Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Иммунный статус ягнят раннего периода развития и его коррекция пептидным биорегулятором "Тимоген"

РГ6 од

- 9 АИурШ$ий сельскохозяйственный институт

На правах рукописи

БОРИСОВ Данил Родионов:!-!

УДК: С13;3!5.37:«?«Л

ИММУННЫЙ СТАТУС ЯГНЯТ РАННЕГО ПЕРИОДА

РАЗВИТИЯ И ЕГО КОРРЕКЦИЯ ПЕПТИДНЫМ БИОРЕГУЛЯТОРОМ «ТИМОГЕН»

!6.00.62. — Патология, онкология

и ж,{*<!*>лг,Г1»:> ¿шроткмх

д^с^с;)';!:;!;;: :;а уче;'"'! с«е«;-'

Работа выполнена на кафедре нормальной и патологической физиологии Бурятского сельскохозяйственного института

Научный руководитель — доктор ветеринарных наук, профессор Игнатьев Р. Р.

Официальные оппоненты: Доктор ветеринарных наук, профессор Чекишев В. М. Кандидат ветеринарных наук, доцент Савельев Б. П.

Ведущая организация — Бурятский НИИСХ СО РАСХН

Защита состоится « -/4 » г*1993 года в -/4 часов на заседании специализированного совета К 120.79.01 в Бурятском сельскохозяйственном институте (670020, г. Улан-Удэ, ул. Пушкина, 8).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан « /У » 199-3

г.

Ученый секретарь специализированного совета, доцент

Г. А. Игумнов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность теки. Новорожденные ягнята, как и молодняк других видов сельскохозяйственных хивотных, не способны еще к формиро---------

ванию активного иммунитета и поэтому в этот период их хизни. вахное значение имеют пассивно приобретенные от матери факторы иммунитета. Среди этих защитных факторов первостепенную роль играют иммуноглобулины, которые влияют на выживаемость новорох-денных зивотных в зависимости от уровня в их крови, который определяется главным образом количеством потребленного молозива и содержанием в нем иммуноглобулинов, а такхе временем первого кормления молозивоу и эффективности? пх усвоения новорожденными гивотными. Тахш образом, определение содерхания иммуноглобулинов в крови имеет прогностическое значение в отношении устойчивости новорожденных к заболеваниям и оценки иммунологического состояния организма на ранних этапах внеутробного развития.

По данным ветеринарной статистики наибольший отход (30-40 %). молодняка приходится на ранний постнатальный период развития зивотных. Несовершенство защитных механизмов организма, обусловливавшее кммунодефицитное состояние, увеличивает возмохность заболевания и затем гибели новорожденных зивотных э первые недели и месяцы их хиэни (И.£>.Храбустовский,1977; В.МЛекишев, 1979; П.А.Емельяненко,1980; Р.Р.Игнатьев,1982; D.H.Федоров,1982; З.М.Меакоз,1989), что особенно четко проявляется у особей, родившихся с недостаточной физиологической зрелостыз.

Цель и еядами исследования. Цельо и задачей лаших исследований было изучить: 1.Становление иммунного статуса ягнят в раннем периоде развития; 2. Изучить влияние молозивного кормления на иммунный статус новорожденных ягнят; 3.Установить возрастные изменения некоторых клинияо-фиэиологических, биохимических и иммунологических параметров у исследуемых ягнят; 4.Определить влияние препарата "Тшоген"на неспецифичоскуп резистентность организма ягнят-гипотрофихоз»

Научная нозизна работы. Проведены исследования биохимической и морфологической картины крови, фагоцитарной, бактерицидной и лизеодмнея aitтквности креви, а такхе илигако-фязиояоги-ческого статуса с момента рождения до 6-месячного возраста ягнят. Кроме того изучен белковый состав молозива и молока и динамика специфических агглютининов в процессе лактации у овец Забайкальской тонкорунной породы. Использован впервые о уело-

виях Бурятии препарат "Тим о ген" для коррекции иммунного статуса у ягнят при разной степени их физиологической зрелости.

Практическая ценность. Полученные нами в процессе исследований данные об изменения;. различных показателей крови, активности клеточных и жидкостных факторов защиты, клинические показатели ягнят разных возрастных периодов развития, белкового состава молозива и молока овцематок и данные по коррекции неспецифических факторов резистентности ягнят-гипотрофиков при применении тимогена могут быть использованы для характеристики особенностей иммунобиологической реактивности их организма и организации мер эффективного лечения и профилактики патологий, свойственных этому периоду развития ягнят. Кроме того эти данные могут быть использованы в учебном процессе при преподавании нормальной и патологической физиологии, клинической диагностики и терапии внутренних незаразных болезней и других дисциплин для студентов ветеринарных и зооинхенерных факультетов сельскохозяйственных ВУЗов.

Апробация работы. Основные пояснения диссертации долохенн и одобрены: на научных конференциях Бурятского СХИ (1989,1990, 1991); на 3 региональной конференции молодых ученых в г.Улан-Удэ (1990); на зональной научной конференции морфологов Сибири и Дальнего Востока з г.Улан-Удэ (1990); на 3 научно-практической конференции молодых ученых и специалистов в г.Алма-Ата (1991); на республиканской научной конференции морфологов в г.Киеве (1991).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 научных статей.

Объем и структура диссертации. Работа излогена на 135 страницах машинописного текста и состоит из следуовдх разделов: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследования, выбоды, практические предлохения. Список литературы вклпчает 348 источников, в том числе 280 отечественных и 68 иностранных авторов. Работа иллостг фована 10 таблицами.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал и методы исследований. Экспериментальная часть работы выполнена в учебном хозяйстве "Байкал" Бурятского СХИ, ОПХ "Иволгинское" Иволгинского района республики Бурятия и ви-

а арии Бурятского СХИ с января 1989 г. по ивдь 1991 г. Материалом исследований слугиэа ягнята бурятского типа Зебайнальсног?

тонкорунной породы овец 12 возрастных групп: новорожденные до при а! а колоэиза, 1-, 2-, 3-, 7-, 15-, ЗО-суточные.-г-^ 3-,4-, -5- уХ--нёсЖныо по 10 гивотннзс в кагдой возрастной группе и ода а группа ззрослкх овцематок з количество 10 голов, подобранных по принципу я.чалогоз.

У подопутвнх зивотанх определялись возрастные изменения хк-вой массы, 'влинико-морфоаотачесютз пггззателм, 'содорханйе общего белка и его фракция п сыворотке крдок, специфические ентнте-ла 2 ¿грози ягнят. Исследовались такхе белки секрета молочной зедзаы овцематок рг» «ре^я ггзтзщп: п ¿здсагшие я сггвп»*!»-ческих актктел, ¡ккуийзздик на неспецифичоскив факторы

резистентности организма и препарата "Тимоген" при гипотрофии ягнят.

Определение живой массы, клинического статуса, татра специфических паратифозных агглптининов, колотества лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитарной формулы проводились по общепринятым методам. _ „

Обт»:я бело» скйоротаи кров; определяли рефрактометром -польского производства.

?-"с-.;;елоние ¿рантшЯ белков с^оротн:! :-:рови г"рг.йод*'ли иетодс;:: ояектрофореза ь агарозок геле с иослсдуизей донсгт.-лстрчзй озй/.тро'ьор^!рами и пгопыетркроъсяиеи, используя л5й5ру ДЛЯ •г.€«:тро£орз~а. ;;?.рки ШФ-З при скг.е тока 50 А, напряжении -.>.":■ 0 3. Электрофорез проводился в 1,2 % агзрозом геле, приготовленном не 0,25 Н зерскал-гшдкнаплвок буфере с рН 8,6, Для определения белковых фракций сыворотки крови, наряду с электрофорезе* использовался такго турЗодкисгодаоехий < пзфелой-зтрйгсьс-кп;:) к к од.

Бактерицидная активность сыворотки крови определялась по методике О.В.Бухарина и В.Л.Созыкша (1979).

Активность сывороточного яизоЕкка устгагтазлиэалч по методике, предлохснкой О.З.йухарггннь (15?1).

¿агоцитарнуа реакцию лейкоцитов ставили по кетоду П.Н.&гяр~ •-••ода (1975}.

Лкмуниь-гда ягнят проводили двукратно, с интервалом 7 дней концентрированной оорнолявасцовой вакциной в дезах 2 я 5 мл против паратифа ягнят и овец.

Тимоген вводили внутримышечно в течении 3-х дней в дозе 10 мкг/кг.

Цифровой материал обрабатывался биометрически по Е.В.Ман-цевичюте-Эрингене (1964) *

Результаты исследований. Белковая картина овечьего молока в процессе лактации подвергалась существенным изменениям. Максимальное количество общего белка отмечалось в молозиве первого удоя и составляло в среднем по группе 20,06+1,12 т%. Наиболее аначительные количественные и качественные иаменения белков молозива происходили в течение первых дней лактации. Так, через 3 дня после ягнения, содергание общего белка падало более чем в 2,5 раза (до 3,17+1,08 т%), а после 7 дней снижалось до 5,60+ 0,85 т%. Следует отметить, что к этому периоду у некоторых овцематок концентрация общего белка все «де сохранялась на довольно высоком уровне. Некоторый спад отмечался в последующие сроки лактации и к концу исследования протеин в молоке составлял всего лишь 5,00+0,63 Сывороточные белки в молозиве первого удоя содержались в значительном количестве и составляли в средней 15,59+1,06 г% (более 78 % от общего белка). В дальнейшем содерхание сывороточных белков подворгалось резкому спаду и оно становилось минимальным после 2-х месяцев лактации - 1,24+ 0,25 т%.

Основным белком овечьего молока является казеин, в составе которого насчитывается до 11 различных фракций, 3 из которых -альфа, бета и гамма наиболее изучены. Казеин находится в молока в виде казеинкальцийфосфатного комплекса в форме мицелл размером от 30 до 800 нм. В наших исследованиях мы ограничились определением общего количества казеина, ибо нас интересовали в основном фракции сывороточных белков, оказывающих влияние на формирование колостраяьного иммунитета у новорожденных ягнят. 3 молозизе первого удоя содерхание казеина составляло 4,46+0,11 г% или 22,28 % к общему белку. Через 3 дня после ягнения концентрация казеина повышалась до 5,05+0,49 1%, а на 7 сутки лактации резко снижалась до 3,67+0,39 г%; в дальнейшем отмечалось незначительное снижение до 2-го месяца лактации (3,12+0,45 г%), а в последующие периоды лактации овцематок концентрация казеина имела тенденцию л повышению.

В доступной литературе сведений по содержании фракций сы-

вороточных белков молока сравнительно немного и они разноречивы. Работ, посвященных этой теме и проведенных в наших климатических условиях, единичны. При проведении электрофореза мо-.—-_..лока.нами-отмечено незначительное "содерханке сывороточчнх аль-буилков и это псоудило нас, в звду их незначительной концентрации, пренебречь учетом данной фракции. Содержание бета-лакто-глобулкч* в молозива первого удоя составляло 0,35+0,09 г%} в л иьненьч. г происходило снихение его уровня и в тэтечяи 15 дчей лактации !■ онЦ'Хграция дачного бел;;а у^гчал.'^сг. и 6 эьо (0,11-'-0,"-': г " по у.сс.-л:а ¿здзиЦт! ш-меч елось повышение:

60 дней - 0,35+0,03 г$,-90 дней - О.яя+п/к :: 12С

- Га.

Альфа-лшстоальбум^овая фракция молозива и молока превалировала над другими фракциями на протяжении зеего периода лактации и являлась основный компонентом сывороточного белка. Концентрация адьфа-лактоальбумша б молозиве первого удоя составляла 5,03+0,79 г%. На 3-й день ее содержание уменьшалось в 2,4 раза (2,11+0,Зо т%), повторное резкое падение данной фракции СНВОрОТОЧИОГО болкя ПРИХОГКЛОСТ ¿а:.. г-чтглу«;

■ ,4 •', ■ '>•/•¿ЗГГ Ол-.ХС:-".. -г" ЧО • •-.Г.СГ:: . -'л*

: V": - С..53+С.г/.

^ ог.еч';?.-. /О" 'у.,::-'., ,:ервс*"о .уд1-1-'- '.'ег';"-

^ •¿:!:;.;1:;тсл:.ном коакч-зстсо ( чго

т^лестр.уч'у " "^сочо:-- дааун^коугпгектки.с

/-..^ов в к~и:оцтральноь колок?«, '¡крупные глобулины на н;п! лезгшх лн<.л лакташ« подвергались существенном количественным иэмекзшиз:, чей лредтествуощяе фракции молочной сыворотки. Так, через 3-е суток сог-ргзчтто б<. яков сшгдагот» ¿'ол^';

ч р^з (до 0, 0, <":; . ■:. ••?::;*•-,>. ¿розеш.

кщаж^петеа гнах белков падал еще в 1,3 раза (0,39+0,14 в дальнейшей наблпдалось постепенное снижение концентрации им-к??яшх глобулинов к на 120-я день лактация она емг».чя«гт1 чсс-

' • -л-:. .-.,.;* «ис^уа?» «.ущсв^вся-

тзик ——г -"V-д,-- ■„'.-•;■•. С. <л .''"'"*:'И

, г . ч ¿»-уии«. Счи-

.тсениоп урозкл всех белковых ксчпспентоз, особенно жмунотобу-линовой фракции сысоротки молозива.

Для выяснения ь:,еханио;га яолостразьной передали сяошййчвс-

к их антител были проведены исследования по содергантаз и продоя-аительности сохранения паратифозных агглютининов в секрете колонной хелезы вакцинированных в период суягности овцематок и их изменения в процессе лактации. Антитела в молозиве вакцинированных овцематок-сраау после окота содержались в высоких концентрациях (1:8960+1924). С течением лактации наблюдалось быстрое понижение уровня специфических паратифозных агглютининов: на 7-й день - до 1:1760+332, на 30-й день - 1:260+70. Специфические агглютинины через три месяца лактадаи выявлялись в молоке у всех подопытных хивотных, хотя и в низких татрах. На 120-й день лактации з сыворотке молока у большинства исследуемых овцематок мы не обнаружили специфических антител. Нами установлено, что достаточно высокий уровень паратифозных агглютининов в секрете молочной хелезы овцематок сохраняется до 30 дней лактация.

В сыворотке крови ягнят, родившихся от иммунизированных овцематок, до приема молозива специфические агглютинины но выявлялись. Их появление в высоком титре связано с приемом молозива, чем и обусловлено повышение концентрации паратифозных антител в организме хивотных в течении первых 3-х дней хивни. Так, содержание специфических антител возрастало с 1:2550481 в 1-дневном возрасте ягнят до 1:5760+642 в возрасте 3-х дней - более чем в 2 раза. Мы это связываем с тем, что у новорохденных животных (ягнят, поросят, телят) глобулины молозива не разрушается в пищеварительном тракте, а в нативчом виде проникает непосредственно в кровь. По мере становления и развития организма ягнят происходило неуклонное снижение титра гуморальных антител и к концу 1-го месяца его содерхание составляло 1:520+140. Резкое понихение концентрации паратифозных агглютининов наблюдалось з крови 2-месячных ягнят (1:55+29) и к окончанию подсосного периода они выявлялись только у отдельных хивотных и в низких титрах (1:5 - 1:10).

Из всех исследованных нами возрастных периодов, по степени и глубине сдвигов протеинового спектра сыворотки крови ягнят, выделяется молоеивнып, наиболее характерным для которого является появление гемма-глобулиновой фракции, обладающей высокой иммунобиологической активность», благодаря наличию в ней антител, По нашим данным обздй белок достигает максимальной величины только после приема молозива. В последующие дни количество обдэго белка незначительно понижалось и я концу молозивного пе-

риода составляло 7,28 т%, что связано с уменьшением концентрации гемма-глобулинов.•

Альбуминовая фракция до приема молозива преобладала над глобулинами и составляла 63,22 % от общего количества белка, затем -"неравноиерно~снигалась, а на 7-я день увеличивалась до 3,78 г%.

Альфа-глобулины в высокой концентрации о кеч елись в молозив-ннй период (1,29+4,54 т%). Сравнительно высокое содержание альфа-глобулинов на ранних этапах постнатального онтогенеза ягнят скорее всего обусловлена их участием в обменных процессах, хотя Бкскавываотся и иные мнения. Б частности, А.Г.Малахов (1957) считает, что высокое содержание альфа-глобулинов является компенсаторной реакцией на пшоальбумдаедап.

Наиболее ничкое с. дергание б ста- г л сбу~:пгсз наблюдалось в сыворотке крови ягнят до приема молозива (0,20 т%) и в дальнейшем они не претерпевали значительных изменений, т.е.данная фракция обладает устойчивостью, очевидно, вследствии того, что бета-глобулины являются носителями неспецифических антитоксинов.

Наиболее существенным изменениям подвергалось содержание гамма-глобулинов ой франции. Эта франция обнарузивается в крови только после приска «ологивъ и через сутйи его содержание достигло максимальной ьоличинн - 2,43 т%. О 3-дневкого возраста со-дергаяие гаггиа-глобулинов падало до 2.С4 т% и а далънв^аек происходило прогрессивное снигенпе до i ,05 г% к З-иесячному возрасту ягнят. Начинал с 4-х месяцев после рождения япшт, уровень депной ¿ршгаиа постепенно увеличивался и к 6-месячноиу возрасту составлял г%.

Возрастные изменения гамма-глобулиновой фракции, исходя из вышеизложенного, сводятся к тому, что находясь на относительно зисояск уровне в ранкак эос-расте (до 1-го месяца), к 2-месячно-.•гу возрасту этот уровень у всзх подопытных хивотных снижался. К 4-месячному возрасту содерхание этой фракции в сыворотке крови значительно увеличивалось и продолхалось оно до конца исследований.

Результаты наших исследований согласуется с данными ряда аз торов {С.М.дурдыезДЭбЗ; В.Л.Родина,1982 и др.), которые тан-so отмечали высокий уровень гамма-глобулиноэ б 1-й месяц жаззк и последующее снижение его к 2-месячному возрасту, а такае умеш. вение общего количества в сыворотке крови и связывали с тем, • что глазным источником белка, поступающего в организм ягненка,

является молоко матери. Но с течением лактации в молоке значительно падает количество общего белка и иммунных глобулинов, а собственные гамма-глобулины молодой организм синтезировать еще не в состоянии, что привод;.г к снижению уровня данного белка в крови ягнят в первые 2 месяца жизни. Что касается повышения уровня гамма-глобулинов в сыворотке крови к 4-месячному возрасту, то мы это объясняем с началом функционирования систем, регулирующих синтез гамма-глобулинов и возможно с изменением характера питания ягнят после отбивки их от матерей.

Соответствующие изменения белковой картины сыворотки крови ягнят наглядно отражаются на альбумино-глобулиновом коэффициенте. Этот коэффициент наиболее высоким был при рождении ягнят -1,72, в молозивный период А/Г резко падает (ниже 1), а с возрастом животных постепенно повышается и приобретает стабильность на 4-6 месяцах постэмбрионального развития организма.

Для выявления влияния иммунизации на некоторые факторы неспецифической защиты организма ягнят, мы выбрали тот период, когда пик концентрации титра паратифозных антител и в секрете молочной железы овцематок, и в сыворотке крови ягнят, аел резко ка спад. Работами ряда исследователей доказано, что полученные от матери антитела, с одной стороны, обеспечивают жизненно необхо-димув иммунную защиту, но с другой - они же могут отрицательно влиять или даже подавлять образование активного иммунитета против того или иного возбудителя, т.е. колострадьныя иммунитет оказывает угнетающее влияние на функции иымунокоипетентных органов.

Под влиянием иммунизированного молока овцематок фагоцитарная активность крови 20-дневных ягнят характеризуется высокими показателями. Результаты, полученные в ходе исследований различными авторами и на разных видах животных, нуждаются в критическом анализе. Многими авторами (И.М.Карпуть и В.С.Прудников, 1970; В.М.;.1итшников,1971; С.К.Плященко и В.Т.Сидоров, 1972; Т.А.Йва-нова,1988; 3,П.0крипник,1988) признается, что у ков рожденных устойчивость органиама обеспечивается в основном за счет клеточных факторе в защиты - фагоцитоза. По мере роста и развития организма фагоцитоз уступает свои главенствующие позиции гуморальным факторам защиты и все же на всем протяжении жизни он продолжает играть нагнув защитную роль. В наших исследованиях происходило повышение фагоцитарной активности крови ягнят после их

вакцинации, особенно после вторичной иммунизации - 96,3 %, Высокий уровень фагоцитоза сохранялся у подопытных хтотаыг до 58-лнеяного эоорсста С7о,-1 против 63,3 % исходного). В аосятуохлс пзолодч наблюдалось повыл emie •5агоцг:тариоа_.бнтивности-кпо!»ч-чг- —

нлт_*антоольнор-груггаг<".м~у подоггчтк^х (7о»о 67," 33,9 г СО . -1 л- С-С ОТ U ОТ С i Э; ?' :н С ■; .

• ухарьдыше оакторн ^««»укттггта ^-.ртфус г.оодкоо к nr. к^ооййраеь'стро с пеоэиа дн:: ¿изки ула^пзкл* Р.^.^гнатьсг ^ 1&8L),

^.М.л/.ТТЪЗККСЗ ( *3u5) , 1.Н.РаКПВй ( • ПОЦ/^Ъ'^З 5 ЗЯОК^ UC -

.■г.и.л;\ гусят - длил? обладает низкой бехтерицидиой актив-

ностьо.

-„„п.ор^-д;;— „¿•¡ийнос"?' лроьа ягнят опытной грул-

аы ¿амвтно повнпадась под воздействием 2-кратной иммунизации (скачкообразное усиление поело каждой вакцинации - 78,3 и оо,4^), тогда как у контрольных ягнят она соответственно составляет 57,У и 72,3 %. 3 последуодне периоды исследований нами отмечалось постепенное пенихение БАС крови обеих групп, хотя следует отметить, что у иииунизированннх животных эти показатзлк морально!? зазкп: волг»« б;;лг г»-».««, --¡е? • г с:-: т?с>::„.~гну,

: •■.¡чч-v-;'i ог.:чт;-j^lt;-inr- аит»-;эчо-;г;; caso-

г:у чч кой» : v ": З-чо^и , чтэ л!« г ."иер^д^н л' Ьаятора а дальчед--гок аавкся? о-: ;<:лизяп ¡ог^гл-г^чя. содер^от*.», зозонов года w диупгс фахторог., но носсннелно стимулйрувдс«? влияние и^чугаэоцли на активность лизоцима крови ягйчт.

Нельзя обойти вшманием установленные! нами фант, что у ягнят е 2-месячном возрасте происходит ослабление иесп<ззи$ичгсяих -?а горов зазитн организма и ни екдонхи объяснить ото '/тратой коло- :, :г,--чого иммунитета и носовераонстгюк иммунологической реан-растудего организма.

На основании полученных результатов мы считай!, что у ягнят з периода новорожденное?;! до б-кесячнлго воерасга температура тела „•;- .тодзсргается значительны* колебаниям. Так, у козорохден-ынх Я1"НД1 температура тела составляла 39,9+0,1Э°С и сохранялась на втек уровне в течешгл 2-х дяда жизни. Начиная с 3-даеаного возраста наглодалось постепенное снижение анальной температуры у исследуемых хивотны* и к 5-месячному возрасту она составляла в средне« 38,9+0,23°С, что, по-видимому, мохно обменить учас-

тием в терморегуляции подкохной пигментированной хировой ткани, которая окисляясь, образует тепло, необходимое для терморегуляции (С.С.Абрамов, И,Г.Арестов, И.М.Карпуть и др.,1990).

Число сердечных сокращений с возрастом ягнят уменьшалось. При рохдении оно составляло в среднем 171+11, в 6-месячном возрасте 98+8 сокращений в минуту. На зависимость частоты пульса от возраста, сезона года, условий содерхания сельскохозяйственных . хивотных указывает многие авторы (А.А.Ходоркина,1957; А.Ф.Кият-кин и И.А.Тапильский,1957 и др.), которая сводится к постепенному снихешго ее с ростом и развитием'хивотных (А.Д.Слоним,1961; Г.А.Дубровина, 1970 и др.).

Аналогичная картина выявлена нами при определении числа дыхательных движений у ягнят. Оно было максимальным при рохдении (73+4 дыхательных двихений в минуту), с 3-дневного возраста хивотных наблюдалось постепенное снихение числа дыхательных двихений (67+5) и на 60-й день после рождения оно составляло в среднем 50+5 в минуту. Относительная стабилизация ритма дыхания происходит у ягнят в последующие 3 месяца и с 5-месячного возраста у них отметалось значительное снихение количества дыхательных движений (41+5) и к концу исследования оно составляло в среднем 36+4 в минуту.

Морфологический состав крови у ягнят бурятской тонкорунной породы в течении первого года их хизни подвержен значительным возрастным изменениям и они деют нам основание считать, что относительная стабилизация морфологического состава крови у ягнят завершается в течении первых 6 месяцев их постэмбриональной хиэ-ни, которые согласуется с данными приведенными в работах Н.В. Старикова (1973), Б.Б.Саханова (1973), С.М.Дурдыева (1984). Наряду с этим есть и расхождения наших данных с работами А.А.Кудрявцева и М.В^Кудряыова (1935), исследовавших морфологш крови ягнят со дня рождения до 7 месяцев и установивших возрастание числа эритроцитов с воерастом хивотных. Г.А.Стакан (1947) установила наивысшие показатели эритроцитов и гемоглобина у 2-месячных ягнят, тогда как в этот период, по нашим данным, их число резко снижается и содергание эритроцитов достигает минимальной величины (5,12+0,13 млн/км3). С.И.Севастьянов (1956) отмечает снихение содерхания гемоглобина в возрасте 3-4-х месяцев на фоне возрастания количества эритроцитов. Наг;и же выявлена прямая зависимость мехду количеством эритроцитов и концентрацией гемо-

глобина.

Возрастныэ пгненбнил колгявства лейкоцитов в ярози ягнят, по-видимому, являются отражение-:? процессов роста;; развит ил их — организма и-возможно-взаш*одейстайя их с окрузасщей средой. Са~ мое ниакоо содержание лейкоцитов отмечалось з крови новорожденных ягкят (7,04+0,88 тыс/ич"), число которых разно возрастало з молозиэный период и объясняется оно поступление больного количества белы* кровяных клеток з оргяяияч ягнят г аолопквон овцематок (у®злпчгнио идет з основной за счет дде-.-роодтов). Затег* этот показатель неравномерно снижался и в 2-чесячном возраста ягнят достигал наименьшей веяич^чч (6,83^.0,75 т-сЛм3}, что, ©чвэчдло, объясняется ее»» еде ч'--:зг:"П фуккциснаяьнок акткзностьэ органов кроветворения. Однако с 3-иесячного возраста число лейкоцитов увеличивалось и сохранялось оно на этой уровне до конца исследований.

Изменения числа лейкоцитоз были обусловлены соответствующими сдвигами со стороны различных его фор!. В лейкограша новорожденных ягнят преобладали неатрофильные лейкоцита (до 8,5 % палечкоядерпкх к 35.9 % согнентоядертшз), количество ноюрьт зв-:; ::•:-■%<•. сни:г.аясст> з •:-.^•.■.■■у.'.'л леряод. пвло-;.:оядернк2 фор:

'¡••.¿'•з в течении посчеп^ит^х косяш'В еучестьпкно не кг;.:?.--пялось, з»г и-.жл^чкнжз! кезнзпитолмгого увеличения 3 7-дневккж лгнлт (12,3 %). Содержание иегментояд-ркнх нейтрофилов подвергалось болео существенным колебания;? - у 1-дневны;': ягнят их количество уменызалось более чел з 2 раза (с 35,9 до 16,2 %). 3 последующие возрастные периоды данная форма лейкоцитов возрастала з среднем до 30 % и сохранялась на этом уровне с незначительными колебаниями до 6-месячного возраста ягнят.

яоличество лимфоцитов же подвеогалось более существенным изменениям, особенно в течении 1-й сутки жизни (увеличение с 36,9 до 62,7 %) и это не случайное явление, т.к. с молозивом матери организм новорожденных ягнят получает большое количество иммуно-компетеч-янх клеток - лимфопитоз. Аналогичные результаты пскво-дпт В,У,..Чернов (1539), установивший, что у 1-днзвнн:: козлят больаа половины зсех лейкоцитов приходится на долю лимфоцитов. С возрастом ягнят ч'лсло лимфоцитов имеет тенденцию к понижению, но необходимо отметить, что на протяжении 6-месячного периода наблюдений количество лимфоцитов существенно превалировало над нейтрофилами.

Содержание эоаинофилов в крови яхнят до 2-месячного возраста изменялось неравномерно. Относительная стабилизация их количества выявлена нами с 3-го месяца хизни хивотных. Число моноцитов в периферической крови ягнят первого года хизни сравнительно мало и колебалось в пределах 2,4-7,2 %

Для коррекции иммунного статуса ягнят при гипотрофии нами использовался препарат "Тимоген", выпускаемый научно-производственным комплексом "Цитомед". ,Лля характеристики гомеостаза и состояния развития хивотных нами определялись такие показатели, как масса тела, содерханио в сыворотке крови протеина и его фракция, бактерицидная активность и количество лизоцима, фагоцитарная активность нейтрофилов крови.

Средний вес ягнят опытной и контрольной групп к началу исследования не имели существенных отличий и составили 9,83+0,69 9,47К),47 кг соответственно. Через 7 дней после начала применения тимогена масса тела подопытных хивотных составляла 11,43+ 0,69 кг, что превышала ^ивой вес контрольных ягнят в среднем на 1 килограмм. На 14-й день у ягнят опытной группы масса тела составляла 12,87+0,63 кг, на 21-й день - 14,29+0,78 кг и через месяц после принене:з:я тимогена их хивой вес практически не отличался от веса ягкят-нормотрофиков и составлял 16,24+0,56 кг. Среднесуточный привес у ягнят данной группы за исследуемый период составил 229 граммов. У контрольных хивотных такхе отмечался увеличение хивой массы и период исследования, но она имела более низкие показатели, чем у ягнят опытной группы. Так, на 14 сутки их хивой вес составлял 11,23+0,41 кг, на 21-я день -12,13+0,43 кг и к концу исследования всего 13,29+0,29 кг. Среднесуточный привес за весь период составил 136 граммов, т.е. на 93 граммов меньпе, чем у ягнят опытной группы.

Тимоген оказывает стимулирующее влияние на содержание общего бедка и его фракций в сыворотке крови больных хивотных. У подопытных ягнят нами выявлено наличие болео высокой концентрации белка в сыворотке крови, чеи у контрольных, которая достигала, на 26-й День 7,04+0,11 г% против 6,13+0,10 г?с до начала применения тимогена. ягнят контрольной группы на 14-я день отмечался понижение урозня общего белка до 5,40+0,10 г% с по-следуюэдм незначительным позкпениел •: концу исследования.

Количество альбуминов в сыворотке крови яггят составляло е опытной группе 3,29+0,14 т% или 57,26 % от общего количества

белка и контрольной - 3,21*0,10 (59,11 %). Альбуминовая фракция в крови контрольных ягнят воарастала до 4,25+0,10 или 69,34 %. Уровень альбуминов у подопытных животных такхв возрастал, но его показатели были гораздо нихе, чем у ягнят контрольной группы.

Значительные изменения происходят в содвраании глобудшовой фракции белка. Так, у подопытных животных на 7-й день после начала применения нами тимогена, наблодалось повышение концентрации данной фракции сыворотки крови с 2,45+0,14 1^(42,72 %} до 3,05+0,14 1% (49,31.%). А у контрольных ягнят уровень этого белка снихался на 7-й день до 2,05+0,13 т% (36,76 %), на 14-я день до минимальной величины - 1,75+0,09 г%. На 21-й день у данных животных отмечалось незначительное повышение содержания глобулинов и к концу наблюдений ее концентрация составляла 1,88+0,08 г%. Уровень глобулиновой. фракции сыворотки крови подопытных ягнят в дальнейшем имеет тенденции к понижении, хотя к концу исследования он сохранялся на довольно высоком уровне (2,82+0,17 т% или 40,05 %).

Бактерицидная активность сыворотки крови у ягнят контрольной группы понижался ка 14 сутки с 66,4+2,1 % до 60,7+1,4 %. 3 дальнейшем, начиная с 21-го дня, БАС крови продолжала увеличиваться до конца опыта (/2,6+2,2 %). Уровень БАС крови подопытных ягнят после начала применения тимогена ноузлонно повызаяся на протяжении всего периода исследования с 63,8+1,7 до 78,3+2,5 процентов.

Активность лизоцима сыворотки крови контролышх ягнят снижалась на 7 сутки с 26,8+3,5 до 22,6+1,7 %, у ягнят опытной группы - до 24,6+0,7 %, В' последующе периоды исследования у животных обеих групп нами выявлено достоверное увеличение .уровня лизоцимной активности, в частности, у контрольных животных они составляли соответственно 24,6+1,7; 26,0+2,3 и 27,2+2,6 %, у ягнят опытной группы - 28,5+1,7; 31,4+2,3 и 32,1+1,3 %. Следует отметить, что активность лизоцима всегда была визе у ягнят опытной группы, чем у контрольных.

Фагоцитарная активность крсвк у ягнят контрольной группы не претерпевали значительных изменений и составляла к концу опыта 59,3+1,9 %. Наиболее ааметное повышение фагопиташой активности лейкоцитов отмечалось у ягнят опытной группа. На 7-е сутки эти показатели возрастали с 57,1+2,0 до 66,4+2,3 % с последуошм ее

повышением на 21-й день.до 78,3+3,1 Г, а к концу исследования до 80,6+2,3 %.

Таким обраэон, тиноген оказывает подохительное влияние на реакции клеточного, гуморального иммунитета и неспецифкческуо резистентность организма, нормализирует обменные процессы, рост и развитие ягнят.

ВЫВОДЫ

1. В молозиве овцематок содержится больпе белка, чем в молоке во все периоды лактации. В первые часы лактации сывороточные белки в'молозиве составляет 15,59+1,06 т% или 77,72 % от всего количества общего белка. В дальнеияеи содерхание сывороточных белков неуклонно снижается и на 120-й день лактации составляет 1,29+0,17 г%. Концентрация казеина по мере лактации овцематок повышается с 22,26 до 74,28 %.

2. Альфа-лактоальбумкновая фракция является основным компонентом сывороточного белка молена и на протяхении всего периода лактации превалирует над другими фракциями. Содержание бета-лактоглобулина подвергается значительным изменениям. Минимальный уровень отмечается на 15-й день лактации ~ 0,14+0,02 с • после,цуоцим повышением до 0,44+ 0,07 т% к концу исследования.

3. Иммунные глобулины в молозиве первого удоя содержатся

в значительной концентрации (9,67+0,31 г% или более 48 % от общего количества сывороточных белков). Иммуноглобулины подвергаются более существенным количественным изменениям, чем пред-вествушие фракции .молочной сыворотки. К началу молочного периода происходит стабилизация белковой картины секрета молочной хелезы овцематок.

4. Паратифозные агглютинины содержатся в чрезвычайно высоких концентрациях в молозиве. Титр специфических антител сохраняется на достаточно высоком уровне в молоке овцематок в течении 30 дней лактации.

5. Содерхание общего ¿елка в сыворотке крови ягнят увеличивается после приема молозива с 4,54+0,13 до 7,44+0,24 с последующим лонихениш и к концу исследования достигает величины (6,84+0,10 г%), характерной для взрослых хивотных. Возрастание альбуминовой фракции наблодается у 2-месячных ягнят, что связано с интенсивным ростом животных. Количество глобулинов у ягнят домолоэивного периода составляет 1,67+0,08 т%. После при ма молозива их уровень повышается до 4,41+0,20 т% или 59,23 %

от общего количества белка.

6. Существенные возрастные изменения претерпевают содержания глобулиновых фракций. Уровень альфа-глобулинов до 2-моеяч-

ного возраста гивотннх сравнительно высок и составляет 1,2У -1,47 ¿>. Бета-глобулиновая фракция на протяжении всего периода исследования не подвергалась сузгстзеккш иемоненикм. У новорожденных ягнят гамма-глобулины до приема молозша не выявлялись, через сутки его содержание достигало максимальной величина (2,43+0,2' гГ- или 32 % от общего количества глобулинов). Поэы-пение уровня гамма-глобулинов происходило с 4-месячного возрас-

"ПО р гтжггп*

7. Специфические паратифозные агглютинины в сыворотке крови новорожденных ягнят не выявлялись. Максимальной величины достигали они на 4-й день хизни хивотных (1:5750+642) и сохранялись на высоком уровне до 1-месячного возраста, особенно в первые

2 недели постнатадьной аизни ягнят.

6. Иммунизация усиливает БАС крови ягнят до 81,7+3,5 % (у контрольных - 79.3^2,2 %). Лисспкыная я фагоцитарная активности -ротл к концу исследовании ;* ягнят сое;*.-: групп ко км «от больп;;х различия, хотя откач&лось нокоторо«* усилеяио их аатив-.ост;-: поело ■/лгдг.!1 куиту т-золчл,

а. Т.гмпвратурй Тйла, сердечна* д^те-льмссть ч дыхание у яг-по я ер* их роста и развитая приближаются * показателям, ха-раягернкV- длл взросла?: овец, лояячество еритроцитов и яонцои-гемоглобина з гроэи были калсимальнш'-п у новорожденных ;¿,44^0,31 млн/нм° и 14,3^0,43 га>, с возрастом эти показатели

КрОВК СЧИХ8ЛИСЬ.

10., Количество лейкоцитоз увеличив ел ось в ; опсзкзкып пеои-ид. число неятрофильных лейкоцитов понихадось в первые сутки с 45 до 23 %. Количество лимфоцитов повышалось после приема моло-зиаа с 35,4+3,33 до 32,7+4,33 %г с последующим повторным повы-* лг '-о 54,2+3,с5 % к копну зсслвдоачняя.

11» Лэлпгднея биорегулятор ^Т>?,.*ог-£-:-г повивает физиологически:;; г..";тус и усиливает яеопезг^-чэекуй реахтдрность организма

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛ01ЕНИЯ 1. Данные об иммунологических сдвигах организма ягнят в постнатальнон онтогенезе могут быть использованы для организации мер профилактики и лечения ягнят-гипотрофикоз, а такхе в

учебном процессе ври чтении_лекция г проведении лабораторно-практических ванятий на ветеринарных и еооинженерных факультетах ВУЗов.

2. Уделять особое внимание на качество секрета молочной хе-леэн овцематок, на своевременное кормление новорохденных ягнят в первые часы и сутки их жизни для формирования у них напряженного иммунного состояния.

3. Для коррекции иммунного статуса организма ягнят раннего периода развития рекомендуем использовать цитомедины (тимоген и др.) с лечебной и профилактической цельо.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Воврастная изменчивость белковой картины крови у ягнят •в условиях Забайкалья //Биологические ресурсы и проблемы эколо

гаи Сибири.-Улан-Удэ,1990.-С.17-18.

2. Влияние молозивного кормления на белковый состав крови ягнят /'/Сб.работ Бурят.отделения ВрНОАГЗ.-Материалы конференци морфологов Сибири и Дальнего Востока.-Улан-Удэ,1930.-Вып.5.-С. 60-62.

3. Изменение содержания белков молозива и молока овцематок в процессе лактации //Материалы итоговой научной конференции ученых института за 1990 год.-Семипалатинск, 1991.-С.73.

4. Динамика изменений белковой картины и морфологического состава крови на ранних стадиях онтогенеза //Морфо-экологичес-кие проблемы в хивотноводстве и ветеринарии.-Материалы докл. республ.науч.конференции морфологов.-Киев,1991.-С.13-14.

5. Онтогенетические изменения содерхания белков в сыворот ке крови у ягнят //Задачи молодых ученых в повышении эффектов ности сельскохозяйственного производства.-Материалы 3 республ канской научно-практ.конф.молодых ученых и специалистов (зиво новодство, ветеринария).-Алма-Ата,1991.-С.7-8.

6. Некоторые биохимические показатели крови ягнят бурятск го типа Забайкальской породы овец в раннем постнатальном онтс генезе //Тр.Бурятского с.-х.института.-Раздел:Ветеринария.-Улан-Удэ,1992.-С.108-111.

7. Влияние тиыогена на неспецифическув резистентность ор! низма ягнят-гипотрофиков //Материалы второй региональной нау* ноя конференции морфологов Сибири и Дальнего Востока.-Улан-У; 1992.-С.14-15.

3. Влияние возраста на некоторые оиохдлгч эскиз показатели •грезя*лгклт' //Проблемы научного обеспечения повышения эффективности сельскохозяйственного производства.-Тез.докл.-Бишкек, 19Э2. -С.107-108.

9. Об мммуннси статусе ягнят раннего периода развития //Сибирский вестник сельскохозяйственной научи,-1992.-®3.-С.125-127.

s пстать 14 мзя 7.993- г-. Печя-ть офсеттол. Бугага пксча; юр-т:.^ &/IÓ. Загаз К- III, te ICO, Отпечатано з ТОО"ОЛЗОН '

Бн& Рай. 670042 г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, б