Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.04) на тему:Фармако-токсикологическая оценка побочных продуктов промышленного производства аскорбиновой кислоты

Казанский ордена Ленина ветеринарным институт им. Н. Э. Баумана

На правах рукописи

МЕРЗЛЕНКО Ольга Валерьевна

УДК 619:015.015:614.9:636.5

ФАРЛ\АКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКЛЯ ОЦЕНКА ПОБОЧНЫХ ПРОДУКТОВ ПРОМЫШЛЕННОГО ПРОИЗВОДСТВА АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ

16.00.04 — ветеринарная фармакология с токсикологией

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Казань 1992

■■О ,-) * ' , "" 1

/

N

Казанский ордена Ленина ветеринарный институт им. Н. Э. Баумана

На правах рукописи

МЕРЗЛННКО Ольга Валерьевна

УДК (>10:615.015 014.0:630.5

ФАРМАКО-ТОКСПКО.ЧОГПЧРлМчЛЯ ОЦЕНКА ПОБОЧНЫХ ПРОДУКТОВ ¡"¡¡'О.МЫШ.'ИгННОГО ПРОИЗВОДСТВА ЛСКОРЬППОВОП кислоты

16.00.04 — иегсрннарная фармакология е токспколосист

А и т п р с ф е р а т диссертации на соискание ученой степени кандида га ветеринарны:-: паук

Казань 1902

Работа выполнялась в лаборатории биологически активных вещестп Белгородского сельскохозяйственного института (учебно-научного центра по сельскому хозяйству).

Научные руководители — доктор ветеринарных наук Антипов В. А.; доктор биологических паук Бойко И. А.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Гараев Р. А.;

кандидат ветеринарных наук Гарипов Т. В.

Ведущее учреждение: Всероссийский государственный научно-исследова-тельекпй институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.

на заседании специализированного совета 120.22.02) в Казанском ветеринарном институте (420074, г. Казань, ветинститут).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанского ветеринарного института.

Защита состоится

1992 г.

часов

Ученый секретарь специализированного совета к. п. п., доцент

А. II. К о р н и щ и н.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. В условиях промышленного птицеводства большую остроту приобретает проблема обеспечения птицы витаминами. Имеющие место частые нарушения витаминного питания, ведущие к снижению продуктивности и задержке реализации генетического потенциала птицы, связаны с высокой энергией ее роста н интенсивностью обменных процессов, постоянным выведением витаминов с яичной массой, усиленным расходованием их в процессе адаптации к стрессам, с массовыми дисбактериозами, возникающими после лечебно-профилактических мероприятий (В. К. Бауман, Н. И. Берзинь, А. Р. Вальдман и др., 1987).

Исследованиями А. Р. Вальдмана (1957), А. В. Труфано-ва (1959), М. И. Смирнова (1974), И. И. Матусиса (1975), Л. Д1. Двинской (1987), П. Ф. Сурая (1987), Н. И. Кузнецова (1989), А. А. Душейко (1989) и других установлено, что обеспечить полноценность кормления животных без коррекции витаминной обеспеченности рационов невозможно.

Однако объемы производства витаминных препаратов в стране не отвечают потребностям животноводства. До последнего времени спрос па витамины удовлетворялся всего лишь на 40% (Э. И. Козлов, 1987), и этот дефицит по разным причинам продолжает стремительно расти.

В этой связи восполнение нужд животноводства в витаминных препаратах возможно за счет использования промежуточных продуктов и технологических отходов промышленного синтеза витаминов. Их применение позволило бы не только уменьшить указанный дефицит, но и в определенной мере способствовать экологическому оздоровлению местностей расположения химико-фармацевтических предприятий, т. к. согласно регламентам производства все отходы должны сжигаться либо сбрасываться в заводские стоки.

В процессе промышленного производства аскорбиновой кислоты образуется целый ряд полупродуктов синтеза, побочных продуктов и отходов, имеющих высокую витаминную актив эсть,

которые могут быть использованы в ветеринарии и животноводстве. Сюда относятся третий сорбозпый маточник, первый маточным раствор аскорбиновой кислоты, отходы таблетпого цеха. В настоящей работе представлены результаты исследования по определению возможностей применения этих продуктов в птицеводстве.

1.2. Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы состояла в изучении, разработке и внедрении промежуточных продуктов и отходов промышленного производства аскорбиновой кислоты в птицеводстве в качестве витаминных добавок к рациону.

В задачи исследовании входило:

— определение химического состава побочных продуктов, получаемых при производстве аскорбиновой кислоты;

— изучение параметров общетокспческого действия препаратов па организм животных;

— исследование их фармакологической активности;

— разработка н.внедрение препаратов в птицеводство с целью профилактики С-гиповитампноза и стимуляции роста бройлеров.

Исследования выполнены в соответствии с научно-техниче-скои программой 0.СХ.П7.03 с номером госрегнстрации 01860!13279.

1.3. Научная новизна. Впервые изучены химический состав, острая п хроническая токсичность, аллергнзирующее и омбрно-тог.спческое действие, С-вптампнпая активность, влияние на интенсивность роста бройлеров и 11 рол у ктпВ1 юст ь кур-несушск четырех препаратов (сорбовпта, пацевнта, кальцевпта и полпвита кормового), представляющих собой промежуточные продукты либо отходы промышленного производства аскорбиновой кислоты. Определено их фармакологическое действие и, в частности, влияние на основные морфоиммуннобпохпмпчсскне показатели и содержание витамина С в сыворотке крови и в печени птиц.

Новизна исследовании но еорбовпту защищена Авторским свидетельством СССР, Л"» 1387959.

1.4. Практическая значимость. На основании экспериментальных и научно-производственных исследований сорбовит, на-певит, кальцевпт и поливит кормовой предлагается применять в качестве эффективных лечебно-профилактических при С-авн-тамнпозе и ростостпмулпрующпх средств для птиц как самостоятельно, так и в составе вптамиппо-глпнеральпых премиксов, а также в качестве добавок к комбикормам н кормосмесям для нтпцы, Разработана необходимая иорматпвпо-техппческая документация по их применению. Результаты исследования внед-

репы па пяти птицефабриках Белгородской, Харьковской и Кур-скоп областей.

Использование этих препаратов в животноводстве позволяет снизить за год объемы стоков Белгородского витаминного комбината па 200м3, сократить энергозатраты на сжигание 150 т отходов п уменьшить загрязнение атмосферного воздуха.

1.5. Апробация работы. Материалы диссертации были представлены па Всесоюзной конференции молодых ученых и аспирантов по птицеводству (Загорск, 1989), научно-теоретической конференции «Вопросы интенсификации производства сельскохозяйственных продуктов» (Москва, 1989), межреспубликанской конференции «Экологические проблемы фармакологии п токсикологии» (Казань, 1990), ежегодных заседаниях методического совета Белгородского сельскохозяйственного института по результатам НИР (Белгород, 1989—1991).

I.G. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 научных статей и получено Авторское сридотсльство СССР.

1.7. На защиту наносятся:

Результаты изучения состава и физико-химических свойств сорбовита, пацевита, кальцешпа и поливпта кормового, представляющих собой промежуточные продукты пли отходи промышленного производства аскорбиновой кислоты;

экспериментальные данные по изучению их основных токсикологических и фармакологических свойств;

результаты изучения лечебно профилактического при С-гипо-вптампнозе н ростостпмулпрующего действия у птиц;

практические предложения по применению препапаизз.

1.8. Объем и структура диссертации. Дисеертаичл изложена па 168 страницах машинописного текста и состоит из разделов: введения, обзора литературы, cock г.ччшм.ч нее кпобш.ьп, corn ждения результатов, вызолов п вракiнчеекпх н()С.'ло>кс:.иц. Список использованной литера г. pi: f.:.vno4aei 2. 'I работ!в тол числе 180—отечественных авторов. Имеется приложение i;a 21-страницах. Работа иллюстрирована 40 таблл сами, П «|)cnv,>j»;m-ями и 2 рисунками.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальные исследования проведены в лаборз:о .-ш биологически активных веществ Белгородского сельскохозлйе: -венного института, клинические — в условиях inпц-м.'одчеехп \ хозяйств Белгородской области. Производственные iici:i¡тс:1иги лечебио-профнлактичеекоп эффективности препаратов и их

внедрение в практику птицеводства н ветеринарии осуществляли в условиях птицефабрик Белгородской, Курской и Харьковской областей. Препараты получали па Белгородском витаминном комбинате.

Экспериментальная часть работы выполнена па 366 белых крысах, 85 белых мышах, 25 морских свинках, 15 кроликах, 260 куриных эмбрионах, 5780 цыплятах п 1540 взрослых курах.

При проведении экспериментов использованы токсикологические, фармакологические, морфологические, иммуннобиохимиче-екпе, клинические и другие методы исследования.

Токсикологические свойства препаратов изучали путем определения параметров их острой и хронической токсичности, общего действия на организм животных, местпораздражающего, эмбриотоксического и аллергизпрующего действия, а также контроля изменении функции п структуры отдельных органов и систем под влиянием препаратов (И. П. Заиадшок, В. И. Заплд-шок, Е. А. Захария, 1983). Острую токсичность определяли па белых мышах и крысах при однократном пероральиом и парентеральном путях введения. Среднюю смертельную дозу вычисляли по Керберу (М. Л. Беленький, 1963). Определение хронической токсичности на белых крысах, курах и кроликах проводили в соответствии с «Требованиями к доклиническому изучению общетокснческого действия новых фармакологических веществ» ФКМЗ СССР (М., 1985). При изучении общего действия препаратов учитывали общее состояние, аппетит, частоту дыхания и температуру тела, частоту дефекации и величину диуреза, динамику массы тепла и внутренних органов. Состояние ЦНС оценивали по поведенческим реакциям в «открытом ноле», двигательную активность — по количеству пересечений линии, разделяющих поле на квадраты, возбудимость и реактивность — по числу вертикальных стоек, эмоциональное состояние — по количеству дефекаций и умывании (грумингу). О состоянии сердечно-сосудистом системы судили по ЭКГ, полученным во втором стандартном отведении на электрокардиографе ЭК Л-ЗМ.

Не менее, чем от 5 животных из каждой группы исследовали кровь, в которой определяли морфологический состав в счет-поп камере Горяева), время ее свертывания по Мае и Магро), СОЭ в аппарате Панченкова, содержание в ней гемоглобина (гемоглобннцианндным методом) и сахара (ортотолу-идиновым методом). Выводили лейкограмму.' В сыворотке крови учитывали содержание общего белка (по биурстовон реакции) и его фракции (методом электрофореза на бумаге), оста-

точного азота (но прямой реакции с реактивом Несслера), мочевины (по цветной реакции с лнацетплмопооксином), креагп-шша по цветном реакции Яффе, холестерина (качественном реакцией с участием в мен уксусного ангидрида и смеси уксусном п серной кислот), активность трансаминаз и билирубин (набором реактивов фирмы «Лахема», Чехословакия).

Дстоксншфующую функцию печени изучали на модели гек-сепалового сна. Гексенал (80 мг/кг) в форме 1%-ного раствора вводили внутрпбрюшинпо п регистрировали продолжительность сна, которая в контрольной группе принималась за 100%.

Состояние выделительной функции почек определяли методом водной нагрузки (Е. Б. Берхни, 1977), которую вызывали внутрибргошшшым введением изотонического раствора натрия хлорида в объеме 5 мл па 100 г массы животного. Количество выделяемом мочи учитывали через 2 и 4 часа.

В конце периода наблюдения из каждой группы умерщвляли по шесть животных для патоморфологическнх исследований. Внутренние органы взвешивали, вычисляли их относительную массу н в дальнейшем подвергали гистологическом)' исследованию. Гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином и изучали под микроскопом МБИ-6 при 100—200-кратпом увеличении.

О местнораздражагощем действии препаратов судили при жизни путем осмотра конъюнктивы после аппликации па нее растворов изучаемых препаратов, посмертно—по результатам осмотра слизистой оболочки желудка крыс, которым препараты вводили пероральмо.

Лллергпзирующее действие проверяли на морских свинках. До сенсибилизации (исходные данные), перед введением разрешающей дозы и после нее учитывали массу тела, ректальную температуру, количество в крови лейкоцитов. Ставили РСАЛ в нитратном крови по Флексу. Положительной считали пробу, в которой агломерация (склеивание) лейкоцитов превышала контрольные данные не менее, чем на 30% (Э. В. Гюллплг, Л1. Б. Сам-бур, 1981).

Эмбрнотокснческое дейстзне изучали па 7-суточных куриных эмбрионах. Препараты вводили в желточный мешок. Каждую дозу исследуемого вещества проверяли па 20 эмбрионах.

После декальцинации тканей в жидкости Буэна (через 7 суток) делали серию поперечных разрезов плода и исследовали внутренние органы по методу Вильсона, модифицированному в отделе эмбриологии экспериментальной метпцины .АМН СССР (Л. П. Дыбан, И. И. Тиходеева, Н. В. Хромов-Борисов, П75).

Изучение скелета проводили по метод)' А. Б. Даусои (1920).

С целью выявления действия исследуемых препаратов па потомство инкубацию 10 яиц в каждой группе проводили до вы-луплепня цыплят. Последних взвешивали и в дальнейшем вели за ними наблюдение в течение двух месяцев, отмечая динамику живой массы и падеж в каждой группе (В. В. Меньшиков, Л. Н. Дслекборская, Р. П. Заболотская, 1987).

Ветернпарно-сапптарпуго оценку мяса птпцы, \битой после применения препаратов, проводили с использованием общепринятых методов, руководствуясь «Правилами ветеринарпо-сапн-тарного осмотра убойных животных п ветерниарно-санптарпой экспертизы мясных продуктов» (М., 1985).

О фармакодпнамике препаратов судили по интенсивности роста и продуктивность- птпцы, клиническим показателям, изменениям основных показателей обмена веществ, общей неспсцн-фической резистентности, напряженности специфического иммунитет;' против болезни Ныокаста.

В сыворотке крови определяли содержание кальция тптро-метрнческн по де Ваарду, неорганического фосфора — калориметрически с ванадат-молнбденовыи реактивом (С. П. Кулачен-ко, Э. С. Коган, 1979; С. П. Кулаченко, В. И. Булавпна, Е. Я. Логвинова, 1982), лизоцимную (фотоэлектрокалорнметром) н бактерицидную (фотонефелометрсм по методике отдела зоогигиены УНИИЭФ) активность, содержание иммуноглобулинов нефслометрнческнм методом после воздействия их с сульфатом цинка, специфические антитела против вакцинного штамма возбудителя ныокаслской болезни птиц — по РЗГА (В. Я- Антонова. П. Н. Блинова, 1971).

Доступность аскорбиновой кислоты дтя организма из изучаемых препаратов определяли по содержанию ее в крови и печени- после применения эквивалентных доз офицннальпон аскорбиновой кислоты п содержащейся в препаратах. Аскорбиновую кислоту определяли методом в основе которого лежит восстановление ею йодповатокнелого калия.

Терапевтическая эффективность препаратов проверялась па С-гнповптамипозных цыплятах. Гиповнтаминозное состояние вызывали двухнедельным содержанием цыплят па стандартном комбикорме, лишенном С-вптамннпой добавки. Способность препаратов предупреждать развитие С-гпповптамнноза изучалась путем введения их в комбикорма для птицы взамен фармакопейной аскорбиновой кислоты и выращиванием па этих комбикормах цыплят пли содержанием кур-несушек.

Лечебная и профилактическая эффективность препаратов и

сргшншсмьнап их оценка проворе,чв1 на сыном йоге СС п.-с. цкидлт и в ¡рослых к\'р.

I: -I \'тем 11 ь; и » онгпа. г,:ф п, оч «и:обраоо ; ан на

С-/.-И' лсюл.'мн чарнациошкн'. CT.Ytiiciiti.il. омк-аиными рчдом (Ы>1а;01> (I. (;>. Лакни, 1У/Л, /V. .... аЗерпч, .V. .-Д. .• ох.ии:, Ч». Л. Курмап, 197л; В. 11. Пепхоч ¡Зол).

Лист опертое п» ра.нпщы :.а\кд\ сравшиглсмимп иог.а.иасыг.и определялась по аргх.меп ; \ С. ь:с.;с л г:;. Разница считалась достоверной при Р<0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ПССЛНДОСАШШ

3.!. Характерней;.« изучаемых препаритои

Тсяноло! ья проь.нд' -.етна аслОрбипс.К/а :,нслс>м да Зечоород-ском г.итамшпюм комбинат о состоит из 3 стадий, в процессе которых 11г;аплпвзкне . перспож; пвчв с дта ¡ожо/ж;:озн:ч;л в ['стерпиарпм подунрод; кт ы и ополи: п.н-гип сорбслг.ип ..тгоч-|;ик (сороониг) — более 10.) гоин п гол; первый чкпо-кши раст-|:ор аскорбиновой кислоты (исходный продукт длл синтеза нацепи га и кальцешпа) — 2:;У0 топа и год; 0r.40.1U т абле I прова-нпя нолнвнтам.нпиих комплексов (подивит кормовой) Сотое 50 топи в год.

Сорбопит — густая жидкость темно-коричневого цвета. Содержит ."2—Со1;!> сухих веществ, а г. н. сахара (в пор.-с.еге на сорбозу; — 46,9—17,1, сирого ироюпна — 0,8—1,3%. В составе сорбовпта аскорбиновой кислоты — ¡3,1 — 1тиамшм — 0,123 — (¡,133, рибофлавина — 21,9—ЗЗд' мг!',у.

Напевпт (натрия аскербпщи) и калвиеви г (кальция аскор-бинат) получают пентралнзавнеп в первом с.к п; :рокарбо-наюм ширин, а' во п;ором капжпл ларбоал. ол Ллр:-;.о м;тп-4010 раствора па стадии П1-5. 0.",р«.:о,;а,нну;' с-.; соль ос; .кла-г)г из йодного раствора спиртом и и ивертачж . рисиа.г.пл'шн.

Оба препарат должны отвечать требоваапжл ГУ (И-3-1 ¡'З об.

II.) швиг кормовой — сын'. чан масса, коюру.о голечаал потом н.шедьченш! некондвнноь'ПАЧ по форме п р .. морам табле-10к п ядер драже -?Ревт>> 1:0 З'О ¡21373 а таЗд-то.. аскорбиновой кислоты (витамин С) но 1>с,.С ¿2-163331. А 1 г подаенга содержи ген; гп га.мпиа А—0,03621 —З.ЗЗ1; 33 тиамина—0,0 3123---0,'л3032; рибофлавина — 0,00321—'л,03389; асклрЗд .овол кислоты — 0,0091—0,0169. Остал:»и\ 10 .массу состав.!:,;от наполнители (сахар, крахмал, глюкоза, мука пшеничная).

3.2. Токсикологические свойства препаратов

/¡Дбо сорбовита при однократном желудочном введении для белы:; мышеи составила 18,6, для белых крыс — 19,4 г/кг.

Нпцевит и кальцевит, введенные в полость желудка в максимально допустимых объемах, не вызывали токсического действия и гибели белых мышеи и крыс. При однократном внутри-брюшинном введении кальцевита ЛДзо Для белых мышей составила 1180, для крыс — 1260 мг/кг.

Полнвнт кормовой, введенный в форме суспензии в максимальных объемах внутрь, не вызывал токсических явлений и гибели животных. Учитывая, что поливпт кормовой практически соответствует «Ревнту» и «Витамину С с глюкозой», на которые имеются ФС 42-1676-89 и ВФС 42-1082-81, дальнейшее изучение его токсикологических свойств не проводили.

При длительном введении сорбовита н кальцевита внутрь в дозах 0,1 и 0,2 ЛД5о не обнаружено каких-либо существенных изменений клинического статуса, морфологического и биохимического состава крови, местнораздражающего влияния на слизистую оболочку желудка и кишок, патоморфологичеекпх изменении внутренних органов. Препараты не оказывали отрицательного влияния на функции сердца, печени и почек, не нарушали диурез и пищеварение.

Нацевнт, кальцевит и полпвит кормовой не проявляли ал-лергнзпрующего действия. Сорбовнт только в повышенной дозе (0,2 ЛД5о) вызывал слабую аллергическую реакцию.

Препараты не оказывали токсического влияния на плод п не нарушали последующего развития потомства.

Таким образом установлено, что препараты относятся к ма-лотокенчпым соединениям.

3.3. Ветеринарно-санитарная оценка мяса после применения сорбовита, нацевита и кальцевита

При проведении встерппарно-санитарпой экспертизы тушек цыплят-бройлеров, анализе биохимического состава мяса и его оргаполептпческой оценке установлено, что длительное назначение шнце изучаемых препаратов способствует улучшению качества продукции.

Так, при использовании нацевита в дозе 57 г/т белково-качс-ствспиый показатель мяса опытной группы цыплят-бройлеров был выше контроля на 15,1% (р<0,01). При включении кальцевита в кормосмесь для мясных цыплят снижалось число животных с аномалией развития костной ткани (утолщение эпифизов

К)

болыиеберцовой и бедренной кости, искривление грудной кости) до 7,5% против 22,5% в контроле.

3.4. Фармакологические свойства препаратов

Фармакокинетика препаратов после внутреннего применения характеризовалась тем, что содержащаяся в них аскорбиновая кислота быстро всасывалась в желудочно-кишечном канале и распределялась в органах и тканях в оптимальных для организма количествах.

Па фоне применения сорбовита, нацевпта, кальцевпта и по-ливпта кормового внутрь содержание витамина С в плазме крови и печени было не ниже, чем от эквивалентных доз официального препарата аскорбиновой кислоты. Содержание витамина С в печени цыплят опытных групп находилось в прямой зависимости от назначаемой дозы. Например, у цыплят, получавших сорбовит в дозе 0,5% от массы корма, в печени содержалось витамина С 25,6±1,03, у получавших дозу 1% — 25,8±0,93, у получавших 2% — 27,9± 1,01, 3% — 28,3±0,99 мкг/г, тогда как в контроле только 20,8± 1,07. При добавках к корму поливита кормового в дозе 4 кг/т в печени содержалось 25,5=^0,51, от дозы 6 кг/т — 27,9±0,41, от 8 кг/т — 28,9±0,55 мкг/г, что выше, чем в контрольной группе, соответственно на 29,1; 41,5 и 46,4 % (р<0,05—0,01). Такая же зависимость, но на более высоком уровне, отмечена и в отношении нацевпта и кальиевита.

Помимо улучшения С-вптаминпой обеспеченности организма па фоне применения изучаемых препаратов наблюдалось увеличение числа эритроцитов, содержания гемоглобина в крови и гематокритпого числа; была выражена тенденция повышения в сыворотке крови уровня общего белка, достоверное увеличение концентрации кальция и спижепнс—холестерина. Величина этих изменений определялась н свойствами препаратов и их дозами. Вместе с тем они повышали показатели резистентности организма птиц.

Наиболее эффективная доза сорбовита (2% от массы корма) вызывала у цыплят увеличение числа эритроцитов в крови па 8,7 (р<0,05), концентрации гемоглобина — на 9,2 (р<0,05), гематокритпого числа — па 15,8% (р<0,001). В сыворотке кровп содержалось больше общего белка (на 16,8%, р<0,001) п существенно возрастала доля в нем бета-глобулинов (на 16,1%, р<0,001).

При применении нацевпта сдвиги гематологических показателей наиболее существенными были от дозы 170 г/т. По сравнению с контрольной группой цыплят, получавшей норму аскор-

биновоп кислоты, у цыплят, потреблявших комбикорма с наце-витом, содержание в крови эритроцигог. было выше па 13,Г> (р<0,()1), гемоглобина — на 19,8% (р<0,05). Возраст а ли оиъ-ем форменных элементов по отиошеш;»'. к нла:;ме — па 18,,')'/о (р<0,()5), доля бста-глобулппов в белке — па 51,1 % (рМ),0Ь) концентрация кальция в сыворотке — па 8,5% (р<0,001). Содержание холестерина в сыворотке крои! снижались на 17,2%, а активность AcA'i'сосгавйла лиш!> 80,1% к контролю.

У цыплят, получавших добавки кальцевпта в дозе 180 г/т, по сравнению с контрольными, в рационе которых С-вптампппое питание корректировалось до нормы, число эрптроцншв в крови было больше па 13,3 р<0,001), содержание гемоглобина — па 7,8% (р<0,05), величина гемагокрита — па 10,7% (p<0,00i). Содержание кальция в сыворотке повышалось па 5,5% (р<0,05).

По положительному эффекту большие дозы пацевпта (570 г/л) и кальцевпта' (G00 г/т) незначительно отличались от оптимальных доз. Токсических сдвигов при этом не зарегистрировано.

Для кур-несушек кальцевит оказался более эффективным, чем аскорбиновая кислота, по показателям гимопоэза: увеличение числа эритроцитов на 8,0, гемоглобина—14,7, гемагокрита— 23,3%, (р<0,01); содержанию общего белка (больше па 29,9%, р<0,001) и кальция (больше па 13,2%, р<0,05) в сыворотке крови. Он увеличивал в общдм белке долю гамма-глобулинов (на 20,2%, р<0,001) за счет снижения содержания альфа-фракции.

При испытании добавйк полнвпта кормового к комбикорму в дозе 4,6 и 8 кг/т морфологические и биохимические показатели крови цыплят изменялись мало, хотя в целом можно отметить их улучшение. Достоверно изменялось лишь содержание общего белка (увеличение па 14,9—28,9%), кальция (увеличение па 7,9—10,0%) и холестерина (снижение на 14,3—17,4%). Дозы полпвпта 0 и 8 кг/т по данным морфологических и биохимических исследовании не имели никаких преимуществ перед дозой 4 кг/т. В то же время повышенные дозы не вызывали каких-либо нежелательных изменении в картине крови. Активность трапеамппаз оставалась па уровне контроля.

После применении препаратов улучшались показатели неспе-цифичсскон резистентности организма. У цыплят, получавших иацевит, бактерицидная и лпзоцпмпая активность сыворотки крови. Он увеличивал в общем белке долю гамма-глобулинов (па ответственно на (5,7 (p<0,'001), 7,2 (р<0,()01) и 2,8% (р<0,05), увеличивалось содержание в сыворотке иммуноглобулинов (па 0,84 сд., р<0,001). Зтп же показатели после введения кальцевпта достоверно превосходили контроль па 5,9, 6,1, 3,0% и 0,59 ед.

1с менее значимая коррекция резистентности происходила и па юие применения ноливита кормового. У цыплят, получавших репарат, наблюдалось увеличение бактерицидной (па 6,4%, <0,001) и лизоцимной (па 6,6%, р<0,001) активности сыворот-:и крови, фагоцитарной активности лейкоцитов (на 2,9%, <0,05), содержания иммуноглобулинов (на 0,70 ед., р<0,001).

Корректирующее влияние сорбовпта на резистентность ока-алось значительно слабее: после 40-суточного его назначения у нытных цыплят повысилась бактерицидная (на 4,0%, р<0,05) лпзоцимная (па 6,5%, р<0,001) активность сыворотки крови, эгда как изменения двух других показателей не выходили за ределы статистически вычисленных колебаний ошибки разпос-и с контролем.

Кальцевит и полпвит кормовой, дополнительно введенные в балансированный рацион за 3 дня до и 3 дня после первой вак-ииацни цыплят против болезни Ныокасла, на 8-е сутки с мо-епта поступления антигена в организм способствовали повы-[енпю группового иммунитета до 100, а сорбовит и пацевнт при }.ч же условиях — до 88—89 прп контрольном показателе 51 %. пдпвндуальные титры сыворотки РЗГА в опытных группах эстпгалп 1:2048, тогда как в контроле не превышали 1:512. В )-суточиом возрасте все подопытные цыплята, кроме получав-нх сорбовпт, были защищены п имели высокие титры. Защи-енность цыплят, получавших сорбовит, осталась па прежнем ювне, а контрольных составила 68%.

Таким образом, изученные препараты обладают высокой армакологической активностью для сельскохозяйственной пти-л.

3.5. Изучение лечебной эффективности препаратов при С-гиповитаминозе птиц

После двухнедельного содержания па основном рационе, лючающем стандартные внтаминно-мпиеральпые добавки, за ключеннем аскорбиновой кислоты, у подопытных цыплят-ойлсров снижалось потребление корма, ослаблялась двнга-льиая активность, кожный покров и слизистые оболочки ставились бледными, увеличивался падеж. На вскрытии обнару-шались небольшие кровоизлияния под кожей. В плазме крови льпых содержание витамина С было в пределах от 0,48±0,01 0,58±0,02; в печени — от 4,01 ±0,28 до 5,29±0,29 мг%. Начиная с 15-суточного возраста цыплят разделили на 5 упп и до конца выращивания (56 сут.) они получали по груп-м корректирующее С-вптампнпос питание: добавки сорбовн-

та (3% к комбикорму), иацевпта (170 г/т), кальцевпта (180 г/т) п поливита кормового (6 кг/т). В контрольной группе корректп ровка С-витампнного питания не проводилась. Результаты опыта представлены в табл. 1.

Т а б л м ц а 1 Результаты 40-суточного применения препаратов С-гиповита^инозным цыплятам-бройлерам

Контроль

О и ы т н ы с, и ол у ч а «ш п е

сорбовит нацевпт

кальцевпт

Кол-во цыплят: в начале опита в конце опыта Живая масса в конце опыта, г Среднесуточный прирост, г Затраты корма (п 1 кг прироста, кг Выздоровело цыплят, гол. Сохранность, % Больных к моменту убоя, гол. Содержание витамина С, мг%: в печени в плазме крови

зоо 300 300 300 300

168 213 246 243 231

1214± 15,3 1590± 16,1 1670± 18,1 1602-17,8 1612± 16,

21,0 27,8 29,2 29,1 28,2

3,97 2,71 2,81 2,86 2,98

12 41 81 77 63

56 71 82 81 77

32 7 0 1 3

17,5±0,78 26,0 ±0,41 28,7±0,53 29,0 = 0,61 27,8 ±0,5

1,61 ±0,19 2,01 ±0,17 2,18 ±0,18 2,21 ±0,20 2,11 ±0,1

Как видно из таблицы, по количеству выздоровевших цыпл: и сохранности наиболее эффективными были нацевит и кальи вит, пм несколько уступал полпвпт кормовой и минимальиг эффект получен от сорбовнта. В такой же последовательное' препараты распределял7сь по приросту массы тела к концу в ращиванпя и содержанию витамина С в плазме крови и печег Однако по затратам корма на килограмм прироста лучшие п казатели были от применения сорбовнта, что можно связать наличием в нем других биологически активных веществ, обра; ющнхея при ферментации сорбозы.

При этом нормализация картины крови происходила в п пичном для действия препаратов направлении (повышен уровня витамина С, стимуляция гемоноэза, увеличение кальи в сыворотке крови, снижение холестернпемии и т. д.).

По терапевтическому действию испытанные средства можно юставпть в следующем порядке (от минимума к максимуму эффекта): сорбовнт — полнвит кормовой — кальцевит — нацевит. ^-витаминная активность препаратов находится в прямой зави-имости от содержания в их составе аскорбиновой кислоты.

Следовательно, препараты обладают выраженным терапев-ическнм действием при гиповитаминозе С.

3.6. Изучение профилактической эффективности препаратов при С-гиповитаминозептиц

У цыплят, получавших с 5-суточного возраста в качестве до-авки к корму один из препаратов (сорбовнт — 2% от массы ьедаемого корма, нацевит — 57 г/т, кальцевит — 60 г/т или по-чвпт кормовой — 4 кг/т), при ежедневном наблюдении до кои-з выращивания (56 сут.) не выявлено никаких признаков -гиповитаминоза. Они активно поедали корм, имели хорошо сраженный ориентировочный рефлекс. Их перьевой покров менялся в нормальные сроки, был гладким н чистым. У цыплят е контрольной группы, содержавшихся на том же рационе, но з витамина С, быстро развивались признаки С- авитаминоза.

Сравнительные данные о росте и сохранности цыплят но упнам представлены в табл. 2.

Т а б л и ц а 2

Эффективность использования препаратов с целью профилактики гиповитаминоза С у цыплят-бройлеров

Группы

11оказлтели 1 (контроль) 2 | 3 I 1 (сорбопит'| (нацепит)! (кальцевит) о (полнвит)

¡-во цыплят, гол начале опыта конце опыта 300 171 300 258 300 273 300 267 300 264

Зраковано пос-убоя, гол. ранность, "о 38 57 3 80 0 91 0 89 2 88

дпяя живая :а 1 гол. в 1е опыта, г 1211,9± 21,32 1671,4± 18,20 1724,1 ± 17,71 1721,3± 19,82 1699,6 ± 19,33

ища с коптим, г _ + 459,5 + 512,2 + 509,4 + 487,7

тнссуточпыи юст, г 21,0 29,2 30,2 30,1 29,7 '

>аты корма на прироста, кг 3,97 2,70 2,67 2,67 2,69

Т а б .ч и и а .3

Содержание витамина С в плазме крови и печени подопытных цыплят

Пла зма крови Печень

Группы разница разница

мг% с конт- Р мг% с конт-

ролем, ролем,

МГ /о мг %

(контроль) 1,72 ±0,22

(сорбовнт) 2,19 ±0,17

(нацепит) 2,23±0,21

(кальцевнт) 2,17±0,18

(полпвит) 2,22 ±0,19

— — 17,81 ±0,67 — _

0,47 >0,05 27,11 ±0,55 9,30 <0,001

0,51 >0,05 29,31 ±0,72 11,50 <0.001

0,45 >0,05 29,20±0,82 11,39 <0,00

0,50 >0,05 28,18+0,71 10,37 <0,00

Т а б л и ц а 4

Эффективность использования препаратов с целью профилактики гиповитаминоза С у кур-несушек

Группы

Показатели 1 ^контроль) 2 (сорбовнт) 3 (нацечлп) 4 1 5 (кальцевнт)|(полнии

Колнч. птицы, гол: в начале опыта в конце опыта Сохранность, % Средняя живая масса 1 гол, г: н начале опыта

в конце опыта

Санбрак, гол. Интенсивность яйцекладки в среднем на несушку, % Средняя масса 1 яйца, г Показатель упругой деформации скорлупы, мкм Средний показатель качества бел ка, ед. Хау Затраты корма на 10 яиц, кг

220 172 78,2

1611,2

± 15,9 1796,3 ±16,2 19

47,7

220 203 92,3

1609,7 ±16,1 1831,4 ±15,7 2

б 1,3

50,6±0,26 52,8±0,31

220 206 93,6

1611,1 ±15,1 1848,1 ±16,1 2

61,7 53,1 ±0,22

220 211 95,9

1613,7 ± 14,9 1851,2 ±15,2 1

64,4 54,2 ± 0,25

75,3 ± 0,54 76,9 ± 0,51 1,59 1,57

220 205 93,2

1612,с ±15,6 1843,'; ± 16Д 3

53

62,5 ,0±0.

18,2±0,28 !8,9±0,26 19,1 ±0,23 21,1 ±0,28 19,3±0,

78,3 ±0,48 78,4 ±0,49 77,1 ±0, 1,57 1,57 1,57

Из табл. 2 видно, что в контрольной группе за время наблюдения пало 129 пыплят. На вскрытии обнаруживали истощение, геморрагический диатез, анемию, осгеопороз и другие признаки С-внтамнппой недостаточности.

В группе, получавшей сорбовпт, паткартппа С-пшовптамп-поза выявлена у 9 цыплят. В остальных группах падеж регистрировался в первые 6 суток и он не был связан с недостатком витамина С.

По всем показателям, приведенным в таблице, наилучшие результаты получены в группах с применением нацсвнта и кальце-впта, далее следует поливпт кормовой и менее значимый, но существенный эффект дал сорбовпт.

Результаты исследования содержания витамина С в плазме и печени в этом эксперименте приведены в табл. 3.

Из табл. 3 видно, что в плазме крови цыплят ¡опытных групп витамина С содержалось больше, чем в контроле, однако эта разница была статистически мало значимой. По содержанию витамина С в печени разница с контролем оказалась более существенной.

С-витамнппые свойства препаратов изучались также на клинически здоровых курах. В период с 23-до 46-псделыюго возраста кур переводили па основной рацион без обычных добавок аскорбиновой кислоты. Опытные группы получали один из испытуемых препаратов в указанных выше дозах. В контроле витамин исключали. Результаты этого опыта представлены в табл. 4.

Из табл. 4 видно, что у кур, содержавшихся на дефицитном по витамину С рационе, за время опыта увеличился надеж и снизилась продуктивность. Добавки же препаратов к комбикорму предотвращали эти негативные изменения и поддерживали высокую продуктивность. По большинству показателей наиболее эффективным оказался кальцевнт, далее следуют нацепит, подивит кормовой п сорбовпт.

Куры, получавшие наиевпт, кальцевнт и поливпт, отличались в конце наблюдения от контрольных более высоким содержанием витамина С в печени (121,6±2,76 до 129,9±3,01 мг% против 111,3±3,33, р<0,05—0,01). По сорбовиту существенность этого отличия статистически пе подтверждаюсь.

В плазме крови всех кур к началу опыта содержалось витамина С в пределах 1,71 ±0,31 — 1,88 — 0,62 мг%. В копне наблюдения в контрольной группе содержание витамина снизилось с 1,87±0,72 до 1,61 ±0,15 мг%, тогда как в опытных группах повысилось до 2,51 ±0,30, но статистически значимы эти данные были но катьцевпту.

Таким образом, проведенными опытами установлено, что введение препаратов в состав комбикорма взамен аскорбиновой кислоты предупреждало С-гиповитаминоз и его последствия, способствовало высокой энергии роста молодняка и продуктивности взрослой птицы.

ВЫВОДЫ

1. На основе побочных продуктов промышленного производства аскорбиновой кислоты разработаны препараты сорбовит, нацевит, кальцевит и поливит, содержащие наряду с аскорбиновой кислотой другие биологически активные вещества.

2. Сорбовит, нацевит, кальцевит и поливит кормовой являются малотокепчиыми препаратами. Их среднесмертельная доза при внутрнжелудочиом введении составляет: сорбовита (для мышей) 18,6±1,3 и (для крыс) 19,4 1,2 г/кг; нацевита, кальцеви-та и поливита кормового более 5000 мг/кг. При однократном и длительном пероралыгам введении препаратов белым мышам и крысам, кроликам и морским свинкам, цыплятам и взрослым курам в количествах, десятикратно превышающих эффективную дозу, не выявлено побочного действия на поведение, интенсивность роста молодняка, функции сердечно-сосудистой системы, пищеварение, кровь и ее состав, диурез, детоксицирующую функцию печени, гистоструктуру сердца, печени, почек. Они не оказывают местнораздражающего и эмбриотоксического влияния и в рекомендуемых для применения дозах не проявляют аллергизи-рующих свойств.

3. Добавление препаратов к комбикормам взамен аскорбиновой кислоты в течение периода выращивания цыплят-бройлеров улучшает качество их мяса. Повышенные дозы увеличивают содержание сухого вещества в мясе и повышают его белково-качественныи показатель (на 2,8—13,1%).

4. Фармакокинетнка препаратов после скармливания их птице характеризуется быстрым усвоением аскорбиновой кислоты, оптимальным распределением ее в органах и тканях.

При этом содержание витамина С в плазме крови и печени как здоровой, так и больной С-гиповитаминозом птицы поддерживалось на уровне не ниже, чем при назначении эквивалентных доз официпальной аскорбиновой кислоты.

5. Фармакодинамика препаратов характеризовалась разносторонним фармакологическим действием. При этом отмечалось: увеличение числа эритроцитов, гематокрита (на }0,8—23,4%) и

гемоглобина (на 9,2—19,8%); рост концентрации кальция (на 0,9—13,3) и снижение содержания холестерина (на 2,7 — 15,4%); повышение — общего белка сыворотки крови при достоверном увеличении в нем фракций бета-глобулинов (на 2,9—51,1).

Назначение нацевита, кальцевита и поливита кормового стимулировало фагоцитарную активность лейкоцитов (на 3,8 — 5,4%), повышалась бактерицидная (на 8,3—13,2%) и лизоцим-ная (на 14,8—17,5%) активность сыворотки крови, повышало содержание иммуноглобулинов (на 4,8—28,7%) в сыворотке крови. Сорбовит восстанавливал лишь бактерицидную и лизо-цимиую активность сыворотки.

Вместе с тем препараты активизировали гуморальный иммуногенез против болезни Ньюкасла у птицы.

6. Применение препаратов цыплятам и курам-несушкам на фоне С-гиповитаминоза ослабляет (сорбовит) либо полностью прекращает (нацевит, кальцевит, поливнт кормовой) его клинические проявления. При этом повышается содержание витамина С в плазме крови и печени, нормализуется морфологический и биохимический статус крови, возрастает интенсивность роста п продуктивность птицы, стабилизируется сохранность поголовья.

7. Введение нацевита, кальцевита и поливита кормового в рационы, не скорректированные премпксом по витамину С, предотвращает развитие С-гиповитамипоза у цыплят п взрослых кур и поддерживает на нормальном или высоком уровне интенсивность роста, яйцекладку, массу и качество яиц, оплату корма продукцией, сохранность поголовья, морфологический п биохимический статус крови, содержание витамина С в плазме крови и печени. Сорбовит действует в том же направлении, но уступает в эффективности этим препаратам.

8. По комплексному фармакологическому воздействию кальцевит и пацевит могут служить полноценными заменителями аскорбиновой кислоты, а поливит кормовой н сорбовит дополнительными факторами корректировки С-витаминного питания, а также в качестве ростостимулирующих средств.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ

Препараты нацевит н кальцевит рекомендуется использовать в составе витаминно-минеральных премиксов или в качест-зе витаминной кормовой добавки с целыо лечения С-гиповита-линоза птицы в дозах 170 и 180 г/т соответственно, с профи-тактической и ростостимулирующей целыо в дозах 57 и 60 г/т эдип раз- в сутки.

Поливпт кормовой предлагается для корректировки поливитаминного питания птицы и стимуляции ее продуктивное!и в дозе 4—6 кг па тонну корма.

Сорбовпт рекомендуется использовать в качестве витаминной кормовой добавки с целыо повышения продуктивности птицы в дозе 2% от массы корма.

Список научных трудов, опубликованных по материалам диссертации

1. Мерзлепко О. В., Далии В. П., Сироткпиа Л. И., Купина Е. В. Сорбоза-маточппк в кормлении бройлеров //Повышение уффектнвности приготовления и использования кормов: Сб. научи, тр. — Белгород, 1987. — С. 52—57.

2. Мерзлепко О. В. Использование в составе вшамшшого премпкеа для цыплят-бройлеров отходов таблетных цехов но производству ревнта п внта-мпиа С с глюкозой //Биологические основы-интенсивного животноводства; Сб. иаучн. тр. — Белгород, 1988. — С. 149—155.

3. А. с. 1387959. Кормовая добавка /Ю. М. Маслов, Л. И. Снроткипа, Е. В. Купина, М. Л. Меритукова, Т. К. Алимов, В. С. Закорко, В. 11. Далии, О. В. Мерзлепко, Л. А. Шапошников — Л1> 4064У24; Заявлено 31.03.86; Опубл. 15.04.88, Бюл. № 14 //Открытия. Изобретения. — 1988. — Л» 14. — С. 20.

4. Мерзлепко О. В., Даллп В. П., Молчанов И. А., Кео Чантарп. Использование отходов ог производства «Ревнта» п витамина С при выращивании цыплят-бройлеров //Вопросы интенсификации производства с.-х. продуктов: Мате]), иаучн.-теоретнч. конф. в г. Москве (14—17 июля 1989). — М., 1989.—

5. Использование сорбозы-маточппка в рационах мясных цыплят /Сост.: Мерзлепко О. В.—Белгород, 1989,—2 с. — (ИЛ/Белгородский Ц11ТИ, X» 297).

С. Использование отходов, получаемых при производстве «Ревнта», в рационах цыплят-бройлеров /Сост.: Мерзлепко О. В., Картамышева II. В., Чумакова Е. Д. — Белгород, 1989. — 2 с. — (ИЛ/Белгородский ЦИТИ, № 282).

7. Применение отходов, полученных при производстве аскорбиновой кислоты с глюкозой, в рационах цыплят-бройлеров. /Сост.: Мерзлепко О. В., Картамышева И. В., Чумакова Е. Д. — Белгород, 1989. — 2 с. — (ИЛ/Белгородскин ЦИТИ, № 283).

8. Мерзлепко О. В. Использование отходов витаминного комбината при выращивании бройлеров. //Экологические проблему фармакологии н токсикологии: Тез. докл. иаучн.-конф. в г. Казани (25—27 сентября 1990 г.). — С. 63.

Подписано п печать 25.09.92. Формат 00x84/10. Гарнитура литературная. Печать высокая. Усл. п. л. 1,10. Уч.-изд. л. 1,25. Тираж 100 Заказ 3583

С 95—97.

Ракитянская районная типография. 309310 п. Ракитное Белгородской области, пл. Советская, 6