Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Эпизоотология бруцеллеза крупного рогатого скота в Нечерноземной зоне Российской Федерации и система оздоровительных и профилактических мероприятий

-г

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

о САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ " АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ

УДК

На правах рукописи 619:6 16.981.42:636.22/.28 (470.31)

СТАРУНОВА Нина Петровна

ЭПИЗООТОЛОГИЯ БРУЦЕЛЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В НЕЧЕРНОЗЕМНОЙ ЗОНЕ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ И СИСТЕМА ОЗДОРОВИТЕЛЬНЫХ И ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ МЕРОПРИЯТИЙ

16.00.03 — ветеринарпая микробиология, вирусология, эпизоотология, микология И ИММУНОЛОГИЯ

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Санкт-Петербург — 1995

Работа, выполнена в Нижегородской Государственной сельскохозяйственной академии, в НИВИ ИЗ РФ, хозяйствах, райшшых и областных ветеринарных лабораториях Нечерно-зе^цой. зоны Российской Федерации

Научные консультанты:

доктор ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент Россельхозакадемии В. В. Сочнев.

доктор ветеринарных паук, профессор, академик Р^се™'--хозакадемии, заслуженный деятель наук Российской Федерации В. П. Урбан.

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор А. Н. Борисенкова

доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель наук Российской Федерации К. М. Салманов.

доктор ветеринарных паук, профессор А. А. Есглевский

Ведущая организация:

Донской государственный аграрный университет

Защита состоится,17 мая 1995 г. в 11 часов на заседании совета по защите докторских диссертаций Д 120.20.02 при Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины (196084, Санкт-Петербург, Черниговская, 5).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины.

Автореферат разослан » ..........И^.У......................... 1995 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доцент О. В. Узюмова

(№."í!AH XAPAÍCfliPíWíiKA PALOÏli Актуальность томя. Ьру;;0ЛЛ1 как ХРОЦПЧООЖП tío-e?«!,, но яр<шшну ялляетоя o;w.n» из эктупльннх прошлом «.•0!-p"*"íU!inii и««/гци»;и я ьстгфшпф';.'!. Но даянии С.Н.Ии'ячл'.-ссгого (W>4), M.'t.kîWflna (ISíjO), Ц.Ф.^дродорокого U"'^;, iî.A.l'tîpixwwnii (!Л>?''0, К.и.Орлопа КУЛь), i;.H..Урбана С I Sí : ¡, !!, !>. I зрып (IPiJO), К.В.Нуииловл (!.9'У)), М.К<к»глоич 11900), V.X.Axpmiu (1987), Д.Л.Новицкого {19&7J, Н.Ь.Оочиепн (L5№) и од nix последователей бруцеллез предо лвлчо? посточияуа эпизоотичсокуч я зпзд'Л!ичг.'Скуя угрозу. }я>яс:ть рсгнотрирупоч :к> мяоин «трп -пах мира (J.K-jJ lar, в-гм "•:■>, ¡, 7!rck, r»?''» ».';<>«<•:,<>,

1')aO| З.ЗоЬтЛогт.", I.?V5; ГГ-rvoUi, r».P!<wft,

В Российском Фед'-.рг.щип до eux »fji ряд if.'pjK'ioj.wtimx « национальных образовании оетигск и>:'>.|тч)н0 1,/чч;-чт по г»рупо*~ лезу ¿ияотинх, "в онилаоглч и сопяолмю-сксмо'м'к-скпя я«ачч~ кость ото;; Оол^чик,

изншенпч отру;;ту(ч1 я тчуиотргяп r'vyutm .»кяопктолстьз. яозникавлис на fane vxfmwvihurpii рр|срчя трлдчто хозчИгп.'. оконоиич»ско-з, опорготичсокоо п ек'иппп'л'гссн д-ччедг«« m оояьскохозяь'отконноо iipft'Kivv/i'; ; on ¡мло/ч ïr wwii i m ;;'">■> .ч-бильнсоти na «пизоотач'/жу» coi y »mi. !Ьзяп«»з»'т о.'.^лпчмш'"* измпи«ч«ш-о nponiwmm '¡ело ««»и mwwK, п т«/« ччеле и с-ру-мешич-з. !!":1лл"яче ичиои'чшнх 'Нч'п бруичлл "уч:1'! аыыо нглгет нродстзядспия о хврчкт' ;•'• ч«и "»кччфпгогр и от ч>(У!>:->:%ох<ч о щ-оцоосп при oo.ii.'jn !,

.-Ь лоа.::':;;н'Л(; iодм я írtt'j р.чмпйо", бия* eins-, чянх >;ру-

1Н.'ЛЛ?Г!/ иИТ-РЧШ-'У . '»"I !í-" '.fi'l'í'X ÍI'J Л<' f'-'4itii V ; ' '71' If" ' Ч i " ' -т^пиг.-, ji ':,,'f'Dpt.'T!t<3 <ti'<; ,! KO'i'!;w kí'í' ;:лэт

Г!РГЦЦО p pi;?r.íV.irV 'i ÏÎ '1-4 'l^MIT ":rt '!I í:■:.•"!, /-ГЧ11." 1

исследованиями установлено, что в ряде случаев проявление таких реакций связано с заражением животных не бруцеллами, а другими микроорганизмами, имеющими о шши антигенное родство. Ъ регионах, применяющих в системе противобруцеллезних мероприятий специфическую профилактику, нередко появляются случаи индукции противобруцеллезних антител под воздействием гетерогенных раздражителей.

Проведенные научные иоиски последних лет по выяснению причин возникающих парадоксов в проявлении инфекционного и эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого скота не смогли в полной мере ответить на поставленные вопросы.

До сих пор ветеринарные специалисты не вооружены надежными способами оперативного выявления латентных форм бруцеллеза, идентификации и дифференциации бруцелл, дифференциальной диагностики спонтанного бруцеллеза и поствакцинальных последствии. Имеется необходимость совершенствования системы противобруцеллезних мероприятий с учетом региональных особенностей ведения животноводства и эпизоотической ситуации.

Неблагополучие ряда регионов ИЗ РФ по бруцеллезу крупного рогатого скота к 19Ы( году, высокий риск возникновения эпизоотических очагоь болезни в настоящий период определила выбор темы.

Цель работы; изучить эпизоотический процесс бруцеллеза крупного рогатого скота в различных регионах Р4? и на атой ое-

рьзриоотатъ и предложить новые подходи по формирование основных направлений прогнозирования эпизоотического процесса бруцеллеза и его упражнению,

Ь задачи кссьелований входило;

Изучить мшзоитачьскии процесс при оруцилльза группе» I с рогатого олони ь рьзлнчиих природно-климатических уелоачах 1 и.^т.^мн: *ь-дц,ыщ1и

2. Усовершенствовать и оптимизировать оценку методов эпизоотологической диагностики бруцеллеза крупного рогатого окота - как элемента эпизаотологического мониторинга при зтоа инфекции.

3. Дать оценку системы специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота - как элемента управления эпизоотическим процессом бруцеллеза.

Н. Предложить научно обосновзнн/п систему протнхюо'руцел-яезных мероприятий с учетом региональных особенностей проявления эпизоотического процесса и степени риска этой инфекции»

Научная новизна. Б настоящей работе вперпио в срятиш-тельном аспекте изучены особенности проявления эпизоотическо го процесса бруцеллеза крупного рогатого скота л рпэличтх регионах ГФ я зависимости от природно-климатических и хозял-ственно-экономических условий. Методами современной прогностики (фактографии, экспертных оценок, пряной, косвенной и инверсивной .верификации) определены основные факторы риска и рогрп» ботаны методц оценки эпизоотической ситуации по бруцеллезу. Усовершенствованы и оптимизированы способы эпизоотологлчесчоУ диагностики для проведении штэрогологичоокого мониторинга при бруцеллезе. Впервые разработаны днфференцярзпончнэ способы сдерживания развития эпизоотии бруцеллеза и определена основные подходи управлении эпизоотическим процессом бруцеллез;) крупного рогатого скота в различнчх регионах Российской Федерации.

I! р н к г и чес кяя ценность. Доказано, «то япизоотач^кий процесс при бруцеллезе крупного рогатого скота - иролгос упрпр-ляоныЗ, а 1 iiK.se ноооходимость пгх?тоянчто оогири^чстротпия систем« по одерхипвни« его развития. Опрчлол<-нм роль и место

ирСфиШ.-ЛТШИ 1) СИСТОМО ИрО'ЫЬООру цаллъзицх 1-К;-рОГ.рИаТ'ИИ и рйЗЛИЦиЬХ ¡.сгионмх

^квлаяуяие па «миошвии многолетних исслсдоодиш поло*е-акия«с1 оспиной для разработки научно обоснованной оисте-" ни по упраьлвшш онизоотичсский прицелам ируциллеза крупного рогатою окота ь Исчсуцоаимиои ионе Р'£, Нижний Ноюоя&ьо, ^е-ьораом Кавказа к ьоалп л опоццалыше издшшя: "Рохоыеидыдеи по профилактика и лшитдацни бруцеллеза крупного ¡шкитого окота ь хозластнах Рязанской оОлаотн", одойрчинио Рязанского соли-аодиома (19И5); "Научно оиосиоъааная иистома проаквобру-цоалилшх мероприятии и Нечерноземной зоне КгСР", одеоредншя Деаартамоатои шл'орииириш (ГУВ) Мицсольхоаироди Р'* ЦШ7» 1991); '^Дифференциальная диагностика бруцеллеза и и-зренииоза и меры но их профилактике" (1591), "Нвтраднциотши неводи исследования при дифференциальной лиагноетикв оруцмыоза иаьоу-1ш>," (И'9<»), одобренные Донартааентои ьстеринирни Минсельхозпрода "Комнлексний план профилактики иерсиниоза крупного рогатого скота в условиях Северного окоиомйчоского района Р!'", илобрсипай управлением сельского хозяйства администрации Архангельской оолийти (1954), а илап-прогаоэ ссецпааышх шкее-р,ширин* мероприятий но профилактике и ликвидации бруцедлоза и. туберкулеза сроди ои.пскохиаяистнскних лиаотних ь областях, кроях и 1»лтг.11о;ших республиках Росиииокон «одерациь на 19о9-1993 роди (№•)),

'»•¡»¿¡нии положения, ^иноаниие на зацпту; - ньима попеьо^ого пропшзироьакля при оруцалдьЗо и ««ршл«.^ анизиотичьСкого процесса при оруцоллозе крупного Гоплен, охота 1 раз;,».ах ригиоких

- элементы эпиэоотологического мониторинга - эпизоотоло-гическая диагностика бруцеллеза крупного рогатого скота;

- роль и место специфической профилактики в системе про-тивобруцеллезных мероприятий в регионах с различной степенмп риска возникновения и распространения болезни:

- система по управлению эпизоотическим процессом бруцеллеза на основе исследовательского и нормативного прогнозирования развития опизоотий этой болезни".

Пути реализации. Результаты исследований могут бить использованы при разработке исследовательских и нормативных прогнозов развития эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого скота и определения его социальной опасности, а также при разработке научно обоснованных систем по управление эпизоотическим процессом бруцеллеза в стране и отдельных эе экономических районах с учетом степени риска развития опизоотий этой болезни.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на заседании методической комиссии ветеринарного факультета Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии (Н.Новгород, 1993-1994)} на заседании секции."Лгроэкологичё-ские проблемы " 1 Международного Славяно-Евразийского конгресса деятелей науки, культуры, предпринимательства (Н.Новгород, 1994). на Всесоизных конференциях "Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным" (Новосибирск, 1989), "Ш Всесоюзная конференция по эпизоотологии" (Новосибирск, 1991), "Современные проблемы иммунологии, биотехнологии, генной и клеточной инженерии в ветеринарной медицине" (Н.Новгород, 1990), на Всероссийской научно-практической конференции "Гигиена, ветсанитария и

ййоаошя лшотноводотва" (Чебоксары, 199ч)г иа ниучно-нроаз-ьодотдешшх конференциях: "По актуальным вопросам ветеринарии" (Горький, "Профилактика н лечение заболевании сельско-

холдпсгт.пих киьоншх в Нечерноземной зоне РСФСР" (Горький, 1965), "Профилактика и лечение болезней сельскохозяйственных животных" (Вологда, 19Ь6), "Интенсификация животноводства VI кориопролзводства в Нечерноземной зоне РС$0Р" (Йошкар-Ола, 19М6), "Достижения ветеринарной науки и передового опыта -животноводству Нечерноземной зони РСФСР" (Горький, 198Ь), "Пути интенсификации производства молока и мяса, профилактика болезней сельскохозяйственных животных в современных условиях" (Смоленск, 1992), "Проблемы диагностики, профилактики и лечении сельскохозяйственных животных в Нечерноземной зоне" (Нижний Новгород, 1992); на совещании "О перспективах развития животноводства и ветеринарии в ХШ пятилетке (Ленинград-Пушкин, 1990), на семинарах руководителей агропромышленного комплекса, ветершшрних специалистов и научных работников по совершенствованию мероприятий по профилактике и ликвидации бруцеллеза и туберкулеза (Сяопин, Шилово, Касимов Рязанской области,

П'лтелино Рязанской области, 1965), на заседании НТО Аг-рокомитета Рязанского облисполкома (Рязань, 19И6), на заседании НТО Госагропрома НЗ РФ (1990), на заседании секции инфекционных и инвазионных болезней сельскохозяйственных кивотних Россельхозакаднмии (1991), на заседаниях Ученого Совета НИЩ 113 РФ (19(й_1994), на межкафедральном заседании профессорско-преподавательского состава Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии (1992-1994).

Материала диссертации опубликованы в'27 научных статьях, рекомендациях, методических указаниях, научных отчетах.

Внедрение. Результаты исследований в 1985-199') гг. под Авторским надзором с положительным эффектом внедрены в хозяйствах Рязанской, Архангельской, Нижегородской, Волгоградской и Ростовской областей. Подготовлен«, рассмотрены и утверждены НТС и изданы рекомендации: "Рекомендации по профилактике и ликвидации бруцеллеза крупного рогатого скота в хозяйствах Рязанской области" (1905), "Научно-обоснованная система про-тивобруцеллезных мероприятий в Нечерноземной зоне РСФСР" (1987 и 1991), "Дифференциальная диагностика бруцеллеза и иерсиниоза и меры по их профилактике" (1991), "Нетрадиционные методы исследований при дифференциальной диагностике бруцел-. леза животных" (1994), Методические указания по использованию нетрадиционных методов идентификации бруцелл, одобренные секцией инфекционных и инвазионных болезней с.х. животных Рос-сельхозакадемии (1991). Материалы исследований, изложенные в дисоертации, экспонировались на ВДНХ СССР (ВВЦ РФ) и удостоены серебряной медали (1991).

Объем работы. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, рекомендаций производству, библиографического указателя использованной литературы. Диссертация изложена на 412 стр. машинописного текста, иллюстрирована 65 рисунками и ЬЧ таблицами. Список использованной литературы включает 433 источника, из них 252 иностранных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалы, методы и обьем исследований. Работа выполнялась с 196'» по 199'» годы в лаборатории по изучению бруцеллеза животных Научно-исследовательского ветеринарного института Нечерноземной зоны РФ, на кафедре эпизоотологии и микробиоло-

гик Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии, ь хозяйствах и ветеринарных лабораториях ряда регионов Российской Федерации.

При изучении эпизоотологии бруцеллеза крупного рогатого скота в условиях Нечерноземной зоны и других регионов РФ были проанализированы:

- данные, полученные автором во время многолетних эпи-ао(лологических исследований очагов бруцеллеза;

- отчеты и статистические обзоры отделов (управлений) ветеринарии при администрациях краев и республик, районных станций по борьбе с болезнями животных, областных и районных ветеринарных лабораторий, областных центров Госсанэпиднадзора (СЗС), управлений перерабатывающей промышленности, ИЛ за 1961-1993 гг.{

- материалы фактографии« экспертных оценок, прямой, косвенной и инверсивной верификации, клинико-элиэоотслогических обследований эпизоотических очагов бруцеллеза крупного рогатого скота4

- экспертизы бактериологических и серологических исследований на бруцеллез патологического материала от животных различных видов, проведенных по нааей просьбе в ветеринарных лабораториях аони, в том числа экспертизы исследований 2550 абортированных плодов крупного рогатого скота, 13112,0 тыс. серологических исследований крупного рогатого окота, экспертизы исследований 1Ш культур бруцелл, выделенных от больных животных;

- экспертизы исследований материала от людей, мелких млекопитающих и объектов окружающей природной среды, выполненных по нашей просьбе в лабораториях отделов особо опасных

инфекций Архангельского, Волгоградского, Нижегородского и Рязанского областных центров Госсанэпиднадзора;

- ветеринарная отчетность об инфекционных болезнях животных в 1162 колхозах и совхозах, акционерных обществах, ассоциациях фермерских и крестьянских хозяйств за период с 1961 года}

- изучена эпизоотическая обстановка в 1102 хозяйствах и 724 очагах бруцеллеза. Проведено производственное испытание различных систе« протмвобруцеллезннх мероприятий, в том числе о применением вакцины из штамма вр.аЬаг1;иа 82. Изучено и идентифицировано 34 штамма бруцелл, 5 штаммов иероиний я 12 штвммов пастерелл,

В работе попользован комплексный эпизоотологический подход, включающий методы} описательно-исторический, эпизоо-тологичеойой статистики, эпизоотологического осбледования, бактериологический, иммунологический анализы и экспериментальные исследования. При проведении эпизоотологических исследований руководствовались картой, разработанной на кафедре эпизоотологии Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины.

Методом ретроспективного эпизоотологического анализа изучали« заболеваемость крупного рогатого скота бруцеллезом, тенденцию ее многолетней и годовой динамики» влияние различных факторов на механизм передачи возбудителя и на процесс взаимодействия в паразитарной системе бруцеллеза.

Для прижизненной диагностики бруцеллеза использовали РА и РОК о единым бруцеллезным антигеном и роз-бенгал пробу с цветным антигеном, кольцевую реакцию (КР) с молоком, РИГА о эритроцитарным диагностикумом, зкспресс-РНГА и реакцию агглютинации латекса (РАЛ).

Поотиноту РА, ЮН, РБП, КР проводили в соответствии о методическими указаниями по лабораторной диагностике бруцеллеза (1982), РИГА- в соответствии с наставлением по применению орвтроцитарного диагностикума, зкспресс-РНГА, РАД - по методикам, разработанным в НИШ НЬ РФ.

РСК о В - антигеном с целью дифференциации иммунологических реакций ставили по методике, разработанной К.М.Оалма-ковым и А.М.Фошшым (ЫШВИ).

Серологические исследования на иерсиниоэ проводили с применением РИГА с кишечно-иерсиниозным аритроцитарным диа1'-ноотикумом сыроваров 03 и 09 Санкт-Петербургского НИИ вакцин и сывороток согласно наставления по их применению. Реакцию ставили в микроварианте, сопровождая контролями диагностику-ма и испытуемой сыворотки.

Аллергические исследования на бруцеллез проводили путем постановки кожио-адлергической пробы с бруцеллином ВИ2В пальпебрально - под кожу нижнего века, а также реакции непрямого лейколизиса (1991).

бактериологические исследования патологического материала, органов и тканей от абортированных плодов и животных, убитых с диагностической целью, проводили в соответствии о наставлением по диагностике бруцеллеза животных (1982), биологические исследования проводили на морских свинках живой массой 350-400 г, предварительно проверенных на бруцеллез и другие болезни.

Идентификацию выделенных культур ору целл проводили в лаборатории по изученив'бруцеллоза животных СКЗНИЬИ по методике, одобренной подкомиссией по таксономии микроорганизмов 'МО/ЮЗ, а также нетрадиционными методами с использованием

газовой хроматографии жирных кислот и электрофореза в полияк-риламидном геле с додецилсульфатом натрия в лаборатории по изучению бруцеллеза животных НИВИ НЗ РФ.

Выделение белколнх компонентов различных субклеточных структур микроорганизмов проводили в лаборатории по изучению бруцеллеза животных НИВИ НЗ РФ,

Для получении клеточных оболочек бруцелл апробиропани общепринятые методики лизиса бактериальной клетки без применения протеиназ ( E.c.H.Gra?39t , 1935). Белки наружных мембран выделяли по методу о-Я.Уэгзьгзаьэ (1986) и при экстрагировании клеточной масон буфером для образцов по P.J-rf.Jataan (1987) без осаждения фракции. Периплазчатиче-ские белки выделяли экстракцией хлороформом по методу A,.G.Ferro-l,u2/.l (198<0 в нашей модификации и методом иного-кратного замораживания-оттаивания по B.c.H.Graaset; (1935). Количественное содержание белка в препаратах клеточных экстрактов определяли стандартным методом по о.НЛ.одау (1951), а в образцах, содержащих тритон Х-lUO - модифицированным методом по JVDulay (1975), Содержание углеводов определяли колориметрическим методом по M<Dut>oiu (1965).

Явпсульные антигены пастерелл получали по методу Картера (1967), растворимые антигены пастерелл - по методу Грас-со десятикратным замораживани<?м-оттаиванмем (1935).

Жирнокислотинй состав клеток микроорганизмов определяли методом газовой хроматографии с использованием метиловых эфиров жирных кислот, .приготовленных с помощью гидроокиси тетраметилвммония (ГТМА) по Мао Geo в модификации Л.В. Андреева и А.И.Соифас (1977). Анализ проводили на газовом хроматографе "1.(вет~152" о использованием пламешю-иониэами-

umioío детектора. Определяли процентное содержание отдельных пиков «ирных кислот на хроматограммах, проводили визуальное сравнение жирнокислотного профиля.

Фракционирование белков клеточных акстрактов бактерий (оруцелл и иероиний) на основе их молекулярной массы проводили с помощью электрофореза в полиакриламидном гало о доде-цидсульфатом натрия по U.K.liaammli (I97Ü).

Фракционирование балков клеточных окотрактов пастерелл проводили с помощьи диок-алектрофореза в полиакриламидном геле по Дэвису (1962) в приборе фирмы " Ha anal «,

По окончанин разгонки гели фиксировали и одновременно окрашивали no P«J.H«JaJaaaa. Ц9Й7) краоителем Кукьсси бриллиантовый голубим к-250 в течение Ц-Й часов (для выявления белков), для определения полисахаридов у паотерелл - реактивом Шиффа.

Улектрофоретическую подвижность (W) и молекулярные массы рассчитывали по методу к.тьзг, и-0зьаса (1969). Оптическую плотность отдельных полос в гелях определяли о помощьи регистрирувцего микрофотометра с электронным автоматическим потенциометром ЭПП-09 МЗ. Графические постро- • ения хроматограмм и денситограмм проводили по принятым в биологии и ветеринарии методам.

Анализ и производственные испытания комплекса противо-бруцеллезных мероприятий, в том числе и с применением проти-вобруцеллезных вакцин из штаммов Вт.abactúa Х9 и 82, проводила в неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах Рязанской, Волгоградской и Нижегородской областей, противоиерсиниозных мероприятий - в хозяйствах Архангельской области. Роль специфической профилактики'в системе противобруцеллеэных меро-

гриятий изучали в неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах ряда регионов.

Вакцину из штамма Ег-аъогъиз 82 молодняку в ^-месячном гозргсте вводили подкожно в область верхней трети шеи по 100 млрд, микробных клоток.(н.к.) в объеме 5 мл. Через 10 месяцев поело вакцинации животных исследовали на бруцеллез в РД и РСК, Реагирующих удаляли из стада, п животным, л сыворотке крови которых не обнаруживались противоОруцеллозные антитела, вводили вакцину повторно в тон хе дозе« В последующем их исследовали через 1-2 месяца после отела. Вакцинация и ревакцинации коров проводили одновременно всего стада в период, когда в ней било наименьшее количество стольных коров,

С целью провокации скрытых форм бруцеллеза у крупного рогатого скота в неблагополучных хозяйствах ряде регионов испытывали противоэпизоотическуи эффективность применения ' вакцины из штамма 82 дробными дозами на взрослом крупной рогатом скоте (по B.C.Стопину в модификации В.Й.Сочневп). (¡ер-вое введение вакцины в дозэ 2 млрд.м,к. проводили всем нер?-агируотим на бруцеллез коровам неблагополучного стада. Через 14-28 дней после вакцинации животных двмды исследовали на бруцеллез в РД и РСК, Реагирующих в РСК и в РА на 100 МИ и выше удаляли из стада, остальному поголовья вводили вторую дозу вакцины (93-100 млрд. м.к.). Через 3 месяпа поело введения полной дозы вакцины из штамма Ь2 коров исследовали на бруцеллез. Хивотных, реагирующих в РА на 800-1600 НЕ, удаляли из стада. Оставшееся поголовье в последующем (через 7 месяцев после введения второй дозы вакцины) поояп/рют на бруцеллез через каждые 15-21 день по получения групповых отрицательных розультатрр. Одновременно проводили комплекс

ьетеринарно-санитарних мероприятии по обеззараживанию окружающей природной среди, санитарный ремонт и дезинфекцию животноводческих помещений, изолированное содержание и водопой животных неблагополучных по бруцеллезу стад. В производственных опытах (колхоз "Борьба" Касимовского района и др.) изучали индукцию противобруцеллезных антител у коров, привитых проти-вобруцеллезно11 вакциной из штамма 82, под воздействием гетерогенных раздражителей: вакцин против сибирской язвы, эмкара, лептосцироза, ящура.

На основании результатов изучения характера эпизоотического процесса при бруцеллезе крупного рогатого скота и определения степени риска возникновения и распространения болезни разработали научно обоснованную систему противобруцеллезных мероприятий по диагностике, профилактике бруцеллеза крупного рогатого скота и оздоровлению неблагополучных хозяйств, по дифференциальной диагностике бруцеллеза и иерсиниоэа и мерам по их профилактике.

Статистическую обработку результатов исследований проводили по Н.А.Плохинскому (1970) и Хитоси Кума (1990) с использованием электронно-вычислительной техники МЯ-61, "РЫШрз " и " ноиоъгш ". Картографирование региональных особенностей эпизоотологии бруцеллеза и его эпидемиологического значения, графическое изображение результатов исследований проводили по принятым в ветеринарии и биологии методам.

В организации,проведении эпизоотологических экперимен-тоя участвовали специалисты хозяйств, ветлабораторий и станций по борьбе с болезнями животных Рязанской. Нижегородской, Волгоградской и Архангельской областей, начальник Департамента ветеринарии Минсельхозпрода РФ, кандидат ветеринарных на-

ук И.М.Авилов, директор Ростовской областной ветеринарной лаборатории, кандидат ветеринарных наук В.И.Руденко, начальник управления ветеринарии при администрации Волгоградской области, кандидат ветеринарных наук Н.В.Филиппов, директор Холмогорской опытной станции животноводства и луговодства, кандидат ветеринарных наук М.П.Клеэов, научный сотрудник НИШ НЗ РФ, кандидат биологических наук Н.Г.Горчакова, доцент кафедры эпизоотологии и микробиологии НГСХА, кандидат медицинских наук А.Б.Тебекин, зав. лабораторией по изучении бруцеллеза животных СКЗНИВИ, кандпда* ветеринарных наук Л.А.Малышева, член-корреспондент Россельхозакадемии В.В.Соч-нев, академик Россельхозакадемии В.П.Урбан, которым автор выражает искреннюю признательность и благодарность за методическую помощь н сотрудничество.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эпизоотология бруцеллеза крупного рогатого скота в различных регионах РФ ~

Хозяйственно-дкономические и природно-географичеокие особенности развития животноводства РФ в~современных условиях к а кфа к т о р ,~обу с л а в л и в и ю 'ч и ; ¡¿¡о пш з| 1 он оруцеллоза крупного рогатого скота

Сельскохозяйственное производство, в том число и животноводство, ведется во всех территориально-административных и национальных образованиях всех девяти экономических районов Российской Федерации. Развитие животноводства в регионах определяется природно-климатическими условиями, уровнем урбанизации, занятостью и народными традициями сельского населения, а также проводимой государством аграрной политикой в стране. В зонах рискованного земледелия из-за недобора кормов, недостаточного внимания вопросам агротехнического улучшения сенокосов и пастбищ кормовая база животноводства постоянно остается дефицитной, что, в своя очередь, определяет структуру и уровень разведения животных. Сложилось десятилетиями неравномерное производство продуктов животноводства на территории России, что порождает межрегиональные перемещения поголовья и продуктов животноводства. В условиях экономической реформы в стране, увеличившихся экономического и энергетического давлений животноводство превратилось в непрестижную отрасль, идет сокращение иоголопья, снижении его продуктивности. В стропе

происходит переориентация на снабжение населения продуктами шииты импортного производства.

Сложиштяся ситуация в сельскохозяйственном производстве н в частности в животноводстве, способствует возникновению существенных отклонений, препятствующих реализации физиологических возможностей продуктивных животных, в состоянии их здоровья и' сохранности. Возникли препятствия на пути создания эпизоотического благополучия животноводства. Повысилась степень риска возникновения и распространения инфекционных болезней. Зто касается и бруцеллеза животных.

■Нозологический профиль инфекционной патологии ^ШШго~рогатого окота в отдельных территориально-административных образованиях РФ

Установили, что инфекционну» патологий крупного рогатого скота в формирует в основном болезнь. ИаиболЬший"удель-ний вес" занимает туберкулез (6,42+0,17 от общего числа неблагополучных пунктов и 35,56+1,70$ - от числа заболевших инфекционными болезнями). Второе место по заболеваемости животных в нозологическом профиле занимает бруцеллез (12,24+0,34$), на его долю приходится 1,9+0,14$ неблагополучных пунктов. Интенсивность поражения поголовья бруцелаезои в эпизоотических очагах в 6,44 раза Превышает атот показатель при других инфекционных болезнях*

Особенности эпизоотологии бруцеллеза крупного возникновения и распространений

Методами экспертных оценок и верификации установили границы зоны минимального риска возникновения и распространения бруцеллеза крупного рогатого скота.Как в отдельных регионах, так и в границах зоны риска бруцеллез крупною рогатого скота является весьма редкой болезньв и, как правило, ограничивается единичными вспышками. Однако при скрининговых исследованиях крупного рогатого скота в ряде регионов, длительно неблагополучных по этой болезни, выявляются случаи их компрометации по бруцеанеау. На примере Архангельской области установили, что это связано с заражением поголовья микроорганизмами из рода т-зина , икевдми антигенное родство с бруцеллами. При атом установили, что в отдельные годи (1984,1985,1967,1988,

1989,1991 гг.) показатели компрометации достигали 96,7 ре,-пирующих на 10 тис. поголовья, случаи компрометации отмечались и 15 из 21 районов области, показатель "неблагополучия" варьировал от 0-6'1,3$ (М = 22.3+1, ОД,- "коэффициент апнзоотичнос-ти" компрометации в области за и анализируемых лот составил - 0,075.

Комплексными комиссионными исследованиями с участием ученых 1ШВ, УкрШШВ, НИШ 113 РФ бруцеллез среди крупного рогатого скота в этой области бил исключен. Это подтверждено и результатами эпизоотолох'ического мониторинга и последующие годы. Бактериологическим исследованием 2717 абортированных плодов и 2555 мертворожденных за период 1908-1993 гг, случаи бруцеллезной инфекции по установлены, по установлены и иммунологические показатели бруцеллеза при исследовании парных сывороток кроли 1503 абортировавших коров. ■

В одном из хозяйств области по разрешению Департамента ветеринарии (ГУБ) Минсельхозпрода РФ провели эпизоотологичес-кий эксперимент. Ьсех скомпрометированных по бруцеллезу животных (36 голов) сформировали в подопытную группу, контролем служили животные этого же хозяйства но реагирующие о бруцеллезным антигеном. Провели серологические и аллергические исследования в динамике ив бруцеллез, а также на иерсиниоз, ту-' ляремию, сальмонеллэз.

• Установили, что в 6,3^ случаев у животннх отмечалось прерывание беременности, в 2,8$ случаев (33,3$ от числа абортировавших) от животных выделен патогенным штамм у.чпьэгосо-li.ti.ca ."Иммунологические показатели бруцеллеза" выявлялись только в РА на 50-100 НЕ, у одного животного в РИГА 1:80, Нарастания титров РА при многократных исследованиях не установлено. Отрицательными оказались кожная аллергическая проба с бруцеллином и реакция непрямого леиколизиоа. Все животные не реагировали в РА о туляреииинкм антигеном, но в СО, 6,£ случаев реагировали в РИГА с эритроцитарным 09 иерсиниозным диагностн-кумом в титрах 1:25 - 1:^0 (М = 1/75+12,9), а 72.,2% случаев-с эритроцитарным 03 иерсиниозным диагностикумом в титрах 1:?5~ 1:1600 (¡1 = 1/159,3+16,3). Установлены положительные РА с иг.р-оиниозными диагноотикумаяи 09;03;0ъ; 16,30; 1Л,27,

От 3 жиоотннх '|9, В05, 687) получены нзоллтн, и дс ¡инфицированные как Г.чхлзгогоИШеа , которые встуги.чи в

реакцию агглютинации с аутосыворотками животных и положительной бруцеллезной сывороткой ( РА = 400 14Е). Экспериментально докйзвйи, что причиной появления иммунологических реакций у крупного рогатого скота, выявляемых при плановых диагностических исследованиях на бруцеллез в условиях Архангельской области, является их заражение иереиниями. У 15-19,таких животных отмечаются отклонения в состоянии здоровья (прерывание беременности, задержание последа, субинволюция матки, маститы).

Совместно с областным центром Госсанэпиднадзора установили, что среди обитателей естественных биотопов Архангельской области в В,1$ случаев установлено носитеяьство иерсиний. В 68,3$ случаев - У.еггёвгосоШ;1.оа , в .4,3$ - У.тъегше<11а, в 26,- У.Кг1еЬепзеп11 , в 0,6$ - Х.аЗДоуш .

На основании многолетних исследований мы прищли к заключению, что в зоне незначительного риска бруцеллеза крупного рогатого скота при оценке эпизоотического состояния по бруцеллезу в случаях выраженной компрометации следует всесторонне изучать возможное заражение животных микроорганизмами, имеющими антигенное родство с бруцеллами, в частности иереиниями, широко распространенными среди обитателей биотопов.

На основании результатов исследований разработали методические рекомендации "Дифференциальная диагностика бруцеллеза и иерсиниоза и меры по их профилактике" (1991).

Особенности эпизоотологии бруцеллеза крупного рогатого окота в зоне повышенного ряска его возникновения и распространения

Установили границы зоны повышенного риска бруцеллеза на территории 113 Р§. Рязанская область являетоя "эталоном" форми-• рования зоны повышенного риска болезни: в течение 80 лет оставалась неблагополучной по бруцеллезу животных и постоянно £14Возшаси за свои пределы натуральные и переработанные продукты животноводства. Бруцеллез крупного рогатого скота здесь составляет от 0,50 до 1,76$ от общей инфекционной патологии животных (М - 0,75+0,31), с выраженной территориальной нерав-, иомерностью. Наиболее широко и длительно эпизоотия бруцеллеза развивалась на территориях Пителинского, Касимовского, Спасского районов. Показатель неблагополучия по бруцеллезу здесь

варьировал от 0,5 до 1,0, Самый высокий уровонь распространения этой болезни (показатель неблагополучия) установили в районах, расположенных в поймах рек Оки, Клязьмы, Яолни и Судогды,

Экстенсивные показатели эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого скота в этой зоне имели гырахениое непостоянство. В отдельные годы (1962, 1971, 1979, 1900 гг.) количество эпизоотических очагов бруцеллеза резко возрастало, в том числе и за счет повторных вспышек в оздоровленных хозяйствах. Однако в целом в многолетней динамике распространения бруцеллеза установили тенденцию затухания, в линейно-графическом выражении как ниспадающая под углом в 34° линия, с резким падением (62°) на завершающем этапе, с выраженной периодичностью через 2-4-5 лет.

Установили, что но имеют выраженного постоянства и интенсивные показатели эпизоотического процесса бруцеллеза в этом регионе. Б уровне заболеваемости установлены периодичность, с нарастанием заболеваемости через 5-7 лот, а также постоянное превышение превалентности над инцидентность» (в 2,8 - 5,16 раза), что подтверждает постоянное наличио резервуаров и источников" возбудителя, В годовой динамике бруцеллеза установлена круглогодичная заболеваемость (0,01$) и две эпизоотические надбавки: в февраде (0,82$) и ипле-авгус~ те (0,15-0,18%).

Экстенсивные показатели эпизоотического процесса оруцеллеза на популяционном уродна в зоне его повышенного риска

Установили, что наиболее поражаемым бруцеллезом видом сельскохозяйственных животных в этой зоне является крупный рогатый скот (96,1%), второе место занимают свиньи (2,. В спектре патогенносги при бруцеллезе в этой зоне соответственно 0,5 и 0,>\% занимают овцы и лошади. Круглогодичное проявление бруцеллеза установлено только у крупного рогатого скота, среди других видов животных эпизоотический процесс бруцеллеза отличается выраленнои прерывностью и в определенной степени зависит от развития эпизоотического процесса среди крупного рогатого скота.

Установили, что а эпизоотический процесс при оруцеллезе крупного рогатого скота могут вовлекаться евобо/шо живущие колкие млекопитающие, однико эпизоотическим процесс среди шзх но подучаот дальнейшего разлития и практически прекращаемся с затуханием эпизоотического процесса бруцеллеза среди крупного рогатого скота.

Анализ заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом в зоне повышенного риска болезни" по факторам риска"

Установили, что на территории зоны повышенного риска болезни ¡эпизоотический процосо бруцеллеза формируется под воздействием ДВух видов причин?

- сдерживающих эпизоотию бруцелдеза (ликвидация эпизоотических очагов и оздоровление неблагополучных пунктов);

- расширение границ эпизоотии из-за вовлечения в эпизоотический процеоо новых групп животных в действующих очагах и за его пределами (возникновение новых очагов),

'1'ак, между показателями передержки больного бруцеллезом скоте и увеличением количества очагов бруцеллеза установили прямую коррелятивную связь (ч ■ + 0,62), между уровнем передержки больных животных и инцидентностью бруцеллеза -пряную коррелятивную связь (ч = + 0,91), между уровнем передержки больного скота и темпами оздоровления - обратную коррелятивную зависимость (ч " ~ 0,48).

Установил',(, что на уровень заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом оказывает одерживающее воздействие специфическая профилактика болезни. Между этими показателями установили обратную коррелятивную связь (ч в - 0,352), Невысокий уровень зависимости подтверждает необходимость проведения комплексных профилактических и оздоровительных проги-вобруцеллезных мер, воздействующих на ьсе звенья эпизоотической цепи.

Географическая эпизоотология бруцеллеза крупного рогатого 6кбта в зоне повышенного риска

Усчшшьиаи выраженную географическую приуроченность епиаоотия бруцеллеза крупного рогатого скота. На территори-' ях непосредственно расположенных в пойменной части рек Оки и ьи притоков показатель неблагополучия бруцеллеза значи-

тельно превышает (а 1,6 раза) этот показатель в целом по зоне повышенного риска и в 4, В раза в сравнении с районами, но прилегающими к водоразделам. Провели зпизоотологическое районирование но оруцеллозу. Но степени неблагополучия территорию области разделили на 4 подзоны: максимального 1.6 районов), повышенного районов), среднего (ДО районов) и минимального (3 района) риска.

На основании результатов исследований разработали прогнозный диагноз бруцеллеза и выявили потенциально опасные в эпизоотическом и эпидемическом отношениях территории. Установили территории с приуроченностью бруцеллезной инфекции, в основном расположенные в пойме реки Оки. Здесь самый высокий коэффициент эпизоотичности, 91,7$ всех случаев повторных вспышек бруцеллеза в зоне, в 54,7)6 случаев начало возникновения эпизоотии приурочено к апрелю-маю, в 21,6$ - к июнв-июлю.

Полученные результаты позволили подтвердить гипотезу выравнивания эпизоотической ситуации по бруцеллезу на низинных (поименных), затапливаемых территориях. На основании этого внесены изменения и дополнения в систему противобруцеллезных мероприятий.

Степень риска бруцеллеза крупного рогатого окота в отдельных регионахгТТПёа верификация

Установили, что характер эпизоотического процесса и его проявление при бруцеллезе зависит от региональных особенностей и состояния противоэпизоотического обеспечения животноводства. Методом прямой и косвенной верификации установили, что за последнее 20 лет объемные показатели территориальных измерений эпизоотического процесса бруцеллеза в РФ сократились в 12,03 раза, в том числе п Новосибирской области в 19,3; в Волгоградской - только в 2,1 раза, достигнуто затухание эпизоотического процесса бруцеллеза в Рязанской области.

Прогнозирований развития эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого с,<ота и его реализация ь ааьиоимости от степени

ёиска возникновения и распространения этой олеины

На основании изучения динамических позиций экстенсивных и интенсивных показателей эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого скота территорию разделили ни 4 зони:

- максимального риска^четире региона, имеющие 100 и более эпизоотических очагов бруцеллеза, с инцидентностью 100 и более больных на Ю тыс. поголовья);

- повышенного риска (2'| региона, имеющие от 5 до 100 •эпизоотических очагов, при высоком уровне инцидентности);

- среднего риска Й региона, имеющие от 1 до 5 очагов бруцеллеза, с невысоким уровнем инцидентности - до 20 заболевших на 10 тис, поголовья);

- минимального риска (.39 регионов, свободных от бруцеллеза крупного рогатого скота или имеющие единичные вспышки (эпизоды) бруцеллеза, практически с нулевым уровнем инцидентности).

Б зависимости от степени риска разработали отдаленный нормативный прогноз и основные направления антропогенного воздействия по его реализации.

Реализация нормативного прогноза бруцеллеза крупного рогатого скотв, составленного только на экстенсивных показателях эпизоотического процесса, подтвердила его невысокув достоверность и надежность и что при составлении отдаленного

■ прогноза необходимо обязательно учитывать и интенсивные показатели панзоотии. При атом оценку степени риска следует базировать но биологических закономерностях функционирования паразитарной системы при данной болезни и сопоставлении интенсивных и экстенсивных показателей болезни при разработке Прогнозного диагноза.

Недооценка этого метода при прогнозировании эпизоотического процессы по состояний на 1.01.1961 г. в условиях Северного Кавказа и Нижнего Поволжья и других регионов, а елсдова-

■ тсльно, и послабление в оценке эпизоотической ситуации привели к у ело,¡сменив эпизоотической ситуации в Ставропольском крое па 36,7/2, в Чечено-Ингушетии - на Кабардино-Балкарии-на 27,в Волгоградской области - на 12,%, в Туве - в ^,6 ризп.

Ооу.|")понстионшшо и оптимизация опизоотологи- , "'"111-15' Дчцгпост.нси бруцеллеза крупного '¿У'г.лчГго скота

аял аипзоотологпчоскои диагностики бруцеллеза использовала оеяиотику изучение закономерностей проявления эпизооти-

ческого процесса),.диагностическую технику в форме математи-ко-статисгического учета и анализа заболеваемости животных бруцеллезом и сопоставления полученных результатов а данными изучения биолого-экологических характеристик возбудителя и иммунологических особенностей различных видов и групп животных. а также социальных условий, в которых развивается эпизоотический процесс бруцеллеза.

С этой цель» провели ретроспективный анализ многолетней динамики бруцеллеза крупного рогатого скота, оперативный анализ эпизоотических очагов болезни, эпизоотояогичаскую разведку и ветеринарно-эпизоотологическое наблюдение за поголовьем в зоне минимального риска болезни, изучили годовуа динамику эпизоотического процесса и географическое его районирование, . Использовали все доступные методы прижизненной и посмертной диагностики бруцеллеза для установления характера его проявления на популяционном уровне.

Клинико-эпизоотологическое обследование очагов бруцеллеза крупного рогатого окота

Установили, что в свежих очагах бруцеллеза, возникших на территориях длительно благополучных по этой болезни, кли-нико-эпизоотологические показатели бруцеллеза развиваются в первые 6-7 нес. после заражения. При этом болезнь этим методом можно установить только у взрослых животных в 12,2+4,6$ случаев. Это зависит от технологического сезона, в котором произошло заражение животных. У 6,1$ заболевших животных отмечалось прерывание беременности, у 33,- сопровождалось рождением мертвого или нежизнеспособного плода, у -

задержанием последа, у 42,Щ - маститами. У отдельных животных- синдромом: аборт, задержание последа, эндометрит, мастит. Результаты исследований даот основание судить но столько о широте распространения, сколько о тяжести течения и проявления эпизоотии болезни.

Серологическая, диагностика С1цуцелАчг;-ц круп I '• с» г о рогатого скота, г;е ичлъ и мостов:,).ы .юоч оТоТм-чоскои диагностика оол^зни :

Установили, что в овеаях апмэоогичссилх оч;.га< бр/иил-леза первые случал иммунологичосклх иплгглы ол;;! и,.и -^шае-

нии бруцеллезом при исследовании парных сывороток через 19-23 дня после первичного выявления, кик правило, не повторяются. Ито вводит в заблуждение ветеринарных специалистов при оценке возникшей эпизоотической ситуации. Повторные показатели бруцеллезной инфекции установлены только через 2-3 месяца у других животных в более высоких показателях классических серологических реакции (РА '100 МЁ, положительная РДОК).

В длительном зпиэоотологическом эксперименте установили, что в свежем эпизоотическом очаге бруцеллеза иммунологические показатели инфекционного процесса проявляются в РА, при ее экспрессивности 50- 400 МЁ. Наивысшие ретроспективные показатели инфекционного процесса бруцеллеза на понуляционном уровне устанавливаются серологическими реакциями через 4-5 мес. (52,12 - в РА и от I до гв% - в РОК). В 60-87,12 показания РА и РСК к этому времени сонпадают. У 17,8$ лактирупших животных бруцеллез к этому времени устанавливается и в ИР'с молоком. В 50,5^ случаев у животных бруцеллез к этому времени диагностируется и аллергическим исследованием, в 722 случаев показатели аллергического исследования согласуются с серологическими.

Полученнне результаты дают основание подтвердить, что серологические методы диагностики играют важную роль в эпизо-отологической диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота, позволяют определить основные эпизоотологические категории бруцеллеза: инцидентность, превалентнооть, индекс эпизоотично-сти, показатель неблагополучия, круглогодовую заболеваемость и эпизоотические надбавки, надежность оздоровления и состояние реактивности организма восприимчивых животных.

Совершенствование дифференциальной диагностики бруцеллеза крупного рогатого окота и других инфекции, возбудители которых имеют родственные с ор.уцоллами антигены

Иммунологические показатели при дифференциальной диагностика оруцоллеза и иорииниоза крупного рогатого скота

Устаношш;, что при зарасти животных норсиниями отмечаются илуч.г.1 имитации положительных реакции при исследовании на бруцеллез, за счет наличия у них родотчхпных антигенов. В произюдтчлшнх окоиориментах уитоноыми, что, как правило,

при заражении лиьотних иерсининми иммунологические показатели с единим бруцеллезным антигеном выявляются только в РА в титрах 50-НЮ Ш, при исследовании парных сывороток не отмечается рост титра антител. Такие, аивотные дают отрицательные КР с молоком с бруцеллезным антигеном, аллергическую (кожную) пробу с бруцеллином. В то ¡не время такие животные положительно реагируют в РИГА с эритроцитарным иерсшшозныы диагностикуном (03, 09) или в РА с одной или несколькими культурами иерсиний 03; 06,30; 05,27; Ой, 09 в титрах, значительно превышающих титры реакций с единым бруцеллезным антигеном. На основании результатов исследований разработали методические рекомендации по дифференциальной диагностике бруцеллеза и иерсинноза и мерам по их профилактике (1991).

Нетрадиционные методы идентификации и дифференциации оруцелл, иерсиний и наотеролл

Идентификация и дифференциация бруцелл, иарсиииЯ и других микроорганизмов методом изучения ащрнокиТПШт-ного состава микробной клетки

Совместно с Н.Г.Горчаковой изучили жирнокиолотный состав микробной клетки бруцелл и иерсиний. Установили, что бруцеллы всех видов имеют однотипный (в качественном отношении) состав ¿ирных кислот, в котором преобладают пальмитиновая, олеиновая и Циклопропановая кислоты, на доли олеиновой №¿8.1) и циклен пропановой (С19 7 ) приходится 50-70$ всех жирных'кислот '' Сороме Вг.оу1з ). Спектр лирных кислот микробной клетки иерсиний значительно шире, чем у бруцелл, о преобладанием пальмитиновой» пяльмиголеиновоя и олеиновой кислот. Пальмитолеи-новой кислоты в спектре жирных кислот иерсиийй в 4-25,6 раза больше, чем у бруцелл, в 3,2- 33,5 раза объемнее представлена у иерсиний и метиленгекоадеканоная кислота №17^)» В то же время метиленоктадекановая (циклопропановая) кислота ХС^у) в спектра иерсиний представлена объемно (в 3,6-13,8 роза), чем у бруцелл,

Установили специфические видовые различия в жирнокислот-ном спектре бруцелл. На этой основе разработали модели соотношений жирных кислот у отдельных штаммов и видов бруцелл и иерсиний, составили клочовиа и дополнительные тесты для идентификации бруцелл и иерсиний по спектру жирных кислот, И.1у~

чение и сопоставление жиунокислотворо состава бруцелл позволяет бистро проводить их идентификаций и дифференциацию, а в сочетания с другими таксономическими критериями повышает надежность диагностики бруцеллеза.

На основании проведенных исследований разработали рекомендации "Нетрадиционные методы исследований при дифференциальной диагностике бруцеллеза животных" (.1994).

Идентификация и дифференциация бруцелл, иерсиний и других микроорганизмов методом изучения белковых фракции их клетки о иоиоыьп ияектпофореза в полнакрилймидном геле lite

Изучили возможность идентификации и дифференциации бруцелл на основе фракционирования белков различных структурных элементов микробной клетки (экзопродукты. белки наружных мембран). Фракционирование бактериальных белков проводили с помощью электрофореза в НААГ-ДОН по V .К.Ьаевшй! . Определение молекулярной массы (М.м.) иооледуеиых полипептидов проводили по калибровочным кривым, построенным по стандартным белкам, известной М.м.. Расчет относительной подвижности и молекулярной массы исследуемых белков проводили как по электрофораг-раммам, так и по денситограммам.

Установили, что пептидные фракции наружных мембран оруцелл имеют Еыражепнуи неравномерность у различных штаммов и видов брунелл. Полипвптиды с М.м. 60 кД ( кг 37) и общем спектре белков наружных мембран у различных штаммов Вг.иеЛ-Севз1з варьирует от 6,2 до 20,6$, у . Br .suia - от 9,432,4;?, у Вт.ovia - 16,7-17,1%, у Вт.cania - 19,2%, у Br.abartus только у отдельных штаммов в количествах не превышающих 5,2%. Фракция с М.м. 40 кД С н* 56) наиболее объемно представлена в спектре Br.abortua (10,0-25,5^) и незначительно - л спектре ег .n»ltteu3Lg {и-12,1%). В различных сочетаниях в спектре мембранных белков представлены фракции с М.м. 25-20 кД С R1 68-73), а у отдельных штаммов - и с М.м. 13-15 кД ( i» 85-95), 35 кД ( вг 60), 38-33 кД . : •

Псриплазмятическии болки бруцолл в основном представлены в ряду с М.м. 62-14 кД (К1 35-94). Несмотря на большое сходство фракция по М.м., имеются суцостьешше штониовно различия бруцелл по »тому показателя. для лсех штаммов бруцелл обкиш

является наличие в периплазме фракции белка о Й.м. 15 кД С нг 67). У штаммов Вт.abortus эта фракция составляет 13,956,9$, у штаммов Br .aaUtenais - 25,5-35,1$, у Br .aula l,Si~Zà/ii, у Br .ovl3 - 20,2-23,6%t у Вт «canis - 30$. Имеются штаммовые различия и в других фракциях оелков периплазма.

Остановили, что и спектре белков наружной мембраны и экзопродуктон иерсиний преобладают пептидные фракции с 39,

54, 65, 73, Ъ5, 90 и 95. Зти фракции установлены у всех сороваров иерсиний. Основные крупице фракции в спектре белков наружных мембран распределяются в зоне В£ 39-57 01.м. 58-39 кД). Спектр белков окзопродуктов иерсиний имеет выраженное качественное и количественное сходство с профилем белковых фракций их наружных мембран.

lia основании проведенных исследований установили качественный и количественный состав различных беякових фракции бруцелл и иерсиний, а также возможность использования злект-рофореграмм окзопродуктов бруцелл и иерсиний в качестве таксономического критерия при идентификация бруцелл и видовой их дифференциации.

На основании результатов исследований подготовлены спе- • циальнио методические рекомендации, одобренные Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода Р$ (1994).

Методика изучения белковых фракций нирулених мембран применена при идентификации и дифференциации ¡зпизоотических штаммов бруцелл, полученных от различных видов животных в хозяйствах ряда регионов Северо-Кавказского экономического района. Установлена высокая гомогенность белкового спектра штаммов бруцелл, имеющих единое происхождение, профиль пептидних фракций у них практически идентичен. Последнее обстоятельство может бцть использовано как доказующее обстоятельство путей миграции бруцелл, а также для подтверждения и уточнения механизма передачи возбудителя внутри опизоотических очагов, так и за их пределы. Несмотря на свои нестандартность нетрадиционные методы идентификации и дифференциации бруцелл являются дополнительными методами эпизоотологической диагностики данной болезни, и особенно в .дифференциации болизной, возбудители которых имеют антигенное родство.

Изученне белкового цпоктра наружных мембран ШШЗЩшх клеток. паоторёлд

Многие исследователи предлагали переименовать родовое название микроорганизмов Paateurella на Yersinia Другие ( G.R.Carter ) установили, что колониальная диссоциация Ь типа у Paataurella haamolytica происходит аналогично диссоциация микроорганизмов различных видов рода Brucella , Однако, до сих пор общего мнения об однородности штаммов P.hsonolytlca не достигнуто. С целью сравнительной оценки с белковым спектром наружных мембран бруцелл и иерсиний изучили спектр антигенов наружных мембран P.has-¿olyfclca ,

При сравнительном анализе денситограмм растворимых кап-оульных белков и денситограмм растворимых белков, выделенных по Грасое, установили, что они имеют очень схожий графический рисунок. У обеих групп белковых антигенов, выделенных разными методами, отмечено наличие одних и тех же белковых фракций: как у капсульных, так и у антигенов Грассе были хо~ ропо выражены первая ( EI 0,05-0,08) и особенно последняя (^.0,09-0,95) белковые фракции. По нашему мнению, это связа"т но с тем, что в результате использования этих двух методов выделения антигенов из микробных клеток в обоих случаях освобождаются один и те же белковые■структуры. В данном случае ото растворимые белки, которые относительно легко освобождаются из бактериальных клеток.

. При окрапиоанни гелей пиронином "Ж" на электрофореграм-мпх нуклеиновых кислот выявлено не было, что указывает на сохранение целостности клетки пастерелл при получении антигенов вдаеуказашиши методами. При сравнительном анализе белковых спектров капсульных антигенов и антигенов по Грассе установлен одинаковый состав белковых Фракций.

Исследования по идентификации бруцелл и пастеролл по спектрам болкових фракций на. данном этапе но позволяют сделать доказательного заключения. Адаптация и унификация методов энотрш про'чишя и разделения белков, различных клеточных' структур орунолл и ппотсрелл продол.«петая.

Разработка комплекса диагностических исследований, как основной составной части эпиаоотологичеокои диагностики оруцеллеза

С учетом разработанных нетрадиционных подходов при дифференциации и идентификации бруцелл и других микроорганизмов, накопленного опита скрининговых исследований при проведении эпизоотологичиской диагностики болезни разработали комплексный подход в диагностике оруцеллеэа крупного рогатого скота, включающий комплекс диагностических исследований по установлению бруцеллеза у конкретного животного, а также для определения ретроспективных показателей инфекционного и эпизоотического процессов при бруцеллезе. Комплекс, исследований расчи-тан на установление диагноза в свежих очагах бруцеллеза, так и при диагностике болезни в оэдоравливаемых хозяйствах.

Специфическая профилактика бруцеллеза крупного рогатог'о скота как метод управления эпизоотическим процессом

Роль и место специфической профилактики а системе протиьооруцеллезных мероприятии

Установили, что применение протиаобруцеллезких вакцин в зоне повышенного риска только в отдельных хозяйствах и районах (выборочно) не оказало существенного сдерживающего воздействия на развитие эпизоотического процесса (Рязанская область). Исчислением коррелятивной связи уровня заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом и уровнем выборочной иммунизации поголовья установлена слабая, прямая зависимость (ч = + 0,1094), Более того, "пунктирное" применение противо-бруцеллеэных вакцин в неблагополучных по бруцеллезу регионах приводит к "усложнению" эпизоотической ситуации за счет провокации латентных форм бруцеллеза у животных.

Применение специфической профилактики бруцеллеза в комплексе противобруцеллезных мероприятий одновременно на уровне административно-территориального образования России оказывает одерживавшее воздействие на развитие эпизоотии бруцолле-за (коэффициент ранговом зависимости ч " - 0,499). Установили, что роль вакцинации при бруцеллезе крупного рогатого скота заключается в создании ¡ни/иных стад животных для замены неблагополучных по бруцеллезу стад, форм, хозяйств, а также для снижения напряженности эпизоотического процесса в действующих очагах ¿олезиц.

Влияние различных препаратов на стимуляции ооразования .улавливаемых и классических реакциях

антител на различных стадиях иЩ^циоШТоге -

процесса бруцеллеза

Установили, что применение малых (дробных) доз вакшпш из слабоагглютиногенного штамма Вт .аЬм^ия 02 стимулирует образование антител, улавливаемых классическими реакциями на ранних стадиях заражения животных бруцеллезом. В эпизоотических очагах, оздоравливаемых без применения вакцин, у 6,животных через 14-28 дней поело введения малой дозы вакцины из • штамма 02 при отрицательных показателях в контроле, после введения полной дозы вакцины - дополнительно - у 16,9$ животных; в свежих эпизоотических очагах - у животных через 14-28 дней после введения малой дозы вакцины и у 28,3^ - п последуЩем после введения полной дозы вакцины.

Результаты исследований подтверждают, что у большинства зараженных бруцоллами животных, развивается фаза первичной латенции бруцеллеза, как правило, протекающая скрыто, не выявляемая классическими серологическими реакциями, И только после стимуляции специфическим раздражителем (малой дозой вакцины из штампа 02) происходит быстрое нарастание в организме противобруцеллезных антител.

Стимуляция (индукция) иммунологических показателей при бруцеллёзе крупного рогатого скота под воздействием гетерогенных раздражителен

Установили, что введение коровам, ранее вакцинированным противобруцеллезной вакциной из штамма Вг.аЬогЪиз 82, вакцины против лептоспироэа вызывает у 90% из них кратковременную (до 45 дней) индукцию специфических противобруцеллезных антител, выявляемых различными серологическими реакциями.

При воздействии на таких же кивотных вакциной против ом-кара, индукция противобруцеллезных антител возникает у животных, в том число через 7 дуей после введения гетерогенной вакцины - у 40,«' животных, через 14 дней - у 35;», Через 21 день-у 10;I ышотпкх. Реакции сохраняются до 45-60 дней.

Иод воздействием вакцин ОТИ и противошчурной у аналогичных кивотных в ЬЪ$ и 90/5 случаев (соответственно) также установлено явление индукции протиноируцеллезных антител, сохраняемых до йЬ—60 дней.

Ьиявлоиие толерантных животних пра ируцеллезе с номощыГ"применения прбтавооруцеллёзнои вакцины из гдтлытиногонних штаммов

Установили, что в хозяйствах, неблагополучных по бруцеллезу, телки, полученные от коров оздоравливаемих от бруцеллеза стад, в '»,7-10,6$ случаев СМ = 6,5+1,9$) оказываются аре-активными на введение аггдитаногенной вакцини из штамма 19, Дополнительными исследованиями у части таких животных установили бруцеллоносительство, Такие животные являются опасными в эпизоотическом плане.

Полученные результаты исследований подтверждают слабуи эффективность изолированного выращивания молодняка а неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах. Своевременное удаление из стад ареактиъннх и с пониженной в отношении бруцеллеза иммунологической реактивностью телок позволяет повысить эффективность изолированного выращивания молодняка.

Научно оооонованная система нротивобруцеллезцих мероприятии 5~ГПз Рз

Эпизоотический процесс бруцеллеза крупного рогатого скота на'фоне применения вакцины из штамма Вт .ьЪаг ^цз 29

Установили, что применение вакцины из штампа 19 на заведомо благополучном поголовье (коровах и телках) но изменяло эпизоотическую ситуации) по бруцеллезу в сторону усиления напряженности эпизоотического процесса, хозяйство в течении последующих трех лет сохраняло эпизоотическое благополучие. Применение этой вакцины в хозяйствах, скомпрометированных по бруцеллезу, вызвало нарастание числа реагирующих ;*инотних, у 1,9$ коров отмечено прерывание беременности, отмочены случаи реагирующих животных в отдалеиние после вакциниций сроки. Применение вакцини из штамма 19 в комплексе противобруцоллез-ных мероприятий сдергивает распространение и клиническое проявление болезни, но не позволяет ускорять оздоровлений и нормативно прогнозировать оздоронление и развитие эпизоотического процесса.

Результаты применения вакцины из штаммы В2 в

системе противобруцеллезних мероприятий в регионах

Ь различной опизовтйчеокой оостацовкоя по оруцеллозу

За последное время вакцина, разработанная К.М.Салмяковым, применяется во многих регионах Росоии и СНГ. Многие исследователи, сообцая о положительных результатах применения этой вакцины, не пришли к единому общему суждению о перспективах оздоровления животноводства с применением этого препарата, В отдельных случаях применение) вакцины вызвало побочные, негативные последствия, которые оказали сдерживающее воздействие на реализацию государственной программы оздоровления животноводства от бруцеллеза. Наиболее сложной за последние годы оказалась эпизоотическая обстановка по бруцеллезу в ряде регионов Северного Кавказа и Нижнего Поволжья.

Совместно с Н,В.Филипповым провели ретроспективный анализ эффективности применения вакцины из штамма Й2 в регионах со сложной эпизоотической обстановкой. Установили, что в условиях Нижнего Поволжья вакцина применялась первоначально на телках (о 1974 года), а в последующем и на взрослом скоте, во многих регионах по фону применения вакцины из штамма 19. В хозяйствах, где вакцина из штамма С2 применена без должной оценки эпизоотической оитуации, появились негативные последствия, а в последующем и сдерживание ее применения. Так к 19Ü2 году в Волгоградской области уровень иммунизации коров сократился до 2,52 и до 14,22 - телок. За весь период ретроспекции в этой области под иммунной защитой находились менее половины поголовья коров (М * 42,2+ В, 9/0 и около 60% телок (М 3 '80,4+7, b'¿). При высокой напряженности эпизоотического процесса бруцеллеза в облас-тйСпоказатель неблагополучия М= 16,3+2,7$, очаговость - М= 117,1+20,0; инцидентность - М= 84,7+7,0 заболевших на Ю тыс. поголовья) и недостаточном уровне и несвоевременности специфической профилактики, применение вакцины из штамма 62 не оказало существенного воздействия на управление эпизоотическим процессом бруцеллеза в регионе. Так в Даниловском районе к 1981 г. оказались привигмп всего лишь 7,5% телок, подлежащих вакцинации, коровы Booc.ií не прививались. Показатель неблагополучия » этом районе достиг 54,52, а инцидентность бруцеллеза - 521,7 заболевших на 10 тыо. поголовья. Математическим моделированием установили, что между уровнем гакцинации и уровнем заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом существует обратная

коррелятивная сьязь U Волгоградской области ч = - U,2U2).

На основании 'результатов исследований установили, что применение вакцины из штамма б2 в системе протинобруцеллез-них мероприятий в зоне повышенного риска болезни оказало существенное воздействие на развитие эпизоотического процесса. Первоначально (.и семидесятые годы) Применение вакцины вызвало провокации скрытых форм бруцеллеза, а, следовательно, и увеличение количества (уровня) заболеваемости, на завершающем этапе ретроспекции - расширение границ неблагополучия за счет выявления истинных границ эпизоотии.

разработка научно обоснованной систсми прбтивобруцеллезних мероприятий в HJ

На основании комплекса проведенных исследований по изучению характера эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого скота в различных природно-акономических районах, определения степени риска возникновения и распространения болезни, используя накопленный в России опыт работы по диагностике, профилактике и ликвидации зпизоотичеоких очагов бруцеллеза разработали научно обоснованную систему противо-бруцеллезних мероприятий применительно к регионам Нечерноземной зоны РФ.

Определили границы зон риска, испытали комплекс диагностических (скрининговых) исследований с учетом использования нетрадиционных методов идентификации и дифференциации бру-целл, спонтанного бруцеллеза и поствакцинальных последствии.

Установили основные задачи и направления противобруцел-лезных мероприятий для каидой зоны риска. Для вс<;х зон риска при возникновении свежих очагов бруцеллеза крупного рогатого скота основным направлением действий является установление эпизоотологического диагноза, границ очага и угрожаемой зоны и их купирование. В системе предусмотрена стандартизация проводимых мероприятий, их комплексность, одномоментность и обязательность, В зоне повышенного риска предусмотрено использование специфической профилактики с применением вакцины из штамма 82 на молодняке и взрослом поголовье крупного рогатого скота; обязательным является дифференциация бруцеллеза и иерсиниоза в зонах минимального риска болезни при коипромета-

ции эпизоотической ситуации, а также использование нетрадиционных методов' идентификации и дифференциации изолятоя бру-целд и иероиний»

Научно оооснованная система противобруцвллезны* мероприятий в НЗ РФ рассмотрена и одобрена Департаментом (Г7В) ветеринарии Минсельхозпрода, изданы Агропромиздатом РФ в качестве методических рекомендаций по организации профилактики болезни и ликвидации очагов бруцеллеза.

Внедрение научно обоснованной системы противобруцеллез-ных мероприятий в условиях Нечерноземной зоны Российской Федерации позволило уточнить эпизоотическую обстановку и снизить напряженность эпизоотического процесса бруцеллеза, практически оздоровить все неблагополучные пункты бруцеллеза крупного рогатого скота.

ШБОДМ:

1. ьруцеллез животных, как самостоятельная нозологическая единица, на территории ИЗ регистрируется более ИО лот и до настоящего времени является составляющей нозологического профиля инфекционной патологии крупного рогатого скота.

2. 'Лшзоотический процесс при бруцеллезе крупного рогатого скота а Нечерноземной зоне России имеет торпидный характер, имеет тенденцию к стационарности и периодическим обострениям.

3. Бруцеллез крупного рогатого скота а НЭ РФ представляет специфическую экологическую систему, в которую вовлекаются и другие виды сельскохозяйственны)!, диких (свободно, липу-щих) животных. Однако, среди других видов животных эпизоотический процесс не развивается, так как они являются при повинном бруцеллезе биологическим тупиком.

4. По характеру развития эпизоотический процесс бруцеллеза у крупного рогатого скота отличается круглогодичной заболеваемость» с наличием эпизоотических надбавок. За последние годы в связи с существенными изменениями ь организации сельскохозяйственного производства в зоне значительно возросла роль иерегилируемых эпизоотических вспышек бруцеллеза крупного рогатого скота.

5. Эпизоотические надбавки в годовой динамике эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого скота определяются двумя элементами;

- появлением в стаде восприимчивых неиммушшх животных и активизацией механизма передачи возбудителя - массированное выделение возбудителя зараженными экивотними при абортах и отелах;

- смешиванием неблагополучных fio бруцеллезу етад животных с благополучными (неиммуиными) на пастбищах и водопое,

6. На территории ИЗ Р& сформировались три зрны риска бруцеллеза крупного рогатого скота: минимального (19 территориально-административных и национальных образовании), среднего (9 облаете?.) и повышенного (РяЗайскМ, Свердловску,ч и Нижегородская области) риска» Ct^ik-.-u. р.к:кч еозн^кис-

вения и распространения бруцеллеза крупного рогатого скота формируется под многофакторным воздействием и определяется природно-географичеокими, технологическими условиями развития животноводства и уровнем его Противоэпизоотического обеспечения,

7, Оптимальным приемом прогнозирования степени риска бруцеллеза крупного рогатого скота являются сочетанием оценка экстенсивных и интенсивных показателей эпизоотического процесса при этой патологии.

8. Зпизоотологическую диагностику бруцеллеза крупного рогатого скота следует проводить комплексно путем использования классических и нетрадиционных методов при диагностике болезни как у отдельных животных, так и при изучении закономерностей характера проявления эпизоотического процесса на популяционном уровне;

- результаты клинических исследований при бруцеллезе не отражают полностью развитие эпизоотического процесса в стаде, хозяйстве, регионе, не позволяпт судить о широте рас-

• нрострвнения и тяжести течения и проявления эпизоотии;

- серологические и аллергические методы диагностики бруцеллеза позволяют определить основные эпизоотологические категории, характеризующие эпизоотический процесс бруцеллеза: инцидентность, превалентность, очаговость, показатель неблагополучия, индекс апизоотичнооти, круглогодовую заболеваемость и эпизоотические-надбавки, количество животных, реагирующих по серологическим и аллергическим реакциям, надежность оздоровления и степень реактивности организма животных при бруцеллезе;

- нетрадиционные методы исследований (изучение жирно-кислотного и белкового спектра различных структур микробной клетки) наряду с классическими методами позволяют оптимизировать дифференциальную диагностику бруцеллеза, дифференциацию и идентификацию возбудителя на родовом и видовом уровнях;

- метод иммунологической провокации для диагностики латентных форм бруцеллезной инфекции в сьсмх и энзоотических очагпх бруцеллеза повышает эффективность эпизоотологичоской диагностики при оруцеллезе крупного рогатого скота на

6,*>4 1,3*.

но л i,;. »д<.t:UTi.nii:t гчни.чогичних раздражителен (.малая Ab.tu ьа&клш ii:i .mswhi Ш * 2 млрд. U.K.) происходит npo.io-i;;i!t::¡i , ¡ui/., opy«c*/ic:»a у крупного рогатого скота пак

на cnu.:m ииршгыш днтмпим съедпх эии-аоочичечких очи-i\.u), 5ин и u¥ü¡).)4¡iu.i -пленниц unзоотичьоках очагах)

иру п., л Л О j и 0:1 ИНфС: Kiur.l »

10. iloA «сидвым-шт Wioporuumx и OHuOitiuuui üpynoлаи-иа анТЩ'еШШ/ ¡;a3Apa..-.ii'i ujV.,;¡ (ыИСЦШЫ llpOïiib ЛыПОСИПроии, ам:;ц»а, сйьлрочов шнура) у шкшшировнницх прочий

OpyueJbli.au лИЬОНШХ «рОйЬЛИ«.ТСа ЦрЦТИОсреПЫНШН 62 дня) пилукиин tipoîкlioüpy¡шлиuuiix ¡штнтол, ¡;uin<sim:nu;'. клаиоичоо-кш«н реакциями.

íi, Paópiiíío'j'úrfíi^ü научно fíóociivuaiiuijH üi:C'ft,-ka противо-ору цг;л л t., 'jiiux ».ipoiipiiiiTUsi и IJ'J t'P, вклычакцая оптпниэпцню и Komuchuiiy« опнзоотологичеок/и диагностику, диффсронциронин--иую оц.-.нну стнпенн риска а нрогнозироьаине раивитня эпизоотии ОруцсЛЛОЛ», вшлифшивнуи Профилактику &ОА(ШШ, НГ.ЛНсТСИ высокоэффективной и приемлемой млн всех зон риска бруцьлясьи крупного рогатого окота.

Внедрении научно оиооиоздиноа системы нозьилило за послидиии ¡i-ki лет улучшить эпизоотическую ситуация по бруцеллезу л ib РФ.

ршсошцащм тиаюялш ;

1. "PcftOHûHAaiWii по профяликч'ике и мкаидадоя сруцеяяе-аь крупного рогатого скота в хозлпетвах Рязанском области"; ¿'tú. ши .".i-ронрома Рязанского облисполкома 0'9Ö5).

2. Рокшюндаи.ш "Научно Oübuuoiiiiiiiiüit система нротино-

ОруцеЛЛеЗНЫХ Мероприятии В iii;'¡r;pí¡G.ieu¡tO;j ЗОНЙ ilJiJi'"'; одобр,

ии заседании ¡ПО Госагропрома Iii Pü-K¡P (i967, 199i).

'i, Рекомендации "Ди^Ки.лшзилыши ¿и ai t-.о.лика йру^лло-за íi иьр.лшиоза и по "их апориликтике"; о добр, на заседании liivî i ounr^onpOHü ИЛ j С i.;? i 1991),

î. "¡JL-'ipa.i.UüKiHin.-: а^л-мс^аиа

iip.i A;^JÍ'ÍICJ4ÍI¡:O ÍJIÍIÜIW'';

одоир. м(,|,ар'.чч'.чптси utn<-j;Ht>b¡,íM а^л г.- (¡:>>'t.>.

3. i.p. :!.;'! о;., i. a "Mia'iO!; i,.ii-.p/jt«i¡,l.i i:.. л.Vi ■;,:,!

ор^^ллеы: ïioiio... t, ь ; ;:<-:ia¡',.i.,!,;',,,'-.:,

t.a¡,i ài(..:i4 Cu r>.'i .чи.г.о г » vi'".;-);/

СПИСОК ОСНОВНЫХ НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТШЕ ДИССЕРТАЦИИ:

при

заболев. с.х. кивотных в условиях Нечерноземья ц Сб. науч. тр. Горький, 1905. - С. 33...37. . ' v

2. Рекомендации по профилактике и ликвидации бруцеллеза крупного рогатого окота в хозяйствах Рязанской области /В,В. Оочиев. Т.А.Демина, Н.П.Старунова и др. //РекомендацииГорький, 1985. - 34 с.

3. К эпизоотологии бруцеллеза /В.В.Сочнев, Т.А.Демина, Н.П.Отарунова и др. //Профял, и лечение болезней с.х. животных; Тез. обл. науч.-пр. конф. - Вологда, 1986. - 0. 14...15.

4. Профилактика бруцеллеза животных /В.В.Сочнев, Т.А«Демина, Н.П.Отарунова « др.„//ИитекоиФ. жии-ва и кормопрзизп-ва в ИЗ PCiCPi Тез. докл. - Йошкар-Ола, 1986. - Ü. W9..«150.

5. Демина Т.Д., Старунова Я.П., Сочная #.В. К вопрзсу изу чения бруцеллезного эпизоотического процесса в Нечерноземной зоне РСжСР //Досткй, вет. науки и перед, опита - животн-ву НЗ P0&JP: Тез. докл. науч.-пр. конф, - Горький, IS'öil. - U< Т...8,

6. Старунова Н.П«, Демина Т.А, 'Гонденции бруцеллезного эпизоотического процесса в длительно неблагополучной по бруцеллезу области //Дсстил. вот* науки и перед, опыта - животн-ву НЗ ГО§СР: Тез. докл. науч.-пр. конф. - Горький, 198». - 0.9,..JJ

7. Основные причини, Обусловливавшие современную тенденцию заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом /В.П.Урбан, В.В.Сочнев, Н.П.Отарунова и др. //Акт. вопр. нрофил. бруцеллеза и оргониэоц. кед. помощи больным: Ссес. конф,, Новосибирск, 24-25 октября 1969 . - М„ 19И9. - С. 9...11.

О, Иммунологические реакции в дифференциальной диагностике бруцеллезе) и иеосиниоза крупного погатого скота /В.В.Сочнев, А.Ь.Тебекнн, Н.П.Старунова и др. //Солр. проб,п. икмунол., биотехнологии и клеточной шмюнерпн в вет^ медицине: Тез. докл. Всес. науч.-техн. конф. - М„, 1990. - 0. 112,..ИЗ.

9. Дифференциальная диагностики бруцеллеза и «еосяниояа крупного рогатого скота /В.В.0очтп>, A.b.'Jебскин, Н.и.Старунова и др. //О перспокт. раз», жив-ва и в<гфринарии н L3 пятилетка: Тез. совет. - Л. - Пушкин, 1990. - С, 7...8.

10. 1>руцеллем;«й эпизоотический процесс в южной части сов--ременной Мещеры /Й.В.Сочнен, Н.П.Стпряювп. В.И.Урбпн и дп. //О проспект. рг>зп, ¡ш>-пп и гстотшприи в 13 пятилетке: юг., сонет.' - Л. - Нувкин, J590. - С. !;.,.«.

II. Эпизоотолотчиския диагностика бруцеллеза крупного огатого скота /В.В.Сочнев, Б.¡1.Урбан, Н.П.Старунова и др. /Профил. и лечение заболев, крупи. рог. скота в условиях Вв-ерноземьд: Со, науч. тр. - Горький, 1990. - 0. 23...¿о.

12. Система контроля за качеством противоэииэоотичоских шроприятий при бруцеллезе /В.В.Сочнев, О.З.Иохакоа, В.н.Ур-1ан. Й.П.СтвиуноЕа // Ш Всес, конф. по апизоотологии. •• Ново ибирок, 1991. и. 49.-..50.

13. Научно обоснованная система противобруцеллезинх меро-фиятий в Нечерноземной зоне РС<1СР /В.В.Сочнев, Н.И.Старунова, '.А.Демина и др. //Рекомендации. -- и., 1991. - 27 с.

14.

Дифференциальная диагностика бруцеллеза и иероиниоза I меры по их профилактике /В.В.СочиеЕ, А.Ь.Тебекин, И.н.Стару-¡ова и др. //Рекомендации. - й.; Росагропромиздат, 1991. -¡7 с.

15. Научные подходи к созданию бруцеллезной искусственной шкцинн /В.В.Сочнев, Г.И.Григорьева, П.В.Игнатов, Н.П.Старуно-за. О.З.Исхаков //Вестник Российской академии с.х. наук, 1992,5 1. - 5. 50,,.53.

16. Причини появления положительных реакций на бруцеллез з благополучном хозяйстве /Н.П.О'тарунова, В.В.Сочнев, А.Ь.Те->екин и др. //Пробл. диагност., профил. и лечения с.х. иивот-шх в ИЗ; Тез. докл. конф. . - Н.Новгород, 1992. - С, 13,

17. Роль и место вакцинации в системе противобруцеллезннх 4ероприятий в России /О.З.Йсхаков, В.М.Авилов, Н.П.СтарунОБа

* др. //Пути интенсиф. пр-ва молока и мяса, профил. болезней з.х. животных в соврем, условиях: Тез. докл. Рос. науч.-прокт» сонф.-Смоленск, 1992. - С. 147...149.

18. Разработка антительного (иммуноглобулипового) латекс-того диагностикума для выявления антигенов бруцелл /А.Б.Тебе-син, В.В.Сочнев, Н.П.Старунова и др. //Нробл, профил. и лече-шя забол. с.х. животных; ьб. науч. тр. - Н.Новгород, 1993, ->. 23..,28.

19.

условиях — ______________________.................„, ............., .,.„.

1'ебекин и др, //Пробл. профил. и лечения заболев, с.х. хивот-(шх: Сб. науч. тр. - Н.НЬвгород, 1993. - С. 29,..35.

20. Г 'орчакова И.Г., Старунова Н.П., Сочнев В.В, ИдеятиЬи-кация и диффоренниация микроорганизмов методом электрофореза белков (обзор) //Пробл, профил. излечения заболев, с.х. »ипат-ннх: об. науч. тр. - Н.Новгород, 1993. - С. 36...43.

Эпизоотология бруцеллеза крупного рогатого скота в современной Мещеры /Н.П.Старунова, В.В.Сочнев, A.B.

¿1. Нетрадиционнее метода исследования при мШшшилль-■;°Й Диагностике бруцеллеза животных /В.В.Сочнев. Н.Г.Горчзлоса, .1.11,(<таруиова и др. //Рекомендации. - Н.Новгород, 1994. - Ьв с,

>r¿

22. Результат« энизоотологичиского мониторинга пои бруцол-кпупкого.рогатого окота в условиях Нижнего Поволжья и Ни-

Щ - -■ - -

Н.Новгород, 199't.

23. Прогнозирование эпизоотического процесса при бруцрлло-аз крупного рогатого ското в Российской Фсдоращш (сообщоние первое: прогнозная ориентация, задания на прогнозирование, прогнозный диагноз по состоянии на í,OI.i97ч г.) /.и.М.Авнлои, й,Я,Сгарунова, Н.В.Оочнев и др. //Инфакц. и инваз. болезни ;si¡~ ротных и мер!) борьбы: Матер, науч. копф, по итога« НИР за 19911993 гг. - fl,Новгород, 1994. -С. 13...17.

?ЛГ Руденко В.П., Сочнев B.D., Старунона Н.П. Усовершенствование истодов диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота и внедронно их в коналекс протшзобиуцолльзпых мероприятий //Инфекц. к инваз. болозни животных и керн оорьсщ; Матор.науч. конф» по итогам НИР за I99I-I993 гг. - Н.Новгирод, JL9SV. ~ С. 1Ü...22.

25. Идентификация эпизоотических штаммов бруцзлл п? спск-траи жирных кислот <Ц.Г.Горчакова, й.В.Оочнов, п.Н.Ствр^ииит и др. //Инфакц. и инввз. оолозни животних и нерв сорьбн: lîuïep. научд кон$. по итогам НИР за 1991-1993 гг. - Н.Н.-тгород. /99'«.-С. 2/...31.

26. Сиоссб обнаруяония гозбудитояя бр.уцоллоэа о пеноиьл реакции вгглптинпцяи латекса /й.п.^очнси«, А.Ь.Тобукан, П.П.Ста-рунова и др. //Врем.методика. - Н.Новгород, l9:J't. - 5 с.

27. Экологическвя ниша бакч ерМ рода ïor'Unia /U.tt.Go-i-нов, Л.ь.Тебекин, Н.П.Стирунова н др.; 'i оз. докл. í Мояд. Сла-вяио-ЕвразиКокого Конгр. деят. nayr.n, культуры, нроднртшмят.-Н«Новгород, ISЩ (в печати).

П..'|. iíJJ j-:'}. I'-1'/)