Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфофункциональные изменения печени крыс при остром токсическом отравлении и способы их коррекции

Актуальность темы. В современных условиях в связи с широким использованием антибиотиков в медицине, ветеринарии, сельском хозяйстве, а также рядом других неблагоприятных факторов (загрязнение биосферы промышленными отходами, включая и радиоактивные вещества) наметился сдвиг в микробной экологии человека и животных. Проблема дисбактериозов в последние годы привлекает все большее внимание в клинике самых различных заболеваний [15, 113].

Традиционные подходы в последние десятилетия к этиопатогенезу многих распространенных болезней человека и животных не дают новых конструктивных идей, позволяющих разрабатывать высокоэффективные средства и методы профилактики и лечения различных патологических состояний и синдромов [115].

Микрофлора желудочно-кишечного тракта и печень - это две основных детоксикационных системы, осуществляющих защиту организма от токсических соединений посредством окислительных реакций в печени, или гидролитических и восстановительных процессов в кишечнике [114]. Заболевания органов гепатобилиарной системы сопровождаются развитием дисбиотических изменений в желудочно-кишечном тракте. В этих условиях кишечная микрофлора не может выполнять присущие ей функции, что усугубляет нагрузку на печень [13, 18, 74, 146, 147]. Рассмотренные схемы сопряженности патологических процессов нацеливают на комплексный подход в их профилактике и лечении с учетом микроэкологических нарушений.

В последние годы в медицине и ветеринарии все шире вводятся средства функционального назначения и пробиотики. Хотя точные механизмы участия представителей микрофлоры хозяина и их метаболитов в этиопатогенезе многих болезней и патологических синдромов до настоящего времени окончательно не установлены, микроэкологические подходы к раскрытию сути их развития явились отправной точкой конструирования принципиально новых лекарственных препаратов (про- , пре- и симбиотиков) и продуктов функционального питания для профилактики и лечения широко распространенных болезней человека и животных. Благоприятный эффект этих средств проявляется в повышении устойчивости организма к воздействию патогенных микроорганизмов и эндотоксинов, предотвращении их транслокации из пищеварительного, дыхательного и урогенитального трактов в лимфатические узлы, кровь, селезенку, печень, в восстановлении структуры и функции биопленки [113].

Есть все основания утверждать, что в будущем пробиотики, в первую очередь продукты функционального питания в значительной степени потеснят на рынке традиционные фармакологические препараты, особенно те из них, которые применяют с профилактической целью [115].

Все вышеуказанное свидетельствует о том, что профилактика и комплексная терапия (включающая пробиотики) различных патологических состояний систем и функций организма с учетом микроэкологических нарушений кишечника в настоящее время становится весьма актуальной.

Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований явилось изучение особенностей структурно-функциональных повреждений печени и механизмов формирования микроэкологических нарушений в кишечнике при остром токсическом гепатите, а также обоснование нового подхода к их коррекции бифидосодержащими средствами функционального назначения.

Для достижения указанной цели были определены следующие задачи:

1) изучение морфофункциональных повреждений печени и микроэкологических нарушений в кишечнике при остром токсическом отравлении печени;

2) активизация сухих культур бифидобактерий, с подбором стимулятора их роста на молочной основе; конструирование бифидосодержащего средства и его биохимическая характеристика;

3) оценка влияния бифидосодержащего и фитобактериального средств на морфофункциональное состояние печени белых крыс и на состав кишечной микрофлоры при остром токсическом отравлении печени, вызванном четыреххлористым углеродом;

4) исследования микроэкологических нарушений кишечника у детей с различными патологиями.

Научная новизна работы. Впервые изучено влияние фитобактериального и бифидосодержащего средств на течение острого токсического гепатита. Показано, что курсовое введение этих средств в экспериментально-терапевтических дозах улучшает функциональное состояние печени, которое характеризуется торможением процессов перекисного окисления липидов в биологических мембранах гепатоцитов, снижением проявлений синдромов цитолиза, холестаза, воспалительной реакции. Установлено, что острые токсические повреждения печени белых крыс вызывают дисбиотические нарушения кишечной микрофлоры. Новым подходом в коррекции токсических повреждений печени, сопровождающихся дисбактериозами, является комплексная терапия с использованием пробиотиков на основе бифидобактерий и сухих растительных экстрактов.

Впервые выявлено, что водорастворимые экстракты корней солодки голой и марены сердцелистной оказывают стимулирующее действие на рост бифидобактерий на молочной основе. Установлено, что данные растительные экстракты оказывают благоприятное действие на биохимическую активность бифидобактерий. Впервые выявлена антагонистическая активность бифидобактерий в сочетании с экстрактом корня солодки и плодов рябины обыкновенной в отношении S.aureus 209 р, Ps.aeruginosa АТТС 1045, Pr.vulgaris 50.

Установлено, что тяжелое течение респираторных заболеваний и алергодерматозы у детей сопровождаются микроэкологическими нарушениями в кишечнике. Комплексная терапия различных патологических состояний организма, включающая наряду с химиотерапией средство функционального назначения с бифидобактериями, наиболее целесообразна. Это отвечает современным принципам воздействия на патологический процесс.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. При остром токсическом гепатите у белых крыс возникают изменения деструктивного характера в печени с нарушениями функций печени по биохимическим показателям. Бифидосодержащее и фитобактериальное средства обладают гепатопротекторными свойствами, которые проявляются в нормализации структурной организации печени, в ингибировании процессов перекисного окисления липидов, стабилизации биологических мембран гепатоцитов, снижении явлений холестаза, воспалительной реакции.

2. Состояние систем и функций макроорганизма и состояние микробиоценоза кишечника взаимозависимы. Морфофункциональные изменения печени сопровождаются дисбактериозами кишечника. Бифидосодержащие средства нормализуют микробиоценоз кишечника. Терапевтическая эффективность исследуемого пробиотика при дисбактериозах определяется тем, что физиологически активные микробные клетки бифидобактерий при прямом контакте с биопленкой хозяина, обладают способностью образовывать колонии в кишечнике, чем обеспечивают защитный барьер против патогенных микроорганизмов и продуктов их метаболизма.

3. Углеводные компоненты растительных экстрактов корней солодки голой и марены сердцелистной обладают свойствами, стимулирующими рост бифидобактерий, что обеспечивает самовоспроизведение бифидобактерий на молочной основе, и упрощает процесс конструирования бифидосодержащего средства.

4. Активизированные культуры бифидобактерий обладают антагонистическими свойствами по отношению к условно-патогенным и патогенным микроорганизмам. Также они обладают выраженной протеолитической активностью.

Практическая значимость. Полученные данные по механизму действия бифидосодержащих и фитобактериальных средств позволяют конструировать новые биологические препараты, нормализующие функциональное состояние печени и кишечную микрофлору. Проведенные исследования по бифидогенным свойствам растительных экстрактов солодки голой и марены сердцелистной позволяют упростить процесс конструирования бифидосодержащего средства функционального назначения, обладающего гепатозащитной активностью.

Бифидосодержащее средство включено в комплексное лечение детей в детском отделении республиканской больницы им. Н.А.Семашко. Назначение детям средства функционального назначения с физиологически активными микробными клетками бифидобактерий положительно влияет на дисбиотически измененную микрофлору, при этом наблюдается повышение количества бифидобактерий и снижение пула условно-патогенных бактерий.

На способ культивирования бифидобактерий в молоке получен патент РФ N 1813237; положительное решение о выдаче патента на изобретение N 5032642/13 по способу производства кисломолочного продукта «Кобиф» для детей раннего возраста.

Апробация работы.

Материалы исследования и основные положения работы обсуждались на:

- 2 Национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 1996г.)

- научно-практической конференции терапевтов Бурятии (Улан-Удэ,1997);

2-м Международном семинаре «Традиционная медицина: теоретические и практические аспекты: (Улан-Удэ, 1998);

- научно-практической конференции «Биологически активные добавки в профилактике заболеваний» (Улан-Удэ, 1999г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 научных работы. Получен патент РФ на изобретение; положительное решение формальной экспертизы на выдачу патента РФ на «Способ получения кисломолочного продукта Кобиф для питания детей раннего возраста».

Работа выполнена в соответствии с научным разделом государственной программы развития индустрии детского питания в РСФСР, (Пост. СМ РСФСР № 70 от 31.01.91.), федеральной целевой программы 12.5 «Развитие индустрии детского питания в РФ на 1994-95 гг., государственной программы развития производства продуктов детского питания в Республике Бурятия на 1993-95 гг. (Пост. СМ РБ № 385 от 30.08.93).

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций, заключения, списка использованной литературы, включающего 182 работы, из них 62 зарубежных авторов, 1 приложения. Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста, иллюстрирована 23 таблицами, 10 микрофотографиями.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Заболевания органов гепатобилиарной системы сопровождаются дисбиотическими изменениями в желудочно-кишечном тракте, что нацеливает на комплексный подход к решению вопросов, связанных с терапией повреждений печени.

Курсовое введение фитобактериального и бифидосодержащего средств на молочной основе в экспериментально-терапевтических дозах на фоне повреждения печени четыреххлористым углеродом оказывало выраженное гепатозащитное действие, которое характеризовалось нормализацией структурно-функционального состояния печени и кишечника.

Основными механизмами, определяющими терапевтическую эффективность исследуемых пробиотиков, являются торможение процессов перекисного окисления липидов и снижение явлений цитолиза, воспалительной реакции печени, а также восстановление дисбиотически измененной микрофлоры толстого кишечника.

Клинические исследования показали, что продукт функционального назначения с бифидобактериями играет положительную роль в комплексной терапии различных патологий, т.к. активизированные бифидобактерии способны быстро приживаться в кишечнике, образуя колонии, которые препятствуют заселению кишечника условно-патогенными микробами, что предотвращает бактериальную эндотоксинемию, которая должна быть отнесена к факторам риска по развитию инфекционных и иммунопатологических процессов.

Бифидосодержащие средства успешно и широко применяются в клинической практике. Результаты клинико-физиологических исследований показывают эффективность предложенных средств при комплексном лечении разных заболеваний.

Высокая встречаемость дисбактериозов кишечника различной степени при разных заболеваниях диктует необходимость совершенствования методов профилактики и лечения патологий с учетом состояния нормобиоценоза кишечника человека и животных.

В соответствии с этим разработаны бифидосодержащее и фитобактериальное средства на молочной основе, предназначенные для профилактики и комплексной терапии разных заболеваний, как правило сопровождающихся дисбактериозами кишечника.

Для конструирования средства функционального назначения на молочной основе были использованы бифидобактерии шт. В.Ы/к1ит 791, В.Ы/1с1ит 1, ВЛоп^т В379 Ми экстракт плодов рябины обыкновенной. Для обеспечения самовоспроизводства бифидобактерий на молочной основе были использованы в качестве стимуляторов роста экстракты корней и корневищ солодки голой и марены сердцелистной.

Бифидосодержащее средство функционального назначения обладает высокими диетическими и терапевтическими свойствами благодаря содержанию ряда биологически-активных соединений, микро- и макроэлементов, белков в легкоусвояемой форме, бифидобактерий в активной форме и поддержанию колонизационной резистентости кишечника.

Возможность производства бифидосодержащего средства и фитобактериального средства на молочной основе в больших объемах определяют значение этих средств, как массового средства профилактики и лечения органов гепатобилиарной системы и дисбактериозов кишечника.