Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Диагностика пневмонии свиней бордетеллезной этиологии

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ СОВЕТА МИНИСТРОВ СССР ПО ПРОДОВОЛЬСТВИЮ И ЗАКУПКАМ

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНО-КОНТРОЛЬНЫЙ ИНСТИТУТ ВЕГПРЕПАРАТОВ

На правах рукописи

КОЖЕВНИКОВ СЕРГЕЯ ВАСИЛЬЕВИЧ

УДК 619:616.24-002-085:636.4

ДИАГНОСТИКА ПНЕЕМОр! СЕИНЕЛ БОРДЕГЕЛЛЕЗНОЙ ЭТИОЛОГИИ

I6.C0.03. - веторшариая микробиология, вирусология, ЭПИЗООТОЛОГИЯ, Ш1К0Л0ГИЯ п иммунология

Автореферат

диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва - 1990 г.

<

Работа выполнена во Всесоюзном государственном научно- . контрольном институте ветеринарных препаратов и Сибирской зональной научно-контрольной лаборатории

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук,

Татаринцев Н.Т.

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук,

профессор ,

Конопаткин A.A.(ИВА)

кандидат ветеринарных наук Тихонов Л.И. (ВГНКИ)

Ведущая организация - Всесоюзный научно-исследовательский

ветеринарный институт (г,Казань)

Защита состоится " ßiJi&AA 1991г. в " " часов на заседании Специализированного Совета при Всесоюзном государственном научно-контрольном институте ветеринарных препаратов Главного управления ветеринарии Государственной комиссии Совета Министров СССР по продовольствию и закупкам по адресу: (123022, г.Москва, Звенигородское шоссе, 5, ВГНКИ)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВШШ вет-препаратов .

Автореферат разослан

Г»

Ученый секретарь Специализированного совета

Козырев Ю.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность теш

В нашей стране успешно осуществляется планомерная программа индустриализации и концентрации общественного свиноводства путем строительства новых государственных комплексов, межхозяйственных объединений, реконструкций и расширения существующих ферм с внедрением на них современной промышленной технологии производства свинины. Это дает возможность при минимальных затратах получать максимум высококачественной продукции. Имея неоcnopm.roе технико-эко-. комическое преимущество перед экстенсивным свиноводством, технология промышленных комплексов сцдвигает перед ветеринарной наукой новые проблемы, связанные с сохранностью животных.

Качественно косые методы содержания и эксплуатации, которые характеризуется длительным пребыванием животных в закрытых помещениях, высокой концентрацией их на ограниченных производственных площадях, воздействием организм многочисленных техногенных, стрессов . , обусловливают повышенную чувствительность свиней к неблагоприятным факторам, способствует интенсивному обмену микрофлорой, пассировании ее через восприимчивых ответных и усилению вирулентных свойств.'Это явилось одной из причин возникновения на свиноводческих комплексах ранее не регистрируемых заболеваний, характеризующимся широким охватом восприимчивых животных за короткий промежуток времени. • '

Особенно большую опасность для свиноводства представляют респираторные болезни, так как на комплексах при определенных условиях .появляется возможность передачи возбудителей как воздушно-капель-путем, так и при прямом контакте больных и здоровых животных. Если несколько лет назад первостепенное 'значение в инфекцион-

ной патологии свиней имели остро протекающие болезни, то в настоящее время одной из трудно разрешимы«:, проблем промышленных хозяйств и комплексов являются пневмонии свиней, которые занимают одно из ведущих мест в патологии этого вида животных и наносят свиноводству большой экономический ущерб. По своей этиологии и клинико-мор-фологическому проявлению пневмонии свиней очень разнообразны* В большинстве случаев возникновения их обусловлены воздействием комплекса причин, главной из которых являются инфекционные агенты. г

Среди этиологических факторов респираторной патологии свиней основными являются микробы, в том числе микогшазш, вирусы, хла-ыидии и их сочетания. В последние годы в респираторной патологии свиней установлена этиологическая роль гемофилькьсс бактерий и бордетелл.

Роль гемофильшх: бактерий достаточно рассмотрена М.А.Сидоровым, Л.И. СкородумовшЧ 193б ). Что каса0тся бакторий рода бордетелл, то их значение в этипатогенззе респираторной патологии свиней до последнего гремени оставалось кэдсстатотаэ оспецагп-ым. Основное вюшаии& в литературе удалкатся -ошеакка' обусловленных, &сгс/е{е№е> инфекционного атрофкчаского ришта

и реже развивающейся при этом брокхспнавздшш (?.Б.Пз2208, П.Я. Курбола, Д.И.Середа, 1967, Р.Км^Ме*» ¡Ш; Л&ирег

сбое.,

Поль и задача исследований

Работа выполнена в соответствуй с отраслевой кой программой 0.СХ.68. по заданию 03.0б.'Н-1.Государствангой регистрации 01860104290. Основной целью работы являлось изучзнкэ степени распространения пковдояий свинэй бердотеллззшй этиологии в хозяйствах Курганской области и разработка сороло1'ического

метода диагностики болезни. В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Выяснить степень распространения бордетеллеза свиней в хозяйствах Курганской области.

Изучить клинико-гематологические признаки и особенности течения болезни и патологоанатомические изменения.

2. Провести бактериологические исследования с целью выделения и изучить основные биологические свойства возбудителя.

3. Разработать методику получения активных и специфических противобордетеллезных иммуннных сывороток для серологических .исследований.

4. Изыскать активный и' специфичный антиген для РА и разработать метод его изготовления.

5. Провести апробацию сывороток.и антигенов в производственных условиях.

6. На основании полученных данных разработать НГД на "Набор •для диагностики бордётеллезной пневмонии свиней в РА" и Наставление по его применению.

•" Научная новизна работы

Впервые изучен комплексный метод диагностики бордетеллезной пневмонии свиней, экспериментально подтверждена этиологическая роль /голсА/гф&со. Дана сравнительная оценка мето-

дов бактериологического и серологического исследования, как диагностическим тестам для индивидуального и группового контроля пораженности стада бордетеллезом.

Практическая ценность работы

Результаты изучения специфических методов диагностики боль-

ных поросят позволяют рекомендовать реакцию агглютинации для диагностики бордетеллеза в комплексе с другими общепринятыми методами.

Полученные данные клинико-гематологических, патологоанатоми-ческих исследований поросят дополняют сведения о патогенезе и симптоматике бордетеллеза и могут быть вспомогательными.тестами при диагностике болезни. Разработаны и утвередены ГУВ от 22 декабря 1988 г."Методические указания по постановке реакции агглютинации при диагностике бордетеллезной пневмонии свиней", техничес- ., кие условия на "Набор для диагностики бордетеллезной пневмонии свиней в реакции агглютинации", "Временное наставление по применению ' набора для диагностики бордетеллезной пневмонии свиней в реакции агглютинации". Одобрены методической комиссией ВГНКИ ветпрепаратов (протокол № 9 от 7.06.89 т.) и представлены на утверждение в Главное управление ветеринарии. "Методические указания по диагностике, профилактике, терапии и мерам борьбы-с бордетеллезом СЕ'лней", разработанные совместно с сотрудника-'® Полтавской зональной наушю-ксследовательской ветеринаркой станции.

Предложенный' Диагностицум может быть использовал в комплексе с другими методами для выявления хронических и латентных форы болезни',для обследования ремонтных свинок и молодняка при формировании маточного стада и продаже для племенных целей.

Апробация научных результатов

Основные материалы диссертационной работы доложены на: -

- XI научной конференции молодных ученых ВПШ ветпрепаратов, Москва, 1989 г.,

- ученых советах ВПШ, 1£осква, 1937, 1933, 1389 гг. ,

- межлабораторнш заседании сотрудников ВПШ,Москва, 1990 г.

Публикация результатов исследования Основные положения диссертации отражены в 3 печатных работах.

Объем и структура работ

Диссертация изложена на l7f> страница^ и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, собственных исследований, обсутедения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 16 таблицами, 8 рисунками. Список литературы содержит 240 работ, включает 104 отечественных и 136 иностранных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ : . -Материалы и методы Работа выполнена в 1985-1989 гг. во ВГНКИ ветпрепаратов и Сибирской зональной научно-контрольной лаборатории, в Курганской областной ветеринарной лаборатории, в Полтавской ЗНИВС и прогягп-ленных свиноводческих хозяйствах Курганской и Полтавской областей. Клинически обследовано на бордетеллез 1200 подсвинков. 260 павших и 90 специально убитых свиней исследованы с целью определения наиболее характерных патологоанатомических изменений; От тавотных взято III7 проб'крови для серологических исследований. Проведены бактериологические исследования 183 проб патматериала, гематологические - от 32 большое с характерной клинической картиной бор-детеллеза подсвинков. Кроме того в экспериментальных исследованиях использовано 30 кроликов для приготовления иммунных сывороток, 148 белых мышей, 12 свиней для экспериментального воспроизведения болезни.

Материалом для эпизоотологического анализа служили данные ветеринарной отчетности, а такясе результаты исследования 12

б

свиноводческих хозяйств. Детальное изучение характера проявления бордетеллезной пневмонии, а также эксперименты, направленные на . выяснение ее особенностей проведены на базе совхозов " Юргамыш-ский " , и Баяракский" Курганской области, совхозов " Орджоникидзе " , " Красноградский колхозе " Перемога " Полтавской области,! В процессе экспериментальной и диагностической работы использовались эпизоотологический, клинический, патологоанатомичео-кий и серологический методы исследования»

Последовательность и приемы эпизоотологичеокого исследования выполнены согласно рекомендациям А.А, Глушкова и А«А« Коно-паткина ( 1981 ) > " Методы исследования и анализа в эпизоотологии ". Течение и клиническое проявление болезни изучали на 237 больных свиньях различного возраста«) При этом обращали внимание на общее состояние больных животных*' наличие аппетита и кашля, состояние кожного покрова, длительность инкубационного периода** температуры тела. Патологоанатонический метод диагностики вклэ-чал исследования макроскопических изменений в органах и тканях 183 трупов свиней, павших и специально убитых с клиническими проявлениями бордетеллезной пневмонии«)

В крови количество эритроцитов и лейкоцитов определяли в камере Горяева и на электронном счетчике н Р' м,

а также на электрофотоколориметре 'ФЗК - М « Количество гемоглобина - в гемометра Сали ГС -'2в1 Лейкоцитарную формулу выводили по методу Шилинга . СОЭ измеряли в аппарате Панчен-кова.

___ Для изоляции возбудителя бордетеллеза использовали обогащен-

нив среди: сывороточный мясо-пептонный бульон, США, кровяной агар, КУА, простые среды (ША, МПБ).

. Культивирование, поддержание и идентификацию культур осуществляли по методу Г.Ф.Бовяун (1976)-., Серологические исследования включали исследования сывороток крови свиней в реакции агглютинации с антигенами, приготовленными из эпизоотических культур, выделенных нами от поросят и референтного штамма 4424, полученного из Дании, в концентрации 10 МШ по коклюшному стандарту мутности.

• Для приготовления кроличьих иммунных сывороток использовали гагдслспзай огсюоотичзсгглй .стати &сгс!е{&Но Ьгопс^^ср^/сп 01 и рсфзрзктиий стигм !? 4424. Определение активности иммунных сывороток проводили о рэакции агглютинации (РА) согласно разработан-пулх "!!отод:1часп:1Х указогай по постановке реакции агглютинации пр:1 диападстпко бордотеллезной га1си.к>1ши свиней", утвержденных ' | 22.I2.S3 ГУВ.

■ Спсщфгчпасть ггцун-зд савороток определяли в реакции аггло-бердзтсллдзнттч. а тают» с тгп:2Цл?Г(Г/1гас"8роя7;оа12;:с и ротигстш антигенат.

Пр:ггото2хсп2гз сцгкггони по обца_-принятой кзтодике из эпизоо-

тптаешк .пга'ков В. Ъгоясб/^с/зб/са и полученные-к ним антисыво1- .1

рот^и испетагп о гхзяПсггзя К^гаетпоЯ н Полтавской областей,не-

бгагоползтепп:: п блпгоголусгг^: по бердетеллезу. *

:., .:■• ' л-." ■ -.■ ■ • ............: ' I

ЗЕСПор^стггалшзэ Еоспропзпгдсгкэ бордстеллезкой пневмонии пропод:1Л1 га 12 поросятся 45-днзпмого возраста, подобранных по прпщтпу аналогов, г:з содергзцгк в егшоротке крови антитела к Бор-дотолда брогешеептпка. Для заргЕСняя использовали эпизоотический птагхм 01. Культуру вводили п обьс::зх: I группа - 2 ня внутрнкыгеч-' ко в концентрации 200 ШЕМ б днэП подряд, 2 группа - 5, ш гатрана-залыю по 2,5 от в каздоо шеовоо отверстие в той'ясэ дозе б дней подряд. 3 группа - контактная.

Всех подопытных поросят ежедневно клинически обследовали и в определенные сроки у них брали материал для гематологических, серологических и бактериологических исследований. ,

Для определения степени развития патологоанатомичоского процесса при экспериментальном воспроизведении бордетеллезной пневмонии шесть поросят были убиты.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Зпизоотологические особенности бордетеллеэа свиней

Анализ отчетности ветеринарной слу,кби Курганской области показал, что в целом за последние 4 года болезни органов дыхания составляют в среднем 30,9 а в отдельные годы до одной трети от всех незаразных заболевшей свиней. На падая от этих болезней приходится в среднем 10,6 гь от числа свиней, павших от незсразних болезней. Болезнь регистрируется на протяжении круглого года, однако в первом и третьем кварталах сабодевают пржорш одинаковое количество свиней - 31,2 СА, во втором насколько больсо - 35,3 а в четвертом квартале регистрируется наибольшее количество заболевших - 41,7

Ретроспективнь:,гл1!ССледоБан!1я«11 по РА в 1987 году установлено в 9 из 12 свиноводческих хозяйств, наличие к^ботных, в сыворотках крови которых содержались антитела к в диагностических титрах (1:40 и бы^о).

При эпизоотологическом обследовании стационарно неблагопо- ' лучных по пневмониям свиносовхозов "Вргеилшзекий" и "Баяракский" установлено, что удельный вес от общей заболеваемости свиней достигает 53,3^, среди которой бордетеллезная пневмония по результатам РА составляет более одной трети. Впоследствии комплексными, исследованиями в этих хозяйствах был поставлен диагноз на борде-теллезную пневмонию.

Проведенные в названных хозяйствах исследования показали, что заболевание начинается срёди поросят-сосунов. Очаги пневмоний начинают появляться у поросят 5-7-дневного возраста. Среди животных этого возраста типичные клинические признаки болезни наблюдаются в 10 % случаев, однако другая часть не имеет ярких клинических признаков и болезнь протекает в субклинической форме,что подтверждается при серологических исследованиях.

После отъема поросят от свиноматок и объединения их в большие группы по 50 голов, резко увеличивается возможность контактирования больных и здоровых животных. С этого момента идет массовое перезаражение животных. Несовершенство системы комплектования, отсутствие карантинных ферм, нерациональное кормление, неудовлетворительная организация воспроизводства, переуплотнение производственных помещений, несоблюдение принципа "пусто-занято" при экс-' плуатоции производственных секторов способствуют широком^распро-страненкю инфекции.

По-нашим наблюдениям степень охвата поголовья бордетеллезной пневмонией в группах-2-4 месяцев по клиническим данным отмечено у 30-35 %, по РА - у 68 % животных. Свиньи старше шести месяцев менее восприимчивы к возбудителю. Так, в совхозе "Юргамышский", несмотря на тесный контакт больных швотных и свиней группы откорма старше шести месяцев, заболевание не распространялось на взрослое поголовье и регистрировалось лишь в единичных случаях. Учитывая результаты эпиэоотологических наблюдений, а также частое выявление антител в сыворотках крови свиноматок к возбудителю бордетел-леза, позволяет нам сделать заключение, что основным резервуаром возбудителя инфекции в условиях стационарных эпизоотических очагов являются основные и особенно разовые свиноматки.

Изучение клинико-гематологических показателей и патологоанатомических изменений у поросят при бордетеллезной'пневмонии свиней

Результаты клинико-гематологических и патологоанатомических изменений у поросят, исследуемых в хозяйствах, неблагополучных по бордетеллезной пневмонии показывают, что для данной инфекции характерное поражение респираторных органов различной степени выраженности.

Инкубационный период при естественных условиях составил 8-15 дней. Клиническое проявление характеризовалось угнетением,чиханием, появлением кашля, одышкой, незначительным повышением температуры, лейкоцитозом, пневмонией. .""■.-■'■

При ежедневном наблюдении за поросятами, больными бордетел-лезом, выявили некоторые характерные симптомы и последовательность их проявления. Так, температурная реакция повышалась до 40,9 0 в течение 3-5 дней, а затем снижалась до нормы. Однако повышение температуры отмечали не у всех животных, температура тела чаще повышалась после появления кашля, как у экспериментально зараженных, так и в естественных условиях. Дыхание учащалось и доходило до 70-75 движений в минутуНарушение сердечной' деятельности отмечалось в виде аритмии, учащении пульса. Кашель появлялся в ранние сроки (на 7-8 день болезни), вначале был редким, сухим, непродолжительным (1-2 кашлевых движения). В последующие дни поросята кашляли более часто, особенно при приеме пищи.

При экспериментальных условиях клинические симптомы заболевания бшга сходны с вышеописанными .. , но характеризовались менее выраженными признаками поражения органов дыхания.

Гематологические исследования больных поросят показали, что

при клинически выраженной патологии отмечено снижение содержания гемоглобина с 9,3 до 4,5 г^. При этом скорость оседания эритроцитов значительно повышена и достигала 50,1 мм/час против 15 -20 мм/час при норме. Количество эритроцитов снижалось с 8,6 млн/мм5 до 3,4 млн/мм3.

У больных поросят на протяжении периода исследований отмечали стойкий, резко выраженный лейкоцитоз. Содержание лейкоцитов в среднем колебалось в пределах 26,1-28,0 тыс/мм3. При выведении лейкограммы у поросят отмечали увеличение нейтрофиллов за счет па-лочкоядерных. Лейкоцитоз на фоне снижения количества эритроцитов свидетельствует об усиленной интоксикации организма.

Результаты гематологического анализа в комплексе с клиническими данными имеют важное значение и позволяют дать объективную оценку течению воспалительного процесса при бордетеллезной пневмонии и более достоверно прогнозировать исход болезни.

Патологоанатомические изменения у поросят, павших и убитых в различные периоды болезни, были локализованы в основном в органах дыхания. Слизистые оболочки носовой полости и'трахеи, покрасневшие, слегка набухшие, покрытые обильным количеством слизи. У части животных отмечали .истончение носовых раковин. В легких пораженные участки локализовались в верхушечных, сердечных и реже в диафрагмальных долях. Воспаленные участки синевато-ржавого цвета. Размеры воспалительных органов различны от едва различимых невооруженным взглядом до значительных, захватывающих верхушечные доли легких. Воспалительные очаги плотные, часто ограничены от здоровой ткани. На разрезе влажные. При надавливании стекает мутноватая жидкость.

Бронхи заполнены эксудатом. Бронхиальные и средостенные лим-

фатические узлы в большинстве случаев увеличены в различной степени, отечны, иногда гиперемированы. В более поздние сроки у поросят 2 - 4 мес отмечали изменения в печени: она была желто-глинистого цвета, дряблая, давала обильный соскоб.

Патологоанатомические изменения у экспериментально зараженных животных сходны с таковыми при естественном течении болезни и выявлены через 9 дней после заражения.

Результаты бактериологического исследования поросят, больных бордетеллезной пневмонией

За период исследований из 183 проб патологоанатомического материала выделено 48 первичных культур J>orc/e/i//o ¿ronctisefli/cQ Две из них (штаммы 01 и 04) после 3-5 пассажей на кровяном МБА и селекцией по морфологическим признакам колоний были лиофилизиро-ваны и хранились в лаборатории 2 года, (срок наблюдения),сохранив характерные морфологические, культуральные, гемолитические,биохимические и другие свойства.

Для изоляции возбудителя болезни исследовали участки пораженных легких на границе со здоровой тканью, бронхиальные лимфатические узлы, бронхиальную и носовую слизь. Полученные на твердой питательной среде культуры в первичных высевах, отбирали и производили 3-4 последовательных пересева на этих средах. В первичных культурах возбудители бордетеллеза образовывали точечные, округлые прозрачные колонии с ровными краями, которые вместе выглядели как стелящийся по поверхности среды сплошной беловатый налет. При дальнейших пассажах и селекциях на кровяном агаре или сывороточж» МПА рост отдельных колоний наблюдали в виде округлых, выпуклых, прозрачных формирований размером 1-2 мм с образованием на кровяном агаре гемолизированных зон.

Рост микроорганизмов на жидких питательных средах ( МТБ,

ороточноМ МПБ ) характеризовался равномерным помутнением сре-с образованием пристеночного кольца, а при длительном культи-ювании (4-5 суток) на дне пробирки образовывался осадок, подни-|щийся при энергичном встряхивании в виде "косички".

В мазках-отпечатках из органов, окрашенных по Граму, возбудить в виде грамотрицательных мелких, коротких палочковидных бакте-Гс закругленными концами (0,5-1,0 х.1,2 х 2,4 мкм). В нативном сериале палочка подвижная. Характерным для Бордетелла бронхисеп-са является также быстрое расщепление мочевины, уже через 30-етнут после помещения посева в термостат наблюдается покраснение здн по Заксе. -

Езрдетелла бронхисептика способна редуцировать нитраты,обра-¿нзать аммиак,'. однако не способна разжижить желатин, образовы-гь индол и сероводород, расщеплять углеводы и многоатомные спир-

- Результата изучения культурально-морфологических, тинкториаль-х, биохимических свойств микроорганизмов, а также серологические следования позволили ишл сделать вывод, что ввде'ленные наш штамков микроорганизмов относятся к виду Бордетелла бронхисеп-к'а, рода Бордетелл.

Результаты серологического исследования /поросят, больных бордетеллезной пневмонией

С целью диагностики бордетеллезной пневмонии свиней по эпизоо-»логическим и патологоанатомическим показателям, а также в хозяйках, где отмечали клинические проявления болезни, было изготов-5но 8 серий антигенов из 2-х эпизоотических (01 и 04) и двух ре-эрентных (4424 , 217) штаммов по общепринятое методу, а также таигены из ■ /пи&ос/с/а ц в?.

• В реакции агглютинации применяли полученные наш кроличьи им-

мунные бордетеллезные сыворотки, проверенные на специфичнбсть. Кроме того, в исследованиях использовали гетерологичные эперихи- . озные, сальмонеллезные, пастереллезные коммерческие гипериммунные сыворотки.

При исследовании .1117 сывороток крови, взятых от свиней в хозяйствах Курганской области в различные периоды и разной тяжести заболевания, не дали возможности обнаружить антитела к пастерел-лезным и рожистым антигенам в довакционный период. В то время, в испытуемых сыворотках крови в РА выявлены антитела к бордетеллез-ным антигенам в большом количестве от 23 до 70,0 % с диагностическим титром 1:40 и'выше."

В двух хозяйствах: свиносовхозах "Юргашшский" и "Баяракс-кий", где выделялся наибольший процент реагировавших животных в РА,и в одном благополучном хозяйстве - колхозе "Знамя Ленина" по бордетеллеэной пневмонии испытали РА. С этой целью от 149 свиней различных возрастов с клиникой бронхопневмонии отобрали пробы сывороток и подвергли исследованию с бордетеллозгсдаг антигенами. Процент реагировавших поросят в возраст© 2-4 месяца составил 69, 4-6 мес. - 20,0 старше б месяцев - 6,6 % от исслэдуёкых тавотных. В благополучных хозяйствах результаты исследования в РА были отрицательными. Исходя из этого, »ложно сказать, что с возрастом число реагировавших животных резко уменьшается и регистрируется у взрослого поголовья в единичных случаях. Наряду с этимгровели изучение в РА активности изготовленных антигенов из штаммов 01, 04 и 424 с 230 сыворотками, отобранными от поросят в возрасте 2т4 и 4-8-месячного возраста. Установлено, что наибольшей активностью обладал штамм 01,обладающий типичными свойствами, выделенный нами в 1987 году. При этом в 84 % исследованных проб выявили антитела в : титрах 1:40 - 1:160 и выше. Максимальный титр 1:80 установили у

годсвинков 4-8-месячного возраста. Пробы сыворотки крови, вызвав-те агглютинацию антигена на 3-4 креста в разведении 1:40 и выше, ¡читали положительными, что в дальнейшем было подтверждено экспе-(иментальными исследованиями.

Результаты серологических исследований позволили нам совмест-ю с сотрудниками Полтавской ЗНИВС приготовить диагностический на-'ор для диагностики бордетеллезной пневмонии свиней.

Результаты экспериментального заражения свиней культурой Бордетелла бронхисептика

В ходе эксперимента все подопытные поросята {п- = 9) показали исокую чувствительность к внутримышечному и интраназальному за-'аяению культурой бордетелл, что свидетельствовало о патогенности пизоотического штамма 01 для свиней. Один поросенок из числа ин-ицированных пал (11,1 %), У зараженных поросят внепние признаки ордетеллезной пневмонии проявились через 6-0 дней ( в среднем че-ез 7,0+0,1) после введения культуры и сохранились в течение 106 дней { в среднем 11,5+0,6). Соответственно, степень проявления имптомов болезни и тяжесть ее течения также варьировали. Момент аксимального снижения количества эритроцитов и содержания гемо-лобина совпал с периодом наиболее выраженного проявления клиничес--: их признаков болезни. В белой крови отмечался незначительный лей-оцитоз и нейтрофилез за счет палочкоядерных форм. При патолого-натомическом исследовании в легких (33,3 %) обнаруживали односто-оннюю бронхопневмонию с локализацией очагов в верхушечной и сер-ечной доли. Очаги воспаления коричневого цвета с синюшним оттен-ом величиной до 1,5 см, а у одного опытного животного отмечали оспаление слизистой оболочки носа и истончение носовых раковин 11,1.$). Посевы из воспалительных участков легких на 5 %-ной кро-

вяной МПА давали обильный рост В. бронхисептика. С целью изучения антител и динамики их накопления проведены исследования сыворотки крови подопытных поросят в РА до заражения и в динамике болезни с тремя бордетеллезными антигенами (01, 04, 4424).

Полученные результаты свидетельствуют, что титры агглютининов обнаруживался в крови экспериментально зараженных животных через 10 дней после заражения их культурой бордетелл, однако выявление . диагнотических титров наблюдается лишь на 20 день (1:40). Максимальное накопление антител отмечали на 30-40 день (1:160 - Ii320). В дальнейшем идет снижение антител в сыворотке крови опытных животных. Таким образом, наличие серопозитивных животных с диагностическим титром 1:40 и выше в РА может расцениваться как основной показатель вероятного переболевания или бордетеллоносительства в группе.

Результаты испытания наборов диагностикумов бордетеллезной пневмонии свиней в хозяйствах Полтавской области

Комиссионные испытания диагностического набора проводили в соответствии с ТУ 10.07.063-88 "Набор для диагностики бордетеллезной пневмонии свиней в РА", "Методическими указаниями по бактериологическому контролю стерильности ветеринарных препаратов", "Временным наставлением по применению набора для диагностики бордетеллезной пневмонии свиней в реакции агглютинации" и "Методическими указаниями по постановке реакции агглютинации при диагностике бордетеллезной пневмонии свиней", утвержденными ГУВ 20.12.88г.

При клиническом осмотре 358 голов свиней в неблагополучных хозяйствах, в т.ч. в возрасте 10-12 мес - 178 голов, выявлены с явными признаками бронхопневмонии до 80-85 % поросят и до 5 % взрослых свиней.

Патологоанато^ическим осмотром 52 голов свиней отобрали и ис-¡ледовали 17 проб патматериалов,в том числе: от поросят 2-4 мес -"I проб и от свиней 10-12 мес - 6 проб. Из 17 проб патматериала оделены культуры В.бронхисептика в 10 случаях (5S.S %).

Пробы сыворотки крови от 211 голов свиней (неблагополучных и >лагополучных хозяйств) исследовали в РА. В неблагополучных хоэяй-:твах по пневмонии и ИАР реагировало с бордетеллезными антигенами )Т 75 до 90 % исследованных животных. В среднем среди поросят 2 --4-месячного возраста выявлено до 80-85 % положительно реагировавшее, а среди них свиней 10-12-месячного возраста - до 5-7%,что согласовывалось с результатами клинических,патологоанатомических и 5актериологических исследований. В благополучных хозяйствах исследования в РЛ показали отрицательные результаты. Реакция с контрольные ■ гиперитилуиными' сыворотками была положитёльная, с нормаль-Ш.ЗЯ1 - отрицательная. . ,

Исходя из результатов собственных исследований, комиссионных испытаний и литературных данных, а также учитывая тот факт, что описываемое заболевание но имело до последнего времени конкретного названия»считаем целесообразным назвать его бордетеллезной пневмонией свиней. Такое название вполне согласуется с международной литературой и,кроме того,позволит отделить эту форму бронхопневмонш от сходных респираторных болезней свиней другой этиологии.

• выводы •; '

1. На основании проведенных комплексных исследований в хозяйствах Курганской области установлена широкая, распространенность пневмонии'свиней..'Одной из причин респираторной патологии свиней

в хозяйства:: области нами впервые установлена3v,-t/d<?Mr ¿голЖ^со

2. Заболевание протекает в виде энзоотии,степень распростра-

ненности которой зависит от концентрации животных, условий их содержания и возрастного состава свинопоголовья.

В стационарно неблагополучных хозяйствах бордетеллезная пневмония наблюдается в основном среди животных с преимущественны поражением поросят - отъемышей и подсвинков 4-6 - месячного возраста.

3. Клиническое проявление заболевания характеризуется сухим частым кашлем и смешанной одышкой, незначительным учащением дыхания и пульса, повышением температуры тела.

4. При гематологических исследованиях больных животных установлено снижение содержания гемоглобина на 4,5 количества эритроцитов на 3,4 млн/мм3, повышение скорости оседания эритроцитов, нейтрофилез при одновременном значительном лейкоцитозе.

5. Характерными патологоанатомическими изменениями для бор-детеллезной пневмонии свиней являются серозно-катаральные, реже катарально-гнойные очаги в сердечной, добавочной и•диафрагмаль-ных долях легких серо-коричневого до серо-желтого цвета с синюш-ним оттенком.

.6. Различные схемы гипериммунизации кроликов с целью получе ния бордетеллезных антисывороток вызывают не -одинаковый уровень антителообразования. Наиболее активные сыворотки при гиперииму-низации кроликов получены при чередовании подкожного и внутривенного методов введения антигена, а также при соблюдении определенных интервалов как между отдельными инъекциями, так и мевд • первым и вторым циклом гипериммунизации.

7. Результаты проведенных исследований сывороток крови поросят в РА в хозяйствах Курганской и Полтавской областей,а так®

полученные при экспериментальном заражении, позволяют считать за диагностический титр при бордетеллезе свиней 1:40 и выше.

8. Экспериментальное заражение поросят культурами бордетелл вызывало типичную пневмонию с характерной клинической картиной, гематологическими сдвигами и патологоанатомическими изменениями, что свидетельствует о ведущей роли Бордетелла бронхисептика в этиологии болезни.

9. Разработана и предложена для диагностики бордетеллезной пнзсиоши свиней реакция агглютинации с антигенами из возбудителя и специфическая позитивная сыворотка. Регисция проста в выполнении и дает возможность выявлять до 84 и более процентов живот-нше, больных бордетеллезной пневмонией. •■

10. Результаты проведенных исследований, а также комиссионная апробация диагиостииуиа даат основание сделать заключение о спсгг.тфггагоста и п:сокой диагностической ценности реакции агглю-тгасщм, которая иог.о? успспно применяться, как один из основных гетодоз 'лабораторной .днапгастняи бордетеллезной пневмонии свиней.

ПрэдяотешпЛ диагностический набор может широко использо-паться для сютяешя хронических п латентных форм болезни, при обследовании рекитсгс сглкок и ютлодняка при формировании маточного стада и продагэ для Наеденных целей.

Праэтттческко предложения

[Черпали етуг-зпк исследований использовали при составлении стедугг^п докуг.!Знтоэ:

1. Технические услошш 10.07.063,88 на "Набор для диагностики бсрдотеллезкоП ппзкязнии-свиней в реакции агглютинации", утиер-гптянП ГУВ 22.12.88 г.

2. "Временное наставление; по применению набора диагностики

бордетеллезной пневмонии свиней в реакции агглютинации".утвержденное ГУВ 22.12.88 г.

3. "Методические указания по постановке реакции агглютинации при диагностике бордетеллезной пневмонии свиней", утвержде* ные ГУВ 22.Î2.88 г.

4. Одобрены методической комиссией ВГНКИ ветпрепаратов (протокол № 9 от 7.06.89 г.) и представлены на утверждение в Главное управление ветеринарии "Методические указания по диагностике, профилактике, терапии и мерам борьбы с бордетеллезоы свиней".

СПИСОК РАБОТ, ОПУБШКОВАННЬК ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Кожевников C.B., Душук Р.В., Татаринцев Н.Т. Бордетел-лез свиней. М., ВНИИТсйагропром, 1990 г., 40 стр.

2. Кожевников Q.В. Патологоанатошческие и бактериологические исследования при бордетеллезной пневмонии свиней. -M., - 1990, - 5 с. - Деп. в ВНИИТЭИагропрома 21.05.90 г., № 232-ВС '' ' '

3. Кожевников C.B. ' Клиникр-эпизоотологические данные и гематологические показатели при бордетеллезной пневмонии -

' свиней. - M., 1990, - 7 стр. - Деп. в ВНИИТЭИагропрома 21.05.90, № 23I-BC

'Москва, 1990, ВНИИВС» ВВК, » /6&Zfs 100 экз.