Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Ассоциированная инактивированная вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, оценка ее иммуногенных свойств

ДИССЕРТАЦИЯ
Ассоциированная инактивированная вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, оценка ее иммуногенных свойств - диссертация, тема по ветеринарии
АВТОРЕФЕРАТ
Ассоциированная инактивированная вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, оценка ее иммуногенных свойств - тема автореферата по ветеринарии
Нургалиев, Фарит Муллагалиевич Казань 2006 г.
Ученая степень
кандидата ветеринарных наук
ВАК РФ
16.00.03
 
 

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Ассоциированная инактивированная вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, оценка ее иммуногенных свойств

На правах рукописи

НУРГАЛИЕВ ФАРИТ МУЛЛАГАЛИЕВИЧ

'ич

АССОЦИИРОВАННАЯ ИНАКТИВИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ ПАРВОВИРУСНОЙ БОЛЕЗНИ, СТРЕПТОКОККОЗА И САЛЬМОНЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ, ОЦЕНКА ЕЕ ИММУНОГЕННЫХ СВОЙСТВ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 03.00.07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Казань - 2006

Работа выполнялась на кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии в ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э Баумана» и в лаборатории по изучению болезней молодняка сельскохозяйственных животных ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности -ВНИВИ» (г. Казань)

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

Госманов Рауис Госманович

Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор

Гаффаров Харнс Зарипович

Официальные оппоненты: — доктор ветеринарных наук, профессор

Сафин Марат Абдрахмановнч

— доктор ветеринарных наук, Фомин Алексей Максимович

Ведущая организация: Институт ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет»

Защита состоится «2?» <¿/¿1 2006 г. в /V. часов на заседании

диссертационного совета Д — 220.0034.01 при ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э Баумана» (420074, Казань, ул. Сибирский тракт, 35)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э Баумана»

Автореферат разослан «_»_2006 г.

Учёный секретарь диссертационного совета, профессор

М.С. Ежкова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Нарушения воспроизводительной способности свиноматок могут вызывать различные микроорганизмы и приводить к гибели плода на различных стадиях внутриутробного развития. Бактериальные и вирусные болезни являются причиной до 40% всех нарушений функций органов репродуктивной системы свиней. Причиной этой патологии у животных может, быть инфицирование парвовирусом свиней, вирусом репродуктивно-респираторного синдрома, хламидиями, стрептококками, сальмонеллами, бруцеллами, кишечной палочкой, лептоспирами и микоплазмами. Влияние на нарушения в воспроизводстве потомства оказывают также ящур, чума свиней, болезнь Ауески, грипп свиней, трансмиссивный гастроэнтерит свиней, африканская чума свиней, японский В-энцефалит, везикулярный стоматит и другие инфекции (Х.З. Гаффаров и др. 2004; Б. СуеЫб 1984; Т. ОгапсЫеп е1 а1. 1986).

Почти повсеместное распространение парвовирусной болезни свиней (ПВБС) в странах с интенсивно развитым свиноводством, в том числе и в Российской Федерации делает борьбу с. ней одним из основных условий, необходимых для обеспечения ■ нормального процесса воспроизводства свинопоголовья (Б.Г. Орлянкин и др. 1989; Т.З. Байбиков и др. 2005).

На сегодняшний день установлено наиболее важное значение условно-патогенной микрофлоры (стрептококков, сальмонелл) в этиологии инфекционных заболеваний, характеризующихся гибелью эмбрионов и плодов. Так, например, частота выделения патогенных стрептококков различных серологических групп. от маститных свиноматок из вагинального секрета и абортированных плодов составляет в среднем 51,6.%, 51,5 % и 15,9 % случаев соответственно. (Е.В.Малик 2000).

Большое значение в профилактике смешанных форм инфекционных болезней у свиноматок имеет вакцинолрофилактика. При иммунизации животных моновалентными вакцинными препаратами сложно охватить весь спектр микроорганизмов, участвующих в данной патологии свиноматок. В связи с этим наибольшее значение приобретают разработка и применение ассоциированных (комплексных) вакцин (Х.З. Гаффаров и др. 2003).

В этой связи представляется весьма актуальной разработка ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, которая одновременно обеспечивала бы защиту животных от этих инфекционных заболеваний.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилась разработка лабораторного регламента технологии изготовления и оценка эффективности применения ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней.

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

— изучить этиологическую структуру наблюдаемых нарушений воспроизводительной функции свиноматок в хозяйствах зоны Среднего Поволжья и Предуралья;

— выделить возбудителей парвовирусной болезни, сальмонеллеза и стрептококкоза, вызывающих поражения репродуктивной системы свиноматок и изучить основные биологические свойства выделенных микроорганизмов;

— отобрать наиболее перспективные штаммы для изготовления вакцины, отличающиеся высокой иммуногенной активностью;

— изготовить и изучить антигенные свойства ассоциированных сорбированной и эмульгированной вакцин против парвовируса, стрептококкоза и сальмонеллеза в лабораторных и производственных условиях;

— испытать профилактическую эффективность изготовленной вакцины против парвовирусной болезни, стрегггококкоза и сальмонеллеза свиней;

— разработать нормативно-техническую документацию на ассоциированную вакцину против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней.

Научная новизна. Впервые на основе результатов клинико-эпизоотологичского мониторинга .и лабораторных исследований при инфекционных заболеваниях свиноматок, вызывающих нарушения воспроизводительной функции в ряде свиноводческих комплексов регионов Среднего Поволжья и Предуралья, показаны преимущественное распространение и циркуляция среди поголовья свиней возбудителей парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза, проявляющиеся как моноинфекции так и в ассоциации.

Выделены и отобраны штаммы сальмонелл и стрептококков по степени патогенности для восприимчивых лабораторных животных, морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам, а парвовируса «У-13» - по способности репродуцироваться в культуре клеток с характерными цитопатическими изменениями и антигенной идентичности его с референтными штаммами. Отобранные штаммы соответствуют основным требованиям, предъявляемым к штаммам микроорганизмов, пригодных для изготовления биопрепаратов.

На лабораторных и естественно восприимчивых животных установлены оптимальные концентрации и соотношение инактивированных антигенов микроорганизмов каждого штамма в вакцинном препарате, определена прививная доза для свиноматок.

Получены экспериментальные данные, указывающие на высокую антигенную и иммуногенную активность ассоциированной вакцины.

Испытание разработанной вакцины как в лабораторных, так и в производственных условиях показали ее эффективность.

Практическое значение.' На основе проведенных исследований разработана и предложена для внедрения в ветеринарную практику «Ассоциированная инактивированная гидроокисьалюминиевая вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней». На основе полученных результатов разработаны нормативно-технические документы: инструкция по 'изготовлению и контролю, технические условия, инструкция по применению.

. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: Всероссийской 'научно-практической конференции, посвященной ' 45-летию ФГУ' ВНИВИ «Проблемы экотоксикологического, радиационного и эпизоотологического мониторинга» (Казань, 2005); Международном симпозиуме «Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклеотидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний» (Казань, 2005); Международной научно-производственной конференции ФГОУ ВПО «КГАВМ» (Казань, 2006); конференции молодых ученых и специалистов КГАВМ им. Н.Э. Баумана (Казань 2006);

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, в том числе в «Ученых записках КГАВМ» (в списке изданий ВАК).

Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые для защиты:

— этиологическая структура инфекционных заболеваний свиноматок с патологией органов репродуктивной системы в свинокомплексах регионов Среднего Поволжья и Предуралья; ' ■

— научное обоснование целесообразности создания ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней; ■

— лабораторный регламент технологии изготовления, контроля и применения ассоциированной вакцины;

— . установление антигенной и иммуногениой ' активности ассоциированной вакцины на лабораторных животных и свиноматках;

- показатели профилактической эффективности ассоциированной вакцины в производственных условиях.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на' 158 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения и список использованной литературы, состоящий из 200 источников, в том числе 92 иностранных. Диссертация иллюстрирована 12 таблицами и 3 рисунками.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалы и методы исследований

Работа выполнялась на'кафедре микробиологии, вирусологии и иммунологии в ! ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им Н.Э. Баумана» и в лаборатории по изучению возбудителей болезней молодняка сельскохозяйственных животных ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности -ВНИВИ» (г. Казань) и в ряде свиноводческих хозяйств, расположенных в регионах Среднего Поволжья и Предуралья, в соответствии с тематическим планом НИР ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». ' > ,

Этиологию инфекционных болезней свиноматок с нарушением воспроизводительной функции изучали в 35 сельскохозяйственных предприятиях, расположенных в регионах Среднего Поволжья и Предуралья, из них 24 — в Республике Татарстан (РТ), 2 — в Республике Башкортостан (РБ), 6 - в Республике Марий Эл (РМ), 1 - Республике Чувашия, 1 — Кировской области, 1 — Ульяновской области.

Эпизоотологическое '-обследование и анализ ситуации в неблагополучных хозяйствах проводили согласно рекомендациям,

разработанным Бакуловым И. А. с соавт, (1975) .и Джупиной С. И. (1991). .,.,. . ■ ■

.Изучение этиологии данной формы патологии проводилось бактериологическим, вирусологическим и серологическим исследованиями 96 абортированных плодов, мертворожденных и новорожденных, поросят до . приема молозива, 937 сывороток крови свиноматок и хряков с целью .выявления возбудителей ПВБС, хламидиоза свиней, репродуктивно-, респираторного синдрома свиней. (РРСС), стрептококкоза, сальмонеллеза и .бруцеллеза., .. ...... ■•.-.. .

В процессе выполнения диссертационной работы были выделены из абортированных плодов свиноматок, отобраны, депонированы и использованы в качестве производственных штамм "У-13" парвовируса, штамм "С-05" стрептококкоза,, щтамм "К-03" сальмонеллеза.

При проведении ; экспериментов использовали лабораторных и естественно восприимчивых животных: свиноматки - 4515 голов, кролики — 18,голов; морские свинки — 5 голов; белые крысы —25 голов;,белые мыши -100 голов;. .. .. , • ■

Диагностика ПВБС осуществлялась . в соответствии с «Методическими указаниями по диагностике • парвовирусной болезни свиней», утверждены ГУВ Госагропрома СССР. 24.01.89. Выделение и изучение биологических свойств; культур " стрептококков из биоматериала проводили в соответствии с «Методическими указания по лабораторной диагностике стрептококкоза: животных», утверждены ГУВ МСХ СССР 30.08.83 г. Серологическую идентификацию и определение принадлежности стрептококков к группам по Лэнсфильду проводили в реакции латексной агглютинации с использованием набора 8Нс1ех Б1гери>. Выделение и изучение биологических свойств культур сальмонелл проводили в соответствии с «Методическими указаниями по бактериологической, диагнретике -сальмонеллезов животных» рекомендованы ГУВ МСХ СССР 30.12.71 г и «Лабораторная

диагностика сальмонеллезов человека и животных, обнаружение сальмонелл в кормах, продуктах питания и объектах внешней среды». Методические указания, утверждены ГУВ при ГК СМ СССР по продовольствию и закупкам (1990).

При изготовлении лабораторных; образцов ассоциированной вакцины; использовали инактивированные формалином бактёриальные' взвеси стрептококков, сальмонелл и парвовирусную суспензию:'' Составление ассоциированной вакцины проводили с таким расчетом, чтобы в 1 мл готового препарата содержалось 0,33 мл парвовирусной суспензии с геммагглютинирующей активностью 512 ГАЕ, З.ЗИо9 м.к. штамма стрептококков, 3,3x109 м.к. штамма сальмонелл, а также гель гидрата окиси алюминия, полученный' из ФГУП' «Щелковский биокомбинат», из расчета 10%' к общему объему ' вакцины. Все компоненты тщательно перемешивали, доводили рН вакцинй До 7,27,4, расфасовывали вакцину по флаконам и этикетировали.

4 В представленной работе для сравнительного изучения эффективности биопрепарата использовали вакцину, приготовленную с использованием масляного* адъюванта (МА), на основе минерального масла ДонковскогЪ химкомбината Липецкой области. '•' • - г

Антигенную активность вакцины изучали в опытах' на белых крысах, кроликах и свиньях по способности вызывать у них выработку специфических' антител к антигенам штаммов «У-13» Parvovirus "suis в реакций торможения гемагтлютинации (РТГА), «С-05» Streptococcus suis'й «К-05» Salmonella choleraesuis в реакции агглютинации (РА). Все операции с животными'осуществляли в соответствии с «Правилами приведения работ с использованием'экспериментальных животных», утверждены МСХ СССР от 31 июля 1978 года. " ' " ' '

Изучение особенностей клеточного иммунитета проводилось на кроликах после иммунизации ассоциированной вакциной. Т- и В-Лймф6циты: выделяли на градиенте плотности методом центрифугирования, их

идентификацию осуществляли в одном препарате методом Е-РОК и ЗСг РОК. .. . .;,

Оценку эффективности ассоциированной вакцины в производственных условиях осуществляли в 54-тысячном свинокомплексе ГУ СП «Совхоз Рощинский» РБ на основании сравнения фактических данных по получению жизнеспособных поросят до применения вакцины и после применения вакцины. ,,, '....;-■.

Полученные данные лабораторных исследований обрабатывали классическими методами вариационной статистики по известным программам на компьютере (Д.А. Старик, 1996; С. Фишер и др., 1997).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ . Мониторинг инфекционных болезней свиноматок с патологией органов воспроизводства в регионах среднего Поволжья и Предуралья

В период 2003-2006, гг. проведено исследование 1033 проб биоматериалов для диагностики на парвовирусную болезнь свиней, стрептококкоза и сальмонеллеза, полученных из 35 хозяйств 2 областей и 4 республик Среднего Поволжья и Предуралья. Доля хозяйств, где имеются сероположительные животные, составляет 97%. .

Применение вакцин против ПВБС производства НПО «Нарвак» в условиях, крупных свинокомплексов «Совхоз Рощинский» • .РБ и «Камский бекон» РТ привело, к сокращению случаев абортов и рождения мертвых и нежизнеспособных поросят. Однако проблема полностью не была решена, несмотря.на то,; что титры антител к ПВС были достаточно высокими . и напряженность поствакцинального иммунитета была оценена как вполне надежной. Вместе с тем частота случаев нарушения воспроизводительной функции возрастала, проявляющаяся в . виде рождения мертвых, и . нежизнеспособных поросят. Поэтому в, дальнейшем основное внимание было уделено

выяснению причин возникновения спорадических случаев абортов и рождения мертвых плодов путем обнаружения в РТГА специфических антител к парвовирусу свиней и проведения бактериологического анализа 105-патологических материалов - абортированных плодов до 70-го дня развития и мертворожденных поросят, а также абортированных плодов свиней на последнем месяце супоросности, полученных из четырех крупных свинокомплексов.'

В результате проведенных исследований из биоматериалов «Совхоза Рощинский» и «Камский бекон» высевались патогенные по отношению к белым мышам микроорганизмы, идентифицированные как гемолитические стрептококки и сальмонеллы, а в двух других ( совхоз «Кисинский» Аксубаевского района и ООО «Шинник» Нижнекамского района РТ) свинокомплексах из паренхиматозных органов абортированных плодов и мертворожденных поросят выделены патогенные микроорганизмы, типизированные как сальмонеллы.

Обнаружение специфических антител в транссудатах грудной и брюшной полостей у мертворожденных поросят из этих хозяйств свидетельствовало об их внутриутробном инфицировании,' что косвенно подтверждает постоянную циркуляцию парвовируса свиней среди восприимчивого поголовья.

Таким . образом, вирусологическим, бактериологическим и серологическим исследованиями нами было показано, что нарушения функции репродуктивных органов свиноматок в обследованных свиноводческих комплексах чаще всего вызывают парвовирус свиней, стрептококки и сальмонеллы, которые способны преодолевать плацентарный барьер и вызывать указанные заболевания как моноинфекциии, так и в смешанной форме.

Выделение и изучение биологических свойств этиологических агентов, вызывающих нарушения воспроизводительной функции у ■„.г.* свиней

В нашей работе был использован штамм «У-13» ПВС, выделенный в 1997 году сотрудниками лаборатории контроля и индикации • возбудителей болезней молодняка сельскохозяйственных животных ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (Гаффаров Х.З., Абдеева М.З.). Культивирование штамма ■ «У-13» ПВС проводили в перевиваемой линии культуры клеток почки' поросенка' «казанская» ППК. Для определения гемагглютинирующей способности изучаемого штамма парвовируса использовали реакцию гемагглютинации. Определение инфекционной активности штамма «У-13»- парвовируса проводили путем титрования его на перевиваемой культуре клеток ППК. Инфекционный - титр вируса вычислили по методу Рида и Менча,

который составил 7,3±0,4 lg ТЦЦ50/МЛ-■

При бактериологическом исследовании 43 абортированных плодов свиней, 31 мертворожденного поросенка и 3 околоплодных оболочек с применением различных питательных сред были выделены гемолитические и не гемолитические бактерии.

Выделенные гемолитические микроорганизмы, патогенные для белых мышей, отнесли, к роду. Streptococcus. Наиболее перспективной в плане дальнейшего использования в . качестве производственного штамма в сравнительном изучении оказалась культура стрептококков условно обозначенная как «С-05». Данная культура была выделена из головного мозга мертворожденного поросенка, полученного из свинокомплекса «Камский бекон» Тукаевского района республики Татарстан. Серологическую идентификацию и определение принадлежности штамма «С-05» стрептококка к группам по Лэнсфильду провели в реакции латексной агглютинации (PJIA) с использованием набора Slidex Strepto. Штамм «С-05» стрептококка по результатам исследований отнесли к серогруппе В.

, Выделенные негемолитические бактерии, патогенные для белых мышей, по результатам биологических и серологических исследований отнесли к роду Salmonella. В качестве производственного штамма для изготовления вакцины была отобрана' наиболее вирулентная культура сальмонелл, выделенная нами ■ из селезенки абортированного плода, полученного из свинокомплекса совхоза «Кисинский» Аксубаевского района Республики Татарстан. Ее условно обозначили как штамм «К-05» Salmonella choleraesuis. ■ . , ... ,

Лабораторный регламент технологии изготовления гидроокисьалюминиевой и эмульгированной ассоциированных вакцин против парвовирусной болезни, стрептококкоза и

сальмонеллеза свиней Технология изготовления ассоциированной инактивированной вакцины включает получение и инактивацию биомассы с максимально возможным сохранением антигенных и иммуногенных свойств отобранных штаммов.

Наработку биомассы штамма «У-13» ПВС проводили в культуре клеток ППК. Инактивировали вирусную суспензию штамма «У-13» парвовируса формалином. Контроль полноты инактивации' вирусной суспензии проверяли в культуре клеток ППК путем проведения трехкратных слепых пассажей. " ■' " ' '

Для выращивания штамма ■ «С-05» Streptococcus suis использовали МПА с содержанием 1% глюкозы и 5-10% дефибринированной крови барана. Штамм «К-03» Salmonella choleraesuis для получения бактериальной массы культивировали на МПА в матрацах. Инактивацию бактериальных масс проводили формалином. Контроль полноты инактивации осуществляли путем посева инактивированных бактериальных масс на глюкозно-кровяной МПА, МПА, МПБ, МППБ и среду Сабуро. •

Перед нами была поставлена задача —. подобрать адъювант для вакцины, обеспечивающий высокую антигенную активность и обладающий при этом низкой реактогенностью для животных. В качестве депонатора мы

использовали гель гидрата окиси алюминия (ГОА) и масляный адъювант (МА), состоящий из минерального масла с ланолином.

Для приготовления ассоциированной ГОА вакцины использовали гель гидрата окиси алюминия, из расчета 10 мл геля на 100 мл вакцинного препарата. Вирусную суспензию штамма ПВС, обладающую до инактивации гемагглютинирующей активностью 1:512, смешивали с бактериальными суспензиями сальмонелл и стрептококков, содержащих в 1 мл по 10 млрд.м.к., в равных соотношениях, тщательно перемешивали, доводили рН вакцины до 7,2-7,4, расфасовывали по флаконам, обкатывали алюминиевыми колпачками и этикетировапи.

Для изготовления ассоциированной эмульсионной инактивированной вакцины вирусную суспензию ПВС концентрировали, путем сухого диализа используя полиэтиленгликоль-6000, при этом получали гемагтлютинирующую активность суспензии 1:1024 и инактивировали ее, затем смешивали с бактериальными суспензиями сальмонелл и стрептококков, содержащих в 1 мл по 40 млрд.м.к., в соотношении 2:1:1. Полученную массу в равном соотношении объединяли с масляным адъювантом, тщательно перемешивали в размельчителе тканей марки «РТ-1» при 4000 об./мин в течение 3 минут, с последующим увеличением скорости до 8000 об./мин в течение 6 минут. Биопрепарат расфасовывали во флаконы объемом 100 или 200 мл, закрывали резиновыми пробками, обкатывали алюминиевыми колпачками и этикетировапи.

. Проведенный контроль каждой серии вакцины на стерильность, остаточную вирулентность и безвредность показал, что биопрепараты соответствуют требованиям, предъявляемым к инактивированным вакцинам.

Изучение антигенной и нммуногенной активности гидроокисьалюминиевой и масляной ассоциированных вакцин на лабораторных животных Изучение антигенной активности моно- и ассоциированной гидроокисьалюминиевых вакцин на белых крысах и кроликах

Для оценки антигенной активности и совместимости антигенов изготовленной ассоциированной вакцины использовали белых крыс и кроликов, иммунизируя их моно- и ассоциированной вакцинами против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней.

В опыте было использовано 5 групп крыс живой массой 150-200гр, состоящих из 5 животных каждая. Крысам первой группы вводили моновакцину, изготовленную на основе антигенов штамма «К-03» сальмонелл, второй группы — штамма «С-05» стрептококков, третей группе -штамма «У-13» ПВС, четвертой группе - ассоциированную вакцину, пятая группа крыс служила контролем. В одном миллилитре моновакцин против сальмонеллеза содержалось - 10 млрд.м.к., против стрептококкоза - 10 млрд.м.к., против ПВБС - 512 ГАЕ. Вакцинацию проводили парентерально: моновакцины крысам вводили по 0,5 мл подкожно, ассоциированную вакцину - 1,5 мл. От подопытных крыс кровь брали тотальным обескровливанием через 14 дней после иммунизации. Титры специфических антител в пробах сывороток крови к антигенам ПВС определяли в РТГА, к антигенам стрептококков и сальмонелл — в РА, они составили в впервой группе 7,4±0,27 log2 к штамму «К-03» Salmonella choleraesuis, в второй группе б,4±0,27 Iog2 — «С-05» Streptococcus suis, в третьей группе б,6±0,27 log2 - «У-13» Parvovirus suis, в четвертой 6,4±0,27 log2, 6,4±0,27 log2, 6,6±0,27 log2 соответственно, у пятой группы специфических антител обнаружено не было.

Сравнительный анализ результатов испытания моновакцин и ассоциированной вакцины на белых крысах показал, что различия антигенной активности у животных первой, второй и третьей групп по отношению к четвертой статистически не достоверны (Р>0,05),

Далее провели сравнительную оценку антигенной активности изготовленных образцов вакцины на кроликах. Вакцинные препараты вводили двукратно с интервалом в 14 дней в дозе по 1 мл для моновакцин и 3 мл для ассоциированной вакцины. Кроликов первой группы иммунизировали

моновакциной из штамма «У-13» Parvovirus suis, второй — моновакциной из штамма «С-05» Streptococcus, suis, третьей —моновакциной из штамма «К-03» Salmonella choleraesuis, четвертой — ассоциированной вакциной. С целью изучения динамики накопления специфических антител у кроликов взятие проб крови осуществляли из ушной вены до. иммунизации и на 14, 28 дни после вакцинации. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Уровень специфических антител в сыворотках крови кроликов, иммунизированных моно- и ассоциированной вакцинами

№ группы животных Титр специфических антител в сыворотках крови

JJ¡> К парвовирусному антигену в РТГА (log2) К стрептококковому антигену в PA (log2) К сальмонеллезному антигену в PA (log2)

До вакц. Через 14 дней Через 28 дней До вакц. Через 14 дней Через 28 дней До вакц. Через 14 дней Через 28 дней

1 отр 7,6±0,4 10,0±0

2 отр 5,6±0,4 7,6±0,4

3 отр 8,6±0,4 10,6±0,4

4 отр 7,6±0,4 9,3±0,4 отр 5,3±0,4 7,6±0,4 отр 8,3±0,4 10,0±0

Результаты, представленные в таблице 1 показывают, что у всех подопытных кроликов, до введения вакцин, антитела к специфическим возбудителям отсутствовали, а после первой и второй вакцинации в сыворотках крови отмечалось увеличение титров антител. Таким образом, результаты проведенных исследований по изучению антигенной активности моно- и ассоциированной ГОА вакцин против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней показали, что биопрепараты после двукратного введения лабораторным животным обеспечивают выработку специфических антител против антигенов парвовируса, Str. suis и S. choleraesuis.

Изучение иммуногенной активности гидроокисьалюминиевой и масляной ассоциированных вакцин на кроликах

Сравнительная оценка антигенной активности изучаемой ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и

сальмонеллеза свиней нами проведена с добавлением к ней масляного адъюванта или геля гидрата окиси алюминия.

В опыте использовали 2 группы кроликов, состоящих из трех животных каждая. Кроликам "первой группы вводили вакцину с МА внутримышечно в дозе 2 мл двукратно с интервалом 14 дней, второй группы - вакцину с добавлением ГОА внутримышечно в дозе 3 мл двукратно. Взятие крови для исследований осуществляли из ушной вены до иммунизации, на 14, 30, 60, 90, 120, 150 и 180-е дни после вакцинации. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Из таблицы видно, : что на введение ассоциированной вакцины с добавлением МА у • животных в сыворотках крови обнаруживаются специфические антитела больше, чем на вакцину с ГОА. Однако выявленные отличия статистически недостоверны (Р>0,05).

Изучение особенностей клеточного . иммунитета проводилось на кроликах после иммунизации двумя вариантами ассоциированной инактивированной вакцины. Кроликов первой группы иммунизировали вакциной с добавлением МА в дозе 2 мл, второй группы вакциной с ГОА в дозе 3 мл, третью группу не иммунизировали - контрольная. Вакцины вводили двукратно с интервалом 14 дней внутримышечно. Взятие крови для исследований осуществляли из ушной вены до иммунизации и через 14 дней после каждой вакцинации.

Выделение лимфоцитов из крови кроликов проводили на градиенте плотности методом центрифугирования! Идентификацию и процентное соотношение Т- и В-лимфоцитов проводили в одном препарате методом Е-РОК и ЗСЗ-РОК. Результаты исследований количественных характеристик Ти В-лимфоцитов в периферической крови кроликов до вакцинации, через 14 дней после первой и второй вакцинации представлены в таблице 3.

Исследования показали, что количество Т-лимфоцитов в крови кроликов статистически достоверно повышалось у животных первой и второй групп после второй вакцинации (Р<0,01). Статистически достоверное

Таблица 2

X я Титры антител (1о&)

Антигены До Через 14 Через 30 Через 60 Через 90 Через 120 Через 150 Через 180

2 ■ Z ® s X вакц. дней дней дней дней дней дней дней

Кролики, иммунизированные вакциной с МА

Parvovirus suis отр. 6,67±0,41 9,67±0,41 11,33±0,41 11,0±0 11,0±0 10,67±0,41 10,33±0,41

1 Str. suis отр. 5,0±0 7,41±0,41 9,0±0 8,67±0,41 8,67±0,41 9,0±0 8,33±0,81

S. choleraesuis отр. 6,67±0,41 9,67±0,41 10,67±0,41 10,33±0,81 10,67±0,41 10,33±0,41 10,0±0

Кролики, иммунизированные ГОА вакциной

Parvovirus suis отр. 7,67±0,41 9,33±0,41 10,66±0,41 10,33±0,41 10,66±0,41 10,0±0,71 9,66±0,41

2 Str. suis отр. 5,33±0,41 7,67±0,41 8,67±0,41 8,33±0,41 8,33±0,41 8,67±0,41 7,67±0,41

S. choleraesuis отр. 8,33±0,41 10,0±0 11,0±0,71 11,33±0,41 10,67±0,41 11,0±0 9,66±0,41

Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови кроликов, привитых двумя типами вакцин

Таблица 3

№№ Группы Лимфоциты (%)

До вакцинации После первой вакцинации После второй вакцинации

Т- . В- Т- Вг Т- В-

1 Использована вакцина с МА . 52,9±1,8 16,9±0,2 55,7±2,0 19,9±0,1 57,4±1,3 22,9±1,4

2 Использована вакцина с ГОА 52,7±1,6 16,4±0,4 55,2±1,5 19,2±0,2 58,2±0,9 23,5±0,5

3 Контрольная 52,1±0,2 16,5±0,4 52,3±0,1 16,7±0,2 52,6±0,4 16,7±0,2

увеличение В-лимфоцитов у животных первой и второй групп, отмечалось после первой и второй вакцинации (Р<0,001) по отношению к контрольной группе. Отличия между результатами первой и второй-опытных групп статистически недостоверны (Р>0,05).

Таким образом, результаты проведенных исследований по изучению ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней на кроликах показали, что она с добавлением ГОА или МА обладает антигенной и иммуногенной активностью и обеспечивает формирование напряженного иммунитета. •

Изучение антигенной активности гидроокнсьалюмиииевой ассоциированной вакцины на свиноматках Для определения оптимальной дозы ассоциированной ГОА вакцины опыты проводили в условиях свинофермы ООО «Оршанский сельхозпром» Оршанского района РМ на 3 группах свиноматок, состоящих из 5 животных

каждая. . , ..........- .• ■

При исследовании сывороток крови свиноматок -, до опыта специфических антител к антигенам ПВС в РТГА, стрептококкозу и сальмонеллезу в РА обнаружено не было. • -

Свиноматок иммунизировали ассоциированной ГОА >' вакциной внутримышечно в область шеи двукратно, первый раз за 2-3 недели до осеменения и второй раз - через 21 день. Первую группу свиноматок вакцинировали в дозе 3 мл, вторую группу ,— в дозе 5 мл, третью группу - в дозе 7 мл, четвертая группа свиноматок служила' контролем. Взятие крови осуществляли из хвостовой вены через 14 дней после повторной вакцинации. Результаты исследования проб сывороток крови свиноматок представлены в таблице 4. . ... . . ■ ••;/. ..■ ■••• >■ ■' - ■

Из таблицы 4 видно, что после вакцинации у животных во всех группах отмечалось увеличение титров специфических антител в сыворотке крови. При этом сравнительный анализ результатов испытания различных доз • препарата у животных при использовании доз 5 и 7 мл показал, что

достоверно (Р<0,05) достигаются более высокие титры антител по сравнению с дозой 3 мл.

Клиническое. наблюдение за вакцинированными свиньями показало", что двукратное введение вакцины не оказывало отрицательного влияния на

Таблица 4

Уровень специфических антител в сыворотке крови иммунизированных свиноматок на 14 день после второй вакцинации.

№№ группы животных Доза вакцины, мл - 8 "«¡I Я § ■ к. Уровень специфических антител в пробах сывороток крови

к парвовирусу вРТГА к стрептококкозу : в РА .....к сальмонеллезу в РА

1 3 М±т 9,4±0,27 5,б±0,27 9,0±0,35

5 М±т 10,8±0,42 6,4±0,27 . 9,8±0,22

. .3 .■ .. 7 М±т 11,2±0,55 6,6±0,27 10,0±0,35

общее состояние организма. На месте введения биопрепарата наблюдали незначительную припухлость, которая исчезала через 10-14 дней. После осеменения у всех подопытных животных супоросность прошла без осложнений, на одну свиноматку было получено в первой группе 10,2±0,41, второй — 10,6±0,57, третьей — 10,4=Ь0,57, четвертой — 10,4±0,57 поросенка.

Таким образом, была определена наиболее оптимальная'прививная доза . ассоциированной ГОА вакцины против парвовируса * свиней, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, которая составила 5 мл.

: Производственное испытание вакцины ассоциированной инактивнрованной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза Производственное испытание опытных серий «Ассоциированной инактивнрованной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней» проводили в условиях крупного свиноводческого комплекса ГУ СП «Совхоз Рощинский» Стерлитамакского района РБ.

Свинокомплекс ГУСП «Совхоз Рощинский» рассчитан на 54 тыс. голов свиней, где в последние 5 лет наблюдались аборты, в отдельные месяцы, достигавшие 10-12% у супоросных свиноматок. В комплексе

регистрировались инфекционные ' заболевания "' свиноматок, характеризующиеся рассасыванием эмбрионов,' мумификацией плодов, абортами, рождением мертвых и нежизнеспособных поросят.

Как показали проведенные исследования, причиной наблюдаемой патологии свиноматок является комплекс факторов. В одних случаях они были обусловлены тем, что в хозяйстве циркулируют потенциальные возбудители инфекционных абортов свиноматок — парвовирус. и хламидии, в других случаях они были обусловлены смешанной инфекцией, чаще всего парвовирусом, стрептококками и сальмонеллами, которые вызывали у взрослых животных латентную инфекцию и протекали бессимптомно, но у супоросных свиноматок вызывали нарушения репродуктивной функции.

С учетом полученных нами результатов исследований для специфической профилактики парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиноматок было решено провести производственное испытание в данном хозяйстве опытно-производственных серий ассоциированной вакцины против этих заболеваний.

Основных свиноматок вакцинировали первый раз за 2-3 недели до осеменения и второй раз через 21-23 дня, ремонтных свиноматок - первый раз за 3-4 недели до осеменения и второй раз через 21-23 дня. Хряков-производителей первый раз вакцинировали в 6-7 месячном возрасте, а затем через каждые 6 месяцев. Испытание ассоциированной инактивированной гидроокись алюминиевой вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза для вакцинации свиноматок и хряков производителей было проведено на 4500 гол. свиней в производственной зоне свинокомплекса «Совхоз Рощинский».

С целью определения уровня поствакцинального иммунитета у свиноматок, вакцинированных ассоциированной вакциной против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, проводили выборочные серологические исследования сывороток крови. Для этого кровь брали на 14 день после их повторной иммунизации. При этом установили

накопление специфических антител к парвовирусу в титрах 9,44±0,19 log2, к стрептококку - 5,88±0,I9 log2 и сальмонеллам - 7,88±0,19 log2, что служит количественной характеристикой антигенной активности биопрепарата.

Проведенный сравнительный анализ получения и 'сохранности приплода у ■ иммунизированных свиноматок показал, что применение ассоциированной вакцины ■ против парвовируса, стрептококкоза и сальмонеллеза способствовало увеличению выхода поросят. Так, если в группе иммунизированных свиноматок ассоциированной вакциной было получено . 85% жизнеспособных и 15% мертворожденных и нежизнеспособных-, поросят, то в контрольной группе '— оказалось соответственно 77,5%, и 22,5% поросят. Применение предложенной нами вакцины на свиноматках позволило увеличить выход поросят на 7,5%.

Следовательно, разработанная ассоциированная ГОА вакцина против парвовирусной . .: болезни, ■ стрептококкоза и сальмонеллеза свиней обуславливает формирование напряженного иммунитета и создает защиту плодов от этих возбудителей, и тем самым обеспечивает увеличение выхода поросят. .. . . ■> -- ■

Таким, образом, - разработана и ■ предложена для внедрения в ветеринарную " * практику «Ассоциированная инактивированная гидроокисьалюминиевая вакцина против ' парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза • свиней». ' На основе полученных результатов .разработаны нормативно-технические документы: инструкция по изготовлению . и контролю,1 технические условия, инструкция по применению вакцины. ' -

ВЫВОДЫ

1.; к Клиникотэпизоотологическим обследованием свиноводческих комплексов в регионах Среднего Поволжья и Предуралья установлено, что инфекционные болезни у свиноматок, вызываемые инфекционными агентами вирусной и бактериальной природы, характеризуются гибелью эмбрионов и

плодов на разных стадиях внутриутробного развития, что проявляется в виде их мумификации, абортами (выкидышами), мертворождением и бесплодием.

2. Вирусологическим, бактериологическим и серологическим исследованиями показано, что нарушения функции репродуктивных органов свиноматок, вызывают парвовирус свиней, стрептококки и сальмонеллы, которые способны преодолевать плацентарный барьер и вызывать указанные заболевания как моноинфекциии, так и в смешанной форме.

3. По степени антигенной активности и патогенности для восприимчивых лабораторных животных в качестве производственных микроорганизмов отобраны штаммы «К-03» сальмонелл и «С-05» стрептококков, а по способности репродуцироваться й культуре клеток с характерными цитопатическими изменениями и антигенной идентичности его по отношению к референтному парвсвирусу — штамм «У-13» парвовируса свиней.

4. Сравнительным исследованием антигенной и иммуногенной активности ассоциированной' инактивированной вакцины на кроликах установлено, что ее масляный вариант в прививной дозе 2 мл и сорбированный на ГОА в прививной дозе 3 мл, обеспечивают максимальное накопление специфических антител к парвовирусу 11,33±0,41 и 10,66±0,41 1од2в РТГА, к стрептококку 9,0±0 1о£2 и 8,67±0,41 1он2 в РА, сальмонеллам 10,67±0,41 ^2 и 11,0±0,71 1о§2 в РА соответственно на 60 день после двукратного, с интервалом 14 дней, внутримышечного введения. Следовательно, в результате проведенных экспериментов показано, что оба варианта вакцин, содержащих в одной прививной дозе равное количество антигенов каждого ' штамма, обладают выраженной иммуногенной активностью.

5. Испытанием антигенной активности ассоциированной инактивированной гидроокисьалюминиевой вакцины на 3 группах свиноматок, состоящих из 5 животных в каждой, в условиях благополучного

по инфекционным заболеваниям хозяйства установлена оптимальная прививная доза.

6. Применение предложенной ассоциированной инактивированной гидроокисьалюминиевой вакцины в крупном свиноводческом комплексе вызывает образование специфических антител у животных к парвовирусу 9,44±0,19 log2 в РТГА, к стрептококку 5,88±0Л9 log2 в РА и сальмонеллам 7,88±0,19 log2 в РА, что служит количественной характеристикой антигенной активности биопрепарата. Двукратная иммунизация свиноматок ассоциированной вакциной за 2-3 недели до осеменения с интервалом 21-23 дня в дозе по 5 мл позволила увеличить выход поросят на 7,5% в сравнении с периодом до применения вакцины.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основе проведенных исследований разработана и предложена для внедрения в ветеринарную практику «Ассоциированная инактивированная гидроокисьаггюминиевая вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней». Подготовлены нормативно-технические документы, регламентирующие изготовление, контроль и применение данного биопрепарата, в частности:

— Выделены, отобраны и депонированы в лаборатории по хранению и изучению штаммов возбудителей особо опасных болезней ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» штаммы «У-13» Parvovirus suis, «С-05» Streptococcus suis, «К-03» Salmonella choleraesuis, соответствующие основным требованиям, предъявляемым к производственным штаммам (24.01.2006 г.),

— «Временная инструкция по изготовлению и. контролю ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней» (утверждена ФГУ «ФЦГРБ-ВНИВИ» 24.01.2006 г.),

— «Технические условия на ассоциированную инактивированную вакцину против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней» (утверждены ФГУ «ФЦГРБ-ВНИВИ» 15.02.2006 г.),

— «Временная инструкция по ' применению ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней (в порядке производственного опыта)» (утверждена ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 15.02.2006 г.),

— материалы диссертации используются в учебном процессе ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им Н.Э. Баумана».

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Нургалиев, Ф.М. Мониторинг заболеваний свиноматок с патологией воспроизводства в регионе среднего Поволжья и Предуралья / Ф.М. Нургалиев, М.З. Абдеева, Х.З. Гаффаров, Р.Г. Госманов, А.Г. Кузнецов // Всероссийская научно-практическая конференция, посвященная 45-летию ФГНУ ВНИВИ. - Казань, 2005. - С. 341-348.

2. Нургалиев, Ф.М. Иммунобиологическая характеристика эпизоотсшогически значимых возбудителей, обуславливающих патологию репродуктивной функции свиней / Ф.М. Нургалиев, М.З. Абдеева, Г.Н. Спиридонов, Х.З.Гаффаров, Р.Г. Госманов // Международный симпозиум -Казань, 2005. - Т. 2. - С. 247-251.

3. Нургалиев, Ф.М. Совместимость антигенов в ассоциированной вакцине против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней / Ф.М. Нургалиев, Х.З. Гаффаров, Р.Г. Госманов // Мат. межд. науч.-произ. конференции, КГАВМ - Казань, 2006. - С. 38-42.

4. Нургалиев, Ф.М. Об этиологии инфекционных болезней свиноматок с нарушением воспроизводительной функции / Ф.М. Нургалиев Н Мат. конференции молодых ученых и специалистов КГАВМ им. Н.Э. Баумана -Казань, 2006.-С. 49-50.

5. Нургалиев, Ф.М. Разработка технологии изготовления ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней / Нургалиев Ф.М., Гаффаров Х.З., Госманов Р.Г. // Ученые записки КГАВМ-Казань, - 2006. - Т. 183 - С. 171-176.

Подписано к печати 22. ИМ. Формат 60x84/1 б

Заказ ¿69 Тираж /Шэга. Усл.-печ! л. /¿7

Бумага офсетная . _ Печать RISO

Центр информационных технологий КГАВМ 420074, Казань, Сибирский тракт, 35.

 
 

Оглавление диссертации Нургалиев, Фарит Муллагалиевич :: 2006 :: Казань

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Этиологическая структура и эпизоотологические особенности проявления смешанных инфекционных болезней свиноматок, вызывающих нарушение их воспроизводительной функции, в свиноводческих комплексах.

2.2. Характеристика возбудителей, выделяемых у свиноматок с патологией органов воспроизводства, современные методы их диагностики и средства специфической профилактики.

2.2.1. Парвовируса свиней.

2.2.2. Стрептококки.

2.2.3. Сальмонеллы.

2.3. Основные принципы технологии изготовления ассоциированных инактивированных вакцин.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Материалы и методы.

3.1.1 Оборудование и используемые материалы.

3.1.2. Методы выделения и изучения биологических свойств штаммов микроорганизмов.

3.1.3. Лабораторный регламент технологии изготовления ассоциированных вакцин.

3.1.4. Определение физических и иммунобиологических свойств опытных образцов вакцины.

3.1.5. Статистическая обработка результатов исследований.

3.2. Результаты собственных исследований.

3.2.1. Мониторинг инфекционных болезней свиноматок с патологией органов воспроизводства в регионе Среднего Поволжья и Предуралья.

3.2.2. Выделение и изучение биологических свойств этиологических агентов, вызывающих нарушения воспроизводительной функции у свиней.

3.2.2.1. Изучение биологических свойств штамма «У-13» Parvovirus suis свиней.

3.2.2.2. Выделение и изучение биологических свойств штамма «С

05 » Streptococcus suis.

3.2.2.3. Выделение и изучение биологических свойств штамма «К

03» Salmonella choleraesuis.

3.2.3. Лабораторный регламент технологии изготовления гидроокисьалюминиевой и эмульгированной ассоциированных вакцин против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней.

3.2.3.1. Накопление биомассы производственных вакцинных штаммов вируса и бактерий.

3.2.3.2. Изготовление инактивированной ассоциированной вакцины.

3.2.3.3. Определение стерильности ассоциированной вакцины.

3.2.3.4. Контроль остаточной вирулентности компонентов ассоциированной вакцины.

3.2.3.5. Оценка безвредности ассоциированной вакцины.

3.2.3.6. Физические свойства вакцины.

3.2.4. Изучение антигенной и иммуногенной активности гидроокисьалюминиевой и масляной ассоциированных вакцин на лабораторных животных.

3.2.4.1. Изучение антигенной активности моно- и ассоциированной гидроокисьалюминиевых вакцин на белых крысах и кроликах.

3.2.4.2. Изучение иммуногенной активности гидроокисьалюминиевой и масляной ассоциированных вакцин на кроликах.

3.2.4.3. Показатели уровня клеточного иммунитета кроликов, иммунизированных ассоциированной вакциной против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней.

3.2.5. Изучение антигенной активности ассоциированной гидроокисьалюминиевой вакцины на свиноматках.

3.2.6. Производственное испытание ассоциированной. инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

5. ВЫВОДЫ.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

 
 

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Нургалиев, Фарит Муллагалиевич, автореферат

Проблема сохранности приплода свиноматок и новорожденных поросят всегда была в центре внимания ученых и ветеринарных специалистов. В этом плане, хотя и немало сделано, все еще велик отход молодняка.

В настоящее время инфекционные болезни среди маточного поголовья свиней, сопровождающиеся нарушением функций воспроизводства и проявляющиеся рождением нежизнеспособных поросят, гибелью эмбрионов, плодов и абортами распространены как в крупных свиноводческих комплексах, так и небольших свиноводческих хозяйствах. На сегодняшний день проблема смешанных инфекций, вызываемых возбудителями парвовирусной болезни свиней, репродуктивно-респираторного синдрома, хламидиоза, стрептококкоза, сальмонеллеза и болезни Ауески в различных сочетаниях, является одной из актуальных. На их долю приходится около 50% всей патологии маточного поголовья свиней, проявляющейся поражением органов воспроизводства (Х.З. Гаффаров и др., 2003). Распространенность смешанных инфекций объясняется ветеринарно-санитарным состоянием свинокомплексов, условиями кормления и содержания животных, так на ограниченной территории создана беспрецедентная концентрация поголовья (В.М. А п ате н ко, 1982).

Парвовирусная болезнь свиней (ПВБС) широко распространена в странах с развитым свиноводством, в том числе и на территории Российской Федерации. Эпизоотологический мониторинг затруднен тем, что это стационарная инфекция, которая протекает бессимптомно. ПВБС наносит значительный экономический ущерб свиноводческим хозяйствам нашей страны и за рубежом (Т.З. Байбиков и др., 2005). Почти повсеместное распространение ПВБС в странах с интенсивно развитым свиноводством делает борьбу с ней одним из основных условий, необходимых для обеспечения нормального процесса воспроизводства свинопоголовья (Б.Г. Орлянкин и др., 1989).

Микробный пейзаж репродуктивных органов свиноматок представлен различными ассоциациями аэробных и анаэробных микроорганизмов. В состав нормальной микрофлоры влагалища у 64,3% свиноматок входят грамположительные кокки рода Streptococcus, в т.ч. 44,4% Streptococcus группы D. У 42,8% исследуемых животных высеваются стафилококки. Грамотрицательная микрофлора представлена энтеробактериями родов: Esherichia, Proteus, Enterobacter и Serratia. (М.В. Бирюков, 2002г)

Частота выделения патогенных стрептококков различных серологических групп от маститных свиноматок из вагинального секрета и абортированных плодов составляет в среднем 51,6 %, 51,5 % и 15,9 % случаев соответственно. (Е.В. Малик, 2000г).

Большое значение в профилактике смешанных форм инфекционных болезней у свиноматок играет вакцинопрофилактика. Поскольку при иммунизации животных моновалентными вакцинными препаратами сложно охватить весь спектр микроорганизмов, участвующих в данной патологии свиноматок. В связи с этим наибольшее значение приобретают разработка и применение ассоциированных (комплексных) вакцин (Х.З. Гаффаров и др., 2003).

Анализ результатов исследований по применению ассоциированных вакцин свидетельствуют о том, что использование их позволяет значительно сократить время на создание защиты одновременно к нескольким болезням, уменьшить степень аллергизации животных, избежать неблагоприятного воздействия стресс-факторов, сократить затраты на профилактические мероприятия и значительно облегчить труд специалистов (А.П. Михайлюк и др., 1982).

В этой связи представляется весьма актуальной разработка ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, которая бы одновременно обеспечивала защиту животных от этих инфекционных заболеваний.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилась разработка лабораторного регламента технологии изготовления и оценка эффективности применения ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней.

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

- изучить этиологическую структуру наблюдаемых нарушений воспроизводительной функции свиноматок в хозяйствах зоны Среднего Поволжья и Предуралья;

- выделить возбудителей парвовирусной болезни, сальмонеллеза и стрептококкоза, вызывающих поражения репродуктивной системы свиноматок и изучить основные биологические свойства выделенных микроорганизмов;

- отобрать наиболее перспективные штаммы для изготовления вакцины, отличающиеся высокой иммуногенной активностью;

- изготовить и изучить антигенные свойства ассоциированных сорбированной и эмульгированной вакцин против парвовируса, стрептококкоза и сальмонеллеза в лабораторных и производственных условиях;

- испытать профилактическую эффективность изготовленной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней;

- разработать нормативно-техническую документацию на ассоциированную вакцину против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней.

Научная новизна. Впервые на основе результатов клинико-эпизоотологичского мониторинга и лабораторных исследований при инфекционных заболеваниях свиноматок, вызывающих нарушения воспроизводительной функции в ряде свиноводческих комплексов регионов Среднего Поволжья и Предуралья показаны преимущественное распространение и циркуляция среди поголовья свиней возбудителей парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза, проявляющиеся как моноинфекции, так и в ассоциации.

Выделены и отобраны штаммы сальмонелл и стрептококков по степени патогенности для восприимчивых лабораторных животных, морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам, а парвовируса «У-13» - по способности репродуцироваться в культуре клеток с характерными цитопатическими изменениями и антигенной идентичности его с референтными штаммами. Отобранные штаммы соответствуют основным требованиям, предъявляемым к штаммам микроорганизмов, пригодных для изготовления биопрепаратов.

На лабораторных и естественно восприимчивых животных установлены оптимальные концентрации и соотношение инактивированных антигенов микроорганизмов каждого штамма в вакцинном препарате, определена прививная доза для свиноматок.

Получены экспериментальные данные, указывающие на высокую антигенную и иммуногенную активность ассоциированной вакцины.

Испытание разработанной вакцины как в лабораторных, так и в производственных условиях показали ее эффективность.

Практическое значение. На основе проведенных исследований разработана и предложена для внедрения в ветеринарную практику «Ассоциированная инактивированная гидроокисьалюминиевая вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней». Подготовлены нормативно-технические документы, регламентирующие изготовление, контроль и применение данного биопрепарата, в частности:

- выделены, отобраны и депонированы в лаборатории по хранению и изучению штаммов возбудителей особо опасных болезней ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» штаммы «У-13» Parvovirus suis, «С-05» Streptococcus suis, «К-03» Salmonella choleraesuis, соответствующие основным требованиям, предъявляемым к производственным штаммам (24.01.2006 г.);

- «Временная инструкция по изготовлению и контролю ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней» (утверждена ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 24.01.2006 г.);

- «Технические условия на ассоциированную инактивированную вакцину против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней» (утверждены ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 15.02.2006 г.);

- «Временная инструкция по применению ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней (в порядке производственного опыта)» (утверждена ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 15.02.2006 г.).

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на:

- Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 45-летию ФГНУ ВНИВИ «Проблемы экотоксикологического, радиационного и эпизоотологического мониторинга» (Казань, 2005),

- Международном симпозиуме «Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний» Часть Н.(Казань, 2005),

- Международной научно-производственной конференции, КГАВМ (Казань, 2006),

- Конференции молодых ученых и специалистов КГАВМ им. Н.Э. Баумана (Казань 2006).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, в том числе в «Ученых записках КГАВМ» (в списке изданий ВАК).

На защиту выносятся:

- этиологическая структура инфекционных заболеваний свиноматок с патологией органов репродуктивной системы в свинокомплексах регионов Среднего Поволжья и Предуралья;

- научное обоснование целесообразности создания ассоциированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней;

- лабораторный регламент технологии изготовления, контроля и применения ассоциированной вакцины;

- установление антигенной и иммуногенной активности ассоциированной вакцины на лабораторных животных и свиноматках;

- показатели профилактической эффективности ассоциированной вакцины в производственных условиях.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 158 страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложения. Список литературы содержит 200 источников, в том числе 92 иностранных. Диссертация иллюстрирована 12 таблицами и 3 рисунками.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Ассоциированная инактивированная вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней, оценка ее иммуногенных свойств"

ВЫВОДЫ

1. Клинико-эпизоотологическим обследованием свиноводческих комплексов в регионах Среднего Поволжья и Предуралья установлено, что инфекционные болезни у свиноматок, вызываемые инфекционными агентами, вирусной и бактериальной природы, характеризуются гибелью эмбрионов и плодов на разных стадиях внутриутробного развития, что проявляется в виде их мумификаций, абортами (выкидышами), мертворождением и бесплодием.

2. Вирусологическим, бактериологическим и серологическим исследованиями показано, что нарушения функции репродуктивных органов свиноматок, вызывают парвовирус свиней, стрептококки и сальмонеллы, которые способны преодолевать плацентарный барьер и вызывать указанные заболевания как моноинфекциии, так и в смешанной форме.

3. По степени антигенной активности и патогенности для восприимчивых лабораторных животных в качестве производственных микроорганизмов отобраны штаммы «К-03» сальмонелл и «С-05» стрептококков, а по способности репродуцироваться в культуре клеток с характерными цитопатическими изменениями и антигенной идентичности его по отношению к референтному парвовирусу - штамм «У-13» парвовируса свиней.

4. Сравнительным исследованием антигенной и иммуногенной активности ассоциированной инактивированной вакцины на кроликах установлено, что ее масляный вариант в прививной дозе 2 мл и сорбированный на ГОА в прививной дозе 3 мл, обеспечивают максимальное накопление специфических антител к парвовирусу 11,33±0,41 log2 и 10,66±0,41 log2B РТГА, к стрептококку 9,0±0 log2 и 8,67±0,41 log2 в РА, сальмонеллам 10,67±0,41 log2 и 11,0±0,71 log2 в РА соответственно на 60 день после двукратного, с интервалом 14 дней, внутримышечного введения. Следовательно, в результате проведенных экспериментов показано, что оба варианта вакцин, содержащих в одной прививной дозе равное количество антигенов каждого штамма, обладают выраженной иммуногенной активностью.

5. Испытанием антигенной активности ассоциированной инактивированной гидроокисьалюминиевой вакцины на 3 группах свиноматок, состоящих из 5 животных в каждой, в условиях благополучного по инфекционным заболеваниям хозяйства установлена оптимальная прививная доза.

6. Применение предложенной ассоциированной инактивированной гидроокисьалюминиевой вакцины в крупном свиноводческом комплексе у животных вызывает образование специфических антител у животных к парвовирусу 9,44±0,19 log2 в РТГА, к стрептококку 5,88±0,19 log2 в РА и сальмонеллам 7,88±0,19 log2 в РА, что служит количественной характеристикой антигенной активности биопрепарата. Двукратная иммунизация свиноматок ассоциированной вакциной за 2-3 недели до осеменения с интервалом 21-23 дня в дозе по 5 мл позволила увеличить выход поросят на 7,5% в сравнении с периодом до применения вакцины.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основе проведенных исследований разработана и предложена для внедрения в ветеринарную практику «Ассоциированная инактивированная гидроокисьалюминиевая вакцина против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней». Подготовлены нормативно-технические документы, регламентирующие изготовление, контроль и применение данного биопрепарата, в частности:

- Выделены, отобраны и депонированы в лаборатории по хранению и изучению штаммов возбудителей особо опасных болезней ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» штаммы «У-13» Parvovirus suis, «С-05» Streptococcus suis, «К-03» Salmonella choleraesuis, соответствующие основным требованиям, предъявляемым к производственным штаммам (24.01.2006 г.),

- «Временная инструкция по изготовлению и контролю ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней» (утверждена ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 24.01.2006 г.),

- «Технические условия на ассоциированную инактивированную вакцину против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней» (утверждены ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 15.02.2006 г.),

- «Временная инструкция по применению ассоциированной инактивированной вакцины против парвовирусной болезни, стрептококкоза и сальмонеллеза свиней (в порядке производственного опыта)» (утверждена ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» 15.02.2006 г.),

- материалы диссертации используются в учебном процессе ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им Н.Э. Баумана».

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2006 года, Нургалиев, Фарит Муллагалиевич

1. Аминева, С.А. Диплококковая инфекция в свиноводческих хозяйствах / С.А. Аминева // Ветеринария. 1982. - № 1. - С. 34-35.

2. Апатенко, В.М. Смешанные инфекции сельскохозяйственных животных, вопросы диагностики и профилактики. Апатенко В.М. «Паразиты и паразитозы человека и животных.» Киев, 1982, 73—85

3. Байбиков, Т.З. Эпизоотологический и серологический мониторинг некоторых вирусных болезней свиней в России / Т.З. Байбиков, С.А. Кукушкин // Материалы Всероссийской науч.-практ. конф. поев. 45-летию ФГНУ ВНИВИ. Казань. 2005. С. 245-252.

4. Бакулов, И. А. Рекомендации по методике эпизоотического исследования / И. А. Бакулов, Г. Г. Юрков, А. П. Песковацков Покров. - 1975. - 75 с.

5. Бакулов, И.А. Эпизоотология с микробиологией. /Бакулов И.А., Буткин Е.И., Ведерников В.А., Юрков Г.Г.; под ред. Бакулова И.А. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Колос, 1981. - 367 с.

6. Бакулова, А.И. Эпизоотология с микробиологией / А.И. Бакулова, Е.И. Буткин, В.А. Ведерникова Под ред. И.А. Бакулова. М.: Агропромиздат, 1987. -415с.

7. Бекетова, А. Ю. Активность инактивированных препаратов парвовируса свиней в зависимости от количества антигена и вид; адъюыванта / Бекетова А. Ю.,

8. Орлянкин Б. Г., Сергеев В. А. // С.-х. биология ВАСХНИЛ. М., Агропромиздат, 1988.-№5.-С. 133-137.

9. Бехтерев, С.И. К вопросу о заявке на изобретение, относящееся к штаммам микроорганизмов / С.И. Бехтерев, А.Я. Самуйленко // Материалы межд. науч.-практ. конф. Щелково. 2005. С. - 405-407.

10. Бирюков, М.В. Микробиоценоз полового тракта свиноматок после опроса / М.В. Бирюков / Материалы науч.-практ. конф. Воронеж. 2002. С. -137-138.

11. Блинов, Н. И. Методы выделения и идентификации Т- и В-лимфоцитов. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное издание./ Н.И. Блинов-М.: Агропромиздат, 1985.-С. 215-222.

12. Борисович, Ю.Ф. Ветеринарные препараты: Справочник / Ю.Ф. Сост.: Борисович, Л.В. Кирилов; Под ред. Д.Ф. Осидзе- М.: Колос. 1981. 448 с.

13. Бургасов, П.Н. Руководство по вакцинному и сывороточнуму делу / Под ред. Бургасов П.Н. М.: «Москва», - 1978. - 440 с.

14. Воробьев, В.Г. Васильев Н. Н. Адъюванты / В.Г. Воробьев, Н. Н. Васильев М.: Медицина, 1969.- 206 с.

15. Гайзатуллин, P.P. Повышение интенсивности свиноводства основа рентабельности отрасли / P.P. Гайзатуллин и др.; под ред. В.Г. Лабуткина. -Казань: ОАО «Мясная промышленность Татарстана», 1999. - 36 с.

16. Гараев, И.М. Ассоциированные инфекции у свиней в промышленных комплексах / И.М. Гараев, Сбор. науч. трудов ВГНКИ. Москва, 1996. - Т. 59. -С. 113-116.

17. Гаффаров, Х.З. Инфекционные болезни свиней и современные средства борьбы с ними / Х.З. Гаффаров, Е.А. Романов. Казань: РИЦ «Школа»; ООО «Шестой элемент», 2003. - 200 с.

18. Гаффаров, Х.З. Инфекционные болезни свиней и современные средства борьбы с ними / Х.З. Гаффаров, Е.А. Романов. Москва: «Аквариум», 2004. -200 с.

19. Госманов, Р.Г. Практикум по общей и специальной микробиологии / Р.Г. Госманов, А.И. Ибрагимова. Казань. 2004. - 142 с.

20. Гусев, В.В. Мониторинг бактериальных инфекций в промышленном свиноводстве. / Гусев В.В., Приходько СМ., Павлов СИ., Теймуразов М.Г. // Ветеринария.-2004.-Ы 2.-С. 7-8.

21. Джупина, С. И. Методы эпизоотического исследования и теория эпизоотического процесса / С.И. Джупина Новосибирск: Наука. - 1991. - 144 с.

22. Джупина, С.И. Новые фундаментальные знания на службу профилактики инфекционных болезней животных. / С.И. Джупина // «Ветеринария», -2006.-№ 8.-С. 16-22.

23. Драбек, И. Оценка антигенной активности вакцин против парвовирусной болезни свиней на лабораторных животных / И. Драбек, И. Ержабек, Б.Г. Орлянкин, В.А. Сергеев // Ветеринария. 1988. - № 11. -С. 32-34.

24. Дудников, А.И. Иммуногенность у крупного рогатого скота и свиней противоящурной вакцины с масляным адъювантом / А.И. Дудников, В.Н.

25. Коронов, С.А. Ашуров и др. // Проблемы вет. иммунологии. М., 1985. - С. 138-139.

26. Ерофеев, С.Г. Оценка эпизоотической ситуации по парвовирусной инфекции свиней в России на основе серомониторинга. / Ерофеев С.Г., Байбиков Т.З., Долганова Е.К. // Актуал-пробл. патологии свиней, круп, и мелкого рогатого скота.-Владимир, 2002.-С. 36-40.

27. Жеглов, В.В. Состояние технологии производства противосальмо-неллезных вакцин на современном этапе и специфическая профилактика сальмонеллеза. / Жеглов В.В., Трояновская Л.П. // Актуал. пробл. вет. хирургии.-Воронеж, 1999.-С. 38-40.

28. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии) / Под ред. проф. Дьяконова Л.П., проф. Ситькова В.И. М.: Компания Спутник+, 2000 - 400 с.

29. Земсков, A.M. Некоторые механизмы действия адъювантов / A.M. Земсков//Иммунология. 1982. -№ 1.-С. 6-13.

30. Ивашура, А.И. Реакция преципитации при дифференциации стрептококков, выделенных из молока коров / А.И. Ивашура // Ветеринария. 1969.-№2.-С. 104-105.

31. Иммунология: Практикум / Е.У. Пастер, В.В. Овод, В.К. Позур, Н.Е. Вихоть. К.: Выща шк. Изд-во при Киев, ун-те, 1989. - 304 с.

32. Иммунопрофилактика болезней животных: Пер. с нем./ Под ред. Гизатулина Х.Г., Хазипова Н.З.- М.: Колос, 1981.- 415 с.

33. Каймакан, П.В. Вопросы эпизоотологии сальмонеллезов / П.В. Каймакан, А.Н. Бровченко, А.И. Кривутенко // Ветеринария. 1974. - № 9. -С. 52-53.

34. Караваев, Ю.Д. Диагностика, профилактика и меры борьбы с хламидиозами животных. / Караваев Ю.Д., Калугина И.А., Дьяконов Л.П., Белоусов В.И. // Ветеринария.-1999.-N 2.-С. 28-30.

35. Карева, Э.П. Сальмонеллез поросят в современных условиях / Э.П. Карева, Н.А. Солдатенко, В.А. Мандрыко, В.Н. Зимина // Материалы науч.-практ. конф. Воронеж. 2002. - С. 298-230.

36. Колотев, В.Д. Динамика антител у супоросных свиноматок, иммунизированных против парвовирусной болезни / В.Д. Колотев, П.А. Ануфриев, О.Н. Фролова // Ветеринария. 2004. -№ 10. - С. 14-15.

37. Колычев, Н.М. Ветеринарная микробиология и иммунология / Н.М. Колычев, Госманов Р.Г. Омск: Изд. ОмГАУ, 1996. - 552 с.

38. Королева, Л.В. Сальмонеллезы животных в Татарстане / Л.В. Королева, О.А. Котылев, Л.Р. Гузенфельд Научно-методический материал для ветеринарных специалистов / Под ред. А.В. Иванова. Казань: ЗАО «Новое значение», 2003. - 72 с.

39. Краснобаева, О.Е. К вопросу об эпизоотологии парвовирусной инфекции свиней (ПВИС) / О.Е. Краснобаева // Тезисы докладов III Всес.конф. по эпизоотлогии. Новосибирск 1991. С. 233-235.

40. Краснобаева, О.Е. Некоторые аспекты диагностики патологии воспроизводства обусловленной парвовирусной инфекцией свиней / О.Е. Краснобаева // Мат. науч. конф. ВНИИВВиМ. Покров. 1992. - С. 56-59.

41. Кундышев, П.П. Диагностика супоросности и прохолоста у свиноматок / П.П. Кундышев // Ветеринария. 2000. - № 5. - С. 38-41.

42. Лабинская, А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований / А.С. Лабинская. М., «Медицина», 1978. 394с.

43. Лазарева, Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин -М.: Медицина, 1985. 256 с.

44. Лозовой, Д. А. Усовершенствование технологии изготовления инактивированной эмульсионной вакцины против снижения яйценоскости-76: Дис. . канд. вет. наук. Владимир, 2001. - 147 с.

45. Малахов, Ю.А. Эпизоотическая ситуация по лептоспирозу в России / Ю.А. Малахов, Г.Л. Соболева, А.Н. Панин, О.А. Лебедев, Е.В. Викторова // Ветеринария. 2000. - № 7. - С. 6-8.

46. Малявин, А.Г. Получение поливалентных сальмонеллезных сывороток / А.Г. Малявин, А.В. Ромин, А.Н. Шуплико, Л.А. Аганина, А.Н. Полникова, О.Ф. Фисенко, В.А. Орлов, С.В. Зайкин // Ветеринария. 1974. - № 9. - С. 4546.

47. Мартынова, А.В. Проблемы идентификации Streptococcus pneumonia при формировании устойчивых к оптохину штаммов возбудителя / А.В. Мартынова, В.Б. Туркутюков // Журнал микробиологии эпидемиологии и иммунологии. 2005 - №6. - С. 65-68.

48. Медуницын, Н.В. Конкуренция антигенов и комбинированные вакцины / Н.В. Медуницын // Иммунология. 2006. №4. С. 254-257.

49. Методические указания по диагностике парвовирусной болезни свиней: Утверждены Главным управлением ветеринарии Государственного агропромышленного комитета СССР 24.01.1989 4 С.

50. Методические указания по лабораторной диагностике сальмонеллеза животных. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции. Справочник. / Под ред. Б.И. Антонова. М.: Агропромиздат, 1986. -С. 237-240.

51. Методические указания по лабораторной диагностике стрептококкоза животных. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции. Справочник. / Под ред. Б.И. Антонова. М.: Агропромиздат, 1986. -С. 237-240.

52. Методы общей бактериологии / Под ред. Ф. Герхардта и др. М.: Мир, 1983.-Т. 1.-536 с.

53. Михайлюк, А.П. Ассоциированная и комплексная вакцинация животных / А.П. Михайлюк, Б.С. Барсагян, И.А. Пронин, А.В. Аветисян, Р.А. Кадымов, Г.Е. Восканян // Ветеринария. 1982. - № 12. - С. 51 -52.

54. Молодинашвили, Н.А. Сальмонеллез свиней в крупных свиноводческих хозяйствах. / Молодинашвили Н.А. // «Пробл. профилакт. и терапии зараз, заболев, с.-х. животных и птиц». Л., -1986. С. 48—53.

55. Нахмансон, В.М. Дифференциальная диагностика инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. Справочник / В.М. Нахмансон, Л.Г. Бурба. М.: Росагропромиздат, 1990. - 255 с.

56. Нинов, Н. Получаване на жива лиофилизирана ваксина против салмонелоза по свинете / Нинов Н., Стоев И., Гановски Д., Пеев Я., Димитров К. // «Науч. тр. Съюз. науч. раб. България, Враца», 1985, С. - 85-92.

57. Новак, Д.Д. Сальмонеллезы сельскохозяйственных животных и пути их профилактики Электронный ресурс. / Д.Д. Новак 2005. Режим доступа: http:// www.vetfac.nsau.edu.ru. свободный.

58. Новиков, Б.В. Основные параметры иммунного статуса клинически здоровых свиней / Б.В. Новиков, В.В. Дмитренко // Ветеринария. 1993. - № 2. -С. 22-25.

59. Определитель бактерий Берджи / Под ред. Дж. Хоулта. М.: Мир, 1980. -496 с.

60. Определитель бактерий Берджи / Т. 2. Под ред. Дж. Хоулта. М.: Мир, 1997. -368 с.

61. Орлянкин, Б.Г. Биология парвовирусов животных / Б.Г. Орлянкин // Сельскохозяйственная биология. 1986. №11. С. 104-114.

62. Орлянкин, Б.Г. Диагностика и специфическая профилактика РРСС / Б.Г. Орлянкин, Е.А. Непоклонов, Т.И. Алипер, А.Д. Забережный, М.И. Мусиенко // Ветеринария. 2000. - № 10 - С. 16-19.

63. Орлянкин, Б.Г. Парвовирусная болезнь свиней / Б.Г. Орлянкин, В.А.Сергеев, В.А. Седов // Ветеринария 1987. №8 С. 72 - 76.

64. Орлянкин, Б.Г. Патогенность парвовируса свиней / Б.Г. Орлянкин, С.А. Гайтамонова// Бюл. ВИЭВ, 1989.-вып. №71.-С. 6-12.

65. Орлянкин, Б.Г. Специфическая профилактика репродуктивного и респираторного синдрома свиней / Б.Г. Орлянкин, Т.В. Гребенникова, Т.И. Алипер, Е.А. Непоклонов // Ветеринария. 2004. - № 11 - С. 3-5.

66. Панин, А.Н. Новое заболевание свиней, характеризующееся репродуктивно-респираторным синдромом / А.Н. Панин, Р.В.Душук // Ветеринария. 1994. -№ 6. - С. 56-59.

67. Панин, А.Н. Основные требования к производственным и контрольным штаммам микроорганизмов // А.Н. Панин, Н.Т. Татаринцев // Ветеринария. -1993.-№ 4.-С. 28-29.

68. Панин, А.Н. Стрептококковый менингоэнцефалит свиней / А.Н. Панин, Е.В. Малик // Ветеринария. 1991. -№ 7. - С. 35-39.

69. Панин, А.Н. Стрептококкозы свиней / А.Н. Панин // Ветеринария. 1986. -№ 5. - С. 42-44.

70. Применение методов иммунологии в ревматологической клинике. Руководство по иммунологии / В.И. Сачков Под ред. Вязова О.Е. М. «Медицина», 1973.-С. 107-118.

71. Прудников, B.C. Изучение иммуноморфогенеза при болезнях и вакцинациях животных / B.C. Прудников, Ф.Д. Гудков, И.М. Луппова, А.И. Жуков, В.Н. Грушин // Ветеринария. 2005. №4. С. 20-23.

72. Прудников, B.C. Применение тиосульфата натрия при вакцинации свиней против сальмонеллеза / B.C. Прудников // Ветеринария. 1995. - №7. - С. 2931.

73. Прунтова, О.В. применение ИФА для выявления противосальмонеллезных антител у свиней / О.В. Прунтова, B.C. Русалеев, В.М. Гневашев//Ветеринария. 2001. - №12. - С. 18-20.

74. Равилов, А.З. Хламидиоз животных / А.З. Равилов, Х.З. Гаффаров, Равилов Р.Х. Казань: Изд-во «Фэн», 2004. - 368 с.

75. Романов, Е.А. Усовершенствование технологии изготовления и оценка эффективности ассоциированной вакцины против рото-, короно-, герпесвирусной и эшерихиозной диареи новорожденных телят: Дис. . канд. вет. наук. Казань, 1999. - 187 с.

76. Русалеев, B.C. Бактериальные вакцины в свиноводстве. / B.C. Русалеев, В.М. Гневашев, О.В.Прунтова // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2005. - №12. - С. 21-24.

77. Русалеев, B.C. Разработка инактивированных вакцин против сальмонеллеза и пастереллеза свиней. / B.C. Русалеев // Соврем, аспекты патологии животных.-Владимир, 1999.-С. 141-147.

78. Салимов, В.А. Факторные болезни животных и причины их возникновения. / В.А. Салимов // Российский ветеринарный журнал. -2006. -№2.-С. 12-13.

79. Сергеев, В.А. Вирусные вакцины / В.А. Сергеев // Киев: Урожай, -1993 -370 с.

80. Симецкий, О.А. Среда для хранения стрептококков / О.А. Симецкий, Н.К. Оксамитный // Ветеринария. 1969. - № 4. - С. 14.

81. Скворцова, И.И. Биологические свойства парвовируса свиней и его антигенная активность в ассоциации с Leptospira interrogans: Дисс. . канд. биол. наук: 16.00.03. / Скворцова И.И М., 1992. -171с.

82. Складчиков, Р.В. Динамика антител в сыворотке крови свиней при вакцинации против сальмонеллеза / Р.В. Складчиков, В.Е. Завьянцев, Н.Г. Тимофеева // Ветеринария. 1987. - № 7. - С. 42-44.

83. Слинько, В.Г. Экспериментальный сальмонеллез поросят в сочетании с балантидиозом и вирусным гастроэнтеритом / В.Г. Слинько, Н.М. Соболев, А.Ф. Манжос, B.C. Сумцов, Ю.А. Приходько // Ветеринария 1986 - № 8 - С. 48-50.

84. Смирнова, А. А. Микробиологические основы диагностики инфекционных заболеваний / А.А. Смирнова, А.Ф. Подлевский. Л. «Медицина», 1979. -192 с.

85. Соболева, Г.Л. Распространенность и этиологическая структура лептоспироза животных в России / Г.Л. Соболева, А.Н. Панин, Ю.А. Малахов, О. А. Лебедев, Е.В. Викторова // Ветеринария. 2000. - № 12. - С. 11-14.

86. Старик, Д.А. Как рассчитать эффективность инвестиций / Д.А. Старик. -М.: Финстатинформ, 1996. 93 с.

87. Сурнев, Д. С. Усовершенствование технологии изготовления инактивированной вакцины против синдрома гидроперикардита кур: Автореф. дис. канд. вет. наук. Владимир, 2000. - 29 с.

88. Сюрин, В.Н. Ветеринарная вирусология / В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. М.: Агропромиздат, 1991. - 431 с.

89. Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных / В.Н.Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьёв, Н.В. Фомина. М., ВНИТИБП, 1998. - С. 573 - 584.

90. Усольцев, В.М. Результаты испытаний вакцины против различных форм пастереллезов, стрептококкозов и сальмонеллеза свиней / В.М. Усольцев, К.М. Шишкин, Л.Н. Юзвик, В.И. Белоусов // Мат. межд. научн-практ. конф. Щелково.-2003.-С. 152-156.

91. Фаизов, Т.Х. Индикация патогенных сальмонелл в пищевых продуктах / Т.Х. Фаизов, Л.И. Зайнуллин, Н.Л. Александрова // Ветеринария 2004. №8. С. 50.

92. Феокистова, Т.А. Выявление антител к парвовирусу в сыворотках крови свиней иммуноферментным методом. / Т.А. Феокистова, В.К. Сологуб, Л.В. Кошелева // Бюл. ВИЭВ. вып. 60. М. 1985. С. 26-29.

93. Фишер, С. Экономика: Пер. с англ. со 2-го изд / С. Фишер, Р. Дорнбуш, Р. Шмалензи. М.: Дело, 1997.-е. 186-189.

94. Цимбалт, О.М. Иммунитет против сальмонеллеза у свиноматок. 1мун1тет проти сальмонельозу у свиноматок. / Цимбалт О.М. Конаржевський К.Е., Андреева О.С., Сербшенко Т. М., Кульбачна М.З. // «Ветеринар» (Кшв), 1983, № 57, 3—5

95. Шахов, А.Г. Смешанное течение репродуктивно-респираторного синдрома и парвовирусной инфекции свиней / А.Г. Шахов, А.И. Ануфриев,

96. A.В. Голубцов, А.А. Гусев, Т.З. Байбиков, Е.К. Долганова, И.Я. Курман // Ветеринария 1999 - № 9 - С. 18-21.

97. Школьников, Е.Э. Методика получения стрептококкового антигена для иммунизации продуцентов ассоциированной лечебной сыворотки / Мат. междун. научн-прак. конф. Щелково. 2005. - С. 392-396.

98. Щербаков, А.В. Этиологическая структура инфекционных болезней свиней в животноводческих хозяйствах России. / А.В. Щербаков,

99. B.Ф.Ковалишин, А.С. Яковлева, Е.В. Шабаева // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных: Мат. межд. науч. конф. Владимир, -2003.-С. 146-150.

100. Ярцев, М.Я. Показатели роста микроорганизмов в управляемых процессах культивирования / М.Я. Ярцев // Ветеринария. 1996. - №2. - С. 1719.

101. Яцышина, С.Б. Паспортизация вакцинных штаммов сальмонелл / С.Б. Яцышина, И.Л. Обухов, А.Н. Панин // Ветеринария. 2004. №7. С. 23-26.

102. Abaracon, D. Mesqita I. A., Sallua S., Perez Rama R. Emulsificante montanide 888 para la preparacion de vacuna antiaflosa con adjuvante oleoso / D. Abaracon // Bol. Centra Panamer. Fiebre Aftosa. 1982. - № 45-46. - P. 51-53.

103. Alexander, T.J. Streptococcus suis / T.J. Alexander // An update Pig veter. J, 1991; T. 27 -P. 50-60.

104. Alt, M. Effect of maternal antibodies on the vaccination of young against porcine parvovirus / M.L. Alt, K.H. Witte // Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr., 1986.-V. 99.-P. 257-62.

105. Bates, J. A vaccine to prevent parvovirus disease in pigs / Bates J. // Manipulating Pig Production. II. Proc. of the Biennial Conf. of the Australasian Pig Sci. Assoc. Werribee. Australia, 1989. 274 p.

106. Bengelsdorff, H.J. Comparative antibodi determination after vaccination of swein and guinea pigs with inactivated porcine parvovirus vaccine. / H.J. Bengelsdorff. // Berliner-und- Munchener-Tierarztliche-Wochenschrift. 1987. V.100. №5.-P. 162-166.

107. Bersea, I. Infectiile streptococice in patologia suinelor crescute in system industrial / I. Bersea, E. Carol-Dumitriu, G. Dorbe // Lucrari sti. Ser. C. Med. veter. 1987. T.30.-P. 63-76.

108. Betancourt, X. Distribucion de los serotipos de Salmonella en los cerdos de la-Provincia de La Habana. / Betancourt Xiomara, Serra Alida, Garcia Barbara, Ramirez Regla. // «Rev. cub. cienc. vet.», 1984, 15, .№ 1,33—36

109. Brown, T.T. Laboratory evaluation of selected desinfectants as viricidal agents against porcine parvovirus, pseudorabies virus, and transmissible gastroenteritis virus /Т.Т. Brown//Am. J. Vet. Res., 1981. V. 42.-№6. - P. 1033 - 1036.

110. Brunrr, D. Nachgewiesene Parvovirusinfektionen beim Schwein in den Jahren 1985/86. // D. Brunrr, V. Henn, J. Has-ler // «Schweiz. Arch. Tierheilk.» 1987. -V.129. -№5. -P.259-263

111. Byers, N.E., Allison A. S. Adjuvant formulation for use in vaccines to elicit both cell-mediated and humoral immunity / N. E. Byers // Vaccine. 1987. - V. 5. -P. 123-128.

112. Cartwright, S. Virus isolated in association with herd infertility, abortion and stillbirths in pigs. / S. Cartwright, R.A. Huck // Vet. Rec, 1967. V. 81. - P. 196 -197.

113. Castro, J.M. Field trials of an inactivated virus vaccine against porcine parvovirus / J.M. Castro, M. del Pozo, I. Simarro // J. Vet. Med. B. 1992 - 39 № 5 С 337-344.

114. Charles, S.D. Hussain 1., Choi C. et.al. Adjuvanted subunit vaccines for the control of Salmonella enteritidis infection in turkeys / Charles S.D. // Am. J. Vet. Res.-1994.- V. 55, №5.- P. 636-642.

115. Cort, N. A clinical study on the effect of a gram-negative bacterial andotoxin and cloprostenol in non-pregnant and 60-day-pregnant gilts / N. Cort // Anim. Reprod. Sc, 1986; T. 10.-P. 133-145

116. Cvetnic, S. Mikroorganizmi kao uzrocnici reproduktivnih poremetnji u svinja. / Cvetnic S. // «Prax. vet.», 1984, 32, 1-3, 89-96.

117. Dea, S. Parvovirus-like particles associated with diarrhea in unwearied piglets / S. Dea, M.A. Elazhary, G.P. Martinaau, J. Vaillancourt // Can. J. Сотр. Med., 1985. -V.49. -№.3.-P.343-345.

118. Erickson, E.D. Streptococcosis. / E.D. Erickson // J. Am. Veter. Med. Assn, 1987; T.191. №11 -p.1393-1393.

119. Foni, E. A serological survey of swine parvovirus infection in Italy / E. Foni, G.L. Gualandi // Microbiologiea. 1989. V.12.-№3. - P. 241 -245.

120. Freund, J. The mode of action of immunologic adjuvants // Adv. Tuberc. Res.-1956.-V. 7.-P. 130-148.

121. Fujisaki, Y. Immunity to infection with porcine parvovirus in pigs inoculated with the attenuated HT~ strain. / Yujiro Fujisaki, Yosuke Murakami // «Nat. Inst. Anim. Health Quart.», 1982, V.22, №1, -P. 36—37.

122. Gardner, I. Parvovirus: Should you vaccinate. / I Gardner // Pig Farmer. 1988. P.10-24.

123. Germanier, R. Bacterial Vaccines. Orlando ets: Academic Press. 1984. - P. 16-18.

124. Grondalen, T. Smagrisproduksjon og smagrisdodelighet i 13 norske besetninger. / Grandalen Trygve, Liven Eivind, Djpnne Berit Kristoffersen, Gjestvang Mona Solum, ioeer Gry, Utklev Hans Erling. // «Nor. veterinaertidsskr» -1986 №9 p. 611—612

125. Heath, P.J. Streptococcus suis serotypes 3 to 28 associated with disease in pigs / Heath P.J., Hunt B.W. // Veter. Лес.-2001 .-Vol.148,N 7.-P. 207-208.

126. Hondatsu, T. Baba K. Ide S. et al., Detection of antibodies against porcine parvovirus in swine sera by enzyme-linked immunosorbent assay / T. Hondatsu, K. Baba, S. Ide et al.,//Veter. Microbiol. 1988 V. 17. №1. P. 11-19

127. Horner, G.W. Isolation of porcine parvovirus from aborted piglets / G.W. Horner, R. Hunter // N. Vet. J., 1977. V. 25. - №. 1 -2. -P. 25 - 26.

128. Hostnik, V.Z.P. Porcine parvovirus (PPV) on large Farms in Slovenia / V.Z.P. Hostnik, Z. Zeleznik // Int. Pig Vet. Soc. Netherlands, 1992. Pore J. - P. 101.

129. Huysman, C.N. Reproductive failure associated with porcine parvovirus enzootically infected pig herd / Huysman C. N. et al. // Veter. Rec, 1992. V. 131. -№22. - P. 503 - 506.

130. Нинов, H. Получаване на жива лиофилизирана ваксина против салмонелоза по свинете. / Нинов Н., Стоев И., Гановски Д., Пеев Я., Димитров К. // «Науч. тр. Съюз. науч. раб. България, Враца», 1985, 8, 85—92

131. Jerabek, J. Immunoprophilaxis of porcine parvovirus infection / J. Jerabek, et al. // Veterinarstvi, 1987.-V.36.- №2.-P. 55-58.

132. Johnson, B.F. Porcine parvovirus. The Parvoviruses. / B.F. Johnson // New York, Plenum Press. 1984. -P. 284-285.

133. Joo, H.S. Antibody responses of guinea-pigs, rabbits and pigs to inactivated porcine parvovirus vaccines. / H.S. Joo, T.W. Molitor, A.D. Leman // Vet. Microbiol. 1984.9. 1. P.27-33.

134. Joo, H.S. Donaldson-Wood C.R., Johnson R.H. Observation on the pathogenesis of porcine parvovirus infection / H.S. Joo, C.R. Donaldson-Wood, R.H. Johnson // Arch. Virol., 1976. V. 51. - P. 123 -129.

135. Lehnert, C. Gericke R. Virusbedingte Reprodaktionsstorungen in einer industriemassig produzierended Schweinezuchtanalage / C. Lehnert, R. Gericke // Veter.-Med. 1987. №41. P. 890-893

136. Liebermann, H. Die Parvovirusinfection des Schweines / H. Liebermann, G. Hille, G. Ochme, B. Ferko // Arch, exper. Veter.-Med. 1988. 42. 6 P. 890-894.

137. Lutter, K. Aborte bet Sauen. / Lutter K. // Ursachen, Bekampfung und Verlustsenkung. Tierzucht. 1982. 36, 10: 462-465.

138. Madsen, L. Characterisation of streptomycin resistance determinants in Danish isolates of Salmonella typhimurium / Madsen L., Aarestrup F.M., Olsen J.E. // Veter. Microbiol.-2000.-Vol 75. №1. P. 73-82.

139. Mahanta, S. Bacterial infection in neonatal piglest / S. Mahanta, B. Chaudhury, G.K. Baruah // Livestock Adviser. 1987 - Т. 12. - №11. - P. 49-51.

140. Mayr, A. Charactirization of a small porcine DNA virus. // Arch. Gesamte Virusforsch, 1968. №25. - P. 38 - 51.

141. McDanid, Т. Finally A Streptococcus suis biological receives USDA approval / T. McDanid // Pork. 1989. T.9 - №7 - P. 89.

142. Meng, X.J. Heterogeneity of porcine reproductive and respiratory syndrome virus: implications for current vaccine efficacy and future vaccine development / Meng X.J. // Veter. Microbiol.-2000.-Vol.74, №4. P. 309-329.

143. Mengeling, W. L. Virus Infec. Porcine. / W. L. Mengeling // Amsterdam etc., 1989.-P. 83-94.

144. Mengeling, W.L. Biological assay of attenuated strain NADL-2 and virulent strain NADL-8 of porcine parvovirus / W.L. Mengeling, Z. Pejsak, P.S. Paul // Am. J. Vet. Res., 1984. V.45. - №11 .-P. 2403-2407.

145. Mengeling, W.L. Efficacy of an inactivated virus vaccine for prevention of porcine parvovirus-induced reproductive failure / W.L. Mengeling, T.T. Brown, P.S. Paul, D.E. Gutekunst // Am. J. Vet Res., 1979. V.40. - №2. - P. 204 - 207.

146. Mengeling, W.L. Pathogenesis of in utero infection: experimental infection of five-week-old porcine fetuses with porcine parvovirus / W.L. Mengeling, R.C Cutlip //Am. J. Vet. Res. -1975.-V. 36. -№8. -P. 1173.

147. Mengeling, W.L. Porcine parvovirus. Diseases of swine 71 edition / W.L. Mengeling // Ames, low U.S.A., 1992.-P. 299-311.

148. Molitor, T.W. Porcine parvovirus: virus purification and structural and antigenic properties of virion polypeptides. / T.W. Molitor, H.S. Joo, M.S.J. Collett // Virol. 1983. - V. 45. - №2. -P. 842-54.

149. Moscari, E. Isolation of porcine parvovirus (PPV) from swine herds affected by reproductive failure, and serologic evidence of infection in Hungarian large swine herds / Moscari E. et al. //Acta Vet. Hung., 1983.-V. 31.-№1 -3.-P. 5- 15.

150. Nardelli, St. Research on the presence of porcine enlerovirus serotype 1 in northeastern Italy / St. Nardelli, L. Farina, S. Lucia, R. Parpaiola, A. Zuin // J. Vet. Med. 1993. V. 40. №3. - P. 190-196.

151. Nassri, S. Analisis retrospectivo de la presencia de anticuerpos inhibidores de la hemaglutinacion contra al parvovirus porcino en sueros die cerdos colectados de 1971 a 1992 / Nassri S. et al., // Clencia 1993. V. 44.-№l.-P. 184.

152. Nielsen, J.N. Etiologic studies on late-term swine abortions. / J.N. Nielsen, C.H. Armstrong, J.J. Turek//J. Vet. Diagn. Invest. 1989. V.l-P.l83-184.

153. Obaldia, N. Outbreaks of porcine parvovirus disease in Panama / N. Obaldia // Trop. Anim. Health and Prod., 1991.-V. 23.-N. 3.-P. 181 -185.

154. Parsons, T.D. Economics of porcine parvovirus vaccination assassed by decision analysis / T.D. Parsons, G. Smith, D.T. Galligan // Prev. Vet. Med. 1986. V. 4. -№3. - P. 199-204.

155. Paul, P.S. Duration and biological half-life of passively acquired colostral antibodies to porcine parvovirus / P.S. Paul, W.L. Mengeling, E.C. Pirtle // Am. J. Vet. Res., 1982. -V.43.-№ 8.-P. 1376-1379.

156. Paul, P.S. Duration and biological half-life of passively acquired colostral antibodies to porcine parvovirus / P.S. Paul, W.L. Mengeling, E.C. Pirtle // Am. J. Vet. Res., 1982. -V.43.-№8.-P. 1376-1379.

157. Paul, P.S. Effect of vaccinal and passive immunity on experimental infection of pigs with porcine parvovirus / P.S. Paul, W.L. Mengeling, T.T.Jr. Brown // Am. J. Vet. Res., 1980. V.41. - №.9. -P. 1368-1371.

158. Paul, P.S. Oronasal and intramuscular vaccination of swine with a modified live porcine parvovirus vaccine: multiplication and transmission of the vaccine virus / P.S. Paul, W.L. Mengeling // Am. Vet. Res., 1984. V.45. -№12. - P. 2481 - 2485.

159. Pejsak, Z. Parvovirus antibodies in swine Poland / Z. Pejsak, J. Wojik // Med. -Wet, 1985.-V.41.-№8.-P.459-462

160. Pye, D. Development of a vaccine preventing parvovirus-induced reproductive failure in pigs. / D. Pye, J.Bates, S.J. Edwards, J. Hollongworth. // Australian-Vet.-Journal. 1990, 67. 5. P.l79-182.

161. Ruckerbauer, G.M. Demonstration of parvovirus in Canadian swine and antigenic relationship with isolated from other countries / G.M. Ruckerbauer, G.C. Dulac, P. Boulanger // Can. J. Сотр. Med. -1978. V. 42. - №3. - P. 278 - 85.

162. Russmann, H. Delivery of epitopes by the Salmonella type III secretion system for vaccine development / H. Russmann, H. Shams, F. Poblete, Y. Fu, J.E. Galan, R.O. Donis // Saence.-1998.-Vol.281. №5376.-P. 565-568.

163. Saliki, J.T. Serosurvey of selected viral and bacterial diseases in wild swine from Oklahoma / J.T. Saliki, S.J. Rodgers, G. Eskew // J. Wildi Dis, 1998. V. 34. -№4. - P. 834 - 838.

164. Schafzahl, W. Epidemiogische Untersuchung uber das Vorkoommen verschiedener Infectionskrankheiten bein Schwein in einem Praxisgebiet / W. Schafzahl, W. SchuIIer, S. Kolbl // Tierarztl. Umsch, 1990. V.45. - №8. - P. 535 -545.

165. Scholl, W. Zum Stand, zur Bedeutung und zur Bekampfung von Salmonellainfektionen bei Schweinen in der DDR. / Scholl W. // «Monatsh. Veterinarmed.», 1982,37, N» 14, 521—526

166. Siegle, G. Biology and pathogenicity of autonomous parvoviruses. The Parvoviruses. / G. Siegle // New York, Plenum Press, 1984. - P. 297-362.

167. Simko, S. Salmonely v chovoch osipanych s latentnymi infekciami a v ohniskach salmoneloz. / Simko S. // «Vet. med.» (CSSR), 1984, 29, № 5, 287—291

168. Sondermann, R. Zur Strategie der Salmonellenbekampfung. / Sondermann R., Stiehler S., Janz I., Beer K. // «Tierzucht», 1986, 40, № 10,437—438

169. Sorensen, K.J. Assay for antibody in pig fetuses infected with porcine parvovirus/ K.J. Sorensen, J. Askaa, K. Dalsgaard //Acta Vet. Scand., 1980. V.21. -P. 312 - 317.

170. Stafford, K. Antibodies to swein disease in commercial piggeries in Central Zambia / K. Stafford, Y. Stafford, D. Paton et. al. // Rev. Elev. Med. Vet. Pays Trop. 1992. V.45. - №3/4. - P. 229 - 230.

171. Sur, J.H. Evidence for the localization of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) antigen and RNA in ovarian follicles in gilts / J.H. Sur, A.R. Doster, J.A. Galeota, F.A. Osorio // Veter. Pathol.-2001.-Vol. 38, № l.-P. 58-66.

172. Thomson, G.R. Antibody to porcine parvovirus in warthog (Phacochoerus aethiopicus) / G.R. Thomson, J. Peenze // Onderstepoort J. Vet. Res., 1980. V. 47.-№1.-P. 45 - 46.

173. Too, H.L. Evaluation of a gel diffusion precipitin test for porcine parvovirus / H.L. Too, J.T. Seaman, J.R. Littlejohns, R.J. Love // Aust. Vet. J., 1983.-V. 60.-№6.-P. 161 165.

174. Torremorell M. Prolonged persistence of an epidemic Streptococcus suis strain in a closed pig population / Torremorell M., Pijoan C. // Veter. Rec.-1998.-Vol. 143.-№14.-P. 394-395.

175. Ursa с he, R. L'infection a parvovirus chez le pore. Note 2. Sondage serologique en France (1977—1982). / Ursache R., Vallet С laude. // «Rev. med. vet.» (Fr.), 1984 V. 135, № 2 P. 63—72.

176. Vannier, P. Study of the efficacy of an inactivated virus vaccine against porcine parvo-viruS. / Vannier P., Brun A., Chappuis G., Reynaud G. // «Ann. reck vet.», 1986. V. 17 №4. P.425—432.

177. Vannier, R. Study of the efficacy of an inactivated virus vaccine against porcine parvovirus / R. Vannier, A. Brun, G. Chappuis, G. Reynaud // Ann. Rech. Vet, 1986. V. 17. - №4. - P. 425 - 432.

178. Vecht, U. Streptococcus suis infections in pigs in the Netherlands (Part I). / Vecht U., Leengoed L. A. M. G. van, Verheijen E. R. M. // «Tijdschr. diergeneesk.», 1986, 111,№3, 132—138

179. Walton, J.R. Porcine parvovirus dous not affect all foetuses / J.R. Walton // J. Pigs, 1987. V. 3. - №4.-P. 11-13.

180. Wolf, P.J. Salmonella seroprevalence at the population and herd level in pigs in the Netherlands / P.J. Wolf, W.B. Wolbers, A.R.W. Elbers, H.M.J.F. Heijden et al, // Veter. Microbiol. 2001. - Vol.80. - P. 171 -184.

181. Wood R.L. Immune response of swine vaccinated with a group E Streptococcus whole-culture bacterin / R.L. Wood, G.E. Wessraan // Amer. J. Vet. Res. 1984,45, № 10, 1933—1936

182. Wrathall, A.E. An inactivated, oil-emulsion vaccine for the prevention of porcine parvovirus-induced reproductive failure. / A.E. Wrathall, D.E. Wells, S.F. Cartwright, G.N. Frerichs // Research-in-Vet.-Sceince. 1984. V.36. №2. P. 136-143.

183. Ysuhara, H. Characterization of a parvovirus isolated from the diarrheic Feces of a pig. / H. Ysuhara, 0. Matsu, T. Hirahara et.al. // J. veter. Sc. 1989 №51 P. 337344.