Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Эпиэоотологическая эффективность гипериммунной сыворотки против эпизоотических штаммов пастерелл серовариантов А и Д, при остром респираторном синдроме телят

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ВЕТЕРИНАРНАЯ ' АКАДЕМИЯ имени К.И. СКРЯБИНА

На правах рукописи ВЛАДИМИРОВ ВЛАДЖ.МР АЛЕКСАНДРОВИЧ

»пизоотологическая эффективность гипериммунной сыворотки гротив эпизоотических штаммов пастерелл серовариантов А и

_ г

Д, при остром респираторном синдроме телят

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

МОСКВА 1992

/

Работа выполнена в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной Академии им. К.И.Скрябина

Научный руководитель- доктор ветеринарных наук профессор Конопаткин A.A.

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Сидоров М.А. кандидат ветеринарных наук, доцент Костенко Т.С.

Ведущая организация- Всеросийский ордена Ленина нау исследовательский институт экс римент&льной ветеринарии имен Я.Р. Коваленко

Защита состоится «'Яя&фх. 1992 г. в час

заседании'специализированного совета К 120.36.05 по за диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук Московской ордена Трудового Красного Знамени вотеринарн академии им. К.И. Скрябина

(109472,Москва,ул.Академика Скрябина,23; телефон:377-93

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке акаде Автореферат разослан 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета

Федосеева Т.Н.

I. Общая характеристика работы.

Актуальность теш. Одним из слагаемых успешного развития живот-одства является эффективная борьба с инфекционными заболеваниями, чение которых не уменьшается, а ощутимые экономические убытки эывают обратить на них пристальное внимание и постоянно соЕзряен-овать методы диагностики,' лечения и профилактики.

Научно технический прогресс в животноводстве осуществляется пут перевода ферм на промышленную основу, организацией крупных ни-новодческих комплексов с автоматизацией значительной части произ-ственных операций и механизацией трудоемких процессов. В усло-х интенсификации отрасли, при высокой концентрации поголовья вились благоприятные условия для многочисленных пассажей микроор-измов, з результате значительно изменился вирусно-бактериальный животноводческих помещений. В искусственных экосистемах промыш-ных хозяйств изменяется и становится более сложной эпизоотичес-

ситуация, а иммунный статус поголовья оказывается неопределен- .

*

В этом плане существенную проблему для промышленного откорма та, при котором на еденице площади сосредоточено значительное по-овье, составляют смешанные респираторные инфекции телят. Важней-эадачей ветеринарной науки и практики является изучение эпизоо-огических особенностей этих заболеваний, а также изыскание эффек-ных средств их лечения и профилактики.-

В работах отечественных и зарубежных авторов, касающихся этио-ии смешанных респираторных инфекций, из числа патогенных бакте-, наиболее часто отмечают P.nultocida серовариантов А, 3 и Д ильштайн П. и др.1974; .Масимов H.A. 1982; Шегидевнч Э.А. и др. 5; Конопаткин A.A. и др.1987; Sohlraial D.,KielBteln Р. 1982 и др.)

По данным исследователей в профилактике смешанной респиратор-инфекции телят, особенно в крупных хозяйствах, комплектуемых рным поголовьем, существенное значение могут иметь моно- иполи-ентныз гипериммунные сыворотки, содержала антитела против наи-ее важных патогенов респираторного тракта» ( Кис В.И. 1980; Маси- . H.A. 1982; Муравьев В.Н. и др. 1982; Карьшева А.О. и др. 1983;; ица В.Н. и др. 1989; Апатенко В.11. 1990 и др.).

Серопрофилактика и серотерапия смешанных' респираторных инфек-молодняка крупного рогатого скота является одним из наиболее оф-тивных методов борьбы с этим заболеванием. Однако "имеющиеся в

распоряжении ветеринарной службы биопрепараты против пастерелле крупного рогатого скота изготовлены на основе Р.ииИ;ос1(1а • серс риакта В, что не позволяет надежно профилактировать респираторь патологи» обусловленную серовариантами А и- Д.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлос изучение эпизоотологической и экономической эффективности приме нил гипериммунной сыворотки против пастерелл серовариантов А и для лечения и профилактики респираторных заболеваний телят смен ной этиологии в откормочных комплексах, комплектуемых сборным I головьем. 3 задачи напих исследований входило:

' I. Изучить эпизоотологические особенности смешанных реепщ торных инфекций телят в откормочных хозяйствах.

2. Изучить культурально-морфологические, биохимические и I чуногенные свойства выделенных штаммов Р. ши1-Ьоо1т1а.

3. Получить гипериммунную сыворотку против эпизоотических" штаммоз пастерелл серовариантов А и Д, изолированных от молодш крупного рогатого скота при смешанной респираторной инфекции и изучить её превентивные свойства на белых мышах и телятах.

. 4. Получить поливалентную гипер'иммунную сыворотку против I русов /!РТ, ПГ-З, ВД, адено , а также пастерелл серовариантов А Д.' Апробировать её в условиях откормочных хозяйств, неблагопол^ ных по смешанным респираторным инфекциям молодняка крупного ро! того скота.

Научная новизна;Подтверждено этиологическое значение Р% гт гоо1с1£ серовариантов А и Д при респираторных заболеваниях смешг ной этиологии телят в откормоч!Шх хозяйствах, комплектуемых сб< ным поголовьем молодняка крупного рогатого скота.' Получена гип< иммунная сыворотка против Р.ппПЛос^аа серовариантов А и Д, и I ливалентная сыворотка против вирусов ИРГ, ПГ-З, ВД, адено и пас релл серовариантов А и Д. Дана сравнительная оценка лечебной и профилактической эффективности гипериммунных сывороток при сие: них респираторных инфекциях телят в условиях откормочных комгш сов, с учетом серологического контроля в пробе роста, реакции кольцепреципитации, реакции диффузионной преципитации и латекс! глютинации. Установлена прямая зависимость между уровнем проти! пастереллезных антител ( проба роста ) и активностью сывороток .тесте серозащиты белых мышей. Определена экономическая эффект! ность применения ■ гипериммунной сыворотки против пастерелл серо!

ihtob А и Д при профилактике и лечении смешанных респираторных-зекций телят.

Теоретически обосновано и пратически доказана необходимость тчения гипериммунной сыворотки против пастерелл серовариантов i Д в состав поливалентной противовирусной ( ИРТ, ПГ-3, БД, аде) сыворотки. •

Отработаны режшлг постановки пробы роста для серотипизац;;;; :терелл и оценке активности гипериммунной сыворотки против пас-эелл серовариантов А и Д. Испытан " бульон Ставропольского НИИ <цин и сывороток" для выделения и культивирования пастерелл.

Практическая значимость. Отработан режим гипериммунизации во-в-продуцентоз и эксплуатации в условиях специальных ветеринар-к лабораторий откормочных комплексов.

Получены гипериммунная сыворотка против пастерэлл серовариан-в А и Д, и поливалентная сыворотка против вирусов ИРТ, ПГ-3, БД, ено-, пастерелл серовариантов А и Д. Разработаны схемы оценки активности и применения, профил§ютические и лечебные дозы при епанных респираторных инфекциях телят в откормочных хозяйствах, ливалентная сыворотка испытана в трех хозяйствах Белгородской и льской областей с положительным результатом. .

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены • двух сообщениях на научной конференции МВА в 1991 г.

Публикации. По результатам исследований три статьи опублнко-шы.в. печати.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 136 ■раницах малшнописного текста и состоит из введения, обзора лите-1туры, собственных исследований, обсуждения, выводов, сведений о >актическом использовании полученных научных выводов, рекоменда-!й по использованию научных выводов, списка литературы и приложе-ш. Работа иллюстрирована 19 таблицами, 9 рисунками. Список ис-)льзованной литературы включает 196 источников, из них 83 иност-шных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.>

2.1. Материалы и методы. ;

В настоящей работе представлены результаты исследований, про-эденных в I988-I99I гг. на кафедре эпизоотологии, в лаборатории ярусологии и кафедре микробиологии Московской- ордена Трудового ■ расного Знамени ветеринарной академии им. К. И.. Скрябина, а также

на откормочных комплексах колхоза " Большевик " i; совхоза им. 60 летия СССР Белгородской области, совхоза "Авангард" Тульской и совхоза "Гжельский" Московской областей, в Чернянской районной.в теринарной лаборатории Белгородской области.

Последовательность и приемы эпизоотологического метода иссл! дования, а также расчет интенсивных и экстенсивных показателей э; зоотического процесса проведены согласно методическим рекоменда циям " Методы исследования и анализа в эпизоотологии " ( Глушков А..Конопаткин A.A.rI98I ).

Проведен анализ данных ветеринарной отчетности, гуртовых ведомостей о поступлении телят и других документов в колхозе "Большевик" и в совхозе 60 летия СССР за последние 5 лет.

Течение и клиническое проявление болезни органов дыхания H3j чали на больных телятах в возрасте от 30 дней до шести месяцев. Патологоанатомический метод включал вскрытие павших и вынужденно убитых телят.

Для выделения чистых культур-пастерелл и их культивирования использовали общепринятые в СССР среды, а также " питательную сре ду-для выделения гемо(<ультур и культивирования стрептококков-суха производства Ставропольского НИИ вакцин и сывороток и"бульон Дифк лаборатории Дифко США. В качестве основного метода выделения чистых культур использовали вкутрибрюшинное заражение белых мышей су точными смешанными культурами с последующим высевом на плотные и жидкие питательные среды крови из сердца погибших мышзй.

У изолятов пастерелл изучали культурально-морфологические, тинкториальные и биохимические свойства по общепринятым методам.. Идентификацию пастерелл проводили согласно " Определители бактери! Bergey 3. (1986).

Вирулентность ( JI^q) определяли на белых мышах по методу Кец бера в модификации Ашмарина (1962). Токсигенность пастерелл определяли на белых мышах путем внутрибрюшинных инъекций фильтратов 7< часовых бульонных культур в дозе 0,5 мл. .в разведениях от 1:2 до 1:64. '

Серологическую типизацию штаммов по капсулыюму антигену проводили. в РД11 по Сидорову (1984). Для типизации изолятов пастерелл серовариантов Л и Д использовали акрифлавиновую пробу и тест на п)алуронидйэу (Carter Q.R. е. а.1973; 1975 ). Типоспецнфические сыворотки на эталонные штаммы пастерелл серовариантов Л, В, Д и Е

- о -

олучали путем гипериммунизации кроликов фильтрованными через се-ацекс Q-2C0 фракциями капсульньк антигенов.

Серии антигенов для гипериммунизации доноров готовили из зпи-оотических штаммов пастерелл серовариантов А и Д на. кафедре эпи-оотологии МВА и в Чернянской районной ветеринарной лаборатории.

Гипэриммунную сыворотку против пастерелл сбровариантов А и Д олучали на кроликах и волах продуцентах. Взятие крови от доноров роводили до начала гипериммунизации, затем каждые 10 дней после оследнего введения антигена по 5-7 л крови от донора. Сыворотку олучали методом отстаивания в стерильных одноразовых полизтилено-ых мешках. Полученные серии гипернммуннкх сывороток проверяли на теридьность и безвредность по общепринятым методикам.

Превентивные свойства гипериммунных сывороток изучали в тэс-е серозкциты белых мьшей. Наличие з сыворотках антител к исходил серовариантам пастерелл выявляли серологическими тестами (РДП, КП| проба роста, реакция латекс агглютинации).

Для РДП в качестве антигена использовали 20 млрд. взвесь пас-ерелл, инактивированную при 60° в течение 30 мин. в водяной бане, ля РКП антиген получали -путем центрифугирования при 5000 об/мин течение 30 мин 20 млрд. взвеси пастерелл, инактивированноЯ при 0° в течение 30 мин.

Пробу роста определяли пробирочным методом. Сыворотки предва-ительно инактивировали в водяной бане при 56° в течение 30 мин , атем раститровывали в проверенном на стерильность бульоне таким бразом, чтобы в первой пробирке в объеме 2,0 мл было разведение :2, во-второй- 1:4 и т.д.^до. 1:1024. Пробирки выдерживали в тер-остате при 37° в течение 24 ч. В каждую пробирку добавляли 0,025 л суточной бульонной культуры пастерелл содержащей I млрд.м.т./мл культивировали в термостате при 37° в течение 24 ч. Положитель-ой считали реакцию в том случае, если после культивирования на не пробирки обнаруживали осадок в виде перевернутого зонтика или рупных хлопьев, а надосадочнута питательную среду- прозрачной.Пра аличии осадка и незначительного помутнения^среды реакцию считали омнительной, а при наличии роста, подобного в контрольных пробир-ах, реакцию оценивали как отрицательную. Контролем служили про-ирки с МПБ и с раститрованной в бульоне натцвной биофабричной сы-ороткой крупного рогатого скота или нативной кроличьей сывороткой, е содержащей противопастереллезных- антител. -65S • ' '

- О -

Лечебно-профилактическую эффективность гиперимыунной сыворо ки против пастерелл серовариантов А и Д, при экспериментальном воспроизведении заболевания, изучали ка 24 телятах в двух опытах

Эпизоотологическую эффективность применения гипериммунной с . воротки против пастерелл серовариантов А и Д и поливалентной сыв ротки изучали в условиях производства на больных и вновь завози-l.rjx тзлятах, опытные и контрольные группы- аналоги.

Оценку эпизоотологической эффективности разрабатываемых сыв роток проводили согласно методическим рекомендациям Гармиса М.Г. Константинова D.M. (1979), а'экономическую эффективность- по мет дпчёским рекомендациям И;а{Ъсаманова М.Х.(1982)и КоржеЕенко Г.Н. и др. (1985).

2.2. Результаты исследований.

2.2.1. Анализ эпизоотического состояния обследованных отноц точных комплексов.

Эпнзоотологическпе особенности респираторных болезней телят смешанной этиологии изучали ка базе откормочных комплексов колхс за."Большевик" и совхоза им. 60 летия СССР Белгородской области. Оба комплекса комплектуются сборным поголовьем молодняка крупног рогатого скота. Заболевание регистрируется- сред.; молодняка до 6-месячного возраста, но вспкпки респираторных заболеваний отмечались и среди телят более старшего возраста. Анализ реестров выбь тия скота показал, что причиной падежа, выполненного убоя и прел деврекенной сдачи на мясокомбинат молодняка в 952 случаев являм ся респираторные ..болезни . . ,

В совхозе им. 60 летия СССР с 1985 по 1991 гг. смертность среди завозимых телят увеличилась с 2,945 до 8,15. В колхозе "Большевик" за этот же период времени смертность сократилась с 15,1 до II,85. Заболеваемость в хозяйствах варьировала в пределг 40-605. В течение 150 дней выращивания обычно регистрировали тр; вспьпки респираторных заболеваний, отличающиеся по интенснвност! эпизоотического процесса. Первая вспкака приходилась на 5-25 де( пссле формирования технологической группы, характеризовалась он; самым высоким уровнем заболеваемости (605), при второй и третье! вспьшках заболеваемость не превышала 40*.

При проведении корреляционного анализа иегду среднеыесячны) выбытием и поступлением телят в комплексе "Большевик" не удалое!

,'явить достоверной зависимости ( Р>0,05 ) между этими покаэате-тми. Обнаружена взаимосвязь мекду сезоном года и непроизводитель— гм гыбытием' телят (результативный признак? =3,94), сила влияния ;зонности ч ^ = 1,303 х 10^'при Р< 0,С5, т.е. 135 выбытия телят и о обусловлено сезонными факторами. В совхозе 60 летия СССР ¡стоверного влияния сезона года и среднемесячного количества за-таемых телят на непроизводительное выбытие не обнаружено (Р)0,05).

2.2.2. Результаты бактериологических и серологических исследований материала и сывороток крови от телят.

Изучение культурально-морфологических, тинкториальных и фер-гнтативных свойств выделенных культур позволило отнести их к ви-I Р. ти11;ос1<1а .

Наибольшая частота выделения ( более 805 при п=25) была при зименении обогащенных питательных сред; МПБ и МПА с 105 перевара зттингера, МПБ и МПА с 105 сыворотки крови лошадей, бульона Диф--)'И бульона Ставропольского НИИ. При использовании необогощенних Ш и МПА пастереллы выделяли только из 605 проб. При использова-1и метода выделения Дригальского частота изоляции пастерелл была иге ( необогащекные !Л1Б и МПА - 55,0-60,0$; обогащенные среды -1,0-92,0% ), чем при биологическом методе ( необогащенные МПБ и 1А -40,0-52,05, обогащенные- 68,0-72,05 ).

Наибольшую концентрацию пастерелл обнаруживали в легких (2,0 10® - 2,2 х ТО^к.о.е.), среднюю- в средостенных лимфоузлах (1,2 10^ - 1,7 х Ю^к.о.е.) и наименьшую- в селезенке. (2,9 х 10^-,1 х 10^ к.о.?.).

В результате бактериологического исследования патматериала и зоб носовых смывов от телят 4-х комплексов вцделили 325 культур ютерелл, в том числе из носовых смывов 154 ( 47,35 ), из лег-IX- 78 ( 24,05 ), из средостенных лимфоузлов- 73 ( 22,55 >, из ;лезенки-20 ( 6,25 ).

Серологическими исследованиями установлено увеличение титра 1тител у 405 контрольных телят к аденовирусу и у 205- к РС-виру-г. При исследовании 5 проб сывороток крови.»от 6-месячных телят, зонически больных бронхопневмонией, в трех случаях обнаружили ан-1тела против аденовируса ( 1:256-1:4096 ) и в 5-ти случаях-против )- вируса ( 1:2048 - 1:4096 и выше ).

2.2.3. Свойства'пастерелл и их серотипизаш;я.

8 референтных и 40 эпизоотических штаммов ?.mMocido при культивировании на кровяном агаре не Еызывали гемолиза эритроцитов барана, не разжижали желатину, не изменяли лакмусовое молоко. .Все штаммы ферментировали, галактозу, глюкозу, маннит, сахарозу, сорбит с образованием кислоты без газа, образовывали индол и серо водород в слабой степени, были оксидаза положительными и не фюр-г ментировали арабинозу инозит, инулин, дульцит, не расщепляли мочевину. Из 48 штаммов 10 сбраживали ксилозу,6-лактозу,8-мальтозу.'

Из 325 изолятов пастерелл 173 ( 53,2% ) были отнесены к серо варианту А, 124 ( 38,2% }-к сероварианту Д, не типировано 28(8,6% В хозяйствах Белгородской области преобладали пастереллы серова-рианта А С 65,0% ), а в хозяйствах Московской и Тульской областей Р. rmi£ioc'c/a в 70-80% случаев была отнесена к сероЬарианту Д.

Из 10 производственных штаммов, использованных при приготовлении антигенов для гипериммунизации, три штамма продуцировали экзотоксин, при этом 2 из них относились к сероварианту Д и одиН- к сероварианту В. Наиболее вирулентными ( ЛДзд 0,7 х 10* к.o.e. были штаммы пастерелл сероварианта В', ЛДзд сероварианта А равнялось Л11аь 0,75 х Ю3 к4о.е. и сероварианта Д- 0,75.x 10^ к.о.е. Пастереллы сероварианта Е по вирулентности мало отличались от сероварианта В.

2.2.4. Получение гипериммунных ( экспериментальных ) сывороток от кроликов и Волов-продуцентов*. определение их специфической активности к превентивных свойггз.

Сыворотки крови кроликов, полученные на капсульные и цельно-микробные антигены пастерелл в тесте серозещити предохраняли от гибели не менее 70% белых ыызей и били активными в серологичзскга реакциях с гомологичными антигенами в радведеюшх: РДП- 1:8 - 1:1 РКП - 1:32 - 1:128; ПР- 1:128 - 1:256.

Наименьшее антигенно'е родство ыезду гомологичными к гетеро-логичными сероварианта!.™ пастерелл наблюдали в пробе роста и разница между ними составляла 3-4 разведения, тогда ках в РДДк РКП разница не превышала .1-2 разведений сыворотки.

При существующем в хозяйстве режиме эксплуатации водов-прощ центов ( взятие крови через каждые 10-14 дней в объеме 5-7 л) nej воначальный уровень антител сохраняется в течение 30 дней. Через

- s-

цней титр прогявопастереллэошх гктгг. >д у.*.л, снижается га 1-2 ведения, к 90 дню- на 3-5 р.азведений, а КС1 дню противопас-зллезнъге антитела выявляли лишь в низких титрах или только в ьной сыворотке.

Уровень противопастереллезных антител в сыворотках крови до-ов, гипериммунизированных антигенами из-пастерелл и доноров, ериммунизированных вирусными ( ИРТ, ПГ-3, ЕД, адено- ) и пас-зллезцыми антигенами, был одинаковым через 10-, 20- и 30 дней ле окончания гипериммунизации . Полученные серии гипериммун-сыворотки против пастерелл серовариантов А и Д были активны-в РДП в разведениях от 1:8 до 1:32; в ПР- от 1:32 до 1:256; ЛА- от 1:256 до 1:2048, а поливалентной сыворотки в РДЛ-эт до 1:16; . в ПР- от 1:32 до 1:256; в РЛА- от 1:256 до 1:2048. воначально отмечался высокий уровень антител против пастерелл оварианта Б, что обусловлено применением коммерческой эмульги-анной Еакцины против пастереллеза крупного рогатого скота, зо-, свиней и овец для создания грундиммуниТета.

Гиперимыунная сыворотка против пастерелл серовариантов А и Д ги'рующая э пробе роста в разведениях от 1:4 до 1:8 в тесте се-вщиты предотвращала гибель менее 50% белых мышей, а при актив-ги от 1:16 до 1:32 и вьсе. - не ценее 70% мышей, зарат.енных за-ее подтитрованной смертельной дозой пастерелл при 100^-ной гн~ it й контрольной группы.

2.2.5. Результаты изучения зпизоотологической эффективности экспериментальных серий гипериммунтгх сывороток при ■ смешанных респираторных инфекциях телят.

Изучение защитных свойстз'сывороток проводили на больных и вь поступающих здоровых телятах. Экспериментальную инфекции производили о изоляторе 1TJ .',«1, а эпизоотологкческую. эффэк-ность определили з откормочном комплексе к-за "Большевик".

Нспользозаккал в работе г:шерн;я!у1шая сызоротка против пас-злл серозарнангов Л и Д икела следующие титры антител к исход-•jtrw.c?!: в РДП- к сероварианту А- 1:16, к сероварианту Д-1: в ПР- к серозарнанту А-1:64, я Д-1:128; в РЛА- к серовяриан-А и Д- не менее 1:1024. Поливалентная сыворотка кыела титр отел прот:ш вирусов: ИРТ-1:1024, ПГ-3-1:512, БД-1:5Г2, адено-£55, против пастерелл еероварналтов А и Д в пробе роста не эе 1:32.

2.2.5.1. Лечебная и профилактическая эффективность'* гипер: мунной сыворотки против пастерелл серовариантов и Д при экспериментальном заражении телят.

Изучение лечебной и профилактической эффективности гипер; мунной сыворотки против пастерелл серовариантов А и Д провели двух опытах на 24 телятах 1-месячного возраста при эксперимен тальном воспроизведении заболевания.

В первом опыте из 12 телят, внутритрахеально зараженных ] тереллами серовариантов А и Д, после проявления клинических гг наков, характерных для острого респираторного заболевания ( п шение температуры тела до 40° и выше, учащение пульса и дыхан бьшо сформировано 4 группы по три головы. В 1-й и Н-й группа телят заразили пастереллами сероварианта А, а в Ш-й и 1У-Й-вариантом Д. На второй день послепроявления клинических призн телятам 1-й и Ш-й групп подкожно вводили гипериммунную сыво ку й дозе 1,0 мл/кг, телятам 11-й и 1У-Й групп подкожно вводи нативную сыворотку крупного рогатого скота в тех же дозах. Пр должительность болезни у телят 1-й и Ш-й групп не превышала дней, а у телят 11-й и 1У-Й групп - 4-7 дней и более.

Вс-втором опыте на 12 телятах изучали профилактическую э тивность сыворотки. Сформировали четыре группы телят ( по 3 Телят 1-й и Ш-й групп после введения гипериммунной сыворотк дозе 0,5 мл/кг заражали пастереллами серовариантов А- и Д соот ственно. Контрольным телятам С 11-й и 1У-Й групп ) перед эара нием вводили нативную сыворотку крупного рогатого скота. Из 6 опытных телят кратковременное повышение температуры тела заре гистрировано у двух ( по одному из 1-й и Ш-й групп в течени дня), а из б контрольных телят заболели все, причем продолжит ность болезни была 4-7 дней.

• 2.2.5.2. Эпизоотологическая эффективность гипериммунных сывороток.

Исследования по изучению лечебной-эффективности гиперимм ной сыворотки против пастерелл серовариантов А и Д повторили естественно больных телятах в условиях откормочных хозяйств, этого 20 клинически больным телятам подкожно вводили гипериш ную сыворотку в дозе I мл/кг живой массы. В первой группе ( ]

.), при остром течении заболевания, средняя продолжительность езни била 3,5 дня, а коэффициент эпязоотологической эффектив-ти составил 1,42. Во-второй группе у 10 телят с хроническим ением болезни средняя продолжительность заболевания составила ; дня и эпизоотологический коэффициент достигал 3,0. В конт-ьних группах после применения нативной сыворотки крупного рога-о скота в тех же дозах при остром ( 10 гол.) и хроническом 0 гол:) течении болезни средняя продолжительность заболевания тавила 5,7 и 9.7 дней соответственно.

Опыт 2. Наиболее высокая лечебная эффективность гиперн.чмун-сыворотки против пастерелл серовариантов А и Д была при соче-ии подкожного и аэрозольного способов применения ( Р<0,05 ). ервой группе из 50 леченных телят выздоровело 48 ( 96% ) пе-од заболевания з хроническое течение зарегистрирован только у телят ( 4,0% ).' В двух других группах ( по 50 телят ) при при-ении сыворотки только подкожно или аэрозольно, выздоровление ечено у 35 ( 70,0% ) и 37 ( 74,02 ) животных соответственно.

Опыт 3. Для сравнительного изучения лечебной эффективности ер:шму!{ных сывороток были сформированы четыре группы больных ят по 60 гол. Телятам 1-й группы вводили с лечебной целью ги-иммукную сыворотку против пастерелл серовариантов А и Д, 11-й пг.е - поливалентную сыворотку, содержащую антитела против виру-ПГ-3, адено-, ЕД, 11РТ и пастерелл серовариантов А и Д; Ш-й фабричную противопастереллезную сыворотку; 1У-й(контрольной) ппе - нативную сыворотку крупного рогатого скотаС срок наблю-ия 20 дней). Наибольшей лечебной эффективностью обладала поли-ентная сыворотка: выздоровело 55(93,3%) телят, вынуждено убит ,76%), и остались больными - 3(5,0%). Среди леченных гиперим-ной сывороткой против пастерелл серовариантов А и Д выздоровело 78,3%), выбраковано'- 3(5,0?) и остались больными -.10(16,7%), ле применения биофабрнчной ггротивопастереллезной сыворотки выз-ОЕело 41(68,32), выбыло - 4(6,7%) и остались больными 15(25,0%). ффнциент эпизоотологической эффективности по летальности в 1-й, й, 111-й группах составил 1,6, 4,88, и 1,23 соответственно.

Опыт 4. Для сравнения профилактической эффективности- био-ркчной и экспер;гыентальной противопастереллезных сывороток в иод поступления телят было сформировано 3 группы(по 20 гол.), олеваемость среди телят 1-й группы, обработанных экспернченталь-сивороткоЯ, сотавила 40,0%, во II—й(биофабричная сыворотка) -

- 50,ОХ и в Ш-й ( интактная )- 55,05. Коэффициенты эпизоотологической эффективности по заболеваемости и летальности достигли 2,37 и 4,0, 1,9 и 2,0 соответственно.

Опыт 5. При сравнительном изучении профилактической эффективности гипериммунной сыворотки против пастерелл серовариантов А и Д и поливалентной(претив вирусов ПГ-3, адено-, ВД и ИРТ и пастерелл серовариантов А и Д) гипериммунной сыворотки в период комплектования секций было сформировано три группы телят. В 1-й )уппе применили сыворотку против пастерелл серовариантов А и Д , П-й - поливалентную и в Ш-П - сыворотки не применяли.. Из 250 телят 1-й группы заболело 150(60,0$), выбыло - 12(4,в/о); а из 250 телят 11-й группы заболело - 120(48,045) и выбыло - 10(4 В контрольной группе заболели все 20 телят и выбыло - 2(10,0%). Коэффициенты эпизоотологической эффективности по заболеваемости и летальности были выше (Р< 0,05) у поливалентной сыворотки ] составляли 2,08 и 2,5 соответственно, тогда как у гипериммунной сыворотки против пастерелл серовариантов А и Д они были 1,66 и 2,08 соответственно.

2.2.7. Экономическая эффективность применения гипериммунно сыворотки. '

Экономическая эффективность гипериммунной сыворотки против пастерелл серовариантов А и Д составляла при применении- сыворот с лечебной целью 56,63 руб.. на одну обработанную голову и 2,61 на рубль затрат. Использование сыворотки с профилактической целью давало экономический эффект на одну обработанную голову -17,64 руб. и экономический эффект, на рубль затрат равнялся 11,76 руб.'

3. Выводы.

I. В базовых откормочных хозяйствах респираторные болезни смешанной этиологии имеют широкое распространение среди молодня до 6-ти месячного во&'^аста, завозимого из хозяйств-поставщиков разной эпизоотической обстановкой. Убиквитарность возбудителей, патогенность которых проявляется преимущественно при ассоциатиЕ взаимодействии вирусов ( ИРТ, ПГ-3, ВД, адено и др.) и бактери? (пастерелл', стрептококков, стафилококков и др.),а также неспещ: фических факторов, позволяет отнести такую патологию в группу

зоотических факторно-инфекциопки болезней.

2. Комплексным диагностическим исследованием с использова-:м эпизоотологическо!о, клинического, патологоанатомичэского, юлогического и бактериологического методов, включая экспери-1тальное заражение молодняка крупного рогатого'скота, доказано юлогнческое значение Р. mufiocJcia серовариантов А и Д в воз-:новении массовых респираторных смешанных инфекций в откормоч-: скотоводческих комплексах.

3. Бактериологическим исследованием проб патматериала (лег, средостенних лимфоузлов, носовых смывов), взятых от клиники больных и павших телят, изолировано 325 культур P.rriufkc.'ciq овариантои А и Д, в1 том числе сероварианта A-I73 (53и оварианта Д- 124 (38,2%). Полевые изоляты Р.гш£Ьс«'с1о СОро-иантов А и Д по культурально морфологическим свойствам и фер— гатив1?ой активнбсти не отличались от референтных штаммов. Лишь зльные изоляты ( 12,3%.)-, в отличие от референтных, сбраживал» гозу и мальтозу. При сравнительном изучении выделенных культур герелл и референтных штаммов серовариантов А,В и Д установлена шсшая вирулентность у пастерелл серовариантов В, составляющая ) 6-7 к.o.e. и значительно меньшая у серовариантов А ( 0,75 х

• 1,4 х Ю4 к.o.e.) и Д ( 0,75 х Ю5- 1,7 х Юб к.о.е.); пап-лей токсигенностьа обладали пастерелли сероварианта Д. . 4. Разработанная схема гипериммунизации и эксплуатации волов-уцентов, включапцоя набор и количество антигенов, сроки ш/муни-и и езятич крови в условиях ветеринарки:': лабораторий откормоч-комплексоо, позволяет получать достаточное количество гиперин-ой сыворотки, необходимой для серопрофилактики и серотерапии овых респираторных заболеваний телят. Сочетанное аэрозольное дкожное применение гипериммунной сыворотки в системе профи-ических мероприятий в откормочных хозяйствах позволяет зна-льно снизить- заболеваемость.

5. Поливалентная сызоротка, полученная комплексной шдауниза-волов-продуцентов вирусными(ПРТ, ПГ-3, ВД, адемо-) и пестерел-дш (fimuiiockia сероварианти А и Д) антигенами и гипэриммунпал зотка против пастерелл серовариантов А и Д в биологических и югических тестах были одинаково активными и, имея титры шопастереллезних антител 1:16 -'1:32 в пробе роста, защищали :нее 70,0^ белых мышей d тесте серозащиты.

6. Применение гиепркммунной сыворотки против пастерелл серо-нтов А и Д в откормочных хозяйствах снижает заболеваемость

л

на 20-405 и летальность на 5-10% при смешанных респираторных заболеваниях телят. Экономическая эффективность на рубль затрат npi лечении равняется 2,61 руб. и при профилактическом применении -11,76 руб.

4. Сведения о практическом использовании полученных автором научных выводов

Получены гипериммунная сыворотка против пастерелл серовариа тов А и Д, а также поливалентная сыворотка содержащая антитела против вирусов ИРТ, ПГ-3, БД, ацено- и пастерелл серовариантов А Д. Эти сыворотки используются в схеме ветеринарных обработок мол няка крупного рогатого скота в откормочных комплексах хозяйств Блегородской и Тульской областей неблагополучных по смешанным респираторным инфекциям телят. Разработана и внедрена схема гипериммунизации и эксплуатации волов-продуцентов в условиях спе лабораторий откормочных комплексов.

Отработаны режимы постановки пробы роста для серотипиэации пастерелл(рационализаторское. предложение в соавторстве) и оценк* активности гипериммунной сыворотки против пастерелл серовариант< А и Д. С положительным результатом испытан бульон Ставропольско] НЙИ вакцин и сывороток для выделения и культивирования пастерел;

Проведено комиссионное испытание штаммов пастерелл(8I-A и 81-Д) ВГНКИ ветеринарных препаратов, которые депонированы в качестве производственных.

5. Рекомендации по использованию научных выводов

Результаты эпизоотологического обследования откормочных ко лексов сопряженно связанные с межхозяйственным объединением и т нологией воспроизводства, выращивания и откорма телят рекоменду ется использовать при составлении планов прсфшактической и оз; ровительной работы при массовых смешанных ф&кторно-инфекционнш заболеваниях молодняка крупного рогатого скота в откормочных хс зяйствах, комплектуемых сборным поголовьем телят.

Результаты изучения активности сывороток в серологических реакциях и превентивных свойств на белых мышах позволяют количественно отразить уровень антител в гипериммунных сыворотках.

Данные об испытании гипериммунной сыворотки против пастер серовариантов А и Д на телятах позволяют рекомендовать включен этой сыворотки в состав поливалентной и самостоятельное исполь

ние противопастереллезной сывороткиСсероварианты А и Д) в тех учаях, когда доказано ведущее значение их в возникновении забо-вания.

Результаты бактериологических исследований и изучения свойств стерелл необходимо использовать при составлении схемы профилак-ческих мероприятий и выборе необходимых для профилактики био-эпаратов. При работе с культурами пастерелл и патматериалом комендуется шире использовать обогащенные питательные среды, кие как "бульон лаборатории Дифко сухой" - производства С JA и ;ухой бульон Ставропольского НИИ вакцин и сывороток для выделе-я и культивирования гемокультур стрептококков" - Минмедпрома :?.

Вывод о вирулентности и токсигенности пастерелл предлагается тользовать при приготовлении антигенов для гипериммунизации iopoB.

6. Список научных работ, опубликованных по теме диссертации

Динамика заболеваемости телят смешанными респираторными инфекциями в условиях крупного откормочного комплекса / A.A. Коно-паткин, В.'А. Владимиров, H.A. Масимов, Э.М. Мелев // Проблемы научного обеспечения'повышения эффективности сельскохозяйственного производства: Тез. докл./ Кырг. с.-х. ин-т им. К.И.Скрябина- Бешкек, 1992. Ч. И.Ветеринария.-C.I48-149.

Владимиров В.А., Масимов H.A. Некоторые свойства пастерелл, выделенных от телят // Использование физических и биологических факторов в ветеринарии и животноводстве: Мат. Всес. науч. конф./ Моск. вет. акад. им. К.И.Скрябина, М.; 1992.С.45-46.

Ввделение пас.терелл и стрептококков при смешанных респираторных инфекциях телят / H.A. Масимов, В.А. Есепенок, Э.М.Мешев, В.А. Владимиров // Использование физических и биологических факторов в ветеринарии и животноводстве: Мат. Всес. науч.конф./ . Моск. вет. акад. им. К.И.Скрябина, М.; 1992. С. 55.