Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Биологическое действие и эффективность препарата ПКФ при откорме животных
ГГ Б ОД - з НАР 1М7
На правах рукописи
САФОНОВА Людмила Борисовна
БИОЛОГИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА ПКФ ПРИ ОТКОРМЕ ЖИВОТНЫХ
16.00.04 - Ветеринарная фармакология с токсикологией
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Воронеж - 1997
Работа выполнена в отделе экологии, токсикологии и гигиены Всероссийского научн исследовательскою ветеринарного института патологии, фармакологии и терапии.
Научный руководитель - доктор ветеринарных наук М. Н. Аргунов.
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук, профессор, академик РАСХН кандидат биологических наук
В. Т. Самохин Т. Е. Рогачева,
Ведущая организация - Воронежский государственный аграрный университ им. К. Д. Глинки.
Защита состоится "ЯО" 7 1997 г. в /Р* _ часов на заседай
диссертационного совета Д 020.65.02 при Всероссийском научно-исследовательсю ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии (394087, г. Вороне ул. Ломоносова, 114-6).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.
Автореферат разослан
Ученый секретарь диссертационного совета
М. Н. Аргунов
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.
1.1. Актуальность темы. Одним из важнейзгх факторов, сбезпе-взяцдх наиболее полнее проявлен:» продуктивности зшвотньк является ерганиэацзя пглноценнсго кгрмгзния, то есть сиегекзткадсксб зоступгэнш з кормом набора всех питательных зенестЕ, необходимых для физиологически обоснованного /ровня лроаукэтэнсста, интенсивности процвсссз обмена зазеств з органах и тканях прегуктквных животных, Таким образок, поведанное космлекпе, зкгжчаоз»е органические вещества; протеин, липиды, углззодь», а такие кеебхегашз организму эятзь&аш, макрс- и микроэлементы, являются сскгзкым условием роста и продуктивности мивотных и птиц (ХЕ. Мсзгсз, 1964; А.М. Венедиктов, A.A. Лонао, 1979; ; А.Е. Архипов, 1934; S.T. Са-мохин, 1993; М.Н. Аргунов, 1994,1995; Н.И. Кузнецов, 1994).
однако, интенсивное ведение животноводства, сосредоточение Сольного числа животных ка ограниченных площадях, круглогодовое содержание их в ломецеяиях, использование дрсыыаггкнсгс производства кормов низкого качества, отсутствие непосредственного контакта
о живой природой стали вызывать у животных и птиц пвдение резистентности, глубоки® нарушения обмена веществ, заболевания, еннке-нае продуктивности и биологического качества продуктов животноводства (Л.Б. Пвтруххк,1363; З.Т, Самохин, 1995; B.C. Sysлама и др., iS95: ). Дефицит кормов и недостаток в них питательных элементов требует введения в рацион животных и птиц различных кормовых добавок - источников протеина, макрс- к микроэлементов, витаминов, а также различных препаратов, таких как продукты микробиологического синтеза, антибиотики, транквилизаторы, сорбенты, антиоксиданты и др. (Н.И. Кузнецов, 1995,1895; А.И. Венедиктов, 1933; S.A. Антипов, 1984, 1995, 1996; A.C. Селиванова, Н.П. Бирюкова,
А.П. Морозов, 19SD),
Следовательно, дефицит и низкое качество кормов, недостаток в них питательных зл?.уэктов ведет к необходимости использования фармакологических средств, кормовых добавок, применение которых должно базироваться на строго научной основе и обеспечивать безвредность для здоровья человека и животных, зколсгпческуЕ чистоту ок-рудасней среды (Н.П, Коновалсз, A.C. Архипов, 5.И, Сазличенко, Т.к. Схрнманко, 1923; З.Д. Соколов, 1991; А.М. Смирнов, 1993; Г.А. Таланов, 1992;.
Нами проводились работы по разработке препаратов, фармакологических средств для коррекции рациона животных и отимуляпиз; их роста и развития, одним из них является препарат ПК®,
Тема диссертационной работы является составной частью задания
07.01.03.ИМ Российской НТП фундаментальных и приоритетных прикладная исследований, N гоор&гястрации 01.9.40 00753?.
Экспериментальные исследования и опытные работы выполнены в отделе экологии, токсикологии и гигиены, отделе ®МИ Всероссийского НйЗИ патологии, фарамакологик и терапин, на кафедре технологии т-os и мясных продуктов Воронежской технологической академии.
I.E. Цели и задачи исследования. Основная цель работы - провести комплексные исследования по разработке, изучению и внедрение в практику ветеринарии к животноводства нового экологически безопасного препарата ГКО, предназначенного для коррекции рациона животных и стимуляции их роста и развития. Для достижения поставленной цели были репены оледушие задачи:
- неучены фнзико-хкшічеокие и фармакс-токсикологические свойства (параметры к класс токсичности, аллергенные, змбриотсксичес-кие, тератогенные, кумулятивные свойства, хроническая токсичності; и дана оценка экологической безопасности препарата ПКС;
- изучены биологические закономерности влияния ПК$ на ерга-нкзм животных;
- разработаны показания к применение к изучена .эффективность препарата при откорме животных.
1.3. Научная новизна результатов исследований: Разработан новый экологически безопасный препарат ПК£> для интенсификации откорма Иріплят-брсйлеров и молодняка крупного рогатого скота.
- Изучены физико-химические и фармако-токсикологические
свойства препарата: определены параметры и класс токсичности, ал-
лергенные, змбристокоичеокие, тератогенные и кумулятивные свойства, хроническая токсичность.
- Проведена оценка экологической безопасности использования препарата.
- Изучено влияние препарата UR5 на гематологические показатели крози птиц и молодняка крупного рогатого скота,механизм его ростости.'.гулирусщегс действия.
- Изучена эффективность нового препарата Ш® при откорме цыплят- бройлеров и молодняка крупного рогатого скота.
Результаты комплексных исследований позволили сделать вывод об эффективности и безвредности препарата ПКФ, который содержит активное веіцестзо, макро- и микроэлементы, обосновать научнуж гипотезу о механизме интенсификации откорма животных.
1.4. Практическая значимость исследований. Экспериментальными исследованиями установлено, что препарат ПКФ относится к классу малотскоичных хкшгсескях веществ, не обладает аллергенным, ембрис-тскскчеокям к тератогенными свойствами, улучшает переваримость к усвояемость корма, нормализует обменные процессы. Этот препарат применим для нормализации минерального обмена, стимуляции роста и развития, увеличения продуктивности, а также не оказывает отрицательного влияния на гдорсзье животных, физико-химические и зэтери-нарнс-санитарные показатели мяса.
По результатам НИР разработана научно-техническая документа-
- наставление по пржеиезхзо ИКС;
- технические условия, НТД рассмотрены и сдобрены ученым советом БНКЕИПОиТ (протокол К ? от 21.li.S4r.).
Опыхно-прсмыогленкые партии ПКО проиеведекы з Лермонтовском ПС "Алмаз", Уварогском химическом заводе, которые применялись и применяются о высокой эффективностью з хозяйствах Воронежской области. .
1.5. Апробация материалов диссертации. Основные регулгтзгы доложены и одобрены на ежегодных отчетных конференциях и заседаниях Ученого совета Всероссийского НКВЙ патологии, фармакологии и терапии (1992-96г.г.); координационном совещании, посвященное 25-летию Всероссийского НКВИ патологии, фармакологи а терапии (Воронеж, 1555); научной конференции, посвященной Еи-летин Краснодарской НКВС (Краснодар, 1596); научней конференции, посвященной 70-летию факультета ветеринарной медицины Еорснедскогс ГАУ (1996).
1.6. Публикация результатов исследований. Материалы диссертационной работы опубликованы в 5 научных статьях.
1.7. Объем и структура работы. Диссертация изложена на
страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, изложения полученных результатов, заключения, выводов, практических предложений и списка использованной литературы, вклкчанцего нытменований отече-
ств екных и '/г иностранных работ, содержит таблиц и ' фото.
3 пр;1лояении представлены акты с выполненных научно-производственных экспериментах и нормативные документы на препарат.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.
Исследования выполнялись в осохвегствяи с пгенок научно-исс-лгдовахэдаоках работ БКИВИ патология, -фармакологии и терапии го теме "Разработка и освоение производства нового экологически йего-пасного препарата IKS для интенсификации откорма молодняка крупного рогатого окота к пуплят-Срсйлероз".
Экспериментальная часть работы была проведена в ЕШЕйН&їТ, в птиыессвхсее "Воронежский" Ковоусманокого района и АОЗТ по откорму и дсрашшааа» молодняка крупного рогатого скота "Парїаюкая Коммуна" Верхнехавсксгс района Воронежской области. Е лабораторных экспериментах и научно-прсиззодоовенных опытах использованы беспородные белые мьсги, белые крысы, морские свинки, кролики породы "Белый великан", цыплята-бройлеры кросса “Бройлер-Е11, молодняк крупного рогатого скота симментальской породы мязо-ыолсчнсго направления. Схема и краткая характеристика опытов представлены в таблице 1.
При проведении опытов группы животных формировали по принципу парных аналогов с учетом пола, возраста и живой массы. Проведены физике-химические. клинико-физиологические. токсикологические и биохимические исследования.
В процессе выполнения работ использовали клинические, фарма-тсксикологические, морфологические, биохимические и другие методы исследования. Объем выполненных исследований приведен з таблице 2.
Параметры токсичности определяли по способу Г.Н. Перинна (195С), L.3. Miller, U.L. Toir.tsr (1944), ембриотокспчность и ку-
ыулятивнссоъ - по методам ЕНЖГЛНТЗКС (19Є9), аллергенность - с помощью кенкоктизальной пробы (по Г.П. Трубецкой, 2.975) и кежнеп-ровокацискной пробы (О.Л, Алексеева, Л.А. Дуева, 197S). Сценка экологической безопасности использования ІЇКФ по методике, разработанной при участии соискателя (рассмотрен и одобрен Отделением ветеринарной медецины FACXH протокол К 5 10.10.94).
5 крови определяли;число эритроцитов и лейкоцитов на счетчике (Культер-Каунтер), гемоглобин - гемлглсбинцианидным методом, гематокрит - с помощью микрсцентрнфуги, глюкозу - ферментативным методом. В сыворотке крови определяли общий белок рефрактометрическим методом, общие липиды - с сульфофосфсзанкликсЕым реактивом, мочевину - по цветной реакции с дизцетплмоноскоимсм. в беЗбеЛКОЕОМ фильтрате крови определяли неорганический фосфор с ванадат-молиб-деновым реактивом (по Пулеу в модификации КорсмкслоЕа B.C. и Кудрявцевой Л.А.), кальций в сыворотке крови - методом пламенной $о-
Таблица 1
Схема и краткая характеристика опытов.
N п/п 1 г | Место проведения | ; и целг работы 1 I I Бад животных; ! Кол-во голов , ! ¡Длитель- ! ¡нос ТЬ,ДК. 1
I 2армако-токспксясгичеокая
оценка ПКЗ
X Виварий института белые мьпои 300 50 !
Определение параметров к клас-
са токикясста препарата ПКЗ белые коысы 300 60 |
2"! .С Виварки института кролик-1 15 30
Изучение аллергенных свойств морские
препарата ПК2 свинки 15 30
5 Визарий института . белые крысы 60 зо |
Изучение змбриотоксических и
тератогенных свойств препарата
ПКФ
4 Визарий института белые крысы 50 45 ;
Изучение кумулятивных свойств
препарата ПКФ
ег Виварий института белые крысы 120 £70 ■ !
Изучение хронической токсич-
ности препарата ПК$
II Изучение биологического
действия на организм и
Эффективность при откорме
о Визарий института цыплята 20 ст1-* I
'У Птицеплемсовхоз "Воронежский" цыплята- 27500 57 !
Нозс-Усманский р-н. Воронеж- бройлеры на
ской области откорме
Р; Птицеплемсовхоз "Воронеж- молодняк £50 40 !
ский” ,НоБС-Уоыанскйй р-н, к. р. о.
Воронежской области
Испытание эффективности
ПКФ и преципитата
9 Птицеплемсовхоз "Воронеж- молодняк
ский", Ксво-Усманский р-н, к.р. О.
Воронежской области на откорме 350 60 !
Испытание эффективности
133 и диаммонийфсофата
1С АОЗТ "Парижская Коммуна", молодняк
Верхне-Хазский р-н, Всрсне»- крупного ро-
ской области гатого скота
Испытание эффективности ПКО на откорме 300 30 :
Таблица
Объем проведенных исследований.
; ' "! \ Исследуемые ! ! 1 Объекты исследований
: ! 1 показатели ! ! 1 Кол-во ЖИВОТН ! Туши | ! 1 ( г Оогакоз! Ткани! ! ! Кровь
; 1 | 2 1 1 ! 3 | 4 | 5 ! 6
! 1 1 Мааса (вззежваня&) 4160 | 2310! | ! 14050! 1
) Паталого-анатсмиче- | 1 1 1 1
; ские исследования ! 2310 ! 2310| 14050! |
; Кол-во эритроцитов 1 ! ! ! 1 420
! Лейкоциты - ; : 1 ; ; 420
1 Гемоглобин ! 1 ! ! ! 420
; Ге.матскрнт ! | | ' ! 420
! Гдзкоза ! I 1 I 260
I Обций белок ; : I ! : 260
! Лактат 1 1 ! 1 260
\ Пируват | ! 1 I ! 250
| Общие ЛИПИДЫ ; ! 1 ! 1 260
; жочевина . | ! ■ I • 1 260
, АО'Ле ОТ ерик ; ! : ! ! 260
’ Кальций | 1 ! ! ! 250
: Фосфор | ! | ! ! 260
1 Сера 1 ! ! ! ; 260
! Аэот ; ? 1 ! ! 280
| Марганец . ! ! ! ! ! 260
; Цинк : ! 1 ' ! ! 260
| Натрий | 1 ! ! ! 260
1 Калий 1 ; ! 1 ! 260
\ Морфометрия клеток 1 ! ! ! 1
! Аминокислоты (17 вид)! ! 1 ! 12 ' 10
! PH ! 1 1 1 12 ;
ГигрсЕлага | ! ! 1 12 !
Й.ПР : 1 I ! 12 ! 14
Сухие Еегестза | 1 1 1 ! 14
Зетерикарнс-санктаркая| ! ! ! !
; оценка 1 ■ ! 350! 1 ... 1 ! ; ! !
тсметрип; сухое вещество - по ГОСТ 3228-73, кассовую дело лактазы ~ Пи. iVi^Tw^y Еестрана, зетерпкаркс-санптаркзл сценка мяса - формалиновая реакция - пребяречнш методом, реакция на пересксидагу -пс Андриевскому (Х.С. Горегляд, 1974), pH - потенциометрическим способом, содержание азота - по Келъдалс, гкгровлагу - высушиванием при 1СЕУ, жир - зо Сокслету, аминокислоты - автоматическим анализатором аминокислот Т-ЗЗЭ.
Фиксацию органов и тканей проводили в формалине и жидкости Карнуа; обезвоживание органов и тканей - в спирте-ректификате о последующей заливкой з парафин и цэллекдик; окраску - гематоксилин-эозином, гликогена - по Мак-Макуоу.
Гистологические препараты цлтезидней железы окрашивали методом геиэтовоазина-эогкнз и с ясмозье окуляра микрометра изучали высоту эпителиальных клеток фолликул и диаметр самих фолликул. Определение связанного с белком йода (СБИ) в крови проводили рсдани-дс-нитритным методом СЮ.К. Еремин к др., 197с), по которому, как правило, судят о гормснообразующей функции щитовидной железы.
Полученные результата исследования подвергнуты математической обработке метода®; параметрического (Е.Ю. Урбах, 1975; Г.З. Лаккн, 1930; Л. Зако, 1386).
Экономическую эффективность применения кормовых фосфатов определяли по методике, утвержденной ГУЗ МСХ СССР (М.,1932).
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. Фариако-токсккологичес!5ая характеристика л оценка безопасности препарата ПК®.
3.1.1. Получение, состав и физико-химические свойства. ЛК5 -комплексный препарат, предназначен для интенсификации откорма молодняка крупного рогатого скота, цыплят-бройлеров, представляет собой порошок серовато-белого цвета, в воде плохо растворяется, образуя взвесь. Для его производства используют аммодикзльцппфсс-
фат, йосфогкпс (ТУ £-03-418-80) и биологически активнее вещество
..... . ^
ПО" в соотношении компонентов 50:49:1%. Содержание основных элементов в готовом продукте установленное при спектральном анализе
Кроме того, в 1 кг содержится (г) марганца 0,153, железа -
0,133, меди, 0,005, цинка 0,034, натрия 0,351, калил 0,045. Содержание свинца, мышьяка и фтора не превыпает ЦЦК для этих элементов.
Набор элементов в препарате обусловлен содержанием в фосфс-
гипсе: дигидрзта сульфата кальция 0а304*2Н£0 (не менее 92%), крем-нефторкдов гудочных металлов (8е,К)г5ІРв, фтеридс-в кальция Саго, фосфатов железа и алюминия РО42Н2О, А1Р04*2НгО, фтсралатита Са5(Р04)зР, нефелина (Ма,К)АІЗі04*пЗі02, силикатов Ре и Аі;.и з ак-ксдикагьцвйфссфате: оксида фосфсра Р9О5 к оксида кальция СаС.
Таблица Э
,-------1------;--------,----1-----!----1-----;
'Назва-і Фосфор і Кальций!Сера!Азе™ і Вла|Бвал.І
І нив І вес.XI зве.5 !В8с£|вес^Іги ¡ак.в.|
і_______і_____-Л________Л____і_____1____1_____і
іпкг 5,0 22,0 4,0 4,0 1,0 1 !
і_____________________________________________і
Опытно-промышленная партия препарата ПКФ з количестве 4? была изготовлена на Уваровскок химическом заводе (г. Уварове Тамбовской области) и 2,Е г б Лермонтовском ПО "Алмаз" ка технологической линии по производству дкаммснийфссфата. Аммодикальцийфосфат готовился из концентратов Каратауского и Ковдсрского месторождения.
3.1.2. Изучение острой токсичности п экологической безопасности ПКЇ. Все ноЕые лекарственные средства, препараты и кормовые добавки деланы быть не только высокоэффективными, но и безвредными для животных и человека. В связи о этим проведена изучение токсикологических свойств и дана сценка экологической безопасности ПК©. Исследования выполнены в соответствии с требованиями ВОЗ, Минздрава, Еетеринарка-фзрмакслогическсгс совета Департамента ветеринарии России.
Тсксиксметрическую оценку ІЇКФ проводили в остром опыте на лабораторных животных (белые крысы, белке Шй) . В опыт были взяты пс 25 голов белых мышей с массой тела 18-25 г и белых крыс с массой тела 150-200 г. Животных формировали в-группы по принципу парных аналогов. За нивотными вели наблюдение, учитывали клинические симптомы интоксикации. В течение 14 дней после затравки учитывали количество певши и выживших животных. Препарат ПКФ вводил;: грызунам внутрижелудечке г виде годней взвеси г различных дозировках с интервалом медцу дозами 1000 кг/кг дивой массы. В начале была установлена минимальная токсическая доза, при которой животные не гибли, но признаки интоксикации проявлялись, т.е. кратковременное легкое угнетение обсегс состояния, которое преходило через £0 мик.и максимальная токсическая доза, при которой наблюдалась 100%
гибель грызунов, клинические СИМПТОМЫ ЙКТСКСЕКЗгКй через 30 ЫЙН. к угнетение общего состояния, учащенное поверхностное дкхакяе, сильные судороги. Гибель грызунов наступала в состоянии кош. В результате были определены летальные дозы, которые составили для белых мъпгей /¿¡50 2550±12,3 мг/кт и белых крыс ЛД=о 573С±45,9 мг/кг живей кассы. Согласно принятой классификации (Л.И. Медведь,1363) препарат ПКФ относится к мзлстсксичным хюличеоккм веществам - 4 классу.
Токсическое действие и тяжесть отравления белых мьпдей и белых ярые препаратом ПКФ обусловлено содержанием в нем аымодикальций-фссфата. Признаки отравления препаратом характеризуются продолжительной стадией возбуждения, беспокойством, нервными явлениями, дрожью. Отмечается пугливость, повышается чувствительность кажнеге покрова. 3 последущел/ развивается угнгг-гкле л гибель лизогныч.
Патологсвнатсмические изменения характеризуются диалогом и застойными явлениями в перифирической крови. Обнаруживаются множественные кровоизлияния во внутренних органах, под эпикардом и эндокардом, в слизистой .желудка, тонкого отдела, килечникз. Чаете наблюдается гиперемия и стек легких. Печень незначительно увеличена, полнокровна. Кровь плохо свернувшаяся, имеет темно-вишневый цвет. Оценка экологической безопасности при использовании ПКФ в ветеринарии и животноводстве позволило отнести его к безопасным.
S экспериментальных условиях проведено испытание схемы лечения острого отравления цыплят-бройлеров препаратом ПКЗ, которая включала внутривенное введение 50" хлорида кальция - 1,0, подкожно кофеин-бензоат натрия, 4С% - 0,5 и внутрибрюшинно раствор глюкозы, 40S - 15,0. Из S затравленных птии подвергнутые лечению 4 ка вторые сутки выздоровели, а контрольные пали через 12-24 часа.
3.1.3. Аллергенные и ножно-резорбтгевное действие препарат ПК®. Аллергенные свойства препарата ПКФ изучали на кроликах методом ксньюктивальных проб к на морских свинка:-: путем накожных аппликаций .
Трем кроликам под верхнее веко правого глаза вносили по одной капле 1, 5, 10% водного раствора Ш’Ф. Для контроля в левый глаз
этим же кнзотным вносили по одной капле физраствора. Учет проводили через 5 минут, 24 и 43 часов. При этом учитывали состояние слизистой оболочки глаза зек, наличие инъекции сосудов, секрецию слезы. В течение всего периода наблюдения у животных изменений со стороны глаз ке наблюдали.
Провокационные кожные пробы проводили на морских свинках методом эпикутанных аппликаций. Перед началом аппликаций провода»! сенсибилизацию животных путем многократного нанесения на кожу ПКЭ. Ежедневно на выстриженный участок коди трем морокшг свинкам наносили водный раствор препарата з разведениях 1:10; 1:100 и 1:1000.
На 14 день (время инкубационного периода) ка свежевыстриденный участок кожи наносили разрешающую дозу ПКФ, а такие препарат в разведении.
В течение всего периода опыта за морскими свинками зели наблюдение, проводили измерение температуры тела, толщины кожной складки на месте зпикурироаания, определяли температуру на месте введения препарата. Изменений в клиническом статусе животных и на месте 'аппликаций ПК® не выявлено. Ка основании этого ответную ре-ЗКЦЇ2С 0Ц6КИВЗЛИ СТрКДЗ.ТЄ'ЛЬНО.
Кожнс-резсрбтивное действие ПКФ изучали на белых крысах методом погружения хвоста. 1С голов фиксировали з специальном станке так, чтобы хвосты ливсгных были помещены ка 2/3 длины пробирки о 50% водным раствором ПКФ. Учет реакции проводили через 4 часа по наличию местных изменений на хвосте, смертельных исходов, степени выраженности интоксикации и изменений массы тела животных. Б дакнем случае у опытных белых крыс не было изменений кож: хвоста, случаев гибели и признаков, интоксикации. Исходя из этого, мы пришли к выводу, что исследуемый препарат ПКФ не обладает кожно-ре-зербтивкыы действием.
3.1.4. Эмбриотокскческое и тератогенное действие, '¿мбриоток-сическое действие ПКФ изучали на беременных белых крысах с массой тела 200-220 г. В опыт были взяты 40 голов, из которых 20 голов беременных белых крыс е период имплантации (5 день беременности) и 20 голов б период органогенеза (17 день беременности). 10 животным из каждой группы вводили однократно в желудок препарат ПК® 2ЕС0 мг/кг живой массы, оставшиеся по 1С голов из каждой группы служили контролем. На 20 день провели убой животных пс 5 голсв из каждой группы и учитывали раннюю и повднаао резорбцию плода, общую плодовитость, количество желтых тел беременности, живых и мертвых эмбрионов. В результате не было выявлена различий между животным:-: опытных и контрольных групп.
От оставшихся 25 самок было получено потомство, за раавитиек; которого вели наблюдение: проводили взвешивание, замеры длины те-
ла, хвоста, ступней, ушей, учитывали сроки отлипания упей, проре-
заяия глаз, ебрастакпг верстным печевом, подвижность к активность высасывания «едока матери в течение первых дней ж:гня.
Изучали влияние на постнаталькое развитие. 3 этой серии опытов, как к при изучении ембристокоичеоких и тератогенных свойств ГКО. Опытные крысы получали препарат о 1 по 21 день беременности.
Вторая группа служила контролем. За 1-2 дня до родов сакок рассаживали по одной в клетке. Регистрировали день родов и число крысят в помете. Новорожденных крысят распределяли по 7-3 на самку, для более равномерного вскармливания. О полноценности вскармливания судили визуально по наполнен:® желудка крысят молоком: до
появления лерсти он хорошо зидек через бркякув стенку. Б SO-ти двеьнск возрасте отделяли от матери и рассаживали самцов и самок отдэлькс.
О постнатапьнок развитии потомства судили по массе, показателям физического развития, а также по некоторым поведенчески!»: реакциям крысят. Нивстных взвеливзли один раз з неделю, начиная с сд-нснедельнсго и до £,5-месячного возраста. Ка основании полученных данных вычисляли константу роста, характеризующую прирост массы за единицу времени. Показателями общего развития явились: время открытия утей, глаз, обрастания шерсть». 3 результате вмбриотскоичес-кого и тератогенного действия ПКФ не установлено.
3.1.5. Изучение кумулятивных свойств и отдаленных последствий.
Кумулятивные свойства ПК2 изучали в подострсм эксперименте на белых крысах, которым скармливали з течение 45 дней ПК® з следующих догах: 115с (1/5 JIZ50 ) к 573 мг/кг живой массы (і/10 ЛІІ50 ),
3 группе препарат не скармливали и сна служила контролем.
3 течение всего периода опыта га белым:: крысами вели наблюдение, учитывали поедаемоеть корма, прием воды, состояние слизистых оболочек, волосяного покрова, поведение, гзЕелпвалк в начале и в конце эксперимента, ■
3 результате у грызунов не зарегистрировали гибели, как и признаков интоксикации и заболеваний. Динамика прироста массы тела представлена в таблице 4.
Из таблицы видно, что увеличение прироста живой массы тела составили по первой группе 9,4%, по второй - 2,1% в сравнении с контрольными животными.
Таблица 4
Прирост жязсй массы тела крыс.
1 : Группы ! ! : 1 j Масса тела, г 1Прирост массы тела, г | ! ; 1 1 |з начале опыта|в конце опыта! 1 i !
j IJKC-1156 ! i i 172r 1,3 ! 275= 2,1 ■ ( 1 104 !
; ПКФ-573 | 170± 2,5 | 271± 2,2 I 101 i
1 Контроль | 172± 1,4 i 267± 6,5 I 95 ! 1 i
В конце опыта грызуны были убиты и проведено анатомическое
ЕОК£ЫТП0 И Е5В&П1-1В-ЗЛП£ ВНУТСвКНИХ ОрГЗНОБ,
Достовернык различий лс соотношению массы тушек и внутренних органсн у белых крыс з опыте и контроле не выявлено, не установлено также и патологических изменений зс внутренних органах при скармливании ПК® в течение 45 дней.
Морфологические показатели крсзи у животных всех групп существенно не отличались и находились в пределах нормы. Углеводная, белкоЕс-мсчезкпОсбразоЕагедьные функции печени не нарушены.
Используя данные ЛД50 острого опыта при оральном введении и суммарную дозу, окаршканую белки кркоам за 8 месяцев при изучении отдаленных последствий вычислен коэффициент кумуляции (A.A. Ступ-ников. 1975).
суммарная доза 277440
Хкум ------------------------ =--------------= 48,0
ДЯ50 острого опыта 5730
Согласно классификации по кумуляции в организме животных (Л.И. Медведь, 1964) вещества, имеющие коэффициент кумуляции свыше 5 относятся к 4 классу - к веществам слабсвырахенной степени кумуляции и препарат ПКФ отнесен нами к атому классу.
Изучение отдаленных последствий влияния ПКФ проводили на белых крысах в течение 3 месяцев. Препарат скармливали ежедневно в дозе 1156 мг/кг живой массы (1/5 ЛД^О ) и 573 мг/кг (1/10 ЛДбо ) острого опыта, 3 группа грызунов была контрольной.
В период эксперимента за животными вели наблюдение, проводили учет пседаеыссти корма к приема воды, ежемесячно взвешивали.
• 3 результате у животных не выявили ухудшения поедаеыссти и
приема боды, клинических признаков интоксикации. Отмечено увелнче-
- ІЗ -
низ прироста живей массы тела соствбтственнз в опытных группах ка 3,51 л 1Z.5Z.
Бисасшг-їєеккмк исследованиями установлена тенденция увеличения количества эритроцитов, гемоглобина, общего белгз, хотя эти показатели вс всех группах находились э пределах нормы колебания.
Для научения влияния препарата ПКФ на воспроизводительную функция после 8 месяцев скармливания препаратов свмке и самцы были спарены по следующим вариантам:
- самки к самцы, получавшие препарат в дезе 1155 ыг/кг;
- самки и самцы, получавшие препарат в дезе 573 мг/кг;
- самки, получавшие ПКФ в доге П55 кг/кг с сзщаыи, не по-
лучзешими препарат;
- 2зюа, получавшие ПКФ в деве ПБбмг/кг с салками контроль-
n'w.-j. L'jjyііПЬіІ
- саггкк, получавшие ПКФ в дозе 578 мг/кг с са&шамк
ЛиЛТрСЛ^НСіІ Г РУііПЬІ J
- самцы, получавшие ПКФ в доге 57S мг/кг живой массы с сам-
- оамкя и самцы, не получавшие препарат ПКФ.
С'уцестзеннкх различий в количестве приплода между опытными и
контрольными животными не выявлено. 2 среднем плодовитость составила 5-10 особей на одну сажу. У пеметов не зарегистрировано признаков, классифицируемых как уродства.
В первый день после рождения проводили Езвепивание и промеры длины тела, хзсста крысят.
По живей массе, длине тела и хвоста новорожденные крысята мало стд:гчаится и находятся в пределах нормы колебания, хотя белее крупный приплод был у самок и самцов, ’ получавших ПКФ в дезе 573 мг/кг. В дальнейшей у крысят учитывали сроки отлипания улей, прорезания глаз, сбростание перстным покровом и активность высасывания молока матери. По зтш признакам существенных различий у пометов по всем варианта:.: спаривания не было.
3.2. Биологическое действие препарата ПКФ на организм животных. Исследования по изучению биологического действия ПКФ на организм животных проведены в двух направлениях: влияние на основные
биохимические показатели крови к мосфсдуккциснальное состояние si:-ГОЕПДНСЙ железы.
3.2.1. Влияние ПКФ на основные биохимические показатели крови «квотных. Исследования выполнены на иуилятах-бройлерах в двух экс-
перимэнтах к молодняке крупного рогатого скота в двух сериях опытов. Результаты исследований первого эксперимента представлены в таблице 5.
Таблица 5
Гематологические показатели цыплят-бройлеров.
' 1 i | Локаэател:: \ ) 1 Г р у ■ — , • п п ы |
! ( ! 1 1 |В начале опыта, М±м|В конце опыта,М±м ! ! I ' 1
: | Кол-во эритроцитов, 101к/л 2,40± С, ПО | 3,1 г 0,201 i
: Гемоглобин, г/л 100 ± 0,300 ! ' 106 ± 5,802 !
! Гематскрит, % 32,0± 1.040 | 35,5г 2,15 I
| Общий белок, г/л 36,8 ±3,611 | 45,3± 4,534 ;
! !-/‘бЩИе ЛИПИДЫ, i /л 4,99s 0,515 ! 5,02± 0,337 |
j Холестерин, мм/л 2,07± 0,121 ! 1,66± 0,080 !
i Мочевина, мм/л 0,50± 0,243 1 0,50± 0,142 !
| Фосфор, мм/л 2.10± 0,412 1 1,83± 0,628 !
i Глюкоза, m/s 7,75+ 0,201 ! 7,94+ 0,141 !
\ Лактат, мм/л 1,73± 0,250 ! 1,99: 0,193 !
| Пируват, мм/л 189 ± 17,60 [ 183+25,30 ;
| Кальций, мм/л 2,73+ 0,241 ! 3,44± 0,615 |
S Ссотношенз-ie кальция и фосфора 1,30 ! ! \ 1,87 ! !
СоаЕнивал таблип« можно сказать, что при применении препарата
ГКО в конце опыта достоверно увеличиваются следующие показатели:
эритроциты на 3% (F<0,01), гемоглобин на Е%; гематокрит на 10%,
общий белок на 20% (Р<0,05; , глюкоза на 2%, мочевина на 17%
(Р<0,0Б;, кальций ка £1% (Pcü.DOi), уменьшился фосфор на 13%
(Р<0,05).
Из выше изложенного, очевидно, что применение ПКО шпля-там-бройлерам о и-дневного возраста выссковффективко. Увеличение содержания общего кальция, общего белка, уменьшение фосфора является показателями нормализации фоофорно-кальциевого обмена, а увеличение е крови гемоглобина, гематокрита, общего белка, мочевины свидетельствует о повышении резистентности: и защитных функций организма и косвенно улучшении усвояемости и переваримости кормов (М. Т. Таранов, 1375; А.Гусев, 1988; Н. Танака, К. 51газак1, М. Н1гапага, 1931; 3. Ми1гЬеао, 1391), что согласуется с увеличением
прироста массы тел.
Под влиянием препарата ПХ2 з плазме крови у птиц изменилось содержанке отдельных аминокислот как з сторону увеличения так и з сторону уменьшения. Увеличилось содержание аминокислот: аспараги-нсзоа киолотъ; ка 3%. оеринз - на 4«, глутзминовои кислоты на 1%; иэолейцика на 51%, тирозина на 11", феналалаккка на 3%, гистидина на 2Ж, лизина ка Ъ%, аргинина на 17", суммы аминокислот на 1%. Несколько уменьлилось содержание следующих аызшзкЕОлсх: аланина на 4%, валина на 5», метионина на 8%, лизина на 4%. В печени достоверно увеличилось содержание аминокислот: треонина на 80%
(Р<3,01), оерика на 7% (Р<С,05), пролика ка 23% (?<0(С5), валина
на 22.», метионина ка 34%, фенилаланина на 5%, аргинина на 5%. Несколько уменьшилось содержание следующих аминокислот: аспарагиновой кислоты на 15%, глутаминовой кислоты на 3%, глицин на 3%, аланина на 13%, изслейцин на 2%, лейцин на 22%, тирозин ка 2%, гистидин на 4%, лизин на 4%, аммиак на 24% (“<0,001),
При повторном эксперименте основные закономерности влияния ПК® на биохимические показатели организма птип подтвердились.
В опытах на телятах 3-месячного Еозраста изучали всияние ПКФ на биохимические показатели организма в сравнительном аспекте с преципитатом. Данные по гематологии представлены в таблице с.
Таблица 5.
Результаты исследования крови и сыворотки крови телят.
; { Пскагзт&лл ! Контроль 1 1 ПК5 : Прещпгитат
! -•* 1 ! г; ; - ; з ! ■ - 4
! ! Эритроциты, 10'1К/л ; 3,13= 0.90 |3,5Б± 1 0,79! 9,45+0,75
I Лейкоциты,10“/л ! с,27= 0,97 !5,85± 1,50! 7,47+1,53
!Гемоглобин, г/л ! 124,0+ 5,70 ¡132 ± 5,90] 124 ±2,30
;Гематокрит, % ! 33,7 =1,30 ! ОС + I -■!_ 4 -• — 1,31! 35,7+2,55
¡Общий белок, г/л ! 55,7 -2,51 !?о,0± 3,92! 55, 5±2,23
; оСлие Ы, Г.- .1 ! 1,75 ±0,52 11,35= 0,14! 1,45=0,13
¡Глюкоза, ммоль/л : 1,55 =0,57 11,23= 0,99! 1,ЗЕ±0,24
{Мочевина, ммоль/л | Е, 25 ±0,22 1Е,54± 0,54! 5,2040,30 1
|Неорганический фосфор,! 2,17 ±0,22 11,97£ 0,12! 2,0 ±0,91 !
I шаль/л | ! : 1
IОбщий кальций, ммоль/л! 3,12 ±0,85 ¡3,092 0,57! 3,01±0,57 !
!Соотношение кальция ! 1,43 1 1,57 [ 1,51 !
1 и фосфора • | | ' ! 1 1 ! !
Р<0,05
По гематологическим исследованиям, очевидно, что использование препарата ПК® и преципитата способствует нормализации фосфор-кс-кальцпевого обмена: зодердание неорганического фосфора снизи-
лось ка ю* и ка 8Х (Р<0,05) соответственно. Креме тоге, в сыворотке крови телят обеих групп увеличилось количество эритроцитов ка 5% и 14% соответственно,гемоглобин на 7% у опытней группы, которой применяли препарат Ш®, общий белок на 7 £ и 2%. Введение в рацион препаратов ПКЗ и преципитата позволило нормализовать фосфорно-кальциевый обмен, но вместе с тем, необходимо отметить, что эффективность препарата ПКФ вше преципитата на 8%.
В другом производственном опыте ЖЕ изучали з сравнении с ди-амыснийфссфатом. Данные представлены в таблице 7.
. Таблица 7.
Результаты исследования крови и сыворотки крови
Т8ЛЯТ.
| . Показатели 1 ! ПКФ 1 .... . , ! Диаммонийфссфат ! | |
‘ -1 . 1 2 < ! з ! ! !
¡Кол-во эритроцитов, ; 10аг/л;9,7 ± 0,32 . ! ! 8,6± 0,25 |
¡Лейкоциты,10а/л |7,3 ± 0,05 I 8,0± 0,12 ;
¡Гемоглобин, г/л '119 ± 0,98 I 109± 1,78 |
¡Гематскрит,% |ЗЕ,4± 1,30 1 34,1±2,ОС |
¡Общий белок, г/л I73,4± 1,42 | Б9,г,=0,89 |
1 0б'.•е ЛИПИДЫ, Г/ л \3,05± 0,07 | 2,87=0,10 !
¡Глюкоза, ммоль/л !2,33± 0,05 | 2,31=0,08 !
1 ! 1 ; 1 Г; ■ *- ; < ; з | I ■:
! ¡МсчеЕина, ммоль/л , ” ' —■ !2,41± 0,07 ! ! ; 2,21=0,51 :
,льсргзничсскии ооофор, :1,97+ 0,02 ! 1,89+0,02 |
' ммоль/л ! ■ 1
‘Общий кальций, ммоль/л 13,02+ 0,04 I 2,88±0,07* ;
;ДФ, ммоль/л.ч ; 0,73 0,01 ; 0,31=0,09 * ;
: Осстнспение кальция ; 1,53 1 ■* РП 1 ; д. , ~ ;
! и фосфора : .... : ! 1 ! ... 1
Показатели таблицы свидетельствует о положительном влиянии фепаратоз на бнсхгаогаеокиэ процессы в зргакпамэ животных. У телят ;пытных групп, которым применяли препарат ПКФ и диаммонийфоофат 'ВеЛИЧ«Л~05 КСЛИЧ6СТБ0 ЗРИТООЦИТОЗ Ко 15% И 5% ОССТЗетСТЗеННО, Г5-:оглс£ик ка 11% и 2%, сСщий белок на 4% з перзсй опытной группе, ;бщ:й кальций на 22% и 18% (?<0,05) при снижении 1Д$ на 28% и 25% Р<0,05). |
Однако, ив таолипы видно, что з группе, которой окармливали репарат ПКФ содержание фосфора и кальция соответствует нормативам величинам, также как и ЦЗ, з тс не время у животных, которым римеяядп циамкснипфссфат фосфор и кальций кие нора ссотзетстзен-
о ка 3% и 11% (Р<0,01'.
3.2.2. Влияние препарата ПК9 ка мор$а§ункционаттное состояние итовзщной железы. О характере действия ЛК£ на пштсЕидкую железу удили по его влиянию на массу органа (таблица 3;, содержанию СЕЙ сызоротке крози и морфологическим изменениям.
Таблица 3.
Масса щитовидной железы.
Группы I М ± м, г
; Кролики . Цыплята-бройлеры
I. ПКФ ' ‘ ; 0,205± 0,03* 0,201= .. . — 0,13* |
2. ХКМ-300 ! 0,2£9± 0,03* ' 0,240+ 0,09 1
3. Контроль I 0,220± 0,236= О.Р-2 \ ■ 1
*Р<0,С5
Кв таблицы видно, что ыасса ¡цитовидной железы достоверно снижается и у кроликов к у цыплят-бройлеров при применении препарата ПК® и увеличивается при применении ХКМ-ЗСО.- Уровень С5Й в сыеорот-ке крови (таблица 3) достоверно снижается у кроликов и цып-лнт-бройлерСЕ в конце опыта при применении ПКФ и ХКМ-300.
Таблица 9.
Содержание белок-связанного йода в сыворотке крсзи.
Группы .... . ... Лова . ; і ! Кролики ! СЕИ, мг% І Цыплята-бройлеры • :
1. ПКФ 1500 мг/кг 1 ! 2,17 ± 0,25* і 1,58 = 0,31* !
2. ХКМ-ЗОС С ,007мл/кг і 1,67 - 0,42* • 1,08 і 0,08* і
2. Контроль - . . [ 2,75 і 0,67 і 2,17 і 0,04 |
Р<0,С5
Данные по морфологические последованиям представлены з таблице 10.
Таблица 10.
Результаты морфсметрии цитовидной желевы.
| Группы ; Диаметр фолликул, ілкм і Высота і 3 ПИТ ЭЛИЯ, }-ЛКМ
і і. икс і ! 53,2 і 1,05 1 ! 3,4 і 0,03
! 2. ХКМ-200 ! 49,5 ± 1,12* І 4,2 і 0,04*
\ 2. Контроль ! ' 59,4 і і 1,03 ! 3,0 ! ± 0,09
Р<0,001
Морфологические исследования - уменьшение диаметра фслликул увеличения высоты эпителия являются характерными приензками сниже .яия авгнвнозти £ц:тозидкой железы и согласуются с уменьшение« е массы и снижением содержания СЕЯ в сыворотке крсеи.
3.3. Влияние ПКФ на результаты откорма животных. Зффектив ность препарата ПКФ изучена з нескольких сериях производственны испытаний ка погслозье белее 25000 пуплят-бройлеров и молодняк крупного рогатого окота з количестве до 300 голов. Результаты ис пытаний приведены в таблице 11.
Эффективность ПК© яри откорме.
Таблица 11.
'Препарат Вид жиззткьзс Дополнительно получено прироста
I массы тела, кг/гол
] ПИЗ
! то ! ПКО
, Преципитат
! тт
цыплята
цыплята
к.р.с.
к. р. о. к.р.с.
Дхашсиийфосф&т к.р.с.
0,215 0,095 2,300 0,900 3,700 2, £00
Убойный экхсд тушек опытных цыплят был вьпие контрольных ка 30-110 г. После убоя была проведена ветеринарно-санитарная оценка мяса. Осмотр тулек и внутренних органов не выявил каких-либо отклонений от нормы. На вторые сутки изучены физико-химические свойства мяса птиц, таблица 12.
Таблица 12.
Физико-химические показатели мяса цкплят-бройлеров.
Г - ■ • ! ! 1 ' ! Группы \
; ¿1^' 1 1—кл • : ! ; • Опытная 5 : 1 Кснтрольная !
< ¡pH !массовая доля влагиЛ | Жира :Золы I Протеина ! 5,716 0,24 74,0= 0,53 2,56 0,21 1,306 0,05 21,66 1,00 ! Б,616 0,142 1 ! 74,96 0,525 | | 2,46 0,034 ; !' 1,296 0,031 ! ! 19,56 1,052 ; - ! ., .... - 1
Иг приведенных данных следует, что мясо контрольных и опытных птиц не имеет существенных различий. Проведенная бенгидинсвая проба не выявила различий з реакции мяса опытных и контрольных птиц и была отрицательной, по органолептическим свойствам как сырое так и вареное мясо этих групп птиц не различалось. Закрытая дегустация не выявила различий в качестве мяса животных. Проведенные расчеты экономической эффективности использования препарата ПК®.показали,
что на 1000 рублей затрат прибыль составляет 25000 рублей прибыл::.
ВЫВОДЫ.
1. По общепринятой классификации препарат ЛКФ является мало-тсксичным веществом и относится к 4 классу токсичности. Среднее* мертельные дозы (ДДзо мг/кг живой массы) препарата ПК® составляет соответственно при вкутрилелудочнем введении белый низам 3550=12,Зі белым крысам Б780± 45,9.
2. Препарат ПК® не обладает аллергенными, кежно-резербтквкы-т, змбриотскснческ’їми и тератогенными свойствами. Коэффициент кумуляции составляет белее 5, то есть обладает слабо выраженной кумуляцией. Длительнее скармливание ПКФ лабораторным животным в рекомендуемых дезах отрицательно не влияет на отдельные ткани, органы и системы организма, а также репродуктивную функцию и потомство. Токсикологическая оценка не выявила противопоказаний к применению препарата ПК© в животноводстве,
3. Использование препарата ПК5 з животноводстве не влияет отрицательно ка здоровье животных и качество получаемой продукции, является экономически безопасным.
4. Е основе механизма интенсификации откорма лежит улучшение биохимически процессов в организме и снижение непроизводительных затрат энергии при снижении функции ицтевидкой железы.
5. Введение в рацион Щ® способствует увеличению продуктивности цыплят-бройлеров и молодняка крупного рогатого скота яг 12-21% при экономической эффективности на 1000 рублей затрат 2500С рублей прибыли.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
На основании экспериментальных исследований и производственных испытаний, для интенсификации откорма рекомендуется вводит] препарат ПК© в рацион;
1. Цыплятам-брсйлерам с 11-дневного возраста и молодняку кр; неге рогатого скота с 3-месячного возраста.
2. При использовании препарата ПК® необходимо соблюдать дози ровку и кратность применения согласно наставлению.
Список работ, опубликованных по теме диссертации.
1. Тскоиксгогйчзская характеристика аммодикагъаий&зсфага.
/Сб. каучн. ?р. ВНИВИПФиТ, Всрснел, 1993. - с. (в ссазт.;
2. Влияние препарата ПК® на гематологические показатели и продуктивность животных. Материалы координационного совещания, посвященного 25-летию ВНйВИПФкТ. Воронеж, 1S9E. о. 93-99 (в ооавт.
S. Токсикологическая оценка препарата Ш$. Материалы координационного совещания, посвященного 25-летиЕ ВНКЗИПФиТ. Воронеж, 1995. с. 152-155 (в ссазт.;
4. Экологическая безопасность использования лекарственных средств з ветеринарии. Материалы каучн. кок£,., посвященной 50-ле-ткв Краснодарской ИИВО. Краснодар, 1995. ч.2, с, 70-71 ;з ссазт.;.
5. Обоснование безвредности использования препарата ПК®. Материалы наун. конф., посвященной 70-лет:ос факультета ветеринарной медицины Воронежского ГАУ, Воронеж, 1995, ч.2, о. £4-55 (в соавт.;
S. Разработка и применение новых экологически безопасных фосфатов в животноводстве и ветеринарии. Материалы наун. кснф., посвященной 70-летпю факультета ветеринарной медицины Воронежского ГАУ, Воронеж, 1995, 4.2, с. 74-75 Се ооавт.