Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.01) на тему:Иммунологические основы комплексного лечения больных кетозом коров и родившихся от них телят

министерство сельского хоаяйствл и ПРОДОВОЛЬСТВИЯ российской ФЕДЕРАЦИИ

санкт-петербургская государственная академия ветеринарной

МЕДИЦИНЫ

ОД

На правах рукописи

/г,"

ч;.и ил удК 616.391.1-08:636.2.053/.055

васильев Михаил Федорович

ишшзлогические основы кошлексного лечения больных кет030м коров и родившихся от них телят

16.00.01 - Диагностика и терапия животных

автореферат

диссертации на. соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Санкт-Пе тербург 1996

Работа выполнена на кафедре клинической диагностики Санкт-Петербургской государственной академии ветеринаркой медицины

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарные неук, лроЛс-г;-:: Ьц, работник

высшей школы Республики Беларусь Конопелько П.Я.;

доктор ветеринарных неук, профессор Анохин Б.Li-;

доктор ветеринарных наук, профессор Зедюк В.И.

Ведущая организация - Всероссийский научно-исследовательский институт патологии, фармакологии и терапии.

Защита диссертации состоится '¡Р£7' Cpt&f^XluJ- 1997 г. в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 120.20.01 в Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины по гдрзеу: 196084, г. Санкт-Петербург, ул. Черниговская, 5.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке- Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицинь

Автореферат разослан 'У5"" Л bdbCLfa^ 19У7 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доцент

Никшшв И.Б.

i. общая характеристика работы

Актуальность темы. Надежное снабжение населения продуктами питания отечественного производства является одной из главных задач экономики напей страны. Особое значение в современных условиях приобретает повышение качества, снижение себестоимости и обеспечение конкурентоспособности продукции животноводства. Реализация .этой цели возменна только при интенсивном ведении животноводства, повышении продуктивности всех видов скоте и сохранении их здоровья. Однако с ростом продуктивности коров увеличивается число случаев незаразных заболеваний, на долю которых приходится.96 -..98$ всех болезней животных (А.Д.Третьяков, 1977; В.П.'Шишков','" 1979; И.Г.Шарабрин и др., 1983).

Во всех странах г: интенсивным молочным скотоводством большим препятствием на пути увеличения продуктивности животных служат болезни обмена, веществ, от которых хозяйства несут большие потери (С.Симеонов, 1978; Д.Врзгула, ISS6; К.Н.Mutter, 1979). Среди болезней обмена веществ центральное место занимает кетоз, который наносит .значительный экономический ущерб хозяйствам за счет снижения продуктивности, нарушения воспроизводительной функции животных, сокращения сроков их использования, вынужденного убоя и, иногда, падежа. Нарушение обмена веществ у коров-матерей при этом заболевании отражается на здоровье молодняка. У телят, родившихся от коров, больных кетозем, наблюдаются тяжело протекающие желудочно-кишечные расстройства, вследствие того, что кетоновые тала, проникающие через плаценту, нарушают нормальное развитие плода. Выделяемые в большом количестве с молоком, кетоновые тела резко снижают его потребительские качества и представляют опасность для здоровья ливотных и человека (А.Н.Силаев, 1962; А.М.Смирнов и др., 1975; П.Я.Конопелько, 1976; К.П.Кондра-хин, 1980; И.М.Карпуть, Л.М.Пивовар, 1982; В.Т.Самохин, В.С.Буз-лака, 1983; С.И.Смирнов, 1985; В.П.Иноземцев, 1988; A.B.Жаров, 1995).

Интенсификация животноводства в числе других проблем предполагает учет физиологических возможностей организма животных на. всех этапах их индивидуального развития. Ваяным в этом отношении является внутриутробный период.. Плод живет в условиях, дающих возможность интенсивного развития, что обуславливает его высокую поврендаемость. Механизм повреждения плода при заболеваниях матери состоит в нарушении условий его жизнеобеспечения. Это может про-

является изменением различных параметров гомеостаза матери, изменениями матки и плаценты или проникновением к плоду веществ, чужеродных как для матери, так и для него (Т.Н.Шутова, Е.Д.Черникова, 1974; В.Н.Симонович, Н.В.Пилаева, 1988; Ю.П.Федоров, 1988; Ю.К.Пешкус, В.С.Домкус, 1988; G.S.Daves, 1973).

В связи с этим возникает необходимость в более полной информации об иммунологических особенностях организма, в возрастном аспекте, разработке принципиально новых, нетрадиционных подходов к решению вопросов имиунодефицитных состояний, прогнозирования развития возрастной патологии и коррекции нарушений механизмов защиты развивающихся животных. Однако в настоящее время нет целостного представления о взаимодействии плода с материнским организмом, об аутосинтезе им защитных факторов, о формах иымунореагирования и способах повышения резистентности оргэяизма животных в период внутриутробного развития (П.А.Волосков и др., 1958; Л.А.Трунова, 1984; П.А.Емельяненко, 1987; Я .H.bucWe^ et. al., 1982).

В условиях резко увеличивающихся физиологических нагрузок на животных при малейших нарушениях технологии содержания и кормления изменяются функции важнейших органов и систем, что приводи; к возникновению нарушений обменных процессов, в частности, развитию кетоза и снижению естественной резистентности организма (П.Я. Конопелько, А.Ф.Трофимов, 1977; Б.В.Уса, 1979; В.М.Данилевский, 1980; С.Н.Хохрин, 1980; В.Т.Самохин, 1982; И.П.Кондрахин, 1984; А.Ф.Могиленко, П.Я.Конопелько, 1986; 1987).

В этой связи изучение естественной резистентности и ее изменений при кетозе представляет актуальную задачу, в основу решения кйторой должен быть положен комплекс лечебно-профилактических мер, включающих коррекцию иммунной системы и неспецифических факторов защиты организма. Однако до настоящего времени многие аспекты этой сложной проблемы остаются не изученными. Большинство ранее применявшихся способов профилактики и лечения данной патологии имели одностороннюю направленность в плане воздействия на определенные звенья жирового, углеводного и белкового обмена веществ без учета состояния защитных сил организма как матери, так и новорожденного.

Целью работы явилось изучение иммуно-метаболического статуса у больных субклиническим кетоэом сухостойных коров и родившихся от них телят, а также разработка способов его коррекции.

В задачу наших исследований входило:

--определить ссстонкие обмена веществ и естественной резистентности у здоровых и больных субклиническим кетозом коров до и после отела;

- изучить имму'но-мётаболический статус у телят, полученных от здсроЕых и больных кетозом коров;

- изучить иммуко-биологические показатели амниотической жидкости и молозива у здоровых и больных кетозом коров;

- разравотать и изучить новые эффективные способы и средства лечения больных кетозом коров, в том числе с использованием иммуномодуляторов;,

- изучить состояние обмена веществ и естественной резистентности у телят,_родившихся-от_леченых коров. -- - ....... -

Научная новизна результатов исследования состоит в том, что впервые предпринята попытка комплексного изучения показателей неспецифичееких и специфических факторов защиты б сыворотке крови, амниотической жидкости и молозиве у больных кетозом коров -матерей и их взаимосвязи с аналогичными показателями крови.новорожденных телят; установлена взаимосвязь имкуно-мета-болического статуса с заболеваемостью молодняка б первые 10 дней жизни.

В соавторстве с А.М.Смирновым, В,С.Кондратьевым, С.П.Ковалевым разработаны и изучены два способа лечения коров, больных субклиническим кетозом, приоритет которых защищен авторскими свидетельствами №1508372 от 15.05.1989 г. и Ш515445 от I5.0G.I289r.

Для ишунокоррекции, в соавторстве с A.M.Смирновым, В.С.Кондратьевым, И.В.Никитиной, предложен и изучен тимоспленин (приоритет защищен авторским свидетельством №904707 от 14.10.1981 г.), а совместно с В.С.Кондратьевым и А.Н.Агеевым для этой цели предложен лейкоген (получено уведомление об удволетворении ходатайства о выдаче патента по заявке .V4404634/I5/052837 от 6.04.1988г.) Расшифрован механизм действия тимоспленина, лейкогена, ткмалина на. клеточные и гуморальные факторы иммунной системы и неспецифические факторы защиты организма больных кетозом коров-матерей и полученного от них приплода.

Практическая ценность и внедрение результатов исследования

Практическая ценность работы заключается в том, что показана динамика изменения обмена веществ у больных кетозом коров до

и после отела, установлено развитие у них вторичного иммунодефицита. Выявлена взаимосвязь иммуно-метаболического статуса коров-

матерей и родившегося от них молодняка.

Разработаны и апробированы в условиях сельскохозяйственого производства новые методы лечения больных кетозом сухостойных коров, в том числе с использованием иммуномодуляторов.

Ветеринарный фармакологический совет одобрил, а Главное управление ветеринарии Госагропрома СССР рекомендовало к внедрению "Временное наставление по применению метионина в комбинации с натуральным желудочным соком при кетозе коров (1987)" и "Временное наставление по применению сока желудочного натурального в комбинации с цианкоболамином и кислотой аскорбиновой при кетозе коров (1988)".

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Динамика показателей естественной резистентности и обмена веществ у больных кетозом коров до и после отела.

2. Оценка иммуно-биологических показателей амниотической жидкости и молозива и их роль в формировании иммунного статуса новоровденных телят.

3. Взаимосвязь естественной резистентности и обмена веществ у больных кетозом коров-матерей и родившихся от них телят.

4. Способы лечения больных кетозом коров, включая применение иммуномодуляторов.

Апробация работы. Основные результаты исследований доложены на Всесоюзной научной конференции "Проблемы диагностики, профилактики и лечения болезней обмена веществ у с.-х. животных в условиях промышленных комплексов" (Воронеж, 1978); областной научно-производственной конференции "Профилактика и лечение болезней с.-х. животных и птиц" (Ленинград, 19?<^ конференции молодых ученых и ветеринарных специалистов Нечерноземной зоны РОШСР (Горький, 1979); научно-практической конференции АН СССР "Биологически активные вещества в сельском хозяйстве" (Ленинград, 1988); научно-практической конференции "Профилактика незаразных болезней у коров" (Тарту, 1988); 4-й Межгосударственной научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" (С-Пб., 1992); 5-й Межгосударственной, межвузовской научно практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии" (С-Пб., 1993),

а так же ка ежегодных научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины.

П у б л.и к а ц и я. По материалам диссертации опубликована 21 научная статья.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 392 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов и предложений, списка литературы, включающего 497 источников, из них 97 иностранных. Работа иллюстрирована 53 таблицами и 14 рисунками. В приложении содержатся 3 таблицы и материалы по внедрению

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена на"кафедре клинической диагностики Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины и в хозяйствах Ленинградской области, основными из которых являлись молочные комплексы "Шушеры" и "Ручьи", в 1977 - 1995 гг.

В соответствии с поставленными задачами, материалом для исследования служили глубокоетельные (за 10 - 14 дней до родов) клинически здоровые и больные субклиническим кетозом коровы, а также родившиеся - от них телята. Отбор проводили по принципу аналогов с учетом физиологического состояния, возраста, продуктивности, данных клинического исследования, отсутствия или наличия выраженной кетонурии.

Определение физиологического состояния, выявление больных кетозом коров и контроль за эффективностью лечения осуществляли по следующей схеме: клиническое исследование с помощью общих методов; определение кетоновых тел в моче; исследование морфологического и биохимического состава крови; изучение состояния неспецифических факторов защиты организма и иммунной системы. У телят, кроме того учитывали привесы, заболеваемость, сохранность.

Всего проведено 7 серий опытов.

В первой серии были сформированы три группы глубокостельных коров. В первую группу были включены клинически здоровые животные (п = 24), во вторую - входили больные кетозом коровы, лечение которых-не проводили (п = 20), третью группу составляли больные кетозом коровы (п = 10), для лечения которым применяли подкожно натуральный желудочный сок лошадей I раз в сутки в течение 5 дней подряд в дозе 0,035 мл/кг массы тела животного и

и суспензию метионина (1:5) в дозе 0,025 мл/кг массы тела два раза.с интервалом 4-5 дней.

Исследование крови проводили до лечения (10 дней до отела), через 7 дней от начала лечения (3 дня до отела), через 10 дней от начала лечения (первый день после отела), через 20 дней от начала лечения (10 дней после отела), а у телят в первый и десятый день жизни. .-:.■.

Во второй серии опытов по мере выявления животных с кетон-урией также было отобрано три группы короз. Как и в предвдущем опыте, первую группу составляли клинически здоровые (п = 24), вторую больные субклиническим кетозом без лечения ( п = 20 ), а третью (п = 10) - больные кетозом, для лечения которых применяли подколно натуральный желудочный сок в дозе 0,035 мл/кг массы тела I раз в сутки в течение 5 дней подряд. Кроме того, также подкожно вводили аскорбиновую кислоту из расчета 0,003 г/кг массы тела двухкратно - на первый и третий день лечения и цианко-болашн внутримышечно в дозе 2,75 мг/кг массы тела I раз в сутки в течение 5 дней подряд. Лабораторные исследования крови проводили в те же сроки, что и в предвдущем опыте.

В третьей серии опытов, как и в предыдущих, было отобрано три группы глубокостельных коров. Первая - клинически здоровые (п = 24),.вторая - больные субклиническим кетозом без лечения ( п -.20), третья - вольные субклиническим кетозом животные (п = 10), для лечения которых использовали натуральный желудочный сок и метионин согласно "Временного наставления" и дополнительно подкожно вводили тимоспленин в дозе 0,04 мл/кг массы тела трехкратно через день. Кровь у коров и телят получали и исследовали в те же сроки, что и в предыдущих опытах.

В четвертой серии опытов по мере выявления больных животных и поступления их в родильное отделение сформированы три труп пы, аналогичных таковым в предыдущих экспериментах. Для лечения больных субкяиническим кетозом коров третьей группы (п =.10) применяли желудочный сок и метионин по схеме первой серии и дополнительно внутримышечно вводили тималин в дозе 0,1 мг/кг массы тела I раз в сутки три дня подряд. Исследование крови у коров и телят проводили в теже сроки, что и в предыдущих опытах.

В пятой серии опытов также было отобрано три группы коров. Для лечения больных субклиническим кетозом животных третьей груп пы (п = 10), наряду с использованием желудочного сока и ыетиони-

на применяли' лейкоген, который вводили подкожно в виде 4% взвеси на 33% этаноле в дозе 0.002 г/кг массы тела трехкратно через день.' Исследование крови у коров и телят проводили "по той же схеме,- что и в предыдущих опытах.

В шестой серии проводили исследование амниотической жидкости у здоровых и больных субклиничесним кетозом и в связи с лечением. Для эксперимента было отобрано 4 группы глубокоетельных коров за 10 - 14 дней до родов. Первая группа (п - 10) - клинически здоровые, вторая (п = 10) - больные кетозом без лечения, третья (п = 5) - больные субклиническим кетозом, для' лечения которых использовали желудочный сок, метионин и лейкоген по вышеуказанной схеме, четвертая (п = 5) - больные кетозом, которым с лечебной целью применяли желудочный сок, метионин и тималин по схеме, что и в четвертой серии опытов. Анниотическую жидкость получали во время родов и исследовали однократно.

В седьмой серии эксперименисв изучали иммунологическую полноценность молозива у здоровых и больных кетозом коров и в связи с лечением. Для этой цели было отобрано 4 группы животных. Первая (п = 6) - клинически здоровые; вторая (п = 6) - больные кетозом без лечения; третья (п = 5) - больные кетозом, которым в качестве лечебных препаратов применяли желудочный сок, метионин и лейкоген по схеме пятой серии опытов; четвертая (п = 5) -больные кетозом, которым с терапевтической целью использовали желудочный'сок, метионин, тималин по схеме четвертой серии опы-тое. Исследование молозива (молока) проводили трехкратно - в первый, пятый и десятый день после отела.

За весь период экспериментальной работы клиникс-лабораторно-му исследованию подвергнуто 156 коров и 104 теленка. Проведено анализов мочи - 7320, анализов крови у коров - I08I6 и у телят -5408, анализов амниотической жидкости - 240, анализов молозива (молока) - 396.

Кровь брали в две пробирки, в одной ее стабилизировали, другая служила для получения сыворотки.

В процессе эксперимента определяли число эритроцитов и лейкоцитов кондуктометрическим методом с помощью аппарата "Целло-скоп 302"; количество гемоглобина-на ФЗКе по Г.В.Дервизу и А.И. Воробьеву (1959)'; мазки крови для выведения лейкогреммы окрашивали по методу Филипсона; содержание кетоновых тел изучали по методике Энгфельда в модификации С.М.Лейтеса и А.И.Одкновой; глюко-

зы - орто-толуидиновш методом в модификации В.-С. Кондратьева; кислотную емкость сыворотки крови по Вельтману и Климешу в модификации Н.А.Раевского (1957); резервную щелочность - диффузионным методом с помощью сдвоенных колб по И.П.Кондрахщу (1971); общие дипады - по А.Ш.Криницкоэду в модификации В.И.Волгина; холестерин - по Кльку; общий белок - рефрактометрическим способом; активность лизоциыа - по В.Г.Дорофейчуку (1968); бактерицидную активность - по О.В.Смирновой и Т.А.Кузьминой (1966); активность бета-лизиков - по О.В.Бухарину с соавт., (1972); фагоцитарную активность нейтрофилов - по В.В.Никольскому (1974).

1^центифинацию Т- и В-лимфоцитов в одном препарате проводили методом Е-РОК и ЗС3-Р0К (1985).

О функциональной активности В-лимфоцитов судили по содержанию иммуноглобулинов (ЦС, Ъ$М , ), которые определяли методом дискретного ос&эдения по Ж.Бадину и Ф.Роусселету (1954) в модификации М.А.Костыны (1983).

Амниотическую жидкость получали во время родов и проводили цитологическое исследование, определение активности лизоцима, бактерицидных свойств, а также содержание иммуноглобулинов и кетоновых тел.

Молозиво (молоко) исследовали в первый, пятый и десятый день после отела. При этом определяли кетоновые тела, клеточный состав, количество иммуноглобулинов и их классов.

Результаты исследований обработаны статистически с применением программируемых микрокалькуляторов (МК - 52).

Анализ питательной ценности кормовых рационов в хозяйствах проводили по М.Ф.Тошэ, (1969) с учетом результатов определения качества кормов. Структуру рациона, тип кормления, соотношение отдельных веществ определяли по С.Н.Хохрину (1980). О полноценности рационов судили, сравнивая их с нормами кормления сухостойных коров, предложенных ВИЖ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Иммуно-метаболический статус у здоровых и больных кетозом коров

Наряду с нерезко выраженными клиническими проявлениями, одним из основных признаков кетоза являются кетонемия, которая достигала 3,09±0,П ммоль/л и была в 3,8 раза вше, чем у здоровых животных, а такяе гипогликемия. Сна выражалась снижением содержания глюкозы в крови до 1,82±0,05 ммоль/л, что на 30,5% ниже

данного показателя у здоровых коров. Заболевание кетозом еопрс-волщалось развитием ацидотического состояния, т. к. резервная щелочность и кислотная емкость у этих животных уменьшались в 1,4 раза. Концентрация общих липидов к холестерина у больных кетозом коров быта-достоверно выше, чем у здоровых.

'При'исследовании коров установлены изменения, свидетельствующие о развитии анемии на фоне основного заболевания и уменьшение количества' лейкоцитов на II, Bfo.

Оценка иммунного статуса показала, что относительное содержание лимфоцитов у больных кетозом коров снижалось на 8,07з, а их абсолютная концентрация - на 19,0%. Учитывал, что продолжительность жизни лимфоцитов под действием кетоновых тел не изменяется, то лимфоцитопения,-1 по всей видимости, обусловлена их токсическим действием на лиыфоццные органы. Заболевание сопровождалось уменьшением процента Т-лимфоцитов с 35,65*1^38 до 27,4б±1,27;-ь и их количества с 1,91*0,09 до 1,20*0,08 Г/л (P-<0,0ai} а также снижением концентрации В-димфоцитов с 1,03*0,08 до 0,63* 0,04 Г/л (P¿-0,0I). Относительное содержание С-лимфоцитов v больных кетозом коров по сравнению со здоровыми было выше на 21,6$. Если рассматривать 0-лимфоциты, как не обладающие в полном объёме"иммунологической компетентностью клетки, то их увеличение может свидетельствовать об общем угнетении иымунокомпетен-тности лимфоцитов и их функциональной недостаточности. Косвенным подтверждением этого монет служить снижение у больных кетозом животных общего количества иммуноглобулинов с 27,16*0,83 до 21,49*0,83 Г/л, в том числе: ЗцС - с 20,14*0,69 до 16,16*0,64-г/л; с 4,41*0,19 до 3,34*0,14 г/л; к - с 2,61*0,15 до

1,99*0,12 г/л (Р^0,01).

Заболевание коров кетозом с опровоящ ал ось уменьшением лизо-цимной активности сыворотки крови б 1,44 раза, бета-литической -в 1,47 раза"и'бактерицидных свойств-- в 1,21 раза. При этом наблюдалось такге понижение фагоцитарной активности лейкоцитов на 10,25% и их поглотительной способности - на 27,Во.

Таким образом, заболевание коров кетозом и связанное с этим накопление в крови кетоновых тел, приводит к нарушению обмена Ееществ, угнетен!® иммунной системы и неспецифических факторов

защиты организма.

При .изучении защитней роли околоплодных вод- относительно биологически вредных факторов и иммунологической полноценности

молозива было установлено, что кетоновые тела в амниотической жидкости отсутствуют. Общее количество клеток в ней у здоровых животных составляет 4,19*0,11 Г/л, из них процент макрофагов -93,,21; моноцитов - 1,3*0,30; лимфоцитов - 5,6*0,95. У больных кетозом корой общее количество клеток было ниже на 1,03 Г/л, процент макрофагов - на 9,2%, а лимфоцитов - на 8,5% выие. Иммуноглобулины в амниотической яидкости обнаружены не были, но ока обладает лизоцимной и бактерицидной активностью. У клинически здоровых коров активность лизоцима околоплодных вод составляет 15,43* 0,96% и она в 4,3 раза вьше, чем в сыворотке крови и в 10 раз выше аналогичного показателя в сыворотке крови телят. У больных субклиническим кетозом животных активность лизоцима околоплодных вод была ниже и разнялась 9,60-0,63%. Установлено, чео бактеркцид-ностью обладали не все пробы амниотической жццкости, а только 21 из 30 и у здоровых животных она составляла 22,53-1,56%; у больных-13,85*1,54% к была в 2,6 раза ниае, чем в сыворотке крови коров и в 2,1 раза ниже данного показателя сыворотки крови родившихся от них телят. ..

Наибольшее количество соматических клеток, лимфоцитов, иммуноглобулинов содержится в молозиве первого удоя. У здоровых коров общее число клеток составляет 11,3*0,91 Г/л, в том числе лимфоцитов - 53,0*2,52%, а у больных кетозом соответственно ниже в 1,64 и 1,3 раза. В сыворотке молозива здоровых животных отмечается высокий уровень иммуноглобулинов - 57,03*1,18 г/л, из них: Х^в-44,48*1,12 г/л; - 10,47*0,53 г/л; - 2,08*0,11 г/л. У коров с субклиническим кетозом иммунные свойства секрета молочных желез были ниие, в частности общее количество иммуноглобулинов на 16,35 г/л; Ъ^ - на 11,98 г/л; ^М _ на 3,62 г/л; З^А - на 0,76 г/л.

Таким образом, у больных'кетозом животных по сравнению со здоровыми снижена противомикробная функция амниотической жидкости и иммунологическая полноценность молозива.

При изучении обмена веществ и факторов защиты организма у здоровых и больных кетозом коров за 3 дня до родов и в первый день после отела установлено, что роды приводят к достоверному уменьшению количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, что обусловлено потерей крови во время отела (Р^0,001). В связи с родами не было отмечено достоверных изменений уровня кетоновых тел, общих липидов, холестерина, кислотной емкости сыворотки крови, но

наблюдалось .скияение концентрации глюкозы б крови с 2,66^0,05 до 2,45^0,05 ммоль/л - у здоровых и с 1,83±0,05 до 1,46-0,05 ммоль/л - у больных животных (?< 0,01).

Роды не оказывали существенного влияния на относительное содержание лимфоцитов к их популяций, но сопровождались уменьшением абсолютной концентрации лимфоцитов и Т-клеток (Р<0,05). После отела количество общего белка и иммуноглобулинов было достоверно ниже, чем до него, что связано с перераспределением сывороточных белков в молозиво. В связи с родами у здоровых и у больных кетозом коров наблюдается снижение активности бета-лизинов и бактерицидных свойств сыворотки. Фагоцитарная активность лейкоцитов у больных - имеет тенденцию к повышению, а у здоровых - достоверно увеличивается (Р<0,.05), причиной-чего могсет быть микробная кан-тамкнация родовых путей во время родов.

Ка основании полученных результатов монно сказать, что роды хотя и являются физиологическим актом, однако сопровождаются определенными изменениями в составе крови.

3.2. Оценка эффективности лечения больных кетозом коров желудочным соком и метионином, а также иелудочным соком в сочетании с витаминами В12 и С

Учитывая, что нетоз сопровощаэтся нарушением обмена веществ анемией, мы включили в схему лечения лекарственные препараты, обладающие выраженным нормализующим действием на обменные процессы и кроветворную функцию организма.

Результаты применения желудочного сока с метионином и использование желудочного сока с витаминами и С показали примерно одинаковую направленность"их действия. Под влиянием данных схем лечения у больные кетозом коров через неделю от начала лечения восстанавливалось до.кормы количество эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов и глюкозы в крови. Уровень кетоновых тел в крови при лечении желудочным соком с витаминами восстанавливался до физиологических 'показателей через 7 дней от качала терапии, а при введении желудочного сока' с метионином - через 10 дней. Более выраженное снижение концентрации общих липидов и холестерина наблюдалось при лечении желудочным соком и метионином. В результате применения этих препаратов кислотная емкость сыворотки крови повышалась до нормы через 10 дней от начала лечения, а при использовании желудочного сока с витаминами В^ и С на три дня раньше,

что можно объяснить влиянием гемоглобинового буфера.

Динамика иммунологических показателей при лечении больных кетозом коров (табл. I) характеризовалась увеличением до нормы процента лимфоцитов и достоверным повышением их концентрации через неделю от начала применения желудочного сока и метионина. Относительное и гбсолютное содержание лимфоцитов после применения желудочного сока и витаминов имело тенденцию к увеличению, но не достигало показателей здоровых животных. Процент Т-лимфо-цитов имел тенденцию к повышению у коров овеих групп, а достоверный, рост количества Т-клеток при лечении нелудочным соком и метионином отмечался через 10 дней от его нечала, а при применении желудочного сока и витаминов В^ и С - через 20 дней.

Процент В-лимфоцитов в процессе лечения повышался незначительно, а достоверное увеличение их количества наблюдалось только через 20 дней от начала, проведения лечебных мероприятий.

Уровень общего белке у животных обей групп в' процессе лечения достоверно повышался и к концу эксперимента приближался к показателям его у клинически здоровых коров. Общее количество иммуноглобулинов в сыворотке крови больных кетозом коров леченых желудочным соком и метионином через неделю увеличивалось на 13,7=4 а у леченых желудочным соком и витаминами В^ и С - на 17,ЕЙ и оставалось на таком уровне до конца опыта. Достоверное по сравнению с контролем увеличение содержнния и Ь^А отмечалось уке через неделю от начала применения метионина и желудочного сока. Использование с лечебной целью желудочного сока в сочетании с витаминами и С, также способствовало некоторому увеличению концентрации отдельных классов иммуноглобулинов, но различия по сравнению с нелечеными ?хивотными были недостоверными.

Следует отметить, что почти все показатели, отражающие сое-' тояние иммунной системы, у леченых коров хотя и повышались, однако не достигали значений их у здоровых животных.

Активность лизоцима более всего повышалась у больных коров леченых желудочным соком в комбинации с витаминами В^ и С. К концу опыта она не отличалась от показателей у здоровых зжвотных.

Бактерицидная активность сыворотки крови в результате лече- • ния достоверно увеличивалась у коров обеда групп, примерно до од-?гого уровня, у?ке через неделю от начала применения препаратов. К концу опыта она почти не изменялась и была несколько ниже, чем у здоровых животных.

Таблица I

Динамике иммунологических показателей у больных кетозом коров в связи с лечением

Показатели гр. До лечения Дни после начала лечения

7 10 20

Лимйсциты, Г/л 1 2 3 4.3-0,15 4.4-0,19 4,0±0,29 4,3±0,12 4,8±0,20х 4,2-0,28 3,82*0,II 4,31-0,19х 3,68*0,19 4,15-0,10 4,91*0,29^ 4,46*0,26

Т-лимфсциты, Г/л 1 2 о 1,2±0,08 1,1-0,08 1,1±0,08 I,2-0,07 1,3±0,09 1,35±0,Ю 0,98±0,06 1,27*0,09хх 1,12-0,10 1,13*0,05 1,57*0,13хх 1,41*0,14х

В-лимфоциты, Г/л I N 3 0,63^0,04 0,57±0,06 0,53-0,07 0,57*0,04 0,72-0,07 0.63±0,05 0,50*0,05 0,68*0,08 0,47-0,04 0,62-0,04 о.вэЗо.оэ** 0,77-0.05х

Ъ^С, п/л 1 2 3 16,1±0,64 16,6±0,88 13,0-0,58 16,5-0,67 19,3-1,08х 16,0-0,72 13,5*0,66 16,0*1,12х 13,1*0,56 15,4*0,68 19,2*1, Пхх 16,5*1,14

п/л 1 2 3 3,34±0,14 3,40-0,20 2,51±0,20 3,44-0,14 3,77±0,П 2,81-0,16х 2,83-0,II 3.38-0,14^ 2.61*0,13 3,37*0,21 3,81-0,31 2,90±0,16

З^А, Г/л 1 2 3 1,99-0,12 1,80±0,22 1,41-0,14 1,79-0,II 2,27±0,22х 1,72±0,09 1,77*0,13 2,52±0,14хх 2,21-0,13 1,59*0,11 3,66*0,20:шс 1.86*0,14

Актиеность лизоцима, % 1 2 3 2,75±0,14 2,88±0,23 2,80±0,25 2,74±0,14 з.б^о.гт** 3,83±0,33т 2,43-0,12 3,14-0,24х 3.31*0,31ж 2,49-0,13 3,Гэ6±0,20'а:х 4,39*0.24ххх

Бактерицидная актив-ноеть, ■ % 1 2 3 52,5-1,48 53,4±1,91 52,с-2,03 53,0±1,29 60,6±1,76ж 58.2±2,22х 47,7-1,38 54,2*1,88х 55.7^1.68^ 50,5*1,39 57,5*2,06х* 59,6*2,^

Фагоцитарная активность, % 1 2 3 52,1±1,35. 55,0^3,01 53,2^2 ,.73 52,7±1,34 58,0*3,55 61,7*3,07^ 55,8*1,37 64,0*4,16х о5,2*2,04ххх 53,9*1,53 61,0*4,32 64,1*2,58ххх

Обозначения: 1гр. - нелеченые животные; 2гр. - леченые желудочным соком и метионином; Згр. - леченые желудочным соком в комбинации с витаминами В^ к С .

х - Р<г0,05; хх - Р<0,01; ххх - Р< 0,001.

Что.касается неспецифических факторов защиты организма, то более .выраженное влияние, на фагоцитарную активность лейкоцитов и их поглотительную способность оказывает парентеральное введение желудочного сока с витаминами В^ и С. Указанные показатели да:е. через неделю от начала лечения больных кетозом животных достигали уровня их у здоровых коров, тогда как при использовании желудочного сока с метионином они повышались, но были несколько ниже, чем у здоровых кивотных.

Следовательно, применение для лечения больных кетозом коров желудочного сока и метионина, а такле желудочного сока с витаминами В|2 и С способствует нормализации морфологического и биохимического состава. крови, активизирует клеточные и гуморальные факторы защиты организма, но многие из них не достигают их параметров у здоровых квотных.

3.3. Результаты комплексного лечения больных кетозом коров с использованием иммуномодуляторов

Учитывая возникновение при кетозе вторичного иммунодефицита и недостаточное влияние на показатели иммунитета и неспецифические' факторы защиты организма желудочного сока, как в сочетании с метионином, так и в комбинации с витаминами В^ и С, вызвало необходимость включения в схему лечения больных кетозом коров иммуномодуляторов.

В качестве иммунокоррегирующих препаратов использовали предложенные нами лейкоген и тимоспленин, кроме того использовали прошедший широкое апробирование в медицинской и ветеринарной практике тималин. При введении больным кетозом коровам желудочного сока, метионина и одного из иммуномодуляторов через неделю от начала, лечения наибольшее количество эритроцитов и гемоглобина было у животных, которым применяли лейкоген и тимоспленин. Наиболее'выраженное стимулирующее влияние на лейкопоэз оказывал тимоспленин. Число лейкоцитов у больных кетозом коров при лечении лейкогеном и тималшом увеличивалось и было практически одинаковым.

Снижение концентрации кетоновых тел до нормы при введении больным животным тимоспленинэ отмечалось через 7 дней от начала лечения, а при использовании тималина и лейкогена - через 10 дней. К концу опыта межгрупповые различия отсутствовали. Содержание общих липидов и холестерина у больных кетозом коров всех групп в результате лечения снижалось и к концу опыта более низ-

ками эти показатели были у ливотокх леченых тшелтом и тимос'пле-нином. По денным Б.И.Кузнике с соавт., (1989) угнетение функции тимуса приводит к возрастанию общих лигощов и холестерине в сыворотке крови, а. при введении таким ответным препаратов тимусе наблюдается нормализация этих показателей. 3 первые десять дней от начала лечения наиболее высокэя концентрация глюкозы в крови больных кетозем коров неблюдалесь в группах, где применяли тима-лин и тимоспяеник, так как препараты тимуса ст*адулируот глюко-неогенез в печени и приводит к увеличению содержания глюкозы в крови (С.И.Лютинский и др., 1986; Е.ИДузник и др., 1989).

Изучение лимфоцитов и их популяшй (табл. 2) показало, что применяемые препараты оказывали различное влияние на соотношение клеток белой крови," в частности лимфоцитов.

Таблица 2

Показатели Т- и В-лим£оци?ов у больных кетозом коров в связи с применением ищуношдулиторов

Показатели Через 7 дней от.начала лечения

нелеченые лейкоген тимоспленин тималин

Лимфоциты, % Г/л 53,3*1,50 4,31*0,12 42,0*2,28®* 3,71*0,25х 61,4*1,37х* 5,65*0,20^ 58,4*1,53х 5,02*0,21ххх

Т-лимфоцитьт, % Г/л 26,9*1,42 1,17*0,07 33,3*2,50х 1,24*0,12 35,7*1,96^ 2,02*0, И3^ 34,4*1,98х* I,75*0,1бххх

В-лимфоцитк, % Г/л 13,1*0,76 0,57*0,04 16,2*1,05х 0,62*0,07 21,3*1,41ххх 17,9*1,33'с< 0,92*0, Ю***

Уровень достоверности (Р^0,05 - х; Р<0,01 - ж; Р<0,001 -ххх) выведен при сравнении с нелечеными животными.

Через неделю от нечала лечения в группе коров, которым вводили лейкоген-процент лиьйоцитов б крови уменьшался по сравнению с исходным и был значительно ниже, чем у здоровых пквоткых. Такое положение обусловлено тем, что лейкоген оказывает сталирующее влияние не- выработку кейтрофилов, а процент лимфоцитов при этом снижается. В результате применения тималинс относительное содержание лимфоцитов в крови больных ■•жвотных через 7 дней повышалось до уровня их у здоровых животных, з при введении тимоспленина этот показатель был даже несколько выше. К концу'-эксперимента процент лимфоцитов у яивотных подопытных групп выравнивался но

более низким оставался у коров леченых лейкогенок.

Концентрация лимфоцитов в крови больных кетозом коров под влиянием тималина и тимоспленина через неделю от начала их применения значительно повышалась и достигала уровня ее у здоровых животных. Из работ В.Я.Ариона, (1989); А а£., (1977) известно, что В'экстрактах из тимуса содержатся вещества, стимулирующие пролиферацию лимфоцитов.

Исследования показали, что через 7 дней от начала терапии более высокий процент Т-лимфоцитов был отмечен в крови коров леченых тиыоспленином и тималином, самый низкий - в результате щи-менения лейкогена. В дальнейшем относительное содержание Т-кле-ток увеличивалось в болшей степени под влиянием тималина и тимоспленина и было да^е несколько выше, чем у здоровых животных, а под действием лейкогека приближалось к данному уровню лишь через 20 дней от начала лечения. У больных кетозом коров, которым в качестве иммуномодулятора использовали лейкоген, количество Т-лиыфоцитов увеличивалось постепенно и лишь к концу эксперимента' приближалось к уровню их у здоровых животных, тогда как при применении тимоспленина и тималина концентрация этих клеток уяе через 10 дней от начала лечения деле несколько превышала данный показатель у здоровых коров.

: Лечение больных кетозом коров тималином и лейкогеном к десятому дню от его начала приводит к увеличению до нормы процента В-лимфоцитов, а при введении им тимоспленина относительное их содержание даже несколько превышает показатели здоровых яивотных Талая закономерность сохранялась до конца наблюдения. Наиболее заметное влияние на количество В-лимфоцитов оказывало введение больным короваг.! тимоспленина. Это вырезалось в значительном повышении их концентрации в крови животных уже через неделю от начала применения препарата, которая сохранялась на таком уровне до конца наблюдения. Количество В-клеток у коров, леченых с применением тималина, нормализовалось к десятому дню от качала терапии, тогда как .при введении лейкогена повышение их числа до уровня здоровых животных отмечалось только к концу эксперимента. Из работ Ю.М.Лопухина, (1982); С.И.Лютинского, (1988); И.Д.Александрова с соавт., (1993) известно, что такие препараты, как Т-активин, тималин при имкунодефицитньк состояниях в большей мере способствуют увеличению популяции Т-лгайоцитов и в меньшей мере - В-лимфоцитов. В тс лее время, препараты полученные из тка-

ни селезенки, которая входит и в состав тиисспяенине, сказывают более выраженное влияние на В~скстему иммунитета (В.Ф.Чеботарев и др., 1982; Г.Р.Алвердиев, 1992).

Все патологические процессы,, сопровождающиеся снижением количества белка, особенно иммуноглобулинов, приводят к развитию иммунодефицктов разной степени выраженности (Р.В.Петров, 1987). Наши исследования показали, что у коров, больных кетсзом, показатели ш/одуноглобулинов и неспецифических факторов защиты организма снижены и в различных подопытных группах в процессе лечения изменялись по разксцу (табл. 3).

Таблица 3

Показатели иммуноглобулинов и кеспецифических факторов защита организма у больных кетозои коров в связи с применением иммуномодуляторов

Показатели 7 дней от качала лечения

нелеченые лейкоген тимоспленш' тималин

Общий белок, г/л (общие), г/л г/л г/л к , г/л 70,0-0,85 21,7±0,73 I6.5i0.67 3,44±0,14 I,79±0,II 78,2±1,29ххх 23,4-0,78 17,0-0,97 4,02±0,2бх 2,3б±0,25х 78,5±1,26ххх 30,1±1,05ж 23,0±1,04хзсх 4,30-0,21х>: 2,62±0,18ж 77,2-1,52ххх гб.е^.ез3® 19,5±0,76х 3,80^0,13 2,49^0,13^

Активность: - лизоцима % 2,74±0,14 з^гЬо.го50® З.К^О.Г?** 3,42±0,22х

- бетэ-лизи-нов % 3,71*0,34 о^е^о^с?001 8,б7±о,беж 8,37¿0,53х

- бактерицидная % 53,0±1,29 50,0-2,23 59,2±2,20х 57,4-1,88х

- фагоцитарная % 52,б±1,34 бб.&Ьз.О!30™ 70,3±2,13ж 67,9-2,45ххх

Уровень достоверности (Р^ 0,05 - х; Р^0,01 - хх; Р<0,001 - ххх) выведен при сравнении с нелечеными животными.

Так, количество общего балка в результате лечения нормализовалось у животных всех подопытных групп уже через неделю от качала применения препаратов.

Тималин способствовал повышению содерсшяш иммуноглобулинов в сыворотке крови больных кетозом коров через 7 дней, а нормали-

запия их наступала через 10 дней от начала -терапии. При использовании тимоспленина увеличение концентрации иммуноглобулинов до физиологических значений наступала через 7 дней, а через 10 дней от начала опыта она даже несколько превшала данный показатель у здоровых аиво-гных, Самый низкий уровень иммуноглобулинов был отмечен у коров, в комплекс лечебных препаратов которых включали лейкоген. Лишь к кскцу эксперимента данный показатель приближался к такоЕому у здоровых кивотнкх.

Изменения динамики классов иммуноглобулинов характеризовались, преяде всего, увеличением их количества уже через 7-10 дней от начала лечения. В этот период концентрация I^S у больных кетсэом коров при лечении лейкогеном хотя чуть повышалась, но ке достигала нормативных значений, тогда как при введении тималина практически не отличалась от уровня здоровых зжвстньк, а при использовании тимоспленина. дат несколько превышала его. К концу наблюдения содержание в сыЕоротке крови подопытных коров выравнивалось, однако большим оно оставалось у яивотных, в схему лечения которых был включен тимоспленин.

Более заметное увеличение уровня наоборот, было отмечено при введении тимоспленина и лейкогена, несколько меньшее -при использовании с лечебной целью тималина. В конце эксперимента соотношение данного класса иммуноглобулинов существенно не изменялось.

Синтез повышался уже в первую неделю лечения больных кетозом коров. Наибольшее его увеличение отмечалось при использовании тимоспленина, чуть нике при введении тималина. к лейко-гена. В конце опыта межгрупповые различия сглаживались.

Изучая механизм действия биологически активных препаратов селезенки и тицуса В.Ф.Чеботарев с соавт., (1982); Г.Б.Будааабон с соавт., (1984); А.Н.Смирнов с соавт., (1984); В.Д.Соколов с соавт., (1992) установили, что их применение при заболеваниях сопровождающихся снижением концентрации иммуноглобулинов, приводит к ее нормализации.

Известно, что различные ищуномодуляторы оказывают многогранное действие на организм, включая неспецифические факторы защиты (А.Ю.Кассич, 1986; А.Ф.Могиленко, П.П.Кснопелько, IS86; О.Ф.Шумаков, 1988).

Анализ результатов исследования показал, что через неделю от начала применения препаратов активность лиэоцима сыворотки

крови была более высокой у больных коров, которым вводили лейка-ген, а начинал с десятого дня и до конце опыта - б группе животных , которым применяли тимосшгенин. Аналогичная картина наблюдалась при изучении динамики активности бете-лизинов, Если в первую неделю от начала лечения она была выше у короЕ, которым в качестве иммуномодулятора применяли лейкоген, то в последующие сроки исследования - у яивотннх леченых тимссплекином и тималинш. По всей видимости, лейкоген оказывает более быстрое, но менее продол-ксительасе, чем тимосплекин и тималин влияние на. активность лизс-цима и бета.-лизинов.

Бактерицидная активность сыворотки крови в результате применения больным кетовом коровам лейкогена повывелась в процессе опыта незначительно. Учитывая, что для проявления бактерицидноети необходим.комплемент и ме.'зду" ними существует прямая корреляция (П.А.Емельяненко, 1986), то можно предположить, что лейкоген оказывает слабое влияние на активацию комплементе. Использование больным коровам в качестве иммуномодуляторе тииаяине, способствовало нормализации бактерицидной активности сыворотки крови через 10 дней от начала применения препарата, г введение ткмоспленине сказывало более выраженный эффект и в указанный срок этот показатель у подопытных животных даже несколько превышал аналогичный у здоровых коров. Такое соотношение сохранялось до кони,а опыта.

Применение имыунокорректоров при лечении больных кетозом коров значительно повышало фагоцитарную активность лейкоцитов и уле через неделю от начала их использования у яивотнкх всех подопытных групп она была вше, чем у здоровых коров. В сравнительном аспекте меньшая фагоцитарная активность лейкоцитов была отмечена у коров, которые получали лейкоген. Это связано с тем, что при введении в организм препаратов, стмфлщтащих лейкопоэз, увеличение количестве лейкоцитов происходит за счет молодых форм ней-трофилов, а менее зрелые клетки обладают слабой выраженностью фагоцитоза (А.Ю.Кесскч, 1986; А.Ф.Ыогилекко, 1985; А.Ы.Земсксв с соазт., 1994).

Самой высокой фагоцитарная активность лейкоцитов быле у коров, леченых с применением ткмоспленина. Вивотиые, которым в качестве имыуномодулятора использовали тималин, по показателям фагоцитоза занимали промежуточное положение.

Динамика поглотительной способности лейкоцитов была аналогичной изменениям фагоцитарной активности.

Таким образом, применение больным кетозом коровам иммуноис-дуляторов способствует нормализации обмена веществ, восстановлению инмунного статуса и неспоцифических факторов защиты организма. Сяедут подчеркнуть, что нормализация большинстве показателей происходит в первые 7-10 дней от начала лечения. Более выраженным позитивным действием обладают тимоспленин и тималкн, несколько меньшим - лейкоген.

3.4. Взаимосвязь иммуко-метабслического статуса, коров-матерей и родившихся от них телят'

Наряду с--другими средами определенную роль в защите плода играет амниотическая пшдкость, а сразу после роздения устойчивость животного к заболеваниям обусловлена иммунологической полноценностью молозива.

В результате лечения больных кетозом коров с применением лейкегена общее количество клеток амниотической жидкости увеличивалось на 23,1%, а при использовании тималина - на 33,Процент моноцитов в околоплодных водах при введении коровам, лейкогена. повышался-в 1-, I раза, а при введении тималина он снижался в 2 раза, "при этом относительная концентрация лимфоцитов уменьшалась соответственно в 2,35 и в 1,96 раза.

'Активность лизоцима амниотической жидкости в результате лечения больных кетозом животных лейкогеном повидалась на 33,9%, а тималином - на 50,0%; бактерицидная активность увеличивалась соответственно на 28,7% и 59,7%.

Сниженное у больных кетозом коров количество клеток в секрете молочных желез первого удоя, в результате лечения лейкогеном" повышалось нэ 48,5%, а при использовании для этой цели тималина -на 72,3%. Относительное содержание лимфоцитов в молозиве под влиянием лейкогена снижалось на 9,5%, а под действием тималина повышалось на 24,9%.

Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке молозива первого удоя у больных нивотных низкая. В результате применения лейкогена она увеличивалась на 17,7%, а при введении тималина - на 29,4%, но все же не достигала уровня ее у здоровых животных. Что касается классов иммуноглобулинов, то нормализация содержания З^б отмечалась только при лечении тималином. Под действием лейкогена количество повывелось на 34,1%, а под влиянием тималина-ка 47,ОЙ.

Ils пятый день лактации иммунологическая полноценность молозива резко снияеотся. Так, у больных кетозом нелеченых коров общее количество клеток в секрете молочных желез уменнвеется в 1,8 разе, процент лимфоцитов в 1,27 разе, концентреция иммуноглобулинов всех классов в 4,4 раза. Лечение больных ююотных с применением имздукомодуляторов способствует более "мягкому" снижению указанных показателей.

Следовательно применение при кетозе желудочного сока, ш-тионина и едкого из ишунокорректоров способствует увеличению антибактериальных свойств эмниотической жидкости и пэвшению иммунологической полноценности молозива. Более вырзяекное влияние оказывает тималин, несколько меньшее - лейкоген.

Изучение зависимости ищуно-метаболического статуса приплода от состояния организма коров-матерей показало, что у телят, родившихся от больных кетовом коров, в первый день штаня по сравнению с матерями увеличено количество эритроцитов'в 1,88 раза и гемоглобина в 1,2 раза. Такая se закономерность отмечается и у здоровых животных. Число лейкоцитов у новорожденных телят, полученных от здоровых коров, несколько превышало их концентрацию в крови матерей, тогда как у родившихся от- больных ^.квотных соотношение данного показателя было обратным.

Установлено, что количество кетоновых тел в крови телят, родившихся от больных коров, находилось на верхней границе физиологически допустимых значений; концентрация глюкозы в 2,13 раза вше, чем у матерей, а содержание общих лигадов и холестерина -нияе.

Лимфоциты попадают к новорожденному не только с кровью, ко и с молозивом (И.М.Кзрпуть с соавт., 1982; А.Ю.Кассич, 1985). При исследовании нами выявлено, что как относительное, так и абсолютное их содержание в .крови телят после приема молозива выше, чем у коров-матерей. В то же время, процент и количество Т-лим-фоцитов в первый день после родов .у молодняка было нике, чем у больных кетозом коров-матерей соответственно в 1,43 и 1,38 раза, s В-лкмфоцитов в 1,67 и 1,62 раза. Снимание количества иммуно-компетентных клеток у телят сопровождается увеличением в крови недифференцированных О-лимфоцитов.

Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови телят зависят от уровня колострального иммунитета. Установлено, что у молодняка, родившегося от больных кетозом коров, б первый День после

отела концентрация в сыворотке крови была кичо, vm у матерей в 1,2 раза, IgH - в 1,4 раза, Цк - в 1,1 раза. Большие различия в концентрации З^М объясняются тем, что он всасывается в кровь медленнее, чемI^G (Р.Х.Кармолиев, 1993).

Определение кеспецифических факторов защиты организма показало , ,что у телят, родившихся от больных кетозом коров, по сравнению с матеря:® активность лизоцима в сыворотке крови была ниже в 2,67.раза, бактерицидная активность - в 1,21 раза, фагоцитарная активность.лейкоцитов - в 1,15 раза, а их поглотительная способность -в 2 раза.

Более полное представление о взаимосвязи иммуно-метаболи-ческого статуса матери и потомства дает сравнительное изучение показателей у телят, родившихся от здоровье-: и больных кетозом пилотных.

Учитывая то, что при кетозе у коров развивается анемия, следовательно количество эритроцитов и гемоглобина у их потомства. -в(первый -день посла родов было сниязко по сравнении со здоровыми,.; телят.ами соответственно на 14,1 и 20,0?;, а число лейкоцитов - на 18,3%, что связано с ыорфофункциональндаи изменениями в костном мозге и лимфоидных органах (А.В.Каров и др., 1982; Г.А. Красников-и др., 1986).

Концентрация кетоновых тел хотя и была вше в крови телят, родившихся от больных: кетозом коров, однако сш не выходила за - пределы верхней границы физиологических колебаний.'Содеркаше общих липидов и холестерина было несколько тле'у'"телят, родившихся от больных коров, что по мнению И.И.Тарасова, (1984)*'связано с уменьшением образования аселчи, которая необходима для рас щепления кира молозива. Некоторое снилепие кислотной емкости и резервной щелочности, по-видимому, обусловлено уменьшением гемо-глобкнового и карбонатного буфера в крови телят, родившихся от больных кетозом коров.

Относительное содержание лимфоцитов в крови телят получени ■ от больных коров в первый день после родов уменьшено по сравнению со здоровыми на 14,к десятидневному возрасту разница достигала 18,0е?, а их абсолютная концентрация была снинена соответственно на 30,9? и 33,7^. По денным А.М.Смирнова с соавт., (1979); А.К,Баженова с созвт., (1989) заболевание коров кетозом способствует рождению молодняка с явлениями гипотрофии, что в свою очередь приводит к морфофункциональным изменениям в лголфо-

иднкх органах и клинически проявляется уменьшением содержания лимфоцитов в крови (В.М.Алатэкко, 1982; С.И.Лютшсккй с соавт., I98S; Г.Р.Алвердиев, I9SI).

У новорожденных телят, полученных от больных коров, относительное содержание Т-лим$оцитов в крови было шяе, чем у здоровых на 20,2%, в десятидневном возрасте - на 30,3%, в их абсолютное число снижалось соответственно на 43,?% и 53,4%. Ме.-сгрупповне различия процента и количества В-лимфоцитов в крови телят носили такую ::;е налравленность, как и Т-клоток, но были более выраженными. Низкое содержание Т- и В-лим$юцитов в крови новорожденных телят по мнению И.М.Карпутя с соавт., (1982, 1990); Н.И.Корчаиа, (IS86); Т.Ф.Сухоруковой, (1990) обусловлено иммунологической неполноценностью молозива.

При изучении иммунного статуса молодняка установлено значительное снижение уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, родившихся от больных кетозом коров, который у них был ниже, чем у здоровых в первый день после родов на 32,0%, а на десятый день - на 39,6%. Это объясняется тем, что концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных телят зависит от качества молозива и состояния слизистой оболочки кишечника, а по данным И.И. Немченко, (1984); А.Г.Иванова, (1985); Г.Г.Щербакова, (1937) у молодняка, родившегося от больных кетозом короЕ, наблюдается истончение слизистой оболочки кишечника, повреждаются мембранные структуры, уменьшается активность ферментов и как следствие этого снижается усвоение молозива и способность иммуноглобулинов всасываться в кровь. Определение классов иммуноглобулинов показало, что наиболее значительное снижение их концентрации у телят, полученных от больных коров, происходило за счетИ^б и Зс^К . По всей видимости, это связано с нарушением их всасывания в кишечнике но-ворозденных и со снижением способности молочной железы матерей к синтезу секреторного компонента!^.

Проведенные исследования показели, что у телят, родившихся от больных кетозом коров, наряду с нарушениями в иммунной системе наблюдаются изменения неспецифических факторов защиты организма. Так, у этих нивотных по сравнению со здоровьям в первый день после рождения отмечается снижение активности лизоцима на 43,5%, бота-лизинов - на 30,3%, бактерицидных свойств сыворотки - на 17,7%, фагоцитарной активности лейкоцитов - на 9,3%, при одновременном уменьшении их поглотительной способности на 39,1%. Примор-

но на таком уровне различия сохранялись и в десятидневном возрасте.

Следовательно, заболевание матери кетозсм в период плодоношения приводит к существенному сншени» показателей иммунитета и неепецифкческих факторов защиты организма новорожденного и в меньшей мере отражается на основных показателях обмена веществ.

3.5, Имчуно-метабалический статус телят, родившихся от больных кетозом коров, леченых яелудочным соком и штаонинш, а такяе яедудочнш соком в сочетании с витаминами Б^ и С

Исследования показали, что применение аелудсчного сока и метиокина больным коровам способствовало достоверному повышению у..родившихся от них телят количества гемоглобина и, как следствие этого, увеличению кислотной емкости. У зт.чх телят по- сравнению с новорожденными,полученными от нелеченых коров, на-26,7$ был нике уровень кетоновых тел в крови и на. 9,1% вше концентрация глюкозы. У молодняка, родившегося от коров леченых желудочным соком и витаминами В-^ и С, по сравнен!® с контролем наблюдалось ..более выраженное повышение количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина, что можно связать со стимулирующим влиянием на гемопозз витамина В^. Лечение животных денным методом сопровождалось снижением у их потомства уровня кетоновых тел, но не приводило к достоверному увеличению концентрации глюкозы в крови.- Через 10 дней после рогдеккя мегхгрупповые различия оставались примерно на таком та уровне.

Процент лимфоцитов незначительно увеличивался у молодняка обеих подопытных групп, но не достигал показателей здоровых животных. Относительное содержание Т~лимфоцитов достоверно увеличивалось лишь к десятидневному возрасту, однако оставалось нике, чем у здорового молодняка. Такая не закономерность отмечена л в отношении количества Т-клеток, однако более' высоким этот показатель был у.1 телят, матерей которых лечили нелудочным соком в сочетании с витгминаш В^ и С. Процент- 'В-лимфоцитов достоверно увеличивался -у-молодняка, родившегося от коров, для лечения которых применяли желудочный сок и мотионин и в десятидневном возрасте он не отличался от такового у здоровых телят, тогда как при лечении матерей желудочным соком и витаминами ко достигал Физиологических значений.-Количество В-клеток у телят в резуль-

тате лечения коров-матерей желудочным соком и метиокином достоверно увеличивалось к 10-дневному возрасту на 57,1%, а при лечении желудочным соком и витаминами В^ к С на 75,0%, но несмотря на это не достигало их числа у здорового молодняка. -

В результате лечения больных субнлнническим кетозом коров-матерей общее количество гаямуноглобулинов у их потомстве било достоверно вьаге, чем у телят, родившихся от нелеченых коров, не как в первый,так и в десятый день после отела не достигало уровня их у здорового молодняка. Лечение коров метиокином и гселудочкын соком приводило к достоверному увеличению в скворотке крови новорожденных телят на 22,9% и не сопровождалось существенными изменениями количество иЗ^А. У новорожденных, полученные от коров леченья -Т-о луд очным соком с витешнаш В^ и С, было отмечено лишь достоверное повышенно в 1,6 раза количества З^А до уровня его у здорового молодняка. Следует отметить, что за данным исключением, у телят обеих подопытных групп показатели классов иммуноглобулинов оставались более низкими, чем у телят^родившихся от здоровых коров.

Изучение неспецифических факторов защиты организма показало, что при лечении коров-матерей желудочным соком и метионином у молодняка в первый день лизни отмечается достоверное увеличение активности бета-лизинов на 24,0%, бактерицидноети сыворотки крови -на 11,5% и фагоцитарной активности лейкоцитов - на 13,5%. При использовании коровам в качестве лечебных средств желудочного сока в сочетании с витаминами В^ и С достоверным было только повышение активности лизоцима не 45,0% и фагоцитарного индекса - на 46,1%. Все изучаемые показатели, за исключением последнего, не достигали уровня их у здорового молодняка. К десятидневному возрасту у подопытных телят происходило дальнейшее увеличение неспецифических факторов защиты организма, однако нормализация была отмечена только в отношении фагоцитоза.

Таким образом, применение с лечебной целью больным кетозом сухостойным коровам яелудочного сока и метконина, а тате желудочного сока в сочетании с витаминами В^ и С способствует нормализации основных первыетров обмена веществ у родившихся от них телят, приводит к повышению показателей естественной резистентности, но большинство из них не достигают нормативных значений

З.б. йа$гно-метаболический статус телят,, родившихся' от больных кетсзоы коров, при лечении их о, использованием иммуномсдуляторов

Проведенные исследования по лечению больных'кетозом коров .'чвлудочкым соком и метионином в сочетании с одним из иммуномсдуляторов (лейкоген, тимосплэнин, тималин) показали,, что все;эти препараты примерно в одинаковой степени оказывают нормализующее влияние на эритропоэз и синтез гемоглобина у родившегося молодняка.

••Лейкопоэз- увеличивается в значительной степени под воздействием лейкогена- и число лейкоцитов у новорожденных телят этой группы дат® несколько--превышало их уровень у здоровых телят, что мочко объяснить специфичностью действия данного препарата. У телят, родквсихся от леченых коров, наиболее низкие показатели количества кетоновых тел были в группе, где применяли лейкоген. Он не отличался от уровня его у здоровых животных в группах, где использовали для лечения тиыоспленин и тималин. Не установлено существенных мекгрулповьк различий в содержанки глюкозы в крови телят. Однако у новорожденных, матерям которых вводили лейкоген, - уровень -общих липидов был несколько выше, чем у здоровых телят, а привлечении "-тимоспленином и тималином - чуть ниже. Более высокие показатели кислотной емкости и резервной щелочности отмечались у телят," матерей которых лечили с использованием тимссгою-нина и тималика, т. к. по данным З.Кемилевой, (1984) тимус принимает участие в регуляции уровня микроэлементов и минеральных веществ.

Изучение влияния иммуномодуляторов .на иммунную систему новорожденных телят через организм матерей.показало," что под действием- лейкогена наступает нормализация процента лимфоцитов, тогда как при введении коровам-матерям тимоспленина и тималина относительное содержание данного вида клеток белой крови у -новорожденных телят даже несколько превышает их уровень у здорового молодняка. Межгрупповые различия в количестве лимфоцитов не установлены, но у подопытных телят их число было даче несколько выше, чем у здоровых. Относительное содержание Т-лимфоцитов в крови телят, родившихся от коров леченых лейкогеном увеличивалось лшь ка 8,2й и было несколько ниже, чем у здоровых. При лечении тималином повьнение уровня Т-клеток составляло 32,9% и не отличалось от нормы, тогда как в результате применения тимоспленина этот

показатель увеличивался на 45,8* и даже несколько превышал и:: содержание у здоровых телят. В результате использования ищуномоду-ляторов при лечении больных кетозом коров концентрация Т-лимйюш-тов в крови родившихся от них телят возрастала при использовании лейкогена в 1,73 раза, тимосплеинка - в 2,3 раза, тималина - в 2,18 раза и в случае применения двух последних препаратов деяе несколько превышала их число у здоровых телят.

У телят полученных от леченых коров по сравнению с нелечеными, процент В-лимфоцитов при введении лейкогена увеличивался в 1,23 раза, тимосплешша - в 1,83 раза, тималина - в 1,42 раза. Таким образом, применение тималина приводило к нормализации относительного содержания В-клеток у телят, при использовании тимо-спленина оно дале несколько превышало показатель у здорового молодняка, в то время как при введении лейкогена процент В-лимфсци-тое оставался несколько ниже нормы. Что касается количестве данного вида лимфоцитов, то при лечении лейкогеном оно увеличивалось в 1,53 раза и достигало уровня здоровых телят, при лечении тимо-спленином и тималинои - повшалось соответственно в 2,97 и 2,32 раза и было несколько выше данного показателя у молодняка, родившегося от здоровых коров.

Количество иммуноглобулинов в сыворотке крови телят под действием лейкогена повышалось в 1,31 раза, но не достигало нормы. Под влиянием тималина оно увеличивалось в 1,49 раза и не отличалось от нормы, а при введении тиыоспленина возрастало в 1,57 раза. и Дсоке несколько превышало нормативные значения. Что касается классов иммуноглобулинов, то динамика была сходкой с изменениями общих иммуноглобулинов. Наибольшее увеличение содержания З^М. (в 1,73 раза) отмечалось при использовании лейкогена; тимо-спленин не оказывал существенного влияния на динамику данного показателя, а. введение коровам тималина приводило к нормализации его уровня у новорожденных телят. Применение больным кетозом коровам лейкогена не отражалось на нояичестве А в сыворотке крови телят, тогда как использование тимоспленина способствовало повышению его уровня в 1,5 раза, а тималина - в 1,35 раза, но он оставался чуть нияе, чем у здорового молодняка.

Применение больным кетозом коровам иш-зукомодуляторов оказывало влияние не показатели неспецифических факторов защиты организма родившихся от них телят. Под влиянием лейкогена активность лкзоцима У новорожденного молодняка увеличивалась в 1,43 раза,

тимосгагониня - в 1,97 раза, гимелкне - в 1,62 разе. Активность бета-лизинов у телят при лечении коров дейкогеком не изменялась, под влияние!.-! тимоспленина сна повшелась в 1,56 раза и достигала уровня се у здорового молодняка, а под действием ткмалина повышалась только в 1,21 раза и оставалась несколько низе нормы. Бактерицидная-активность сыворотки крови новорожденных телят е результате применения их матерям иммуномодуляторов- увеличивалась ■И-практически достигала уровня ее у здорового молодняка. В результате лечения больных кетозом коров фагоцитарная активность у юс телят при использовании лейкогона увеличивалась в 1,32 разе, тимоспленина - в 1,49 раза, тикелине - в 1,39 раза и была существенно вше данного показателя у новорожденных, полученных от клинически здоровых коров.

Таким образом, включение в схему лечения больных кетозом сухостойных коров- иммуномодуляторов лейкогена, тимоспленина и тималина приводит к нормализации обмена веществ и сопровождается повышением показателей иммунитета и кеспецифкческих факторов зв-1Ш-1ТЫ организма у родившихся от них телят. Более выраженное позитивное-действие оказывают тимоспленин и тималин, несколько меньшее - лейкоген.

4. В Ы В О Д Ы -

I. В 'отдельных хозяйствах Ленинградской области кетонурия у коров в сухостойный период регистрируется у 10,72 - 15,93? аи- ■ вотнкх. Кетоз у них протекает в субклинической форме.

: 2. У больных кетозом коров, наряду с нарушением углеводно-жирового обмена., возникает вторичный иммунодефицит. Он характеризуется уменьшением количества" лимфоцитов, в том числе Т- и В-клеток, снижением концентрации иммуноглобулинов, угнетением лиэоцимной, бета-литической,' бактерицидной активности сыворотки крови и фагоцитарной активности лейкоцитов.

3. В первый день после отела у коров снижается количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобине, глюкозы в крови. Уровень кетоновых тел, общих липкдов, холестерина, резервная щелочность не изменяются. Роды сопровождаются уменьшением содержания Т- и В-лимфоцитов, иш^унсглобулинов, угнетением лизецимней, бета-ли-тическей, бактерицидной активности сыворотки крови при одновременном повышений фагоцитарной активности лейкоцитов.

4.1. У здоровых коров общее количество клеток б околоплодных водах составляет 4,19*0,11 Г/л в том числе: макрофагов -93,1*1,21%; моноцитов - 1,30*0,30%; лимфоцитов - 5,50*0,95%. Активность лизоц1шс амниотической гждкости в 4,3 раза, выше, чем в сыворотке крови коров и в 10 раз выше, чем в ейворотке новорожденных телят, г бактерицидная активность в 2,5 раза шгсее, чем в сыворотке крови матерей и в 2,1 рата нипе, чем у родившегося молоняка.

4.2. У коров, больных субкликическиы кетозом, снижается лизецимнея и бактерицидная активность амниотической жидкости и концентрация клеток. При этом уменьшается процент макрофагов и увеличивается процент лимфоцитов.

5. При кетозе у коров снижается иммунологическая полноценность молозива,- что проявляется уменьшением общего числа клеток в секрете молочник шлез первого удоя в 1,54 раза, относительного содержания лимфоцитов - в 1,3 ра,зв и концентрации иммуноглобулинов на 16,35 г/л.

6. Лечение больных кетозом коров путем подносного введения натурального желудочного соке лошадей I раз б сутки в дозе 0,035 мл/кг в течение 5 дней подряд и суспензии метионика (1:5) в дозе 0,025 мл/кг массы тела двухкратно, с интервалом 4-5 дней способствует нормализации биохимического к морфологического состава крови, включая процент лимфоцитов. При отом количество Ти В-лимфоцигов, иммуноглобулинов, лизоцимкая, бата-литическая, бектерицвдная активность сыворотки крови, фагоцитоз несколько повышаются, но но достигают показателей здоровых животных.

7. Применение коровам при кетезе желудочного сока лошадей I раз в сутки в дозе 0,035 мл/кг массы тела в течение 5 дней подряд, аскорбиновом кислоты подшкно в доза 0,003 г/кг массы тела двухкратно через день и цканксболамина внутрю«шечно в дозе 2,75 мкг/кг массы тела. I раз в день в течение 5 дней подряд нормализует морфологический и биохимический состав крови, активность лизоцимз. и фагоцитоз, но не повышает до Физиологических значений активность бета-лизинов, бактерицидные свойства сыворотки и показателя отражавшие состояние иммунной системы.

8. Лейкоген, введенный больным кетозом коровам подкоано в виде 4% суспензии на 33% этаноле в дозе 0,002 г/кг массы тела трехкратно через день в сочетании с яелудочным соком и метиони-ном, через 7 дней от качала применения:

&) нормализует морфологический и биохимический состав крови, снижает процент лимфоцитов, почти не оказывая влияния не их количество, .значительно активизирует фагоцитоз, - несколько повышает показатели клеточных и гуморальных факторов ядаунитета,' полнея нормализация которых наступает чзрез 20 дней от начала лечения.

б) активизирует антимикробные факторы емниотической жидкости и повышает иммунологическую полноценность молозива.- *

£'. Тймоспленик при трехкратном подкояяом введении в дозе 0,04 мл/кг мессы тела, через день в сочетании с натуральным желудочным -соком у. метионинон нормализует обмен веществ, значительно повышает количество иммуноглобулинов за счет!<^С: , увеличивает до физиологических значений содержание лимфоцитов, £ том числе Т- и В-клеток, активизирует неспецифические факторы защиты организма, особенно фагоцитоз.

10. Тималин, применяемый внутримышечно I раз в сутки 3 дня подряд в дозе 0,1 мг/кг мессы тела в сочетании с натуральным желудочным соком и метионином нормализует морфологический и биохимический состав крови, содержание Т-лиъгЬоцитов и, в меньшей 'мере В-лимфоцитов. Повышает до уровня здоровых животных концентрацию в сыворотке крови "Цб иД , активность лизоцима, бета-ли-зинов,'бактерицидные свойства сыворотки и особенно Фагоцитоз.

В больней мере, чем лейкоген, увеличивает активность лизоциие и бэктерицидность адаиотичеекой жидкости и иммунологическую полноценность молозива. ■

11. У новорожденных телят по сравнению с коровами-матерями достоверно повышено количество эритроцитов, гемоглобина, "глюкозы, резервная щелочность и кислотная емкость, однако наблюдается кммунодефицитное состояние. Оно характеризуется 'значительны снижением относительного и абсолютного содержания Г- и В-лшфо-цитов,З^М и факторов неспецифической защиты организма, на фоне незначительного увеличения числа лейкоцитов и лимфоцитов.

12. У новоровденных телят, родившихся от больных кетозом коров, по сравнению со здоровыми снижены показатели морфологического и биохимического состава крови и возникает выраженный иммунодефицит, который проявляется достоверным снижением количества Т- и В-лимфоцитов, всех классов иммуноглобулинов и факторов неспецифической защиты организма. К десятидневному возрасту отмеченные различия усугубляются.

13. Применение для лечения больных кетозом коров желудочного соке я метиснина способствует увеличению в крови, родившихся от них телят, количества гемоглобина, глюкозы, резервной щелочности, процента В-лгаЛоцитов, концентрации иммуноглобулинов, за

с.чет. 1^6 , повышению бета-литической, бактерицидной активности сыворотки крови и фагоцитоза, ко они не достигают уровня здоровых телят.

14. Использование с лечебной целью больном кетозом коровам желудочного сока в сочетании с витаминами и С приводит к повышению в крови новорожденных телят кислотной емкости, содержания эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, Т-лимй-оцитов, шэду-ноглобулинов за счстТ^А , активности лизоциме и фа.гсцитоза, однако эти показатели остаются юпэ уровня их у здорового молодняке.

15. Включение в схему лечения больных кетозом коров кмму-номодуляторов оказывает различное действие:

■ а) лейкоген не приводит к полной нормализации показателей иммунитета и неспецифических факторов защиты организма.

б) тимоепленин способствует повышению до нормы показателей естественной резистентности, особенно выра-юнное влияние он оказывает на Т- и B-систему иммунитета, уровень иммуноглобулинов и фагоцитоз.

в) тималин нормализует показатели естественной резистентности, но оказывает меньшее влияние, чем тимоепленин, на содер-аание В-люфзцитов, иммуноглобулинов и активность бета-лизинов.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

. I. Выявленное нами возникновение вторичного иммунодефицита у больных кетозом коров необходимо учитывать при диагностике и проведении лечебно-профилактических мероприятий.

2. Для лечения коров, больных кетозом рекомендуется применение желудочного сока лошадей подкожно один раз в сутки в течение 5 дней подряд в дозе 0,035 мл/кг массы тела и суспензии метионина (1:5) в дозе 0,025 мл/кг массы тела. 2 раза с интервалом 4-5 дней в соответствии с наставлением, утвереденным ГУВ МЗХ СССР или использование для этой цели желудочного сока лошадей подкожно i раз в сутки в течение 5 дней подряд в дозе 0,035 мл/кг массы тела в сочетании с подкожным введением аскорбиновой кислоты из расчета 0,0025 - 0,003 г/кг массы тела двухкратно через день и цианкоболамина внутримышечно в дозе 2,75 мкг/кг

массы телз один раз в день в течение 5 дней подряд согласно наставления, утверяденного ГУВ МСХ СССР,

3. С целью коррекции вторичного -иммунодефиците у больных кетозом коров и повышения естественной резистентности родивакхс: от них телят рекомендуется включать в схему лечения заболевших .квотных один из иадуномодуляторов:

а) лайкоген подкояно в виде А% суспензии на 331 этаноле в дозе 0,002 г/кг массы тела трехкратно через день.

б) тимоспдгпик подкожно в дозе 0,04 мл/кг ыссск тело трехкратно через день.

- в) тималин внутримышечно в доое 0,1 мг/кг кассы тола I раз в сутки 3 дня подряд.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПС ТЕШ ДИССЕРТАЦИЙ

1.Смирнов A.M., Кондратьев B.C., Дугин Г.Л., Васильев M.S. Синдромы нарушения обмена веществ у крупного рогатого скота в условиях промышленного жиБотководствс//Пробяемы диагностики и лечения болезней обмена веществ у с.-х. тавотных в условиях промышленных комплексов/Тез. докл. Всесоюзной науч. конф. - Вороне; 1978.-С.

2. Смирнов A.M., Никишине. И.В., Васильев М.Ф. Взаимосвязь состояния естественной резистентности и обмена веществ организма коров и родившихся от них телят//Тез. докл. к конф. молодых .ученых и ветеринарньк специалистов Нечерноземной зоны РС®СР.-Горький, 1979.-С.

3. Смирнов A.M., Кондратьев B.C., Никишина К.В., Васильев 'АЛ. Состояние естественной резистентности и обмена, веществ организма коров и родившихся от них телят при различных рационах кормления//3оогигиена, кормление и разведение с.-х. животных/ Сб. науч. раб. ЛВИ.-Л., 1980.-С.

-: ,4. Васильев М.Ф., Никишина И.В, Методические указания по лабораторной диагностике нарушений обмена Ееществ у коров. Л., 1980.-35с.

5. Смирнов A.M., Кондратьев B.C., Никишина И.В., Васильев М.Ф., Аксенов O.A. Средство для повышения резистентности животных и способ его получения//Авторское свидетельство 1904707 / Вкл. кзобрет.-К.- 1982.

- 5. Смирнов A.M., Кондратьев B.C., Васильев К.Ф. Желудочный сок при дистонии преджелудков//Ветеринария.-'*3.- 1982.-С.53.

7. Смирнев A.M., Кондратьев B.C., Никишине. И.В., Весильоз M.S. Тимосплянин для повшения резистентности колодняке//Бетэри~ нгрия.-''7. - 1984.-С.65-66.

8. Кондратьев B.C., Никишина И.В., Васильев М.Ф. Результаты применения тимоспяенина при диспепсии телят//Проблемн профилактики и терапии при незаразных болезнях с.-х. ■••иеотных в Нечерноземной зоне РЖР/Сб. неуч. тр. JIBIÎ.-I., 1985.-С.

9. Кондратьев B.C., Васильев М.®., Кссалзв С.П. Временное наставление по применению штионина в комбинеции с натуральным желудочным соком "Зквин" при кетозе коров. Гссагропрсм СССР. 1987.-2с.

1С. Кондратьев B.C., Никияиис И.В., Васильев Ы.Ф., Ковалев С.П. Использование биологического препарате из тимуса и селезенки для повшения резистентности молодняка ':-;ивоткых//Биологичс-скк активные вещества в сельском хозяйстве/ Квтериалн к науч.-практ. конф. Экспресс информация АП СССР .-Л., 1988.-С.25-27.

11. Кондратьев B.C., Никишина И.В., Васильев М.Ф., Ковалев С.П. Результаты применения тимоспленина для профилактики острых желудочно-кишечных заболеваний у телят//Профилактика незаразных болезней у коров/Тез. докл. кауч.-практ. конф. Тарту,J988.-

С.33-34.

12. Кондратьев B.C., Васильев M.S., Ковалев С.П. Временное наставление по применению сока желудочного натурального ("сквин") в комбинации с шанксболамином к кислотой аскорбиновой ппк кетозе коров. Госегропром СССР. I9S8.-3c.

13. Смирнов A.M., Кондратьев B.C., Васильев М.Ф., Ковалев С.Я. Способ лечения кетоза крупного рогатого скота. Авторское свидетельство "1308372 от 15.05.1989.

14. Смирнов A.M., Кондратьев B.C., Васильев Ц.Ф., Ковалев С.П. Способ лечения кетоза коров. Авторское свидетельство №1515440 от 15.06.1989.

15. Васильев й.ф. Содержание иммуноглобулинов у здоровых и больных кетозом коров//Профилактика незаразных болезней и терапия гивотных и пуаных зверей/Сб. неуч. тр. С-ПВК.- С-Пб, 1992.-C.S-II.

16. Васильев Ы.§., Шведов О.Г. Влияние ишятокодуляторов

на уровень колониеобрезовения У облученных шпей//Новые фармакологические средства в ветеринарии/Тез. докл. к 4-Г: Межгосударственной мегжузовекой науч.-практ. конф.- С-Пб, I992.-C.27-2G.

1?. Весильев М.Ф. Прикешяше истисшшг к нгтурплького желудочного соке при субкликическск кетозс коров//Нссые Лсриоколс:гл-чеокке средстве г взтериисржс/Гоз. докл. к 5-П Неотссударствепно: датаузовскоП науч.-прскт. конп.- С-Пб, I9C3.-C.9-IQ.

13. Васильев !•.!.$., йикшине И.В., Ковелев С.ГГ.Качоеова Л.к. Коррекция обмене веществ у керев больных субклкническиы ке-тозом//А?;туелькыо проблемы ветерпкарик/Сб. неуч. тр. С-ПВЛ. - . С-Пб, 1994.-С.36-37.

19. Васильев П.©. Взаимосвязь ик^нс-ь&твболическогс. '■■т?ту-ог больнь"х кстсзом коров и родившиеся от них тел.ят// Актуальные проблемы воторинарикЛ'ат. кауч. кон;-, прс^ссореко-прсподешетачь-екого состава, научных сотрудников и аспирантов 0-ПВИ.- С-Пб, 1994.-С.14-15.

- 20. Васильев Li.S. Пок&зетоли Т- и В-скстэик иммунитета у больных котозом коров// Там -С.12-13.

21. Васильев И.(5. Результаты исследования гм::«отичсско? мццкост:-: у здоровых к больны:: котором коров//Актуальнко проблемы ЕоторпнарноГ медицины/Сб. нг.уч. тр. С~ПГАВ!.1.~ С-Пб, 1995.-С.20-22.