Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Анаэробная энтеротоксемия поросят (этиология, эпизоотология, специфическая профилактика)

АКАДЕМИЯ АГРАРНЫХ НАУК РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

БЕЛОРУССКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ ИМ. С.Н. ВЫШЕЛЕССКОГО

УДК 619:616.98:579.852.13:636.4 г3 Г О О

1 3 НОЙ

БУБНОВ АНАТОЛИЙ ВАСИЛЬЕВИЧ

АНАЭРОБНАЯ ЭНТЕРОТОКСЕМИЯ ПОРОСЯТ

(этиология, эпизоотология, специфическая профилактика)

16.00.03 - эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

МИНСК ■ 2000

Работа выполнена в Белорусском научно-исследовательск институте экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского и Витебской ордена «Знак Почета» государственной академии ветеринар!-медицины.

Научные руководители:

* доктор ветеринарных наук, профессор, академик ААН Республики Беларусь Андросик H.H.

* доктор ветеринарных наук, профессор Максимович В.В.

Официальные оппоненты:

* доктор ветеринарных наук, профессор, академик ААН Республики Беларусь Ковалев H.A.

* доктор ветеринарных наук, профессор, Малашко В.В.

Оппонирующая организация - Гродненский государственный

аграрный университет

Защита диссертации состоится "Л6'п 2000 г. в

часов на заседании Совета по защите диссертаций Д 05.16.01. Белорусском научно-исследовательском институте экспериментальн ветеринарии им. С.Н. Вышелесского по адресу: 223020, г. Минск, i Кунцевщина, БелНИИЭВ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусскс научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии \t С.Н. Вышелесского.

___ •— f

Автореферат разослан ^ " г.

Ученый секретарь совета по защите диссертаций, доктор ветеринарных наук,

профессор • * // П.А. Красочко

/7?П.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы диссертации. Одной из причин снижения рентабельности животноводческих хозяйств Республики Беларусь являются инфекционные болезни молодняка ( H.H. Андросик, 1989; В.В. Максимович, 1994; А.Н. Ковалев и др., 1996; П.А. Красочко, 19*97; A.C. Ястребов, 1999).

Эти болезни могут вызывать рота-, корона- и энтеровирусы, различные бактериии и другие микроорганизмы. Среди болезней поросят с симптомами поражения желудочно-кишечного тракта, одно из важнейших мест занимает анаэробная энтеротоксемия (синонимы: анаэробная дизентерия, инфекционный некротический энтерит), вызываемая Cl. perfringens типов А, В, С, Д, Е, и F (А.Н. Куриленко, В.Л. Крупальник, 2000).

По данным отечественных и зарубежных исследователей анаэробная энтеротоксемия в неблагополучных хозяйствах поражает до i 00% новоро жденных поросят. Летальность от этой болезни среди животных достигает до 80% (И.Н. Хайруллин, 1991; Л.В. Семенов, 1999; С.Д. Панасюк, НЛ. Кружнов, Л.В. Кириллов и др., 1999).

Этиотропное и симптоматическое лечение поросят при клостридио-зах, как правило, мало эффективно. В связи с этим, ряд авторов (В.М. Львов, 1971; Ф.И. Каган, Л.В. Кириллов, 1976; НА. Ковалев и др., 1981; И.Н. Хайруллин, 1991; Л.В. Семенов, 1999), возлагают большие надежды на специфическую профилактику анаэробной энтеротоксемии у поросят путем иммунизации супоросных свиноматок.

С этой целью в последние годы неоднократно предпринимались попытки изготовления и использования монобиопрепаратов для активной иммунизации супоросных свиноматок против анаэробной энтеротоксемии поросят, вызванной Cl. perfringens типа С (И.Н. Хайруллин, 1991).

Однако промышленный выпуск биопрепаратов для профилактики анаэробной энтеротоксемии у поросят не организован, так как многие вопросы этой проблемы требуют дополнительного изучения и уточнения.

В связи с этим, рассматриваемая проблема представляется важной, а разработка высокоэффективных средств специфической профилактики, с учетом этиологической структуры болезни, является актуальной задачей и имеет важное научно-практическое значение.

Связь работы с крупными научными программами, темами. Работа является разделом Республиканской программы "Разработать и внедрить комплексные системы получения и выращивания здорового молодняка в Республике Беларусь" - регистрационный номер 01.9.10 036738 и составной частью темы кафедры эпизоотологии "Изучение эпизоотической ситуации по инфекционным болезням крупного рогатого скота и свиней в Республике Беларусь, совершенствование методов диагностики и специфической профилактики".

Цель и задачи исследования. Целью наших исследований являлось

разработка средств специфической профилактики анаэробной энтероток мии поросят.

Для реализации поставленной цели нами были определены задачи:

1. Выяснить некоторые эпизоотологические особенности и определ! роль различных типов С1.регй1п£еп5 в этиологии анаэробной энтеротоксем поросят в свиноводческих хозяйствах Республики Беларусь.

2. Сконструировать поливалентный анатоксин против анаэробной эн ротоксемии поросят, определить его оптимальные иммунизирующие до: сроки вакцинации и интервал введения для супоросных свиноматок.

3. Изучить формирование гуморального иммунитета у свиномат вакцинированных поливалентным анатоксином против анаэробной знте: токсемии и колострального иммунитета у полученных от них поросят.

4. Установить эпизоотологическую и экономическую эффективность лианатоксина против анаэробной энтеротоксемии поросят.

Объект и предмет исследования. Объектом исследований были сви матки и поросята из свиноводческих хозяйств Республики Беларусь, небла получных по желудочно-кишечным заболеваниям молодняка свиней. Пред том исследований служили - документация ветеринарного учета и отчетное данные эпизоотического, клинического и патологоанатомического прояг ния заболевания, патологический материал, культуры С1. регГпг^еш, кре сыворотка крови и молозива подопытных животных.

Гипотеза. В ряде свиноводческих хозяйств Республики Беларусь, с бенно на крупных комплексах, получают широкое распространение забол« ния поросят первых дней жизни, характеризующиеся катараль геморрагическим язвенным энтеритом, диареей и быстрой гибелью животн Устанавливая причину этой патологии у поросят, нами выдвинута пер часть гипотезы о том, что в этиологии желудочно-кишечных заболеваний росят могут играть определенную роль клостридии. Проведя эпизоотолоп ские, клинико-морфологические и бактериологические исследования были лучены результаты подтверждающие этиологическую роль С1. регГг^епБ пов А, В, С, Д в возникновении желудочно-кишечных заболеваний поре первых дней жизни.

После установления этиологической роли различных типов регЛ^епв в возникновении анаэробной энтеротоксемии у поросят, получ развитие вторая часть гипотезы о необходимости конструирования, получе и использования поливалентного анатоксина С1. регГг^епз типов В, С и Д специфической профилактики этого заболевания у свиней.

Методология и методы проведенного исследования. Для решения пек ленных задач исследования были проведены в два этапа.

На первом этапе мы считали необходимым у становить этиологичес фактор вызывающий патологию у поросят и изучить особенности тече

проявления и распространения заболевания свиней анаэробной энтероток-семией в хозяйствах различного типа Республики Беларусь.

Для этого нами проводились клинико-эпизоотологическое обследование свиноводческих хозяйств, патологоанатомнческие вскрытия трупов павших животных, бактериологические, токсикологические и серологические исследования патологического материала.

На втором этапе конструировали поливалентный анатоксин С). регМг^епз типов В, С, Д против анаэробной энтеротоксемии поросят и устанавливали его иммунологическую, эпизоотологическую и экономическую эффективности в неблагополучных по этому заболеванию хозяйствах.

С этой целью использовались клинический, патологоанатомический, гематологический, серологический и статистический методы исследования.

Научная новизна и значимость полученных результатов. Впервые в Республике Беларусь установлены эпизоотологические особенности проявления анаэробной энтеротоксемии свиней и определена роль различных типов С1. регИг^епв в этиологии этого заболевания.

Определена антигенная активность моноанатоксинов С1. регШ^е типов В, С, Д , установлены их оптимальные иммунизирующие дозы, учетом которых сконструирован соответствующий полианатоксин.

Впервые выявлено иммуностимулирующее действие моноанатоксинов С1. регАпт^епБ типов В, С и Д на выработку у супоросных свиноматок антител против токсинов, продуцируемых С1. регйтг^епз типа А.

Определены оптимальные иммунизирующие дозы полианатоксина, сроки и интервалы его введения супоросным свиноматкам. Изучена динамика гуморального иммунитета у свиноматок, привитых полианатоксином, определена напряженность колострального иммунитета у поросят, полученных от указанных свиноматок.

Установлена иммунологическая, эпизоотологическая и экономическая эффективность применения полианатоксина против анаэробной энтеротоксемии в эксперименте и производственных условиях.

Практическая значимость полученных результатов. Установлена степень распространения анаэробной энтеротоксемии в свиноводческих хозяйствах Республики Беларусь и определена этиологическая роль различных типов С1. регШ^епэ в возникновении указанного заболевания.

На основании проведенных исследований в соавторстве разработана и утверждена нормативно-техническая документация на «Вакцину против анаэробной энтеротоксемии телят и поросят» (Инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению, ТУ РБ 000284), утверждена ГУВ Госкомсельхозпрода БССР от 4 ноября 1990 года.

Подготовлена нормативно-техническая документация на "Полива-

лентный анатоксин С1. рсгГг1п»ег.з типов В, С и Д против анаэробной энтеротоксемии поросят" (Инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению), которая представлена для рассмотрения в Совет по ветеринарным биологическим и формацевтиче-ским препаратам при ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь.

„»Экономическая значимость полученных результатов. Рекомендуемый биопрепарат и метод специфической профилактики анаэробной энтеротоксемии, может быть использован в производственных условиях, для создания иммунной защиты поросят против анаэробной энтеротоксемии, что позволяет повышать их сохранность на 11,520,5% в сравнении с поголовьем, полученным от не иммунизированных животных. Коэффициент заболеваемости (Кз) снижается с 0,4 до 0,1, а экономическая эффективность применения биопрепарата составила 19,44 рублей на один рубль затрат.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

❖ эпизоотологические особенности проявления анаэробной энтеротоксемии поросят в свиноводческих хозяйствах Республики Беларусь, что позволяет осуществить планирование и проведение ппрофилак-тических мероприятий;

❖ этиологическая роль различных типов С1. регГпт^еш в возникновении анаэробной энтеротоксемии поросят, что лозволило разработать специфический биопрепорат профилактики;

❖ экспериментальное обоснование иммунизирующих доз, сроков и интервалов применения полианатоксина, его иммунологической, эпизоотологической и экономической эффективности, что позволяет снизить заболеваемость поросят в свиноводческих хозяйствах.

Личный вклад соискателя. Данная диссертационная работа является законченным научно-исследовательским трудом. Основные научные исследования по изучению эпизоотологических особенностей и определению роли различных типов С1. регГпп§епз в этиологии анаэробной энтеротоксемии поросят в свиноводческих хозяйствах Республики Беларусь, конструированию полианатоксина, установление эпизоотологической и экономической эффективности его применения в экспериментальных и производственных условиях проводились лично соискателем. Также самостоятельно автором проведена статистическая и графическая обработка полученных результатов.

Руководители научной работы: доктор ветеринарных наук, профессор, академик ААН Республики Беларусь Андросик Николай Николаевич и доктор ветеринарных наук, профессор Максимович Владимир Васильевич оказывали методическую помощь при планировании, обработке и интерпретации полученных результатов исследований.

Апробация результатов диссертации. Результаты исследований по диссертационной работе обсуждены и получили положительную оценку на итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава и научных конференциях студентов, аспирантов и молодых преподавателей Витебского ветеринарного института, Витебской ордена "Знак Почета" государственной академии ветеринарной медицины (Витебск, 1992; 1993; 1994; 1996; 1998), Российской научно-практической конференция "Пути интенсификации производства молока и мяса, профилактика болезней сельскохозяйственных животных в современных условиях" (Смоленск, 1992), Республиканской научно-практической конференции "Технология получения и выращивания здорового молодняка сельскохозяйственных животных и рыбо-посадочного материала" (Минск. 1993), 1-ой Международной научно-практической конференции "Ветеринарные и зооинженерные проблемы в животноводстве" (Витебск, 1996), международной научно-практической конференции посвященной 70-летию БелНИИЭВ "Актуальные проблемы ветеринарной патологии сельскохозяйственных животных" (Минск, 2000). межкафедральном и межлабораторном совещаниях сотрудников при рассмотрении диссертационной работы в ВГАВМ и БелНИИЭВ (Витебск, 2000; Минск, 2000).

Опубликованностъ результатов. По материалам исследований опубликовано 8 научных работ, в том числе 5 статей в которых изложены основные положения выполненных исследований. Общий объем опубликованных материалов составляет 17 страниц.

Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 116 страницах машинописного текста, в том числе иллюстрированы 10 рисунками и содержит 9 таблиц в тексте.

Диссертация состоит из введения, общей характеристики работы, основной части, представленной 6-ю главами собственных исследований, заключения, включающего выводы и практические предложения, списка использованных источников и приложения.

Список использованной литературы включает 194 источника, в том числе 159 на русском языке.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ

Обзор литературы по теме

В трех подразделах главы отражены данные литературы современного состояния изученности вопросов этиологии и эпизоотологиче-ских данных анаэробной энтеротоксемии свиней, показаны современные направления и пути разработки, совершенствования и применения

средств специфической профилактики этого заболевания в свиноводческих хозяйствах различного типа.

Общая концепция и основные методы исследований

Экспериментальная часть работы выполнена в 1989-1999 г.г. в условиях кафедры эпизоотологии Витебской ордена «Знак Почета» государственной академии ветеринарной медицины и на свиноферме "Подберезье" учебно-опытного хозяйства, в лаборатории бактериальных инфекций и виварии Белорусского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесското, а также в 6 свиноводческих хозяйствах и комплексах Витебской и Гродненской областей Республики Беларусь.

Проверку профилактической эффективности биопрепарата проводили в двух неблагополучных по анаэробной эктеротоксемии поросят хозяйствах Гродненской области.

Эпизоотическую ситуацию в обследованных хозяйствах изучали согласно методическим указаниям по проведению эпизоотологическо-го исследования (И.А. Бакулов с соавт., 1982).

С целью установления этиологической структуры и эпизоотоло-гических особенностей распространения анаэробной энтеротоксемии свиней в хозяйствах различного типа осуществляли клинико-эпизоотологическое обследование, патологоанатомические вскрытия, бактериологические, серологические и токсикологические исследования.

Выделенные штаммы клостридий идентифицировали общепринятыми методами по морфолого-тинкториальным и культурально-биохимическим свойствам. Выделенные культуры идентифицировали по методикам, описанным Я. Р. Коваленко (1954). Типовую принадлежность токсинов определяли в реакции нейтрализации (РН) с диагностическими антитоксическими сыворотками на белых мышах.

Для иммунизации животных применяли концентрированные анатоксины типов В, С, Д, изготовленные по методике получения поливалентного анатоксина против клостридиозов овец (К.Р. Ургуев и Л.В Кириллов, 1980), с известной антигенной активностью в единицах связывания (ЕС). Полианатоксин готовили из анатоксинов О.регйчг^епэ типов В, С, Д, взятых в соотношении по 200 ЕС каждого антигена. Опытная серия биопрепарата была изготовлена на Краснодарской биофабрике.

Для определения наличия антитоксинов использовали глицери-низированные токсины С1. регГпп§епз типов А, В, С, Д, полученные в Всероссийском государственном научно-исследовательском институте контроля, стандартизации и сертификации ветпрепаратов. Количество антител определяли в РН токсинов сыворотками молозива, крови сви-

номаток и поросят на белых мышах. Обнаруженное количество антител выражали в антитоксических единицах (АЕ),

Первый опыт. с целью определения оптимальных иммунизирующих доз моноанатоксинов, был проведен на 60 супоросных свиноматках, которые по принципу аналогов (76-81 день супоросности) были разделены на 3 группы, по 20 животных в каждой. Животных этих групп иммунизировали соответственно моноанатоксинами СЛ. perfringens типов В, С и Д внутримышечно двукратно с интервалом 2025 дней. Для определения оптимальной иммунизирующей дозы моноанатоксинов их вводили в количестве 50, 100, 200 и 400 ЕС. На каждую дозу брали по 5 животных.. Наличие антитоксинов в сыворотке крови свиноматок определяли до иммунизации, после первого введения различных доз моноанатоксинов, на 14 день после повторной иммунизации и спустя месяц после опороса животных.

Второй опыт. с целью подбора оптимального соотношения моноанатоксинов С1. perfringens типов В, С и Д в полианатоксине, был проведен на 35 супоросных свиноматках. Полианатоксин С1. perfringens типов В, С, Д, с содержанием антигенов в оптимальных иммунизирующих дозах, вводили внутримышечно, двукратно, с интервалом 20-25 дней. Повторное введение биопрепарата проводили не ранее 14 дней до опороса свиноматок.

Антитоксическую активность сыворотки крови иммунизированных животных определяли до введения полианатоксина С1. perfringens типов В, С и Д, после первого, на 14 день после второго введения и спустя 30 дней после опороса свиноматок.

Третий опыт, по определению оптимального интервала между введением поливалентного анатоксина Cl.perfringens типов В, С и Д, был проведен на 20 супоросных свиноматках.

Животные были разделены на 4 группы, по 5 свиноматок в каждой. Для иммунизации применяли полианатоксин CI. perfringens типов В, С, Д, содержащий по 200 ЕС каждого антигена.

Биопрепарат вводили внутримышечно, двукратно, с интервалом соответственно в 15, 20, 30 и 45 дней между инъекциями. Групповые пробы сыворотки крови исследовали в первый день после опороса.

Четвертый опыт, по определению формирования колостраль-ного иммунитета у поросят, полученных от свиноматок вакцинированных полианатоксином Cl. perfringens типов В, С, Д, проведен на 36 животных. Были отобраны две группы супоросных свиноматок по 18 животных в каждой. Первой группе свиноматок вводили полианатоксин Cl.perfringens типов В, С, Д, а вторая группа свиноматок, не вакцинированных полианатоксином, служила контролем. У животных двух групп сыворотку молозива исследовали на 1, 3 и 6 день после опороса. Перед взятием молозива свиноматкам вводили окситоцин по 10-15 ЕД

на 100 кг живой массы животного.

I группа поросят была сформирована от 53 иммунизированных свиноматок используемых во втором опыте, которым вводили полианатоксин С1. регГпг^спв типов В, С и Д внутримышечно, двукратно с интервалом 20-25 дней. Во II группу (контрольную) были взяты поросята от 18 не иммунизированных свиноматок, используемых в четвертом опыте.

От поросят опытной и контрольной групп сыворотку крови исследовали на 1, 2, 3, 6, 9 и 15 день после рождения.

Для установления продолжительности иммунитета у свиноматок вакцинированных поливалентным анатоксином С1. регГлп§сш типов В, С, Д, а также для определения сроков их ревакцинации, использовали животных второго и четвертого опытов. За свиноматками вели клиническое наблюдение и продолжали дальнейшее исследование их сыворотки крови в РН на 1, 3, 6, 9 месяцы после первичной двукратной иммунизации животных поливалентным анатоксином.

Пятый опыт. по изучению эпизоотологической эффективности поливалентного анатоксина О.регШг^еш типов В, С и Д, проведен в двух хозяйствах, неблагополучных по анаэробной энтеротоксемии поросят, на 402 супоросных свиноматках. Полианатоксин С1. регШп§еп5 типов В, С, Д вводили внутримышечно, двукратно с интервалом 20-25 дней между иньекциями. Повторное введение препарата осуществляли не ранее 14 дней до опороса животных. В вводимой дозе полианатоксина содержались по 200 ЕС каждого моноантигена. 30 не иммунизированных супоросных свиноматок этих хозяйств служили контролем.

Об эпизоотологической эффективности применяемого биопрепарата судили по заболеваемости, летальности полученного приплода к 7-дневному возрасту и в отъемный период и дополнительно по количеству опоросившихся животных, полученных от них поросят и средней живой массе поросят в каждой группе перед отъемом.

Гематологические исследования проводили по общепринятой методике (В.Н. Никитин, 1949, 1956). Кровь для исследования брали из венозного синуса угла глаза (П. Петков, 1972).

Полученный цифровой материал подвергали статистической обработке ( М.С. Жаков. В.М. Жаков, 1986; Е.В. Федорова, В.В. Пиль-ко, 1988).

Расчет экономической эффективности применения поливалентного анатоксина О.регГг^епз типов В, С и Д проводили по "Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий", утвержденной ГУВ МСХ СССР 4 мая 1982 г.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эпизоотическая ситуация по анаэробной энтеротоксемии поросят в Республике Беларусь и этиологическая роль различных типов С1. perfringens в ее возникновении. Анализ документации ветеринарной отчетности за последние 10 лет и результаты собственных исследований показывают, что анаэробная энтеротоксемия поросят имеет довольно широкое распространение в Республике Беларусь и приносит значительный экономический ущерб свиноводству, сдерживая, в первую очередь, продуктивность и рост поголовья этого вида животных. Основным возбудителем анаэробной энтеротоксемии поросят в республике является CI. perfringens типа С (86,8% случаев выделения), другие типы (А, В, Д) выделяются реже. Кроме того, заболевание новорожденных поросят с поражением желудочно-кишечного тракта может вызывать ассоциация микроорганизмов, включающая энтеропатогенные штаммы Е. coll и токсиногенные культуры CI.perfringens.

В период энзоотии заболеваемость новорожденных поросят составляет около 40%, летальность - 80-100%. Чаще болеют поросята-сосуны на 2-3 день жизни (28,3 - 37,1%). За тем количество заболевших животных снижалось и к концу недельного возраста составляло около 5%. Поросята старше 14 дневного возраста не болели. Анаэробной энтеротоксемии свойственна стационарность.

КОНСТРУИРОВАНИЕ ПОЛИВАЛЕНТНОГО АНАТОКСИНА ПРОТИВ АНАЭРОБНОЙ ЭНТЕРОТОКСЕМИИ ПОРОСЯТ

Определение оптимальных иммунизирующих доз моноанатоксинов CI. perfringens для конструирования полианатоксина против анаэробной энтеротоксемии. При исследовании сыворотки крови, вакцинированных моноанатоксинами CI. perfringens типов В, С, Д в различных дозах (50, 100, 200, 400 ЕС), нами установлено, что до иммунизации у животных выявляются антитоксические антитела против токсинов CI. perfringens типа А в количестве 0,16 АЕ/см3, что является, по всей вероятности, результатом иммунизирующей субинфекции ввиду повсеместного распространения микроорганизмов CI. perfringens типа А. Антитела к токсинам CI. perfringens типа В, С и Д, в этот срок исследования, не выявлены.

Однократное введение моноанатоксинов не обеспечивает выработку максимального количества антитоксических антител против токсинов Cl.perfringens типов В, С, и Д. Наибольший уровень бета- и эпсилон-токсинов установлен через 14 дней после повторной иммунизации супоросных свиноматок. Через месяц после опороса наблюда-

ется снижение уровня антитоксических антител в сыворотке крови иммунизированных животных и этот уровень зависит от типа и дозы вводимого анатоксина.

Таким образом, оптимальной дозой моноанатоксина С1. perfringens типа С для свиноматок является 200 ЕС, типа В - 200 ЕС и типа Д - 200 - 400 ЕС.

Динамика образования антитоксинов в сыворотке крови свиноматок, иммунизированных полианатоксином CL perfringens типов В, С и Д.

У подопытных животных, после однократного введения полианатоксина С1. perfringens типов В, С, Д, нами установлено увеличение количества антитоксинов ко всем вводимым антигенам. Так, титры антитоксина типа В составили 0,08 ± 0,04 АЕ/см3, типа С - 0,43 ± 0,2 АЕ/см3 и 0,13 ± 0,04 АЕ/см3 - типа Д. Одновременно были выявлены в сыворотке крови свиноматок альфаантитоксины в количестве 0.32 АЕ/см3. Это увеличение, по нашему мнению, результат антигенного родства CI. perfringens типов А, В, С, Д по альфа-токсину.

Нами также установлено, что на повторное введение полианатоксина увеличивается выработка антитоксических антител в сыворотке крови свиноматок. Для антитоксинов типа В это увеличение на 14-й день после второго введения составило с 0,08 ± 0,04 до 0,64 ± 0,39 (Р < 0,05), для типа С- с 0,43 ± 0,2 до 1,28 ± 0.78 (Р < 0,05) и для типа Д -с 0,13 + 0,04 до 0,58 ±0,42 (Р < 0,05) в I см3 сыворотки крови. При этом, защитные свойства сыворотки крови иммунизированных животных по отношению к альфа-токсинам увеличились до 0,64 АЕ/см3.

Спустя 30 дней после опороса, у свиноматок мы регистрировали уменьшение титра антитоксинов в сыворотке крови к токсинам С1. perfringens типов А, В, С и Д, уровень которых составил соответственно к каждому типу 0,32; 0,42 + 0.2; 0,89 ± 0,35; 0,13 ± 0,04 АЕ/см3 (Р < 0,05).

Сопоставление полученных данных по определению количества антитоксических антител в сыворотке крови свиноматок иммунизированных полианатоксином Cl. perfringens типов В, С, Д и соответствующими моноанатоксинами, позволяет сделать вывод, что конкуренции между моноантигенами и суммирования их реактогенности не происходит. Это дает нам возможность включить в поливалентный анатоксин антигены Cl. perfringens типов В, С и Д в оптимально-иммунизирующих дозах.

Вводимый супоросным свиноматкам полианатоксин стимулирует также выработку альфа-антитоксинов и они обнаруживаются перед опоросом животных в количестве 0,64 АЕ в 1 см3 сыворотки крови.

Определение оптимального интервала между двукратным введе-

нием поливалентного анатоксина С1. регМ^епз типов В, С и Д супоросным свиноматкам. Опыты по выяснению активности сыворотки крови ( в АЕ/см3) свиноматок, иммунизированных поливалентным анатоксином С1. регй-^епв В, С, Д, в зависимости от интервала (15, 20, 30, 45 дней) между двукратным введением этого биопрепарата показали, что в группе свиноматок, которым полианатоксин С1. регй^епз типов В, С и Д вводили с интервалом в 15 дней, в сыворотке их крови обнаруживали антитоксические антитела против токсинов С1. регйтгщепв типа В в количестве 0,16 АЕ/см3, типа С - 0,64 АЕ/см5 и С1. регй-^епБ типа Д - 0,08 АЕ/см3. С увеличением интервала между двукратным введением поливалентного биопрепарата до 20 дней, наблюдается увеличение количества антитоксинов в сыворотке крови иммунизированных животных. Так, к токсинам С1. регГпгщепз типа В они обнаруживаются в количестве 0,32 АЕ/см3, к типу С - 1,28 АЕ/см3 , а к типу Д их количество составляет 0,16 АЕ/см3.

При дальнейшем увеличении интервала между введением полиаяатоксииа С1. регГп^егю типов В, С и Д до 30 дней, нами установлено увеличение количества антитоксических антител к токсину С1. рег1т^еп5 типа В. Их в сыворотке крови иммунизированных свиноматок содержалось уже 0,64 АЕ/см3. Количество антител к токсинам С1. регПтг^епз типа С оставалось на прежнем уровне - 1,28 АЕ/см3 . При этом интервале введения биопрепарата увеличилось содержание антител и к токсинам С1. регГппяепв типа Д до 0,32 АЕ/см3.

В сыворотке крови свиноматок, иммунизированных поливалентным анатоксином С1. регГг^ем типов В, С, Д с интервалом между введением биопрепарата в 45 дней, нами не установлено дальнейшего увеличения количества антител к токсинам С1. регГпгшепв. Они оставались на том же уровне, что и при введении биопрепарата с интервалом в 30 дней. Их содержалось в сыворотке крови соответственно к токсинам С1. регИп^епв типов В, С и Д -0,64, 1,28,0,32 АЕ/см3.

Иммунологическая эффективность применения полианатоксина С1. рег1тт§еп8 типов В, С, Д против анаэробной энтеротоксемии поросят.

О реактогенности применяемого полианатоксина судили по общему состоянию животных, аппетиту, температуре тела, воспалительной реакции на месте введения биопрепарата, а также по изменениям в периферической крови.

Результаты опытов показали, что в первые дни после применения полианатоксина СЛ.регГп'^епв типов В, С, Д у иммунизированных свииоматок отклонений в общем состоянии организма не было, за исключением незначительного снижения аппетита и некоторого угнетения у отдельных животных, в первый день после иммунизации. Темпе-

ратура тела повышалась на 0,5 - 1,0°С , а через 1-2 суток общая реакция организма иммунизированных свиноматок приходила к физиологической норме. У отдельных животных отмечалась воспалительная реакция на месте введения анатоксина в виде незначительной отечности, которая рассасывалась в течение 2-3 суток.

В крови свиноматок, иммунизированных поливалентным анатоксином СЛ.регй-^еш типов В, С, Д против анаэробной энтеротоксе-мии поросят, отмечается незначительный лейкоцитоз, что является физиологической реакцией прививаемого организма в ответ на введение биопрепарата.

При изучении динамики антитоксических антител в молозиве свиноматок, иммунизированных полианатоксином С1. регй'^еп? типов В, С и Д, было установлено, что при концентрации антител С1. регй'^епэ типа В в сыворотке крови свиноматок перед опоросом в пределах 0,64±0,39 АЕ/см3, содержание их в молозиве первого дня составляло 0,89 ± 0,2 АЕ/см3 (Р < 0,05). При концентрации в сыворотке крови антител С1. регГгшйет типа С 1,28 + 0,78 АЕ/см3, содержание и в молозиве свиноматок увеличивалось до 2,18 ± 0,7 АЕ/см3 (Р < 0,05). Для антител С1. регЛтг^епв типа Д эти показатели были равны соответственно - 0,58 ± 0,42 и 0,78 ± 0,1 АЕ/см-' (Р < 0,05). Одновременно нами было установлено, что хотя в состав поливалентного анатоксина не включен антиген О.регГппдеш типа А, концентрация альфалецитина-зы в молозиве иммунизированных свиноматок составляла 0,38 ± 0,04 АЕ/см3.

Исследованиями молозива на третьи сутки после опороса свиноматок было установлено резкое снижение количества антитоксических антител ко всем типам С1. регГг^епэ: так к типу А уровень их снизился до 0,08 ± 0,01 АЕ/см3 , к типу В до 0,05 ± 0,01, к типу С до -0,32 ± 0,04 и к типу Д до - 0,05 ± 0,01 АЕ/см3.

Результаты исследования молозива от свиноматок контрольной группы свидетельствуют о наличии в нем в течение 3 дней молозивного периода только антител к токсинам С1. регГгишепз типа А. Антитела к токсинам продуцируемым С1. регМ^епз типов В, С и Д в эти сроки не обнаруживались.

Опыт по определению напряженности колострального иммунитета у поросят, полученных от свиноматок иммунизированных поливалентным анатоксином С1. регШ^епв типов В, С и Д показал, что до приема молозива у новорожденных поросят опытной и контрольной групп антитела против токсинов О.регГг^епБ типов А, В, С, Д отсутствуют.

На второй день жизни новорожденных животных в сыворотке их крови обнаруживаются антитела против токсинов С1.регГпгщеп5 типа А в количестве 0,02 ± 0,01 АЕ/см3, типа В - 0,13 х 0,05 АЕ/см3, типа

С - 0,32 ± 0,09 и типа Д - 0,03 ± 0,01 АЕ/см3.

Сопоставляя данные, полученные при исследовании молозива свиноматок в первый день после опороса, с данными содержания антитоксических антител в сыворотке крови поросят двух дней жизни, нами получен уровень значимости для типа А - Р < 0,001, для типа В - Р <0,01, типа С - Р < 0,05 и типа Д - Р < 0,001. Коэффициент корреляции при этом равен -1, -0,57, -0,46, -1 соответственно для каждого типа антитоксинов.

В эти сроки исследования в сыворотке крови поросят, полученных от контрольной группы свиноматок, нами установлено наличие антитоксинов лишь к токсинам С1. регАг^епв типа С. Среднегруппо-вое количество их равно 0,04 АЕ/см3. По нашему мнению это результат циркуляции С1. регГг^епБ типа С среди свииопоголовья хозяйства, где проводился опыт.

На третий день жизни в сыворотке крови поросят подопытной группы нами установлено увеличение количества защитных антител к токсинам О-регИг^епв А. В, С, Д. И их количество было равно соответственно 0,09 ± 0,02; 0,3 ± 0,1; 1,09 ± 0,4 и 0.1 ± 0,03 АЕ в 1 см3 сыворотки крови. В сравнении с молозивом свиноматок в этот срок исследований, уровень значимости для всех типов был равен Р < 0,05.

Одновременно в эти сроки у животных контрольной группы количество антитоксинов к О.регГг^епз типа С увеличилось в сыворотке крови до 0,08 АЕ/см3.

Количество антител к альфа-токсину па 6 день исследования в сыворотке крови поросят удерживалось на прежнем уровне, к бета-токсинам их количество уменьшилось в два раза, а к эпсилон-токсину установлено незначительное увеличение количества антитоксинов до 0,19 ± 0,05 АЕ/см3. В контрольной группе животных вновь удалось обнаружить лишь антитела к токсину С1. регГипцепв типа С в количестве 0,04 АЕ/см3.

При последующих исследованиях сыворотки крови поросят, полученных от иммунизированных свиноматок, наблюдается снижение ее антитоксических свойств. На 15 день количество антител к токсинам С1. регГг^ет установлено в пределах для типа А - 0,03 ± 0,01 АЕ/см3, типа В - 0,04 ± 0,01, типа С - 0,13 ± 0,02 и типа Д - 0,05 ± 0,01 АЕ/см3. В сыворотке крови поросят от не иммунизированных свиноматок антитоксинов в эти сроки исследования не выявлено.

При определении продолжительности иммунитета у свиноматок, иммунизированных полианатоксином С1. регГппяепБ типов В, С и Д против анаэробной энтеротоксемии поросят было установлено, что у свиноматок, иммунизированных поливалентным анатоксином С1.рег1г^еп5 типов В, С и Д, через 30 дней после опороса нами выявлено в сыворотке крови наличие антитоксинов к типу А в количестве 0,08 АЕ/см3 , к токсинам типа В - 0,42 ± 0,2 АЕ/см3, к типу С - 0,89 ±

0,35 и к типу Д - 0,13 ± 0,04 АЕ/см3.

При последующем исследовании, через 3 месяца после опороса, нами установлено уменьшение количества содержащихся в сыворотке крови свиноматок антител против токсинов С1. регГпг^епв. К типу А, в этот срок исследования, их уже обнаруживали в количестве - 0,03 ± 0,01 АЕ/см3, к типу В - 0,18 ± 0.04 АЕ/см3, а к типам С и Д- 0,38 ± 0,06 и 0,06 ±0,01 АЕ в 1 см3 сыворотки крови.

Через 6 месяцев после опороса у первично иммунизированных свиноматок наблюдается дальнейшее снижение в сыворотке крови количества антител против токсинов возбудителя анаэробной энтероток-семии поросят. Их количество, в этот срок исследования, составило: 0,02 ±0,01, 0,07 ± 0,02, 0,13 ± 0,02 и 0,03 ± 0,05 АЕ/см3 соответственно для типов А, В, С и Д токсинов С1. регГг^ет.

Дальнейшее исследование сыворотки крови свиноматок, иммунизированных поливалентным анатоксином С1. регГг^епэ типов В, С и Д, с содержанием антигенов по 200 ЕС каждого, показало, что через 9 месяцев после опороса сохраняются лишь антитела к токсинам С1. рег1гн^еп5 типа С. Они обнаружены в количестве 0,05 ± 0,01 АЕ/см3. Антител к токсинам СЬрегГг^епз типов А, В и Д. в этот срок исследования, в сыворотке крови первично иммунизированных свиноматок не выявлено.

Энизоотологическая и экономическая эффективность полианатоксина С1. рег1пп§еш типов В, С, Д против анаэробной энтеротоксемии поросят. Результаты исследований показали, что применение поливалентного анатоксина С1. ретП^евд типов В, С и Д против анаэробной энтеротоксемии в неблагополучном по этому заболеванию свиней хозяйстве, обеспечивает у поросят к отъемному возрасту увеличение сохранности на 20,5%, а живой массы - на 390-500 г.

Специфическая профилактика анаэробной энтеротоксемии поросят с использованием поливалентного анатоксина С1. регГг^епБ типов В, С и Д является экономически выгодной, позволяет снизить коэффициент заболеваемости (Кз) с 0,4 до 0,1, а экономическая эффективность ветеринарных мероприятий составляет 19,4 рубля на один рубль затрат.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Базируясь на полученных результатах исследований, можно заключить, что основным возбудителем анаэробной энтеротоксемии поросят, диагностируемой в некоторых свиноводческих хозяйствах Республики Беларусь, является С1. регГппаеш типа С, другие типы - (А, В и Д) играют меньшую роль в возникновении этой болезни. Кроме того, заболевание новорожденных поросят с поражением желудочно-

кишечного тракта может вызывать ассоциация микроорганизмов, включающая энтеропатогенные штаммы Е. coli и токсиногенные культуры Cl.perfringens. Наиболее чувствительны к токсинам С1. perfringens поросята первых дней жизни. У 2-3 дневных поросят заболеваемость составила 28,3 - 37,1%. В некоторых хозяйствах анаэробная энтеротокссмня поросят имеет стационарный характер и проявляется в виде не продолжительных эпизоотии. В период ее развития заболеваемость достигает до 40° о, с летальностью - 80-100%.

Производственное испытание разработанного поливалентного анатоксина С1. perfringens типов В, С и Д против анаэробной энтеро-токсемии поросят, в неблагополучных по этому заболеванию хозяйствах, показало высокую его эпизоотологическую эффективность. Сохранность поросят, полученных от иммунизированных свиноматок, к 7-дневному возрасту была на 11,5 -13,2 %, а к отъему на 12,9 - 20,5% выше, чем в группе не иммунизированных животных. Экономическая эффективность применения биопрепарата составила 19,4 рубля на 1 рубль затрат.

ВЫВОДЫ

1. Анаэробная энтерогоксемия поросят имеет широкое распространение в хозяйствах Республики Беларусь, где ежегодно регистрируется от 3 до 23 неблагополучных пунктов. В этиологии этой болезни ведущая роль принадлежит С1. perfringens типа С, другие типы (А, В, Д) выделяются реже. На их долю приходится 14,2% случаев заболевания (A.B. Бублов, 1992, 2000).

2. Наиболее восприимчивы к возбудителю анаэробной энтеро-токсемии поросята-сосуны 2-3-го дня жизни (28,3 - 37,1%). Их заболеваемость достигает до 40%, а летальность составляет 80-100%. Болезни свойственна стационарность без выраженной сезонности (A.B. Бублов, 1994, 2000; A.B. Бублов, В.В. Максимович, 1996).

3. Оптимальной иммунизирующей дозой для каждого из моноанатоксинов С1. perfringens типов В, С и Д, используемых для конструирования полианатоксина, является 200 ЕС. Введение полианатоксина С1. perfringens типов В, С, и Д супоросным свиноматкам стимулирует также выработку альфаантитоксинов (A.B. Бублов, 1992).

4. Сконструированный поливалентный анатоксин Cl.perfringens типов В, С и Д является безвредным, слабореактогенным и в достаточной степени иммуногенным препаратом. При его введении супоросным свиноматкам с интервалом 20-25 дней, антитоксины С1. perfringens типов А, В, С и Д в максимальных титрах выявляются в молозиве первый день, с последующим снижением их уровня к 3-му дню к типам А и Дик 9-му - к типам В и С. Антитоксины в сыворотке крови первично иммунизированных животных сохраняются в течение 6 месяцев (A.B.

Бублов, 1993; ¡А.Ф. Дереза), A.B. Бублов, 1993).

5. У поросят, полученных от свиноматок, иммунизированных полианатоксином Cl.perfringens типов В, С и Д, антитоксины в сыворотке крови выявляются на 2-oii день жизни, достигая максимального уровня к 3-6-му, что обеспечивает формирование у новорожденных поросят напряженного колострального иммунитета (|А.Ф. Дереза], A.B. Бублов, 1993).

6. Применение поливалентного анатоксина Cl.perfringens типов В, С и Д против анаэробной энтеротоксемии, в неблагополучных по этому заболеванию свиней хозяйствах, увеличивает сохранность поросят к отъемному возрасту на 20,5%, и обеспечивает экономический эффект 19,4 рубля на 1рубль затрат (A.B. Бублов, 1994; A.B. Бублов, В.В. Максимович, 1996).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. "Вакцина против анаэробной энтеротоксемии телят и поросят" (Инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению, ТУ РБ 000284, утверждена ГУВ Госкомсельхозпрода БССР от 4 ноября 1990 года).

2. "Поливалентный анатоксин Cl. perfringens типов В, С и Д против анаэробной энтеротоксемии поросят", на производство которого разработана нормативно-техническая документация (Инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению).

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Бублов A.B. Распространение анаэробной эктеротоксемии свиней в Витебской области Республики Беларусь//Материалы Российской научно-практической конференции "Пути интенсификации производства молока и мяса, профилактика болезней сельскохозяйственных животных в современных условиях", Смоленск, 1992 г. - Смоленск, 1992. - С. 86-87.

2. Бублов A.B. Определение оптимальных иммунизирующих доз моноанатоксинов для вакцинации супоросных свиноматок против анаэробной энтеротоксемии // Вопросы теории и практики ветеринарии и зоотехнии: Сб. науч. тр. Витебского ветеринарного института. - Мн.: Ураджай, 1992. - Т. 29. - С. 7-9.

3. Бублов A.B. Определение оптимального интервала между двукратным введением поливалентного анатоксина С1. perfringens типов В, С и Д супоросным свиноматкам // Технология получения и выращивания здорового молодняка сельскохозяйственных животных и рыбопо-садочного материала: Тезисы докладов Республиканской научно-практической конференции. - Мн., 1993. - С. 114-115.

4. Дереза АЛ>|., Бублов A.B. Динамика антитоксических антител в молозиве свиноматок, иммунизированных полианатоксином Cl. perfringens В, С и Д // Технология получения и выращивания здорового молодняка сельскохозяйственных животных и рыбопосадочного материала: Тезисы докладов Республиканской научно-практической конференции. - Мн., 1993.-С. 119-120.

5. Бублов A.B. Эффективность применения полианатоксина С!, perfringens типов В, С, Д против анаэробной энтеротоксемии поросят // Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины. - Витебск, 1994. - Т. 32. - С. 101-103.

6. Бублов A.B. Этиология анаэробной энтеротоксемии поросят и некоторые эпизоотологические данные // Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины. - Витебск, 1996. -Т. 33. - С. 53-54.

7. Бублов A.B., Максимович В.В. Специфическая профилактика анаэробной энтеротоксемии поросят // Ветеринарные и зооинженер-ные проблемы животноводства: Материалы 1-ой международной научно-практической конференции, Витебск, 1996 г. - Минск, 1996. - С. 87.

8. Бублов A.B. Анаэробная энтеротоксемия свиней и эпизоотологические особенности ее проявления в хозяйствах Республики Беларусь // Материалы международной научно-практической конференции посвященной 70-летию БелНИИЭВ, Минск, 2000 г. - Мн., изд-во "Хата", 2000.-С. 183.

РЭЗЮМЭ

Бублоу Анатолш BacLiflBin

Анаэробная энтэратаксям1я парасят

(этыялопя, эшзааталопя. специфичная прафьпактыка)

Ключавыя словы: шфекцыйныя хваробы, анаэробная энтэратак-ся\пя, этыялоп'я, эшзааталапчныя дадзены, супарасныя свшаматю, па-расяты, ¡ммушзацыя, пол1анатоксш, ¡муиагеннасць, прафЬтактыка, эф-фектыунасць.

Аб'ектам даследванняу з'яулялкя свшаматш i парасяты свшаводчых гаспадарак Рэспублш Беларусь. 1 Град мечам даследванняу служыл! - ветсправаздачнасць, паталапчны матэрыял, культуры CL perfringens, кроу, сываратка крьш i малоз!ва.

Мэта даследванняу - распрацоука сродкау спеныф1чнай пра-фтлактьш анаэробнай энтэратаксямп парасят.

Пры рабоце выкарыстаны эшзааталапчны, клнйчны, патолагаа-натам1чны, бактэрыялапчны, сералапчны i статыстычны метады даследванняу.

Упершыню у Pэcпyблiцы Беларусь установлены эшзааталапчныя асабл1васщ анаэробнай энтэратаксямп евшей i вызначана вядучая роля Cl. perfringens тыпу С у этыялогн тэтага захворвання. Для прафшактыю хваробы распрацаваны пол1анатаксш, яю валодае ¡муналапчным!" уласщвасцям1. Установлена эшзааталапчная i эканам1чная эффек-тыунасщ ад яго выкарыстання.

BbiHiKi атрыманых даследванняу выкарыстоуваюцца у вучэбным працэсе, у навуковых даследваннях i рэкамендаваны у ветэрынарную практику.

РЕЗЮМЕ

Бублов Анатолий Васильевич

Анаэробная энтеротоксемия поросят

(этиология, эпизоотология, специфическая профилактика)

Ключевые слова: инфекционные болезни, анаэробная энтеротоксемия, этиология, токсины, эпизоотологические данные, супоросные свиноматки, поросята, иммунизация, полианатоксин, иммуногенность, профилактика, эффективность.

Объектом исследований являлись свиноматки и поросята свиноводческих хозяйств Республики Беларусь. Предметом исследования служили - документация ветеринарного учета и отчетности, патологический материал, культуры С1. рейг^епв, кровь, сыворотка крови и молозива.

Цель исследований - разработка средств специфической профилактики анаэробной энтеротоксемии поросят.

При работе использованы эпизоотологический. клинический, патологоанатомический, бактериологический, серологический и статистический методы исследований.

Впервые в Республике Беларусь установлены эпизоотологические особенности анаэробной энтеротоксемии свиней и установлена ведущая роль С!. регГлг^епэ типа С в этиологии этого заболевания. Для профилактики болезни разработан полианатоксин, который обладает иммуногенными свойствами. Установлена эпизоотологическая и экономическая эффективность от его применения.

Результаты полученных исследований используются в учебном процессе, в научных исследованиях и рекомендованы в ветеринарную практику.

SUMMARY

Bublov Anatoly Vasilievich

Anaerobic enterotoxaemia

(etiologi, epizootology data, specific prophylaxis)

Key words: infectious diseases, anaerobic enterotoxaemia, etiology, toxins, epizootological data, sows, piglets, immunization, polyanatoxin, immunogenesis, prophylaxis, efficiency.

Objects of investigation were sows and piglets of differents farms in the Republic of Belarus. Subjects of investigation were veterinary reports and accounts, pathological material, CI. perfringens culture, blood, serum of blood and milk.

The goal of investigation was working out means of specific prophylaxis for anaerobic enterotoxaemia.

In the researches epizootological, clinical, pathological, bacteriological, serological methods as well as accounts on the disease were used.

Epizootological peculiarities of anaerobic enterotoxaemia have been determined in the researches for the first time in the Republic of Belarus as well as the dominant role of CI. perfringens type C in the etiology of the disease has been discovered. Special polyanatoxin for prophylaxis has been elaborated, which possesses some immunogenessis properties. The economic efficiency of its application has been established.

The results of the investigation are being used in training, scientific explorations and have been recomended for veterinary practice.