Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.05) на тему:Лечебно-профилактические мероприятия при заболеваниях копытец у коров голштино-фризской породы

На правах рукописи

003488508

Малов Денис Валерьевич

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ МЕРОПРИЯТИЯ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ КОПЫТЕЦ У КОРОВ ГОЛШТИНО-ФРИЗСКОЙ ПОРОДЫ

16.00.05 - ветеринарная хирургия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

1 О ДЕК 2009

Троицк-2009

003488508

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Безин Александр Николаевич Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Щербаков Николай Павлович доктор ветеринарных наук, профессор Ермолаев Валерий Аркадьевич Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Казанская Государственная

академия ветеринарной медицины»

Защита состоится « » 2009г. в Л часов на заседании

диссертационного совета Д 220.066.01 при ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины». Адрес: 457100,

Челябинская область, г. Троицк, ул. Гагарина, 13, тел. 8(35163) 2-48-88, 8(35163) 2-27-16, факс (35163)2-04-72, E-mail: tvi t@mail.ru. http://www.usavm.ac.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины».

Автореферат разослан « ЯР » 2009г.

Ученый секретарь л

диссертационного совета (J/l^U4^ Лыкасова И.А.

1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В Уральский регион ежегодно поступают тысячи нетелей голштино-фризской породы, которые используются для повышения молочной продуктивности и улучшения генетического потенциала местного молочного скота.

Болезни дистального отдела конечностей сельскохозяйственных животных, в том числе и коров, в последние 30 лет являются наиболее актуальной проблемой животноводства, так как наносят значительный экономический ущерб хозяйствам за счет выбраковки большого количества больных животных (до 50%),причем самых высокопродуктивных. В последние годы разработка мер' профилактики и лечения заболеваний копытец у коров проводится в аспекте изучения инфекционных агентов (A.A. Сидорчук, С.Д. Панасюк, 2004), закономерностей структурной перестройки соединительной ткани (C.B. Тимофеев, В.В. Гимранов, 2008), патохимии, иммунологии и иммунопатологии данного заболевания, а также применения иммуностимуляторов и иммуномодуляторов (М.Т. Байкенов, 2001; Н.О. Валёв и соавт., 1997; A.B. Кадочников, 2003; В.В. Колоденская, 1999; В.А. Молоканов и соавт., 1990, 1998; М.Ш. Шакуров, О.И. Шоркина, 1996; Ю.Л. Якубовская, 1991 и другие).

Некробактериоз, как классическая инфекционная болезнь, в последние десятилетия сильно эволюционировала в болезнь крупного рогатого скота в основном в копытной форме и по заболеваемости у этих животных выходит на одно из первых мест (A.A. Сидорчук, С.Д. Панасюк, 2004). В настоящее время в РФ официально зарегистрировано три вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота, опыт применения которых показал их слабую профилактическую эффективность, особенно в хозяйствах с длительным периодом неблагополучия по заболеванию. Поэтому изыскание высокоэффективных и технологичных в применении средств для профилактики и лечения заболеваний копытец у коров применительно к зональным условиям имеет большое актуальное значение.

Целью исследования явилось изучение особенностей заболеваний копытец у коров голштино-фризской породы, проявления иммунопатологических реакций, влияние трансфер-фактора на иммунный статус животного, разработка методов лечения и профилактики заболеваний копытец у коров.

Задачи исследований:

1. Изучить заболеваемость, частоту и характер поражений копытец у коров голштино-фризской породы в зоне Южного Урала.

2. Изучить особенности имуннобиохимического статуса больных животных.

3. Определить имуннотропные свойства трансфер-фактора, иммуногенные свойства вакцины против некробактериоза животных в сочетании с трансфер-фактором.

4. На основе полученных данных разработать рекомендации по диагностике, организации и проведению комплекса лечебно-

профилактических мероприятий при болезнях копытец у коров

голштино-фризской породы.

Научная новизна. Проведено комплексное изучение состояния клинико-^ иммунобиохимического статуса при заболеваниях копытец у коров различных пород в сравнительном аспекте в зоне Южного Урала. Исследован механизм иммунопатологических реакций при заболеваниях копытец у коров. При этом установлено, что при заболеваниях копытец у коров голштино-фризской породы имеет место развития эндогенной интоксикации в результате нарушения углеводного, липидного, белкового и минерального обменов, а также иммунодефицита клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. Доказаны иммуностимулирующие свойства трансфер-фактора, что дало возможность предложить оригинальный метод лечения и профилактики заболеваний копытец у .коров. Разработан комплекс лечебных и профилактических мер с использованием вакцины против некробактериоза животных в сочетании с трансфер-фактором.

Теоретическое и практическое значение работы. В работе представлены результаты ортопедической диспансеризации коров различных пород, изучены особенности этиопатогенеза заболеваний копытец и имуннобиохимического статуса у больных коров голштино-фризской породы в зоне Южного Урала. На основании результатов собственных исследований дано патогенетическое обоснование применения трансфер-фактора с целью стимуляции иммунного ответа в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при некробактериозе крупного рогатого скота. Предлагаемая схема лечебно-профилактических мероприятий при данной патологии является перспективной для практической ветеринарной хирургии, так как ее внедрение позволяет снизить затраты и добиться благополучия стада по некробактериозу крупного рогатого скота.

Материалы диссертации используются в учебном процессе на кафедре хирургии Уральской государственной академия ветеринарной медицины, кафедре хирургии и акушерства Института ветеринарной медицины Алтайского ГАУ и ветеринарными специалистами сельскохозяйственных предприятий Челябинской области.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены: на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины и биологии» (г. Троицк, 2007), международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Вклад молодых ученых в реализацию приорететного национального проекта «Развитие агропромышленного комплекса» (г. Троицк, 2008) и на расширенном заседании кафедры акушерства и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины » (г. Троицк, 2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 работ, в том числе 1 в издании, рекомендованном ВАК.

На защиту выносятся следующие основные положения:

1. Динамика, клиническое проявление и особенности этиопатогенеза заболеваний копытец у коров голштино-фризской породы в зоне Южного Урала.

2. Влияние трансфер-фактора на иммунный статус голштино-фризских коров.

3. Комплекс лечебно-профилактических мероприятий при болезнях копытец у коров.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, предложения, список использованной литературы включает 250 работ, в том числе 49 зарубежных авторов и приложения. Диссертация иллюстрирована 7 рисунками и 15 таблицами.

2. Материал и методика исследовании В работе обобщены результаты научных исследований, проведенных автором с 2006 по2008г.г.в 000«Песчаное» Увельского района и СХПК им. Шевченко Чесменского района Челябинской области, а также в некоторых хозяйствах Курганской и Оренбургской областей.

Работа выполнена в соответствии с планом научных исследований кафедры хирургии Уральской государственной академии ветеринарной медицины по теме: «Разработка и внедрение современных методов диагностики, терапии и профилактики иммунодефицитных состояний, аутоиммунной патологии при некоторых хирургических и внутренних незаразных заболеваниях сельскохозяйственных животных в зоне Южного Урала» номер государственной регистрации 01.200.120201.

Характер исследований был следующим:

1. Выявление локализации и характера поражений копытец проведено у 134 голштино-фризских и 64 черно-пестрых больных коров. При этом учитывали общий клинический статус, местные признаки болезни, степень хромоты, характер и глубину патологических процессов уточняли оперативным методом. На основе полученных данных определяли нозологическую форму болезни.

2. Для определения характера микрофлоры при заболеваниях копытец у коров разных пород был взят материал от 52 больных животных разных хозяйств Челябинской, Курганской и Оренбургской областей.

3. С целью более глубокого изучения отдельных сторон этиопатогенеза заболеваний копытец у голштино-фризских коров (нетели после отёла) проведена сравнительная оценка иммунобиохимического статуса здоровых и больных коров (п=20), у которых для исследований была взята кровь.

* 4. При изучении йлияния трансфер-фактора на иммуннобиохимический статус здоровых коров в ООО «Песчаное» было сформировано 2 группы по 20 голов (1 месяц после отела). Пёрвая группа служила контролем, а коровам второй группы вводили трансфер-фактор 2-х кратно в дозе. 5 мл на, 100 кг

живой массы с интервалом 5 дней. Кровь для исследований брали до введения препарата дважды и в течение опыта трижды с интервалом 10 дней.

5. Для выяснения влияния трансфер-фактора на напряженность иммунитета при вакцинации коров против некробактериоза крупного рогатого скота было создано 2 группы коров. Коровы первой контрольной группы (п=20), подвергались вакцинации без предварительной стимуляции. Коровам второй опытной группы (п=20) за 7 дней до введения вакцины подкожно вводили трансфер-фактор в дозе 5 мл на 100 кг живой массы. В обеих группах коров использовали вакцину «Нековак» против некробактериоза крупного рогатого скота, производства ФГУП «Ставропольская биофабрика», ООО НПФ «Вентком-М», которая применялась согласно наставления.

6. При разработке схемы лечебно-профилактических мероприятий при некробактериозе крупного рогатого скота голштино-фризской породы в ООО «Песчаное» Увельского района Челябинской области было сформировано три группы животных - контрольная (п=20) и две опытные (п=80 и п=40 соответственно). На первоначальном этапе всему поголовью кроме контрольной группы (п=20) с целью санации организма животных вводили ципроклоксацин (с учетом чувствительности микрофлоры выделенной от больных животных) согласно наставления в течение 3-5 дней. После санации организма проводили стимуляцию иммунной системы у

- животных первой опытной группы (п=80), используя для этой цели трансфер-фактор. Через 7 су ток после введения иммуностимулятора провели вакцинацию коров опытной группы коров.

Вакцинацию животных второй опытной группы (п=40) проводили на фоне санации организма антибиотиком в течение 3-5 дней, но без применения иммуностимуляторов.

При проведении гематологических, биохимических и иммунобиохимических исследований на всех этапах использовались методики, принятые в ветеринарии и медицине.

Содержание эритроцитов и лейкоцитов в крови определяли методом подсчета в камере Горяева. Концентрацию гемоглобина устанавливали гемоглобинцианидным методом. Общий белок определяли методом рефрактометрии (И.П.Кондрахин и др., 1983) на рефрактометре типа «ЯЬ-2».

Аспариат- и аланин аминотрансферазы определяли методом колориметрии по Райтману и Френкелю с использованием стандартного набора «БИО-ЛА-ТЕСТ». Кальций - комплексонометрией с индикатором флуорексоном по Вичеву и Каракашеву. Фосфор - колориметрией по Белл-Дойзу. Содержание селена, меди, цинка, железа, марганца, кобальта, свинца, никеля и кадмия - методом атомно-адсорбционной спектрофотометрии на спектрофотометре фирмы Перкен-Эйлмер (Швеция) (ГОСТы 26929-94; 30178-96). Содержание средне-молекулярных пептидов (СМП) определяли по методу Н.И. Габриэлян и соавт. (1983).. Малоновый диальдегид (МДА) определяли модифицированным методом Э.Н. Коробейниковой (1989). Для определения глюкозы крови использовали

анализатор «Эксан-Г». Церулоплазмин определяли модифицированным C.B. Бестужевой и В.Г. Колб (1976) методом Ревина.

Количественное содержание отдельных популяций основных иммунокомпетентных клеток-лимфоцитов проводили методом Е-, ЕАС-розеткообразования по А.Н. Чередееву (1976). Активность лизоцима сыворотки крови определяли нефелометрическим методом, описанным В.Г. Дорофейчуком в 1968 г. Определение бактерицидной активности сыворотки проводили в отношении грам негативных бактерий — Е. coli фотонефелометрическим методом О.В. Смирновой и Т.В. Кузьминой (1966). .Определение активности комплемента в сыворотке крови проводили классическим методом гемолитического титрования комплемента по 50% гемолизу (JI.C. Резникова, 1967; Э. Кэбот, М. Майер, 1968). Определение концентрации циркулирующих иммунных комплексов проводили по методу В. Гашковой и соавт. (1978). Количественный анализ отдельных классов иммуноглобулинов (G и М) проводили методом радиальной иммунодиффузии по Г. Манчини с использованием моноспецифических сывороток против иммуноглобулинов крупного рогатого скота. С целью выявления функциональной активности иммунокомпетентных клеток применяли реакции торможения миграции лейкоцитов и бласттрансформации лимфоцитов по методу Д.К. Новикова(1987). Титр антител к F. necroforum определяли в реакции агглютинации (РА).

При проведении бактериологических исследований использовался биоматериал от нетелей и коров с болезнями конечностей хозяйств Челябинской, Курганской, Оренбургской областей. У выделенных культур микроорганизмов изучали культурально-морфологические, биохимические и патогенные свойства.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась общепринятым методом вариационной статистики. Достоверную вероятность (Р) находили с учетом числа имеющихся наблюдений по таблице Стьюдента. Различия считали статистически достоверными при Р<0,05.

3. Результаты исследований 3.1.3аболеваемость, локализация и характер поражений копытец у коров

различных пород

При анализе заболеваемости болезнями копытец в обследованных хозяйствах установлено, что заболевания копытец у коров в 2006-2007 годах регистрировались в пределах 23,3-83,7 % по отношению к общему поголовью. В ООО «Песчаное» из завезенных из Голландии коров в июле 2006 года в количестве 163 головы, болезни копытец начали проявляться с октября и к концу года с различными клиническими формами заболеваний копытец было выявлено 38 голов нетелей и коров, что уже составило 23,31% от общего поголовья животных.

В дальнейшем, несмотря на предпринимаемые меры по лечению больных животных и проведению профилактических мероприятий в течение 2007 года в той или иной форме переболели 134 коровы или 83,75%. Причем больше

половины животных 52,63 % (в 2006 г.) и 56,57 % (в 2007 г.) с различными клиническими признаками поражений копытец заболели сразу после отёла.

Несколько иная картина по заболеваемости копытец наблюдалась среди местного.черно-пестрого скота с СХПК им. Т. Шевченко Чесменского района Челябинской области. Следует отметить, что данное хозяйство уже длительное время (в течение 2000-2007 годов) является неблагополучным по заболеваниям копытец у крупного рогатого скота.

Проводимая нами и ветеринарными специалистами хозяйства ортопедическая диспансеризация в течение этих лет показала, что в 2006 году заболеваемость составила 30,40%, в 2007 году - 27,70%, то есть была примерно на одном уровне.

Сравнивая заболеваемость копытец после отёла у голштино-фризских и черно-пестрых коров можно отметить, что у импортного скота заболеваемость копытец в меньшей степени связана с отёлом - 52,63 и 56,57% против 81,15 и 76,56%, что 1,54-1,35 раза меньше. Это свидетельствует о том, что местный черно-пестрый скот более устойчивый к неблагоприятным факторам внешней среды и заболевает в большей степени после отёла.

Для выяснения более достоверной картины заболеваемости, локализации и характера развивающихся гнойно-некротических поражений копытец, в течение 2006-2007 года было обследовано 134 больных голштино-фризских коровы в ООО «Песчаное», т.е. практически все больные коровы, которые были выделены в 2006-2007 году. Из них у 97,76% были поражены тазовые конечности, причем только у 4,48% поражения имелись на обеих тазовых конечностях и 2,24 % поражения имелись на грудных конечностях.

В СХПК им. Т. Шевченко при обследовании 64 больных коров черно-пестрой породы поражения одной конечности отмечено у 92,18% и двух конечностей - у 7,82% животных. При этом поражения тазовых конечностей отмечены у 95,31%, а грудных - у 4,69%.

При изучении характера поражений копытец у'коров в ООО «Песчаное» установлено, что доминирующими заболеваниями копытец у голштино-фризских коров являлись дерматиты свода межпальцевой щели (41,07%), пододерматиты - 38,05%; гнойно-некротические язвы подошвенной поверхности копытец, составляли 14,17%; реже встречались флегмоны венчика - 2,98% и артриты копытцевого сустава - 3,73%.

Отличительной особенностью заболеваний дистального отрезка конечностей у голштино-фризского скота явилось то, что заболевание протекало в тяжелой форме и часто заканчивалось вынужденным убоем больных коров. При разделке туши обнаруживали некротические очаги, инфильтраты и кровоизлияния в области ягодичной, заднебедренной групп мышц и других участках тазовых конечностей.

При исследовании патматериала от больных коров и нетелей местного черно-пестрого скота из 3 хозяйств Челябинской области диагноз -некробактериоз по результатам биопробы установлен нами в 12 случаях из 21, что составило 57,14%.

Кроме того, наряду с бактерией некрофорум в 12 пробах выделены энтерококки (57,14%), в 8 пробах кишечная палочка (30,1%), в 9 пробах клостридия перфрингенс (42,85%) и 11 пробах стафилококки (52,38%).

Несколько иная картина наблюдалась при изучении видового состава микрофлоры при поражениях конечностей у импортного голштино-фризского. скота завезенного из Голландии и Германии в хозяйства Челябинской, Курганской и Оренбургской областей.

Так бактерия некрофорум была выделена в 27 исследованных пробах или в 100% случаев. Сопутствующая патогенная микрофлора находилась в ассоциации: энтерококки - 27 проб или в 100% случаев, синегнойная палочка — 27 проб (100% случаев), клостридиум перфрингенс - 11 проб (40,74%), стафилококки - 4 пробы (14,81%).

Высокая чувствительность выделенных культур установлена только к ципрофлоксацину, умеренная к гентамицину (в 50% случаев) и цефотоксину (20 %). К остальным антибиотикам культуры были слабо чувствительны или устойчивы.

3.2. Иммунобиохимический статус больных и здоровых коров голштино-фризской породы

В нашей работе для более глубокого изучения отдельных сторон этиопатогенеза заболеваний копытец, а также процессов адаптации у голштино-фризских коров, завезённых из Голландии проведена сравнительная оценка иммунобиохимического статуса здоровых и больных коров. С этой целью были сформированы 2 группы коров по 20 голов: здоровые и больные (1 месяц после отела). В группу больных были подобраны 20 коров по принципу приближенных аналогов с поражением копытец в виде пододерматитов, контролем служили 20 здоровых коров.

Полученные данные показали, что в группе больных коров общее содержание белка в сыворотке крови достоверно ниже чем у здоровых на 10,51 % (Р<0,05). Снижение его уровня идёт за счет снижения альбуминов на 11,98% (Р<0,05) и гаммаглобулинов - на 15,28% (Р<0,05).

При детальном изучении белкового обмена было выявлено достоверное увеличение у больных животных содержания средне-молекулярных пептидов (СМП) по сравнению со здоровыми на 42,38% (Р<0,05), их увеличение мы связываем с развитием эндогенной интоксикации.

Наряду с этим наблюдается снижение уровня церулоплазмина на 48,15% (Р<0,001) по сравнению со здоровыми, что усугубляет интоксикацию организма. Утывая инфекционную природу заболеваний копытец у голштино-фризских коров, это может привести к генерализации процесса, что и наблюдалось нами при вскрытии вынужденно убитых животных.

Сравнительный анализ показателей углеводного обмена показал, что при гнойно-некротических заболеваниях копытец у коров имеет место снижение уровня глюкозы на 34,75% (<0,05). На этом фоне начинает преобладать анаэробный процесс окисления (гликолиз), о чем говорит увеличение молочной кислоты в сыворотке крови больных по сравнению со здоровыми на 25,61%

(Р<0,01). Об этом же свидетельствует и повышенный в 2 раза коэффициент лактат/пируват у больных животных. Кроме того, пониженное (на 33,34%) содержание пировиноградной кислоты (ПВК), одновременно с высоким содержанием молочной кислоты у больных (больше, чем у здоровых на 25,61%), приводит к развитию ацидоза. Все это свидетельствует о развитии гипоксии у больных коров. Преимущественно анаэробный процесс окисления углеводов, , катаболический характер белкового обмена приводит к стимуляции липолиза и активации перекисного окисления липидов. Как компенсаторная реакция организма у больных животных дефицит энергетического обмена покрывается за счет липидов, поэтому их уровень в крови больных выше, чем у здоровых на 45,94% (<0,01).

Закономерным, на наш взгляд, является повышение на этом фоне содержания малонового диальдегида (МДА) - конечного продукта перекисного окисления липидов - в сыворотке крови больных коров на 44,3% (Р<0,001) по сравнению со здоровыми.

Установлен дисбаланс в системе минерального обмена, а именно: снижение содержания кальция на 50,96% (Р<0,01), фосфора - на 18,94% (Р<0,01), достоверное увеличение содержания меди на 23,0% (Р<0,01) и тенденция к повышению цинка на 11,12% (Р<0,1) и железа - на 10,0% (Р<0,1). Уровень магния, кобальта и марганца у больных и здоровых достоверно не отличается.

Изучая иммунный статус больных и клинически здоровых животных, следует отметить, что развитие патологии в копытцах у голштино-фризских коров идет на фоне иммунодефицита клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. При этом снижается общее количество лейкоцитов периферической крови на 42,75% (Р<0,01), Т- и В- популяций лимфоцитов на 25,02 и 22,11% (Р<0,05) на фоне значительного роста О-популяций лимфоцитов. Отмечается снижение секреции лизоцима у больных животных на 19,25% (Р<0,01) и системы комплемента - на 18,79% (Р<0,05), а также функциональной активности В-лимфоцитов, что подтверждается снижением секреции М и в на 24,78% (Р<0,01) и 20,45% (Р<0,01) соответственно. Развиваются иммунопатологические реакции с накоплением ЦИК в 1,59 раза.

Суммируя полученные результаты можно сделать вывод о том, что на фоне заболеваний копытец некробактериозной, этиологии, имеет место развитие эндогенной интоксикации организма коров, ацидоза, что является результатом нарушения метаболизма: углеводного, сопряженного с ним липидного, а вследствие этого белкового и минерального обменов, а также иммунодефицита клеточного и гуморального звеньев иммунной системы.

3.3. Влияние трансфер-фактора на иммунный статус здоровых коров голштино-фризской породы

Способы коррекции нарушений иммунной системы, выбор препарата, по мнению многих исследователей, должен определяться преимущественными изменениями в системе иммунного гомеостаза, обнаруживаемыми у больных животных. Этим критериям, на наш взгляд, отвечает трансфер-фактор, который получали по разработанной и

запатентованной на кафедре хирургии и терапии УГАВМ методике. Суть данного метода заключается в способе получения биологически активного препарата трансфер-фактора крупного рогатого скота, обеспечивающего адаптивный перенос иммунологической информации в другой организм. Трансфер-фактор крупного рогатого скота представляет собой слегка опалесцирующую жидкость светло-желтого или светло-коричневого цвета с незначительным осадком, легко разбивающимся при встряхивании, не содержит белок, содержит полипептиды и олигонуклеотиды, устойчив к повторному замораживанию и размораживанию, лиофилизации, устойчив к действию РНК-азы, ДНК-азы и трипсина.

В наших исследованиях для выяснения влияния трансфер-фактора на иммуннобиохимический статус здоровых коров в феврале-апреле 2007 г. в ООО «Песчаное» был проведен производственный опыт. С этой целью было сформировано 2 группы по 20 голов (1 месяц после отела). Первая группа служила контролем, а коровам второй группы вводили трансфер-фактор 2-х кратно в дозе 5 мл на 100 кг живой массы с интервалом 5 дней. Кровь для исследований брали до введения препарата дважды и в течение опыта триады с интервалом 10 дней.

В качестве фоновых показателей (показатель до опыта) использовали средние данные по обеим группам полученные в результате двукратных исследований до опыта.

У коров обоих групп проводили исследования иммунологического -статуса на наиболее информативные показатели.

В результате проведённых исследований установлено, что фоновые показатели, характеризующие состояние клеточного и гуморального звеньев иммунной системы находятся на нижней границе нормы или ещё ниже, что характеризует общее состояние организма коров как

иммуннодефицитное.

Как результат влияния трансфер-фактора на организм коров можно оценить положительные изменения в динамике показателей дыхательной функции крови животных на фоне введения препарата. В частности, к 20-му дню опыта наметилась тенденция к увеличению содержания гемоглобина в крови, уровень которого превысил контроль на 6,93% (Р<0,05), и составил в среднем, до 118,87±1,83 г/л против 110,64+2,48 г/л в крови коров контрольной группы .

Анализ лейкограммы на фоне применения трансфер-фактора выявил у коров опытной группы увеличение общего количества лейкоцитов за счет увеличения процента нейтрофилов на 20,51% (Р<0,05) и лимфоцитов - на 18,55% (Р<0,05). При повторном исследовании через 10 дней в контрольной группе существенных изменений изучаемых показателей не отмечено. В опытной группе на фоне введения трансфер-фактора, отмечена активизация клеточного звена иммунной системы коров.

Со стороны гуморального звена иммунной системы также отмечены определённые сдвиги в сторону повышения изучаемых показателей у коров опытной группы на фоне введения трансфер-фактора (табл. 1). ,

Таблица 1 - Оценка некоторых показателей гуморального звена иммунной системы организма коров на фоне применения трансфер-

Показатели Группы До опыта Дни наблюдений

10-й 20-й 30-й

ЦИК, ед. Контрольная 40,33 ± 1,48 41,84 ±1,32 40,24 ±1,83 41,84 ±2,54

Опытная 42,16 ± 1,23 56,68 ± 1,34** 57,24 ± 2,40** 49,12 ± 2,78*

Активность комплемента, ед. Контрольная 30,22 ± 1,18 29,64 ± 1,54 28,78 ± 1,88 29,64 ± 1,54

Опытная 31,42 ± 1,24 37,54 ± 1,38** 38,16 ± 1,42** 32,14 ± 1,72

Активность лизоцима, мкг/мл Контрольная 10,24 ± 1,10 11,58 + 1,22 11,20 ± 0,78 10,67 + 1,34

Опытная 11,18 ± 1,24 18,26 + 1,34** 15,34 ± 1,12* 14,10 + 1,28*

Бактерицидная активность, % Контрольная 35,16 ± 1,24 37,21 ±1,47 38,24 ±1,56 37,49 ±1,23

Опытная 36,84 ± 1,82 40,53 ± 1,97 41,16 ± 1,28 38,64 ± 1,84

да, г/л Контрольная 21,64 ±1,22 22,45 ± 1,23 21,62 ± 1,13 20,33 ± 1,38

Опытная 20,58 ±1,46 24,69 ±1,74 24,83 ±1,28* 26,57 ±1,44*

^М, г/л Контрольная 2,26 ± 0,08 2,14 ± 0,04 2,17 ± 0,04 2,12 ± 0,03

Опытная 2,10 ± 0,06 2,69 ± 0,06* 2,54 ± 0,08* 2,48 ± 0,04*

Примечание: достоверно при * - Р<0,05; ** - Р<0,01

Так, на фоне корригирующей терапии, в опытной группе через 10 дней опыта содержание ЦИК по сравнению с контролем повысилось на 26,19% (Р<0,01). Существенное повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов свидетельствует о повышении сенсибилизации организма здоровых

коров, еще не переболевших некробактериозом, и готовности иммунной системы реагировать на введение антигенов.

Следует отметить, что на фоне введения трансфер-фактора отмечены не только количественные сдвиги со стороны клеточного и гуморального звеньев иммунной системы, но и качественные изменения. Так, повышение уровня иммунноглобулинов М на 21,94% (Р<0,01) и иммуноглобулинов G на 16,65% (Р<0,05) у коров опытной группы по сравнению с фоном на 20,45% (Р<0,01) и 9,08% (Р<0,05) на 10-й день опыта, говорит о повышении функциональной активности B-лимфоцитов, ответственных за синтез специфических антител

Все вышеперечисленные факты изучения имунотпропных свойств трансфер-фактора бесспорно важны для изучения возможности стимуляции иммунного ответа при вакцинации животных против некробактериоза.

3.4. Использование трансфер-фактора для стимуляции иммунного ответа в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при некробактериозе крупного рогатого скота

При постановке опытов коровы первой контрольной группы (п=20), подвергались вакцинации без предварительной стимуляции. Коровам второй опытной группы (п=20) за 7 дней до введения вакцины подкожно вводили трансфер-фактор, в дозе 5 мл на 100 кг живой массы. В обеих группах коров использовали вакцину «Нековак» против некробактериоза крупного рогатого скота.

Для определения наличия сенсибилизации организма к F. necroforum использовали внутрикожное введение антигена (очищенную, убитую, культуру F. necro forum), который вводили через 14 дней после применения вакцины с последующим учетом реакции в виде увеличения толщины кожной складки, через 24, 48 и 72 часа. Параллельно определяли наличие сенсибилизации иммуннокомпетентных клеток в реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ), и титр антител к F. necroforum в реакции агглютинации (РА), используя этот же антиген.

В результате проведенных исследований установлено, что развитие аллергической реакции на внутрикожное введение антигена у обеих групп коров нарастало постепенно, достигнув максимальных значений через 48 часов после введения (табл. 2). Причём уже через 24 часа кожная реакция была более выражена у коров, которым вводили трансфер-фактор. Так, толщина кожной складки у коров опытной группы через 24 часа превышала показатель контрольной группы на 21,20 %, а через 48 часов эта разница увеличилась и составила 37,15 % (Р<0,01).

Таблица 2 - Результаты внутрикожной аллергической пробы с микробным антигеном ( X + 5х; п=20)

Группы коров Сроки наблюдений

Через 24 часа Через 48 часов Через 72 часа

Контрольная: увеличение толщины кожной складки, мм 3,22+0,25 3,52+0,23 3,60+0,28

Опытная: увеличение толщины кожной складки, мм 4,68+0,17 5,60+0,21 4,95±0,34

Р<0,05 Р<0,01 Р<0,05

Данный факт свидетельствует о том, что на фоне введения трансфер-фактора, развивается повышенная сенсибилизация организма коров к бактериальному антигену (Р. песгоАэгшп), что косвенным образом подтверждает предположение о возможном переносе иммунологической памяти от животных (больных или переболевших) некробактериозом, здоровым животным.

Подтверждением этого являются результаты динамики изменения РБТЛ и РА, проведённые через 14 и 30 дней после введения вакцины.

Сравнивая результаты РБТЛ у коров контрольной и опытной групп через 14 (время пика иммунного ответа) и 30 дней после вакцинации, можно отметить, что сенсибилизация лимфоцитов к микробному антигену у коров опытной группы выражена в большей степени, чем у коров контрольной группы и превышает показатель последней на 39,88 и 30,86 % (Р<0,01) соответственно. Средний титр антител (1о§2) у коров опытной группы через 14 дней превышал показатель коров контрольной на 41,73% (Р<0,01), а через 30 дней на 23,42% (Р<0,01).

Полученные результаты подтверждают, что применение трансфер-фактора стимулирует иммунный ответ у животных на введение вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота.

Учитывая наличие бактерионосительства и возможности использования вакцины для активной иммунизации здоровых и больных животных старше

одного года против некробактериоза конечностей с профилактической и терапевтической целью, нами была разработана схема лечебно-профилактических мероприятий при некробактериозе крупного рогатого скота голштино-фризской породы в ООО «Песчаное» Увельского района Челябинской области. При этом было сформировано три группы животных - контрольная (п=20) и две опытные (п=80 и п=40 соответственно). На первоначальном этапе всему поголовью, кроме контрольной группы (п=20), с целью санации организма животных, вводили ципрокфлоксацин согласно наставления в течении 3-5 дней. После санации организма проводили стимуляцию иммунной системы у животных первой опытной группы (п=80), используя для этой цели трансфер-фактор. Через 7 суток после введения иммуностимулятора, провели вакцинацию коров опытной группы коров, используя вакцину «Нековак» против некробактериоза крупного рогатого скота.

Вакцинацию животных второй опытной группы (п=40) проводили на фоне санации организма антибиотиком в течении 3-5 дней, но без применения иммуностимуляторов.

В результате клинических наблюдений в течении 6 месяцев было установлено, что в контрольной группе животных из 20 голов, на фоне проведенной вакцинации без предварительной санации организма животных антибиотиком и применения иммуностимуляторов, заболело 5 коров (25,0 %). В первой опытной группе, где применяли перед вакцинацией трансфер-фактор, из 80 голов заболело 5 (6,25 %), а во второй группе, где вакцинацию коров проводили только на фоне санации организма антибиотиком, из 40 голов заболело 11 или 27,5 %.

Таким образом, на основании анализа и обобщения полученного материала можно считать, что применение трансфер-фактора в комплексе лечебно-профилактических мероприятий повышает эффективность вакцинации крупного рогатого скота против некробактериоза.

Выводы

1. Результаты клинической диспансеризации и сравнительный анализ заболеваемости копытец у коров голштино-фризской породы, завезенных из Голландии (88,75%) и местного черно-пестрого скота (27,70%), свидетельствуют о крайне тяжелом течении адаптационного периода у импортного скота к суровым условиям Южного Урала.

2. Отличительной особенностью заболеваний дистального отрезка конечностей у голштино-фризского скота явилось то, что заболевание протекало в тяжелой форме и часто заканчивалось вынужденным убоем больных коров. При вынужденном убое при разделке туши обнаруживали некротические очаги, инфильтраты и кровоизлияния в области ягодичной и заднебедренной групп мышц, в четырёхглавом мускуле и других участках тазовых конечностей.

При исследовании патматериала от больных коров и нетелей бактерия некрофорум выделена в 27 исследованных пробах или в 100% случаев.

Сопутствующая патогенная микрофлора находилась в

ассоциации:, энтерококки - 27 проб или в 100% случаев, синегнойная палочка -27 проб (100% случаев), клостридиум перфрингенс - И проб, что составило 40,74%.

Высокая чувствительность выделенных культур установлена только к ципрофлоксацину.

3. При изучении биохимического статуса установлено, что у больных коров:

- общее содержание белка в сыворотке крови достоверно ниже, чем у

здоровых коров на 10,51% (Р<0,05);

- выявлено достоверное увеличение содержания средне-молекулярных пептидов (СМП) по сравнению со здоровыми коровами на 42,38% (Р<0,05);

- наблюдается снижение уровня церулоплазмина на 48,15% (Р<0,001) и глюкозы на 34,75% (<0,05);

- отмечается пониженное (на 33,34%) содержание пировиноградной кислоты, с высоким содержанием молочной кислоты, что приводит к развитию ацидоза и гипоксии.

- установлен дисбаланс в системе минерального обмена, а именно: снижение содержания кальция на 50,96% (Р<0,01), фосфора - на 18,94% (Р<0,01), достоверное увеличение содержания меди на 23,0% (Р<0,01) и тенденция к повышению цинка на 11,12% (Р<0,1) и железа - на 10,0% (Р<0,1).

4. Развитие патологии в копытцах у голштино-фризских коров идет на фоне иммунодефицита клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. При этом снижается общее количество лейкоцитов периферической крови на 42,75% (Р<0,01), Т- и В- популяций лимфоцитов на 25,02 и 22,11% (Р<0,05) на фоне значительного роста О-популяций лимфоцитов. Отмечается снижение секреции лизоцима у больных животных на 19,25% (Р<0,01) и системы комплемента - на 18,79% (Р<0,05), а также функциональной активности В-лимфоцитов, что подтверждается снижением секреции ^ М и I» С на 24,78% (Р<0,01) и 20,45% (Р<0,01) соответственно. Развиваются иммунопатологические реакции с накоплением циркулирующих иммунных комплексов.

5. При изучении влияния адаптивной терапии на состояние неспецифической резистентности, клеточного и гуморального звеньев иммунной системы установлено, что применение трансфер-фактора оказывает стимулирующий и иммуномодулирующий эффекты на иммунную систему организма коров. При двукратной инъекции препарата в дозе 5 мл на 100 кг живой массы с интервалом 5 дней происходит:

- нормализация количества Т- и В- лимфоцитов;

- повышение уровня иммуноглобулинов М на 21,94% (Р < 0,01) и иммуноглобулинов в на 16,65% (Р < 0,05);

- повышение уровня лизоцима и комплемента;

- повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов на 26,19% (Р < 0,01), что свидетельствует о повышении сенсибилизации организма здоровых коров и готовности иммунной системы реагировать на введение антигенов.

6. Применение трансфер-фактора в комплексе лечебно-

профилактических мероприятий повышает эффективность вакцинации крупного рогатого скота.

Заболеваемость некробактериозом в опытной группе коров составила 6,25%, против 25,0% в контрольной.

Практические предложения

1. В целях предупреждения заболеваемости копытец и преждевременной выбраковки импортного скота регулярно проводить клинический осмотр и ортопедическую диспансеризацию, исключая при этом инфекционную природу заболеваний дисталыюго отдела конечностей у коров.

2. В неблагополучных по некробактериозу хозяйствах в комплексе лечебно-профилактических мероприятий с целью стимуляции иммунного ответа при использовании вакцин, следует проводить санацию организма животных антибиотиком с учетом чуствительности выделенной микрофлоры с последующим двухкратным применением трансфер-фактора в дозе 5 мл на 100 кг живой массы с интервалом 5 дней.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

В РЕЦЕНЗИРУЕМЫХ ЖУРНАЛАХ, РЕКОМЕНДУЕМЫХ ВАК РОССИИ

1. Шепелева Т.А., Безин А.Н., Малов Д.В. Биоэлементный статус и заболеваемость болезней копытец у крупного рогатого скота отечественных и импортных пород в биогеохимических провинциях Южного Урала. Методы коррекции // Ветеринарный врач. - 2009. - № 4. - С. 54-56.

В НАУЧНЫХ ИЗДАНИЯХ

2. Гертман М.И., Молоканов В.А., Бунаков А.П., Малов Д.В. Характеристика микрофлоры при некробактериозе крупного рогатого скота // Актуальные вопросы ветеринарной медицины и биологии: материалы междунар. науч.-практ. конф. - Троицк: УГАВМ, 2007. - С. 20-23.

3. Молоканов В.А., Малов Д.В. Прогнозирование, диагностика и профилактические мероприятия при заболеваниях копытец у коров // Вестник ветеринарии. - 2007. - № 40-41. - С. 123-127.

4. Малов Д.В. Профилактика некробактериозных поражений копытец у коров // Вклад молодых ученых в реализацию приоритетного национального проекта «Развитие агропромышленного комплекса»: материалы XII междунар. науч.-практ. конф. - Троицк: УГАВМ, 2008. - С. 42-43.

5. Малов Д.В. Фармакокоррекция иммунодефицита у коров с помощью трансфер-фактора // Вклад молодых ученых в реализацию приоритетного национального проекта «Развитие агропромышленного комплекса»: материалы XII междунар. науч.-практ. конф. - Троицк: УГАВМ, 2008 - С. 43-46.

Малов Денис Валерьевич

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ МЕРОПРИЯТИЯ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ КОПЫТЕЦ У КОРОВ ГОЛШТИНО-ФРИЗСКОЙ ПОРОДЫ

16.00.05 - ветеринарная хирургия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Сдано в набор 17.11. 2009г. Подписано в печать12.11.2009г. Формат 60*84/16. Объем 1 печ. л. Тираж 100 экз. Заказ № 99. Гарнитура Times New Roman

Издательский центр УГАВМ, лицензия ЛР № 01252 от 31 октября 1997 г. 457100, г. Троицк, Челябинская обл., ул. Гагарина 13. Тел. (35163)2-64-75

Актуальность темы. В настоящее время Российское государство в рамках национального проекта «Развитие АПК» предприняло меры по ускорению развития отрасли животноводства, за которыми в регионах должна последовать целостная система мероприятий по развитию конкурентноспособ-ного отечественного молочного скотоводства.

В Уральский регион ежегодно поступают тысячи нетелей голштино-фризской породы, которые используются для повышения молочной продуктивности и улучшения генетического потенциала местного молочного скота. Вместе с тем хозяйства, планирующие повысить молочную продуктивность посредством приобретения молочного скота, должны помнить, что при этом необходимо импортировать технологию кормления и содержания. Велик риск ввоза в страну новых болезней и пороков (Ф.И.Фисихин, И. М.Дудин, Х.А.Амерханов и др., 2006).

Болезни дистального отдела конечностей сельскохозяйственных животных, в том числе и коров, в последние 30 лет являются наиболее актуальной проблемой животноводства, так как наносят значительный экономический ущерб хозяйствам за счет выбраковки большого количества больных животных (до 50%), причем самых высокопродуктивных. При этом заболеваемость копытец у коров в отдельных хозяйствах доходит до 50% от общего поголовья, в том числе и некробактериозом.

Анализ работ, посвященных этиологии, патогенезу, диагностике, профилактике и лечению болезней дистального отдела конечностей, показывает, что данная патология имеет большое распространение (В.Б. Борисевич, 1980, 1983, 1989; А.Ф. Бурденюк, 1968, 1976; Э.И. Веремей и соавт.,1987, 2003; П. Гринаф, Ф. Маккалум, А. Увер, 1976; В.В. Гимранов, 2002, 2003, 2005, 2006;

A.Н. Елисеев и соавт., 2004; А.В. Есютин, 1967; Г.С. Кузнецов, 1980; В.В. Калинихин, 1989, 1992; А.В. Лукьяновский, 1985, 1986, 1997, 1998, 1999;

B.А. Молоканов, 1985, 1988, 1991, 1998; Н.С. Островский, 1981; М.В. Плахотин, 1977, 1982; Б.С. Семенов, 1981; К.И. Шакалов, 1981; Н.П. Щербаков, 1994; М.Ш. Шакуров, 1996, 2000, 2001; U. Bargai, 1992; С. Bergsten, 1994, 1995, 1996, 1997; В. Clark, 1985; J.E. Nocek, 1997; С. Stanek, 1984, 1994, 1996; J.J. Vermunt, 1992 и многие другие).

В последние годы разработка мер профилактики и лечения заболеваний копытец у коров проводится в аспекте изучения инфекционных агентов (А.А. Сидорчук, С.Д. Панасюк ,2004), закономерностей структурной перестройки соединительной ткани (С.В. Тимофеев, В.В. Гимранов/2008), патохимии, иммунологии и иммунопатологии данного заболевания, а также применения иммуностимуляторов и иммуномодуляторов (М.Т. Байкенов, 2001; Н.О. Ва-лёв и соавт., 1997; А.В. Кадочников, 2003; В.В. Колоденская, 1999; В.А. Молоканов и соавт., 1990, 1998; М.Ш. Шакуров, О.И. Шоркина, 1996; Ю.Л. Якубовская, 1991 и другие).

Некробактериоз, как классическая инфекционная болезнь, в последние десятилетия сильно эволюционировала в болезнь крупного рогатого скота в основном в копытной форме и по заболеваемости у этих животных выходит на одно из первых мест (А.А. Сидорчук, С.Д. Панасюк, 2004). В настоящее время в РФ официально зарегистрировано три вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота, опыт применения которых показал их слабую профилактическую эффективность, особенно в хозяйствах с длительным периодом неблагополучия по заболеванию. Поэтому изыскание высокоэффективных и технологичных в применении средств для профилактики и лечения заболеваний копытец у коров применительно к зональным условиям имеет большое актуальное значение.

Целью исследования явилось изучение особенностей заболеваний копытец у коров голштино-фризской породы, проявления иммунопатологических реакций, влияние трансфер-фактора на иммунный статус животного, разработка методов лечения и профилактики заболеваний копытец у коров.

Задачи исследований:

1. Изучить заболеваемость, частоту и характер поражений копытец у коров голштино-фризской породы в зоне Южного Урала.

2. Изучить особенности имуннобиохимического статуса больных животных.

3. Определить имуннотропные свойства трансфер-фактора, иммуногенные свойства вакцины против некробактериоза животных в сочетании с трансфер-фактором.

4. На основе полученных данных разработать рекомендации по диагностике, организации и проведению комплекса лечебно-профилактических мероприятий при болезнях копытец у коров голштино-фризской породы.

Научная новизна. Проведено комплексное изучение состояния клинико-иммунобиохимического статуса при заболеваниях копытец у коров различных пород в сравнительном аспекте в зоне Южного Урала. Исследован механизм иммунопатологических реакций при заболеваниях копытец у коров. При этом установлено, что при заболеваниях копытец у коров голштино-фризской породы имеет место развития эндогенной интоксикации в результате нарушения углеводного, липидного, белкового и минерального обменов, а также иммунодефицита клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. Доказаны иммуностимулирующие свойства трансфер-фактора, что дало возможность предложить оригинальный метод лечения и профилактики заболеваний копытец у коров. Разработан комплекс лечебных и профилактических мер с использованием вакцины против некробактериоза животных в сочетании с трансфер-фактором.

Теоретическое и практическое значение работы. В работе представлены результаты ортопедической диспансеризации коров различных пород, изучены особенности этиопатогенеза заболеваний копытец и имуннобиохимического статуса у больных коров голштино-фризской породы в зоне Южмического статуса у больных коров голштино-фризской породы в зоне Южного Урала. На основании результатов собственных исследований дано патогенетическое обоснование применения трансфер-фактора с целью стимуляции иммунного ответа в комплексе лечебно-профилактических мероприятий при некробактериозе крупного рогатого скота. Предлагаемая схема лечебно-профилактических мероприятий при данной патологии является перспективной для практической ветеринарной хирургии, так как ее внедрение позволяет снизить затраты и добиться благополучия стада по некробактериозу крупного рогатого скота.

Материалы диссертации используются в учебном процессе на кафедре хирургии Уральской государственной академия ветеринарной медицины, кафедре хирургии и акушерства Института ветеринарной медицины Алтайского ГАУ и ветеринарными специалистами сельскохозяйственных предприятий Челябинской области.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены: на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины и биологии» (г. Троицк, 2007), международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Вклад молодых ученых в реализацию приорететного национального проекта «Развитие агропромышленного комплекса» (г. Троицк, 2008) и на расширенном заседании кафедры акушерства и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Уральская государственная академия ветеринарной медицины » (г. Троицу2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 работ, в том числе 1 в издании, рекомендованном ВАК.

На защиту выносятся следующие основные положения: 1. Динамика, клиническое проявление и особенности этиопатогенеза заболеваний копытец у коров голштино-фризской породы в зоне Южного Урала.

2. Влияние трансфер-фактора на иммунный статус голштино-фризских коров.

3. Комплекс лечебно-профилактических мероприятий при болезнях копытец у коров.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, предложения, список использованной литературы включает 250 работ, в том числе 49 зарубежных авторов и приложения. Диссертация иллюстрирована 7 рисунками и 15 таблицами.

Выводы

1. Результаты клинической диспансеризации и сравнительный анализ заболеваемости копытец у коров голштино-фризской породы, завезенных из Голландии (88,75%) и местного черно-пестрого скота (27,70%), свидетельствуют о крайне тяжелом течении адаптационного периода у импортного скота к суровым условиям Южного Урала.

2. Отличительной особенностью заболеваний дистального отрезка конечностей у голштино-фризского скота явилось то, что заболевание протекало в тяжелой форме и часто заканчивалось вынужденным убоем больных коров. При вынужденном убое при разделке туши обнаруживали некротические очаги, инфильтраты и кровоизлияния в области ягодичной и заднебедренной групп мышц, в четырёхглавом мускуле и других участках тазовых конечностей.

При исследовании патматериала от больных коров и нетелей бактерия некрофорум выделена в 27 исследованных пробах или в 100% случаев. Сопутствующая патогенная микрофлора находилась в ассоциации: энтерококки — 27 проб или в 100% случаев, синегнойная палочка — 27 проб (100% случаев), клостридиум перфрингенс - 11 проб, что составило 40,74%).

Высокая чувствительность выделенных культур установлена только к це-профлоксацину.

3. При изучении биохимического статуса установлено, что у больных коров:

- общее содержание белка в сыворотке крови достоверно ниже, чем у здоровых коров на 10,51% (Р<0,05);

- выявлено достоверное увеличение содержания средне-молекулярных пептидов (СМП) по сравнению со здоровыми коровами на 42,38% (Р<0,05);

- наблюдается снижение уровня церулоплазмина на 48,15% (Р<0,001) и глюкозы на 34,75% (<0,05);

- отмечается пониженное (на 33,34%) содержание пировиноградной кислоты, с высоким содержанием молочной кислоты, что приводит к развитию ацидоза

И гипоксии.

- установлен дисбаланс в системе минерального обмена, а именно: снижение содержания кальция на 50,96% (Р<0,01), фосфора - на 18,94% (Р<0,01), достоверное увеличение содержания меди на 23,0% (Р<0,01) и тенденция к повышению цинка на 11,12% (РОД) и железа - на 10,0% (РОД).

4. Развитие патологии в копытцах у голштино-фризских коров идет на фоне иммунодефицита клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. При этом снижается общее количество лейкоцитов периферической крови на 42,75%) (Р0,01), Т- и В- популяций лимфоцитов на 25,02 и 22,11% (Р0,05) на фоне значительного роста О-популяций лимфоцитов. Отмечается снижение секреции лизоцима у больных животных на 19,25%) (Р<0,01) и системы комплемента — на 18,79%) (Р<0,05), а также функциональной активности В-лимфоцитов, что подтверждается снижением секреции Ig М и Ig G на 24,78% (Р0,01) и 20,45% (Р0,01) соответственно. Развиваются иммунопатологические реакции с накоплением циркулирующих иммунных комплексов.

5. При изучении влияния адаптивной терапии на состояние неспецифической резистентности, клеточного и гуморального звеньев иммунной системы установлено, что применение трансфер-фактора оказывает стимулирующий и иммуномодулирующий эффекты на иммунную систему организма коров. При двукратной инъекции препарата в дозе 5 мл на 100 кг живой массы с интервалом 5 дней происходит:

- нормализация количества Т- и В- лимфоцитов;

- повышение уровня иммуноглобулинов М на 21,94%) (Р < 0,01) и иммуноглобулинов G на 16,65% (Р < 0,05);

-повышение уровня лизоцима и комплемента;

- повышение уровня циркулирующих иммунных комплексов на 26,19% (Р < 0,01), что свидетельствует о повышении сенсибилизации организма здоровых коров и готовности иммунной системы реагировать на введение антигенов.

6. Применение трансфер-фактора в комплексе лечебно-профилактических мероприятий повышает эффективность вакцинации крупного рогатого скота.

Заболеваемость некробактериозом в опытной группе коров составила 6,25%, против 25,0% в контрольной.

Практические предложения

1. В целях предупрждения заболеваемости копытец и преждевременной выбраковки импортного скота регулярно проводить клинический осмотр и ортопедическую диспансеризацию, исключая при этом инфекционную природу заболеваний дистального отдела конечностей у коров.

2. В неблагополучных по некробактериозу хозяйствах в комплексе лечебно-профилактических мероприятий с целью стимуляции иммунного ответа при использовании вакцин, следует проводить санацию организма животных антибиотиком с учетом чуствительности выделенной микрофлоры с последующим двухкратным применением трансфер-фактора в дозе 5 мл на 100 кг живой массы с интервалом 5 дней.