Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Разработка и совершенствование технологии аэрозольной иммунизации свиней и птиц

I »•• *

С-

г 22

^ На правах рукописи

э —

я

КУШНИР Анатолий Тимофеевич

РАЗРАБОТКА И СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ АЭРОЗОЛЬНОЙ ИММУНИЗАЦИИ СВИНЕЙ И ПТИЦ

16.00.03. — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология.

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

П0КР0, -

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии РАСХН.

НАУЧНЫЙ КОНСУЛЬТАНТ доктор ветеринарных наук, профессор, академик РАСХН

БАКУЛОВ И. А.

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ: доктор биологических наук ДЫМИН М. А. (ВНИИВВиМ). доктор ветеринарных наук УЛАСОВ В. И. (ВГНК.И). доктор ветеринарных наук, профессор ЗАКОМЫРДИН A.A. (ВНИИВСГЭ).

Ведущее учреждение — ВНИИ защиты животных.

Защита диссертации состоится 19 мая 1995 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 120.61.01. по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук при Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной вирусологии и микробиологии РАСХН (601120, г. Покров, Владимирской области, ВНИИВВиМ).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института. Автореферат разослан « » апреля 1995 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат ветеринарных наук

ФЕДОРОВ Г. П.

• 4- — -

Л

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

1.1. Актуальность проблемы. Роль инфекционных болезней и их профилактика значительно возросли в условиях современных специализированных птицеводческих, свиноводческих и других хозяйств, расчитанных на равномерное круглогодичное получение животноводческой продукции. Традиционно используемые индивидуальные методы прививок (внутримышечно, подкожно, интрэиазалыш ит. д.) но впи- . сываюгся в технологию промышленного дивотяоводствз та-за ппзкрй производительности, высокой трудоемкости и аначительпих стрзссо-вых воздействий на животных. Эти отрицательные стсрогш мдатаду- ■ альных методов прививок особенно остро проявляются яри ослряяеиия эпизоотической ситуации, когда в слитые сроки необходимо привить многотысячное «оголовье свиней и птиц. Наиболее отвечаядами Япй-зоотологическим принципам профилактики и требованиям промылленной технологии животноводства являются массовые метода прививок: с питьевой водой, с кордам, аэрозольно, с испо^зовайиеи.Сззцголь-ных ингекторов. Успехи орального применения вакцва яротяв НВ тзтиц в условиях производства объясняются высокой биологической актив-. костью и сравнительно хорошей устойчивостью вакцинного вируса в воде. В отношен™ других инфекционных болезней эти результаты разноречивы, так как для орального метода необходима разработка специальных фор» вакцин. Подтверждением этого вывода является успешное лришнеше специально разработанных вакцин против полиомиелита, бешенства и др. болезней.

Мзтод аэрозольной иммунизации по сравнению с оральным менее трудоемок, однако его шрокое внедрение в ветеринарную практику тормозится тем, что не решен ряд важных технологических вопросов (недостаточно обоснованы основные технологические параметры процесса аэрозольной иммунизации, не унифицированы средства создания и контроля дозы аэрозолей, их обезвреживание

после проведения аэрозольной иммунизации, недостаточно интенсивно ведутся работы по созданию вакцин для аэрозольного применения). Разработанные ранее методические рекомендации по аэрозольной иммунизации птиц против НБ и свиней против КЧС в основном освещают технические приемы аэрозольной иммунизации, однако не даиг представления о ее экономической эффективности, не содержат рекомендаций по технологии применения пылевидной вакцины против НБ птиц, не разработана научно-обоснованная схема аэрозольной иммунизации свиней против КЧС, рожи и БА.

Перечисленные выше обстоятельства явились основанием для определения темы диссертационной работы.

I.2. Дель работы. Основной целью данной работы является разработка и совершенствование технологии аэрозольной иммунизации свиней » птиц. ;

1-3. Основные задачи исследования. Для достижения постав-леююй цели решалиследующие задачи:

-теоретически и экспериментально обосновать основные параметра технологического процесса аэрозольной иммунизации;

-усовервеяствовать технологию аэрозольной иммунизации свиней и .птиц и дать ей экономическую оценку;

-разработать пшевидную форму вакцины против НБ птиц и технологию ее аэрозольного применения;

. -разработать и усовершенствовать аппаратуру для создания и изучения аэрозолей вакцин в закрытых пома пениях;

-разработать схему аэрозольной иммунизации свиней против КЧС, рожи и БД в хозяйствах с различной эпизоотической обстановкой. .

1. 4. Научная новизна В результате выполненных исследований 'теоретически и экспериментально обоснованы основные параметры тех-

. о ,

о

ологического процесса аэрозольной иммунизации свиней и птиц, азработана пылевидная вакцина против Ш птиц и технология ее аз-озольного применения, научно и экспериментально обоснована схема аздэлыгой последовательной аэрозольной иммунизации свиней против ЧС. рож и БА, разработана новая и усовершенствована имеющаяся ппаратура для создания и изучения аэрозолей вакцин.

Новыми в диссертации являются следующие разработки: - вакцина против НВ птиц и способ ее получения. Авторское видетельство N 1785098 от 04.09.90 г.

-устройство для получения высокодисперсных аэрозолей. Аварское свидетельство N 1678378 от 30.10. 89г.;

-многодисковый генератор аэрозолей МАГ-З. Авторское свяде-эльство N 889130 от 14.08. 81 Г.;

-прибор контроля аэрозольной вакцинации. Авторское свиде-гльство N 721715 от 21.11,79г.;

-устройство для измерения дозы вакцины. Авторское видетельство N 1303898 от 15.12.8бг.;

-применение аэрозольяой иммунизации в эпизоотическом очаге з целью "обрыва эпизоотии".

1.5. Теоретическое значение работы.

Теоретически обоснованы:

- основные параметры технологического процесса иммунизации эрозоляыи вакцин птиц и свиней соответственно против ныокасл-гой болезни, классической чумы, болеани Ауески и рожи с учетом эробиологических характеристик и условий применения аэрозолей. Зеспечивакиих введение животным и птицам необходимых доз апти-гка для формирования напряженного иммунитета;

- ветеринарно-технические требования к средствам диспергиро-

ваяия и методам контроля концентрации аэрозолей при иммунизации животных и птиц;

- концепция применения аэрозолей вакпин на "обрыв эпизоотии" на примере ньюкаслской болезни птиц.

Теоретические положения подтверждены многочисленными экспериментальными данными в лабораторных и производственных: уол-ззиях, результатами производстве иных комиссионных, испытаний и расчетами экономической эффективности.

1.6. Практическая ценность работы. По результатам исследований разработаны, и утверждены:

-инструкция по изготовлению и контролю пылевидной вакцины против НБ птиц из штамма " Ла Сота";

-технические условия на пылевидную вакцину против НВ птиц из штамма " Ла-Сота":

-временное наставление по применению пылевидной вакцины против НБ птиц из вгхамма " Ла-Сота";

-методические указания по оценке инактивации вакцинного материала в процессе его перевода в аэрозольное состояние;

-методические указания" Выбор оптимального количества генераторов для аэрозольной иммунизации птиц в животноводческих помещениях".

Кроме этого, изготовлена и реализована опытно-промышленная партия генераторов аэрозолей МАГ-3 в количестве 500 штук; изготовлены опытные образцы прибора контроля концентрации аэрозоля, которые использутся в лабораторных экспериментах; модифицированный генератор аэрозолей САГ-1М с 1988 года успешно применяется для распыления пылевидной вакцины на птицефабрике "Шспино" Донецкой области и прошел успешные испытания в условиях птицейаб-

рик Ставропольского края (Золотушка, Еестаугорец) и йэсковской области (Тоишинская, Ястро-Сенежская); освоено производство пылевидной вакцины против НБ ПТИЦ на базе ВНИИБВиМ; схемы раздельной последовательной иммунизации свиней против К.Ч2, рожи в ЕЛ успешно применяется на свиноводческих комплексах "Пармс-кий", "Поволжский" и в Белоруссии; технология аэрозольной иммунизации широко используется на свиноводческих и птицеводческих предприятиях при организации и проведении прививок аэрозолями ваидшг.

1.7. Осноаныа положения работы, выдвигаемые для защити. 1.7.1 Теоретическое и экспериментальное обоснование основных параметров технологического процесса аэрозольной иммунизации свиной и птиц. '

1.7.2. Концепция прииенения аэрозолей вакцин в очагах болезни с целья.рбрива зпизоотий.

1.7.3. Пылевидная ($орма закцины против ЯБ птиц для аэрозольного применения.

1. 7. 4. Разработка рациональных схем раздельной последовательной аэрозольной иммунизации евшей против КЧС, рожи и болезни Ауески.

1.7.5. Новое в аппаратурном оформлении аэрозольной иммуниаа-ции ответных.

1. 8. Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научных конференциях ЕНИИВЕиИ (1973,1976,1978,1381,1965,1937,1983, 1990,1992).заседаниях Ученых советов ЕНШШВиН и ЕГККИ ветпрепара-тов, ка семинарах ветспециалистов в павильонах "Еетеринария" и "Птццеводство" на ВДНХ СССР, на 3 и 4 Всесоюзных конференциях по

аэрозолям, на 4 и 5 Всесоюзных ветеринарных вирусологических конференциях, а также на заседаниях ветеринарной секции НТС ГУЕ.

1.9. Пубдшсации результатов исследований. Основные материалы диссертации опубликованы в 48 научных статьях и сообщениях, из которых 25 опубликованы в центральных изданиях, в 5-ти изобретениях, в Б-ти утвержденных Департаментом ветеринарии нормативно-технических документах и в 12-и отчетах по научно-исследовательским темам ВНИИВВиМ.

; .' '1.10. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 334 страницах г машинописного текста, включает аннотации (1стр), введение { 7 стр), обзор литературы ( 43 стр), материалы и методы { 35 стр), результаты исследований (142 стр), обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения ( 26 стр). Список использованной литературы включает 436 источников отечественных и 167 источников зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 51 таблицей и 30 рисунками. В приложении (48 стр) представлены документы, подтверждаюцкэ результаты от-лельных этапов работы, их научную и практическую ценность.

2. СОБСТВЕННЫЕ ТХСЛЕДОВАГС'Л.

2.1. Материалы и методы.

2.1.1. Вакцины:

- сухая вирусвакцина против НБ птиц из штамма "Да-Сота" о биологической активностью 8.5-9.0 lg ЭДН 50/сй^

- экспериментальная пылевидная вакцина против НБ из штамма "Ла-Сота" с биологической активностью 7,0-9.0 lg ЭИД 50/см*

- сухая вирусвакцина ГИКИ против болезни Ауески с биологической активностью 5,76-6,5 lg ТЦД 50/сы^;

-авирулентная сухая лапинизированная вирусвакцина (АСВ) из штамма ft против К.ЧС с биологической активностью 2.5-3.0 lg 1ЭД 50/см3;

-сухая культуральная вирусвакцина против КЧЗ из штамыа К» адаптированного к культуре ткани тестикуд ягнят (ЛК-ВНИИВВиШ с биологической активностью 4.5-5,5 lg ЙЦД 50/сы^;

- вакцина против роли свиней из пгамма ВР-2 с содерга-нием живых бактерий от 200 тыс. до 180 млн. ifr/CM*;

- сухая вирусвакцина против НБ птиц из пгамыа В1 с биологической активностью 8.0-9.0 lg ЭИД 50/с»И:

2.1.2. Эпизоотические штаммы:

- штамм Т-53 вируса НБ с биологической активностью 8,59,5 lg ЭЛЛ бО/см3;

- смесь X возбудителя рожи свиней(штаммы Армавирский и Шнихино) с концентрацией бактерий 10,3-10,7 lg иг/а*3;

- штамм П (производственный) вируса болезни Ауескп с биологической активностью 7.0-7.5 lg ТШГ 50/еы^;

- штааы Ей-Мын вируса КЧС с биологической активностью 6.0-7.0 lg ЛД 50/cmj:

2.1. а Суспендирующие среды:

- дистиллированная вода с 1,5% и 10% х. ч. глицерина, с : инозита, с 5% сухого обезжиренного молока и 12 глицерина;

- физиологический раствор рн 7,2-7,4 с II и 10% г лидер-, на, с 5% сухого обезжиренного молока, с 3% цистеина, с 3% иноз! та;

- аллантоисиая жидкость куриных эмбрионов си глицерина

- мясо-пептонный бульон с 1% и 10% х. ч. глицерина;

- обезжиренное коровье молоко с рН не них® 6,6.

2.1.4. Сорбирующие среды:

- щсо-пептонный бульон с пеногасителем (твин 80);

- физиологический раствор с 10% ШБ и 0,1% тиомерсала

2.1.5. 1Ьполн5ггели (носители) пылевидной вакдини:

- микротальк, аскангель, окись алюминия, тальк медицина; бентонит: гидрофобии и гидрофильный азросилы (510^).

2.1.6. Реактивы, растворы и др. материалы.

- фауореедеин натрия, индикатор Ташро, фиксаналы, 1% раствор фенолфталеина, 0,5% раствор крахмала, антибиотики (пенициллин, стрептомицин,.полимиксин), сыворотки крови свиней и кур, 1-2%-ная суспензия эритроцитов кур, натрий лимонно-кислый.

2.1.7. Животные.

- куриные ЗМбрШНЫ, куры мясных и яичных пород, свиньи е возрасте 2 месяца и старше.

2.1.8. Аппаратура и оборудование.

- генератора аэрозолей: ПЭГА-1, электроэоль-1, АИ-1, САГ-1, САГ-Ш, ИРПБ-1, Л-19. ДАГ-2. МАГ-З;

- пробоотборники: КП-4. КПК-1, имлакгор Мая, ИВ-20. жидкостной импактор;

- камеры аэрозольные: БОС-10, боксы из органического стекла собственной конструкции кубической формы объемом 300, 500,

1000 л, оборудованные по типу БОС-10; приспособленные лабораторные помеозния объемом до 30000 л. производственные помещения птицеводческих и свиноводческих хозяйств объемом от 1,4 до 10 тыс. м3:

- приборы и аппараты: воздуходувка от аппарата для профилактики гриппа АИ-1; аспиратор Мигукова;- вакуум-насос типа ЕН-461 компрессоры: С0-7А, БУ-3/3, ПКС-3,5; флуориметр, шаровая мельница; установка для сушки методом контактного обезволзгеания; установка для лиофкльной суша:.

2.1.9. Определение биологической активности (титра) вакцин и эпизоотических таймов.

Биологическую активность вакцины против НБ к эпизоотического штамма Т-53 определяли титрованием на куриных эмбрионах с использованием общепринятого метода, описанного в методических указаниях по применению аэрозолей вакцин для иммунизации птиц против НБ. Титрование пылевидных вариантов вакцины имело отличия на стадии приготовления исходной суспензии. Вначале отвешиваш навеску массой 500 ыг, добавляли 49,5 см* стерильного физиологического раствора с антибиотиками, щуттелкрогали ю минут при комнатной температуре, помещали на 10 минут в холодильник при 2-б£С. После отстаивания надосадочяу» жидкость декантировали с осадка и использовали для титрования.

йивую вакцину против рогя свиней из вташи ВР-2 и эпизоотические вгтаммы титровали по общепринятой м-зтодике на МПА в чашках Петри.

Ьакцину против болезни Ауе'ски и контрольный штамм П титровали по общепринятой методике на культуре клеток куриных эмбрионов по цитопатическому эффекту.

Биологическую активность вирусвакция против КЧС и эпизоотическо-

го вггамма определяли титрованием на свиньях (определяли ЙД 50 и ЛД 50 соответственно).

Титры вакцин и эпизоотических штаммов расчитывали по методу Кербера в модификации Ашмарина И. П.

2.1.10. Определение безвредности, реактогенности и имму-ногенности вакцин.

Для определения безвредности пылевидную вакцину против НБ вводили цыплятам Ю-ЗОти-лневного возраста внутримышечно и интра-назально в дозах, превышающих оптимальные в 10 раз (по 0,2 см из разведения 1:10).

Реактогенность проверяли на группах цыплят 10-30ти -дневного возраста по 20 голов в кахдой. С этой целью цыплят прививали аэ-розольно различными дозами вакцины, превышающими оптимальные в 5 раз.

Иммунологическую э^фэктивкость вакцин оценивали по величине минимальной иммунизирующей дозы, сроку наступления и продол,«! -тельности иммунитета, уровню накопления вируснейтраиизумщис антител и усто: :ивости к контрольному заражению.

Величина оптимальной заражающей дозы вирулентного штамма Т-53 вируса НБ составила 1000 ДД 50 внутримышечно; вирулентных бактерий рож - 1-2 млрд. мт накожно; возбудителя КУС - 0,1-1,0 млн. ЛД 50; возбудителя болезни Ауески - 100-500 млн. ТНД 50 комбинированно (назально и подкожно).

Для определения срока наступления и продолжительности иммунитета группу свиней или кур прививали аэрозольным или другим методом оптимальной иммунизирующей дозой. Через различные сроки после вакцинации (2, 4, 6, S, 10, 12, 14, 30, 60, 90. 120, leo, 240 и более дней) у животных брали кровь для серологических исследований и не менее чем по 2-4 головы на каждый изучаемый срок

подвергали контрольному заражению. Начало формирования устойчивости и ее продолжительность оценивали после однократной прививки.

2.1.11. Аэрозольная иммунизация з условиях лаборатории. Аэрозольную иммунизацию птиц проводили в статических камерах

объемом 300 -1050 л. вакцины распыляли генераторами аэрозолей САГ-1, ЛЗГА-1 или электрозоль-1 из расчета 1 см'/бЛэбтеыа какэ-. ры. Экспозиция иммунизации составляла 20 минут. Для определения концентрации пробы аэрозоля отбирали пробоотборников КПК-1 в течение экспозиции с объемной скоростьп б д/кин.

Свиней иммунизировали аэрозолями вакцин в приспособленных под камеру помещениях вивария объемом от 10 до 100 ТЫС. д. Вакцины распыляли генераторами аэрозолей САГ-1 из расчета 1 сы^/и3 объема, пробоотборники КПК-1 размещали на высота 30-50 см от уровня пола. Пробоотборники сьаряжали фильтрами из ткани Пгтряно-за (ФПЛ-15-2). Пробы отбирали в течение 40-минутной экспозиции в периоды: 0-5. 15-20 и 35-40 минут от начала распыления.

Индивидуальную аэрозольную вакцинацию свиней осуйзствляли с использованием специально разработанного устройства. Экспозиция вакцинации составляла 5-10 минут, отбор проб из предкамеры с объемной скоростью 5 л/хам осуществляли в течение времени экспозиции пробоотборником КП-4, снаряженным 10 см3 дистиллированной воды или физиологического раствора. . -

Внутримышечную вакцинацию свиней против Я®, рожа и болезни Ауески проводили в соответствии с действугацши наставлениями по их применению.

2.1.12. Аэрозольная иммунизация в производственных условиях. В производственных условиях вакцины распыляли генераторами

аэрозолей САГ-1 в помещениях объемом от 1.4 до 10 млн. л, где одновременно разметали от 600 до 2000 голов свиней или от 20 до 70

тыс. голов птиц. В методическом плане руководствовались методическими рекомендациями по аэрозольной иммунизации птиц и свиней.

2.1.13. Определение физической концентрации аэрозолей вакцин.

®1зическую концентрацию аэрозолей вакцин определили общепринятым флуориметрическим методом.

Физическую устойчивость аэрозолей вакцин определяли по изменению весовой концентрации во времени.

2.1.14 Определение биологической концентрации аэрозолей вакцин.

Биологическую концентрацию аэрозолей вакцин, выраженную в единицах биологической активности, определяли по формуле: С бкол. •= А исх. х С физ., где:

С биол. - биологическая концентрация (ЗИЛ 50/л и т. д.);

С физ- - физическая концентрация аэрозоля (мг/л):

А есх. - биологическая активность распыляемого материала (ЗЩ1 50/см"5 и т. д.).

Для получения истинной биологической концентрации пробы материала из аэрозоля титруют на соответствую^ питательных средах, клеточных культурах или животных по общепринятым методикам.

Биологическую устойчивость вакцин в аэрозоле изучали в статических камерах объемом 1-27 м^ при различных показателях температуры (10-30 еС) и относительной влажности воздуха (30 - 90 X).

г. 1.15. Определение фракционко-дисперсного состава аэрозоле! яидких и пылевидных вакцин.

Количество частиц разного размера в аэрозоле определяли методом их подсчета под микроскопом.

Для определения соотношения фракций в аэрозоле весовым методом распыляемый материал метили уранином и пробы аэрозоля отбирали импактором Ызя на предметные стекла, покрытые силиконом.

Задержанный материал с каздого стекла или фильтра элюировали в

х

10 см дистиллированной воды и определяли концентрацию вещества флуорчметрическим методом. Приняв суммарное значение задержанного импактором и фильтром вещества за 100% и зная количество задержанного вещества каждой ступенью импактора и фильтром, расчитывали весовое содержание той или иной фракции.

Ф Д С пылевидных вакцин определяли микроскопией предметных стекол, на которые наносили суспензию пылевидного препарата в растворе коллодия в эфире.

2.1.16. Расчет доз вакцин при аэрозольной иммунизации.

Расчетную дозу валютного препарата при аэрозольном применении определяли как описано в |( Методических рекомендациях по аэрозольной иммунизации птиц против НБ и свиней против КЧС.'

2.1.17. создание экспериментального эпизоотического очага НБ птиц и методика испытания защитной эффективности аэрозолей жидкой и пылевидной вакцин.

С этой целью формировали три изолированных группы цыплят по 200-220 голов в каждой. В опнгах использовали 30-40-дневных цыплят, не привитых против НБ и полугенных от иммунных к этой болезни кур. Источником возбудителя в кахдой группе были внутримышечно зараженные вирусом Ж (пл-амм Т-53) в дозе 100 тыс. ЭДД 50 окольцванные цыплята в количестве по 20 голов (10% от числа в .группе). Зараженных цыплят подсаживали к интактным. Павших цыплят удаляли из клеток ежедневно. Через 3-4 суток после начала гибели зараженных цыплят появлялись характерные клинические признаки НБ среди интактных. Появление этих признаков свидетельствовало о перезаражении бывших в контакте цыплят и появлении эпизоотического очага, что было показанием (сигналом) для проведения аэрозольной иммунизации капельным или пылевидным аэрозолем вакцины Ла-Сота

Эффективность вакцины в Форш пылевидного или капельного аэрозоля определяли по уровню сохранности цыплят в опытных и контрольных эпизоотических очагах. "

2.1.18. Разработка сетевой модели технологического процесса иммунизации. Методика заключается в выборе оптимального варианта ссупрст-вления процесса иммунизации на основании подробнейшего его описания по отдельным операциям, переходам и действиям, располагаемым друг за другом в строгой зависимости от предыдущей работы или наравне с ней для осуществления последующей зависимой операции.

[фактически каждый оптимальный вариант сетевой модели идет по пути наибольших затрат времени, в данном случае вариант подготовки вакцины наиболее продолжительный, а другие варианты выполняются параллельно. Если нет возможности параллельного выполнения работ, они выполааюхся последовательно.

2.1.19. Обезвреживание аэрозолей вакцин.

После :кончания экспозиции в камеру аналогичным генератором аэрозолей распыляли в качестве химических инактиваторов перекись водорода, молочную и кадуксусную кислоты из расчета 1-3 см'^/м \ Экспозиция равнялась таковой при вакцинации. Эффективность обезвреживания аэрозолей перед выбросом в окружающую среду оценивали по титрованию проб аэрозолей до и после распыления дезин-фектантов.

2/1.20. Определение температурка-владностного и газового режимов в животноводческих помещениях.

Изменение температурного режима оп, еделяли универсальными психрометрами ПБУ -1. По разности температур перед началом вакцинации и после окончания экспозиции определяли уровень изменения температурного режима в помещении.

Изменение относительной влажности определяли бытовым универсальным психрометром ПБУ-1 и аспирационным психрометром. Уровен^ относительной влажности воздуха в помещениях определяли по разнице показаний сухого и влажного термометров, используя, для этой цели специальную психрометрическую таблицу.

Определение содержания аммиака (МН$) в воздухе помеданий проводили в соответствии с общепринятой методикой за исключением способа отбора проб. Пробы отбирали пробоотборником Ю1-4 с объемной скоростью 4 л/мин в течение 15 сек. ГО-4, соединенные попарно последовательно, заполняли 0,01 N раствором серйой кислоты в количестве по ю см^ в каждый и размешали по центру помещения иа высоте 0,8-1,0 м от уровня пола. После просаливания воздуха содержимое КП-4 переносили в колбочку, добавляли индикатор и от-титровывали 0.01 N раствором едкого натрия.

Определение содержания углекислого rasa (СО^) в воадутэ животноводческих помещений проводили по методу Субботина-Шторного, а пробы отбирали так, как описано при определении содержания аммиака.

Содержание сероводорода (Нг5) в воздухе животноводческих помещений определяли по общепринятой методике. Пробы отбирали так, как описано при определении содержания аммиака.

2.1.21. Штодика разработки рациональной технологии-ветеринарно-санитарного обслуживания животных в специализированных хозяйствах.

В основу методики заложена " Методическая схема выполнения технологической тематики на примере разработки технологического процесса получения и применения аэрозолей химических препаратов в комплексах для откорма свиней", разработанная во ВНИИБС (1983Г).

- 16 -

В качестве основного критерия оценки рациональности исследуемых технологических процессов в настоящей методике приняты приведенные затраты, расчитываемые по отдельным операциям и процессу в целом. При разработке оптимального варианта технологического процесса в него включают варианты операций, имеющие минимальное значение приведенных затрат.

Показатели, полученные по результатам исследований рациональной технологии и выбора оптимальных вариантов выполнения отдельных операций использовали для определения оптимального процесса вакцинации и для разработки ветеринарно-технических требований (ВТТ) на технологический процесс.

2. 1.22. Определение действия стресс-фактора "прививка".

В условиях свинокомплекса до вакцинации взвесили две группы свиней и определили среднюю массу одной головы. Затем одну группу свиней (620 годов) привили аэрозольно последоватнльно с интервалом 3 дня против КЧС. рожи и БА. а вторую группу (620 голов) -внутримывечно комплексно в соответствии с действующим наставлением. Контрольное взвешивание проводили через 5 и 6 суток от начала вакцинации. В условиях лаборатории 30 свиней в возрасте 2 месяца массой 18-20 кг разделили на б групп по 6 голов в каждой. Первую группу привили комплексно внутримышечно в соответствии с действующим наставлением. Вгорую группу привили аэрозольно последовательно с интервалом 3 дня между прививками и ревакцини-роаали против роки и БД через 24 дня. Третью группу свиней привили внутримышечно только против КЧС в соответствии с действующим наставлением. Четвертуй группу свиней привили аэрозольно против КЧС в соответствии с действующим наставлением. Пятую группу свиней не прививали (контроль). Контрольное взвешивание проводили в течение 87 дней до опыта и в течение 45 дней после вакцинации с

интервалом б дней.

2. 1. 23. Статистический анализ результатов исследований. Статистическую обработку материалов проводили с помощью ЭВМ

- МИР-2 по программам N 1. 2. 13. 15 и 15 б. '

2.2. Результаты исследований. 2.2.1. Разработка и совершенствование технологии аэрозольной иммунизации свиней и птиц. 2.2.1.1. Теоретическое и экспериментальное обоснование основных параметров технологического процесса аэрозольной иммунизации. В результате теоретического и экспериментального обоснования основных параметров технологического процесса аэрозольной иммунизации показано:

- при аэрозольном применении для вакцины против НБ птиц нижний предел биологической активности составляет 8,0 lg ЗИЛ 50/см , для вакцины против КЧС - 4,5 lg ИМД 50/см . для вакцины против рожи свиней - 8,7 lg мт/см , для вакцины против болезни Ауески

- 7,3 lg ТВД 50/см . Эти условия по каждому вакцинному препарату, предназначенному для аэрозольного применения, должны содержаться в соответствующих наставлениях по применению;

- величина частиц аэрозолей для целей иммунизации должна находиться в пределах 1-20 мкм, что обеспечивает их достаточное время витания в воздухе, а также глубину проникновения и степень задержи в органах дыхания;

- для обеспечения устойчивости вакцинных вирусов и бактерий в аэрозоле перед распылением в вакцины необходимо добавлять сухое обезжиренное молоко (5Х-ная суспензия) или сухое обезжиренное молоко с одним процентом глицерина.

- расход распыляемых жидких или пылевидных вакцин не должен

Ъ \

превышать 2 см (г)/м объема помещени, так как при превышении этого уровня процессы коагуляции и седиментации начинают превалировать над ростом физической концентрации;

- время распыления вакцины при экспозиции 20 минут должно составлять не Солее 5-7 минут, а при экспозиции 40 минут - не более 10-12 минут;.

- параметры микроклимата животноводческих помещений при проведении аэрозольной иммунизации должны соответствовать зоотехническим требованиям, предъявляемым к содержанию свиней и птиц;

- экспозиция вакцинации для птицне должна превышать 20 минут, а для свиней - 40 минут;

- для обеспечения равномерности дозирования ваюутн аэрозольной иммунизации необходимо подвергать близких по возрасту и массе тела животных. Разница в возрасте у птиц допускается не более трех дней, а у свиней - не более пяти дней.

- для распыления жидких препаратов необходимы генераторы, обеспечивающие создание аэрозолей с преимущественным содержанием частиц размером от. 1 до 10 мкм (не ниже 80%), а для создания пылевидных аэрозолей соответствующая вакцина должна содержать носитель с частицами размером 1-10 мкм;

для достижения более равномерного распределения аэрозоля в животноводческом помещении генераторы аэрозолей типа сдг-1 необходимо, располагать из, расчета 1 прибор на 100-200 м* площади или на 400-500 « * объема так, чтобы расстояние между генераторами по продольной и поперечной оси здания было в два раза больше, чем от боковых и торцовых стен, но не более 20 м друг от друга на Еысоте около 1 м от уровня пола. Применительно к генераторам других типов указанные рекомендации меняют в зависимости от их производительности;

- на основе вше изложенных материалов наших исследований разработаны и утверадеш Глгавяым уяравжотеш ветергяаргя Нетод:?-ческие указания по оценке ¡шазстяващ^а Basajsraora кззгерва<га а процессе его перевода в аэрозольное состояние** я "Игтодачйскаэ узса-зания "Выбор оптимального количества аэрозольных генераторов дли аэрозольной вакцинации птиц в животноводческих йомеа^ШЕГХ**.

Выполненная работа по теоретическому я экспериментальному обоснованию основных параметров технологического процесса аэрозольной иммунизации является продолжением исследований, ■ яроводи-шх нами совместно с М М. Бондаронко. В. И. Бурцевым я .ярутят исследователями. Анализ результатов ранее проведённых исследований, а также получение новых ргзульгатов^позволили подойти а разработке технологии этого сложного производственного процесса.

2.2.1.2. Разработка ветеринарно-техничгсккх требовашй (ЕТТ) к технологии аэрозольной жауаиззцЕЯ свиней и тшщ.

Обобщив данные литературы и собственных исасадованиЗ яря разработке метода аэрозольной иммунизации птиц против НЕ if ЦЛГ, свиней против КЧС. рожи и болезни Ауески asm были ефррдаарсеазы основные требования ла создание процесса аэрозольной ишущзадал птиц и свиней применительно к сложившимся в яастоянре время условиям производства животноводческой продукция. "Эти требования зач-лючаются в следующем: •. -

- аэрозольной иммунизацией руководит ветеринарный врач, освоившей этот метод и умеющий обращаться с генераторами аэрозолей;

- помещения должны быть относительно герметичяыш. ¡оборудованными исправной принудительной приточно-вытязкОй •вентиляцией;

- для распыления вакцин используют генератора аэрозолей 'типа САГ-1, САГ-10. ШГ-'З. Использование генераторов.» создающих более т'анкодиспгрснь'э или г рубодиоперсные аэрозоли категорически

запрещается. Давление -сжатого воздуха, полагаемого на генераторы

я.

типа САГ. не должно превышать 5 кг/см я быть не ниже 3.5 кг/см ;

- аэрозольной иммунизации подвергают одновозрастных или Слизких по возрасту клинически здоровых животных. Животные должны содержаться в соответствующих зооветеринарным требованиям помещениях со строгим соблюдением норм кормления и плотности посадки.1 параметров микроклимата и т. д;

- для аэрозольной иммунизации необходимо использовать вакцинь с известной биологической активностью на момент применения. Так, вакцина против КЧС из штамма ЛК-ВНШВВиМ должна иметь активность не нижа 4,5 lg ИВД 50/см , вакцина против болезни Ауески должна иметь активность не ниже 7.3 lg ТЦД 50/см\ вакцина против рожи свиней должна содержать не менее 8,7 lg мт/см*\ вакцина против

НЕ птиц должна иметь инфекционную активность не ниже 8,0 lg ЗВД 50/СМ3;

- иммунитет к КЧС считается достаточным, если после контрольного заражения выживают 85% животных из числа зараженных. Титры флюоресцирующих антител 1:8 и выше также свидетельствуют

о наличии напряженного иммунитета к КЧС. Титр антител 1: 20 и выше свидетельствует о наличии напряженного иммунитета к болезни Ауески и роже свиней. Титр антител от 1:8 и выие свидетельствует о наличии напряженного иммунитета к НЕ птиц.

Если иммунитет выявляется менее чем у 80% исследуемых сывороток или зараженных птиц, проверку наличия иммунитета срочно повторяют и при подтверждении первого результата все поголовье подвергают повторной прививке независимо от срока предыдущей иммунизации.

2.2.1.3. Разработка структурного состава технологии иммунизации.

Технологический процесс иммунизации -включает-щт основные операции: подготовительную, основную да

чает ряд переходов, состоящих из первичных обгесто» нормирования и оценки - действий.

Технологический процесс аэрозольной иммунизация. Подготовь- тельная операция состоит . из следующих переходов•. подготовка людей» пошпрний, аздаотиых* вакцины и аэрозольной техники.

Основная операция включав? переходы; раз-мэгрнио и подключение заправленных вакциной генераторов аэрозолей, гермзтизациа помещения, распшениэ вакцина» экспозицию вакцинации и удаление остатков аэрозолей из помец^ния.

Заключительная операция шяючаэт снятяа генераторов аэрозолей, демонтаж переносной системы для подачи слатого воздуха, обезвреживание остатков вакцины, санитарно-гигиеническую обработку участников аэрозольной иммунизации и оформление записи в спедаааьный журнал.

Технологический процесс внутримышечной иммунизации. Под готов и тельная операция включает тег® переходы,что и яри аэрозольной иммунизации. Отличие заключается в том, что вместо подготовки аэрозольной техники содержится подготовка инструментов.

Основная операция включает в качестве переходов снаряжение полуавтомата вакциной и ее введение. Указанны® ггерзхода еопродоляавтся следующш:! действиями: присоединение глрица к клапанному устройству и емкости с вакциной, заполнение системы вакциной,обработка кзсга введения препарата, введение вакцины, штка привитого животного, смена инъекционной игла

Заключительная операция включает сбезвреяиваияа остатков вакцины я инструмента, санитарно-гигиеническую обработку участников иммунизации я оформлещэ записей в

специальном журнале.

Раскладка процесса иммунизации на операции и действия дает возможность более детально оценить организационные и материально -технические затраты, выработать оптимальные варианты выполнения тех иди иных процессов.

2.2.1.4. Еьбор исходных данных для составления сетевых моделей и расчета приведенных затрат по вариантам.,

Исходные данные для оценки выбранных вариантов базируются на нормативных и экспериментальных данных.

Для расчета приведенных затрат собраны основные сведения по операциям, переходам и действиям технологических процессов: количестводвдей. материалов, оборудования, энергетических затрат, производительности труда, времени выполнения действий и т.д.

Производственные опыты по указанным вопросам проведены на свиноводческих комплексах и птицефабриках.

1Ь нашим расчетам Ha lOOQ м^ объема помеп$зния потребуется 30 погонных метров стальньа труб, 1-2 запорных вентиля и 2 генератора аэрозолей САГ-1. Во всех случаях требуется г компрессора: один рабочий, а другой - запасной.

< Учитывая, что операции технологического процесса аэрозольной иммунизации в павильонных и сблокированных помещениях аналогичны по содержание и затратам времени, / в качестве основы для разработки технологическогопроцесса аэрозольной иммунизации взяли свинокомплекс с сблокированными секторами и птицефабрику с корпусами павильонного типа для выращивания 3 идя. бройлеров в год в клеточных батареях BKU-ЗБ. Для получения данных о трудоемкости отдельных переходов и действий при иммунизации аэрозольным и базовым методом нами в 20 опытах в производственных условиях про-

ведеи соответствующий хронометра*.

Показано, что на один цикл аэрозольной иммунизации свиней при наличии стационарной системы разводки труО требуется в обсзй сложности 99 кинут, при этом в подготовительной операция одно* временна работают 4-5 человек, в основной и заключительной операциях работают 2 и 3 человека соответственно.

Ш один цикл аэрозольной иммунизации свиней при использовании переносной разводки труб для сжатого воздуха требуется 115 минут, при этом в подготовительной операции одновременно работает 7 человек, в основной и заключительной операциях соответственно заняты 2 и 4 человека Компрессор в средней работает 20 минут за один цикл. Тракторист или шофер у передошяого компрессора в среднем занят 90 минут. При проведении внутримышечной иммунизации затраты времени составляют около 280 минут, при этой в подготовительной операции участвуют 4 человека, в основной я заключительной операциях заняты по 3 человека.

На один цикл аэрозольной иммунизации птиц при наличии стационарной разводки труб требуется в общей сложности 74 минуты, при этом в подготовительной операции одновременно работает 5 человек, в основной и заключительной - соответственно по 2 человека Компрессор в среднем работает 10 минут за цикл, фи наличии переносной разводки на один цикл аэрозольной иммунизации требуется на 9-10 минут больше. При проведении индивидуальной (клоач-но, назально) прививки затраты времени составляют около 340 канут, при этом во всех операциях участвуют не менее 5 человек.

Для расчета приведенных затрат использовали даянш яа примере аэрозольнолй и клоачной иммунизации птиц против ЮТ, а таю® на примере аэрозольной и внутримышечной ишмунгаация свиней против КЧ2, рожи и болезни Ауески.

Экономический аффект при аэрозольной иммунизации 1 млн. гол. птиц составил 12 596,1 рублей (27 074,5 - 14 478,4). В расчете на годовой объем работ экономический эффект будет равен 40 307,5 рублей (12 596,1 * 3,2). •

Приведенные затраты на аэрозольную иммунизацию по сравнению с внутримдаэчной при КЧ2 я болезни Ауескм .свиней выше в 4,1 и 6,4 раза соответственно. Несколько ниже эти затраты при аэрозольной иммунизации против рожи. Превышение приведенных затрат при аэрозольной иммунизации обусловлено значительным перерасходом вакцин s силу их недостаточно высокой исходной биологической активности. отсутствием специальных форм вакцин для аэрозольного применения.

фи применении аэрозолей вакцин в 13-15 раз возрастает производительность труда иЛ значительно снижается неблагоприятное воздействие стрессфактора •'ЗДудашй*', -дао позволяет предупредить ущерб от недополучения ядовесов до ,<80 tisr м более от 1000 голов привитых. Экономический jajfcttcr от применения аэрозольного метода .. иммунизации свиней црсщв SPC л рода в условиях свинокомплекса "ПоводаскйГ составил 25,« цыс. ¡рублей в гея пенах до 1989 года). Приведенные расчета показывает так» большую экономвд-ность стационарных систем подачи сжатого воздуха., -которые чшке mtyi быть использованы ори проведении дароаодьной з^аикфеющи »

2.2.1.5. Регламент и экономическая оценка .разработанной технологии аэровольной иммунизации.

Технологический регламент аэрозольной иммунизации состоит & сладуют* ■,

- инструктаж участников иммунизации я проверка наличия ж jîîjjw-раввости средств индивидуальной защиты-, .

-25- приготовление рабочего разведения вакцины;

- проверка компрессора и разводки труб для подачи сяатого воздуха, устранение негерметичности помещения, изоляция при необходимости животных с клиническими проявлениями заболевания органов дыхани и пищеварения;

- разлив вакцины в генератор^ аэрозолей;

- отключение вентиляции и распыление вакцины, которое в среднем не должно превышать 5-7 минут при иммунизации птиц и 10-12 минут при иммунизации свиней соответственно. ; .

- экспозиция иммунизации берется с учетом времени распыления и составляет 20 кинут для птиц й 40 минут для свиней, после чего сразу включают вентиляцию. Через 15 минут от начала работы вентиляции входят в помещике, снимает генераторы,выносят их в специальное помещэние и разбирает, остатка вакцины сливают в дезраствор, генераторы промывают водой и переносят для работы в следующие помещэния, а если работа окончена - генераторы остаз-ляюг сушиться при комнатной температуре;

- записи в специальном журнале о проведенной работе.

В процессе осуществления технологии аэрозольной иммунизации необходимо соблюдать правила техники безопасности, предусмотренные отраслевым стандартом ОСТ 46, 32.158-84, а такзвэ с ГОСТ. 12.1. 008-76 (биологическая безопасность), ГОСТ 12.0.004-79 н ОСТ45.0.126-82 (обучение персонала). Оборудование, работайте под давлением (САГ-1, разводка труб, компрессор), следует эксплуатировать в соответствии с "Правилами устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением" й "Правилами безопасности в газовом хозяйстве".

Проведенные нами четырехлетние испытания метода аэрозольной иммунизации на поголовье около 300 тыс. свиней в условиях евино-

комплекса "АдаксеевсюйГ КуЯбдаевской области показали высокую иииувюлзгичвскзго эффективность, вакцин против КЧС, рож и болезни Ауесхи и существенное снижение стрессовых воздействий на животных. Так вепрявитда и аэроэоЛьно привитые поросята 80-дневного воа-раста имелипривеси «а плановом уровне, а привитые внутримышечно - на 136 граммов ниже в течение S дней после прививки. Таких образом. годовой экономический эффект- получен в основном за счет сохракеииз привесов в результате ликвидации стрессов и сокращения трудозатрат при проведении азроаодьной иммунизации по сравнению с внутримышечной прививкой. Привесы в данном случае рассматриваются с точки зрения затрат ресурсов иаих получение (труд, корма и т.д.)

1»асчвт годового экономического аффекта производили в соответствии С "Мзтодвсов определения экономической эффективности использований а народном хозяйстве новой техники, изобретений и рацпредложений", утвержденной постановлением от 14.02.77 г.

Лабораторные «производственные испытания метода и технология авроаадмюй иммунизации свиней'против №£, рожи и болезни Ауески, ¿доведенные на поголовье около 500 тыс. свиней (свинокомплексы "Апксеевскиа", " бО лет ВХР", >50 лет СССР", "Восточна»"» и ряд откормочных хозяйствйуйбыдавс-; кой,•Горьковсиэй, &нингрэдской областей и Краснодарского края), йоказад их соответствие принятой системе ведения животноводства и высокую «швдтшоРическув эффективность вакцин в вило аэрозолей при ах правильном дозировании. ' В процессе внедрения эффективность предлагаемой технологии аэрозольной иммунизации подтверждена яа сашгоношдексах "Шрмский" и "Пэволаекий" на поголовье оисив? 300 тыс. свивай. С момента внедрения технологии аэрозоль-вой юавнявацик свиней против КЧС, рожи м болезни Ауески и по

настоящее время (1385 -1994 г) эта раоота вэдатся по разраоэнйш ГУВ на свинокомплекса* "Шрмский" и ТЬволаскай", где а общей сложности привито по надой технология около 2 или. саиввй. Эффективность вакцин при разработанной нами аэрозольной технологии применения подтверддена в процесса внедрения а подтверддавтся в процессе производственного применения рядам бкопроб и серояогя-ческих исследований сывороток кровя привитых свивай. Эта работа выполняется нами в условиях ВШШВВиМ совмйстяо с лабораторией диагностики по мере поступления для исследования животных я снзоро-ток крови от аэрозолыго привитых свиней;

г. г. г. Разработка пылевидной вакцины против ньпгсаелскйЯ болезни птиц и метода ее аэрозольного применения, фактика применения коммерческих вакцин для аэрозольной иммунизации показала, что они не отвечают требованиям аэрозольного метода по уровню исходной биологической активности к устойчивости вируса а аэрозола, с зтоц целый необходимо разрабатывать формы вакцин, предназначенных специально ддяаэрозольного применения. Одной из таких форм является пылевиднаявакцина, а которой вакцинный вирус практически на инактивяруется при распылении я незначительно снижает активность в процессе витаний, пылевидная вакцина представляет собой готовую к дрииейена» форму и яе требует применения защитных сред (глицэряя, глхада^а, обезжиренное молоко и др.). Именно эти яреимув&стаа я послужили основанием для разработки пылевидной вакцины против Ш пТиц, предназначенной для аэрозольного применения.

На основании данных литературы и собственных исследований для приготовления пылевидной вакцины нами выбрав вакцинный штамм "Ла-Сота", а в качестве наполнителя - инертный по отношения к вакцинному вирусу и животным азросил, имеющий удельную массу 2,2

Г/см и рН в пределах 8,2-10,5, содержащий частицы размером 1-40 мкм. Наименьше снижение активности вакцины наблюдается при контакте вируссодержащэго материала с гидрофильным аэросилом марки АЗА с рН=8,2 в концентрацих до 10Х и гидрофобным аэросилом марки АЖ также в концентрациях до 102. Эти марки азросилов оказались безвредными для цыплят в дозах от 0,03 до 2,5 мг/гол при однократном и двукратном введении, обеспечивали сохранность биологической активности в процессе хранения и необходимый уровень остаточной влажности (2-32).

Получение и контроль вируссодержащего сырья проводили в соответствии с инструкцией по изготовлению и контролю сухой ви-русвакцины против НБ птиц из штамма "Ла-Сота", утвержденной 28 августа 1990 года и ТУ - 10 -19 - 212 - 86 на ату вакцину.

В качестве стабилизатора использовали обезжиренное молоко, которое способствовало наилучшей сохранности вируса при лиофили-аации и последующем хранении.

Лиофилизацию проводили в вакуум- сушильном аппарате фирмы "Ювифруа"(Сранция).

Установлена возможность высушивания вирусвакцины против НБ по двум режимам: продолжительностью 18 и 48 часов.

Перед размолом к высушенной вакцине в асептических условиях добавляли 4Х гидрофобного аэросила марки АМ-1-300. Для измельчения лиофилиэированной вакцины использовали шаровую барабанную мельницу и вибромельницу. Полученная пылевидная вакцина в основном имела следующие характеристики: остаточная влажность -2,0-2,6Х, расгыляемость- 58Х, содержание частиц 1-10 мкм -37,8%, 1120 мкм- 23,11, 21-30 мкм- 39,IX,биологическая активность- 7,48,0 1в ЗВД 50/г.

После размола готовую вакцину фасовали в полиэтиленовые

пакеты размером 200 * 250 мм по 200 гр. я герметично запаивали, определяли биологическую активность и стерильность. Показано, что после распыления пылевидной вакцины из расчета 0,5 г/м^ физическая концентрация аэрозоля в начале экспозиции была равной 0,1 иг/л, через 10 минут - 0,05 иг/я и череа 20 минут - .0,03 мГ/Д

Биологическая концентрация толе имела тенденцию К етсюнгао. . Однако более чем в 20 опытах показано, что а первые 15-20 минут экспозиции снижение биологической юнцентрацюгпоотяойЭйЕЮ н начальной не существенно. Через 30 минут снижение CuojsoJ4fl»CK>fi концентрации составляет 37,ЗХ при средних значениях атьасгтеЛЪ* ной влажности воздуха и температуре; v■'v.¿ :

Путем математического анализа установлено, что среднее зва^ чение выживаемости втамма "Jk-CoTä" за 20 минут витания в аэрозоле равно 82t, в то ев время при аналогичных усяойдазтот а» пггамм в капельном аэрозоле выживает только на 10-12Х ,;.-у

иммунологическую эф}»кткзйость пнле£идаов вакцины вз игааш "Ла-Сота" оценивали по величине ее ИЗД gO даз■ ЩДДЗТ Я>-ДОа8ногО > возраста, реактогенности, сроку я£стуш»ий я1ф0^рдавз»ел^>сти иммунитета. Показано, чтоиюшыайъваа имкувизедр»-tsßs доза пылевидное вакцины с учетомстепеяа аязхпшщка для 2D-дневкых дышит* сгстзаила 2,03 i 0,16 SÜ. \

Для сравнения вдй лззо&шсироБаяяоа ваяцивы : протет ЙВ вэ" стажа "Ла-Сота" , применяемого в Форш капельного азрозаая еосг . тавила 2,30 i 0,43 lg ЗВД50 (199 ЗЯД50). •

Показано, что оптимальная дасаунизнруячая доза пылевядаоЯ вакцины для цыплят 10-30-дневного возраста, : обеспечившая 90-100Z защиту от вяутримыэечвого заражения состааает юомгоо SJffi 50. Получение этой дозы цыплятами обеспечивается пра расхода» д^ге видной вакциныиз расчета 0,5 г/м3о<5ъеыа пошя»юиг,пр»

увеличении расхода распыляемой вакцины ее концентрация в аэрозоле увеличивается незначительно. Показано, что иммунитет у большинства привитых пылевидной вакциной наступает на 4-6 сутки и сохраняется до 9 месяцев, пылевидная вакцина при внутримышечном и интраназальном применеиии в дозах 600 тыс. ЗИД 50 и при аэрозольном применении в дозах до б,1 млн. . ЭИД 50 безвредна для цыплят 10-30 -дневного возраста, а таюке ареактогенна при аэрозольном применении в дозе 6,1 млн. . ЭВД 50. Таким образом пылевидная вакцина безвредна и ареактогенна в широком диапазоне доз по сравнению с лпофилизированной, применяемой в форме капельного аэрозоля.

Для определения длительности хранения пылевидной вакцины ее помешали в- холодильник при 4-6 С и при комнатной температуре. Показано, что массовая доля влаги через 12 месяцев хранения при температуре Д-б^С составила 2,3-2,5 X, а содержание частиц размером 1-10 мкм составило 37-38%, что не отличалось от тех же характеристик при закладке на хранение. Биологическая активность пыле. видной вакцины в условиях храпения при 4-6°С в течение года снижается на 19Х < 0,73 1в), а за 10 месяцев хранения при комнатной температуре - на 42,6% (4,43 1е).

- . Таким образом, нами совместно с лабораторией конструирования биопрепаратов (Хрипунов Е. Й. , Исакова Н.Е. и др.) разработан лабораторный регламент изготовления высокоиммуногенной, безвредной и ареактогениой пылевидной.вакцины против НБ с использованием в качестве наполнителя гидрофильного аэрооила марки АЗА и гидрофобного аэросила марки АМ-1-300. На опытно-промышленное изготовление этой бакцины разработана и утверждена Главным управлением ветеринарии. нормативно-техническая документация, включающая технические условия, инструкцюо по изготовлению и контролю и наставление по ее аэрозольному применению (приложения 7.12; 7.13 и 7.11 соот-

ветственно).

Эпизоотологическую оценку иммунологической эффективности пь левидной вакцины против НЕ провели в 5 лабораторных и одном комиссионно опытах на поголовье 2498 цыплят из которых 1088 голов использовали в контрольных экспериментальных эпизоотических очагах и 1410 голов - в экспериментальных эпизоотических очагах с применением аэрозолей пылевидной и жидкой вакцин против НБ из штамма "Ла-Сота". Гибель цыплят в контрольных эпизоотических очагах в среднем составила 93-94%. Сохранность цыплят, привитых пылевидной вакциной в оптимальной дозе и выше в среднем составила 73,5 % (54-90). Аналогичные данные получены и при комиссионных испытаниях пылевидной вакцины в лабораторных и производственных услових.

Через 30 дней после иммунизации сохранившаяся в очаге птица эпизоотической опасности практически не представляла, так как подсаженные неиммунные птииу не заболевали и вирус из органов и тканей выживших цыплят выделить не удалось. Устойчивыми в эпизоотическом очаге являются цыплята с титрами антител от 1:8 и выше.

В процессе опытно-промышленного производства пылевидной вакцины методом лиофилизации установлена низкая производительность применяемого способа высушивания, что явилось основанием для продолжения исследований в направлении поиска бощее производительного способа высушивания. Такой высокопроизводительный способ высушивания был разработан в лаборатории конструирования биопрепаратов ВНИИВВиМ Хрипуновым Е. М. и соавторами, он получил название " метод контактного обезвоживания," а изготовленная по этой технологии пылевидная вакцина и метод ее получения защипаны авторским свидетельством М 1785098 от 04.09.90 г. (Авторский коллектив: Исакова а Б., Вишняков И. Ф., Хрипунов Е. И, Кушнир А. Т.

к др. ). С использованием этого способа производительность повысилась в 100 рааСЮ кг/час)» снизилась трудоемкость и энергоемкость при полном сохранении биологических и физических характеристик. Образцы вакцины, полученные новым способом, не отличались от лиофильно высушенной вакцины по биологическим свойствам. Эти образцы вакцины успешно испытаны в лабораторных и производственных условиях.

Всего в производственных условиях с положительным эффектом пылевидная вакцниа испытана на поголовье более 5 млн. кур яичной и мясной продуктивности.

2.2.3. Разработка схем аэрозольной иммунизации свиней против ЕЧС, рожи и болезни Ауески.

Во НШВВиМ, как и в ряде других НЙУ, велись целенаправленные исследования по разработке метода аэрозольной иммунизации свиней против КЧС.роди и болезни Ауески.

В предварительных опытах in vitro и на свиньях были изучены вопросы взаимодействия вакцин против КЧ2, рожи и болезни Ауескк. Установлено, что противороашстая вакцина в смеси с вирусвакцияа-мя против КЧС и болезни Ауески значительно снижает биологическую активность, причем уровень снижения биологической активности зависит от степени разведения варусвакцин и времени нахождения про-тиворожистрй вакцины в смеси. Так аз cassez с вирус вакцинами против КЧЗ и болезни Ауески в разведенки .1:10 (для аэрозольного применения) число жизнеспособных бактерий снижается в 1000 раз сразу после приготовления сшей и в 400 тыс. раз через 2-5 часов контакта В смеси вакцин, приготовленных для комплексной внутримышечной вакцинации, сразу после смешивания число жизнеспособных бактерий рожи уменьшатся в 7 раз, через 2 «аса контакта - я 24 раза и через 5 часов - в 400 раз (разведение 1:50 - 1-ДШ1. Шио-

логическая активность вирусвакцины против болезни Ауески практически не изменяется в смеси с другими указанными выше вакцинами.

Последующие эксперименты по изучению взаимодействия вакцин проведены на свиньях. Показано, что минимальные иммунизирующие дозы вакцины против КЧС практически одинаковы при одновременном и раздельном аэрозольном применении. Минимальная иммунизирующая доза противорожистой вакцины при аэрозольной одновременной вакцинации увеличивается в 3,9 раза. Минимальная иммунизирующая доза вакцины против болезни Ауески при применении с другими вакцинами была меньше минимальной иммунизирующей дозы при раздельной вакцинации (680 ТЦД 50 против 9550 ТВД 50).

При изучении срока наступления и продолжительности иммунитета установлено, что после аэрозольной вакцинации свиней сме- . сью вакцин против КЧС! и роди устойчивость к возбудителю КЧС у части привитых наступает на 4-10 сутки, у всех привитых - на 14 сутки, а к возбудителю рожи - на 4-3 сутки У всех привитых. У свиней, привитых смесью вакцин одновременно против КЧС в болезни Ауески, иммунитет к КЧС наступает на б сутки : и сохраняется ISO дней (срок наблюдения). После одновременной аэрозольной вакцинации свиней против КЧС, рожи и болезни Ауески устойчивость к возбудителям рожи и болезни Ауески наступает на 4-8 и 4-6 сутки соответственно, а к КЧС -на 12 сутки у всех привитых. После однократной аэрозольной иммунизации смесью трех вакцин напряженный иммунитет сохраняется три месяца против рожи и КЧС и 180 дней против болезни Ауески (срок наблюдения).

Иммуноморфологическими, биохимическими и гематологическими исследованиями подтверждена активная иммунологическая перестройка в организме привитых свиней, которая выражалась в увеличении уровня ггмш-глобулмнов, числа зрелых форм лимфоцитов и усилением

- «4 -

клетак пжааасщтаряого ряда. Таким образом, аосле аэрозольной иммунизации свиней как раздельно, так и одновременно против указанных 'болезней у животных развивается выраженные иммунологические сдвиги, ко наличие в вирусвакцинах антибиотиков и задержка формирования иммунитета к КЧС послужили основанием для разработки схем последовательной аэрозольной иммунизации.

На основании проведенных исследований нами бши обоснованы две основные схемы. Согласно первой схемы сьиней первый раз вакцинировали последовательно против КЧС, рожи и болезни Ауески с интервалом 3 дня между нрививками. Через 21 день после последней иммунизации свйней прививали второй раз против рожи и болезни Ауески с интервалом 3 дня между прививками. Согласно другой схеме свиней первый раз прививали смесь» вакцин против КЧС и болезни Ауески и спустя В часа вакциной против рохи. Спустя 21 день животных вакцинировали повторно против рожи и болезни Ауески с интервалом между прививками 3 "часа, ко всех опытах экспозиция вакцинации составляла 40 минут.

В соответствии ¡с рекомендацией комиссии и планом мероприятий йо организации И внедрений метода аэрозольной Вакцинации свиней, утвержденным МСХ СССР -27,01.1977 г., 'были проведены производственные испытания метода последовательной 'и одновременной вакцинации свиней против Ж;,'болезни Ауески и рожи в условиях свинокомплекса "Алексеевский" я в совхозе "Комсомолец" Куйбышевской области, а также £ условиях свинокомплекса "*11эрмсккй" Пермской области. Остановлено. что 'через 4 месяца после однократной аэрозольной вакцинации в условиях 'свинокомплекса "Алексеевский" иммунитет :к КЧС "сохранился у всех привитых и у половины привитых против рожи и болезни Ауески. В .условиях свинокомплекса

"Пермский" все привитые животные были устойчивы к ГЛЗ, болезпк Ауески и pose через 3,5-4 месяца.

За период с 1976 г. по сентябрь 1979 г. аэрозольный мэтодом с использованием предложенных схем на свинокомплексах"Алексеееск-ий" и" Пермский" й в совхозе" Комсомолец" было привито окаю 320 тысяч свиней. В последующие годы метод аэрозольной вакцинация свиней против кчс, рожи и болезни Ауески по предлолзняым схеыам регулярно применялся на указанных комплексах, а в пастоящзе время применяется на свинокомплексе Пермский, селекцвонно-гябрвдном центре "Поволжский" и на комплексах Белоруссии.

Показано также, что в производственных условиях вакцина из втамма ВР-2 к концу экспозиции инактивируетса на 99.7Z, выбрасывается во внешнкго среду ничтожная часть (0,002 Z) бактерий. Почти такая же картина видимо происходит и с вакцинным вирусом болезни Ауески, который в лабораторных условиях инактивируется на 98,9Z, а под воздействием внешних факторов этот процесс должен идти гораздо быстрее.

Влияние стрессфактора "прививка" оценивали по уровни приветов в поствакцинальный период. Показано, что В группе привитых азрозольно среднесуточный привес за 5 дней составил 146 г на голову, а в груше привитых внутримышечно за этот m :рок - 310 г на голову. . .

На основании результатов исследований и анализа эпизоотической обстановки в хозяйствах, где используется штод аэрозольной ммуяизации с использованием наших рекомендациями разработали :оответствутаэе временное наставление, которое направили а Департамент ветеринарии на рассмотрение и утверждение.

Материалы разработки рассмотрены и одобрены на заседаниях 'ченого совета института, ветеринарной секции НГС И2Х СССР (про-

ТОКОЛ N 32 ОТ 30.04. 79 г.; протокол И 78 от 27.08.81 г.; прото-ЮЗЯ N Й5 ОТ 25, 11. 83 Г.).

Эшномический эффект от внедрения разработки в практику складывается из повышения производительности труда (в 7-8раз), снижения стрессовых воздействий (сохранение привесов на плановом уровне) и составляет для промышленного комплекса производительность» 103 тыс. свиней в год околоо 50 тыс. руб. (в ценах до 1289 года).

2.2.4. Разработка и совершенствование технических средств

для создания я изучения аэрозолей вакцин. Разработка и совершенствование генераторов аэрозолей в навей работе были обусловлены поисками распылителей, работающих на более доступном источнике энергии с производительностью, близкой к таковой у генераторов типа САГ, а таюа необходимостью создания аэрозолей пылевидных препаратов. Одновременно стояла задача ' разработать экспресс-метод определения концентрации аэрозолей в процессе их применения и изучить возможности защиты окружахщэй среды от выбрасываемых из животноводческих помещений аэрозолей вакцин.

В результате исследований, проведенных совместно с сотрудниками научно-экспериментального конструкторского отдела и лаборатории охраны окружающей среды нами разработаны:

- генератор аэрозолей ИАГ-3 со следующими техническими характеристиками: производительность-35-40 см /мин; дисперсность аэрозоля -1-20 мкм с преобладанием частиц 1-5 мкм(93%); масса-10 кг; питание от электросети напряжением 220 вольт; потребляемая мощность- 250 ватт; емкость резервуара - 1 литр. (Авторское свидетельство N 889130 от 14.08.81 г). ГЪ разработанной технической документации была изготовлена опытная партия этих генера-

торов в количестве 500 штук. Генератор аэрозолей МАГ-З провел успешные («эмиссионные испытания в институте и приемочные испытания в условиях завода- изготовителя. Этот генератор аэрозолей ш-жг быть использован в производственных условиях наравне с генератором САГ-1;

- устройство для получения пылевидных аэрозолей на базе генератора САГ-1. Принцип усоверсенствовшшя зацищэн авторским свидетельством N1578378 от 30.10.89 г. Усовершенствование заключается в том, что поток воздуха, изменив свое' первоначальное направление, попадает в стачан, проходит через слой пылевидного материала и выносит в сопло частица в основном до ; 15 »лш, которые распыляются встречными соударяется потоками. Этим усо-вериеиствованием была решена проблема сохранения уха внедренной технологии получения аэрозолей с использованием саатого воздуха, стационарных и переносных разводок слатого воздуха. Кроме этого сами генераторы аэрозолей САГ-1 стали универсальными. Усовершенствованный генератор аэрозолей САГ-1 постоянно . используется при проведении научных исследований в лабораторных условиях, с 1989 г. применяется в условиях производства;

- способа и устройства, обеспечивающих непрерывное измерение ¿концентрации аэрозолей непосредственно в процессе аэрозольной вакцинации. Измерение меняющейся кассовой концентрации аэрозоля вакцины оказалось возможным га счет разности электрических сопротивлений в стандартной и измеряемой жидкости,: через которую постоянно проходит с заданной скоростью аэрозольсодёржаций воздух. Этот принцип и устройство защищены авторскими свидетельствами

N 712715 от 21.11.79 Г. и М 1303898 от 15.12.86 г. Чувствитедь-ность прибора составляет 0,02 мг/л. Относительная погрешность составляет 10,1 X. Указанные технические характеристики прибора,

работоспособность прибора подтверждены комиссионными испытаниями в институте и в производственных условиях. В соответствии с фактическим уровнем концентрации аэрозоля прибор может корректировать экспозиции вакцинации, соответственно увеличивая или уменьшая по откашенн.ч к стандартной (расчетной).

- предложение по обезвреживанию аэрозолей вакцин.

Нам представляется, что проблема охраны окружающей среды от вредных выбросов специализированных хозяйств должна решаться не на уровне борьбы с аэрозолями вакцин, составляющих сотые доли всех выбросов, а на уровне защиты внешней среды при использовании технологии производства животноводческой продукции на промышленной основе, предполагающей массовые выбросы таких вредных отходов как аммиак, сероводород, углекислота, аэрозоли деаинфектан-тов, антибиотиков, вирусов, бактерий, пыли, навоза и сточных вод. Б период функционирования корпусов загрязненный воздух поднимается между корпусами и сразу же забирается собственными и соседними приточными системами, что делает бессмысленным проведение санаций пустующих в санразрывах помещений, так-как в считанные минуты после включения вентиляции они снова контамииируотся той же микрофлорой в таких же количествах, как и до санации. Не дает должного эффекта в, таких условиях химиотерапия и дезинфекция в присутствии животных.

Практическа суть нашего предложения заключается в следующем: воздух из каждого птичника (свинарника) подают в общий воздуховод где его подвергают обеспыливанию, очишэют от примесей газов и других веществ, обезвреживают и выбрасывают во внешнюю среду в направлении розы ветров на расстоянии не менее Б00 метров от предприятия. В итоге создания такой системы существенно снизятся энергозатраты на вентиляцию, расходы на дезинфекционные меропри-

ятия, существенно улучшится эпизоотическая схггузхца по особо опасным, опасным и другим болезням за счет снизэния риска заноса и распространения возбудителей, передатадахся череа воздух капельками жидкости или обсемененными пылинками. Значительно снизятся затраты на проведение профилактических мероприятий, связанных с вакцинацией и химиотерапией. Создание такой систеш в комплексе с мероприятиями по очистке сточных вод и утилизации навоза позволит максимально защитить окружащуо среду от вредных выбросов животноводческих предприятий и получать экологически чистую продукции.

а ВЫВОДЫ.

3.1. Разработана технология аэрозольной иммунизации птиц и свиней с детальным описанием технологических операций, что позволило определить реальные материальные и трудовые ресурсы, необходимые при практическом применении этого метода.

3.2. Теоретически и экспериментально обоснованы основные параметры технологии аэроаольной иммунизации. Шказано, что экспозиция вакцинации для свиней не должна превышать 40 минут, а для птиц - 20 минут; расход пылевидной и жидкой вакцин должен находиться в пределах 0,5-2,0 г(см5 )/м? объема помещения; время распыления вакцины должно входить в экспозицию вакцинации и составлять для птиц не более 7 минут, а для свиней - не более 10-12 минут; величина частиц аэрозолей вакцин должна быть в пределах 1-10 мкм; параметры микроклимата должны соответствовать принятым для данной технологии содержания животных зоотехническим нормам.

3.3. Исходная биологическая активность вакцин, предназначенных для аэрозольного применения при профилактике и ликвидации НВ птиц, классической чумы, рожи и болезни Ауески у свиней должна

составлять 8,0 lg ЗВД 50/см3,4,5 lg МВД БО/см3, 8,3 lg мт/см® к 7,1 lg ТЦД 50/сы3 соответственно).

3.4. Проведен экономический анализ эффективности технологии аэрозольной иммунизации свиней и птиц и показано, что производительность труда повышается в 13-15 раз, а трудоемкость снижается в среднем в 4 раза. Экономический эффект от внедрения технологии аэрозольной иммунизации на свинокомплексе "Поволжский" Куйбышевской области в год составил 25,8 тыс. рублей (в ценах до 1987 года), а для птицефабрики - 12596 рублей при прививке одного миллиона голов (в ценах до 1987 года).

3.5. Разработана пылевидная вакцина против НЕ птиц из штамма ".Еа-Сота", предназначенная для аэрозольного применения. Отличительным качеством этой вакцины в сравнении с коммерческим препаратом из этого хв штамма при аналогичной иммуногенности является безвредность я ареактогенность для цыплят и взрослых кур в оптимальных дозах и дозах, превышающих оптимальные в 100 и более раз.

3.6. Доказала целесообразность применения и высокая эффективность пылевидной вакцины в экспериментальном эпизоотическом очаге НЕ Установлено, что пылевидная вакцина защищает от гибели 63,4 I, а жидкая 53 Z птиц от числа привитых через 24-72 часа после проявления в группе клинических признаков болезни.

а 7. Разработана схема раздельного последовательного применения вакцин при иммунизации свиней против КЧС, рожи и болезни Ауе-ски. Показана нецелесообразность аэрозольного применения смеси вакцин против вше указанных болезней, так как в этом случае не создается напрятанный иммунитет к рола и КЧС ( иммунитет к КЧС формируется на 12 сутки и сохраняется не более трех месяцев). Эффективность раздельной последовательной иммунизации свиней против КЧС, роли и болезни Аувски подтверждена на практике в уело-

виях ряда свиноводческих комплексов Куйбышэвской, Пэртсой, Лэ-нинградской областей и в Белоруссии на поголовье около 2-х миллионов свиней.

3. 8. Усовершенствован генератор аэрозолей САГ-1 с цель» применения по новому назначении дли расписания пыгзвидных аакции. Разработка защищена авторским свидетельством. Усовершенствованный генератор аэрозолей обеспечивает распыленна пигевидной вакцивы без изменения принятых для распыгепвя гкдиостей требований к давлению и расходу сжатого воздуха.

3.9. разработан генератор аэрозолей ЫАГ-З, работающий от электрической энергии и не требует^ строительства дорогостояща разводки стальных труб и подачи слатого воздуха. Производительность генератора составляет 35 кшзштгров в минуту. Генератор !!АГ-3 успегао апробирован при аэрозольной иммунизации птиц.

а 10. Впервыэ разработан прибор контроля концентрации аэрозолей вакцин непосредственно а процессе азрсзальясЗ подотзация, что дало возможность певыестг. точность дозирования вакцин яри аэрозольном пр")£эк"

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЗДЛОЗВНЯЯ а РЕКОМЕНДАЦИИ Шполненные разработки вешай составной частьэ в технология аэрозольной иммунизации птиц и свиней:

4.1. Ва основании анализа литературы а данных зкссерикенталь-ных исследований теоретически и экспериментально обоснованы основные параметры технологического процесса аэрозольной нммушг-331001.

4.2. Разработана пылевидная вакцина против НБ птиц ш* втайма "Ла-Сота", авторское свидетельство И 1785093 от 01.09.1992 г.

4.3. Разработано временное наставление по применению пылевидной вакцины против НЕ из штамма Ла-Сота, утвержденное ГУВ Гос-агропрома СССР в ише 1987 года

4.4. Разработаны технические условия на пылевидную вакцину, утвержденные ГУВ Госагропрома СССР 23 марта 1937 года.

4.5. Разработана инструкция по изготовлению и контролю пылевидной вакцины против НЕ птиц из штамма Ла-Сота, утвержденная директором ЕШШЗиМ 12 января 1989 года.

4.6. Разработаны методические указания "Выбор оптимального количества аэрозольных генераторов для аэрозольной вакцинации птиц в животноводческих помещениях", утвержденные ГУВ Госагропрома СССР 30 июня 1988 г.

4.7. Разработаны методические указания по оценке инактивации вакцинного материала в процессе его перевода в агрозольное состояние, утвержденные ГУВ Госагропрома СССР в декабре 1988 г.

4.8. Разработан многодисковый генератор аэрозолей МАГ-З, авторское свидетельство N 889130 от 14.08.81 г.

4.9. Разработан прибор контроля аэрозольной вакцинации, авторские свидетельства N 721715 от 21.11.1979 года и N 1303898 от

15.12.1986 года.

4.10. Разработано устройство для получения высокодисперсных аэроаолвй, авторское свидетельство Н 1678378 от 22.05.91 г.

4. И. Разработаны -схемы раздельной последовательной аэрозольной иммунизации свиней против КЧС, рожи и болезни Ауески;

4.12. Разработана методика создания экспериментального эпизоотического очага НБ птиц.

5. СПИСОК РАБОТ. ОПУБЛИКОВАННЫХ ГО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1 Аэрозольная вакцинация свиней и птиц. / Бурцев ЕЛ , Чернышев

B. 3. , Кушнир А. Т., Бондаренко И. U. // Газета-плакат ШХ СССР. - 1978. Я 2 от 12 июня.

2 Аэрозольная вакцинация птиц п рот из иьюкаслской болезни. Сообщение 1. Сравнительная оценка эффективности аэрозольной иммунизации цыплят тдкой и пылевидной вакцинами из пгамга В1. / Еондаренко !1 М , Бурцев ЕИ., Черньапев ЕЕ. , Куинир А. Т. //Болезни птиц: Сб. трудов ВНИИПБП.-JL , 197а ВШ. 9(20). -С. 13-20.

3 Аэрозольная вакцинация птиц против ныпкаслской болезни. Сообщение 2. Иммунологическая эффективность аэрозольного и интраназального иетодов вакцинации.

/Бондаренко И. Ü, Бурцев R И. , Чернышев ЕЕ, Куияир Л. Т. //Болезни птиц: Сб. трудов ВШИПБП. -Л., 1973. вш. 9(20).-С. 21-27.

4 Аэрозольная вакцинация свиней. /Изотова }L А., Бурцэа В, TL , Еондаренко И. М,, Кушнир А. Т.// Свиноводство,-1982. В 7. -С. 23-24.

5 Аэрозольная вакцинация свиней против чуш. /Кушшр А. Т., Бурцев Е И., Езадаренко И. М. и др. //Ветеринаркя. -1979. -N 10. -С. 50-52.

6 Аэрозольная вакцинация свиней. /Изотова ЕА. . Бурцев ЕII, • Еондаренко И. ¡1, Кушнир А. Г, // Свиноводство. -1982. -М 7. -

C. 23-24.

7 Аэрозольная вакцинация свиней против классической чуш, рожа и болезни Ауески. /Изотова Н. А., Бурцев а И., Кушнир А. Т., Бондзреяко II iL //Тезисы 3-й Всесоюзной конференции по аэрозолям. -Ереван. -1977. ,т. 3. -С. 51-52.

8 Аэрозольная иммунизация поросят против классической чумы. /Бурцев Е И., Кушшр А. Т., Еондаренко TL М., Архипов Е VL ,

- 44 -

Сергеев НА.// Ветеринария. -1976. N 7, -С. 34-35. 9 Аэрозольная иммунизация поросят против классической чумы. /Бурцев К И., Бондаренко И. М., Архипов Е И., Кушнир А. Т., Сергеев В. А. // Ветеринария. - 3976. N 7. -С. 34-35.

10 Бакулов И. А. , Кушнир А. I. Эффективность аэрозольной вакцинации животных в хозяйствах промышленного типа. // Ветеринарка сбирка - 1938. N а -С. 55-57.

11 Бурцев В.И. , Кушнир А.Т., Бондаренко И.М. Рекомендации по проведению групповой иммунизации свиней против классической чумы аэрозолями вирусвакцкя.// Москва- Колос, 1980. - 24 с.

12 Бурцев К И., Бондаренко ЛИ, Кушнир А. Т. Производственные испытания метода аэрозольной вакцинации свиней против классической чума.// Тезисы 3-й Всесоюзной конференции по аэрозолям- Ереван, Огетбрь 1977. т. а-С. 17-18.

13 Вурцев Ей., Кушнир А.Т., Изотова К А. Влиние газов животноводческих помещений на биологическую устойчивость вакцин в воздухе. //Тезисы докладов 4-й Всесоюзной конференции по аэрозолям. - Ереван, 1982. -а 17-18.

14 Еакцива против болезни Ньюкасла и способ ее получения. Простяков £. А., Кольцов А. Е , Евсеева С. Д. и др.

А. С. 1785098 ОТ 04. 09.90 г.

15 Выживаемость вакцинных микроорганизмов свиней и пткц в аэрозоле. / Изотова Н. А., Кушшр А. Т., Бурцев Е 11, Бондаренко И. Дутко Ю. С. // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: Те зисы докд. 4-й Всес. вет. вирусол. конф,- Владимир, 1976. т. 1 -С 222-223.

16 Выживаемость бактерий рожи свиней из штамма ВР-2 в аэрозоле. /Бурцев а й., Изотова а А., Кушнир А. Т., Бондаренко И. Ы. //Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и зпизоото

лога!: Тезисы докладов научи. конф. БНИИВВяМ. - 1973. -С. 68-69.

17 Выживаемость бактерий рожи свиней в аэрозоле. /Бурцев В. И., Изотова Е А., Кукнир А. Т. , Бондаренко И.И //Ветеринария.

- 1974. N 2. -С. 47-49.

18 Изучение физических я биологических свойств аэрозолей пылевидной вшедины против КБ птиц, полученной ¿методом контактного обезвоживания. / Кольцов А. П. , Мса;соЕа Е Е , Евсеева С. Д., КуЕНмр А. Т. // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы до!сладов научной конфе-

. рэяцаи ВНЙИЕЕиЦ -1992. т. 1. -С. 150-151.

19 Иммуиогенныз и реактогенные свойства аэрозоля вакцины против болезни Ауески для свиней. /Куинир А. Т., Изотова Е А. , Бондаренко II м., Бурцев В И., Балмасов А. В. //Актуальные вопросы ветеринаркой вирусологии: Тезисы докладов 4-й Всесоюзной ветеринарной вирусологической конференция. -Владимир,1976. -т. 2. -С. 66-67.

20 Иммунологические свойства пылевидной вакцины против КБ птиц из штамма Ли Сота, полученной методом контактного обезвожива-шю. / Кольцов А П., Кушпф А. Т. , Евсеева С. Д. и др. //Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции ЕНЙИВВиМ.- 1992.

Т. 1. -С. 143-149.

21 Иммунизация птиц против НЕ аэрозолями вакцин в условиях крупных птицеводческих хозяйств. / Бондаренко й. М., Лагуткии Е А., Чгрнъпев ЕЕ, Бурцев Е И. , Кукнир А. Т. //Тезисы докл. на Все< согес^таи. - йуйбьшэз (13-15 ноября 1973).-11,197а-С. 17-1&

22 Ишуноморфологическая реакция у пороет, аэрозольно привитых против чуш. /Цурцев В. Л , Архипов Е Я., Еондаремсо И.И, Куинир А. Т. // Труды пятой Всесоюзной на/чно-ыетодичоской гсэн-

ференции по патологической анатомии с. -х. животных, 18-22 сентября 1973 г.- Тбилиси.- M,, -а 286-238.

23 Иммунологическая эффективность аэрозоля культуральной вирус-вакцины против чумы свиней. /Бурцев В. II , Еокдаренко й. VL , Гоголева С. tt , Кушнир А. Т. //Труды ВНИИВС. - 1974. т. 50, 180-188.

24 Кушнир А. Т. Некоторые итоги и перспективы изучения, разработки и внедрения аэрозольной вакцинации животных. //Вопроса ветер, вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докл. научя. конф. , посвященной 70-лети» Великого Осгября.

-Покров. 1987. -С. 22~2о,

25 Кушнир А. Т. Зооветеринарные требования на разработку технологического процесса азрозолбной вакцинации с/х животных и птиц. //Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции ВНЯЙЕВиМ, ноябрь 1990. -С. 187-188.

26 Кушнир А. Т. Технология аэрозольной вакцинации с/х животных и птиц. // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции ВШМЕВиЫ, ноябрь 1990. -С. 188-190.

27 Кушнир А. Т. Технологический процесс аэрозольной вакцинации в условиях специализированных животноводческих хозяйств.

// Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции ВНИИЕВиМ, ноябрь 199а -а 190-193.

28 Швликаев Р. Г., Кольцов А, П. , Кушнир А. Т. Выживаемость вакцинного вируса нмжзслской болезни во время и после аэрозольной вакцинации птиц пылевидной вакциной из штамма "Ла-Сота". //Вопр. ветерин. вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докл. ааучн. конф., посвященной 30-летию ВНИИЕВИМ. - Пи

ров, 1938. -С. 30-31.

29 Ыавликаев Р. Г. , Кушнир А. Т. , Дутко И. С. Иммунологическая и экономнчкская эффективность технологии аэрозольной вакцинации птиц против ИЛТ. // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции, посвяцгнной 30-летию ВНИИВВиМ. -198а -а 76-7а

30 Методические указания по применению прибора для контроля массовой дозы аэрозолей вакцин. / Еуреев и. А., Коромыслов Е.К , Кушнир А. Т., Осипов В. В. // Брошюра, 1988 г. Утв. ГУВ СССР 06. 07. 88 г.

31 Методы определения ФДС аэрозолей жидких вакцин классической чумы свиней и ныокаслской болезни. / Кушнир А. Т., Гусев Н. С,, Залетова Т. Г. , Кожаяова Г. К , // Допросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции ЕНИЙВВиЫ.- 1992. Т. 2. -С. 314-315.

32 Многодисковый аэрозольный генератор. / Вязников Б. П., Жиряков В. С., Панкова Г. И. и др. //Авторское свидетельство

N 889130 от 14. 08. 81.

33 Морфологическая оценка иммунитета у свиней, вакцинированных против болезни Ауески. /Ерохина Л. Ц., Архипов а И., Бурцев В. И. Изотова Е А., Кушнир А. Т. //Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: Тезисы докладов 5-й Всесоюзной,вирусологической конференции. -Казань. -19®). -С. 155-156.

34 О взаимодействии вакцин при одновременной иммунизации свиней.

/ Бурцев В. И., Изотова Н. А., Кушнир А. Т., Бондаре нко И. Н. // Ветеринария.- 1977. N 1. -С. 51-54.

35 Сб эффективности назального, орального и ингаляционного методов вакцинации птиц против псевдочумы. / Бурцев В. И., Бондарен-ко И. М., Чернышев а а , Лагуткин К А., Кушнир А. Т. // Тезисы

докладов на Всес. совещании. - Куйбышев, 197а -С. 48-50.

36 00 эффективности вакцинации птиц против НЕ

/Бондареико И. Ы., Бурцев В. И., Чернышев В. В , Лагуткин Н. А., Кушнир А. Т. //Еетерикария. - 197а К В. -С. 61 -ба

37 Определение концентрации аэрозолей жидких вакцин против классической чумы свиней, ньвкаслской болезни и инфекционного ла-ринготрахеита кур. / Еалетова Т. Г., Коданова Г. Е , Гусев Н. С., Кушнир А.Т.// Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов нзучной конференции ВНИИВЕиЫ. -1992. т. 2. С. 316-317.

38 Опыт борьбы с классической чумой свиней в крупном свинокомплексе. / Семенихин А. Л., Коломыцев А. А., Куриннов ЕЕ и др.

// Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции ВНИИВЕиН-1990 (ноябрь). С. 90-92.

39 Основные характеристики электроаэрозолей вакцин и их иммунологическая эффективность. / Еуреев И. А., Дунский Е Ф., Изотова Е А., Бурцев ЕИ. , Кушир А. Т.// Ветеринария.-1976. N а -а 58-61.

40 Оценка иммуногенности вакцины из кгаша ВР-2 при аэрозольном применении. / Кушшр А. Т., Бурцев Е И., Изотова Н. А., Бондареико 11Ы. У/Еэтерлнария. - 1976. N 10. -С. 35-36.

41 Оценка эффективности применения пылевидных вакцин против ныокаслской болезни пт.чц. / Куеяир А. Т., Кольцов А. а , ЬСавли-каев Р. Г., и др. // Вопросы ветеринаркой вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции ВНИИЕВиМ. - 1992. Т. 1. "С. 149-150.

42 производственные испытания пылевидной вакцины против ныокаслской болезни. / Ыавлюсаев Р. Г. , Кушир А. Т., Хрипунов Е. М.

- 49 -

и др.// Ветеринария.-1991. М 2. -С. 31-33.

43 Прибор для контроля аэрозольной вакцинации. Авторское свидетельство N 721715 от 21.11. 79. / Буреев И. А. , Бурцев а 11, Оленин О. Д. и др. // Бюллетень изобретений. -1980. -С. .164.

44 Сравнительная оценка генераторов аэрозолей. / Буреев И. Л. у Бур-лев ЕИ., Сухая Д К , Кушнир А. Т., Изотова Н. Л. // ВетериНа-рия.-1977. N 6.-С. 38-40.

45 Сравнительна оценка экономической эффективности различных методов вакцинации свиней и птиц. / Бондаренко И. 51, , Бур -цев ал, Изотова а А., Дут ко XX С. , Кушнир А. Т. // Тезисы докладов 4-й Всесоюзной конференции по аэрозолям, - Ереван,: 1982. -С. 43-44.

46 Сравнительная оценка эффективности аэрозольной иммунизации цыплят жидкой и пылевой вакцинами из штамма В1 против НЕ.' .

/Бурцев К И., Бондаренко li.lL, Чернышев ЕЕ, Кушнир А. Т.

//Тезисы дохл, на Бсес. совеи&тт. - КУйбыпев, 1973. -С. 47-48.

47 Устройство для измерения дозы ¿акция.

/Осипов а Е , Буреев И. А., Харламов Е Т., Артищзз 1й И., Кушир А. Т.// Авт. спид. II 1303898 от 15.12.£5 г.

48 Устройство для получения высокодисперсиых аэрозолей..

/ Кушнир А. Т., Еакулов Я А., !,£адикаев Р. Г., Кольцов А. II. , Вязников а Е// Авт. свид. N 1678378 от 22. 05.91 г.

49 айективность аэрозольной вакцинации в зависимости от размера частиц. /Буреев И. А., Бурцев а И., Дунский В Ф., Кушнир А. Т. //Тезисы 3-й Всесоюзной конференции по аэрозолям. - Ереван, октябрь 1977. т. а -С. 21-22.

50 Эффективность аэрозольной вакцинации свиней против классической чумы, рожи и болезни Ауески в промышленных комплексах. / Бурцев а И., Изотова Н. А. , Кушнир А. Т. и др. //Тезисы док-

- 50 -

ладов 4-й Есес. конф. по аэрозолм. -Ереван, 1982.-С. 6.

51 Экономическая эффективность метода аэрозольной вакцинации птиц против НЕ. / Еондаренко II Ы., Лагуткин Е А., Чернышев Е Е , Бурцев В И. , Купшир А. Т. //Тр. ВНИИ кет. санитарии. -1974. N 50. -С. 169-172.

52 ¡Саков ¡0. Г., Кушнир А. Т. Физическая и биологическая устойчивость вирусвакцины против НЕ в капельной и пылевой дисперсной фазе аэрозоля. // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии : Тезисы докл. научн. конференции. -1985. -С. 147-1-й.

53 ХЗшков Ю.Г., Кушнир А. Т. Сравнительная эффективность иммуни-аируадих и минимальных доз (ИМД 50) пылевидной и жидкой вакцины против ныокаслской болезни из штамма "Ла-Сота" при аэрозольном введении.// Еопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции.- 1985. -С. 145-147.