Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Поствакцинальный иммунитет против энтеровирусного гастроэнтерита у свиней различного возраста

р Б Н^^ЮНАЛЬНИЙ АГРАРНИЙ УН1ВЕРСИТЕТ

- 2 ОНТ 1835 На правах рукопису

ОСТАПЕНКО Валентина Петр1вна

ПОСТВАКЦИНАЛЬНИЙ 1МУН1ТЕТ ПРОТИ ЕНТЕРОВ1РУСНОГО ГАСТРОЕНТЕРИТУ У СВИНЕЙ Р13НОГО ВЖУ

16.00.03 — ветеринарна лмкробшлопя, в1русологш, еш'зоотолопя, 1'мунолопя \ ликолопя

АВТОРЕФЕРАТ

дисертацп на здобуття наукового ступени кандидата ветеринарних наук

КиТв — 1995

Дисертац1я.е рукопис.

Робота виконана в 1нститут! ветеринарией медицинц УААН.

Науков1 кер1вники — доктор ветеринарннх наук, професор,

. член-кореспондент УААН Собко А. I.;

— кандидат медичних наук, старший науко-вий сшвробтшк Тацька В. Н.

Офщжш опонентн: — доктор ветеринарннх наук Прискока В. А.

— доктор ветеринарннх наук Скибиць-кнй В. Г,

ПровIдна 0ргашзаЦ1Я — 1нстнтут Ыльськогосподарсько! мнфобю-

логп УААН

Захист дисертацм в1дбудетъся « ЯР. » Уг^э^^лЛ995 р. о год. на засщанш саещал1зовано1 ради Д.01.05.10

в Национальному Аграрному Университет! за адресою: 252041, м. Кшв, вул. Потехша, 16, уч. корпус 12, ауд. 412.

Просимо взяти участь в обговоренш днсертаци при и захист1 або вислати Ваш вщгук на автореферат в 1-му прим1рнику, засв1дчешш печаткою, за адресою: 252041, м. Кн1в-41, вул. ГероУв оборони, 15, НАУ, сектор захисту дисергащй.

3 дисерташею можна ознайомнтпсь у б1блютещ Национального Аграрного Университету.

Автореферат розклаиий « » 1995 р.

Вчений секретар спеи,1'ал1зовано1 ради, професор

В. А. БОРТНИЧУК

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТЙ

Актуальн1сть теми. У зб1льшенн! виробництва м'яса в Укра1н1 зиачна роль належить свинарству, як найб1льи скороспШй та рентабельна галуз1 тваринництва, Вир1шити (де питания можливо за рахунок великих промислових комплексов га спец!ал1зованих свипарських господарств.

Однак, велике скопичення погол!в'я свиней р!зиого в!ку на обме«ен1й площ1, вплив багатьох шк!дливих та стресових фактор1в оточувчого середовища, зиачно зменшують првродну резистенти1сть 1х орган1зму.

За таких умов зИлыяуеться захвсрвван1сть свиней, зокрема, виникають шлунково-кишкоэ1 захворювання в!русно1 ет1олог!1. ■

Особливу роль у илунково-кишков1й патолог!! свиней в1д1грають корона-, рота- та еитеров1руси.

0станк1к часом в умовах свинокомплекс1в ентеров!русн1 гастроеитерити свиней рееструються част!ше, мають виключно гострий перев1г, швидко охоплоють все сприйнятлаве логол!в'я.

Ёетеринариа наука прид!ляе багато уваги вивченнв енгеров!рус1в - збудник!в гастроентериту свиней у зв'язку з зпачним поширенняи цих агент!в серед погол1в'я свиней та здатн1стю при певшие умовах реал!зуватя сво1 патогенн! властивост!.

До остаянього часу в Укра1н1 не були розроблен! иетоди активно! проф1лактики ентеров1русних гастроентерит!в у свиней. Основннми заходами боротьби з ц1ев 1нфекц1ею вванались: охорона господарств в1д заносу 1нфекцИ, карантинування тварин, що завозяться з Ьганх господарств, дотримання ветеринарно-сан!тарно1 культур!!, виклвчення д!1 стресових фактор!в, створення оптималышх умов утримання та повноц!нного харчування тварин.

Багатьма науковими закладамк кк блнвнього так i далекого заруб1жяк ведеться робота по створешго вакцин проги siрусних гастроентерит1а свиней. Доведена асдашвЧсть колострального захисту ковонародвавих поросят в1д ентеров!руского гастроентериту пляхом вгкцинацИ поросних свинокаток, Перспективное вважаеться робота по створеннв вакцин з використанкяи м!сцезнк еп1зоотичних щтам1в BipyciB (Iflpicc ,У. А., Тацька Б.К., Иакаренко О.В., ЛабутХнас А;В., Серейка В.Й., Шимкус П.К.).

В лабораторП в1русологП IBM проведен! иирок1 ретроспективы! серолог!чн1 досл1д*ення у багатьох господарствах Укра1на, встановлено пирокэ розповсюджения енгеров!рус1в свиней 6, ? та 8 серогруп (за класиф1кац1гю J.B. Derbyshire, 1982), як! е збудкикамк гастроентериту свикей.

Тому створекня в лабораторЦ в1русологП 1ЕЫ вакцини проти ентероз1русвого гастроентериту свиней (ЕВГС) 1з втаму УН1В1 {6

серогрупа) - ;своечасний та актуальней крок. Розробка вакцини

/

проведена з ¡¡ашою участи. Вивчеиня воствакцинальиого 1мун1тету у свиней р!зноГо в!ку при використанк! ц1е! вакцини е ваюшвим та актуальним завданням.

|Иета досл1дяень. Метою наших досл1диень було вивчения поствакцинального гуморального 1кун1тгту у свиней р!зних в!кових труп при застосуванн! в!русвакцшш проти енгеров1русного гастроентериту свиней ,1з втаму У111В1, ефективност1 колострального захисту» поросят, HKi народилися в!д вакцинованих свиноматок та ефективност! викоркстакня вакцини у неблагополучию по eiiiepoBipycHoMy гастроентериту свиней господарствах.

Робота проводилась зг1дно план!в НДР по зачданию 0.51.09.01.03; 0.СХ.90 01.02.06; IA (16), розпорядженням РМ УРСР в!д а.02.83 Но 61р; 0.СХ.9О 01.02.06; 07.01.01.И; 01.02.09.

0с??озн1 завдання яосд!диерь;

1. Розробити оптямвльяу ехэму вакцииацП поросних свиноматок у залежное?! . в1д способу ззедення (пероральний, внутр1шньом'язевий) 1 дози вахцаии.

2. Визначитм р!вень а!руснейтрал1зуачих антитЛл у сироватках кроа! й молозива (молоке.) поросяик свиноматок у заяеяиост! з!д способу закцинацП й к!льхост! опорос!а, перед яки» эони буди вакцинован!.

3. Вивчити дииан!ку й трнвал!сть зберенання з1руснейтрал!зувчте аитиг!л у сироватц! кров! вакцияованя» р1зн!ши методами свиноматок.

4. Вивчити динам!ку з!руснейтрал!зуючих антит!л у сироватц! кров1 поросят, як! народилися з!д заадинозанкл свиноматок.

5. Досл!дити залеин!сть ¡шпруженос?! колостралыюго 1иуи!тету у поросят в!д показник1в з!руснейтрал!зупчо1 активное?! сироваток кров! та иолознза вакцинования емноматок.

6. Вивчити вплив пасивного 1муя1т8ту поросят у пер!од а!длучення на формування активного !мун!тету.

7. Досл!дитн поствакцинальннй !мун!тет при закцинацг! проти ЕВГС поросят на дорощуванн1.

8. Виачиги показники зберэяеност! поросят у иер!од в1длучення, як! народилися в!д вакцинозаних 1 контрольная свиноматок, та встановитн е§>ентивн1с?ь винористання вакцин» проти ЕВГС у неблагополучиях господарствах.

Ааукова новизна. В!русвакцииа проти ЕВГС !з итаму УНШ не мае аналог!в, розроблена й впровадяена в ввтеринарну практику вперше. Поствакциилльний 1 колостральний !мун!тет у свиней при використанн! вакцкни райше не вивчався.

Вперпе проведен1 досл1дження по вивченню гуморального 1мун1тету у поросних свиноматок, вакцинованих внутр!шньом'язево й перорально, а також колострального 1мун1тету у поросят.

Вперше вивчена динам!ка в!руснейтрал1зуючих аытит!л у сироватках кров1 й молозива (молока) вакцинованих свиноматок 1 в сироватц! кров1 поросят, як! в1д них народилися.

Вперше розроблена оптимальна схема вакцинац11 проти ЕВГС поросних свиноматок.

Вставовлена ефективн1сть вакцини при 11 використанн! в неблагополучних по еитеров1русному гастроентериту свиней господарствах, в яких захворювання було пов'язане з ентеров1русом свиней 6 серогрупи.

Практи'т ц1нЩсть, роботи.

Розроблена схема вакцинацП поросних' свиноматок проти ЕВГС гарантуе створення напруженого гуморального 1мун1тету у свиноматок 1 колострального 1мун1тету у новонароджених поросят, який забезпечуе п1двищення 1х збереженост1 в неблагополучних по ЕВГС господарствах.

3 нашою участю розроблено комплект нормативно-техн1чно1 документами: 1нструкц1я та Техн1чк1 умови по виготоаленнв та контролю в1русвакцини проти ЕВГС 1з штаму УН1В1 та Наст&нова по використанно вакцини, затвердвен! ГУВ Дераагропрону СРСР.

За пер1од виконання роботи виготовлено й реал1зовано господарстваы Укра1яи, РосИ, Молдови, Б1лорус1, Казахстану 3657 тисяч доз вакцини, в яких вона була застосована з високим ефектом.

А)1Р0бац1я роботи. Иатер1али дисертацП допов!дались на:

кокференцН "Ветеринари! проблеми промислового свинарства", м.Ки1в/ 1983р.;

н1иреспубл1канськ1й конференцП "Питания групово! .профилактики захворювань тварин та птах1в", м.В1льнюс, 1987р.

Латер1али по тем! дисертацП експонувались на. ВДНГ. УРСР ! в1дзначен! Св1доцтвами ВДНГ УРСР у 1985, 1986, 1987, 1988/ 1990pp. У 1986 та 1987pp. вакцина удостоена бронзово1 медал! ВДНГ СРСР, а у 1991р. иагороджена Дипломом пошанн ВДНГ СРСР 1 ср1бною медаллю (Посв!дчення Но 12207).

Г бл1кап11. По тем1 днсертац11 опубл1ковано 8 наукових роб!т.

Об'ен 1 структура дисертацП. ДисертаЩя викладена на 181 сгор!нц! машинописного тексту, 1люстрована 16 таблицями й 3 граф1ками. Складаеться з1 вступу, огляду л1тератури, особистих досл!дженъ, обговорення результат!в досл!джеяь, висновк!в, практичних пропозиц!й 1 додатк!в. Список використано! л!тератури вклкчае 257 джерел, г тому числ! 161 в1тчизняних 1 96 заруб!жних автор!в.

На захист виносяться матер!али, одерхан1 особисто здобувачем, по розробц1 1 вивченню:

- схеми вакцииац11 поросних свиноматок;

- поствакцинального гуморального 1иун1тету у поросних i п!дсисних свиноматок при внутр1шньом'язев!й та пероральн1й ix вакцинацИ та колострального 1мун1тету у поросят;

- показник1в збереженост! поросят при в!длученн1, як1 народилися в!д вакциноваяих проти ЕВГС свиноматок, та визначення ефективност1 вакцшш.

ВЯАСН1 ДОШДЖЕННЯ

Матео!али й методи.

В робот! використовували перещешшван! культури кл!тин нирки свиней - СНЕВ, ПСН та тест!кул!в поросят - ПТП. MoHomapHi культури

кл!тин одериували 1з лабораторП культур тканин IBM УААН у проб!рках та в 1,5 дм3 матрасах.

Досл1ди проводили на свинях р!зних в!кових груп, серед яких 1053 свиноматки на р1зннх строках поросвост1, 605 поросят р!зного в!ку - новонародиен!, поросята-сисуни в 10, 20, 30 - денному в!ц!, поросята у перЮд в!длучення та на дороцуванн1. У виробничих досл!дах, як! буян проведен! у неблагополучних по ЕВГС государствах Укра!ни, використовуваяи тварин 1з загального стада.

Вивчення ефективиост1 вакцикн проси ЕВГС по збереженост! поросят при в!длученн! у неблагополучних господарствах, в яких з&стосуваяи вакцивац!» поросиих свиноматок, проведеие на 103599 поросних свиноматках та 1030116 поросятах.

В досл1дах використовуваяи в!русвакцину проти ЕВГС !з втама УН1В1 (6 серогрупа), розробяену та виготовлену в лабораторИ в1русолог!1 1ВИ (титр 106 ТЦД50/СИ3).

Вакцинац!ю, тварин проводили зг!дио "Тимчасово! настанови на застосуваиня в1русвакцмни проти ентеров1русного гастроентериту свиней 1з итама УН1В1", розроблено! в лабораторИ в1русолог!1 1ВН. Випадки, коли схема досл1д1в потребувала зм1ни строк!в, кратност! вакцинацП &бо дози вакцина, описан! у в1дпов!дних розд!лах дисертацИ.

При в!дбор1 кров!, молозива й молока тварин та при п1дготовц! цих матер1ал1в для досл!дхення використовуваяи загальноприйнят! методики. При проведена! роботи досл!дкено 1350 сироваток молозива ! молока. 143? сироваток кров! в1д свиноматок та 930 сироваток кров1 в1д поросят.

В1руси титрували в культур! кл!тин на проб1рках, титри розраховували за методом Р!да ! Менча й вираяали в тканевих цитопатичних доз в 1,0см3 (ТЦД50).

При постановц! реакцИ нейтрал!зац!1 використовували загальноприйняту методику. Реакц1ю ставили з пост!йною дозою вакцинного в!русу (100 ТЦД50/0 1). 0бл!к результат!в реакцП

проводили протягом 5 д!б за допомогою м!кроскопу. Титр антит1л у сироватках кров! й иолозива (молока) розраховували за методом Р1да 1 Менча 1 вирахали в одиницях логарифм!в з основою 2 або в розведеннях сироватки.

Статистичний анал1з результат1в досл1д!в проводили за методиками Сайдулд!яа Т.С. 1 Усовича А.Г. (визначення середньо! геометричио!, похибки середньо! геоиетрично1, коеф!ц!ента кореляцИ, середиього квадратичного в!дхилення).

РЕЗУЛЬТАТИ ДОШДЯЕНЬ ТА IX ОБГОВОРЕННЯ

. 1. Визначення оптимально! схеии вакцинаШ!.

В лабораторному експеримент! поствакцинальиий гуморальний 1мун!тет у свиноматок, яким вводили вакцину знутр1иньом'язево та перорально, вивчалн на семи поросних•свиноматках з благополучного по 1нфекц1йиим захворюванням господарства та !нтактних до ентеров!русу свиней 6-1 серогрупи. Вакцину свиноматкам вводили дв1ч! - за 15 та 9 д!б до опоросу. Свиноматкам NN0 1, 2, 3 вакцину давали перорально по 10 см3 на кояне введення, свиноматкам ЙНо 4, 5, 6 вакцину вводили внутр!иньом'язево по 5 см^ на кояну 1н'екц1в (титр 6,0 lg ТЦД 5оусиЗ). Свиноматка Но 7 була контрольною.

Протягом перших дев'яти дн!в щоденно, а пот1м на 11, 14, 21, 26 та 30 день п1сля першого введення вакцини у свиноматок вхдбирали кров для визначення р1вня в!руснейтрал!зуючих антит!л $ сироватц1. Одержан! дан! св!дчать про те, що поява антит!л у сироватц! кров! свиноматок, вакцинованих виутр!шньом'язево, встановлеиа на тре-.н добу в титрах 2,0 - 3,8 а у перорально

вакцинованих.свиноматок - на 8 добу (титр 2,0 Через 30 д!б

титри антит!л у сирпватц! кров! тварин досягли максимуму, але у вакцинованих внутр!пяьом'язево свиноматок вонй

були значно виц! - 9,4 - 9,6 проти 5,2 - 5,5 1оя2 у

свиноматок, вакцинованих пероральио.

Аналог1чн! досл1даення були проведен! в виробничих умовах у трьох • неблагополучних по ентеров1русному гастроентериту господарствах: колгосп1 "Б1льшовик" В1нницько1 облает!, колгосп! !м. Суворова Никола1всько1 област1 та в радгосп!-комб!нат! "Труб!зький" Ки1всько! облает!. Всього в цих господарствах було вакциновано пероральио ' 33 й внутр1иньом'язево - 337 поросних свиноматок. Вакцину 1м вводили за 30 та 15 д1б до опоросу в тих самих дозах.

Проведен! досл1д®ення показали, цо вказан! строки введения вакцини сприяють п!двищенню титр!в в!руснейтрал!зуючих антит!л у пероральио вакцинованих свиноматок на день опоросу до 7,0 У сироватц! кров! й до 8,6 в молозив!. У свиноматок,

вакцинованих внутр1ашьом'язево титри антиПл були вищимн - 9,5 1ог2 та 11,2 в!дпов!дно.

У контрольна груп!, яка складалась з 103 свиноматок, р1вень в!руснейтрал!зуючих антит!л у сироватц! кров! на протяз1 досл!ду ие зм!нювався ! був на р1вн! 4,0 iog 2-

Таким чином, двократна внутр!шньом'язева або пероральна вакцииацИ поросних . свиноматок забезпечують утворення в!руснейтрал!зух>чих антит1л в сироватках кров! та молозива вакцинованих свиноматок на день опоросу у високих титрах, внутр1шньом'язеве введения вакцини дае б!льший ефект в пор!внянн1 з пероральним.

Вивчення р!вня гуморального !иун!тету у поросних свиноматок при введенн1 р1зних доз вакцини й встановлення оптимально! дози було проведено в колгосп! "Б!льшовик" В!нницько1 облает!. Для цього сформували 6 груп свиноматок по в1с1м гол!в у кожн!й. Вакцину свиноматкам вводили внутр!вньом'язево за.30 та 15 д!б до

опоросу, але доза вакцини для коано1 групя була р!зною. Схема цього досл1ду та одержан! результат подан 1 в таблиц! 1.

Таблиця 1

Р!веиь антнт!я у сироватц! кров! вакцинованих свйноматок у заложиост! в!д дози вакцини.

(Х± и; п=3),

N Доза вакци- Титр антят!л в 1о^2

гру - ни на одну

пи 1н'екц1п до вакцинац11 перед 2-ю у день опоросу

(мл х ТЦД50 вакцивац1ею

I 5,0 х 106 5,5 ± 0,23 8,7 ± 0,30 10,6 * 0,32

II 2,0 х 106 5,2 ± 0,14 7,4 ± 0,28 7,7 ± 0,20

III 2,0 х 105 5,5 ± 0,30 7,5 ± 0,50 7,5 ± 0,40

IV 2,0 х 104 5,4 ± 0,20 7,5 ± 0,50 7,5 ± 0,32

V 2,0 х 103 5,5 ± 0,48 6,8 ± 0,23 6,3 ± 0,20

VI контроль 5,5 ± 0,40 5,5 * 0,45 5,4 ± 0,35

3 приведених даних видно, цо р1вень поствакцинального !мун!тету у вакцинованих тварин залежить в!д дози введено! вакцини. Найб1льи високий р!вень гуморальних антит!л у день опоросу (10,6 1ое2) встановлено в груп! свиноматок, яким ввели вакцину в доз! 5,0 х 106, цо в!дпов!дае 5000000 !нфекц!йних доз. Таким чином, ця доза вакцини визначена як найб1лыа оптимальна 1 покладена в основу ус!х схем вакцинац!! поросних свиноматок при проведенн1 подальших

д0сл!д1в.

/

Таблице 2,

Р!вень автит1л у сироватк&х кров1 та мояозива свиноматок, вакцинованих перед к!лькоиа опоросами.

(X ± п-3)

Свиноматки вакцино- ван! К-ть сви- | нонаток Титр аятиИл в день опоросу в 1о£ 2

1 в кров1 в молозив!

Перед двома

опоросами 8С 9,8 ± 0,24 10,8 ± 0,38

Перед 3-5

опоросами 217 10,8 ^ 0,42 11,6 ± 0,21

При виробничШ перев!рц1 вакцина встановлено, цо у свиноматок, як1 були аакцинован1 перед двоиа-трьома та б!лыяе опоросами п1дряд, титри антат1л в сироватках кров1 та молозива значно перевищують ц! показиики у свиноматок, вакцинованих перед перпим опоросом.

Якцо в день опоросу р1вень ангит1л у сироватц1 кров! периоопоросок становить б!ля 7,5 1ог2. а в молозив! 8,0 - 9,5 log2, то до наступного опоросу та вакцинац!1 антит!ла у них в кров! част!ие виявлявться в титрах 3,0 - 5,0 Вакцинац!я 1х,

перед другим опоросом стимулве п!двицення в!руснейтрал!зуючих антит1л у сироватц! кров! до 9,0-10,5 log2 ! *о 10,0-11,5 1оё2 в сироватц! молозива.

Досл1ди показали (таблиц* 2), що у свиноматок, яких вакцинувалн перед 3-5 пос*1довними опоросами, титр в1руснейтрал1зувчих антвт!л у сироватц1 кров! досягае в день опоросу 9-12 1 10-13 log2 у сироватц! молозива.

Результат» досл!джеиь доводить, що вакцинац!я поросних свиноматок перед 3-5 опоросами забезпечуе формуяання у них' б1льш иапруденого гуморального !муя!тету.

2. Дияам!ка в!руснейтрал1зуючих антит!л в сироватках кров! та молозива (молока) вакиииованих р!зними методами свиноматок.

У виробннчих досл1дах по вивченив дииам!ки в1руснейтрал!зуючих антит1я у сироватках кров! й молозива (молока) вакцинованих свиноматок^астосовували розроблену схему вакцинац11 тварин.

Кров в!д свиноматок в1дбирали через 7, 14, 21, 30, 60, 90 та 120 д!б п1сля первого введения вакдини для досл!дження в реакцП нейтрал!зац!1 тнтр!в в1руснейтрэ т1зуючих антит1л до вакцинного в1русу. Середн! дан! п'яти досл!д!в, в яких вивчали 24 сироватки кров! в!д свиноматок, вакцинованих внутр!шньом'язево та 18 сироваток кров! в!д перорально вакцинованих тварин, показан! на граф!ку I.

12 Граф1к 1.

Динам1ка в1руснейтрал1зуючих антнт1л у сироватц! кров! свиноматок, вакцинованих р!зними методами проти ЕВГС.

II

10 9

в

7 Ь

6 5

4|-

Э

г

I К

Титр ант»-тгл в

г=ио_

й

/

И ✓

До вак- 7 цинащ!

14 21 30 60 90 | | - в/и ^ - перорально

120 Дн! п!сля вшшшшвд*

Одержан! результаты св!дчать про те, цо п!к р!вня антит!л у тварин припадав иа 21-60 добу п!сля першого введения вакцини (в1дпов1дно на 5-45 добу п1сля другого введения вакцини). Причому, найб1льи висок! титри антит!л у свиноматок, вакцинованих внутр!юньом'язево, в середньому иа 4,0-5,0 н1в у

перорально вакцинованих тварин. Через 90 д!б титр антит1л в кров! свиноматок, знихуеться, проте у вакцинованих внутр!иньом'язево свиноматок, в!н залишаеться на високому р!вн1 (в,5 Нав1ть

через 120 д!б титр антит!л у кровЬ цих свиноматок становить в середньому 5,0 1о£2-

Таким чином, двокрагна внутр1иньом'язева або пероральна вакцинацП свиноматок проти ЕВГС забезпечують утворення в1руснейтрал1зуючих антитХл у сироватц1 кров1 свиноматок у високих титрах та зберекення 1х на протяз1 тривалого часу. При цьому внутр1шньом'язева вакцинац!я дае б1льший ефект н!ж пероральна.

В цих же господарствах були поставлен! досл!ди подо вивчення динам!ки в!руснейтрал!зуючих антит!л у сироватц! молозива та молока 75 свиноматок.

Було встановлено, що найб1льш високий титр 81руснейтрал1зуючих антит1л у молознв! вакцинованих свиноматок спостер1гаеться у день опоросу (б!ля 11,0 log2)■ Протягом наступного тижня в!н знижуеться в середньому на 2,5 1 на 14 добу п!сля опоросу не перевищуе

4,0 1о82, О через м!сяць 2,3 log2.

3. Дииам1ка та в!вень колостральиого 1иун!тегу у поросят, як! раролилися в!д вакцинованих свиноматок,

В досл!дах по вивченню динам!ки колостральних антит!л використовували поросят в1д свиноматок, вакцинованих дворазово внутр!аньом'язево, за 30 та 15 д1б до опоросу, в доз! по 5,0 см3 (титр 6,0 1й ТЦД 50/смЗ). Кров в!д поррсят в1дбирали до ссання ними молозива, а пот1м у р!зн! строки п1сля народвення.

Л!д час досл!дження сироватки кров! п'яти новонародаених поросят, отримано! до ссання ними молозива, антит1л проти ЕВГС не виявлено, цо св!дчить про в!дсутн1сть трансплацентарно! !х передач!. У сироватц! кров1 поросят, котр! ссали молозиво вакцинованих свиноматок, ангит!ла проти ЕВГС у найб1льш високому титр! виявлен! в одноденному в!ц! (7,5-9,2 У 10-20 -

денному в1ц! середн!й титр складае 7,2 log2, у м1сячному в1ц1 -6,4 1ой2, у двом!сячноиу - 4,2 1о£2, У трьохм!сячиому - 2,1

У трьох аналог!чних доел!дах, проведених у виробничнх уковах, було вивчено 32 сироватки кров! в1д поросят, иародженнх в1д вакцинованих свиноматок.

Результати досл1д1в Щдтвердкують, цо найвищих показник1в титри антиг1л у сиравагц1 «ров! поросят, як 1 були одержан1 в!д вакцинованих свиноматок, досягають у перв! дн! «иття - до 10,6 а в м!сячному й двом1сячному в1ц!, коли в государствах звичайно проводять в1длучення тварин, титри антит!л у сироватц! кров! поросят складають в середньому 5,8 1о£2 1 4,2 в!дпов!дно.

В процес! роботи нами встановлеио, цо р1вень антвт!л у сироватц! кров! новонароджених поросят п!сля ссания молозива в перший день та на протяз! всього п!дсисного периоду залежнть в1д р!вня в1руснейтрал!зуючих антит!л у сироватц! кров! й молозива свиноматок в день опоросу.

В реакцП иейтрал!зац11 досл!джено 188 сироваток кров1 й молозива в1д свиноматок, яких вакцинували перед двона опоросами, а також в1д вакцинованих багаторазово (перед 3-5 та б!льше опоросами), та 340 сироваток кров!.в!д поросят р!зного в1ку, як! народилися в1д цих свиноматок. Результати досл1д!в викладен! в таблиц! 3.

3 лриведених данях видно, цо спостер!гаеться явна залежн!сть р1вня антит!л у сироватц! кров! поросят в!д р!вня антит1л у сироватц! кров! та молозива свиноматок у день опоросу. Напру«ен!сть та тривал!сть колострального !мун!тету у поросят зросгае з! зб1льшенням титру в!руснейтрал!зуючих антит1л у сироватках кров! й молозива свиноматок у день опоросу.

Таблицу 3

Залешисть р1вня антитхл у сироватцi Rposi поросят вхд pisw алтитм у сяроштках кров! та молозива вахщнованих свиноматок

/ Х±яг in»3 /

Титри антитхл в

y свпноматох в день : , У ПОПОСЯТ ТЭ13НОГО BÍRY

orto то су : к по в : г.тозиво : I-дн. : 4-дн. i 14-да. : 21-дн. : 30-да. : 60-дн. : : 90-дн.

7,0*0,48 9,0*0,25 7,0*0,15 6,1*0,20 6,0*0,23 5,7*0,31 3,0*0,40 2,5*0,33 9,5*0,32 10,0*0,23 8,3*0,21 8,0*0,54 6,8*0,35 6,0*0,40 4,3*0,15 3,0*0,50 11,0*0,31 12,0*0,52 11,8*0,32 11,7*0,54 8,0*0,42 7,8*0,32 5,8*0,42 . 3,5*0,40 2,5*0,23

4. Вплив пасивного !нун!тету у поросят в П9Р1РД в1ДЯУЧевМ на

фоомування дивного 1нун!тету,_Й9СТВЖЧВЯШЯИЙ—1нУВ1т, У

породят та ддрршувдн! ■

Досл1д по вивченнп впливу иолостральиого 1муи!тету на фориування активного !мун!тету у поросят в пер!од в1длучення оляхои 1х вакцинацП проведений в радгосп1-комб!иат! "Калнтянський", де в!длучения поросят проводять у 26-денному, в1ц!.

Сфорнували чотиря групя поросят в!д вакцинованих свиноматок по 30 гол1в у кошн1й груп1, яких вакцинували в р1зному в!ц1 та за р1зними схемами. Схеми досл!д1в та одержан! результате вказан! в таблиц! 4.

Таблиця 4.

Вплив антит!л молозива на створення активного 1мун1тету проти ЕВГС у поросят в пьр!од в1длучення.

(п-3)

N0 груш:

Кратшсть аакцинащГ

В1к поросят п!д час вак-цинаца (дн!)

Титр антит1л у сироватц! кров! <в код)

до вакцинацП

ЯИ1В п!сля друго! вакцинацП

14

30

60

I 2-разова 18 та 25 9,0±0,14 4,4±0,21 3,8±0,31 1,5±0,52

II 1-разова 25 7,0±0,32 3,6±0,24 3,9±0,26 3,1+0,10

III 2-рй.зова 25 та 30 7,5±0,28 4,4±0,24 4,3±0,12 3,5±0,21

Х±о 7,8±0,22 4,35±0,23 4,0±0,23 2,85±0,27

IV контроль

7,7±0,12 4,7±0,20 4,0±0,20 3,3±0,23

3 пряведених даних видно, цо спостер!гаеться тенденЩя до р!зкого знивення татру колостральяих антит1л у поросят в пер1од в1длучення як у контрольна, так i в досл!дних трупах.

0триман1 результата Шдтвердвують, що вакцинац!я поросят на в1лученн1, на фон! колострального !мун!тету, неефективна та недоЩльна, тому що в!дбуваеться нейтрал1зац1я вакцинного sipycy колостральними антит1лами в кров! досл1дних поросят.

Поствакцинальний 1мун!тет у поросят на дорочуванн! вивчали на 10 поросятах у в!ц! 4-5 м!сяц!в, як! народилися в!д вакцинованих проти ЕВГС свиноматок. Вакцину проти ЕВГС !з ктаму УН1В1 ввели поросятам одноразово внутр1шньом*язево в доз! 5 см3 (титр 6,0 lg ТЦД 50/см3^- КР°В У тварин була в!д!брана до вакцинац!'!, а пот!м на 14, 21, 30, 90 та 150 добу п!сля введения вакцини. Середн! дан! подан1 в таблиц! 5.

Таблиця 5.

В1руснейтрал!зуюча актиан!сть сироваткн кров1 4-5 и!сячннх п!дсвинк!в, вакцинованих проти ЕВГС.

Х±п; п=3.

Титри в!руснейтрал!зуючкх антит!л (в log2)

до вакци- Дн! п1сля вакцинац!1

нац! 1

14 21 : 30 : 90 150

2,4±0,14 4,46*0,21 5,94±0,18 7,56±0,25 8,3±0,31 6,2±0,23

'j

Одержан! дан! св!дчать, що вже через 14 д1б п!сля вакцинацИ титри в!руснейтрал5^уючих антит!л у сироватц! кров! поросят п1двищилися у середньону на 2,0 logj ! 1х зростання в1дм!чаеться

до дев'яносто! доби (до 6,3 log2). Через 150 д1б титри антит1д трохи зменшуються, але заливаютьея на досгатньо високому р!вв1 <6,2 log 2).

Таким чином, одноразова внутр!иньом'язева вакцинац1я поросят у в!ц1 4-5 м1с, як! народилися в1д вакцинованих проти ЕВГС свиноматок, на фон! згасаючого колострального 1мун1тету, стимулюе активну !мунну в!дпов1дь оргаШзну тварин достатньо1 напруженост! й тривалост!.

5. ЕФективн!сть_38РТ0СУВЙВНЯ_ВИШНИ, ПРРТИ_ЕВГС_В

неблагополучиях тПРДаРСТВаХ.

Вакцина проти ентеров!русиого гастроентериту свиней.!з втамму УН1В1 з позитив»им ефектом застосована в ряд! неблагополучних свинарських господарств, в яких захворювання гастроентеритои було ет1олог!чно пов'яэане з ентеров!русом свиней 6 серогрупи. Ефективн1сть вакцини оц!нювали за показниками збереиеност! поросят при в!длучен«1.

У деяких господарствах п1д час спалаху в!русного гастроентериту загнбель поросят-сисуи1в у перш! 10-15 д1б життя була дуже великое. Наприклад, у радгосп1-техн1кум1 "Бобровицький" Черн!г!всько1 облает! загнбель поросят в р!зн1 роки складала 57,6> 81,6Х, у колгосп! "Б!льшовик" В!нницько1 облает! - 51,8-60,3%, у радгосп!-коиб!нат! "Труб!зький" - 27,6-40,ОХ. Вс! л!кувальн! та пррф!лактичн1 м!роириемства, як! проводились у цих господарствах, позитивного ефекту не давали. Однак, вже п1сля проведения первого туру вакцинац!! поросних свиноматок проти ЕВГС, ситуац!я в . господарствах покрасилась, зиеншилась загнбель новонароджених поросят. Систематична вакцинац!я маточного й ремонтного погол!в'я на протяз! к!лькох poKie дозволила оздоровити

g о

lasa '

5 Я92

; д wn

Л ¿ К

с r»

I

le

s ° &§•

« ß • •

• S"

ki

v.

03 PI „ V*.

^ ^ • O) to

В H S И N

(M

» *

g 9 *

s

со

m со

и»

ю

8

o> Й

a

in to

g

о со

«

M л N

www t>

с-

9

я

tÄ 1-4 ъ». f.

w

a» co •

О M « co

w m M M

■w

tí

0) V*. •

M C- О со О

s M со M

VI «

CT) •> g о » IS <0 en «

СП ■cil w Ю

05 M СП M 00

1-1 f-

О Vi 1Л о я о « • с- <г>

03

SÎ

со

аз ю

in со

со м

Я

IN СО

СО

господарства в1д ентеров!русного гастроентериту свиней, досягти в них ст!йкого благополуччя по в!дношенню до !нфекц11, эабезпечити внсоку зберевеи!сть новонароджених поросят.

Дан! ефективност! застосувания вакцняи наводиться на приклад! трьох господарств, в як их частина свиноматок вакцикоаана внутр!шньом'язево, частина - перорально- Результати подан! в таблиц! 6.

Таким чином, в результат! проведено! роботи, показана досить висока ефективн!сть вакцини проти ЕВГС !з штану УН1В1 в умовах господарств, неблагополучних по ентеров!русному гастроентериту свиней.

ВИСИОВКИ

1. Експерииентальио розроблена схема застосувания вакцини: двократне внутр1шньом'язеве або пероральне введения за 30 та 15 д!б до опорооу в доз! по 5,0 см3 або 10,0 см3 в1дпов1дно (титр 6,0 Н ТЦД 50/см3)-

2. Внутр1шньом'язеве введения вакциии за розробленою схемою обумовлюе високий р!вень в!руснейтрал1зуючих аитит!л у сироватц1 кров! вакцинованих свиноматок. Титр 1х у тварин на день опоросу становиты 7,0-10,5 1оЕ2. Б!льш висок! титри антиИл - 9,0-12,0 1оЕ2 встановлен! у свиноматок п!сля 1х багаторазово! вакцинацП (перед ¿-5 посл!довними опоросами).

3. Пероральна вакцинация поросних свиноматок стимулюе достатн!й, лроте пор!вкяно менший, н!ж внутр!шньом'язева, синтез в!руснейтрал1зуючих антит1л. Титр 1х у сироватц! кров1 и- день опоросу становить 5,4-7,0 log2.

4. У молозив!- вакцинованих двократно внутр!шньом'язево або перорально свиноматок найбиьш високий р1вень в!руснейтрал!зуючих

антит!л виявлено в титрах 8,6-11,2 log2 у першу добу п!сля опоросу. У свиноматок, вакцинованих перед 3-5 посл!довними опоросами титри в1руснейтрал1зуючих антиг1л сгановлять 10,0-13,0 log2• Через м!сяць титр аитит1л у молоц1 не перевищуе 2,0-3,0

5. При вивченн1 динам!ки в1руснейтрал!зуючих антит!л у сироватц! кров! вакцинованих внутр!шньом'язэво свиноматок поява 1х встановлена на 3 добу (2,0-3,8 log2), максимальннй вм1ст - на 2130 добу (8,8-10,66 log2). Через 3 та 4 MicHUi п!сля вакцинацП антит!ла в сироватц! кров! свиней виявлялись в середньому в титрах 8,5 та 5,0 log 2 в!дпов1дно.

6. Поява в!руснейтрал!зуючих ант'ит!л у сироватц! кров1 вакцинованих перорально свиней встановлена на 8 добу (2,0 log2), максимальннй вм!ст - на 21-30 добу (5,4-5,5 log2). Через 3 та 4 н!сяц! антит!ла в сироватц! кров! свиней виявлялись в середньому в титрах 3,3 та 2,2 log2 В1дпов!дно.

7. У новонародхених поросят максимальннй р1вень в1руснейтрал!зуючих антит!л у сироватц! кров! встановленнй в першу добу п!сля ссання молозива в титрах 7,5-10,6 log2, у н!сячному в!ц! антит!ла виявлен! в титрах 5,8-7,2 log2, у двон!сячному -3,3-5,0 log2, трьохм!сячному - 2,0-2,5 log2.

8. Встановлена пряма залежи!сть напруаеност! колострального !мун!тету в новонароджених поросят в!д р!вня антит!л у сироватц! кров1 й молозива свиноматок. Чин виц! титрн в!руснейтрал!зувчих антит!л у свиноматок у день опоросу в сироватц! кров! й молозива, тим вищий р!вень 81руснейтрал!зуючих антит!я у сироватц! кров1 поросят протягом уеъого п!дсасного пер!оду.

9. Вакцинац!я поросят в пер!од в!длучення неафективна й тому недоц1льна, тому то в цей пер!од у них ще збер!гаються колостральн! антит!ла на достатвьо високому р!вн! (5,8-7,5 log2).

Вакцинувати поросят сл1д у в!ц! 4-5 м!с на фон1 згасамчого колострального !мун!тету (0-3,0 log2).

10. При виробнич!й перев!рц1 ефективност! в1русвакцшш проти ЕВГС 1з итаму УН1В1 всгановлена, що внутр!шньом'язеве та пероральне 11 введения стимулюе формування напруиекого гуморального 1мун!тету у поросних свиноматок та колострального 1мун!тету у новонародхених поросят, що забезпечуе високий pisaiib ix захисту в1д захворювання та загибел!. Збережен1сть поросят, ян! иародилися в!д вакцинованих внутр!шньом'язево свиноматок в пер1од з!длучення досягас 85,9-94,а в1д перорально вакцинованих - 70-Ё9,3%, Збережен1сть поросят у контрол1 становила 27,7-77,9Х,

ПРАКТИЧН1 ПР0П03ИЦ11

Запропонована схема вакцинацП поросних свиноматок проти ЕВГС - дворазово внутр!шньом'язево або перорально за 30 та 15 д16 до опоросу в доз! по 5,0 см3 та 10,0 см3 в1дпов!дно (титр 6,0 lg ТЦД 50/сиЗ) - гарантуе створення напруженого гуморального iuynlreTy у поросних свиноматок та колострального 1мун1гету у иовонароджених поросят, який захищае 1х в1д захворювання та загибел!, п1двищуе 1х збереаеи!сть у неблагополучиях ко ЕВГС сзинарських господарствах.

Розроблена науково-техн!чна докумеятац!я по в1русвакц>:н1 проти ЕВГС !з штаму УН1В1 використовуеться при 11 виготовлеин! в Хиститут! ветеринарно1 медицина ! може бути використана в умоаах промислового виробництва вакциии.

ПЕРЕЛ1К Р0Б1Т, ЯК1 БУЛИ 0ПШ1К0ВАН1 ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦП.

1. Тацкая В.11., Вабищевич Ф.С., Остапенко В.53. Иммунобиологические свойства энтеровирусов и их этиологически;: ■ роль в возникновении гастроэнтеритов у свиней // Сб. научных

труден: Научные основы профилактики и борьбы с заболеваниями сельскохозяйственных ннвотных. - Киев, 1987. - С. 67-72.

2. Собко A.I., Квачов В.Г., Тацька В.Н., Остапенко В.П., Флорентьев В.П., Яворський А.Е., Гогоман I.B. Вивчення in vitro токсичност1 1 противipycHol активност1 npenapaTia на ochobI ацикл!чних нуклеозид!в//В1сник с1льськогосподарсько1 науки. -1988. - Но 10. - G. 49-51.

3. Ваб1щевич Ф.С., Тацька В.Н., Иакарскко О.В., Остапенко В. П. Роль ветеринарно-сан1тарних заход!в та спецнф1чно1 проф!лактики в збережекк1 молодняка свиней при в1русних гастроентеритах// Зб1рник статей науково-практично! конференцП "Збережен1сть молодняка с!льськогосподарських тварин - запорука розвятку тварккництва Укра1нв. - Харк1в, 1994. - С.25-26.

4. Тацька В.Н., Остапенко В.П., Макаренко О.В. Проф1лактика ентеров1русного гастроентериту у свиней // МатерХали • респ.. науково-пракг. конф. "Наукове забезпечеяня агропромислового комплексу УРСР". - Б. Церква, 1990. - С.90-91.

5. Собко А.И., Тацкая В.II., Демченко М.П., Остапенко В П. Передача антител протиз эвтеровирусного гастроэнтерита свиней через молозиво и молоко // Тезисы докл. конф. "Ветеринарные проблемы промышленного свиноводства". - Киев, 1983. - С. 25-25.

6. Собко А.И., Демченко М.П., Макаренко A.B., Тацкая В.Н., Остапенко В.П. Влияние антител молозива вакцинированных против энтеровирусного гастроэнтерита свиноматок на иммунизацию поросят // Тезисы докл. конф. "Ветеринарные проблемы промышленного свиноводства". - Киев, 1983. - С. 41-43.

7. Собко А.И., Тацкая В.Н., Остапенко В.П. Чувствительность энтеровируса свиней (штамм УНИВЙ) к желудочному соку // Тезисы докл. меяреспубл. конф. "Вопросы групповой профилактики заболеваний животных и птиц". - Вильнюс, 1987. - С.72-74.

3. Собко А.И., Тацкая В.Н., Иоздрин В.И., Квачев В.Г., Остапенко В.П. Повышение урожая энтеропатогеннкх вирусов животных в культуре клеток // Тезисы докл. Республ. научн. конф. "Состояние и перспективы развития биотехнологии в животноводстве." - Харьков, 1988. - С.250.

24 SUMMARY

Ostapenko Valentina Petrovna.

Postvaccinal Immunity against enterovlral gastroenteritis in different age pigs.

The nanuscript rights. For the application of the Candidate of Veterinary Science degree.

16.00.03 - Veterinary Microbiology, Virology, Epizootology, Immunology and Hycology.

National Agrar University, Kiev, 1995.

Hain ideas: the induction of immunity and postvaccinal imnune response study in different age pigs vaccinated against enterovlral gastroenteritis using ONIVI strain.

Results: The scheme for pregnant sows vaccination »as developed with the following study of the postvaccinal immunity in sows and colostral immunity in piglets. The efficacy of the vaccine against enteroviral gastroenteritis was shown in faras infected with swine enterovirus of 6 serogroup.

/ . АННОТАЦИЯ

Остапенко Валентина Петровна.

Поствакцинальный иммунитет против энтеровирусного гастроэнтерита у свикей различного возраста.

На правах рукописи. На соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук.

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, иммунология и микология.

Национальный Аграрный Университет, г. Киев, 1995.

Основные идеи: Изучение напряженности поствакцинального иммунитета у свиней различных возрастных групп при применении вакцины 'против энтеровирусного гастроэнтерита свиней из штамма УНИВИ.

Результаты: Разработана схема вакцинации супоросных свиноматок, изучен поствакцинальный иммунитет у свиноматок и колостралышй иммунитет у поросят, показана эффективность вакцины против ЭВГС в неблагополучных хозяйствах, где заболевание свиней гастроэнтеритом этиологически связано с энтеровирусом свиней 6 серогруппы.

Ключов! слова: ентеров1русний гастроентерит, л кцина, iMyiiiTeT, сироватка, титр, антит1ло, свиноматка, поросята, вакцинаЩя. ,

.Ки1в ДРУК.ФПУ 3ам.1е31-10а. • )