продолжительности карантина. В таких ситуациях существенно возрастает роль лабораторных методов" диагностики туберкулеза и, в первую очередь, бактериологического исследования материала от животных. От него зависит выделение возбудителя туберкулеза или атипичных мнкобактерий и определение их свойств (H.H.Ииробокова, 1974; Н.П.Зыков, Т.Е.Ильина, 1978;
A.П.Аликаева, 1979; С.Г.Субботина, 1979; 1994; Н.МЛажгалиев, . 1986; Л.А.Ильиных, 1S90, 1991; Л.А.Фокина, 1995; C.Zorawski,
P.S.Skwarek, 1977; W.Kappler, K.Eosemarie, 1989).
При патояогоанатокическон или бактериологическом подтверждении диагноза на туберкулез и налозении карантина на ферму {хозяйство) возникает необходимость срочного оздоровления стад крупного рог..:-.. - скота (ферм,- хозяйств), которое вклвчает не только выполнение специальных ветеринарных мероприятий, но и комплекс зоотехнических, организационно-хозяйственных к общих , санитарных работ, направленных на ограничение и ликвидации очага инфекции (И.К.Есковец, 1948, 1952, 1953, 1963; В.Й.Ротов, П.Н.Кокуричев, П.Е.Савченко, 1973; В.П.Урбан, 1980, 1995;
B.Е.Иуревский, . 1980; Н.П.Овдненко, В.А.Еаров, Э.С.Плотников, 1982; Р.В.Туэова, 1978, 1983,- ».Е.Кассич, 1984, 1994; С.И.Джу-пкна, 1986; А.С.Донченко, 1986, 1989, 1995; А.И.Ерошов, Б.П.Заблоцкий, 1990; J.D.Collins, 1981, 1987; K.B.Chloupe, 1981; t.Denes, 1983; R.E.Ortis, 1986; T.B.Hartin, 1992).
Поскольку длительность неблагополучия стада зависит, в основном, от продолжительности и полноты проведения аллергических исследований поголовья, то в нШ*еоних сложных социально-экономических условиях преобразования животноводства и перехода его к рыночным отношениям назрела необходимость совершенствования существующих и разработки новых схем я методов аллергических
исследований скота с целью быстрейаей ликцндацяи туберкулезной инфекции и с наиненьяики потерями (Г.В.Корокыслов, 1983; Н.П.Овдпенхо, 1584; Г.А.Объедков, 1984; В.А.Шхнль, 1987; О.И.Сиолянинов, 1994; Д.Д.Новах, 1995).
Связь работы с хрушшни каучиымн программами, текака. !: Научно-исследовательская работа проводилась в соответствии с отраслевыми комплексными научно-техническими программами 3.31.03.01 (1976-1980 гг.) и 051.09.01 (1980-1990 ГГ.), по ме-котраслевым программам 0.сх.61.02 (1976-1980 гг.) и О.сх.97.01 (1981-1985 гг.), номера Госрегистрацни 76045446 н 81085787, а гаххе по республиканской подпрограмме "Ветеринария", Госрегист-эация Н 1993141 (1991-1995 гг.).
Цель работы. Совершенствование дифференциальной диагностики туберкулеза еивотных и методов оздоровления неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота.
Задачи исследования.
1. Провести ретроспективный анализ эпизоотической ситуации ю туберкулезу крупного рогатого скота и свиней а Республике 5еларусь.
2. Изучить специфичность проявления когшо-аялэргических реакций у реагировавших через 72 ч животных на повторное введете туберкулина, усовернействовать порядок проведения плановая >ллергических исследований крупного рогатого слота.
3. Разработать , способ српипзнонпоД дп^фчронциация Еиутрн-:ожкых туберкулиновых реакций при проведении плановых аллзргк-[еских исследований'крупного рогатого сгста.
4. Сравнить диагностичееху» эффективность комплексного ал-[ергена из атипичных гя:нобактер:!й (КАМ) и ГШД туберкулина для 1тиц в симультанной аллергической проба.
5. Оптимизировать методику бахтеряояогкчесяого исследова-
ния
:ия материала на туберкулез в условиях практических ветеринарах лабораторий.
6. Разработать метод оздоровления неблагополучных по ту-еркулеэу стад крупного рогатого скота, позэолясгп'.а оздоровить оголовье а боя&е короткие срока.
•7. Обосновать целесообразность исследования свиней на ту-вркулез только туберкулином для млекопитающих.
Научная иовазна работы.
1) впервые установлена высокая специфичность проявления реакции на повторное введение туберкулина в другой участок кожи вей рядом с реакцией на его:введение первый раз у крупного рогатого скота, зараженного возбудителем туберкулеза, что позволяет повысить точность и ускорить проведение дифференциальной диагностики.
2) Разработана схема ускоренных аллергических исследований и обоснована целесообразность ее применения при обнаружении первых случаев туберкулеза иди на завершающей стадии оздоровления стад вначале с. интервалом между исследованиями в 15-20 дней, затем - через 60-75 дней, завершая цикл исследований симультанной аллергической пробой. Доказано, что частое введение туберкулина не влияет в последующем на развитие и проявление аллергических реакций у инфицированных, но еще не реагирующих животных.
.3) На основании анализа эпизоотической ситуации по туберкулезу в Белоруссии получены данйые, позволяющие объективно определить тенденции ее изменения. Установлено преимущественное влияние, субъективных факторов на уровень благополучия по туберкулезу В республике.
4) Доказан-, что гранулематозные поражения только в мезен-териалышх лимфатических узлах у реагировавшего на туберкулин крупного рогатого скота не связаны с заражением животных возбудителен туберкулеза, и по этому признаку нельзя ставить окончательный диагноз без бактериологического пли гистологического исследования материала. '
5) Оптимизирована методика проведения бактериологического исследования материала на туберкулез в условиях практических ветеринарных лабораторий, что позволило повысить высеваемость нихобактерий на 50-65% и уже на первом этапе их культивирования на" плотных средах провести дифференциацию культур по способности образовывать корд-фактор. . »
6) На основании прикладных исследований и научного анализа доказана целесообразность проведения диагностики туберкулеза у свиней с применением только одного туберкулина для млекопитающих.
7} По результатам работы издана монография, материалы ко-
торой йспользувтся при чтении лекций для студентов и слувателей $ПХ Витебской государственной академия ветеринаркой медицины, а также при проведении курсов и семинаров по повышению квалификации ветеринарных специалистов республики. Получены 3 удостоверения на рацпредложения.
< Практачес*ая значимость полученных результатов. Способ ускоренной дифференциации туберкулиновых реакций у скота позволяет на 85-1004 уменьшить необоснованный убой реагировавших на туберкулин коров, инфицированных нетуберкулезными микобактерия-ки, сократить в 1,9-2,0 раза расход диагностических препаратов и на 1-4 месяца ускорить цикл исследований по дифференциальной диагностик®.
Применение метода ускоренного оздоровления хозяйств от туберкулеза позволяет в 2,5-3,5 раза сократить сроки я соответствующие затраты при проведении оздоровительных мероприятий.
. Оптимизация способов н приемов бактериологической диагностики заболевания на 50-65% повышает ее эффективность, сокращает время и затрата на идентифихаци» выделенных культур.
В целом применение разработанная методик прижизненной и посмертной дифференциальной диагностики туберкулеза позволяет предотвратить ущерб от необоснованного убоя реагировавших на туберку'.-н гивоткых по причине 'сенсибилизация их организма атипичными иикобактернями в 2-3 раза.
В книге "Микобактериоэ свиной"' (1333 г.). приведены данные, необходимые ветспециалистаи свинозодчесних хозяйств, по этнологии, патогенезу и дифференциальной диагкостаце туберкулеза д кикобактерноза свинеЗ.
Внедрены а прожзводстЕэ:
№ ■
- способ ускоренной дифференциация туберкулиновых реакций
у скота при плановых исследованиях на туберкулез {утэ. НТС я ГУВ Минсельхозпрода Республики Бэларусъ^кЭЛУ.1996 г., протокол Я б).
- Исследование свиней на туберкулез одним туберкулином для ■«лекопитавядах (утв. НТС я ГУВ Минсельхозпрода Республика Беларусь 29.ХП.1994 г., протокол II 8).
- Метод ускоренного оздоровления неблагополучных по тубар-гулезу стад крупного рогатого скота (утв. НТС я ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 29.1У.1996 г., протохоз К 6).
•■ «. -
- Оптимизированная методика бактериологического исследования материала на туберкулез (справка Республиканской государственной ветеринарной лаборатории К 507 от 12.05.1997 г.).
- Способ и порядок , проведения плановых аллергических исследований скота на туберкулез. Одобрен НТС Минсельхозпрода Республики Беларусь 29.ХП.1994 г., протокол 8 8.
Разработаны проекты "Инструкции о мероприятиях по профилактике и ликвидации туберкулеза животных" и "Наставления по диагностике туберкулеза животных", которые представлены в ГУВ и Республиканскую государственную лабораторию для утверждения.
Экономическая эффективность разработок. Внедрение разработок в ветеринарную практику сокращает затраты на дифференциальную диагностику в 2-3 раза и на 85-100% предотвращает необоснованный убой реагирующих на туберкулин животных при инфицировании их атипичными микобактериями. При подтверждении диагноза на туберкулез применение метода ускоренного оздоровления стада позволяет ликвидировать болезнь за 6-$ нес, при 85-90%-ной сохранности поголовья. Предотвращенный экономический ущерб составил 8,37, млн.руб. при аллергическом исследовании крупного ро-гатогосхота и 6,97 млн.руб. - у свиней на 100 исследованных животных. Эффективность оздоровления ускоренным методом - 62,12 млн.руб. па СО ^оров оздоравливаемого стада (в ценах 1993 г.).
Осноь.1Ыо положения диссертации, выносимые на задату.
1. Характеристика и особенности эпизоотической ситуации по туберкулезу животных в Республике Беларусь, отличающиеся тенденцией снижения основных ее показателей с затухающей амплитудой периодических подъемов, которые в большей степени зависели от субъективных причин, кадровой политики и экономической стабильности хозяйств.
2. Особенность аллергического иммунного ответа у реагировавших через 72 ч животных на повторное введение туберкулинов (аллергенов), отличающаяся 85-100% специфичностью внутрихожных реакций на гомологичный туберкулин (аллерген)«
3. Оптимизированная методика бактериологического исследования патматериала, включающая его высев отдельно по группам лимфатических узлов от каждого животного, приготовление мазков только из высеваемой суспензии, использование разных типов пробок для герметизации пробирок, постановку наиболее простых и
доступных тестов с выделенными культурами мнхобактерий с определением корд-фактора а первичном росте или субкультуре на плотной питательной среде, что позволяет на 50-65% увеличить высеваеность микобактерий, сократить время и затраты на их идентификации.
4. Схема аллергических исследований крупного рогатого скота при оздоровлении неблагополучных по туберкулезу стад для бо-. лее быстрого выявления больных и инфицированных возбудителем туберкулеза животных.
5. Аллергическое исследование свиней на туберкулез только туберкулином для млекопитающих.
Личный вклад. Основной объем работ (90%) выполнен лично автором и частично (10%) совместно с сотрудниками лаборатории туберкулеза и лейкоза.
Апробация результатов диссертации. Основные результаты исследований доложены на Ученом совете БелНИИЭВ (1980-1997 гг.), на республиканских научно-производственных конференциях (ньиск, 1979; Гродно, 1982, 1987, 1996; Витебск, 1994), на Всесоюзных конференциях (Симферополь, 1981; Киев, 1982; Новосибирск, 1991, 1995), в Главном управлении ветеринарии и облво-тотделах (1993-1996), на НТС Минсельхозпрода Республики Беларусь (1990, 1994, 1996).
«г
, Опубяиховаккость результатов. По тема диссертации опубликовано 56 работ, в том числе одна монография (в соавторстве), 40 статей, 15 тезисов.
Структура и объем диссертация. Диссертация изложена на 339 страницах мапинописного текста, вхлвчает 48 таблиц а 16 рисунков. Список литературы состоит из 710 источников, в том числе 188 иностранных.
ОЕЗАЯ НЕТОДШ5А H ОСНОЕННЗ ИВТ0|^! ЕСС2ЩД0ВЙЕНЯ
Работа выполнена в лаборатории туберкулеза Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вшяелессхого, в хозяйствах с различной эпизоотической ситуацией по туберкулезу крупного рогатого скота и свиней, на мясокомбинатах Белоруссии.
Анализ эпизоотической ситуации по туберкулезу за период с 1957 по 1996 год проводили по.ветеринарной отчетности ГУВ Нин-
сельхозпрода Республики Беларусь.
Экспериментальные исследования для усовершенствования аллергической диагностики туберкулеза проведены на 52 морских свинках, б кроликах и б головах молодняка крупного рогатого скота, зараженных или иммунизированных М.Ьоу1з-Уа11е, М.Ьо-у1в-8, М.Ьоу1в-ВС6, М.ЬоУаа-ЗР, Н.БСГо*и1асеит-509, M.avi-иш-1603, Н.1еггае-5922, М.£ог1ииит-342, М.рЬ1еа-1889. (ВГНКИ, ЦНИИТ).
Для аллергического исследований крупного рогатого скота, свиной и экспериментально зараженных животных использовали ППД туберкулин для млекопитающих или его стандартный раствор, ППД туберкулин для птиц и КАМ производства Курской биофабрики, согласно наставлениям по их применению.
Результаты симультанной пробы с применением ППД туберкулина для птиц оценивали по общему количественному и качественному проявлению реакций на аллергены, при использовании в симультанной пробе КАИ - согласно "Наставлению по применению симультанной аллергической проба с применением Туберкулина и комплексного аллергена из атипичных иикобактерий (КАМ) при диагностике туберкулеза у животных", утвержденной? ГУЕ КСХ СССР 27 ноября 1978 г.* и 4 июля 1980 г., а затем - согласно "Наставлению по диагностике туЕ•?геза животных", утвержденному ГУВ Госагроо-. рома СССР 2-, февраля 1986 г.
Исследования по совершенствованию аллергической диагностики в условиях производства выполнены на 71263 головах крупного рогатого скота в 6 областях республики: в 33 хозяйствах на 67 фермах, в тон числе симультанной пробой с использованием ППД туберкулина для пткц - на 5437 головах (10 хозяйств, 16 ферм) и с применением КАН - на 7761 голове (13 хозяйств, 21 ферма).
Учет аллергических реакций проводили в динанике через 72 ч, а также через 24 и 48 ч в случаях повторного введения аллергенов реагировавшим животным. Всего исследовали 57696 коров и нетелей в 6 областях на 64 фермах 32 хозяйств,' в которых выявили 5773 головы реагировавших животных.
Для совершенствования методов оздоровления неблагополучных по туберкулезу ферм исследования проведены на 12922 головах крупного рогатого скота 22 ферм из 15 хозяйств.
ВнутрихожноЙ аллергической пробой исследовали 35851 голову свиней 34 ферм (комплексов) из 34 хозяйств, в том числе 2461
голову - в неблагополучной по туберкулезу конплексе.
Диагностическому убою подвергли 5795 регировавших на туберкулин животных. Пробы материала отбирала и исследовали бактериологически в соответствии с "Наставлением по диагностике туберкулеза животных" (1986 г.). Дополнительно проводили бактериоскопию мазков, приготозленных из суспензия высеваемого на штательные среды материала я из суспензии для заражения лабо->аторкых животных. Всего исследовали 931 пробу патматериала от гивотных и выделили 725 культур микобактерий.
С целью изучения распространения микобактерий в окружающей щвотных среде проведены исследования 297 проб различных объектов внешней среды, кормов и дополнительного материала от реаги-ювавших на туберкулин животных, из которых выделили 57 культур [икобактерий.
Исследование спермы на содержание возбудителя туберкулеза проводили в соответствии с "Рекомендациями по вопросам ветери-ар;-м стран-членов СЭВ" (1980 г.). •
Для герметизации пробирок с посевами материала использова-и ватно-нарлевые пробки с последуащэй заливкой парафином, ре-иноЕые пробки без- и с вырезанным хосым желобком, корковые робки и металлические затворы.
,У выделенных культур микобактерий, наряду с изучением ультурально-морфологическях, тинкториальках а биологических войств, определили наличие корд-фактора (файтора внруяентиос-и) по В.$.Еалан с соавт. (1978 г.) а нааеЯ модификации.
В работе использовали эталонные итакка кпкобактериЗ;
H.bovis, Vallee, И 8, BCG; И.tuberculosis, М, Hj7Ík; •avuin^ 1603, 780; H.phlei 18S9, M.fortuitua 392, M.saeqnatis, .srcofulaceum 509, M.scotochronoqeaea, полученные нз UHlfflT, ГНКИ и ВЯЭВ (Москва), а тахяе хуяьтурь",.микобактерий, выделзн-ае из материала от реагировавши: на туберкулин животных п из 5ьехтов внешней среды.
Статистическую обработку цифровых данных проводила по .б.Рокицкону (1967 г.). ЗЕОНоинчесхуэ эффективность разработок 7ределял;г по методике З.П.Урбана, В.П.Шпясоза (1991 г.) с учэ-зм удельных коэффициентов затрат при проведешп! протиэотубер-глезных мероприятий по В.Я.Скоятгаиову (1994 г.).
- о
10
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота в Республике Бэларусь
Для эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в республике характерны периоды улучшения и ухудшения основных ее показателей. Наибольшее количество неблагополучных пунктов на конец года (рис.1) отмечалось в перио; 1964-1965 гг. 4599 и 660), в 1976-1977 гг.(453 И 380), I 1986-1987 гг. (132 и 179), а меньше всего - в 1968 г. (161), I 1980 Г. (102) и В 1992-1993 гг. (по 18 пунктов). '
Максимальное выявление неблагополучных по туберкулезу пунктов отмечалось в 1964-1965, 1976 и 1987 годах (соответственно 235-229, 258 и 160), а минимальное - в 1966, 1980 и 1992 годах (51, 58 и 9 пунктов.).
Оздоровление неблагополучны^ по туберкулезу пунктов боле« быстрыми темпами проводилось в 1966-1967, 1978-1979 и в 198£ годах (298-261, 197-214 и 193), медленнее - в 1961, 1970 и 198] годах ("45, 41 и 61 пункт).
Большое ас.:: ■■ ;„тво реагирующего на туберкулин (больного! крупного рогатого скота в неблагополучных пунктах выявлялось I 1965, 1976" и 1985-1986 годах (соответственно 26495, 25826 I 12932 - 13434 головы), меньше - в 1970, 1980 и 199Г- года> (7954, 5675 и 1222 головы).
Начиная с 80-х годов общее количество реагировавших на туберкулин аявотных в благополучных к неблагополучных по туберкулезу хозяйствах увеличивалось и в 1989-1990 г. составило 7609: и 70785 голов, причем в благополучных хозяйствах из них выявлено 68769 и 67780 голов, а в неблагополучных - только 7324 » 3105 голов соответственно. В дальнейшем при общем уровне снижения реагировавших хивоткнх эта тенденция продолжала сохракять-
.X
ся, что отмечается и в настоящее время.
Наибольшее количество туберкулезных изменений у сдаваемогс на убой скота обнаруживали в 1972, 1974, 1982 и 1986 года? (7293, 7406, 5486 и 5660 случаев), мэньше - в 1980, 1983-1984 I 1992-1993 годах (3710, 3856-3851 и 845-842 случая),
Количество туш, направленных на техническую утилизацию I
1975 г. составило 1269 случаев, затеи их количество постепенн* уменьшалось и в 1992 г. было всего 58 случаев.
Анализ выделения микобактерий при бактериологическом исследовании материала от животных и птиц ветеринарными лабораториями республики за последний.21 год показало, что результативность выделения микобактерий увеличилась. Вели в 1976 г. былс выделено 511 (7,9+0,16%) культур, то уже в 1988 г. частота из выделения составила 1946 (22,8+0,46%).
Отмечена также явная тенденция уменьшения выделения М.Ьо-vis при одновременном увеличении изоляции атипичных микобактерий (см.рис.2), особенно микобактерий 1У группы по классификации Runyon (1959 г.). Так, если в 1976 г. H.bovis составлял! 496 выделенных культур (97,06+1,94%), то в 1992 г. только Í (1,3+0,03%), а атипичные микс,5актерии соответственно: с 3 культур (0,59+0,01%) первой, второй, третьей и 6 культу! (1,17+0,02%) четвертой группы до 6 культур первой (0,9+0,01%), ' 95 - второй (13,4+0,274) и 566 культур (80,0+1,6%) четверто{ группы. * .
М.tuberculosis выделяли в единичных случаях (1977, 1978, 1980, 1982 гг.), что свидетельствует о его строгой селективности. За последние 6 лет он был выделен от крупного рогатого скота только i одном хозяйстве (1995 г.). Выделение'микобактерий из материала от свиней за этот период колебалось в разных пределах и в зависимости от количества поступившего материала: от 4 21,0+0,42% в 1977 г. до 45,0+0,90% в 1985-г., а в среднем -28,0+0,56%. Это, в основном, атипичные кикобактерни И-й (до 80,0%) и 1У-й групп (до 18,0%). Отпечены также единичные случаи выделения H.bovis (1976-1978 гг.) и ».tuberculosis "(1983 г.)
Бактериоскопическое подтверждение диагноза на туберкулез у птиц достигало более 50% случаев, причем не в промышленном птицеводстве, а в частном секторе.
Таким образом, начиная с 1964-1965 гг. в республике отмечалась тенденция снижения основных показателей эпизоотического процесса с затухающей амплитудой периодически* подъемов, которые не были связаны с внедрением нормативных документов по профилактике и диагностике туберкулеза, а в большей степени зависели от субьективных причин, кадровой политики и экономической стабильности хозяйств. ,
С 1976 г. количество выделенных культур Я.bovis из материала от животных постоянно уменьшалось, а атипичных микобагтерий - увеличивалось.
Адяорптчэсхая диагностика
Изучение специфичности реакций г*ри повторном введении аллергенов у яабо-раторкых аизоткнх, аарззеккнх M.bovle-BCG н ати-хкрпгыиа ннкобактерпямя.
При подксаюя заражении 7 морских свгнохи внутривенном 2 кроликов K.bovis-3CG в дозо 1 кг и скесьв атипичных никобакте-ркй Ш и 1У группы по Runyon а дозе по 2 нг аллергические реакции на туберкулин выявлены через 17 суток у всех морских свинок (1001). При учета реакций черэз 46 ч животным повторно,, в другой участок spssi, вводили туберкулин, отступив от края развив-вей,^'! реакция 3-4 си, а с другой стороны,- RAM. Оценку реакций проводили через 24 и 43 ч.
Размер эритем у морских свинок, зараженных H.fcovis-ECG [атнпачннмй микобгхтеркякя*), на туберкугяа через 24 и 43 ч, :оставил 12,3+0,25 (7,0+0,14) н 10,4+0,20 (4,5+0,03) км, на 10вт,орнеЗ'его введение 11,4+0,23 (4,2+0,03) и 3,4+0,17 ;2,7+0,05) мм, , на KAM - 5,3+0,12 (9,2+0,13) л 4,0+0,03 .6,7+0,13) кн. Суммарная интенсивность вяавргйчасхза: реакций на tepBoe введение тубс-р^уг::::-:а сосТггаига 23,2+0,5 (11,5+0,23) к«, ta повторное - 19,3+0,4 (6,9+0,14) им соо?з®*ствег.тк» я из КАЛ ->,8+0,2 (15,9+0,32) КМ.
npi% исследовании на 32 сутки посла заражения реаацзп через 4 и 43 ч составаяв 12,7+0,26 (5,6+0,11) а 12,4+0,25 (4,9iÖ,10) м, яа повторное введение туберкулина 3 3,0+0,24 (5,3+0,11) а 1,0+0,20(4,2+0,08) км, на KAM - 5,9+0,12 (13,6+0,25) а ,7+0,11 (11,0+0,20) ни.
Суммарная интенсивность ГЗТ за два иссаэдования у спинок ерез 24 и ,4В ч составила 25,2+0,50 (12,6+)б25) и 22,8+0,45 9,4+0,19) км, на повторное введение туберкулина 23,4*0,47 3,5+0,19) а 19,4+0,40 (6,9+)S13) км, на КАИ - 11,7+0,23
* - В скобках ухезана ередниа зегпггпяы рэаицкЗ у ензотиых, зараяашшх параллельно атипичными шпгобактериякя.
(22,8+0,45) И 9,7+0,20 (17,7+0,35) мм.
У кроликов реакции были 11,0 (4,0) и 8,S (3,0) им на основное введение туберкулина и 14,5 (3,0) и 11,5 (3,0) им на повторное его введение, йа КАИ - 7,0 (13,0) и 5,5 (10,0) им.
Таким образом установлено, что интенсивность реакций на повторное; введение гомологичного аллергена у зараженных К.Ьо-vie-BCG животных имела лишь тенденцию снижения, в то время как на гетерологичный аллерген она фактически была отрицательной, т.е. специфичность показаний внутрихохной пробы при повторном введении аллергенов составила 100t.
Исследования специфичности аллергических Реакций ч телят, сенсибилизированных антиренами H.bovis и атипичных мнкобакте-рий, ■ _ •
В опыте использовали 6 голов молодняка крупного рогатого скота. Двум из них трехкратно подкожно с интервалом 14-15 дней вводили ультразвуковой дезиктегрант смеси микобахтерий П, Ш я 1У групп по Runyoa из расчета 200 мкг белка на 1 кг массы животных." Два теленка в эти хе сроки гиперимнукизировали дезин-тегрантом К.bovis Vallée (1 гол.) и H.bovis 8 (1 гол.) с эмуль-сигеном £ равных объемных соотношениях.
Аллергические исследования провели трижды с интервалом 15-30 суток. Схема постановки внутрихогных тестов бнла. анало-* гичной вышеприведенной. При тестировании через 72 ч животным повторно с одной стороны вводили туберкулин, отступив от края развившейся реакции на 7-10 см вперед, а с другой стороны шеи -КАИ или ППД туберкулин для птиц. При втором и третьем исследованиях вводили ППД туберкулин для млекопитающих, для птиц и KAM. Реакции учитывали через 24, 48 а 72 ч после первого и повторного их введения. '
Общая суммарная иммунная реактивность трех исследований у животных, гнпериммунизированных антигенами H.bovis, на первое введение туберкулина составила 94,0+1,9 им и 57,0+1,1 мм у иммунизированных антигенами атипичных микобахтерий, на повторное введение соответственно 87,0+1,7 и 56,0+1,1 мм; на туберкулин для птиц - 73,0+1,4 н 82,0+1,6 мм; реакция на KAM была 66,0+1,3 мм в обоих случаях.
Результаты исследований (табл.1) показали, что все животные, сенсибилизированные антигенакк Н.bovis, были диагностированы правильно (оценка реакции "+"), как при учете по базовому методу на 72 ч, так я при повторном введении аллергенов. У особей, сенсибилизированных антигенами атипичных микобактерий, как i туберкулином для птиц, так и с KAM в 1 случае из 3-х при уча-, те на 72 ч получены парадоксальные реакции с оценкой "+", т.е.причина аллергии была определена неправильно (специфичность 66,6+1,3%). В то же время при повторном введении аллергенов в случае применения туберкулина для птиц 8 из S животных были определены правильно (специфичность 100+2,0%), а при постановке реакции с KAM эти показатели соответственно 5 из 7 случаев (71,4+1,4%). У контрольных (интактных) животных специфическая реакция отсутствовала - утолщение кожных складок в сроки 72 ч, 24 ч (96 ч), 48 ч (120 ч) были не более 1 мм.
' Такпм образом, частое введение туберкулина (трижды через дней), прячем с дополнительным введением аллергенов через 72 ч не вызызало десенсибилизации организма телят, гиперинмунн-зированных антигенами М.bovis в атипичных нйхобактеряй, а также сенсибилизации у здоровых (контрольных) животных.
На повторное введение аллергенов ответная реакция была спевчфи«*ййе, чем на первое, в особенности при учете результатов на 48 ч.
Соверзенствованяэ котодоэ дг559ревцзальвоЗ аллергической даагпостпЕЗ
Оценка эффективности симультанной пробы с применением ХАН а туберкулина „для. Я...
Исследования с применением KAM проведены на 3 неблагопо-аучных и 17 благополучных фермах с обсзм поголовьем 7761 zhbot-аое. При применении симультанной пробы согласно наставление в неблагополучных стадах только а одном случае (33,3%) из трех результаты достоверно свидетельствовали о туберкулезной инфекции. В двух случаях (76,7%), где подтверждено надзчяо сиепанной «нсобактериальной инфекции, получен неопределенный результат. В делом из 854 исследованных хоров выявлено всего 58 животных
. .. . Таблица 1
Результаты изучения специфичности показаний ■ аллергических проб на первое и повторное введение аллергенов
-г—т—————. '-1; :-——————-■—> ■
Воиера¡Антиген JУтолщение ножной складки в нн (оценка реакции)) еивот-|дяя сен-| на ЕПД туберкуливы и КАИ |
KUX | сибкли- |—-—-—--—-■ ■ |--—-------—-j
|зацип | первично | повторно (
I t- / I, .... 1 -11' -■ ■ ——I-1
| |млеко-| птиц | KAM |млеко-j птиц | KAM )
| (питаю-) | . )питаг-| ) )
1 (вдх ): | |щкх | | )
__1_i__' _1__l__1___i_j
*
в . ■ ■;
1738 Н.bovis-8 7 8 6(+) 5(+)
286 • M.bovis-V 3 8 7{ + ) 6( + )
7309 Смесь ■ *
П-1У группы 1 3 5(-) 3,5(-)
198 " " 3 6 З(-) 7(-)
■ В -
1738 K.bovis-3 12 . 9... 5(+)
Т
1738 M.bovis-8 10 8(+) 5(+) 7 5( + ) 4{+)
7309 Сиесь
П-1У группы 5 3(+)х 2( + }* 3 5(-) 3( = )*
198 " * 5{-) 5(~) 5 б(-) 5( = )»
Специфичность пробы 66,6+1,3% 66,64+1,3% 100+2,05 71,4+1,4%
Примечание: П, Б, 1 - ■ результаты исследования ¡тавотных . . через 15, 15 и 30 дней; ;
. х - • зтво.якое определено неправильно ; (парадоксальная реакция)
(6,8+0,1%), в гон числе со знаком "паюс" - 29 (50,0+1,0%), "минус" - 9 (15,5+0,3%) я "равно" - 20 животных (34,7+0,7%).
Из 17 благополучных ферм результаты, достоверно свидетельствующие об инфицирований скота атипичными микобактериями, получены только в 3 случаях (17,6+0,4%). На 14 фермах (82,4+1,7%) ¿аэультатн оказались неопределенными. Из 7907 исследованных коров и нетелей 12 хозяйств 20 ферм выявили 790 животных (9,9+0,2%), в ток числе со знаком "плюс" - 101 (12,7+0,2%), "минус" - 566 (71,7+1,5%) я "равно" - 123 животных (15,6+0,3%).
Данные последующего наблюдения и результаты бактериологического исследования материала от животных показали отсутствие туберкулеза в стадах и подтвердили инфицирование скота атипичными микобактериями И-1У группы.
Такие же данные о диагностической значимости симультанной пробы получены при использовании туберкулина для птиц. Исследовано 5392 головы крупного рогатого скота на 16 фермах 10 хозяйств. Из 1029 реагировавших на туберкулины животных (19,0+0,4%) только на туберкулин для млекопитающих реагировали 13 (1,2+0,02%), только на туберкулин для птиц 915 (89,0+1,8%) и одновременно на оба, в основном с большей интенсивностью реакций на последний, - 101 голова (9,0+0,2%). Если проводить оценку результатов симультанной пробы по методике аналогичной с КАМ, то лишь в 2 случаях (12,5+0,25%) установлено отсутствие туберкулеза, в остальных случаях (87,5+1,8%) получены неопределенные результаты, хотя во всех случаях бактериологически подтверждено инфицирование скота атипичными мккобактерикнп.
Вместе с тем соотноаекиэ реагированиях на туберкулин для млекопитающих и для птиц было в среднем 1:70, что с учетом проявления реакций на оба аллергена' целесообразно учитывать при оценке результатов симультанной аллергической пробы.
Таким образом, необходимо учитывать всех реагировавши на аллергены животных: а) на туберкулин для млекопитающих; б) на туберкулин для птиц (или КАМ) я в) на оба аллергена при утолщении кожной складки на 3 мм и более. Этот подход позволит в большшетве случаев получить достоверное различие в интенсивности реакций у животных и определенные результаты симультанной пробы по тем стадам, в которых поголовье инфицировано атипичными . микобактериями и больяинство особей реагируют только на ту-
IS
беркулин для птиц (или KAM). Это даст основание по результатам аллергических исследований обосновать предварительное заключение об отсутствии туберкулезной инфекции в стаде (на ферме).
Специфичность аллергических реакций на повторное 'рведение туберкулина у коров из хозяйств с разной эпизоотической ситуацией.
Исследования проведены на 19780 головах коров, из которых на туберкулин реагировало 782 головы. Этим животным повторно внутрикожно вводили туберкулин в дозе 10000 Т.Е., отступив вперед на 7-10 см от края развившейся реакции. Результаты учитывали через 24 и 48 ч.
При аллергическом исследовании 215 коров неблагополучного стада на первое введение туберкулина реагировало 78 голов (36,3+0,75%). Из них повторно на 24 ч реагировало 63 (80,7+1,6%), ка 48 ч т 49 голов (63,4+1,3%). При убое всех 78 животных у 19 (24,4+0,51) обнаружены туберкулезные изменения: в 10 случаях у животных, реагировавших на первое введение через 72 ч, -повторно на 24 и 48 ч (52,6+1,5%), в 5 случаях - на 72 ч и повторно кг 2-i ч [16,3+0,5%) и 8 4 случаях - у асивотных, реагировавших только на 72 ч (21,1+0,4%).
Кроме-того, при убое всего стада (215 голов) в туиах. еде 4 коров, которые не были выявлены двукратной внутрикожной,пробой, обнаружены изменения, свойственные туберкулезу.
При бактериологическом исследовании материала от 9 коров без видиках изменений б 3 случаях выделены М.bovis, в 2 - М.bovis и одновременно атипичные микобактерии и в 3 случаях - только микобактерии Ш И 1У группы, то есть в стаде имела место смешанная микобактериальная инфекция, что в целом повлияло на специфичность и результаты внутрикожной пробы.
Б целом чувствительность метода в группе коров с туберкулезными изменениями составила при учете реакций на 48 ч -52,6+1,4%, а на 24 и 48 ч - 79,0+1,6%.
Из 19565 исследованных коров в благополучных по туберкулезу хозяйствах на 72 ч реагировало 704 животных (3,6+0,07%), из которых повторно через 48 ч - 161 голова (22,8+0,45%). Во всех хозяйствах подтверждено инфицирование скота атипичными микобак-
t : ■
териями, в одном - одновременно выделены Н.bovis.
Таким образом количество повторно реагировав®« коров в неблагополучном стаде оказалось значительно выше, чем в благополучных стадах: соответственно 63,4+1,3% н 22,8+0,45%. То есть в случаях инфицирования скота атипичными микобактерияма число тавотных, реагирующих на повторное введение туберкулина з другой участок кожи через 48 ч, уненьиается в среднем на (80,0+1,6%).
Изучение эффективности дифференциации реакций на туберкулин е помощью повторного введения туберкулина и аллергена яз атипичных микобактерий? *
Основываясь на полученных нами данных, что при повторной введении аллергенов реагирующим через 72 ч животным у них наблюдается более выраженный сг*зцифический ответ на гомологичный аллерген., изучена эффективность этого способа в качестве дифференциально-диагностического теста. Исследования проведены на 38131 корове 14 хозяйств 45 ферм, из которых на 72 ч выявлено 3084 головы (8,1+0,15%). Этим животным повторно вводили туберкулин для мле^Ьпитающих, отступив от места развнвиейся реакции вперед на 7-10 см, а с другой стороны пей - симметрично ППД туберкулин для птиц в той же дозе (или КАК). Реакция учитывали через 48 ч.
На повторное введение аллергенов через 48 ч реаг:>.;-»ваяо 1929 гидов (62,5+1,3%), в тон числе с оценкой "плюс" - 123 (6,3+0,13%), с оценкой "ккнус" - 550 (28,5+0,55%), со знахсн "разно" - 134 (7,0+0,14%) и только на туберкулин для птиц (или KAM) - 1122 животных (58,2+1,2%).
Реакция на основное введение туберкулина были выпуклые, ограниченные, упрупе по консистенция с незначительным повьгае-нием местной температуры, болезненные при пальпации и хорошо заметны на расстоянии, в^то время как на позторное "¿ведение аллергенов они, как правило, были меньае по интенсивности, без выраженной выпуклости а ограниченности, мягче по консистенции, разлитые в самой толще кожи и поэтому слабо заметна визуально.
При диагностическом убое 257 коров> дазших реакции с оценкой "+" я "=", макроскопические изменения, характерные для ту-
беркулеза, не обнаружены, а бактериологическим исследованием материала от них во всех случаях выделены атипичные микобакте-рии П - 1У грушш. последующем наблюдении (в течение 5-7
лет) за стадами (фермами) не отмечено ухудиения ситуации по туберкулезу.
В качестве контроля эффективности способа в 2 неблагополучных по туберкулезу стадах исследовали 253 коровы. Из 143 (56,5+1,1%) реагировавшие через 72 ч животных на повторное введение аллергенов на 4? ч реагировали 117 (81,8+1,6%), в том числе с "шшеом" - 84 (71,8+1,4%), с "минусом" - 15 (12,8+0,254), в одинаковой степени - 6 (5,2+0,1%) и только на туберкулин для птиц (или КАМ) - 12 голов (10,2+0,20%).
Таким образом, если число реагироваввих с оценкой "+" и "=" в благополучных стадах в среднем составило 8,3+1,7%, то в неблагополучных оно достигало 63,0+1,3%, а оценка по критерию знаков по результатам повторного введения аллергенов достоверно подтверждала отсутствие или наличие туберкулезной инфекции в стаде. «
Эффективность способа в среднем составила 91,7+1,8%. Он прост и удобен в работе, технологичен, в 2-3 раза уненырет затраты по установления дифференциального диагноза в сравнении с методом, регламентируемым инструкцией, и на £5-100% сокращает необоснованный убой реагировавших на туберкулин животных по причине сенсибилизации их организма атипичными микобактеркяна.
о Совераенствоваиие аллергодизгностики ууберкулеза свиней.
Аллергическая диагностика туберкулеза свиней в настоящее время осуществляется симультанно с применением ППД туберкулинов для млекопитающих и для птиц. Анализ ее результатов показал, что в большинстве случаев хивотные реагируют только на туберкулин для птиц, лиаь единичные особи - только на туберкулин для кдсаопктакзкх (или ке они вообще отсутствует) и незначительное количество - на оба аллрогена при большей интенсивности реакций на туберкулин для птиц.
Ез 33390 исследованных свиней разных производственных групп в благополучных по туберкулезу хозяйствах было выявлено 3068 реагироьавсих на туберкулины животных (9,2+0,18%). Из них
11 (0,3+0,006%) реагировали только на туберкулез для млекопитающих, 2742 (89,4+1,8%) - только на туберкулин для птиц н 315 животных (10,3+0,2%) реагировали на оба туберкулина, у большинства аз которых реакции были интенсзганее на последний. ,
Динамика проявления аллергических реакций у свиней характеризовалась выпадением реакций у ранее реагир'Овавзвх и появле-. нием их у других ¡тавотных. / "
В 25% исследованных гуртов свиней, особенно в партиях плекмояодняха, животные реагировали только на туберкулин для птиц.
Для уточнения диагноза о? 191 ответного, убптого с диагностической • целыз, мятериал нсслйоваля багтерзологаческя. В 170 случаях (89,0+1,8%) выделилзг атшгачные никобактерга, нз которых 14 (8,2+0,16%) отнесены ко П-й, 130 (76,5+1,5%) - к И-й и 26 культур (15,3+0,30%) -х 1У-й группе по йипуоп.
Яная закономерность продления реакций на туберкулина отмечена у. животных в период'неблагополучия свинокомплекса по ту, берхулезу (созхоз-хомбинат им.бО-яетия Белорусской ССР). Из 2461 головы свиней выявили реагировавших 279 голов (11,4+0,2%), в том числе только на туберкулин для- ияекоплтаагзк - '43 (15,4+0,3%), только на тубархулкя для птнц ~ 91 (32,6+0,7%) я одновременно на оба туберкулина - 145 животных (52,0+1,0?). Пря бактериологическом исследования патматеркала от 12. убатнх тавотных выделили,Н.tuberculosis и H.intracelíulare.
- Таккк образом, применение туберкулина для. кявгмвй-.газос з монотеста обеспечивает достоверно надезшнй контроль влагогозу--чня гуртоз сзякей. в отнсзежп! возбудителя туберкулеза клекот-:-тающих. Наряду с этии' анализ ахшэомгаческой снтуацна похазал, что за последние 13 лет .возбудитель туберкулеза из материала от реагировав»« на туберхуликы свиней Сна ззделен лш» одназда (1992 г.), аз остальных случаях сгхяъя бот. гнфацироааны 'ата-пичиыии зтехобактераяки кз грушш aviua-iátracallulare, которые кэ олазываят существенного зяажкяя на продуктивноеt-i* {J.Hsrsig -et al,, 1982; . c.Zorawski et al., 1S33), но зызаааат зшнунобяо-'логичесхуа перестройку а организма с раэвятязн реакций из туберкулин для птиц'(В.П.Урбан-, .'О.В.НарТма, 1973; Н.Т.Ночзаль, 1982; А.Д.Сол0неко,1984). Следовательно, экономически целесообразно исследовать сзпяей' на туберкулез только туберкулином дла
млекопитающих, что позволит на 85-100% уменьшить выделение реагирующих животных и в 2-3 раза сократить затраты на проведение диагностики.
:ОСОБЕННОСТИ ПАТС^ОГОАНАТОМНЧВСКОЗ ДИАГНОСТИКИ КРУПНОГО РОГАТОГО С£ОТА
Известно, что решаю©« моментом в постановке диагноза в наложении карантина при туберкулезе является обнаружение макроскопических туберкулезных изменений в тусах убиваемых животных. В отдельные годы на практике отмечены случав постановки диагноза на туберкулез при обнаружении у реагировавшего на туберкулин крупного рогатого скота гранулсиатозных поражений только в брыжеечных лимфоузлах. Для выяснения этиологии этих гранулем проведены исследования в хозяйствах Мстиславского, Славгородского, Пинского, Барановичского и Хобринского районов с наибольшей частотой встречаемости такой патологии.
йз 140 реагировавших на туберкулин гивотныхиз 16 хозяйств в 34 случаях (24,3+0,5%) были обнаружены туберкулезоподобные изменения только в брыжеечных лимфатических узлах. При бактериологическом исследовании патнатерналани в одном случае диагноз на туберкулез не был подтвержден. При гистологическом иссследо-вакии* ,мазанные гранулемы представляли заключенную в соединительно-тканную капсулу оксифильную (гнойную) массу, часто с примесью клеточного детрита и пожшорфноядерных клеток (нейтро-'
Филов, эозинофилов, ¿тифоидных и фибробластических элементов),
о
иногда с наличием крупинок извести. В окружающей ткани пролиферация указанных элементов отсутствовала или была слабо выражена.
Реакции на туберкулин, вероятнее всего, были связаны с инфицированием атипичными кикобактериями, которые были выделены у 89,0+1,8% таких животных.
Таким образок, гранулематозные поражения, обнаруживаемые только в лимфоузлах брыхейки, в том числе и при контрольном убое у реагировавнего на туберкулин крупного рогатого скота, не когут быть основанием для окончательного установления диагноза на туберкулез, а в обязательном порядке должны исследоваться бактериологически или гистологически.
»-гистологические исследования проведены зав.лабораторией леГкоза, кандидатом ветеринарных наук Дрогуном А.Г.
БХКТВРНОЛОГИЧВСЮЗ ЕССДЕД0ВАНН2
Оптимизация методика бахтериояогнчесзсого иссяедовангга материала ва туберкулез
Бактериологическое HcoieÄoiBaHHe материала, от реагировавши на туберкулин животных является основным методом при постановке диагноза на туберкулез. Однако его результативность зависит как от методических приемов, так и от качества работы лабораторной службы. С усилением лабораторной диагностики с середины 70-х годов ее эффективность стабильно повышалась: с 511 выделенных культур мккобактерий g 1976 г. '«7,9+0,16%) до 1946 культур в 1988 г. (22.8+0,45%).
Анализ результатов работы ряда ветеринарных лабораторий н семинаров по повышению квалификации врачей-бактегиояогоз показал, что методика бактериологического исследования нуадается в оптимизации.
Исследования, проведенные в 1976-1996 гг. на материале от 981 головы крупного рогатого скота и свиней аэ 153 ферм 96 хозяйств, позволили установить:
- целесообразность махроскопии мазков только из высеваемой на питательные среды или для заражения морских свиноа суспензии материала, а не непосредственно из доставленных для исслодова-ния лимфоузлов и органов, поскольку результативность этого метода очень низка (3,9+0,08% случаев а материала без маг^-юкопк-чесних изменений и в 6,0+0,18 случаев - с таксзшга) и .v-i положительный результат микроскопии носят жшь информативный характер;
- необходимость посева материала отдельно от кагдогс; si~ вотного и по группам лимфатических узлов, что увеличивает обьэм посеагого материала и дает возможность судить (предварительно) о путях инфицирования ¿квотных; :
- предпочтительность использования Si-ного рас^зора щавелевой кислоты при посе^э материала по методу А.П.Алпкаевой,
-как наиболее Чадящего и удобного метода обработки- патологического материала;
- влияние использования типа пробок для герметизации пробирок при посеве материала на туберкулез и пересевах микобакте-рий: очень хороший рост микобактерий с последующи интенсивным
накоплением бакмассы отмечали в пробирках, закрытых корковыми пробками и металлическими затворами, хороший - в закрытых резиновыми пробками с м^взанкш косым желобком и ватно-карлевыми пробками и скудный - иод резиновшш пробкака без желобка;
- возможность ид в цткфкк 6цеи Еыдвлекнах культур по упрощенной схеме с использовагше« баоаробы; «
• - необязательность аявергачесвого исследования морских свинок через 30„дие£ посла заражения суспенззей материала; так как реакции на туберку^н могут, вызывать аткппчныз мякобактерш!;
- целесообразность введения в практику ввтеричаршх лабо-
*
раторнй методики определения корд-фактора (фактора вирулентности) в первичной или субкультуре выдесениых мкхобактвркй на плотных питательных средах, давнего возкоетоеть в 100% случаев дифференцировать К.bovis и И.tuberculosis от К.avium и атипичных гаггобактарий я способного заменить дорогостоящий и длительно выполняемый по времени биологический кетод исследования.
Использование спттшзкроЕанной методика бактериологического исследования материала иа туберкулез позволил'? увеличить бы-деление юнгсбактерий в 5,4 раза ;о срагнатш со среднереспубликанским показателен работы ветеринарных лабораторий и довести его до 74,0+1,5%. Ез 725 выделенных культур кикобактерий 20 (2,7+'! .05%) огкосены и 51.bovis, 5 (0,7+0,01%) - к Н.tuberculosis, (1,9+0,045) - ко П-й, 350 (40,4+1,0%) - к П-Й и 336 культур (46,3+0,9!;) - к 1У-Й группе атипичных микобактерий по, Runyon. Аткпичкие какобакт&рнЕ Ь-й группы выделяли примтаест-вви'ю из материала от санней (89,6+2,С%), а 1У-Й - от крупного рогатого скота (72,0+1,4%).
■ Ebwersffiss кпксбагтерггй из об&вэтоа teES^uoü срвяй s ксрггов
Роль атипичных кпкобакгеркй г разсития ГЗТ к туберкулину у кр!»1ного рогатого скота визавает необходимость изучения источников, факторов передач«, а также кх распространения е объектах виеаией среды в условиях республики.
Пробы отбирали в благополучных по туберкулезу хозяйствах, в которых выявлялись ;?еагирозй£Еие на туборкуяшг ышотныз. Всего ксследоьано 297 проб. Никобахтертш была Еыявзены в 57 сзуча-
ях (19,2+0,4%). В 10,5% они отнесены ко П-й, в 35,0% - jc M s в 54,5% - к 1У-Й группе атипичных никобактерий. Чаще всего культуры были выделены из домбисилоса, проб почвы, взятой из различных мест территории ферм и выгульных двориков, соскобов с корнеплодов, из торфа я опилок, предназначенных для подстилки (33,3...66,7%).
Следовательно, попадание микобактерий в организм животных с последующим развитием реакций на туберкулин одинаково возможно как зимой с кормами и через подстилку, так я летом - дополнительно через почву и воду из естественных н искусственных водоемов.
В 5 хозяйствах провели одновременное исследование проб из внешней среды и материала от животных с реакциями на туберкулин. В результате было выделено 17 хультур микобактерий. Исследование по упрощенной схеме идентификации микобактерий с учетом их способности к росту на сред^ с 5% ЯаС1, а также гидролизу твина-80, показало очень близкое сходство культур, выделенных из внешней среды и непосредственно от животных.
Наряду с этим отмечена прямая зависимость выявления количества реагировавших на туберкулин животных от санитарного состояния среды обитания и степени контаминации ее атипичными ни-кобактериями.
СОВВРШНСГгЕОВАННК МЕТОДОВ О'ЗДОРОЗЛЕЕЯЯ НЗВЛАГОПОЕУЧННа ПО ТУВЕРЮТЛЕЗТ СТАД КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Результаты проведенных исследований показали, что з большинстве неблагополучных стад причиной реакций па туберкулин может быть как возбудитель туберхулеэа, так и атипичные микобактерий. Такую ситуацию отмечали и другие исследователи (В.В.Анд-рущенко, 1984; Н.Н.Мандро,, 1988; Ю.Я.Кассич, 1590; B.J.Duffi-
N
eld, j-.H.Horton, D.Hoffman, 1989), и вполне яогич'йЪ учитывать условия обитания животных в соответствующей среде.
Основным критерием оздорозления стада является отсутствие реагирующих животных при очередных и контрольных исследованиях. Однако в условиях общего сенсибилизирующего фона атипичными ми-кобактериями получение отрицательных результатов аллергических '
исследований растягивается по времени и в ряде . зон республики вряд ли достижимо.
С целью разработки метода оздоровления с учетом фона атипичных минобактерий провели исследования в 15 неблагополучных по туберкулезу хозяйствах при оздоровлении 22 ферм.
После наложения карантина на ферму (хозяйство) через 30-45 дней после предыдущего исследования проводили двукратную туберкулиновую пробу ,на веем поголовье, затем дважды животных исследовали с интервалом через 15-20 дней однократным введением туберкулина. Этим достигали максимальное выявление больных и инфицированных возбудителем туберкулеза зиготных в сжатые сроки. Затем проводили еще два исследования с интервалом 60-75 дней, причем последнее - симульт&нио с ППД-туберкулином для птиц (или KAM). Такая схема исследований давала возможность объективно оценить частоту и специфичность проявления аллергии и возможность признания стада оздоровленным даже при наличия реагировавших на туберкулин животных, если результаты заклвчительного исследования симультанной пробой указывали на инфицирование животных атипичными михобаитерпями.
Карантин в целом с фермы снимали при условии качественного проведения санации животноводческих помещений, выгульных двориков и территории фермы, предусмотренных планом ее оздоровления.
¡контролем оздоровления стада служило соотношение животных с оценкой реакций "+", "¡г", *-м к отсутствие характерных для туберкулеза изменений у особей, реагировавших с "+" и "=". Контролем оздоровления ферм - отсутствие таковых изменений как у реагировавшего на туберкулин скота при плановых исследованиях, так и у сдаваемого на обцих основаниях в течение 6 месяцев после снятия карантина.
Б целом метод ускоренного оздоровления неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота позволяет за 6-ß месяцев оздоровить стадо к ка 85-90% сохранить его поголовье. Естественно, что при этом должны быть выполнены все заключительные организационно-хозяйственные, зоотехнические я общие вете-ринарно-санитарным мероприятия на ферме (в хозяйстве).
вы в*о д и
1. Эпизоотический процесс при туберкулезе крупного рогатого скота в республике характеризуется периодами подъема и спада основных показателей с тенденцией сниаения амплитуды и повышением роли атипичных ми^обактерий в:возникновении реакций на туберкулин, которые составляют 98,0+1,9% выделенные культур, в том числе - 0,7+0,01% - 1-й, 11,8+0,23% - П-й, 5,7+0,11% - 0-й и 79,8+1,6% - 1У-й группы по Runyon.
2. Основным источником атипичных микобактерий в условиях республики является почва, в особенности торфяных и лесных массивов, и вторичным - кйриа, вода и подстилочные материалы, через которые инфицируется до 70% поголовья крупного рогатого скота, из них от 8 до 25% оказываются способными, давать реакции на туберкулин для млекопитающих и парадоксальные реакции В симультанной пробе,, что затру^ляет дифференциальную диагностику туберкулеза.
3. При повторном введении туберкулина реагировавшим на 72ч животным на расстоянии 7-10 см от места развившейся реакции через 48 ч удается выявить более специфичный аллергический ответ, что в сочетании г одновременным введением аллергена из атипичных микобактерий позволяет на 50% повысить специфичность внут-рикохной пробы, в 2-3 раза'уменьшить затраты и время на прижизненную дифференциальную . диагностику туберкулеза и на ¿5-100% сократить убой продуктивных зивотных в благополучных сталях при инфицировании их атипичными, мшсобантершгмя. .
4. Трехкратное введение туберкулина для мдекопитавянх з интервалом 15 дней, причем с повторным его введениек рядом с развившейся реакцией через 2 суток (учат на 48 ч) и КАК с . другой стороны морским свинкам и кроликам, ППД туберкулина для
. млехопитавщих, для птиц n KAM в диагностических дозах телятам через 3 суток (учет через 72 ч), не приводит к десенсибилизации организма животных, зараженных Н.bovis (или гиперкмлуннзирозан-ных антигенам!! Н.bovis) и атипичными михобактериями, а также не "вызывает сенсибилизация организма здоровых животных к туберкулину.
Сокращение интервалов между аллергическими исследованиями до 15 суток не влияет на проявление реакций у животных, зар^-
женных 'М>)»оу1в и атипичными микобактериями, что нохно использовать для ускорения дифференциальной Диагностики и оздоровительных мероприятий в неблагополучных стадах.
5., Гранулематозкые поражения иезентериалькых лимфатических узлов, встречающиеся у реагировавшего на туберкулин крупного рогатого скота в условиях республики, «е связаны с заболеванием животных туберкулезом; их обнаружение не является основанием для постановки диагноза без проведения бактериологического или гистологического исследования патматериала.
6. Оптимизация приемов бактериологического исследования позволяет на 60,2% повысить эффективность и достоверность лабораторной диагностики туберукулеза, а применение упрощенной схемы в комплексе с обнаружением корд-фактора в первичном росте или в субкультуре на диагностических средах - проводить экспресс-идентификации никобакгерий не прибегая к биопробе.
7. В условиях обширного сенсибилизирующего фона атипичных никобактерий оздоровление неблагополучных стад целесообразно вести с применением ускоренной схемы аллергических исследова-кий, обеспечивавшей на первом этапе максимальное удаление больных и инфицированных возбудителем туберкулеза животных путем 3-кратного повторения исследований через 15-20 дней с последув-Едеии контрольными исследованиями через 60-75 дней для оценки полное, удаления группы риска и определения этиологии туберкулиновых реакций с помоиью постановки симультанной пробы на заключительном этапе оздоровления. *
8. В сложившейся эпизоотической ситуации по туберкулезу
О •
свиней в республике целесообразно проводить диагностику болезни в монотесте с туберкулином для млекопитающих в дозе 10000 Т.Е., что позволят в 2-3 раза сократить затраты на проведение комплексных исследований по уточнению диагноза и на 85-100% умень-вить выявление реагкруюгдах животных без уаерба в диагностике туберкулеза. ,
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЯЯ ПРАКТИКИ
1. Способ ускоренной дифференциация туберкулиновых реакций у скота при плановых исследованиях на туберкулез (утвержден НХС и ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 29.1У.96 г., протокол . N 6).
2. Схема ускоренного оздоровления неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота (утверждена НТС и ГУВ Госкомсельхозпрода Белорусской ССР 21.XI.90 г., протокол К 4 и рекомендована к внедрение).
3. Метод ускоренного оздоровления неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота (утвержден НТС и ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 29.1У.96 г., протокол Н б).
4. Исследование свиней на туберкулез одним туберкулином
для млекопитающих (утверждено НТС и ГУВ Минсельхозпрода Респуб-
¿8'
лики Беларусь 29.ХП.94 г., протокол К в и рекомендовано к внедрению ). •
5. Способ и порядок проведения плановых аллергических исследований скота на туберкулез (одобрен НТС и ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 29.ХП.94 г., протокол Я 8).
6. Использование безыгольиого механического инъектрра для внутрикожного введения туберкулннов свиньям (рацпредложение ЕелНИИЗВ Н 196 от 19.У.84 Г.).
6. Концентрирование мнкобактерий в исследуемом на-гегяалэ с помощью фильтра Зейтца (рацпредложение БелНИНЭЗ ■ И 7 от 28.У.84 г. ).
7. Способ герметизации пробирок при бактериологических исследованиях на туберкулез резиновыми пробками (рацпредложение БелНКНЭВ N 209 от 10.Х.84 Г.).
3. Оптимизированная методика бактериологического исследования материала на туберкулез (справка республиканской государственной ветеринарной лаборатории И 507 от 12.05^97 Г.).
9. Книга "Микобакте.^иоз свиней", 1Э83 г. (з соавторстве с ^А.А.Солонеко).
10. Проекты '"Инструкции о мероприятиях по профилактике и -ликвидации туберкулеза животных" я "Наставления по диагностике туберкулеза квотных" (1997 г.).
СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДЙССЕРТАЦИН
г ■
1. Солонеко A.A., Румачик H.H. Роль различных видов микобактерий в заболевании свиней туберкулезом /Минск, 1961.- Депонирован во ВКИИТЭИСХ, рог. К .2134. - 4*С.
2. Экология микобактерий в краевых условиях Белоруссии /Р.В.Тузова, А.А.Солокеко, й.И.Румачик, H.H.Григорьев. -В кн.: Вопросы взаимосвязи туберкулеза человека и животных. Алма-Ата, 1961. - С. 23-26.
3. Характеристика микобактерий, выделенных от свиней, имевших туберкулезоподобные изменения /A.A.Солонеко, И.И.Рума-чик, С.И.Антипова и др. - Санаторное лечение больных туберкулезом. Сб.научн.работ БелНИИ туберкулеза. - Минск, 1982.
С.136-141.
4. Румачик И.И. Параадлергические реакции на туберкулин у крупного рогатого скота //Современные проблемы профилактики и лечения зоонозных заболеваний и лейкозов. Тезисы докл.респ.научн. -производств.конф. 8-9 сентября 1982 г., г.Гродно. - Минск,
1982. - С.67.
5. Солонеко A.A., Румачик И.И. О микобактериозе свгчей //Актуальные проблемы эпизоотологии. Тезисы докл. - Казань,
1983. - С.33.
¿. Румачик H.H., Солонеко A.A. Мероприятия при микобактериозе и туберкулезе свиней //Вет.наука - производству. Мек-вед.сб.БелННИЭВ. - Минск, Ураджа«, 1983. - Вып.21. - С.3-5. '
7. Спонтанная индукция Л-форм микобактерий в эксперименте /С.й.Антипова, Н.Н.Коваленко, A.A.Солонеко, И.И.Румачик - Проблемы туберкулеза. - М., 1984. - Н 10. - С.68-70.
8. Румачик И.И., Солонеко A.A. Особенности аллергических исследований на туберкулез //Ветеринария, М.., 1984. -К 9. -С.30-32.
9. Солонеко A.A., Румачик И.И. Аллергия У свиней при микобактериозе и сроки учета реакций на тубЬркулины //Вет.нау-ка-производству. Неевед.сб.БелНИИЭВ. - Минск, Ураджай, 1984. -Вкл. 22. - С. 6-9. „
10. Солонеко А., Румачик И.!!., Сахончик П.Е. Особенности дифференциальной диагностики михобактеркоза свичей //Бет.наука
- производству. Межвед.сб.ЕелНШЭВ. » Нянек, Ураджай, 1985. -Вып. 23.- С. 13-19.
11. Солонеко A.A., Румачик И.И., Объедков Г.А. Бактериологическое и биологическое исследование при постановке диагноза на туберкулез свиней. //Там же. - С. 9-13.
12. солонеко A.A., Руначнк и.Я. Аллергия.у свиней при ма-кобактериозе. //Проблемы ветеринарной иммунологии. Научные труды ВАСХНИЛ. - М., Агропромиздат, 1985. - С.81-83.
13. Ковалев H.A., . Румачик И.И., Ломано H.H. Туберкулез //Энциклопедия природы Белоруссия. - Минск, 1986. - Т.5. -С.117.
14. Патологоанатомические изменения у телок, с разными типами трансферинов при® экспериментальном >аракении М.bovis /А.П.Лысенко, З.А.Глинникова, И.Н.Румачик и др. - Научные основы развития животноводства в БССР. - Минск, Ураджай, 1986. -Вып. 16. - С.143-146.
15. Румачик И.И., Сахонч1*х П.В. Динамика аллергических реакций на туберкулины у подсвинков, полученных от реагировавких и нереагировавших свиноматок //Вопросы эпнзостолегли, диагностики и мероприятия по ликвидации туберкулеза к бруцеллеза животных. - Новосибирск, 1987. - С.36-44.
16. Румачик И.И. Исследование материала прн установлении диагноза на туберкулез крупного рогатого скота //Современные проблемы профилактики зоонозных инфекций а пути их реиения. Тезисы докл. Ш респ.науч.-практ.конф. 20-21 мая 1987 г., г.Гродно. - 1987. - С.80-81.
17. Румачик И.И., Сахокчик П.Н. Исследование свиней на туберкулез одним туберкулином для илекопитавщих //Вет.нау^а -производству. Межвед.сб.ВелНЛИЭЗ. - Минск, Урадаай, 1987. -Вып. 25. - С. 33-36.
18. Вывучэнне ачышчаных специфичных антыгекау ППД туберху-л1ку //А.П.Лысенко, Г.А.Объедков, Е.И.Румачик и др. - Be«ü АН Веларускай ССР. Серыя с.-г. назук, 1987. - Я 2. - С. 92-94.
19. Румачик Я.И. Методические основы "лабораторной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота //Ветеринария. - М., 1987. - U 12. - С. 62-64? ;
20. Солокеко A.A., Руиачих И.И., Нпкобактериоз свиней. -Минск, Ураджай, 1988. - 136 с.
21. Румачик И.И. Сравнительное испытание различных пробок
при культивировании микобактерий //Ветеринария. -И., 1989. - Н 1. - С. 62-63.
22. Руначик И.И. Способ концентрирования микобактерий в дополнительном материке с помощью фильтра Зейтца//Вет.наука -производству. Межвед.сб.БелНИИЭВ, - Минск, Ураджай, 1989. -Вып. 27. С. 36-39.
А
23. Румачик И.И. Различное сочетание результатов аллергических, бактериологических и патологоанатомических исследований при туберкулезе »//Вет.наука - производству. Межвед.сб.БелНИИЭВ. - Минск, Ураджай, 199С. - Вып. 28. С. 42-47.
24. Руначик И.И. Взаимосвязь выделения микобак-ерий из материала от реагирующего на туберкулин скота и объектов внешней среды //Таи же. -С. 47-51.
25. Румачик И.И. Особенности эпизоотической ситуации в некоторых неблагополучных по туберкулезу хозяйствах Белоруссии //Тезисы докл. Ш Всесоюзной конф. по эпизоотологии. - Новосибирск, 1991. - С.145.
26. Румачик И.И. Эффективность ППД туберкулина для птиц и комплексного аллергена из атипичных микобактерий (KAM) в симультанной аллергической пробе у крупного рогатого скота //Вет.наука - производству. Межвед.сб.БелНИИЭВ. - Минск, Ураджай, 1991. - Вып. 29. С. 27-33.
27. Румачик И.И. Загрязнение древесных опилок атипичными микобьттериями //Ветеринария. - М., 1991. - И 3. - С. 23-24.
28. Румачик И.И. Схема ускоренного оздоровления стад крупного рогатого скота от туберкулеза //Вет.наука - производству., Межвед.сб.ЕелНИИЭЭ. - Минск, Ураджай, 1992. - Вып. 30. С.
29. Румачик И.И. Изучение сенсибилизирующих и протективных свойств атипичных микобактерий // Тан.же. - С. 24-27.
30. Румачик И.К. Моделирование токсикоза у морских свинок я его влияние на течение туберкулезного процесса //Там же.
С.27-32.
31. Румачик H.H. Экономическая эффективность исследования свиней не туберкулез однкк туберкулином для млекопитающих // Бесцх ААН Беларуси. - Минск, 19?3. - К 3. - С. 110-113.
32. Румачик И.И. Методы оздоровления стад крупного рогато-
9
го скота от туберкулеза //Вет.наука - производству. Меж-вед. сб. БелНИИЭВ. - Нинск, Ураджай, 1993. - Вып. 31. С. 70-78.
1
33. Румачнк H.H. Проявление аллергических реакций у скота в зависимости от кратности введения туберкулина я сроков учета реакций //Весц! ААН Беларур!. - Кянсв, 1994. - н 1. - С. 107-109.
34. Румачик й.И. Способ ускоренной дифференциации туберкулиновых реакций //Материала респ.научн.-практ.конф. по животноводству и вет.недицяна (21-22 сентября 1994 г.). - Витебск, 1994. - С.76.
35. Динамика выделения инкобактерий от скота в птицы в Республике Беларусь 1976-1993 годы /И.И.Румачик, Н.М.Король, В.Д.Бабаа, З.А.Глинникова." - Весц1 ААН Беларус!. - Минск, 1995.
- Н 2. - С. 77-78. д,
36. Румачик И.И. Ускоренная дифференциация туберкулиновых реакций у скота //Основные научные исследования по проблеме туберкулеза и бруцеллеза с.-х. животных, профилактика и организация мероприятий по ликвидации болезней в регионе Сибири. Тезисы докл.научн.-практ.конф.: РАСХ1?, ИЭВ и ДВ. - Новосибирск," 1995.
- С. 46-47.
37. Румачик И.И. Проведение плановых исследований крупного рогатого скота на туберкулез с одновременной дифференциацией туберкулиновых реакций //Вэт.наука - производству. Сб.научных трудов БелНИИЭВ. - Минск, 1996. - Вып. 32. С. 86-97,
38. Румачик И.И., Кузнецов H.A. Выявление, вндоспецифичнос-ти реакций у лабораторных животных, зараженных M.bovis-BCG а атипичными никобактерпями, на повторное введение аллергенов // Там же. - С*73-86.
39. Патоморфологичесхие критерии дифференциальной дя- мостики туберкулеза крупного рогатого скота /А.Г.Дрогун, Г.А.Объедков, И.Н.Румачик и др. - Так же. - С. 102-108.
40. румачик Н.й. Доукомплектование оздоровленного о- туберкулеза стада после снятия карантина //Наука - производству. Тезисы докл. научн.-прахт. конф., посвященной 45-летиа Гродненского ГСХН, 28-29 коня 1995 г. - Гродно., 1996. - С. 200-201.
. 34
P S 3 В И Б
Руначык I.I. Удасканальванне дыягностык! i нбрапрыеиствау па барацьбе э туберкулёза« буйной рагатай'жывелы i св1ней.
Квючавыя сдовы: ^туберкулез, м1кабактэрыя,1нфекиьш, алер-ген, рэакцыя, спецыф!чнасць, с!ыудьтанная проба, дыферэнцыялъ-ная дыягностыка, спосаб, культура, даследванне, бхяпроба, дыяг-ваз, карантын, аздарауяенне.
Аб'ектам даследвання 31яуляюцца буйная рагатая яыведа i csxKHi, з лабарКторных жывел!н - марск1я CBiHKi I трусы. Мэта даследвання - удасканальванне дыферэнцыяльнай дыягностыкх туберкулезу хывел i матадау аздараулення небяспечных «."а туберкулезу статкау буйной рагатай зшволн.
Пры працы выкарастаны алерг1чны, паталагаанатамхчны, мхк-раскапхчны, культуральны i бхклагхчны метады даследвання. Экспериментальные даследвашй выкангни на 52 галовах марскхх свх-нак, 6 трусах i б цялятах, а таксама на 5773 галовах рэагуючай на туберкулин буйной рагатай кьшелы ва умовах вытворчасцх. На-вукова-практычкык даследваши выканани на 79948 галовах буйной рагатай вывели i 13299 св1княх. Праведзена 2085 паталагааната-н!чных i 981 бактэрыялйпчнао даследванне, а таксама даследвана 297 проб натэрыялу з аб'ектау зневшяга ассяроддзя i кармоу. Выдзелена адпаведна 725"и 57 культур ихкабахтэрый. -
Навуковая нав1зна атрыманых рэзультатау вызначаевда у тым, ето у;\ -каыкю установлена высокая спецыф1чнасць праяулення рэак-цый ка пауторнао увядэение туберкулхву у некранутув кожу шх побач з узо хснувчай праз 72 г рэакцыяй на пго перкае увядзент.; у буйной рагатай кывелы, заражанай уэбуджалыикам туберкулезу, sbto дазволхла павял1чыць дакладнасць i паскорыць дыферэнцы-яльную дыягностыку туберкулезу.
Ва падставе вынхкау даследванняу распрацаваны, навукова абгрунтаваны, ззцвердганы i прапанаваны да прынянеиня: спосабы алерг1чнай дыягностык! туберкулезу i паскоранай дыфврэкцыяцьи туберкул1навых рэакцый у буйной рагатай зашелы;. даследванне св1ней на туберкулез адным туберкулхисм для, илекакорнячых; спосаб^ герметызацых прабхрак пры культываваних »икабактэрый; аптэ-н1эаваная методика бактэрыялаг1чнага даследвання матэрыялу на туберкулез ва укогах практичных ветзрынарных лабараторый; метад паскоранага аздараулення небяспечных па туберкулезу статкау буйной рагатай яывеяы.
35 .
Р В 3 ЮН в
Румачих Иван Иванович. Совершенствование Диагностики я мер борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота и свиней.
Ключевыеслова: туберкулез, микобактерия, инфекция, аллерген, реакция, специфичность, симультанная проба, дифференциальная диагностика, способ, культура, исследование, биопроба,, диагноз, карантин, оздоровление.
Объектом исследования являются крупный рогатый скот и свиньи, из лабораторных животных - морские свинки и кролики. Цель исследований - совершенствование дифференциальной диагностики туберкулеза животных и методов оздоровления неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота.
При работе использованы аллергический, патологоанатомичес-кий, микроскопический, культуральный и биологический методы исследований. Экспериментальные исследования выполнены на 52 морских свинках, б кроликах и 6 телятах, а также на 5773 головах реагировавшего на туберкулин крупного рогатого схота з условиях производства. Научно-производственные испытания проведены на 79948 головах хрупкого рогатого скота и 132Э9 .свиньях. Проведено 2085 патологоанатомическнх и 981 бактериологическое исследование, а такхе исследовано 297 проб материала из объектов внешней среды я кормов. Еыделено соответственно 725 и 57 хультур михобактеряй.
Научная новизна полученных результатов заключается в том, что вперзые установлена высокая специфичность ярс^-влен;« реакций на повторное введение туберкулина а другой участок :гока паи рядом с развившейся через 72' ч реакцией на его. первое вгм.пэтна у крупного рогатого скота, зараженного возбудителем туберкулеза, что позволило повысить точность и ускорить дифференциальна диагностику туберкулеза.
На основании результатов исследований разработаны,, утзэра-дены и рекомендованы х внедрения: способы аллергической диагностики туберкулеза я ускоренной дифференциации туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота; исследование сзиией на туберкулез одним туберкулином для илехйт.тгющих; сяе-Зэб герметизации пробирок при культ1?зирован!Ш микобахтсрпй; оптикизирсвая--ная методика бактериологического исследования материала на туберкулез з условиях практических ветеринарных лабораторий; метод ускоренного оздоровления неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота.
36 ■■ SUMMARY Rumachlk Ivan Ivanovich The Perfection of Diagnostics and Control Measures Against Cattle and Swine Tuberculosis Key words: tuber^losis, mycobacterium, infection, allergen, reaction, specificity, simultaneous test, differential diagnostics, granulomatous changes, method, culture, biological test, diagnosis, quarantine, sanitation.
The research subjects were cattle and swine; guinea pigs and rabbits we*e used, as laboratory anitaals. The research object was to improve differential diagnoctics of tuberculosis in animals and methods of sanitation of cattle herds unwell by tuberculosis.
During the work allergic, pathologoanatomical, Evicrosco-pic, cultural and biological methods of research were used. Experimental studies were curried out on 76 guinea pigs, 16 rabbits, 6 calves and also on 5 773 cattle that reacted on tuberculin under production conditions. Scientific and production testings were carried out on 79 948 cattle and 13 299 swins. 2 085 pathologoanatomical and 981 bacteriological examinations were carried out and there were investigated 297 samples of material of objects of environment and feeds; 725 and 57 cultures of mycobacteria were isolated, respectively.
The scientific novelty of results received is that for the first "vine it was determined a high specificity of manifestation of the reaction on the reinoculation of tuberculin into the intact neck skin near the site where a reaction has developed, after the first inoculation in cattle infected by tuberculosis agejt, what permited to hasten and increase precision of differential diagnostics of tuberculosis.
On the grounds of the research results there were elaborated, approved and recommended for introduction in practice: methods of allergic diagnostics of tuberculosis and accelerated differentiation of tuberculin -reactions in cattle; an examination of swine on tuberculosis using tuberculin for the mammali-
i
ans: a method of tube hermetik seal for cultivation of mycobacteria; optimized methods of ths bacteriological investigation of materials on tuberculosis under conditions of practical veterinary laboratories; a method of the accelerated sanitation of cattle herds unwell by tuberculosis.