Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Фармакологическое действие и применение динофена при доращивании и откорме бычков

РГБ ОД

3 - МАЙ г^ На правах рукописи

СТАКАНОВ Валентин Яковлевич

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ ДЙН05ЕНА ПШ ДОРМРАШН И ОТКОРМЕ БЫЧКОВ

16.00.04 - ветеринарная фармакология с токсикологией

АВТОРЕФЕРАТ

диссергаци на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Воронвж-1999

Работа выполнена в отделе патологии и фармакологии Всвроссий ского НИВЙ патологии,фармакологии и терапии , Российской академии сельскохозяйственных наук.

НАУЧНЫЕ РУКОВОДИТЕЛИ: Заслуженный деятель науки РФ, доктор

биологических наук, профессор В.С.БУЗЛАНА

(ЖЦШЬШЕ ОППОНЕНТЫ: I. Доктор ветеринарных наук, профессор

Т.Н. РАКОВА

2. Кандидат биологических наук, старший научный сотрудник В.Н.ДОЛГОШДОВ

ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ - Всероссийский Государственный научно-исслед

на заседании диссертационного совета Д 020.65.02 во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте: патологии,фармако логии и терапии РАСХН (394087.г.Воронеж, .ул.Ломоносова,114-6).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Кандидат вегеринарных наук А.М.САМОТИН

ватевьский институт контроля, стандартизаци и сертификации ветеринарных препаратов Мин сельхозпрода РФ

часов

Автореферат разослан

1999 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

и.Н.Аргунов

о

/1251 £инлере+с}0

I. ОВДАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Эффективность откормочного скотовод-гва наряду с современной технологией предусматривает использование элноценных кормов, регуляторов роста и средств защиты здоровья ивотных. С этой целью особенно перспективно использование антиок-идантов. Эти вещества, независимо от происхождения (природные или интетические), структуры, различия механизмов биологической актив-ости, обладают комплексом полезных свойств (О.Н.Воскресенский,1986; .Б.Бурлакова, 1997).

Достаточно широким кругом исследований установлено, что анти -ксиданты незаменимы в качестве консервантов премиксов, белково -кнерально-витаминных концентратов, заменителей цельного молока, равяной муки, жиров кормовых, мясо-костной муки. Они эффективны сля повышения сохранности в кормах витаминов А, Д, Е (А.Р.Вальдман i др., 1977; К.М.Солнцев и pp., 1980; В.П.Куренева и до., 1986; I.М.Иванов и др.,1998; O.ïïeinroich , 1992). Антиоксиданты с успехи используют для предотвращения прогоркаяия кормовых жиров, кото-)ое ведет к снижению их качества и к токсичности (Л.М.Двинская и р. 1977; А.М.Иванов и др. 1998). Наконец, они проявляют себя, как зысокоактивные стресс-корректоры, средства терапии и профилактики заболеваний (Л.М.Двинская и до., 1979; Е.Я.Каплан, 1992; К.М.Дша-зв и до., 1995; С.М.Николаев и др., 1977; В.А.Полякова и до., 1998).

Такое действие антиоксидантов в животном организме обусловлено способностысих снижать интенсивность свободнорадикальных процессов, которые характерны для начальных стадий общего синдрома адаптации -стресса и патологических состояний (Ф.З.Меерсон, 1979, 1980; Ю.Н.Кожевников, 1985; Н.П.Мец{ряков, 1987; Т.Е.Рогачева, 1988; В.А.Барабой, 199I; М.И.Рецкий, 1997; Р.П.Евстигнеева, 1998).

В целом, вполне обоснованно можно утвфждать,- что антиоксиданты являются новым поколением высокоэффективных регуляторов процессов жизнедеятельности и средств защиты здоровья животных. Между тем, практика сельскохозяйственного животноводства показывает, что ассортимент используемых антиоксидантов невелик, а имеющиеся препараты дефицитны и не обеспечивают как кормопр о из водящий комплекс, та.к и повседневную практику профилактики и печения заболеваний.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью работы явилось фармакологическое изучение и разработка показаний к применению при дора-щивании и откорме молодняка крупного рогатого скота нового антиокси-

данта - динофена.

Для достижения поставленной цели решали следующие задачи:

- изучение острой и хронической токсичности динофена, его мутагенного, тератогенного, змбриотоксического, кожно-раздражавде-го действия;

- изучение резорбтивного действия динофена и механизма антиок-сидзнтной активности;

- оценка экологической безопасности динофена;

- оценка эффективности применения динофена в откормочном скотом водстве.

1.3. Научная новизна. Фармакологическими исследованиями впервые установлено, что новый грепара-т - динофен - является высокоэффе тивным антиоксидантом с низкой токсичностью, механизм биологическое действия которого обусловлен нормализацией процессов перекисного окисления липидов и сохранением достаточности естественной антиок-сидантной защиты организма. Впервые экспериментальным путем коыплек но оценена экологическая безопасность нового ветеринарного фармакологического препарата - динофена.

1.4. Практическая значимость работы. Разработаны показания к применению динофена при доращивании и откорме молодняка крупного рогатого скота. Полученные результаты вошли в нормативно-техническу документацию, одобренную Ученым советом ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии, и направленную на рассмотрение Ветфармбиосовета Департамента ветеринарии Минсельхозпрода РФ.

1.5. Апробация. Материалы диссертации доложены, обсуждены и одобрены на:

Отчетных сессиях БШВИ патологии, фармакологии и терапии 1996, 1997, 1998 г.г.

- Международном координационном совещании "Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животно'*.- Воронеж, 1997.

- Годовых отчетах ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии, на Бюро отделения ветеринарной медицины Российской академии сельскохозяйственных наук, 1997, 1998 г.г.

1.6. Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 научных работы.

1.7. Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 152 страницах машинописи, содержит 22 таблицы, 14 рисунков. Она состоит из введения, обзора литературы, матер нала и методов исследо ваний, результатов собственных исследований, заключения, выводов,

предложений. Список литераторы содержит 330 источников, из них 50 иностранных.

1.8. Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- 0 низкой токсичности динофена;

- Об антиоксидантном действии динофена и его механизме;

- Об экологической безопасности грименения динофена;

- Об эффективности использования динофена в откормочном скотоводстве.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования выполнены в I994-1998 годах в соответствии с планами научных работ Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института патологии, фармакологии и тфапии Российской академии сельскохозяйственных наук. Они являются частью комплексных разработок института по НТО: 0.СХ.94, задание 09 на 1990-1995 г.г.: "Разработать и внедрить оптимальную систему ветфинар-ньк мероприятий групповой профилактикитранспортного и технологического стресса в промышленных хозяйствах с применением адаптогенных и антимикробных препаратов" (Тр гос.рег. 81088908); задания 04 фундаментальных и приоритетных прикладных исследований РАСХН на 1996-2000 г.г.: "Разработать общую теорию патологии сельскохозяйственных, промысловых и диких млекопитающих, птиц, рыб, Пчёл и на её основе создать экологически чистую систему их ветфинарной защиты" .

Экспериментальные и биохимические исследования выполнены в отделах патологии и фармакологии, физико-химических методов исследований; микробиологии, вирусологии и иммунологии института.

%оизводетвенные испытания проведены на предприятиях "Маяк" Лискинского района Воронежской и "Мценское" Мценского района Орловской областей.

Фармакологическому изучению и про иа дарственным испытаниям подвергнут 2,6-дитретбутил-4-нонилфеноя (динофен), изготовленный ОАО "Воронежсинтезкаучук" (ТУ 3840367-87). В качестве аналога использован бутил-гидрокситояуол (ионол) фирмы "Байер".

Токсичность динофена изучена на 200 беспородных белых мышах обоих полов со средней массой тела 20,Otó,0 г? 144 беспородных белых крысах обоих полов с массой тела 150-250 г; 24 кроликах породы шиншилла обоих полов со средней массой тела 2,0+0,2 нг.

фи определении острой токсичности динофен вводили внутрь с узмощыо зонда, а хронической - в смеси с кормом. Расчеты ВДТ(~»

ЛДзд, ЛЯ34, коэффициента кумуляции, мутагенное, эмбриотропное, раз до ахавшее действие динофена изучали по принятым в токсикологу,1/ методам (Л Беленький, 1963; О.Н.Елизарова, 1971; О.Н.Елизарова и др., 1974; А.П.Шицкова и др., 1977; Н.Ф.Измеров и др., 1977; И.Ы.Трахтенбфг к др., 1991).

Лабораторных животных содержали в виварии института в соответствии с принятыми нормами.

Резорбтивное действие динофена изучено на 63 белых крысах и 81 откормочном быке.

Для характеристики общего состояния животных общепринятыми методами (В.Г.ЦредтеченскиВ, 1964; И.П.Кондрахин и др., 1983) в крови определяли количество эритроцитов, млн/мкя; гемоглобина, г%; СОЭ, мм/ч; лейкоцитов, тыс/мкл; тромбоцитов, тыс/мкя.

Оценку влияния динофена на углеводный обмен проводили по показателям крови: гликоген, г/л (Л.С.Мильман идо., 1974); глюкоза, мМ/я (В.В.Меньшиков, 1971); дактат, м'.'/я (М.И.Прохорова и до., 1965); пируват, мМ/л (П.М.Бабаскин, 1976); активность гяакозо-6--фосфатдегидрогеназы, мкМ/л.мин (П.В.Бульфсон и до.,1979) и лактат дегидрогеназы, мкМ/мин.мг белка (Я.Н.Пьрков и до., 1970),

Влияние динофена на белковый обмен изучали по содержанию в сыворотке крови общего белка рефрактомечрически (В.Б.Филиппович и др., 1975), и активности АСАТ, АлАТ, мМДч.к.) (В.В.Меньшиков,1973) Изменения в обмене липидов под действием динофена оценивали пс содержанию в сыворотке крови: общих липидов, г/л (Л.В.Орлова,1980) НЭЖК, мМ/я (М.Ю.Прохоров и др., 1977); триглицеридов, мМ/л (Н.Б.Одашко и др., 1979); ^-липопротецдов, мг% (М.Ледвина, 1960); холестерина, мМ/и (Н.П.Одушко идо., 1979).

Состояние цроцессов пфекисного окисления липидов и антиокси-дантной защиты у животных оценивали по показателям крови: диеновьи конъюгаты, ыМ/л (И.Д.Стальная, 1977); кетодиены, мМ/л (И.Д.Стальная и -р., 1977; Н.К.Шишкина и ДО., 1978); основания Шиффа,ед/мл ( \7.Е.В1б1ак а1. , 1973; et а1. , 1974); глута-

тион, мИ/п < I.Бей 1ак: ег а1., 1968); глутатионпероксидаза, мМ/я.мин.(Г.О.Кругликова и др., 1976; В.О.НаЪеиав et а1., 1974) ; глутатионредуктаза, мМ/л.мин. (Г.0.Крутикова идо., 1976); супер оксирдисмутаза, ед./мг гемоглобина (В.Ц.Чумаков и др.,1977, 1979) церуяоплазмин (фер^ксидаза), мМ/л.мин. (М.П.Антонов и до.,1985); кат ал аз а, мМ Н^О^/я.мш. (М.Н.Королюк и др., 198% пероксидаза , ед./л (Б.Н.Пдешкова, 1976); витамин Е, мкМ/л (Р.Ш.Киселевич идо.,

1972; b.D.Desai et al. , 1986).

Оценку состояния неспецифической иммунологической резистентности проводили по показателям в сыворотке 1фови: бакактивность, 055 (О.В.Смирнова и др., 1966); лизоцим, мнг/мл (О.В.Бухарин и др., 1974); пропердин, г/л (В.С.Томилка и да., 1984); комплемент, % гемолиза (Г.Ф.Вагн<ю, 1963).

^армакокинеору динофена изучали методом тонкослойной хроматографии на пластинках Sylufol . Содержание препарата определяли в крови, печени, почках, легких, мышцах, содержимом тонкого и толстого кишечника через I, 3 и 5 суток после длительного применения динофена. Для сравнения параллельно изучали фэрмакокинетику ионола.

Для оценки экологической безопасности динофена изучали: бакте-риостатическое и бактерицидное действие препарата на Echerichia coli 866 и Staphylococcus aureaus 209Р в разведениях:

10**^; биоцидное действие на Parameoiun caudatom по методике В.С.Бузпама и др. (1997); биоцидное действие на сеголеток гуппий путем добавления динофена в аквариум в разведениях: Ю-2, Ю-3, КГ4, 10 ; влияние в дозах: 5,0, 50,0, 500,0 мг/кг на всхожесть семян пшеницы, интенсивность роста и выживаемость проростков; влияние на качество говядины и бульона после длительного применения динофена откормочным быкам в дозе 5,0 мг/кг по 9-ти бальной системе предпочтительности слепым методом.

Описание схем проведения каждого из опытов подробно дано в соответствующих главах.

Полученный ци(|ровой материал обработан статистически с использованием соответствующих программ на ПЭВМ "Элентроника-М30585" (Г.Ф.Лакин, 1973; Б.Ю.Урбах, 1975; Е.В.Гублер, 1978).

3. РЕЗУЛЬТАТ СОБСТВЕННЫХ; ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Общая характеристика динофена

Динофен - 2,6-дитретбутил-4-нонилфенол. Вязкая жидкость от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета. Молекулярная масса -304-332. Плотность при 20°С - 0,92 г/см3. Температура кипения -310-340°С. Показатель преломления при 20°С - 1,4940-14980. Хорошо растворяется в органических растворителях: этаноле, хлороформе. Смешивается с диметилсульфоксидом в любых соотношениях. С водой до 50^-ой концентрации даёт устойчивую эмульсию. Химическая формула

ОН

н,с н3с н3с

■сн

Н3

Отличается от широко известного антиоксиданта ионола наличием длинноцепочечного радикала £9^19.

Клиническая картина острого отравления мышей дииофеном начинае проявляться через 2 часа после введения препарата, нарастает в течс ние 48 часов, а затем, если животные не погибают, исчезает через 4 суток. Вначале возникает угнетенное состояние. Животные сбивать в кучу. Шерсть становится взъерошенной, теряет блеск, слипается. Наблюдаются кишечные расстройства. Затем мыши полностью теряют подвижность и погибают в коматозном состоянии. У выживших животных постепенно появляется подвижность, жажда. Общее состояние восста -навливается через 7-Ю дней после введения динофена.

При вскрытия павших мышей установлены: отек легких, кровенаполнение печени. Сердце останавливается в состоянии диастолы. Сосз ды внутренних органов инъецированы. Кровь тёмная. Слизистые глаз сишошны.

Исходя из приведенных параметров острой токсичности динофена для белых мьшей при внутреннем применении (МГД - 8000; Щ^-ЮЗОО; ЛДзд- 15200;т ВДвд- 16850; ЛДэдд- 20000 мг/кг) и в соответствии с ГОСТом 12.1.007 динофен относится к мало опасным соединениям 1У класса.

Динофен применяли в дозе 1500 мг/кг (10% от ВД50) екедневно до достижения №&%> гибели животных.

Исследования показали, что гибель животных началась на 14-й день введения при суммарной дозе 21000 мг/кг, что составило 1,4 ЛДг . Фактической ЛД§д при длительном применении динофена достигли на 33 день. Она равнялась 49500 мг/кг. Это 3,3 острой ЛД§ф. Стопро -центную гибель мышей наблюдали на 63 день применения препарата. Фактическая ВДхоо

при длительном введении — 94500 мг/кг. Это в 6,3 острых ДЦ5о и 4,7 - ДД100.

Расчетная хроническая ЛДзд составила 44450 мг/кг. При расчет-

3.2. Токсичность динофена 3.2.1. Острая токсичность

3.2.2. Кумуляция

ной ЯД50 острой 15000 мг/кг коэффициент кумуляции равен 2,96. В соответствии с классификацией Л .Д.Медведя (1964) дино<рен относится к умеренно кумупирующим препаратам.

3.2.3. Хроническая токсичность

Опыты проведены на двухмесячных сачцах белых крыс со средней массой тела 80,0+10,0 г. Животные опытных групп получали ежедневно на протяжении 6 месяцев в смеси с кормом динофен в суточных дозах 100,0, 20,0 и 5,0 мг/кг. Это составляет суммарно 12055, 24% и && от ЛДзд. После прекращения скармливания динофена наблюдения за крысами вели еще в течение I месяца.

За весь период наблюдений динофен во всех испытанных дозах не вызывая гибели животных. В зависимости от дозы, крысы отличались по поведению, интенсивности роста и относительной массе внутренних органов.

В дозе 100,0 мг/кг через 2 недели после начала применения динофен вызывал некоторое успокоение животных, более спокойную реакцию на звуковое и тактильное раздражение. В первый месяц опытные крксы выросли на 27& больше контрольных. Затем интенсивность роста их снизилась, сравнялась с контрольными и не отличалась до конца наблюдений.

Применение динофена в дозе 20,0 мг/кг проявило такое же,но менее выраженное влияние на рост белых крыс. Эффект действия в первый месяц был существенно ниже, но последующий спад интенсивности роста оказался менее вьраженньм.

Динамика роста молодняка крыс под влиянием динофена в дозе 5,0 мг/кг на протяжении всего периода наблюдений не отличалась от контрольной, а интенсивность была устойчиво более высокой.

При патояогоанатомическом вскрытии видимых признаков отравления динофеном во всех группа/не обнаружено. В группе животных, получавших препарат в дозе 100,0 мг/кг отмечена яньекция сосудов внутренних органов и их большее, по сравнению с животными остальных групп, кровенаполнение. Так, печень опытных крыс, по сравнению с контрольными,весила на 33,7$ больше, почки - на 23,35?. Препарат в дозе 5,0 мг/кг оказывает стабильное положительное влияние на рост животных и не проявляет никаких побочных эффектов.

3.2.4. Мутагенное действие

Опыты проведены на самцах и самках белых крыс путем оценки частоты возникновения доминантных летальных мутаций. Самцам перед

смешиванием с самками в течение 6 месяцев ежедневно применяли динофен в смеси с кормом та расчета 100,0, 20,0 и 5,0 мг/кг. Всех самок контрольной и опытных групп убили на 17-19 дни беременности. Учитывали количество жёлтых тел в яичниках, пред- и постимпяанта-ционную гибель плодов, состояние живых плодов.

Исследования показали, что в естественных условиях без примет ния каких-либо добавок в рацион самцов, их оплодотворяющая способность на треть не достигает 100$. Применение динофена в дозах 100,( и 20,0 ыг/кг не оказывает существенного влияния на этот показатель, В дозе 5,0 мг/кг препарат на 11% повышает оплодотворяющую способность самцов. При этом количество жёлтых тел беременности у самок колеблется от 14 до 15,6 на одну особь в среднем и не имеет достоверных различий в группах. Это говорит о том, что динофен не влияет на оплодотворяющую способность.

У контрольных самок доимплактационная гибель оплодотворенных яйцеклеток достигала трети от общего количества, что свидетельствует об интенсивной физиологии размножения данного вида.СИ.П,Западник и др., 1974). Длительное применение динофена в больной дозе самцая увеличивает до кмпл ант ационну в гибель яйцеклеток на 8,6^, Препарат в средней дозе не оказывает заметного влияния на этот покг затель. Динофен в дозе 5,0 иг/кг повышает жизнеспособность оплодотворенных клеток и сникает их дозадзлдатационную смертность на 6,6$,

В контрольной группе самок отмечена небольшая постимпяанта-ционная гибель плодов. Она происходитне у каасдой самки и в среднем не достигает 10$. Динофен в высокой дозе на 1,5% повышал, а в малой снижая на 1,9$ постшппантационную смертность плодов.

В группе животных,самцы которой длительно получали препарат в дозе 100,0 мг/кг у одного плода отмечена недоразвитость правой передней конечности. Б остальных группах уродливых и аномальных плодов не обнаружено.

Таким образом, в хроническом огюте на белых крысах установлен что полугодовое применение динофена самцам в дозе 100,0 мг/кг сопровождается возникновением доминантных летальных мутаций. Это выражается в увеличении предимплактационной гибели оплодотворенных яйцеклеток, очень незначительном повшении гибели эмбрионов после имплантации и возможном возникновении аномальных плодов. В дозе 20,0 ыг/кг препарат не оказывал влияния на физиологическую полноценность сперматозоидов крыс. В дозе 5,0 мг/кг динофен оказывает выраженное положительное влияние. Повышается оплодотворяющая

способность, снижается доимплантационная гибель оплодотворенных яйцеклеток, уменьшается смертность эмбрионов после имплантации. В целом можно говорить о слабом мутагенном действии длительного применения динофена в высоких дозах, а также о положительном влиянии низкой испытанной дозы на организм самцов и качество спермопродукцм

3.2.5. Эмбриотропное действие

Самкам белых 1фыс с первого дня беременности применяли ежедневно в смеси с кормом динофен в дозах: 100,0, 20,0, 5,0 мг/кг. Половину самок вскрыли на 17-19 дни беременности. Учитывали количество жёлтых тел беременности, мест имплантации эмбрионов,живых и мёртвых плодов. Расчитывали до- и постимплантационную гибель плодов, общую эмбриональную смертность. У плодов, гавлеченных до родов, определяли нормальное состояние, отечность, кровоизлияния, аномалии, уродства. У второй половины самок подсчитывали количество родившихся крысят, их взвешивали,«зжряли длину тела.

Динофен в дозе 100,0 мг/кг не оказывал влияния на оплодотворенные яйцеклетки до их имплантации. Отмечено увеличение гибели плодов после имплантации в 1,36 раз. При использовании динофена в меньших дозах достоверных изменений не обнаружено.

Из таблицы 1 видно, что у плодов животных,не получавших препаратов 5,7$ случаев обнаружены кровоизлкяния на брюшине, в случаев - аномалии развития - недоразвитая конечность.

Таблица I

Влияние применения динофена беременным самкам крыс на состояние живых плодов

Показатели !Контроль!Динофен в дозе,мг/кг ^_|__! 100,0 ! 20,0 ! 5,0

1. Количество проанализированных плодов

2. Нормальные

3. Отечные

4. С кровоизлияниями

5. С аномалиями развития

6. С уродствами

Применение беременным самкам динофена в дозе 100,0 мг/кг с начала зачатия оказало выраженное эмбриотропное действие. Тал, количество нормальных плодов составило 68,3% от проанализированных по группе,ото на 24,6% меньше по сравнению с контролем. У плодов

70 60 75 80

65 41 62 76

0 19 9 0

4 12 6 4

I 3 0 0

0 I 0 0

с отклонениями от нормы имели место отечность- 100%, кровоизлияния - 63,2%, аномалии развития в воде недоразвитых конечностей -

- 15,6%, уродства - 0,53%.

Динофен в дозе 20,0 мг/кг не оказал вредного влияния на 82,?^ плодов. Это на 10,2^ меньше, чем в контроле. Здесь не обнаружено аномалий развития и уродств. Среди плодов с отклонениями от нормы 69,2$ было с отеками и 46,1^ - с ¡фовоиэяияниями в брюшной полости.

Препарат в дозе 5,0 мг/кг не оказывает вредного влияния на развитие крысят. Среди 80 проанализщэованных плодов 95,0$ оказалиа нормальными, что на 0,7% больше, чем в контроле. Только у 5,0% плодов в брюшной полости найдены отдельные кровоизлияния, не отличающиеся от контрольных. Отеков, аномалий развития и уродств ни у одн« го из проанализированных плодов не обнаружено.

В контрольной группе мертвым родился один крысенок. От самок, получавших динофен в дозах: 100,0 мг/кг оказалось три мертворожденных, 20,0 - один и 5,0 - ни одного. Крысята, родившиеся от самок, получавших динофен в большой дозе имели большую по сравнению с кон' ролем массу тела на 21, %, среднюю дозу - на 10,6$ и низкую дозу -

- на 7,1$. Длина туловища у крысят от опытных самок была больше, чем от контрольных на 5,2^; 0,6$ и 4,855, соответственно.

Таким образом, длительное применение динофена бфеменнкм сачкам белых доыс в ежедневной дозе 100,0 мг/кг вызывает заментное увеличение постимплантационной гибели плодов, появление у них отечности, 1фовоизпияниЙ в брюшной полости и недоразвитости отдель ных конечностей.

Динофен в дозе 20,0 мг/кг практически не оказывает отрицатель ного эмбриочропного действия. В дозе 5,0 мг-кг длительное гримене-ние антиоксиданта беременным животным проявляет положительный эмб-риотропный эффект. По сравнению с контролем происходит большое сохранение живых эмбрионов, снижается пред- и постимплантационная гибель плодов, л концу беременности обнаруживаются несколько больш нормальных плодов. Рождается болыпе живых нормальных крысят с большими массой теда и длиной туловища.

3.2.6. Раздражающее действие

В первом опыте изучено раздражающее действие динофена при нанесении на коньсктиву глаз кролика.

Установлено, что как у контрольных, так и у опытных животных при однократном и многократном закапывании воды животные в течение

первых трех минут потряхивают головой, затем успокаиваются. Никаких других изменений у животных на слизистой и роговице глаза не наблюдали .

10%-ная эмульсия динофена вызывала у кроликов в течение первого получаса периодическое потряхивание головой, беспокойство. Повторные закапывания не изменяли такую реакцию. Температура тела и аппетит у животных не изменялись. На слизистой оболочке глаз отмечали слабое покраснение через 30-60 минут после закапывания. Затем оно исчезло. Других изменений у животных не наблюдали.

50%-ная эмульсия динофена вызывала такую же реакцию. Опытные животные не отличались от контрольных по поведению через I час, а по состоянию коньвкгивы - через 3 часа. Изменений темпфатуры тела не отмечали весь период наблюдений.

ЮО^-ный динофен после закапывания в глаз вызывал более вьра-женную общую и местную рсакция. Тавотные потряхивали головой и беспокоились в течение 2-3 часов, Такач реакция повторялась при последующих закапываниях. Через 6 часов опытные тфолики по поведению не отличались от контрольных. Температура тела не изменялась. Гиперемия коныоктивы нарастала в течение первого' часа до сильной, и к 6-му часу уменьшалась до слабой, а через I сутки не наблюдалась. Повторные-введения препарата не изменяли такой динамики. У всех животных, которым закапывали чистый динофен отмечали кратковременное, до 30 минут слезотечение. Нагноений и поражений роговицы не наблюдали. Наблюдения в течение 5-ти дней введения препарата и ещё 5-ти дней после его окончания других изменений у кроликов не выявили.

Во втором опыте на фоликах изучено раздражающее действие чистого динофена при нанесении на кожу. Под влиянием одно£фатного и последующего длительного применения препарата не произошло изменений поведения и аппетита животных,температуры тела и живой массы кроликов.

Установлено, что если однократное нанесение на кожу не изменяет ее состояния, то длительное - оказывает незначительное раздражающее действие.

Толщина складки выстриженной и выбритой кожи на протяжении месячного срока не подвергалась широким колебаниям. Смазывание кожи вазелиновым маслом ведет к незначительному и недостоверному увеличению толщины кожной складки в пределах 2-82 к контролю и исходному состоянию.

0дно!фатная обработка кожи чистым динофеном существенно увели-

чивает толщину кожной складки. По сравнению с контролем оно достоверно возрастает на 32,5^, с обработанной вазелиновым маслом- на

22,ЗЙ,с исходным состоянием- на 23,5%. Через 5 суток,несмотря на

^ . коэт

цродолжение обработки, когда^адаптируется к дивофену и толщина кожной складки существенно не отличается от контрольной и исходного состояния.

Выстриженная и выбритая кока у ролика через I месяц наблюдений зарастает шерстью на В0%. Обработка вазелиновш маслом несколько замедляет рост волос. Применение динофена не оказывает влияния на рост шерсти у гаоликов.

Таким образом, ринофен оказывает слабое раздражавшее действие на слизистую оболочку глаз, но не влияет вредно на роговицу как пр> однократном, так и при длительном применении. Раздражающее действие на кожу выражено слабо и не носит кумулнрующего характера.

В целом,результатам проведенных исследований можно заключить, что новый фенольный антиоксидант - дянофен относится к малотоксичным препаратам и может длительно применяться животным внутрь в смеси с кормом в ежедневных дозах до 20,0 мг/кг массы тела.

3.3. Резорбтивное действие 3.3.1. Опыты на белых крысах

В пфвом опыте крысам ежедневно в течение 30 дней индивидуаль но внутрь в ОД мл растительного масла вводили дннофен в дозах: 5,0, 10,0, 50,0 ыг/кг. Не обнарукено заметного влияния препарата на клиническое состояния животных.

В дозе 50,0 мг/кг на фоне повышения уровня общие липидов Сна 11,6$) и НЗЯК (на 45,4$) в крови, динофен вызывает существенное, до 56,2% снижение содержания триглидеридов. При этом снижается к общий уровень пероксидов. Но особенно вьгражено уменьгаение содержания кетодичнов Сна 38,0?). При применении динофена в меньших дозах степень выраженности изменений была меньше, но имела такую же тенденцию.

В глутатионоЕои звене отмечается повышение активности глута-тионпероксидазы и уровня самого гяутатиона. Активность супероксид-дисмутазы и ферроксидазы возрастают в зависимости от доз препарате до 30%. В то же время активность ферментов, восстанавливающих перекиси Скаталаза, пероксидаза) мало изменяется.

Введение в организм динофена сопровождается существенным снижением в крови уровня витамина Е. Наиболее вьражен эффект малой

розы препарата, когда разница достигает 3,57 раз (4,36+0,52 мкМ/л в контроле и 1,22+0,48 мкМ/л - в опыте).

Второй опыт на 5фысах проведен с целью изучения сравнительной фармакодинамики динофена и ионола. Препараты применяли ежедневно внутрь в течение 70 дней в дозе 5,0 мг/кг. Обяанткоксиданта не оказывали заметного влияния на клиническое состояние, аппетит, массу паренхиматозных органов^и интенсивность роста животных. Не отмечено существенных изменений в клеточном составе крови, содержании общего белка. Оба антиоксиданта вызывали повышение активности транс' фераз и факторов гуморального иммунитета. При этом, под влиянием динофена повышение активности АсАТ и АлАТ, лизоцима и пропердина было выражено значительно сильнее, достигая 35%. Как ионол, так и динофен не оказывали влияния на изученные показатели углеводного обмена. Хотя была заметна тенденция к активизации ферментов.

Ионол и динофен оказывают выраженное влияние на обмен липидов, их пер оксидацию и систему антиоксидантной защиты. В сыворотке 1фови опытных животных на 4,9-6,2$ возрастает уровень общих липидов, на 5,8-11,5$ НЭНК. Общая активизация метаболизма липидов сопровождается повышением на 1735 содержания ß - липопротеирных комплексов. Одновременно установлено более интенсивное использование триглицери-дов и холестерина, уровень которых снилается на 12$ и 17%, соответственно. Влияние обоих антиоксидантов на показатели обмена липидов однонаправлено, но у динофена оно вьражено сильнее.

Влияние динофена на характер перохсидации липидов более неспе-цифични, чем ионола. Так, динофен на 25,8$ снижает уровень начальных продуктов ПОЛ, на 32$- промежуточных и на 41,3$ - конечных. У ионола это составляет 31,6$, 12,0% и 39,2$, соответственно.

Реакция глугатионового звена антиоксидантной системы характеризуется незначительным повышением его функционального потенциала. Об этом говорит повышение содержания глутатиона при применении ионола и динофена, соответственно на 23,9% и до 18,5$. Активность глутатионпетоксидазы под влиянием динофена возрастает на 13,5$, а ионола - на 9,37?. Активность глутатионредуктазы также повышается на 21,2$ и на 11,1$, соответственно.

Применение динофена способствует повышению в крови на 25,0% активности центрального фермента антиоксидантной защиты - суперок-сиддисмутазы. Уровень одного из основных б но ант ко кс ид ан тез плазмы -- церулоплазмина возрастает на 37,2% при применении ионола.Динофен в меньшей степени повышает феррокеидазную активность церулоплазми-

на, но в большей степени активирует СОД.

Динофен,как и ионол примерно в одинаковой степени оказывают стимуяхфутацее влияние на активность каталазы и пероясидазы.

Оба антиоксиданта, хотя и в разной степени, вызывают снижение уровня витамина Е в доови крыс. Так, под действием динофена содержание токоферола уменьшается в 3,4 раза, а ионола - в 2,7 раза.

3.3.2. Опыты на откормочных быках

Подобрано три группы быков на откорме со средней массой тела 240+25 кг по 27 животных б каждой. Быков контрольной группы кормили сбалансированным хозяйственным рационом. Нивотные опытных групп получали ежедневно в течение 3-х месяцев в смеси с кормом динофен к ионол в дозе 5,0 мг/кг массы тела. Учитывали клиническое состояние быков, поведение, аппетит, интенсивность откорма. Через сутки после последнего введения препаратов у 7-ми животных из каждой группы брали для исследований крови из яремной вены.

Установлено, что при длительном применении в смеси с кормом препараты не оказывали видимого влияния на поведение и аппетит быков. Однако рост опытных животных отличался от контрольных. Применение динофена интенеифицфоваяо ежесуточные приросты массы тела на 9,В%, а ионола - на 4,6%, по сравнению с контролем.

Динофен, как и ионол, не влияет на содержание форменных элементов крови. Не выявлено заметного влияния на скорость оседания эритроцитов и уровень гемоглобина. Не отмечена изменений в содержании кальция и фосфора в сыворотке крови.

В то же время уровень общего белка в 1$юви быков, получавших динофен, возрос на 8,2$. Оба антиоксиданта способствовали повышению активности аминотраясфераз до 25^, но не вызывали изменений активности щелочной фосфатазы.

Фенольные антиоксиданты, особенно динофен, оказывают выраженное стимулкруэдее действие на показатели гуморального звена неспецифической иммунологической резистентности. Под в даяние.! ионола бактерицидная активность сыворотки крови быков повышается на 28^. Динофен вызывает активизацию яизоцима на 4К. Оба антиоксиданта до 35^ повышают активность системы пропердин-комплемент, непосредственно связанной с противовирусным иммунитетом у животных.

Антиоксиданты, не оказывая существенного влияния на уровень глюкозы, молочной и пкровиноградной кислот, все же изменяют процве использования углеводов,- Об этом говорят увеличение величины соотношения глюкозы к пакт ату и отрувату до 33,67$ и уменьшение соотно-

шения лактат/пируват на 9,2%. Это в большей степени выражено при применении динофена.

Более заметно выражено влияние антиоксиданта на обмен липидов у откормочных быков (табл.2). Динофен на 15,25? повышает в крови уровень общих липидов. Это происходит, в первую очередь, за счет НЗЖК, содержание которых возрастает в группе с динофеном на 17,3^, а с ионолом - на 11,555. Возрастает также и содержание Р-липопроте-идов на 29,2 и 19,7%, соответственно. В то же время, под влиянием динофена, уровень холестерина снижается на Как ионол, так и динофен уменьшают интенсивность пероксидации липидов. У ионола наиболее выражено снижение образования Пфвичных продуктов ПОЯ. Их уровень на фоне длительного введения в рацион препарата снизился лишь на 17,8%, а конечных - на 11,0%. При этом относительный уровень диеновых конъюгатов в отношении кетодиенов увеличился в 1,3 раза, а оснований Шиффа - лишь в 1,1 раза.

Таблица 2

Сравнительная оценка влияния динофена на обмен,пероксидацию липидов в организме быков и систему антиоксидантной защиты

да!

пп!

Показатели

Контроль

!

Динофен

Ионол

1. Общие липиды

2. НИК

3. Холестерин

4. Билирубин

5. р - липопротеиды

6. Диеновые коныогаты

7. Кетодиены

8. Основания Шиффа

9. Глутатион

10. Г'лутатионпфокеидаза

11. Глутатионредуктаза

12. Супероксиддисмутаза

13. Ферроксидаза

14. Каталаза

15. Нероксидаза

16. Витамин Е

4,79+0,26 0,52+0,03 1,27+0,08 0,44+0,02 91,4 +6.1

5,52+0,47 0,61+0,05 0,92+0,06х 0,48+0,02 118,1 +9,9х

0,180+0,014 0,138+0,007 0,079+0,005 0.041+0.002 0,143+0,008 0,68 +0,04 17,2+1,1 317,0+23,3 4,85+0,26 220,8+13,1 33,7+2,4 38,2+3,9

12,7+0,8

0,100+0,005х 0,81 +0,08 23,6+1,4х 335,1+37,2 6,40+0,44х 313,5+28,3х 38,1+2,0 52,4+3,6х 5.4+0.4х

5,00+0,34 0,57+0,04 1,14+0,17 0,41+0,03 109,4+9,2 0,117+0,009х 0,065+0,003 О,104+0,006х 0,77+0,07 20,5+1,8 360,0+20,4 5,87+0,48 292,0+30,1 39,4+2,3 56,7+1,9х

6,1+0,5х

Под влиянием динофена уровень первичных продуктов ПОЛ снижается на 23,4%. Это на 11,Ь% ниже, чем под влиянием ионола. Однако содержание кетодиенов в крови ниже, чем у контрольных животных на.

48,1%, а у получавших ионол - на 30,3%, Влияние препаратов на соде? жанке конечных продуктов ПОЙ еще более ярко раафывае? специфику анткоксидантной активности динофена. Так, относительный уровень диеновых коньагатов в отношении кетодиенов не возрастает, а резко снижается (по отношение к контролю б 1,47 раза, ионопу - в 1,87 раза). В то ке время относительный уровень уонечных продуктов ПОЛ в отношении к первшньы изменяется несущественно, а к промежуточным - в 1,35 раза.

Реакция глутатионового звена антиоксидантной запиты проявляется повышекиш по сравнению с контролем активности вссу системы. Так, в группе быков, получавших динофен, отмечено в большей степен; повышение активности глутатионпероксидазы (на 37,2%). При этом происходит поБьиение уровня глутатиона и активности глутатионредук-тазы. Суда по отношениям ферментов к субстрату, происходит не толь ко повышение активности ПК), но к увеличение её синтеза. При этой, относительный уровень ГР к ГПО под влиянием динофена снижается, хотя абсолютная активность гяутатконредуктазы несколько возрастает Приведенные особенности отличают дккофек от ионола.

Центральное ферментативное звено антиоксидантной защиты актив но реагирует у откормочных быков на введение фенояьных антиокеи-дантов. Дкнофен на 32,ОЙ повышает активность СОД по сравнению с контролем V на 10% по сравнению с нойоном. Уровень дерулоплазмина также увеличивается на 42,0$> и 32,2%, соответственно.

Повьшением активности характеризуются ферменты, которые инак-тивнруют перекись водорода. Действие обоих аптиоксидантов примерно одинаково и находится в пределах 8-17%.

Фенольные антиоксидантн обеспечивают снижение концентрации витамина Е в крови. Под влиянием динофена его содержание ниже,чем в контроле в 2,3 раза, а ионояа - в 2,1 раза.

В целом, результаты исследований на откормочных быках свидетельствуют о том, что дкнофен, как и его аналог - ионон, проявляют активное резорбтивное действие при длительном применении животным в смеси с кормом. Это действие разнонаправлен», но наиболее ярко выражено на шздидный обмен, его активизацию к одновременно снижение уровня пэроксидации. При этом повышается активность ферментативного звена системы антиоксидантной защиты.

Следует подчеркнуть» что динофен, несмотря , на наличие длиинс цепочечного углеводородного радикала, относится к биологически высокоактивным веществам. Уже в дозе 5,0 мг/кг при ежедневном внут-

реннем применении он, как и ионол, проявляет резорбтивное действие и оказывает влияние на различные биохимические процессы. При этом направленность фармакологической активности дияофена не зависит от вида животных. Хотя у жвачных она выражена сильнее, чем у крыс по отдельным показателям гуморального иммунитета, обмена липидов, их пероксидации и состоянию системы антиоксидантной защиты.

Динофен, как и ионол, проявляет высокую антиоксидантнуга активность на фоне интенсификации липидного обмена в организме. Это действие направлено как на снижение уровня всех типов пфоксидов (хотя в разной степени), так и на повышение активности ферментов антиоксидантной защиты (тоже в разной степени). Дополнительным подтверждением высокой антиоксидантной активности динофена является значительное снижение поу его влиянием содержания в крови наиболее активного эндогенного бкоантиоксиданга - витамина Е.

Анализ результатов проведенных опытов даёт основание считать, что резорбтивное действие динофена в дозе 5,0 ыг/кг массы тела животных три длительном применении в смеси с кормом направлено на более благоприятное для организма течение и адекватное регулирование обменных процессов. У откормочных быков это, в конечном итоге, положительно сказывается на продуктивности.

3,4. Фдрмакокинетика динофена

3.4.1. Опыт на белых крысах

Исследования проведены на трёх грушах белых крыс-самцов со средней массой тела 170+25 г. В контрольной группе было б животных, в двух опытных - по 18. Крысы опытных групп получали в течение 70 дней ежедневно в смеси с кормом динофен и ионол в дозе 5,0 мг/кг. Содержание антиоксидантов определяли в крови, печени, легких, мышцах, содержимом тонкого, толстого кишечника через I; 3 и 5 суток после последней дачи препаратов.

Установлено, что фармакокинетика динофена не сходна с таковой ионола (табл.3). Через сутки после окончания дачи препаратов содержание в крови динофена на 27,9% ниже, чем ионола. Динофен меньше (на 43,7%) накапливается в. .печени,а в мышцах через сутки не обнаруживается. В почках-антиоксиданты сосредотачиваются в одинаковых количествах. Обнаружены существенные отличия концентрации ионола и динофена в содержимом тонкого и толстого кишечника. Так, в тонком кишечнике динофена обнаружено больше, чем ионола в 1,8раза, а в толстом - в 1,5 раза.

Таблица 3

Ззрмакокине<г|Г динофена и юнояа (через I сутки после о кончай ия применения)

!'Тг! Материал 'Содержание антиоксцданта,

пп! !мкг на I г материала_

'__ионол_! динофен_

1. Кровь 0,61+0,03 0,44+0,02

2. Печень 1,19+0,07 0,67+0,03

3. Почки 1,22+0,09 1,18+0,08

4. Легкие 0,57+0,04 0,50+0,02

5. Мышцы 0,09+0,01 0,00~

6. Содержимое кишечника:

тонкого 0,45+0,01 0,81+0,05

толстого 0,62+0,09 0,96+0,05

С цекыо оценки характера фармаконинетики динофена проведены расчеты относительного распределения препарата, приняв содержание и крови за единицу. Ески у конопа тропность органов распределяется следующим образом: почки-печень-толетый кишечнкк-яегкие-тонкий ки-сечник-мшцк, тс у -динофена.: почки-топетый китшчнкк-тонккй кисечниз -печень, легкке-мшцц.

Через 3 суток ионон не обнаруживается, а следовые количества динофена установлены только в почках. Через 5 суток следов обоих антиокекдактоЕ в организме не обнаружено.

3,4,2. Опыты на откормочных быках

Динофен скармливали яивогным в дозе 5,0 мг/кг в течение трёх месяцев. Через сутки после последнего введения препарата убили по 3 контрольных и опытных животных и провели исследование длиннейшей мышцы спины на содержание динофена. Установлено, что через сутки после длительного внутреннего применения динофена откормочным быка препарат не обнаруживается в чышцвх.

В целом исследования по изучении фармакокинетики нового анти-оксиданта показали, что динофен имеет свои особенности распределения по организму. Препарат выделяется через пищеварительный тракт и почки. 0ц в меньшей степени накапливается в печени,по сравнению с конояом. Уке -'срез сутки динофен не обнаруживается в мышщх.Убой животных (сроки ожидания) мохно производить через 5 суток после последнего введения гфепарата.

3.5. Оценка экологической безопасности динофена в животноводстве

3.5.1. Опыты на бактериях

Первый опыт проведен на референтном штамме килечной палочки Esherichia coll 866. Установлено, что только в разведении 1:100 динофен в МПБ угнетает рост микроорганизма. Введенный в МПБ препарат не проявляет угнетающего действия на жизнеспособность бактфий.

Второй опыт проведен на референтном штамме Staphylococcus atireaus 209Р. Установлено,что угнетение роста коккоа препарат в МПБ вызывал в разведении 1:1000. Бактерицидного действия на МПБ, бактериостатического и бактерицидного на МПА динофен не проявил.

3.5.2. Опыты на простейших

Опыты проведены на Paramecium ca.udatum в четьре этапа. Первый этап - экспресс оценка биологической активности динофена. Установлено,что в течение 24 часового контакта в разведениях до 1:100000 динофен не проявляет биоцидности.

Второй этап - оценка биологической активности динофена методом разрешающего воздействия. В зависимости от концентрации в среде обитания клеток, биологическая активность динофена имеет некоторые различия. Так,в 1:100 препарат несколько угнетает,а до 1:10000 _ до 255? повышает защитные силы одноклеточных организмов.

Третий этап - оценка биологической активности динофена по интенсивности размножения парамеций. Антмоксцаант в большой концент рации на 205? угнетает интенсивность размножения парамеций. Но уже в разведениях 1:1000 он активизирует этот процесс,а в 1:10000-повытает на 35$.

Четвертый этап - оценка биологической активности тканей и жидкостей организма животных, получавших динофен. Материал взят от опытных к контрольных быков,длительно получавших динофен в производ ственных условиях, «ссяедовали печень, мышцы,содержимое рубца,толстого кишечника, мочевого пузыря. Водные экстракты из тканей и взве си жидкостей изучали в разведениях 1:100, 1:1000, 1:10000. Оценку проводили по методике первого этапа. Не установлено различий биологической активности материала от опытных и контрольных животных.

3.5.3. Опыты на рыбах

Работа выполнена на сеголетках гуппии. Из общего в 5 малых аквариумов высадили по 18 рыбок. Первый аквариум служил контролем. В остальные опытные добавляли динофен в разведениях 1:100, 1:1000,

1:10000, 1:100000. Выживаемость и гибель рыб учитывали в течение 5 суток. Установлено, что антиоксидант малот(5синен для рыб. Только в концентрациях до 1:3000 он ведёт к их гибели. Такие концентрации фактически невозможно создать в водоёме даже ограниченных размеров

3.5.4. Влияние на всхожесть семян пшеницы,

интенсивность роста и выживаемость проростков

Изучение влияния динофена в дозах 5,0, 50,0 и 500,0 мг/кг на всхожесть, прорастаемость семян пшеницы и интенсивность роста молодых растений. В концентрациях 0,5, 5,0 и 50,0 мг% изучено влияние препарата на проростки при мх опрыскивании.

В малой дозе антиоксидант стимулирует прорастаемость семян пшеницы на 8,9%. В десяти!фатно превышавдей её дозе влияния динофена не обнаружено. Наибольшая доза вызывает обратное действие -сникает прорастаемость зерен в тех же пределах.

Зависимость от дозы установлена и во влиянии динофена на интенсивность роста при обработке зерен. Так, если в контроле среднесуточный рост проростков составлял 1,4 мм, то обработка динофеном в максимальной дозе вела к угнетению роста на 15,2%. В меньших дозах антиоксидант не оказал заметного влияния на интенсивность роста проростков пшеницы. Наружная обработка эмульсией динофена в концент рациях от 0,5 до 5,0 не оказала отрицательного влияния на внешнее состояние (цвет, тургор) и интенсивность роста молодых растений Заметно, хотя и незначительно, тайму мрующее влияние динофена на рост растений. Если в контроле общий прирост за пятидневку составил 9,02+0,31 мм, то под влиянием опрыскивания анткоксидантом в концентрации 5,0 ыг% - 10,25+0,47 мм, что на 13,6% больше.

Таким образом, динофен мало токсичен для растений как при обработке семян,тал и проростков. В невысоких дозах проявляется небольшой стимулирующий эффект, который вьражается в некотором увеличении прорасгаекг'сти семян и интенсивности роста молодых растений.

3.5.5. Оценка качества говядины и бульона

Пробой варки по 9-ти бальной системе предпочтительности слепым методом в сравнении с контролем проведена оценка качества вере-ного мяса и бульона из длиннейшей мышцы спины от трех опытных быков, длительно получавших с кормом динофен.

Установлено, что длительное применение нового антиоксиданта при доращивании и откорме быков не изменяет органояептических качеств вареного мяса к бульона.

В результате проведенных исследований получены ответы на принципиальные вопросы, обобщение которых даёт право судить о динофене с позиций экологической фармакологии.

Прежде всего,по влиянию динофена в тысячекратно различающихся концентрациях на бактерии, простей ¡лих, семена, зеленые растения, рыб, млекопитающих показало, что новый препарат относится к малотоксичным фенольным антиоксидантам. При этом не выявлено избирательности, тропности к биообъектам микробного, растительного или животного происхождения.

О глубине экологической безопасности препарата. При прямом взаимодействии динофена с живыми объектами установлена его невысокая агрессивность. Методом разрешающего воздействия показано, что имеющаяся агрессивность динофена не затрагивает механизмы сопротивления организма. И, наконец, по делению клеток (всхожесть семян, размножение инфузорий) установлено, что динофен не влияет на генетический комплекс, обеспечивающий продление жизни вида.

Полученные результаты в сочетании с исследованиями токсичности динофена и его влияния на качество продукции позволяют считать его экологически мало опасным и вполне допустимым для использования в откормочном скотоводстве.

3.6. Производственная оценка эффективности применения динофена при доращивании и откорме быков

Научно-производственные испытания эффективности использования динофена при доращивании и откорме сборного поголовья 1фупного рога того скота проведены с 1994 по 1998 годы на базе двух МХП: "Маяк" Воронежской и "Мценское" Орловской областей. Предприятия отличаются по типу кормового рациона и исходному фону интенсивности доращива-ния и откорма поголовья.

МХИ "Маяк" ведет дсрацивание и откорм скота на сбалансированном конценоратном рационе. Испытания и применение динофена на предприятии начато с 1995 года со следующим охватом поголовья:1995 год - '¿0%, 1996- 60^,1997- 100%, 1998- 100%. В 1994 году среднесуточный прирост массы тела скота составлял 1046 г. В ¡последние годы он вырос на I г или на 0,09% и стабильно держится на одном уровне. На предприятии нет падежа скота. Если в 1995 году вынужденный убой по. причинам остеодистрофии и гепатодистрофии составил 0,6%,то в 1996- 0,0б5&, а в 1997 - 0,1555. В 1994 году, до применения динофена, на 1 ц привеса затрачено 6,8 ц кормов. В 1997 году эффективность откор ма повысилась, затраты уменьшились на 0,1 ц. Если учесть высокую

интенсивность откорма на предприятии, можно подчеркнуть эффективность использования динофена по трём показателям: увеличение средне суточного прироста массы тела; снижение уровня вынужденного убоя, а значит - улучшение здоровья животных; снижение затрат на единицу продукции.

ЫХП "Мценское" ведет доращивание и откорм сбсрного поголовья крупного рогатого скота на основе свекловичного жома. Рацион балансируется до соогветствувцего уровня различными добавками. Применение динофена начато в 1996 году - 40$, 1997, 1998 г.г.- 100%. В 1995 году среднесуточные приросты массы тепа скота составили 875 г. В 1926 году они возросли до 903 г или на 3,8%. В год полного использования нового антиоксиданта в рационе (1997) прирост массы тепа достиг 973 г. Это на 11,1% бояьае по сравнению с 1995 годом.Отмечается существенное уменьшение количества вынужденно убиваемого скота с признаками гепатодистрофии. До использования динофена в 1995 году затраты корма составили 7,6 ц кормовых единиц на I ц прироста массы тела, в IS96- 7,5 ц, а в I997-. 6,6 ц или на 18% меньше,

Приведенные данные показывают, что использование нового антиоксиданта динофена эффективно ери доредиввнии и откорме крупного рогатого скота для сохранения здоровья тавотных и улучшения продуктивности.

4. ВЫВОДЫ

1. Динофен - 2,6-дитретбутия-4-нонилфенол- первый синтетический поверхностно-активный фенояьный антиоксидант, разработанный в качестве ветфинарного фармакологического препарата. Это однородна вязкая прозрачная шщкость ог светло-жёлтого до светло-коричневого цвета. Препарат с водой даёт равномерную стабильную эмульсии.

2. Динофен относится к ыалотоксичнш веществам 1У класса.

2.1. Параметры острой пер оральной токсичности пря введении нелинейным белш шзаа-самцам с массой тела 20+2 г: ЙД-^ - 10800;

15200; ЛД^ - 18850 иг/кг.

2.2. При хроническом прииененки ЛДзд - 44450 мг/кг, коэффициент кумуляции - 2,96.

2.3. Шестимесячное применение антиоксидента белым крысам в смеси с кормой в су шар них дозах до 120$ от острой ДДзд не вшывае гибели животных. Малые дозы дикофена вызывают повышение интенсивности роста молодых кивотных, а большие проявляют мягкое успокаивающее действие.

2.4. Длительное применение динофена в малых (5,0 мг/кг) и ерр

них (20,0 мг/кг) дозах не сопровождается мутагенным, тератогенным и эмбриотоксическим эффектом. Отмечена некоторая стимуляция плодовитости и интенсивности роста плодов. В больших дозах (100,0 мг/кг) увеличение плодовитости и размеров плодов сопровождается повышением мертворождаемости крысят по сравнению с контролем.

3. Динофен в чистом виде проявляет слабое раздражающее действие на коку и слизисту» оболочку. 50^-ная водная эмульсия препарата раздражающим действием не обладает.

4. При длительном внутреннем применении в дозах от 5,0 мг/кг динофен проявляет общее резорбтивное действие на организм, которое принципиально не отличается от широко известного аналога- ионола.

4.1. Направленность фармакологической активности не зависит от вида животных (белые крысы, крупный рогатый скот), но по ряду показателей (яизоцим, комплемент, холестфин и д>.) она более выражена у жвачных.

4.2. Общее резорбтивное действие проявляется интенсификацией роста молодых животных, обмена углеводов и липидов, повшениеи активности ферментов и гуморальных факторов неспецифической иммунологической резистентности,

5. Длительное внутреннее применение динофена в дозах от 5,0 мг/кг подобно ионояу оказывает специфическое резорбтивное действие на систему пер оксидации липидов и антиоксидантной защиты организма.

5.1. На фоне интенсификации липидного обмена под влиянием дино фена снижается по сравнению с контролем уровень первичных продуктов

ПОЛ до 25$, кетодкенов до 50$, конечных продуктов до 30$.

5.2. В глутатионовом звене антиоксидантной защиты наиболее выражено под влиянием динофена повышение активности глутатнонперок-сидазы.

5.3. Применение динофена способствует повыаенко роста центрального фермента антиоксидантной защиты- супероксиддисмутазы до 325

5.4. Под влиянием нового антиоксиданта активность перекись -восстанавливапдих ферментов возрастает до 17$.

5.5. Динофен обеспечивает экономна расходования токоферолов в системе естественной антиоксидантной запиты. Зто вгаажаетсл в снижении содержания витамина Е в крови до 2,3 раз.

6. Длительное применение динофена в дозе 5,0 мг/кг сопровождается распределением его в количествах от 0,44 до 1,18 мкг/г по оргг нам в убыващей последовательности: почки-толстый кипечник-тонкий ккзечник-печень-легкие-мшцы. В мышцах препарат не обнаруживается через I сутки после последнего введения. Через 3 суток сяеровые

количества динофена обнаруживаются в почках. Через 5 суток динофен не обнаруживается в органах и тканях животных.

7. Динофен экологически мало опасный антиокеидант. Он не токсичен в разведениях 1:300 - дпя мюфобов и простейших, 1:100000 -дяя рыб. Препарат в дозе 50,0 ыг/кг не угнетает прорастаемость семян пшеницы и не угнетает рост проростков. Б концентрации 5,0 мг? не влияет на внешнее состояние и интенсивность роста растений при наружной обработке.

8. Длительное применение динофена при доращИЕании и откорме крупного рогатого скота в дозе 5,0 ыг/кг не оказывает отрицатель -ного влияния на качество говядины и бульона из нее.

9. Применение динофена в качестве антиоксиданта при доращива-нии и откорме быков в дозе 5,0 иг/кг на протяжении всего технологического процесса в зависимости от интенсивности технологии: повышает среднесуточный прирост ыассы тела животных до 11,15?; снижает затраты корма на I ц прироста продукции до 1,0 ц. Вынужденный убой животных в связи с синдромом гепатодкегрофии снижен с 0,60% до 0, 15

5. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Применение динофена в дозе 5,0 мг/кг внутрь ежедневно в смеси с кормом в качестве антиоксщанта при роращивании и откорме крупного рогатого скота.

Вошло в НТД и проект наставления по применению динофена в качестве антиоксиданта в ветеринарии. Одобрено Ученым советом ВНИВИ патологии,фармакологии и тфапии PAGXH (протокол it II от 2 ноября 1998 г.) и направлено на рассмотрение Ветфармбиосовета Департамена ветеринарии Минсельхозпрода РФ.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Токсикологическая характеристика динофена//Материаяы Между народного координационного со в ещания:"Эко логические троблемы патологии, фармакологии и терапии" .-Изд.ВНИЕШадГ.-Воронеж,199?.

2. Эмбриотропное и мутагенное действие динофена//Материалы Международного координационного совещания:"Экологические проблемы патологии,фармакологии и тор алии". -Изд .ВЛИВШИ. -Воронеж, 1997. --С.300-301.

3. Применение препарата динофен дпя профилактики и лечения.-Информ.листок Воронежского 1ЩГИ,- Р 248-98,- 3 с.