Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Антигенный спектр главного комплекса гистосовместимости у здорового, инфицированного вирусом лейкоза и больного лейкозом крупного рогатого скота

Государственная комиссия при Совете Министров СССР по продовольствию и закупкам

Московская ордена Трудового Красного Зншзни ветеринарная академия имена К.Л.Скрябина

На правах рукописи

ЛАРЦЕВА СВЕТЛАНА АЛЕКСА] ЩРОША

АШГШШИ СПЕПР тШОГО. КОМПЛЕКСА ПЮТОСОШЕСПИОС'Ш У здорового, ШЮИЦИГОШШОГО ВИРУСОМ лШкоза и больного

ЛЕЙКОЗОМ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 16.00.02 - патология, онкологияя морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 1990

Работа выполнена в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им. К.И.Скрябина

Научный руководитель - академик ВЛСНМЛ, доктор ветеринарных

наук, профессор Шишков В.П.

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук, профессор [¡аьличенко ii.il. Доктор ветеринарных наук, профессор Кпсьнненко И.И. Ведущая органиваиия:

Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии, г.Покров

Зашита состоится п19 й^г. в ^'час. на 'заседании специализированного совета Д 120.36.01 по защите диссертации на соискание ученой степени доктора наук в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им. К.И.Скрябина /109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Тел.: 377-93-83/.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии Автореферат разослал 1990 г.

Ученый секретарь специализированного совета

Слесаренко Н.А.

О ИНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность теми. Лейкозы сельскохозяйственных животных я человека представляют актуальную проблему современной науки, имеют не только медико-ветеринарное и общебиологячоское, но и социальное, а такав народно-хозяйственное значение.

Заболевания наносят значительный экономический улерб вследствии гчбели, вынужденной выбраковки животных, утилизации органов и туа при убое, расходов, связанных с ограничительными мероприятиями.

С переводом животноводства на промышленную технологию проблема лейкозов приобретает еще б&лыяую экономическую значимость в связи с увеличением распространения заболевания в животноводческих комплексах. В отдельных хозяйствах и районах лейкозы получили столь широкое распространение, что ставят под угрозу развитие племенного животноводства. Наряду с ветеринарными мероприятиями для борьбы с лейкозами в последние годы начали разрабатывать селекционно-генетические методы с целью получения здорового, резистентного к лейкозам потомства. Эта задача зависит от возможностей идентификации устойчивых и чувствительных к заболеванию животных. Биологическими маркерами могут служить любые иммуногенетические структуры, в том числе и лейкоцитарные антигены. В связи с этим важным направлением исследований в плане разработки селекционно-генетических подходов к оздоровлению яивотноводства от лейкозов является изучение ассоциативных связей антигенов гистосовместя-МОСТИ СИСТеШ Бо1А. С ВОСПРИИМЧИВОСТЬЮ Л УСТОЙ 4.1ВОСТЫО крупного

рогатого скота к лейкозам.

Особенно актуальна задача использования всей информации о ВоБА-фенотиае каацого гивотного для интегральной оценки его кн-муногенетического статуса и классификации лашоткых по группам резистентных и предрасположенных к данному заболеванию.

Проведённые исследования являются фрагментом комплексного кзу-

чения молекулярно-ч5иологичоских основ спонтанного и экспериментального лейкоза сельскохозяйственных животных, пропоя, имого по проблема 0.69.05 Госкомитета по науко и технике СССР.

1.2. НеЛь к задачи исследований. В связи с вишеизлояонным полью исследований явилось изучение генетического полиморфизма серологически определяемых антигенов Главного комплекса гисгосошесги-мости /Во1А-системи/ у крупного рогатого скота чорпо-пестрой породы с уточнённым патоморфологическим диагнозом в связи с устойчивостью и восприимчивостью к лейкозам и ЕДКРС, а также паболо -аи!-т, сопровождающимися лейкемовдными реакциям!. Достижение цели ¡ш-полшиось решением следующих задач:

1. Определить в динамике частоту встречаемости серологически определяемых антигенов Во1А-скстемы I класса в общей популяции лимТо-цктов и дифференциально на поверхности В-лимХоцитов, а тшмс совокупности Т- и "0" /нулевых/ клеток у здорового, инфицированного ВЛКРС и больного лейкозом крупного рогатого скота, у жшотних с маститами /заболевание, сопроводиалцееся лейксмовдиыш роашишмп/,

2. Определить на основе популяциошшх исследований риск заболева-.ния лейкозами и маститами.

3. Изучить возрастные особенности распределения ВоЗА-онтигоноп I класса у больных лейкозами и инфицированных ВЛКРС животных в хозяйстве с уровнем инфицкрованноста превышающем 90>.

4. С помощью метода статусметрии по антигенам ВоЬЛ-системы I клас са дать интегральную оценку иммуногенетического статуса инфицированных ВЛКРС и больных лейкозами животных.

1.3. Научная новизна. С использованием современных и объективных методов исследования впервые дана характеристика особенностей распространения серологически определяемых антигенов гистосовмис-гюности I класса на В-лимйсыитах, совокупности Т- и"0" /нулевых/

клоток здоровых, инфицированных БЛКРС И больних лейкозом хнвот-нш ч ¡5 рно-п острой породы. Дана возрастная характеристика генетического полиморфизма Во1Л-антигонов I класса у больных и инфицированных ШКРС животных в популяции с уровнем шфщированности вирусом лейкоза более

Проьоданная интегральная оценка шмуногенетичеекого статуса животных разных групп, позволяет конкретизировать риск заболеваемости ла!1козом для каждого животного с определённой долей достоверности. Результата популяционных исследований подтверздены статус-метривй и патоморфологическим диагнозом.

1.4. Практическая ценность работы. Получены новые данные о генетическом полшорфизме серологически определяемых антигенов ВоЬА--системы, выявляем на В-лимТюцитах и совокупности Т- и "О" клеток у здоровых, инфицированных Ш1КРС и больных лейкозом животных чёрно-пёстрой породы.

Полученные данные о резистентности и предрасположенности к лейкозам животных, обладающих определенным набором Во1А-антигенов I класса, позволяют в конкретном хозяйстве с уровнем инфицированное-та ВЛКРС более 90# выделить группы "повышенного риска" развития лейозов с целью исключения их из воспроизводства. Таким образом создана предпосылка для осуществления генетического контроля резистентности к лейкозам и комплектования племенного ядра стада устойчивыми к заболеваниям животными.

1.5. Апробация работа. Основные положения диссертационной работа долояены и обсуздены на II1-м Всесоюзном совещании по проблеме повышения резистентности сельскохозяйственных животных /Кострома, 1988 г./, на отчётной научной конференции прсфэссорско-препсдаза-тедьского состава Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии 'им. К.И.Скрябина /1989 г./, на совместном

заседании соруаШЖОВ кафедр патологической анатомии и физиологи! с.х. животных, гистологии, ветеринарной хирургии и лаборатории по изучению лейкозов о.х. животных /1990 г./. Г.в.Публикации. По темо диссертации опубликовано 3 статьи, Т.?. Основнно положения диссертационной работи, выносимые .пли эяштц. I. Особенности генетического полиморфизма серологически опредаляемнх антигенов Во1А-систеш I класса у здорового, инфицированного ШПСРС и больного лейкозом крупного ро!атого скота.

2. Ассоциативная связь' антигенов БоП-систеш о забояаваеысоа-ы лейкозом.

3. Кнтограяьн&ч оценка шцуногенетичвокого статуса здорового, гофигщрованного НИСРС п больного лейкозом крупного рогатого скот.

I.8. Структура ц объём |Щссорт&итт. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литература, методики исследовании, собственник исследований, обсуждения полученных результатов, вп-водов, практических предложений. Материал диссортации изложен па 156 страницах машинописного текста, содержит 33 таблицы, 12 рисунков, из них 8 котфсхЬотографий. Список литературы включает 264 наименования, в том числе 213 иностранных авторов.

II.Материал и методы исследований. Работа выполнена в течение 1986-88 г. на базе лаборатории но изучению лейкозов с.х. животных и кафедры патологической анатомии и физиологии МЕЛ. Исследования проведены в двух популяциях крупного рогатого скота: в свободном от ВЛКРС хозяйстве и с уровнем инфицированноети ВДКРС более 90$. Были вьщелены следующие группы животных:

1. Здоровые /контрольные/ /Тем м-", РИД "-" / -38 голов

2. С маститами /Тем Р1Щ / - 26 -"3. Инфицированные ВЛКРС /Тем Р1Щ" "+"/ - 22 -"4. Больные лейкозом /Тел» V, РВД "+"/ -63 гол., в т. ч. с под-

¡ерлщённым латологоморфологическим диагнозом - 31 гол.

Поскольку поставленный на основе гематологическт. и серологи-эоких исследований прижизненный диагноз на леЛкоз в ряцо случя-з не подтверждается при вскрытии, а также в овязи о разнообра-дем форм и вариантов болезни, для точной диагностики гомоблас-эзов крупного рогатого окота и дифференциации их от заболеваний, опровоадающихся лейкеыокдныш реакциями, наш были использованы атоморфологические методы исследования: макроскопический и теологический. Материалом для исследования служили лимфоузлы, пе-ень, почки, сердце, пораженный кшечнше, сычуг, вымя. Образцы рганов и тканей обрабатывали по общепринятым правилам патолого-гистологической техники. Парафиновые гистосрезы окрашивали гема-окешшн-эозином, препарата-отпечатка исследуемых органов по 'омановскому-Пдаза.

Для изучения антигенного спектра ГКГС у здорового, ипфицпрован-юго ВЛКРС и больного лейкозом крупного рогатого скота, а также г животных о маститами было проведено ВоИ-типированкэ лимфоцитов г 149 коров чёрно-пёстрой породы в возрасте от 4-х до 12 лет о ювторным взятием крови.

Титрование антигенов гистосовместишсти проводили в стандарт-том 2-х ступенчатом ыикроцитотоксическом тесте по /^йз/ж^я'-в модификации для крупного рогатого окота / , 1977?

Л.Р.Слепчелко, Б.З.Иткин, 1979/. В работе использовали 71 изош-унную антшшмфоцитарную сыворотку, полученную А.Р.Слепченко в лаборатории по изучению лейкозов с.х. животных МВА в 1975-80 г. , идентифщщрухщую 24 серологически определяемых антигена ВоН-сис-темы I класса. Материалом для Во1А-типировашгя служили лимфоциты пернфирической крови, выделенные на флколл-верографиновом градиенте плотности. Разделение общей популяции лимфоцитов на субпопу-

ляцию В-лимфоцитов, совокупность Т- и "О" ¿слеток просочилось с

помощью внтиишуноглобуливовых сывороток, выпускаемых институт

биохимии ДктССР.

Иммуногенетический анализ результатов ВоЬА-типирования шипе

изучение частот антигенов и контролирующих их генов, средних о

клонений, относительного и атрибутивного рисков заболеваемости

лейкозами и болезнями, сопровождающимися леЯкемовдннми реакции

Частоты антигенов / / / рассчитывали по формуле: £ - у

где ¡ь - число животных, млеющих данный антиген, А/ - обшоо ч

ло обследованных животных.

Частоты генов / р / определяли поформуле: ^ - /-т/-^ ;

Среднее отклонение / : /дуь = — у '

Степень относительного риска заболеваемости / ЯЯ. / лейкозами

болезнями, сопрововдаюцимися лейхемовдинш реакциями, в эагис!

ти от распределения ¿Й -антигенов устанавливали по формуле:

Р Р - (4-РС) - , где РЪ - частота дшшогс

РС (1-РЪ) $ ■ с.

антигена у восприимчивых животных, РС - частота этого антигонг

контрольной группе, т.е. у резистентных животных, л -процент ! абсолютное число животных, восприимчивых к заболеванию и облог щих данным антигеном, с1 - процент или абсолютное число животт резистентных к заболеванию и неимепцих данный антиген, / - ког трольная группа с данным антигеном, С -процент или абсолютное ло животных, восприимчивых к заболеванию и не имевших данный антиген. Атрибутивный риск /, позволяющий определить, юи та антигенов, ассоциированных с заболеванием, имеет наибольщу; нетическую связь о ним, определяли по Формуле: —

3 случаях, когда с заболеванием ассоциировалось несколько Во! -антигенов,, определяли величину так называемой этиологической фракции /ЕР/: —» где Г? - частота антигена

олышх, определяемая из четырехпольной таблицы - а,", (л+с) „ ичина выраженная в долях единицы, показывает ту часть ышх, у которых заболевание связано с наличном данного Бо1А-|На шш сегрегирующего с шм гена чувствительности к заболева-). Когда т.е. частота ВоЬА.-шш1гена у заболевших ниже,

I в контроле, что может свидетельствовать о "за^лтно!*" роли того антигена; сходным образом определяли величину тях назнва->й превонтативной фракции //V/: Рг - -

¡остоверность различий частоты встречаемости Во1А-антигена в с популяциях проверяли по критерии хи-квацрат с коррекцией на

1РЭРШШ0СТЬ выборки, р*. (Г^М^^и/ю- ' > ¡¿и1-£с| - абсолютная величина разности, О,ЪЛ/~ поправка на 1рерывность для малых выборок.

Гест^^применяли в тех случаях, когда У>20 м все ожидаемые учения к наблюдаемым частотам й,%6гСгс1 больше 5, т.е. выполня-условие; ,

Для избежания ошибочного заключения се ассоциации коррегировали йденное при помощи метода ^С^" значение Р соответственно числу азнений, т.о. числу опредо.чяемых антигенов по Бонферони: в Р х п,, где Рс- коррелированное значение Р, Р- найденное ачение.

В работе использован метод статусматрии. Статусмвтрия - комплекс годов количественной отдешси состояния слохннх объектов, харак-риэуомых десятками и сотнями показателей. В состав южплекса одят методы теории распознавания образов, математическая тео-я зкспер1аде.чта, теория отбора /мшш.таза^яя/ информативных приз-ков, критериальный аппарат математической статистики я автома-:зированный машшннй эксперимент.

Интегральная оценка % предрасположенности к заболеванию вычкс-

лялась с помощью функциональной модели полинома 1-ой степени!

Z- £<>++ Мк * Vf, Mt

где А J, -антигены BoLA-системы, выступающие как бинарные качественные переменные; I - номер антигена, принимающий значение I если А имеется у данной коровы и 0 - в противоположном случае Коэффициенты В^, If 0, получены после обработки данных о за болеваемости животных методом статусметрии и характеризуют "си влияния" антигена на состояние организма.

В качестве альтернативных использованы три состояния: здоров кивотныо - носители возбудителя - больные лейкозом. Для пострс ния модели использовались два крайних контрастных состояния "э ровна - больные", носптельство считалось промежуточным состояв с неопределённым исходом.

В результате обработки данных получен набор из 19 инФсрмати£ антигенов и дискриминантиая модель в виде полинома: Я? = 0,408+0.32IAJ--0,790А2-0,274А4-0,226А5-0,104А6-Ю,667А7-

-0,294А8+0,605Ag-0,756AI0+0,160А12+0,709А13~0,330А15+0,225А16н

+1,240AI7-0,5I7Aib+0,602AI9+I,0I6A22-0,6I2A2g-0,273А24 , а также граница зоны неопределённых решений «¿,<=-0,046 и «</¿=0,036 для 40% доверительной вероятности.

Решавшее правило анализа предрасположенности к лейкозу имео' вид: еоли £<-0,046, корова предрасположена к лейкозу; если £>0,036, корова резистентна; если -0,046 4 % ¿0,036, решение неопределённое. На обучаыцей выборке это правило обеспечивает 64$ правильных решений.

III.Собственные исследования 3.1. Характеристика здоровых /контрольных/ животных по аптиге

BoIA-систепы. В общей популяции лимфоцитов у ксслецовашпы »ивот-iiux наиболее часто выявляются антигены MoBoIA. А 20,12,21,15,16, 13,24,14,3,4,19,9,23 /значения -f от 0,579 до 0,421; значения р от 0,351 до 0,239 /и наиболее редко - А8 и AI8 /-f » 0,184; р=0,097/. В распределении антигенов гистосоЕ^естнмости на В-лэм-*оцитах, а также на Т- " "О" клетках прослаивается тл яе тсздн-ция, что и в общей нспуляцнт лшл^оцптов. При сравнонни этих-групп достоверные разлит:« не выявлены.

5.2. Особенности тастоэделотщ BqIA-актирснсв у животкнх большое лейкозом. Наибольшее распрострапепио в ствде с уровнем шфн-царовалноптя более 90% виоют антягегга BoIA А 20,15,24,21,19,3,11, 4,0 /f от 0,646 до 0,416; р от 0,405 до 0,236/, насмоггьиев распространение - пнтигенц А 9,13,6 /значения £ от 0,252 до 0,289; р от 0,135 до 0,136/.

Общая пспуляияя лимфоцитов у либотннх о подтверждённым пато-морйологическим диагнозом характеризуется наибольшей частотой встречаемости антигонов BoIA А 11,4,24,15,20,3,16,8,20,5,7 /значения -f от 0,677 до 0,419; р от 0,432 до 0,238/ в наименьшей у AI /f = 0,2265; р=0,120/, А 9,17 //»0,193; р*0,Ю22/. По результатам статусметрической обработки все вышеуказанные часто встречающиеся антигены ВоLA-cистеки относятся к числу неблагоприятных, а наиболее редко встречающиеся - к числу благоприятных.

Т-лимйоциты и "О" клетки характеризуются наибольшей частотой встречаемости неблагоприятных антигенов: А 4,15,24,18,20 /J or 0,516 до 0,419; р от 0,30^ до 0,238/ и наименьшей у антигенов BoIA А7 //=0,097; р=0,050/, AI7 //=0,161; р=0,090/ и А8 // = =0,193; р^О,102/. На этой фракции клеток по сравнению с общей популяцией лимфоцитов и субпопуляцией В-клеток достоверно уменьшена экспрессия антигена All п отмечается тенденция к повышению

экспрессии антигена А5.

11а Б-лим|юцитах наиболее часто встречаются неблагоприятные антигены Бои А24 «0,613; р=0,3?8/, А И,К =0,540; р=0,320/ и А13 /{ «=0,452; р=0,260/, наиболее редко А 7,9,22 =0,09?; р=0,050/, А17 «0,129; р=0,069 /и А 1.5 /{ =0,161; р=0,084/.

При сравнении мевду собой спектра ВоХА-антигенов, определяемых в обшей популяции лимфоцитов больных лейкозом животных с подтвер-аденшы пазгоиорфологическим диагнозом и здоровых аивотных, выявлена ассониативная связь с заболеваемостью лейкозом антигенов Во1А АЗ /ЙЛ =3,647; 605; Р<0,05; б =0,328/ к АН /66=3,22;

1^Га=4,425; Р^0,05; & =0,466/, причём антиген Во1А АН обнаруживает наибольшую генетическую связь с заболеванием,

Протективное значение имеют слеаущие Во1А-антигены: А14 ЯП =0,324 ^«5,718 в «-0,471 РГ ш 1,417 А13 ЧЯ =0,292 ,1Хавб,745 <> —0,548 РГ ** 1,566 А9 КИ =0,314 ^Гг»4,735 б »-0,390 РР =1,400 '

Полученные результаты подтверждаются статускетрической обработкой данных, сох-ласно которой антигены А9 и А13 входят в группу благопрняных по силе влияния на резистентность к леЯкозу и имеют положительные коэффициенты Б^: 0,605 и 0,709. Таким образом абсолютные величины В^ указан»'« Во1Л-йнгигенов коррелируют как со значениями о I нос г, тельного и атрибутивного рисков, так и с величинами рутинных методов статистического анализа.

При сравнении грушшживотных больных лейкозом с патоморЬоло-гически подтверждённым, диагнозом и контрольной по спектру антигенов гкстосовг.естимости, выявляемых на Т- и "0"-клитках, не об- , наружено достоверных ассоциаций заболеваемости лешюзщнк с одним ВоХА антигеном.

Сравнительная характеристика спектра ВоНА-антигенов, определи-

pmux на в-лгадТчжитах, u связи с заболеваемость« лойкозом демонстрирует в'.гсоксдостовернуп ассоциацию антигена ВоЬА А8»с заболе-впнием. Относительный риск заболевания у повителей данного BoIA-снгигена по «равнению со здоровыми животными ооста am вт 2,102;

5t

крптог'ки соответствия^ «19,<1?0 /PiO.OOI/, а скорректированный по числу срапнениР. показатель Ро=0,024. Анализ величины атрибутивного риски сштст^льструот о том, что наиболее тесную связь с "dl-ita.л."~аллелом вновь показывает антиген BoIA-AII Д=0,4С8/. Тенденции к протектизному гдеИствию в отношении заболевания лейкозом демонстрируют антигены BoIA - А 1,9,13,22 /табл. I/.

3.3. Анг.хен1ш:1 спектр BoIA-сксгемц у гематологически n сссо-логлчтеки по.моу.ительнгл .улвотных. В группе животных Гем"+",Рид"+" ■ ; ■■/очаотся ннвпл-.^'о^'л различий в распределении Во1А-антягонов, ннтилешх па»? в обрей популяэтп лам?о«лтов, так и на поверхности L'-jinr,!опытов, Т- и "О" ¡'.четок. Это объясняется тем, что в ней по-пяля кап ишпние, обладзтие более олабим типом иммунного статуса к, так;;м образом, более восприимчивые к заболеванию лейкозом, так и .-аиютные с более сильным типом иммунного статуса и, следовательно, более устогчивне к заболевании л прогресспрованию лейкоз-ного процесса. Подтверждением служат результаты интегральной оценки предрасположенности коров к лейкозу по набору их ВоЬА-антигонов, полученные методом стптуометрии.

Частоты встречаемости лодяпляпяего большинства BoIA.-антигепов, за исключением A3 и АН, как б общей популяция, так и на Т- и В-лигЛ оцптах значительно превышают тазовые у больных лейкозом о подтвержденным патомор-ологачэским диагнозом. При сравнении данной группы животных с контрольной выявлена определённая связь ан-ткгенов ВоХА А 2,4,10,13,1Г>, 17,18,24 с заболеваемостью лейкозом /табл. I/.

I.Характеристика ВоЬА-антигенов, благоприятных и неблагоприятных для организма животных в связи с восприимчивостью.к лейкозу

ОоХА : ЯП : : В

благоприятные

AI 0,370 -0,275 3,937х +0,321

А9 0,232 -0,320 6,232х +0,605

AI3 0,313 -0,565 6,314х +0,709

AI7 0,415 -0,493 эда** +1,016

А22 0,164 -0,182 2,839 +1,240

неблагоприятные

А2 7,155 0,619 К^Эб*** -0,790

А4 3,157 0,492 4,206х -0,274

АЮ 3,600 0,406 5,338х -0,756

AI5 3,214 0,538 3,899х -0,330

AI8 8,647 0,847 12,127ш -0,518

А24 3,571 0,562 4,778х -0,273

х - Р<-0,05; хх - Р<. 0,01; ххх - Рс0,001

При коррегировании по числу проведённых сравнений высоко достоверной отзывается лишь ассоциативная связь антигонов 12 и AI8, причём наибольшую генетическую связь с " citSeo.se "-аллелей имеет антиген AI8 /б =0,847/.

р.4. Генетический полиморфизм ВоХА-антигенов у инФинированных ВЛКРС животных. Группа животных, полоеттельных на вирусокоситель ство, но не имеющих гематологических, признаков лейкоза, занимает промежуточное положение и представляет собой группу риска, т.е. из этой группы часть животных заболеет лейкозом, другие останутся рдороБыми. Однако и в этой группе наблхщыотся те se различия

ю сравнению о положительными по гематологии, что и у группи ?доров!сс, но несколько болпе сглаженном виде. От эдоровкх животик эта группа отличается тенденцией увеличению антигенов А 8, [I. 15.

3.5 *J>c^бш^г^г'l■PJl£пшмolшдJшиг.'>^^oя гротодррмегерчооти ;с

,-:;-|..)т;1[1Х болыплс масштаб, Еипотгахе, бг\льяно маститом /Гем "+•", ГЧ'Л"-"/, отличг.стол от эцоровпх элиминацией антигонов ВоХА А 12,4,. Г5,1б, ьиявляемых в обн-ой популяции лга]>оцитов. От животных, больных -Чктси, она отлячсктсл достоверным уменьшением частоты ветре-члшпоги ВоЬА-штигеня А 15 и увеличением экспрессии антигена А9. Япстоиораио р"1'1Л!гг,'я и ¡\чспродолеияи антигенов в об^оЙ испулпцг.и, ¡а. В-димГ-спитох, на Т- ч "О" клетках не выявлены.

.. -П^п 1ПЛ0НИЛ .....а. зат«?.И»ЙСТК ОТ рочраст» '•!

[^•■"1!...""Л "-1" ?!;потпух я хозяйств д уровнем,«даТ/лциропянисотн лромш:пьчррм ч(С возрастом т» стада из числа больнкх лейкозом я шп-тшрогашшх Е1КРС животных элиминируются носители ВоХА-антк-гена Л1, что подтверждается критерием соответствия ^ . Одновременно увеличивается число носителей антигенов А 2,3,14,13,17,10, 20. Отмечается тенденция к возрастанию числа животных, имеплих а ('онотипе антигены А 5,8,9,11,12.

4. Интегральная оценка иммуногенетического статуса животных, определяемого набором РоХА-антигенов. В таблице 2 приведено количество животных, предрасположенных к заболеванию, резистентных и число неопределённых решзшШ.

Па обученной выборке полином обеспечивает 64Я правильных решений, ошибка составляет ¡36/6. Статусметрическая обработка результатов ВоЬА-типирования больных лейкозом животных' с подтверждённым патомор-Тюлогическим диагнозом подтвердила предрасположенность животных к развитию заболевания в 71% случаев, дав неопроделён-

них и 26% ошибочных решений.

2. Результаты интегральной оценки иммуногенетического статуса животных

Количество животных, % Группы животных ' у •—--

• • • /< ' «Су^^^ ^

I. Здоровые 38 29 68 3

2. Подозрительные на лейкоз 56 37 59 4

3. Больные лейкозом 90 60 33 7

4. С подтвержденным иатомор-

Фологическкм диагнозом 31 71 26 3

выводи

1. Популяция животных, свободная от ЕЖРС, характеризуется нанбо шей частотой следупяих антигенов Во1А-системы: Л 21, 20, 15, 16. Наиболее редко встречается антиген А 8. Аналогичная тенденция пр слеживается в распределении антигонов на субпонуляции В-лга.гЬоци-тов и совокупности Т- и "0" клоток.

2. В инфицированном ЕЛКРС стаде коров наибольшее распространение имеют антигены Во1А-системы А 20, 15, 24, 21, 19, 3, II, 4, 8 и наименьшее - антигены А 9, 12, 6. Инфицированные ВЛКРС животные занимают промежуточное положение медцу здоровели и полояктелышм по гематологии, представляя собой "группу риска" заболеваемости лейкозом. От здоровых животных их отличает тенденция к увелпчеш! экспрессии антигенов А 8, II, 15.

3. На основе использования методов статусметрии и гистологически исследований выведена функциональная модель Елмуногонетического статуса исследуемой популяции крупного рогатого скота. В результате . антигены ВоН-системы распределены на благоприятные /А 17, 22, 13, 9, 19, I, 16, 12/ и неблагоприятные /А 2, 10, 7, 23, 18,

3,3. 4, 24, 5, 6/.

, У животшяс, большое лейкозом с подтвердценным патоморфологичес-ям диагнозом, в обдей популяции лимфоцитов наиболсо часто ветре-иотся ннтигони Во1Л А II, 4, 24, 15, 20, 3, 18, 8, 20, 5, 7 /не-лагоприятнно/ и наиболее редко А 9, 17 /благоприятные/. Совокуп-г>сть Т- и "О" клеток характеризуется наибольшей частотой нМлаго-риятних антигенов ВоЬА А 4, 15, 24, 18, 20 и наименьшей частотой 7, 17, 0. На субпопуляции В-лимфоцитов наибольшее распространено иг.оют неблагоприятные антигены Во1А А 24, II, 15, 18; редко стречамтся антигены А 7, 9, 22, 17, I, 5.

. Па совокупности Т- и "0я клеток по сравнению с обшей популяций II еуС'Популнциой В-лим'Гоцитов снижена экспрессия антигена А II

Я. 2,

• ^-.о-лютствонно^ = З.^ЗО; У ■= 4,283; Р <0,05/,отмечается теп-•пция к пошшеин'г частоты А 5 антигона. На В-лимфоцитах наиболее пего к-.трочнлен А и ант:'.гон по сравнению с Т-клетками /^^>=9,894/. . Установлена ассоциативная связь с заболовасмостью лейкозом ;оЬЛ-;штигонои А 8, II, выявляемых в общей популяции лимфоцитов 4,'.'05; «А =з,(Ч7 и^=4,125; ЯЯ=3,220 при Р<0,05/ и антиге-[а А 0 на В-лимТюцитах 19,470; КЯ= 2,182; Р< 0,001/.

'. Г.шютныв, больше маститом, отличаются от здоровых элиминацией !о1Л-антигонов Л 4, 12, 15, 16, а от больных лейкозом - уменыаеки->м частоты встречаемости антигона А 15.

!. С возрастом из популяции черно-пестрого скота с уровнем инйицц-юпанности ВйКРС более 9(# элиминируются инфицированные и больные юйкозом носители Во1А Л I антигона, возрастает число носителей штигепов Л 2, 3, 14, 16, 1?, 18, 20. Отмечается тенденция к увеличению числа Гем "+" и РЦД "+" животных, имеющих в фенотипе анти-:ены Л 5, 8, 9, II, 12.

ПРЛКТИЧгСШ ПР1ДО1М1ИЯ Полученные дишш о гсне-тическш пояягорфизме серологически определяемых вот: ""еиов г истое оемо сткыостм, а также данные о реуис течтностц и предрасположенности к лейкозам животных, обладающее определенным шбороы Бо1А-антигонов I класса, дают возмоглость в конкретном хозяйстве выделять группы "поименного' ркска" развития болозни с долью осуществления генетического контроля резистентное ти к лейкозу.

1. Павленко С.П., Ларцева С.А. Генетический полиморфизм по ВоЬА-йнтигеиш в генетических группах черно-пестрсго енота //Проблемы лейкоза и пн^екадоннис осболевонш! с.х. анвотных: Межвузовский сборник научных трудов."!оск. иет. академия 1Ш.К.И.Скрябина, 1988.-С.39—14.

2. Слепчснко А.Р., Павленко С.П., Ларцева С.Л. Исследование генетических маркеров ВоХА-системы у разных пород крупного рогатого окота // Там хе.-С.35-39.

3. Распространение антигенов гистосошестимости в генеалогических группах черно-пестрого енота / Т.П.Виль, Л.Р.Слепченко, С.П.Орсш-кяна, С.А.Ларцева // Достижения ветеринарной пауки и практики по повышению продуктивности с.х. тшвотшк: Теоретические и практкчео кие вопросы д&етеркнарии.-Т.И: Шйекцлошие болезни.-Тарту.-1988.' С.126-126.

Перечень опубликованшк работ