Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Мембранное пищеварение у овец при паразитарном энтерите
МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ л САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ БЕТЕИ1НАРШЙ ИНСТИ1УГ
р.Г Б ОД-—--
2 О МЮН 199^ На правах рукописи
АЛЬ С ЛИМАН хот :
УДК 612.326.3:616.34-002:6363
МЕМБРАННОЕ ПИЩЕВАРЕНИЕ У ОВЕЦ ПЭД ПАРАЗИТАРНОМ ЭНТЕГОТЕ 16.00.01 - диагюстика и, терапия животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Саикт-Петербург 1934
Работа выполнена на кафедре внутренних незаразных болезней < сельскохозяйственных животных Санкт-Петербургского ветеринарного Института.. . V
г 1
Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор Г.Г.Щербаков
Научный консультант но вопросам, гельминтологии -член-корреспондент РАОХЕ, доктор ветеринарных наук, профессор Ю.Ф.Петров
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор В.У.Давыдов - ,
старший научный сотрудник, доктор биологических наук Н.Н.Иезуитова
Ведущая организация - Воронежский Агроунивврситет
Ы
Защита диссертации, состоится " Ч« 1994 г.
в 13 часов на заседании Специализированного совета Д 120.20.01 при С-Пётербургском ветеринарном институте (194084, С-Петербург, Ул.Черниговская, 5).
С диссертацией юш ознакомиться в библиотеке С-Петербург-окого.ветеринарного. института.
" 1"
Автореферат разослан " " У-ГУЬ** 1994 года.
Ученый секретарь . Специализированного совета • доцент
И.В.НИКИШИНА
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблем. В желудочно-кишечном тракте у овец шразятирует более 100 видов нематод, являющиеся, в осговном, чзматофагами. Наиболее распространенным! я патогенными являются ■чэльминты из IVtacca '^i^UlcUCL , роjsu<AcsitCntfi/fas ,лЛт{0~ liVj£vi)buhCStomuf}\ которые паразитируют в тонкой кишке квачннх швотннх (Скрябин К.И. и др., 1952; Петров Ю.Ф., 1988 и др.). Их шразятировакие сопровождается нарушением функций мюгих органов ! систем и прекде всего шиззварителыюй (Богданова А.Г., 1956; Соэяова! В.Н., 1987 и др. ). У овец инвазия сопрово¡даогая, в част-гости, диареей, потерей массы тела. Пря её сильноiî фора» гибель юлодняка достигает 40-50?. Особые интерео в этом плане представ-, тяют разстроЯства мечбранюго пищеварения, осугоствлявдзго промежуточные и заключительные стадии гидролиза гшвдвкх веществ а зя-гегрируюцего процессы пищеварения и всаонвания. Считается, что за счет него расщепляв гея до 80% связей пищевых молекул. Покавя-зо также, что в функциональном плана (в о станом фзрыевгатввныг |СП0КТы) И структурном ОТШЕЕНИН (првИМУИвСТВв НЮ СООТОЯВЛв М8М-5раны энтероцатов) мембранное шдаварение является высокочувст-эительдай организацией клеточш-молеяулярного уровня я различного рода неблагоприятным алиментарным ректорам (Уголев A.M., IS63, Г9С7, 1972, 1985; Изыаялов Т.У., 1966; Рахимов K.P., 1970; Тимофеева H'ji» 1978; Иезунтова H.H., 1979; Щербаков Г.Г., 1984; 1лтуховН.М., 1989; Сирота Д.А., 1989; Локкина Г.Г., 1990; Сгар-танков C.B., 1990; Ахмад А., 1990; Хоанг Ван Нам, 1992; Еэшкин В.А., 1993 я др.).
У овец отдельные стороны в го го типа пиюзварекая исслодэ вага сь лишь в юрке в пря 8коперикантальасй патологии на фэке но-иотернг экстремальных факторов (Рахвюв K.P., 1966; Юнусов A.C., I9S7; Януш З.Н., 1977; Измайлов Т.У., 1972; Ганин М.Д., 1977; 1вае А.,1990).
Исследований ооогояния мембранного пищеварения при огюнтаи-еюй патологии я, в частности, пра гедьмантнзй инвазии кэлудачно-ршлечюго тракта у овец m проводилось.
Пель л задача доследования. Целью работы бнло изучение кеи-Зранного пипвварения у овой в норма и при гельмпктяой инвазии в тонкой кяше. Для этого нами бши составлены следующие задачи':
I. Изучать мембранное шее варение у овец разнэго возраста в норме и пря комбинированной гельминтной инвазии тонкой клипа.
2. Исследовать влияние некоторых антигельминтных препарате: на мембранное пищеварение у овец при комбинированной гельминтно: инвазии тонкой кишки,
3. Провести клинические и гематологические исследования у овец, а такке гистологические и электронно-микроскопические исс, давания слизистой оболочки тонкой кишки у здоровых овец, при ге. мингной инвазии их а на фоне применения им антигельминтных препаратов,
4. Дать оценку эффективности применения антигельминтных пр паратов у овец при комбинированной инвазии тонкой кишки.
Научная говизна. Впервые на клеточно-молекулярном уровне у ташвлено, что у овец при комбинированной гелъшнтной инвазии тонкой кишки происходит нарушение функции мембранного пищеварен
У разного возраста здоровых овец и у овец при комбинирован ной гельминтгой инвазии тонкой кишки охарактеризована топографа. ' мембранного пищеварения в тонкой кишке и показано наличие в ней кранно-каудальюго градиента активности ферментов .осуществляю щи заключительные стадии гидролиза белков, углеводов и эфиров фосфорной кислоты.
Исследовано влияние антигельминтных препаратов на течение инвазии и состояние мембранного пищеварения у овец.
Практическая ценность работы. Клинические и гематологи чес кие, а также результаты исследований активности ферментов слизистой оболочки тонкой кишки, осуществляющих мембранный гидроли белков, углеводов и эмиров фосфорной кислоты - глицил- -лейцин пептидазы, мальтазы и щелочной фосфотазы и ее морфологической структуры у здоровых овец, при гелъшнтной инвазии, а такке на .фоне применения антигельминтных препаратов могут быть использованы в научно-исследовательской работе при изучении мембранного шиевареиня у овец, в практической работе при проведении дегель шнтизаций у зараканных овец, для лабораторной диагностики нару шений функций мембранного пищеварения у овец, а такке в лекциях и лабораторно-практаческих занятиях для студентов на кафедрах физиологии, клинической диагностики, фармакологии и токсикологии, внутренних незаразных болезней, паразитологии.. .
Апробация работы. Ооновные полокения дисоертЗДйшшсЛГ~рабо= тк докладывались и обсувдались на: -. •
научных конференциях Санкг-Петербургского ветеринарного института в 1991, 1992 и 1993,г.г.;
- меютеударствешшх маввузовских научно-практических конфе
зенциях "Ноззме фармакологические средства в ветеринарии". Занкт-Петербург, 1992 г. (3), 1993 г. (2).
Публикации результатов исследований. Основные материалы даесертащаи. опубликованы в пяти статьях.
Структура и объем работы. Диссертация и ало ко на на 171 страницах машинописного текста и состоит яз введения, обзора гатературы, собственных •исследований, .заключения, выводов, .■фактических рекомендаций, списка литературы и приложения. )на иллюстрирована 15 таблицами и 37 .рисунками. Список гатературы включает 157 источников, из которкх 36 на иностранных языках.
Основные голокенкя. выноспмне на защиту
1. У овец при комбинированной гельминтной инвазии гонкой кишки происходит нарушение мембранного пищеварения.
2. У овец при комбинированной гельминтной инвазии тонкой кишки возникают изменения обтего состояния, гематологического статуса, а также нарушится структура и ультраструктура гонкой кишки.
3. У овец при комбинированной гельминтной инвазии тонкой кишки в ней происходит адаптационно-компенсаторные перестройте пищеварительных функций.
4. Влияние антигельшнтного препарата фенкура на состояние мембранного пищеварения.
МАТЕГИАЛЫ И ШОМ ИССЛЕДОВАНИЯ
Работа выполнялась в течение 1990-1993 гг. на кафздре внутренних незаразных болезней сед^хозтавотнцх Саккт-Пзтер-бургского ветеринарного института.
Опыты проведет на 23 клинически здоровых ягнятах я взрослых овцах породи Литовская темноголовая, йормированле экспериментальных групп осуществлялось ш принципу аналогов.
Еивотные содержались в стационаре кафедры при свободном доступе к корму и воде. Суточный кормовой рацион состоял из двух кг сена, 300 г комбикорма и мияералыюй. подкормки.
Овцы были разделены к,а шесть групп. Первую группу составляли четыре здоровых ягненка в возрасте трех месяцев. Второй группой являлись пять ягнят такого ке возраста, зараженных тремя родами кишечных нематод: Аиполо»^») ш^рпсср^Ьай;,„ ^г/нЫыо-и} и Гме-ксяи-сн^цСи}. В третью груп-
о
пу входили пять таких ке ягнят, зараженных указанными паразитами и затем подвергнутые дегельминтизации.
Четвертая группа состойт из трах здоровых взрослых овец, пятая - из трех взрослых овз;>„ зараженных указанными выш паразитам я шастая из трех взрослых зараженных овац и затем подвергнутых дегельминтизации. Животные зараяениама были в течение тридцати даэГ;.
Они подвергались клиническим, гельминтологическим, гематологически!.:, а получении:* после убоя их экспериментальны;! материал - биохимическим, патологоанатошческим, гистологически!; и электронно-макроскопическим исследованиям общепринятыми методам .
3 соответствии с поставленных! задачами в исследованиях использовалась цетодака оотрих онитов я получение изоларовоа-них от организма фзрментиих препаратов - шсернутых отрезков, гоиогвяатов слизистой я содержимого полости разных отделов тонкой кишки.
3 качестве критериев исследования было взято определение активности уермэнтов тонко/, кишки, осуцествлявдих заключительные этахш гидролиза белков - глшил- ^-ле&зшпопгадазы (К3.4,13.2), которая определялась колориметрическим глициновым методом (Уголев А.М., Тимофеева Н.1Л., 1Э6Э), мальтазы (КЗ 3.2.1.20), определение проводилось глжозооксидознш методом (Городецки!! З.К., 190-1) п целочиол $ос<Хатазн (Кз 3.1. 3.2), которая определялась по методу <5иске и Суббароу (1925). В качестве субстратов использовались глицин-.^-леЗцин или глицил— леЛцин, мальтоза и бета-глицероуосЁат натрия. Ферментативные активности выражались в миллимолях (мМ) или мпкробадои на I г влажного вэса слизистой тонкой кишка при исследовании ее гомогенатов или на I с:л шкздада, при исследовании ее поверхности, что принималось за условную единицу (у.е.).
Полученные результата обработаны методом вариационной статистики по Монцевичютз-Эрингене (1064).
"_ШСТЬШЫ СОЕСТЗШШ ПССЛРДОЗАШ^__
Известно (Уголев А..М.,. 1363, 1967, 1972, 1985; Танцевав ПЛ., 1977; Иезуитова Н.И., 1979; Щербаков Г.Г., 10-4 и .др.), что уровни активности ферментов, осуществляющих леи-
ранни.; гидролиз заключительных этапов пищеварения в тонкой пшке, определяется скоростью синтеза энзимов эпителиальными леткат.я тонко;'! кишки (энтероцитами), транслокаилей (парахо-,ом) их на наружную поверхность энтероцятоз, а интенсивность .'олостного гидролиза обусловлена степенью поступления ферментов оо слизистой з ее полость при их десорбцсл, а также в со-;тавз десква\шрозанного кшечного олит&лпя. Показано такка, сто прз келудочно-кйшвчноЛ патологии эти процессы осуществляйся иначе, чем в норме.
Запоил методическим подходом, позвояяяциа дать характеристику ппдапарительным аспектам тонкой клоки, является одновременное исследование гомогената слизистой, отрахэздего интенсивность синтеза кишечных ферментов энтероцпташ л позволяющее судать об 'обцо.ч запаса энзимов в олизнетоЕ, вывернутых отрззкоз кишки к отрагаодее процесс перехода фермеятоз на нарукнуа поверхность энторощтоз, а таккэ ферментов содержимого полости.
Результаты исследований глкцял- /-дездинпептидазноЗ, малътазно!': п двлочно-фсфатазной активности в указанных препаратах гонкой кяшхя у озец перечисленных групп приведены в табл.1.
¡Лэмброзвое пящэваттие в тонкой кишка у зтю-ровнх
ягнят, ггш паразитарном эя?дрзтв п после дегель-отктазатаи
Из таблицы I (2,2,3) видно,у ягнят при патологических состояниях уровни активности ферментов тонкой кишкп, осуществляющих мембранное пищеварение существенно иные, чаи у здоровых.
Так, у ягнят, зараженных ассоциацие.'] гельминтов, на по-верхаости энтерсцятов в два раза повышается щэяочяо-уосфа-тазная активность я существенно не изменяются гявцпл- Л -лейцинпептидазная и мяльгазкал. У ягнят, которым проведена дегэлыяштизацдя, последние две активности.значительно сни-даются (соответственно на 23 и 40$) и такяа в два раза возрастает щвлочно-^оаХатззнал.
.В гомогеяате слкзестой гатя у] зараженных ягаят ¿сало йзмзяяйтся гладил- £ -лвйцзшгвптадазная' и оточно-^осфатазяея активкостя л на повкпается мальтазная. У яг-
Глад: той ( ровые
4 - здоровые взрослые овцы; 5 - зараженные ассоциацией .гельминтов; 6 - подвергнутые дегель-
шнп : ТПВНО
Таблица I
[- -лз Гигл нпептида зная, мальтазная и щелочно-фосфатазная активности поверхности слизис-7), гомогенатов слизистой (Г) в содержимого полости (СП) тонкой кисеи у овец. I - здо-ягнята; 2 - зараженные ассоциацией гельминтов; 3 - подвергнутые дегельминтизации;
заоти. >СА - общая активность, СП от ОА - активность содеркимого полости от общей ак-сти. Средние данные в целом по тонкой кишке. Активность выракена в у.е. .
Иск чники
Группы
овец
фер '.С КТО В ■"• . . I : 2 - 3 • 4 , 5 6
Пептидазная активность
П . ■ 116,9± 102,0± 82,9± 92,4± 60,9± 128,4±
•±15,4 ¿24,3 ±13,5 ±26,7 ±10,5 • ± 16,6
Г ' 1723,4± 1842,3± 1229,8± 1422,5± 2042,3± 1728,7?
±233,4 ±350 ±254,9 ±474,9 ±633 V' ±310,5
зп: 68,8± 126,8± 38,9± 84,0± 81,0± 132,7±
±28,6 ±49,1 ±10,6 ±23,3 ± 48 ±66,8
Обша т активность 1909,1± 2073,1± 1351,6± 1598,9± 2204,2± 1989,8±
±277,5 ±423,4 ±279 ±524,9 ±691,5 ±393,9
СП 01 г 'ОА, % ' 3,6 6Д 2,8 5,2 3,6 6,6
Окончание таблицы I
Малътазная активность ...
п 96,Oí 76, Э± 229,9± 218,1* 228,2± 133,8±
±34,8 ±21,6 ±103,5 ±64,2 ±64,7 ±71,8
г 1096,3± 1609,8± 2614,4± 2284,6± 36И,5± 2275,6±
' ±443,7 ±257,3 ±44,6 ±473,5 ' ±1000,9 ±410,9
СП 2Í9,2± 183,6± 594,8± 466,5± 475,6± 453,8±'
±26,5 , ±92,0 ±198,4 ±112,1 ±241,7 ±125,7
ù OA I4II,4± 1870,3± 3439,1± 2969,2± 4310,3± 2863,2±
±505 ±зта,э ±746,5 ±649,8 ±1307,3 ±608,4"
СП от OA, % 15,5 9,8 17,2 15,7 11,0 15,В
Н'елочяо-сгосйа та зпая активность
П 0,24± 0,20± 0,3± 0,1± 0,2± 0,2±
±0,05 ±0,02 ±0,04 ' ±0,05 ±0,01 ±0,07
Г 5,9± 5,0± 7,2± 4,6± 4,1± 5,3±
■ i ±2,4 ¿1,5 : ±1.1 ±1,0 ±1,0 ±0,5
СП 2,2± 0,8± 2,5± I.Í 1.6?
±0,3 ±0,2 ~0,3 ±0,3 ±0,4 ±0,5
OA 8,3± 6,0± 10,0± ' 6,4± 5,4± 7,It
±2,75 ; ±1,72 ±1,44 ±1,3 ±1,5 - ±1.0
СП от OA, % 26,5 13,3 25,0 25,5 20,3 22,5
нят после дегельминтизации почта на 30$ снижается глицил-^--лейцинпептидазная и не изменяются мальтазная и здглочно-фос-фатазная.
В содеркишн полости тонкой кишки у зараженных ягнят более чем в два раза возрастает глицил-/-лейцинпепткдазная активность и не изменяются мальтазная и щелочно-йосфатазная. У яивотшх на соке дегельминтизации на 50/! 'снижается глицил-£ -лейцинпептидазная и остаются на уровне здаровых ягнят мал! та зная и щелочно-фос($атазная активности.
Это дает основание считать, что гелышнтная инвазия и последующая дегельминтизация препаратом-фзнкуром оказывают влияние на синтез исследованных ферментов в тонкой кишке ягнят, транслокаюш (переход) их. та наружную поверхность мембраны энтероцятов и поступление их со слизистой оболочки кишки в ее полость и таким образом в целом на осуществление мембранного и полостного пищеварения. .
2. Мембранное пищеварение в тонко!' кишке у здоровых взрослых овец, при паразитарном энтерите и после догельминти загки ;
Результата этих опытов приведены в .табл.1 (4,5,6).
Их анализ свидетельствует о том, что уровни глицил- £ -лейцинпепгидазы, мальтазы и щелочкой фосфатазы тонкой кишки у взрослых овец, зарааешшх ассоциацией гельыинтов и после их дегельминтизации, в большинстве случаев отличаются от таковых здоровых. В частности, если у заражению: овец активность поверхности энтероцятов по всем трем исследованным ментам практически ке изменяется, то после обработки их про-тиеоглисткым препаратом фзккуро'м дая всех их она до сто верш возрастает.
В гомох'енаге слизистой зараженных овец и дсгельшнгизи-роваиных фзнкуром повышаются активности всех исследованных энзишв.
Дуракение овец гельминтами не влияет на серость перехода со слизистой ооолочкш гок:«ягяяж2-в-ве-шлость глицил--лейцзнпедтидазы и мальтазы и достоверно ниже протекает он в экспериментах со щелочной фосфатазой.
Приведенные материалы'позволяют заключить, что гель-ыинтная инвазия оказывает влзякие на синтез всех трех иссле<
хованных фвршнтов и на степень перехода пх со слизистой гонкой киши в ео полость, а догзльшнтизация фзнкуром кроме того и на трэяслокацию их на наружную поверхность энтароцитов.
3. Онтогенетические аспекты доследований мембранного пищеварения в тонкой таакэ у зтторопих овец. птп паразитарном энтеттате и после дегельминтизации
Полученные в нашей работе разутатага и приведенные в табл.1 свидетельствуют также о той,что з осуществлении исследованных процессов имеются а онтогенетические (возрастные) особенности.
Так, синтез и транслокация нанаружную поверхность мембраны энтероцитов глицял-./-ле1шш1ептидазн я мальтазы протекают более интенсивно у ягаят, а щелочной фосфатазы - у овец. Это позволяет заключить,что мамбранное пищеварение белков, во всяком случзе глзцил-^-лейцина и углеводов, в частности мальтазы, у ягнят.идет с более высокой скоростью, чем у овец, а офяров фосфорной кислоты (бета-глицерофосфата натрия) выло у овец. Состояние инвазии тонкой кигаки и наличие при этом энтерита, а также дегельминтизация фенкуром в большинстве случаев тоже по.разному проявляются на осуществлении мембранного пищеварения у ягнят и взрослых овец.
В плане онтогенетических исследований важным является и то, что у здоровых ягнят и овец при отмеченных патологических состояниях в тонкой кишке (характеризована топография глицил-^-леицинпептидазы, мальтазы и щелочной фосфатазы, ферментов, осуществляющих мембранное пищеварение белков, углеводов и эфиров фосфорной кислоты. Установлена функциональная неравноценность разных ее отделов по исследованным ферментам. Показано наличие в ней проксимо-дистального (кранио-каудального) градиента активности этих энзимов, который у взрослых овец и больных животных в большинстве случаев иной, чем у ягнят. Эти результа- . та свидетельствуют о наличии в тонкой кишке ягнят и овец при патологических состояниях адаптационно-компенсаторных перестроек ферментативных активностей, обусловленных заражением их гельминтам и последующей дегельминтизацией фенкуром.
При исследовании распределения указанных ферментативных активностей между слизистой я содернюшм полости тонкой кишки у здоровых япнят а овец установлено;' что как в целом по
тонкой кишке, так и в разных ее отделах они концентрируются преимущественно в слизистой, а не в содержимом полости. В.. частности, глицил-/-лейщ1нпептидазная активность в целом по тонкой кише у ягнят в слизистой составляет 94,1$, в содержимом полости - 5,9$ С в разных отделах: в.слизистой - 94,198,4$, в содеранаом полости - 1,6-5,9$), шльтазная активность - 84,3 и 15,75а (в разных отделах -'74,7-94,5? и 5,5т-25,3$), щелочно-фосфатазная активность - 73,5-26,(в разных отделах - 64,5-84,0 и 16,0-35,5$).
У ягнят и овец, зараг.енных ассоциацией .гельминтов и подвергнутых дегельминтизации распределейие этих фермеитзтивннх, активностей, в.основном, аналогично таковому у здоровых животных.
Так, глицил-^-лейцяипептида зная активность в целом по тонкой кишке у зараженных ягнят в слизистой составляет 93,95» в содержимая полости - 6,1$, у дегельминтизированных - 41,2% и 2,8$, мальтазная соответственно .89,0-1155 и 84,2-15,8$, ще-лочно-фосфатазная: 79,7 - 20,355 и 77,5 - 22,5$.
У соответствующих групп овец эти активности ыенду слизистой и.содеряимим полости распределяются следующим образом: глиция-^-лейщишептидвзная, 96,4 - 3,6$ и 93,4 - 6,655 маль-тазная: 90,2 - 9,8$ и 82,8- 17,2$, щелочночфосфатазная: 86,7 - 13,355 и 75,0 - 25,0$. В разных отделах тонкой кишки у овец обеих групп распределение этих активностей мевду слизистой и содержимым полости по характеру является аналогичным.
Эти данные позволяют считать, что как у здоровых ягнят и овец, таг; и зараженных ассоциацией гельминтов и дегельмин-тизированных гидролиз глицпл- -лейцина, мальтозы и бета-глицерофосфата натрия в.целом, по тонкой кишке и в разных ее отделах осуществляется преимущественно в связи, со слизистой кишке (мембранное пищеварение), а не в содержимом полости (полостное пищеварение).
4. Заключение .
Основное заключение, которое мы делаем на основании результатов наших исследований состоим в том, что гельминтная инвазчя тонкой киака у овец, вызываемый ею энтерит, а такке дегельминтизация фенкуром, приводят к глубоким нарушениям мембранного пищеварения, складывающимся из расстройств ферментативного статуса з тонкой ;::аке, ооу^еоташщего гадро-
литаческие функции, а такие нарушения мембраны энтероцитов, являющейся структурной основой этого типа пищеварения. . , Одновременно в организме овец возникает серьезные нарушения общего состояния и системы крови.
Дегельминтизация овец фенкуром, в последующие девять дней, способствует улучшению общего состояния животных и функционирования мембранного пищеварения.
ВЫВОДЫ
1. У здоровых ягнят и взрослых овец, больных энтеритом, вызванным заражением их ассоциацией кишечных нематод трех родов и после дегельминтизации их препаратом фзнкуром, проведены клиническиеj гельминтологические, гематологические, а после убоя животных - патблогоанатомические, гистологические а электронно-микроскопические исследования. На изолированных
эт организма препаратах тонкой кишки (вывернутые отрезки, го-дагенаты слизистой, содержимое полости) охарактеризованы активности ферментов, осуществляющих мембранное пищеварение белков на примере глицил-/-лейцикпептидазы. углеводов - на примере мальгазы и эфиров фосфорной кислоты - на примере щелочной £осфатазы.
2. При исследовании активности ферментов тонкой кишки у здоровых ягнят, зараженных ассоциацией гельминтов и подвергнутых дегельминтизации установлено, что уровни ее у.животных, лри отмеченных патологических состояниях шше, чем у здоровых.
Так, у ягнят, зараженных ассоциацией гельминтов, на по-, зерхности энтероцитов существенно не изменяется глицил-^-ленда нпептн да зная и кальтазная активности и в два роза повышается шелочно-фосфатазная. У ягнят, которым проведена дегельминтизация, значительно снижаются глицил-,/-лейцинпептидазшя и ■ дэльтазкая активности (соответственно на 29. и 40$) , и в два--раза возрастает щелочно-сЕосфатазкая. В гошгенате. слизистой <ишки у зараженных ягнят существенно не изменяются глицил-/. -лейцинпептидазная и гшелочно-фосфатазная активности .и на 58$.'. товшлается ыальтазная. У ягнят после дегельминтизации "почти, ía 30$ снижается глицил-^-лейщ:нпептадазщя.и не изменяются /.альтазная н-целочно-фертазная. .В содержимом полости тонкой сишки у заражённых ягнят;более чем в два раза возрастает . гтацил-/-лсйц;1Н11ептидазная -актавнбсть и пз изменяются ыздн= ?азная и щелочно-фосфатазная. У ягнят на фоне
ции на 505? снижается гладил- ^-лейцинпептидазная и остаются на уровне здоровых животных мальтазная и те ла чно - фо сфа та з ная активюсти.
■ Это .дает основание считать, что гельмннтная инвазия и лротивогельминтшй препарат фенкур оказывают влияние на синтез исследованных ферментов в тонкой кишке ягнят, транслока=-цию Спереход) их на наружную поверхность мембраны энтероцитов и поступление их со слизистой оболочки кишки в ее полость и таким образом в целом на осуществление мембранного и полостного пищеварения.
.3. При исследовании активюсти атих ке ферментов тонкой кйшкя у здоровых взрослых овец, зараженных ассоциацией гельминтов и после дегельминтизации их установлено, что уровни ееугавотных при отмеченных патологических состояниях в большинства. случаев отличаются от таковых здоровых. В частности, если у зараженных' овец' активность поверхности энтероцитов по всем трем исследованным ферментам практически не изменяется, то после обработки их противоглистным препаратом фенкуром. для всех их она достоверно возрастает. В гомогенате слизистой зараженных овец я дегельминиззированных фенкуром, повышаются активности всех исследованных энзимов. Заражение овец гельминтами не влияет на переход со слизистой оболочки тонкой кишш в ее полость глицил-^-лейцинпептидазы и мальтазн и . достоверно шж протекает он в экспериментах со щелочной фосфата зой.
• Зто позволяет заключить, что гельшнтная инвазия оказывает влияние на синтез всех трех исследованных ферментов и на степень перехода их со слизистой тонкой кишки в ее полость, а дегельминтизация фенкуром кроме того и на транслокацию их та наружную поверхность энтероцртов.
4. У здоровых ягнят и овец и при исследованных у них патологических состояниях в тонкой кишке охарактеризована топография глицил- ^-лейцинпепгадазы, мальтазы и щелочной фосфа-. тазы ферментов, осуществляющих мембранное пищеварение белков, углевэдов п .эфиров фосфорной кислэты. Установлена фуявдиональ--ная-керапвценность.разных ее отделов' по исследованным ферментам, Показано наличие в ней проксимо—дистэлького (краиЕО— каудальюго) градиента актившета этих энзшлов, которий у взросянх овоц и больных каютных е большинстве случаев иной, чом у ягнят. Эта результаты свидетельствуют о наличии в тонкой ташке ягия? и овец при яатологичесжед состояниях ада'пта-
о нно- ко м пе н с а го р тсс перестроек ферментативных активностей, условленных заражением их гельминтами и последующей дегель-нтизацией фонкуром-
5. При исследовании распределения указанных ферментатив-ос активностей между слизистой и содераимым. полости тонкой шга у здоровых ягнят и овец устаю&тено, что как в целом по нкой кишка, та« и в разных ее отделах они концентрируются «имущественно в слизистой, а не в содержимом полости. В стности, глицял-/-лейцинпептидазная активность в целом, по ¡нкой кишке у ягнят в слизистой составляет 94,1$, в содержи->м полости - 5,9$ (в разных отделах: в слизистой - 94,1 -1,4$, в содержимом полости - 1,6 - 5,9$), мальтазная актив-сть - 84,3 и 15,7% (в разных отделах - 74,7 - 94,5$ и 5,5 -¡,3$), шелочно-фзсфатазная активность - 73,5 - 26,5$ (в раз-ос отделах 73,5 - 26,5 (в разных отделах - 57,2 - 90,7$ и 3 - 42,8$), У овец глнцил-/-лейцинпептадазная активность в ¡лом по тонкой кишке составляет в слизистой 94,8$, в содер-1М0М полости - 5,2$ (в разных отделах - 91,2 - 98,5$ и 1,5 -,8$), мальтазная активность 84,5 и 15,5$ (в разных отлелах->,8 ■• 100$ и 0,0 - 23,2$), щелочю-фосфатазная активность -¡,5 - 26,5$ (в разных отделах - 64,5 - 84,0$ л 16,0 - 35,5$).
У ягнят и овец, зараженных ассоциацией гельминтов и под-¡ргнутих дегельминтизации распределение этих фзрментов, в сс~ 1Вном, аналогично таковому у здоровых кивотных. Так, глицил-^-лейцинпептядазная активность в целом по тонкой.кишке у факенных ягнят в слизистой составляет 93,9$, в содержимом «гости - 6,1$, у дегельминтизированных - 97,2 и 2,8$, маль-¡зная соответственно 89,0 - 11,0$ и 82,4 - 15,6$, щелочпо-юфатазная - 79,7 - 20,3$ и 77,5 - 22,5$. У'соответствующих )упп взрослых овец эта активности мевду слизистой и содеряи-м полости распределяются следующим образом: глицил-^-лей-шпептидазная - 96,4 - 3,6$ и 93,4 - 6,6$, мальтазная - 90,2 9,8$ и 82,8 - 17,2$, щелотао-фосфэтазная 86,7 - 13,3$ й 5,0 - 25,0$, В разных отделах'тонкой кишки у овец.обеих групп »определение этих активностей менду слизистой и содержимым >лости по характеру является аналогичным.
Приведенные в этом выводе данные позволяют считать, что ж у здоровых ягнят и овец, так и зараженных ассоциацией здьминтов и дегельминтпзировашшх, гидролиз глацял-^-лейци-), мальтозы и бета-глицерофосфата натрия в целом по тонкой
кишке и в разных ее отделах осуществляется преимущественно в связи со слизистой тонкой кишки (мембранное пищеварение), а не в содержимом полости (полостное пищеварение).
6. Полученные в нашей работа результаты свидетельствуют о том, что в осуществлении исследованных процессов имеются онтогенетические (возрастные) особенности. Так, синтез и транслокация на наружную поверхность мембраны аатероцитов глицил- •
^-лейцинпептидазы и мальтазы протекают более интенсивно у ягнят, а щелочной фосфатазы - у овец. Это позволяет заключить что'мембранное пищеварение белков, во всяком случае глицил-лейцина , -лэтицина и углеводов, в частности, мальтозы, у''ягнят эдет с более вцсокой скоростью, чем у овец, а эфиров фосфорной кислоты (бета-глицерофосфата натрия) вышэ у овец. Состояние инвазии тонкой кишки и наличие при этом энтерита, а также дегельминтизация фенкуром, в большинстве случаев тоже по разному проявляются на осуществлении мембранного пищеварения у ягнят и взрослых овец.
7. У ягнят и овец заражение гельминтами сопровождалось общим угнетением снижением аппетита, усилением жажды, диареей. У животных подвергнутых дегельминтизации общее состояние со временем улучшалось. Гематологические исследования у них характеризовались снижением уровня геомглобана, эритропенией, лейкоцитозом, а лейкограмма - эозинофилией и- палочксидеряой нейтродилией.
8. При визуальных и гистологических исследованиях тонкой кишка у больных животных установлено катаральное воспаление, некроз эпителия ворсинок, инфильтрация слизистой оболочка '
лимфоцитами.
Электронно-микроскопические исследования показали наличие деформации в деструкции щеточной каймы энтероцитов, сопровождающиеся укорочением и уменьшением числа мякроворсинок.
9. Приведенные результаты позволяют заключить,что заражение овец ассоциацией кишечных нематод и последующая дегельминтизация их фенкуром сопровождаются энтеритом и нарушением «собранного пищеварения.
. ПРАКТИЧЕСКИ РЕКО;.ШЩАШШ , .
Результаты клинических, гематологических, гельминтологических, а также исследований, касаюцихся определения фермеи- . татлзных активностей тонкой кишки у овоц,.ее гистологической
ультраморфологической структуры могут быть использованы:
- в клинической практике для диагностики паразитарного нтерита у овец и при проведении дегельминтизации зараженных ивотшх;
- для лабораторной диагностики гельмитной инвазии тонкой ишки у овец;
- для терапии животных при гастроэнтеритах паразитарного роисхождения;
- в научно-исследовательской работе и учебном процессе на :эфедрах физиологии, патофизиологии, клинической диагностики, нутренних незаразных болезней, фармакологии и токсикологии, :аразнтологии.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАНИИ ГО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Аль-Слиман Хосин, Петров Е.Ф., Щербаков Г.Г., Семенков Л. ффективность фенкура при дегедьминтизацации у овец и ягнят и
го действие на некоторые показатели крови. Тез. докл. 4-й меж-осударственной, межвузовской научно-практической конференции, -Петербург, 199?. С.5
2. Аль-Слиман Хосин, Петров D.55., Щероаков Г.Г., Семенков 1., ¡ираждинов P.C. Влияние антигельминтика фенкура на мембранное ищеварение у взрослых овец. Там же - С.42.
3. Аль-Слиман Хосин, Семенков Л.Д., Щербаков Г.Г., Сираж-,инов P.C. Влияние антигельминтика фенкура и кокцидиостатика тенерола на меморанное пищеварение у ягнят. Там же С.42-43.
4.Аль-Слиман Хосин Морфологические изменения стенки тонкой ишки у овец при гельминтозах и дегельминтизации. Тез. докл. -й межгосударственной, межвузовской научно-практической канфе-енции. С-Петербург, 1993. С.66-67.
5. Зиналиева М.З., Аль-Слиман Хосин Влияние дегельминти-ации на подисуОстратные взаимоотношения в процессе мембранного идролиза в тонком кишечнике у овец. Там же С.72-73.
1одписано к печати 26.05.94. Заказ № 297. Тираж 75 зкз.
Отпечатано на ротапринте СПб ГТУ. Санкт-Петербург, Политехническая ул.,29.