Автореферат и диссертация по медицине (14.00.27) на тему:Коррекция морфофункциональных нарушений печени в комплексном хирургическом лечении ее токсических поражений (экспериментально-клиническое исследование)

На правах рукописи

БАЙМАТОВ НИКОЛАЙ ВАЛЕРЬЕВИЧ

Коррекция морфофункциональных нарушений печени в комплексном хирургическом лечении её токсических поражений (зкеиериментально-клиническов исследование) 14.00.27 - хирургия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Уфа - 2007

003159365

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Нартайлаков Мажит Ахметович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Хувафин Саубан Нурлыгаинович

кандидат медицинских наук Бакиров Салават Хамиду плович

Ведущая организация ГОУ ВПО «Тюменская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита состоится «_»_2007 года в часов на

заседании диссертационного совета Д 208 006 02 при ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (450000, г Уфа, ул Ленина, 3)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Автореферат разослан « З.к » ¿ХиТ/г-^-Я 2007 г

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор

РТ Нигматуллин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы За последние годы возрос интерес исследователей к изучению воздействия ксенобиотиков на организм животных и человека (Фишер А, 1961, Владимиров ЮА, Арчаков АИ, 1972, Блюгер АФ, 1975, Губский ЮИ, 1984, 1989, Новиков КН, 1985, Иодымова С Д ,1993, Дунаев П В , 1999, Савлуков А И., 2000, Мышкин В А , 2001, Волкова Е С , 2004, Хуснутдинов Т Р , 2005, гнптегтап Н1, 1978)

Разносторонне изучается патология печени в Башкирском республиканском центре хирургической гепатологии (Галеев М А, 2000, Сафин И А, 2002, Нартайлаков МА, 1994-2005) Предложены методы прогнозирования исходов лечения печеночной патологии различной этиологии (Багаманова Р К , Лутфарахманов И И , 2000, Богданов Е Н , 2000, Валеев И Г с соавт, 2000, Галимов О В с соавт, 2000, Плечев В В с соавт, 2002; Тимербулатов В М, 2002)

Актуален вопрос применения антиоксидантов с широким спектром фармакологической активности, оказывающих терапевтический эффект и положительное влияние на сопряженные с процессами перекисиого окисления липидов у больных с гепатитами токсической и вирусной этиологии (Фархутдинов Р Р , 2000, Савлуков А И, Хуснутдинов Т.Р , 2005) Особенно это относится к методам хирургической коррекции заболеваний печени, что послужило основанием для продолжения исследований морфофункциональных нарушений печени и путей их коррекции в экспериментальных и клинических условиях

Цель работы. Клинико-экспериментальное обоснование коррекции морфофункциональных нарушений внутренних органов и свободно-радикального окисления в комплексе хирургического лечения токсического поражения печени

Задачи исследования:

1 Изучить морфологические изменения во внутренних органах крыс при экспериментальной тетрахлорметановой интоксикации

2 Изучить в эксперименте состоящие свободно-радикального окисления в печени при ее токсическом поражении и возможности его коррекции

3 Исследовать влияние на морфофункционапьное состояние внутренних органов эксперименальных животных* гепатопротекторов (отвара расторопши, карсила, оксиметилурацила) при тетрахлорметановой интоксикации

4 Оценить возможности исследования хемилюминесценщга крови и гомогената печени в клинике в определении тяжести токсического поражения печени и эффективности его комплексного хирургического лечения

5 Провести анализ эффективности клинического применения отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила в комплексе хирургического лечения больных с токсическим поражением печени

Научная новизна работы.

Впервые с использованием морфологических и биофизических методов исследования показаны сочетанные морфофункциональные изменения в организме крыс при экспериментальном тетрахлорметановом токсикозе, проявляющиеся нарушением структуры и функции внутренних органов Эффективность лечения токсических поражений печени предложено оценивать по регистрации хемилюминесценции крови или пунктата печени с определением активных форм кислорода и/или перекиского окисления липидов Показано, что при экспериментальном отравлении животаьи тетрахлорметаном оксиметилурацил по антиоксидантным свойствам превосходит отвар расторопши и карсил Экспериментально на животных обосновано, что при коррекции токсических поражений печени следует учитывать сочетанные нарушения в почках, селезенке, легких, желудке ¥

кишечнике Рекомендован новый подход в комплексном хирургическом лечении токсического поражения печени, включающий хирургическую коррекцию патогенетического фактора токсического гепатита и применение в раннем послеоперационном периоде отвара расторопши, карсила и оксимет илурацила

Практическая ценность работы. Впервые при токсическом поражении печени установлены изменения в организме человека активных форм кислорода, что является одним из ключевых моментов патогенетических изменений и в выборе метода их коррекции Исполыованные для комплексной терапии растительные (расторопша пятнистая, карсил) и синтетический (оксиметилурацил) препараты обладают разной гепатотропной и антиоксидантной активностью Полученные данные расширяют и дополняют тактические приемы при консервативной и хирургической коррекции токсического поражения печени

Внедрение. Результаты работы внедрены в комплекс лечения больных с токсическим поражением в Республиканском центре хирургической гепатологии на базе отделения гастрохирургии Республиканской клинической больницы им Г Г Куватова Теоретические положения и практические рекомендации диссертации используются в программе обучения студентов, врачей-интернов, клинических ординаторов и аспирантов на кафедре общей хирургии БГМУ Положения, выносимые на защиту:

1 При токсическом поражении организма животных и человека возникают морфофункциональные изменения не только в печени, но и в легких, селезенке, почках, желудке.

2 При воздействии тетрахлорметана на организм животных и человека возникают метаболические нарушения в крови и внутренних органах, проявляющиеся ускорением реакции перекисного окисления липидов с накоплением активных форм кислорода, диеновых конъюгатов и ТБК-активных продуктов

3 При экспериментальной тетрахлорметановой интоксикации животных отвар расторопши, карсил, оксиметилурацил и комплекс названных препаратов оказывают положительное влияние на гистологическую структуру внутренних органов и процессы свободно-радикального окисления в крови и печени

4 При тяжелой хирургической патологии, сопровождающейся токсическим поражением печени, расторопша, карсил, оксиметилурацил и комплекс препаратов снижают содержание активных форм кислорода, диеновых конъюгатов, ТБК-активяых продуктов

5 При токсическом поражении печени у больных с гнойно-септическими процессами брюшной полости хирургическая коррекция его патогенетического фактора в комплексе с применением отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила способствует нормализации лабораторных показателей функции печени (АлАТ, АсАТ, билирубина, ЩФ, холестерина)

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на

• Международной конференции «Болезни мелких животных», Уфа, 2001,

• Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины, Уфа, 2003,

• Заседании кафедры общей хирургии БГМУ, Уфа, 2004,

• VII Конгрессе Международной ассоциации морфологов, Казань, 2004,

« Третьем Российском конгрессе по патофизиологии «Дисрегуляционная

патология органов и сиоем», Москва, 2004, « Заседании Ассоциации хирургов РБ, Уфа, 2005. Публикации. Основные научные положения, выводы и разработки диссертации изложены в 19 научных статьях, из них 3 в центральной печати

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на ___

страницах компьютерного набора Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследовании,

обсуждения полученных результатов исследования, выводов и практических предложений Работа иллюстрирована ^б рисунками, 1& таблицами Список литературы включает 158 отечественных и 68 работ зарубежных авторов

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Экспериментальная часть работы выполнена в лаборатории кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии Башкирского государственного медицинского университета при консультативной и методической помощи профессора Каюмова ФА Опыты проводили на 150 белых беспородных крысах Для этого были подобраны клинически здоровые, упитанные крысы в возрасте 8-9 месяцев, массой 270±20 г Опытных животных содержали на одинаковых рационах, в обычных условиях вивария Их содержание соответствовало правилам, принятым Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для научных целей (Страсбург, 1986) Животные были разделены на 6 групп по 25 крыс (табл 1) 1 группа -контрольные животные, не подвергавшиеся экспериментальному воздействию, 2 группа - животные, получавшие в течение 5 дней перорально, в оливковом масле тетрахлорметан в дозе 0,5 мл /кг в виде 60% раствора, без последующего лечения, 3 группа животных одновременно с интоксикацией получала лечение отваром расторопши в дозе 100 мг/кг, 4 группу животных лечили карсилом в дозе 1,0 г/кг, 5 - группу животных лечили оксиметилурацилом в дозе 50 мг/кг, 6 группа получала комбинированное лечение карсилом, расторопшей и оксиметилурацилом одновременно в вышеперечисленных дозах Через 14 дней животных убивали методом мгновенной декапитации Для гистологических исследований брали внутренние органы, которые фиксировали в растворе 12% нейтрального формалина и обрабатывали по существующим ме годам Гистологическому и гистохимическому исследованию подвергали печень, легкие, почки, желудок, кишечник и сердце Взятые кусочки после соответствующей проводки окрашивали гематоксилин - эозином для

выявления морфологических изменений Гистохимическими методами исследовали гликоген (ШИК реакция) и кислые гликозаминогликаны (метод Хейла) Всего приготовлено более 2000 микропрепаратов Гистохимическую реакцию органов наблюдали под световым микроскопом при увеличении о г 200 до 400 и оценивали по 4-х бальной системе неактивная, слабая, умеренная и высокая

Таблица 1

Характер экспериментальных исследований

Серия опытов Характер экспериментов Кол-во животных

1-я серия Контрольная 25

2-я серия Токсический гепатит, спонтанная регенерация 25

3-я серия Токсический гепатит, лечение отваром расторопши 25

4-я серия Токсический гепатит, лечение карсилом 25

5-я серия Токсический гепатит, лечение оксиметилурацилом 25

6-я серия Токсический гепатит, комбинированное лечение 25

ИТОГО 150

Полученные материалы документировали, фотографировали на микроскопе при окуляре 10 и объективе 40 с применением фотонасадки и фотопленки марки «ФУДЖИ» чувствительностью 100 единиц

Хемилюминесценцию крови и печени проводили по модифицированным методикам на аппарате «ХЛ-003» (Фархутдинов Р Р 2000) Для этого у крыс при выведении из опыта брали кровь и печень Готовили 20% гомогенат печени методом механического измельчения Кровь выдерживали 30 мин при комнатной температуре, центрифугировал» я течение 15 мин 0,5 мл приготовленной сыворотки, разводили в 20 мс солевого буфера Помещали в кювегную камеру прибора «ХЛ-003? Свечение индуцировали добавлением 1 мл 50 мМ раствора Ре80«*7Н/> ускоряющего процессы перекисного окисления липидов Сравнительную

эффективность хемилюминесценции крови проводили с эталонным препаратом - мексидолом (Фархутдинов Р Р , 2006)

Клиническая часть работы содержит анализ результатов обследования и хирургического лечения 94 больных (табл 2) с токсическим поражением печени, находившихся в Башкирском республиканском центре хирургической гепатологии и Республиканском противосептическом центре на базе Республиканской клинической больницы им Г Г Куватова (г Уфа) с 2002 по 2006 гт Наблюдались пациенты со следующими заболеваниями, вызывающими токсическое поражение печени осложненный деструктивный панкреатит с острой печеночной недостаточностью, алкогольные гепатиты и циррозы, отравления суррогатами алкоголя, лекарственные гепатиты, производственные токсические поражения печени, острый токсический гепатит неустановленной этиологии Больные были разделены на пягь клинических групп I группа (контрольная) - оперированные больные (31 яациеш) с токсическим гепатитом, которым в послеоперационном периоде назначалось традиционное лечение эссенциале 1000 мг в сутки в течение 10 дней, пентоксифиллин (трентал) 2% - 5 мл 1 раз в сутки внутривенно, креон -1 капсула 3 раза в сутки, глюкоза 5% - 500 мл, раствор NaCl 0 9% - 500 мл внутривенно, витамины В(, В6, В12 II группа - 11 больных, которым в дополнение к оперативному лечению проводился курс терапии с применением расторопши в течение 14 дней в виде отвара per os в дозе по 1 чайной ложке порошка иа 1 ст воды, III группа - 13 больных с токсическим гепатитом, которым в дополнение к оперативному лечению назначался карсил per os по 0,5 г 3 раза в день в течение 14 дней, IV группа -17 больных с токсическим гепатитом, которым в дополнение к оперативному лечению проводился курс лечения оксиметилурацилом 14 дней по 0,25 г 3 раза в день per os, V группа - 22 больных с токсическим гепатитом, которым в дополнение к оперативному пособию проводился курс лечения комплексом лекарственных препаратов (отвар расторопши+карсил+оксиметилурацил) в

вышеуказанных дозах Объем операций в каждой группе больных представлен в таблице 2

Таблица 2

Объем выполненных оперативных вмешательств при первичных и вторичных токсических поражениях печени

Объем хирургического этапа лечения больных с токсическими поражениями печени Группы больных Всего

I 11 III IV V

Лапаротомия, секвестрнекрэктомия поджелудочной железы и забрюшинного пространства 5 4 2 2 2 15

Релапаротомия, санация сальниковой сумки и забрюшинного пространства, секвестрнекрэктомия поджелудочной железы 4 1 2 1 1 9

Релапаротомия, секвестрнекрэктомия поджелудочной железы, вскрытие поддиафрагмальных а/или подпеченочных пространств 4 4 2 2 1 12

Лапаротомия, спленэктомия, денервация собственно печеночной артерии, канюлирование воротной вены 4 3 3 2 5 17

Лапаротомия, канюлирование воротной вены, биопсия печени 5 5 4 4 22 41

Итого 22 17 13 11 31 94

Для обследования больных использовали клинические, гематологические, биохимические исследования, инструментальные (ультразвуковое исследование, ультразвуковая доплерография сосудов печени, сцинтиграфия, лапаросхопия, биопсия), рентгенологические (реогепатография) и функциональные (скенирование печени) методы исследования Сердечнососудистую систему исследовали с помощью ЭКГ и функциональных проб Всем больным проводилась реогепатография на аппарате 4 РГ-1А с анализом

гепатограмм по Логинову А С, Пушкарю Ю Т (1962) и на автоматизированном реографическом комплексе «Кредо» Для определения размеров, формы, положения печени и оценки ее макрофагальной системы применяли радиоизотопное скенирование печени («Сцинтикарт-М» типа МВ-8100 фирмы «Гамма» (Венгрия) Ультразвуковое исследование (УЗИ) проводили аппаратом «А1ока-680» Япония) с использованием конвексного датчика 3,5 мГц Количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, тромбоцитов, общего белка и его фракций, билирубина, холестерина, триглицеридов, определение активности ферментов АлАТ, АсАТ, ЛДГ, ЩФ изучали общепринятыми методами За референтные значения активности ферментов принимали их показатели в крови здоровых доноров

Статистическую обработку данных проводили при помощи общепринятых методов с оценкой достоверности полученных результатов исследований по трем порогам вероятности и критериям достоверности по Стьюдепту Для достижения данных целей использовали пакет программ «МБ Ехе1» для компьютера «Репйит-4»

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрахлорметаном

Проведенные нами в первой серии опытов исследования показывают, т!то при интоксикации животных тетрахлорметаном отмечаются выраженные морфологические изменения в паренхиматозных и иммунокомпетентных органах В печени под действием ксенобиотика возникают нарушения микроциркуляции, застой желчи в канальцах и нарушается структура печеночных пластинок и гепатоцитов Однако соединительнотканные структуры печени остаются без изменений, междольковая соединительная ткань выражена слабо и определяется тольков зоне расположения триады печени Довольно часто определяются скопления лимфоидных клеток как в междольковой соединительной ткани, так и внутри дольки печени В печени

количество гликогена снижается Аналогичная реакция отмечается и в количестве кислых гликозаминогликанов Располагающиеся около центральной вены гепатоциты имеют умеренную реакцию на этот показатель.

В почках отдельные почечные тельца сильно уплотняются в результате их инфильтрации лимфоидными клетками Последние могут быть не только среди сети кровеносных капилляров почечных телец, но и в непосредственной близости от почечного тельца В просвете канальцев нефрона, особенно в проксимальном отделе, прежде всего коркового вещества, имеются белково-углеводные гранулы различного размера, которые заполняют весь просвет канальцев и расширяют их просвет. В почечных тельцах отмечается умеренная реакция на гликоген, в проксимальных и дистальных отделах нефрона - слабая Изменяется в почечных тельцах содержание кислых гликозаминогликанов до высокой или очень высокой реакции, тогда как в различных участках канальцев нефрона она низкая

В легких выявлены разного размера и конфигурации лимфоидные клетки, которые концентрируются по ходу бронхов и сопровождающих их кровеносных сосудов При этом лимфоидные клетки прилегают вплотную к бронхам или кровеносным сосудам, инфильтрируют их наружные оболочки

Селезенка животных, подвергшихся интоксикации, увеличена в размерах, полнокровна и отечна Гранулы железа в селезенке у животных, отравленных тетрахлорметаном, выявляются в красной пульпе Они мелкозернистые и равномерно расположенные по всей цитоплазме в макрофагах В красной пульпе его распределение неравномерное, местами плотное, а в отдельных участках железо в макрофагах встречается в небольшом количестве

В собственной пластинке слизистой оболочки желудка при интоксикации животных увеличивается количество эозинофильных лейкоцитов У животных, отравленных тетрахлорметаном, на слизистой

оболочке отсутствует с.лизь, а эпителиальный слой имеет умеренную реакцию на гликоген и высокую реакцию на гликозаминогликаны Гаким образом, интоксикация животных тетрахлорметаном приводит к выраженным деструктивным процессам в печени, почках, легких, желудке и селезенке, проявляющимся нарушением циркуляции крови и очаговыми кровоизлияниями, а также выраженной реакцией иммунокомпетентных клеток

Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрахлорметаном и коррекции расторопшей

При интоксикации животных тетрахлорметаном и на 14-й день лечения расторопшей пятнистой в зоне триады печени наблюдаются небольшие скопления лимфоидных клеток В зоне расположения центральной вены других долек печени появляются единичные гепатоциты с умеренной реакцией на гликоген и в процессе лечения происходит постепенное увеличение количества гепатоцитов, имеющих такую реакцию на полисахарид Реакция на кислые гликозаминогликаны становится высокой не только в Iепатоцитах, но и в эндотелиоцитах синусоидных капилляров В просвете различных отделов нефрона можно увидеть белково-углеводные гранулы, имеющие небольшие размеры и окрашивающиеся диффузно В меньшем количестве встречаются почечные тельца, инфильтрированные лимфоцитами, макрофагами и плазматическими клетками, что говорит о противовоспалительном действии препарата В легких еще сохраняется лимфоидно-клеточная реакция, яо увеличивается содержание гликогена В селезенке реакция на железо повышается и соответствует показателям крыс контрольной группы Отдельные макрофаги с гранулами железа выявляются в красной пульпе около центральной артерии и маргинальном синусе Около центральной артерии макрофаги чаще содержат гранулы и увеличены в размерах После применения расторопши у крыс появляется достаточное

количество слизи на поверхности слизистой оболочки желудка, которая имеет умеренную реакцию на гликоген и кислые гликозаминогликаны

Следовательно, отвар расторопши пятнистой оказывает выраженное противовоспалительное действие, что проявляется, прежде всего, уменьшением воспалительной сосудистой реакций в печени, почках, легких, селезенке и желудке, а также редукцией реакции иммунокомпетентных клеток исследованных органов.

Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрахлорметаном и коррекции карсилом На 14-е сутки после начала лечения карсилом в печени экспериментальных животных определяются небольшие скопления лимфоидных клеток в междольковой соединительной ткани, особенно в непосредственной близости от триады, а иногда и внутри дольки печени Количество гликогена в гепатоцитах вначале увеличивается до умеренной реакции, а в некоторых до умеренной или высокой реакции Тогда как кислые гликозаминогликаны накапливаются во всех гепатоцитах, и их увеличение происходит равномерно по долькам Отмечается повышение кислых гликозаминогликанов до умеренной реакции В легочной ткани обнаруживаются скопления лимфоидных клеток, но они располагаются диффузно и имеют небольшой размер В отдельных местах заметно сдавлен просвет альвеол и снижается функциональная активность легких В кровеносных сосудах селезенки улучшается микроциркуляция, что подтверждается уменьшением застойных явлений крови, а реакция на железо повышается до умеренной Большинство почечных телец имеет полнокровную сеть капилляров, но снижается количество лимфоидных клеток среди эпителиоцитов капилляров, а также среди подоцитов и эпителиальных клеток наружного слоя капсулы нефрона Встречаются канальцы нефрона, имеющие белково-углеводные гранулы, тогда как большая их часть не содержит В слизистой оболочке желудка увеличивается содержание гликогена.

Таким образом, карсил эффективнее, по сравнению с расторопшей, оказывает стабилизирующее влияние на репаративные и энергетические процессы в тканях пожзляются гепатоциты с равномерно окрашенной цитоплазмой, увеличивается содержание гликогена

Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрахлорметаном и коррекции оксиметилурацилом (ОМУ) Нами отмечено, что в печени крыс на 14-е сутки после действия оксиметилурацила (ОМУ) улучшаются метаболические процессы происходит равномерное накопление гликогена и кислых гликозаминогликанов. В группе животных, получавших ОМУ, повышается реакция на кислые гликозаминогликаны за счет их увеличения в синусоидных капиллярах и незначительно в гепатоцитах В большинстве гепатоцитов повышается реакция на гликоген, тогда как рядом расположенные гепатоциты могут проявлять и слабую реакцию на гликоген В почках, в просвете канальцев нефрона выявляется небольшое количество плотных белково-углеводных масс Общее их количество заметно меньше, яри сравнении с другими группами Однако видимые кровеносные капилляры вокруг канальцев нефрона остаются еще полнокровными Качественная реакция на гликоген показала слабую, а местами умеренную реакцию, что соответствует наличию кислых гликозаминогликанов В легочной ткани обнаруживаются скопления лимфоидных клеток, расположенных вокруг артериол, капилляров, венул, бронхиол и альвеол Между ними видны достаточно большие скопления эритроцитов Несмотря на имеющиеся воспалительные явления, легочная ткань несомненно улучшает свою структуру и при этом заметно увеличивается просвет альвеол При лечении животных ОМУ в кровеносных сосудах селезенки заметно уменьшается застой крови. Количество макрофагов увеличивается, они заполнены железом более равномерно при сравнении с такими же показателями крыс других групп В желудке, под действием ОМУ, в рыхлой

соединительной ткани собственной пластинки слизистой оболочки значительно снижается эозинофильно-клеточная реакция Слизистая оболочка покрыта достаточным количеством слизи, а проведенные реакции показывают умеренное содержание в ней гликогена и кислых гликозаминогликанов

Таким образом, в группе животных, получавших оксиметилурацил, после действия препарата определяются признаки восстановительных процессов, в частности более выраженный противовоспалительный эффект улучшение микроциркуляции, уменьшение размеров лимфоидных скоплений и застойных явлений крови в сосудах различного калибра во всех исследованных органах

Морфологические изменения в организме крыс при интоксикации тетрахлорметаном и коррекции комплексом лекарственных препаратов При одновременном лечении животных расторопшей, карсилом и ОМУ на 14-е сутки отмечается исчезновение застойных явлений и кровоизлияний, отсутствует жировое перерождение гепатоцитов Скопления лимфоцитов незначительны как в междольковой соединительной ткани, так и внутри дольки печени Междольковая артерия и гепатоциты проявляют слабую реакцию на гликоген и кислые гликозаминогликаны слабая реакция на них в гепатоцитах и эндотелиоцитах синусоидных капилляров, тогда как в гепатоцитах, располагающихся около центральной вены долек печени, имеют умеренную реакцию В почках уменьшается количество почечных телец с инфильтрацией лимфоцитами, макрофагами и плазматическими клетками Исчезают признаки застоя крови в сети капилляров как в почечных тельцах, так и канальцах нефрона Отмечается постепенное уменьшение белково-углеводных гранул в различных отделах нефрона, затрудняющих мочеобразование и отток мочи в почечных канальцах В селезенке реакция на железо повышается и соответствует показателям крыс контрольной группы

Полученные данные показывают, что препараты стимулируют активность макрофагов селезенки, повышают элиминацию поврежденных эритроцитов

Комплексное применение препаратов привело к снижению эозинофилии и высокой реакции слизистой оболочки желудка на гликоген и кислые гликозаминогликаны

В интерстиции легких под действием комплекса препаратов заметно уменьшается скопление лимфоидных клеток За счет этого увеличивается респираторная часть легкого, меньше встречаются участки с нарушенными альвеолами

Таким образом, комплексное применение препаратов оказывает более выраженное восстанавливающее действие, что соответствует показателям интактных крыс

АНТИОКИСЛИТЕЛЬЕ[АЯ АКТИВНОСТЬ КАРСИЛА, РАСТОРОПШИ И ОКСИМЕТИЛУРАЦИЛА

Анта окислительная активность расторопши и карсила в модельных системах, генерирующих активные формы кислорода (АФК), в которых происходят реакции перекисного окисления липидов, оказалась ниже, чем у ОМУ и эталонного препарата мексидола {табл 3) Исследованные препараты оказывают влияние на процессы свободно-радикального окисления в различных модельных системах, что подтверждает наличие у них антиокислительной активности определенной степени выраженности При этом они не нарушают генерацию АФК в фагоцитах, от которых зависит микробицидность Для подавления СРО в модельных системах концентрацию расторопши и карсила пришлось увеличить в 10 раз Однако, учитывая, что вводимая в организм доза этих веществ намного выше, чем у мексидола, то можно считать их антиокислительную активность то же сопоставимой

Таблица J

Влияние мексидола, карсила, расторопши и оксиметил>рацила на светосумму хемилюминесцеиции (ХЛ) в модельных системах (в % от контроля)

Продукт Концентрация (мг/мл) ХЛ в модели АФК ХЛ в липидах ХЛ цельной крови

Контроль 0 100 100 100

Мексвдол 0,001 32,41±2,82* 24,47±2,19* 48,2±3,21*

Оксимети лурацил 0,001 43,12±1,12* 32,33±1,83* 156,3±11,55*

Растороп ша 0,01 73,10±6,45* 54,66±4,26* 168,3±14,47*

Карсил 0,01 54,32±3,43* 48,93±2,23* 124,7±12,34*

Примечание * - достоверность различия (р<0,05) по сравнению с контрольной пробой

Записи хемилюминесцеиции (ХЛ) гомогенатов печени, плазмы и цельной крови животных контрольной группы оказались идентичны описанным в литературных источниках При введении тетрахлорметана экспериментальным животным светосумма хемилюминесцеиции гомогената печени повышается, одновременно увеличивается и содержание ТБК-активных продуктов Также возрастает интенсивность спонтанной и индуцированной люминол-зависимой хемилюминесцеиции крови Это свидетельствует об ускорении процессов перекисного окисления липидов в ткани печени Введение карсила, расторопши и оксиметилурацила сдерживает усиление хемилюминесцеиции и увеличение содержания ТБК-активных продуктов в печени Нами установлено, что оксиметилурацил, карсил, расторопша обладают способностью подавлять свободно-радикальное окисление m vitro и ш vivo Отравление экспериментальных

животных тетрахлорметаном сопровождается усилением свободно-радикального окисления в крови и печени (табл 4)

Таблица 4

Светосумма ХЛ гомогената печени крыс (отн ед ) при отравлении тетрахлорметаном и коррекции карсилом, расторопшей и оксиметилурацилом

Группы экспериментальных животных Показатели Люминол-зависимая ХЛ

ХЛ ТЕК Спонтанная Индуцированная

Интактные животные (контроль) 110,5±7,2 205,5± 1,5 1,1 ±0,7 30,4 ± 5,6

Отравление тетрахл орметаном 145,7±5,4 * 227,5*0,5 * 9,9±2,5 * 60,9±8,3 *

Коррекция карсилом 135,3=Ы0,3 * 211,6=Ь4,8 * 6,6±0,3* 38,2±6,5 **

Коррекция расторопшей 130,й±3,2 *, ** 218,4*5,7 *,** 8,1±0,3* 45,5±1,3 **

Коррекция оксиметилурацилом 125,5±10,2*,** 212,7±8,6 V4 6,9±2,1 * 49,8±6,1 **

Примечание приведены средние значения 5 измерений, * - изменения показателей по сравнению с контролем достоверны (р<0,05), ** - по огношению к опытным животным с интоксикацией

тетрахлорметаном (р<0,05)

Доступность и эффективность действия ОМУ, карсила, расторопши дают возможность рекомендовать их для профилактики и коррекции нарушений свободно-радикального окисления (СРО) при токсических поражениях и различных заболеваниях печени, сопровождающихся нарушением СРО

Таким образом, регистрация хемилюминесценции позволяет при минимальных затратах времени и средств определить влияние препаратов на процессы СРО Хемилюминесцентные методы могут помочь в оценке состояния свободно-радикального окисления в организме в норме и при патологии, выбрать тактику лечения и контролировать ее эффективность

КЛИНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КОРРЕКЦИИ ТОКСИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ ПЕЧЕНИ

Экспериментальные исследования на крысах позволили сформировать рабочую гипотезу о роли свободно-радикального окисления в генезе токсического гепатита у людей В связи с этим, нами было использовано значение исследования свободно-радикального окисления для тактики лечения больных

Полученные данные показывают, что проводимое фадиционное консервативное лечение при токсическом гепатите мало изменяет хемилюминесценцию крови Исследование гомогената печени на ХЛ показывает, что при поражении печени происходит шачительное снижение свободно-радикального окисления Показатели ХЛ крови после применения расторопши, карсила, ОМУ и комплекса препаратов, повышалась до уровня контрольных нормативов Быстрее это происходило после оперативного лечения с применением оксиметилурацила и комплекса препаратов Результаты исследований показали, что ХЛ может служить одним из методов оценки тяжести заболеваний печени и эффективности их коррекции при оперативном вмешательстве (рис 1)

Рис 1 Запись спонтанной (1,3) и индуцированной (2,4) хемилюминесценции крови больной В (Диагноз Очаговый панкреонекроз с аррозией селезеночной вены, аррозивное кровотечение с образованием обширной забрюшинной гематомы, острый токсический гепатит) до оперативного лечения (1,2) и на 3 день после операции (3,4) - (лапаротомкя, спленэктомия, резекция хвоста поджелудочной железы, вскрытие и дренирование гематомы, канголирование воротной вены, биопсия печени) с назначением оксиметилурацила

Частота повторных оперативных вмешательств в послеоперационном периоде зависят от выбранного метода лечения Так, больным первой группы, в курс лечения которых не входили вышеназванные препараты, (им проводили оперативное лечение, с последующим назначением традиционных лекарственных препаратов), релапаротомию, санацию сальниковой сумки и/или санацию подпеченочных пространств выполнили в 40,9% случаях, больным 2 группы, которым назначали дополнительно отвар расюропши пятнистой - в 47,1% случаях, больным 3 группы, которым добавляли карсил - в 37,8% случаях, в 4 группе, которым добавляли оксиметилурацил - в 27,3% случаях, больным пятой группы, которым добавляли комплекс вышеназванных препаратов - в 6,5% случаях соответственно Биохимические показатели у больных с токсическим гепатитом изменяются неоднозначно Так, в начале лечения АсАТ, АлАТ, ДДГ, общий билирубин, триглицериды и ТБК-активные продукты значительно увеличиваются в крови Другие показатели варьируют в пределах физиологических норм, как до лечения, так и после

У больных с токсическим поражением печени до операции отмечается достоверное (р<0,05) повышение активности АлАТ, АсАТ, ЛДГ на 65-82%, щелочной фосфатазы на 62%, билирубина и его фракций до 2,1-2,5 раза Интенсивное лечение больных в послеоперационном периоде приводит к постепенной нормализации печеночных проб во всех 5 группах, но с различиями в ее сроках Так, в 1-й (контрольной) группе больных активность трансаминаз нормализовалась на 13,2±2,3 сутки, билирубина и его фракций -на 11,5*2,2 сутки, при лечении расторопшей (2 группа больных) - на 11,8±2,4 и 9,4±1,9 сутки, при лечении карсилом - на 10,1±1,8 и 9,1±2,1 сутки, при лечении ОМУ - на 7,9±2,1 и 6,3±2,0 сутки, при их комплексном применении (5-я группа) - на 6,2±1,9 и 5,9±1,5 сутки соответственно Лечение больных после операции с включением отвара расторопши (II группа) на 14 день лечения сопровождается снижением (р<0,05) ферментативной активности

АлАТ на 23%, АсАТ на 20%, ЛДГ на 18% по сравнению с аналогичными показателями у больных I группы

В третьей и четвертой группах больных, получавших соответственно карсил и оксиметилурадил, на 14 день лечения также отмечается снижение основных биохимических показателей АлАт на 40% (р^0,05), АсАг на 38% (р<0,05), ЛДГ на 33% (р<0,05), активность щелочной фосфатазы на 40%, снижение уровня билирубина на 80% (р<0,03)

Наиболее положительная динамика (р<0,05) изучаемых показателей отмечена в V группе больных, которые получали комплекс лекарственных препаратов (расторопша+карсил+оксиметилурацил) отмечено снижение АлАт на 53%, АсАт на 72%, ЛДГ на 85%, активность щелочной фосфатазы на 84% (Р<0,05), снижение уровня билирубина на 93%, триглицеридов и холестерина на 76% Исследование основных биохимических показателей указывает на хороший корригирующий эффект оксиметилурацила к комплекса лекарственных препаратов наибольшее снижение (р<0,05) показателей получено в ГУ и V группах (на 80-93%)

Таким образом, полученные нами данные показывают, чго классическая модель патологии печени, воспрои ¡веденная тетрахлорметаном, позволяет проводить скрининг лекарственных веществ, оценить их влияние на морфофункциональное состояние внутренних органов Показано влияние карсила, расторопши и оксиметилурацила на морфофункциональное состояние организма и процессы СРО в модельных системах и в эксперименте на животных Определена активность расторопши, карсила и ОМУ, оценена перспектива использования хемилюминесцентного метода исследования — как критерия эффективности действия гепатогропных препаратов Показанная в данной работ? эффективность действия фитопрепаратов и ОМУ, их доступность дак т возможность рекомендовать их для коррекции морфофункциопальных нарушений внутренних органов у больных хирургического профиля нормализации процессов СРО при токсическом поражении печет

23

ВЫВОДЫ

1 Интоксикация животных тетрахлорметаном приводит к выраженным деструктивным процессам не только в печени, но также в почках, желудке, легких и селезенке, морфологическими проявлениями которых являются нарушения циркуляции крови и очаговые кровоизлияния, а также выраженная реакция иммунокомпетентных клеток

2 Введение экспериментальным животным тетрахлорметана сопровождается усилением хемилюминесценции крови и гомогената печени, что свидетельствует об ускорении свободно-радикального окисления в крови и печени, генерации активных форм кислорода, в которых протекают реакции перекисного окисления липидов, что требует проведения антиоксидантной терапии

3 Расторопша пятнистая, карсил и оксиметилурацил проявляют симулирующий эффект на морфофункциональное состояние и метаболические процессы в печени, почках, желудке, легких и селезенке Наибольшую антиокислительную активность в модельных системах при экспериментальной и спонтанной патологии проявляет оксиметилурацил

4 Хемилюминесценция крови и гомогената печени является объективным методом оценки тяжести поражения паренхимы печени у болышх с эндогенной интоксикацией Определение спонтанной и индуцированной хемилюминесценции позволяет контролировать эффективность лечения и своевременно корректировать течение восстановительного периода у больных с токсическим поражением печени

5 Включение в комплекс хирургическою лечзния больных с токсическим поражением печени расторопши пятнистой, карсила и оксимегилурацила приводит к усилению метаболических процессов в организме и восстановлению образования активных форм кислорода до нормальных величин В крови в более короткие сроки снижается активность ферментов, диеновых конъюгатов и ТБК-активных продуктов

У больных, получавших комплекс лекарственных препаратов (расторопша+карсил+оксиметилурацил), отмечено снижение АлАт на 53%, АсАт на 72%, ЛДГ на 85%, активности щелочной фосфатазы на 84%, уровня билирубина на 93%, триглицеридов и холестерина на 76% Исследование основных биохимических показателей указывает на хороший корригирующий эффект оксиметилурацила и комплекса лекарственных препаратов наибольшее снижение показателей получено в IV и V группах (на 80-93%)

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 При тяжелой хирургической патологии (гнойно-септические процессы, панкреонекрозы, перитониты) необходимо исследование в динамике функциональных проб печени (АлАТ, АсАТ, билирубин, диеновых конъюгатов, ТБК-ажтивных продуктов) для своевременного выявления токсических поражений печени (острой печеночной недостаточности)

2 Рекомендуется при острых и хронических интоксикациях организма (лекарственные и алкогольные поражения печени, отравления суррогатами алкоголя и др) комплексное обследование больных для выявления сочетанных поражений внутренних органов (печеночно-почечная недостаточность, тяжелые двусторонние поражения легких и т д)

3 Пря выявлении признаков токсического поражения печени и/или других органов необходимо в комплекс лечения включить гепатопротекторы, об падающие антиокислительной активностью отвар расторопши, карсил, океиметилурацил

4 Применение антиоксидантной терапии с включением отвара расторопши пятнистой, карсила и оксиметилурацила в комплексном лечении больных хирургического профиля (деструктивный панкреатит, перитонит) или с острыми отравлениями (алкогольные и лекарственные гепатиты и циррозы, отравления суррогатами алкоголя, промышленными ядами) показано при нарушениях функционального состояния печени и свободно-

радикального окисления, подтвержденных функциональными пробами печени и результатами хемилюминесценции крови и гомогената печени

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ В ПЕЧАТИ

1 Волкова, ЕС Структурно-функциональные изменения у крыс при тетра-хлорметановом токсикозе /ЕС Волкова, Н В Байматов // Материалы всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины, Москва, 2003 - С 282-283

2 Байматов, В Н Патогенетические пути интоксикации у животных / Байматов В Н, Волкова Е С, Байматов Н В, Каримов Ф А, Нарежная И Н // Дизрегуляционная. патология органов и систем Материалы 3 Российского конгресса по патофизиологии, М,- 2004 - С 248

3 Байматов, В Н Нейротоксический эффект экотоксикантов на животных / Байматов В Н, Волкова Е С, Байматов Н В, Латыпов М М, Нарежная И Н // Дизрегуляционная патология органов и систем Материалы 3 Российского конгресса по патофизиологии, М,- 2004 — С 248-249

4 Байматов, НВ Коррекция морфологический изменений у крыс оксиметилурацилом после действия тетрахлорметана // Морфология, т 126, №4, СПБ,-2004 -С 15

5 Байматов, Н В Коррекция морфологический изменений у крыс комплексом лекарственных веществ /Байматов Н В , Каюмов Ф А // Морфология, т 126, №4, СПБ, 2004 - С 15

6 Байматов, НВ Морфофункциональные изменения у крыс при тетра-хлорметановом токсикозе /Байматов Н В , Каюмов Ф А.. Нартайлаков М А , Байматов В Н // Морфология, т 126, №4, СПБ, 2004 - С 15

7 Байматов, НВ Коррекция морфологических изменений расторопшей у крыс после действия тетрахлорметана / Байматов Н В , Нартайлаков М А , Каюмов ФА// Морфолошя. т.126, №4, СПБ, 2004 - С 15

8 Байматов, НВ Коррекция морфологических изменений у крыс карсилом после действия тетрахлорметана // Морфология, т 126, №4, СПБ, 2004 -С 14

9 Байматов, Н.В Антиокислительная активность карсила, расгороиши и оксиметилурацила в модельных системах, генерирующих активные формы

кислорода и перекисное окисление липидов // Байматов Н В , Фархутдинов

'i 'Pi

Р Р / Современные проблемы ветеринарной медицины и животноводства, Уфа, 2005 - С 61-67

10. Байматов, НВ Состояние свободно-радикального окисления в печени и крови при отравлении тетрахлормеганом и коррекции // Байматов Н В , Фархутдинов РР/ Современные проблемы ветеринарной медицины и животноводства, Уфа, 2005 - С 67-71

11 Байматов, Н В Морфофункциональные изменения у крыс и их коррекция при экспериментальном тетрахлорметановом токсикозе // Байматов IIВ Каюмов Ф А, Нартайлаков М А, Байматов В Н / Современные проблемы ветеринарной медицины и животноводства, Уфа, 2005 - С 71-80

12 Волкова, Е С Структурно-функциональные изменения у крыс при отравлении тетрахлормеганом // Волкова Е С , Байматов Н В, Байматов В Н / Современные проблемы ветеринарной медицины и животноводства, Уфа, 2005 - С 80-84

13 Волкова, Е С Морфологические изменения в селезенке при интоксикации ксенобиотиками // Волкова Е С, Байматов В Н, Нарежнад И Н, Курамшина А Ф, Байматов Н В, / Современные проблемы ветеринарной медицины и животноводства, Уфа, 2005 - С 84-8'5

14 Волкова, ЕС Морфофункциональные изменения в организме »ивоткы> при патологии печени // Волкова Е С, Байматов В Н, Бондарева И А , Козлов В Н, Байматов Н В., Мамцев А Н, Нарежная И Н / Современна.. проблемы ветеринарной медицины и животноводства, Уфа, 2005 - С 117 120

Ь Байматов, В H Механизмы действия экотоксикантов на животных // Байматов В H , Волкова Е С, Байматов H В , Мамцев А H, Козлов В H, Бондарева И А / Современные проблемы ветеринарной медицины и животноводства, Уфа, 2005 - С 120-122

16 Байматов, В H Хемшпоминесцентные методы оценки функционального состояния животных // Байматов В H, Фархугдинов Р Р, Байматов H В , Волкова Е С , Нарежная И H, Багаутдинов A M, Козлов В H, Бондарева И А, Мамцев А H // Методические рекомендации, M Россельхозакадемия, 2005 - 40 с

17 Baimalov, V Motoric function of the foiestomachs m experimental hepatosis / V Baimatov, N Baimatov // Ветеринарно-биологические проблемы науки и образования,Уфа, 1999 -С 175

18 Baimatov, V Ovine metabolism m experimental hepatosis / V Baimatov, N Baamaiov // Ветеринарно биологические проблемы науки и образования, Уфа, 1999 - С 175-176

19 Baimatov, V Action of nitrates on animal organism / V Baimatov, N Baimatov // Ветеринарно биологические проблемы науки и образования, Уфа, 1999 -С 176

БАЙМАТОВ Николай Валерьевич

КОРРЕКЦИЯ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ ПЕЧЕНИ В КОМПЛЕКСНОМ ХИРУРГИЧЕСКОМ ЛЕЧЕНИИ ЕЕ ТОКСИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ (экспериментально-клиническое исследование)

14.00.27 - хирургия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 18 01 2007 Формат 60х841/,5 Уел печ л 1,6 Тираж 100 экз Заказ №24

Отпечатано в ГУ Издательство «Мир печати» 450077, г Уфа, ул Аксакова, 45

За последние годы возрос интерес исследователей к изучению воздействия ксенобиотиков на организм животных и человека (Блюгер А.Ф., 1975; Новиков КН., 1985; Подымова С.Д.,1993; Дунаев П.В., 1999; Савлуков А.И., 2000; Мышкин В.А., 2001; Волкова Е.С., 2004; Хуснутдинов Т.Р:, 2005; Zimmerman H.J., 1978). Изучению были подвергнуты самые разнообразные соединения: гелиотрин, тетрахлорметан, ацетон, аллилформиат, дубильная кислота, полихлорированные бифенилы, диоксин, перфторан, аллиловый и этиловый спирт, более 200 фосфороорганических соединений, более 300 лекарственных веществ (Венгеровский А.И., Маркова И.В., 1999). Особое значение приобретают техногенные и антропогенные воздействия на организм чужеродными химическими соединениями, которые потенциально могут воздействовать с водой, пищей, воздухом. В настоящее время число ксенобиотиков составляет 4-6 млн. и количество их увеличивается десятками тысяч в год. Практическое значение поражения печени, моделируемого тетра-хлорметаном, определяется тем, что он используется в промышленности, сельском хозяйстве, в виде растворителей, при обработке кож, пушнины, обезжиривания деталей (Дунаев П.В. с соавт., 1999). По данным ряда авторов, при концентрации тетрахлорметана в воздухе 15 мг/л острое отравление человека возникает через 10 минут после ингаляции, при концентрации 2 мг/л - через 30 минут (Zimmerman H.J.,1978; Herbst Н. et all., 1992).

Печень, как центральный орган метаболизма, чаще страдает от эндо- и экзогенных токсинов в первую очередь. Это и закономерно, так как вся кровь, оттекающая от толстого и тонкого отделов кишечника, желудка и селезенки, через воротную вену попадает в печень (Подымова С.Д., 1993). В печени существует целая система детоксикации веществ различного происхождения путем их соединения с кислотами, буферами, глюкозой или конью-гируя их в пары. Например, аммиак превращается в мочевину (Блюгер А.Ф.,

1988). Наиболее изучен механизм действия тетрахлорметана на животных разного уровня организации (Шкурупий В.А., 1989; Uchida Т., Peters K.L., 1983; Ariosto R. et all., 1989). Используя ультраструктурные методы исследования печени у мышей, авторы показали, что в процессе детоксикации тетрахлорметана большое значение имеет состояние гипоталамо-гипофизарной системы. Так, при стрессе значительно снижается действие токсина на организм, из-за угнетения монооксигеназ и действия глюкокортикоидов. Отравление экспериментальных животных этим ксенобиотиком по морфологической характеристике и биохимическим изменениям близко к острым поражениям печени различной этиологии у человека (Brattin W. I. et all., 1994).

Комплексный подход к раскрытию патогенеза токсической гепатопа-тии позволяет выяснить ключевые звенья нарушенных функций субклеточных структур и в дальнейшем целенаправленно воздействовать на них (Блю-гер А.Ф., 1989; Czaja. М. I. et all., 1989).

Разносторонние процессы при патологии печени изучены в Башкирском республиканском центре хирургической гепатологии (Галеев М.А., 2000; Сафин И.А., 2002; Нартайлаков М.А., 1994-2005). Предложены методы прогнозирования исходов лечения печеночной патологии различной этиологии (Багаманова Р.К., Лутфарахманов И.И., 2000; Богданов Е.Н., 2000; Вале-ев И.Г. с соавт., 2000; Галимов О.В. с соавт., 2000; Плечев В.В. с соавт., 2002; Тимербулатов В.М., 2002).

Изучены молекулярные механизмы развития патологических процессов и внедрены в клинику новые патогенетические принципы лечения (Бобрик И.И. с соавт., 1987; Вакулин Г.М., 1993; Волкова Е.С., 2004; Geisler A. et all., 1994). Доказано, что гепатозащитное действие оказывают никотиновая кислота, кокарбоксилаза, липоевая кислота (Алехин Е.К. с соавт., 2002; Vaishwanar I. et all, 1972). По данным Вакулина Г.М. (1993), Алехина Е.К. с соавт. (2002), витаминные препараты не дают существенного положительного эффекта при химическом поражении печени, вероятно вследствие нарушения их использования ферментными системами митохондрий.

На данный момент недостаточно расшифрованы молекулярные основы токсической патологии и ключевые звенья биологического действия ксенобиотиков, позволяющие представить патобиохимические изменения в гепа-тоцитах, коррелирующие с ультраструктурными нарушениями клетки. Стало актуальным направлять все исследования для создания единой теоретической концепции, в рамках которой можно объяснить главные закономерности развития химического поражения печени (Владимиров Ю. А., 2000; Алехин Е.К. с соавт., 2002; Brattin W. I. et all, 1985; Chen M. F., Hwang T.L., 1994). В ее основе может лежать представление о первичном изменении физико-химических свойств липидов мембранных структур гепатоцитов. Химическое поражение печени, вызванное такими распространенными гепатотоксинами, как этанол, тетрахлорметан, приводят к различной степени выраженности изменений центролобулярных и периферических гепатоцитов, что связано с анатомическими особенностями строения печеночной дольки (Лебедев С.П., 1980).

Несмотря на достаточно разносторонний подход к изучению многообразных функций печени, многие патогенетические механизмы компенсаторно-восстановительных процессов остаются недостаточно изученными (Завадская Е.Э., 1989; Громов А.Г.,1992, Мышкин В.А., 1998, Савлуков А.И., 2000). Актуален вопрос применения антиоксидантов с широким спектром фармакологической активности, оказывающих терапевтический эффект и положительное влияние на сопряженные с ПОЛ процессы у больных с гепатитами токсической и вирусной этиологии (Савлуков А.И., Хуснутдинов Т.Р., 2005). Особенно это относится к методам хирургической коррекции заболеваний печени, что послужило основанием для продолжения исследований морфофункциональных нарушений печени в экспериментальных и клинических условиях.

Цель исследования:

Клинико-экспериментальное обоснование коррекции морфофункциональных нарушений внутренних органов и свободно-радикального окисления в комплексе хирургического лечения токсического поражения печени.

Задачи исследования:

Для реализации цели исследования были поставлены следующие задачи:

1. Изучить морфологические изменения во внутренних органах крыс при экспериментальной тетрахлорметановой интоксикации.

2. Изучить в эксперименте состояние свободно-радикального окисления в печени при её токсическом поражении и возможности его коррекции.

3. Исследовать влияние на морфофункциональное состояние внутренних органов эксперименальных животных гепатопротекторов (отвара расто-ропши, карсила, оксиметилурацила) при тетрахлорметановой интоксикации.

4. Оценить возможности исследования хемилюминесценции крови и гомогената печени в клинике в определении тяжести токсического поражения печени и эффективности его комплексного хирургического лечения.

5. Провести анализ эффективности клинического применения отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила в комплексе хирургического лечения больных с токсическим поражением печени.

Научная новизна.

Впервые с использованием морфологических и биофизических методов исследования показаны сочетанные морфофункциональные изменения в организме крыс при экспериментальном тетрахлорметановом токсикозе, проявляющиеся нарушением структуры и функции внутренних органов. Эффективность лечения токсических поражений печени предложено оценивать по регистрации хемилюминесценции крови или пунктата печени с определением активных форм кислорода и/или перекисного окисления липидов. Показано, что при экспериментальном отравлении животных тетрахлорметаном ок-симетилурацил по антиоксидантным свойствам превосходит отвар расторопши и карсил. Экспериментально на животных обосновано, что при коррекции токсических поражений печени следует учитывать сочетанные нарушения в почках, селезенке; легких, желудке и кишечнике. Рекомендован новый подход в комплексном хирургическом лечении токсического поражения печени, включающий хирургическую коррекцию патогенетического фактора токсического гепатита и применение в раннем послеоперационном периоде отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила.

Практическая значимость.

Впервые при токсическом поражении печени установлены изменения в организме человека активных форм кислорода, что является одним из ключевых моментов патогенетических изменений и в выборе метода их коррекции. Использованные для комплексной терапии растительные (расторопша пятнистая, карсил) и синтетический (оксиметилурацил) препараты обладают разной гепатотропной и антиоксидантной активностью. Полученные данные расширяют и дополняют тактические приемы при консервативной и хирургической коррекции токсического поражения печени.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При токсическом поражении организма животных и человека возникают морфофункциональные изменения не только в печени, но и в легких, селезенке, почках, желудке.

2. При воздействии тетрахлорметана на организм животных и человека возникают метаболические нарушения в крови и внутренних органах, проявляющиеся ускорением реакции перекисного окисления липидов с накоплением активных форм кислорода, диеновых конъюгатов и ТБК-активных продуктов.

3. При экспериментальной тетрахлорметановой интоксикации животных отвар расторопши, карсил, оксиметилурацил и комплекс названных препаратов оказывают положительное влияние на гистологическую структуру внутренних органов и процессы свободно-радикального окисления в крови и печени.

4. При тяжелой хирургической патологии, сопровождающейся токсическим поражением печени, расторопша, карсил, оксиметилурацил и комплекс препаратов снижают содержание активных форм кислорода, диеновых конъюгатов, ТБК-активных продуктов.

5. При токсическом поражении печени у больных с гнойно-септическими процессами брюшной полости хирургическая коррекция его патогенетического фактора в комплексе с применением отвара расторопши, карсила и оксиметилурацила способствует нормализации лабораторных'показателей функции печени (АлАТ, АсАТ, билирубина, ЩФ, холестерина).

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы доложены, обсуждены и одобрены на:

• Международной конференции «Болезни мелких животных», Уфа, 2001;

• Всероссийской научно-методической конференции патологоанатомов ветеринарной медицины, Уфа, 2003;

• Заседании кафедры общей хирургии БГМУ, Уфа, 2004;

• VII Конгрессе Международной ассоциации морфологов, Казань, 2004;

• Третьем Российском конгрессе по патофизиологии «Дисрегуляционная патология органов и систем», Москва, 2004;

• Заседании Ассоциации хирургов РБ, Уфа, 2005.

Публикации.

Основные научные положения, выводы и разработки диссертации изложены в 19 научных статьях, из них 5 в центральной печати.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 156 страницах компьютерного набора. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов исследования, выводов и практических предложений. Работа иллюстрирована 76 рисунками, 13 таблицами. Список литературы включает 161 отечественных и 68 работ зарубежных авторов.

ВЫВОДЫ

1. Интоксикация животных тетрахлорметаном приводит к выраженным деструктивным процессам не только в печени,, но также в почках, желудке, легких и селезенке, морфологическими проявлениями которых являются нарушения циркуляции крови и очаговые кровоизлияния; а также: выраженная реакция иммунокомпетентных клеток.

2. Введение экспериментальным животным тетрахлорметана сопрово- . ждается усилением хемилюминесценции крови и гомогената печени,- что свидетельствует об ускорении свободно-радикального окисления в крови и печени, генерации активных форм кислорода, в которых протекают реакции перекисного окисления липидов, что требует проведения антиоксидантной терапии.

3. Расторопша пятнистая, карсил и оксиметилурацил проявляют стимулирующий эффект на морфофункциональное состояние и метаболические процессы в печени, почках, желудке, легких и селезенке. Наибольшую антиокислительную активность в модельных системах при экспериментальной и спонтанной патологии проявляет оксиметилурацил.

4. Хемилюминесценция крови и гомогената печени является объективным методом оценки тяжести поражения паренхимы печени у больных с эндогенной интоксикацией. Определение спонтанной и индуцированной хемилюминесценции позволяет контролировать эффективность лечения и своевременно корректировать течение восстановительного периода у больных с токсическим поражением печени.

5. Включение в комплекс хирургического5 лечения^ больных с токсическим поражением печени расторопши пятнистой, карсила и оксиметилураци-ла приводит к усилению метаболических процессов в организме и восстановлению образования активных форм кислорода до нормальных величин. В крови в более короткие сроки снижается* активность ферментов, диеновых конъюгатов и ТБК-активных продуктов.

У больных, получавших комплекс лекарственных препаратов (расторопша+карсил+оксиметилурацил), отмечено снижение АлАт на 53%, АсАт на 72%, ЛДГ на 85%, активности щелочной фосфатазы на 84%, уровня билирубина на 93%, триглицеридов и холестерина на 76%. Исследование основных биохимических показателей указывает на хороший- корригирующий эффект оксиметилурацила и комплекса лекарственных препаратов: наибольшее снижение показателей получено в IV и V группах больных(на 80-93%).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При тяжелой хирургической патологии (гнойно-септические процессы, панкреонекрозы, перитониты) необходимо исследование в динамике функциональных проб печени (АлАТ, АсАТ, билирубин, диеновых конъюгатов, ТБК-активных продуктов) для своевременного выявления токсических поражений печени (острой печеночной недостаточности).

2. Рекомендуется при острых и хронических интоксикациях организма (лекарственные и алкогольные поражения печени, отравления суррогатами алкоголя и др.) комплексное обследование больных для выявления сочетан-ных поражений внутренних органов (печеночно-почечная недостаточность, тяжелые двусторонние поражения легких и т.д.).

3. При выявлении признаков токсического поражения печени и/или других органов необходимо в комплекс лечения включить гепатопротекторы, обладающие антиокислительной активностью: отвар расторопши, карсил, оксиметилурацил .

4. Применение антиоксидантной терапии с включением отвара расторопши пятнистой, карсила и оксиметилурацила в комплексном лечении больных хирургического профиля (деструктивный панкреатит, перитонит) или с острыми отравлениями (алкогольные и лекарственные гепатиты и циррозы, отравления суррогатами алкоголя, промышленными ядами) показано при нарушениях функционального состояния печени и свободно-радикального окисления, подтвержденных функциональными пробами печени и результатами хемилюминесценции крови и гомогената печени.