Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Иммунный статус, микробиоценоз кишечника поросят и методы их коррекции биологически активными продуктами пчеловодства

РГ6 од

/ 8 ИЮН 1998

На правах рукописи МАННАПОВА РАМЗИЯ ТИМЕРГАЛЕЕВНА

ИММУННЫЙ СТАТУС, МИКРОБИОЦЕНОЗ КИШЕЧНИКА ПОРОСЯТ И МЕТОДЫ ИХ КОРРЕКЦИИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫМИ ПРОДУКТАМИ ПЧЕЛОВОДСТВА

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Специальность 16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Научный консультант: Член-корреспондент РАСХН, профессор, доктор ветеринарных наук А.Н.Панин

Москва -1998

Работа выполнена на кафедре паразитологии и микробиологии Башкирского государственного аграрного университета (г. Уфа)

Научный консультант - член-корр. РАСХН, доктор ветеринарных наук, профессор А.Н.Панин.

Официальные оппоненты: Доктор ветеринарных наук, профессор Душук Р.В. (ВГНКИ) Доктор ветеринарных наук, профессор Бурлаков В.А. (Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И.Скрябина}

Доктор ветеринарных наук, профессор Даугалиева Э.Х.( ВИГИС -РАСХН)

Ведущее учреждение - Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (РАСХН)

Защита состоится "25" июня 1998 г. в 14 часов, на заседании Специализированного совета Д 120.85.01 на соискание ученой степени доктора биологических наук при Всероссийском государственном научно-исследовательском институте контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.

Адрес института: 123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВГНКИ.

Автореферат разослан ' мая 1998 г.

Ученый секретарь Специализированного совета, кандидат ветеринарных наук

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. В последние годы появилось достаточное ко-пичество работ показывающих, что можно с успехом управлять иммунным этветом и при снижении функции иммунитета стимулировать её. Поэтому эдной из важных проблем медико-биологической и ветеринарной науки и практики является изыскание мер и средств, направленных на снижение действия неблагоприятных факторов на гомеостаз организма и профилактику развития иммунодефицитного состояния (И.М.Карпуть, 1974,1981; В.М.Земсков,1981; Р.М.Петров, 1983, 1984; Э.Х.Даугалиева, В.В.Филиппов, 1991; С.И.Прудников, 1996).

В ветеринарии изучены и предложены большое разнообразие иммуно-модулирующих веществ. Но, в основном, все они имеют химическую природу и часто в той или иной степени оказывают супрессивное воздействие на иммунную систему организма.

В последние годы в России и за рубежом открыты уникальные свойства биологически активных продуктов пчеловодства (БАПП). Они исследуются в самых различных направлениях биологической, ветеринарной и медицинской наук. Но работ, касающихся изучения влияния их на иммунную систему недостаточно и они являются, в основном, односторонними и касаются чаще всего конкретной ситуации или болезни (А.М.Ногаллер, 1987; А .Я. Джари-мов, 1991; Ю.А.Филиппов с соавт., 1995; Ш.М.Омаров, 1995; Е.И. Якушева, 1995; Н.С. Асфандиярова с соавт., 1995; Н.В. Дмитриева, 1995; И.М.Нагорная с соавт., 1997).

С другой стороны сегодня отмечаются значительные отклонения в ау-гофлоре животных, вызванные такими явлениями, как нарушения условий содержания и кормления животных, постоянные стрессовые воздействия различной этиологии, широкое и бесконтрольное применение антибактериальных препаратов и другие факторы, способствующие негативным сдвигам бифидофлоры. На фоне дефицита бифидофлоры, нарушаются нормальные соотношения между облигатными микроорганизмами кишечника обуславливающие снижение количества или полную элиминацию лактобацилл, увеличение или снижение кишечных палочек и повышение ассоциации условно-патогенных бактерий. Это оказывает неблагоприятное влияние на секреторную функцию кишечника, процессы всасывания и некоторые показатели белкового, липидного и минерального обмена, витаминсинтезирующую и ферментативную функции, создает условия для дисбактериоза (О.В. Чахава, 1972; Б.В.Пинегин, 1984; Г.И.Гончарова с соавт., 1989; A.A. Шубин, с соавт., 1994; П.И.Жданов, 1994; А.А.Воробьев, с соавт., 1995).

Эти исследования явились основой для внедрения в ветеринарную практику композиций пробиотических препаратов обогащенных витаминами, антибиотиками, ростковыми добавками, молочной кислотой, лактозой, микроэлементами. Однако, введение в организм пробиотиков, полученных вне самого организма, не всегда может иметь достаточный эффект.

Отечественными и зарубежными исследователями широко изучаются ассоциативные заболевания поросят. При этом, основное внимание уделяется вопросам изучения смешанных инвазий и эффективности дегельминтизации разными антгельминтными препаратами с учетом возраста животных, условий содержания, кормления и других факторов (В.С.Ершов, Э.Х.Даугалиева, 1982; Е.А. Шваб,1983; М.В. Якубовский, 1984, 1986; Т.Г.Никулин с соавт., 1988; Э.А.Данилявичюс, 1988, 1989; Р.Т.Сафиуллин, 1992, 1996; Л.М.Коновалов, К.Г.Казначеев, 1994; С.В.Березкина, 1992, 1997; З.М. Губейдуллина, Ю.С.Докторов, 1997; А.М.Сазанов, 1997; J.D. Baggot, 1994; J.Cabaret, 1995).

Работы многих исследователей посвящены определению состояния иммунной системы, анализу механизмов иммунного ответа при смешанных гельминтозах свиней и возможности его иммунокоррекции в каждом конкретном случае (A.C. Бессонов, 1973, 1984, 1996; Е.И.Малахова, 1973, 1980; Е.С.Лейкина, 1978, 1981; H.H. Озерецковская, 1978; Г.И.Апухтин, 1974, 1984; А.П.Матусявичус, 1984; О.Г.Полетаева, 1984, 1987; В.К.Бережко с соавт., 1992; С.И.Белозеров, 1990; М.С.Жаков, 1990; Э.Х.Даугалиева с соавт., 1996, 1997; Т.Н.Константинова с соавт., 1997; Г.М.Камалетдинова, Ю.С.Докторов, 1997; С.М. Faubert 1982 ; J.Urban et al., 1984; D.Wakelin, 1984; M.Katrinca, 1986).

Однако, мало исследований посвященных изучению ассоциации аска-риозов с другими нематодозами и инфекционными болезнями и, в частности, с сальмонеллезами ( А.П.Матусявичус с соавт., 1984; М.С.Жаков с соавт., 1986, 1991; В.С.Прудников, С.К.Гончаров, 1987).

Анализ данных литературы и создавшейся ситуации в традиционных СТФ, неблагополучных по сальмонеллезу и аскариозу показал, что мероприятия по иммунизации поросят к месячному возрасту и дегельминтизации в возрасте свыше 50 дней не способствуют развитию должного иммунного баланса в организме. Это вызвано тем, что развивающийся аскариоз подавляет иммунные механизмы, и вакцинация такого организма не способствует достаточной активизации антителогенеза. В последующем дегельминтизация лишь дальше подавляет ослабленную иммунную систему и в итоге оба мероприятия (иммунизация и дегельминтизация) оказываются мало - или неэффективными. К тому же многие эффективные антгельминтики обладают супрессивной активностью в отношении иммунной системы.

Следовательно, изучение иммунного статуса, микробиоценоза кишечника л методов их коррекции иммуностимуляторами, не имеющими химическую трироду, способные снять супрессивное воздействие антгельминтика, при :овместном их применении, является перспективным и представляет определенный научный и практический интерес.

Целью работы явилось - изучить возможности коррекции иммуногенеза и естественного микробиоценоза кишечника с применением БАПП в норме, а также при ассоциативном сальмонеллезно- аскариозном заболевании поросят и его профилактике.

В соответствии с целью работы в задачи исследований входило:

1. Установить влияние различных доз БАПП: прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на:

-факторы естественной резистентности;

-динамику Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-супрессоров и В-ЕАС-лимфоцитов в крови и лимфоидных органах;

-динамику площадей структурных компонентов (Т- и В-зависимых зон) лимфатических узлов, селезенки и на структуру тимуса.

2.Изучить влияние различных доз БАПП на состояние естественного микробиоценоза кишечника:

-динамику бифидо- и лактобактерий;

-динамику условно-патогенных микроорганизмов.

3. Исследовать влияние низких, средних и высоких доз БАПП на прирост массы тела и сохранность поросят.

4.Изучить иммунный статус организма, микробиоценоз кишечника и изыскать средства и методы иммунокоррекции при ассоциативном сальмо-неллезно- аскариозном заболевании поросят при иммунизации живой сухой вакциной из штамма ТС-177 на фоне дегельминтизации ринтал 10% грануля-том ( во второй серии опытов универмом 0,2%) и параллельной стимуляции прополисом, с сравнительной оценкой:

-естественной резистентности, антителогенеза и тимического индекса;

-динамики Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-супрессоров и В-ЕАС-лимфоцитов в крови, лимфатических узлах, селезенке, тимусе;

- иммуноморфологической перестройки в центральных и периферических органах иммуногенеза;

- гистохимической дифференциации Т-и В-лимфоцитов реакциями на неспецифическую эстеразу (НЭ) и щелочную фосфатазу (ЩФ);

- динамики клеточного состава костного мозга;

- динамики микробной ассоциации кишечника: бифидо- и лактобактерий и условно- патогенных микроорганизмов;

-показателей прироста живой массы и сохранности поросят.

Научная новизна исследований заключается в следующем:

- изучено влияние различных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на глубокие иммунологические, иммуноморфологические реакции в центральных и периферических органах иммуногенеза, состояние естественного микробиоценоза кишечника и установлена степень коррекции их, в зависимости от доз БАПП;

- определена динамика иммунного статуса и ассоциации нормофлоры и условно- патогенных микроорганизмов при ассоциативном сальмонеллезно-аскариозном заболевании поросят и его профилактике в условиях традиционных СТФ;

-установлен оптимальный вариант коррекции иммуногенеза и микробиоценоза кишечника при ассоциативном сальмонеллезно- аскариозном заболевании поросят в условиях традиционных СТФ;

-для стимуляции иммуногенеза, снятия супрессивного воздействия ант-гельминтиков, активизации бифидо- и лактофлоры кишечника, при профилактике ассоциативного сальмонеллезно- аскариозного заболевания поросят, предложен БАПП - прополис.

Теоретическая и практическая значимость работы.

- Данные о влиянии различных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на иммунный статус и микробиоценоз кишечника служат биологической основой для разработки оптимальных методов коррекции иммуногенеза и естественного микробиоценоза для применения БАПП в ветеринарии и апитерапии.

- Экономичность, доступность, удобство и простота применения, высокая биологическая активность прополиса позволяет рекомендовать производству, в качестве иммуностимулятора применение его для коррекции иммуногенеза и естественного микробиоценоза кишечника поросят. Среднесуточные приросты живой массы повышаются на 76% при 100% сохранности поросят.

-Установлено, что в традиционных СТФ, неблагополучных по ассоциативному сальмонеллезно- аскариозному заболеванию, иммунизация сухой живой вакциной из штамма ТС-177 на фоне дегельминтизации ( на стадии миграции личинок) и параллельной стимуляции прополисом способствует созданию в организме поросят прочного иммунного баланса и оптимального микробиоценоза кишечника. Среднесуточные приросты живой массы достигают 396,5 г, при 96,7%-ной сохранности поросят.

-Доказано, что применение антгельминтика универма 0,2%, по сравнению с ринтал 10% гранулятом, способствует повышению среднесуточных приростов живой массы на 56,5 г (396,5 против 340,0 г, контроль: здоровые - 182,2 г, больные - 67,7 г).

Реализация результатов. Рекомендации: 1. "Иммуноморфологические перестройки в лимфоидных органах под влиянием различных доз БАПП:

прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка" (Москва, 1996); 2. "Коррекция естественного микробиоценоза кишечника при ассоциативном сальмонеллезно - аскариозном заболевании поросят и его профилактике" (Москва, 1996); 3. "Применение продуктов пчеловодства для стимуляции иммуногенеза и коррекции микробиоценоза кишечника поросят" (Москва,

1997). 4. " Использование препаратов прополиса для коррекции иммунитета при сальмонеллезах и ассоциативных сальмонеллезно - аскариозных заболеваниях поросят в условиях традиционных СТФ республики Башкортостан" (Москва, 1997) используются в традиционных СТФ колхозов, совхозов, АКХ республики Башкортостан в целях повышения иммунного статуса, нормализации естественного микробиоценоза кишечника и получения высоких привесов живой массы и сохранности поголовья животных.

Результаты исследования используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по микробиологии и иммунологии в Башкирском государственном аграрном и медицинском университетах, Омском государственном университете ветеринарной медицины, Оренбургском государственном аграрном университете, Казанской государственной академии ветеринарной медицины.

Апробация работы. Основные теоретические и практические положения диссертационной работы доложены и получили положительную оценку на 94....106 научных конференциях Башкирского государственного аграрного университета, Всесоюзной конференции " Достижения ветеринарной и зоотехнической науки в животноводство" ( Казань, 1985); X Всесоюзном съезде анатомов, гистологов и эмбриологов (Винница, 1986); Всесоюзных и Всероссийских съездах и конференциях по апитерапии ( Вологда, 1987; Днепропетровск, 1988; Киев- Львов, 1990; Гадяч, 1991; Рыбное, 1993, 1995); Всесоюзной конференции "Возрастная и экологическая морфология животных в условиях интенсивного животноводства" (Ульяновск, 1987); Всероссийском съезде физиологов Уральского региона и Поволжья "Физиологические механизмы адаптации человека и животных" (Свердловск, 1990); на Всероссийском координационном совещании гельминтологов (Москва, 1997); на Всероссийском симпозиуме "Роль российской гельминтологической школы в развитии паразитологии" (Москва, 1997); на Всероссийской конференции "Актуальные вопросы медицинской паразитологии" (Санкт-Петербург,

1998), а также на многих республиканских и межвузовских научных конференциях (Казань, 1990, 1996; Уфа, 1986, 1990, 1995, 1997).

Публикация результатов исследования. Основные положения диссертационной работы изложены в 33 работах, опубликованных в журналах, тематических сборниках, материалах съездов и конференций.

На защиту диссертации выносятся следующие основные положения:

1. Биологически активные продукты пчеловодства - прополис, цветочная пыльца и маточное молочко оказывают неидентичное воздействие на иммунную систему и микробиоценоз кишечника поросят, в зависимости от вида и дозы препарата:

- наиболее выраженными иммуногенными свойствами обладает маточное молочко, несколько ниже прополис и уступает им цветочная пыльца;

- низкие дозы БАПП восстанавливают нарушенный иммунный статус и микробиоценоз кишечника до нижнего уровня их физиологических норм;

- средние дозы БАПП обладают высокими иммунокоррегирующими свойствами и активизируют бифидо - и лактофлору кишечника;

-высокие дозы БАПП вызывают в организме иммунодефицита и дисбак-териозы.

2. Ассоциативные сальмонеллезно- аскариозные заболевания поросят в условиях традиционных СТФ вызывают глубокие нарушения иммунологических, иммуноморфологических, гистохимических процессов в крови, в центральных и периферических органах иммуногенеза и дисбактериозы в кишечнике.

3. В традиционных СТФ, неблагополучных по ассоциативному сальмо-неллезно- аскариозному заболеванию, иммунизация поросят сухой живой вакциной из штамма ТС-177, на фоне дегельминтизации ( на стадии миграции личинок) и параллельной стимуляции прополисом, способствуют созданию прочного иммунного баланса в организме и естественного микробиоценоза кишечника с активным повышением бифидобактерий и лактобацилл и затормаживанием размножения условно- патогенных микроорганизмов.

4. Прополис, применяемый в качестве иммуномодулятора, усиливает антигенные и иммунногеные свойства вакцин, снижает супрессивное воздействие антгельминтиков, повышает и пролонгирует иммунные реакции и активность бифидо- и лактофлоры кишечника.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения и двух глав, каждая из которых включает разделы: обзор литературы, собственные исследования (материал и методы, результаты собственных исследований), обсуждение, выводы и практические предложения. Список литературы включает 555 работ, в том числе 123 иностранных авторов.

Диссертация написана на 456 страницах, иллюстрирована 71 таблицами, 24 рисунками, приложение включает таблицы, рисунки, акты и справки.

1. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

1.1 .Материал и методика исследования

Работа выполнена в лабораториях кафедр паразитологии, микробиологии, вирусологии и анатомии, гистологии и патологии БГАУ, лаборатории иммунологии городской клинической больницы N21 г. Уфы и в условиях АКХ « Уныш» и совхоза «Тимирязевский» Буздякского района. Внедрение результатов опытов проводилось в традиционных СТФ 12 хозяйств 5 районов республики Башкортостан.

При выполнении 1 главы диссертации, в опытах по изучению влияния различных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на иммуногенез использовали 560 поросят с 1 месячного возраста (2 серии по 280 голов). 2 глава диссертации по коррекции иммуногенеза и естественного микробиоценоза кишечника при ассоциативных сальмонеллезно-аскариозных заболеваниях поросят выполнена на 472 поросятах, в том числе 224 голов в 1 серии и 248 голов во 2 серии опытов. 20% -ный спиртовый экстракт прополиса готовили из сырья отвечающего требованиям ГОСТ -2888690, настаиванием в 96° этиловом спирте. В опытах по изучению влияния различных доз БАПП поросятам I группы выпаивали прополисное молочко (готовили из расчета 5 мл 20% -ного спиртового экстракта прополиса на 1000 мл кипяченной и охлажденной воды). Низкая доза составила 2 мл прополисного молочка, средняя - 5 мл, высокая - 50 мл.

Животным 2 группы выпаивали водный раствор цветочной пыльцы, соответствующего требованиям ГОСТа 28887-90 (готовили из расчета 20 г цветочной пыльцы на 100 мл кипяченной и охлажденной воды). Низкая доза составила 0, 5 г цветочной пыльцы (2,5 мл водного раствора цветочной пыльцы), средняя- 1,5 г (7, 5 мл водного раствора), высокая - 15 г ( 75 мл водного раствора ). Дачу препарата проводили 2 раза в день перед кормлением.

Поросятам 3 группы выпаивали водный раствор маточного молочка. В качестве маточного молочка использовали таблетки апилака (в 1 таблетке весом 1 г содержится 0,01 г апилака). Раствор апилака готовили из расчета 20 таблеток апилака на 100 мл кипяченной и охлажденной воды. Низкая доза составила 1 мл раствора апилака (0, 002 г апилака), средняя 2,5 мл (0, 005 г апилака), высокая - 20, 0 мл (0, 04 г апилака). Выпаивание препаратов проводили 2 раза в день перед кормлением. Высокие дозы выпаивали в 2-3 приема.

Преимагинальную дегельминтизацию проводили в 29-30 дневном возрасте поросят ринтал 10% гранулятом в дозе по ДВ 5 мг/кг (во второй серии -

универмом 0,2%-ным в дозе 100 мг/ кг, по ДВ 0,2 мг/кг) в течение 2 дней перорально с кормом групповым методом. Стимуляцию прополисом начинали параллельно с дегельминтизацией путем группового выпаивания с водой 2 раза в день в виде прополисного молочка в дозе 5 мл на голову в течение 10 дней. Иммунизацию сухой живой вакциной из штамма ТС-177 проводили через 10 дней, подкожно, в дозе 1,0 и 1,5 мл. Вакцинацию формолвакциной против паратифа поросят проводили через 5 дней после дегельминтизации, дважды с интервалом в 5 дней, подкожно, в дозе по 4-5 мл. Антгельминтную эффективность препаратов изучали методом флотации с использованием счетной камеры ВИГИС. Личинки аскарий выделяли в аппарате Бермана.

Активность комплемента сыворотке крови определяли по 100% гемолизу эритроцитов титрованием в гемолитической системе в объеме 0, 5 мл. Бактерицидную активность сыворотки крови поросят исследовали по П.А. Емельяненко (1980). Уровень агглютининов в РА и фагоцитарную активность лейкоцитов изучали по общепринятым методикам. Антиген для реакции агглютинации готовили из суточной культуры Salmonella cholerae suis. Предельным титром в сыворотке считали максимальное разведение его, в которой наблюдали 4-х крестовую агглютинацию.

Убой поросят с целью взятия материала в опытах по изучению влияния различных доз БАПП на иммуногенез и естественный микробиоценоз кишечника проводили до начала и через 3, 7, 14, 21, 35 и 60 дней от начала опытов; в опытах по исследованию коррекции иммуногенеза и естественного микробиоценоза при ассоциативном сальмонеллезно-аскариозном заболеваниях поросят - через З(-), 13(3/8)/ 15(5/10), 17(7/12), 25(15/20), 35(25/30), 65 (55/60) и 95(85/90) от начала дегельминтизации, стимуляции (иммунизации вакциной TC-177/формолвакциной).

Кусочки лимфоидных органов для иммуноморфологических исследований фиксировали в 10 % -ном нейтральном формалине и в жидкости Карнуа, парафиновые срезы окрашивали гематоксилин-эозином, азур II эозином, метиловым зеленым пиронином по Браше. Площадь зон лимфоидных органов определяли с помощью окуляр-сетки по Г.Г. Автанди-лову (1973). Индекс тимуса определяли по В.А.Апатенко, В.И.Бут (1989,1992). Мазки костного мозга взятого из проксимальной части диафиза плечевых костей фиксировали и окрашивали по Мая-Грюнвальду с дальнейшей докраской по Романовскому. Идентификацию клеточных элементов костного мозга проводили с помощью атласа по М.Г.Абрамову (1979).

Для определения Т-Е-РОК и В-ЕАС-лимфоцитов в крови и в лимфоидных органах лимфоциты выделяли в градиенте плотности фикол-верографин ( плотность 1,007 г/мл) и ставили реакции розеткообразования.

Определение субпопуляций Т-лимфоцитов проводили по методике ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии.

Качественное исследование микрофлоры кишечника проводили по методике, разработанной НИИЭМ им. Г.Н.Габричевского.

Полученные цифровые данные обрабатывались методами вариационной статистики с проверкой достоверности результатов с помощью критерия Стьюдента и уровня значимости (Р), (Г.Ф.Лакин, 1980) с помощью стандартных программ на ПВЭМ в вычислительном центре Башкирского ГАУ.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

1.2. Влияние различных доз БАПП на иммуногенез.

1.2.1. Влияние различных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на показатели естественной резистентности.

Титр комплемента у животных контрольной группы колебался в пределах от 7,0±0,31 до 8,5±0,39, бактерицидная активность сыворотки крови от 45,8 до 49,0%, фагоцитарная активность нейтрофилов - от 15,3 до 16,8%.

Низкие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка способствовали умеренному повышению этих показателей, которые превышали контрольное значение до конца опытов.

Средние дозы БАПП, по сравнению с низкими, способствовали более выраженному повышению факторов естественной защиты организма, которые достигли максимума к 21 и 35 дням, превысив контрольный показатель в прополисной группе: комплементарная активность в 4,7, бактерицидная - в 1,84, фагоцитарная - в 2,5 раза, в группе с цветочной пыльцой, соответственно в 2,6; 1,65; и в 2,07 раза; с маточным молочком - в 5,86; 1,93 и в 2,84 раза. К окончанию опытов отмечали некоторое понижение этих показателей, но они значительно были выше их уровня у поросят контрольной группы.

Высокие дозы БАПП до 7 дня опыта вызывали бурное повышение факторов естественной резистентности. К этому сроку комплементарная активность была выше контрольного показателя в 4,28 раза, бактерицидная в 1,61, фагоцитарная- в 2,54 раза; в группе с цветочной пыльцой- в 3,42;1,50;2,08 раза, с маточным молочком - в 7,42, 1,93, 2,85 раза. Однако, уже к следующему сроку исследования отмечали резкое понижение этих факторов. Этот процесс прогрессировал до 35 дня. К 35 дню в прополисной группе уровень комплемента был ниже контрольного значения в 1,7 раза, бактерицидной активности сыворотки крови - в 1,63, фагоцитарной активности нейтрофилов -в 1,52 раза; в группе с цветочной пыльцой- в 1,21; 1,23; 1,29 раза, с маточным молочко- в 2,42; 2,43; 2,12 раза. До конца опытов данные комплементарной, бактерицидной активности сыворотки крови, фагоцитарной актив-

ности нейтрофилов, в крови поросят получавших высокие дозы БАПП, оставались значительно пониженными и уступали контролю.

1.2.2. Влияние различных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на Т- и В-системы иммунитета.

1.2.2.1.Динамика Т-лимфоцитов их популяций и В-лимфоцитов в крови и лимфоидных органах

У поросят контрольной группы в крови Т-Е-РОК-лимфоциты колебались в пределах от 44,6 до 45,3% ,Т-хелперы от 20,7 до 22%,Т-супрессоры от 14,2 до 14,6%, В-ЕАС-лимфоциты от 17,3 до 18,0%.

Низкие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка вызывали некоторые повышения в крови Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов, и В-ЕАС-лимфоцитов. Т-супрессоры не подвергались каким-либо достоверным изменениям. Максимум Т-Е-РОК-клеток в прополисной группе составил 48,3+0,21%, Т-хелперов - 25,9+0,29%, В-ЕАС-клеток 29,8±0,20%; в группе с цветочной пыльцой - 48,4±0,21%, 25,0±0,18%, 24,5±0,16%; с маточным молочком - 50,3±0,14; 29,6±0,12% и 31,4±0,26%.

Средние дозы БАПП способствовали выраженным изменениям в динамике Т- и В-лимфоцитов крови. Так, в прополисной группе и в группе с цветочной пыльцой они достигли пика, составив Т-Е-РОК-лимфоциты (к 35 дню) -54,5±0,15 и 50,1±0,09%, Т-хелперы ( к 21 дню) - 37,6±0,15 и 32,3±0,16%, В-ЕАС-лимфоциты ( к 35 дню) -34,7±0,15 и 28,410,26%; в группе с маточным молочком: Т-Е-РОК-лимфоциты 56,3±0,17, Т-хелперы 42,5±0,24%, В-ЕАС-лимфоциты 38,6±0,29%. До конца эксперимента содержание Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов, В-ЕАС-лимфоцитов в крови поросят, получавших средние дозы БАПП, оставались значительно повышенными, по сравнению с уровнем поросят контрольной группы и были равны в прополисной группе 50,8±0,13, 31,4±0,08, 28,610,17%, в группе с цветочной пыльцой -46,210,12, 26,410,15, 23,410,22, с маточным молочком - 51,510,16, 34,5+0,17, 31,310,18%.

Высокие дозы БАПП вызвали бурное повышение в крови до 7 дня опыта числа Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов. Но это явление было непродолжительным, оно сменилось резким уменьшением этих клеток.

Т-супрессоры в крови поросят, получавших высокие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка с 3 дня опыта постепенно увеличивались, имели максимальное значение к 35 дню, достигнув в прополисной группе 34,710,13%, в группе с цветочной пыльцой - 25,610,13%, с маточным молочком -39,710,11%. До конца опыта Т-супрессоры продолжали значи-

тельно превышать уровень их у поросят 1 контрольной группы, соответственно составив 20,6±0,10, 17,6±0,18 и 30,6±0,12%.

В наружном паховом лимфатическом узле Т-Е-РОК-лимфоциты находились в пределах от 31,4 до 32,1, Т-хелперы от 16,4 до 17,1, Т-супрессоры от 9,3 до 9,8%, В-ЕАС-лимфоциты от 19,8-20,7% (56,7-57,7 млн.).

Низкие дозы БАПП способствовали некоторому повышению в лимфоуз-леТ-Е-РОК-лимфоцитов,Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов.Т-супрессоры находились на одинаковом уровне с контролем.

Средние дозы БАПП вызвали более глубокие иммуноклеточные реакции в лимфоузле. Они выражались интенсивным повышением содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов, В-ЕАС-лимфоцитов. В прополисной группе самый высокий процент Т-Е-РОК-клеток достиг 42,2+0,54, Т-хелперов 27,8±0,14, В-ЕАС-клеток - 29,5±0,56 (75,3±1,47 млн.), в группе с цветочной пыльцой - 39,3±0,39, 25,7±0,21, 26,4±0,69 (70,7+1,82 млн.), с маточным молочком - 48,9±0,63,31,3±0,12, 31,6±0,73 (79,5±1,73).

Высокие дозы БАПП в лимфатическом узле в начале опыта вызывали значительное повышение уровня Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов, которые затем сменились резким уменьшением количества этих клеток. До окончания опытов они оставались на низком уровне, уступая контролю в прополисной группе в 2,3, 1,48 и в 1,47 (абс. количество в 1,42) раза; в группе с цветочной пыльцой - в 1,55, 1,77 и в 1,28 ( в 1,24) , с маточным молочком - в 2,73, 1,71 ив 1,79 (в 1,71) раза.

Количество супрессорных клеток повышалось до 14 дня опыта и достигло в прополисной группе 26,4±0,09%, в группе с цветочной пыльцой -21,8+0,12%, с маточным молочком - 29,6±0,09%. К окончанию опытов они превышали контрольный показатель, соответственно в 2,04; 1,39 и в 2,43 раза.

В селезенке поросят контрольной группы содержание Т-Е-РОК-лимфоцитов колебалось от 29,6 до 30,8% (от 128,5 до 130,8 млн.). В-ЕАС-лимфоцитов - от 38,6 до 39,5% (158,6 - 160,1 млн.).

Выпаивание животным с водой растворов с низким содержанием БАПП способствовали умеренному повышению в селезенке содержания Т- и В-лимфоцитов. Этот процесс продолжался до 35 дня, затем затормаживался. Наиболее оптимальные перестройки Т- и В-лимфоцитов в селезенке установили под влиянием средних доз БАПП. Максимальный уровень этих клеток регистрировали к 35 дню опыта. На этот срок они были выше показателя поросят контрольной группы в группе с прополисом в 1,28 (1,22) ив 1,23 (1,23), с цветочной пыльцой - в 1,21 (1,20) и в 1,15 (1,14), с маточным молочком - в 1,37 (1,28) и в 1,38 (1,41) раза.

Высокие дозы БАПП прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка уже к 7 дню вызвали бурную реакцию Т-лимфоцитов, к 3 дню ( а в группе с маточным молочком к 7 дню) - В-лимфоцитов. На эти сроки Т- и В-клетки превысили уровень контроля в прополисной группе в 1,33 (1,24) ив 1,25 (1,24), в группе с цветочной пыльцой - в 1,27 (1,22) ив 1,19 (1,2), с маточным молочком в 1,5 (1,31) и в 1,38 (1,41) раза. Но уже к следующему сроку наблюдали резкий спад относительного и абсолютного числа Т- и В- клеток. К 60 дню Т-Е-РОК-лимфоциты и В-ЕАС-лимфоциты в селезенке поросят прополисной группы уступали контрольной цифре в 1,78 (1,62) и в 1,13 (1,14), группы с цветочной пыльцой - в 1,49 (1,39) и в 1,08 (1,09), с маточным молочком - в 2,28 (1,65) и в 1,75 (1,61) раза.

Абсолютное количество Т-лимфоцитов в тимусе контрольных поросят составило 430,3-432,6 млн. на орган.

Низкие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка вызывали в тимусе умеренное повышение содержания Т-лимфоцитов.

Наиболее активную реакцию Т-лимфоцитов наблюдали в тимусе поросят, получавших средние дозы БАПП. Средние дозы прополиса способствовали повышению уровня Т-лимфоцитов до уровня 520,5±28,0 млн. В конце опыта Т-лимфоциты в тимусе поросят этой группы продолжали превосходить контрольный уровень, составив 479,2±16,5 млн. Средние дозы цветочной пыльцы способствовали увеличению продукции Т-лимфоцитов также до 35 дня - 450,1±21,4 млн. Средние дозы маточного молочка вызывали самую яркую реакцию Т-клеток в тимусе поросят. Максимальный показатель их был равен 556,4±36,7 млн. Значительно выше контроля было его содержание и в конце эксперимента - 496,4+28,7 млн.

Высокие дозы БАПП оказывали однотипное воздействие на продукцию Т-лимфоцитов в тимусе, но имели разную степень выраженности. Прополис вызвал максимальное увеличение Т-лимфоцитов к 7 дню. Они составили 515,4±18,7 млн. На следующий срок исследования (14 дней) содержание Т-лимфоцитов упало до 347,4±23,6 млн., к 21 дню - до 302,5±18,3 млн.

Цветочная пыльца в высоких дозах вызывала, усиление продукции Т-лимфоцитов к 7 дню до 487,5±19,2 млн. К 14 дню их уровень резко понизился и был равен 360,7±30,5 млн. Минимальное содержание наблюдали к 21 дню -346,2±26,3 млн.

Высокие дозы маточного молочка вызывали максимальное повышение Т-лимфоцитов в тимусе уже к 3 дню - 599,5±34,6 млн. Затем содержание Т-лимфоцитов в тимусе падало. На 21 день они составили 230,4±27,0 млн., к 35 дню -205,5±22,1 млн.

1.2.2.2. Влияние различных доз прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка на Т- и В-зависимые зоны лимфоидных органов

В наружном паховом лимфатическом узле в качестве тимуснезависимых (В-зон) исследовали лимфатические узелки и мякотные тяжи, в качестве ти-мусзависимых (Т-зон) - паракортикальную зону. Для полного анализа изменения площади лимфоузелков измеряли также площадь коркового плато.

Относительная площадь, занимаемая корковым плато, в среднем, у контрольных животных составила 19,4%, лимфоузелков без светлых центров 5,54%, со светлыми центрами - 0,97%, паракортикальной зоны - 11,55% мя-котных тяжей - 14,73%.

Низкие дозы БАПП вызвали некоторые расширения структур в Т-и В-зависимых зонах лимфатического узла. Эти изменения были слабо выраженными и непродолжительными.

Самого высокого уровня площади Т- и В-зон в лимфатическом узле достигли у поросят, получавших средние дозы БАПП. Так, в прополисной группе максимальное расширение площади лимфоузелков со светлыми центрами к 35 дню превысило контрольную цифру в 11,4 раза, в группе с цветочной пыльцой - в 10,2, с маточным молочком - в 18,7 раза. Высоким оставалась площадь лимфоузелков со светлыми центрами до конца исследований и превышала показатель поросят контрольной группы, соответственно в 7,6, 4,1 и в 10,4 раза. Площадь мякотных тяжей лимфоузла поросят прополисной группы превысила таковую контрольных животных на 35 день в 1,26, в группе с цветочной пыльцой - в 1,21, с маточным молочком - в 1,35 раза; паракортикальной зоны, соответственно в 1,34, 1,2 и в 1,37 раза.

Высокие дозы БАПП в лимфатическом узле опытных поросят вызывали глубокие перестройки в Т- и В-зонах, которые проявлялись в начале опыта в виде расширения этих зон, затем сменялись уменьшением площади их структур. В прополисной группе площадь лимфоузелков со светлыми центрами к 7 дню превысила контрольный показатель в 14,5, в группе с цветочной пыльцой в 11,4, с маточным молочком - к 14 дню - в 25,5 раза. В последующие сроки наблюдали прогрессивное уменьшение площади лимфоузелков со светлыми центрами. Расширение площади мякотных тяжей, также имеющих отношение к продукции В-лимфоцитов, происходило в прополисной группе и в группе с цветочной пыльцой к 7 дню - в 1,27 и в 1,18, с маточным молочком - к 14 дню - в 1,5 раза. С 21 дня до конца исследований мякотные тяжи уменьшались в площади и к концу исследований имели показатели, уступающие контролю. Т-зависимая паракортикальная зона к 90 дню была ниже контрольного значения.

В селезенке поросят контрольной группы на долю красной пульпы приходилось в среднем 68,05% площади, белой пульпы 28,81%. В составе белой пульпы периваскулярные муфты занимали 10,25%, лимфоузелки без светлых центров - 17,56%, со светлыми центрами - 1,06%.

Низкие дозы БАПП способствовали умеренному уменьшению площади красной пульпы и расширению белой пульпы. Изменения в белой пульпе происходили за счет некоторого расширения площади периваскулярных лимфоидных муфт ( Т-зона) и лимфатических узелков со светлыми центрами (В-зона).

Применение средних доз БАПП способствовало более выраженным проявлениям этих изменений. Максимальная площадь периваскулярной муфты составила в прополисной группе 16,0±0,17%, в группе с цветочной пыльцой -14,8±0,13%, с маточным молочком - 16,7+0,10%; лимфоузелков со светлыми центрами, соответственно - 14,0±0,10, 12,3+0,12, 15,710,13% на 35 день опыта.

Высокие дозы БАПП вызвали на первых этапах опыта активную имму-номорфологическую перестройку в Т- и В-зависимых зонах, которые в последующем сменялись деструктивными изменениями в селезенке, характеризующими истощение иммунного статуса органа.

В тимусе поросят контрольной группы на долю коркового вещества приходилось 54,63% площади, мозгового - 45,36%.

Низкие дозы БАПП вызывали умеренное расширение площади коркового и уменьшение площади мозгового вещества органа. Наиболее выраженным этот процесс был под влиянием средних доз. К 35 дню опыта в тимусе поросят, получавших средние дозы прополиса, корковое вещество составило 68,52±0,14%, цветочной пыльцы - 63,6±0,17%, маточного молочка -72,5710,14%. В последующие сроки исследований отмечали постепенное уменьшение площади коркового вещества тимуса. Но она, во все сроки, была выше контрольного показателя и к концу опыта превышала его, соответственно в 1,08,1,06 и в 1,18 раза.

Высокие дозы прополиса и цветочной пыльцы максимальное расширение коркового вещества тимуса вызвали к 14 дню - 79,8210,22, 66,310,19%, маточного молочка - к 7 дню - 78,8810,08%. Но уже к следующим срокам наблюдали резкое уменьшение площади коркового и расширение мозгового вещества органа. Такие перепады в параметрах иммуноморфологических структур тимуса свидетельствовали о глубоких нарушениях иммунных реакций в организме поросят этой группы.

1.3. Коррекция БАПП естественного микробиоценоза кишечника поросят

У поросят месячного возраста, содержащихся в условиях традиционных СТФ, мы регистрировали нарушения нормального микробиоценоза кишечника. Этот процесс прогрессировал и к концу опытов у поросят 1 контрольной группы бифидо- и лактобактерии были ниже фонового показателя в 2,41 и в 2,9 раза. Понижение нормофлоры приводило к активизации и повышению количества условно- патогенных микроорганизмов. Содержание эшери-хий превысило фоновой уровень в 1,17, энтерококков - 1,29, стафилококков -1,17, протея -2,35, клостридий - 1,23, псевдомонов - 1,53, микрогрибов кандида - в 1,35 раза.

Применение низких доз БАПП способствовало восстановлению в кишечнике нормального соотношения бифидо- и лактофлоры и условно- патогенных микроорганизмов. К 90 дню от начала опыта бифидобактерии в кишечнике поросят, получавших низкие дозы прополиса, превысили контроль в 2,8, лактобациллы - в 3,75 раза; цветочной пыльцы - бифидобактерии - в 2,7, лактобациллы - в 3,35 раза, маточного молочка - бифидобактерии - в 3,09, лактобациллы - в 4,5 раза.

Под влиянием низких доз БАПП параллельно с повышением уровня нормофлоры в кишечнике отмечали снижение содержания условно-патогенных микроорганизмов. К концу эксперимента они были ниже контрольного показателя у поросят, получавших низкие дозы прополиса, соответственно: эше-рихии в 1,52, энтерококки -в 1,43, стафилококки в 1,56, протеи - в 2,22, клостридии - в 1,58, псевдомоны - в 1,73, микрогрибы кандида - в 1,65 раза; цветочной пыльцы: эшерихии в 1,37, энтерококки - в 1,37, стафилококки - в 1,48, протеи - в 2,0, клостридии - в 1,39, псевдомоны - в 1,48, микрогрибы кандида - в 1,52 раза; маточного молочка: эшерихии в 1,73, энтерококки -в 1,58, стафилококки- в 1,71, протеи - в 3,33, клостридии - в 1,72, псевдомоны -в 2,35, микрогрибы кандида - в 1,75 раза.

Таким образом, низкие дозы продуктов пчеловодства способствуют восстановлению в кишечнике соотношения ассоциаций нормо- и условно- патогенных микроорганизмов, соответствующие их нормальным параметрам.

Наиболее эффективным для коррекции микробиоценоза кишечника поросят в условиях традиционных СТФ было применение БАПП в средних дозах.. Средние дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка вызывали не только увеличение бифидо-и лактофлоры и уменьшение условно-патогенных микроорганизмов до их нормального соотношения и содержания, как низкие дозы этих продуктов, но и способствовали более активному размножению и увеличению числа нормофлоры, по сравнению со средним нормальным уровнем, и более значительному торможению размноже-

размножения условно-патогенной микрофлоры. Под влиянием средних доз прополиса, в конце опытов, бифидо- и лактобактерии превысили показатель поросят контрольной группы в 3,74 и в 5,3, цветочной пыльцы- в 3,38, и в 4,5, маточного молочка - в 3,87 и в 5,9 раза. Условно-патогенная микрофлора под влиянием средних доз БАПП интенсивно понижалась и к 90 дню была ниже контрольного уровня в группе, в которой животным выпаивали раствор прополиса: эшерихии в 1,76, энтерококки - в 1,61, стафилококки - в 1,71, протеи- в 5,0, клостридии- 2,37, псевдомоны,- в 2,0, микрогрибы кандида в 2,62 раза; цветочной пыльцы: эшерихии в 1,43, энтерококки- в 1,46, стафилококки -1,56, протеи -в 3,22, клостридии- в 2,11, псевдомоны- -в 1,66, микрогрибы кандида в 2,33 раза; маточного молочка: эшерихии в 2,0, энтерококки - в 1,76, стафилококки - в 1,89, протеи - в 5,71 клостридии - в 2,71, псевдомоны - в 3,63, микрогрибы кандида - в 3,65 раза. Высокие дозы БАПП однотипно, но в различной степени выраженности, в первые дни способствовали резкой и высокой активизации бифидо- и лактофлоры и некоторому подавлению или замедлению темпов размножения условно-патогенных мик-роорганизмов.Однако, реактивность нормофлоры была не продолжительной, повышалась до 14 дня опыта, а затем сменялась резким торможением и активизацией условно- патогенной флоры. Причем характерной особенностью эшерихий и стафилококков после 14 дня эксперимента становилась повышение до 40-50 % их количества, обладающих гемолитической активностью.

К окончанию опытов бифидо- и лактобактерии в кишечнике поросят, получавших высокие дозы БАПП, значительно уступали таковым у животных, получавшим средние дозы их: прополиса в 3,41 ив 2,94, цветочной пыльцы -в 2,62 и 1,76; маточного молочка- в 4,0 и 4,37 раза. Условно- патогенные микроорганизмы под влиянием высоких доз БАПП, напротив, к 90 дню опыта были выше их уровня в кишечнике поросят, получавших средние дозы прополиса: эшерихии в 1,9 раза, энтерококки в 1,6, стафилококки- в 1,9, протеи - в 9,0, клостридии - в 2,54, псевдомоны - в 2,21 раза; цветочной пыльцы: эшерихии - в 1,43 раза, энтерококки - в 1,55, стафилококки - в 1,61, протеи - в 3,22, клостридии - в 1,96, псевдомоны - в 1,54, микрогрибы кандида - в 1,86 раза; маточного молочка: эшерихии в 2,26 раза, энтерококки -в 2,11, стафилококки - в 2,29, протеи - в 10,5, клостридии - в 3,04, псевдомоны - в 5,18, микрогрибы кандида - в 3,56 раза.

Анализируя вышеизложенное можно заключить, что высокие дозы различных БАПП оказывали не идентичное воздействие на организм поросят. Наиболее реактогенным было влияние на организм высоких доз маточного молочка, несколько ниже прополиса и еще слабее цветочной пыльцы. Это указывает на то, что высокие дозы БАПП оказывают угнетающее воздействие на иммунную систему и нарушают физиологический статус микробиоценоза кишечника. Эти изменеия могут привести к дисбактериозам и раз-

личным патологическим состояниям.

1.4.Влияние различных доз БАПП на прирост массы тела и сохранность поросят.

За период опытов (с 1 до 3 месячного возраста - 60 дней) средний прирост массы тела в контрольной группе составил 10,5±0,15 кг. Наибольший показатель прироста массы тела зарегистрировали в группах, в которых животным выпаивали растворы БАПП в средних дозах: прополиса в 1,57 раза выше контрольного показателя, цветочной пыльцы - в 1,42, маточного молочка - 1,72 раза.

Низкие дозы способствовали получению умеренных привесов живой массы поросят. Они превысили уровень контрольных животных в пропо-лисной группе в 1,22 раза , в группе, в которой применяли цветочную пыльцу - в 1,08 раза, маточное молочко - 1,37 раза.

У поросят, которым выпаивали БАПП в высоких дозах отмечали самые низкие приросты живой массы. Они уступали значению поросят контрольной группы : в прополисной группе - в 1,4, в группе с цветочной пыльцой -1,23, с маточным молочком - в 1,75 раза.

Самые высокие среднесуточные приросты живой массы отмечали у поросят, получавших средние дозы БАПП. Их максимум регистрировали у животных, которым выпаивали раствор маточного молочка - 298,3 г, что было выше уровня контроля в 1,7 раза. Среднесуточный прирост поросят, получавших средние дозы прополиса составил 275 г и в 1,57 раза превысил контрольную цифру, цветочной пыльцы - 251,6 г и был выше контрольного значения в 1,43 раза.

Сохранность поросят, получавших средние дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка составила 100%, низкие дозы - 89,2; 85,7 и 92,8 %, высокие, соответственно 42,8; 46,2, 39,2 %. Сохранность поросят контрольной группы составила 57,1 %.

Патологоанатомическими, патогистологическими и микробиологическими методами исследований патологического материала от павших поросят, во всех случаях, были установлены гастроэнтериты неинфекционной этиологии.

2.0.Иммунный статус, микробиоценоз кишечника и изыскание средств и методов иммунокоррекции при ассоциативном сальмонеллезно-аскариозном заболевании поросят 2.1. Динамика факторов естественной резистентности и эозинофилов

крови

У поросят 1 контрольной группы титр комплемента находился в пределах от 7,0 до 8,5, бактерицидная активность колебалась от 46,4 до 49,3%.

В сыворотке крови больных ассоциативным сальмонеллезно-аска-риозным заболеванием поросят (2 группа) отмечали прогрессирующее понижение этих показателей и к концу опыта они составили, соответственно 2,5±0,04 и 10,2±0,39%.

Иммунизация живой вакциной из штамма ТС- 177, без предварительной дегельминтизации (3 группа) а также дегельминтизация без иммунизации (4 группа) и дегельминтизация со стимуляцией, без иммунизации (5 группа) лишь частично повышали комплементарную и бактерицидную активность сыворотки крови. Они превышали значения поросят 2 группы, но не достигали уровня здоровых животных. Иммунизация вакциной из штамма ТС- 177 на фоне дегельминтизации (6 группа) способствовала выраженному повышению факторов естественной резистентности, которые были выше в группе поросят, дегельминтизированных универмом 0,2%, по сравнению с ринтал 10% гранулятом. В группе с ринталом комплементарная активность сыворотки крови максимально превышала уровень контрольных поросят в 4,0, больных -13,6, в группе с универмом - в 6,5 и в 22,4 раза; бактерицидная - в группе с ринталом в 1,32 и в 4,54, с универмом - в 1,54 и в 5,33 раза.

Самая высокая степень комплементарной и бактерицидной активности сыворотки крови была у поросят 7 группы, которых иммунизировали вакциной ТС-177 на фоне дегельминтизации, на стадии миграции личинок, ринтал 10% гранулятом (во 2 серии универмом 0,2%) и параллельно стимулировали прополисом. Они достигли пика к 35 дню в серии опытов с ринталом, превысив показатели поросят 1 и 2 групп по комплементарной активности - в 4,94 и в 16,8, по бактерицидной - в 1,48 и в 5,11 раза; в серии с универмом по комплементарной - 7,52 и в 25,6, по бактерицидной активности - в 1,8 и в 6,23 раза.

У животных 8 группы, в обеих сериях опытов комплементарная и бактерицидная активность сыворотки крови уступали показателям поросят 6 и, особенно 7 групп, но были выше их уровня у животных 3,4,5, и, особенно, 2 групп.

У животных 1 контрольной группы эозинофилы в крови за период опытов колебались от 7,4 до 9,4% (от 568,6 до 599,1 ед./мкл.).

К началу опытов во всех группах, кроме 1 контрольной, отмечали повышенное содержания эозинофилов - 13,9-15,3% (886,2-1022,7 ед./мкл.)

В крови поросят 2 группы - отмечали прогрессирующее повышение эозинофилов. К 35 дню опыта они достигли - 31,2±0,09% (2198,4±71,2 ед./мкл.). До конца опытов содержание эозинофилов оставалось высоким - 24,4±0,08% (1505,3±60,4 ед./мкл).

Иммунизация без дегельминтизации ( 3 группа) не оказывала влияния на состав эозинофилов в крови. К 35 дню они составили 30,6±0,11% (2063,6±67,6 ед./мкл.), к 95 дню - 23,1±0,04% (1432, 7± 71,4 ед./мкл.). У поросят 4 и 5 групп регистрировали уменьшение количества эозинофилов. К концу опытов в серии с ринтал 10% гранулятом они составили в 4 группе -9,0+0,05% (592,6±62,1 ед./мкл.), в 5 группе - 8,7±0,09% (585,2±66,4 ед./мкл); в серии с универмом - 9,0+0,08% (580,7±60,8 ед./мкл.) и 8,2±0,07% (565,3±72,4 ед./мкл.).

У животных 6 и 7 групп содержание эозинофилов в крови пришло в норму в обеих сериях опытов к 15 дню. Подобным образом изменялась динамика эозинофилов в крови поросят 8 группы. Но здесь их количество к контрольному уровню подошло в серии с ринталом к 25, а в серии с универмом - к 35 дню.

2..2 Исследования изменений в Т- и В- системах иммунитета 2.2.1.Динамика Т-лимфоцитов, их популяций и В-лимфоцитов в крови и лимфоидных органах

В крови поросят 1 контрольной группы уровень Т-Е-РОК- лимфоцитов колебался от 44,2 до 45,7%, Т- хелперов от 20,7 до 22,1%, Т- супрессоров от 14,2 до 15,1%, В-ЕАС- лимфоцитов от 17,2 до 18,1%.

К началу исследований фоновые показатели поросят 2-8 групп имели нарушения в содержании Т- и В-клеток крови. У животных 2 группы Т-Е-РОК -лимфоциты до конца эксперимента понижались и к 95 дню составили 24,9±0,43%, Т- хелперы - 11,2±0,17%.С понижением содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов и их хелперной популяции отмечалось повышение числа Т-супрессоров, которые к концу опытов достигли 27,4±0,37%. Уровень В-ЕАС-лимфоцитов к концу исследований был ниже, по сравнению с контролем, в 2,14 раза (8,3±0,16%). У поросят 3, 4 и 5 групп отмечалось незначительное повышение уровня Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов, но во все сроки и в обеих сериях сохранилась высокая активность Т-супрессоров.

Иммунизация вакциной из штамма S.cholerae suis TS - 177 на фоне дегельминтизации (6 группа) способствовали повышению числа Т-Е-РОК-лимфоцитов в серии с ринталом до уровня здоровых поросят 1 группы -45,0±0,32%, в серии с универмом превысили его - 47,9±0,53%. К концу опытов они составили 44,2±0,26 и 46,2±0,39%. Процент Т- хелперов повышался до 23,8±0,32 и 30,0+0,23 и к концу исследований оставался выше контрольного показателя. Содержание Т- супрессоров достоверно понижалось и к концу опыта составило в 1 серии 18,2±0,35, во 2 серии - 15,0±0,42%. Количество В-ЕАС- лимфоцитов в процессе эксперимента повысилось в серии с ринталом до 16,9±0,17% , с универмом - до 21,2±0,15.

Наиболее активной была реакция Т- и B-клеток в крови поросят 7 группы. Т-Е-РОК - лимфоциты достигли максимума к 35(25) дню и составили в серии с ринталом 46,4±0,23, с универмом 52,3±0,48%. К концу эксперимента Т-Е-РОК-лимфоциты были выше уровня здоровых поросят - 46,0+0,23 и 50,7±0,56%. Т-хелперы до 35 (25) дня интенсивно повышались и превышали контроль до конца опыта. Реакция супрессорных клеток значительно понизилась. В группе с ринталом до конца эксперимента она оставалась выше физиологических норм - 17,0±0,32%, с универмом - восстановилась до контрольного уровня, составив 14,5±0,40%. Уровень В-ЕАС-лимфоцитов достоверно повышался, достиг пика к 65(55) дню, был равен в 1 серии 21,5±0,36, во 2 серии -25,6±0,14% и оставался выше значения здоровых поросят в конце опыта в 1,16 и в 1,37 раза.

В регионарном, к месту иммунизации, наружном паховом лимфатическом узле поросят 1 контрольной группы Т-Е-РОК- лимфоциты, в разные сроки исследований, колебались от 31,0 до 32,1%, Т-хелперы от 16,5 до 17,1 %, Т- супрессоры от 9,2 до 9,9%, В-ЕАС-лимфоциты от 19,2 до 20,7% (от 56,7 до 57,4 млн.) . К началу опыта, у животных всех остальных групп, отмечали нарушение соотношения иммунокомпетентных клеток в лимфатическом узле, вызванное развитием аскариозной инвазии, к этому времени, до периода миграции личинок.

Развитие ассоциативного сальмонеллезно-аскариозного заболевания вызвало значительное уменьшение содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов и Т-хелперов. К 95дню опыта они составили 22,7±0,47% и 4,710,13%. Т-супрессоры, напротив, повышались и к концу опыта достигли 17,0+0,12%. Относительное и абсолютное число В-ЕАС-лимфоцитов падало и было равно 8,7+0,17% (35,2±1,12 млн.).

В наружном паховом лимфатическом узле поросят 3, 4 и 5 групп регистрировали лишь кратковременное и незначительное увеличение числа Т-Е-РОК- лимфоцитов, Т- хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов. Количество Т-супрессоров увеличивалось.

У животных б группы Т-Е-РОК- лимфоциты повышались до 35 дня, достигнув в группе с ринталом уровня поросят 1 группы, в группе с уни-вермом - в 1,16 раза превысив его. Т-хелперы превысили, на этот срок, контроль в 1,16 и в 1,3 раза. Т-супрессоры продолжали превышать контрольный показатель до конца опыта, составив в группе с ринталом -11,5±0,06, с универмом - 10,0±0,24%. В-ЕАС-лимфоциты в 1 серии опытов восстановились до значения поросят контрольной группы, во 2 серии с 35 дня опыта превышали его.

Самая выраженная реакция Т-клеток наблюдалась в лимфоузле животных 7 группы. Т-Е-РОК- лимфоциты имели пик, равный в серии с ринталом 35,3±0,19, с универмом - 41,1±0,32%, Т-хелперы - 21,6±0,32 и 27,4±0,21%, В-ЕАС-лимфоциты - 21,8±0,26 и 25,5±0,20%. Т-супрессоры в серии с ринталом до конца опыта были в 1,13 раза выше контрольных цифр, с универмом - приблизились к ним.

В лимфоузле животных 8 группы происходило повышение Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов к 35 (25) и 65 (60) дням до контрольного уровня, но к концу опытов эти показатели понизились. Т- су-прессоры были выше контрольного значения.

В брыжеечном лимфатическом узле поросят всех опытных групп реакции иммунокомпетентных Т-и В-клеток были типичны с наружным паховым лимфатическим узлом, но с более выраженной активностью Т-лимфоцитов.

Содержание Т- лимфоцитов в селезенке поросят 1 контрольной группы, на протяжении опытов, находилось в пределах от 29,4 до 30,0% (128,4 до 130,9 млн.), В- лимфоцитов - от 38,6 до 39,3% (156,2 до 160,4 млн.).

У больных ассоциативным сальмонеллезно-аскариозным заболеванием поросят (2 группа) количество Т-Е-РОК- лимфоцитов понижалось до 65 дня опыта - 17,6±0,17% (81,6±3,11 млн.). К 95 дню их уровень был ниже контроля в 1,62 раза. Количество В-ЕАС- лимфоцитов к концу эксперимента в 2,14 (1,78) раза уступало контрольному показателю.

У поросят 3, 4 и 5 групп наблюдали не высокое повышение числа Т- и В- клеток, но этот процесс был кратковременным, слабо выраженным и не достиг значения поросят 1 группы.

У животных 6 группы отмечали, по сравнению с предыдущими группами, значительное повышение активности Т- и В- лимфоцитов в селезенке.

Самая ярко выраженная активизация Т- и В- клеток была в селезенке животных 7 группы. Здесь пик Т- и В- клеток регистрировали к 35 (25) дню. Они составили в группе с ринталом: Т-Е-РОК - 44,7±0,29% (170,8±4,62 млн.), В-ЕАС- 51,9±0,24 (210,718,19 млн.); с универмом: Т-Е-РОК- 48,8±0,19% (187,6±4,76 млн.), В-ЕАС- 57,1 ±0,26% (9234,5+5,67 млн.).

До конца опыта содержание Т- и В-клеток превышало контрольный показатель.

В селезенке поросят 8 группы реакция Т- и В-клеток значительно уступала их активности у животных 6 и, особенно, 7 групп.

В тимусе поросят контрольной группы абсолютное содержание Т-лимфоцитов колебалось от 430,5 до 432,4 млн. У животных 2 группы отмечалось значительное угнетение продукции Т- лимфоцитов в тимусе. К концу опыта они составили 260,3±13,9 млн. Не восстанавливалось содержание Т- клеток до уровня их у здоровых поросят и в тимусе животных 3, 4 и 5 групп. К 95 дню абсолютное число Т-лимфоцитов в тимусе поросят 3 группы было равно 379,7±31,2 млн., 4 группы - в серии с ринталом- 360,2±24,8 млн., с универмом - 390,6±27,9 млн., 5 группы - 372,6±16,7 млн. и 400,9±24,5 млн.

Наиболее высоким был уровень Т- лимфоцитов в тимусе поросят 6 и, особенно, 7 групп. Максимальный показатель содержания Т- лимфоцитов в тимусе поросят 6 группы регистрировали к 35 (25) дню: в серии с ринталом - 479,9± 21,4 млн., с универмом - 505,6±16,9 млн. У животных 7 группы пик Т- лимфоцитов в тимусе был в серии с ринталом к 25 (15) дню - 535,6±29,8 млн., с универмом - к 35 (25) дню - 589,2±21,8 млн.

У животных 8 группы установили повышение числа Т- лимфоцитов в тимусе в 1 серии до уровня 429,6±17,6 млн., во 2 серии до 432,9±25,4 млн.

2.2.2.Морфометрический анализ динамики площадей структурных компонентов лимфоидных органов

В наружном паховом лимфатическом узле поросят 1 контрольной группы на долю коркового вещества органа приходилось от 19,0 до 19,6% площади, лимфатических узелков без светлых центров - от 5,1 до 5,23%, со светлыми центрами - от 0,46 до 0,57%, мякотных тяжей - от 12,6 до 13,4%, паракортикальной зоны - от 9,9 до 10,5%.

У поросят 2 группы установили изменения в Т- и В- зависимых зонах, которые проявлялись уменьшением площади лимфоузелков без светлых центров и со светлыми центрами, вплоть до их исчезновения, уменьшением площади мякотных тяжей и паракортикальной зоны. Площадь мякотных тяжей к концу опыта составила 4,1 ±0,11%, паракортикальной зоны -3,7±0,16%. Эти изменения происходили при расширении площади коркового плато органа до 39,9±0,15%.

В лимфатическом узле поросят 3,4 и 5 групп наблюдали некоторое расширение площади лимфатических узелков со светлыми центрами, мякотных тяжей, паракортикальной зоны. Они были слабо выраженными, но более активными в серии опытов с универмом, по сравнению с ринталом.

В лимфатическом узле поросят 6 группы, иммуноморфологические перестройки, по сравнению с предыдущими группами, были значительными. Площадь лимфоузелков со светлыми центрами увеличивалась в серии с ринталом до 35 (25) дня - 16,9±0,14% и превысила контрольный показатель поросят 1 группы в 32,1 раза, в серии с универмом - до 25 (15) дня -22,7+0,16% и в 49,3 раза была выше контрольного значения. Мякотные тяжи расширились до уровня 17,1+0,22% и 19,0±0,11%. Наибольший показатель паракортикальной зоны был равен в серии с ринталом -21,0+0,16%, с универмом - 22,910,17%. Наиболее высокого уровня достигли перестройки в Т- и В- зависимых зонах наружного пахового лимфатического узла поросят 7 группы. Пик расширения площади лимфоузелков со светлыми центрами регистрировали к 35 (25) дню, которая в серии с ринталом составила 19,4+0,17%, что в 37,3 раза было выше контроля, а в серии с универмом -25,910,24%, превысив контроль в 49,8 раза. В конце опыта этот показатель был выше контрольного в 11,9 и в 20,7 раза. Мякотные тяжи имели максимальное значение, равное - 18,0+0,12% и - 23,810,22%. Расширение площади паракортикальной Т- зависимой зоны продолжалось в серии с ринталом до 25 (15) дня - 25,9+0,31%, с универмом до 35 (25) дня - 23,610,25%.

В селезенке поросят 1 контрольной группы средняя площадь красной пульпы, за период опыта, составила 70,8%, белой пульпы 26,2%, капсул и трабекул 2,7%. В белой пульпе на долю периваскулярной лимфоидной муфты приходилось 8,65% площади, лимфатических узелков без светлых центров 16,3%, со светлыми центрами 1,22%.

Ассоциативное сальмонеллезно-аскариозное заболевание поросят (2 группа) способствовало деструктивным изменениям в органе. Они выражались в виде расширения площади, занимаемой красной пульпой. К 65 дню исследований она составила 92,2+0,49%. Площадь белой пульпы, к концу опыта, уступала контролю в 7,0 раз. При этом показатель площади, занимаемой периваскулярной муфтой, был ниже контроля в 9,79 раза, лимфатическими узелками без светлых центров уступал контролю в 5,71 раза. Лимфатические узелки со светлыми центрами к 65 и 95 дням в селезенке не регистрировались.

У животных 3, 4 и 5 групп отмечали не продолжительное и не высокое расширение площадей Т- и В- зависимых зон в селезенке. Они не достигали контрольного показателя поросят 1 группы, к концу опытов вновь понижались и значительно уступали ему.

В селезенке поросят 6 группы расширение площади периваскулярной муфты в серии с ринталом продолжалось 65 (55) дня - 11,9+0,12%, с универмом до 35 (25) дня - 15,810,13%. Увеличение площади лимфоузелков со светлыми центрами происходило в обеих сериях опытов до 35 (25) дня -15,8±0,16 и 19,310,27%. Самого высокого уровня исследованные парамет

ры в Т- и В- зонах селезенки достигли у животных 7 группы. Лимфоузелки со светлыми центрами к 35 (25) дню составили в серии с ринталом 16,7±0,12% , с универмом - 22,8±0,14%. Площадь периваскулярных муфт превысила контроль, к этому сроку, в серии с ринталом в 1,61 раза, составив 13,9±0,31%, с универмом - в 1,85 раза - 16,0±0,18%. Это способствовало расширению общей площади белой пульпы. К 95 (85) дню площадь лимфо-узелков со светлыми центрами была выше контроля в серии с ринталом в 6,53, с универмом - в 12,7 раза, периваскулярных лимфоидных муфт - в 1,38 ив 1,53 раза. Показатели поросят 8 группы значительно уступали таковым у животных 6 и 7 групп. В тимуса контрольных поросят 1 группы площадь коркового вещества изменялась, за период опытов, от 54,6 до 56,7%, мозгового - от 43,3 до 45,4%.У поросят 2 группы отмечались значительные структурные изменения в тимусе. Они проявлялись уменьшением площади коркового вещества, при увеличении мозгового. К концу опыта площадь коркового вещества тимуса в 1,65 раза была меньше показателя контроля и составила 34,3±1,94%. В тимусе поросят 3, 4 и 5 групп регистрировали достоверные расширения площади коркового вещества, которые были не продолжительными и достигали лишь в серии опытов с универмом уровня контрольных животных.

Наиболее ярко выраженной была перестройка структуры тимуса у поросят 6 и, особенно, 7 групп. В тимусе животных этих групп в серии с ринталом максимальный уровень площади коркового вещества был равен 67,4±1,87 и 76,9±2,44%, в серии с универмом 73,6±1,74 и 79,2±1,18%.

У животных 8 группы самый высокий показатель площади коркового вещества органа был равен 61,4+0,97%, что превышало его уровень у поросят 2, 3,4, 5 групп, но было ниже значения у животных 6 и 7 групп.

2.2.3. Гистохимическая характеристика лимфоидных органов

В наружном паховом и брыжеечном лимфатическом узлах поросят контрольной группы отмечали умеренную реакцию на ЩФ вокруг лимфатических узелков и в слабой степени в мякотных тяжах. На НЭ - в паракорти-кальной зоне и частично в синусах и мякотных тяжах. У поросят 2 группы реакции на ЩФ и НЭ были слабо выраженными и проявлялись в виде следовой реакции в лимфатических узелках и в мякотных тяжах. В лимфатических узелках поросят 3, 4, 5 и 8 групп к 35 (25) дню отмечали активизацию реакции на ЩФ и НЭ - гистохимическая картина препарата была схожей с рисунком поросят контрольной группы.

У животных 6 и 7 групп в наружном паховом лимфатическом узле отмечали выраженную реакцию на ЩФ уже в начале опыта. Она проявлялась вокруг лимфатических узелков, в самих узелках, в мякотных тяжах и в кор-

ковом плато органа.

Реакция на НЭ была ярко выражена в паракортикальной зоне брыжеечного лимфоузла и слабее - наружного пахового. Наиболее активно она проявлялась у поросят 7 группы в серии опыта с универмом.

В селезенке животных контрольной группы клетки с положительной реакцией на ЩФ выявлялись в лимфатических узелках (при отсутствии в периваскулярной муфте) и частично обнаруживались в красной пульпе. Реакция на НЭ проявлялась в виде узкого ободка вокруг лимфатических узелков и диффузно в зоне периваскулярных лимфоидных муфт.

У животных 2 группы отмечали угнетение реакции на ЩФ и НЭ, которые проявлялись в виде единичных клеток со стертой картиной в соответствующих зонах органа. У животных 6 и, особенно, 7 групп отмечали самую выраженную реакцию на ЩФ, которая была интенсивной в лимфатических узелках и четко проявлялась в красной пульпе.

НЭ - содержащие клетки обнаруживались в периваскулярных лимфоидных муфтах, вокруг лимфатических узелков и между ними и в виде очаговых скоплений в красной пульпе. Эта картина была наиболее выраженной в серии опыта с универмом.

Гистохимический анализ показал, что в тимусе поросят всех групп реакция на ЩФ была положительной только в стенках капилляров. НЭ- содержащие клетки локализовались в корковом веществе органа. В мозговом веществе они отсутствовали. У поросят 2 группы реакция на НЭ ослабевала как по выраженности, так и по занимаемой в органе площади.

В тимусе поросят 3, 4, 5 и 8 групп клетки содержащие НЭ напоминали таковую поросят 1 контрольной группы. Наибольшее количество клеток с положительной реакцией на НЭ регистрировалась у поросят 6 и 7 групп. У животных 7 группы в серии с универмом отдельные НЭ- содержащие клетки встречались в мозговом веществе долек тимуса.

2.2.4. Динамика клеточного состава костного мозга

В костном мозге поросят контрольной группы клетки зернистого ростка лейкоцитов, в течение опыта, понизились от 49,9 до 45,3%, эозинофилы - от 1,5 до 1,1%, моноциты, мегакариоциты и плазматические клетки - от 1,64 до1,91%. Клетки эритроидного ростка повысились от 38,7 до 44,1%, лим-фоидные от 5,5 до 7,41%. У животных 2 группы отмечали угнетение выра-

ботки клеток зернистого ростка в составе палочко- и сегментоядерных ней-трофилов на 65 день в 1,7 раза, при активизации эозинофилов - в 18,3 раза. Клетки эритроидного ростка, к концу опыта, уступали контролю в 2 раза, лимфоидные - в 3,06.

Моноциты, мегакариоциты и плазматические клетки до 15 дня повышались - 2,02±0,006%, в последующем понизились - 1,12±0,007%.У поросят 3, 4 и 5 групп реакция костного мозга была однотипной, пониженной и отличались активностью эозинофилов, которые максимально повысились в 16,8, 10,0 и 7,16 раза.

Высокая активность костного мозга, в обеих сериях опытов, отмечалась у поросят 6 и, более выраженнее, 7 групп.

У поросят 7 группы максимум клеток зернистого ростка без эозинофилов составили в серии с ринталом - 59,6±0,46, с универмом -61,8+0,37%, эритроидного ростка - 47,3±0,32 и 50,3±0,46%, лимфоидные -14,4±0,18 и 15,710,13%, моноциты, мегакариоциты и плазматические клетки - 3,3110,07 и 3,1Ю,09%.

Активность костного мозга поросят 8 группы уступала уровню животных 6 и 7 групп.

2.2.5. Динамика микробиоценоза кишечника

У поросят 1 контрольной группы отмечали достоверные изменения микробиоценоза кишечника в сторону некоторого понижения нормофлоры и повышения условно- патогенных микроорганизмов.

В кишечнике животных 2 группы, больных сальмонеллезно- аскариоз-ным заболеванием, развивались явления выраженного дисбактериоза. К концу эксперимента бифидобактерии уступали значению контроля в 7,71, лактобациллы - в 6,16 раза. Условно-патогенные микроорганизмы, напротив, превысили уровень контрольных животных : эшерихий - в 1,47, энтерококки - в 1,42, стафилококки - в 1,74, протеи - в 2,15, клостридии - в 1,82, псевдомоны - в 2,23, сальмонеллы - в 15,1, микрогрибы кандида - в 1,55 раза.

У животных 3, 4 и 5 групп отмечали, некоторое повышение нормофлоры и понижение активности условно- патогенных микроорганизмов, по

сравнению с уровнем поросят 2 группы. Однако, эти перестройки в микробиоценозе кишечника были недостаточны и уступали их уровню у контрольных поросят.

Нормофлора кишечника поросят 6 группы динамично увеличивалась, превысив показатель 1 контрольной группы, в серии с ринталом: бифидо-бактерии - в 1,4, лактобациллы - в 1,7; с универмом - в 1,46 и 1,93 раза. Условно-патогенные бактерии уменьшались в численности и к концу опыта были ниже контрольного значения в серии с ринталом и универмом: эше-рихий - в 1,48 и 1,61, стафилококки - в 1,26 и 1,42, протеи в 2,2 и 2,5, клост-ридии - в 1,03, псевдомоны - в 1,41 и 1,7, сальмонеллы - в 1,15 и 1,29, микрогрибы кандида- в 1,31 и 1,33 раза.

Полное восстановление, до нормального соотношения микробных видов, составляющих микробиоценоз кишечника , установили у животных 7 группы. К окончанию экспериментов, в группе с ринталом и универмом бифидобактерии превышали контроль в 1,53 и 1,7, лактобациллы - в 2,62 и 2,75 раза. Условно- патогенная флора значительно уменьшилась в численности и к 95(85) дню была ниже контроля: эшерихий - в 1,54 и 1,8, энтерококки - в 1,67 и 1,78, стафилококки - в 1,52 и 1,67, протеи - в 2,85 и 3,3, кло-стридии - в 1,56 и 1,65, псевдомоны - в 1,7 и 1,88, сальмонеллы - в 1,31 и 1,4, микрогрибы кандида - в 1,46 и 1,61 раза.

В кишечнике поросят 8 группы эти процессы значительно уступали их уровню у животных 6 и 7 групп.

2.2.6.Показатели прироста массы тела, сохранности поросят и тимического индекса

В 1 контрольной группе прирост массы тела поросят составил 16,3±0,32 кг, среднесуточный прирост - 182,2±1,24 г, сохранность поросят - 71,4%, тимический индекс - 2,8.

Самые низкие показатели были у животных 2 группы: прирост массы тела - 6,1±0,16 кг, среднесуточный прирост - 67,7+2,17 г, сохранность -21,4%. Тимический индекс - 0,6 свидетельствовал о выраженной иммунной недостаточности, вплоть до необратимых изменений в иммунной системе.

У поросят 3, 4 и 5 групп все вышеизложенные параметры были низкими, превышали незначительно лишь показатели животных 2 группы. Тими-ческие индексы от 1,2 до 1,5 показали иммунологическую недостаточность.

Показатели поросят 6 группы составили: прирост массы тела в серии с ринталом - 20,2±0,18, с универмом - 25,2+0,18 кг, среднесуточный прирост - 225,412,13 и 280,2±3,46 г, сохранность - 75,0 и 83,8%. Тимические индексы - 2,5 и 2,9 соответствовали нижней границе иммунологического

благополучия поросят. Титры противосальмонеллезиых агглютининов значительно превышали показатели поросят 3 группы, но уступали их уровню у животных 7 группы в обеих сериях опытов.

Самые высокие показатели были у поросят 7 группы. Прирост массы тела в серии с ринталом составил 30,6±0,23, с универмом - 35,6±0,22 кг, среднесуточный прирост - 340,0±5,18 и 396,5±3,17 г, сохранность - 96,4 и 96,7%. Тимический индекс - 3,6 и 3,9 указывал на хороший и высокий иммунологический статус поросят.

ВЫВОДЫ ПО 1 ГЛАВЕ

1. Биологически активные продукты пчеловодства (БАПП): прополис, цветочная пыльца и маточное молочко оказывают не одинаковое воздействие на иммунный статус организма и микробиоценоз кишечника, в зависимости от вида и дозы применяемого препарата.

2. Низкие дозы вызывают умеренное повышение факторов естественной резистентности: комплементарной и бактерицидной активности сыворотки крови, фагоцитарной активности нейтрофилов, восстанавливая их до нормального физиологического уровня;

- способствуют умеренной пролиферации и повышению уровня Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов в крови, лимфатических узлах, селезенке и Т-Е-РОК-лимфоцитов в тимусе;

- вызывают иммуноморфологические реакции средней активности в Т -В-зависимых зонах лимфоидных органов;

- способствуют восстановлению и поддержанию соотношения бифидо-бактерий и лактобацилл и условно-патогенных микроорганизмов до уровня, соответствующей физиологическим нормам.

3. Средние дозы БАПП способствуют сильной активизации показателей естественной резистентности организма и длительному сохранению их на высоком уровне (в группе с прополисом комплементарная активность максимально превышает контроль в 4,7, бактерицидная- в 1,81, фагоцитарная - в 2,5 раза; с цветочной пыльцой - в 2,35, 1,65, 2,07 раза, с маточным молочком -в 5,17,1,93,2,67 раза);

- значительно активизируют реакции иммунокомпетентных клеток в виде увеличения и длительного поддержания их на высоком уровне в крови и в лимфоидных органах относительного и абсолютного количества Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов. Т-Е-РОК-лимфоциты, Т-хелперы, В-ЕАС-лимфоциты достигли уровня, превышающего контрольное, значение:

а/ в крови в прополисной группе в 1,2, 1,63, 1,92, в группе с цветочной пыльцой в 1,1, 1,52, 1,57, с маточным молочком в 1,24,1,95,2,14раза

в/ в лимфатических узлах в прополисной группе - в 1,31, 1,63, 1,42, в группе с цветочной пыльцой - в 1,22, 1,51, 1,27, с маточным молочком - в 1,52, 1,84, 1,52раза;

в/ в селезенке в прополисной группе - в 1,28, 1,27, в группе с цветочной пыльцой в 1,21, 1,15, с маточным молочком - в 1,37, 1,38 раза;

г/ в тимусе абсолютное количество Т-Е-РОК-лимфоцитов максимально превышает контрольное значение в прополисной группе в 1,2, в группе с цветочной пыльцой - в 1,04, с маточным молочком - в 1,28 раза;

- вызывают глубокие иммуноморфологические перестройки в Т- и В-зависимых зонах лимфоидных органов:

а/ в лимфатических узлах виде расширения зоны (максимально превышающее контрольный показатель в прополисной группе в 1,34, в группе с цветочной пыльцой - в 1,20, с маточным молочком - в 1,37 раза), лимфо-узелков со светлыми центрами (соответственно в 11,4, 10,2, 18,7 раза);

б/ в селезенке в виде расширения площади периваскулярных лимфоидных муфт (превышающее контрольный показатель в прополисной группе в 1,56, в группе с цветочной пыльцой - в 1,45, с маточным молочком - в 1,63 раза), лимфоузелков со светлыми центрами без учета площади периваскулярных лимфоидных муфт (соответственно в 13,0, 11,4,14,6 раза) и уменьшение площади красной пульпы органа;

в/ в структуре тимуса в виде расширения площади коркового вещества, превышающее контрольное значение в прополисной группе в 1,25, в группе с цветочной пыльцой - в 1,16, с маточным молочном в 1,32 раза и уменьшения площади мозгового вещества;

- способствуют высокой активизации размножения в кишечнике бактерий - пробионтов: бифидо- и лактофлоры (максимально превышающие контроль в прополисной группе в 3,13, 3,02, в группе с цветочной пыльцой в 2,78, 2,84; с маточным молочком - в 3,18; 3,4 раза) и затормаживают рост условно-патогенных микроорганизмов: эшерихии, энтерококков, стафилококков, протея, клостридий, псевдомонов, микрогрибов кандида.

4. Высокие дозы БА1111: прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка вначале вызывают бурное повышение факторов естественной резистентности организма, а затем резкое торможение их, способствуя полному разрушению общей резистентности организма;

-развивают глубокие иммунодефицитные состояния, проявляющиесг пролиферацией и повышением в крови и лимфоидных органах Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов, В-ЕАС-лимфоцитов и Т-супрессоров, а затем внезапным уменьшением количества Т-Е-РОК-лимфоцитов, Т-хелперов и В-ЕАС-лимфоцитов и дальнейшей активизацией Т-супрессоров;

-вызывают деструктивные изменения в структурах лимфоидных

органов, проявляющиеся угнетением и уменьшением площадей Т- и В- зависимых зон в них;

- способствуют нарушению нормального микробиоценоза кишечника, развивая состояние дисбактериоза;

- наиболее реактогенными в отношении иммунной системы и естественного микробиоценоза кишечника являются высокие дозы маточного молочка.

5. На коррекцию иммунного статуса организма и естественного микробиоценоза кишечника поросят оказывают активное воздействие средние дозы маточного молочка, затем прополиса и более умеренно действует цветочная пыльца.

6. БАПП различно влияют на сохранность поросят и показатели прироста живой массы, в зависимости от вида и дозы продукта:

-самые высокие среднесуточные приросты живой массы регистрируются у поросят, получавших средние дозы БАПП прополиса - 275,0 г, маточного молочка 298,3 г, цветочной пыльцы -251,6 г, при сохранности поросят 100,0, 100,0 и 96,4% (контроль - 175,0 г %);

- низкие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка способствуют умеренному среднесуточному приросту живой массы: 215,0 г, 190,0 г, 240,0 г, при сохранности поросят 89,2; 85,7 и 92,8 ;

-высокие дозы прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка угнетают среднесуточный прирост живой массы: 125,0 г, 141,6 г, 100,0 г и вызывают высокий процент падежа, при сохранности их 42,8; 46,2 и 39,2% ( контроль - тот же).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПО 1 ГЛАВЕ

Учитывая экономическую эффективность, доступность, удобство, простоту в применении и высокую биологическую активность прополиса считаем целесообразным применение его в традиционных СТФ для коррекции иммуногенеза и естественного микробиоценоза кишечника поросят в виде прополисного молочка в средних дозах (5 мл прополисного молочка, приготовленного из расчета 5 мл 20 % спиртового экстракта прополиса на 1000 мл кипяченной и охлажденной воды, 2 раза в день; или 5мл прополисного молочка, приготовленного из расчета 10 мл 20 % спиртового экстракта прополиса на 1000 мл кипяченной и охлажденной воды 1 раз в день с водой в течение 7-10 дней).

ВЫВОДЫ ПО 2 ГЛАВЕ

1. В традиционных СТФ, неблагополучных по сальмонеллезу и аскариозу в организме поросят, вследствие развития аскариозной инвазии, достигающей стадии миграции личинок, к месячному возрасту, иммунная система и микробная ассоциация кишечника, находящиеся на стадии становления, закономерно претерпевают изменения в сторону нарушения иммунного статуса и соотношения между бифидо- и лактофлорой и условно- патогенными микроорганизмами.

2.Ассоциативное сальмонеллезно- аскариозное заболевание поросят приводит к развитию в организме глубоких иммунодефицитов и выраженного дисбактериоза, характеризующиеся:

-понижением естественной резистентности ( комплементарная активность в 3,4, бактерицидная в 4,8 раза);

-повышением эозинофилов в крови в 2,55 раза; -уменьшением содержания Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови в 1,82, в наружном паховом лимфатическом узле в 1,4, в брыжеечном - в 7,04 раза;

В-ЕАС-лимфоцитов - в крови в 2,14 раза, в наружном паховом лимфатическом узле - в 2,27, в брыжеечном - в 2,56 , в селезенке - отн. количество - в 1,78 раза;

-активизацией супрессивных реакций ( увеличение Т-супрессоров в крови в 1,88, в наружном паховом лимфатическом узле в 1,77, в брыжеечном - в 2,87 раза);

-деструктивными изменениями в центральных и периферических органах иммуногенеза в виде уменьшения площадей Т- и В-зависимых зон;

-понижением активности гистохимических реакций на НЭ и ЩФ в местах наибольшего скопления Т- и В-лимфоцитов в лимфатических узлах, селезенке, тимусе;

-затормаживанием в центральном органе иммуногенеза - костном мозге пролиферации клеток зернистого ростка ( без эозинофилов) в 1,7 раза, эритроидного - в 2,0, лимфоидных клеток - в 3,06 раза, при активизации эозинофилов в 18,4 раза;

-нарушением микробиоценоза кишечника при уменьшении бифидобак-терий в 7,71, лактобацилл в 6,15 раза и повышении уровня условно- патогенных микроорганизмов с активизацией гемолитических свойств.

3.Иммунизация поросят в традиционных СТФ, неблагополучных по сальмонеллезу и аскариозу, сухой живой вакциной из штамма ТС-177, на фоне дегельминтизации универмом 0,2% и стимуляции прополисом, способствует созданию в организме прочного иммунного баланса и

-вырабатывается иммунитет высокой напряженности; -повышается уровень Т-Е-РОК-лимфоцитов в крови в 1,23, в наружном паховом лимфатическом узле в 1,3, в брыжеечном - в 1,27, в селезенке -

отн.количество в 1,64, абс. количество в 1,45, в тимусе - абс. количество в 1,36 раза; Т-хелперов в крови в 1,44, в наружном паховом установлению нормального микробиоценоза кишечника:

-активизируется антителогенез и факторы естественной резистентности (комплементарная активность сыворотки крови повышается в 7,52, бактерицидная - в1,8 раза);лимфатическом узле в 1,65, в брыжеечном в 1,42; В-ЕАК-лимфоцитов в крови в 1,41, в наружном паховом лимфатическом узле - отн. количество в 1,23, абс. количество в 1,16, в брыжеечном - отн. количество в 1,47, абс. количество в 1,48 раза;

-Т-супрессоры снижаются до уровня контроля;

-активизируются иммуноморфологические перестройки в Т- и В-зависимых зонах лимфоидных органов:

а) в лимфатических узлах в виде расширения площади паракортикаль-ной (Т-зависимой) зоны в 2,29 раза, лимфатических узелков со светлыми центрами и мякотных тяжей (В-зона) в 49,8 и в 1,85 раза;

б) в селезенке в виде относительного увеличения площади периваску-лярных лимфоидных муфт (Т-зона) в 1,85 раза, лимфатических узелков со светлыми центрами без учета периваскулярных лимфоидных муфт (В-зона) в 18,2 раза;

в) в тимусе в виде расширения площади коркового вещества в 1,39 раза; -активизируются и усиливаются процессы пролиферации и дифференциации В- и Т-лимфоцитов, регистрируемые через гистохимические реакции на ЩФ и НЭ, проявляющиеся:

а) в лимфатических узлах расширением мест локализации ЩФ (концентрируемой в В-лимфоцитах) в корковом плато и в мякотных тяжах мозгового слоя и НЭ ( концентрируемой в Т-лимфоцитах) в паракортикальной зоне и в синусах мякотных тяжей;

б) в селезенке - интенсивной реакцией на ЩФ не только в лимфатических узелках, но и в красной пульпе и регистрацией НЭ-содержащих клеток в периваскулярных лимфоидных муфтах, вокруг лимфатических узелков, между ними в виде очаговых скоплений в красной пульпе;

-в) в тимусе - интенсивной локализацией НЭ-содержащих клеток в корковом веществе и частично в мозговом веществе.

-в костном мозге максимально увеличивается количество клеток зерни стого ростка лейкоцитов (без эозинофилов) до 61,8% (контроль - 7,8%), эритроидного ростка до 50,3% ( контроль - 43,6%), лимфоидных клеток до 15,7% ( контроль - 6,26%), а также моноцитов, мегакариоцитов и плазматических клеток до 3,1% (контроль - 1,84%);

-восстанавливается естественный микробиоценоз кишечника с активным повышением бифидобактерий и лактобацилл, превысивших контрольное значение в 1,81 ив 2,62 раза, при усиленном понижении условно- патогенных микроорганизмов: эшерихий, энтерококков, стафилококков, протея, клостридий, псевдомонов, сальмонелл, микрогрибов кандида.

4.Антгельминтик универм 0,2% обладает менее выраженными супрессивными свойствами, по сравнению с ринтал 10% гранулятом.

5.Прополис, применяемый в качестве иммуномодулятора способствует повышению антигенных и иммуногенных свойств вакцин, снижает супрессивное воздействие антгельминтиков, повышает и пролонгирует иммунные реакции и активность бифидобактерий и лактобацилл в кишечнике.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПО 2 ГЛАВЕ

1. В традиционных СТФ республики Башкортостан, неблагополучных по ассоциативному сальмонеллезно- аскариозному заболеванию поросят иммунизацию поросят следует проводить живой сухой вакциной из штамма ТС-177 ( согласно наставлению по применению ) на фоне обязательной предварительной дегельминтизации ( на стадии миграции личинок в 29-30 дневном возрасте поросят) с параллельной стимуляцией прополисом ( с 29 дневного возраста в течение 5 или 7-10 дней в виде прополисного молочка). Порядок приготовления моточного молочка и его применения в качестве иммуномодулятора описан в практических предложениях по 1 главе диссертации.

2. В качестве антгельминтика целесообразно применять универм 0,2%. Универм 0,2% - новый отечественный препарат, полученный на базе природного авермиктинового комплекса, образуемого культурой З^ерЬэггпсез ауептийНз ВНИИСХМ - 54. Разработан НПО «Фармбиомед» (г. Москва). Наставление по применению утверждено Департаментом ветеринарии МСХ и П РФ 04.07.95 г.

Список основных опубликованных работ по теме диссертации:

1. Маннапова Р.Т. Влияние препаратов прополиса, в составе сальмонел-лезного антигена, на Т- и В-зависимые зоны селезенки / Достижения ветеринарной и зоотехнической науки в животноводство.-Казань.-1985. -С.26-27.

2.Маннапова Р.Т. Биоморфология Т- и В-зависимых зон лимфатических узлов под влиянием антигена с прополисом // Материалы 10 Всесоюз. съезда анатомов, гистологов и эмбриологов.-Полтава.-1986. -С.229.

3. Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Влияние прополисполиэтиленгликоле-вого адъюванта на иммуногенез // Роль молодых ученых в интенсификации сельскохозяйственного производства.-Уфа.-1986. -С.

4.Маннапова Р.Т., Кивалкина В.П. Иммуноцитологическая перестройка лимфатических узлов под влиянием сальмонеллезного антигена с прополисом //Использование продуктов пчеловодства в медицине и ветеринарии.-Вологда.-1987.- С.41.

5.Маннапова Р.Т., Хакимова Ф.М. Иммуноморфологические реакции органов тимико-лимфатической системы в динамике первичного иммунного ответа//Возрастная и экологическая морфология животных в условиях интенсивного животноводства.-Ульяновск.-1987.-С. 142-143.

6.Маннапова Р.Т. Рекомендации по применению препаратов прополиса для инактивирования сальмонелл. -Уфа.- 1987. -2с.

7.Маннапова Р.Т. Сравнительно-морфологическое исследование интенсивности реакции лимфоидных тканей некоторых органов при иммунизации антигеном с различными формами препаратов прополиса. Деп.рук.-Омск.-1988,- б/o.-N 6.

8. Маннапова Р.Т., Кивалкина В.П. Влияние на иммуногенез различных доз прополиса // Апитерапия. Биология и технология продуктов пчеловодства. - Днепропетровск., 1988. - Ч. И. - С. 171-173.

9.Маннапова Р.Т., Кивалкина В.П. Влияние прополиса в сочетании с ко-стно-мозговой вытяжкой на завершенность фагоцитоза // Сб. Животноводству - комплексную программу развития. - Казань, 1990. - С. 56.

Ю.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Стимулирование В-лимфоцитов и Т-хелперного фактора в органах иммунной системы препаратами прополиса в сочетании с костно-мозговой вытяжкой в составе антигена // Бактериальные болезни растений. - Киев-Львов, 1990. - Ч. 1. - С. 119-120.

П.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г., Кивалкина В.П. Изучение фагоцитарной активности лейкоцитов в крови кроликов иммунизированных препаратами прополиса с костно-мозговой вытяжкой в составе антигена // Бактериальные болезни растений. - Киев-Львов, 1990. - Ч. 1. - С. 118-119.

12.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Переваривающая способность лейкоцитов крови после иммунизации сальмонеллезным антигеном с препаратами прополиса //Физиологические механизмы адаптации человека и животных,-Свердловск.-1990.-С.68.

П.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Изучение чувствительности некоторых видов возбудителей сальмонеллеза к инактивированию препаратами прополиса // Апитерапия и пчеловодство. - Гадяч, 1991. - С. 95-97.

14.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Адъювантное действие препаратов прополиса на завершенность фагоцитоза // там же - Гадяч, 1991. - С. 62-72.

15.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г., Сагитов Р.З. Использование продуктов пчеловодства в системе специфической профилактики сальмонеллезов /Интенсификация сельскохозяйственного производства.-Уфа,-1992.-С.41 -42.

16. Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Экологически чистые противосальмо-неллезные вакцины с препаратами прополиса// Апитерапия сегодня,-Рыбное,-1993.-С.38-39.

17.Маннапова Р.Т. Сравнительное изучение иммунногенности противо-сальмонеллезных вакцин / Тез.докл.102 науч. конф. БГАУ.-Уфа.-1993.-С.21.

18.Маннапова Р.Т. Сочетанное действие препаратов прополиса и пчелиного яда на завершенность фагоцитоза // Успехи физиологических наук, 1994. - Вып. 3. - Т. 25. - С. 98.

19.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г., Шафикова Р.Г. Влияние на иммуногенез различных доз цветочной пыльцы // Сб. Краевая патология животных в условиях республики Башкортостан. - Уфа, 1995. - С. 33-34.

20.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г., Мухаметшина З.М. Сочетанное применение цветочной пыльцы с антибиотиками // Сб. Краевая патология животных в условиях республики Башкортостан. - Уфа, 1995. - С. 36-38.

21.Маннапова Р.Т. Динамика разных популяций Т-лимфоцитов при антигенной стимуляции с костно-мозговой вытяжкой и прополисом // Сб. Проблемы зоотехнии и ветеринарной медицины. - Уфа, 1996. - С. 209-212.

22.Маннапова Р.Т. Иммунологическая активность антигенов из местных сероваров сальмонелл, выделенных в разные годы // Сб. Проблемы зоотехнии и ветеринарной медицины. - Уфа, 1996. - С. 212-213.

23 .Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Влияние костно-мозговой вытяжки в составе антигена на иммунную морфологию и антителогенез // Актуальные проблемы ветеринарии и зоотехнии.-Казань.-1996.-С.22.

24.Маннапова Р.Т. "Иммуноморфологические перестройки в лимфоид-ных органах под влиянием различных доз БАПП: прополиса, цветочной пыльцы и маточного молочка". Рекомендации. - М.- 1996.-27с.

25.Маннапова Р.Т., Панин А.Н. "Коррекция естественного микробиоценоза кишечника при ассоциативном сальмонеллезно - аскариозном заболевании поросят и его профилактике". Рекомендации. - М.- 1996.-16с.

26.Маннапова Р.Т., Маннапов А.Г. Фагоцитарная реакция при иммунизации антигеном из местных сероваров сальмонелл с разными адъювантами // Актуальные проблемы ветеринарии и зоотехнии.-Казань.-1996.-С.23.

27.Маннапова Р.Т., Панин А.Н. "Применение продуктов пчеловодства для стимуляции иммуногенеза и коррекции микробиоценоза кишечника поросят". Рекомендации. - М,- 1997.-19с.

28.Маннапова Р.Т., Панин А.Н. Использование препаратов прополиса для коррекции иммунитета при сальмонеллезах и ассоциативных сальмонеллезно - аскариозных заболеваниях поросят в условиях традиционных СТФ республики Башкортостан. Рекомендации. - М.- 1997.

29.Маннапова Р.Т., Нурхаметов Х.Г., Кадыров У.Г. Новые методические основы к коррекции иммуногенеза при ассоциативном аскариозно-сальмонеллезном заболевании поросят // Матер. Всеросс. симп. Роль гельминтологической школы в развитии паразитологии. - М., 1997. - С. 30-31.

30. Маннапова Р.Т. Иммунный статус и профилактика при сальмонеллез-но-аскариозном заболевании поросят // Тр. Всеросс. ин-та гельминтологии им. К.И. Скрябина. - М., 1997. - Т. 33. - С. 121-129.

31.Маннапова Р.Т. Иммуноморфологические изменения в лимфоидных органах и их коррекция при ассоциативном сальмонеллезно-аскаридозном заболевании поросят // Тр. Всеросс. ин-та гельминтологии им. К.И. Скрябина. М., 1997. - Т. 33. - С. 130-139.

32. Маннапова Р.Т. Комплексные исследования биологических закономерностей иммуногенеза с продуктами пчеловодства // Сб. научно-исслед. работ по пчеловодству.-Уфа.-1997.-С.92-94.

33. Маннапова Р.Т. Иммунный статус при сальмонеллезно-аскариозном заболевании поросят // Тр. Всеросс. науч. конф. Актуальные вопросы медицинской паразитологии. - С.-Петербург, 1998. - С.24.

34. Маннапова Р.Т. Микроэкология кишечника и его коррекция при ассоциативном сальмонеллезно-аскариозном заболевании поросят // Тр. Всеросс. науч. конф. Актуальные вопросы медицинской паразитологии. - С.Петербург, 1998. - С.24.

35. Маннапова Р.Т. Коррекция иммуногенеза при профилактике ассоциативного сальмонеллезно-аскариозного заболевания поросят // Ветеринария. -1998. -№ 1.-С. 34-36.