Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Мастит коров

ВСЕСОЮЗНАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ИМЕНИ В.И.ЛЕНИНА

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА. ДРУЖБЫ НАРОДОВ НАУЧНО-ИССЛВДОВАТЕДЬСКИЙ ИНСЖГУТ ВЕТЕШНАРНОЙ САНИТАРИИ

На правах рукописи

ИВАШУРА Анатолий Иванович

МАСТИТ КОРОВ (диагностика, санитарно-технологическая оценка молока, лечение, генетическая профилактика)

16.00.06 - "Ветеринарная санитария, ветеринарно-санитарная экспертиза и гигиена переработки продуктов животноводства"

Диссертация в форме .научного доклада на соискание ученой степени доктора ветеринарных Наук

Москва - 1990

У

/

/

Работа выполнена в Белгородской сельскохезяйствегзгоа шгстк туте (учебно-научнои центре по сельскому хозяйству)

Научяий консультант- доктор ветерзкаркых паук.профессор Картаиова В.Н. (БПИИВС)

Официальные оппеязкты: доктор ветерииаршх каук,профессор Е/тао М.П. (ВНШ1Ш) доктор ветеряяаршлс наук,профессор Ильинский Е.В. (Кубанский СХИ) доктор сельскоаозяастввгоплс паук,профессор Бороздин Э.К. (ВШШплеы)

•Ведущая организация - ДештградсккЯ веторлиарпиЯ спститут

Заднта состоится " 1991 г> в час.

ка заседании спецяалпзировашюго совета Д. 120.46.01. прз Вссссэз-коа ©рщепа Друкба кародов шучио-исслодоаатольсЕса шстотуто вото-ргтарзоП сакатарзя (123022, Иосква, Звегагородскоо сассо,б).

С диссертацией в форма паучкого доклада моеео овпакошться в библиотеке Всесовзпого ердепа Друвба пародов каучззэ-пссяодева-теяъского ннстатута ветерзкарлой савдт&рая.

Дяссоргацгя в фораз шучпого доклада -разослана "о[1* ^^ 1990

Учешй секретарь специализированного совета Л.П.Пимепова

>

• . ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ .".- г/.,Актуальность темы. Повыаен:«э благосостояния трудящихся нашей страны неразрывно связано с ростом производства я улучшением качества продуктов животноводства.

Между том развитие молочного скотоводства в значительной мере одерживается из-за различных болезней коров и особенно мастита. Причиняемый ам экономический ущерб, выражающийся в снижении молочной продуктивности, преждевременной выбраковке яивотных, увеличении заболеваемости телят, ухудаешш качества молоха и молочных продуктов я аозизэшш количества бесплодных хоров, является зесьма о^утаааа а яровыпаэт таяоэоЯ от авогих других болезней (Г.В.Звере-за, 1964; 1981; ИЛ.Арх&нгельсхий, В.М.Картапоза, 1966; Д.ДЛогви-.аов я др., 1966; 1979; Н.М.Хилькевич. 1966; В.Я.Никитин, 1967; Л.С.ЗагазасаиЯ. 1971; А.Я.Батрааов, 1972; Н.К.Охсамитный, 1973; Н.Г.Затахин, 1973;*В.й.йутозин, 1974; И.И,Архангельский, О.А.Си-нзцгшЯ, Н.К.ОксаантныЗ и др., 1974; М.Г.Шфолпбов, 19'А; В.А.Париков, 1977; В.Н.Хоиепко, 1979; В.В,Винокуров, О.А.Сямецкий, 1979; В.Ы.Картагова, 1930; Е.Й.Карманова, 1981; В.И.Рубцов. 1981; В.Й.Вэспобоаияков, 1931; Г.А.Кононов я др., 1962; Н.И.Полянцев, 1983; В.М.Стародубцев а др., 1983; В.Л.Гончаров, В.А.Карпов. ИЛ.Якямчук, 1964; МЛ.Шайхаманов, Н.Г.Гаоанов, Я.А.Козырев. 1985; А.П.Солдатоэ; А.И.Лобанов, 1986; В.С.Шишиов, В.К.Копытин, 1988).

В комплексе мероприятия (диагностика, лечение, профилактика) по борьбе с маститами первостепенное значение имеет своевременное их диагностирование, вклвчаящее и определение чувствительности возбудителей этой болезни к антимикробным препаратам СН.М.Хи'ькевич и др., 1970; Г.В.Зверева, 1974; 3.1!. Поль, П.Л.Попой, 1976; В.А.Па-риков и др.. -1978; Н.Г.Гаеанов, О.А.Козырев, А.Г.Миляновский. 198А; И.Й.Балковоя и др., 1985;' В.Н.Картавова, З.Д.Демидова, 1986). . ,-мсг-п. что дяагиостяяа «г.гт-лгч должна оеуазстилятьея, в основном,

путём определения состава и свойств с грета молочной железы с помощью цитологических, химических, микробиологических и иммунологических методов исследования (В.П.Копытин, 1970; Н.Г.Шатохин, 1973; В.И.Рубцов, 1973; 1981; И.С.Загаевский, Г.Н.Куэьмин. .1975;

A.C.Овод, 1975; В.М.Картаиова, H.H.Оксамитный, 1977; О.Г.Богагов, I931»; И.А.Алексеев, М.Г.Мкролюбов, 1964; Г.В.Зверева, и др., 1995; Е.П.Карманова, В.Ё.Макарова, 1935). Однако взаимозависимость показаний, полученных с помощью различных методов диагностики, например, цитологических и химических, изучена ещё недостаточно, а в отношении достоверности отдельных из них имеются разноречивые, а порой и прямо противоположные мнения. Неоднозначно трактуются результаты микробиологического исследования секрета молочной железы. Чётко не определены критерии санитарно-технологической оценки молока. Нет и единых представлений по вопросам терапии и генетической профилактики этой болезни, хотя им и лосвяиено значительное количество исследований CA.И.Поспелов, 1972; А.Я.Батраков, 1977; Е.П.Карманова, А.Е.Болгов, 1979; Б.А.Банкиров, B.C.Пономарёв, i960; Э.К.Бороздин. К.В.Клееберг и др., 1981; В.А.Париков, А.Н.Савостин,

B.И.Слабодяник и др., 1982; Г.А.Кононов, А1Я.Киселев. Г.М.Андреев. 1982; Г.В.Зверева, 1933; И.Г,Ииролюбов, 1903; Т.А.Павлпченко,

Л.¿.Тарасович, 1983; С.Б.Оразалкева, J965; Н.И.Полянцев. А.ШСиня-вин, 1985; Н.Л.Бацаков. i9&6; Н.Й.Мирон, 1906; Н.Ы.Хилькввич, I9Ö7; А.П.Солдатов. О.Халодков, 1983; Е.В.Ильинский, И.А.Родин» 1988). Не изучено влияние новых доильных маинк на заболеваемость коров воспалением молочной железы. Кроме того, многие методы диагностики, лечения и профилактики мастита сложим и трудоёмки.

Следовательно, разработка яоввх, усовершенствование и сравнительная оценка суаествувлих методов санитарно-техвологической оценки молока, диагностике, лечения в генетической профилактики мастита - задача, реиить которую крайне необходимо.

Цель и задачи исследований. Цельв настоящих исследований являлось углубленное изучение и, на основе полученных результатов, совершенствование методов санитарно-технологической оценки молока, диагностики, лечения и генетической профилактики мастита, а также выяснение влияния новых доильных аппаратов на возникновение этоп болезни. •

В связи с этим на разрешение были поставлены следующие задачи:

1. Определить диагностическое значение количества соматических клеток в молоке, содержания в нём лактозы, белка, микроорганизмов, его рН, электропроводности и бактерицидных свойств при выявлении ранних стадия мастита; усовершенствовать диагностические показатели состояния "здоровья" молочной железы; дать санитарно-технологическую оценку молока с примесьв "маститного".

2. Теоретически обосновать использование поверхностно-активных вецеств (ПАВ) для диагностики мастита, определения санитарно-технологических свойств молока и разработать препараты из ПАВ для этих целей; усовервеиствовать некоторые способы индикации и идентификации стрептококков и стафилококков.

1 3. Выяснить, возможность диагностики мастита по первым струйкам молока, подученного из вымени до дойки,, и предложить более со-вервенну» конструхцио пластинки молочно-контрольной.

Разработать ускоренные и одновременно простые по выполнение способы определения.чувствительности возбудителей мастита к антибиотикам; предложить способы лечения коров, больных маститом, без применения антибиотиков.

5; Установить роль некоторых факторов э генетической устойчивости хоров к маститу и выявить критерии невосприимчивости их к этой болезни; уточнить методику оценки и отбора молочного скота по м&стйтоустойчивостн.

6. Определить влияние новых доильных аппаратов на заболеваемость коров маститом.

Научная новизна. Теоретически обосновано использование ПАВ для диагностики мастита (изучены механизм возникновения сгустка и способность различных ПАВ к его образованию). Доказана возможность появления сгустка при добавлении ЗАВ не только к секрету молочной железы, но и к некоторым другим биологическим объектам (крови, моче и др.), что открывает широкие возможности их применения при различных биологических исследованиях. На основании теоретических положений разработаны: усовершенствованные схемы оценки показаний димастина и масгидина; препарат "Доя" для диагностики мастита у

коров; препарат для диагностики ранних стадий мастита у коров (удостоверение на рацпредложение М-'."9-II/I633-33J; способ определения количества соматических класок в сборной молоке коров (удостоверение на рацпредложение ]ЙЭ9-П/2 468-72); .индикатор Ивашурц А.И для диагностики мастита у коров (положительное решетив *Л4602ЛЗ/1Э от 2Ji.I0.89 г. о выдаче авторского свидетельства); способ определения содержания лейкоцитов в крови (авт. свидетельство £365646); способ идентификации крови птиц, рыб и амфибий от крови млекопитающих по А.И.Йвапуре (авт. свидетельство M545I63).

Определено диагностическое значение количества соматических клеток в молоке, содержания в нём лактозы, бедка, микроорганизмов, его рН, электропроводности и бактерицидных свойств при выявлении ранних стадий мастита. Обоснована целесообразность диагностики мастита по молоху, взятому из вымени до доения животного. Доказано наличие в заготовляемой молоке, содержащем более 200 тыс/ыл соматических клеток, примеси "маститного*..

Предложена новая диагностическая оценка состояния "здоровья" молочной железы.

Сконструированы пластинка молочно-контрольная Иваоури А.И. (положительное реиекие £4669795/15 от 30.01.90 г. о выдаче авторского свидетельства) и прибор для разлива в неё диагностических пре^ паратов.

Для определения чувствительности возбудителей мастита к антибиотикам разработаны: ускоренный (пробирочный) метод определения чувствительности микрофлоры молока к антибиотикам; среда МВГ (мо-лочно-водо-глвкозная) для определения чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам (удостоверение на рацпредложение JH39-II/2563-87); способ определения чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам (положительное решение 64719119/13 от 30.05.90 г. о вы/аче авторского свидетельства).

Предложен способ патогенетической терапии коров, больных маститом, ло А.И.Ивашуре (положительное решение £4733206/15 от 23.08.90 г. о выдаче авторского свидетельства).

Выяснена устойчивость к маститу у симментало-монбельярдских помесных коров, у помесных животных разной степени кровности, подученных на базе симментальского и красно-пёстрого' голштинского скота, и чистопородного черно-пестрого скота по сравнению с чистопородными симменталами. Определена молочная продуктивность, жирность молока и скорость молохоотдачи у предрасположенных и устойчивых к этой болезни животных, принадлежащих к разным линиям, од-

ной и той же линий, а такяо у дочерей одних и тех же быков. Проведено изыскание критериев (маркёров) устойчивости коров к воспаление молочной келезы путём изучения некоторых показателей молока и полиморфных систем белков крови. Уточнена методика оценки и отбора молочного скота по маститоустойчнвости.

Изучено влияние новых доильных аппаратов (АДН-1, АДС-1, конструкции Белгородского СХИ) на заболеваемость коров маститом.

Практическая значимость и внедрение. Сформулированные теоретические положения о методике микробиологических исследований секрета поражённой маститом четверти вымени и оценке их результатов, о саннтарном качестве молока, содержащем более 200 тне/мл со-матическгсх клеток, механизме образования желеобразного сгустка при добавлении к молоку ПАВ и возможности последних вызывать появление его в зависимости от их химической структуры, поэволяпт не только более целенаправленно применять известиыо методы диагностики, ле-чзняя и профилактики маститов, но н создавать новые, более совер-сенкие их варианта. А теоретические выводы в отноиения ЛАЗ имеют обгебиологичасхое значение, что даёт вознойность разрабатывать препараты не только для диагностики мастита у коров, но и для других биологических исследований.

На основе диссертационных материалов разработаны 22 практических преддояония, 19 иг которых утверждены или одобрены МСХ СССР, Госегропроаол СССР, Госхо!шсе5;ой С!! СССР по продовольствию и закупкам, ЙСХ РС5СР, ВАСХНИЯ. На Харькояской биофабрике организован сер?!»ный выпуск препарата "Раствор сульфопола 20 £-най".

Основные разработку вкаесенные на защиту. Теоретические по-ло"ог;5п' сб использовании ПАВ. дли диагностики каст-та и их общебио-логнчоскон значении, о методика микробиологических исследований секрета пораненной четгертя'замени и оценке их результатов, о влиянии различных доильных аппаратов на заболеваемость коров маститом. Предлсгешшо оценки состояп'ш *здсрсз£ля мзлочней я^сэи и санитарного качества молока, содержащего более 200 тыс/мл соматических клеток. Разработанные и усовершенствованные методы и средства диагностики мастита, определения санитарного качества молока и чувствительности возбудителен это!? болезни к антибиотикам, лечения больных коров, селекционно-генетической про^ила^ики ^спале-ния молочной желеэн.

Апробация. Основные результаты исследований д- зны на: советско-финляндском симпозиуме, ¿0 осесоязных, 3 рз- ликанских

- 6 - ' и 9 зональных конференциях, симпозиумах, семинарах, а также на 10 заседаниях координационных советов ^ЯИИплем и ВНИИВС,-

Публикация. По теме диссертации опубликовано 78 работ, из . них 61 (КГ в соавторстве) в изданиях,- утверждённых. ВАК СССР для опубликования материалов по докторским диссертациям: в 5 книгах (книги написаны без соавторов), в союзных и республиканских сборниках, авторских свидетельствах, журналах, материалах научных конференций, симпозиумов и семинаров. Шесть предложений признаны изобретениями (соавторов нет), три - рацпредложениями союзного значения (соавторов нет). Две разработки экспонировались на ВДНХ.

Обьём работы. Диссертация в форме научного доклада изложена на 49 страницах, состоит из общей характеристики работы,экспериментальной части, выводов, предложений для практики, списка работ, опубликованных по теме диссертации, содержит 13 таблиц и I рисунок.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнялась на протяжении 1968-1990 гг. Основные исследования проводились в Белгородском СХИ (учебно-научном центре по сельскому хозяйству).

Диагностировали мастит по методикам, утверждённым ИСХ СССР, Госагропромом СССР, Гссу'^' гтвеннкм комитетом СССР по гтандартгм.

.^следования с использованием приборов *$оссоматик" и "Милко-скан 203" проводили во ВНШРГ1 (г. Ленинград-Пушкин).

Реакции крН; йолока определяли рК-мотр-миллизольткетром Ш-60 М и индикаторами - бромтимоловым синим и феноловым красив.

Санитарно-технологичеоиш свойства молока изучали на Белгородском молочном комбинате.

Ыузейвые штаммы микроорганизмов получади из Государственного контрольного института медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевнча (г. Москва).

Электропроводность молока определяли, используя прибор •Mi'U CHiCKBK • (яповия).

Полиморфные системы белков крови и частоту генотипов по ним устанавливали методом горизонтального электрофореза в крахмальном геле по методу 0.Смятиеа CI955) в модификации JLС.Жебровского в В.В.Китвтьхо <1979).

Определение плотности, кислотности, количества сухнх невеста, СОКО, наличия различных микроорганизмов и других показателен при исследовании секрета мелочной железы, а такие подсчёт клеток в крозн проводили согласно оувествувиим, официально ут-•верхд|нвым методикам.

Подученные экспериментальные данные обрабатывали статистически, определяя-, ¿редквв арифиетячосхув (х), коэффициент вариация (Cyf). квадратичное стандартное отклонение С 5Х), коэффи-' цаент корреляции Cr ). Достоверность полученных сведений устанавливала по представительности средней /Q и критериям Стьвдента. Достоверность результатов исследований, выраженных а процентах, определяли оо методу 5? (хи-квадрат). Влияние различных факторов неустойчивость коров к маститу выясняли с помои'ьв дисперсионно^ . го анализа,•контролируя достоверность по критериям Фидера. Вычисления проводили на программированном микрокалькуляторе "Электроника ЯК-56*.

Более подробные введения об использованных материалах и методах; а также новых методах, разработанных нами при выполаении данной работы, приводятся в соответствующих разделах, где излагаются результаты исследований.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Диагностическое значение кол*.-:ества соматических клеток в молоке, содержания s ней лактозы, белка к микроорганизмов* его рН, электропроводности я бактерицидных свойств при выявлении ранних стадий мастита

Поскольку в секрете четвертей вымена, поражённых маститом, -количество соматических клеток в белка увеличивается, а лактсзн снижается, мы (А.Й.Кваиура, Т.А.Павлвченко, Л.Ф.Тарасавач) ровили выяснить взаииозависимость изменения етих показателей в молоке отдельных коров с целью использования их для определения его санитарного качества и диагностики воспаления молочной железа.

Для этого .в молоке каждой коровы определяли количество соматических клеток, белка я лактозы (табл. I). Оказалось, что с увеличением содержания соматических клеток количество белка возрастает (f «0,87 при Р^.0,001), а лактоза уменьшается (Г--0,91 лрв Р^ 0,001). Причём, такие изменения уже достоверны у проб молока, ямевцих 0,2-0,3 млн/мл соматических клеток, в сравнении с пробами предыдущего. порядка по содержании последние (во всех случаях Л» 95), Э?и сведения показывает, что нормальное количество соматических клеток в молоке здоровых коров в больвинстве случаев не должно превыиать 0,2 та/т,-

Полагая, что здоровых коров, в молоке которых содержится нормальное число соматических клеток, встадв должно быть гораздо больше, чек больных маститом, мы (А.И.Иваиура, Т.А.Павлючен-ко, 1.$.Тарасович) решили выяснись структуру исследования* проб молока « учётом содержания в них семагическкх клеток. Оказалось, что >а 687 исследованных проб (коров) 77,29 % содержали их до 0,5 млн/мл, г том числе 31,64 % проб - до 0,1 клн/мл соматических клеток, 31,00 - от 0,1 до 0,2, 17,7 - от 0,2 до 0,3, 10,92 -от 0,3 до 0,4 к 8,66 - от 0,4 до 0,5. То есть в большей части

(62,72 %) проб полокл, содержащих до 0,5 нлм/мл соматических

клеток, насчитывалось их не болов 0,2 мди/ыд. Следовательно,

подтвердилось мнение, что в больпинстве случаев нормальным явля

ется содержанке соматических клэток до 0,2 млн/мл молока.

I. Содержание белка я лактозы в пробах молока коров с различным количеством соматических клеток

Количество ! Содераание, %

| сел,а | лактозы -

млн/ил 1 X_! ^У % I .5x1 х ! У% ! 'х

До ОД 3,22+0,04 13,04 0,42 4,78+0,05 9,83 0,47

0,1-0,2 3,28+0,03 9,76 0,32 4,75+0,04 7,16 0,34

0,2-0,3 3,*» +0,07 16,18 0,55 4,52+0,09 . 10,18 0,46

0,3-0,5 3,52+0,09 18,18 0,64 4,44+0,07 10,59 0,47

0,5-1,0 3,58+0,16 32,4 . Г,16 4,37+0,1 13,04 0,57

Более 1,0 3,55+0,03 ГО, 70 0,33 4,25+0,09 13,18 0Р5б

Пословице расчЗты показывает, что в I мл сборного нолока этого стада будет содержаться 0,184 шж соматических клеток. Понятно, что осла в иего ввести несколько коров с повипенным количество» соматических клзтой в нолоае, то пооледноо разбавится в сборной а в 1 йп все равно их будет содержаться до 0,5 млн/мл. Нпприкор, пра вводешш на швдыв 100 аиаотиых данного стада 9 коров, в. молоке которых насчитывается 4,0 млн/мл соматических клеток,, в I мл сборного иолоаа в атом случае их будет находиться 0,499 млн. Следовательно, сборное молоко, содержащее 0,2-0,5 та/мл соматических кле-тоа, всегда содержи? примесь молока больных маститом коров, причём рост числа соматических клеток свидетельствует об увеличении прлмеси последнего.

Лама изучено изменение реакции (рП) молока в зависимости от содержания в нём соматических клеток (табл. 2). Оказалось, что

-10 - • , • даже при наличии в I мл альвеоля. зого и соскового молока, полу* ченного из каждой четверти вымени отдельно, более 1,0 млн сома-• тических клеток только, соответственно, у 21,15 % и 59,8 % ис-' следованных проб было изменено значение рб в щелочную сторожу: ^'соответственно, Г/»0,33 и /^0,57 (Р^0,001). к в пробах молока »из удоя каждой коровы, имеющих до I млн/мл соматических ыетох, сдвиг рН вообще не обнаружен. И в пробах, содержащих их более I млн/мл, изменение рН было отмечено только в 5,77 % случаев. Следовательно, определять рН молока с целью диагностики ранних стадий мастита нецелесообразно, а используемые для этого 5 уМшй раствор димастина, 2 %-няй раствор маствдина к особенно ГО раствор маегадина не дают обьективных сведений о "здоровье" вы-■мени по данному показателю. Более того, входящие в состав указавших препаратов красители (индикаторы) вообще не нужны, т.е. без ^-всякой пользы расходуются дефицитные и дорогостоящие химические ; -реактивы.

■ 2. Значение реакции (рЕ) молоха в зависимости от содержания в нём соматических клеток

<• Содержа-' н дие со-"мати^ес-*-ких кле-"ток в молоке, к млн/мл ' Значение реакции (рЮ проб молока

взятых перед ¿оени-!язягых после дод- !из удоя каждой ей (первые сг^уйки)1ния Сальвеолярное ] коровы !ыолоко) <

6.3-6.9 ! >6.9 ! 6.3-6,9 ! >6.9 ! 6,3-6.9 Л>о,9

количество проб, }

До 0,5 99,46 0,54 99,89 0,11 100,0 0 0,5-1,0 78,95 21,05 93,66 6,34 100,0 0 Более 1,0 40,02 59.8 78,85 21.15 94.23 5.77

Диагностическое значение электропроводности молока при ранних стадиях мастита изучали путём параллельного анализа одних а тех же его проб, определяя количество соматических клеток, рН л электропроводность. Коэффициент корреляции между количеством соматических клеток я электропроводностью оказался для первых струек

молока 0,66, для альвеолярного молока 0,58, для удоя коровы 0,56 (Р^0,001). Увеличение электропроводности наблюдается и при возрастании рН - как в молоке, полученном до дойки (г'-О.вг), так и в таковом, взятом из вымени после дойки С 59): (Р^0,001). Таким образом, и с учётом данных таблиц 3 и 4 нами установлено, что с увеличением в молоке соматических клеток и значения его рН возрастает и его электропроводность, хотя не строго пропорционально, что, очевидно, связано с другими факторами. Электропроводность проб молока, полученных из отдельных четвертей вымени и из удоя коровы, но о одинаковым содержанием соматических клеток, значительно отличается. Крона того, она начинает меняться позже по сравнеияэ о изменением количества соматических клеток, но несколько рааьсо, чем сдвигается реакция (рН) молока. Но во всех •пробах иолока о измененной реакцией (рН) изменена и электропроводность (Р-¿0,001). Следовательно, определенней количества соматических клеток в молоко можно выявить более ранние стадии мастита, чем измерением его электропроводности. Но показатель электропроводности является более надежный диагностическим тестом, чем значение рН.

При сопоставлении количества соматических клеток в молоке и величины ого рН с бактерицидными свойствами было установлено (А.И.Ивапура, В.А.Гордеев), что последние отсутствовали во всех пробах молока, иневцих цедочиув реакции СрН). Что же. касается количества соматических клеток, то такое явление стабильно наблвдалось лииь при значительном их увеличении - до 3,5 млн/мл и более ( Г'«-0,52 при Р¿-0,001). Следовательно, бактерицидные свойства молока исчезают позже, чем происходит увеличение в нём количества соматических клеток, по раньше, чем изменяется его рН.

Диагностическое значение наличия микроорганизмов в секрете ¿ШР^нЩ^меж- Результаты напих исследований показали, что сек-

... - 12 - , рет молочной железы коров, больных маститом, содержит кикроорга-' низмы в значительно больней числе случаев.. (8%,85 >), чем молоко здоровых животных (9,07 Я* СР^0,001). Поскольку кикрооргани»-мы не выделены из 15,15 % проб секрета пораженных'маститом четвертей вымени, можно было бн считать, что у части животных воспаление вызвано какими-то другими причинами нвивфекционного ка- . рактера. Именно такого мнения и придерживается многие исследователи.

3. Зависимость электропроводности молока от количества содержедихея в ввм сематичеокях клеток .

Количество соматических клеток ¡Порция ¡молока ! Удельная электропроводность,|По значению { „см/см влектропровод-, ш*/ «и ¡ности выявлено

в молоке, млн/мл > : 1 ! ! > пораженных мас-!титои четвертей ¡вымени, %

п.с. 5,40+0,02 9,58 0,52 9,87

До 0,5 а.м. 4,93+0,02 10,12 0,50 5,63

у.к. 5,0 +0,02 - _7гРЁ _ 0,35 0

п.с. 6,14+0,09 12,83 0,79 53,16

0,5 - 1,0 а.м. 5,44+0,06 10,74 0,58 25,69

у.к. 5,17+0^05 _ -Л*. _ 0,37 2А17

п.с, ~ 7,53+0,13 21,31 1.6 ' 75,04

Более 1,0 а.м. 6,54+0,09 17,33 1.13 62,80

у.к. 5,52+0,13 17,67 0,97 10,35

Условные обозначения: п.с. - первые струйки молока; а.м. - альвео-

лярное молоко; у-к. - удой коровы.

Однако мы (А.И.Лваиура, А.С.Овод, С.А.Гордеев, А.А.Бокун) установили, что за период переболевания коров маститом микроорганизмы выделяются с молоком из поражённой доли вымени не постоянно. Даже были отмечены неоднократные случаи, когда при положительной реакции на мастит с препаратом мастидин из молока отдельных четвертей вымени микрофлору выделить не удавалось, хотя в

- 13 - '

предшествуицих исследованиях при отрицательной реакции на масти-дин из молока ¡этих же четвертей выделялись микроорганизмы в значительном количестве. Это явление мы объясняем активной иммунологической реактивность» организма на раздражитель, вследствие чего происходило подавление микробного агента. Об этом свидетельствуют и те случал, когда при подсчёте лейкоцитов под микроскопом был ясно виден фагоцитоз /кокки внутри лейкоцитов/, но бактериологический анализ этой же пробы молока давал отрицательный результат. #агоцятарнув активность лейкоциты сохранявт и в течение нескольких часов после выдаивания молока. Важно и то, что в настоящее время известно более 90 видов микроорганизмов, способных вызвать мастит. Создать необходимые условия культивирования для всех возможных возбудителей практически нельзя. Следовательно, 'иевнделенаэ микроорганизмов из сокрота четверги вымени, поражённой маститом, указывает в основном (особенно прн однократном анализе) но на стерильность воспалительного процесса, а лишь на то, что с помодьв используемых методов исследования выявить возбудителей мастита в конкретном случав не удалось. Поэтому, диагностировать ранние стадии мастита по наличия микроорганизмов в секре-то молочной железы следует с. большой осторожностьо.

Зависимость электропроводности молока от его реакции СрН)

Реакция]Порция СрЮ |молока молока | ! Удельная ! * электропроводность, мСы/см 1 5х !По значению электропроводности вы-4-явлено пораженных !маститомчетвертей !вымени, %

6,3-6,9 п.с. 5,53+0,03 13,16 0/7Э 16,65

а.м. 5^21+0,03 _ 15^5 _ _ 0,61 15^83

>6,9 п.с. 8,42+0,14 15,5 1.3 100

а.м. 7,97+0,23 15,02 1,19. 100

Условные обозначения: п.с. - первые струйки молока; а.м. - аль-

веолярное молоко.

Для усовершенствования оценки состояния "здоровья" молочной железы изучали динамику заболеваемости коров маститом путём многократного исследования одних и т>л же животных. Так, проверяя (А.И.Йвапура, С.А.Гордеев) 400 коров через каждые' 1-1,5 мес. в течение года, регистрировали эту болезнь постоянно. Всего переболело 70,3 % животных. Но ежемесячно количество больных коров ко-, лебалось от 12,6 до 38,4 % (Р^0,001) и в среднем составило 21,5 %, В другом случае при еженедельной диагностике были получены принципиально подобные данные. Даже при ежедневном исследовании количество больных животных и особенно поражённых четвертей вымени заметно изменялось, причём крайние показатели их оказались достоверными уже по истечении 14 дней (Р^0,05). Следовательно, наряду с длительным течением болезни у многих животных (до 52,5 f) отмечалось быстрое самовыздоровление. Поэтому необходимо дифференцировать истинный мастит от раздражения молочной железы, так как их лечение и профилактика различны. .

Нарушения состояния "здоровья" молочной железы обычно обозначали, согласно литературным источникам, такими терминами, как мастит абактериальный (асептический, т.е. б'еэмикробный), латентный (наличие в молоке патогенных микроорганизмов без проявления каких-либо других признаков боле?ни), субклинический (скрытый) и клинический. Иногда использовали и термин раздражение, подразумевая под ним нарушение секреции молока.

Учитывая, что ебактериальный мастит проявляется лишь нарушением секреции молока (раздражением) и быстро переходит в инфекционный или претерпевает обратное развитие, ведущее к выздоровление животного, мы предложили назвать его раздражением молочной хелезы. Что касается латентного мастита, то мы считаем, что коль нет каких-либо признаков воспаления, то нет и мастита, а факт обнаружения в секрете четверти вымени патогенных микроорганизмов следует

расценивать как бактерионосительство. Понятие же скрытый мастит весьма условно а зависит от того, насколько правильно проведено клиническое исследование животного и особенно молочной железы. 5. Диагностическая оценка состояния "здоровья" молочной железы

| внешнего

Состояние "здоровья молочной ! вида вы-железы (да-! мени агностичес-! вал оценка)!

! Изменение! Измене-! Увеличе-!Наличие

ние ко- ¡микроор-•-----------

! иия в

! ткани ! личеетва'.ганизмов

! вымени ! сомати- !в молоке

! ! ческих !

! ! клеток в!

I

молоке

!

Проба отстаивания

Здоровая

Бактерионосительство

Раздражение

•Настит

+ иногда - + иногда - +

иногда *■

+ + иногда

Учитывая эыпеязложенное, нами предложено по результатам комплекса диагностических исследований (табл. 5) различать еле-дувщие состояния "здоровья" молочной железы: здоровая, бактерионосительство, раздражение, мастит. •

Теоретическое обоснование и разработка методов диагностики мастита и определения санитарно-технологических свойств молока с помещьэ поверхностно-активных веществ (ПАВ)

Поскольку количество соматических ядерннх клеток (в основном лзйкоцятоз) э полого является однна яз оспозных показателей состояния "здоровья" вымени ж санитарко-тохнологаческях свойств молока, кн (А.К.Кзашура, Й.А.Гордеэв, А,А.Бокуп) провела сравнительную оценку известных методов подсчёта клеток в молоке (Я.И.Архангельского с соавторами, Д.К.Семсновой, Н.И.Хилькевича, Паппен-гейма в модификации К.И.Хижняковой, Ньюманса), используя в качестве контроля метод Прескотта-Ерида. Оказалось, что лучше готовить мазкн по Нышансу, так как фиксация, обезжиривание и окраска. их сведены в одну операцию, е. лейкоциты при микроскопии

' - 26 - - • видны более рельефно. Разница в ко:ачестве клеток, подсчитанных по любому методу, включая контрольный (кроме Л.К.Семеновой), была незначительна и недостоверна (Р>0,05). Но вое способы подсчёта клеток под микроскопом весьма трудоемки и, следовательно, не могут найти пирокого применения в хозяйствах.

Учитывая вышеизложенное, мы решили разработать методы опре- . деления соматических клеток в молоке с помощью препаратов, состоящих из ПАВ, как наиболее приемлемых для использования в условиях молочных ферм и комплексов. В первую очередь изучили механизм образования желеобразного сгустка при добавлении реактивов, содержащих ПАВ (димасггина, мастидина и др.), к молоку, поскольку мнения учёных по этому вопросу весьма различны. Так, по данным

(1957), Ф.О, ЬскаЬп (1960), И.Й.Архангельского и Н.К.Оксамитного (1969), ПАВ вступают во взаимодействие с клетками крови, содержащими ядра. Однако Ф- (1962), В„Й.Мутовин (1974), А.С.Погорелый (1983), И.С.Загаевский (1986) полагают, что в образовании сгустка в молоке принимают участие белки самого молока и этот процесс не связан с количеством в нем соматических клеток.

Изучение проводили, анализируя результаты реакций реактивов, содержащих ПАВ, с некоторыми биологическими обьектами (табл. 6). Согласно данным опытов И, 6, 7 и 9, в реакцию с ПАВ вступают ядерные клетки, поскольку лейкоциты любого животного и эритроциты птиц, рыб, рептилий и земноводных содержат ядра, а в эритроцитах млекопитающих их нет. На это же указывают и результаты опытов И1, 13 и 14 - в молоке коровы, больной маститом, и в моче чело-г века, больного циститом, резко возрастает количество лейкоцитов. Результаты опытов И2а и 126 также обусловлены наличием в молоке соматических клеток, содержащих ядра, одна часть которых попела при центрифугировании в осадок, а другая (клетки^ захваченные жи-

ровыми аарикаыа) - в сливки. Микроскопические исследования показали наличие*лейкоцитов в осадке и сливках и их полное отсутствие в плазме молоха. Чтобы установить компоненты ядерных клеток, вступавших в реакции с ПАВ, проведены опыты $2, 3, 5 и 8. Ими оказались ядра клеток. Но за счёт чего образуется сгусток? На причастность ДНК к образование сгустка при добавлении ПАВ к молоху указал (1962}. Проверяя ото мнение, мы к образовавшемуся сгустку добавил» фермент дезоксирибонуклеазу (ДНК-азу), который деполаиеризует молекулы ДНК. Во всех случаях наступало моментальное его разжижение (опыты МО, 12в). Учитывая, что фаркоит ДНК-аза строго специфичен и действует только на ДНК, можно утворздать - сгусток состоят аз ДНК.

Следовательно, механизм образования желеобразного сгустка , при добавления ПАВ я.различным бнологячзским объектам, содержащим ядерные соматические клетки, таков: ПАВ, разруаая ядра соматических клеток, образует комплексы с их белками а вытесняют ДНК из связанного (с белком) в свободное полимерное состояние, в хо-• тором она, из-за своеобразия структура макромолекулы (удлиненная), является вязкой.

Путём подкисления и подщелачивания молока больной маститом коровы мы установили, что образование сгустка при добавлении ПАВ в розко кислой среда не происходит. Именно этим1 объясняется тот факт, что отдельные проба сеярота, полученные из четвертей вымени, поражённых клиническим маститом (иногда гнойный секрет имеет кислуп реакцив), дапт отрицательный результат по желеобразо-ванив о димастином и мастидиком. Но и чрезмерное подшелачивание секрета ведёт к уненьвенив плотности образуюиегося сгустк^ и к его более быстрому самопроизвольному разжижении, поскольку в сильно щелочной среде наступает денатурация ДНК.

6. Реакция I мл 5 í-ного раствора димастииа, 2 %~тто раствора мастидина, 2,5 %-иого раствор? сульфонола я 3 ¡C-вого раствора сульфоната с различными биологическими объектами

I Биологический объект (0,1-1,0 ил): в чибтом !0бразова-№ опыта ! виде, при добавлении в молоко, при добавле- !ние сгуст-_! нии в дистиллированную воду_!ка_

1. Лейкоциты (любого животного) +

2. Ядра лейкоцитов +

3. Митохондрии лейкоцитов -

4. Рибосомы лейкоцитов -

5. Цитоплазма лейкоцитов

6. Эритроциты млекопитающих -

7. Эритроциты птиц, рыб, рептилий, амфибий + •

8. Плазма крови (любого животного) -

9. Взвесь куриных фибробластбв в среде 199 *■

10. Лейкоциты или эритроциты (любого животного) + -деэохсирибонуклеаэа (ДНК-аза)

11. Молоко больной маститом коровы +

12. Компоненты молока больной маститом коровы после центрифугирования:

12а. осадок или сливки +

126. плазма * . '

12в. осадок или сливки + ДНК-аза

13. Моча здорового человека*

14. Осадок мочи человека, больного циститом +

15. Молоко здоровой коровы ' . *

16. Дистиллированная вода _ -

Изучая способность различных ПАВ образовывать сгусток при взаимодействии с соматическими клетками, мы обратили внимание на обладающие хорошими мовдами свойствами анионактивные ПАВ: ал-килбензолсульфонаты (сульфонолы) - НП-I, НП-2, НП-3, хлорный • сульфонол; динатриевую соль сульфомоноянтарной кислоты (ДНС); пасту алкилсульфонатов на основе хлорсульфоновой кислоты (ХСК); алкиларилсульфонат (ДС-РАС); алкилсульфонат ("Волгонат"). Оказалось, по убывающей способности образовывать сгусток сульфоно-лы можно расположить в такой ряд: НП-3, НП-I, хлорный, НП-2.

Именно в таком ряду расположены сульфонола и по моющей способности, которая возрастает с удлинением алкильной группы в юс формуле, где обычно /? - алкил С10 - С1Э. ДНС обладает лучшей моющей способностью и даёт более выраженный сгусток по сравнению с ХСК. "Волгонат" по обоим показателям приближается к сульфонолу НП-З. Изучаемые свойства ДС-РАС оказались самыми низкими по сравнению с таковыми других ПАВ. Следовательно, можно прогнозировать способность различных ПАВ (по их моющим свойствам) вступать во взаимодействие с соматическими клетками, а не подбирать их вслепую путём проб и овибок.

Вышеизложенные теоретические концепсии нами были использованы при усовершенствовании существующих и разработке новых препаратов из ПАВ, предназначенных для диагностики мастита и определения санитарных качеств молоха.

Так, оценку результатов реакции молока с диыастином (автор В.И.Йутовин) и мастидинои (авторы И.И.Архангельский и Н.К.Окса-млтный) по образованию сгустка первоначально осуществляли по схе-■ ме, приведенной в таблице 7. Учитывая, что образование сгустка зависит от количества клеток в молоке, «ы решили выяснить, какому числу их соответструпт отдельные показатели реакций этих препаратов. Оказалось, что пробы молока, реагирующие с димастином и 2£-ным каствдином даже на один крест /+•/, имеют клеток более I млн/мл (Р ¿.0,001). к поскольку содержание их более 0,5 млн/мл свидетельствует о нарушении "здоровья" вымени, реакцию, оцениваемую любым количеством крестов, следует считать положительной. Что касается 10 ^-ного мастидина, то нет смысла устанавливать сомнительную реакцию при слабом сгустке /++/ и отдельно п ложи-тельную реакцию» а тем более делить положительную реакцию на два показателя /+++, ++++/, поскольку это не играет никакой роли -ведь молбко животных, давш«х эти реакции, обязательно исследуют

- 20 -

5 %-ныи раствором димастина иди 2 %-ти раствором мастидина. Поэтому нами предложена схема учёт* результатов реакций этих препаратов с молоком по вязкости желе: отрицательнее реакция -однородная жидкость (-); сомнительная реакция - следы образования желе (-); положительная реакция - ясно видимый сгусток Сот слабого до плотного) (+). Цвет сгустка значения не имеет. 7. Оценка реакций молока с димаотином и мастидином

Учёт реакции, в крес тах ! Изменение консистенции -! молока 1 1 {Оценка результатов реакции с !5 i-ным димас- !2 £-ным и ! тином !I0 а—ным ! !мастидином

+ Следы образования.желе отрицательная отрицательная

++ Слабый сгусток, который нельзя выбросить палочкой из луночки раздражение сомнительная

+++ Умеренный сгусток, который с трудом выбрасывается палочкой из луночки раздражение положительная

++++ Плотный сгусток, легко выбрасываемый палочкой из луночки положительная положительная

Мы (А.И.Ивашура, В.§.Городцов) разработали препарат "Дон",

состоящий из ПАВ и красителя (индикатора). Он даёт такие же показатели, как и 2 %-ний мастидин, но имеет несколько меньшую стоимость.

Поскольку из изученных ПАВ (см. выше) сульфонол НП-3 показал лучший результат, нами разработан новый реактив (уже налажен его серийный выпуск) - универсал (раствор сульфонола 20 #-ный), предназначенный для определения количества соматических клеток в молоке и диагностики мастита (в соответствующих разведениях обычной питьевой водой, отвечавшей ГОСТу "Вода питьевая") - как по удою коровы (50 растгор), гак и по лэлоку, полученному из каждой

четверти зыызт в отдельности (12,5 !-яый раствор). По отноиенив

к димастину, мастидину, "Дону", мастоприиу он обладает различными комплексами преимуществ из числа следующих: большей чувствительностью, более длительным сроком годности, удобствами при проведении исследований, меньшей стоимостью, безопасностью для обслуживающего персонала, лучшей биологической распадаемостыо (до 92 НУ.

О чувствительности предложенных реактивов в сравнении с известными препаратами, утвержденными ГУБ МСХ и Госагропромом СССР, можно судить по данным таблиц 8 и 9 (А..Й.Ивашура, Т.А.Павлпченко.

Тарасович). Наибольшей чувствительностьп обладают 2,5 £-ный раствор мастоприма и универсал, давшие одинаковые показатели. Чувствительность 10 £-пого раствора мастидина и 50 $-ного раствора универсала также одинакова, по несколько ниже, чем предыдущих .препаратов. Следующее место занимает 12,5 раствор универсала, затем ид§т 2 £-иый раствор мастидина. Наименьшую чувствительность проявляв* 5 £-ный раствор димастина (Р^ 0,001).

Учитывая, что "Волгонат" по своим свойствам очень близок ' сульфополу НП-3 (си. выше), нами разработан препарат, получивиий название "Индикатор Йваауры А.И. для диагностики мастита у коров", ЕйОзщШ.савдуацеэ соотиоаэнйа компонентов вперосчЗте на химпчес-рп чистое воцостзо, иао.£: "Волгопат" - 4,5-5,4, кальцинированная оода - 0,9-1,0, вода ДЕегсшшреванпаа - оетальпоз до 100. Он даёт <?акие же показателя, как а 20 %-ьШ раствор сульфонола, но имеет кэпьвув стоимость (в три раза), более удобен в работе (при хранения раствора осадок не образуется), обладает большей биологической распадаемостьв (до 99 %) и менее опасен для здоровья человека.

Теоретические положения о механизме образования сгус ха при взаимодействии ПАВ с клетками не только дают возможность разрабатывать методы цитологического исследования молока коров, но имеат общ'ебиологическое значение,'поскольку реакция наступает не-

зависимо от того, в какой биологической жидкости содержатся клетки. Подтверждением служат разработа>..(Шв нами "Способ определения количества лейкоцитов в крови" и "Способ идентификации крови птиц, рыб и амфибий от крови млекопитавщих по А.И.Ивашуре".

8. Соответствие показаний реакций различных препаратов количеству соматических клеток, содержащихся в молоке (млн/мл)

Ре-!пока-ак-!зате-ция'.ли ,15^-ный ]2£-ный !10£-ный!2,5#-ный!12,5^-ный!50^-ныЙ!Уни-¡раствор¡раствор !раствор!раствор 1раствор ¡раствор!вер-¡димас- !масти- !масти- !масто- !универ- !универ-!сал 'тина .'дина !дина 'прима !сала !сала !

X 0,38+ 0,35+ 0,2 + 0,17+ 0,31+ 0,2 + 0,17+

0,02- 0,02- 0,006 0,005 0,01; 0,006 0,005

- 139,8 151,4 70 64,71 83,87 70 64,71

Ьх 0,53 0,53 0,14 0,31 0,26 0,14 0,11

X 1,65+ 1,62+ 0,66+ 0,53+ 1,4 + 0,66+ 0,53?

0,06- 0,07- 0,02 0,02- 0,06 0,02; 0,02-

+ % 34,55 35,19 , 27,27 34,0 , 32,14 27,27 33,96

Ьх 0,57 0,57 0,18 0,18 0,45 0,18 0,18

X 2,3 + 1,87+ ' 1,3 + 0,75+ 1,77+ 1,3 + 0,74+

+ 0,08- . 0,06 0,06- 0,02- 0,06- 0,06; 0,02

26,09 28,88' 34,62 21,33 32,2 . 34,62 22,62

5х 0,6 0,54 0,45 0,16 0.57 ' 0,45 , 0,16

Используемые для проведения реакций препаратов из ПАВ с г моло-

ком пластинки иолочно-контрольные ПИК-1 и ПМК-2 имеют ряд недос-

татков: отсутствие сита, что не позволяет достаточно четко определить в молоке наличие гноя, хлопьев, сгустков и других включений; отсутствие ручки, вследствие чего оператору (доярке) необходимо держать её за рабочую часть, в том числе и при мойке, что негигиенично; отсутствие крвчка, за который пластинку можно было бы повесить, например, на доильное ведро.

Нами предложена лишенная этих недостатков пластинка молочно-

контрольная Ивапуры А.И. (рпс. I) с четырьмя лунками и отходящими от них сливами. Пластинка I снабжена ручкой-крючком 2. Над каждой лункой закрепляется с помощьо зажима сьёмное сито 3, разделенное сплошными диаметрально расположенными перегородками на 4 равные секции, причэи размер отверстий сита в каждой секции разный.

9. Показания различных реактивов в зависимости от количества соматических клеток, содержащихся в молоке (количество проб в %)

Реактив !Реак~! Количество соматических клеток в I мл

j ц11я i _молока, млн» _

_! {до 0.5 Í0.5 - 1.0 I 1,0 - 1,5 '. более 1.5

5 2-ный + 0 0 51,7 20,9

раствор

диыастнна__+___0_____0______Зх4____67,1___

2 *-иый t 0 1,1 41,4 14,3

раствор

мастадина__+___0_____0_____26а4____75,2____

10 Х-ный X 3,6 62,4 8,1 0

раствор ...

наствдана _ _ ±___0_ ___19,3___91^9____100^0____

2,5 '¿-пня + 8,3 32,3 2.3 0

.раствор . v

мастогфйиа__+___0Д4____65,6___97^7_ ____100^0____

12,5 g-ннй ' ? '. 0 4,3 36,8 9,5

раствор

¿1тварсала__ _; +___t0____. _ 0 41л4 _ 86^7

50 Й-чнй . % 3,63 . 62,4 8,1 0

раствор

¿ниверсала_ _ +___0_ ^ ____19,3____91х9____100А0____

' + .8,3 32.3 2,3 0

Универсал

______+ 0,4 45,5 97,7 . 100,0

Примечание. В остальных случаях все реактивы давали отрицательные реакции.

Используитеё следующим образом. Доярка сдаивает на сихо первые струйки молока - из каждая четверти зиме.ни ъ отдельную лунку. Затем осматривает сита. Если на них нет каких-либо хлопьев, сгустков, пленок, то она, наклоняя пластинку, выливает молоко,

7

r—, Пластинка нолснно-хмтгмма* îffautw Л1/.

ßu-Bß

с:

JjSmop: Цёашуга I/.

после чего пластинка готова для заполнения молоком другой коровы. Воля же на одном или нескольких ситах будут замечены какие-либо включения, то доярка после слива молока из всех лунок эти сита заменяет чистыми - и пластинку опять можно использовать. При диагностике мастита с помочью специальных реактивов наполнение луночек молоком осуществляют таким же образом. Ветеринарный врач осматривает поверхность сит, затем снимает их и наклоняет пластинку на 30-40° для выливания излияков молока, далее переводит пластинку в горизонтальное положение и добавляет в луночки необходимые реактивы. После окончания исследования молока пластинку моют в теплой воде, насухо вытирают, ставят на место сита - и она готова к приёму молока от следующей коровы.

Кроме указанных преимуществ, предложенная пластинка даёт •возможность дифференцировать принеси молока - следовательно, и определить форму воспалительного процесса. Так, при процеживании молока, води оно нб содержит викаких примеоей, ни одна из секций сита не покроется отложениями. Вели молоко содержит очень мелкие ' фракция серозного экссудата, они покроют только секцию сита с самими маленькими отверстиями. Более крупные фракции, характерные для фибринозного мастита, покроют две секции, ещё более крупные примеси, образующиеся при катаральном мастите, три секции, а самые крупные включения, характерные для гнойно-катарального мастита, покроят отложениях* все четыре секции сита.

Для ускорения процесса разлива препаратов мы (А.И.Ивашура, В.Ф.Городцов) предложили прибор (жестко скрепленные два флакона с пипетками-автоматами), позволяющий добавлять реактив сразу в две луночки пластинки молочао-контрольной. Изготовить его ложно в любой слесарной мастерской*

Согласно имеющимся нормативным документам, для исследования на мастит молоко из каждой четверти вымени отбирают после выдай-

: - 20 - ■'■ вания коровы (альвеолярное молоко). Однако отбор этих проб, особенно при использовании доильных установок "Елочка" и "Таидеи", ведёт к затягиванию дойки. Поэтому мы предложили для диагисетк-ки мастита использовать сосковое молоко (первве струйка). Ери фактичзски одинаковых диагностических ноаааатежях (совпедалхгаеть результатов исследований составляет 90,03 %. Г »0,79, Р-; 0,001), процесс отбора молока хороно ышсывается в современную технологию его получения, поскольку сдаивание первых струак предусмотрено правилами маикнкого доения, следовательно отбор проб в сдаивание первых струек можно ебвместить.

Некоторые пробы соскового молока дают полокзтелыше реасцсц при отрицательных показателях проб альвеолярного ыолозт, взятых от этих же хоров. Следовательно, при диагностике кастета по сосковому молоку будут полнее ваявлеки животные с патологичаскши изменениями в соске, что. очень важно, ибо своевреманно принятые профилактические в лечебные шры позволят быстро купировать ра£-виваощийся патологический процесс, а затеи к полносгьв его ликвидировать.■ .* '

Соврекенстзование некоторых методов кндкаации в вдентификедий стрептококков и стафилококков Учитывая, что стрептококки и стафилококка являются оскоьыа-

ии возбудителями маек;; херов (по налим данным, в 83,49 % заболеваний), нами усовераекствованы некоторые методы индикации к идентификации этих микроорганизмов. "■•/.,

Установлено, что для постановки САМР-теста с целью идентификации. стрептококков серологической группы В можно использовать не только штаммы стафилококков, продуцирующие ^-гемолизин, но и смешанные - и <£/5 -гемолизины,' причём в последнем слу-

чае САМР-тест проявляется даже несколько лучше.

Разработан способ хранения патогенных стрептококков. Засеян-

-Z? -

вне пробирка (10 мл стерильного молока, подщелоченного до рН 7,6-7,8) инкубирувт при температуре 37 °С в течение б часов, а затем хранят при-4 °С. Стрептохохка на этой среде сохраняются б нзсяцзв. Образуощнйся слой сливок предохраняет среду от высыха-

Ы№. ,

При вчращавачни стафилококков на кровяном агаре содержащем 7,5 $ ÑbZl Йндо замечено, что наличка в среде соли резко тормозит юс способность гемолиэировагь эритроциты. Установлено также, что жвзточно-солевса агор непригоден, для проверки лецитовител-лазиоЯ активности у стафилококков "бычьего" происхождения. Но постановка отой реакция эозмсана на желточном агаре.

Путей сравнительного анализа доказано, что предложенный С.Л.Пегрозач ускоренный изтод опредояенпя коагулазной активности сТЕфалокойков, Еддейешшх от ладей, можно применять в ветеринарной практике. "•

Установлена возможность использовать определение наличия лвзоцкма у стафадококзов "бычьего" происхождения как теста иден-тификацни отих ьткроергаиязыав. / ; •

. Набором фагов института питания Академии медицинских наук СССР типировались только 67,7 í втаммов стафилококков - возбудителей мастита, что указывает на необходимость его дальнейшего совершенствования. ;

Санитарно-технояогическая оценка молока, содержащего примесь "маститного"

Влияние мастита на санитарно-технологические свойства молока выясняли путём изучения его образцов, содержащих различное количество йримёсй ."Маститного" молока, а приготовленных нз них кефира и творога (табл. 10). Снижение.плотности нормального молей обнаружено при добавлении к нему 10 % "маститного". жирности - 15, С0"0 - 10, кислотности -ДО, сухого вещества - 10 %

. /;.;/ , / - 28 - -л'; ,

(P-¿ 0,05). При изготовлении кефира и творога длительность.образования сгустка возрастала, а кислотность готовых продуктов снижалась уже при наличии в молоке 5 % "маститного*,СР^ 0,001).

10. Санитарно-технологическке свойства молока в зависимости от примеси "маститного*

i Нормаль-j"Мастит-¡ ное ¡ нов" ; молоко {молоко

Показатели

Примесь "маститного" молока в нормальном. %

5

10 1 15 Г 20

Плотность, °А Кислотность, Хирность, % Сухое

вещество, % COMO. %

Класс молока

28.75+ 0.15

16,95? 0,09

3,5 ? 0,06-

11,96+ 0,03-

8,48+ 0,01-

I

25,5 + 0,1 V

13,11+ 0.19

2,45+ 0,08-

9.88+ 0.04

7,42+ 0,01/ *1У

28.5 + 0,12-

16,45+ 0,13-

•э> +

0,06-

11,791+ 0,03

8,4 + 0,01-

П

23,05+ 0,15-

15,95+ 0,11-

3,35+ 0,07-

11,62+ 0,03

8,27+ 0,02-

П-

26,95+ 0.14

15.95+ 0,093,2 + 0,06

11,16+ 0,03

7,96+ 0,01

26,0 ♦ 0,16-

М.98+ 0,153.1 + 0.07

10.86+ О.М

7,71 + 0.02

U

Длительность образования сгустка при выработке: кефира, чае

творога, час

Кислотность: кефира, °Т

творога, °Т

.8,31+ 14,29+ 10,13+ 11,46+

0,04- 0,15 0,2- 0,21 •

8,28+ Творог не 9,66+ 11,17+

0,04 получился 0,1 - 0,26-

12,7+ 13,89+ 0,15- 0,16

12,18+ 13,97+ 0,13- 0,2

107,0+ 66,1+ 89,3+ 2,09 2,72 1,77

203,5+ Творог не 192,8+ 3,16 получился 2,56

82,2+ 76,5+ 67,9+

1,99 1,97 2,51

190,2+ 190,0+ 189,5+

1,79 1,43 1,73

Корреляционная связь между длительность» технологического процесса при выработке кефира й творога и показателями плотности, кислотности, сухого вещества и COMO молока /сырья/, а также кис-

«отности кефира и творога является отрицательной и выражена сильно или очень сильно (от -0,84 до -0,99 при Р^ 0,01). Подобная связь, но только положительная, обнаружена между кислотностьв молока а готовых кисломолочных продуктов.

Незначительные отклонения органолеатичеоких показателей кафира а творога от нормальных были отмечены уже при изготовлении ах иг молока, содержащего 5 и 10 процентов примеси "маститного". С увеличением её содержания усиливались и пороки органолептичес-хих своЗотв приготовленных из него продуктов. .

Лечение коров, больных маститом В настоящее время наиболее часто при лечении коров, больных маститом, используются антибиотики. Наяк для этой целя был применен ектибаотик цофуроксим /кетоцеф/ яз группы цефадоспоринов (вкутрщцстариальво 750 иг в 5 %-исы растворе глякозы). Получен адлсзштелькый эффект. '

Однако имеется достаточно сведений о том, что возбудители кастига очень часто отзывается^устойчивыми не только к тому иля гкзку антибиотику, во и к комплексным антимикробным препаратам. Тэх, ssmj* обнарухенб от 4,7б ло 54,77 процентов (от числа исследованных четвертей, замени) возбудителей мастита, устойчивых s ;г;;ш«шйгяну, стрептомицину, эритромицину, тетрациклину, мококи-якяу, нёомщииу, ампициллину, гентаиицину, стрептобициллину, мае-гас^у-Д, дзфурояу. Следовательно, научно обоснованное вркшие-■«в антибиотиков возможно лниь при систематическом определении чувствительности к ним микроорганизмов. }

Посколькуизвестн0в методы^ определения чртствительности микроорганизмов К; антибиотикам, (ifeTOÄ даффузда в агар и метод серийный разведений) весьма ^удо^мки и длительны, нами разработан Ьростой-:и непосредственно в хозяйст-

вах ускоренный (про0ирочный)мегод определения чувствительности

к антибиотикам возбудителей мастита. Из поражённой четверти вымени, соблюдая правила асептики, сдаивают 10-16 мл.молока и по 2, мл разливают в пробирки. В одной ад них определяют его рН, добавляя 0,1 мл раствора бромтимолового синего. Записав результат /цвет смеси/, данную пробу исключают из опыта. В оставшиеся пробирки /кроме одной/ добавляют по одному диску того или иного антибиотика. Все пробирки выдерживают при 37 °С в течение 16-20 часов, после чего определяют рН молока. При наличии в секрете вымени микрофлоры в пробирке без антибиотика кислотность молоха увеличивается. Бели же после выдерживания в термостате кислотность молока в пробирках с тем или иным антибиотиком не повышается, ото означает, что имеющиеся в молоке бактерии чувствительны к данному антибиотику. И наоборот - повывение кислотности свидетельствует об устойчивости бактерий к данному антибиотику.

Н.М.Хилькевич и др. /1970/, 3.П.Воль и П.П.Попов /1976/ отмечают высокую эффективность терапии маститов антибиотиками, подобранными с помощью этого метода. Однако при некоторых формах мастита секрет вымени приобретает консистенции гноя, что исключает возможность использования данного способа. Поэтому нами предложена среда ЫВГ (молочио-водо-глюкозная), предназначенная для определения чувствительности основных возбудителей настать коров к антибиотикам. Засев среды можно проводить секретом поражённых четвертей вымени или культурами возбудителей. Схема проведения опыта и оценки результатов в принципе такая же, как и в предыдущем способе.

Нами разработан и более быстрый способ определения чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотик .. В стерильный мясо-пептонный бульон, содержащий 1,0 % глюкозы, 0,3 % дрожжевого экстракта я 0,003 % фенолового, красного, разлитый в пробирки по 1,5 мл, добавляют по 0,5 мл секрета, полученного из по-

ажённой четверти вымени. Затем в пробирки, кроме одной (для юнтроля роста микроорганизмов), вносят один диск какого-либо антибиотика. Пробирки выдерживают при 37 °С. Просматривает их [ере'з 2, 3, Ч, 5, б, 7 и 16-18 часов. Результаты учитывают тогда, :огда цвет среды в контрольной пробирке станет желто-белым. Схе-(а учёта не отличается от уже изложенной (см. выше).'

Временной интервал, за который происходит заметный сдвиг ре-1кции /рН/ среды в кислую сторону и, следовательно, изменение её двета, зависит от состава а свойств секрета поражённой четверти зымени, вида возбудителя и количества микробных тел, внесенных в 5реду. В нашем случае чувствительность возбудителей мастита к антибиотикам была определена ужо в течение 2-7 часов от начала опыта у 85,71 % (Р<£ 0,001) возбудителей мастита (от числа поражённых четвертей вымени).

Все разработанные наня способы можно использовать и для определения чувствительности ннкрооргашимов к одновременному /комплексному/ действие нескольких антибиотиков /двух, трех/. Для этого необходимо в одну пробирку вносить по одному диску этих антибиотиков.

' • При параллельной проверке чувствительности возбудителей мастита к антибиотикам разработанными методами и известным (метод диффузии в агар) были получены принципиально одинаковые результата (Р^-0,001).

/ Учитывая пагубное влияние антибиотиков на качество молока, нами разработаны способы лечения лактирурщих коров, больных маститом, без применения антибиотиков» В частности, проводят короткую блокаду нервов вымени путём введения в надвыменное пространство (ретромастозно) 150-200 мл 0,5 $-ного раствора новокаина с добавлением трипсина или химотрипсина в дозе 0,07-0,15 мг ча I кг живой массы. Повторное введение препарата осуществляют

каждые 24 часа до выздоровления. Эффективность лечения в опытной группе составила 90,24 %,• а в контрольной (использовали только новокаин) - 70,0 % (Р^0,05).

С целью повышения результатов терапии вначале внутрицистер-нальнов поражённую четверть вымени вводят 0,5 £-ный раствор нашатырного спирта (150-200 мл), приготовленный на 5 %-ъои растворе глюкозы, с последующим сдаиванием зтой четверти через I час. Затеи внутрицистернально вводят 5 %-нМ раствор глюкозы (150-200 мл) и осуществляот короткую новокаиновую блокаду нервов вымени с использованием трипсина или химотрипсина по описанной выше методике. Эффективность лечения составляет 96 % (Р<0,001). ) Генетическая профилактика мастита коров Вами (А.Й.Иваоурой, D.A-.Гордвевым) ещё в 1969 г. установлено, что при одинаковом кормлении и равных условиях содержания, а также при доенш одним и тем же аппаратом, аналогичном уходе за выменем коров, обслуживаемых одной и той же дояркой, отдельные особи являются устойчивыми к маститу. Поэтому мы попытались выявить факторы, обусловливающие устойчивость коров к этой болезни, и паркеры выявления таких.животных. Устойчивыми считали коров, которые в течение 2 лактаций не болели маститом и у них не отмечалось раздражения молочной железы. С 1985,,года устойчивость животных к маститу определяли по методике, утверждённой ВАСХНИ1 19.12.84 г. (см. методические рекомендации "Оценка и отбор коров по пригодности к промышленной технологии производства молока". -М., 1995).

Возраст. Животные младших возрастов оказались более устойчивыми к маститу, причём наибольшая устойчивость обнаружена у коро: • второго отёла (32,4 JÍ), затем у первотёлок (29,8 %) и коров четвертого (22,0 Я и третьего (20,0 %) отелов. Наименьшее число уо тойчивых (9,3 f) было среди животных пятого отёла (Р-^0,01).

- 33-

Живая масса. С увеличением живой масса коров их устойчивость к маститу снижается, Так, наибольшее число устойчивых особей (29,57 %) было отмечено среди животных с живой массой 40045 0 кг, наименьшее (6,25 %) - более 550 кг (Р^0,01).

Одновременность (равномерность) выдаивания четвертей вымени. Между величиной разницы во времени окончания молокоотдачи из первой и последней четвертей вымени и устойчивостью коров к маститу существует обратная зависимость (В.М.Бутенко, А.И.Ивашура). Так, среди коров с разницей во времени окончания молокоотдачи из первой и последней четвертей вымени до 0,5 мин. устойчивых к маститу было 81,8'ji, а с разницей до 1,0 мин. - 59,46 %, до 1,5 -54,6 до 2,0'мни. -,30,0 % (Р^ 0,05).

Порода. Учитывая, что в настоящее время идёт формирование новой молочной породы животных на базе симментальского и красно-пёстрого голштинского скота, мы изучили устойчивость к маститу чистопородных коров симментальской породы и помесных животных разной степени кровности (3/8, 1/2, 5/8, 3/4). Только животные 3/8 степени кровности оказались более устойчивыми к этой болезни по сравнению и с чистопородными симиенталами, и о помесными животными других степеней кровности (Р^с0,05).

Было также установлено, что чистопородные животные чёрно-пёстрой породы менее устойчивы к маститу, чем их чистопородные сверстницы симментальской породы (Р¿0,001). Последние оказались также устойчивее к этой болезни, нежели симментало-монбельярд-ские помеси 1/2 степени кровности (Р-^0,05).

Принадлежность к линии, родственной группе. Невосприимчивость к маститу в зависимости от принадлежности к линии (Миномета 562, Акробата 2538, Андалуза 576, Известного 7) или родственной группе (Зайчика 2183, Англеризированная группа) изучали (А.И.Ивашура, З.З.Шмайлов) на коровах красной степной породы.

Выясняли также устойчивость к этой болезни дочерей использованных в стаде 18 быков-производителей. Кроме того, были оПределе-. ны скорость молокоотдачн, средний удой « жирность молока опытных ' коров за лактацию в разрезе линий к отдельных быков. Оказалось, что животные, принадлежащие к линиям Миномета и Акробата, сочетает в себе как наибольшую устойчивость к воспалении молочной железн, так и самую высокую продуктивность (табл. II). Сочетание этих двух признаков представляется особенно ценным в селекционной работе. Какой-либо достоверной корреляции среди показателей удоя, жирности молока и скорости молоковтдачи у устойчивых и предрасположенных к маститу коров, принадлежащих к одной и той же линии или группе, не обнаружено. 1 дочерей различных быков-производителей во всех случаях наблюдалась значительная как внутрнлинейная и внутригрупповая, так и междулинейная и между» групповая вариабильнвсть устойчивости к маститу - от 5,3 % в группе Зайчика до 42,8 % в линии Миномета. Из дочерей 18 быков только у потомков пяти производителей была достоверной разница в жнрности молоха и только у дочерей двух быков - В скорости моле-коотдачи (Р«£0,05).

О влиянии на устойчивость коров к маститу месяца рождения животного, продолжительности лактационного периода, удоя за последнюю лактацию, интенсивности молоковтдачи достовзрных сведение не получили (Р >0,05).

Нааи исследования показали-, что выяснить влияние породы, л| ник и отдельных быков на устойчивость коров к маститу можно тол) ко в том случае, если в опыт будут взяты дочери этих быков одного возраста, с одинаковым удоем за лактацию и с одним и тем же периодом лактации, поскольку эти факторы оказывает существенное влияние на конечные результаты изучаемого вопроса. Нами предлож на специальная схема учёта таких исследований (табл. 12).

II. Устойчивость к маститу и продуктивность устойчивых и предрасположенных к этой болезни коров различных линий и групп

Принадлеж-}йссле-! Устой-!СРедниЯ УД"й! Средняя жир-! Средняя ско-ностьк !довано!чивые !за лактации !ность молока!рость моло-линии или !коров, группе !голов

I

к мас-!на К0Р0ВУ» !за лактацию,!коотдачи, TJfTy t _ " < y . I ' кг/мин»

JY' ¡устой!прад- }устой'.пред- |устой!пред-^ j чивых!рас по-i чивых!р аспо-¡ч ивых!р аспо-!ложен~; !ных !

!распо-!ложен-! !кых !

распо-!ложен-!ных

Л. Мино- III 34,2 3903? 3730+ 3,73+ 3,69+ 1,33+ 1,33+

мета 562 144- 200- • 0,03- 0,02 0,19 0,13-

I. Акроба- 50 28,1 3726+ 3680+ 3,65+ 3,68+ 1,38+ 1,36+

та 2533 139- 181- 0,03 0,01 0,19 0,14

Группа Зай- 146 24,0 3483+ 3710+ 3,66+ 3,69+ 1,38+ 1,32+

чика 2183 123- 164- 0,02- 0,01- 0,16 0,09

Англерйзфо- 81 22,2 3566+ 3564+ 3,67+ 3,70+ 1,42+ 1,30+

ванная группа • 98- 187- 0,01- 0,02 0,11 0,08

Л. Андалу- 80 21,2 3698+ 3608+ 3,65+ 3,68+ 1,39+ 1,36+

за 576 168- 213- 0,02- 0,02- 0,09- 0,11

1. йзвест- 67 21,0 '3663+ • • 3426+ 3,67+ 3,62+ 1,44+ 1,33+

ного 7 174- 183- 0,01- ■ 0,0Г. 0,13- 0,17-

По стаду 535- 25,4 3681+ 3623+ 3,67+ 3,68+ 1,39+ 1,33+

131- 168- 0,02- 0,02- 0,15" 0,12

При изыскании маркёров устойчивости коров к маститу изучали (А.И.Ивашура, A.C.Овод, Ю.А.Гордеев, А.А.Бокун) микрофлору и некоторые показатели молока (антибактериальные свойства, количество клеток, плотность, кислотность, COMO, содержание лактозы, казеина, сухого вещества и хлора) у коров, устойчивых и лредрасло-

«

ложенных к этой болезни (анализ молока последних делали тогда, когда они были здоровы), но достоверных различий изученных показателей у этих двух групп животных не обнаружили (Р>0,05).

- 36- - .

12. Схема учёта генетической устойчивости коров к маститу в зависимости от породы, линий и отдельных быков

1 11-Порода ! 1нния ! Бык ! ' » Д ' ' ! 1 I 1 ¡акта-1Удой за цдо по!лактаци счёту !цию, !тыс. кг 1 » ! Период! Иссле; !лакта-!вано !ции, ¡кивот-!меся- !ных, !цев '.гол. !после ! !отёла ! ю-{Выявлено !коров, ус- !тоячивых к !маститу, % | !

1 I 2-3 до 2

2-7

более 7

3-4 до 2 '

2-7

■ более 7"

4-5 до 2

2-7

более 7

более 5 до 2 ■ •" ""' '

2-7 \ '

более 7

* Сухостойный период

Всего (по первой лактации)

2-3

до 2

2-7

более 7

и т.д.

Делались попытки (А.И.йвашура, В.В.Шмайлов) использовать качестве критерия устойчивости коров к маститу полиморфные сист

т белков крови. Наиболее предрасположенными к этому заболеванию оказались животные с генотипом Д^ в локусе грансферрина, причём по отношению к коровам о генотипами АА и АД2 в этом же локусе и БВ в локусе амилазы -эти сведения достоверны (Р^-0,05). Во всех остальных случаях достоверной связи не выявлено.

Однако при неадекватном машинном доении даже генетически устойчивые к маститу животные могут им заболеть, хотя и в мень-вем числе случаев, чем предрасположенные к нему. Следовательно, совершенствование доильных аппаратов и технологии машинного доения с целью уменьшения их отрицательного воздействия на физиологическое состояние молочной железы - одна из самых важных мер профилактики мастита.

' Производственные испытания низковакуумных доильных аппаратов АДН-1 проводили в сравнении с серийно выпускаемыми аппаратами ДА-2Н" на 193 коровах с удоем 4011 кг за лактация» Установлено - поражаемость коров и четвертей вымени маститом при доении аппаратами АДН-1 была соответственно ниже в 1,97 я 2,07-раза, чем при использовании аппаратов ДА-2М. Подобные результаты были ' получены и при учёте раздражений молочной железы - соответственно в 1,27 а в 1,36 раза (Р^ 0,001).

13. Влияние различных доильных аппаратов на заболеваемость коров маститом

Доильные !_Выявлено поражённых маститом, %_

аппараты_! коров_!_четвертей_

ДА-2М 30,9 11,43

АДС-1 30,4 " 11,34

АДН-1 21,49 7,68 Конструкции

Белгородского 1о,38 6,4

СХИ ___

В другом случае было проведено сравнительное изучение влия-

ния на заболеваемость коров маститом доильных аппаратов ДА-2Н, АДН-1, АДС-1, конструкции Белгородского СХИ. В опыт было взято 400 животных. Выявленные различия в заболеваемости коров маститом (табл. 13) оказались достоверными только при сравнении результатов использования аппаратов конструкции Белгородского СХИ к АДН-1 с аппаратами ДА-2М и АДС-1 как при учёте коров, так и при учёте долей вымени (Р^0,001).

Таким образом, самыми безопасными для молочной железы коров оказались доильные аппараты АДН-1 и конструкции Белгородского СХИ.

■ ВЫВОДЫ

1. В молоке удоя здоровых коров количество соматических клеток Не превышает 0,2 млн/мл. Сборное молоко, имеющее их большее количество, содержит примесь молока, полученного от больных маститом коров, причём чем больне клеток, тем весомее примесь. Если она достигает 5-10 %, наступает ухудпение санитарно-технологичес-ких свойств всего молока,

2. При развитии в молочной железе воспалительного процесса наряду с увеличением количества соматических клеток в молоке удоя коровы в нём изменяется содержание лактозы (<"=-0,91) и белка (Г"0,87) (Р-*- 0,001), что позволяет использовать эти показатели для диагностики ранних стадий мастита!

3. Увеличение рН молока и электропроводности, снижение его бактерицидных свойств нй.ступает при более сильном патологическом процессе в поражённой четверти вымени по сравнению с таковым, вызывающим возрастание количества соматических клеток. Изменение электропроводности молока.и бактерицидных свойств отмечается несколько раньпе, чем сдвиг его рН. При выздоровлении животного эти показатели восстанавливаются быстрее, чем содержание клеток. Изменение рН молока и его электропроводности в одной и даже двух четвертях вымени не влекут за собой чёткого их изменения в молоке удоя коровы. Следовательно, учитывать рН, электропроводность

и бактерицидные свойства секрета каждой четверти вымени и особенно молока удоя коровы с целью диагностики мастита нецелесообразно, поскольку при определении содержания в нём соматических клеток будут выявлены более ранние стадии этой болезни.

4. Невыделение из секрета четверти ьынени, поражённой маститом, каких-либо микроорганизмов, особенно при однократном исследовании, указывает в основном не на стерильность воспалительного процесса, а лишь на то, что с помощью используемых методов выя-

вить их не удалось. В ото« случае следует провести повторные исследования, причём на наличие более широкого круга возбудителей.

5. Необходимо различать следующие состояния "здоровья" молочной железы: здоровая, бактерионосительство, раздражение, мастит.

6. При подсчёте клеток, имеющихся в молоке, под микроскопом с использованием мазка, последний лучше готовить по Еьюиансу, так как фиксация,-обезжиривание и окраска его сведены в одну операцию, а лейкоциты при микроскопии видны более рельефно.

7. В реакцию с препаратами из ПАЗ вступают соматические ядер- . ные клетки независимо от того, в какой биологической среде они находятся. Разрушая ядра клеток, они образуют комплексы с их белками и вытесняют ДНК из связанного (с белхом) в свободное полимерное состояние, в котором она из-за своеобразия структуры макромолекулы

(удлиненная) является вязкой, вследствие чего и образуется сгусток. Наиболее интенсивно данная реакция протекает в щелочной среде. Это свойетво ПАВ положительно коррелирует с их моющей способностью, которая возрастает в удлиненнием алкильной группы в их формуле (Я - алкил Сэд - С^д), что позволяет прогнозировать результаты использования того или иного ПАВ для диагностических исследований, а не подбирать их вслепую путем проб и ошибок. Эти теоретические положения имеют общебиологическое значение - они позволяют применять ПАВ для анализа различных биолЬгических объектов: ■ молока, крови, мочи и др.

- 8. По чувствительности, о учато* её снижения, препараты из ПАВ располагаются так: 2,5 #-ннй раствор мастоприма и универсал, дающие одинаковые результаты; 10 £-ный раствор мастидйна- и 50 З-ный раствор универсала, которые также имеют одинаковую чувствительность; 12,5 2-ный раствор универсала, 2 £-ный раствор масти-дина и реактив "Дон"; 5-#-ннй раствор димастина.

9. Результаты реакции при использовании 5 £-ного раствора дккастина, 2- и 10 2-ного растворов иастидина следует учитывать по консистенции смеси молока с реактивом по следующей схеме: однородная жидкость (-) - отрицательная реакция; следы образования желе (+) - сомнительная реакция; ясио видимый сгусток (от слабого до плотного) (+) - положительная реакция..

10. Разработанный реактив универсал, предназначенный для определения количества соматических клеток в молоке и диагности-

ки мастита (в соответствующих разведениях), обладает по сравнению с широко используемыми для этих целей препаратами (димасти-ном, мастидинои, мастоприиом) определенным комплексом преимуществ- из числа следующих; большая чувствительность, более длительный срок годности, удобства при проведении исследований, меньшая стоимость, безопасность для обслуживающего персонала, лучшая биологическая распадаемость (до 92 %).

II. Предложенный "Индикатор йвашуры А.И. для диагностики мастита у коров" имеет следующие преимущества по сравнению с универсалом: лучшая биологическая распадаемость (99 %). меньшая стоимость (в три раза), более удобен в работе (при хранении раствора осадок не образуется), менее опасен для здоровья человека.

. 12. Выделенных стрептококков - возбудителей мастита можно сохранять в молоке по предложенной методике в течение шести месяцев без пересева. Для постановки САМР-теста целесообразно использовать штаммы стафилококков, продуцирующих - или £]?> -гемолизины.

Плазмоко&гуяирующие свойства стафилококков лучше проверять по ускоренному методу, предложенному С.Л.Петрович, позволяющему сократить срок исследований на сутки. А выявлмьих способность вырабатывать гемолизин и лецитиназу следует на средах, не содержащих уУаС1. •

13. Использование пластинки мелочно-контрольной йвапуры А.И. и спаренного клюва-полуавтомата позволяет улучшить обьектив-ность результатов диагностики мастита и повысить производительность труда ветеринарных врачей и операторов машинного доения.

Для диагностики мастита вместо -альвеолярного молока следует использовать сосковое (первые струйки), поскольку при одинаковых диагностических показателях сдаивание последнего предусмотрено правилами машинного доения.

14. Антибиотик цефуроксим можно использовать для лечения коров,-больных маститом (внутрицистернально 750 мг в 5 £-ном растворе глюкозы).

Разработанные способы определения чувствительности возбудителей мастита к антибиотикам являются достаточно точными, ускоренными и простыми в выполнении по сравнению с существующими.

Предложенные способы лечения коров, больных маститом, с использованием 0,5 ,£-ного раствора нашатырного спирта, 5 7»-ного

раствора глюкозы, короткой новокаивовой блокады нервов вымени с одновременным введением в растворе новокаина протеолетических ферментов (трипсина, химотрипсина) позволяют получить хороший терапевтический аффект без .применения антибиотиков.

15. У коров с увеличением возраста, живой массы и разницы во времени окончания нолокоотдачи из первой и последней четвертей вымени возрастает и предрасположенность к маститу. Месяц рождения, продолжительность лактационного периода, удой за последнюю лактацию, интенсивность (скорость) молокоотдачи не влияет на устойчивость к этой болезни.

КорЬвы чёрно-пёстрой породы и симментало-монбельярдские помеси (1/2 кровности) менее устойчивы к маститу, чем чистопородные симменталы. Помесные животные 3/8 степеней кровности, полученные на базе симментальского'и красно-пёстрого голштинского скота, имеют большую устойчивость к маститу как по сравнению с чистопородными симменталами, так и с помесями других степеней кровности.

Использование производителей, принадлежащих к линии, имевшей наибольяее число дочерей, устойчивых к воспалению молочной железы, будет вести к снижению заболеваемости коров маститом, а в некоторых случаях способствовать повышенно скорости молокоотдачи и молочной продуктивности.

Выясняя влияние "породы, линии и отдельных быков на устойчивость коров к маститу в олыт необходимо брать дочерей этих быков одного возраста, с одинаковым удоем и с одним и тем же периодом лактации. ' •

16. По таким показателям молока, как бактерицидные свойства, количество клеток,-плотность, кислотность, содержание С0М0„ лактозы, казеина, сухого вещества, хлора, микроорганизмов, невозможно выявить коров, устойчивых к маститу.

Полиморфные системы белков крови лишь в незначительной степени можно использовать в качестве маркёров устойчивости коров к воспалению вымени. Самыми устойчивыми являются животные, имеющие генотипы M и АДд- в локусе трансферрина и ВВ в локусе амилазы. Наиболее предрасположены к заболеванию коровы с генотипами Д^ в локусе трансферрина.

17. Более безопасными для молочной железы по сравнению с аппаратами ДА.-2М и АДС-1 являются низковакуумные доильные аппараты АДН-I и конструкции Белгородского СХМ.

• ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

1. Всех коров ежемесячно проверять на скрытые маститы (вклю чено в "Рекомендации по борьбе с маститом коров", утвержденные МСХ СССР 01.07.83 г.).

2. Различать следующие состояния "здоровья" молочной железы: здоровая, бактерионосительство, раздражение, мастит (включено в "Рекомендации по борьбе с маститом коров", утверждённые МСУ СССР 01.07.83 г., и в учебник "Ветеринарное акуперство и гинекология", изд. 6-е, под ред. академика ВАСХНИ1 В.С.Шипилова, - М.: Агропромиздат, 1986. - с. 353).

3. Способ диагностики маститов у коров с использованием специального реактива "Дон" (положительное заключение ГУВ МСХ СССР ¿117-3 от 12.05.77 г.).

4. Схемы учёта результатов реакций 5 ?-ного раствора димас-тина, 2- и 10 л-ных растворов мастидина (включено в "Рекомендации по борьбе с маститом коров', утверждённые МСХ СССР 01.07.83 г.).

5. С целью снижения заболеваемости коров маститом вир око использовать низковакуумнув доильную систему (рекомендовано к внедрению совместным НТС МСХ СССР, ГоскомсельхоЗтехники СССР и Минживмашем СССР 16.05.84 г.).

6. Спаренный клюв-полуавтомат для разлива диагностических препаратов в пластинки молочно-конТрольные (прибор одобрен ГУВ ЕСХ СССР 04.03.85 г., экспонировался на ВДНХ СССР).. '

7. Препарат для диагностики ранних стадий мастита у коров (удостоверение на рацпредложение 6439-11/1633-33). ГУВ Госагро-прона СССР утверждены: "Наставление по применению 20 $-ного раствора сульфонола для диагностики-ранних стадий мастита у коров," (14.04.87 г.), приказ Н26 от 25.12.87 г. о внедрении этого препарата в ветеринарную практику, ТУ 10-07-605-88 "Раствор сульфонола 20 $-ный" (08.02.88 г.), в соответствие с которыми Харьковская биофабрика выпустила опытную партию этого препарата

8. Способ определения количества соматических клеток в • сборном молоке коров (удостоверение на рацпредложение

ВД39-П/2468-72). ГУВ Госагропрома СССР утверждены: "Наставлени . по -применении 20 а-ного раствора сульфонола для определения количестве соматических клеток в сборном молоке коров" (09.11.88 г.)# приказ К157 от 14.12.88 г. о внедрении этого способа в ветеринарную практику. Разработаны ТУ I0.07.-I7.90 "Раствор суль-

фонола 20 £-ный"# утвержденные ГУБ при Государственной комиссии Зовета Министров СССР по продовольствии и закупкам 29,03.90 г., а соответствие с которыми Харьковская биофабрика осваивает его зерийный выпуск.

9. Индикатор йвашурн А.И. для диагностики мастита у коров (положительное решение »4460243/13 от 24.10.89 г. о выдаче авторского свидетельства; одобрен ГУВ Госагропрома СССР, письмо 1434-4 от 20.07.89 г.).

10. Диагностику мастита с применением любых препаратов проводить» используя первые струйки молока, (ГУВ Госагропрома СССР утверждено 27.06,89 г. "0 внесении изменений и дополнений в "Рекомендации по борьбе с маститом коров", утвержденные МСХ СССР 01.06. 83 г. ).

11. Использовать для диагностики мастита и сдаивания первых струек молока перед каждым доением пластинку молочно-контрольнув Иваяура А.И. (положительное решение »4669795/15 от 30.01.90 г.

о выдаче авторского свидетельства).

12. Способ определения содержания лейкоцитов в крови (авт. свидетельство №365646). ГУВ МСХ СССР утверждены: "Методические указания по определении количества лейкоцитов в крови крупного рогатого скота с помощью 0,65 £-ного раствора хлорного сульфонала" (25.01.84 г.), приказ »104 от 04.12.85 г. "О применении в ветеринарии способа определения содержания лейкоцитов в крови". Экспонировался на ВДНХ СССР. •

. - 13.- Способ, идентификации крови птиц, рыб а амфибий от крови млекопитающих по А.Й.Ивавуре (авт." свидетельство И545163).

14. Коагулазную активность стафилококков - возбудителей мастита- определять ускоренным методом (включено в "Методические указания по бактериологическое исследованию молока и секрета эымени коров" утверждённые ГУБ МСХ СССР 30.12.83 г.).

15. При подсчёте соматических клеток в молоке с помощью микроскопа а приготовления мазка последний следует окрашивать по Яьюмансу (включено в "Методические указания по бактериологическому исследованию молока и секрета, вымени коров ".утверждённые ГУВ МСХ СССР 30.12.83 г.).

... 16. Предложения по рациональному использованию антибиотиков при лечении маститов у коров (одобрены НГС МСХ РС#СР 13.01.71 г.).

17. Ускоренный (пробирочный) метод определения чувствительности микрофлоры молока к антибиотикам (включено в "Методические указания по бактериологическому исследованию молока д секрета

вымени коров", утверасдённые МСХ СССР 30.12.83 г.).

18. Среда МВГ (ыолочно-водо-глокозная) для определения чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам (удостоверение на рацпредложение В439-11/2563-87). ГУВ Госагропрома СССР 'утверждены: "Наставление по определению чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам с помощью среды МВГ" (21.06.89 г.), приказ К99от 28.12.89 г. о внедрении этого способа в ветеринарную практику.

19. Способ определения чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам (положительное решение $4719119/13 от 30.05.90 г. о выдаче авторского свидетельства).

20. Способ патогенетической терапии коров, больных маститом, по АЛ.Ивашуре (положительное решение K4788206/I5 от 23.08.90 г. о выдаче авторского свидетельства; одобрен ГУВ при Государственной комиссии Совета Министров СССР по продовольствию и закупкам, письмо 15042-4 от 28.06.90 г.).

21. Методические рекомендации "Оценка и отбор коров по пригодности к промышленной технологии производства молока" (в соавторстве). Утверждены БАСХНШ 19.12.84 г.

22. Методические рекомендации "Оценка и отбор молочного скота по маститоустойчивости и пригодности к машинному доению" (в соавторстве). Утверждены ВАСХШЛ 22.03.90 г.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИЙ

1. Ивашура А.й. Использование термосов при выявлении микрофлоры в молоке //Ветеринария.-1969.~!?б.-С. 94-95.

2. Квавура А.И. Никрофлора вымени коров, больных маститок, и её чувствительность к антибиотикам //Проблемы повышения качеству молока и профилактика маститов у коров: Тез. докл. Всесо-юз. науч.-тех. конф.-М., 1969.-С. 60-61. . .

3. Ивыпура А.й. Некоторые вопросы диагностики и.терапии ыас титов у коров //Всесоюз. науч.-практич. конф. терапевтов и диагностов посвященная 100-летии проф.. Н.П.Рухлядева: Мат. докл.-Казань, I969.-T. I.-C. 273-274.

4. йвааура А.И. Применение антибиотиков при маститах коров //Система ведения сельского хозяйства Ростовской области /Под ред. Н.Н.Ильинского.-Ростов, книж. изд-во, 1970.-Т.2.-С. 259-261

5. Ивашурс А.И, Реакция преципитации при дифференциации стрептококков, выделенных из молока коров //Ветеринария.-1969.-

Й2.-С. 104-105.

6. Ивашура А.И. Антибиотикотералия при маститах у коров //Ветеринария .-1970. -Й8.-С.. 91-93.

7. Ивашура А.И. Оценка-показаний реакции молока с димасти-иом при диагностике маститов у коров //Науч.-произ. зональная конф.: Мат. докл.-Персиансвка, Ростов, обл., 1970.-С. 92.

8. Иваиура А.И. Сравнительная оценка индикаторов, применяемых для определения pH молока, при диагностике маститов у хоров //Первая науч.-произ. конф. по проблемам ветеринарии зоны Северного Кавказа: Мат. докл.-Ростов, кния. изд-во, I97I.-C. 187-189.

9. Иваиура А.И., Гордеев D.A. Н динамике маститов у коров. Там ае.-С. 190-192.

10. Ивашура А.И. Оценка действия династина и мастиДина //Ветеринария.-1971.-Й6.-С. 94-96.

11. Ивашура А.И., Овод A.C. Экспресс-индикация стрептококков группы В в молоке воров //Доклады ВАСШШ.-1971.-Н0.-С. 37-38.

12. Иваиура А.И., Гордеев S.A., Бокув A.A. Сравнительная оценка методов диагностики субклинкческнх маститов //Вторая Все-ссвз. конф. молодых ученых по ветеринарии: Тез. докл.-М., 1971.--С. 25-26.

13. Овод A.C., Иваиура А.й. Флуоресцентно-серологический метод индикации стрептококков f-руппы В в молоке хоров. Там же.--с. 33-34. ; ■

- , 14.'Ивашура А.И. Сравнительная оценка методов подсчёта клеток в молоке //Тр. ин-та/ Всесовэ. НИИ ветеринарной санитарии.--I97I.-T. 39.-С. 82-84.

15. Иваиура А.И., Овод A.C. Метод выделения стрептококков при маститах //Ветеринария.-I972.-i2.-C. 97-98.

16. Иваиура А.И. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам //Ветеринария.-1972.-JJ3.-С. 97-98.

17. Иваиура А.И. Определение количества лейкоцитов в крови коров с помощью реактивов из поверхностно-активных веществ //Все-совз. симпоз. по проблеме лейкозов-с.-х. животных: Тез.: докл.--И.,' 1972.-С. 90-91.

18. Ивашура А.И. САМР-тесг,- надёжный метод идентификации стрептококков серологической группа В //Лабораторное дело.-1972. -S6.-C. 360-362. '

19. Иваиура А.И. Маститы коров.-М.: "Колос", 1972.-192 с.

20. Ивашура А.И.. Федоренко И.Б. Определение патогенности стафилококков, выделенных при маститах коров, по ДНК-азвой активности //Науч.-проиэ. хонф. по проблемам ветеринарии Северного Кавказа: Иат. конф.-Нальчик, 1972.-С. 99-100.

21. Ивашура А. И. Диагностика стафилококковых маститов //Вете-ринария.-1973.-)Н.-С. 79-80. ,

22. Ивашура А.И. Патогенные свойства стафилококков, выделенных из молока //Ветеринария.-I973.-i7.-С. 102.

23. Ивашура А.И.. Городцов B.i, Устройстводля ускоренного добавления реактивов в луночки молочно-контрольной пластинки (в разделе "Нам пишут ") //Ветеринария. -1973. -В9.-С. 100.

24. Ивашура А.й., Городцов B.i. К диагностике и лечени» коров при маститах //Маститы и болезни обмена веществ сельскохозяйственных животных: Науч.-тех. информация.-Управление науч.-

■■ тех. информации МСХ 1ат. ССР, Рига, I973.-C. 13-14.

25. Способ определения содержания лейкоцитов в крови: A.c. »365646 СССР. И.Кл.£ 0ЬгЗЭ/16. /А.И.Иваиура(СССР).-2 с.

26. Некоторые свойства молока у коров с различной устойчи-востьо к маститам /А.И.Ивашура, A.C.Овод, С.А.Гордеев, А.А.Бокун //Профилактика бесплодия сельскохозяйственных животных на Северном Кавказе: Мат. хонф.-Новочеркасск, I974.-C. I87-I&9.

■ 27. Ивашура А.И, Методы индикации и идентификации стрептококков, выделяемых кз молока здоровых и больных маститом коров; //Всесооз. науч.хонф. Казанского ветеринарного жв-та: 'Мат. докл. -Казань, 1974.-Т. I.-С. 317-318. ; • • ;:

28. Динамика физиологического состояния молочной железы коров при машинном^ добних- /А. И. Ивавура, Г.Н.Кузьмин,В.И.Захаров, О.С.Трусова, В.§.Городцов,0.А.Гордеев //В Всесовз. сшгаоз. по физиологическим основам машинного доения: Мат. симаоз.-Боровск, I974.-C. 198-199. V • У;-;:;:У V.: 'V- V:-: ;:Н : V у ■'

29. Ивашура А.й. Актуальные задачи в&уки в разработке методов и средств борьбы с маститами хоров //Диагностика и профилактика заболеваний молочной железы коров: Тез. докл. Всесовз. се. минара. ДСП.-М., I974.-C. 53-55.

30. Ивашура А.И. Гигиена производства молока в промышленном животноводстве.-Ростов. хниж. изд-во, 1976.-88 с. .

31.; Ивашура А.И., Гордеев Ю.А. Диагностическое.значение, титра лизоцима "М" в молоке при маститах коров //Основные проблемы ветеринарии Северного Кавказа: Мат. науч.-произ. конф.-Махачкала

976.-C. 85-86.

32. Ивашура -А.И. Качество молоха //Книга животновода/ Под ед. М.ИЛопатко.-Ростов. книж. иэд-во, 1977.-С. 56-69.

33. Иваиура А.И. О пригодности редухтаэной пробы с метиле-овым голубым для определения .общей бактериальной обсемененное-и молока //Пути повышения качества продуктов животноводства и' X ветеринарно-санитарная оценка*. Тез. докл. Всесоюй. конф.-лев. I98I.-C. 127-128.

34. Нвааура А.И. 1ечение острого гнойно-катарального мастита коров //Вопросы ветеринарной фармации а фармакотерапии: Тез.

;окл. Всесопз. науч.-практич. конф.-Рига, I962.-C. 68-69.

35. Нвааура А.И., Шмайлов В.В. Устойчивость хоров к масти-у— селекционный признак //Генетическая устойчивость сельско-озяйственных животных к заболеваниям/ Под ред. А.И.Прудова. ,СП.-М.» 1983.-Вып. З.-С. 51-52. *

36. Ивапура А.И. Корреляция устойчивости коров к маститу с ix возрастом, скорость® ыолокоотдачи, живое массой и классом, 'аи se.-С. 52-53. ; ^

37. Ивапура А.И. Низковакуумная доильная система и состояло, молочной железы коров //Полочное и мясное скотоводство.-;933.-В9.-С.~ 41. : ; :

38. Ивапура А.И. Методика учёта результатов при использова-taa 10 ^-ного иастидина (в разделе "Из акуверской практики") 7Ветеринария.-1984.-Л10.-С. 51-52.

39.' Иваиура А.И, Гигиена производства молока.-Ы.: Россель-хозиздат, ХЙ34.-143 с. ; ■ '

40. Иваиура А.И. Методические указания по определенно количества лейкоцитов в крови крупного рогатого скота с помодьв ),65 /ё—ного раствора хлорного сульфонола //Ветеринария.-1984.-'«7.-С. 75. _ ;, ..V :,■;■;. \ \ - •

41. Ив&вура АЛ. Методика оценка устойчивости крупного pora-raro скота к масгнту //Пути ускорения реализациипродовольствен-■ой программы: Tes. докл. обл. науч.-произ. кояф.-Диепреает-

.'-I9&4.-Ç. ■ 205-207. ""а ; '■'.'■';'./..'•-••=■

42*Мэааура А.И. Методика оцевки линий крупного рогатого :кота по устойадаоотй к маститу //Селекция сельскохозяйственных частных" на устойчивость к болезнймв условиях промышленной тех-■глст-m/ Под ред. А.И.Прудова. ДСЛ.-М., 1936.-3ып. 6.-С. 51.

4J> îfeanypa А.И., Шмайлов В.В., Устойчивость к маститу коров ! разными типами полиморфных белков крови._ Тан же.-С. to.

44. Бутенко В.М., Ивашура АД. Значение равномерности выдаивания четвертей вымени при определении устойчивости коров к маститу //Проблемы интенсификации животноводства в. Казахской ССР: Тез. докл. респубд. науч.-практкч.кокф. молодых учёных и специалистов.-Алма-Ата, 1986.-.4. I.-C. 126.

45. Ивашура А.И. Лептоспироэыый мастит коров //Проблемы диагностики, терапии и профилактики незаразных болезней сельскохозяйственных животных в промьшленном животноводстве: Тез. докл. Всесоюз. науч. конф.-Воронеж, 1936.-Ч. П.-С. 19.

46. Ивашура А.И. Генетическая устойчивость к маститу коров симментальской породы и их помесей с красно-пёстрыми голитинами //Селекция сельскохозяйственных животных на устойчивость к боле; ням и повышение резистентности в условиях промышленной технологии/ Под ред. Н.И.Мамонтова. ДСП.-М., 1988.-Вып. 8.-С. 36.

47. Ивашура А.И. Классификация мастита //Картапова В.М., Ивашура А.И. Маститы коров.-М.: ВО "Агропромиздат", 1988.-С. 32-61.

48. Ивашура А.И. Диагностика мастита с помощью реактивов из цоверхкостно-активних веществ. Там ке.-С. 67-72.

49. Ивашура А.И. Лечение коров, больных маститом. Там же.-С. 139-162.

50. Ивашура А.И., Павлвченко Т.А., Тарасевич Л.§. Оценка качества молока по количеству соматических клеток //Зоогохния.-I93ö.-};-3.-C. 55-57.

51. Способ идентификации крови птиц, рыб к амфибий от кров млекопихасщих по А.И.Иваиуре: A.c. K545I63 СССР, М. iü. G- 01 Л 33/49 //А 61 В 5/00. /А.И.Ивашура (СССР).-2 с.

52. Ивавура ¿.И. Гигиена производства молока. 2-е изд., пер раб, идоп.-М.: Росагропромиздат, 1939.-237 с.

53. Ишшура А.й., Павлюченко Т.А., Тарасевич Определение количества соматических клеток в молоке коров //Ветеринария -I989.-i5.-C. 55-57. ' • .

54. Ивашура А.й., Емайлов В.В. 0 наследственной устойчивост коров к заболеванию маститом //Молочное и мясное скотоводство.-I939.-S2.-C. 22-24.

55. Ивашура А.й. Диагностика мастита коров путём исследования соскового молока //Молочное и мясное скотоводство.-1989.-М -С. 34-35.

56. Ивашура А.И. Устойчивость к маститу коров черно-пёстрой

и симментальской пород, и их помесей о монбельярдским и красно-пёстрым голитино-фризскии скотом //Современное состояние и перспективы по создания новых пород крупного рогатого скота, приспособленных к условиям промышленной технологии: Тез. докл. Всесооз. науч.-техн. семинара.-М., I989.-C. 32-33.

57. Оценка и отбор короз по пригодности к промышленной технологии производства молока /З.ЛЛ'арьказый, А.П.Солдатоа, В.И.Стародубцев, Э.К.Борозднн, К.В.Клееберг, А.И.Ивапура и др. //Него-диче с кио рекомендация. - М., ВАСХНИЛ, 1905.- 28 с.

58. йващура А.И.Использование антимикробных препаратов для лечения коров, больных маститом //Вопросы ветеринарной фармации и фармакотерапии: Гез. докл. Всессвз. науч.-практич. конф. - Сигу лд а, 1990.-С. 39-41.

59. Оценка и отбор молочного скота по маститоустойчивости и пригодности к машинному доешэ /Э.К.Бороздин, К.В.Клееберг, А.П.Солдатов, Ф.Л.Гарькавый, А.В.Болгов, В.М.Карташова, А.И.Ивапура и др. //Нетодаческко рекомендация.-П., ВАСХНИЛ, 1990,- 19 с.

60. йващура А.И. Электропроводность молока при диагностике мастита //ПолочнЬе и мясное скотоводство.-I990.-56.-C. 31-33.

, 61. Ивааура А.Й. Методы выявления коров, генетически устойчивых к маститу //Гез. докл. советско-финляндского симпозиума по . проблеме мастита.-Л., 1990.-С. 19-20.

йгскяа, Звенигородское ш., 5, ШШИВС, зан JUSjg тираж 100 экз.