Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Мастит кокковой этиологии у коров и рациональные способы его терапии и профилактики

РГБ Ой

На правах рукописи

КУЗЬМИН Геннадий Николаевич

-МАСТИТ КОККОВОЙ ЭТИОЛОГИИ У КОРОБ И РАЦИОНАЛЬНЫЕ СПОСОБЫ ЕГО ТЕРАПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ

16.00.03 - ветеринарная микробиология,вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат диссертации на соискаше ученой степени доктора ветеринарных наук

Воронеж - 1995

Работа выполнена в Воронежском государственном аграрном университете им. К.Д.Глинки и Всероссийском НИВИ патологии, фармакологии и терапии.

Научные консультанты:

Заслуженный деятель науки РФ, доктор ветеринарных наук,профессор Артемов Б.Т.,

доктор ветеринарных наук, профессор

Париков B./V.

Официальные оппоненты:

Заслуженный, деятель науки РФ,доктор ветеринарных наук,профессор Карташова В.М., доктор медицинских наук,профессор Земсков A.M., доктор ветеринарных наук Гончаров П.И.

Ведущая организация - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии.

Защита состоится "."/.V..' cLtip^t^j 1996 г. в /i^rrчас.

на заседании диссертационного совета Д.120.54.04 . при Воронежском государственном аграрном университете /394087, г.Воронеж,ул.Ломоносова,114-а. Вегклиника ВГАУ /

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Воронежского госагроуниверситета.

Автореферат разослан кЛ^нЛ. 199 ^ г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Л.И.Ефанова

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

I.I. Актуальность темы. Интенсификация молочного скотоводства поставила перед ветеринарной наукой и практикой проблему борьбы с маститом коров на комплексах и фермах. Используемые с этой целью традиционные зоогигиенические и акушерские приемы недостаточны, поскольку не учитывают инфекционный аспект болезней вымени у коров, обусловленный патогенной и условно-патогенной микрофлорой, вирулентность которой в условиях концентрации поголовья резко возрастает.

По данным Международной молочной федерации мастит коров является существенной проблемой в скотоводстве большинства стран мира, что вызывает необходимость создания государственных программ по борьбе с болезнью.

Важное значение в этиологии мастита принадлежит кокковой микрофлоре .известной своей убиквитарностыо (Поляков Я.Е.,1964;Карташо-ва В.М.,1973,1985; Шатохив Н.Г.,1976; Самецкий O.A.,1980Аксамитный К.К.,1982; Полянцев Н.И. и др.,1985: Орлова Э.П.,1987; Тарано-ва Л, А. ,1988; Зверева--Г.В. и др. ,1990; Париков В.А.,1990; Ивашура А.И., 1991; Ивченко В.М., 1991; Слободяник В.И.,1994; Heidrioh н.*, Graner I. ,1982", Tolle А., ,1982; Baaken G ,1987; И др.), ЧТО и предопределяет сложность борьбы с этим заболеванием.

Возникновению и распространению бактериального мастита у коров способствуют различные предрасполагающие факторы.главным образом, технологического характера.снижающие резистентность вымени, а также организма животного и."открывающие" ворота инфекции (Валковой И.И.,1967; Хилькевич Н.М..1970; Мутовин В.И..1974; Логвинов Д.Д.и др.,1979; Васкобойников В.М.,1981; Гончаров В.П.и др..1987; Миролюбов М.Г., 1988; Ильинский Е.В., Агафоннчев В.А., 1991 ;

Батраков А.Я., 199I; Griffin т. , 1984; Bcnnet . 1987 и др,

Диагностика мастита, в связи с его преобладающи с.убклиниче ским течением, нуждается в совершенствовании и разработке эффективных методов индикации, идентификации возбудителей и выясненш их роли в этиологии данного заболевания.

Широко используемые для терапии мастита у коров антибиотику известны своим отрицательным влиянием на здоровье потребителей молока, поэтому поиск новых, экологически безопасных средств и способов безантибиотикового лечения болезней вымени актуален с научной и практической точек зрения.

До настоящего времени не отработаны эффективные приемы анта: микробной профилактики мастита у коров как в период лактации.тар и в период сухостоя.

Не изучено влияние субклинического мастита у вакцинирование с целью создания колострального иммунитета, коров-матерей на прс тивоинфекционную защиту новорожденных телят.

Эти обстоятельства определили выбор темы настоящей работы , цель и задачи исследований.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью исследований явля -лось изучение особенностей распространения и этиологии мастита у коров в условиях концентрации животных на молочных комплексах и формах, совершенствование его диагностики, разработка безантибис тиковых способов и средств терапии и профилактики, а также выяснение влияния на уровень колострального иммунитета новорожденных телят. При этом решались следующие основные задачи:

1. Изучить распространение мастита коров на молочных комплексах и крупных фермах Центрально-Черноземной зоны России.

2. Установить этиологическую структуру мастита у коров и роль микрофлоры в его возникновении и развитии.

■ '3. Усовершенствовать бактериологическую диагностику мастита

кокковой этиологии у коров.

4. Разработать эффективные, безантибиотиковые способы и средства терапии коров, больных маститом.

5. Усовершенствовать антимикробную профилактику мастита .у коров в период сухостоя.

6. Определить влияние антимикробной профилактики мастита у сухостойных коров на повышение устойчивости новорожденных телят к заболеванию инфекционными диареями.

1.3, Научная новизна. Определены степень'распространения мастита у коров и роль микрофлоры в его этиологии в условиях молочных комплексов и ферм Центрально-Черноземной зоны России.

Впервые научно обосновано и экспериментально подтверждено новое перспективное направление в лечении и профилактике бактериального мастита у коров без применения антибиотиков. На основании его разработаны:

- способ лечения субклинического мастита у коров растительным препаратом - хлорофиллпптом (авт.свидетельство ,№ 588677);

- способ определения антибактериальной активности хлорофилла п та (авт. свидетельство № 803468);

- нитрофурановый препарат (дифурол Б для лечения мастита у коров (авт. свидетельство № 939004);

- способ этионатогенатичёской терапии мастита на основе сочетания нового анестетика, тримекаина с сульфаниламидами;

- способ антимикробной профилактики маегата у коров в сухостойный период с использованием безантибиотиковых препаратов:хло-рофиллипта и дифтурола.

Дано экспериментальное обоснование иммунотерапии мастита кокковой этиологии у коров, открывающее перспективу специфической серотерапия этой болезни.

Впервые установлено влияние субклинического мастита у сухо-

стойных коров, вакцинированных против колибактериоза и сальмонел леза, на иммунологический статус новорожденного молодняка.

Усовершенствованы методические приемы идентификации и диффе ренциации кокковой микрофлоры секрета вымени больных маститом КО' ров.

Результаты проведенных исследований позволили научно обосно вать принципы рациональной терапии и профилактики бактериального мастита у коров с применением безантибиотиковнх препаратов, что является существенным вкладом в теорию и практику ветеринарной медицины.

1,4. Практическая значимость..Для лечения субклинического-мастита у лактируюшдх коров без применения антибиотиков предлагается ряд препаратов: нейтральный раствор сульфацилэ натрия с три-мекаином; дифурол Б; хлоросЬиллипт: тгаделиив^_

Для профилактики мастита у сухостойных коров и колострально-го иммунодефицита у новорожденных телят рекомендуется в период : пуска исследовать на субклинический мастит всех животных с после дующим введением больным и бактерионосителям антимикробных преге ратов с учетом чувствительноети к ним микрофлоры секрета.вымени,

Основные научные результаты исследований включены в состав:

- "Рекомендаций по борьбе с маститом", утвержденных ГУВ МО СССР 1.07.83 г.;

- "Временного наставления по применению хлорофйллипта для лечения коров при мастите и повреждении сосков вымени", утвержденного ГУВ МСХ СССР 5.04.83 г.;

- "Наставления по применению дифурола Б для лечения коров (Зольных маститом',1 угвержденного ГУВ МСХ СССР 1.07.86 г.;.

- "Рекомендаций по профилактике и лечению наиболее распрос: раненных незаразных болезней сельскохозяйственных мвотных в Центрально-Черноземной зоне" (Воронеж, Г978);

- "Рекомендаций по внедрению в хозяйствах Воронежской и Курской областей "Способа повышения устойчивости новорожденных телят ■ к заболеванию колибактеркозом и сальмонеллезом", 1992 г.

1.5. Апробация'. Основные результаты диссертационной работы доложены на 3, 4, 5 и. 6 Всесоюзных симпозиумах по физиологическим основам машинного доения (Боровск, 1974 г.; Алма-Ата, 1975 г. ; Рига, 1979 г.; Таллин, 1983 г.), на Всесоюзных и Всероссийских научных конференциях (Ленинград, 1976; Воронеж, 1978, 1986. 1995), на 6 съезде дольских ученых и ветеринарных специалистов (Вроцлав, 1978) , на советско-финляндском симпозиуме по проблеме' мастита (Ленинград, 1990), на I Всероссийской научной конференции "Иммунодефицита сельскохозяйственных животных" (Москва, 1994), на 6 межгосударственной, мэжв.узовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" (С.-Петербург , 1994), на годичных научных конференциях профессорско-преподава -тельского состава Воронежского госагроуниверситета в 1981-1994 гг.^

Разработанные препараты для лечения мастита у коров экспонировались на ВДНХ СССР в 1979 и 1985 гг., в связи с чем ав.тор награжден Бронзовой медалью (1979) и утверждался участником ВДНХ СССР (1985).

1.6. Публикации. По теме диссертации оцубликовано 46 научных работ в международных и союзных сборниках, материалах научных конференций и симпозиумов, в журнале "Ветеринария", авторских свидетельствах.

1.7. Объем и структура работа. Диссертация изложена на 253 страницах машинописного текста и имеет следующие разделы: введение, обзор литературы, материал, методы и результата собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы и прак,-тические предложения, список использованной литературы, приложение. '

Библиографический список включает 361 наименовании, из них 118 зарубежных авторов. Диссертация содержит 39 таблиц.

На защиту выносятся следующие основные положения диссергаци

- этиологическая структура мастита у коров и роль кокковой микрофлоры в его возникновении и развитии;

- теоретическое обоснование и результаты экспериментальных и производственных исследований новых безантибиотиковых способов и средств терапии бактериального мастита у коров;

- антимикробная профилактика мастита у сухостойных коров и ее влияние на противоинфекционную защиту новорожденных телят.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДУ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в 197I-1994 гг. в соответствии с планом ЩР в лаборатории патологии молочной железы Всероссийского НИВИ патологии, фармакологии и терапии и на кафедре эпизоотологии и микробиологии Воронежского госагроуниверситета им. К.Д.Глинки, а такке в производственных условиях и является составной частью исследований по государственным темам "Изучение этиологии и патогенеза маститов у сельскохозяйственных животных, разработка методов ранней диагностики, мер профилактики и лечения" (& гос.регистрации 76074695) и "Разработать и внедрить научно-обоснованные мероприятия по профилактике массовых болезней животных в условиях ЦЧЗ" (№ гос.регистрации 01.86.0051715).

■ Материалом для проведения исследований служили I64I0 лакти-рукщих и сухостойных коров, от которых было взято 9427 проб секрета вымени для лабораторного изучения.

При выполнении работы использовали эпизоотологический, клинический, цитологический, бактериологический и иммунологический методы исследований.

При изучении ситуации по мастит.у в хозяйствах анализировали

документа ветеринарной отчетности, проводили с применением диаг-ностик.умов неоднократные исследования коров на 5 молочных комплексах (хоз. "Большевик", "Колыбельский", "Красный Горняк", "Новая жизнь", "50 лет Октября") и 6 крупных молочных фермах (хоз. "Березовский", "Восход". "Знамя Коммунизма", "Подгорное", "Хлебородный", 'опытная станция ВГАУ) трех областей Центрально-Черноземной зоны России (Белгородской, Воронежской и Липецкой).

Диагноз на мастит ставили согласно "Методическим указаниям по диагностике, лечению и профилактике маститов у коров" (1972), а также "Рекомендациям по борьбе с маститом коров" (1988).

Бактериологическое исследование секрета вымени у коров проводили путем посева на кровяной МПА с последующей микроскопией выросших колоний микроорганизмов и дифференциации кокковой микрофлоры с помощью каталазной пробы, реакций плазмокоагуляции, анаэробной ферментации глюкозы, окисления маннига, генолиза эритроцитов. Реакцию плаэмокоагуляцш стафилококков"проводили по общепринятой методике с сухой цитратной плазмой кролика, выпускаемой медицинскими учреждениями. Дифференциацию видов стрептококков проводили с помощью среды Карташовой, КАМП-теста, на среде с эскулином. У части выделенных культур определена патогенность путем внутрибрю-иинного заражения белых мышей. Чувствительность изолированных культур к антибиотикам определяли с помощью общепринятого метода стандартных дисков.

Больными инфекционным маститом считали коров, секрет вымени которых положительно реагировал с диагностическим препаратом, а при бантериологическом исследовании в нем обнаруживалась патогенная микрофлора.

Подсчет соматических клеток в секрете вымени проводили камерным методом и с помощью датского электронного прибора "фоссо-матик". Активность лизоцима М определяли по В.И.Муговину (1974).

Оценку результатов лечения у животных проводили через 10 дней после окончания лечебных мероприятий с использованием клинического, цитологического, бактериологического методов исследования.

Отработку способов антимикробной профилактики мастита у коров в сухостойный период провели на 5? животных. Влияние профилактики субклинического мастита у коров, вакцинированных против колибактериоза и сальмонеллеза, на уровень колостральной защиты полученных от них телят, изучали на 35 коровах Я' 35 новорожденных телятах, научно-проязводсгаенный опыт провели на 273 коровах и 265 телятах.

Иммунологические исследования секрета вымени коров и сыворотки крови телят проводили в лаборатории иммунологии ВШВИЕГФИТ. Общее количество иммуноглобулинов устанавливали по методу Мак Зван ( 1970 ). Классы иммуноглобулинов определяли по методике Манчини (1965).

Титр специфических антител в сыворотке крови и секрета вымени определяли в РА по общепринятой методике.

Статистическую обработку полученных данных проводили по методике И.А.Ойвина (i960).

В проведении отдельных исследований принимали участие научные сотрудники В.А. Париков, В.И. Слободяняк. В.И. Беляев, О.С. Трусова, а также ученые из Польши Е.Вианевски, М.Дрожжинска, которым автор искренне признателен и благодарен за оказанную помощь в работе.

Производственные испытания разработок проводились в ряде молочных хозяйств Воронежской, Липецкой, Курской. Оренбургской, Ростовской областей. Краснодарском крае, Латвии.

3. РЕЗУЛЬТАТУ ИССЛЕДОВАН®

3.1. Распространение мастита у коров на молочных комплексах и фермах Центрально-Черноземной зоны России

Распространение мастита у коров изучено на 5 молочных комплексах и 6 молочно-товарных фермах II хозяйств, которые являются типичными для данного региона по уровню кормления, технологии со держания, доения животных и их породному составу (симментальская и черно-пестрая породы).

Заболеваемость коров маститом определяли при разовом исследовании животных (табл. I), а также ежемесячным обследованием ко ров неблагополучной фермы в течение 3-х лет.

Таблица I

Заболеваемость коров маститом на молочных комплексах и фермах

№ п/п : Показатели ¡Комплексы : Фермы

I Обследовано коров 2850 2301

2 Заболеваемость коров маститом, % 17,7 8,8

3 Клиническая форма мастита, % 2,9 1,5

4' Субклиническая форма мастита, % 14,8 7,3

5 Атрофия четвертей вымени, % 5,2 2,7

6 Бактериальный мастит, % 81,6 79,4

7 Асептический мастит, % 18,4 20,6

Заболеваемость коров маститом на молочных комплексах состав ляла 17,7 % и колебалась от 9,9 % до 24 %.

При исследовании на мастит коров, содержащихся на молочных фермах выявлено больных 8,8 %, что в два раза меньше, чем на ком лексах, диапазон заболеваемости составлял от 4 % до 12 %, Почта в два раза чаще регистрировался клинический мастит на комплексах

документы ветеринарной отчетности, проводили с применением диаг-ностикумов неоднократные исследования коров на 5 молочных комплексах (хоз. "Большевик", "Колыбельский", "Красный Горняк", "Новая жизнь", "50 лет Октября") и 6 крупных молочных фермах (хоз. "Березовский", "Восход", "Знамя Коммунизма", "Подгорное", "Хлебородный", опытная станция ВГАУ) трех областей Центрально-Черноземной зоны России (Белгородской, Воронежской и Липецкой),,

Диагноз на мастит ставили согласно "Методическим указаниям по диагностике, лечению и профилактике маститов у коров" (1972), а также "Рекомендациям по борьбе с маститом коров" (1988).

Бактериологическое исследование секрета вымени .у коров проводили путем посева на кровяной МИД с последующей микроскопией.выросших колоний микроорганизмов и дифференциации кокковой микрофлоры с помощью каталазнои пробы, реакции плазмокоаг.уляции. анаэроб-кой ферментации глюкозы, окисления маннита, генолиза эритроцитов. Реакцию плазмокоагуляции стафилококков проводили по общепринятой методике с сухой цитратной плазмой кролика, выпускаемой медицинскими учреждениями. Дифференциацию видов стрептококков проводили с помощью среды Карташовой, КАШ-тес та, на среде с эскулином. У части выделенных культур определена патогенность путем внутрибрю-шинного заражения белых мыией. Чувствительность изолированных культур к антибиотикам определяли с помощью общепринятого метода стандартных дисков. .....

Больными инфекционным маститом считали коров, секрет вымени которых положительно реагировал с диагностическим препаратом, а при бактериологическом исследовании в нем обнаруживалась патогенная микрофлора.

Подсчет соматических клеток в секрете вымени проводили камерным методом и с помощью датского электронного прибора "фоссо-матик". Активность лизоцима М определяли по В.И.Мутовину , (1974).

Оценку результатов лечения у животных проводили через 10 дней после окончания лечебных мероприятий с использованием клинического, цитологического, бактериологического методов исследования.

Отработку способов антимикробной профилактики мастита у коров в сухостойный период провели на 57 животных. Влияние профилактики субклинического мастита у коров, вакцинированных против колибакгериоза и сальмонеллеза, на уровень колостралькой защиты полученных от них телят, изучали на 35 коровах К' 35 новорожденных телятах, научно-производственный опыт провели на 273 коровах и 265 телятах.

Иммунологические исследования секрета вымени коров и сыворотки крови телят проводили в лаборатории иммунологии ВНИВШФИТ. Общее количество иммуноглобулинов устанавливали по методу Как Зван ( 1970 ). Классы иммуноглобулинов определяли г.о методике Манчини (1965).

Титр специфических антител в сыворотке крови и секрета вымени определяли в РА по общепринятой методике.

Статистическую обработку полученных данных проводили по методике И.А.Ойвияа (i960).

В проведении отдельных.исследований принимали участие научные сотрудники В.А. Париков, В.И. Слободяник, В„И. Беляев, О.С. Трусова, а также ученые из Польши Е.Вишневски, М.Дрожжинска, которым автор искренне признателен я благодарен за оказанную помощь в работе.

Производственные испытания разработок проводились в ряде молочных хозяйств Воронежской, Липецкой. Курской, Оренбургской, Ростовской областей, Краснодарском крае. Латвии.

3. РЕЗУЛЬТАТУ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Распространение мастита у коров на молочных комплекса: и фермах Центрально-Черноземной зоны России

Распространение мастита у коров изучено на 5 молочных комплексах и 6 молочно-товарных фермах II хозяйста, которые являютс. типичными для данного региона по уровню кормления, технологии с< держания, доения животных и их породному составу (симментальска. и черно-пестрая породы).

Заболеваемость коров маститом определяли при разовом исследовании животных (табл. I), а также ежемесячным обследованием к< ров неблагополучной фермы в течение 3-х лет.

Таблица I

Заболеваемость коров маститом на молочных комплексах и фермах

№ :

п/п :

Показатели

¡Комплексы : Фермы

1 Обследовано коров

2 Заболеваемость коров маститом, %

3 Клиническая (форма мастита, %

4 Субклиническая форма мастита, %

5 Атрофия четвертей вымеаи, %

6 Бактериальный мастит, %

7 Асептический мастит, %

2850

17.7 2,9

14.8 5,2

81,6 18,4

2301 8,8 1.5 7,3 2,7 79,4 23,6

Заболеваемость коров маститом на молочных комплексах сосгат ляла 17,7 % и колебалась от 9,9 % до 24 %.

При исследовании на мастит коров, содержащихся на молочных фермах выявлено'больных 8,8 %, что в два раза меньше, чем на ко> лексах, диапазон заболеваемости составлял от 4 % до 12 %, Почп в два раза чаще регистрировался клинический мастит на комплекса:

микрофлора, причем по мере кратности переболевания, интенсивное! бактериального обсеменения повышалась. Так, при однократном забс левании микрофлора установлена у 75,8 % коров, при двукратном -у 86,4 %, при трехкратном - .у 93,8 %, что свидетельствует о ведущем значении микрофлоры в поддержании неблагополучия на ферме.

В результате проводимой лечебно-профилактической работы в течение 2-го года удалось снизить заболеваемость коров маститом до 28 %. При этом переболело за год: I раз - 18,7 %, 2 раза -4,9 %, 3 и более раз - 4,3 %. Микрофлора установлена у 89,1 % больных животных.

В течение 3-го года исследований отмечено дальнейшее снижение .заболеваемости: всего по стаду маститом переболело 21,1 % коров, у которых микрофлора обнаружена в 90,3 % проб секрета вымени..

Таким образом, трехлетнее изучение ситуация по маститу на ферме с удовлетворительными условиями содержания и кормления коров показало высокую заболеваемость их в течение года. Проводимь мероприятия против мастита позволили снизить ежегодное переболе! ние коров с 46,6 % (первый год), до 21,1 % (третий год), в peзyJ тате чего удой молока на фуражную корову возрос на 200 кг по сравнению с исходным уровнем и улучшилось его санитарное качестт

Однако полностью оздоровить стадо от мастита не удалось,поскольку циркулирующая на ферме кокковая микрофлора постоянно поддерживает инфекционный процесс в вымани коров.

Возникновение инфекционного мастита зависит от множества причин, среди которых внедрение в молочную железу патогенных илр условно-патогенных микробов является обязательным условием.Дальнейшее заражение здоровых животных сопряжено со взаимодействием трех обязательных звеньев, составляющих непрерывную эпизоотическую цепь: I - источника возбудителя инфекции, которым являются

коровы, больные клиническим или субклиническим маститом,а также бактерионосители; 2 - факторов передачи возбудителя инфекции (доильные стаканы, полотенца для вымени и др.); 3 - восприимчивых ■ животных, прежде всего со сниженной резистентностью,обусловленной неблагоприятным воздействием жестких условий промышленной технологии.

Как показывают .наши данные, эпизоотический процесс при мастите сопровождается непрерывным течением, интенсивность его проявления в течение года характеризуется сравнительно высоким уровнем заболеваемости животных, с тенденцией к повторному переболе-ванию.

На молочных, комплексах и крупных фермах мастит протекает по типу энзо°тии, поддерживаемой убиквитарной кокковой микрофлорой. Несмотря на вялое течение бактериального мастита в стаде, им в течение года лереболевает значительная часть поголовья.

Неоднократное лереболевание коров в течение года маститом кокковой этиологии позволяет утверждать, что постинфекционный иммунитет при этом заболевании характеризуется слабой напряженностью к непродолжительностью.

Мы разделяем мнение В.П„Урбана (1985), Э.П.Орловой (1987) , Д.Н.Левковского (1990), В.М.Ивченко (1991) о том, что в условиях концентрации животных на крупных молочных фермах роль условно-патогенной микрофлоры в этиологии маститов и эндометритов резко возрастает й распространение таких болезней в стаде происходит по инфекционному типу.

3.2. Этиологическая структура мастита у коров и роль

кокковой микрофлоры в его возникновении и развитии

С целью выяснения этиологической структуры мастита у коров было подвергнуто бактериологическому исследованию 3044 пробы альвеолярного секрета вымени от животных, больных субклиническим

маститом (97,4 % проб),и от коров с клиническим маститом (2,6 % проб). При этом было выделено 2504 культуры микроорганизмов, из них 1105 культур (84,2 %) от коров, содержащихся на комплексах : 1399 (80,7 %) от животных, находящихся на фермах.(табл. 2).

Таблица 2

Микрофлора секрета вымени коров, больных маститом, на молочных комплексах и фермах ( % )

Микроорганизмы :Пробы получены от коров

:на комплексах : на фермах

Стафилококки 55,4 61,8

В т.ч. Staph.aureus 30,5 29,3

Staph, epidermidis 24,9 32,5

Стрептококки 43,3 37,4

В Т.Ч. Str„agalactiae 22,0 17,7

Str.dysgalact iae 16,6 15,9

Str.uberis •4,6 3,5

Str„pneumoniae 0,08 0,3

Эшерихии 0,28 0,15

Ассоциация микроорганизмов 1,04 0,6

Выделено культур 84,2 80,7

Пробы,не содержащие бактерии 15,8 19,3

- Установлено:;' что абсолютное большинство случаев мастита (80,7 % на молочных фермах и 84,2 % на комплексах) имели инфекционное происхождений, обусловленное кокковой микрофлорой.

В этиологической структуре инфекционного мастита преобладав Staph, aureus (30,5-29,3$), Staph, epidermidis (32,5-24,9.% ] Str. agalactiae (22,0-17,7 %), Str. dlsgalactiae (16,6-15,9 "/, Str. uteris (4,6-3,5 %), другие виды микроорганизмов ( js .coli, pneumonias ) составили' менее 2 % всех изолятов. При этом

стафилококки к стрептококки в пробах секрета вымени от больных

»

коров обнаруживали, как правило, в монокультуре, очень редко в ассоциации с другими микроорганизмами (0,6-1,04 %).

Асептический мастит у коров в обследуемых хозяйствах составил менее пятой части всех случаев болезни (соответственно 15,8 % и 19,3 % проб).

Результаты исследований показывают, что в развитии воспалительного процесса в вымени у коров участвуют разные виды кокковых микроорганизмов при доминирующей роли стафилококков.среди которых значительный удельный вес принадлежит staph, epidermidis* В последнее время щтзммьГэтого-зида стафилококков медицинские исследователи стали относить к патогенным, поскольку попадая в организм иммунокомпрометированного больного, они могут вызывать тяжелые гнойно-септические процессы (А.Ф.Мороз, А.К.Акатов, 1991)• Ряд зарубежных авторов отмечают распространение мастита у коров с участием коагулазоотрицательных стафилококков ( Poutrel в. ,1985; Smith R. ,1986 и др.). Сообщения отечественных исследователей по этому вопросу не многочисленны и противоречивы (Н.К.Оксамитный, 1982; В.А.Париков, 1990; А.И.Ивашура. 1991).

Нами определено значение эпидермального,стафилококка в этиологии мастита у коров. Для опыта, в условиях молочной фермы было отобрано 5 клинически здоровых коров симментальской породы на третьем месяце лактации. Трем коровам, с различным состоянием вымени (здоровое, бактерионосительство, асептическое воспалена^ ). после доения в соответствующую четверть молочной железы ввели суспензию живой суточной культуры эпидермального стафилококка. Двум коровам со здоровым выменем антрацистернально ввели культуру золотистого стафилококка (I животное) и физиологический раствор ( I животное)с

В течение суток после заражения культурой эпидермального ста-

филококка у двух коров (бактерионосителя и с асептичесЕсим маститом) отмечено развитие катарального мастита.' Из воспалившихся че вертей вымени при бактериологическом исследовании выделен заражающий штамм микроорганизма в монокультуре от коровы с аседтическ маститом и в ассоциации с золотистым стафшюкокком-от корова с ■первоначальным бактерионосительством. В дальнейшем микробный лей заж вымени у этих животных не изменился, признаки клинического мастита сохранились у коровы с ассоциативной микрофлорой,у коров с первоначальным асептическим маститом воспаление протекало стер то, по субклиническому типу.

Инокуляция эпидермального стафилококка корове со здоровой № лочной железой не привела к видимому воспалению четверти вымени, однако при исследовании секрета из нее установлены изменения, типичные для субклинического мастита, которые сохранялись кратковре менно и уже через 96 часов в нем констатирована нормализация клеточного состава, повышение лизоцимной активности и отсутствие мм рофлоры.

Интрацистернальное введение корове со здоровым выменем патогенной культуры золотистого стафилококка вызвало через 4 часа появление симптомов катарального мастита, с полным развитием признг ков воспаления через 24 часа после заражения. В секрете вымени о а мечено повышение уровня соматических клеток (в I мл -2,8 млн),оа сутствие лизоцима, при бактериологическом исследовании рейзолиро-ван штамм стафилококка. У коровы, в вымя которой вводили физрас:д-■ вор, изменений в показателях секрета вымени не отмечено.

Таким образом, экспериментально подтверждено этиологическое значение эпидермального стафилококка при мастите. Однако вирулент ность эпидермального стафилококка недостаточна для преодоления местного иммунитета вымени у здорового животного, поэтому возникновение мастита, обусловленного таким микроорганизмом, возможно.

лишь при взаимодействии с другими факторами, .угнетающими защитную функцию молочном железы (асептическое воспаление, бактерионоситель ство).

Нами изучено значение асептического субклинического мастита у коров в формировании инфекционного воспаления вымени.При этом установили, что отсутствие микроорганизмов в отдельных пробах секрета вымени, положительно реагирующих с диагностикумом, свидетельствует об асептическом мастите только в данное время, такое состояние является непродолжительным,в большинстве случаев воспалительный процесс осложняется микрофлорой и становится инфекционным (табл. 3).

Таблица 3

Исход асептического субклинического мастита у коров

Срок наблюдения

К-во:К-во¡Инфицировано кокковой

ко- :больк микрофлорой_

;ных ¡патогенной ¡не пагоген-¡чет~: : ной

ров

¡вер-:к-во :теи :чет-:вы- ¡вертей :мени:вымепи

Т

: к-во :чет-¡вертей ¡вымени

X

Асептический мастит

К-во четвертей вымени

Самовыздоровление

чэт- .

вертей

вымени

Начало

опыта 35 35 -Через

1 мес. 35 29 22 62,8 Через

2 мес. 35 29 27 77,1

35 100 7 20,0

17,2

2 5,7

В течение двухмесячного срока с момента регистрации асептического мастита произошло инфицирование вымени патогенной кокковой микрофлорой .у 27 коров (77,1 %) из 35 наблюдаемых и сапрофитной - у 2-х животных (5,7 %). Осложнение микрофлорой неинфекционного мастита наблюдалось,в основном, в течение первого месяца его существования - 62,8 % (22 коровы), за этот период асептический процесс в вымени сохранился только у 7 (20 %) и'самовыздоровление

наступило у 6 (17,2 %) животных. Через 2 месяца неинфекционный мастит у животных не регистрировался.

Следовательно, асептический мастит непродолжителен по своему течению, и он,как:правило, осложняется убиквитарной кокковой микрофлорой, в результате чего происходит формирование инфекционного воспаления молочной железы. Кокковая микрофлора, являясь постоянным компонентом среды обитания животных, в данном случае играет роль вторичного этиологического фактора, осложняющего вызванное другими причинами неинфекционное воспаление вымени.

С целью определения возможного бактерионосительства при мастите был изучен бактериальный статус вымени здоровых коров,отрицательно реагирующих с диагностикумами. Для этого бактериологичес кому исследованию было подвергнуто 352 пробы молока, от 88 животных, находящихся на молочных"комплексах и фермах (табл. 4).

Таблица 4

Микрофлора молока здоровых коров•

Хозяй-:Ис- _ Выделена микрофлора, %__

ствз* :еле-:Всего: Стафилококки • .-Стрептококки ""ТДругая :до- :куль-:с^ h ¡¿vt^,: к,- S^. : :микро-

:вано: тур

:проб: : ■tru.cUS -¿¿с^ :

Комплексы 160 13,55 2,5 6,8 0.6- 1,25 1,8 0,6

Фермы 192 6.7 1,0 3.1 0,5 0,5 1.6

Всего 352 20.25 3,5 9.9 1,1 1,75 3.4 0,6

Установлено, что микрофлора содержалась только в 20.25 % исследуемых проб, а 79,75 % проб молока здоровых коров были стерильными. Видовой состав микрофлоры был представлен стафилококками и стрептококками, при этом изоляция патогенных микроорганизма была незначительной и составляла по staph.aureus -3,5 %, а по S-agalact iae - 1,75 %. Молоко коров в большей мере было кон-

ответственных за: соответствующую патологию. Что касается грампо-ложительных кокков, то у них отмечается определенная избирательность к паразитированшо во внутренней среде молочной железы как у животных, так и человека по сравнению с другими видами микроорганизмов .

3.3. Совершенствование бактериологической диагностики мастита у коров

Бактериологическому методу исследования секрета вымени коро' принадлежит решающая роль при лабораторной диагностике и оценке результатов лечения воспалений молочной железы.Однако этот мето; представляет определенную сложность и требует совершенитвования Прежде всего выяснили принципиальный вопрос, связанный со временем исследования секрета молочной железы у лактиругощих кор< поскольку в нормативных документах предусмотрено проводить отбо] проб молока после выдаивания коровы (альвеолярное молоко),тогда как :в большинстве зарубежных стран взятие таких проб осуществляют перед доением (цистерналъное молоко).

С этой целью было подвергнуто бактериологическому исслеровг нию '204 пробы секрета вымени,положительно реагирующих с мастади-ном, из них 102 пробы цистернального молока, взятого после сдаивания первых струек от 74 коров и такое же количество проб альвеолярного молока.полученного после выдаивания этих же животных.

Из 102 проб цистернального молока, 89 содержали возбудителе мастита, что составляет 87,2 %, тогда как в таком же количестве проб альвеолярного молока, взятого из этих же четвертей вымени, микроорганизмы установлены, в 75 пробах (73,5 %). В видовом отношении преобладала патогенная кокковая микрофлора, представленная стафилококками (62,9 % - 60,0 %) и стрептококками (36,0^-40,0^). Отмеченная разница на .13,7 % в количестве выделенных куль-

тур свидетельствует о преимущественном диагностическом значении цисгерналышго секрета вымени по сравнению с альвеолярным, что было подтверждено и цитологическим методом с маститным диагности-кумом.

Сравнительное изучение двух методов исследования (в начале и конце доения) провели в' течение 2-х лет на 120 коровах, принадлежащих ОПС Воронежского госагроуниверситета.

При бактериологическом исследовании наибольшее количество проб молока, содержащих микроорганизмы, выявили у . реагирующих животных в начале доения (165,6+18,0), а в конце доения -(139,0+ 18,9), В пробах молока,-взятых до доения, обнаружено золотистых стафилококков - 17,75'*$, после доения - 15,25 % и агалактийных стрептококков - соответственно 6,76 % и 5,61 %.

Следовательно, диагностику мастита с'использованием соответ^-ствующих тестов необходимо выполнять в начале доения коров. Это связано с :тем, что, во-первых, такое молоко содержит соматические клетки и микроорганизмы, поступающие из очага воспаления, локализованного как в цистернальной, так и в альвеолярной частях молочной железы, тогда как молоко, взятое в конце доения, отражает состояние альвеолярного отдела вымени. Во-вторых, взятие проб молока в начале доения увязывается с технологией доения и не снижает производительности труда дояров.

Как правило, из секрета вымени коров, больных маетитом,выделяется кокковая микрофлора. Однако ее видовая дифференциация представляет определенную сложность (Картащова В„М., 1973; Ива-шура А„И.1991 и др.). Нами усоверщвнствована'Методика идентификации микрофлора секрета вымени, позволяющая более объективно и быстро проводить внутривидовую дифференциацию стафилококков и стрептококков. Включение в диагностический комплекс каталазной пробы, комплексной среды на основе кровяного МПА с эскулином,

ъ 2 раза ускоряет сроки дифференциальной оценки кокковой микро-ры, выделенной из вымени больных маститом животных.

Определенную сложность в диагностике субклинического масти' саздают так называемые "раздражения вымени", характеризующиеся i вытешем Ph. секрета и увеличением в нем количества соматических клеток, проходяще через 2-3 дня без лечебного вмешательства, а тем вновь диагностируемые у некоторых животных. '

Отдельные исследователи (Карагез А.К., 1976; Париков В.А., 1990 и др.) связывают появление "раздражении вымени" с нарушени техники машинного доения коров.

Нами, при многократном исследовании коров с "раздражением bi мени", без какой-либо корректировки техники доения, у них было yi тановлено периодическое исчезновение и появление положительных pi акций секрета вымени с мастиданом.

Отмечаемое "выпадение" положительных реакций с диагностику-мом у отдельных животных, по-видимому, связано с колебанием ypot ня локальной резистентности у переболевших маститом коров, либо с дерсистированием в паренхиме их вымени бактериальных возбудите лей мастита, что подтверждает мнение Л.Г.Емельяновой и А.С.Емелъ нова (Г974), H.Haudrich und I.Gruner (1982), дающих объяснение такому реактивному состоянию молочной железы.

Считаем, что существующий термин "раздражение вымени" не отражает сущности скрытого патологического процесса, проысходяще го в молочной железе и предлагаем определять такое состояние,как "нарушение секреции вымени", патогенез которого требует изучения С целью дифференциации субклинического инфекционного мастита от других скрытых патологических состояний вымени у лактирую-щйк коров, наш разработана соответствующая схема (табл. 5).

Схема йблица 5

дифференциальной диагностики инфекционного су¿клинического

мастита

Состояние

молочной

железы

"Реакция с диагностикумом

Секрет молочной железы

Резуль-: Продолжи,-тат стельность

Содержание соматических клеток (тыс./мл)

Наличие или отсутствие патогенной микрофлоры

Здоровая Нарушение

секреции , +

Асептический + мастит

Бактерионосит тельство

Инфекционный +

суоклинический

мастит

Постоянно Менее 500

В течение Более 500 2-3 судок

Постоянно Более 500

Постоянно Менее 500 Постоянно Более 500

В основу дифференциации различных состояний молочной железы положена бактериологическая оценка ее секрета с учетом показателей цитологического исследования.

Согласно предложенной схемы здоровая молочная железа характеризуется отсутствием-в молоке патогенной микрофлоры, содержанием в нем соматических клеток (менее 500 тыс.в I мл) и отрицательной реакцией с диаггостикумом мастита.

Нарушение секреции вымени проявляется временной (в течение 2- 3 суток) положительной реакцией молока с диагноетикумом мастита , повышением в нем, в этот период, соматических кленок (более 500 тыс,в I мл) и отсутствием патогенной микрофлоры.

Асептический мастит диагностируется на основании стабильной положительной реакции секрета вымени с мастидешом, повышения в нем содержания соматических клеток (более 500 тыс.в I мл), отрицательного результата бактериологического исследования.

Бактерионосительство связано с наличием в секрете вымени

патогенной микрофлоры, содержанием в нем соматических клеток (менее £00 тыс.в I мл) и отрицательной реакцией с диагностикумом мастита.

Для инфекционного субклинического мастита характерным является наличие в секрете вымени патогенной микрофлоры, повышенный уровень соматических клеток (более 500 тыс.в I мл) и стабильная положительная реакция с реактивом мастита.

Данная схема позволяет дать квалифицированную оценку различным субклиническим проявлениям патологического процесса в молоч -ной железе с учетом результатов бактериологического и цитологичес кого исследований ее секрета.

3.4. Разработка безантибиотиковых способов и средств терапии мастита у коров

В настоящее время из всех средств этиотропной терапии при мастите антибиотики занимают доминирующее положение, однако така: терапия имеет ряд отрицательных сторон в связи с попаданием остаточных количеств антибиотиков в молоко. Существующие режимы пастеризации молока не гарантируют их полного разрушения, поэтому проблема терапии мастита приобретает первостепенное значение,поскольку затрагивает вопросы здоровья животных и человека.экологической сферы, качества молочной продукции.

В связи с указанным, нами впервые было обосновано положение о необходимости создания противомаститных препаратов неантибиоти ковой природы. При разработке новых способов и средств антимикро ной'терапии мастита, руководствовались следующими принципами: а) максимально ограничить и упорядочить использование антибиотиков за счет других антибактериальных средств, лишенных недостатков / свойственных антибиотическим препаратам; бУ изыскать противомаститные средства, не содержащие антибиотики

оказывающие выраженное антибактериальное действие на микрофлору вымени, обладающие противовоспалительными свойствами и не вызывающие раздражения тканей молочной железы.

С лечебной целью при мастите у коров недостаточно используются антимикробные вещества, не относящиеся к группе антибиотиков: сульфаниламиды, нитрофураны, фитопрепараты и др., применение которых могло бы составить альтернативное направление в терапии болезней вымени у коров, что и стало предметом нашего исследования.

Терапевтическую эффективность изучаемых безантибиотиковых средств мы сравнивали с антибиотикосодержащим препаратом мастици-дом.

3.4.1. Сульфаниламидная терапия мастита

Сульфаниламиды, обладая широким спектром антимикробного действия, выгодно отличаются от антибиотиков тем, что значительно быс рее выводятся из организма животного и в меньшей степени загрязняют молоко. При изучении лечебных свойств сульфаниламидов установ -лены два сдерживающих фактора по их применению при мастите: высокие щелочные свойства препаратов, оказывающие раздражающее действие на вымя и невозможность использовать эти медикаменты в комплек се с новокаином - основным компонентом патогенетической терапии , из-за его антисульфаниламидного эффекта.

Отмеченные недостатки были устранены в результате разработанного нами этиопатогенетического способа терапии мастита без антибиотиков, основанного на сочетании нового анестетика - тримекаина с сульфаниламидами. Тримекаин, снимая болевое раздражение вымени, активизирует его трофику, а сульфаниламиды подавляют микрофтору, что способствует активизации защитных сил организма, направленных на ликвидацию воспалительного процесса в молочной железе.

Впервые в ветеринарии проведено изучение анестезирующего действия на молочную железу коров тримекаина, не обладающего

антис.ульфаниламидным эффектом и превосходящего по обезболивающей активности новокаин, что позволило включить в комплекс патогене- -тической терапии мастита сульфаниламиды.

. При изучении чувствительности in vitro основных возбудителей мастита (золотистого стафилококка, агалактийного стрептококка) к сульфаниламидам, наибольшая антимикробная активность отмечена у норсульфазола и сулъфацила, соответственно 1,56-6,25 мгУмл и 1,56-12,5 мг/мл. Установлено, что для интрацисгернального введения при мастите у коров пригоден только сульфаидл в концентрации 15-20 %, после нейтрализации его щелочных свойств действием молочной кислоты до рН 6,8-7,0.

Определение лечебной эффективности растворов сульфацила в комбинации с тримекаином проведено на 36 коровах, больных субклиническим маститом кокковой этиологии. При использовании в препаратах 12 % и 15 % сульфацила 14 тавотным, терапевтическая эффективность составила соответственно 57 % и 77,7 %. Увеличение концентрации сульфаниламида до 20 %, повысило лечебную эффективность до 82,6 % у 22 коров (табл. 6).

Таблица 6

Эффективность химиотерапевтических препаратов при лечении субклинического мастита у коров

Препараты

Подвергнуто лечению

коров¡четвертей :вымени

Выздоровело

коров

1Гво

Т

:четвер.выме-_

:К-во : %

Сульфацил (20 ^ +0,5

тримекаил) 22 23 19

Дифурол Б 54 78 47

Мастицид 20 24 16

Контроль

(без лечения) 15 18 2

86,3 19 82,6 87,0 66 84,6 80,0 18 75,0

13,3

11,1

Положительный результаэ отмечен в производственных условиях при лечении коров, больных серозным ( п. - 108) и катаральным (*т_= 6) маститами при парентеральном введении растворимых сульфаниламидов (норсульфазола, сульфацила) в сочетании с тримекаиновой блокадой молочной железы по Логвинову, что подтверждает эффективность безантибиотикового этиопатогенетического способа терапии клинически выраженных воспалений вымени, .....

Наши разработки по использованию тримекаина для патогенетической терапии мастита у коров включены в действующие "Рекомендации по борьбе с маститом, коров" (1983).

3.4.2.Нитрофуранотерапия мастита

Широкий спектр антимикробного действия нитрофуранов.медленное развитие к ним устойчивости микроорганизмов, положительное влияние на фагоцитоз и быстрое выведение из организма, послужили основанием для их изучения при мастите коров. На основе нитрофуранов до наших исследований, был создан противомаститнай препарат дифу -рол-А, существенным недостатком которого является неоднократное введение в вымя с целью поддержания лечебной концентрации.

При изучении 6-ти нитрофурановых препаратов: фурагина, фура-цилина, фуракрклина, фуразолина, фуразонала установлено потенцирование антимикробного эффекта у фурагина и фуразолидона.взятых в равных весовых соотношениях (1,0-3,0 %). Бактерицидное действие двух нитрофуранов in vitro по отношению золотистого стафилококка, агалактийного стрептококка и эшерихий проявлялось соответственно в концентрациях 0,4; 0,8 и 1,0 мкг/мл.

На основе сочетания фурагина с фуразолидоном и специальной мазевой основы был разработан комплексный противомаститный препарат, получивший название "дифурол-Б" (а„с. 939004). Препарат быстро выводится из молочной железы, содержащиеся в нем активно дейст-

■¿в

вующие вещества обнаруживаются в молоке в теченае 24 часов после интрацистернальиого введения.

Изучение лечебных свойств дифурола-Б было проведено на 54 коровах, больных субклиническим маститом стафилококковой (67,7 %] и стрептококковой (32,3 %) этиологии (табл„6). Терапевтический эд фект составил 84,6 %, у невыздоровевших коров выделено 10 культур микроорганизмов, представленных, главным образом, золотистым стафилококком. В контрольной группе ждао.гсных (мастицид) выздоровлена составило 75 %, к тому же применение этого средства требовало про ведения длительной браковки молока из-за содержания в нем антибио тиков. Во второй контрольной груше, где находилось 15 больных ко ров без лечения, самовыздоровление составило 11,1 %,

Дйфурол-Б внедрен в производственную практику (Наставление ГУБ МСХ СССР по применению дифурола-Б для лечения мастита коров", 1986).

3.4.3. Фитотерапия мастита

Препараты растительного происхождения являются биологически активными соединениями, родственными по своей химической структуре ряду ферментных систем человека и животного, они быстро подвер гаются метаболизму и выводятся из организма. Их получение и освое ние представляет большой научно-практический интерес, особенно в связи с распространением микроорганизмов, устойчивых к действию антибиотиков, получаемых из низших растений.

Мы провели изучение трех новых растительных медицинских препаратов: донелвина, полученного из корней шалфея; сангвиритрина -из маклей сердцевидной и хлорофиллипта - из листьев эвкалипта с целью использования их в качестве противомаститных средств.

При определении in vitro антимикробной активности фитопрепаратов в отношении 12 штаммов золотистого стафилококка и '5 штаммов агалактийного стрептококка, обладающих различной степенью

антибиотикоустойчивости, установлено бактерицидное действие до-нелвина и хлорофиллипта в концентрации 3,12-12,5 мкг/мл, сангви-ритрина- 2.5,0-50,0 мкг/мл, а бактериостатическое, как правило,на 1-2 разведения ниже.

Наиболее перспективными для дальнейшего изучения были признаны донелвин и хлорофиллипт, их растворы в концентрации 0,2 % и 1,0 %, в дозе 10 мл не обладали местнораздражающим действием при введении в вымя коров.

Изучение терапевтической эффективности фитопрепаратов проведено наш на 48 коровах, больных субклиническим маститом кокковой этиологии (табл. 7).

Таблица 7

Эффективность фитопрепаратов при лечении субклинического мастита у коров

Препараты : Подвергнуто Выздоровело

лечению : коров ¡четвертей вымени

:коров ¡четвертей : вымени :Кол-во % :Кол-во : %

Дэнелвин 20 20 17 85,0 17 85,0

Хлорофиллипт 15 15 12 80,0 12 80,0

Мастицид 13 13 9 69,3 9 69,3

У 20 коров, перед введением донелвина, из секрета вымени была выделена 21 культура микроорганизмов, после лечения кокковая микрофлора обнаружена в вымени трех невыздоровевших коров,терапевтическая эффективность препарата составила 85 %.

У 15 коров, перед лечением хлорифиллиптом, при бактериологическом исследовании молока было изолировано 15 культур стафилококков и стрептококков. После лечения микрофлора выявлена в трех пробах секрета вымени, терапевтическая эффективность этого препарата составила 80 %.

У 15 коров контрольной группы, которым применяли мастицид, бы-

ло выделено 13 культур. После лечения в секрете вымени 4-х животных обнаружено 4 культуры: 2 - золотистого стафилококка и 2 -ага-лактийного стрептококка. Лечебная эффективность антибиотикосодер-жащего препарата составила 69,3 %. Определенные сложности вызвал; браковка молока от этой группы животных, поскольку входящий в сос тав мастицяда стрептомицин выделяется из вымени в течение недели, тогда как при использовании растительных препаратов срок бра ков к! молока, в среднем, двое суток после окончания лечения.

На основании применения хлорофиллипта разработан способ леч( ния субклинического мастита у коров (а0с„ 5В8677), который вне.] рен в производство. В процессе работы по промышленному выдуску х-рофиллипта нами, совместно с сотрудниками. Харьковского НИИ микрог биологии, вакцин и сывороток (Надтока В.Л. и др.), был разработа! "Способ определения антибактериальной активности хлорофиллипта" (а„Со В 803468), который повысил качество выпускаемого препарата

3.4.4. Иммунотерапия мастита

Вопросы иммунной терапии мастита кокковой этиологии у коров мало, .изучены из-за сложности противоинфекционного иммунитета, обу.словленного антибактериальными и антитоксическими (факторами.

Нами проведено испытание лечебных свойств иммунных сыворото! на 14 лактирующих коровах, больных серозным и катаральным маститом стафилококковой и стрептококковой этиологии.

Установлено, что сыворотки крови коров .переболевших бактериальным маститом, оказывали терапевтическое действие при условии соответствия их виду возбудителя мастита у 8 больных животных. Сыворотки, неспецифичные виду возбудителя мастита убкоров.не оказали лечебного эффекта. Поиск препаратов для серотерапии инфекционного мастита следует вести, в направлении получения специфических гипериммунных сывороток. Наш данные в отношении возможност]

иммунотерапии мастита согласуются с результатами исследований А.Г. Шахова и др. (1390), В.И.Слободяника (1994).

3„5. Рациональная антибиотикотерапия мастита у коров

Безантибиотиковые средства терапии мастита, ввиду ограниченного выпуска, пока не могут заменить препараты на основе антибиотиков, арсенал которых постоянно пополняется.

Проведены исследования по отработке параметров рациональной антибиотикотерапии мастита у коров. Изучена чувствительность 638 стафилококковых и 437 стрептококковых культур, выделенных от коров на молочных комплексах и фермах к 5 антибиотикам: пенициллину, стрептомицину, неомицину, тетрациклину, эритромицину. Микрофлора вымени больных коров была наиболее чувствительной к трем антибиотикам: эритромицину,. пенлцилину и неомицнн.у. Среди изученных культур, наибольшая устойчивость отмечена к стрептомицину и тетрациклину .

Клинические испытания комплексных антибиотикосодержащих препаратов: мастисана Б, Е, неомастаэрозоля и мастицида провели на коровах, больных катаральным (п- = 33)'и субклиническим (л. =30) маститами. Лечебная эффективность препаратов напрямую зависела от чувствительности микрофлора вымени к антибиотикам, входящим в их композиции и составляла 40 % - 90 %. ,

Установлено, что антибиотикосодержащие препараты необходимо применять для лечения мастита у коров под контролем антибиотико-грамм микрофлоры секрета вымени. При лечении субклинического бактериального мастита антибиотики следует назначать отдельным живо^ ним, у которых не отмечено выздоровление после безантибиотиковой терапии.

Мы поддерживаем мнение М.А.Симецкого (1980) о необходимости разработки для каждого хбзяйства антибиотикограмм возбудителей

мастита, вместе с тем считаем, что предложенный им интервал между исследованиями сроком в полтора года нуждается в корректировке и предлагаем определять чувствительность к антибиотикам микрофлоры секрета вымени не реже 2 раз в году: в зимний и летний периоды. Основанием для такого заключения служат полученные нами данные о приобретении низкой чувствительности и устойчивости 47,0-64,7 % штаммов микроорганизмов к пенициллину и стрептомицину через 5 месяцев после применения на ферме мастицида, содержащего эти антибиотики.

3.6. Совершенствование антимикробной профилактики мастита у коров в период сухостоя

Для антимикробной профилактики мастита у коров в период сухс стоя используются, как правило, антибиотики, которые вводят интра цистернально во все четверти вымени (британский метод) или только в те из них, которые содержат микрофлору (скандинавский метод).

Отмечено, что четверти вымени, содержащие микрофлору в период сухостоя, после отела коров давали на 15,6 % молока меньше по сравнению со здоровыми четвертями, а также обрабатываемыми антибиотиками (Hirsch н.Р,:1985).

Нами изучена профилактическая эффективность двух препаратов без антибиотиков: хлорофиллипта, дифурола А и немецкого антибиотического средства "мастипен-депод", преднЗзначенного для применения коровам в сухостойный период. Кроме того проверяли целесообразность ивтрацистернального введения противомаститных препаратов сухостойным коровам со здоровой молочной железой.

Экспериментальные исследования проведены на 5 группах коров, из которых три были опытными (а. = 31) и две контрольных (л-=26)'.

Первая контрольная группа включала коров с инфицированным выменем, вторая - со здоровым.

Препараты вводили коровам опытных групп в последний день

запуска в четверга вымени, секрет которых содержал кокковую микрофлору. Животные контрольных групп обработке препаратами не подвергались. Учет результатов проводили через 10 дней после отела коров.

Установлено.что применение с профилактической целью хлоро-филлипта, дифурола А и мастипен-депода не только предупредило мастит у коров, но и способствовало освобождению от кокковой микрофлоры и снижению бактериальной обеемененности в 78 %, 73,7 %, 70,6 % четвертей вымени соответственно.

За период сухостоя у коров первой контрольной группы освободилось от микрофлоры 21,4 % четвертей вымени, зарегистрировано одно заболевание катаральным маститом; во второй контрольной

группе животных, вымя которых не содержало микрофлору в период

* •

запуска, отмечена низкая степень бактериальной обсемененности молочной железы (16,6 %). Считаем, что коровам со здоровой молочной железой, не являющимся бактерионосителями, введение противомастатных препаратов при переводе в сухостой не целесообразно.

Для профилактики мастита у коров в период сухостоя следует вводить антимикробные препараты во время запуска в те четверти вымени, секрет которых дает положительную реакцию с диагностикумом или содержит возбудителей мастита. Введение'противомаститных препаратов, особенно антибиотической группы, всем коровам, переводимым в сухостой, без предварительного бактериологического исследования секрета вымени, может привести к угнетению механизмов локальной защиты молочной яелезы у здоровых животных и формированию устойчивости микроорганизмов к действию антибиотиков.

3.7. Влияние антимикробной профилактики мастита у коров на повышение устойчивости новорожденных телят к заболеванию инфекционными диареями

Проблема мастита у коров связана не только с потерей молока и снижением его качественных показателей, ко она имеет прямое отношение к здоровью новорожденных телят, поскольку молозиво является не только основным источником питательных веществ, но и носителем защитных иммуноглобулинов, содержание которых при хроническом воспалении вымени становится низким (Федоров Ю.Н. , 1988; Ко сянчук В„В. , 1992; Метаиоиак! М. , 1984).

Нами изучено влияние субклинического мастита и его профилактики у сухостойных коров, вакцинируемых против колибактериоза и сальмонеллеза, на иммунологические показатели молозива и колост-ральную защиту новорожденных телят.

В опытные группы были включены животные, у которых в период зацуска был диагностирован субклинический мастит кокковой этиологии. В контрольные группы входили животные с больным и здоровым выменем (табл. 8). Бактериологические, иммунологические и цитологические исследования секрета вымени проводили дважды: в период з пуска и после отела. У телят, полученных от коров каждой .группы, исследовали сыворотку крови перед выпойкой молозива и после выпой ки' в первые 10-12 часов жизни. Коровам опытных групп, в последний день запуска, в больные четверти вымени вводили антибактериальные препараты без антибиотиков (хлорофиллипт, дифурол А) и с антибиотиками (мастицид, фармазин). Животным контрольных групп препараты не вводили.. Через 10-14 дней коровы (д. = 20) были привиты формол-квасцовой вакциной против сальмонеллеза, а другая группа животных (п. = 15) - концентрированной формолтиомерсаловой вакциной против колибактериоза телят и ягнят в дозах и сроки, согласно наставлени по применению данных биопрепаратов,,

Научно-производственный опыт подтвердил влияние антимикробной профилактики мастита у сухостойных коров, имцунизируемых против колибактериоза и сальмонеллезо. на заболеваемость диареями новорожденных телят (табл. 9).

Таблица 9

Заболеваемость диареями новорожденных телят в зависимости от состояния вымени сухостойных коров-матерей

Груп- :К-во:Состояние .-Полу-¡Заболело :Средняя:Пало те- ¡Осталось

пы ¡ко- ¡вымени в ¡чено : телят :продол-:лят в те-¡больных

коров:ров ¡период ¡телят: :житель-.• чение I ¡коров

: ¡запуска ¡ .•__¡ность :мес.жизни:_

: : :все-: % :болезни:все-: % :все-: %

: :го : :(сут.) :го : ¡го :

1 82 Субклин. 80 53 66,2 5,4 14 17,5 74 92,5

мастит

2 91 Субклин. 88 42 46,4 3,9 7 7,9 13 14,7

мастит санирован

3 100 Здоровое 97 35 36,0 3,4 4 4,1 5 5,2

Заболеваемость диареями почти на 20 % была выше у телят,полученных от коров с субклиническим маститом, по сравнению с телятам] от коров, у которых.проводилась санация вымени в период запуска, . соответственно - 66,2 % и 46,4 %. Также в первой группе падеж телят был на 9,6 % выше, чем во второй (17,5 % и 7,9 %).

В третьей (контрольной) группе коров со здоровым выменем заболело 36 % родившихся телят, из них пало 4,1 %.

Проведенные экспериментальные и производственные исследования показали, что интрацистернальное введение антимикробных препаратов коровам, больным субклиническим маститом, перед вакцинацией 'их против сальмонеллеза и колибактериоза, повышает иммунологическую ценность молозива и профилактирует вторичны! иммунодефицит у новорожденных телят, что проявляется их меньшей заболеваемостью и лучшей сохранностью. Иммунизацию сухостойных коров, с

целью создания специфического колострального иммунитета у телят следует проводить после предварительной санации вымени животных, больных субклиническим маститом или являющихся бактерионосителями.

Таким образом, антимикробная обработка вымени у коров в начале сухостойного периода имеет два аспекта: предупреждение мастита и улучшение биологических свойств молозива, что положительно отражается на иммунологической защите телят и получении молока высокого санитарного качества.

ВЫВОДЫ

1. Заболеваемость коров маститом на молочных комплексах и фермах Центрально-Черноземной зоны России составляет от 9,9 до 24 % и от 4 до 12 % соответственно, при соотношении клинически выраженных форм и субклинического воспаления вымени 1:5. Атрофия четвертей вымени у коров на комплексах диагностируется значительно чаще (5,2 %), чем на фермах (2,7 %).

2. Инфекционный характер мастита установлен у большинства больных коров (84,2 % на комплексах и 80,7 % на фермах). В этиологической структуре мастита ведущая роль принадлежит кокковой микрофлоре, представленной стафилококками видов Staph, aureus (30,5-29,3 %), staph.epidermidis (32,5-24,9 %). и стрептококками видов Str. agalactiae (22,0-17,7 %), Str. dysg al actiae (16,6-15,9 %), Str.uberiD (4,6-3,5 %).

Роль других микроорганизмов (str.pneumoniae, E.coli) в этиологии мастита незначительна.

3. Установлено этиологическое значение эпидермального стафилококка при мастите у коров. Интрацистернальное введение коровам культуры staph.epidermidis приводит к возникновению мастита при взаимодействии с другими факторами, отрицательно влияю-

После отела коров, вакцинированных против сальконеллеза.наибольшее содержание иммуноглобулинов (40,60+0,23 иг/мл) и специфических антител (1:152) было отмечено в молозиве животных, которым для санации вымени применяли хлорофиллипт. При бактериологическом исследовании секрета вымени коров данной группы микрофлора- не обнаружена. Коло стральный статус телят, полученных от этой группы коров, характеризовался относительно высоким уровнем иммуноглобулинов (16,03+0,20 мг/мл) и противосальмонеллазных антител (1:74), что обеспечило их устойчивость к заболеванию в первый месяц жизни.

У коров, вакцинированных против колибактериоза, сравнительно высокое содержание иммуноглобулинов (42,640,24 мг/мл) и специфических антител (1:166) зарегистрировано в молозиве животных, вымя которых санировалось фармазином. У коров указанной группы микрофло ра в секрете вымени не установлена. Колостральный статус телят, ро дившихся от этих коров, по своим показателям более чем в два раза превосходил уровень гуморальной иммунной защиты телят, подученных от коров, больных субклиническим маститом. Из пяти телят этой груп да заболел только один (20 %).

После отела животных контрольных групп установлено: субклинический мастит вызывает иммунологическую неполноценность молозива, проявляющуюся низким содержанием иммуноглобулинов (16,8-19,7 мг/мл) и специфических антител у коров, вакцинированных против колибактериоза (1:36) и сальмонеллеза (1:40), что соответственно коррелировало с концентрацией антител в сыворотках крови их телят (1:22) и отрицательно влияло на колостральный иммунитет. Заболеваемость телят в контрольных группах составила 60 %.

Наиболее высокий уровень иммуноглобулинов (46,1^0,Г7 мг/мл) и специфических антител (1:182) был установлен в молозиве коров со здоровым выменем, что обеспечило иммунную защиту их новорожденных телят от заболевания колибактериозом.

Научно-производственный опыт подтвердил влияние антимикробной профилактики мастита у сухостойных коров, иммунизируемых против колибактериоза и сальмонеллеза. на заболеваемость диареями новорожденных телят (табл. 9).

Таблица 9

Заболеваемость диареями новорожденных телят в зависимости от состояния вымени сухостойных коров-матерей

Груп-:К-во¡Состояние :Полу-¡Заболело :Средняя:Пало те- ¡Осталось

пы ¡ко- ¡выменл в ¡чено ¡ телят ¡продол-:лят в те-¡больных коров:ров ¡период ¡житель-¡чение I ¡коров

: ¡запуска ¡ ¡_^__.-яость : мес. жизни:_

¡ : : :все-: % :болезни:все-: %~:все-: %

: : : ¡го : :(сут.) ¡ro ¡ ¡го :

1 82 Субклин. 80 53 66,2 5,4 14 17,5 74 92,5

мастит

2 91 Субклин. 88 42 46,4 3,9 7 7,9 13 14,7

мастит санирован

3 100 Здоровое 97 35 36,0 3,4 4 4,1 5 5,2

Заболеваемость диареями почти на 30 % была выше у телят,полученных от коров с субклиническим маститом, по сравнению с телятами от коров, у которых.проводилась санация вымени в период запуска.. соответственно - 65,2 % и 46,4 %% Также в первой группе падеж телят был на 9,6 % выше, чем во второй (17,5 % и 7,9 %).

В третьей (контрольной) группе коров со здоровым выменем заболело 36 % родившихся телят, из них пало 4,1 %.

Проведенные экспериментальные и производственные исследования показали, что интрацистернальное введение антимикробных препаратов коровам, больным субклиническим маститом, перед вакцинацией их против сальмонеллеза и колибактериоза, повышает иммунологическую ценность молозива и профилактирует вторичный иммунодефицит у новорожденных телят, что проявляется их меньшей заболеваемостью и лучшей сохранностью. Иммунизацию сухостойных коров, с

целью создания специфического колострзльного иммунитета у телят следует проводить после предварительной санации вымени животных, больных субклиническим маститом или являющихся бактерионосителями Таким образом, антимикробная обработка вымени у коров в начале сухостойного периода имеет два аспекта: предупреждение мастита и улучшение биологических свойств молозива, что положительно отражается на иммунологической защите телят и получении молока высокого санитарного качества.

ВЫВОДЫ

1. Заболеваемость коров маститом на молочных комплексах и фермах Центрально-Черноземной зоны России составляет от 9,9 до 24 % и от 4 до 12 % соответственно, при соотношении клинически выраженных форм и субклинического воспаления вымени 1:5. Атрофия четвертей вымени у коров на комплексах диагностируется значительно чаще (5,2 %), чем на фермах (2,7 %).

2. Инфекционный характер мастита установлен у большинства больных коров (84,2 % на комплексах и 80,7 % на фермах). В этиологической структуре мастита ведущая роль принадлежит кокковой микрофлоре, представленной стафилококками видов staph, aureus (30,5-29,3 %), staph.epidermidis (32,5-24,9 %). и стрептококками видов Stг.agalactiae (22,0-17,7 %), Str. dysgalactiae (16,6-15,9 %), Str.uteris (4,6-3,5 %).

Роль других микроорганизмов -(str.pneumoniae, К.coli) В этиологии мастита незначительна.

3. Установлено этиологическое значение эпидермального стафилококка при мастите у коров, Интрацистернальное введение коровам культуры staph.epidermidis приводит к возникновению мастита при взаимодействии с другими факторами, отрицательно влияю-

щими на вымя животных (асептическое воспаление, бактерионосительство).

4. На молочных комплексах и крупных фермах мастит кокковой этиологии протекает по гиду энзотии, поддерживаемой убкквитарной микрофлорой. Постинфекционный иммунитет при этом заболевании проявляется слабой напряженностью и непродолштельностыо, что подтверждается неоднократным переболеванием животных в течение года.

5. Бактериологический метод исследования секрета вымени является решающим при постановке диагноза на инфекционный мастит и позволяет выявить на 13,7 % культур микроорганизмов больше при использовании цистернального молока по сравнению с альвеолярным.

■ 6. Эффективность разработанных способов химиотерапии субклинического мастита коров на основе с,ульфацила натрия в сочетании с тримекаином и нитрофуранового препарата дифурола Б составляет 82,6 и 84,6 % соответственно, что на 7,6 и 9,6 % больше по сравнению с.применением антибиотикосодернащего препарата - мастицида.

7. Лечебная эффективность разработанных способов фитотерапии субклинического мастита коров на основе донелвика и хлорофаллипта составляет 85,0 и 80,0 % соответственно, что на 15,7 и 10,7 % больше, чем мастицида.

8. Способ иммунотерапии мастита с использованием сывороток крови коров, переболевших маститом кокковой этиологии, оказывает терапевтическое действие при условии специфичности сывороток виду возбудителя мастита.

9. Лечебная эффективность комплексных антибиотикосодержащих препаратов при мастите зависит от чувствительности микрофлоры вымени к антибиотикам, входящим в их состав. Применение таких препаратов необходимо контролировать антибиотикограммой возбудите-

лей мастита, определяемой не реже 2 раз в течение года: в зимни и летний периоды.

10. Введенде антимикробных препаратов в инфицированные четверти вымени коров в начале сухостойного периода снижает бактериальную обсемененность молочной железы и профилактирует заболет ние маститом на 78,0 % при применении хлорофиллипта, 73,7 % диф.1 рола А и 70,6 % - мастипек-депода.

При отсутствии микрофлоры в вымени коров, переводимых в су-,хостом, после отела отмечается низкая степень инфицирозанности ь лочной железы.(16,6 %), таким животным введение антимикробных средств, с целью, профилактики мастита, нецелесообразно.

11. Субклинический мастит сухостойных корон обусловливает иммунологическую-неполноценность молозива, что отрицательно влия ет на колостральный иммунитет телят. Интрацистернальное. введение антимикробных препаратов в начале сухостойного периода коровам, больным субклиническим маститом, перед иммунизацией против коли-бактериоза и сальмонеллеза, способствует увеличению в их молозив общего количества иммуноглобулинов и специфических антител,обеспечивающих противоикфекционную защиту новорожденных телят.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ .

1. С целью совершенствования бактериологической диагностики мастита кокковой этиологии рекомендуются каталазная проба и коми лексная среда с эскулипом, позволяющие в два раза ускорить дифференциальную оценку изолируемой микрофлоры.

2. Для проведения эффективной терапии мастита у коров разра ботана и предлагается схема дифференциальной диагностики инфекционного субклинического мастита от-других скрытых патологически состояний вымени.

3. Для .успешного лечения субклиническсго мастита у лак тирую

щих коров без использования антибиотиков рекомендуем применять один раз в сутки, в течение 3-х дней интрацистерналыю: - 20 % нейтральный раствор сулъфацида натрия на 0,5 % тримекаине в дозе 20 мл; - нитрофурановый препарат дифурол Б в дозе 5 мл; - I % масляный раствор хлорофиллипта в дозе 10 мл; - 0,2% раствор донел-вина в дозе 10 мл.

4. С целью профилактики мастита у сухостойных коров и коло-стрального иммунодефицита у новорожденных телят предлагаем в пе-рисЗд запуска исследовать на субклинический мастит всех животных с последующим интрацистернальнкм введением больным и бактерионосителям антимикробных препаратов с учетом чувствительности к ним микрофлоры секрета вымени.

5. Для рационального использования комплексных антибиотико-содержащих препаратов при мастите'у коров необходимо определять ан-тибиотикограмму микрофлоры вымени больных животных не реже двух раз в течение года. Такие препараты следует применять ограничено,

в случаях безуспешного лечения коров средствами, не содержащими антибиотики.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ

ДИССЕРТАЦИИ

А, С та тьи

1. Кузьмин Г.Н. Лечение скрытых маститов // Ветеринария.- 1974,-№ II.- С.91-93.

2. Йвашура А «И., Кузьмин Г.Н., Захаров В.й, и др. Динамика физиологического состояния молочной железы коров при машинном доении // Материалы Ш Всесоюзного симпозиума по физиологическим основам машинного доения,- Боровск, 1974.- С.198-199.

3. Загаевский И.С., Кузьмин Г.Н.,0 диагностике скрытого мастита у коров // Ветеринария,- 1975,- № II.- С.66-67.

4. Кузьмин Г.Н. Анестетики и сульфаниламиды при лечении мастито у коров // Материалы 1У Всесоюзного симпозиума по фмзиологич с!шм основам машинного доения,- Алма-Ата, 1975. - С.141-143.

5. Кузьмин Г.Н., Захаров В.И., Фомин М.А4. Результаты применения тримекаина // Ветеринария.- 1975.- А' 7,- С.86-87.

6. Кузьмин Г.Н. Реакция молочной железы коров на инграцистернал. ное введение анестетиков Ц Сб.науч.работ "Акушерство, гинекология, искусственное осеменение и болезни молочной железы с.-х. животных". - Л., 1976. - С.147-148.

7. Париков В.А., Кузьмин Г.Н., Лигерс Я.А, и др. Эффективность противомаститных препаратов // Ветеринария.- 1976. - № 5. -С. 7Й-75.

8. Кузьмин Г.Н., Париков В.А. Препарат из листьев эвкалипта для лечения маститов у коров // Тез. межреспубликанской конф. -Рига, Г977. - С.75-78.

9. Париков В.А., Кузьмин Г.Н., Ветра Я.А.'и др. Применение прелг ратов без антибиотиков для лечения маститов у коров )) Сб. науч.тр. Всесоюзного НИИ незаразных болезней животных. - Воронеж, 1977.- Т.1. - С.37-42.

10. Кузьмин Г.Н..Париков В.А. Хлорофилловый препарат для лечения

VI

маститов у коров (на польск.яз.) // Бюллетень съезде польско1 товарищества вет.наук. - Вроцлав,1978.. ТЛ.- С.175.

11. Кузьмин Г.Н, Антимикробная активность хлорофиллипта по отношению к микрофлоре, выделенной от коров, больных масгатом

// Сб.науч.тр..Всесоюзного НШ незаразных болезней животных. - М., 1979.- Т.2. - С.78-80.

12. Париков В.А., Кузьмин Г.Н., Слободяник В.И. и др. Роль эффективной диагностики в системе мер профилактики мастита у коров при машинном доении // Тез.докл. У Всесоюзного симпозиума по

машинному поению с.-х. животных.- М., 1979.- С.132-133.

13. Кузьмин Г.И., Париков В,А., Слободяник В.И. Профилактика субклинического мастита у коров в сухостойном периоде // Сб.науч. тр. Всесоюзного НИИ незаразных болезней животных "Болезни органов воспроизводительной системы и новорожденного молодняка",-М., 1979.- С.19-20.

14. Кузьмин Г.Н., Худяков В.И. Бактериологическая диагностика стрептококкового мастита у коров // Сб.науч.тр. Воронежского сельскохозяйственного института. Том 114.- Воронеж, 1981. -С.58-61„

15. Париков В.А., Слободяник В.И., Кузьмин Г.Н. и др. Дифференциация кокковой микрофлоры молока // Ветеринария.- 1981,- № II. -

С.64-65.

16.'Париков В.А., Слободяник В„И., Кузьмин Г.Н. и др. Новый нит-рофурановый препарат для лечения больных маститом коров при машинном доении // Тез.докл. У1 Всесоюзного симпозиума по машинному доению с.-х. животных.- М„, 1983.- С.143-144.

17. Рекомендации по борьбе с маститом коров. Утверждены Министерством сельского хозяйства СССР 01.07.83.- М., 1983.- 39 с.

18. Кузьмин Г.Н. Фитотерапия при мастите у коров // Тез. докл. Всесоюзной научной конференции.- Воронеж, 1986.- С.30-31.

19. Кузьмин Г.Н. Эффективность новых антимикробных препаратов при лечении мастита у коров // Сб.науч.тр. Воронежского сельхозинститута«- Воронеж, 1986.- С.25-32.

20. Кузьмин Г.Н. Профилактика мастита и иммунизация сухостойных коров против сйльмонеллеза // Сб. науч. тр. Воронежского сельхозинститута.- Воронеж, 1990,- С.49-54.

21. Дынин В.И., Кузьмин Г.Н. К вопросу иммунотерапии мастита у коров // Сб.науч.тр. Воронежского сельхозинститута,- Воронеж, 1990.- С.15-19.

22. Париков В.А., Слободянкк В.И., Савостин А.Н.. Кузьмин Г.Н. Препараты не содержащие антибиотики и их эффективность при мастите у коров // Тез. докл. советско-финляндского симпоз ма по проблеме мастита.- Л., 1990.- С.15-16.

23. Кузьмин Г.Н. Мастит коров и противоинфекционная защита нов рожденных телят // Тез.докл. науч.конф. Воронежского госаг университета,--Воронеж, 1993«- С, 99-100.

24. Кузьмин Г.Н. Принципы антибактериальной терапии мастита у коров // Сб.науч.тр. Воронежского госагроуниверситета, -Воронеж, 1994.- С.37-39.

2'5. Кузьмин Г.Н. Влияние мастита сухостойных коров на иммуноло; ческий статус новорожденных телят // Тез.докл. I Всероссий кой научной конф. "Иммунодефицита сельскохозяйственных жив! ных"о - М., 1994,- С.32-33.

26. Кузьмин Г.Н., Париков В.А„, Слободяник В.И. Роль эпидермал: го стафилококка в этиологии мастита у коров // Итоги и перспективы научных исследований по проблемам патологии животных и разработке средств и методов ¡терапии и профилактики: Материалы координац,,совещания,- Воронеж, 1995.- С.215-216.

Б. Изобретения

1. Способ лечения субклинического мастита у коров }/ Авторское свидетельство № 588677 (СССР). 1977.- 2 с. (в соавт.)

2. Способ определения антибактериальной активности хлорофиллип: // Авторское свидетельство № 803468 (СССР), 1980. - 5 с.

(в соавт.).

3. Препарат для лечения мастита у коров )) Авторское свидетели ство № 93900 4 (СССР). 1982.- 3 с. (в соавт.).