Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Антигенность, иммуногенность и противоэпизостическая эффективность агглютиногенных вакцин в разных дозах при бруцеллезе крупного рогатого скота

российская академия сельскохозяйственных наук сибирское отделение адзтшт экспериыешальноя ветеринарки сибири и дальнего востока

На правах рукописи

русаков юрия валентинович ■ удк 610; 616.98:679.841.93б-084:636,2

антигешюсть, иммуногенность и проиюсшезоотическая ' эмекглвность мтжшюгеншх вакцин в разных дозах при бруцеллезе крупного рогатого скота

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Новосибирск 1991

Работа выполнена в отделе по разработке мер борьбы о бруцелле-вом Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Сибирского отделения Российской академии сельскохозяйственных наук.

Научные руководители: профессор, доктор : ветеринарных наук И. А. Косилов, профессор» доктор Ветеринарных наук С. И. Джупина

Официальные онпонентш член-корреспондент РАСХН, профессор, доктор ветеринарных наук, ЕВ.Сочнев, профессор, доктор ветеринарных наук Н П. Иванов

Ведущая организация: Киргизский научно-исследовательский Ветеринарный институт

Зашита состоится 1991 г. в/6 4 на

Заседании специализированного согета $0.02о.УЗ О! Институт экспериментальной•ветеринарии Сибири и Дальнего Востока (633128, Новосибирская область, п. Нраснообск, Сибирское отделение РАСХН, ИЗВСиДВ).

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНСХВ Сибирского отделения РАСХН. .

Автореферат разослан "¿9 " й,. /гуу^/г, ? 1991 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат ветеринарных наук

• \

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

В комплексе мер по ликвидации бруцеллеза особое место от-дится специфической профилактике. П. Ф. Здродовский, П. А. Вер-лова, X. G. Котлярова, М. к. Юзкавец, П. R Яйваник, П. А.Триленко, С.Орлов, 'НС.Уласевич, И. А.Коснлов, К.В. Щгмилов, КЛЮалма-в, ILIL Иванов и многие другие исследователи внесли значи-лынй вклад в решение этой проблемы, изыскивая новые и со-ршенствуя существующие средства и методы.

Для иммунизации крупного рогатого скота против бруцеллеза настоящее время регламентировано две вакцины: причем одна из глютшгагенного штамма В. abortus 19, вторая из слабоагглютп-гениого В. abortus 82. Одновременно в производственном испы-,шш находится вакцина из штамма В. abortus 1Q4M, предложен-,Н в БО-е гг, X. 0. Котдаровой.

Ряд авторов (Е.С.Орлов, НС.Уласевич, М.М.Иванов, К.ЕШу-¡лов и др.) считают, что агглютиногенные штаммы отличаются ' 1 слабоагглгеиногенных более выраженной иммуногенностыо, ста-[льностыо свойств и наличием четких и надежных маркеров. Од-iko длительные серопозитивние реакции у животных при примене-[И этих вакцин ограничивают их использование, особенно на рослом поголовье, затрудняя проведение диагностических исс-дований,. тем самым делая их малоэффективными.

За рубежам P. Hicaletti (1978), 6,й Alton, L. A. Corner 980-1983), A.W.Plommet (1984), К. V/.Confer (1985), W.Beckett, S.C.Mac Dlarmid (1985), V.F.Ceoilo et al. (1986), в нашей стране К В. Шумилов (1979), II С. Уласевич, В. А. Рома-iB (1983), М. 11 Ломинейшвили (1985), М. И. Искандеров (1986), И. Шняасов (1986), А. М. Лим (1987) и другие сообарот о том, о после использования вакцин из штаммов 19 и 104М в малых >зах на крупном рогатом скоте серопозитивние реакции угасают., :ачктелыга быстрее и при этом не снижается напряженность им- . 'нитета.

• Все вышесказанное выдвигает необходимость сравнительного ¡учения.малых доз агглютиногенных вакцин из штаммов 104М и 19 эксперименте, лабораторных и производственных условиях.

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось изучение агглюпшогенностн, иммуногенности и противозпи зоотической эффективности агглютиногенных вакцин в разных до зах прп бруцеллезе крупного рогатого скота в лабораторных и производственных условиях. Исходя из этого ставились следующ задачи:

- изучить агглютиногенность вакцин из штаммов 104М и 19 сравнительном аспекте после первичного введения полной дозы : повторного - малой дозы;

- изучить иммуногенность вакцин кз штаммов 104М и 19 в ' различных схемах; ■

- изучить противоэпнзоотическую эффективность ¿акции из пггаммоп 1Q4M и 19 при различных схемах иммунизации.

Парная новизна, в сравнительно!.: аспекте изучены две аг: люгшюшшые вакцины из .штаммов 104М и 19, в том числе при примзнении их в малых дозах. Показаны степень их аггдшиноге: ности после вакцинации и .'ревакцинации, иммуногенность в различных, схемах и протлвоэпизоогическая аффз{егшцюсть, Устаиов гено преимущество вакцины из штамма. Б. abortus 1041.L

Практическая ценность работы. Полученные данные позволя, дать сравнительную оценку .эффективности вакцин из штаммов 10 и 19 в различных" схемах профилактики бруцеллеаа крупного рог-того скота, дополняют сведения о вакцинном штамме В. abortus 104!.i, полученные в производственных условиях» и дают возможность определить оптимальные меры профилагаики и ликвидации бруцеллеза крупного рогатого скота.с использованием специфической профилактики. . . . ' . ,., Апробация работы. Материалы диссертации доложены на:

- научно-теоретической конференции, посвященной памяти П.Д. Цкгько, оам. директора института, канд. mi, наук (Новосибирск, 1937 г.);

: - региональной конференции исполнителей НИР по проблеме бруцеллеза сельскохозяйственных животных в регионе Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1987т.); i - региональной научной конференции "¿Ьлодыо ученые Сиби и Дальнего Востока ветеринарному обеспечению Продовольственн программы" (Новосибирск, 1987 г.);

- региональной научной конференции "Проблемы инфекционной яологии сельскохозяйственных животных" (Новосибирск, 193В г.);

- Всесоюзной конференции "Актуальные вопросы профилактики >уцеллеза и организации медицинской помощи больным (Ново-[бирск, 24-25 октября 1989 г.).

Публикация. По материалам диссертации опубликовано 4 ■атьи и 1 находится в печати.

Объем-и структура диссертации. Диссертация изложена па ¡6 страницах машинописного текста и-включает введение, обзор (тературы, собственные исследования, обсуждение результатов, шоды, практические предложения, список литературы и прилике-ш. Работа содержит 7 таблиц и. 6 рисунков. Список литературы сличает 250 'источников, из них 40 иностранных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Штериал и методы исследований

Научно-исследовательскую работу по сравнительной оценка . жцин при бруцеллезе крупного рогатого скота выполняли в со-рветствии с заданием ГУВ МОХ СССР (письмо М 1652-22 от 15 мая 385 г. "О производственном испытании вакцины из штамма 104М в эавненйи с 19").

По согласованию с ветотделом Новосибирского сблагропрома збота проводилась с 1985 по 1990 г. в отделе по разработке эр борьбы с бруцеллезом с.-х. животных, на экспериментальной 1зе ИЗВСиДВ СО РАСХН, в Убикской районной ветеринарной лабо-атории, в благополучном по бруцеллезу крупного рогати'о скота элхозе им. Ленина и неблагополучных совхозах "Борисоглебс-ий" и "ВладимировегаШ" Убинского района Новосибирской облас-

Испытуемую противебруцеллезную вакцину из штамма 104М поучали на Алма-Атинском, базовую - из штамма 19 на Щелковской иокомбинатах. . -

Агглвтиногенные свойства вакцины из штамма 104М в сраане-ии с вакциной из штамма 19 изучали на и^муниаировацша .полци-я дозами (80 млрд м. к.) телочках 2-6-месячного возраста и

- Б -

далее на ревакцшшрованных за два месяца до осеменения малым дозами (3 млрд м. к.). Всего для изучения динамики первичног и вторичного иммунных ответов использовано 1070 животных.

Вакцину из штамма 104М вводили согласно наставлению о и рядке ее производственного испытания, утверлщещюму ГУВ МОХ . СССР 28 марта 1985 г., а вакцину из штамма 19 - согласно нас тавлении, утвержденному ГУВ ШХ СССР 27 апреля 1983 г.

Для определения агглюгиногеиных свойств испытуемой и . контрольной вакцин сыворотки крови опьггных животных на 15, SO, 180 и 270-й день после вакцинации и ревакцинации после-,, довали в РА, РСК, и РЕП с биофабричным антигеном до предель!« го титра, согласно наставлению по серологической диагностике бруцеллеза, утвержденному 30 декабря 1982 г. ГУВ МОХ СССР.

Аналогично изучали первичный иммунный ответ па введение вакцин из пггаммов 104М и 19 у 683 телочек в неблагополучных i бруцеллезу крупного рогатого скота хозяйствах.'

Напряженность иммунитета определяли на 18 первотелках, привитых вакцинами из штаммов-19 и 104М по трем различным cxt мам. Для .контроля были завезены четыре здоровые непривитые ■Первотелки. Опытных и контрольных животных.заражали вирулентным штаммом В. abortus 54 в дозе 200 млн м. к. подкожно и за ними наблюдали в течение 30 суток. Сыворотки крови исследовали в РА, РСК, РВП.и РИГА с медицинским зритроцитарным диаг-ностикумом как перед заражением, так и поело - на 7, 14, 21 и 27-е сутки, 'to истечении этого срока всех животных убили, е отобранный баоматериал (селезенка, печень, почки, подчелюстные, заглоточные, предлопаточные, паховые, надвымянные, тазовые, гшогастральные и нарааортальные лимфоузлы) подвергли бактериологический исследованиям, с высевами на НППГГЕ и ИППГГА.с выделением, идентификацией и дифференциацией культ$ бруцелл по общепринятой методике.

Противозпизоотичэскую эффективность вакцин из агглюгиногеиных штаммов В. abortus 104Ы и 19 изучали в неблагополучньа по бруодалеау крупного рогатого скота хозяйствах. Эпиаоотичес кую ситуацию внюс исследовали методом ретроспективного аналг натвриаюа ветеринарной отчетности районной ветстанцин, ветлг бораторяя it.непосредственно хозяйств. Шлучеиные результаты.

атистически обрабатывали по методике И. П, Аимарина с соавт, 371) и В. JLВоробьева (1088),

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

' Агглюгиногонность вакщщ пооде' первичной иммунизации

Способность вакцин сталировать синтез антител после эвичной иммунизации изучали на здоровых телочках 2-б-месяц~ го возраста из благополучных по бруцеллезу ферм, Для этого зледовали сыворотки крови в РЕП, РА и РСК через 15, 90, 180; 5 и 360 дней после вакцинации. РА ставили в разведениях от ' 50 до .1:1600, а РСК - от 1:5 до 1:640. . ' У телок благополучных .ш бруцеллезу ферм на 1В-й день зле прививки вакцины из штамма 104М РЕП была положительной у ,7X, РА - у 06,9 (средний титр 248 МЕ), РСК - У 78, 6% живот-х (табл. 1). / ■ ' -•'•/;•'. ■

lía 90-й день число животных, реагирующих по этим реакод-, снизилось в 1,6-2 раза. К 180-му дню РА отмечена только у 17. животных, РСК - у 15,1, РЕП - у 63%., К'270-му дню РА ис~ зла, РБП и РСК сохранились только у 13,2Z ¡I 2,6% еоотвотс-. ВИНО. ■:■■■■■ ....... ¡.. .

Средний титр антител в РА' к 90-.чу дню снизился до 89 МВ, к 180-му - До 47 МЕ. -

У животных благополучных форм, привитых вакцвдой из штцм* 19, па 15-й день после прививки положительная РА была yi ,3% (средний титр 347 МЕ), РБП - у 89,9, РСК - у 76,4%. './'На 90-й день РА сохранилась у 36% (средний титр 61 МЕ), , 180-й - у 6,8 (средний титр 5Q МЕ)-, а на 270-й день ее от* чали только у 1,7% животных. л'у

Исследования сывороток крови в зти же сроки от кивотниаЦ нвитых вакцинами из штаммов 104М и 19, в неблагополучных хо-йствах показали более низкий (количественный и качественны^' овеиь серологических реакций. ; ■ . : г;

Особенно интересные данные получены чореа 15 дней посла ццинации/ ..-■", / ' '", • '::'-,:V'' " /.• V,

Так, РА была положительной ы 82.25 животных, '«»пригых-

Таблица 1

Результаты серологических исследований сывороток' крови телочек после первичной иммунизации лротявобруцедезкыми вакцинами в благополучных стадах

Срок исслед. Исследо- Р е а г и р о в ало в

после вакци- вано го- Ш1 I РА I та

нации, дни лов поло;я1Т. | х ¡поделит. | 7. |ср. титр, 1'Л (положит. | % .

' Штамм '■ 104М

15 290 265 / ' 91,7 . 281 96,9 243 228 73,6

90 127 75 59,8 31 24.4 89 69 54,3

180 ; 126 8 6,3 9 7,1 47 19 15,1

270 38 б 13,2 -- 1 2,6

: ■ ; Штамм 19 --' • " :. "

15 281 - 250 88,9 - 251 89,3 347 212 75,4

90 ; 139 111 79,0 50 35,0 • 61 . 109 73,4

180 133 ■ 27 . 20,3 9 6,8 50 28 21,0

270 59 13 22,0 1 1,7 100 б 10,1'

кцгаюй из штамма 104М, и у 81,77. - из штамма 19; РБП - соот-гственно у 87,9 и 78,7%; РСК - у 67,9 и 80,27., Таким обрам, не ответили выработкой агглютининов в. этот срок 17,8% житных, привитых вакциной из штамма. 104М, и 18,3% - из шла 19, -

Из приведенных материалов очевидны преимущества вакцины штамма 104М при первичной прививке телок в 2-6-месячном зрасте перед вакциной из штамма 19:

- в более высокой реактогенности на 15-й день, гарантиру-,ей объективность использования для выявления толерантных житных; : ' '

- в более быстром исчезновении серопозитивпости, снимаю-м препятствия для последующей поствакцинальной диагностики.

Агглютиногенность вакцин при введении малых доз по иммунному фону, созданному полными дозами

Способность вакцин из штаммов 104М и 19 в'малых дозах I млрд м. к.) отштудировать синтез антител при их повторном едении изучали на телках (за два месяца до случки), отрица-льно реагирующих на бруцеллез, ранее иммунизированных полны-[ дозами этих же вакцин.

В качестве контроля (без реинмунизации) использовали 20 лок, привитых в 2-6-месячном возрасте полной дозой вакцины | штамма 104М, и 18 телок, привитых вакциной из штамма 19.

Посредством РБП, РА, и РСК исследовали сыворотки крови 1ытных животных через 15, 90, 180, 270 и 360 дней. РА ставили разведениях от-1:50 до 1:6400, а РСК - от 1:5 до 1: 640.

В период наблюдений ревакцинированных и неревакцшшрован-к животных содержали вместе. Через два месяца их осемени-

Из табл. 2-видно, что на 16-й день в группе животных, им-гнизированных по схеме "штамм 104М полная доза + штамм 104М тая доза", 100% животных реагировали положительно по РА, РСК РБП. Средний титр б РА составил 145 МЕ.

Через 90 дней после применения вакцины по этой схеме я

:ТаЗлицз. 2

.Результат серологических, исследований'сывороток крови ; телок, реиммункзироЕшаыг малыми "дозами вакцин из штампов Ю4М и 19

Срок во- Иселедо-I Р ear и о о в а л о в

след. пос- ваш го-| mi РД I FCK

ла вакц., дни > лов; - | всыкшпг. , 7. положит. Z )средний |положит. |титр, ME I 2

Штамм 104М полкая-доза + штамм 1Q4M малая доза

15 90 180 270

::. Шгаш'19 полная доза +■ штамм 19 малая доза

15 261 • 258. 98,8 243 93,1, -199 ; : 256 98,1

90 . ' 63 ' 24 38,1 6 9,5 .50 ■ 9 14,3

1804 . 59 . 2 - 3,4 "■ з. 5-.1 . 50 . 5 " 8,5

270 . *. 37 1 2,7 1. 2,7 50 Т . -

Схеш иммунизации.' •■

'238 '238 100 238

47 . ; 14 , 29,8 1

■■'■'' 50 ■ . ' • : -

42 . -

100 145 238 . -100 " 2,1 50 3 ; 6,4

5БП серопозитивные решсции сохранились у 29,8 % животных, в ЮК - у 6,4 и в РА - у 2,1%. Средний титр в, РА составил 50 М, '. е. ниже, диагностического. Всего же через 90 дней реакции охршшлксь у 33,3% привитых телок.

К 180-му дню животных,' реагирующих по указанным.тестай, о было. На 270-й день реакции' тоже не проявились. "'

В группе животных, иммунизированных по схеме "штамм 19' олная .доза + штамм. 19 малая доза", серопозитивной через 15 ней РВЕ бита у 98,8%, РСК - у 53,1 и РА - у 93,1 % 'животных:; редний. тигр в РА составил 199 мв. л .

На 90-й день титр" реакций снизился," но 49,5% животных реа-йровалш'положительно. Так, реагирующих.в РБП оставалось 38,1%, РСК - 14,3 и в РА - 9,5% (средний титр - 50 МЕ). ..;■.';

. К 180-му дню'.пологмтельная РЕП сохранилась у 3,4%, РСК 8,5 и РА. - у 5,1% животных (средний титр - 50 Ш)> К 270-му ий реагировало в РБП только-одно животное (у него же отмечена Л В титре 50 Ш). >

На протяжении опыта в контрольных, группах (неревакциниро-эдных) РБП, РСК и РА были.отрицательными. 07'

: Следовательно, после реиммунизации телок.малымй дозами, : рглютиногенных вакцин за два месяца до осеменения на 1б-й знь показали положительные реакции по комплексу тестов (РБП,' \ и РСК) 100% животных первой группы (штамм 104И псиная: ,/^л )за + штамм 104М малая доза) и 93,1-98,8% - второй (штамм 19 Ш!ая деза + игами 19 малая доза).' .:; .>::.. , ; ; -К 90-му дню реагировало, соответственно 38,3 и 49,5% яи-)ТНЫХ обеих групп. . . "'••' ; .. ;'-/ '^Й-

К 180-му дню в первой группе полнссть» угасают нммуноло-!чес!ше реакций, а во второй они, Сохраняются у единичных юь иных до 270-го дня. },' :

Тагаш образом, агглютишгеняоеть штамма 104Н.выше, чем ■амма 19, в первый сроки после прививки. В последующем; пост-йциналыше реакции угасают а обратной последовательности.,,

Пэсде одно!фатной илмуяизации в возрасте 2-6 месяцев, волной из штампа 104М животные полностью утрачивали соропози-вность к о месяцам. У телок, приветы* вакциной из твщв119, мунологическиэ реакции к этоиу с|хжу сохрайшсЬ ё РА

t,7Z, в РСК - у 10,1% привитых животных.

После реиммунизации, т. е. повторного введения этих же вакцин в малых дозах (3 млрд м. к.) животным за 2 месяца до случки, вторичный иммунный ответ был ярко выражен на 15-й день в обеих группах. К 180-му дню иммунологические реакции угасли полностью у животных, реиммунизированных вакциной из штамма i 104М, а у роиммупизированных вакциной из штамма 13 серопози-тивные реакции еще сохранялись у единичных животных до 270-го дня.

Изучение иммунитета при применении вакцин из штаммов В. abortus 104М и 19 по различным схемам

Иммуногенные свойства вакцин изучали в эксперименте на 18 первотелках через 3-4 месяца пооле первого отела. Контрольными были 4 первотелки, ранее, не иммунизированные противобруцеллез-ными вакцинами. После 10-дневного гарантирования всех опытных и контрольных животных заразили предварительно изученной вирулентной культурой В. abortus 64 в дозе 200 кон м. к. в объеме 2 мл подкожно в области средней трети шеи.

На 7, 14, 21 и 28-е сутки после заражения сыворотки'Kposf от указанных животных исследовали на бруцеллез по РА, РСК,РБП И РКГА. . 1 ' ■

На введение вирулентной культуры В. abortus 54 серологически ответили все животные опытных и контрольной групп, при этом, динамика реакций была различной. На 30-й день после заражения их убивали.

Бактериологическими исследованиями органов и лимфоузлов от зараженных животных установлено, что в первой и третьей группах заразились по две первотелки; а во второй - только од на. 3 контрольной группе заразились все животные.

Таким образом, в группах животных, реиммуниэированных ма лыми дозами вакцин из штаммов 104М и 19, иммунитет через 11-1 месяцев после реиммунизации оказался равноценным, т. е. он Оь обнаружен у 66,6% животных. В нереиммукизировашюй группе иммунными были 83,52. первотелок.

Для окончательных выводов о целесообразности ревакцинаций малыми дозами агглкяиногенных вакцин в указанные выше сроки нужны дополнительные исследования.

Изучение противоэпизоотической эффективности вакцин из штаммов 104М и 19, примененных по различным схемам

Изучение противоэпизоотической эффективности применения, загадан из штаммов В. abortus 104М и 19 по различным схемам доводилось с июня 1985 по июль 1990 г. в контролируемых про-1зводственных опытах на базе неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота совхозах "Владимировский" и 'Тэрисог-' небский" Убинского района Новосибирской области (табл. 3).'

ГГротивозпизоотическая эффективность вакцины из штамма 1 . 04Н в схеме "полная доза + малая доза". На ферме с. Ксеньевка ¡овхоза "Владимировский" б 1982-1934 гг. заболеваемость коров Зруцеллэзом составляла в среднем 36%. На таком фоне была пройдена реиммунизацин вакциаой из штамма 19. При исследовании . соров через 2 года после реиммунизации (1987 г.) выявлено .4,2% положительно реагирующих, в том числе я в высоких1 тиграх 'А. Среди первотелок в 1937 г. перед вводом животных опытных ' ■рупп выявлено 33,3% положительно реагирующих.

■ За период опыта вакциной из штамма 104М в полной дозе [ривили 1072 телочки 2-6-месячного возраста и реиммунизировал» еред случкой 241, в том числе в 1937 г.- 99, в 1938 г. - 142.

В 1988-1989 гг. в группы коров вводили по несколько подо-ытных животных. Всего за весь период введено 38 подопытных етелей, из которых положительно рсагировапи 3 (3,4%). а тот же период положительно прореагировала 71 корова, или 2,2 % от дойного поголовья (без опытных). Ш мере заме прения тарых.коров молодит первотелками а нетелями в'общем но хо-яйству количество положительно реагирующих уменьшалось и при оследнем исследовании составило в голов, что в 8 раз меньше, ем перед опитом, т.е. три года назад.

Таблица

>5эяйет£о,- ферма

Противозгшзоопгееская эффективность применения вакцин из штаммов 104Ы -и 13 }Год

Поголовье коров

- Ввод нетелей Результаты исследований-

ясего ■ В1.Ч Кратность Положительно оеагировало

подопытных исследов. коров и нетелей коров . % - нетелей и растеливш. "первотелок %

с-а "£аадилшровский" с. Ксеньевка ■

С-а "Борисоглебский" с. Центральное

С-з "Владиыировекий" с. Щушковка

С-а "Борисоглебский" .с. Бадлесное

¡2гаш104М полная доза + Штамм 104Ы малая доза

1087 335

1983 315

.1989 322

1987 520

1988 500

1989 '5В8

2А 39 49

158 198 111

39 49

190 111

3 3 3

3 3 2

-54 9 8

104 23 10

16,1 2,8 2,4

20,0 3,8. 1,7

Штамм 19 полная доза + штамм 19 малая доза

"1987

1988

1989

1987 -1988 1989

8

1 «>

: 24 , 4

33,3 2,5 2,3

15,2

/3,6

91 18 3 9 9,9 4 22,2

99 20 20 4 7 7,Г — • -

103 18 .18 3 9 8,7 ■-7 з '.■•. 16,6

314 ' 92 4 . 29 '3,3 9 9,8

300 105 95 3 10 ' 9,5 2 ■ •2.1

чЗОО 71 71 2 5 1,7 .; . 3 ' . 4,2

Схема иммуниз&ции.

На ферме с. Центральное совхоза "Ворисоглебс!Шй" в тече-ие 1982 г.' серологическими исследованиям! выявлено 12,9% газов, положительно реагирующих на бруцеллез. К 1984 г. заболе-аемость резко возросла: при 'трехкратных исследованиях выявили 3,6% коров, положительно реагирующих на бруцеллез. В 1984 г. зеле изоляции реагирующих коровы на' указанном фоне были реим-лшзированы вакциной из штамма 19. К. их исследованиям вновь эистулили в конце 1986 г. До конца 1987 г. при шестикратных ¡следованиях выявили положительно реагирующих 26,7% коров, в )м числе с РА в титре 400 ЫЕ - 9,3 и в титре 200 ME - 8, 6%.

Среди первотелок в 1985 г. - пололятельно реагировало 43,'5% i числа-исследованных, в 1987 г. (на момент введения в общее адо животных опытных групп) - 15,2%.

Всего за период опыта вакциной из штамма 1Q4M в полной зе привито 766 телок 2-б-месячного возраста, реиммупизиро-но перед случкой 4M телки, в том числе в 1986 г. - БО, в 87 г. - 189, В 1988 Г. - 205.

В 1988-1989 гг. в общие стада коров вводили первотелок и гелей группами по 30-50 голов,, привитых по схеме "штамм 104М зная доза -китами 104М малая доза". Всего sa этот период . зли 301 животное, из них положительно реагировали 4 (1,3%). эртов в опытных группах не было. Среди коров sa этот зш срок га Выделено 137 больных животных (22,8%). ' Прртивозпизоотаческая эффективность вакцины из Штамма 19 ;хеме ."полная доза + малая доза".. К 1984 г. после рейммуни-ПШ коров вакциной из штамма 19 заболеваемость бруцеллеаом 1 ¡ди маточного поголовья фермы с. Щушковка совхоза "Впадими-юкий" составляла 28,5%. В 1987 г. положительно реагировало ZZ коров. Из числа первотелок в этом же году выявлено 22,2% шитедьно реагирующих. -

Бакшшой из штамма 19 в полной дозе первично привито 245 очек 2-6-месячного возраста, реиммуняаировано перед случ-отой -та Вакциной в малой дозе 192. Введено в маточное ета-38 опытных первотелок я нетелей. Из них положительно pearií-али 3 (7,9%). Sa этот срок среди корез выделено "25 поло.та-ыго реагирующих (25%).

. На ферме р. Подлэсное совхоза "Борисоглебский" к 1984 г. заболеваемость коров бруцеллезом достигла 22,5%. В 1987 г. пссле реиммунизации вакциной из штамма. 19 положительно .реагировало-на бруцеллез 12,4% коров. Среди первотелок перед началом опыта (1987 г.) выявлено 9,8% положительно реагирующих."

Всего за 1985-1988 гг. привито полной дозой вакцины из штамма 19 487 телочек 2-б-меспчного возраста, ревакцинирова-но малой дозой этой же вакцины 265 телок перед осеменением. В. общие стада коров в 1987-1989 гг. введено 166 первотелок и нетелей, группами по 30-50, голов, из которых положительно реагировали 5 (3%). Абортов среди опытных животных не было. Поло жительно реагирующих коров выявлено 44 (14,7%).

Таким образом, сопоставляя заболеваемость животных дойного стада до и после введения в.гурты подопытных нетелей, привитых по схемам "штамм 104М полная доза + штамм 104М малая доза" и "штамм 19 полная доза + штамм 19 малая доза", можно отметить, что ¡шунизация животных указанными вакцинами способствовала купированию инфекции. Кроме того, прослеживалась более выраженная эффективность от применения вакцины из шташ 104М, поскольку за весь период опытов количество реагирующих стадах первотелок, привитых этой вакциной, было в 2 раза меш ре, чем в аналогичных условиях у животных, иммунизированных вакциной из штамш. 19. Коэффициенты снижения интенсивности проявления эпизоотического процесса (заболеваемость) в групп; животных, где применяли вакцины из штаммов 104М и 19, были а отвеютвенно 84,7 и 41,2.

4. ВЫВОДЫ

1. Агглетиногенность вакцины из штамма'.104М по сравнен!! с вакциной из штамма 19 более выряжена лри исследовании эдор вых телок благополучных по бруцеллезу ферм в первые 2-3 неде после прививки (соответственно 96,9 и 89,3%).

2. В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах до 17,8-19,0% телочек, привить« вакциной из штамма 104М, не от: 'чает выработкой антител при исследовании их в РА на 16-20-й дни после прививки.

3. Шствакщшальные серологические реакции (РД, РСК, РБП) f животных, привитых вакциной из штамма 104М, угасают раньше [к 9 месяцам), чем у иммунизированных вакциной из штамма 19, зредн которых к указанному сроку реагирует до 10% местных.

4. После реиммунизации телок за 2 месяца до случки вавди-1ами из штаммов 104М и 19 в малых дозах (3 млрд м. 'к.) вто- , шчныЯ иммунный ответ на 15-й день более вырахек в группе зт-ютных, привитых вакциной из штамма Ю4М.

5. Угасание поствакцинальных, серологических peamuift в •руппе животных, ревакцинированных в малой дозе вакциной из ¿гамма 104М, наступает-значительно быстрее (к 180-му дню), чем ' телок, реиммунизированных аналогичной дозой вакцины из штам-ia 19 (серопоаитишше реакции сохраняется у единичных животных ;о 270-го.дня).

6. В эксперименте у животных, привитых по схемам."штамм 04И полная доза + штамм 104И малая, доза" и "штамм 19 полная оза + mraj,LM 19 малая доза", через 11-13 месяцев после реимму-изации иммунитет при искусственном заражении вирулентной ультурой В. abortus 54 (200 млн м. -к.) оказался по напряжен-dctii равным 66,6%. Вместе с тем, в группе животных, которых" рививаля в 2-6-месячном возрасте вакциной из штамма 104.!,! пер-ячно полной дозой и не•■ реиммуниаировали, напряженность и?му-, стета 01сазалась несгалько выше - 83,3%.

7. Противоэпизоотическал эффективность схемы иммунизации «ютных. против бруцеллеза, предусматриваю^ прививку вакци-зй из штамма 104М в полной дозе телочек текущего года ровде-1я и реиммунизации малой дозой этой же вакцииы аа два месяца > случки, в .контролируемых производственных опытах оказалась 2 раза вше, чем при применении вакцины из штамма 19 по ана-1Гичной схеме.

о. ПРАКТИЧЕСКИ^ ПРЕДЛОЖЕНИЯ '

На основе результатов экспериментов и производственных ытов, с учетом литературных дачных считаем целесообразным пользовать для создания грунтиммунитета у телочек текущего да роздеаия ватину из итамма 104М с последующей их реммыу-

низацией вакциной из штамма 82 по схеме, предусмотренной наставлением по ее применению.

6. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Русаков ЕЕ Изучение реактогенных свойств вакцин ьз штаммов Brucella abortus ШМ и 19 в различных эпизоотических'условиях // Вопросы эпизоотологии, диагностики и мероприятия па ликвидации туберкулеза и бруцеллеза животных: Сб. науч." тр. / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. ИЭВСиДВ. - Новосибирск, 1987. -

С. 117-120. ,

2. Иммунологическая реактивность телок после ревакцинации малыми дозами вакцин из штаммов В. abortus 19 и 104М / А. Г. Xni стунов, Ю. Е Русаков, Е Е Русаков, Е К. Щумилов // Диагностика и специфическая профилактика бруцеллеза и туберкулеза ж вотных: Сб. науч. тр. /ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. ИЗВСиДЕ - Hobi сибирск, 1988. - С. 16-19.

3. Иммунитет к бруцеллезу у крупного рогатого скота, реиммун оированного малыми дозами агглюгиногешшх вакцин / Ю. В. Русаков, А. Р. Хлыстунов, С. К. Димов, И. А. Иосилов, Н. И. Черкасская / Актуальные проблемы туберкулеза и бруцеллеза сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр. / ВАСХНИЛ Сиб. отд-ние. ИЭВСиДВ. - Новосибирск, 1989. - С. 77-79.

4. Димов С. К. , Русаков 1й Е , Хлыстунов А. Г.1 Роль агглклвдогЕ пых вакцин в повышении эффективности специфической профклага ки бруцеллеза крупного рогатого скота // Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медшдошкой помощи бо. ишл Тез. докл. Всесоюз. кокф. (Новосибирск,* 24-25 октября 1989 г.) - М., .1989. - С. 164-165.