Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Гормональная регуляция полового цикла у коров
Г, С ГОСда^СТБЕННЬЙ АГРОПРСМЫШЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
и '
ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ НЕЗАРАЗНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ЖИВОТНЫХ
На правах рукописи
ССШОВЕВ Николай Александрович
УДК 619:618+636.2:612.018
ГОРМОНАЛЬНАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ПОЛОВОГО ЦИКЛА У КОРОВ
16.00.07 - акуиерство и искусственное осеменение
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Воронеж - 1989
Работа выполнена в Донской ордена Трудового Красного Знамени сельскохозяйственной институте и Всесоюзном научно-исследовательской институте незаразных болезней животных
Научный руководитель :
доктор ветеринарных наук А.Г.НЕЩ1АНОВ
Официальные оппоненты:
доктор ветеринарных наук, профессор Г.А.ЧЕРЕШСИНОВ;
кандидат ветеринарных наук, доцент Г.Г.КОЗЛОВ
Ведущее предприятие - Белорусский каучно-исследовательск институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Выиелесского
Защита состоится " & " Х989 г. в у#?чаоо 1
ка заседании специализированного совета К 120.7В.01 при Всесоюзной научно-исследовательском институте незаразных болезней кивотных (39Ю43, г.Воронеж, ул.Ломоносова, 114-6).
С диссертацией мояно ознакомиться в библиотеке Всесоюзного научно-исследовательского института незаразных болезней животных.
Автореферат разослан " 19В9 г.
Ученый секретарь специализированного совета кандидат биологических наук
А.Т.ПЕТРОВА
М';. : - I - -
I . -
(
■ I. ОЕПАЯ ХАРШЕКСТИКА РАБОТЫ
: 1.1. Актуальность темы. 3 обеспечения дальнейшего устойчивого роста производства продуктов навотноБодмяа, определенного реаепя-Я1ш ХХ711 съезда КПСС, ваяное значение ииепг вэ проси интенсяфнка -ции воспроизводства и профилактики бесплодия сельскохозяйственных животных*
Научно;! о с но вой правильной организация воспроизводства животных является ученяе о половой цикле, созданное А.П.Студенцовш (1953) и развитое в работах В^СЛЕкпигова (1954-1985) ,Н.И. По лязг<з-ва (1959-1967), В.В«Хралцова (1967-1975), ВЛ.Папаева (1972) , Н.В.Ншштва (1374). Р„¿.Васильева (197б),ВДопытина(1978),А^.Сер-Гйзеко (Ш8).Й.Е»ШевякоЕой(1982),А.А.7саченко(1985),Б.Г.Прокика (1588) и других исследователей.
Однако,анализ данных литературы свидетельствует о недостаточной изученности нейроэндокринных факторов з регуляции половых процессов,, в тоц числе полового цикла а его феноменов, характера гормональных, изменений пра функциональных расстройствах половых аелез и парупенян половой цикличности я репродукция. Знание этях сдозных биологических процессов имеет исключительно газное научное я практическое значение при решении вопросов активного кон? -роля п управления процесса!/:; разшоження жтеотных.
Поэтах?? изучение гормональной регуляция полового цикла у коров, эндокринных яарунепяй. при дисфункция половых келез, влияния факторов внесшей среди и гормональных препаратов на ах эндокрин -зую и генеративную функции, а такие язученяе эффективности использования различных гормоналышх препаратов для восстановления пдо -довшгостя и повышения оплодоггеоряедасти животных является актуальной задачей ветеринарной науки и практики»
- г -
1.2. Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы былс изучение гормональных изменений в организме коров в течение пологого цикла и при его нарушении,влияние естественных факторов, и гормональных препаратов на эндокринную функцию яичников и определение их эффективности для регуляции воспроизводительной функции животных.В соответствии с этим на разрешение были поставлены -следующие задачи:
1. Изучить динамику содержания половых гормонов в крови коров в течение полового цикла и определить влияние быка-прабника на гормональную фуякцшо половых келез.
2. Выявить особенности стероидогекеза у корор при гипофункции ЯИЧНИКОВ.
3. Изучить влияние очищенного гонадотропина СЖ и синтетического аналога гонадотропик-рилизинг-горцона - сурфагона на стероидопродуцкрующув функцию яичников и проявление полового цик-лй у горзв.
4. Определить зффектявность применения гонадотропина СВК п сурфагопа для восстановления плодовитости и повышения опяодотво-ряеиостп горов.
Исследования втолкана по теш 12 Донского сельскохозяйствз! ного и .¡отит; та (Л го^.регистрации С1.66.0088659) и по теш 0.сх.67.01 Всесоюзного НЭД незаразных болезннй животных (й гос. регистрации 01.86.0П3276).
1.3. Научноя новизна. 1ьлвлены особенности гормональных изменений в организме коров в течение полового цикла и при гипофункции яичпыгов.родь половых стероидов (эстрадиола,прогестерона тестостерона) р фориировчг а стадии возбуждения и ее феноменов, влияиие сзмда-пробника, очищенного гонадотропина СГК и гонадо -тропин-рилизинг-горшна на горкональкуп и генеративную Функции яичников и обоснованы показания к их применению длк регуляции воспроизводительной функции коров.
1.4. Практическая значимость. Определены нормативы гормо -нальных показателей крови коров для радиоиммунологического кон -троля за функциональным состоянием половых желез и эффективность применения гонадотропина CJK и сурфагояа для восстановления плодовитости и повышения оплодотворяемости коров.
1.5. Реализация результатов исследования. Результата исслэ -доваяий используются в учебном процессе при изложении курса акушерства,гинекологии и искусственного осеменения сельскохозяйст -венных животных в Донском, Воронежском и других сельскохозяйст -венных институтах, вошли в "Комплексную систему мероприятий по борьбе с болезнями органов размножения коров я телок", одобренную ученым советом ВНИИ незаразных болезней животных С протокол
JE б от 7.07.1988 г.) и направленную на рассмотрение в ГУБ Гос -агропрома СССР, осЕещены в Информационном листке Ростовского ЦНТИ Гг 574-68.
1.6. Апробация работы. Материалы диссертации долояеиы и одобрены на Всесоюзной"научной конференции "Проблемы диагностики, профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных в промышленном животноводстве" (Воронея,198б); научной конференции по итогам научно-исследовательской работы Донского СХИ за 1966 г. (ПерсиапоЕКа,1987); Всесоюзной научной конференции "Научные ос -новы профилактики и лечения патологии воспроизводительной функ -цик сельскохозяйственных животных" (Воронеж,1988).
1.7. Публикация. По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ.
1.8. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена
на 163 страницах машинописного текста я состоит из введения .обзора литературы, материала и методики исследований , пяти глав результатов собственных, исследований,заключения, выводов'и прак-
тических предложений, списка использованной литературы включающего 364 наименования отечественных и кносгранных авторов.Рабога . содержит. 2^ таблацн, иллюстрирована 5 рисунками.-
2. НАТЕРК'Л И ШТОДИКА ИССЭДСВАЕИЙ ' ,.
Научные исследования выполнены на коровах красной егепноП и черпо-пестрой пород, принадлежавших учхозу "Донское", колхозу им. Фрунзе и ОПХ Северо-Кавказской иазшнокспытательной станции ' Ростовской области.
Исследования по изучению гормональной функции яичников в течение нормально протекающего подового цикла выполнены па 10 коровах. Рацион которых удовлетворял их потребность в основных питательных веществах. Коровам екедневно предоставляли прогулки и общенпе о быкои-пробникои, подготовленный по методу В.С.Шипи-лэва путец перемещения в правую сторону препуциального цепка . Кровь для исследования ка содержание стероидных гормонов брали по яреклоЗ вены прк появлении признаков течки, подового возбук-деягя, охогы, через 4-6 часов после овуляции фолликула к далее чарес £-3, 6-7, 11-14 ¡: 15-17 дней после полового ■ твоабукдеакя И 0X0*!.'.
Опыт ко язучзкш влияния быка-вробника на горионосинтези -рупцуэ функцию в течшяо полового цикла проведены на 22 коровах. Восемь из япх обдались с быком-пробникои, подготовленным путей сслвания верхнего и нпензго колена пенпса 2 оСласти 5 -образ -пого кзгкба, шесть коров общались с вазэктошзровашши бикои -пробников, аосеш» кс кмзли общения с бикоы-пробпикои п слукили контроле!!. Кровь брали во вреця стадия возбукдения подового цикла (0), на 2-4, 6-7, 11-15, 16-17 дпи полового цшела и вновь в стадию возбуждения.
- 'Э -
Язучзяйо особенностей м'ероидегзяеза у глров с дасфтн-лпиоа яячайхоз 'проведено за 12 хорогах о гяпофунхцкеП яячкжоз '•йраого -нропсхогаештя, сопрово-ззавтайся аяафродязяей. В радиокз '•¿йзотках -"шявзялся дефицит по первварянои7 ярогеяпу па 13% в Ггос-'форз 'га -25?. Пра бяэхяизчзсхои ясследоваягя 'крэвя шязлев аоая-яз-яый уровень содержания фосфора (4,0-4,6 игЯЗ я хйодоуйоЗ егтазстя (■220-260 цг&). За зиготными в течение 20 дней 'гзлось псстояягое яаб'лоЯе'яяе. -Через каждые яя?ь суток проводах:! "гинекологическое •¥ссАёдо,йа«'ея-о'тбйрала проба крова.
бил со азучзяйз'!?уе5ойдойродуайрухз^5Л'(¿¡гх&т яечл5~оз у хоров 'в «ечеязо полорого цэслз, йяду'цяройззЕэУо 'гояадогрояляон СЗС, ароведен па 8 порозах с гкпофуякакзй яячагашз, сопровоздасцейся акафродизней. Сывороточный гозадотрошш вводили однократно з дозе 7 м.е./кг. Крсвз брздя перед введением препарата, а затем яря ко -'явления' первых признаков точзя, во вреия полового возбуждения я •охота, после овуляции за 6-7Д1-12,16-17 дня пологого цикла з ззовь го время проявления газторяоЗ стадии возбуждения пологого шисяа.
Исследования по изучению злая язя гояадотропяз-рклязянг-гормс-на(еурфагояа) ва гормональную функцяо яипзихоз проведена аа воська хорозах с гипофупкцяеЗ яячпяхов. Препарат вводная з доза 50 нхг. Отбор проб грозя проязвод или перед введением сурфагопа я через 12, 24,48 ч, 6,12,18 суток после введения, прз проявления стадия возбуждения - в период охоты.
Опыт по изучении влияния савороточного. гонадотропана и сурфагопа па стероидоскятезирувщув функция яичников коров яря введения их в период проявления стадия"возбуадеяяя полового цикла проведен в летяе-пастбящный период на 24 хоровзх. Восыш аявотныы вводили за час до осеменения по 4,5 н.е. сывороточного гонадотропаяа,восьми- по 10 юсг сурфагона и восьыя- по 2 ил физраствора .Ректальное исследование и отбор проб хровя производили перед введением препа-
- б -
ратов к через б и II сут. после осеменения.
При радиоиммуыологичеоком исследоБании в плазме кровя определяли содержание прогестерона,эстрадЕ0ла-17/§Е тестостерона со методу T.flso c-Lel(l975).Регистрация радиоактивности проводили с помощь» гидко с теого сцинтиллядионвого счетчика" £.яек8е1я -I2I5lPac-четп выполняли по специальной программе на ЗВУЗлектрэника ДЗ-28".
Эффективность применения гонадотрошша С2К определена в научно-производственных опытах на коровах краокоЕ степной породы с. гипофункцией яичников алиментарного лронсхоЕдення,которым предварительно было улучкеяр кормление и содержанке путем перевода их ва пастбищное содер-анпе в обеспечения ежедневного общения с бигаип-пробЕвкаии в течение двух месяцев. В дальнейЕем 49 коровау, ие проявившей стадЕш возбуждения полового цикда.было введено по 2700 говадогрозкпа CSS, а 44 контрольным животным по 2 мл физраствора. НабладекЕе за Енвогпшги велось в течение 81 двя.
«Зффзк?нвеося> еснользошейя гонадотропнна (Ж к говадотрошш-pj5.;23SET4Popi:oHa (сурфагона) для ЕовыеекЕЯ оплодотворяемо ста ск-BOiuis определена кс 132 г.оровах красной степной породы, разде -генных ua spn рашые группа. Енютннн первой группы в день осз -мзееага: подкоепо вводили eo 1600 м.е. гоиадотропин СЕК, второй -сурфагсс дозе- 10 третьеП(конгрогьяой)-физрастЕор в дозе
2 ьц>.Воо корни пахьзегалпоь активный моционом к общались о бы-каии-прсбпйкбмв .Наблюдение проводилось в течение трех месяцев.
Осемегзвйв ствокых осушеотвлялось искусственно цервикалышм методом о рек?аль"оЕ фккоацвей сейкс матки замороженной опёршЕ (-196°С). Выбор времени осеменения осуществляли по признакам течки, полового возбукдеькл к охоты,которая определялась бшеом-проб-ником.Ееременность и бесплочие диагностировали ректальным методом.
Всего в нау^цо-произБодствонных опытах использовано 309 коров проведен радиоиУ)!угологичеоккй анализ '61 образца крови.
Расчет экономической эффектя-ностп предлагаемых методов гор-,. • меняльной регуляции пологой функции котов проведен по утзерздэя -пой Глэенны управлением ветеринарии- ШЛИ СССР. "Методике опрзделе-- ния экономической эффективности ветеринарных мероприят:й(М.1905)
Результата всех исследований подвергнуты анализу с яспользо-вапкзм биометрических методов обработки цифровых материалов (Е.К.Нерхурьеза,1964; П.Ф.Рокгщкя8,1973; Н.В.Садовский.1975; Н.Г. Валазов,1580).
. 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Динамика содержания половых стероидов в течение полового цикла в крови коров.
Установлено,что гормональные показателя крови коров претерпевают значительные изменения как в дипанике полового цикла, так я стадия возбуждения.
В начзле формирования стадии возбуждения концентрация прогестерона составила 1,60+0,40 нг/мл(5,02+1,25 нмоль/л). 3 период проявления полового возбуждения п ярко выраженных признаков течки его количество снижается до 0,86+0,27 иг/илС270+0,85 яколь/я), а с наступлением охоты и овуляция - до 0,36+0,04 - 0,31+0,07 яг/мл (1,13+0,13 - 0,97+0,22 нмоль/л).
Начало формирования желтого тела (стадия'торможения полоесго цикла) сопровождается увеличением содержания прогестерона до ' 0,58+0,10 нг/мл (1,82+0,31 нмоль/л).
В стадию уравновешивания содержанке прогестерона а крова продолжает увеличиваться я достигает максимальных величин (3,88+0,31 нг/мл или 12,18+0,97 нмоль/л) на 11-14 день полового цикда(Р< 0,001). К 15-17 дню количество прогестерона снижается до 2,77+0,38 нг/мл (8,6951,19 ншль/л) или на 28,6Й(Р< 0,05),кто свидетельствует о начале развития инволюционных процессов в желтой теле яичника.
Исходных величин концентрация, прогестерона достигает в пе -риод проявления всех феноменов стадии'возбуждения полсеого цикла.
Б динамике эстрадиола установлено два подъема уровня содержания. Первый пик отыечек па II-14.день полового цикла,когда его концентрация увеличивается с 17,8+2,00 пг/ил (65,3+7,34 пыоль/л) до 28,8+3,99 иг/ил (105,7+14,05 гшодь/л) или на 61,8 СР<0,05). Соотношение гсградиояа с прогестеронов составляет 1:134.
Второй (ыаксицадьныГОподьзы концентрации эстрадиола отыечен в начале формирования стадия возбуждения полового цккла(ЗВ,3+7,44 пгДш кли Ш0,б+27,31 П1£оль/л). В ото врзия его уровень в-оравна.-. am с последующая: днями стадии уравновешивания(18,1+3,11; гцз/лл) лозрастае-Е более чем а два раза, а соотношение с прогестеронов, опирается до 1:42.
В целен? проявления пологого возбуждения и охоты. крнценграг-шш эотрадиода достоверно уиеньпается до 20,9+3,50 - 13,8+4,08~ пг/hí- (76,7-^12,85 - 50,7+14,93 гшоль/л). После овуляции содеркашзо-ropuoaa yovanaE.-nsaesca па уровне 17,7+2,65 - 19,7+2,32 пг/ил; (65t0v9.73 - 72,3+6,52 ¡шогь/s).
СЬш2 кизккй уровень конненурацни тестостерона уставрвдор; га С ~7 день еологлро цикла (54,2+9,96 пгДа . или 187,5+34,46.. г.::здьД;, X II»24 диэ сто сэдеряанва возросло до 73,9+9,08: ep/u?¿
аяч; /а) :ия на 36,3 а к 15-17 дни - до 83¿0+. 13,62 яг/ил 2У7,2+47,Ь2 п4гогь/г)ЕЯК иг. 53,1
I". ко^енгу форкироггнкя стадии возбуждения копцзнтрашшктро^. sactsposa оавэкгась до 69,7+7,55 - 71,1+6,78 пг/ил (241,2+26,16246,0+30,38 пиоль/л), по в период охоты она скова увеличилась.на: 30,6 5', достигнув üßKCiii/yua (92,9+10,61 кг/ш клк 321,4+36,71 пкодь/д). Послп овуляции количество тестостерона вновь снизилось до 61,9+7,7 пгЛ'л (214,2+26,6' пиолъ/л).
Соотношение теотоС)«рока о проггхпероно« на 15-17 день пою-
вого никла составило 1:33, з во время охоты 1:4,
<5осоставляя дакаштку содержания в крова кзздого исследуемого ррр^опа, г.эчио заключать,что в регуляции поло го 3 фунхция у санок крупного рогатого скота заряду с эстроге!пз1я я нрдрестерояои активное участие принимают андрогенякз гориэза, а эндокринная подготовка к проявлению стадяк возбуядеппя полового цикла начинается еце в стадию уравновешивания ( а период достижения иаксииахыгоб активности яелтого тела),когда отмечается первая волна роста фолликулов я возрастает концентрация в кровя тестостерона п эстрадно-ла. Однако во вреня этого пика эстрогенов я андрогеноз проявления стадия возбуждения, ввиду высокой концентрации'з крови прогестерона ,не отмечается. Стимулированные к росту фолликулы з этих условиях подвергаются атрезаи.
Бресте с тем,кратковременное повышение содержания зотроген -пах горкозов, усиливая продукция простагландинов С естественных лвтеолизинов) каткой,вызывает снижение гормональной активности, а в последующей я регрессат) зелтого тела.
Со ояияенвеы концентрация з крова прогестерона откечается зторая волна роста фолликулов со значительный увеличением продукции андрогенных и эстрогезных гормонов я наблюдается формирована стйдпя возбуждения полового цикла. То- есть-, проявление феноменов полового цикла происходят только при определенных зстрогеио-про-гас^ероновых щ андрогено-прогестероновых соотнозенпях.
При этой• )!очно вксказать предположение, что эстрогены выполняют основную(пусковуа) роль в формировании стадии возбуждения, а андрогепн вызываю? проявление феноменов половой охота я озуляцяи.
3.2. Гормональная функция яичников коров в течение полового цикла при обцепна с быками :-пробнякамн
Выявлено, что динамика содержания*прогеотеррна в течение по -лового цикла в крова коров, общавшихся и необщавяихся о быкаын -
пробниками, имела общую закономерность. Его концентрация увеличилась с началом стадии.торможения и достигла нахсииуш ( ъ контроле 2,24+0,19 ur/ыл или 7,03+0,60 ныоль/л и в опыте 2,41+0,24 нг/мл вли 7,57+0,57 нцоль/л) в стадии уравновешивания (11-13 день поло.-, юго цикла)f К I6-X7 дню количество гораока снижалось соответственно до 1,23+0,39 (3,86+1,22. ¡шоль/л) к до 1,72+0,15 нг/ид (5,40+0,47 нколь/л), достигая исходных величин к моменту проявле- -ния охоты (0,35+0,07 - 0,42+0,04 нг/ил или 1,22+0,22 - 1,32+0,13 киоль/л).
У коров, общавшихся с быкакя-пробннкаци, содержание прогестерона в крови начиная с 6-7 дня цикла до проявления следующей стадии Бозбугкешш, было высз на 7,6-39,8 И только во вреыя пологого ЕОвбукгденяя и охотк зтк различи были менее выражены.
Концентрация эстргдколг. з крови контрольных животных колебалась 2 пределах 17,3+2,44 ~ 32,0+4,76 пг/ил (63,5+8,96 - 117,5+ ¿7,47 Огиочезо деь подъема в уровне содержания гормона -
1I-T: день цяклз (25,0+3,46 пг/ил или 95,4+12,70 пмоль/л) и в ;гячала формярогаши? стадии возбуедеикя (32,0+4,76 пг/ше иле 117,5^17.47 гшодьД).
Г хоров, обггжкхся о быкаш-пробниками, содержание эстрадио-:л, соата^ло 16,4+1 44 - 33,4+3,14 пvM (60,2+5,29 - 122,6+11,53 ¡:!:оль/«).Пря змц его в«*, на II-X3 декх. цикла был кзнее Еыргшен 1,20//+1,36 пт/ул или 76,04*.,99 го»ль/л).
К «оиенту проявления полоього возбуждения я охоты концентрация эстрадиода v кроаг ол г::ых гхьатних была ниже, чаи ? контрольных на 22,4-24,<1б57^,42 - 17,1+3,28 пг/мл пли 61,3+6,80 -62,8+12,04 пыольА против 21,5+2,56 - 22,5+3,19 т'/ил или 78,9+9,40 - 82,6+11,71 пмоль/л' . что свидетельствует о более рзиисц достижении <1упкц<;окплькой зрелое.растущих фолликулов в ничннках коров,обиагзихоя с бвками-пробцчками.
- - • - "V - II -
'Наибольшая концентрация тестостерона у контрольных животных отмечена в начале формирования стадии возбуждения подового цикла (102,6+7,31 пг/мл или 355,0+25,29 пмоль/л).Однако к периоду предполагаемой .охоты отмечено снижение'среднего уровня гормона в крови на 20,6$,в основном за счет понижения его содержания у двух хоров, у которых был зарегистрирован аковуляторвый половой цикл.
Концентрация тестостерона в крови коров,общавшихся с быками-пробниками на 6-7 день голового цикла была визе на 18,3^(62,6+ 5,90 яг/мл ила 216,6+20,41 амоль/л против 52,9+5,51 пг/мл или 183,0+19,06 нмоль/л), а л период охоты - па 37,1 £(116,8+8,99 пг/мл или 404,1+31,10 пмоль/л против 85,1+7,72 пг/мл ила 294,4+ 26,71 пмоль/л).Соотношение тестостерона и зстрадиоха в эти сроки Соответственно составило 3,8:1 и 7:1 при 2,9:1 я 4:1 у контрольных животных.
Таким образом,результаты впервые проведенных исследований по изучении влияния быков-пробнякоз яа стероидопродуцкруюцую функции половых зелез свидетельствуют о стимулирующем ях влиянии на генеративную я эндокринную функции яичников' у короз.Вараяается это в активизации созревания фолликулов я поенззппя функциональной ак-тлвпостн формирующегося желтого тела. Это является необходимым условием для формирования и проявления полноценного ¡пологого ■цикла,а значит и высокой опяодотворяеноста гиготаых,
3,3. Особенности стероцдогесеза у коров прз гипофункции яичников
Установлено, что для.гипофункции яичппков,сопровождавшейся длительной анафродязией,в первую очередь, характерным является чпзкий уровень кояцзнграцип з хровз прогестерона,который в среднего по всем исследованиям составил 0,28+0,02 нг/мл ( 0,88+0,05
:;го.п:>/л) .Зго содержание но сравнению со.з'дорогтги зиеотнкуи в тл'.'.од проявления огозпга яозбуадевия пологого цикла было ниж; : З/;--.7 разз С? < 0,С01).
* r¿ =
Продукция эстрогенны* Ро£й6н§§ у £bpós с гипофункцией яичников сохраняется на уровне йормалышге полового цикла,отмеченного в период стадий тормокёнйя и уравновешиваниями в среднем составив 25,0+2,05 пг/мл(91,8+7,53 пмоль/л)iОднако на протявении всего nej ода исследований не было отызчего пик&а эстрадиола,характерного г начала формирования стадии возбуждения полового ,цикла у здоровых EiíEOTübíx,когда его концентрация возрастала в I¿6 разаСР < 0,001), Концентрация тестостерона в крови коров о гипофункцией яичнг ков составила 57,1+4,47 пг/мл(197,б+15,47 пмоль/л) к была близка к канызвьЕегу зпачскиз данного стероида у нормально цшслирувцих животных в стадия торможения полового цикла(58,0+2,48 пг/мл или 200,7+8,53 пмоль/л). В оравкеиии о периодом формирования стадии возбуждения полового цикла она была ннсз на 29,4 % (Р< 0,001).
Мейгориональные соотношения прогестерона о эстрадколом н тес тостероаон у здоровах квотных б стадию возбуждения полового цккг со ставила 31:1г2,тогда гак у коров о гипофункцией яичников- 11:1: 7 Еквзтних о недостаточной фуЬкцйоШШ! активностью жеатог •*ел£,ко*орая йаа sapsrncspsípoBüHa у fiá&bfiüíBtnc коров,кон -
цек-x/j'i.a;:я прогестерона в периферической крбвн Ь díafcffib во&бу8»е&в полового иякгз была секс здоровых сявотяак Irá -0,40+0,05 нг/ил), в мриогемкя - ва йг/мй)
и v суадй» уравповзшквсзлк - В 2,1 раза (I,25*0»té нг/ш;).Р* O^ÓS Выйвдоко, «о Зорукргаяке стадии возбуждения полового цйхла кивопдьт: г. недостаточной фугкцле* келтого тела происходит при бол низком ссдсряаш'.а <>с г^ад иол s( 28,3+1,95 пг/мл или 103,9+7,16 пмоль к более высоком {оне концентрация в крови тестостерона(105,7+5^й
пг/мл или 365,7_j9f24 пиаль/л).Однако в период полового, возбуждения и охоты,когда содержание тестостерона у здоровых животных возрастает на 21,7 Ц, у коров с недостаточной функцией желтого тела.наоборот, оно сминается на 17,6
Исходя из получениях дзвных я обцей схеш отероадогеаеза в яичниках,коапо захлочить, что гяпофунхдпональвое as соогояпяс у зоров обусловливается не пряициа янаодюпвоннкай азыенеаияия, a нарусеЕяен регуляция, на уровзэ гнпоталалэ-гяиофиЭараоЙ оистеца.То есть.снпгезкз функциональной активности половых 2элйэ а наругзняз йоАовой циклично ста'у виютанх по отнопешш к гявотагауа-гапофпвар« . пни сдвигам пиеет вторичное проноховденнз. В этой.связи Для вэссуа-яовленая овариального цикла и повшения функциональной активности ' цорфодогпчзсхах структур' яичников заряду с улучгевяеи усгогзЗ хор:г-хеакя, со дергания я эксплуатация гявотних вполне уиеомой sioss? быть фнзяогогпчесгая гакзсптеяьная тзрапгл.
За-». Стероядопродуцврув^ая фуихцпя янчнзйсз у
коров яря воздойогеяп горгэяагхзнх зрззарагев
3,4.1. Динаихка содержания ..половых отег-оядов а хгавя_уОАЗ-!у с течение полового цикла,ив дурю»вакиргр гояадогроппяоа ,3?;дaо гояадопрэпиза CZS порогам о гяпофунхцяей ялчзпхов обеспечило гтр-яяявшм о«*дпа возбуядепия полового щпяз у всех аягатяых в уз^п;:* ípüS дней»При это« у 62,55 был зарегистрирован полноцеяявД з.)Лот-:«3 ¡¡ats,íi $ 37,52 аиовулягорянЗ.
Вря полноаевяом полоэоа meso концентрация прогоotepona з хрз-М йороз па оедьша день увеличилась в 12 раэСо 0,18+0,03 пг/ял ва йрэмя охота до 2,11+0,69 кг/ил), а х II—12 дяп достигла uascnuyita (3,18+0,52 nr/ii3 ахи 9,99+1,63 яшдь/л). К 15-17 дна его содеру.акяа снизилось до 2,13+0,70 яг/«л или на 33?, а к началу проявления нового полового цикла до 1,10»0,34. иг/ил (3,'¡5+1,07 низ ль/л), что свидетельствует о начале ii заверзеняг: инволюционных процессов в тел то а ícáe яичниха.хак и при спонтанно, протекаете« половэц цикле.
Количество эотрддпел'а во вргыя течки возросло на 5,^(25, *»« 1,62 nr/мл), к иоиепту проявления охоты уиеяьенлозь до 16,2+3,00 пг/мл или на 20,4%,а г наступление!! овуляцнк-до13,Г;2,78 пг/ил ила '»¡а 92, '1% (Р < О,COI). К седьмое дно полового. цихла его содертг.г^й
вновь увеличилось до 23,7+7,48 пг/ил(87,0+27,45 пмоль/л),а к П-12 дню - до 47,4+12,28 пг/мл (174,"0+45,07 пмоль/л) или в 3-4 раза (Р<0,05), что свидетельствует о закономерной волне роста фолликулов в яичниках.Затем, в связи с атрезией данных фолликулов,уровень гормона в крови к 16-17'дно снизился до 36,4^,33 пг/мл или на 23,2£.Вторая волна роста фолликулов обеспечила следующий закономерный и максимальный подъем концентрации эстрадиола до 57,5+15,5 пг/мл (211,0+57,03 пмоль/л) и проявление нового пологого цикла.
Уровень концентрации тестостерона после введения препарата снизился с 88,9+2,83 пг/мл до 51,5+7,28 пг/мл или на 42£(Р< 0,001). Можно предположить,что это связано с активизацией процессов ароматизации андрогенов и переходом их в эотрогенные гормоны.В последующем в динамике концентрация тестостерона выявляется та ке закономерность, что и при спонтанно протекающем половом цикле.
Следовательно,в яичниках аивотных после введения экзогенного . гокадотропного препарата, как и при спонтанном половом цикле,последовательно протекают все физиологические процессы генеративной я гормональной функций.
7 животных с ановуляторным половым циклон было выявлено изначально .низкое содержание прогестерока(0,36+0,07 нг/нл) я тестосте-гона(б1,3+4,17 пг/мл), что,свидетельствует'о гипопластнческои сос-злили соединительнотканных структур половых келез.Поэтому,несмотря :;а г'ост фолликулов в яичниках после введения гонадотропина СЗК, уюлпчзние колцеитрацяи в крови эстрадкола(48,6+8,29'вг/ш)н яро-г;;-£н.;з возбуждения'.полобого цикла ' овуляции не каблюда -
о'ля.Только через три педели .возобновляемая функциональная актив? кчк;:ке,^оссигао? определенного физиологического уровня, г с- ог-оы, ?е«г.псвгкческая оф^ективаость гокадо^ропяых 1 ; :.т а;;!1 о? б1:о;:0Гичзск01- актикоог!:,
организма кивотннх.
3.4.2. Влияние гонадотропин-рилизинг-гормоаа(сут>£агона) на гормональную функцию яичников коров.Введение сурфагона коровам с
гипофункцией янчнякоз не обеспечило проявление непосредственного, полового цикла ни у одного животного. В первые 24 часа хонцзятрааяя прогестерона оставалась на изначальном урознеСО,49+0,07 -0,46+0,09 кг/мл), а к 48 часа:,;, как я после введения гонадотропипа СПС,сяизи- • лась до 0,37+0,07 нг/мл зли па 24,5 В последующем количество гормонов в крови увеличивалось и к 12 дню достигало 1,22+0,17 нг/мл (3,83+0,53 нмоль/л),Р< 0,001. 1С 18 дно концентрация прогестерона снизилась до 0,65+0,27 нг/мл(2,04+0,85 нмоль/л),
Установлено,что препарат резко активизирует акдрогсно-зстрогся-носиЕтззируздуэ функция яичгакоз угз з первые 12 часов после введе-вяя.Так,концентрация тестостерона к этому времена увеличилась с 67,3+7,76 пгД'л до 97,8+10,34 пг/ил н.~а па 45,3?(Р< 0,05), а эстда-днола с 24,9+2,95 пг/нл до 49,9+10,96 пг/ил пли з два рлза(?< 0,05). К 24 часам концентрация зотрадязаа достигала 71,6+5,44 пгД'л (262,8+19,9 пмоль/л) я првБкеала уроюнь содержания кормзльгэ зяплл-руэ^пг. гявотякх з два раза. Одяако количество тестостерона этому времз2П снизилось до 64,31.8,42 пг/ылС 222,5+29,13 пмоль/лЬля кз 3*,Г*;, В последующие 24 паса,наоборот,концентрация тсстозгерэ^ вногг покоилась до 87,5+5,?0 Ег/«л(ЗЭ2,е+20,41 к№н/л),а зотрадиола снизилась до 57,2+4,69 пг/!5л( 209,9+17,2 пиоль/л) .При ото:! ни мяанчсв -кого пряглезкя отадн-л гээбугаеяая, як овуляции у глвотяик ги <5«м ОТ!!ОЧеЯО. . ...
Ногно аредпологлть,ч?о г-язогэякыа гонадотропнн-гнлизипг-гор.-.-он вызывает мощный выброо латак!шянруюс;его Гормона,который резко активизирует синтез аггдрогенкых гормонов л их метаболизм - эсгрогзт/ -неподготовленных к росту и созреванию фолликулах. Более того г ;■.•:-)-физ,по- видимому,на определенное время приобретает ре^р'дг.тгг-эегь к стимулирувзену действии резко увелкчивзоцеЕоя конг*п?рацкл ->зггз~
диола на повторное выделение ЛГ,в связи о чей рост фолликулов в яи никах не заверкается их созреванием и овуляцией.Как свидетельству ет динамика содержания прогестерона,активизированные к росту фол ликулы подвергаются облитерационноЕ атрезии.Поэтоыу через шесть суток после введения сурфагона концентрация тестостерона снизилас до 63,0+9,39 пг/щ (218,0+32,48 пмодь/л), а эстрадиола до 42,6+ 2,90 пг/нл (156,3+10,6 пиоль/л).
На 12 сутки количество эстрадиола в кроет коров составило 33,2+4,00 пг/ыл (121,8+14,68 пыоль/л), а тестостерона возрасло дс 74,7+8,06 пг/мл(258,5+27,89 пиоль/л).К 18 дкв уровень содержания тестостерона достиг 84,1+9,18 пг/ил(291,0+31,76 пколь/л), а эс?р.' диола 40,0^,20 пг/мл(146,8+30,10 пиоль/л),что свидетельству?? активизации роста и созревании фолликулов в яичниках. 3|9 я д$§§. печило в дальнейвеи проявление через 18-22 суток у 87,5 % них индуцированного полового цикла.
Таким образои,введение гонадотропнн^^лизинг»горг®1& яоровз! ка фоне гипофункции яичников с целью восстановления половой цикл: ности с овуляцией фолликула не обеспечивает непосредственного те; певтического аффекта'. Л ишь через один цикл, с восотановлениец энд генных нейрогуиоральиых ыеханизыозз регуляции половых процессов, животных отмечается проявлевие полноценного полового цикла;
3.4.3. Влияние гокалотропина СЖ к гонадотропия-рилпзинг-гормона на птдгеотероносинтезируащую йункцито циклического желтог тела. Установлено, что в жаркий летний сезон' года после овуляция
фолликула в яичнике формируется малоактивное в горшнальноц отн§
пении желтое тело.В период его расцвета концентрация прогестерог
у коров контрольной группы составила 1,42+0,18 ыг/ыл(4,46+0,57
ниол'ь/л) .
При введении сурфагона количество прогестерона в крови на день полового цикла превысило уровень содержания его у контроль! животных на 23,9 %, а при введении гокадотропина - на 53,5
Следовательно,гонадотропные препараты,введенные з стадии в
букдения полового яикла,способстзув? фориярогаяд:! • г-адчыде "иг-. активного в гормональной отнопеяин s-елтого тала,Пзэтоцу гз -тройные препараты иогут быть нспоаьзозааа для зро*зззэтгхг "лт-л-тяческого бесплодия коров, вызываемого гзсзгэЗ о~р—-гдеЛ турой и проявлявшегося низкой опгодотгоряеюсгкз -гзтагшх.
3.5. Применение гонадогропяна СТК :: сургсгсяа- дгз -гсзсГСЕОз-■ гения.плодовктосгз и повнзеяяя оягэдогзгрлз^с^тз хзгз-г
3.5.1. Терапевтическая эффективность гозгдэтгэягдз. пв-рйдофушсцщ; яичников. В течение 81 дня опига ггт^з
(предоставление.акгявяого «Ьшгона.обцзяпз.. с.
пеняя- кормления) половая, цикличность досстаяззздазэ у
лрдртЕорезиз после оое«ененкя наступило у 70,-d sstarsax. = rpy^z i
аив05ных,находяцга:ся в тех ~з условиях и сбработа-ннх
но и СПС,за этот период количество загэтзых, з -згззу -zz? --
чклось на 20,9%,оплодотворенных на 23,5;', г> лнд?::;
зялся на 0,15.Период о? начала опыта до оп.:здо*::зрз:гг.- j zzx'.z^z
:сороз(16,8+1-78 днеЮуиенкг.сся боле-з,-nn з ргза гз spar:-;-::
кон*ролышта яизотнигаСЗЭ, 5+3,94- дпзй).В срздп?:! здгз
по опытной группа было предо тарзгзпз 25,7 днзЗ ¿ззплк?<
Экономическая о^|.ектнгяос;ь прякзязк:и гзкздэггзгтгк СП? т; опытной группе оостагяла 2133,55 руб.ТТр:: ста.-пзсг:: дога ГТГ.:
2,8 руб, окупаемость иеропряятиЗ па од::з рубль затра? 15,7 "•->, а ,нз;.одио hhb0vh03 руб.
3;5.2. Эффективность использования гояадзтгз.тггз СТ71 ■ гона для повыдсння оилоао^поряег.'ости коров. Га г-рзм.*г сл^гз г гг.г-
рольноЗ группе(инъекция перед оссиепсниои {кзрастгорд} сглзд?тчтение наступило у 53,3? яивотных г«рз индексе осзузяспяд 1,с1.'.!чз:2-ция сур|агона споообстЕОсала яовкгенко оагодстгсг^-^з-гт д-? или на 9,15» и пнякенив индекса осеменения до гс-?гд: -
трипкна СГК увеличило оплодотворяемоегь короз до 75,6? гглл в срагиеяня о кои:ролей, а тгдекс осскзяеяяя сяггзгтлзя дэ 1,25.
ПримеЕзняе сурфагока коровам в дееь осеменения сократило лр< должктельность бесплодия у оплодотворенных йнвотпых на дня, ; гонадотропяна СЖ на Г6,4 дня.
Экономическая сффектавность при применении гонадотропяна СИ по группе составила 1342 руб.Окупаемость мероприятий на I руб.за1 рат - 16,3 руб., на одно животное - 30^5 руб. При использовании сур$агона эконоийческкЗ эффект по группе составил 396,6 руб.,оку паемость ка I руб. - 18 руб.,на одно йивоткое - 9 руб.
ВЫВОДЫ
1. В регуляции полового цикла и его Феноменов у коров наряд с эстрогенами к прогестероном активное участке принимает скдроге ные гормоны.Формирование стадии возбувдення происходят при опред ленном эстрадколо-тестостероно-прогестероиовом соотноиеяия.
2. Наивысшая концентрация прогестерона в плазме периферкчес кой крови (3,88+0,31 кг/мл или 12,18+0,97 нмзль/л) установлена в 11-14 день полового цикла. СамыЗ низкий его уровень (0,31+0,07 н яли 0,97+0,2?. емоль/л) выявляется в конце стадия возбуждения под вого цикла.
3. В дцнамгке содержания острадкоза в крови зарегистрировав два достоверных подъема: па 11-14- день (23,8+3,99 пг/ма 5гдн 105,7+14,65 пмоль/л) н в канале формирования стадии возбуждения полового цикла(38,3+7,44 пг/мл или 140,6+27,31 пмоль/л).Минимал! пая концентрация эстрадиола (13,8+4,03 пг/мл ил г. 50,7+14,9'6 гшо; определяется в период половой охоты.
4. Высокий уровень концентрации тестостерона выявляется в конце стадия уравновешивания полового цикла (83,0+13,82 пг/мл и. 287,2+47,82 пмоль/л) и во время проявления половой охоты (92,9+10,61 пг/мл клй 321,4+36,71 пмоль/л). Минимальное его зна> ние(54,2+9,96 пг/мл иля 187,5+34,46 пмоль/л) установлено в нача, стадии уравновешивания.
5. Эндокринная подготовка к проявлении очередной стадии возбуждения полового цикла начинается з период-достижения максимальной актишостн гелгого тела путем активизации роста я развития фолликулов, увеличения концентрации в грозя андрогенов и эстрогенов о последующи!.! снижением гормональной активности аелтого тела
я повторной активизацией роста'п созревания фолликулов в яичниках. Соотношение прогестерона о тестостерсвол ш эстрадиолои на 11-14 день полового цикла составило 135:2,5:1л, а при формирования стадия возбуздения 31:2:1." •
6. Необходимый условием формирования я проявления полноценного полового пекла является обценяе короз о бккаыа-нробпЕкаия, прл которой ахтигязирувтся процесса созревания я овуляция фолликулов, пэ-сцззется функциональная активность желтого тела. Об этой свидетельствует увеличение з крови в период полового возбуждения г. охоты концентрации тестостерона на 16,8-37свитаяяе количества затра-даода на 22,4-24 % и погыаеннэ з с?адю? уравносзапванпя сэдартаяад прогестерона на 7,6-39,3
7. При функциональной педосгаточности гедтого тела-концентрация прогестерона з крова норов в стадии уравновешивания полоього цикла зарегистрирована на урошз 1,25+0,16 пг/1£л(3,93+0,50 ягояь/л). Формирование стадия возбуждения у таких животных происходило пр:? более низкой содержания прогестерона (0,66+0,13 пг/нл)-, эстрадиола (23,3+1,95 пг/ыл) а покгаенкой концентрация тестостерона (105,7ч ■5,56 пг/цд).Соотношение прогестерона о тестостерона« и эстрадиодои составило 30:3, 7:1.
8. Для гипофункции яйчнеко'з,сопровождающейся анафрэдизяей, характерны низкая концентрация прогестерона (0,28+0,02 яг/ил или 0,88+0,06 г.иоль/л), тестостерона (57,1+4,47 пгДи идя 197,6+15,'" пиоль/л) и нэриальпос содержание эстрадиола (25,0+2,05 пг/^ ',','Я 91,9+7,53 пыоль/л).Соотношение прогестерона о тестостероном и зстрадиолои 11:2:1.
9. Гор^ггосиЕтезЕруюг^я с генеративная реакция япчзиков г
»
гЕеденге r-FsoreEHKX гсяадотропных препаратов зависит от потев rzaxisa: •хогаогжостоЕ соедвнит&гьвогнанных структур. Нря'сохрг see пх гориоЕагьЁэй ÇyEsene отмечается проявление полноценной гогогс а с горцогалькаии изменениями,соответствующими oaoi so spccstac-sjiy циклу» При глубокой.гипоплазии соединительно® z'dx структур агтиЕкзироБаннЕЗ к росту фолликулы подвергаются а pezi:i :: у пзотакх регистрируется ановуляторный половой цикл.
1С. Ввгдегге короваа ^ "гипофункцией яичников гопадотропиг рслгакет-гормона резко активизирует синтез и инхрецию тестосте рои a î. ' гстрадсзла фоллккулаюх, которые в последующем подвергаг oàiKïspacuoEsoîi атрезии. Проявление полноценного полового цик oims:4£.2îcs чзреь 18-22 суток пра восстановлении эндогенных мех ZZSKÙ2 регулящгк половах процессов.
П. Введение гонадотрошша СЕК коровам в день осеменения, ivrreir JysicrzcEsaEyD активîiocsb формирующего келтого тела, о : :-i-ггел^сггует угелкчеЕке концентрации прогестерона в крон: S3,5 -Z, Ipn ncxsHis гсаадотроекн~ридизинг-гормона концентраци è.::it-онь преькегда уровакь контрольных еивотннх на 23,9
12. CporgsezES гонадотропина СЕК в дозе 7 и.е./кг коровам г;;:;.*? ягчзпгов па фоне нормализации О'б^нЬ ¥а'цесУв и- фи ioravecEsz реагций оргаквама обеспечило восста'новленйе плодови
у 93,4 £ героь при 70,4 £ в контроле. Продолжительность бес дня у гагдого г.игорного сократилась на 28,7 дней, индекс о семе siira 0,15. Окупаемость мероприятий на I рубль затрат состави, 15,7 рублей и на одно ЕИЕОтвое 44 рубля.
13. ГснЕдотропин CSC, введенный коровам в дозе 4,"5 ц.'е./к: девь осеменения,обеспечил повыаэа'ие оплодотворяемостк на 2'7,ЗЙ сигаете продолсительЕости бесплод!ш на 16,4 дня при окупаемое1 керогркггЕ 16,3 рубле на рубль затрат я 30,5 рублей ея одно s; сое.
- 21 - >
При назначении в день осеменения 10 ькг сурфагона о п л о до -творяемость коров повысилась на 9,1 продолаагельиоеть бесплодия снизилась на дня, окупаемость мероприятий на рубль затрэ иа одно апвотной составила соответственно 18 и 9 рублей.
•я ? V.
практические прадозшя
I» Для раднонмыунояогического контроля функционального состояния половых яелез у коров предлагаются следующие нормативы пока -зателей половах стероидов в ялазые крови:
СОСТОЯНИЕ ГОЛОВОЙ ФУНКЦИИ
Прогестзрон,| Эстрадно л, ¡Тестостерон, . яг/мл, . I яг/ыл I пгД:л
нколь/л
ямоль/д I яяоль/л
I. Нормальное течение полового цикла:
-стадия урагновепивакия
1,88-3.58п .18,9-24,7 -62,1-79,1 5,90-10,93 69,4-90,7 214,9-273,7
начало стадии возбуядзяпя
0.79-1.41 2,48-4,43
29,8-40,6 63.9-
109,4-149,0 221,1-2:0,:
- стадия торкоггнйя
0.67-1,27 16,7-19,5_ 53,0-63,-' 2,73-4,00 61,3-71,6 . 183,4-21?,О
2. Недостаточная функция кедтого тела:
- стадия уравновешивания
0.68-1»б2 17,5-27,3 42,9-02,1
2,76-5,09 54,2-100,2 148.4-2Г 4,1
начало стадии возбуждения
0,30-1,42 0,94-4,45
19.9-36.7 ' 81,8-129,6 73,0-134,7 283,0-448.4
- стадия ториотения
С.57-1Д5
12,0-24,0
46,3-75,5
1,79-3,61 44,0-88,0 160,2-254,'
3. Гипофункция яичников „30,?-29,^
47,2-67,0
0,75-1,СО 75,7-106,3 153,3-231,8
-'222. Для обеспечения высокой функциональной активности поло келез, проявление полноценного полового цикла к высокой оплодо творяемости коров необходит ежедневное .их общение о быками-пр нихами.
3. Для восстановления плодовитости коров при гипофункции киков гонадо тропике препараты в физиологических дозах следует менять на фоне предварительной нормализации обмена веществ физиологических реакций организма с использованием естественны факторов.
4. Для повывения функциональной активности желтого тела , оплодотЕоряемоти коров и сокращения продолжительности бссплоди обусловливаемого климатическими факторами С высокой температур вводить парентерально в день осеменения гонадотропин СЯК в до А,5-5,0 м.е./кг.
Основные положения диссертации опубликованы в следующих работах:
1. Нежданов А.Г.,Соловьев H.A. Гормональная функция яичнс в течение полового ,цикла//Ветер;шаряя.-198б-тй4- С.56-58.
2. Нежданов А.Г.,Яободик A.C..Власов С.А.,Соловьев H.A. Гормональный профиль коров и телок при различном состоянии ре родуктквной функции // Проблемы диагностики,.терапии и профила! незаразных болезней с.-х. животных: Тез.докл.Всес.конф.- Bopoi: 1986.-4.2.-С.39-40.
3. Соловьев H.A. Эффективность гонадотропина сыворотки н был кобыл при гипофункции яичников у коров // Сборн.науч.тр./i ской с.-х. ин-т.-Перепаковка,1987. - С.63-66.
4. Шипилов В.С.,Нежданов А.Г..Соловьев H.A.Гормональная Функция яичников коров при общении о быками-пробниками // Док ВАСХШЛ.-1987. -Д4. -С.37-39.
5. Соловьев H.A. Применение гонадотропина сыворотки яеребых кобыл для регуляция половой функции коров // Научные основы профилактики и лечения патология воспроизводительной функции сельскохозяйственных животных : Тез.докл.Всео.конф.- Воронеж, i960. - C.IIO-III.
6. Нежданов А.Г^Соловьев H.A. Половые стероида в кроет при гипофункции яячников //Ветеринария,- 1988.-"5. - С.41-43.
7. Соловьев H.A. Применение гонадотропина СЖ я гонадотропга-рилизипг-гормона для восстановления плодовитости я повышения опло-
дотворяемости коров // йнфорцлисток/РостовскпЯ ЦПТН.-1988. -;'57'г. .
, /
' А. ! . ' л С; '
Зпкоз Г 298 Тигол 120 -лкз.
пх G52J7