Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Диагностика и специфическая профилактика аденовирусной и хламидиозной инфекций крупного рогатого скота

Кыргызский научно-исследовательский ОД ветеринарный институт

2 7 ИД" 1£Ь5

На правах рукописи

БИРИМКУЛОВА Айнура Ташибековна

УДК 619:016.98 - 07- 084:(578 826 + 57Р.88):636.'2

ДИАГНОСТИКА И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА АДЕНОВИРУСНОЙ И ХЛАМИДИ03Н0Й ИНФЕКЦИЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Специальность 16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

БИШКЕК 1996

Киргизский научно-исследовательский ветеринарный институт

на правах рукописи

БИРИМШОВА АЕНУРА ТАШИБЕКОЗНА

да 615: 616.58-0 7-064:(.578.826 +579 . 86):6с6.2

ДИАГНОСТИКА И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА АДЕНОВИРУСНОЙ И ХЛА1ЩИ03Н02 ЙНРЕКЦШ"! КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Специальность 16.00.03 - ветеринарная микробиология,

вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

.АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Бишкек - 1556

Работа выполнена в Кыргызском ордена "Знак'Почета сельскохозяйственном институте им.К.И.Скрябина

Научный руководитель - кандидат ветеринарных наук, • доцент Нургазиев Р.З.

Научный консультант - доктор ветеринарных наук, профессор Белоусова Р.В.

-Официальные оппоненты - заслуженный деятель науки ."

Кыргызской Республики, доктор ветеринарных наук Галиев P.C.

- кандидат веъеринарных наук, старший научный сотрудник Белеков Т.Б.

Ведущая организация - Казахский научно-исследовательский

ветеринарный институт

----Защита диссертации состоится " Н " июня • I9S6 г-.

в 14°° часов на заседании специализированного ■ совета -Д.16.94.18 в Кыргызском научно-исследовательском ветеринарном институте по адресу: 720021 .Кыргызская Республика,

г¿Бишкек, ул. Токтогула 80,. • Кырг.НйВИ :

С диссертацией можно ознакомиться-в библиотеке Кырг.НИВИ Автореферат разослан JO "' Л/Я^ ISS6 г.

Ученый'секретарь специализированного совета, кандидат биологических наук

-1 -

............-0БША2. ХАРАКТЕРИСТИКА -РАБОТЫ .Г

Актуальность темы. Формирование'многоукладной экономики и возникновение многообразных форм" собственности оказало значительное влияние на-сельское хозяйство, властности на животноводство. Ряд крупных животноводческих и откормочных комплексов реорганизованы на сельскохозяйственные кооперативы и акционерные общества. Тем не менее система содержания и выращивания животных остается прежним (ограниченная площадь, неблагоприятные санитарно-гигиенические условия и др.).Более того, основной причиной дальнейшего развития«животноводства являются болезни и падеж молодняка сельскохозяйственных животных. Среди болезней молодняка ведущее положение занимает вирусные респирагорно-кишечные инфекции, в возникновении которых значительную роль играют смешанные инфекции. Таковыми.могут быть аденовирусная и РС-инфекция, инфекционный ри-нотрахеит, парагрипп-3 и хламидии.; Ассоциируя в организме вышеназванные инфекционные агенты могут вызывать пневмоэнтериты у молодняка. Трудности борьбы с вирусными пневмоэнтеритами связаны прежде всего с полиэтиологичностью и многообразием форм болезней.

Общеизвестно, что в респираторной и кишечной патологии телят значительную этиологическую роль могут играть аденовирусы и хламидии.. 2ти инфекционные заболевания наносят большой экономич$ркий ущерб, который складывается из потери упитанности, падежа, вынужденного убоя, абортов и рождения нежизнеспособных телят, а также затрат на проведение лечебных и профилактических мероприятий.

В связи с отим в последние годы значительное внимание уделяется на специфическую профилактику данных инфекционных заболеваний.' Для профилактики аденовирусной инфекции и хламидиоза крупного рогатого скота в ряде стран (*РГ,Англии,Болгарии,Польше и др.) используются как живые, так и инактивированные вакцины.

Зарубежный опыт показывает, что при конструировании вакцин необходимо учитывать типы полевых*изояятов, превалирующих в том или* ином регионе, которые затем можно было бы использовать в качестве исходных, 'зопрос же специфической профилактики аденовирусной и хламидиозной инфекции у крупного рогатого скота в странах СНГ находится еще на стадии научной"разработки и опыта.

Большой практический интерес предстазлнет инактивированная вакцина против аденовирусной инфекции, которая была разработана

сотрудниками лаборатории вирусологии Московской ветеринарной академии им .К.Й.Скрябина (Белоусова Р.В., Коненкова Л.M.,1965). Данная вакцина прошла успешное испытание на стельных'коровах в условиях Кыргызской Республики (Нургазиев Р.е.,1588). Но наряду с. этим ряд исследователей ( ~W/i<gmann G. IS£2; Souiвы M. 1565; èetynakn ' H.IS67; Еумабаев X.E. IS&S) отдают предпочтение комбинированной вакцине, так как она имеет ви-рокий спектр действия и обеспечивает профилактику основных составляющих вирусно-бактериальной ассоциации.

В нашей стране и странах СНГ ассоциированных вакцин против аденона^екции и хламидиоза крупного рогатого скота eue нет.

Цель к задачи исследований. Цельа выполнения настоящей работы явилось установление степени распространенности аденовирусной и хламидиозной инфекций крупного рогатого скота и изучение анткген-ноГ. активности экспериментальных образцов ассоциированной и моновакцины на лабораторных и естественно-восприимчивых а.ивотных.

Для достижения поставленной цели нам необходимо было решить следующие задачи:

- изучить распространенность аденовирусной -и хламидиозной4 инфекций крупного рогатого скота в хозяйствах Чуйской долины;

- выделить и идентифицировать полевые изоляты аденовирусов круп-' ного рогатого скота, изучить их биологические свойства;

- изучить антигенные свойства экспериментальных образцов ассоциированной вакцины на лабораторных (крысы) и естественно-восприимчивых животных (телята); •

- установить этиологическую роль аденовирусов и хламидий в воз- - нккцовеияи-респираторно-кишечных инфекций у телят. -

Научная нозкз:-:а работы . ' При определении сироты распространения аденовирусов и хламидий' в хозяйствах Чуйской долины Кыргызстана, используя серологические методы исследования, выявлена корреляция .данных в реакции нейтрализации (РН), реакции непрямой гекаггити-нации (РИГА), реакции связывания комплемента (РСН) и иммунофермен-тном анализе (КЗА);

- установлена этиологическая роль аденовирусов й хламидий в возникновении респираторно-кишечных заболеваний, у молодняка крупного рогатого скота; .......

- впервые в Кыргызской республике "от больных телят выделены и идентифицированы полевые изоляты аденовирусов'крупного рогатого скота, относящиеся к 1-й _антигенной подгруппе;

изучены иммунобиологические свойства аденовирусов; изучена антигенная активность, ассоциированной"инактивировапной вакцины против аденоинфекции и хламидий крупного рогатого скота, на. лабораторных и.естественно-восприимчивых ьизотлых.

Практическая значимость работы.Рекомендованы Аля серодиагностики аденовирусной и хламидиоз.юй инфекции как более чувствительные Р1{ГА и ИЗД.Отработаны оптимальные сроки вакцинации телят для профилактики ад'еновирусной и хлакидиозной инфекций. На основании разработанной методики изготовления инактивированной ассоциирована вакцины против аденовируса и хламидий крупного рогатого-скота суд в г соеуивмма 1/7Д.

На защиту^заносятся:материалы по изучению распространенности аденовирусной ин'екции и хламкдиоза крупного рогатого скота, выделение, 'идентификация и изучение иммунобиологических свойств аденовирусов крупного рогатого скота, результата изучения антигенной активности ассоциированной инактивированной вакцина и моновакцины на лабораторных и естественно-восприин-чивых'&ивотных.

Апробация работы. Основные положения диссертации долог.ены на научно-практических конференциях молодых ученых Кыргызского сельскохозяйственного института им.К.И.Скрябина в гг,

на расширенном мезика^едральном совещании на кафедре инфекционных к инзазионных'болезней сельскохозяйственных животных Кырг. СХК ек.К.И.Скрябина в 1^56 году"18 марта.

Публикация научных исследовании. По' материалам диссертации опубликовано"5"стате£»■ •

Обьем и структура диссертации. Диссертация изложена на Т52 страницах машинописного текста и состоит' из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения, рекомендаций по использованию научных выводов, списка литературы и приложения." Работа содержит 2С таблиц, 6 рисункоз и б готогра*ий. Список литературы включает источников, в том числе 128 на иностранном языке.

•'АТЕР!!Л: П ЧЕИДО ЙССШОЗАЖ/.

Раоота выполнена в 1551-Т&55 гг., на кафедре ннфекцион- " ках и "нзазкснных болезней сельскохозяйственных животных Кырг. Сл.: К.К.Скрябина, в лаборатории вирусологии '.¡осковской ветеринарной академии им,К.И .Скрябина, лаборатории вирусологии

- * -

Гийсенского Университета ФРГ и в хозяйствах,- ветлабораториях Республики" Кыргызстан, в Акционерном обществе "Дссгук", сельхоз— кооперативе "Алга". -. .-

Распространенность аденовирусной'инфекции и хяаикдиоза среди крупного рогатого"скота определяли путем исследования проб сывороток' крови, которые получали из ветеринарных-лабораторий и хозяйств области. Пробы сывороток крови для исследований брали в основном от коров и телят с I0-2G дневного до 1,5-2 месячного возрастов не менее IG% от стада.

Все сыворотки исследовали в РИГА на аденовирусную инфекцию и в РСК и И5А на хламидкоз по общепринятым методикам. Часть сывороток, положительно реагирующих в РИГА исследовали в реакции ней-трализации(РНХ 4

В работе испбльаавали аденовируса крупного рогатого скота 1-го и .7-го серотипов. Л ля постановки РИГА применяли эритроцитарный диагностикум, приготовленный по усовершенствованной методике сотрудниками МВА.

В период вспышки среди телят заболеваний с поражением респираторного и желудочно-кипечного трактов у больных животных были взяты парные сыворотки с интервалом TC-I5 дней и патматериал для ^ вирусовыделения. Материалом для выделения вируса служили носовыеч и глазные смывы, кровь и фекалии от больных телят 1-1,5 месячного возраста. Для'выделения вируса от павиих и вынужденно убитых животных брали кусочкк легких, слизистой трахеи и лимфатические узлы. Изолирование вируса проводили в первично-трипсинизированной культуре клеток тестикул бычка (ТБ).

■ Пробы с выраженным цитопатическим действием (ЦПД) до начала идентификации хранили при -20°С. Все пробы были исследованы в трех последовательных пассажах. В работе использовали изоляты (Русь 18/81, МБ.ЗОЭб.ЗР.^Р), прошедшие 4 пассажа в первично-трипсинизированной культуре клеток ТБ и эталонные ятаммы (с 1-го по 10 серотипы).

Для электронно-микроскопического исследования вируссодержащий материал центрифиугировали при 6.000 об.мин. в течение 30 минут, готовили по общепринятой методихе к исследование в электронном микроскопе и просматривали при увеличении до 80 тыс.

Для'определения групповой принадлежности аденовирусов выделенные изоляты были иссяедованы'в реакции иммунофлуоресценции (РИФ)-и методом флуорохромирования. Реакцию иммунофлуоресценции (РИФ)

ставили в прямом варианте с фитц-коньюгатами сывороток 1-й и 2-й подгрупп из набора диагностикумов биофабричного изготовления. Хля зтойже цели изучали характер ядерных изменений методом флуо-рохромирозания при помощи окраски акридином оранжевым'.

Для серотипирования полевых изолятов использовали реакцию нейтрализации в культуре клеток ТБ с возрастающим разведением вируса и постоянной дозой сыворотки по индексу нейтрализации. При этом использовали эталонные сывиротки 1,2,3,5, 7 и 8 типам аденовирусов крупного рогатого скота.

Антигенную активность экспериментальной инактиЕированной ассоциированной вакцины против аденоинфекции и хламидиоза крупного рогатого скота, изготовленную в отделе вирусологии 143А, изучали на лабораторных животных (крысы) и естественно-восприимчивых животных (телята) .Опыты проводили в сельхозкооперативе "Алга" и акционерном обществе "Достук".

Для изучения антигенной активности вакцины на лабораторных животных использовали белых крыс с массой до 250-сС0 г. Вакцины вводили животным внутримышечно с интервалом 14 дней, двукратно. По истечении 14 дней после второго введения препарата проводили полное обескровливание животных с целью получения от них сыворотки, которые Исследовали в реакции нейтрализации (РН) и непрямей гемагглютинации(РНГА). "

Я ля этих целей использовали 24 белых крыс, которые были разделены тЛ группы. Крысам 1-й и 2-й группы вводили ассоциированнув вакцину, содержащую С,3 и С,5.'мл. хламидийного компонента по 1,3 и 1,5 «л соответственно.

7-квотным 2-й группа вводили монова'кцину, содержащую только аденовирусный компонент в дозе I мл, а крысы 4-й группы - служили контролем - им вводили культуральную жидкость. - Для изучения антигенной активности вакцины на телятах использовали животных в возрасте от 1,5 до 2-х-месяцев местной (Алатаус-ской ) породы. 7 зсех телят перед" закццнациек исследовали сыворотг-ку крови для определения исходного уровня специфических антител к аденсвирусам(з РНГА) и к хлакидияк--(з РСК). Вакцинацию проводили внутримышечно, двукратно с *мрерваЛ5м" 30'дне*.. Антигенную актив-_ ность образцов вакцин определяли по титру антител в сыворотках крови телят к-аденовирусам в РНГА, а также в РСК .и й£А к хлами-дикм через месяц после первого введения препарата и. далее ежемесячно (до б-ти месяцев)"-

Результаты серологического исследования проб сывороток-крови обработаны статистически..

Опытные образцы ассоциированной инактивированной вакцины проверяли на стерильность С на средах МПБ, МПА; МППБ, Сабуро) общепринятыми методами. Безвредность каждого образца вакцины'была установлена на ТО-ти белых крысах. Полноту инактивации вируса в испытуемых образцах вакцины определяли в перевиваемой культуре клеток почки теленка (T-I) на протяжении 4-х последовательных "слепых" пассажей.

Первый опыт на телятах имел целью сравнительное изучение антигенной активности монозакцины дзух образцов, содержащий в своем состаЕг различное соотносиние антигенов к аденовирусам Т*-й и П-й подгрупп. 7ля-этих целей использовали ЗО'телят, которые били разделены на 3 группы .-Препарат вводили дважды по 5 мл-уизотным 1-й и 2-й группы, 2-я группа - служила контролем, -которым вводили кул туральную жидкость.

3 опыте К2 изучали антигенную активность 3-х образцов вакцин, 1-й и 2-й образцы вакцин содержали хламидийный компонент, а 3-й образец являлся моновакциной. Ассоциированную вакцину вводили двукратно с интервалом 30 днеи по ? мл (образец Я и 52),моновакцину - 5 мл (образец.'гЗ) .3 опыте использовали 4G телят, которые \ были разделены на 4 группы.

Телята'1-й и 2-й группы были привиты образцами Я и !«2, телята. 3-й группы были привиты только моновакциной, содержащей только аденовирусные антигены ;1 и II подгруппы в соотношении С,5:1. Животные 4-й группы служили контролем. '

В третьем опыте-изучали'антигенную активность двух образцов вакцины, отличающихся соотнокением входящих в него компонентов (аденовирусов и хламидий) и дозой препарата вводимого телятам. В опыте использовали 40 телят (4 группы).

Животным 1-й'и 2-й групп вводили'образец вакцины Я в дозах 5мл и 2,5 мл'(соотнэпение аденовирусного и хламидийного компонентов 2:1 соответственно). Телят 3-й группы прививали в'дозе 2 мл образцом вакцины S2, в котором'соотнопение аденовирусного и хлами-ди'Ллого компонентов било Т:Т. 4-я группа животных с «ужи„а . контролем.

РЕЗПЬТАТЛ СОБСТВЕННЫХ ЖС1ЕЛ0ВАЮЙ.....

Распространение аденовирусной и хламидисзной инфекций_в_

некоторых хозяйствах Республики Кыргызстан/ ,

При серологическом исследовании 522 проб сызороток крови от крупного* рогатого скота из" 25-ти хозяйств Чуйскок долины з 453 обнаружена антитела к аденозир-усам 1-й подгруппы и з 557 (72 - к аденовирусам II подгруппы.'Из этого ае количества обследованных проб серопозитиэными в отношении к хламидиям оказались 135 (162) проб з РСК и 165 (2С£) проб в И*А.

3 большинстве хозяйств количество положительно реагирующих кизотных на аденовирусы составило более 50-ти процентов, а иногда доходило до 10С2-

При выборочном исследовании сывороток крови в реакции нейтрализации вируснейтрализующие антитела выявлены у 60£> животных, тогда как в РИГА, у 80-ТСС^ животных.

При исследовании проб сызороток крови у крупного рогатого скота в РСК на наличие антител к хламидиям было установлено наличие их из обследованных 25-ти лоэяйств в 27-и и процент серопозитив-ных животных колебался от Т,5 до 45-ти. Наибольший процент среди положительно реагирующих животных к хламидиям составляли телята от 4-х до б-ти месяцев, а к аденовирусам - молодняк от 6-8 месяцев до 18 месяцеЕ и взрослое поголовье. Данные серологического анализа обследованных хозяйств на наличие антител к аденовирусам и хламидиям показывают спектр циркуляции аденовирусной и хлами-диозной инфекции в некоторых хозяйствах Чуйсхой долины Кыргызстана и-свидетельствуют об его широкой распространенности в целом,

' Кроме того при выяснении распространенности- аденовирусной и хйамйдиозноЯ'инфекция , используя серологические методы исследования - РИГА, РН ,РСК - - и. И1А -выявлена. определен ааа. корре ляцкя.

Ввд»лзаяе'вяруса~от"больных кйзотчвх; • идентификация ■ и изучение их иммунобиологических свойств

В результате вирусологических исоледозаниП из носовых и глазных смывов, крови и фекалий больных, из легких, трахеи"и лимфатических узлов от павших и вынужденно убитый телят было выделено 15 цитопатогенных агентов (ЦПА). "

Материал для исследования брали от 50"больных, 5 павших и 5-ти занукденно убитых телят. Наибольяее" количество ЦПА. было выделено из носовых смыэов (10-5С£) и'наименьшее (5-1С£) из фекалий.

"Наиболее успешно нам удавалось выделение изолятоэ от телят • 1-1,5 месячного возраста. Этиологическая роль выделенных изолятор з проязленяи вспышек заболезан^я доказана по нарастании

титра антител к данным агентам в парных сыворотках, взятых в -период заболевания-и реконваяесценцив. '*

Заделанные изедята'вызывали быстро пррязлявкееся и характерное ЦПЛ"з культуре клеток ТЕ, кнели значительный инфекционный, титр С5Д-5,е^2).

После выделения цитопатоге.-.ных агентов нами были проведены исследования по их идентификации.- '

Зпектронно-микроскопическое изучение показало, что выделенные полевые изоляты имели икосаедрическую симметрию, диаметр составлял 75-80 нм., капекд состоял из 252 капсокеров, т.е. имели характерную для еденозлрусов морфологию.

При определении' групповой принадлежности выделенных изолктов гетодом лвминисцентной микроскопии путем флюоро'хромирования акридином -оранжевый нам удалось обнаружить, что через часов после инфицирования клеток формировались включения светло-зеленого цвета, характерные как для аденовирусов 1-й подгруппы, так и для аденовирусов 11-й подгруппы. Для подтверждения полученных денных нами были проведены исследования вирусов-изодятов в РИФ.

При окрашивании зараженных клеток флуоресцирующей сывороткой 1-й подгруппы через 2-3 сутки после их инфицирования можно было обнаружить единичные клетки с внутриядерным свечением. .

3 препаратах же окравелнзх Флуоресцирующей сывороткой 11-й подгруппы^ наблюдалось скопление нескольких клеток (3-4 клеток) с характерным ядерным сверни ем- В результате данных этих исследований можно судить огналичии аденовирусов 1-й и 11-й подгруппы в выделенных изолятах.

При ткповой"идентификации по результатам'реакции нейтрализации :'?Н) выделенные изоляты были отнесены к 3-му ееротипу, при котором индекс нейтрализации-составлял 5,2 Сод^'. '

Этиологическая.роль выделенных вирусов в заболевании телят была доказана по нарастании титра антител в парных сыворотках,что свидетельствовало о'довольно широком носительстве аденов11русо?' и хламидий среди крупного рогатого скота и участие их в возникно-^ .-вении респираторно-кшсечных заболеваний молодняка крупного рогатого скота. " " .....-. . - -.....

" Таким обрйзом,"результаты исследований показали, что от телят до 1-2" несйчного' возраста склиническими признаками поражения респираторного И"кишечного трактов выделены цитопатогенные агенты, которое-по морфологии вирионов, характеру !Щ2, по характеру вну-

триядерных включений в реакция, иммунофлуоресценции отнесены к аденовирусам I и II подгруппы, а "выделенный вирус-изолят отнесен к 2-му серотияу, генотип которого еще полностью не изучен. 4 "

РЕЗУЛЬТАТУ ИЗУЧЕНИЯ АНТИГШНХ СЗОПСТЗ ЗКСПШ1-ME-fciibHOS ШКТИЗИРОЗАШО?, ДССОЦИИРОЗАНШЙ ЗАКЦИШ ', ПРОТИВ А1ЕН0ШЕКШ И ХХАГЩИОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО ■ СКОТА НА ЛАБОРАТОРНЫХ И гТЮТЗЕШЮ-ЗОСПРИтМШХ 1ИВ0ТШХ

Сравнительная'антягвзззя'актязязеть ио;<сэакиииы и ассоциированной вакцины у лабораторных .¿.квотных..

При изучении антигенной активности 2-х образцов ассоциированной вакцины (образец И и *2) содержзцеге различное соотноиение аденовирусного и хламидийного компонентов (1:0,3 и 1:0,5) и моновакцины (образец к3) содержагего только аденовирусный компонент выязлена их Еысокая антигенная активность.¡Наряду с этим установлено, что образцы ассоциированной вакцини'по антигенной актйзяос-ти не уступали моновакцине'. Титр антител х аденовирусам был в пределах 8;5-9,Ilfoj2 в РН и 10,01-10,21 foijg в Полученные данные результатов исследований позволяют сделать захясчеиие, что аденовирусные и х'ламидиознае компоненты не зазывай конкуренцию между антигенами и тем самим не снижали антигенной актизйостя з ассоциированных препаратах, и были безвредны для лабораторных животных.'- ."" ....... ......

'Изучение"антигенных сзоПстз"экспериментальной а.гсос/и&озаязой ' ияактйзарозанног • вакцина; против адгноин^екцки л хгзкудйсза .аруп-ного рогатого скота на телятах.-

■ Изучение антигенных свойств ассоциированной гакцина ¡(2 яро-, ■ зодили сравнительно с моновакциной. Для этого сначала нами были изучены антигенные свойства моновакцины, которая содержала'различное соотнесение аденозирусов 1-й и 11-Я подгрупп." 3 pes/ль -тате исследований было установлено, что у кивотных привитых образцами 'FI (соотношение аденовирусов 0,5:1) антигенный был намного выше чем у телят, привитых образцом г:2 (соотнесение аденовирусов 1:1) . Причем титр антитея был высоким к ойеим" подгруппам" аденовирусов (T0,2fog2 -8»0 fog?) в течения 2-3 месяцев , который" постепенно снижался и x'5-иу месяцу он состазлял 5,С2 .. и 9,5и оставался на этом уровне с некоторой тенденцией к снижении в течении всего срока нзогодеяия (6 месяцев).

У телят привитых моновакцкной образца )!2 титр антител к аде нови- " русак 11-й подгруппы был значительно нкэке (S-Sfo^' чем к подгруппе (Р<С,С5).

3 результате полученных данных мог.но сделать вывод о том,что кнаетивирозанная вакцина, которая состояла'из соотношения-аденовирусных антигенов 1-й и II-й подгрупп С,5: Т оказалась более активной к обеим антигенным- подгруппам аденовирусов в сравнении с вакциной с соотношением 1:1......

'' Сравнительное изучение антигенной активности ассоциированной вакцины и ноновакцины. ' •

Пр.к сравнительном изучении антигенно;": активности двух образцов ассоциированной инактнзированной вакцины против аденоинЛея-дии и хламидиоза' крупного рогатого скота' и ¡юневакцины против аде.ноин?екции. крупного рогатого скота было установлено, что обе вакцины обладают внраленной антигенной активностью.

У телят 1-й группы, вакцинированных образцом содержащим аденовирусный и хламидкйнкй-компоненты, через месяц после ревакцинации титр антител к аденсзирусам Т и TI подгруппы соответственно состяБЛйя ТС,П2 и ТО,40 Iо^, а через I месяц после повы-салсядо TI.CS и II ,25 Hogg« Бьтем незначительно снижался на Т-1,2lofe и оставался более менее стабильным г течении вс'его срока наблюдения.

У т£ляг 2-й'группы, вакцинированных образцом ,;2. где соотноЕе-;нис аденовирусных антигенов Т и II подгрупп, было 1:1 уровень антител резко отличался.Гитр антител к аденовирусам II подгруппы была значительно ниже (на Т,2-2,52од2' чем к аденовирусам 1-й подгруппы (Р<О,СС0- '

У трг.гт 3-й группа привитых моновакциной тцтр антител после ревакцинации достигал'до'IIЛ fogg и II ,С Ь>32*

Наряду с изучением" антигенной активности двух образцов (И и :,г2) ассоциированной вакцины в отношении аденозирусов проводилось также изучение последнего в отношении хламкдийного компонентов. ' 7 телят 1-й и 2-й группы после первой вакцинации титр антител к хламидиям бнл-в пределах 2;8-3,0^ор2- Ревакцинация сопровождалась повышением титра антител более чем в 2 раза (5,45 и бЛТ&зс^) У еивоткых 1-й и 2-й группы соответственно и на 6-й месяц титр антител к"хламидиям составлял k,5 и ч.З^ос^. Причсапри сопоставлении полученных данных не наблюдалось существенного различия

в уровнях, антител у гизотных'.ОИ и '?2 группы) привитых ассоциированной" вакциной, которая"содержала- з с-зоем составе антигены аденозирусов 'э различном соотношении (С,5:Т и Т:Т).о?0" свидетельствует о том, что наличие хламидийного компонента в образцах ассоциированной" ^акциза не снижало аатигзкной активности аденовирусных препаратов. Помимо зтого у животных, привитых образцами вакцин как с хламидий на:?, так и без' хламидий ного компонента, титр антител к обеим подгруппам аденовирусов бал одинаков :з течении . всего срока наблюдения. Это говорит о том, что образцы ассоцииро -ванной вакцины обладали высокой антигенной активностью как к аденовирусам, так и к хламидиям, и наряду с этим моновакцина не уступала в активности ассоциированной вакцине".

'Влияние дозы ассоциированной вакцины на антигенный ответ животных.,

3 результате проведения испытания активности ассоциированной вакцины в зависимости от дозы введенного препарата существенных различий в уровне антител мекду группами з зависимости от дозы образцов инактизированной вакцины не наблюдали. Титры антител в сыворотке крови привитых животных независимо от дозы введения препарата оставались высокими - 6,5-Т2,5£о22 на 1-е подгруппу аденозирусов, 7,1-12,800^2 на П-в подгруппу аденовирусов и -2,5-6,5^2 к хлахидиям. •

7 невамлимрованных телят через 1,5-2 месяца после формироза -ни я их'в группы наблвдали зспышку респиратсрно-кишечных заболеваний. Эти данные позволяет'сделать вывод, что вакцинация опытных телят позволяла надежно защитить их от аденовирусной инфекции и -хламидиоза крупного рогатого скота, индуцируя у. них образование гуморальных" антител з течение нести месяцев.' '

Полученные нами данные'широкого испытания экспериментальной' серии ннактквированноП ассоциированной вакцины против аденовирусной и хламидиозной инфекции крупного рогатого скота свидетельствуют о высокой антигенной активности испытуемых препаратов' и о возможности рекомендации их для биофабричного.производства.

заводы

Т." Зпизоотологичесхими, серологическими и вирусологическими • исследованиями з хозяйствах Чуйской долины Кыргызской Республики выявлена'широкая распространенность аденозирусов и хламидиоза крупного рогатого скота.

2. Установлено участие аденовирусов 1-й и 11-й подгрупп и хла-мкдий в возникновении респираторных и кишечных заболеваний

' телят. ...... . ' ----- .

3. Ог телят с клиническими признаками поражения респираторного

и желудочно-кишечного тракта выделены \9 цитопатогенных агентов, в результате изучения их иммунобиологических сгойств -морфология, характера цитопато'генного действия, морфологии внутренних включений, РИФ и культуральным свойствам - отнесены к аденовирусам крупного рогатого скота. Идентификация в реакции нейтрализации выделенного вируса-изолята позволяет отнести его к 5-му серотипу.

5. Испытание экспериментальной сер'/и кнактиви^сванной ассоции-' роганной вакцины против аденовируса и хпаиидиоза крупного

рогатого скота на лабораторных животных показало их безвредность и антигенную активность.

6. Сравнительное опыты по испытанию инактивированной ассоциированной вакцины против .аденовирусной и хламидирзной инфекции крупного рогатого скота и моновакцина на телятах показали высокую; антигенную активность ассоциированной вакцины в борьбе с Едеяоинфекгией и хламидиозом.

7.-Наличие двух различных компонентов в .ассоциированной вакцине не снижало ее антигенной активности как в отношении аденоин-*екцик,"так и хламидий.

8. Опытные образцы инактивированной ассоциированной вакцины обладали выраженной антигенной'активностью в предохранении вакцинированных животных от аденовирусной и хламидиозной инфекций •.

.РЕКОМЕНДАЦИЙ ПО. 1'ЕП01Ь303АНЙЮ НАУЧШХ ЗУЗОЛОЗ

1. Рекомендованы' для'серодиагностики аденовирусной и .хлами-. диозной инфекций как.более, чувствительнее РИГА и ИЗА.

2. Телят ЭС-35-ти" дневного возраста, имеющих-колостральные .антитела, и ееронегативнах," не имеющих антител, с 15-ти дневного возраста достаточно вакцинировать ¿в дозе 5 мл

' двукратно с интервалом :в'30'дней. . " " '

3. Результаты-диссертационной' работы внедрены ,в учебный процессий'кафедре инфекционных и: инвазионных болезней Кыргызского сельскохозяйственного института.

- та -

СЛИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ 1КОСЕРТАЦИИ

Т. Цургазиев Р.З.,Биримкулова А.Т. Распространение некоторых пневноэнтеритов в хозяйствах Республихи' Кыргызстац^Яроб-лямы научного обеспечения эффективности сельскохозяйот -венного производства: Тезисы докл./Кырг.СХй км.К.И. Скрябина.Бишкек.-Т552.-С.16^-185 2. Биримкулова А.Т. Серодиагностика вирусных пневмоэнтеритсв //Тезисы докладов юбилейной научной конференции, посвященной 60-летия образования Кырг.СХИ им.К.И.Скрябина УКырг. СХИ им.К.И.Скрябина.Бискек.-1552.- С.Т46' с. Нургазиев Р.3.,Биримкулова А.Т. Распространение парагриппа -3 в некоторых хозяйствах Чуйской долины .//Вклад науки в изучение и лечение распространенных болезней животных: Сб. науч. тр./Кнрг.СХИ им.К.И.Скрябина.-Бишкек.-1553.- С.123 Нургазиев Р.3..Биримкулова А.Т. Распространение антител к вирусу' инфекционного ринотрахеита у телят ^Вклад науки в изучение и лечение распространенных болезней животных:Сб. науч.тр./Кырг.СХИ ик.К.И.Скрябина.-Бишкек.-1553.-С Л 25 5. Белоусова Р.3.,Нургазиев Р.3.,Биримкулова А.Т. Антигенные свойства-бивалент ной иаактивированной вакцины/Совериенс-твозание мер борьбы с болезнями с-х животных: Сб.науч.тр-/Кырг.СХК',им.К.И.Скрябина.-Бишкек.-1994.- С.37

Fir'a!rulova Alnura Tashibekovna

Diagnostician and specific.prophylactic measures of adenovirus and claaydes infection of catties.

For Science Degree,Biology.

Speciality 16.00.03

3UV::ary

In this v?ork the spreading of adenovirus and clanydes infection in Chu Valley of Kyrgy:; Republic was investigated.

Stiologycal rolr of adenvirus and clanydes in arising of

ieepiratory-intestinal disease of heifers was proved.

Adenovirus fro? sick and dead ersinals was taken.Group

and' type identification of cytopathogenic agents allowed

to attribute them to the 3d Serotype of cattle*s aderfvirus.

Moreover sone reries of inactive associated racci-cs a^cisst end clanydes of catties were 'tested

end their high antigenic activity was revealed.

Биримкулова A.T.

Бодо маядардын аденовирус хана хламидиоз ыдавдарынын диагностикасы жана спеиифи-калык профдлактик&сы. *

Кыргыз' республикасынын Чуй' ереенунде бодо малдардын арасында аденовирус хана хламидиоз ыландарынын кедири тара-лыиы аныкталд№.1аш музоолордун респиратррдук ичеги-карь:н ыландарынкк пай да болушунда ».а на енугушу'нде аденовирустар-дын жане хламидиоздордун тузден туз катыша тургандыгы да-лиддендк.

Ооруган жаш музоолордон алынган патматериалдан вирусоло-•гиклек изилдеелердун негизинде адековирустардын 3-чу серр-типке таандык болгон вирус табылды.

' Аденовирус' жана хламидиоз ылавдарына каршы инактивация-

ланган вакцинан'ын жогорку антигендуулук касиетке ээ экен-

диги аныйталды. _______/

Подписано и печать, Б V^JLS._ Формат ¿¿?у £

Печать офсетная. Объем За к__(¿JL__Тир.,

/СО

г. Бишкек, уп. Медероы, 68. Типография КСХИ