Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Коррекция иммунной недостаточности и микробиоценоза кишечника у поросят отъемного возраста при дефиците меди и цинка фитопробиотиками

оиа^ои-—

На правах рукописи

МЮРИСТАЯ МАКСИМ ЛЕОНИДОВИЧ

КОРРЕКЦИЯ ИММУННОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ И МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА У ПОРОСЯТ ОТЪЕМНОГО ВОЗРАСТА ПРИ ДЕФИЦИТЕ МЕДИ И ЦИНКА ФИТОПРОБИОТИКАМИ

16.00.03-ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологней и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

о 2 АПР 2209

003466198

На правах рукописи

МЮРИСТАЯ МАКСИМ ЛЕОНИДОВИЧ

КОРРЕКЦИЯ ИММУННОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ И МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА У ПОРОСЯТ ОТЪЕМНОГО ВОЗРАСТА ПРИ ДЕФИЦИТЕ МЕДИ И ЦИНКА ФИТОПРОБИОТИКАМИ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Работа выполнена на кафедре «Паразитология, микробиология и вирусология» ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет».

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор,

почетный работник высшего профессионального образования Российской Федерации Андреева Альфия Васильевна.

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Иванов Александр Ильич;

кандидат биологических наук Нурлыгаянова Айгуль Назифовна.

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия

ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана».

Защита состоится 17 апреля 2009 года в 14°° часов на заседании диссертационного совета Д 220.003.03 при ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет» (450001, г. Уфа, ул. 50 лет Октября, 34, ауд. 325/2).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет».

Автореферат разослан 16 марта 2009 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор сельскохозяйственных наук,

г-

профессор (^З^^ ^ ^ Гиниятуллин

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Для решения проблемы обеспечения населения продуктами питания большое значение отводится свиноводству, как отрасли наиболее скороспелого животноводства. Однако рентабельное ведение свиноводства возможно только на основе его интенсификации, связанной с повышением скорости роста при выращивании и откорме животных, улучшением конверсии корма и увеличением выхода продукции па каждую голову, имеющуюся к началу хозяйственного года (С. И. Прудников, 1996).

В тоже время перевод свиноводства на промышленную основу резко изменил условия среды обитания животных. При этом технологические приёмы, используемые на крупных свиноводческих фермах, часто не обеспечивают биологические потребности свиней. Несбалансированность рационов, особенно по биологически активным веществам (витамины, макро- и микроэлементы, антиоксиданты) приводят к нарушению обмена веществ, снижению естественной резистентности и иммунологической реактивности организма животных и, как следствие, к высокой заболеваемости и низкой продуктивности свиней (Л. А. Литвина с соавт., 2000; А.Ф. Бакшеев, 2003). И. И. Кузьменковой (2000), Г. Н. Вайзенен (2001), В. И. Ивановой с соавт. (2004) установлено, что медь и цинк влияют на резистентность организма животных. При их дефиците в организме развиваются вторичные иммуннодефицитные состояния (М. Г. Алигаджиев, 2007).

В связи с вышеизложенным, выяснение влияния дефицита меди и цинка на иммунный статус, микробиоценоз кишечника, рост и развитие поросят отъемного возраста, а также разработка методов по их коррекции является актуальной.

Целью работы явилось изучение возможности коррекции фитопробиоти-ками в комплексе солями микроэлементов иммунного статуса, гематологических показателей, биохимической реактивности, минерального обмена и микробиоценоза кишечника поросят при дефиците меди,и цинка, а также эффективность вышеназванных композиций для профилактики гастроэнтеритов у поросят раннего отъема.

В связи с этим, были поставлены следующие задачи:

1. Оценить обеспеченность поросят раннего отъема микроэлементами путем исследования содержания их в почвах, воде, основных кормах для свиноводческого хозяйства и крови поросят;

2. Изучить морфологические показатели крови поросят раннего отъема (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина, лейкограммы) при дефиците меди и цинка и их коррекции фнтопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов;

3. Установить изменения белкового спектра крови поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов со сравнительной оценкой динамики содержания общего белка, альбуминов, а-, |3- и у-глобулинов;

4. Изучить изменения минерального состава крови поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов с учетом динамики макро- и микроэлементов;

5. Изучить иммунную реактивность поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и установить возможности её коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов со сравнительной оценкой:

а) состояния естественной резистентности (динамика бактерицидной и ли-зоцимной активности сыворотки крови) и активности реакций фагоцитоза;

б) состояния клеточного (динамика Т-лимфоцитов (СОЗ+), Т-хелперов (С04+), Т-супрессоров (СВ8+), В-лимфоцитов (С019+) и гуморального звена иммунитета (динамика иммуноглобулинов А, М, С);

6. Определить состояние микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и возможность его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов с учетом динамики нормо- и условно-патогенной микрофлоры;

7. Выяснить эффективность применения фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики послеотъемных гастроэнтеритах у поросят с учетом показателей прироста живой массы и сохранности поголовья.

Научная новизна. Впервые проведены комплексные исследования гематологических показателей, динамики белкового спектра, микроэлементного состава крови, клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности и иммунологической реактивности, состояния энтеробиоценоза, прироста живой массы, сохранности поросят и выявлены биологические особенности состояния иммунной системы, формирования микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема при недостаточности меди и цинка и разработаны эффективные методы их коррекции с применением фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов.

Проведенными исследованиями установлены высокие иммупокоррегирую-щие, гемопоэтические, повышающие колонизационную резистентность нормофло-ры кишечника, прирост и сохранность поросят раннего отъема свойства фитопробиотиков на основе лактобактерий и лекарственного растительного сырья (люцерна посевная, чистотел большой, барбарис обыкновенный) в комплексе с солями микроэлементов на фоне недостаточности меди и цинка, обоснована эффективность их применения для профилактики послеотъемных гастроэнтеритов.

Теоретическая и практическая значимость работы. На основании полученных результатов гематологических, биохимических исследований, содержания микроэлементов, показателен естественной резистентности, фагоцитоза, Т - и В-систем иммунитета, микробиоценоза кишечника, данных прироста массы тела и сохранности поросят раннего отъема на фоне недостаточности меди и цинка, с учетом влияния на организм фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов обобщены биологические закономерности гемо- и лейкопоэза, иммуногенеза, колонизационной резистентности, способствующие повышению иммунного статуса и естественного микробиоценоза кишечника.

Экспериментальными данными обоснованы механизмы восстановления иммунного равновесия, колонизационной резистентности кишечника на фоне нарушенного иммунного статуса и микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка.

Результаты экспериментальных исследований, выполненных по плану научных исследований ФГОУ ВНО «Башкирский ГАУ» (номер госрегистрации темы ВНТИЦ И081205134104), включены в рекомендации, утвержденные Управлением ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан «Применение фитопробиотических композиций на основе лактобактерий и лекарственного растительного сырья в комплексе с солями микроэлементов для профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят и поросят послеотъемно-го возраста» (Уфа, 2009) и используются в свиноводческих хозяйствах Республики Башкортостан в целях повышения иммунного статуса, нормализации микробиоценоза кишечника, повышения прироста, сохранности и профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема.

Результаты исследований также используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по микробиологии и иммунологии в Башкирском государственном аграрном университете, Оренбургском государственном аграрном университете, Казанской государственной академии ветеринарной медицины.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и апробированы на международной конференции «Роль молодых ученых в реализации национального проекта «Развитие АПК» (Москва, 2007); на всероссийских конференциях: «Проблемы и перспективы развития инновационной деятельности в агропромышленном производстве» (Уфа, 2007), «Интеграция аграрной науки и производства: Состояние, проблемы и пути их решения» (Уфа, 2008), «Молодежная наука и АПК: проблемы и перспективы» (Уфа, 2008).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Гематологические показатели поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и их изменения под влиянием фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов;

2. Динамика биохимических показателей и минерального обмена у поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и возможности их коррекции фито-пробиотиками в комплексе с солями микроэлементов;

3. Состояние иммунного статуса поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и возможности его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов;

4. Оценка естественного микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема (нормофлоры и условно-патогенных микроорганизмов) при дефиците меди и цинка и его изменения под влиянием фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов;

5. Эффективность фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики послеотъемных гастроэнтеритов поросят.

Публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в семи научных статьях, в том числе одна - в ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендованных экспертным советом ВАК РФ и в рекомендации, утвержденной Управлением ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и практических предложений, приложения; изложена на 138 страницах компьютерного текста. Работа иллюстрирована 27 таблицами, 20 рисунками. Библиографический список включает 190 работ, в том числе 30 иностранных авторов.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Материалы и методы исследований

Работа выполнялась в 2006-2009 г.г. в условиях лаборатории кафедры паразитологии, микробиологии и вирусологии ФГОУ ВПО «Башкирский государственный аграрный университет», ФГУ ЦАС «Башкирский», а также в условиях ГУСП совхоз-завод «Дмитриевский» Уфимского района Республики Башкортостан.

Общая схема исследований представлена на рисунке 1.

_1 этап исследований__

Оценка обеспеченности микроэлементами (железо, медь, цинк, марганец, кобальт)

_ поросят отъемного возраста _

Изучение микроэлемеитного I Химический состав кормов и I Микроэлементный состав состава почв и волы ГУСЛ зоотехнический анализ сыворотки крови поросят совхоз-завод «Дмитриевский» | рационов кормления поросят |_отъемного возраста

2 этап исследований

Иммунный статус, микробиоценоз кишечника и их коррекция фитопробиотиками в комплексе _солями микроэлементов при недостаточности меди и цинка с оценкой :_

¡5

% =

В «г

е. <и

с н

2

с. ■а-

о 8 о

5 в-

о.

Е I Р

о> х а

Е Р Е

и т

с*

о

о §

и г

03 ~

•©« О

«> О

£ ё.

ё р

я з

я 5 я = о •&

Ь о.

§ •§■ в.

^ Л с и £ Ь

& Ч £

О СО ь

я Е

>-. ее

5 О

о

о ►

5 <

3 •6"

_3 этап исследований_

Эффективность фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики послеотъемных гастроэнтеритов поросят:

1. Изучение показателей прироста живой массы (динамика среднесуточного, абсолютного и относительного приростов);

2. Учет сохранности и заболеваемости поголовья;

3. Обоснование экономической эффективности применения фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов._

Рисунок I Общая схема исследований

В работе использовали: жидкий пробиотик лактобактерин; фитопробиоти-ческие композиции на основе лактобактерин и лекарственного растительного сырья (люцерна посевная, чистотел большой и барбарис обыкновенный) (Уфимский филиал «Иммунопрепарат» ФГУП НПО «Микроген» МЗ и СР РФ); соли микроэлементов (сернокислая медь, сернокислый цинк).

Содержание микроэлементов в почве сельхозугодий изучали по «Агрохимическому паспорту полей» ГУСП совхоз-завод «Дмитриевский» (ФГУ ЦАС «Башкирский», 2006). Зоотехнический анализ основных кормов и анализ суточных рационов поросят проводили по Е. А. Петуховой с соавт. (1989) и А. П. Калашникову с соавт. (2003).

Определение кобальта, меди, цинка, марганца и железа в кормах растительного происхождения, воде и крови поросят раннего отъема проводили на атомно-абсорбционном спектрофотометре «КВАНТА.ЭТА».

Научно-производственные опыты проводились на поросятах раннего отъема (30 дней), которые были разделены на семь групп по принципу аналогов (таблица 1).

Таблица 1 Схема опыта

Группа животных (п=8) Применяемые препараты

1 контрольная Основной рацион (ОР)

2 ОР + соли микроэлементов (120 мг на голову в течение 30 дней)

3 ОР + жидкий пробиотик лактобактерин с кормом в два этапа ежедневно по 8 мл в течение 10 дней с интервалом в 10 дней

4 ОР + фитопробиотик с люцерной с кормом в два этапа ежедневно по 8 мл в течение 10 дней с интервалом в 10 дней + соли микроэлементов (120 мг на голову) в течение 30 дней

5 ОР + фитопробиотик с чистотелом с кормом в два этапа ежедневно по 8 мл в течение 10 дней с интервалом в 10 дней + соли микроэлементов (120 мг на голову) в течение 30 дней

6 ОР + фитопробиотик с барбарисом с кормом в два этапа ежедневно по 8 мл в течение 10 дней с интервалом в 10 дней + соли микроэлементов (120 мг на голову) в течение 30 дней

7 ОР + фитопробиотик с люцерной и барбарисом с кормом в два этапа ежедневно по 8 мл в течение 10 дней с интервалом в 10 дней + соли микроэлементов (120 мг на голову) в течение 30 дней

До начала опыта, а затем на 10, 20, 30-й дни проводили взятие крови для гематологических, биохимических и иммунологических исследований; фекалий для микробиологических исследований; в 60- и 90-дневном возрасте проводили взвешивание.

Гематологические показатели определяли на анализаторе «Гемоскрин-13».

Лейкограмму определяли путем подсчета форменных элементов белой крови в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе.

Содержание общего белка определяли рефрактометрически, белковые фракции - нефелометрически.

Содержание макро- и микроэлементов в крови проводили на атомно-абсорбционном спектрофотометре «Квант-2.ЭТА».

Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по П. А. Емелья-ненко (1980), лизоцимную активность сыворотки крови устанавливали по В. Г. Дорофейчуку (1983). Для исследования фагоцитарной активности нейтрофилов использовали частицы латекса размером 0,8 мкм (С. Г. Потапов с соавт., 1977).

Определение субпопуляции лимфоцитов проводили непрямым иммуноф-люоресцеитным методом с применением моноклональных антител на проточном цитофлуориметре, количество иммуноглобулинов A, M и G в сыворотке крови поросят - методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини (1965).

Качественное исследование микрофлоры кишечника проводили по Э. П. Касаткиной с соавт. (1996). Для выделения бактерий семейства кишечных палочек материал засевали на среды: Эидо, Левина, МПА, МПБ. Чистую культуру эшерихий типировали в РА. Культивирование клостридий проводили на мясо-пептонном печёночном бульоне Китта-Тароцци, плотной среде Вильсона-Блера, глюкозо-кровяном агаре Цейсслера. Для выделения протея материал засевали в конденсационную воду свежескошенного агара. Выделение бифидо-бактерий проводили посевом больших разведений фекалий в среду Блаурокка. Посевы инкубировали при температуре 37°С в течение 24 часов. Лактобациллы выращивали на среде MPC. Выделение микроскопических грибов осуществляли на средах Сабуро. Результаты переводили в десятичные логарифмы и устанавливали относительное соотношение различных групп микроорганизмов в кишечной популяции.

При изучении эффективности фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики гастроэнтеритов послеотъемного возраста учитывали физиологическое состояние поросят, заболеваемость, течение и исход болезни.

Экономическую эффективность профилактических мероприятий определяли по В. М. Авилову (2000).

Полученные данные подвергнуты статистической обработке методами вариационной статистики с проверкой достоверности результатов с помощью критерия Стьюдента и уровня значимости (Р) по специально разработанным компьютерным программам.

2.2 Результаты собственных исследований

2.2.1 Обеспеченность поросят раннего отъема микроэлементами в условиях ГУСП совхоз-завод «Дмитриевский» Уфимского района Республики Башкортостан

При анализе содержания микроэлементов в почвенном покрове хозяйства установлено, что уровень содержания меди и цинка - низкий (средневзвешенное содержание цинка по хозяйству - 0,3 мг/кг почвы; меди - 0,2 мг/кг почвы); кобальта и марганца - средний (средневзвешенное содержание кобальта - 0,3 мг/кг почвы; марганца - 17,0 мг/кг почвы).

Данная динамика прослеживается и при исследовании воды. Зоотехнический анализ кормов и анализ рациона кормления поросят раннего отъема показал, что они не обеспечивают их потребность в таких микроэлементах, как медь и цинк.

Анализ микроэлементного состава крови поросят раннего отъема приведен в таблице 2.

Таблица 2 Содержание микроэлементов в крови поросят раннего отъема

Микроэлемент Содержание, мкмоль/л Физиологическая норма, мкмоль/л

Железо 18,2±0,06 17,9-32,2

Медь 19,2±0,03 31,5-37,8

Цинк 12,5±0,02 15,2-24,5

Марганец 1,5±0,02 0,36-1,82

Кобальт 0,6±0,01 0,4-0,75

Таким образом, ГУСП совхоз-завод «Дмитриевский» Уфимского района относится к биогеохимической провинции с дефицитом меди и цинка.

2.2.2 Гематологические показатели поросят раннего отъема при дефиците меди н цинка и их коррекция фнтопробнотиками в комплексе с солями микроэлементов

Количество эритроцитов в крови поросят раннего отъема контрольной и опытных групп на начало исследований составило от 4,21±0,04хЮ12/л до 5,84±0,06х10п/л. Применение поросятам фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов способствовало повышению уровня эритроцитов в крови. Данный показатель превышал уровень контроля в крови животных четвертой, пятой, шестой и седьмой групп к концу опыта 1,12; 1,1; 1,1 и 1,15 раза, соответственно.

Подобным образом изменялась динамика лейкоцитов и тромбоцитов в крови поросят при использовании фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов. На 30-й день опыта содержание лейкоцитов и тромбоцитов в крови поросят

четвертой, пятой, шестой и седьмой групп было выше, чем в контроле, соответственно, в 1,31; 1,35; 1,34 и 1,49 раза и в 1,06; 1,05; 1,11 и 1,08 раза; тогда как во второй и третьей группах в 1,11; 1,22 раза и в 1,02; 1,03 раза, соответственно.

Содержание гемоглобина в крови животных опытных групп в перпод исследований заметно повышалось. Его максимальное значение относительно контрольных значений регистрировалось у поросят к 30-му дню опыта в пятой и седьмой группах в 1,1 и 1,2 раза, соответственно.

За весь период исследований статистически достоверных изменений в содержании эозинофилов и моноцитов в крови поросят раннего отъема контрольной и опытных групп не регистрировалось. Уровень эозинофилов колебался от 1,25±0,16 до 1,63±0,18 %, а содержание моноцитов находилось на уровне от 3,5±0,27 до 3,88±0,4 %.

Результаты исследований динамики палочкоядерных, сегментоядерных нейтрофилов и лимфоцитов представлены на рисунке 2.

% т

16,0 --

12,0 -■

8,0

%

% 20,0 - •

13,0 --

Фон

10

20

30

Дни

6,0

Фон

10 Б

20

, Дн»

75,0 -■

60,0

1 контрольная

— - - 3 группа

— -А — 5 группа

— -4 - 7 группа

— -"2 группа

— •■ — 4 группа

— — б группа

Фон

10

20

зо Дни

Рисунок 2. Динамика изменения палочкоядерных (А), сегментоядерных (Б) нейтрофилов и лимфоцитов (В) в крови поросят раннего отъема

2.2.3 Биохимические показатели крови поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и их коррекция фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов

Количество общего белка у поросят раннего отъема контрольной и опытных групп находилось на уровне 59,91±0,91 - 60,09±0,73 г/л. В процессе исследований количество общего белка у животных опытных групп изменялось в сторону повышения. Однако, максимальное увеличение общего белка в сыворотке крови наблюдалось у поросят, получавших фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов. Так, к концу исследований количество общего белка было выше контрольных значений в четвертой, пятой, шестой и седьмой группах в 1,09, 1,14, 1,11 и 1,17 раза, соответственно.

Использование в рационе поросят вышеуказанных композиций способствовало повышению в крови альбумина по срокам опыта. Максимальное повышение альбумина регистрировалось в сыворотке крови животных пятой и седьмой групп.

Применение фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов способствовало увеличению в сыворотке крови поросят р- и у-глобулинов, понижению а-глобулинов (рисунок 3).

г/л • -16,0 -12,0 -•

8,0

•т:

Фон

ч

10

20

ЗОДни

г/л 13,0 -■

П,0

9,0

Л

У

----- - "

Фон

10

20

ЗОДни

г/л

16,0

12,0 --

8,0

Фон

10

20

30д„

' 1 контрольная • - - 3 группа

— т1 — 5 группа

- — 7 группа

— — 2 группа

— -в — 4 группа

— -в - 6 группа

Рисунок 3. Динамика изменения а- (А), (3- (Б) и у-глобулинов (В) в крови поросят раннего отъема

2.2.4 Минеральный обмен поросят раннего отъема при дефиците меди н цннка н его коррекция фитопробнотиками в комплексе с солями микроэлементов

Данные, полученные при изучении динамики меди и цинка в крови поросят раннего отъема, представлены в таблице 3.

Таблица 3 Динамика содержания меди и цинка в крови поросят раннего отъема

Группа Показатель

живот- Стат. Медь, мкмоль/л Цинк, мкмоль/л

ных показатель Сроки исследования (день от начала опыта)

(п=8) Фон 10 20 30 Фон 10 20 30

М± 19,05 19,24 18,93 19,07 12,51 12,69 12,53 12,44

1 т 0,24 0,26 0,23 0,14 0,16 0,14 0,09 0,15

Су, % 3,53 3,75 3,44 2,09 3,59 3,17 2,07 3,36

М± 19,34 23,31 25,40 30,24 12,65 13,19 13,86 14,53

2 т 0.24 0,26 0,17 0,27 0,10 0,10 0,10 0,09

Су, % 3,52 3,13 1,84 2.50 2,20 2,16 2,14 1,69

Р *** *** *** ** * * * ***

М± 19,20 19,28 19,52 19,73 12,44 12,67 12,84 12,92

3 т 0,12 0,12 0,08 0,11 0,13 0,13 0,12 0,10

СУ, % 1,75 1,69 1,22 1,65 2,94 2,81 2,72 2,25

Р ♦ *

М± 19,14 24,55 27,66 32,37 12,59 13,84 14,78 16,19

4 т 0,26 0,25 0,21 0.17 0,16 0,17 0,14 0,23

Су, % 3,85 2,87 2,10 1,45 3,57 3,39 2,61 4,02

Р *** **# *** *** *** ***

М± 19,10 25,36 28,94 34,86 12,44 14,09 15,30 16,96

5 т 0,17 0,20 0,16 0,19 0,10 0,15 0,14 0,21

С\-, % 2,49 2.26 1,60 1,56 2,27 2,98 2,58 3,58

Р *** *** *** *** *** ***

м± 19,42 24,89 28.08 32,78 12,63 13,48 14,34 15,23

6 т 0,19 0,22 0,15 0,25 0,12 0,10 0,16 0,15

Су, % 2,70 2,47 1,50 2,14 2,69 2,03 3,06 2,83

Р *** *** *** *** *** ***

М± 18,99 26,05 29,73 36,56 12,51 14,32 16,04 19,35

7 т 0,16 0,14 0,19 0,23 0,13 0,16 0,19 0,18

Су, % 2,42 1,48 1,84 1,75 3,00 3,10 3,38 2,66

Р *** *** *** *** *** ***

Примечание: * - Р<0,05; ** - Р <0,01; *** - Р <0,001.

Содержание марганца, кобальта и железа в крови поросят раннего отъема за весь период опыта находилось в пределах физиологических норм и достоверных изменений не зарегистрировано.

Результаты исследования содержания кальция в сыворотке крови поросят контрольной, второй и третьей опытных групп свидетельствуют об умеренном их повышении по срокам опыта (от 0,63±0,01 ммоль/л до 0,71±0,01 ммоль/л). В организме поросят опытных групп, получавших фитопробиотнки в комплексе с солями микроэлементов, наблюдали тенденцию к динамичному увеличению общего кальция в сыворотке крови. Так, количество общего кальция в сыворотке крови поросят четвертой и шестой групп увеличивалось по сравнению с контрольным уровнем к 10-му дню опыта - в 1,07 и 1,09 раза (на 0,05 и 0,06 ммоль/л), к 20-му дню - в 1,10 и 1,11 раза (на 0,06 и 0,07 ммоль/л), к 30-му дню - в 1,13 и 1,16 раза (на 0,09 и 0,10 ммоль/л). Уровень содержания общего кальция в сыворотке крови животных пятой и седьмой групп повысился по сравнению с контролем на 10, 20 и 30-й дни опыта в 1,10 и 1,11 раза (на 0,06 и 0,07 ммоль/л), в 1,12 и 1,14 раза (на 0,08 и 0,09 ммоль/л), в 1,18 и 1,21 раза (на 0,12 и 0,14 ммоль/л), соответственно.

Динамика содержания неорганического фосфора в сыворотке крови поросят контрольной и опытных групп аналогична изменениям кальция. Максимального уровня количество неорганического фосфора достигло в крови поросят пятой и седьмой групп. С 10-го дня опыта уровень неорганического фосфора превысил контроль-в 1,15 и 1,17 раза (на 0,06 и 0,07 ммоль/л), с 20-го дня - в 1,17 и 1,20 раза (на 0,08 и 0,09 ммоль/л), с 30-го дня - в 1,23 и 1,26 раза (на 0,10 и 0,12 ммоль/л).

2.2.5 Иммунный статус поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и его коррекция фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов

Фоновое значение активности лизоцима у поросят контрольной и опытных групп находилось на уровне 41,63±0,87 - 42,61 ±0,21%. У поросят контрольной группы показатель активности лизоцима в сыворотке крови за период опытов изменялся незначительно и колебался от 41,86±0,92 до 42,6±0,84%. В крови поросят второй и третьей опытных групп лизоцимная активность повысилась, по сравнению с показателями контрольной группы, на 10-й день опыта в 1,01 и 1,02 раза (на 0,3 и 1,1 %), на 20-й день - в 1,03 и 1,07 раза (на 1,1 и 2,9 %), на 30-й день - в 1,04 и 1,11 раза (на 1,8 и 4,5 %). Несколько интенсивнее активность лизоцима повышалась у поросят четвертой и шестой групп. В крови поросят пятой и седьмой групп уровень лизоцимной активности увеличивался более активно и превысил показатели контрольной группы на 10-й день опыта в 1,06 раза (на 2,4 и 2,7 %), на 20-й день - в 1,12 раза (на 4,9 и 5,3 %), на 30-й день - в 1,16 и 1,17 раза (на 6,6 и 7,1 %).

У поросят контрольной группы во все сроки исследований достоверных изменений бактерицидной активности сыворотки крови не регистрировалось. Данный показатель на протяжении опыта находился на уровне от 42,99 % до 43,5 %. Показатель бактерицидной активности сыворотки крови животных опытных групп, получавших фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов заметно повышался. Максимальное его значение регистрировалось в сыворотке крови поросят пятой и седьмой групп. Так, на 10-й день опыта показатели данных гр^тт превышали контрольный уровень в 1,11 раза (на 4,5 и 4,7 %), на 20-й день - в 1,16 и 1,19 раза (на 7,1 и 8,1 %), на 30-й день - в 1,25 и 1,29 раза (на 10,9 и 12,3 %).

Показатели исследования динамики фагоцитоза в крови поросят раннего отъема приведены на рисунке 4.

% 55,0 ■

♦

/

/>

/ ' '

ЖСж . -

30,0 •

6,0 -•

-1 4,0

♦

/а

/¿.-Л

-И

Фон

10

20

30 Д"»

Фон

10

20 30 Дни

3,0

2,0 --

л : ■

——I контрольная

■ ■ 3 группа ■ -А— 5 группа - •♦— 7 группа

— —2 группа -■в - 4 группа

— — 6 группа

1,0 ■

Фон

10

20

ЗОДни

Рисунок 4. Динамика изменения фагоцитарной активности нейтрофилов (А), фагоцитарного числа (Б) и фагоцитарного индекса (В) в крови поросят раннего отъема

У поросят контрольной группы уровень Т-лимфоцитов в крови за период опытов находился в пределах от48,19±0,91 до 56,10±0,96 %.

В крови поросят опытных групп количество Т-лимфоцитов имело тенденцию к увеличению. Так, у поросят второй и третьей групп количество Т-лимфоцитов было выше значений контрольных животных на 10-й день - в 1,01 раза (на 0,6 %) и в 1,02 раза (на 1,1 %), на 20-й день - в 1,01 раза (на 0,7 %) и в 1,04 раза (на 1,9 %), на 30-й день - в 1,02 раза (на 1,2 %) и в 1,06 раза (на 3,4 %). Более высокое содержание Т-лимфоцитов в крови было у поросят четвертой и шестой опытной группы. Данный показатель превышал контрольный уровень на 10-й день - в 1,05 и 1,07 раза (на 2,4 и 3,4 %), на 20-й день - в 1,09 и 1,12 раза (на 4,6 и 6,1 %), на 30-й день - в 1,14 и 1,18 раза (на 7,7 и 10,3 %), и показатели третьей группы, соответственно, в 1,02 и 1,04 раза (на 1,3 и 2,3 %), в 1,05 и 1,08 раза (на 2,7 и 4,2 %), в 1,07 и 1,12 раза (на 4,4 и 6,9 %). Самое высокое содержание Т-лимфоцитов было зарегистрировано у поросят пятой и седьмой опытных групп. Так, на 10-й день исследований данный показатель был выше значений контрольной группы в 1,08 и 1,10 раза (на 3,8 и 5,1 %), на 20-й день -в 1,14 и 1,17 раза (на 7,1 и 9,0 %), на 30-й день - в 1,24 и 1,29 раза (на 13,4 и 16,0 %), значений третьей группы в 1,05 и 1,08 раза (на 2,7 и 4,0 %), в 1,10 и 1,13 раза (на 5,3 и 7,1 %), в 1,17 и 1,21 раза (на 10,1 и 12,6 %), соответственно.

Результаты исследований содержания Т-хелперов и Т-супрессоров в крови поросят приведены в таблице 4. Максимальное увеличение количества Т-хелперов регистрировалось у поросят четвертой, пятой, шестой и седьмой опытных групп, что было выше контрольных значений в 1,1; 1,2; 1,17 и 1,23 раза, соответственно. Динамика содержания Т-супрессоров противоположна изменениям Т-хелперов.

Фоновое значение В-лимфоцитов в крови поросят контрольной группы составило 3,49±0,07 % и до конца исследований достоверных изменений не отмечалось. В опытных группах количество В-лимфоцитов в крови животных на начало опыта находилось на уровне от 3,45 % до 3,53 % и в течение срока исследований изменялось с различной степенью интенсивности. Высокое значение количества В-лимфоцитов наблюдалось в пятой и, особенно, в седьмой группе. Уровень В-лимфоцитов превышал контроль на 10-й день исследований, соответственно по группам, в 1,24 и 1,27 раза (на 0,89 и 0,96 %), на 20-й день - в 1,45 и 1,56 раза (на 1,68 и 2,11 %), на 30-й день - в ! ,66 и 1,84 раза (на 2,60 и 3,29 %).

Таблица 4 Содержание Т-хелперов и Т-супрессоров в кров» поросят раннего отъема

Группа Показатель

живот- Стат. Т-хелперы, % Т-супрессоры, %

ных показатель Сроки исследования (день от начала опыта)

(п=8) Фон 10 20 30 Фон 10 20 30

М± 14,65 15,94 17,19 18,73 14,43 13,13 11,88 10,74

1 т 0,22 0,22 0,24 0,28 0,21 0,18 0,18 0,16

Су, % 4.24 3,91 3,95 4,23 4,20 3,94 4,34 4,28

М± 14,74 16,34 17,93 19,46 13,86 12,83 11,40 10,15

2 т 0,24 0,24 0,27 0,30 0,21 0,21 0,18 0,14

Су, % 4,53 4,11 4,27 4.32 4,21 4,56 4,55 4,01

Р *

М± 14,99 16,79 18,49 20,19 14,11 12.61 11,01 9.59

3 т 0,25 0,26 0,27 0,29 0,17 0,22 0,17 0,16

Су, % 4.78 4,43 4,08 4,08 3,42 4,99 4,43 4,58

Р * ** &

М± 14,71 17,16 19,24 21.96 13,99 12,19 10,53 8,59

4 т 0,19 0.25 0,27 0,30 0,18 0,16 0,15 0,13

Су, % 3,71 4,12 4,02 3,86 3,59 3,60 4,12 4,20

Р ** * ** *** ** *** ***

М± 14,66 17,93 20,88 24,10 14,18 11,63 9,81 7,65

5 т 0,24 0,27 0,33 0.37 0.19 0,16 0,14 0,11

Су, % 4,54 4,25 4,54 4,37 3.73 3,98 3,98 4,01

Р *** *** *** **♦ *** ***

М± 14,93 17,46 20,19 23,00 13,85 11,91 10.21 8,01

6 т 0,25 0,25 0,30 0,37 0,21 0,18 0.17 0,13

Су, % 4,77 4,11 4,26 4,54 4,35 4,17 4,75 4,45

Р ** *** *** ** *** ***

М± 15,03 18,46 21,23 25.51 14,26 11,44 9,21 6,60

7 т 0,25 0,28 0,32 0,41 0,21 0,19 0,15 0,12

Су, % 4,73 4,34 4,27 4,51 4,21 4,72 4,66 4,99

Р *** *** *** ***

Применение поросятам фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов способствовало повышению активности 1£>А. Уровень антител этого класса в сыворотке крови поросят был максимальным по отношению к контролю к 30-му дню опыта у животных пятой и седьмой групп, соответственно, в 2,25 и 2,58 раза (на 0,95 и 1,20 мг/мл). Аналогичная динамика наблюдалась и при изучении иммуноглобулинов класса М и О. У поросят четвертой, пятой, шестой и седьмой опытных грутт уровень иммуноглобулинов был максимальным к 30-му дню исследований, превышая показатели контрольных животных, соответственно, в 1,47 раза (на 0,81 мг/мл), в 1,72 (на 1,23 мг/мл), в 1,62 (на 1,05 мг/мл), 1,85 раза (на 1,45 мг/мл) и в 1,69 (на 3,23 мг/мл), 2,03 (на 4,84 мг/мл), 1,84 раза (3,93 мг/мл) и в 2,20 раза (на 5,64 мг/мл).

2.2.6 Микробноценоз кишечника поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и его коррекция фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов

В кишечнике поросят раннего отъема содержание бифидобактерий за период опытов находилось на уровне от 7,38 до 7,78 IgKOE/r. Фоновый уровень бифидобактерий в кишечнике поросят контрольной группы колебался от 7,63 до 7,75 IgKOE/r. Уровень бифидофлоры поросят, получавших раствор солей микроэлементов, в период опытов заметно не изменялся и находился на уровне от 7,61±0,18 до 7,83±0,16 IgKOE/r. Более выраженная активность бифидофлоры наблюдалась в кишечнике поросят третьей, четвертой и шестой опытных групп. Так, к 10-му дню исследований показатели контрольной группы были превышены в 1,08 раза (на 0,61 IgKOE/r), в 1,10 раза (на 0,76 IgKOE/r) и в 1,09 раза (на 0,66 IgKOE/r), к 20-му дню - в 1,08 раза (на 0,60 IgKOE/r), в 1,09 раза (на 0,73 IgKOE/r) и в 1,10 раза (на 0,76 IgKOE/r), к 30-му дню - в 1,11 раза (на 0,87 „ IgKOE/r), в 1,13 раза (на 0,97 IgKOE/r) и в 1,14 раза (на 1,10 IgKOE/r). Самая высокая активность бифидобактерий регистрировалась в кишечнике поросят пятой и седьмой опытных групп. В данных группах описываемый показатель был выше контрольных значений на 10-й день опыта в 1,12 и 1,14 раза (на 0,85 и 1,0/gKOE/г), на 20-й день - в 1,14 и 1,17 раза (на 1,10 и 1,26 IgKOE/r), на 30-й день-в 1,19 и 1,21 раза (на 1,48 и 1,60 IgKOE/r).

Аналогичная тенденция наблюдалась и при изучении динамики лактобак-терий в кишечнике поросят. Содержание лактобактерий в кишечнике поросят контрольной и опытных групп находилось на уровне от 4,39 до 4,78 IgKOE/r. Максимальное содержание лактобактерий регистрировалось в кишечнике поросят, получавших фитопробиотик с люцерной и барбарисом в комплексе с солями микроэлементов (седьмая группа). Так, содержание лактобактерий было выше показателей контрольной, второй, третьей, четвертой, пятой и шестой опытных групп, соответственно, на 10-й день исследований в 1,25 раза (на 1,1 IgKOE/r), в 1,22 раза (на 1,0 IgKOE/r), в 1,07 раза (на 0,4 IgKOE/r), в 1,04 раза (на 0,2 IgKOE/r), в 1.03 раза (на 0,1 IgKOE/r) и в 1,07 раза (на 0,3 IgKOE/r), на 20-й день - в 1,33 раза (на 1,5 IgKOE/r), в 1,29 раза (на 1,4 IgKOE/r), в 1,08 раза (на 0,5 IgKOE/r), в 1,07 раза (на 0,4 IgKOE/r), в 1,04 раза (на 0,3 IgKOE/r) и в 1.08 раза (на 0,5 IgKOE/r), на 30-й день - в 1,63 раза (на 2,9 IgKOE/r), в 1,54 раза (на 2,6 IgKOE/r), в 1,20 раза (на 1,2 IgKOE/r), в 1,12 раза (на 0,8 IgKOE/r), в 1,07 раза (на 0,5 IgKOE/r) и в 1,16 раза (на 1,0 IgKOE/r).

Динамика содержания в кишечиике поросят раннего отъема кишечной палочки и её гемолитических форм представлена на рисунке 5.

18 КОЕ/г

%

9,0

N4

-1-1-1-»-1

Фон 10 20 30 Д"и

7,0

0,0

Фон 10 20 30 Д™

А

Б

— - - 3 группа

— -А — 5 группа

— — 7 группа

I контрольная

— 2 группа

— -и — 4 группа

— •• — 6 группа

Рисунок 5. Динамика изменения кишечной паточки (А) и её гемолитических форм (Б) в кишечнике поросят раннего отъема

У поросят контрольной группы количество стафилококков, выделенных из кишечника за весь период исследований изменялось незначительно - от 3,01±0,08 до 2,98±0,061 ¿КОЕ/г.

В процессе опыта в кишечнике поросят третьей группы содержание стафилококков имело тенденцию к понижению по сравнению с контролем на 10-й день исследований - в 1,13 раза (на 0,36 1§КОЕ/г), на 20-й день - в 1,13 раза (на 0,35 ^КОЕ/г), на 30-й день - в 1,14 раза (на 0,38 1§КОЕ/г). Количество стафилококков в кишечнике поросят четвертой и шестой опытных групп также имели тенденцию к понижению во все сроки опыта. Так, на 10-й день исследований данный показатель был ниже значений контрольной группы в 1,18 и 1,05 раза (на 0,05 и 0,14 ^КОЕ/г), на 20-й день - в 1,19 и 1,05 раза (на 0,49 и 0,14 1§КОЕ/г), на 30-й день - в 1,18 и 1,03 раза (на 0,46 и 0,09 1§КОЕ/г). Особенно активно уровень стафилококков понижался в кишечнике поросят пятой и седьмой опытных групп. На 10-й день исследований данный показатель был ниже контрольных цифр в 1,17 и 1,23 раза (на 0,48 и 0,61 1§КОЕ/г), на 20-й день - в 1,25 и 1,30 раза (на 0,63 и 0,71 ^КОЕ/г), на 30-й день - в 1,25 и 1,39 раза (на 0,60 и 0,84 ^КОЕ/г).

В кишечнике поросят контрольной группы количество энтерококков находилось на уровне от 3,73 до 3,98 1§КОЕ/г. Содержание энтерококков в кишечнике поросят второй и третьей опытных групп имело незначительную тенденцию к понижению. Содержание энтерококков в кишечнике поросят четвертой и шестой

групп значительно понизилось rio сравнению с контрольными значениями. Самый низкий уровень содержания энтерококков в кишечнике регистрировали у поросят пятой и седьмой групп, он был ниже показателей контроля на 10-й день - в 1,21 и 1,18 раза (на 0,70 и 0,60 lgKOE/r), на 20-й день - в 1,23 и 1,28 раза (на 0,73 и 0,85 IgKOE/r), на 30-й день - в 1,42 и 1,48 (на 1,15 и 1,26 lgKOE/r).

Показатели содержания клостридий и вульгарного протея представлены на рисунке 6.

2,0

lg КОЕ/г

Фон

10

20

1,4

0,7

0,0

lg КОЕ/г

^Ч Ч N V

ЗОДни

Фон

10

20

30 Дни

——— 1 контрольная " " " 3 группа —А ~ 5 группа — — 7 группа

~~ 2 группа i — 4 группа • — 6 группа

Рисунок 6. Динамика содержания клостридий (А) и вульгарного протея (Б) в кишечнике поросят раннего отъема

В кишечнике поросят контрольной группы содержание дрожжеподобных грибов колебалось от 3,39 до 3,51 1§КОЕ/г. Наиболее активный процесс понижения количества дрожжеподобных грибов наблюдался в кишечнике поросят пятой и седьмой групп. Так, на 10-й день опыта их уровень в данных группах был ниже контрольных значений в 1,26 и 1,27 раза (на 0,71 и 0,74 ^КОЕ/г), на 20-й день - в 1,47 и 1,41 раза (на 1,13 и 1,01 ^КОЕ/г), на 30-й день - в 1,80 и 1,71 раза (на 1,51 и 1,41 ^КОЕ/г), а по сравнению с третьей опытной группой в эти сроки опыта в 1,14 и 1,15 раза (на 0,38 и 0,40 1ёКОЕ/г), в 1,15 и 1,10 раза (на 0,35 и 0,24 ^КОЕ/г), в 1,26 и 1,19 раза (па 0,49 и 0,39 ^КОЕ/г).

2.2.7 Эффективность применения фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема

Показатели, полученные при изучении влияния солей микроэлементов, про-биотика и фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов на массу тела,

заболеваемость гастроэнтеритами отъемного возраста и сохранность поросят представлены в таблицах 5 и 6.

Таблица 5 Влияние фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов на массу тела поросят раннего отъема

Группа животных (п=8) Живая масса, кг Среднесуточный прирост, г Абсолютный прирост, кг Относительный прирост, %

30-дневные 60-дневные 90-дневмые

1 7,09±0,06 П,98±0,18 18,74±0,03 194.0±4,0 11,65±0,26 22,6±0,24

2 6,95±0,09 12,3±0,25 *** 19,43±0,20 *** 208,0±3,0 *** 12,48±0,2 *** 23,6±0.19 ***

3 7,03±0,09 12,8±0,23 *** 20,2±0,34 *** 220,0±5,0 *** 13,2±0,28 *** 24,2±0.23 ***

4 7,01±0,09 13,39±0,23 *** 21,8±0,29 *** 247,0±4,0 *** 14,8±0,23 *** 25,7±0,17 ***

5 7,03±0,08 14,0±0,19 *** 24,16±0,41 *** 286,0±6,0 17,1±0,37 *** 27,510,24 ***

6 6,95±0,06 13,41 ±0,22 *** 22,7±0,42 263,0±6,0 *** 15,8±0,39 *** 26,6±0,28 ***

7 7,06±0,08 14,19±0,23 *** 25,7±0,37 *** 311,0±6,0 *** 18,7±0,36 *** 28.5±,28 ***

Таблица 6 Заболеваемость и сохранность поросят при применении фитопробиотиков _в комплексе с солями микроэлементов__

Показатель Группа животных (п=8)

Контрольная 2 3 4 5 6 7

Количество животных, голов 8 8 8 8 8 8 8

Заболело, голов 6 6 5 3 2 3 2

Заболеваемость, % 75 75 62,5 37,5 25 37,5 25

Продолжительность болезни, сут. 6,5 5,7 4,2 2,6 2,4 2,6 2,2

Сохранность, % 100 100 100 100 100 100 100

Результаты, полученные при расчетах экономической эффективности применения солей микроэлементов, пробиотика и фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема, показали, что экономическая окупаемость на один рубль затрат была максимальной в четвертой, пятой, шестой и седьмой группах - 3,8; 4,8; 4,6; 6,2 руб., тогда как в контрольной, второй и третьей группах она составила 2,1;.2,3; 2,7 руб.

ВЫВОДЫ

1. Исследованиями содержания микроэлементов (железо, медь, цинк, марганец, кобальт) в почвах, воде, основных кормах, суточных рационах и крови выявлен дефицит меди и цинка в организме поросят раннего отъема.

2. Установлено, что дефицит меди и цинка вызывают в организме поросят раннего отъема нарушение эритрогемопоэза, белкового и минерального обмена, снижение показателей иммунного статуса и микробиоценоза кишечника.

3. Применение фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов способствует нормализации гематологических показателей, что выражается:

а) повышением количества эритроцитов в 1,12; 1,1; 1,1 и 1,5 раза; лейкоцитов -в 1,31; 1,35; 1,34 и 1,49 раза; тромбоцитов - в 1,06; 1,05; 1,11 и 1,08 раза; гемоглобина - в 1,1; 1,09; 1,16 и 1,2 раза; сегментоядерных нейтрофилов - в 1,43; 1,49; 1,51 и 1,62 раза;

б) уменьшением количества лимфоцитов - в 1,07; 1,06; 1,07 и 1,09 раза.

4. Фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов увеличивают показатели протеинограммы поросят раннего отъема, которая выражается:

а) увеличением количества общего белка - в 1,09; 1,14; 1,1 и 1,16 раза; альбуминов - в 1,1 ; 1,17; 1,12 и 1,2 раза; бета-глобулинов - в 1,13; 1,25; 1,18 и 1,31 раза; гамма-глобулинов - в 1,37; 1,59; 1,52 и 1,67 раза;

б) уменьшением количества альфа-глобулинов - в 1,2; 1,4; 1,35 и 1,5 раза.

5. Применение фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов активизирует в организме поросят раннего отъема показатели минерального обмена в виде увеличения в сыворотке крови общего кальция - в 1,12; 1,16; 1,15 и 1,2 раза; неорганического фосфора - в 1,15; 1,24; 1,19 и 1,26 раза; меди - в 1,69; 1,83; 1,72 и 1,91 раза и цинка-в 1,3; 1,4; 1,22 и 1,56 раза.

6. Фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов повышают в организме поросят раннего отъема показатели иммунного статуса путем увеличения:

а) бактерицидной, лизоцимной и фагоцитарной активности сыворотки крови, соответственно, в 1,18; 1,25; 1,2 и 1,29 раза; в 1,12; 1,15; 1,14 и 1,17 раза; в 1,3; 1,46; 1,4 и 1,56 раза;

б) количества Т-лимфоцитов - в 1,14; 1,24; 1,18 и 1,29 раза; В-лимфоцитов в 1,36; 1,66; 1,52 и 1,84 раза; Т-хелперов - в 1,17; 1,29; 1,23 и 1,36 раза; Ig А - в 1,74; 2,25; 2,02 и 2,58 раза; Ig M - в 1,47; 1,72; 1,62 и 1,85 раза; Ig G - в 1,69; 2,03; 1,84 и 2,2 раза.

в) уменьшения количества Т-супрессоров в 1,25; 1,4; 1,34 и 1,63 раза.

7. Фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов способствуют восстановлению микробиоценоза кишечника, выражающегося в:

а) увеличении количества лакто- и бифидофлоры, соответственно, в 1,46;

1,52; 1,4 и 1,63 раза; в 1,13; 1,19; 1,14 и 1,21 раза;

б) уменьшении стафилококков - в 1,18; 1,25; 1,03 и 1,39 раза; энтерококков -в 1,35; 1,42; 1,29 и 1,48 раза; клостридий - в 1,29; 1,34; 1,21 и 1,47 раза, вульгарного протея - в 2,39 и 2,53 раза; дрожжеподобных грибов - в 1,51; 1,8; 1,5 и 1,71 раза, а также вытеснения гемолитической кишечной папочки из энтеробиоценоза.

8. Применение фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов оказывает ростостимулнрующее действие (среднесуточные приросты массы тела повысились с 194 г до 247-3II г) и обладает высокой эффективностью (62,5-75,0%) для профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема.

9. Экономическая эффективность при использовании фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема на один рубль затрат составляет 3,8; 4,8; 4,6 и 6,3 рубля, против 2,1 рубля в контрольной группе.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В свиноводстве для профилактики микроэлементозов, вторичных иммуно-дефицитов, дисбактериозов, послеотьемных гастроэнтеритов, а также повышения живой массы и сохранности молодняка, целесообразно вносить в рацион поросят отъемного возраста фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов.

2. С целыо повышения иммунного статуса, естественного микробиоценоза кишечника, среднесуточных приростов, сохранности и профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема предлагается использовать разработанные научно-практические рекомендации, утвержденные Управлением ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан «Применение фитопробиотических композиций на основе лактобакгерий и лекарственного растительного сырья в комплексе с солями микроэлементов для профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят и поросят послеотъемного возраста» (Уфа, 2009).

3. Полученные результаты исследований могут быть использованы при составлении научной и информационной литературы, в учебном процессе, при проведении лекционных и лабораторно-практических занятий по микробиологии, иммунологии, фармакологии, а также в ветеринарной практике.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Мюристая, М. Л. Иммунная реактивность поросят при недостаточности микроэлементов / М. Л. Мюристая, А. В. Андреева // Проблемы и перспективы развития инновационной деятельности в агропромышленном производстве / Мат. всерос. науч.-практич. конф. - Уфа, 2007. - С. 226-228.

2. Мюристая, M. Л. Влияние недостатка микроэлементов на иммунную реактивность организма поросят / М. Л. Мюристая, А. В. Андреева /7 Роль молодых ученых в реализации национального проекта «Развитие АПК» / Сб. мат. междунар. науч.-практич. конф,- Москва, 2007. - С. 277-278.

3. Николаева, О. Н. Эффективность применения фитопробиотиков и полисоли микроэлементов для профилактики желудочно-кишечных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных / О. Н. Николаева, М. Л. Мюристая, А. В. Андреева //Успехи современного естествознания. - 2007. - № 12. - С. 32-33.

4. Nikolayeva, О. N. Aplication phitorobiotics and polysalts of microcells in animal industries / O.N. Nikolayeva, M. L. Mjyristaya, A. V. Andreeva // European journal of natural history. - 2007. - Vol. 6. - P. 145.

5. Мюристая, M. Л. Стимуляция роста и развития поросят фитопробиоти-ками / М. Л. Мюристая, А. В. Андреева // Интеграция аграрной науки и производства: Состояние, проблемы и пути их решения / Мат. всерос. науч.-практич. конф. - Уфа, 2008. - С. 109-111.

6. Мюристая, М. Л. Влияние фитопробиотиков и полисолей микроэлементов на нормофлору желудочно-кишечного тракта поросят-отьемышей / М. Л. Мюристая, А. В. Андреева // Молодежная наука и АПК: проблемы и перспективы / Мат. II всерос. науч.-практич. конф. - Уфа, 2008. - С. 112-115.

7. Андреева, А. В. Микробиоценоз кишечника поросят на фоне недостаточности микроэлементов в период отъема н методы их коррекции / А. В. Андреева, M. JI. Мюристая // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана.- Казань, 2008. - Т.191. - С. 20-23.

8. Андреева, А. В. Применение фитопробиотических композиций на основе лактобактерий и лекарственного растительного сырья в комплексе с солями микроэлементов для профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят и поросят послеотъемного возраста / А. В. Андреева, О. Н. Николаева, М. Л. Мюристая // Рекомендации. - Уфа, 2009. - 20 с.

Подписано в печать "14" марта 2009 г. Формат 60x84. Усл. печ. л. 1,41. Уч.-изд.л. 1,64. Бумага офсетная. Гарнитура 'Гаймс. Печать оперативная, отпечатано в полном соответствии с предоставленными диапозитивами в типографии издательства "ХАН". Заказ 546-2. Тираж 100 экз. Адрес: г. Уфа, Пр. Октября, 16. Тел./факс: (347)223-89-38, моб.: 8-927-32-48-360.

Актуальность темы. Для решения проблемы обеспечения населения продуктами питания большое значение отводится свиноводству как отрасли наиболее скороспелого животноводства. Однако рентабельное ведение свиноводства возможно только на основе его интенсификации, связанной с повышением скорости роста при выращивании и откорме животных, улучшением конверсии корма и увеличением выхода продукции на каждую голову, имеющуюся к началу хозяйственного года (С. И. Прудников, 1996).

В тоже время перевод свиноводства на промышленную основу резко изменил условия среды обитания животных. При этом технологические приёмы, используемые на крупных свиноводческих фермах, часто не обеспечивают биологические потребности свиней. Несбалансированность рационов, особенно по биологически активным веществам (витамины, макро- и микроэлементы, ан-тиоксиданты), нарушение параметров микроклимата, отсутствие активного моциона, нерациональное применение антибиотиков, а также не соблюдение вете-ринарно-санитарных правил приводят к нарушению обмена веществ, снижению естественной резистентности и иммунологической реактивности организма животных и, как следствие, к высокой заболеваемости и низкой продуктивности свиней. Поэтому вопросы, связанные с изысканием новых способов и средств повышения резистентности и продуктивности животных, остаются актуальными (Л. А. Литвина с соавт., 2000; А. Ф. Бакшеев, 2003).

В последние годы в животноводстве и ветеринарной медицине широко применяются симбиотические кормовые добавки (пробиотики, пребиотики), представляющие собой стабилизированные культуры симбионтных микроорганизмов или продукты их ферментации. Важными достоинствами таких препаратов являются их полная утилизация организмом животных, отсутствие побочных эффектов и ущерба, как здоровью конечного потребителя продукции, так и окружающей среде. Корректируя микробиоценоз пищеварительной системы, пробиотики оказывают разностороннее положительное влияние на организм. Назначение пробиотических препаратов способствует оптимизации метаболических процессов в организме, лучшему усвоению питательных, жизненно необходимых для хозяина, активизации его иммунного статуса и повышению его устойчивости к факторам окружающей среды (Е. В. Зинченко с соавт., 2003; К. В. Лушников с соавт., 2005; А. Н. Панин, 2006; И. Р. Селиванова, 2007).

В связи с появлением новых пробиотиков и синбиотических композиций возникает необходимость изучения их влияния на различные физиологические, биохимические и продуктивные показатели животных с различным физиологическим состоянием, условиями кормления, содержания и уровнем продуктивности (Д. С. Учасов, 2006).

Стойкое увеличение производства продуктов животноводства возможно на базе организации полноценного кормления животных. Среди факторов кормления важное место занимают минеральные вещества, недостаток или излишек которых наносит значительный ущерб животноводству, сдерживает рост поголовья, снижает производительность и плодовитость, вызывает заболевания у животных и ухудшает качество продукции. Макро- и микроэлементы должны поступать в организм животных в оптимальных количествах и соотношениях и в строгом соответствии с потребностями продуктивных животных.

Исследованиями В. Т. Самохина с соавт. (1985), Г. Н. Вайзенен (2001), В. И. Иванова с соавт. (2003) установлено, что эссенциальные микроэлементы железо, медь, цинк, марганец, кобальт влияют на резистентность животных. При их дефиците в организме развиваются вторичные иммуннодефицитные состояния со всеми вытекающими последствиями (М. Г. Алигаджиев, 2007).

В связи с вышеизложенным, выяснение влияния дефицита микроэлементов на клинико-биохимический и иммунный статус, микробиоценоз кишечника, рост и развитие, а также разработка мероприятий по коррекции микроэлемен-тозов является актуальной.

Целыо работы явилось изучение возможности коррекции фитопробио-тиками в комплексе солями микроэлементов иммунного статуса, гематологических показателей, биохимической реактивности, минерального обмена и микробиоценоза кишечника поросят при дефиците меди и цинка, а также эффективность вышеназванных композиций для профилактики гастроэнтеритов у поросят раннего отъема.

В связи с этим, были поставлены следующие задачи:

1. Оценить обеспеченность поросят раннего отъема микроэлементами путем исследования содержания их в почвах, воде, основных кормах для свиноводческого хозяйства и крови поросят;

2. Изучить морфологические показатели крови поросят раннего отъема (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, гемоглобина, лейкограммы) при дефиците меди и цинка и их коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов;

3. Установить изменения белкового спектра крови поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов со сравнительной оценкой динамики содержания общего белка, альбуминов, а-, Р~ и у-глобулинов;

4. Изучить изменения минерального состава крови поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов с учетом динамики макро- и микроэлементов;

5. Изучить иммунную реактивность поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и установить возможности её коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов со сравнительной оценкой: а) состояния естественной резистентности (динамика бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови) и активности реакций фагоцитоза; б) состояния клеточного (динамика Т-лимфоцитов (СБЗ+), Т-хелперов (С04+), Т-супрессоров (СБ8+), В-лимфоцитов (СБ 19+) и гуморального звена иммунитета (динамика иммуноглобулинов А, М, О);

6. Определить состояние микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и возможность его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов с учетом динамики нормо- и условно-патогенной микрофлоры;

7. Выяснить эффективность применения фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики послеотъемных гастроэнтеритах у поросят с учетом показателей прироста живой массы и сохранности поголовья.

Научная новизна. Впервые проведены комплексные исследования гематологических показателей, динамики белкового спектра, микроэлементного состава крови, клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности и иммунологической реактивности, состояния энтеробиоценоза, прироста живой массы, сохранности поросят и выявлены биологические особенности состояния иммунной системы, формирования микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема при недостаточности меди и цинка и разработаны эффективные методы их коррекции с применением фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов.

Проведенными исследованиями установлены высокие иммунокорреги- ' рующие, гемопоэтические, повышающие колонизационную резистентность нормофлоры кишечника, прирост и сохранность поросят раннего отъема свойства фитопробиотиков на основе лактобактерий и лекарственного растительного сырья (люцерна посевная, чистотел большой, барбарис обыкновенный) в комплексе с солями микроэлементов на фоне недостаточности меди и цинка, обоснована эффективность их применения для профилактики послеотъемных гастроэнтеритов.

Теоретическая и практическая значимость работы. На основании полученных результатов гематологических, биохимических исследований, содержания микроэлементов, показателей естественной резистентности, фагоцитоза, Т - и В-систем иммунитета, микробиоценоза кишечника, данных прироста массы тела и сохранности поросят раннего отъема на фоне недостаточности меди и цинка, с учетом влияния на организм фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов обобщены биологические закономерности гемо- и лейкопоэза, иммуногенеза, колонизационной резистентности, способствующие повышению иммунного статуса и естественного микробиоценоза кишечника.

Экспериментальными данными обоснованы механизмы восстановления иммунного равновесия, колонизационной резистентности кишечника на фоне нарушенного иммунного статуса и микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка.

Результаты экспериментальных исследований, выполненных по плану научных исследований ФГОУ ВПО «Башкирский ГАУ» (номер госрегистрации темы ВНТИЦ И081205134104), включены в рекомендации, утвержденные Управлением ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан «Применение фитопробиотических композиций на основе лактобактерий и лекарственного растительного сырья в комплексе с солями микроэлементов для профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят и поросят послеотъемно-го возраста» (Уфа, 2009) и используются в свиноводческих хозяйствах Республики Башкортостан в целях повышения иммунного статуса, нормализации микробиоценоза кишечника, повышения прироста, сохранности и профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема.

Результаты исследований также используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по микробиологии и иммунологии в Башкирском государственном аграрном университете, Оренбургском государственном аграрном университете, Казанской государственной академии ветеринарной медицины.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и апробированы на международной конференции «Роль молодых ученых в реализации национального проекта «Развитие АПК» (Москва, 2007); на всероссийских конференциях: «Проблемы и перспективы развития инновационной деятельности в агропромышленном производстве» (Уфа, 2007), «Интеграция аграрной науки и производства: Состояние, проблемы и пути их решения» (Уфа, 2008), «Молодежная наука и АПК: проблемы и перспективы» (Уфа, 2008).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Гематологические показатели поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и их изменения под влиянием фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов;

2. Динамика биохимических показателей и минерального обмена у поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и возможности их коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов;

3. Состояние иммунного статуса поросят раннего отъема при дефиците меди и цинка и возможности его коррекции фитопробиотиками в комплексе с солями микроэлементов;

4. Оценка естественного микробиоценоза кишечника поросят раннего отъема (нормофлоры и условно-патогенных микроорганизмов) при дефиците меди и цинка и его изменения под влиянием фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов;

5. Эффективность фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики послеотъемных гастроэнтеритов поросят.

Публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в семи научных статьях, в том числе одна - в ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендованных экспертным советом ВАК РФ и в рекомендации, утвержденной Управлением ветеринарии при МСХ Республики Башкортостан.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и практических предложений, приложения; изложена на 138 страницах компьютерного текста. Работа иллюстрирована 27 таблицами, 20 рисунками. Библиографический список включает 190 работ, в том числе 30 иностранных авторов.

выводы

1. Исследованиями содержания микроэлементов (железо, медь, цинк, марганец, кобальт) в почвах, воде, основных кормах, суточных рационах и крови выявлен дефицит меди и цинка в организме поросят раннего отъема.

2. Установлено, что дефицит меди и цинка вызывают в организме поросят раннего отъема нарушение эритрогемопоэза, белкового и минерального обмена, снижение показателей иммунного статуса и микробиоценоза кишечника.

3. Применение фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов способствует нормализации гематологических показателей, что выражается: а) повышением количества эритроцитов в 1,12; 1,1; 1,1 и 1,5 раза; лейкоцитов - в 1,31; 1,35; 1,34 и 1,49 раза; тромбоцитов - в 1,06; 1,05; 1,11 и 1,08 раза; гемоглобина - в 1,1; 1,09; 1,16 и 1,2 раза; сегментоядерных нейтрофилов — в 1,43; 1,49; 1,51 и 1,62 раза; б) уменьшением количества лимфоцитов - в 1,07; 1,06; 1,07 и 1,09 раза.

4. Фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов увеличивают показатели протеинограммы поросят раннего отъема, которая выражается: а) увеличением количества общего белка - в 1,09; 1,14; 1,1 и 1,16 раза; альбуминов - в 1,1; 1,17; 1,12 и 1,2 раза; бета-глобулинов - в 1,13; 1,25; 1,18 и 1,31 раза; гамма-глобулинов - в 1,37; 1,59; 1,52 и 1,67 раза; б) уменьшением количества альфа-глобулинов - в 1,2; 1,4; 1,35 и 1,5 раза.

5. Применение фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов активизирует в организме поросят раннего отъема показатели минерального обмена в виде увеличения в сыворотке крови общего кальция - в 1,12; 1,16; 1,15 и 1,2 раза; неорганического фосфора - в 1,15; 1,24; 1,19 и 1,26 раза; меди - в 1,69; 1,83; 1,72 и 1,91 раза и цинка-в 1,3; 1,4; 1,22 и 1,56 раза.

6. Фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов повышают в организме поросят раннего отъема показатели иммунного статуса путем увеличения: а) бактерицидной, лизоцимной и фагоцитарной активности сыворотки крови, соответственно, в 1,18; 1,25; 1,2 и 1,29 раза; в 1,12; 1,15; 1,14 и 1,17 раза; в 1,3; 1,46; 1,4 и 1,56 раза; б) количества Т-лимфоцитов - в 1,14; 1,24; 1,18 и 1,29 раза; В-лимфоцитов в 1,36; 1,66; 1,52 и 1,84 раза; Т-хелперов - в 1,17; 1,29; 1,23 и 1,36 раза; А - в 1,74; 2,25; 2,02 и 2,58 раза; ^М - в 1,47; 1,72; 1,62 и 1,85 раза;

О - в 1,69; 2,03; 1,84 и 2,2 раза. в) уменьшения количества Т-супрессоров в 1,25; 1,4; 1,34 и 1,63 раза.

7. Фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов способствуют восстановлению микробиоценоза кишечника, выражающегося в: а) увеличении количества лакто- и бифидофлоры, соответственно, в 1,46; 1,52; 1,4 и 1,63 раза; в 1,13; 1,19; 1,14 и 1,21 раза; б) уменьшении стафилококков - в 1,18; 1,25; 1,03 и 1,39 раза; энтерококков - в 1,35; 1,42; 1,29 и 1, 48 раза; клостридий - в 1,29; 1,34; 1,21 и 1,47 раза, вульгарного протея - в 2,39 и 2,53 раза; дрожжеподобных грибов — в 1,51; 1,8; 1,5 и 1,71 раза, а также, вытеснения гемолитической кишечной палочки из эн-теробиоценоза.

8. Применение фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов оказывает ростостимулирующее действие (среднесуточные приросты массы тела повысились с 194 г до 247-311 г) и обладает высокой эффективностью (62,575,0%) для профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема.

9. Экономическая эффективность при использовании фитопробиотиков в комплексе с солями микроэлементов для профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема на один рубль затрат составляет 3,8; 4,8; 4,6 и 6,3 рубля, против 2,1 рубля в контрольной группе.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В свиноводстве для профилактики микроэлементозов, вторичных им-мунодефицитов, дисбактериозов, послеотъемных гастроэнтеритов, а также повышения живой массы и сохранности молодняка, целесообразно вносить в рацион поросят отъемного возраста фитопробиотики в комплексе с солями микроэлементов.

2. С целью повышения иммунного статуса, естественного микробиоценоза кишечника, среднесуточных приростов, сохранности и профилактики гастроэнтеритов поросят раннего отъема предлагается использовать разработанные научно-практические рекомендации, утвержденные Управлением ветеринарии при Министерстве сельского хозяйства Республики Башкортостан «Применение фитопробиотических композиций на основе лактобактерий и лекарственного растительного сырья в комплексе с солями микроэлементов для профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят и поросят послеотъ-емного возраста» (Уфа, 2009).

3. Полученные результаты исследований могут быть использованы при составлении научной и информационной литературы, в учебном процессе, при проведении лекционных и лабораторно-практических занятий по микробиологии, иммунологии, фармакологии, а также в ветеринарной практике.