Значение молекулярно-биологических маркеров при раке желудка

Луд, Анна Николаевна

Диссертации по медицине → Онкология

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.12) на тему:Значение молекулярно-биологических маркеров при раке желудка

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Луд, Анна Николаевна Москва 2010 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.01.12

Автореферат диссертации по медицине на тему Значение молекулярно-биологических маркеров при раке желудка

На правах рукописи

ÜÜ4603142

Луд Анна Николаевна

ЗНАЧЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ПРИ РАКЕ ЖЕЛУДКА

Онкология - 14.01.12

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 4 НЮН 2010

Москва, 2010

004608142

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Российском онкологическом научном центре имени Н.Н.Блохина РАМН (директор академик РАН и РАМН М.И.Давыдов)

Научные руководители:

академик РАН и РАМН,

д.м.н., профессор М.И. Давыдов

д.м.н., профессор А.Ю. Барышников

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор В.И. Борисов

Доктор медицинских наук, профессор И.В. Поддубная

Ведущее научное учреждение:

ФГУ Московский научно-исследовательский онкологический институт имени П. А. Герцена МЗ СР РФ.

Защита состоится « /В » и О 2010 г. в /О часов на

заседании Диссертационного совета Д.001.017.02 при Российском онкологическом научном центре им. Н.Н.Блохина РАМН (115478 , г. Москва, Каширское шоссе, 24).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Российского онкологического научного центра им. Н.Н.Блохина РАМН. Автореферат разослан « / _2010 г.

Ученый секретарь

Диссертационного совета Д.001.017.02

доктор медицинских наук, профессор

Ю.А. Барсуков

Актуальность проблемы.

Рак желудка во всем мире продолжает оставаться в центре внимания медицинской науки и практики и является одной из важнейших медицинских и социально-экономических проблем.

В России рак желудка занимает второе место в структуре онкологической заболеваемости у мужчин (10,8%) и третье - у женщин (7,5%). Ежегодно выявляется 41 930 новых случаев заболевания. В структуре смертности от злокачественных новообразований рак желудка стоит на втором месте, составляя среди мужского и женского населения соответственно 13,9% и 12,4%.

Отдаленные результаты хирургического лечения больных раком желудка, за исключением ранних стадий, остаются малоутешительными, так как радикальность большинства операций носит условный характер. Это связано с тем, что большая часть больных поступает на лечение с местно-распространенными или генерализованными формами опухолевого процесса. Причиной неудовлетворительных результатов лечения данной категории пациентов является высокая частота возникновения отдаленных метастазов в ближайшие годы наблюдения.

Исходя из изложенного, очевидно, что для улучшения результатов лечения больных раком желудка необходимо разрабатывать методы профилактики развития местных рецидивов и отдаленных метастазов после удаления первичной опухоли.

Химиотерапия является единственным методом лечения пациентов с неоперабельным, местно-распространенным или метастатическим раком желудка. Однако выбор целого ряда схем химиотерапии основывается на их интуитивном подборе, без достаточного учета объективных показателей прогноза заболевания, молекулярно-генетических особенностей опухоли.

опухоли к пролиферации, инвазии, метастазированию, а также могут предсказывать индивидуальную чувствительность к химиотерапии.

Особое внимание привлекает прогностическое значение молекулярно-биологических маркеров, характеризующих апоптоз, ангиогенез, пролиферацию, а также некоторых ферментов, участвующих в метаболизме противоопухолевых препаратов. В ряде случаев их структурно-функциональные изменения могут служить специфическими маркерами, имеющими диагностическое и/или прогностическое значение.

При раке желудка комплексное изучение молекулярных маркеров прежде не проводилось. Цель исследования.

Основной целью исследования явилась оценка экспрессии молекулярно-биологических маркеров и характеристика клинического течения и эффективности лечения больных раком желудка в зависимости от показателей апоптоза, ангиогенеза, пролиферации и других молекулярных опухолевых маркеров.

Задачи исследования.

1. Оценить экспрессию молекулярно-биологических маркеров (Р53, Вс1-2, Вах, Тимидин фосфорилаза, Тимидилат синтетаза, НЕ11-2/пеи, Кл-67, УЕвР, РаБ-лиганд, А ОТ, СОХ-2, Топоизомераза-1, Топоизомераза-2а, ЕИСС-1, Х11СС-1, 8100А4) у больных раком желудка и их корреляцию с клинико-морфологическими характеристиками опухоли.

2. Определить прогностическую роль молекулярно-биологических маркеров у больных раком желудка.

3. Оценить эффективность химиотерапии первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка.

4. Определить корреляцию эффективности химиотерапии первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка и экспрессии молекулярных маркеров.

Научная новизна и практическая значимость.

Впервые изучена широкая панель молекулярно-биологических маркеров (Р53, Вс1-2, Вах, Тимидин фосфорилаза, Тимидилат синтетаза, HER-2/neu, Ki-67, VEGF, Fas-лиганд, AGT, СОХ-2, Топоизомераза-1, Топоизомераза-2а, ERCC-1, XRCC-1, S100A4) при раке желудка. Изучены особенности экспрессии, корреляции с клинико-морфологическими характеристиками опухоли и взаимного влияния маркеров на прогрессирование болезни.

Впервые изучено прогностическое значение экспрессии и совместного влияния различных молекулярно-биологических маркеров на выживаемость больных и резистентность к современным типам химиотерапии. Предложены новые подходы к таргетной терапии при раке желудка. Проведен анализ наиболее информативных критериев прогноза течения заболевания и риска резистентности к химиотерапии. Результаты настоящего исследования будут способствовать внедрению в клиническую практику индивидуального подхода к диагностике и лечению больных раком желудка, повышению эффективности проводимой химиотерапии.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Апробация работы.

Апробация диссертационной работы состоялась на совместной научной конференции с участием отделения химиотерапии и комбинированного лечения злокачественных опухолей, отделения химиотерапии, отделения клинической фармакологии и химиотерапии, хирургического отделения диагностики опухолей, хирургического отделения абдоминальной онкологии, хирургического торакального отделения, отделения патологической анатомии опухолей человека НИИ КО и лаборатории экспериментальной диагностики и биотерапии опухолей НИИ ЭДиТО РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 123 страницах машинописного текста, содержит 30 таблиц, 28 рисунков и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы», изложения собственных результатов, обсуждения и выводов. Список литературы включает 168 источников, в том числе 24 отечественных и 144 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В исследование включен 101 больной раком желудка (РЖ), у которых иммуногистохимическим методом была оценена экспрессия различных молекулярных маркеров. Среди них 67 пациентов, радикально оперированных по поводу рака желудка, и 34 больных метастатическим раком желудка (мРЖ), получавших химиотерапию в отделении химиотерапии и комбинированного лечения злокачественных опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН.

Пациенты, радикально оперированные по поводу рака желудка.

В исследовании приняли участие 67 больных, которые в период с 1998 по 2003 гг. перенесли радикальную операцию по поводу рака желудка (1В-1У(М0) стадии). Клинико-морфологическая характеристика представлена в таблице 1.

На первом этапе лечения всем пациентам выполнена радикальная операция в объеме гастрэктомии (п=30; 44,8%) или радикальной (дистальная или проксимальная) субтотальной резекции желудка (п=37; 55,2%). Лимфодиссекция в объеме выполнена у 10 больных (14,9%), а Б2 - у 57 (85,1%).

Таблица 1.

Клинико-морфологическая характеристика пациентов, радикально _оперированных по поводу рака желудка (п=67)_

Характеристики Количество больных (%)

Пол

мужчины женщины 40 (59,7) 27 (40,3)

Возраст менее 45 лет 3 (4,5)

45 - 60 лет более 60 лет 27 (40,3) 37 (55,2)

медиана - годы 62

диапазон - годы 27-73

Глубина опухолевой инвазии (Т) Т,-2 Тз-4 27 (40,3) 40 (59,7)

Количество пораженных регионарных лимфатических узлов (N) N+ 33 (49,3) 34 (50,7)

Стадия болезни

IB II IIIA HIB IV (Mo) 10(14,9) 16(23,9) 17(25,5) 2 (2,9) 22 (32,8)

Классификация Borrmann: I тип (полиповидные или грибовидные опухоли) II тип (блюдцеобразные опухоли) III тип (инфильтративно-язвенные опухоли) IV тип (диффузно-инфильтративные опухоли) 6 (8,9) 25 (37,3) 29 (43,3) 7(10,5)

Гистологическая классификация ВОЗ:

папиллярная аденокарцинома 7(10,5)

тубулярная аденокарцинома 13 (19,4) муцинозная аденокарцинома 4 (5,9)

перстневидноклеточная аденокарцинома 12 (17,9) недифференцированный рак 4 (5,9)

низкодифференцированная аденокарцинома 27 (40,4)

Классификация Lauren:

кишечныи тип 29 (43,3)

диффузный тип 23 (34,3)

смешанный тип 15(22,4)

Учитывая сомнительный прогноз при местно-распространенных формах РЖ, выделена группа больных (п=39), в которой проведено комплексное лечение, включающее, наряду с оперативным вмешательством, адъювантную химиотерапию в режиме: 5-Фторурацил 425 мг/м2/сутки в/в 30-минутная инфузия день 1-5, Лейковорин 20 мг/м2/сутки в/в день 1-5, каждые 4 недели, общим числом курсов 6. У 10 из 39 пациентов этой группы проведен курс адъювантной химиолучевой терапии.

После выполнения радикальной операции (п=67, 100%) и проведения адъювантной химиолучевой терапии (п=39, 58%) больные находились под наблюдением с проведением ежегодного контрольного обследования.

Медиана времени наблюдения за больными составила 68,5 месяцев (от 6 до 120). На момент анализа смерть от прогрессирования основного заболевания зарегистрирована у 42% пациентов (28/67). Медиана времени до прогрессирования составила 13 месяцев. При прогрессировании процесса больные не получали химиотерапию.

На срезах с парафиновых блоков первичной опухоли, предназначенных для стандартного морфологического исследования, ретроспективно проведен иммуногистохимический анализ с целью оценки уровня экспрессии молекулярных маркеров.

Пациенты с метастатическим раком желудка.

В период с 2004 по 2010 гг. в условиях отделения химиотерапии и комбинированного лечения злокачественных опухолей РОНЦ имени Н.Н.Блохина РАМН проведено лечение 34 пациентов с гистологически верифицированным метастатическим раком желудка (ТП1о6ос1Члю6осМ]). Клиническая характеристика представлена в таблице 2.

При морфологическом исследовании были диагностированы низкодифференцированная аденокарцинома (61,8%, п=21) и перстневидноклеточный рак (38,2%, п=13).

Таблица 2.

Клиническая характеристика пациентов с метастатическим раком желудка (п=34)

Характеристики Количество больных (%)

Пол мужчины 19 (55,9) женщины (44,1)

Возраст

моложе 40 лет 40 - 65 лет старше 65 лет медиана - годы диапазон - годы

3 (8,8) 22 (64,7) 9(26,5)

57,5 34-75

Статус ЕССЮ

0-1 2

33 (97,1) 1 (2,9)

Локализация отдаленных метастазов

печень

лимфатические узлы брюшина легкие кости яичники

19 (55,9) 24 (70,6) 13 (38,2) 8 (23,6) 2 (5,9) 1 (2,9)

Первичная опухоль

удалена не удалена

9 (26,5) 25 (73,5)

Количество зон метастазирования

медиана диапазон -

3 и более ■ количество зон - количество зон

9(26,5) 15 (44,1) 10 (29,4) 2

1 -4

Вторая линия химиотерапии

не проводилась проводилась

21 (61,8) 13 (38,2)

20,6% больных имели отдаленные метастазы только в висцеральные органы, 8,8% - метастазы в лимфатические узлы (надключичная и/или забрюшинная локализации) и висцеральные метастазы, и 14,7% - только метастатическое поражение брюшины.

Всем пациентам до начала лечения выполнена компьютерная томография органов грудной клетки, брюшной полости и малого таза. В процессе лечения с целью оценки эффективности химиотерапии и исключения прогрессирования заболевания контрольное обследование повторялось каждые 2 цикла. Оценка эффекта проведена согласно критериям RECIST. Обязательными условиями включения были удовлетворительная функция костномозгового кроветворения, печени и почек (гемоглобин >10 г/дл, абсолютное число нейтрофилов >1500*109, абсолютное число тромбоцитов >100000*109, уровень билирубина - <1,5 * верхняя граница нормы, уровни щелочной фосфатазы, AJIT и ACT <3 х верхняя граница нормы при отсутствии метастатического поражения печени и 5 х верхняя граница нормы при наличии метастазов в печень). В случае прогрессирования болезни или развития неприемлемой токсичности лечение пациентам прекращалось. После окончания терапии пациенты наблюдались до конца жизни.

В первой линии лечения больные мРЖ получали режимы химиотерапии, включающие препараты платины и фторпроизводные пиримидина: 1) режим I (п=4): Цисплатин 100 мг/м2 в/в день 1, 5-ФУ 1000 мг/м2/день в/в 120 часов, каждые 4 недели; 2) режим II (п=22): Цисплатин 80 мг/м2 в/в день 1, Кселода 2000 мг/м2/день р.о. в 2 приема, день 1-14, каждые 3 недели; 3) режим III (п=8): Цисплатин 75 мг/м2 в/в день 1, S-1 25 мг/м2 р.о. 2 раза в день, день 1-21, каждые 4 недели, общим числом курсов 6; затем продолжался прием S-1 в монотерапии.

Иммуногистохимическое исследование.

Для иммуногистохимического исследования использовались фиксированные в формалине и заключенные в парафин опухолевые блоки, полученные в рутинной патологоанатомической работе. Характеристика изученных молекулярно-биологических маркеров дана в таблице 3.

Оценку результатов окрашивания проводили с применением светового микроскопа «Leica» (Германия) под увеличением х10, х20, х40. Для всех маркеров оценивали локализацию окрашивания в клетке (ядро, цитоплазма, мембрана). Количество положительных клеток оценивали в зонах, содержащих их максимальное количество.

Таблица 3.

Панель изученных молекулярно-биологических маркеров

Специфичность Клон Фирма Разведение Буфер

Ki-67 KÍ-S5 DAKO 1:50 10 мМ Tris, 1 мМ EDTA (pH 9,0)

HER-2/neu поликлон. DAKO 1:500 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

Нормальный и мутантный тип р53 DO-7 DAKO 1:200 10 мМ Tris, 1 мМ EDTA (рН 9,0)

Вс1-2 124 DAKO 1:50 10 мМ Tris, 1 мМ EDTA (рН 9,0)

Вах поликлон. DAKO 1:500 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

CD95L(Fas/APO 1) лиганд поликлон. Santa Cruz Biotech 1:500 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

VEGFa С-1 Santa Cruz Biotech 1:500 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

Циклооксигеназа-2 (ЦОГ-2) поликлон. Santa Cruz Biotech 1:300 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

Тимидин фосфо-рилаза (ТФ) P0GF.44C Calbiochem 1:100 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

Тимидилат синтетаза (ТС) TS 106 Chemicon 1:50 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

Алкил гуанин ал килтрансфераза (АГТ) поликлон. DAKO 1:100 10 мМ цитратный буфер (рН 6,0)

Иммуногистохимические исследования и консультация морфологических препаратов проведены в лаборатории экспериментальной диагностики и биотерапии опухолей (с.н.с., к.м.н. Степанова Е.В.) и в отделении патоморфологии (с.н.с., к.м.н. Вишневская Я.В.).

Статистический анализ

Статистический анализ проводили на персональном компьютере с использованием программы "SPSS" (vl3.0. for Windows). Для проверки достоверности различий значений признаков в группах использовали тесты «хи-квадрат» (х2) и точный критерий Фишера. Различия считались статистически достоверными при р<0,05 (95% точности). Корреляция проводилась с помощью коэффициента корреляции Пирсона и коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Расчет выживаемости проводили методом Каплана-Мейера. Сравнение двух кривых выживаемости выполняли с помощью логранкового критерия. Для оценки независимости признаков и расчета сравнительного риска (HR) использовалась модель пропорционального регрессионного анализа Кокса.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Особенности экспрессии молекулярно-биологических маркеров у

больных, радикально оперированных по поводу рака желудка.

Анализ экспрессии молекулярных маркеров (Р53, Ki-67, Bcl-2, Вах, HER-2/neu, Fas-лиганд в опухоли и лимфоцитах, VEGF, Тимидин фосфорилаза в клетках опухоли и стромы, Тимидилат синтетаза, AGT и СОХ-2), их ассоциации с различными клинико-морфологическими особенностями опухоли и прогнозом течения заболевания проведен у 67 больных, радикально оперированных по поводу рака желудка IB-IV(M0) стадий.

Анализ корреляции экспрессии молекулярных маркеров и клинико-морфологических характеристик выявил следующие особенности.

Опухоли, локализованные в средней трети тела желудка, по сравнению с другими локализациями, чаще характеризовались высокой экспрессией Bcl-2 (р=0,039; r,rs=0,569), ТФ в опухолевых клетках (р=0,037; r,rs=0,535) и высоким индексом пролиферативной активности Ki-67 (более 25%) (р=0,041; r,rs=0,673). При массивном опухолевом поражении желудка (тотальном и субтотальном) экспрессия VEGF в опухолевых клетках наблюдалась реже, чем при менее распространенном процессе (р=0,029; r,rs=0,300).

Прогностически неблагоприятные типы РЖ (перстневидноклеточная, слизистая аденокарцинома и недифференцированный рак), в сравнении с благоприятными, реже сопровождались гиперэкспрессией ТФ в опухолевых (40% и 89,4% соответственно; р=0,0001; r,rs=0,519) и стромальных клетках (70% и 91,5% соответственно; р=0,05; r,rs=0,276), гиперэкспрессией ТС (4% и 70,2% соответственно; р=0,029; r,rs=0,284) и СОХ-2 (55% и 80,9% соответственно; р=0,038; r,rs=0,267).

Экзофитно растущие опухоли, по сравнению с эндофитными, чаще имели высокую пролиферативную активность (Ki-67 более 25%) (89,5% и 58,6%) соответственно; р=0,002; r,rs=0,387), гиперэкспрессию Тимидин фосфорилазы в опухолевых (86,7% и 64,9% соответственно; р=0,05; r,rs=0,249) и стромальных клетках (96,7% и 75,5% соответственно; р=0,019; r,rs=0,293).

Кишечный тип опухоли, в сравнении с диффузным, чаще сопровождался гиперэкспрессией Вах (58,6% и 30,4% соответственно; р=0,04; r,rs=0,287) и ТФ в опухолевых клетках (93,1% и 43,5% соответственно; р<0,0001; r,rs=0,544).

Установлена прямая корреляция экспрессии Fas-лиганда в клетках опухоли и стадии опухолевого процесса: 7,7% при 1В-Н стадиях, 26,3% - при III стадии и 31,8% - при IV (М0) стадии заболевания (р=0,03 для групп 1В-Н и III-IV; r,rs=0,436).

Отмечено, что опухоли с высокой митотической активностью, по сравнению с опухолями с низкой митотической активностью, чаще

характеризовались гиперэкспрессией Вах (55,2% и 31,6% соответственно; р=0,024; г,г5=0,275) и ТФ в опухолевых (89,7% и 63,2% соответственно; р=0,013; г,г5=0,302) и стромальных клетках (96,% и 76,3% соответственно; р=0,021; г,г5=0,281).

Для оценки прогностической роли молекулярно-биологических маркеров больные были прослежены не менее 5 лет после удаления первичной опухоли, либо до появления метастазов.

Проведен анализ экспрессии маркеров в двух прогностических группах: благоприятной группе А (прогрессирования болезни не произошло в 5-летний период после удаления первичной опухоли) и неблагоприятной группе Б (прогрессирование болезни произошло в 5-летний период после удаления первичной опухоли). Установлено, что достоверными показателями прогноза являются высокая экспрессия Р53, низкая экспрессия Вах и низкая экспрессия Тимидин фосфорилазы в опухолевых клетках (таблица 4).

Таблица 4.

Характеристики прогностических групп

Маркер Группа А, п=43 Группа Б, п=24 Достоверность, р

Р53 - (п=43) 33 10 0,005

' Р53 + (п=24) 10 14

Вах - (п=38) 22 16 0,028

Вах + (п=29) 21 8

ТФоп - (п=17) 8 9 0,037

ТФоп +(п=50) 35 15

Метастазы после удаления первичной опухоли появились у 58,3% больных, положительных по Р53, и 32,6% - отрицательных по Р53, у 25% пациентов, положительных по Вах, и 51,4% - отрицательных по Вах, у 38% больных, положительных по ТФоп, и 62,9% - отрицательных по ТФоп.

Анализ экспрессии молекулярно-биологических маркеров и общей выживаемости больных РЖ представлен в таблице 5.

Таблица 5.

Экспрессия молекулярно-биологических маркеров и общая выживаемость больных раком желудка (п=67)

Показатель Средняя общая выживаемость, мес. Медиана ОВ, мес. Р

Р53 0,0131

Р53- (п=43) 101±7,6 (95%ДИ 86,3-115,9) не достигнута

Р53+ (п=24) 64,8±11,3 (95%ДИ 42,6-86,9) 33

Кл-67 0,193

И-б7- (п=17) 61,4±11,7 (95%ДИ 38,2-84,5) не достигнута

Ю-67+ (п=50) 93,9±7,3 (95%ДИ 79,6-108,1) не достигнута

Вс1-2 0,498

Вс1-2- (п—61) 87,4±7,2 (95%ДИ 73,4-101,4) не достигнута

Вс1-2+ (п=б) 97,3±16,4 (95%ДИ 65,2-129) не достигнута

Вах 0,0123

Вах- (п=38) 80,1±8,9 (95%ДИ 63-98) 76

Вах+ (п=29) 103,9±9,9 (95%ДИ 84-123) не достигнута

Нег-2/пеи 0,174

Нег-2/пеи- (п=64) 90,4±6,8 (95%ДИ 77-104) не достигнута

Нег-2/пеи+ (п=3) 42,3±24,8 (95%ДИ 0-90) 13

Раэ-лиганд (опухоль) - (п=53) 89,4±7,5 (95%ДИ 75-104) не достигнута 0,927

+ (п=14) 86,1±14,9 (95%ДИ 57-115) не достигнута

Раэ-лиганд (лимф.) -(п=51) 87,8±7,7 (95%ДИ 73-103) не достигнута 0,777

+ (п=16) 89,1±13,3 (95%ДИ 63-115) не достигнута

УЕвР в клетках 0,991

опухоли УЕОР- (п=31) 88,4±10,0 (95%ДИ 68-108) не достигнута

УЕСР+ (п=36) 88,9±9,0 (95%ДИ 71-106) не достигнута

ТФ в клетках опухоли ТФоп- (п=17) 61,7±14,9 (95%ДИ 32-91) не достигнута 0,019

ТФоп+ (п=50) 95,1±6,5 (95%ДИ 82-107) не достигнута

ТФ в строме опухоли ТФстр- (п-10) ТФстр+ (п=57) 56,3±16,6 (95%ДИ 23-88) 92,4±6,8 (95%ДИ 79-105) 16 не достигнута 0,032

СОХ-2 СОХ-2- (п=18) С0Х-2+ (П=49) 77,4±13,1 (95%ДИ 52-103) 91,8±7,7 (95%ДИ 77-107) 76 не достигнута 0,367

ТС ТС- (п=26) ТС+ (п=41) 76,2±Ю,5 (95%ДИ 55,6-96,8) 92,9±8,2 (95%ДИ 76,9-108,9) 76 не достигнута 0,152

АвТ АСТ- (п=16) АвТ+ (п=51) 94,6±11,6 (95%ДИ 71-117) 84,1 ±7,9 (95%ДИ 69-99) не достигнута 78 0,267

Выявлены маркеры, прогнозирующие общую выживаемость больных,

радикально оперированных по поводу рака желудка.

Установлена статистически значимая корреляция экспрессии Р53 и общей выживаемости больных РЖ. Медиана общей выживаемости в группе Р53+ составила 33 месяца, тогда как в группе Р53- медиана не достигнута. (р=0,013) (табл. 7 и рис. 1).

« в

■г с

20 40 60 60 100 120 140

Месяцы

Рисунок 1. Экспрессия Р53 и общая выживаемость больных раком желудка.

Получено статистически значимое улучшение общей выживаемости при гиперэкспрессии Тимидин фосфорилазы в опухолевых и стромальных клетках (табл. 7, рис. 2). В группе ТФоп+ средняя общая выживаемость

составила 95,1 месяцев, а в группе ТФоп- - 61,7 месяц (р=0,019). Медиана общей выживаемости в обеих группах не достигнута. В группе ТФстр+ средняя общая выживаемость составила 92,4 месяца, а в группе ТФстр— 56,3 месяцев (р=0,032). Медиана общей выживаемости в группе ТФстр-равнялась 16 месяцам, тогда как в группе ТФстр+ медиана не достигнута.

.а в к я

о .9

а .8

ТФоп + я я .6

ТФоп + (живы) Э ю

О ,5

ТФоп -

ТФоп - (живы) ,4

ТФстр

ТФстр + ТФстр + (живы) ТФстр -ТФстр - (живы)

А. Месяцы Б. Месяцы

Рисунок 2. Экспрессия ТФ в опухолевых (А) и стромальных (Б) клетках и общая выживаемость больных раком желудка.

Выявлено достоверное увеличение общей выживаемости в группе с гиперэкспрессией Вах (р=0,0123) (табл. 7, рис. 3). При опухолях Вах-медиана общей выживаемости составила 76 месяцев, а при опухолях Вах+ медиана не достигнута.

При многофакторном анализе установлено, что независимыми прогностическими факторами высокого риска прогрессирования и низкой общей выживаемости больных, радикально оперированных по поводу рака желудка с 1В-1У(М0) стадиями, являются высокая экспрессия р53 (р<0,05) и низкая экспрессия ТФ в опухолевых клетках (р<0,05).

1.2

к «

«о

Вах

Вах +

Вах + (живы) Вах-

Вах - (живы)

О 20 40 60 80 100 120 140

Месяцы

Рисунок 3. Экспрессия Вах и общая выживаемость больных раком желудка.

При стратификации по поражению регионарных лимфатических узлов (Ъ1+ и Ы-) в группе КГ- статистически значимое улучшение общей выживаемости отмечено при гиперэкспрессии ТС (р=0,003) и СОХ-2 (р=0,007) (таблица 6).

Таблица 6.

Экспрессия молекулярных маркеров и общая выживаемость больных РЖ в зависимости от поражения регионарных лимфатических узлов

Показатель Средняя ОВ, мес. Медиана ОВ, мес. Р

И- ТС- (п=12) ТС+ (п=21) 69,8±13,9 (95%ДИ 42-97) 116,1±7,6 (95%ДИ 101-131) 76 не достигнута 0,003

ТС- (п=14) ТС+ (п=20) 88,4±14,7 (95%ДИ 59-117) 58,2±9,9 (95%ДИ 38-77) не достигнута 32 0,39

СОХ-2- (п=9) СОХ-2+ (п=24) 56,2±9,31 (95%ДИ 38-74) 112,4±8,96 (95%ДИ 95-130) 71 не достигнута 0,007

N+ СОХ-2- (п=9) СОХ-2+ (п=25) 93,6±19,2 (95%ДИ 55-132) 60,2±8,5 (95%ДИ 44-77) не достигнута 35 0,42

ОВ - общая выживаемость.

В группе Ы- гиперэкспрессия ТС коррелировала с увеличением общей выживаемости (116 месяцев), в отличие от группы, в которой гиперэкспрессия ТС отсутствовала (69 месяцев).

Медиана общей выживаемости достигнута только в группе ТС- (76 месяцев). Гиперэкспрессия СОХ-2 также коррелировала с увеличением общей выживаемости (112 месяцев), в отличие от группы, в которой гиперэкспрессия СОХ-2 не определялась (56 месяцев). Медиана общей выживаемость достигнута только в группе СОХ-2- (71 месяц).

Анализ совместного влияния экспрессии маркеров на общую выживаемость показал, что сочетание экспрессии ТФ в опухолевых клетках и экспрессии Р53 дает наибольшую прогностическую информацию (таблица 7). Опухоли, обладающие фенотипом Р53+/ТФоп-, имели наихудший прогноз в виде 100% метастазирования и медианы общей выживаемости 11 мес.

Таблица 7.

Влияние на прогноз заболевания экспрессии Р53 и ТФ в опухолевых клетках

Прогностические Метастазирование Средняя Медиана

признаки (%) ОВ (мес.) ОВ (мес.)

Р53-/ТФоп+(п=31) 32,3 102,8 -

Р53-/ТФоп- (п=12) 33,3 89,8 -

Р53+/ТФоп+ (п=19) 52,4 78,2 76

Р53+/ТФоп- (п=5) 100 14,2 11

ОВ - общая выживаемость.

Таким образом, среди больных раком желудка 1В-1У(М0) стадий после выполнения радикальной операции, наименее прогностически благоприятной, характеризующейся высоким риском раннего метастазирования, явилась группа с фенотипом Р53+/ТФоп-

Клиническое изучение эффективности химиотерапии первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка и оценка экспрессии молекулярно-биологических маркеров.

Изучена эффективность химиотерапии первой линии в лечении 34 больных метастатическим раком желудка (табл. 8). На момент анализа 2 (5,9%) из 34 больных живы и продолжают лечение.

В связи с тем, что все пациенты получали химиотерапию с включением Цисплатина и фторпроизводных пиримидина (5-Фторурацил, Капецитабин, Б-1), а также в связи с отсутствием статистически значимой разницы в эффективности химиотерапии в трех лечебных группах, в дальнейшем анализ эффективности и экспрессия молекулярных маркеров проводится в общей группе больных мРЖ (п=34).

Таблица 8.

Эффективность химиотерапии первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка (п=34)

Показатель — Эфф| п ективность %

Объективный ответ (ЧР + ПР) 18 52,9

Стабилизация (>4 месяцев) 4 11,8

Прогрессирование болезни 12 35,3

Медиана времени до прогрессирования, мес. 6,0

Медиана общей выживаемости, мес. 14,0

1-годичная выживаемость 18 52,9

1,5-годичная выживаемость 10 29,4

ЧР - частичная регрессия, ПР - полная регрессия

На непосредственную эффективность, т.е. достижение полной и частичной регрессии, оказало статистически значимое влияние количество зон метастазирования и наличие первичной опухоли. У 24 пациентов с минимальным количеством зон метастазирования (1-2) объективный ответ достигнут чаще (59,2%), чем у 10 больных с 3 и более зонами метастатического поражения (33,4%) (р=0,021; г,г5= -0,578). При отсутствии первичной опухоли (п=9), удаленной как с паллиативной целью, так и при радикальной операции, объективный эффект достигнут чаще, чем при ее

сохранении (п=25): 66,5% и 40,2% соответственно (р=0,017; г,г5= -0,445).

На медиану времени до прогрессирования и медиану общей выживаемости больных мРЖ оказали статистически значимое влияние количество зон метастазирование, наличие первичной опухоли и непосредственная эффективность химиотерапии. У 24 пациентов с 1-2 зонами метастазирования медиана общей выживаемости составила 9 месяцев, а у 10 больных с 3 и более зонами - 5,8 месяцев (р=0,04). Медиана времени до прогрессирования в этих группах равнялась 5,0 и 2,0 месяцам соответственно (р=0,5). У 9 пациентов с удаленной первичной опухолью медиана общей выживаемости составила 21,1 месяц, а у 25 больных, у которых опухоль не была удалена -8,2 месяца (р=0,0017). Медиана времени до прогрессирования в этих группах составила 7,9 и 4,4 месяца соответственно (р=0,037). При достижении частичной и полной регрессии опухоли медиана общей выживаемости составила 12,2 месяцев, а при стабилизации болезни 34 месяцев и при прогрессировании - 4,0 мес. (р=0,001).

13 (38,2%) из 34 анализируемых пациентов получили химиотерапию второй линии, на момент начала лечения ЕССЮ их статус не превышал 1. Медиана общей выживаемости в этой группе больных составила 6,0 месяцев (от 3,5 до 22,0), медиана времени до прогрессирования - 4,5 месяца (от 2,0 до 20,0). Частичная регрессия или стабилизация болезни 54 месяцев достигнута у 4 больных (30,8%). Проведение эффективной химиотерапии второй линии увеличило медиану общей выживаемости: при прогрессировании болезни (п=9) - 3,2 месяца, при стабилизации болезни месяцев (п=2) - 5,7 месяцев, при частичной регрессии опухоли (п=2) - 9,5 месяцев.

При многофакторном анализе установлено, что независимыми прогностическими факторами, влияющими на выживаемость, явились отсутствие первичной опухоли к моменту начала лечения (р<0,05) и достижение объективного эффекта (ПР + ЧР) (р<0,05).

Анализ экспрессии молекулярных маркеров в группе больных мРЖ показал, что гиперэкспрессия Топоизомеразы-1, выявленная в 55,9% случаев, прямо коррелировала с экспрессией ТС (р=0,017; г,г5=0,668) и 8100А4 (р=0,044; г,г<г0,436). Гиперэкспрессия ТС отмечена у 42,1% мужчин (8/19) и у 100% женщин (15/15) (р=0,001; г,г5=0,600). При низкодифференцированной

аденокарциноме экспрессия Топоизомеразы-2а определялась в 61,9% случаев

(13/21), а при перстневиднокпеточном раке - в 23,1% (3/13) (р=0,02; г,г5=0,683).

Изучена корреляция экспрессии молекулярных маркеров и непосредственной эффективности химиотерапии (таблица 9).

Таблица 9.

Корреляция экспрессии молекулярных маркеров и непосредственной эффективности химиотерапии у больных мРЖ

Показатель ЧР + ПР, п (%) (п = 18) СБ + ПБ, п (%) (п = 16)

Ю-67 (более 25%) 8 (44,4) 12 (75,0)

ТФ в опухолевых клетках 6 (33,3) 8 (50,0)

ТФ в стромальных клетках 7 (38,9) 7 (43,8)

ТС 9 (50,0) 7 (43,8)

ЕКСС-1 2(11,1) 5 (31,3)

ХЯСС-1 14 (77,8) 13(81,3)

8100А4 в опухолевых клетках 11 (61,1) 12(75,0)

Б100А4 в стромальных клетках 11(61,1) 11 (68,8)

Топоизомераза 2-а 8 (44,4) 8 (50,0)

Топоизомераза 1 11 (61,1) 8 (50,0)

УЕйР 8 (44,4) 9 (56,3)

Р53 7 (38,9) 7 (43,8)

Вах 1 (5,6) 2(12,5)

Установлено, что в группе больных с достигнутым эффектом (ПР + ЧР) реже, чем при отсутствии эффекта (СБ + ПБ), встречались опухоли с высоким индексом пролиферативной активности (Кл-67>25%): 44,4% и 75% соответственно (р=0,05; г,г5= -0,400). Кроме того, в этой группе была ниже частота экспрессии Е11СС-1: 11,1% и 31,3% соответственно (р=0,05; г,г5= -0,755).

Наиболее благоприятными в плане эффективности химиотерапии оказались фенотипы Е11СС-ГЖл-67~ и Е11СС-17Кл-67+, которые

характеризовались высокой частотой достижения непосредственного эффекта (66,7 - 72,2%) в сравнении с группами ЕЯСС-1+/К1-67+ и ER.CC-Г/Кл-67" (27,8 - 33,3%) (таблица 10).

Таблица 10.

Эффективность химиотерапии и экспрессия Е11СС-1 и К1-67

Маркеры Количество случаев ПР+ЧР (%)

ЕЯСС-Г/Кл-67+ 5 27,8

ЕКСС-1+/Кл-67" 6 33,3

ЕЯСС-17Кл-67+ 11 66,7

ЕЯСС-Г/КШ' 12 72,2

Установлено, что при гиперэкспрессии ЕК.СС-1 наблюдалась меньшая, чем при отсутствии экспрессии, медиана времени до прогрессирования (3,0 и 5,0 месяцев соответственно, р=0,048) и медиана общей выживаемости (7,0 и 10,0 месяцев соответственно, р=0,035).

Анализ совместной экспрессии молекулярных маркеров показал наличие модуляции медианы времени до прогрессирования и медианы общей выживаемости в группе опухолей, имеющих экспрессию ТФоп в сравнении с опухолями, не имеющими данной экспрессии (таблица 11). Таким образом, из всех анализируемых групп (ЕКСС-Г/ТФоп+, ЕЯСС-17ТФоп+, ЕЯСС-1 +/ТФоп~ и ЕЯСС-Г/ТФоп") наименее прогностически благоприятной оказалась группа опухолей с фенотипом ЕКСС-1+/ТФоп+.

Таблица 11.

Медиана общей выживаемости больных мРЖ и экспрессия Е11СС-1 и ТФ в опухолевых клетках

Фенотип Медиана ВДП, мес. Р Медиана ОВ, мес. Р

ЕЯСС-1+/ТФоп+ 2,0 0,053 4,0 0,012

ЕКСС-1-/ТФоп+ 6,0 12,0

ЕЯСС-1 +/ТФоп- 4,0 - 7,0 -

ЕЯСС-1-/ТФоп- 4,0 7,0

Опыт применения Герцептина в комбинации с химиотерапией в 1-й линии лечения больных мРЖ с гиперэкспрессией/амплификацией HER-2/neu.

С 2006 по 2010 гг. в отделении химиотерапии и комбинированного лечения злокачественных опухолей РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН лечение получили 6 больных, имеющих HER-2-позитивный статус опухоли, который подтвержден ИГХ методом (3+, п=6) и FISH реакцией (выявлена амплификация гена, п=6).

В первой линии лечения использовались следующие режимы химиотерапии: 1) Цисплатин 80 мг/м2 день 1, Капецитабин 2000 мг/м2/сутки день 1-14, каждые 3 недели, общим числом курсов 6; 2) Таксотер 35 мг/м2 день 1 и 8, Оксалиплатин 70 мг/м2 день 1 и 8, Кселода 1600 мг/м2/сутки в два приема день 1-14, каждые 3 недели, общим числом курсов 6. У 3 из 6 больных проведен курс химиотерапии с включением Трастузумаба, который назначался в трехнедельном режиме (8 мг/кг (нагрузочная доза), затем 6 мг/кг в/в 90-минутная инфузия день 1) в комбинации с химиотерапией и после ее завершения до прогрессирования болезни. Больным, получавшим Трастузумаб, до начала участия в исследовании выполнялась эхокардиография (критерий включения - уровень фракции выброса левого желудочка ^>5%). В исследование не включались пациенты с отягощенным кардиологическим анамнезом (инфаркт миокарда в течение 6 месяцев до начала лечения, неконтролируемая артериальная гипертензия, сердечная недостаточность, стенокардия, требующая медикаментозной терапии). Кардиологический мониторинг осуществлялся у всех больных перед началом участия в исследовании и каждые 12 недель после.

На момент анализа 2 из 6 пациентов живы и продолжают лечение. Анализ эффективности химиотерапии представлен в таблице 12.

Таблица 12.

Эффективность химиотерапии ± Герцептин у больных мРЖ с гиперэкспрессией/амплификацией НЕИ-2/пеи

Показатель Химиотерапия + Химиотерапия

Трастузумаб (п=3) (п=3)

Медиана времени до 17,0 5,0

прогрессирования, мес.

Общая выживаемость, мес. 24,0+ 7,0

В группе больных, получавших Трастузумаб (п=3), у 1 удалось достичь полной регрессии опухоли, у 2 - частичной регрессии. В группе не получавших Трастузумаб, у 2 из 3 пациентов получена частичная регрессия опухоли, у 1 - наступило прогрессирование болезни после 2-х курсов химиотерапии. Медиана времени до прогрессирования заболевания составила соответственно 5,0 и 17,0 месяцев в группах Трастузумаб- и Трастузумабн-. Медиана общей выживаемости в группе Трастузумаб-составила 7,0 месяцев, а в группе Трастузумаб+ не достигнута. Средняя общая выживаемость в группе получавших Трастузумаб пациентов достигла 24,0+ месяцев.

Согласно проведенному анализу, добавление Герцептина увеличивало медиану времени до прогрессирования и среднюю общую выживаемость больных мРЖ с гиперэкспрессией/амплификацией НЕЯ-2/пеи.

ВЫВОДЫ

1. Факторами неблагоприятного прогноза и высокого риска метастазирования у больных, радикально оперированных по поводу рака желудка, явились наличие экспрессии Р53 (р=0,013), отсутствие экспрессии Вах (р=0,012) и ТФ в опухолевых (р=0,019) и стромальных клетках (р=0,032).

2. При отсутствии поражения регионарных лимфатических узлов факторами неблагоприятного прогноза у больных, радикально

оперированных по поводу рака желудка, явились отсутствие экспрессии ТС (р=0,003) или СОХ-2 (р=0,007).

3. При многофакторном анализе установлено, что независимыми прогностическими факторами низкой общей выживаемости больных, радикально оперированных по поводу рака желудка, явились высокая экспрессия Р53 (р<0,05) и низкая экспрессия ТФ в опухолевых клетках (р<0,05).

4. Наименее благоприятный прогноз у больных раком желудка с 1В-1У(М0) стадиями после выполнения радикальной операции отмечен при фенотипе первичной опухоли Р53+/ТФоп~ (медиана общей выживаемости у данной группы составляет 11 месяцев).

5. Эффективность новых режимов химиотерапии с включением Цисплатина и фторпроизводных пиримидина (капецитабин, Б-1) в первой линии лечения больных метастатическим раком желудка составила 52,9% (ПР + ЧР), медиана времени до прогрессирования - 6,0 месяцев, а медиана общей выживаемости - 14,0 месяцев. 1-годичная общая выживаемость составила 52,9%, а 1,5-годичная - 29,4%.

6. Наличие первичной опухоли (р=0,017), 3 и более зоны метастатического поражения (р=0,021), присутствие экспрессии Е11СС-1 (р=0,05) и высокая пролиферативная активность опухоли (К>67 более 25%) (р=0,05) явились факторами, отрицательно влияющими на частоту достижения частичной и полной регрессии, для комбинации Цисплатина и фторпроизводных пиримидина в первой линии лечения больных мРЖ.

7. Независимыми прогностическими факторами, характеризующими высокую медиану общей выживаемости больных мРЖ оказались: отсутствие первичной опухоли к моменту начала лечения (р<0,05), достижение объективного эффекта (ПР + ЧР) (р<0,05) и отсутствие экспрессии ЕЯСС-1 (р=0,035).

8. При изучении эффективности Герцептина в комбинации с химиотерапией первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка с гиперэкспрессией/амплификацией НЕЯ-2/пеи установлено, что добавление Герцептина увеличивало медиану времени до прогрессирования с 5,0 до 17,0 месяцев. Медиана общей выживаемости в группе больных, не получавших Трастузумаб, составила 7,0 месяцев, а в группе больных, получавших Трастузумаб, медиана не достигнута, а средняя общая выживаемость составила 24,0+ месяца.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1. Луд, А.Н. Капецитабин в лечении больных раком желудка / А.Н. Луд // Фарматека.12009. - № 18. - С. 53-56.

2. Луд, А.Н. Применение Авастина в лечении злокачественных опухолей желудочно-кишечного тракта / А.Н. Луд, И.П. Ганыпина // Фарматека. -2008. -№ 19. - С.15-21.

3. Луд, А.Н. Экспрессия тимидилат синтетазы и тимидин фосфорилазы в ткани опухоли у больных раком желудка, получавших адъювантную химиотерапию с включением фторурацила / А.Н. Луд, Е.В. Степанова, Я.В. Вишневская, А.И. Шмак, В.В. Жарков, А.Ю. Барышников // Российский биотерапевтический журнал. - 2007. - № 4. - С. 1-7.

4. Луд, А.Н. Применение Элоксатина в лечении больных раком толстой кишки и желудка / А.Н. Луд // Фарматека. - 2007. - № 18. - С. 17-22.

5. Луд, А.Н. Значение молекулярно-биологических маркеров при раке желудка и пищевода / А.Н. Луд / Российский биотерапевтический журнал. -

007. - № 3. - С. 38-42.

6. Луд, А.Н. Молекулярно-биологические маркеры при раке желудка: ффективность химиотерапии, факторы прогноза / А.Н. Луд // Достижения »ундаментальной, клинической медицины и фармации. Материалы 62-й аучной сессии сотрудников ВГМУ, Витебск, Беларусь, 15-20 нояб. 2007. -:. 255-257.

7. Луд, А.Н. Новые возможности использования молекулярно-биологических маркеров в прогнозировании эффективности химиотерапии с включением фторпиримидинов / А.Н. Луд, Е.В. Степанова // Достижения фундаментальной, клинической медицины 63-й научной сессии сотрудников ВГМУ, Витебск, Беларусь, 12 - 16 нояб. 2008. - С. 217-220.

8. Lud, Н. Expression for thymidylate synthase and thymidine phosphorylase intumour tissue for gastric cancer patients treated with adjuvant 5-fluorouraciland leucovorin chemotherapy / H. Lud, E. Stepanova, Y. Vyshnevskaya, A. Baryshnikov // 19th International Congress on Anti-Cancer Treatment (ICACT), Paris, France. 5-8 Febr. 2008. - P. 125.

9. Луд, А.Н. Факторы прогноза при раке желудка / А.Н. Луд // Достижения фундаментальной, клинической медицины и фармации. Материалы 64-й юбилейной научной сессии ВГМУ, посвященной 75-летию его образования, Витебск, Беларусь, 17-21 нояб. 2009. - С. 37-40.

Подписано в печать 17.05. ю Формат 60X84/16 Бумага офисная «ЗуеЮСору». Тираж 100 экз. Заказ № 475 Отпечатано на УМТ РОЩ им. Н.Н.Блохина РАМН 115478, Москва, Каширское ш., 24

Оглавление диссертации Луд, Анна Николаевна :: 2010 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Пациенты, радикально оперированные по поводу рака желудка.

4 2.2. Пациенты с метастатическим раком желудка.

2.3. Иммуногистохимическое исследование.

2.4. Статистический анализ.

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Особенности экспрессии молекулярно-биологических маркеров у больных, радикально оперированных по поводу рака желудка.

3.1.1. Анализ корреляции экспрессии молекулярно-биологических маркеров и клинико-морфологических характеристик.

3.1.2. Клинико-морфологические характеристики опухоли и отдаленные результаты лечения больных, радикально оперированных по поводу рака желудка.

3.1.3. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров и прогноз в группе больных, радикально оперированных по поводу рака желудка. 67 3.2. Клиническое изучение эффективности химиотерапии первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка и оценка экспрессии молекулярно-биологических маркеров.

3.2.1. Эффективность химиотерапии первой линии лечения больных метастатическим раком желудка.

3.2.2. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров и их корреляция с клинико-морфологическими характеристиками, эффективностью химиотерапии и прогнозом течения метастатического рака желудка.

3.2.3. Опыт применения Герцептина в комбинации с химиотерапией в первой линии лечения больных метастатическим раком желудка с гиперэкспрессией/амплификацией HER-2/neu.

ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации по теме "Онкология", Луд, Анна Николаевна, автореферат

Актуальность проблемы.

В России рак желудка занимает второе место в структуре онкологической заболеваемости у мужчин (10,8%) и третье — у женщин (7,5%). Ежегодно выявляется 41 930 новых случаев заболевания. В структуре смертности от злокачественных новообразований рак желудка стоит на втором месте, составляя среди мужского и женского населения соответственно 13,9% и 12,4%.

В связи с этим большой интерес представляет изучение молекулярно-биологических маркеров, т.е. белков и генов, изменения которых находят в опухолевой клетке. Они несут дополнительную информацию о способности опухоли к пролиферации, инвазии, метастазированию, а также могут предсказывать индивидуальную чувствительность к химиотерапии.

При раке желудка комплексное изучение молекулярных маркеров прежде не проводилось.

Цель исследования.

Задачи исследования.

1. Оценить экспрессию молекулярно-биологических маркеров (Р53, Вс1-2, Вах, Тимидин фосфорилаза, Тимидилат синтетаза, HER-2/neu, Ki-67, VEGF, Fas-лиганд, AGT, СОХ-2, Топоизомераза-1, Топоизомераза-2а, ERCC-1, XRCC-1, S100A4) у больных раком желудка и их корреляцию с клинико-морфологическими характеристиками опухоли.

2. Определить прогностическую роль молекулярно-биологических маркеров у больных раком желудка.

3. Оценить эффективность химиотерапии первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка.

Научная новизна и практическая значимость.

Впервые изучена широкая панель молекулярно-биологических маркеров (Р53, Вс1-2, Вах, Тимидин фосфорилаза, Тимидилат синтетаза, HER-2/neu, Ki-67, VEGF, Fas-лиганд, AGT, COX-2, Топоизомераза-1, Топоизоме-раза-2а, ERCC-1, XRCC-1, S100A4) при раке желудка. Изучены особенности экспрессии, корреляции с клинико-морфологическими характеристиками опухоли и взаимного влияния маркеров на прогрессирование болезни.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Апробация работы.

Основные результаты исследований доложены на ряде международных конференций и съездов: научной сессии сотрудников ВГМУ (Витебск, Беларусь) «Достижения фундаментальной, клинической медицины и фармации» в 2007 г., 2008 г.; на международном конгрессе по противоопухолевой терапии в 2008 г.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста, содержит 30 таблиц, 17 рисунков и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы», изложения собственных результатов, обсуждения и выводов. Список литературы включает 168 источников, в том числе 24 отечественных и 144 иностранных.

Заключение диссертационного исследования на тему "Значение молекулярно-биологических маркеров при раке желудка"

выводы

2. При отсутствии поражения регионарных лимфатических узлов факторами неблагоприятного прогноза у больных, радикально оперированных по поводу рака желудка, явились отсутствие экспрессии ТС (р=0,003) или СОХ-2 (р=0,007).

4. Наименее благоприятный прогноз у больных раком желудка с IB-IV(Mo) стадиями после выполнения радикальной операции отмечен при фенотипе первичной опухоли Р53+/ТФоп~ (медиана общей выживаемости у данной группы составляет 11 месяцев).

5. Эффективность новых режимов химиотерапии с включением Цисплатина и фторпроизводных пиримидина (капецитабин, S-1) в первой линии лечения больных метастатическим раком желудка составила 52,9% (ПР + ЧР), медиана времени до прогрессирования - 6,0 месяцев, а медиана общей выживаемости — 14,0 месяцев. 1-годичная общая выживаемость составила 52,9%, а 1,5-годичная - 29,4%.

6. Наличие первичной опухоли (р=0,017), 3 и более зоны метастатического поражения (р=0,021), присутствие экспрессии ERCC-1 (р=0,05) и высокая пролиферативная активность опухоли (Ki-67 более 25%) (р=0,05) явились факторами, отрицательно влияющими на частоту достижения частичной и полной регрессии, для комбинации Цисплатина и фторпроизводных пиримидина в первой линии лечения больных мРЖ.

8. При изучении эффективности Герцептина в комбинации с химиотерапией первой линии в лечении больных метастатическим раком желудка с гиперэкспрессией/амплификацией HER-2/neu установлено, что добавление Герцептина увеличивало медиану времени до прогрессирования с 5,0 до 17,0 месяцев. Медиана общей выживаемости в группе больных, не получавших Трастузумаб, составила 7,0 месяцев, а в группе больных, получавших Тра-стузумаб, медиана не достигнута, а средняя общая выживаемость составила 24,0+ месяца.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Луд, Анна Николаевна

1. Базин И.С. Рак желудка: значение проблемы и современные возможности лечения / И. С. Базин, А. М. Гарин // Росс. мед. журнал. - 2002. - Т. 10, № 14.-С. 1-14.

2. Бердов Б.А. Сравнительный анализ непосредственных результатов комбинированного и хирургического лечения рака желудка / Б. А. Бердов и др. // Вопросы онкологии. 2007. - Т. 53, № 4. - С. 419-426.

3. Вашакмадзе JI.A. Результаты паллиативных операций при раке желудка / JI. А. Вашакмадзе, А. В. Бутенко, О. В. Пикин // Росс, онкол. журнал. -2000. -№ 5. -С. 32-34.

4. Голдобенко Г.В. Рак желудочно-кишечного тракта проблемы лучевой терапии / Г. В. Голдобенко и др. // Вопр.онкол. - 1999. - № 2. - С. 198-201.

5. Давыдов М.И. Современные методы диагностики и лечения рака желудка // Росс, журнал гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. 1997. — № 1. - С. 35-38.

6. Давыдов М.И. Принципы хирургического лечения злокачественных опухолей в торако-абдоминальной клинике / М. И. Давыдов // Вопр. онкол. -2002. № 4-5. - С. 468-479.

7. Давыдов М.И. Пути улучшения результатов хирургического лечения рака проксимального отдела желудка / М. И. Давыдов и др. // Росс, онкол. журнал. 1996.-№1. - С. 17-19.

8. Давыдов М.И. Современная стратегия хирургического лечения рака желудка / М. И. Давыдов, М. Д. Тер-Ованесов // Соврем.онкол. 2000. - Т. 2, № 1. - С.4-10.

9. Дарьялова C.JI. Современные возможности лучевой терапии злокачественных опухолей / С. Л. Дарьялова, А. В. Бойко, А. В. Черниченко // Росс, онкол. журн. 2000. - № 1. - С. 48-55.

10. Клименков А.А. Комбинированные операции при раке желудка / А. А. Клименков и др. // Хирургия. 1991. - № 4. - С. 21-25.

11. Клименков А.А. Основные направления в изучении проблемы операбельного рака желудка / А. А. Клименков, С. Н. Неред, Г. И. Губина // Вестн. РАН. -2001. -№9.- С. 71-74.

12. Русанов А.А. Рак желудка / А. А. Русанов. М.: Медицина, 1979. - 230 с.

13. Сельчук В.Ю. Рак желудка / В. Ю. Сельчук, М. П. Никулин // Росс.мед. журнал. 2003. - Т. 11, № 26. - С. 14-21.

14. Серов В.В. Клиническая морфология и прогноз рака желудка / В. В. Серов // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол. колопроктол. 1997. - Т. 7. - С. 3135.

15. Скоропад В.Ю. Сравнительный анализ отдаленных результатов комбинированного и хирургического лечения рака желудка / В. Ю. Скоропад и др. // Вопросы онкологии. 2007. - Т. 53, № 4. - С. 427-435.

16. Слинчак С.М. Рак желудка / С. М. Слинчак. К.: Здоровье, 1985. - 200 с.

17. Тер-Ованесов М.Д. Факторы прогноза рака проксимального отдела желудка. Что определяет результаты хирургического лечения? / М. Д. Тер-Ованесов и др. // Материалы V съезда онкологов и радиологов СНГ, Ташкент, 14-16 мая 2008 г. С. 323-324.

18. Черноусов А.Ф. Радикальное хирургическое лечение раннего рака желудка / А. Ф. Черноусов, Ф. А. Черноусов, И. М. Селиванова // Хирургия. -2004.-№7.-С. 4-8.

19. Чиссов В.И. Злокачественные новообразования в России в 1997 году / В. И. Чиссов, В. В. Старинский, JI. В. Ременник. М., 1999.

20. Чиссов В.И. Циркуляция опухолевых клеток в кровеносном русле во время оперативного вмешательства у больных раком желудка / В.И. Чиссов и др. // Совет, мед. 1983. -№ 12. - С. 47-51.

21. Чиссов В.И. Расширенная лимфаденэктомия при раке желудка / В. И. Чиссов, А. М. Авербах // Хирургия. 1998. - № 1. - С. 52-56.

22. Щепотин И.Б. Рак желудка: практическое руководство по профилактике, диагностике и лечению / И. Б. Щепотин, С.Р.Т. Эванс. Киев «Книга Плюс», 2000. - 227 с.

23. Bailey C. Stomach cancer / C. Bailey // Clin. Evid. 2002. - N 8. - P. 469-480.

24. Bando E. Prognostic value of age and sex in early gastric cancer / E. Bando, N. Kojima, T. Kawamura // Br. J. Surg. 2004. - Vol. 91, N 9. - P. 1197-1201.

25. Berse В., Brown L., Van de Water L., et al.: Vascular permeability factor (vascular endothelial growth factor) gene is expressed differentially in normal tissues, macrophages and tumors./ Mol. Biol. Cell, 1992; 3:211-220.

26. Blanke C, Haller D, Benson A., et al. A phase II study of irinotecan with 5-fluorouracil and leucovorin in patients with previously untreated gastric adenocarcinoma. Ann Oncol 2001; 12: 1575-1580.

27. Boku N, Chin K, Hosokawa K, et al. Biological markers as a predictor for response and prognosis of unresectable gastric cancer patients treated with 5-fluorouracil and cis-platinum. Clin Cancer Res 1998; 4:1469-74.

28. Bonenkamp J.J. Surgery for upper gastrointestinal malignancies / J.J. Bonen-kamp // Semin. Oncol. 2004: - Vol.31, N 4. - P. 542-553.

29. Bottcher K. et al. Prognosefaktoren beim Magencarcinon. Ergebnisse einer uni-und multivatiaten Analyse // Chirurg. 1992. - N 63. - P. 656-661.

30. Bozzetti F. Comment on «Subtotal versus total gastrectomy for T3 adenocarcinoma of the antrum» / F. Bozzetti // Gastric. Cancer. 2003. - Vol. 6, N 4. - P. 237-242.

31. Cao Y., Linden P., Farnebo J., et al.: Vascular endothelial growth factor С induces angiogenesis in vivo./ Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998; 95: 1438914394.

32. Chen C., Sung C., Lin M., et al.Clinicopathologic association of cyclooxyge-nase 1 and cyclooxygenase 2 expression in gastric adenocarcinoma. Ann Surg 2001;233:183-8.

33. Chen X. et al. Detection of micrometastasis of gastric carcinoma in peripheral blood circulation / // World J. Gastroenterol. 2004. - Vol. 10, N 6. - P. 804808.

34. Cho Y., Kim C., Kim S., et al. Overexpression of S100A4 is closely associated with the progression of gastric cancers and hepatocellular carcinomas. Proc Amer Assoc Cancer Res, Volume 45, 2004. Abstract 5058.

35. Corte-Funes H, Rivera F, Ale I., et al. Phase II of trastuzumab and cisplatin in patients with advanced gastric cancer with HER2/neu overexpres-sion/amplification. J Clin Oncol 2007; 15: 18S (Abstr 4613).

36. Cozzaglio Z. et al. Gastric cancer: extent of lymph node dissection and re-guirements for a correct staging // Tumori. 2004. - Vol. 90, N 5. - P. 467472.

37. Cunningham D, Allum WH, Stenning SP et al. Perioperative chemotherapy versus surgery alone for resectable gastroesophageal cancer. N Engl J, Med 2006; 355: 11-20.

38. Cunningham D, Starling N, Rao S, et al. Capecitabine and Oxaliplatin for Advanced Esophagogastric Cancer. N. Engl. J. Med., Jan 2008; 358: 36 46.

39. Edwards P. et al. Prospective comparison of D1 vs modified D2 gastrectomy for carcinoma // Br. J. Cancer. 2004. - Vol. 90, N 10. - P. 1888-1892.

40. Eliuahu D., Michalooilz D., Oren M., et al Overexpression p53 antigen makes established cells highly tumor nic//Ibid. 1985. - Vol. 3. - P. 158-160.

41. Ellis L.M., Liu W., et al. Vascular endothelial growth factor (VEGF) expression and alternate splicing in non-metastatic and metastatic human colon cancer cell lines./Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 1995; 36: 88a.

42. Eroglu A., Demirci S., Ayyildiz A., et al. Serum concentrations of vascular endothelial growth factor and nitrite as an estimate of in vivo nitric oxide in patients with gastric cancer. Br J Cancer 80:1630-1634, 1999.

43. Ferrara N., Alitalo K., et al. Clinical applications of angiogenic growth factors and their inhibitors./ Nat. Med., 1999; 5: 1359-1364.

44. Ferrara N., et al. Vascular endothelial growth factor: molecular and biological aspects./ Curr. Top. Microbiol., Immunol., 1999; 237: 1-30.

45. Ferrara N., Henzel W., et al. Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding growth factor specific for vascular endothelial cells./ Biochem. Bio-phys. Res. Commun., 1989; 161: 851-858.

46. Findlay M, Cunningham D, Norman A et al. A phase II study in advanced gastroesophageal cancer using epirubicin and cisplatin in combination with continuous infusion 5-fluorouracil (ECF). Ann Oncol 1994; 5: 609-616.

47. Folkman J., et al. Tumor angiogenesis: therapeutic implications./ N. Eng. J. Med., 1971; 285: 1182-1186.

48. Fukushimai M., Morita M. et al Population study of expression of thymidylate synthase and dihydropyrimidine dehydrogenase in patients with solid tumors. International journal of molecular medicine 12: 839-844, 2003.

49. Gadgeel S., Shields A., Heilbrun L., et al. Phase II study of paclitaxel and car-boplatin in patients with advanced gastric cancer. Am J Clin Oncol 2003; 26: 37-41.

50. Grau J, Domingo-Domenech J, Morente V, et al. Low thymidylate synthase expression in the primary tumor predicts favorable clinical outcome in resected gastric cancer patients treated with adjuvant tegafur. Oncology 2004;66:226-33.

51. Graziano F, Cascinu S, Staccioli M, et al. Potential role and chronology of abnormal expression of the Deleted in Colon Cancer (DCC) and the p53 proteins in the development of gastric cancer. BMC Cancer 2001 ;1:9.

52. Greenblatt M., Bennett W., Hollstein M., et al.: Mutations in the p53 tumor suppressor gene: clues to cancer etiology and molecular pathogenesis./ Cancer Res., 1994; 54: 4855-4878.

53. Hoeijmakers J., et al. Nucleotide excision repair, II: From yeast to mammals. Trends Genet 9:211-217, 1993.

54. Ireland A, Clark G, DeMeester Т., et al. Barrett's esophagus: the significance of p53 in clinical practice. Ann Surg 1997;225:17-30.

55. IshidaTI, Irie K, Itoh T, et al. The prognostic significance of p53 and bcl-2 expression in lung adenocarcinomas and its correlation with Ki-67 growth fraction. Cancer 1997;80: 1034-45.

56. Ito H. et al. Adenocarcinoma of the gastric cardia: what is the optimal surgical approach? // J. Am. Coll. Surg. 2004. - Vol. 199, N 6. - P. 880-886.

57. Jain S., Filipe M., Gullick W., et al. C-erbB-2 proto-oncogene expression and its relationship to survival in gastric carcinomas: an immunohistochemical study on archival material. Int J Cancer 1991;48:668-71.

58. Kameda Т., Yasui W., Yoshida K., et al. Expression of ERBB2 in human gastric carcinomas: relationship between pl85ERBB2 expression and the gene amplification. Cancer Res 1990; 50, 8002-9.

59. Karayiannakis A., Syrigos K., Polychronidis A., et al: Circulating VEGF levels in the serum of gastric cancer patients. Ann Surg 236:37-42, 2002.

60. Khatsi V.P. D2 5 dissection for gastric carcinoma / V. P. Khatsi, H. O. Douglass // Asch. Surg. 2004. - Vol. 139, N 6. - P. 652-659.

61. Kim D. et al. Factors related to lymph node metastasis and surgical strategy used to treat early gastric carcinoma / // World J. Gastroenterol. 2004. - Vol. 10, N5.-P. 737-740.

62. Kim T, Kang Y, Ahn J., et al. Phase II study of capecitabine plus cisplatin as first-line chemotherapy in advanced gastric cancer. Ann Oncol 2002; 13: 18931898.

63. Klein H, et al. Long-term results with FAMTX (5-fluorouracil, adriamycin, methotrexate) in advanced gastric cancer. Anticancer Res 1989; 9: 1025-1026.

64. Koizumi W., Hyodo I., Sakamoto J. et al. Response to capecitabine according to thymidine phosphorylase (TP) and dihydropyrimidine dehydrogenase (DPD) expression profiles in gastric cancer (GC). 2003 ASCO Annual Meeting. Abstract 1222.

65. Kolev Y., Uetake H., Iida S., et al. Prognostic Significance of VEGF Expression in Correlation With COX-2, Microvessel Density, and Clinicopathological

66. Characteristics in Human Gastric Carcinoma. Annals of Surgical Oncology 14:2738-2747 (2007).

67. Kornek G, Schulz F, Depisch D et al. A phase I—II study of epirubicin, 5-fluorouracil, and leucovorin in advanced adenocarcinoma of the stomach. Cancer 1993; 71: 2177-2180.

68. Kraker A, Moore C., et al. Elevated DNA polymerase beta activity in a cis-diamminedichloroplatinum (II) resistant P388 murine leukemia cell line. Cancer Lett 38:307-314, 1988.

69. Kwon H., Roh M., Oh S., et al. Prognostic value of expression of ERCC1, thymidylate synthase, and glutathione S-transferase PI for 5-fluorouracil/oxaliplatin chemotherapy in advanced gastric cancer. Annals of Oncology 18: 504-509, 2007.

70. Lacave A, Baron F, Anton L., et al. Combination chemotherapy with cisplatin and 5-fluorouracil 5-day infusion in the therapy of advanced gastric cancer: a phase II trial. Ann Oncol 1991; 2: 751-754.

71. Larminat F, Bohr LA: Role of human ERCC-I gene in genespecific repair of cisplatin-induced DNA damage. Nuc Acid Res 22:3005-3010, 1994.

72. Lee E, Cibull M, Strodel W, et al. Expression of HER-2/neu oncoprotein and epidermal growth factor receptor and prognosis in gastric carcinoma. Arch Pathol Lab Med 1994;118:235-9.

73. Lee К, Lee H. Prognostic Significance of p53, nm23, PCNA and c-erbB-2 in Gastric Cancer. Jpn J Clin Oncol 2003;33(4)173-179.

74. Leung D., Cachianes G., Kuang W., et al.: Vascular endothelial growth factor is a secreted angiogenic mitogen./ Science, 1989; 246: 1306-1309.

75. Levi F. et al. Monitoring falls in gastric cancer mortality in Europe // Ann. Oncol. 2004. - Vol. 15. - P. 338-345.

76. Levi F. et al.Cancer mortality in Europe, 1995-1999, and an overview of trends since 1960 // Int. J. Cancer. 2003. - Vol. 110. - P. 155-169.

77. Liu J, Chen M., et al. Prognostic Implications of the Expression of erbB2, To-poisomerase Ha and Thymidylate Synthase in Metastatic Gastric Cancer After Fluorouracil-based Therapy. Jpn J Clin Oncol 2004;34(12)727-732.

78. Longley D, Harkin D, Johnston P. 5-fluorouracil: mechanisms of action and clinical strategies. Nat Rev Cancer 2003;3:330-8.

79. Lordick F, Bang Y, Kang Y., et al. HER2-positive advanced gastric cancer: similar HER2-positivity levels to breast cancer. Eur J Cancer 2007; 5(4): 271 (Abstr 3541).

80. Louvet C, Andre T, Tigaud J., et al. Phase II study of oxaliplatin, fluorouracil, and folinic acid in locally advanced or metastatic gastric cancer patients. J Clin Oncol 2002; 20: 4543-4548.

81. Lowe S., et al. p53 status and the efficacy of cancer therapy therapy in vivo. Science 1994; 266: 807-810.

82. MacDonald J, Schein P, Woolley P., et al. 5-Fluorouracil, doxorubicin, and mitomycin (FAM) combination chemotherapy for advanced gastric cancer. Ann Intern Med 1980; 93: 533-536.

83. Madzhov R. et al. Gastric cancer. Treatment results in 237 patients // Khirur-giia. 2003. - Vol. 59, N 6. - P. 4-7.

84. Maeda K., Chung Y., Ogawa S., et al: Prognostic value of vascular endothelial growth factor expression in gastric carcinoma. Cancer 77:858-863, 1996.

85. Meropol N, Gold P., Diasio R., et al. Thymidine Phosphorylase Expression Is Associated With Response to Capecitabine Plus Irinotecan in Patients With Metastatic Colorectal Cancer. J Clin Oncol 24:4069-4077. 2006.

86. Meyerhardt J., Fuchs C., et al. Adjuvant therapy in gastric cancer: can we prevent recurrences? Oncology 2003; 17: 714-722.

87. Mrena J., Wiksten Y., Thie A., et al. Cyclooxygenase-2 Is an Independent Prognostic Factor in Gastric Cancer and Its Expression Is Regulated by the Messenger RNA Stability Factor HuR. Clin Cancer Res 2005; 11(20) October 15,2005.

88. Murata H., Kawano S.,Tsuji S., et al. Cyclooxygenase-2 overexpression enhances lymphatic invasion and metastasis in human gastric carcinoma. AmJ Gastroenterol 1999;94:451-5.

89. Nagashima F., Boku N., Ohtsu A. Biological Markers as a Predictor for Response and Prognosis of Unresectable Gastric Cancer Patients Treated with Iri-notecan and Cisplatin. Jpn J Clin Oncol 2005;35(12)714-719.

90. Napieralski R., Ott 1С., Kremer M., et al: Combined GADD45A and Thymidine Phosphorylase Expression Levels Predict Response and Survival of Neoadjuvant-Treated Gastric Cancer Patients. Clin Cancer Res 2005; pp. 30253031, 11(8) April 15,2005.

91. Nicholas G, Cripps C, Au H-P., et al. Early results of a trial of trastuzumab, cisplatin and docetaxel for the treatment of metastatic gastric cancer overex-pressing HER-2. ESMO 2006; 17 (Suppl 9):316 (Abstr 1105).

92. Ochiai A, Yamauchi Y, Hirohashi S., et al. p53 mutations in the nonneoplastic mucosa of the human stomach showing intestinal metaplasia. Int J Cancer 1996;69:28-33.

93. Oh S., Kwon H., Yoo H., et al. Preoperative level of VEGF and IL-6 are associated with lymph node invasion and stage in gastric cancer. 2007 ASCO Annual Meeting. Abstract 4626.

94. Ohguri T, Sato Y, Koizumi W, et al. An immunohistochemical study of c-erbB-2 protein in gastric carcinomas and lymph-node metastases: is the c-erbB-2 protein really a prognostic indicator? Int J Cancer 1993;53:75-9.

95. Ohno S., Tachibana M., Shibakita M., et al. Prognostic Significance of Fas and Fas Ligand System-Associated Apoptosis in Gastric Cancer. Ann Surg Oncol, Vol. 7, No. 10, 2000.

96. Okines N, McCloud P, Kang Y-K, Cunningham D. Meta-analysis of the REAL-2 and ML 17032 trials comparing capecitabine with 5-fluorouracil (5-FU) in advanced oesophago-gastric cancer. Annals of Oncology 2008; 19 (Suppl 8): viiil69 (Abstr 513PD).

97. Oliner J., Kinzler K., Meltzer P., et al.: Amplification of a gene encoding a p53-associated protein in human sarcomas./Nature, 1992; 358: 80-83.

98. Oshima C., Iriya K., Forones N. Ki-67 as a prognostic marker in colorectal cancer but not in gastric cancer. Neoplasma. 2005; 52(5), 420-4.

99. Otsuji E. et al. Recent advances in surgical treatment have improved the survival of patients with gastric carcinoma // Cancer. 1998. - Vol. 82. — P. 12331237.

100. Ott K., Vogelsang H. Chromosomal Instability Rather Than p53 Mutation Is Associated with Response to Neoadjuvant Cisplatin-based Chemotherapy in Gastric Carcinoma. Clinical Cancer Research 20032307:Vol. 9, 2307-2315.

101. Park D., et al. HER-2/neu amplification is an independent prognostic factor in gastric cancer. Dig Dis Sci 2006; 51: 1371-1379.

102. Parker C., Whittaker P., Usmani В., et al. Induction of 18A2/mtsl gene expression and its effects on metastasis and cell cycle control. DNA Cell Biol., 13: 1021-1028,1994.

103. Parkin D. Global cancer statistics in the year 2000. Lancet Oncol 2001; 2: 533-543.

104. Pyrhonen S., Kuitunen Т., Nyandoto P., et al. Randomised comparison of fluorouracil, epidoxorubicin and methotrexate (FEMTX) plus supportive care with supportive care alone in patients with nonresectable gastric cancer. Br J Cancer 1995;71:587-591.

105. Reed E, Ormand P, Bohr VA, et al: Expression of the human DNA repair gene ERCC-I relates to cisplatin drug resistance in human ovarian cancer cells. Proceedings of the American Association for Cancer Research vol 30, 1989 (abstr 1940).

106. Rhyu M, Park W, Jung Y, et al. Allelic deletions of MCC/APC and p53 are frequent late events in human gastric carcinogenesis. Gastroenterology 1994;106:1584-8.

107. Ridwelski K, Gebauer T, Fahlke J et al. Combination chemotherapy with docetaxel and cisplatin for locally advanced and metastatic gastric cancer. Ann Oncol 2001; 12:47-51.

108. Roberts J, Thomson A., et al. The mechanism of antitumor platinum compounds. Prog Nucleic Acid Res Mol Biol, 22:71-131, 1979.

109. Rugge M., Shiao Y., et al. lmmunohistochemical Evidence of p53 Overex-pression in Gastric Epithelial Dysplasia. Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention 1992:Vol. 1, 551-554.

110. Sakuramoto S, Sasako M, Yamaguchi T et al. Adjuvant chemotherapy for gastric cancer with S-1, an oral fluoropyrimidine. N Engl J Med 2007; 357: 1810-1820.

111. Sasano H, Date F, Imatani A et al. Double immunostaining for c-erbB-2 and p53 in human stomach cancer cells. Hum Pathol 1993; 24: 584—589.

112. Saukkonen K, NieminenO, van ReesB, et al. Expression of cyclooxygenase-2 in dysplasia of the stomach and in intestinal-type gastric adenocarcinoma. Clin Cancer Res 2001;7:1923-31.

113. Senger D., Perruzzi C., et al.: A highly conserved vascular permeability factor secreted by a variety of human and rodent tumor cell lines./ Cancer Res., 1986; 46: 5629-5632.

114. Setala L., Kosma V., Marin S., et al. Prognostic factors in gastric cancer: the value of vascular invasion, mitotic rate and lymphoplasmacytic infiltration. Br J Cancer 1996; 74, 766-72.

115. Shah M., Ramanathan R., Ilson D., et al. Multicenter Phase II Study of Irino-tecan, Cisplatin, and Bevacizumab in Patients With Metastatic Gastric or Gastroesophageal Junction Adenocarcinoma. J. Clin. Oncol., Nov 2006; 24: 5201 -5206.

116. Srivastava A., Laidler P., et al.: The prognostic significance of tumor vascularity in intermediate-thickness (0.76-4.0 mm thick) skin melanoma. A quantitative histologic study./ Am. J. Pathol. 1988; 133: 419-423.

117. Starkey J., Crowle P., et al.: Mast-cell-deficient W/Wv mice exhibit a decreased rate of tumor angiogenesis./ Int. J. Cancer, 1988, 42: 48-52.

118. Tamburini A., Tomajer V., Albarello L., et al. Prognostic role of cycloox-ygenase 2 (COX-2) expression in gastric cancer patients. 2007 Gastrointestinal Cancers Symposium. Abstract 94.

119. Tang H., Hokita S., Che X., et al. Comparison of p53 expression in proximal and distal gastric cancer: histopathologic correlation and prognostic significance. Ann of Surg One, Vol 4, Issue 6 470-474. 1997.

120. Tanner M. et al. Ann Oncol (2005) 16:273-278.

121. Tateishi M, Toda T, Minamisono Y et al. Clinicopathological significance of c-erbB-2 protein expression in human gastric carcinoma. Surg Oncol 1992; 49: 209-212.

122. Terashima M, Irinoda T, Fujiwara H, et al. Role of thymidylate synthase and dihydropyrimidine dehydrogenase in tumor progression and sensitivity to 5-fluorouracil in human gastric cancer. Anticancer Res 2002;22:761-8.

123. Thor A, Moore D, Edgerton S, et al. Accumulation of p53 tumour suppressor gene protein: an independent marker of prognosis in breast cancers. J Natl Cancer Inst 1992;84:845-55.

124. Tolentino M., Miller J., Gragoudas E., et al.: Vascular endothelial growth factor is sufficient to produce iris neovascularization and neovascular glaucoma in a nonhuman primate./Arch. Ophthalmol., 1996; 114: 964-970.

125. Tomkinson A, Bardwell A, Bardwell L, et al: Yeast DNA repair and recombination proteins Rad 1 and Rad 10 constitute a single-stranded DNA endonuc-lease. Nature 362:860-862, 1993.

126. Tsujitani S, Konishi I, Suzuki K, et al. Expression of thymidylate synthase in relation to survival and chemosensitivity in gastric cancer patients. J Exp Clin Cancer Res 2000;19:189-95.

127. Van Houten, B: Nucleotide excision repair in Escherichia coli. Microbiological Reviews 54:18-51, 1990.

128. Vidal O., Metges J., Soriano-Izquierdo A., et al. Prognostic value of angi-ogenesis in patients following currative resection of gastric cancer (GC). 2005 ASCO Annual Meeting. Abstract 9605.

129. Vogelstein В., Kinzler K.W., et al. p53 function and dysfunction./ Cell, 1992; 70: 841-845.

130. Weh H, Platz D, Garbrecht M et al. The results of a modified FAMeth chemotherapy protocol in metastatic stomach carcinoma. Dtsch Med Wochenschr 1989; 114: 1391-1396.

131. Weterman M., Stoopen G., Van Muijen G., et al. Expression of calcyclin in human melanoma cell lines correlates with metastatic behavior in nude mice. Cancer Res., 52: 1291-1296, 1992.

132. Wilke H, Preusser P, Stahl M et al. Etoposide, folinic acid, and 5-fluorouracil in carboplatin-pretreated patients with advanced gastric cancer. Cancer Chemother Pharmacol 1991; 29: 83-84.

133. Wu M, Shun C, Wang H, et al. Genetic alterations in gastric cancer: relation to histological subtypes, tumor stage, and Helicobacter pylori infection. Gastroenterology 1997;112:1457-65.

134. Yamamoto H., Itoh F., Fukushima H., et al. Overexpression of cyclooxygenase-2 protein is less frequent in gastric cancers withmicrosatellite instability.• IntJCancer1999;84:400-3.

135. Yano T, Ochiai A, Doi Т., et al. Expression of HER2 in gastric cancer: comparison between protein expression and gene amplification using a new commercial kit. J Clin Oncol 2004; 22: 14S (Abstr 4053).

136. Yeh K, Shun C, Chen C, et al. High expressionof thymidylate synthase is as-sociatedwith the drugresistance of gastric carcinoma to high dose 5-fluorouracilbased systemic chemotherapy. Cancer 1998;82: 1626-31.

137. Yonemura Y., Ninomiya I., Oyohama S., et al. Expression of cerbB-2 oncoprotein in gastric carcinoma. Cancer 1992;67:2914-8.

138. Yoshikawa T, Tsuburaya A, Kobayashi O, et al: Plasma concentrations of VEGF and bFGF in patients with gastric carcinoma. Cancer Lett 153:7-12, 2000.

139. Yoshikawa Т., Morinaga S., Noguchi Y., et al. Clinical value of thymidine phosphorylase in patients with gastric cancer. 2003 ASCO Annual Meeting. Abstract 1255.1. ПРИМЕЧАНИЕ

140. Рисунок 2.3.2. Экспрессия Вах в опухолевой ткани рака желудка. Исследование проведено иммуногистохимическим методом. Экспрессия Вах наблюдалась в цитоплазме опухолевых клеток.У

141. Рисунок 2.3.3. Экспрессия СОХ-2 в опухолевой ткани рака желудка. Исследование проведено иммуногистохимическим методом.

142. Рисунок 2.3.4. Экспрессия CD95L (Fas/APOl) лиганд в опухолевой ткани рака желудка. Исследование проведено иммуногистохимическим методом. Окрашивание наблюдается в цитоплазме опухолевых клеток.

143. Экспрессия АГТ наблюдалась в цитоплазме и ядрах опухолевых клеток.