Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Коррекция лекарственных поражений печени у собак антиоксидантами растительного происхождения

На правах рукописи

СУЛАЙМАНОВА ГУЛЬНАРА ВЛАДИМИРОВНА

Коррекция лекарственных поражений печени у собак антиоксидантами растительного происхождения

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных 16.00.01 - диагностика и терапия животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Барнаул - 2005

Работа выполнена на кафедрах анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных и внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет».

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук

Донкова Наталья Владимировна

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор

Эленшлегер Андрей Андреевич

кандидат ветеринарных наук

Смирнова Валентина Васильевна

Ведущая организация - Иркутская государственная сельскохозяйственная академия

Защита состоится 28 сентября 2005 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 220.002.02 в Алтайском государственном аграрном университете по адресу:

656922, г. Барнаул, ул. Попова, 276, т/факс (3852) 31-30-48.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института ветеринарной медицины Алтайского государственного аграрного университета.

Автореферат разослан «¿5 » 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета_ /-> $

доктор ветеринарных наук, профессор ^ // / Барышников П.И.

IG ПО

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В последние годы возросла актуальность проблемы лекарственных поражений печени у животных в связи с широким применением в ветеринарии разнообразных лекарственных препаратов. Большинство из них для животного организма являются чужеродными, то есть ксенобиотиками, поэтому их применение в первую очередь вызывает повреждение печени - органа, выполняющего роль биологического фильтра на пути поступления экзогенных токсикантов в системный кровоток организма (Байматов В.Н., Волкова Е.С., Багаутдинов A.M., 2001; Соколов В.Д. и др., 2002; Буеверов А.О., 2002; Донкова Н.В., 2004). Спектр лекарственных препаратов, вызывающих поражения печени, насчитывает более 1000 наименований (Змушко Е.И., Белозеров Е.С., 2001). Выраженным гепатотоксическим действием обладают макроциклические лактоны -препараты нового поколения эндо- и эктоцидов биологического происхождения, к которым относится ивомек (Старченков C.B., 2001; Жуленко В.Н., Таланов Г.А., 2002). Однако в настоящее время отсутствуют четкие представления о механизме гепатотоксического действия макроциклических лактонов и характере морфофункциональных изменений, что имеет принципиальное значение в научном поиске и подборе препаратов для их коррекции.

Известно, что в основе патогенеза большинства лекарственных поражений печени лежат процессы активации свободно-радикального окисления, что вызывает дестабилизацию и деструкцию субклеточных мембран гепатоцитов, нарушение метаболизма с развитием ферментемии и цитотоксических эффектов (Ажунова Т.А., 1998). Поэтому для защиты печени от токсического действия ксенобиотиков, восстановления и нормализации ее функции используют гепатопротекторные средства, обладающие антиоксидантными свойствами и улучшающие обменные процессы в гепатоцитах. В современной медицине с этой целью применяют антиоксиданты растительного происхождения: препараты солянки холмовой и расторошли пятнистой, которые благодаря гармоничному сочетанию биологически активных веществ способны ингибировать перекисное окисление липидов, стабилизировать структуру и улучшать функцию мембран гепатоцитов (Саратиков A.C., Венгеровский А.И., 2000; Куркин В.А., 2003; Altoriay J. et al., 1992). Вместе с тем сведения о механизме лекарственных поражений печени у собак, в том числе при применении макроциклических лактонов и коррекции развивающихся морфофункциональных изменений антиоксидантами растительного происхождения в литературе отсутствуют.

Цель и задачи исследований. Основная цель представленной работы заключалась в изучении влияния антиоксид антов растительного происхождение (солянки холмовой, растороппш TtRTO.rTffft;ffù B9ffli лекарственные и спонтанные поражения печени у сс 5ак. БИБЛИОТЕКА I

TVlRJPTOfliiPonWiewrà ,на

БИБЛИОТЕКА { СПтИиРг //ff ОЭ Уф иаОО \

Были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние препаратов солянки холмовой и расторопши пятнистой на морфофункциональное состояние печени у собак при экспериментальном токсическом гепатите, вызванном четыреххлористым углеродом.

2. Изучить морфобиохимические показатели крови и гистоструктуру печени при применении препарата из группы макроциютнческих лактонов -ивомека у собак.

3. Исследовать гепатопротекторное действие экстракта солянки холмовой и гепалива на фоне применения ивомека у собак.

4. Изучить влияние антиоксидантов растительного происхождения (препаратов солянки холмовой и расторопши пятнистой) на морфофункциональное состояние печени у собак при спонтанном гепатозе.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование по изучению гепатозащитного действия препаратов растительного происхождения (солянки холмовой, растороптпи пятнистой и гепалива) при экспериментальном (вызванным четыреххлористым углеродом) и лекарственном (вызванным ивомеком) поражении печени у собак.

Получены новые данные о механизме гепатотоксического действия ивомека у собак. Установлено, что применение препарата повышает активность щелочной фосфатазы и уровень билирубина и приводит к развитию холестаза.

Выявлена специфика морфофункциональных изменений в печени у собак под воздействием четыреххлористого углерода и ивомека.

Показано выраженное гепатопротекторное действие при гепатозе у собак растительных антиоксидантов - экстракта солянки холмовой и карсила.

Практическая значимость. Данная работа является фрагментом темы «Структурно-функциональные основы гомеостаза сельскохозяйственных животных при экстремальных состояниях» основных научных исследований факультета ветеринарной медицины Красноярского государственного аграрного университета.

Практическое значение работы состоит в использовании научно-практических рекомендаций: «Коррекция лекарственных гепатопатий у плотоядных растительными препаратами», утвержденных НТО КрасГАУ от 12 июля 2005г. (протокол № 9) в работе ГУ «Городская станция по борьбе с болезнями животных» г. Красноярска, УНЦВМ «Вита» КрасГАУ и в ^Ветеринарных клиниках: «Красветмедика», «Синто-Красноярск», «Багира» при лечении лекарственных и спонтанных поражений печени у собак.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе па кафедрах: «Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных» и «Анатомия и физиология сельскохозяйственных животных»

Красноярского государственного аграрного университета.

, ( * , 1 • .......

■ /О'-*":* " !

4 *

Основные положения, выносимые па защиту:

1. Антиоксидантные и гепатопротекторные свойства растительных препаратов (экстракта солянки холмовой и масла расторопши пятнистой) при экспериментальном токсическом гепатите у собак, вызванном четыреххлористым углеродом.

2. Сравнительный анализ терапевтической эффективности применения антиоксидантов растительного происхождения (экстракта солянки холмовой и масла расторопши пятнистой) при экспериментальном токсическом гепатите у собак.

3. Механизм гепатотоксического действия и морфофункциональные изменения печени у собак при применении ивомека - препарата из группы макроциклических лактонов.

4. Коррекция препаратами растительного происхождения (экстрактом солянки холмовой и гепаливом) лекарственного поражения печени у собак, вызванного ивомеком.

5. Фармакотерапевтическая эффективность экстракта солянки холмовой и карсила при спонтанном геиатозе собак.

Апробация работы. Основные материалы исследований доложены и получили одобрение на заседании Красноярского отделения Всероссийского общества физиологов им. И.П. Павлова (Красноярск, 2002); XI Международном симпозиуме «Гомеостаз и экстремальные состояния организма» (Красноярск, 2003); Всероссийской научной конференции «Аграрная паука па рубеже веков» (Красноярск, 2004); Международном съезде терапевтов, диагностов «Актуальные проблемы патологии животных» (Барнаул, 2005); Всероссийской конференции молодых ученых «Современные тенденции развития АПК» (Красноярск, 2005); Международной научно-практической конференции «Вузовская наука - сельскому хозяйству» (Барнаул, 2005) и ежегодных научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава Красноярского государственного аграрного университета (2000-2005гг.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано шесть печатных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 129 страницах компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Список литературы включает 258 наименований, из них 90 зарубежных источников. Материалы диссергации иллюстрированы 25 рисунками и 9 таблицами.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования и обработка экспериментального материала проведены на базе учебно-научного центра ветеринарной медицины (УНЦВМ) «Вита» и на кафедрах: «Анатомия и физиология сельскохозяйственных животных» и «Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных» Красноярского государственного аграрного университета в период с 2000 по 2005 г. Экспериментальная работа выполнена на собаках, клинически здоровых и больных гепатозом.

Экспериментальные животные и схема опытов. В первой серии опытов было сформировано четыре группы клинически здоровых собак четырехмесячного возраста, живой массой 6-8 кг, по пять голов в каждой. Животных содержали в индивидуальных клетках на стандартном рационе. Первая группа - интактный контроль; вторая группа - экспериментальный токсический i епахит (ЭТТ), вызванный внутрижелудочным введением 50%-го масляного раствора ССЦ в дозе 1 мл/кг пятикратно через сутки; третья группа -ЭТГ + 5% водный раствор экстракта солянки холмовой (ЭСХ) в дозе 2 мл/кг; четвертая группа - ЭТГ + масло расторопши пятнистой (МРП) в дозе 0,2 мл/кг. ЭСХ и МРП вводили с первого дня затравки перорально три раза в день в течение 30-ти дней. Интервал между введением лекарственных ксенобиотиков и гепатопротекторов составлял 1,5-2 часа - время, необходимое для полного всасывания лекарственных препаратов из кишечника. На пятые, 10-е, 20-е и 30-е сутки опыта у собак исследовали морфобиохимические показатели 1фови; на 10-е и 30-е сутки - проводили биопсию печени.

Вторая серия опытов была проведена на клинически здоровых собаках породы немецкая овчарка пяти-, шестилетнего возраста, живой массой 45-50 кг, по пять голов в группе. Первая группа — интактный контроль; вторая группа -ивомек (1% раствор ивермектина в глицериноформальдегидной среде) подкожно в дозе 0,4 мг/кг двукратно с интервалом 14 дней; третья группа -ивомек+5% водный раствор экстракта солянки холмовой в дозе 2 мл/кг; четвертая группа - ивомек+гепалив в дозе 10 мг/кг. ЭСХ и гепалив вводили с первого дня применения ивомека перорально три раза в день в течение 30-ти дней. Собаки контрольных групп получали в эквиобъемных количествах физиологический раствор. На 15-е и 30-е сутки у собак исследовали морфобиохимические показатели крови.

- Третья серия опытов была проведена на 20-ти собаках, больных

гепатозом, поступающих в УНЦВМ «Вита». В качестве гепатопротекторов первой группе собак применяли 5% водный раствор экстракта солянки холмовой в дозе 2 мл/кг, второй группе - карсил внутрь в дозе 10 мг/кг. Препараты применяли три раза в день в течение 30-ти дней. На протяжении всего опыта проводили клиническое наблюдение за общим состоянием, с ежедневным измерением температуры, пульса и дыхания. На 15-е и 30-е сутки

исследовали морфобиохимические показатели крови; биопсию печени проводили до лечения и на 30-е сутки.

Методика оценки морфофунщионального состояния печени. Для оценки морфофункционального состояния печени собак в ходе экспериментальных исследований были проведены:

- оценка состояния свободно-радикальных процессов в организме по уровню малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови по методике Л.И. Андреевой и соавт. (1988);

- определение в сыворотке крови активности органоспецифических маркеров цитолиза гепатоцитов - аланинаминотранферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (ACT); щелочной фосфатазы (ЩФ), общего белка, белковых фракций, глюкозы, мочевины, общего билирубина и показателей тимоловой пробы. Активность АЛТ и ACT в сыворотке крови определяли методом Райманда-Френкеля; ЩФ - методом «конечной точки»; содержание общего белка в сыворотке крови - биуретовой реакцией; белковые фракции сыворотки крови - нефелометрическим методом; уровень глюкозы -глюкозооксидазным методом; мочевины - ферментативным методом; общий билирубин - методом Йендрашека; тимоловую пробу - методом Лахема;

- определение общетоксического действия химиопрепаратов: по количеству лейкоцитов, эритроцитов в крови и уровню гемоглобина. Количество эритроцитов и лейкоцитов подсчитывали в счетных камерах Горяева; уровень гемоглобина определяли гемоглобинцианидным методом;

- ультрасонографическое исследование печени у собак проведено на приборе «Elmascan-911» с применением высокочастотного трансдукгора;

- биопсию правой доли печени у собак проводили с помощью режущей иглы (для биопсии печени и щитовидной железы);

- для гистологического анализа биопсийного материала печени биоптаты фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, заливали в парафин и изготавливали срезы толщиной 5-7 мкм. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином и по методу ван-Гизон и просматривали под микроскопом МБИ-15.

Полученные цифровые данные обработаны методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента (Лакин Г.Ф., 1990) с помощью компьютерной программы BIOSTAT.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Влияние экстракта солянки холмовой и масла расторопши пятнистой на морфофункциональное состояние печени собак с экспериментальным токсическим гепатитом, вызванным четыреххлористым углеродом

Перекисное окисление липидов и активность аминотрансфераз. Введение собакам ССЦ индуцировало перекисное окисление липидов (ПОЛ), о чем свидетельствовало увеличение количества МДА в сыворотке крови: на пятые сутки опыта - на 48,2%; на 10-е сутки - на 92,6% по сравнению с

показателями интактной группы (табл. 1). С интенсификацией процессов ПОЛ нарастал синдром цитолиза гепатоцитов, о чем свидетельствует повышение уровня аминотрансфераз в сыворотке крови собак: активность ЛЛТ на пятые сутки опыта возрастала в 3,7 раза, а на 10-е сутки - в 9,2 раза; активность ACT увеличивалась в 3,8 и 6,3 раза соответственно.

Экстракт солянки холмовой и масло расторопши пятнистой при ЭТГ у собак, вызванном CCU, снижали активность процессов перекисного окисления липидов, что выражалось в уменьшении количества МДА в сыворотке крови, и обеспечивали стабилизацию клеточных мембран гепатоцитов, что проявлялось снижением активности аминотрансфераз. На пятые сутки эксперимента у собак с ЭТГ, получавших экстракт солянки холмовой, уменьшалась концентрация МДА в сыворотке крови на 14,3%; на этом фоне наблюдалось уменьшение цитолитического синдрома: активность ACT снижалась на 25,9%. А при применении масла расторопши пятнистой достоверное снижение этих показателей отмечалось с 10-го дня эксперимента. В последующие сроки наблюдения положительная динамика от применения данных препаратов нарастала. Более выраженным антиоксидаптным и мембраностабилизирующим действием при ЭТГ у собак, вызванном CCI4, обладает экстракт солянки холмовой, но сравнению с маслом расторопши пятнистой.

Белок и белковые фракции. При экспериментальном токсическом гепатите собак, вызванном СС14, нарушалась синтетическая функция печени, что проявлялось снижением уровня общего белка, преимущественно за счет альбуминов и а-глобулинов.

Применение растительных препаратов ограничивало изменения белковой картины крови, возникающие в результате действия CCU (табл. 1). Под влиянием экстракта солянки холмовой в сыворотке крови собак с ЭТГ на 10-е сутки опыта уровень общего белка становился выше на 13,6%, приближаясь к значениям интактной группы, что происходило в основном за счет альбуминов и а-глобулинов, концентрация которых на 10-е сутки увеличилась на 33,9 и 44,9% соответственно. На этом фоне уровень у-глобулиновой фракции белка снизился в 1,3 раза. Применение масла расторопши пятнистой собакам с ЭТГ приводило к достоверному повышению уровня альбуминов на 10-е сутки на 16,6% и а-глобулинов на 36,8%.

Мочевина и билирубин. Под действием СС14 у собак нарушаются мочевинообразовательная функция печени и пигментный обмен, что проявляется снижением в сыворотке крови уровня мочевины и повышением концентрации билирубина. Экстракт солянки холмовой и масло расторопши пятнистой сдерживали понижение концентрации мочевины и препятствовали избыточному образованию билирубина у собак с ЭТГ (табл. 1). Этот эффект проявился уже на пятые сутки эксперимента и сохранялся весь период наблюдения.

Таблица 1 Влияние экстракта солянки холмовой я масла расторошпи пятнистой на биохимические показатели крови собак с ЭТТ

N2 Условия опыта МДА. мкмоль/л АЛТ, ммоль/(ч-л) АСТ, ммоль/(ч-л) Общий белок, г/л Билирубин, мкмоль/л Мочевина, мкмоль/л

5-е сутки

1 Интактные 4,44±0,12 0,79±0,07 0,45±0,03 54,0*0,79 10,4*0,27 5,22±0,04

2 ЭТГ 6,58±0Д2"" 2,91±0,2Г" 1,70±0,13"' 50,6*0,57* 12,6*0,45" 4,68±ОДО"

3 этг+эсх 5,64±0,23" 2,63±0,40 1,26+0,09' 53,2*2,51 11,5*0,27 4,98±0,07*

4 Э7Т+ МРИ 5,90±0,18 2,43±0,30 1,40±0,02 51,0+2,03 11,8+0,13 4,98±0,07*

10-е сутки

1 Инчакпше 4,53±0,12 0,79±0,07 0,45±0,03 54,0± 1,06 10,4*0,22 5Д2±0,02

2 Э1Т 8,55±0Д5*"* 7,25±0,43'" 2,83±0Д5"* 47,2*2,10" 14,6*0,41'" 4,50±0,24* •

3 ЭТГ+ЭСХ 6,24±0,19*" 5,03±0,84* 1,79+0,08"* 53,6*2,05" 12,2*0,45" 5,8±0,27**

4 ЭТГ+ МРП 6,67±0Д2""" 5,35±0,61* 1,89±0Д2" 49,6*2,86 13,4*0,02' 5,12±0ДЗ

20-е супш

1 Интактные 4,61±0Д8 0,79±0,06 0,45±0,03 54,2*1,08 10,4*0,23 5,20±0,04

2 ЭТГ 6,24±0,24"" 3,72±0,52'" 1,28±0,27* 48,0*1,00" 12,6*0,24"" 4,40±0,20*

3 этг+эсх 5Д2±0,10" 1,68±0,24" 1,05±0ДЗ 54,2*2,05* 11,8*0,21" 5,0010,47"

4 ЭТГ+ МРП 5,47±0,18* 2,18±0,52 1,06±0,04 51,2*2,97 11,2*0,25" 4,50±0,05

30-е сутки

1 Интактные 4,61±0,10 0,79±0,07 0,45+0,05 55,0*0,50 10,4*0,27 5,20±0,04

2 ЭТГ 5,73±0,24" 1,12±0Д9 0,79±0,13* 49,2+0,42'" 10,6+0,45 2,30±0,04*"

3 этг+эсх 4,70±0Д5**' 0,73±0,14 0,52±0,05 54,6*2,05' 10,2*0,45 3,30±0,27"

4 ЭТГ+ МРП 5,00±0,12* 0,98±0Дб 0,71±0,10 51,0+2,03 10,4*0,45 4,76±0,03*"

Примечание- достоверность отличий второй группы по сравнению с первой; третьей и четвертой - по сравнению со второй : *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001. ЭТГ - экспериментальный токсический гепатит, ЭСХ - экстракт солянки холмовой. МПР масло расторошпи пятнистой.

Эритроциты, лейкоциты, гемоглобин. Воздействие СС14 приводило к снижению количества эритроцитов и концентрации гемоглобина крови собак, увеличению количества лейкоцитов. На пятые сутки эксперимента уменьшалось количество эритроцитов с 5,32±0,12 -1012/л до 3,68±0,06 -1012/л, то есть на 30,8% (Р<0,001); на 10-е сутки - с 5,30±0,08-1012/л до 3,21±0,08-1012/л, то есть на 39,4% (Р<0,001) по сравнению с показателями интактной группы. Концентрация гемоглобина была достоверно ниже на протяжении всего эксперимента в среднем на 14,0-26,3%. Количество лейкоцитов возрастало на 10-е сутки опыта с 10,42±0,20-10% до 16,28±0,87-10%, то есть в 1,6 раза (Р<0,001); на 20-е сутки - с 10,49±0,22-109/л до 12,78-109/л, то есть на 21,8%

(Р<0,05) соответственно. Применение ЭСХ достоверно повышало уровень гемоглобина с крови собак с ЭТГ на протяжении всего опыта; при использовании МРП достоверное повьппение этого показателя отмечалось только на 30-е сутки опыта. Применение экстракта солянки холмовой предотвращало развитие лейкоцитоза у собак с ЭТГ, а использование масла расторопши пятнистой уровень лейкоцитов не снижало.

Гистологический анализ биоптатов печени В биоптатах печени собак после затравки CCI4 на 10-е сутки выявлялись признаки гидропической дистрофии гепатоцитов. Последние часто имели гигантские размеры, прозрачную вакуолиз1фованную цитоплазму и пикнотические гиперхромные ядра. Признаки жировой дистрофии гепатоцитов были выражены в разной степени от мелкокапельного ожирения до диффузного вовлечения цитоплазмы печеночных клеток. Микроскопически выявлялись уницеллюлярные и фокальные некрозы, чаще в центролобулярной зоне печеночнных долек. Отмечали полнокровие центральных отделов долек и умеренно выраженную инфильтрацию портальных зон полиморфноядерными лейкоцитами, макрофагами, лимфоцитами.

К 30-м суткам наблюдения в биоптатах печени собак с ЭТГ выявляли гидропическую дистрофию гепатоцитов, их очаговое крупнокапельное ожирение, очаги некроза со скоплением полиморфноядерных лейкоцитов, лимфоцитов и макрофагов. Определялись склеротические изменепия перипортальной стромы.

При микроскопическом исследовании препаратов печени собак третьей группы, защищенных от токсического действия CCI4 экстрактом солянки холмовой, признаки гидропической и жировой дистрофии гепатоцитов были менее выражены, количество некротизированных гепатоцитов значительно уменьшилось, а также исчезали признаки лимфоцитарно-макрофагальной и полиморфноядерной инфильтрации портальной стромы.

Применение собакам с ЭТГ масла расторопши пятнистой также позволило снизить количество гепатоцитов с признаками гидропической и жировой дистрофии и некротизированных участков, однако отмечалось полнокровие центральных отделов долек и сохранялись ипфильтраты в портальной зоне и паренхиме печени.

3.2. Коррекция гепатотоксического действия ивомека у собак антиоксидантами растительного происхождения

— Морфобиохимические показатели крови собак при применении ивомека Введение ивомека собакам характеризовалось нарушением гликогенсинтезирующей функции печени, изменением соотношений белковых фракций, явлениями холестаза и цитолиза гепатоцитов (табл. 2). Применение ивомека собакам приводило к повышению активности аминотрансфераз. На 15-е сутки опыта активность АЛТ увеличивалась в 2,6 раза, а активность ACT -в два раза; на 30-е сутки уровень АЛТ возрастал в 2,8 раза, а уровень ACT - в 2,7 раза, что свидетельствовало о развитии цитолитических процессов в

печени собак. Уровень эритроцитов снижался на 15-е сутки опыта на 44,8%, а концентрации гемоглобина - в среднем на 28,4-31,2% на протяжении всего опыта.

Таблица 2 Морфобиохимические показатели крови собак при применении ивомека

Показатель 15-е сутки 30-е сутки

AJIT, ммоль/(Ч'л) 0.77+0.03 2,02±0,09*** 0.78±0,09 2,2±0,08*"

ACT, ммоль/(ч-л) 0.48±0.08 0,98±0Д1* 0,5±0.06 1,36+0,02*"

Эритроциты, 10"/л 6.70+0.56 3,7+0,24" 6,64+0.96 5,02±0,47

Гемоглобин, г/л 17б±1.41 120,8±1,67*" 177.6±3.63 127,2±1,67***

Общий белок, г/л 77.0+0.61 74,4±1,75 76.8+1.56 78,0±1,46

Альбумины, г/л 42.36±1.08 28,69±1Д9*" 44.30±1.72 31,2910,26***

а-глобулины, г/л 11.35±0.44 8,00±0,67*** 11.91±0.76 8,90±0,68**

Р-глобулины, г/л 15.32±0.76 20,85+1,22** 13.95±1.73 24,7811,04***

у-глобулины, г/л 7.97±0.71 16,86±1,74** 6.60+0.93 13,0310,86**

Тимоловая проба 0,5±0,00 1,76±0,04*** 0.5±0.00 1,210,05*"

Глюкоза, ммоль/л 5.010.43 3,02±0,27** 5.010,37 3,12±0,23"

Билирубин, мкмоль/л 4,5±0,21 10,2±0,89*** 4.46±0,25 13,6±1,03***

Щелочная фосфатаза, ЕД/л 100.0±4.31 471,4±13,5*" 100.4±1.79 502,4±11,73***

Примечание- в числителе - контроль, в знаменателе - опыт Достоверность отличий контроля по сравнению с опытом. *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001

Введение ивомека приводило к нарушению соотношения белковых фракций: понижался уровень альбуминов на 15-е сутки на 32,3%, а-глобулинов на 29,5%; на 30-е сутки - на 29,4% и на 25,3% соответственно. Содержание р-глобулинов во второй группе постепенно увеличивалось: на 15-е сутки на 36,1%, на 30-е - на 77,6%. Содержание у-глобулинов вдвое превышало контрольные значения во все исследуемые периоды. У собак после введения ивомека отмечалось повышение тимоловой пробы в 3,5 раза, что свидетельствует о нарушении коллоидно-осмотического соотношения.

Количество билирубина на 15-е сутки опыта повышалось в 2,3 раза, а на 30-е сутки - в три раза. Активность ЩФ возрастала к 15-м суткам опыта в 4,7 раза, к 30-м - в пять раз. Таким образом, введение ивомека приводило

к проявлению выраженного холестатического синдрома, который усиливался к 30-м суткам наблюдения. Содержание глюкозы снижалось на 15-е сутки опыта на 39,6%, на 30-е сутки - на 37,6%, что свидетельствует о нарушением гликогенсинтезирующей функции печени.

Гистологический анализ биоптатов печени собак при применении ивомека Применение ивомека приводит к развитию признаков холестаза, воспалительной реакции и дегенерации гепатоцитов. В биоптатах печени собак, получавших ивомек, выявляли в расширенных желчных капиллярах зелено-коричневые желчные цилиндры. Наибольшее их количество обнаруживалось в центре печеночных долек. В печеночных клетках были видны капли и зерна, в некоторых местах желчь окрашивала всю цитоплазму. Холестаз приводил к пролиферации желчных протоков, уницеллюлярному некрозу гепатоцитов и воспалительной реакции перипортальных трактов.

Коррекция гепатотоксического действия ивомека экстрактом солянки холмовой и гепаливом. ЭСХ и гепалив оказывали выраженное гепатозащитное действие, снижая проявления холестатических и цитолитических эффектов, развивающихся при применении ивомека. При совместном введении ивомека и ЭСХ активность АЛТ уменьшалась на 15-е сутки на 51,49%, на 30-е сутки - на 61,4%. Активность ACT достоверно снижалась у собак третьей и четвертой групп только к 30-му дню опыта (табл.3).

Наиболее выражено действие растительных препаратов на активность ЩФ. Так, исходный ее уровень в группе собак, получавших ивомек, превышающий в несколько раз нормальные величины под действием антиоксидантов, снижался в обеих группах. Активность ЩФ у собак, получавших ивомек и ЭСХ, на 15-й день опыта снизилась по сравнению с показателями второй группы в 2,6 раза (Р<0,001), на 30-е сутки - в 3,8 раза; у собак четвертой группы - в 3,8 раза (Р<0,001) и почти в пять раз приблизившись к значениям интактной группы (табл. 3).

Таблица 3. Влияние экстракта солянки холмовой и гепалива на активность аминотрансфераз и щелочной фосфатазы сыворотки крови собак на фоне введения ивомека

№ Группа ACT, ммоль/(ч-л) АЛТ, ммолъ/(ч-л) ЩФ, Ед/л

15-е 30-е 15-е 30-е 15-е 30-е

сутки сутки сутки сутки сутки сутки

1 Интактяые 0,48±0,08 0,5±0,0б 0,77+0,03 0,78+0,09 100,0+4,31 100,4±1,79

2 Ивомек 0,98±0,21" 1,36±0,02*" 2,02+0,09'" 2,2±0,08*" 471,4+13,5*" 5 02,4± 11,73*"

3 Ивомек+ ЭСХ 1,03±0,08 0,98+0,17" 0,98±0,lf" 0,85+0,07'" 182,3±3,18"" 131,66+8,57"'

4 Ивомек+ гепалив 0,93±0,12 0,6б±0,20" 0,72±0,0Г" 0,72+0,03*" 123,0+1,18*" 111,98+18,67*"

Примечание: достоверность отличий второй группы по сравнению с первой; третьей и четвертой - по сравнению со второй: Р<0,05; *Р<0,01; *Р<0,001.

Уровень билирубина у собак, которым применяли ивомек и экстракт солянки холмовой, на 15-е сутки был ниже, чем во второй группе на 40,8% (Р<0,01), на 30-е сутки - в 3,2 раза, приближаясь к показателям интактной

группы (Р<0,001). В четвертой группе, где применяли ивомек и гепалив, уровень билирубина был ниже, чем во второй группе, в 2,2 раза (Р<0,001) на 15-е сутки опыга и 3,5 раза (Р<0,001) на 30-е сутки опыта, приблизившись к значениям интактной группы.

Таким образом, применение экстракта солянки холмовой и гепалива предотвращало повышение уровня билирубина и активности ЩФ в сыворотке крови собак, возникающее под действием ивомека. Эффективнее препятствовал проявлению холестатического синдрома комплексный растительный препарат -гепалив.

Применение растительных препаратов нормализовало уровень гемоглобина и эритроцитов на фоне применения ивомека. Концентрация гемоглобина у собак, которые совместно с ивомеком получали экстракт солянки холмовой, превышала показатели второй группы на 15-е сутки на 22,5% (Р<0,001), а на 30-е сутки - на 38,4% (Р<0,001); а при получении гепалива - на 20,8% (Р<0,001) и 32,0% (Р<0,001) соответственно.

Растительные алтиоксиданты - экстракт солянки холмовой и гепалив - на фоне введения ивомека нормализовали соотношение белковых фракций в сыворотке крови собак. На 15-е сутки опыта содержание альбуминов у собак, которым применяли ЭСХ, превышало показатели второй группы на 30,9% (Р<0,001), а у животных, которым применяли гепалив - на 29,0% (Р<0,001); на 30-е сутки опыта - на 28,9% (Р<0,001) и 22,7% (Р<0,001) соответственно. Достоверное превышение уровня а-глобулинов в третьей и четвертой группах, по сравнению с показателями второй группы, отмечалось лишь на 15-е сутки опыта. Уровень у-глобулинов на 15-е сутки опыта составлял в третьей группе 7,8310,61 г/л, в четвертой - 7,36±0,40 г/л, что почти вдвое меньше по сравнению с показателями второй группы (Р<0,001). К 30-м суткам наблюдения достоверно ниже была концентрация у-глобулинов в четвертой группе, где применяли гепалив. Нормализация соотношения белковых фракций в сыворотке крови собак, получавших растительные антиоксиданты на фоне введения ивомека, согласовывалась с показателями тимоловой пробы (рис.1).

15-е

30-е

□ 1 группа (интактные)

■ 2 группа (ивомек)

В 3 группа (ивомек и ЭСХ)

04 группа (ивомек и гепалив)

Сутки

Рис. 1. Влияние растительных препаратов на показатели тимоловой пробы у собак на фоне введения ивомека

Введение растительных гепатоттротекторов ограничивало негативное влияние ивомека на уровень глюкозы в сыворотке крови. У собак, получавших OCX, уровень глюкозы был выше, чем при применении и гепалива, что свидетельствует о нормализации процессов гликогенеза у собак на фоне введения ивомека (рис.2).

□ 1 группа (икгыктные)

■ 2 группа (ивомек)

■ Э группа (иоомек и ЭСХ)

D4 группа (ивоме« и гепалие)

Рис. 2. Влияние растительных препаратов на уровень глюкозы в сыворотке крови собак на фоне введения ивомека, ммоль/л

Экстракт солянки холмовой и гепалив предотвращали развитие холестаза и дистрофических изменений в печени собак. Микроскопически в биоптатах печени собак, получавших вместе с ивомеком ЭСХ и гепалив, выявляли наряду с дистрофическими изменениями в гепатоцитах и регенераторные процессы, выражающиеся в увеличении доли двуядерных клеток и гипертрофии ядер гепатоцитов, что связано с развитием компенсаторно-приспособительных реакций, в частности, с усилением белково-синтетической функции клеток.

3.3. Влияние растительных антиоксидантов на течение спонтапного гепатоза собак

У собак, поступающих в УНЦВМ «Вита», диагноз гепатоз ставили на основании клипических признаков, морфобиохимических исследований крови, ультрасонографического обследования и гистологического анализа биоптатов печени. В крови собак отмечали низкое содержание гемоглобина, лейкопению, высокий уровень аминотрансфераз, щелочной фосфатазы, билирубина и общего белка. При УЗИ устанавливали гепатомегалию. Эхоструктура печени однородная, мелкозернистого типа, повышенной эхогенности, звукопроводимость органа понижена, обеднение сосудистого рисунка. В биоптатах печени собак выявляли гидропическую и жировую дистрофию гепатоцитов, чаще в центролобулярной зоне.

После проведения курса лечения ЭСХ и карсилом у собак нормализовалось общее состояние и улучшались биохимические показатели крови (табл.4).

Таблица 4 Влияние экстракта солянки холмовой и карсила на биохимические локачатели крови собак больных гепатозом

№ Группа До лечения 15-е сутки 30-е сутки

АЛТ, ммоль /(ч-л)

1 Гепатоз +ЭСХ 1,66±0,05 1,44±0,06** 1,29±0,04***

2 Гепатоз +карсил 1,66*0,04 1,48±0,04** 1,39±0,04**

ACT, ммоль/(ч-л)

1 Гепатоз +ЭСХ 1,40±0,03 1,31±0,05*** 1,12±0,04***

2 Гепатоз +карсил 1,41±0,04 1,30±0,03** 1,16±0,04**

ЩФ, ЕД

1 Гепатоз +ЭСХ 135,0±3,46 123,0±2,43* 100,1±2,49***

2 Гепатоз +карсил 133,0±3,21 123,0±3,18* 115,0±3,46**

Билирубин, мкмоль/ч

1 Гепатоз +ЭСХ 7,34± 0,24 6,30±0,31* 5,60±0,38**

2 Гепатоз +карсил 7,32±0,42 6,80±0,32 6,10±0,39*

Примечание: достоверность отличий для 15-х и 30-х суток с данными до лечения: *Р <0,05; **Р <0,01, ♦♦♦Р <0,001.

Так, активность AJIT у собак первой группы к 15-м суткам снизилась на 13,25%, к 30-м - на 22,3%; во второй группе - на 12,43 и 17,8% соответственно; уровень ACT снизился на 15-е сутки в первой группе на 6,43%, на 30-е - на 20%, во второй группе - на 7,8 и 17,7% соответственно. Терапия гепатопротекторами способствовала уменьшению проявления холестатического синдрома. Активность ЩФ уменьшилась у собак первой группы на 9% к 15 суткам и на 26% к 30-м суткам; во второй группе - на 7,5 и 13,5% соответственно. Уровень билирубина при применении ЭСХ достоверно снижался к 15-м суткам на 14,2%, а к 30-м суткам - на 23,7%; при применении карсила - к 30-м суткам на 16,7% (табл.4).

Растительные препараты оказывали положительное влияние на белковую картину крови собак, больных гепатозом. К 30-му дню лечения ЭСХ уровень общего белка снизился на 25,5% (Р<0,001), а при лечении карсилом - на 21,0% (Р<0,001), что происходило в основном за счет у-глобулиповой фракции.

Результаты гистологического исследования биоптатов печени больных гепатозом собак, получавших растительные антиоксиданты, свидетельствовали об уменьшении числа дистрофически измененных гепатоцитов.

ВЫВОДЫ

1. Экстракт солянки холмовой и масло расторогани пятнистой при экспериментальном токсическом гепатите собак, вызванном СС14, в значительной степени снижают ПОЛ, уменьшают диффузию в кровь цитолитических ферментов, снижают явления холестаза, восстанавливают

синтетическую функцию печени, препятствуют развитию некрозов гепатоцитов, устраняют лимфоцитарно-макрафагальную инфильтрацию портальной стромы. Наиболее выраженным гепатопротекггивным действием обладает экстракт солянки холмовой по сравнению с маслом расторопши пятнистой.

2. Применение собакам ивомека, препарата из группы макроциклических лактонов, характеризуется нарушением гликогенсинтезирующей функции печени, изменением соотношений белковых фракций, явлениями холестаза и цитолиза гепатоцитов, что лежит в основе его гепатотоксического действия.

3. В биоптатах печени собак, после применения ивомека, выявляются внутрипеченочный холестаз, дистрофия гепатоцитов и уницеллюлярные некрозы в центральной части печеночных долек, а также незначительная перипортальная инфильтрация гранулоцитами и лимфоидно-гистиоцитарными элементами, что является следствием развивающегося внутрипеченочного холестаза.

4. Препараты растительного происхождения (экстракт солянки холмовой и гепалив) на фоне введения ивомека уменьшают гепатотоксическое действие последнего у собак: устраняют явления холестаза, цитолиза гепатоцитов, нормализуют синтетическую функцию печени, причем гепалив обладает более выраженным действием по сравнению с экстрактом солянки холмовой.

5. Экстракт солянки холмовой и карсил при гепатозе собак в значительной степени умепыпают диффузию в кровь цитолитических ферментов, снижают явления холестаза, восстанавливают синтетическую функцию и структуру печени.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для лечения токсических и лекарственных поражений печени у собак рекомендуется применять внутрь 5%-й водный раствор экстракта солянки холмовой в дозе 2 мл/кг, масло расторопши пятнистой в дозе 0,2 мл/кг и i епалив в дозе 10 мг/кг три раза в день в течение 30 дней.

2. Ветеринарным врачам при лечении собак, больных гепатозом, рекомендуется использовать экстракт солянки холмовой в форме 5% водного раствора в дозе 2 мл/кг три раза в день и карсил в дозе 10 мг/кг в течение 30 дней.

3. Для постановки диагноза при поражении гепатобилиарной системы у собак ветеринарным специалистам рекомендуем проводить наряду с клиническим осмотром биохимический анализ крови, с исследованием ферментов - AJIT, ACT и ЩФ, тимоловой пробы и уровня билирубина; ультрасонографическое исследование и гистологический анализ биоптатов печени.

4. Материалы по коррекции лекарственных поражений печени у собак растительными антиоксидантами предлагается использовать при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсам внутренних незаразных болезней на факультетах ветеринарной медицины.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Сулайманова, Г.В. Динамика клинико-биохимических показателей у животных при применении гепатопротекторов растительного происхождения / Г.В. Сулайманова // Гомеостаз и экстремальные состояния организма: Мат-лы Х1-го Междунар. симп. - Красноярск, 2003. - С. 142.

2. Сулайманова, Г.В. Влияние экстракта солянки холмовой и масла расторогаш пятнистой на уровень МДА и активность аминотрансфераз сыворотки крови собак с экспериментальным токсическим геиатитом / Г.В. Сулайманова // Аграрная наука на рубеже веков: Тез. докл. Всерос. пауч.-практ. конф. / Краснояр. гос. аграр. ун-т. Красноярск, 2004. - С. 308-309.

3. Сулайманова, Г.В. Коррекция гепатотоксического действия ивомека у собак препаратами растительного происхождения / Г.В. Сулайманова, И.В. Морозова // Современные тенденции развития АПК: Мат-лы Всерос. конф. молодых ученых. - Красноярск, 2005. - С.175-178.

4. Донкова, Н.В. Сравнительная эффективность гепатопротекторов растительного происхождения при экспериментальном токсическом гепатите собак / Н.В. Донкова, Г.В. Сулайманова // Ветеринария Сибири. - 2005. - №5.

- С.43-46.

5. Сулайманова, Г.В. Гепатотоксичность ивомека у собак / Г.В.Сулайманова // Вузовская наука сельскому хозяйству (Междунар. науч.-практ. конф.): Сб. ст. В 2 кн. - Барнаул: Изд-во АГАУ, 2005. Кн.2. - С. 124-125.

6. Донкова, Н.В. Коррекция морфофункциональных изменений при экспериментальных лекарственных поражениях печени у собак / Н.В. Донкова, Г.В. Сулайманова // Актуальные проблемы патологии животных: Мат-лы Междунар. съезда терапевтов, диагностов. - Барнаул: Изд-во АГАУ, 2005.

- С. 53-54.

Санитарно-эпидемиологическое заключение № 24,49.04 953.11. 000381.09.03 от 25 09 2003 г. Подписано в печать 23 08.2005. Формат 60x84/16. Бумага тип. № 1 Офсетная печать. Объем 1,0 п л Тираж 100 экз. Заказ К» 2

Издательство Красноярского государственного аграрного университета 660017, Красноярск, ул. Ленина, 117

■

1

г

I

»15354

РНБ Русский фонд

2006-4 16230

Актуальность темы. В последние годы возросла актуальность проблемы лекарственных поражений печени у животных в связи с широким применением в ветеринарии разнообразных лекарственных препаратов. Большинство из них для животного организма являются чужеродными, то есть ксенобиотиками, поэтому их применение в первую очередь вызывает повреждение печени — органа, выполняющего роль биологического фильтра на пути поступления экзогенных токсикантов в системный кровоток организма (Байматов В.Н., Волкова Е.С., Багаутдинов A.M., 2001; Соколов

B.Д., Андреева Н.А., Ноздрин Г.А. и др., 2002; Буеверов А.О., 2002; Донкова Н.В., 2004). Спектр лекарственных препаратов вызывающих, поражения печени, насчитывает более 1000 наименований (Змушко Е.И., Белозеров Е.С., 2001). Выраженным гепатотоксическим действием обладают макроциклические лактоны — препараты нового поколения эндо- и эктоцидов биологического происхождения, к которым относится ивомек (Старченков

C.В., 2001; Жуленко В.Н., Таланов Г.А., 2002). Однако в настоящее время отсутствуют четкие представления о механизме гепатотоксического действия макроциклических лактонов и характере морфофункциональных изменений, что имеет принципиальное значение в научном поиске и подборе препаратов для их коррекции.

Известно, что в основе патогенеза большинства лекарственных поражений печени лежат процессы активации свободно-радикального окисления, что вызывает дестабилизацию и деструкцию субклеточных мембран гепатоцитов, нарушение метаболизма с развитием ферментемии и цитотоксических эффектов (Ажунова Т.А., 1998). Поэтому для защиты печени от токсического действия ксенобиотиков, восстановления и нормализации ее функции используют гепатопротекторные средства, обладающие антиоксидантными свойствами и улучшающие обменные процессы в гепатоцитах. В современной медицине с этой целью применяют антиоксиданты растительного происхождения: препараты солянки холмовой и расторопши пятнистой, которые благодаря гармоничному сочетанию биологически активных веществ, способны ингибировать перекисное окисление липидов, стабилизировать структуру и улучшать функцию мембран гепатоцитов (Саратиков А.С., Венгеровский А.И., 2000; Куркин В.А., 2003; Altoriay J. et al., 1992). Вместе с тем, сведения о механизме лекарственных поражений печени у собак, в том числе при применении макроциклических лактонов и коррекции развивающихся морфофункциональных изменений антиоксидантами растительного происхождения в литературе отсутствуют.

Цель и задачи исследований. Основная цель представленной работы заключалась в изучении влияния антиоксидантов растительного происхождение (солянки холмовой, расторопши пятнистой и гепалива) на лекарственные и спонтанные поражения печени у собак. Были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние препаратов солянки холмовой и расторопши пятнистой на морфофункциональное состояние печени у собак при экспериментальном токсическом гепатите, вызванным четыреххлористым углеродом;

2. Изучить морфобиохимические показатели крови и гистоструктуру печени при применении препарата из группы макроциклических лактонов — ивомека у собак;

3. Исследовать гепатопротекторное действие экстракта солянки холмовой и гепалива на фоне применения ивомека у собак;

4. Изучить влияние антиоксидантов растительного происхождения (препаратов солянки холмовой и расторопши пятнистой) на морфофункциональное состояние печени у собак при спонтанном гепатозе.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование по изучению гепатозащитного действия препаратов растительного происхождения (солянки холмовой, расторопши пятнистой и гепалива) при экспериментальном (вызванным четыреххлористым углеродом) и лекарственном (вызванным ивомеком) поражении печени у собак.

Получены новые данные о механизме гепатотоксического действия ивомека у собак. Установлено, что применение препарата повышает активность щелочной фосфатазы и уровень билирубина и приводит к развитию холестаза.

Выявлена специфика морфофункциональных изменений в печени у собак под воздействием четыреххлористого углерода и ивомека.

Показано выраженное гепатопротекторное действие при гепатозе у собак растительных антиоксидантов — экстракта солянки холмовой и карсила.

Практическая значимость. Данная работа является фрагментом темы «Структурно-функциональные основы гомеостаза сельскохозяйственных животных при экстремальных состояниях» основных научных исследований факультета ветеринарной медицины Красноярского государственного аграрного университета.

Практическое значение работы состоит в использовании научно-практических рекомендаций: «Коррекция лекарственных гепатопатий у плотоядных растительными препаратами», утвержденных НТС КрасГАУ от 12 июля 2005г. (протокол № 9) в работе ГУ «Городская станция по борьбе с болезнями животных» г. Красноярска, УНЦВМ «Вита» КрасГАУ и в ветеринарных клиниках: «Красветмедика», «Синто-Красноярск», «Багира» при лечении лекарственных и спонтанных поражений печени у собак.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах: «Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных» и «Анатомии и физиологии сельскохозяйственных животных» Красноярского государственного аграрного университета.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Антиоксидантные и гепатопротекторные свойства растительных препаратов (экстракта солянки холмовой и масла расторопши пятнистой) при экспериментальном токсическим гепатите у собак, вызванным четыреххлористым углеродом;

2. Сравнительный анализ терапевтической эффективности применения антиоксидантов растительного происхождения (экстракта солянки холмовой и масла расторопши пятнистой) при экспериментальном токсическом гепатите у собак;

3. Механизм гепатотоксического действия и морфофункциональные изменения печени у собак при применении ивомека - препарата из группы макроциклических лактонов;

4. Коррекция препаратами растительного происхождения (экстрактом солянки холмовой и гепаливом) лекарственного поражения печени у собак, вызванного ивомеком;

5. Фармакотерапевтическая эффективность экстракта солянки холмовой и карсила при спонтанном гепатозе собак.

Апробация работы. Основные материалы исследований доложены и получили одобрение на заседании Красноярского отделения Всероссийского общества физиологов им. И.П. Павлова (Красноярск, 2002); на XI Международном симпозиуме «Гомеостаз и экстремальные состояния организма» (Красноярск, 2003); на Всероссийской научной конференции «Аграрная наука на рубеже веков» (Красноярск, 2004); на Международном съезде терапевтов, диагностов «Актуальные проблемы патологии животных» (Барнаул, 2005); Всероссийской конференции молодых ученых «Современные тенденции развития АПК» (Красноярск, 2005); Международной научно-практической конференции «Вузовская наука — сельскому хозяйству» (Барнаул, 2005) и ежегодных научно-практических конференциях профессорскопреподавательского состава Красноярского государственного аграрного университета (2000-2005гг.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано шесть печатных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 129 страницах компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложений. Список литературы включает 258 наименований, из них 90 зарубежных источника. Материалы диссертации иллюстрированы 25 рисунками и 9 таблицами.

выводы

1. Экстракт солянки холмовой и масло расторопши пятнистой при экспериментальном токсическом гепатите собак, вызванным CCI4, в значительной степени снижают ПОЛ, уменьшают диффузию в кровь цитолитических ферментов, снижают явления холестаза, восстанавливают синтетическую функцию печени, препятствуют развитию некрозов гепатоцитов, устраняют лимфоцитарно-макрафагальную инфильтрацию портальной стромы. Наиболее выраженным гепатопротективным действием обладает экстракт солянки холмовой по сравнению с маслом расторопши пятнистой.

2. Применение собакам ивомека, препарата из группы макроциклических лактонов, характеризуется нарушением гликогенсинтезирующей функции печени, изменением соотношений белковых фракций, явлениями холестаза и цитолиза гепатоцитов, что лежит в основе его гепатотоксического действия.

3. В биоптатах печени собак, после применения ивомека, выявляется внутрипеченочный холестаз, дистрофия гепатоцитов и уницеллюлярные некрозы в центральной части печеночных долек, а также перипортальная инфильтрация гранулоцитами и лимфоидно-гистиоцитарными элементами, что является следствием развивающегося внутрипеченочного холестаза.

4. Препараты растительного происхождения (экстракт солянки холмовой и гепалив) на фоне введения ивомека уменьшает гепатотоксическое действие последнего у собак: устраняют явления холестаза, цитолиза гепатоцитов, нормализуют синтетическую функцию печени, причем гепалив обладает более выраженным действием по сравнению с экстрактом солянки холмовой.

Экстракт солянки холмовой и карсил при гепатозе собак в значительной степени уменьшают диффузию в кровь цитолитических ферментов, снижают явления холестаза, восстанавливают синтетическую функцию и структуру печени.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для лечения токсических и лекарственных поражений печени у собак рекомендуется применять внутрь 5%-ный водный раствор экстракта солянки холмовой в дозе 2мл/кг, масло расторопши пятнистой в дозе 0,2 мл/кг и гепалив в дозе 10 мг/кг три раза в день в течение 30 дней.

2. Ветеринарным врачам при лечении собак, больных гепатозом, рекомендуется использовать экстракт солянки холмовой в форме 5% водного раствора в дозе 2мл/кг три раза в день и карсил в дозе 10 мг/кг в течение 30 дней.

3. Для постановки диагноза при поражении гепатобилиарной системы у собак ветеринарным специалистам рекомендуем проводить наряду с клиническим осмотром, биохимический анализ крови, с исследованием ферментов — АЛТ, ACT и ЩФ, тимоловой пробы и уровня билирубина; ультрасонографическое исследование и гистологический анализ биоптатов печени.

4. Материалы по коррекции лекарственных поражений печени у собак растительными антиоксидантами использовать при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по курсам внутренние незаразные болезни на факультетах ветеринарной медицины.