Автореферат и диссертация по медицине (14.00.26) на тему:Выявление бактериовыделителей и характеристика возбудителя при туберкулезе легких в Якутии

РГ6 од

4 - ГЛКСТЙЬ'ХЕО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ШЕРАЦКИ ] 3 пин

МОСКОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛНДОВАТЕЛЬСКЙ ИНСТИТУТ ТУБЕРКУЛЕЗА' ЯКУТСКИЙ ФИЛИАЛ НПО "ОТИЗИОПУЛЬЫОНОЛОГИЯ"

На правах.рукописи

АЛЕКСЕЕВА ГАЛИНА ИВАНОВНА

ВЫЯВЛЕНИЕ БАКТБРИОВЫДЕЛИТЕЛРЙ И ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГШ В ЯКУТИИ

14.00.26-ФТИЗИАТРИЯ 03.00.07-МИКРОБИОЛОГИЯ

Автореферат диссертации-на соискание ученой степени кандидата медицинских каук

Москва 1903

Работа Еиподкенз в Якутском филиале НПО "-тк^копульмонолпгкя" Министерства здравоохранения России «'директор - кан;г.!дат медицинских каук, И.В. Акискмов/.

Научные руководители: кандидат медицинских наук

А. Н.КАЛЗС'К

кандидат медицинских наук И.Я.ЧЕРНОГРЛДСКИЙ _

С&юиадъчие сппонекти:

доктор медицинских наук, профессор А.Л.КУЧЕРОВ доктор медицинских наук, профессор И.Р.ДОРОККОЗА

Негусе уирс-ялиние - Ссшкт-Петероурский научнс-исследова-Тс-хьск;:)! институт "Отизиопудьмонодогии"

V С/ МльаЖ I. Л

состоится у. .у ' л/О; ас. на заседании

гле^асиоирозсшого ссгета К 03-:.01.0\ при Ц:«сксьском ил;/'-:нс-иссдедоъатодьском институте туберкулеза Илиздрана РХ'/ШС-ОЗО, Москва, ."Д. Достоевского, д.4/

С гп'.сгертаглм«. мстаго ознакомиться б библиотеке Московского научно-исследовательского института тубсркулеаз Минздрава К'

Автореферат рас ос-дан '¿9.А~~^ 1993 г.

"•¡с-нмй секретарь спеаиадигиренатаете Совета, доктор медицинских каук, й.П.Ссдогьева

про;« ссор . -

АКТУАЛЬНОСТЬ ЛРОЗЛЯМЫ. Е последа« гол» после г^лл-нил темнев шшслоцйк г>нгом;к! туберкулеза отмечается гостепснн!:."! рост сгйе-.lOSacMOcr.t (Л.А.Прийнак. 1035; А.Л. Кучс-ров,10?.0; K.C! vs>io, IV-ЬЗ;

Kubin et, aî. ,1583). Сохраняется тжок.'Л у,г.г-лм<кй roc с ^охьнкх s: лссгрукгиьчмх Форм заболеваяая а регион, tf, чок с относительно высокой, так и п-.зкои забслозаемссть» туберкуле .'-си органов дыхания (Е.С.Йганоеа и соавт. S.H. оздоеаа, if'.?.*: .V. П. "..тру

на. 1027; А.И.Е'.'-льдсрман И соавт., 1PPS; M. O.Âfonpnii « ссчго.. 1530; A.M.Молсфеев и ссавт. , iS89). Изгеогио. что ccho?hi:m источником ту-оеркулоонеп лл^екаш является Оолм^ЬОактерноп^ел^тель :: os:/ при-каладкит значительная роль в формирован'.'.;! эпидемиологической сктуа-по туберкулезу (Я. Л.Елагодарни'Я. 1980; А.Л.Куч^роь. 10Й7; Л. 1'. Хсмонко, 1033: Л, и. CcCuchok,îSS3; Л. Л. Пркйиак, А.Л.Куче-рои, 1029 ; И.В.Лниспмзс, И.П. Чериогрялсккй Г575; M. А. Тырыт-

г-хстромадошс климате- уеоградмеекке особенности северного региона, рассредоточеш'ость населениях пунктой, слсхнсстп транспсрт-них связей, м.тлал плотность населения, социально-гигиенические Фак-горм, спеюфические условия трула и оыта коронного населения лод-n,ep.vJ-aia.'?T eucokiu"; уровень распространенности туберкулеза в районах крайнего Севера (И.В.Анпсимоз, !1,П.1!ернсгрэдский,1975).

Б республике Саха(Якутия) отмечается традиционно высокая заболеваемость населения туберкулезом, лревыааощая средкэфедерагивну.о в j,6 раза. За последние 10 лет в республике ежегодно регистрируется ¡000-1500 больных-Сактериовыделителей.

Из общего числа бактерковыделителей 20-25% составляют впервые :ыявленнкр. больные, что свидетельствует о сохранении резервуара ту- ' адркулезной инфекции на значительном уровне. В связи с этим многие ¡опросы фтизиомикробиологш, эпидемиологии нуждаются в .совэршекс-

тиегат; и ¡'Сохдаюг в целесообразности поиска нсвих, активных ыето-дов вияьлеиил Осиьню. эпидемиологически опасными формами туберкулеза.

Актусу.1-luMis разделами- Фгвэиатрш.-Итайтся вопросы совершенс-творзния и конкретизации организационных аспектов выявления сакто-риоиии-лителей. т.к. особую опасность представляют бактермовыдели-неизвестные противотуберкулезной слуябе.; Одшш из ьаишх ыо-ыонтов проставляется своевременно; обследование определенных групп населения с првквгоишг .рдоюй^ эдоошдаию-зубвркудеэои. • т. -к., удолъный вес обнаружения сред» вих Я^еряоваделгселей- довольно высок (/..1\Хоы*»ко.19©&1 Ю.Л.ГеммриЬ1. Ä. П. Бобренок, 1976; А;Л. Кучеров, ?.Л.Рибкича,19£3).' . ..' .

До ааптояаего ?рси«и;1прщсгичес>д1ие ^аучс'1и1 структура вперсио выяаденных батгерновыдёлитглей'н бмологше^сая характеристика возбудителя туберку^еаа процесса.

Ллитегльиов время т&ррцтрр>ы; счеталапь: неблагополучной г

отноаении туберкулева №улйрг6;.рЬгатогс>скота, ' "била доказана взаимосвязь туберкулеза' мшоошх ;я дфадмеви; С середмш 80-тих годов по данным ветеринаркой о' отсутствуют хозяйства неблаго-

получные в скота. В услови-

ях эгавоотическоп^д бдодоодоод ; фиде&тсп. в дальнейшей изучении вопросы распросяоденш^гёо!^ Синего вида', час-

тоты !ix ЕЫлелс^иа от Осиьнах тубс-р^леэйа лёгких. Отсутствуют работы но испольаовш»гаг современных iiaroÄO? шкобактерий туберкулеза в Якутии. '•'/.''•-v '..".'.•'■'.

Все Biffie43J!osöHHOö yKasiH5acfT на необходимость разработки оргз-низациоиньк я «етодотеоккх подходов совершенствования бактериологической диапгастикн туберкулёза, для более раннего обнаружения ыико-бактерий туберкулеза, ' научения их биологических свойств (идентифя-

¡«шля, определение лекарственной чувствительности к антибактериальным препаратам), в результате "чего полет Сыть достигнуто сню-.енне эпидемиологической опасности Секте рнсшделителей.

Цель исследования ■-

Совервенствовалне сргашгаацшшшс. форм активного выявлении бактериовиделитсяей-' и 'опредеделие'-биохогйческей характеристики возбудителя у больных' легочным ■туберкулезом г современных эпидемиологических условиях в республике Саха (Яхт/тин). ' ' Задачи иселеддва^::, • ; '

1. Разработать'opráini3áiu'.oí!i!us'фор".и, обеспечившее своевре • • чекну» 'диагностику бгзягвряоввдолейия у" впервые выявленных больных легочном-туберкулезом, ■ .

2. Определить- гашшчееку» i» соииаяьнуи структуру впервые выяв-летшя-бактерповылейит.мей.'- ' '■ ■

3.''УстановйгЬ частоту первичной, лекарственной. устойчивости и возникновение' лгоричной" лекерспзёш'сй 'устоЙчавовгя шкебачтерий туберкулеза в -процессе ¿Мтйбакте^иаяького'-¿©чеэдя.

- -1,' Исследовать. «втобатриааьпу» попрлтцзэ-у бактериовыделите--лей для выяснения вогшогшого едм&йза- ?яя$обакгерий туберкулеза человеческом и бычьего ййдоз. ••

5. Выяснить распроетраятю'сть м:аЬсактерйй туберкулеза бычьего вида а районах республики Casa"(Нкутяя),. ^.родфюпяя,- -siéo^^a'aatniT^-; f V- • . л. Отработана' наиболее' aUotmmm. 4орма организации бактериологических иеследоваэтйз условиях Республики Саха, (Якутия), Показана '.' целесообргййббть доцзатра'пшэдии бактериологической службы с петоднчесшУ.цёнтргглизавдёп.й создрпкеа .шнр«жЬй сети посевных, пуик-

-Teppsríopiiív, роль 'бактериоскопического из групп, риска.

г.. Сзрг .-.едоки особенности 1»:-зервуа?'л туберкухеоной инфекции в Г-.снус-дик'- Са.<а (Якутия> ¡¡а примере впервые выявленных Сактсркош-дедяг» де и: осдыгпнстьс из них составляют лица коренной

^ч-обдада»:- д»п:а «улскс^о пол а, молодого и среднего ьсг-;.члта. часть ооктс-ркоЕкдедатедей выявлена по обращаемос-

ти. ."'.'¡и'!!-;1:.!!: л-г-арстьеинал устойчивость регистрируется в 18,ОХ случаев, ьюри^над 10,ОХ. В клинический структур*4 доминирует пн-¿идьтратийНс:;': туберкулез легких ъ 03,ОХ.

3. :!р.:мекенпе метода клонпро?а.чия первичной ынкоб^ктернальноп г.&г.удг.цпн г. ока сало однородность исследуемой популяции ь отнесении ьлдегей грин:сд-:-х>1осгя к гетерогенность в отношении лекарственно;': чуьст1-г,тел1.кс^ти ыиксбысгеркй ?уСеркуде&а.

ь г: ис-догии туберкулеза легких спредеденну» роль играет г.ОоСуди.тель туберкулеза Си-пего ьлда. кото;:;п регистрируется в £1 ;:з Г-; адиинистратаьгшх территорий и вндедйстея от больных людей, ярсккЕакг/у дренуудегтвенно 2 седьекохойлистьенл^ районах, ь результате "(-го сохраняется опасноеэг.иьоотии туоеркулега.

Каучная новизна.

Предложена система организации бактериологических обедедегачий нас^денин на туберкулез, лэшешзая их э&ективностъ и снивньлал затрать: на их проведение. Дана характеристика ьдерьые выявленного бактерноваледения в условиях современной зпнгемиологическсп обстановки ь республике Саха {Якутия). Решнне вопроса видовой иденти^и-2»д;гл возбудителя, Еыделле-мого от большое г.о комплексу тестоь с использование.-!.; ».а-,уксФ?рментного анализа .позволило достоверно определить ьидогую принадлежность ыккобакторлй туберкулеза и выбить длительную циркудящзо ынкобактерии б^ъего вида среди лидей в условиях эпизоотического благополучия. Состевлена гарта распространения .»¿п-ксбактерий туберкулеза в районах республики с учетом биологическ;::-:

свойств возбудителя, На основании комплекса методов: ку.~ьтур:ил.ш::<, биохимических. иммунологических изучены свойства клопн^опани;;.-: штаммов миксбактерип тубегкулеоа.. Установлено однородность мпке/ак-тери:и;ьной популяции но видовой принадлежности и гстерогешфо-т!. в отношении лекарственной чувствительности к туберкулсетатич<'скич препаратом, Несмотра на то, что микоэактериальчая популяция состоит из колоний обладающие различными биохимическими свойствами. применение иммунологического метола полтперздало ирш:азде.ччооть псе и популяции МВТ к человек „,;ому, либо к бычьему виду.

Практическая значпмость.

Предложен ксмадс-кс мероприятий, повнютцнх кпформат'двжзсть бактериологических обследований (создание Саклунктов дли выделении мпкоОактерпи туберкулеза при районных !фотнвотуСеркудезии>: диспансерах ). Обоснована необходимость выполнения кяиякчоского минимума обследований на туберкулез, больных из групп риска, позволиквего выявлять миксОактерии туберкулеза в 1 -2 раза чаще, чем при проведении прсФосмотров.

F азработашше полуфабрикаты яичных питательных сред для выявления м и к о б а к т е р и и туберкулеза, позволили увеличить вчсоваемость возбудителя из диагностического материала, -а среды о антибактериальными препаратами давя возможность определения лекарственной чувствительности выделенных штаммов на местах. География распространения микобактерий туберкулеза бычьего вида позволила оценить размеры резервуара туберкулезной инфекции, степень опасности эпизоотии и определить необходимость сохранения системы санитарных и ве-'геринарных профилактических мероприятий.

Определение уровня первичной лекарственной устойчивости диктует необходимость более широкого применения лекарственных препаратов группы В наряду с препаратами группы А уже в начальном периоде ле-

•к низ Сольного.

Результаты работы нами отражение в следухвдх документам::

1. Методические рекомендации " Бактериологическое обследование »> туберкулез лиц из групп риска ", Якутск, 1990 г.- 15 с.

С 'методические рекс^ондают " Методика приготовления и ис-псльг.оЕа»и!я полуфабрикатов яичных питательных сред для снабжения бактериологических гг/нктов и лабораторий Якутск, 1691 г.- 7 с.

Апрссаака работи.

¡¿чтери:и7К диссертация доделены:

- па научно-практической региональной, конференции фтизиатров Сибири, Дальнего. - Востока, и Крайнего Севера в 1991 и 1692 гг в г.

Якуте;«, • . ' / ' \ • ; " . ■

- на конференции тералеыического отдела Московского НИИ ту оер^/леиа К' 1993 г.

Публикации. .,-.'•• ' - .

По-тс«« диссертации опубликовано 16 статей и методические ре-

кокендадяч. .••• '

Зн^г-ание ь практик- ' V'

Результаты.'роботь-внедрены в Якутском филиале НПО "Отигногуль-моногоги;!",'.• в бактЕфислопгческиХ пунктах противогуберкулеэных диспансеров районов Ресьубдзии-Саха ЛЕутил?-:и могут быть использованы а районах•■характеридевдеся -■обвириой .территорией, рассредоточен-. костью населенных пуиЦ-'йеслоялостях'транспорт»«« свяьей, малой плотность» населения. '„.'"■ ": ' ',•• - ' '

'Объем и структура диссертации; ■

Диссертация изложена на: 12-1 страницах мзлшнолисяого. текста и состоит иг введения, '..3-х "глав собственного, исследования, заключения, выводов,-' •'■■. п^тндаокйх Работа иллюстрированатаблицами, хргфяедщ, .рисунками.БибйгаграФическип'со--

держит ссылки на отечественные (150) и иностранные (66) литературные источники.

С0ДЕРМ5Ж РАБОТЫ

Материала и методы исследований.

Работа выполнена на-основании анализа комплексного клинического и микробиологического исследований с использованием архивных данных. Для разработки организационных форм своевременной диагностики туберкулеза использованы общепринятые технологии для внявлгиия микобактерии. Выделение миксбактерни туберкулеза проводилось унифицированным!! методами согласно приказа Ш СССР ?! 558 от ö няня 1378 г. "Об унификации микробиологических методов исследования при туберкулезе". Посевы диагностического материма ооуцестгллдись- на комплекс питательных сред СЛелеиатейна^Ионсена, Синнь-2, Л-б и Яо-гсску) при параллельной исследовании. материала методом прямой бактериоскопии по Цилъ-Няльсоиу. или-. дчшшисцентноА микроскопии. 2о-ггдоткншАя чувствительность мяксоактетей туберкулеза к туберкудос--,-атикач изучад&еь гечтряэдег спредеденпом, методом йбеол'отнпх концентраций,

"рсаналкгиройана' хз п&тмость 1ST ергдп лик аевнвмтего ¡люка кпбояо&алия т/беркудегс«, по дгум к^ноллм: 1. при !;пс.11«;актичеоксч, сплошном, дахюогез&тееекш о0сдэдо1гши насегэаяя опвэдехоипой ->д-ччниотпативной теомгаоряп (2125 чегог««); 2. т.о зг--э\<<: п.5»й>;-?йия вольная в лечебны® учрэхчеииа при зыполненш кштческото укниуг*:.«

;.?'ГС0? Опльпых),

r,!;pe;i'.v:o!ii!H об:тай тепд-^цпи-?, лаппктста^укл'ей резервуар • л республик': '.^у-гснь; даннш ¡^лшчтомта бсл!'---

лл, ооетл.п'лл ;к> Слцллллрнс;.; уэ-гь в пгютиночуойрк^леппых лиоллн-~:лрго; ;; лелтипггита лпе^лне ¡¡ь'л:и:олпь:к Огкгертюгч.'делптелей ::а ллрл--,-! гг. Полол^золанл ли'-ге ;;а;п;ке гтоУ!:ватуоеркуле;л;Пл

.с:; бахтсраглогкчсгккх пунктов районов.

Изучение сощ-адьис.-медидакской структуры впервые выделенных г чкт*. }>ио\»;д-лите-Л(-й больных легочным туберкулезом провезено у 1313 '•'••лс! ек. При "том анализ кропались; пол. ьозраст, национальная при-ч .-.л-лне-еть. пролесслюналтая занятость, место крскшвания. наличие ¡; ",-.!:!;>: привычек (алоупотреоленне алкоголем, алкоголизм) обедедо-»••.ш'кх, не! едя икиьлен.« наболев/лих, масикьиоеть Оакюриовиделенил сспостаич-'нни с клиническим диагнозом.

;'.ссдедовама видовая дриг.адлехиость :С5б итаммов мнксбактерий туб^ркулеоа по культуральным и биохимическим с! ойствам с определе-ннок ¡итра-редуглчйноп актушости 'М.ТзиКапига. 1964), нг.адана с использованием барОнтуровой кислоты (П. А.Благодарный, З.В.Сидорки-Трцдициошше метод» идентн^икаани сопоставлялись с результатами имцукоСермеятного анализа с использованием монокдональ-н>.«х антител к чедоьеческому к бычьему видам МВТ (Ы. А. Владимирский, М.В.Андросова, ' Л.К.Й:пина, В.М.Дсиисшсхий. 1583) - (220 стаммов) и методой тонкослойной хроматографии (А.И.Девятова,1&&9) - (20 стам-мов).

С целью выявления возможного инфицирования бактериовыделителей микобактерияын человеческого и бычьего видов проведено клонирование колоний первичной генерации мико'актерий туберкулеза. Клонирование предусматривало пересев определенных колоний с целью получения новой дочерней генерации, с последующим изучением свойств полученных субкультур. Проведено клонирование колоний микобактерий туберкулеза выделенных от 149 больных туберкулезом легких. Изучались культу-ралвные,биохимические свойства микобактерий, а также поверхностные антитела, как первичней генерации, так и полученных субкультур. Чувствительность к антибактериальным препарата).! определена у культур и субкультур, полученных от 39 больных. Больные разделены на 2

- о -

группи : первая группа - больные, выделяющие в первичной генерации чувствительные к антибактериальным препаратам штаммы; вторая группа - ввдедякш:е в первичной генерации устойчивые штаммы.

Изучена распространенность миксЗактерий туберкулеза бычьего вида на территории Якутии. Для этого выделены 5 групп районов: Центральная, Юглая, Зилюйская, Приполярная, Заполярная.

Материалы, проведенних исследован;»"! подвергались вариационно-статистической обработке.

Результаты исследований и их обсухдекпе. , 1. Использование ио'.чх организационных форм внявлення Ж?. Известно, что бактериологический метод выявления туберкулеза трудоемок и дорог. Это свидетельствует о необходимости максимального по. лучения информации при его использовании. Результативность его во многом зависят от рациональной организации и применения эффективной технологии. Нами предложена и внедрена в практику система организации бактериологических обследований населения на туберкулез. Эта система включает рациональную инфраструктуру: центральная Саклабс- . ратория республики (базовая лаборатория) и бактериологические лаборатории я пункты на местах. В настоящее время во всех районах рос-, публики открыты и функционируют бактериологические пункты.при противотуберкулезных диспансерах, которые работают при строгом научно-методическом руководстве со стороны базовой микробиологической лаберзтор-.«« Якутского НЛО "Хтизиопульмонология". Благодаря этому достигнут максимальный охват бактериологическими анализами на туберкулез контингента больных, противотуберкулезных . диспансеров и групп риска. Если до реорганизации бактериологической" службы количество посевов диагностического материала на микобактерйг туберкулеза в республике на ICO человек населения составляло 0,5 посева в год (1971г), то в настоящее время, ■ несмотря ¡^увеличение числа на- .

селения республики (более 1-го миллиона), количество посевов на 100' ■человек достигло 7 посевов (10Э1г).

Если до реорганизации лабораторной службы выявляемое™ мнко-бакгерий туберкулеза на диагностического материала не превышала Г.0-27Х, то с внедрением бактериологических методов эта цифра составила 35 9-ЗЬ,б£, достигая б последние годы до 47.3-49,9%.

Как известно, одним из основных по|<азателей качества бактерио- . логической диагностики является показатель соотношения числа бакте-риовыделитедей к числу лиц с деструкцией легочной ткани среди впервые выявленных больных легочным туберкулезом. В связи с атим проанализированы амбулаторные карты и истории болезни у 1313 впервые выявленных болышх легочным туберкулезом) после окончательной вера- , фикации бактериологического- исследования соотношение бактериовыде-ления к распад у легочной ткани достигает 160-1722.

В бактериологических пунктах производится сбор диагностического материала и поеев. Организация разветвленной сети бактериологических пунктов позволила значительно увеличить охват контингента больных туберкулезом и групп риска бактериологическими исследованиями. В связи с этим увеличился объем производимых посевов на мико-бактерии туберкулеза. Однако, отсутствие на местах свежих куриных яиц •и соответствующих реактивов- не позволяет использовать комплекс питательных сред с включением нативных яичных питательных сред. По этой "ж© причине не всегда проводится определение лекарственной чувствительности выделенных штаммов ШТ. Учитывая вышеуказанные затруднения нами предложены яичные питательные среды в виде полуфабрикатов, приготовленные централизованно, а также яичные питательные среды. с добавлением туберкулоотатиков для определения лекарственной чувствительности выделенных штаммов МВТ, методика транспортировки и использование их в отдаленных населенных пунктах

республики. Система рациональной организации бактериологической сдучбы включает такке и поэтапное лабораторное обследование, предусматривающее использование бактериоскопических методов в т.ч. люминесцентного. По мере внедрения данной системы значительно увеличилась внсеваемость микобактерий туберкулеза. Уделпный вес гперьые выявленных бактериовыдслитслей при легочном туберкулезе среди общего контингента бактериовыделигелей увеличился в 3 раза с 3,7 до 2G.7S. Биявляемость микоОактерий туберкулеза из диагностического материала от больных туберкулезом легких увеличилась в 2 раза, развертывание бактериологических пунктов при районных противотуберкулезных диспансерах позволило использовать бактериологический метод при обследовании населения из групп повешенного риска заболевания с различными неспецифическими заболеваниями легких и почек, как при массових профилактических обследованиях, так и при гыполнении клинического минимума.

Комплексное бактериологическое исследование диагностического материала проведено у 33 691 пациента. Установлено, что миксбакте-рии туберкулеза выявляются чаще при выполнении клинического минимума (1,6±0,072), чем при массовом профилактическом обследовании (0,7+0,245). При проведении профилактического бригадного обследования бактериологическим методом, микобактерии туберкулеза высевались чаще у неорганизованной части населения и у асоциальных лиц, В этой группе из 245 обследованных у 10 (4,1+0,31%) выявлены МВТ.■

Проведенные исследования позволили дать характеристику резервуара туберкулезной инфекции в Якутии. Установлено,что контингент бактериовыделителей, состоящих на учете в противотуберкулезных учреждениях уменьшился в 2,9 раза, тогда, как число впервые выявленных бактериовыделителей легочным туберкулезом не уменьшается, а ос-

Эк'.-Т"!Н'Ш!1п,;г' поканптелг кт<'{ >:;«>!< w •'«'»ил и Якутии

1970 1975 1980 1985 1986 1987 1938 1939 1990 1991

А.

тается на одном уровне, что свидетельствует о сохраняющемся резервуаре туберкулезной инфекции в республике (табл.1).

2. Характеристика впервые выявленных бактерксвиделителей.

При ранжировании эпидемиологических показателей ведушая роль принадлежит впервые выявленным бактериовыделителям. Установлено, что бактериовыделение чаще регистрируется у мухчин (61,4+63,8%), тогда как в 60- х годах краевой особенностью било преобладание среди бактериовыделителей женщин. Несмотря на то, что жители коренной национальности - я игу ты составляют 237. состава населения республики, удельный вес среди бактериовыделителей у них сохраняется на высоких цифрах и колеблется в пределах от 72,87. в 1032 г. до 54,97. в 1091 году. Преобладающее большинство бактериовыделителей - жители сельской местности (67,77.). Эпидемиологически опасными., по нашим данным, представляются лица молодого и среднего возраста (64,77.). Среди Сактериовыделителей лиц злоупотребляющих алкогольными напитками оказалось Солее 1/3, лиц из спецучреждений МЗЯ - 15.31. Из общего количества бактериэвцделителей 697. выявлены при профилактических осмотрах, 41 7. - при обращении, з лечебные учреждения, причем роль прсфосмотров в выявлении бактериовыделителей имеет тенденцию к по-нидежэо (табл.2). В структуре впервые выявленных бактерисвыделителей доминирует инфидьтративный туберкулез легких: эта форма с 1986 года стабильно днагносцлруется в

пределах 63,9ф69.27.. Чаще регистрируется скудное бактериовыделение, которое- устанавливается бактериологическими методами.

Первичная лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза гарегистрирсвана у 87 больных из 4.67 (18,6+1,88%). В 82,1% случаев констатирована первичная лекарственная устойчивость к стрептомицину и б 78,2? случаев к изониазиду. В процессе антибактериального лечения у 10,97. сольных сформировалась вторичная лекарственная устоичи-

вость. Это с одной стороны характеризует хронизапюэ туо>1 инфекции, с другой - свидетельствует о необходимости оолео широкого арименения препаратов группы В наряду с препаратами группы Л уде на начальном этапе лечения больного. .

3. Изучение мик.обактериальной популяции методом клонирования.

Несмотря на большое количество Э1ипорпментмь:!о-з1п!демнологи-ческих работ, посвященных взаимосвязи туберкулеза и крупного рогатого скота микробиологическая часть этой проблемы представляется незавершенной. Традиционные методы ди^феречцироьки человеческого и оычьего видов возбудителя туберкулеза базируются на количественных и полуколичественных методах, а поэтому включают определенны» процент ошибок. Логично предположить инфицирование больных смесью различных видов микобактерий тубео!:улеза, а при идентификации диагностирование вида возбудителя с превалирующей ферментативной активностью. С целью проверки этого предположения проведено клонирование выделенных культур с последующей идентификацией отдельных колоний каждого клона. Сравнительному изучению биологических свойств микобактерий туберкулеза подвергнуты как первичная генерация, так и полученные путем клонирования субкультуры. Первичные культуры и 1Е00 субкультур по комплексу тестов отнесены к микобактерияк. туберкулеза. Изучение биохимической активности выделенных культур с использованием ниацинового и нитратредуктазного тестсв показало, что по сравнению с первичными культурами субштаммы в биохимических тестах реагируют по-разному. Таким образом исследованы культуры МВТ, выделенные от 149 больных туберкулезом легких. Полученные субкультуры в 24,87. случаев в ниациновом тест? и 49X случаев в нитратредуктазпом тесте содержали микобактерии туберкулеза регирующие и положительно и отрицательно.

Так. например, si Сил; больного К., реагировал положительно в Bi;;jeyiv.uvun:.u>: тестах. Субо'льтурн отдельных колоний данного штамма '.'.'и-провалп на эти тесты положительно, но встречалось некоторое ко-.-;г;.';тго субкультур, давних отрицательные реакции. При изучении r.a:n;::x оуб.ультур имууноферыенткс-ч анализе с применением споци-И'пп.х ьечеклекальных антител к микобактериям t. tuberculosis и t.

; tee ч",ии и;:г1г:п4«ш;рогаши кап шчоб&ктерии человеческого айда. а сг.ги-у. с по-ученными данными ад придти к заключению, что мик-рс.'па.-* популяции содержит микобактерпи туберкулезз с различной био-хпк'пч'-..,:сй чктигносгьй. Применение- моноклональных антител к поверх-He.c.Hi.-M аш'илчнам, способных выявить чрезвычайно малые антигенные г.а:..;ич,м . между ьагпзитгмн одного и того гтамма. показало одно-ралн~сп> w.Kpoi-1-ой популяции в '• otaocffHU« видовой ириналлеяаюсти. При нс.учгнли субкультур. сосгсйляп^х популяцию мнкобактерий тубер-:г/Л'.'-;а, е отнесении чу;.стьитглькости к антибактериальным препаратам от>.'.еиА гетерогенность. Поэтому в повседневной практике для определения вида миксбактерий TySepity.-et-a к чувствительности к антибактериальным препаратам рекомендуется изучение не менее 2-3 отдельных колонии.

-i. Изучение распространенности_микобактерий туберкулеза

Изучение видовой принадлежности мнксбактернй туберкулеза проводилось-комплексно- с применением а<удчтуралькых. биохимических и иммунобиологических методов,тонкослойной хрематограрии." По результатам комплексного изучения.видовой принадлежности наделенных стам-мов к человеческому.виду отнесеь*ы 84.SS (1066 больных), к бычьему . виду 5,25 .(79 Оол).шлс>.: Сомнительные раакади зарегистрированы у 0,85. Идентификация стаммов в этих случаях оказалась возыежней при постановке иммундфернентного анализа (№А) с использованием специфических мсноклонзльшх антител к человеческому и бычьему видам

В 60-;-: гЗДах территория Якутии относилась ¡с неблагополучным по туберкулезу крупного рогатого скота. В пос.прг>пнч? годи, по офи^наль-ькм отчетам ветеринарной служпи, констатируется этмс&7ИЧ?ско9 благополучие. Однако, валовая идентификация микобактерий туберкулеза констатирует наличие бычьего вп^а у больных тубсркулееок легких о 6,3 X случаях. Регистрация М1кобг астерий губеркулеиь бычьего вида в разных районах. республики позволила выявить наиболее неблагополучные. Для изучения циркуляции различных видов МБ? территория Якутии была разделена на 5 групг. районов: Центральная,¡О.ная.Вилюйская,Приполярная и Заполярная. Напболнзии процент находок микобактерий ту-беркуле?а бычьего вида зарегистрирован в Центральной (1С.2") и Вм-люйской (9,17.) группа, которые относятся к сельскохозяйственным районам с преиму^стгенным проживанием лиц коренной национальности-жсутсь. Наличие микобактерий туберкулеза бнчьего вида у боль-ииу.-бактериоьццелителей создает не только эпидемиологическую, но и эпизоотическую опасность. При' этом не исключена возможность,что при слабой постановке противотуберкулезной работы среди населения рес-. публики возбудитель туберкулеза бычьего вида может создать опасность вспылки туберкулезной инфекции в отдельных хозяйствах. I

ВЫВОДЫ

1. Совершенствование организации бактериологической служби обеспечивает воамоадооть более своевременного активного выявления источников туСеркулеьнсй инфекции. Увеличение числа бактериологических исследований в условиях Якутии достигнуто на основе широкого сазвертызанка районных бактериологических пунктов при противотубер-гСглезних диспансерах.

2. Предложенная форма организации бактериологической диагнос-

тики позволила увеличить высеваемость микобактерий туберкулеза ло 48-507,, что в 2 раза выае, чем до реорганизации бактериологической службы,

3, Стабильный удельный вес впервые выявленных бактериовыделителей с легочным туберкулезом в течение последних 10-15 лет среди общего контингента бактериовыделителей свидетельствует о сохранении резервуара туберкулезной шйекцлн.

4. При массовом'профилактическом.обследовании населения мико-Сактерпи туберкулеза в диагностическом материале значительно чаде выявляйте.'] у асоциальных .дий- и •' неорганизованной части населения (домохозяйки, пенсионеры, нетранспортабельные больны?).

5. Б социальной. структура впервые выявленных бактериовыделителей больных легоч^м туберкулезом нреобладайт мужчины (62,9Х), лица коренной-навдональнссти (69,0%),' рабочие (58,1%), люди в возрасте 20-39 лот (64,7%).в'хтанической структуре доминирует инфильтратив-ный туберкулез легки*.(03,ОХ). . • '

6, Порвйчяая летарсткешш' устойчивость МВТ среди впервые выявленных ■оакгерпсззделптелги.-с 'делочш;;.! туберкулезом выявляется в 18,0*1 • «ддеаеа;' • порвйчназ лекарственная устойчивость встречается к охреотошцшу, • дооигод;,;^?' и ПАСК. Устойчивость к одному препарату шяызва в 52,«,двум препаратам 37,8% и к трем в 10,ЗХ случаев.

7. вид- чпксСактерп^туоер^/леэа регистрируется биохимн-ч&зкзди теетт». (т&цюг-тос?, - нитрзтредясгасизя активность), имму-лоферыйнтннл ивдкгом с иессглвсваниом следалических ыоткйиюиальных ОТЛИТОЙ, МОТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ 2КЛ'.НТОГрСй1иН I; &.ЗЙ, случаев.

8, Изучение ^вой-етсраальной популяции методом шошфовшшя полагало ел однородность ь сгноесинп елдл и гетерогенность по лекарственной чуво^ятезьаоита.

0. В Республике Саха (Якутия) в 21 из 34 административных территории преимущественно в сельскохозяйственных районах у лиц коренной национальности, больных легочным туберкулезом выявляется бычий вид микобактерий.

ПРАКТИЧЕСКИЕ-. РЕКОМЕНДАЦИЯ,-

В целях своевременного и активного выявления источников туберкулезной инфекции в районах Крайнего Севера "Целесообразно иироксе открытие бактериологических пунктов при районных противотуберкулезных диспансерах. В условиях бактериологических.пунктов для повышения высеваемосга микобактерий туберкулеза'из диагностического материала рекомендуется работать комплексом 2-3 яичных питательных сред и использовать полуфабрикаты натшшх яичных питательных сред о последукщм свертывание« их в условиях бактериологического пункта.

Для сирского охвата больных из грудп поваленного риска Заболеваемости туберкулезом рекомендуется-.гоЭтагШи отбор, диагностического материала с использованием метода даншесцентной'микроскопии с . последующим бактериологическим исследованием':: при-.:;«наличий; полскси-тельной бактериоскопии. Определение уровня, первичной лекарственной' устойчивости мйкобактерий туберкулеза-д^етует ^ иеоОходихюсть . более тирокого применения лекарственных препаратов.группы В наряду.с препаратами группы А ухе в . начальном периоде, лечеьия'ббдьного.'.

Выделение имкобактерпк туберкулеза бычьего вида " от людей -больных туберкулезом лет», свидетельствует: о /сохранения;.' опасности/ эпизоотии , и определяет необходимость .сохранения, система ;оанитарных и ветеринарных профилактических и&раупатЩ.; .'.<'

СПИСОК РАБОТ, ОПУВШОЗАНННХ ПО^ТЕШ ^ССБРТАЦИ!!.';

,1. Характеристика бактериоЕщелитедйй■ !.!эгянр-Кангадасского ра-

- со -

йока за период с 1070-1077 гг. // Науч.-пракг. конф.посея«. МО -fi год. со лил рокд. Й.И.Лелина: Теэ.локл. Секции мед -Якутск, 1930. -

С,Со-ЕС. •

К вопросу централизованного определения лекарственной чувствительности ммкосактерчй туберкулеза в условиях Якутии //Тез. дсил. 4 респуол. конф. молодых ученых и сп^-ц,- ч.З- Якутск, 13ВП.-С. С8-М (Сопит. Чернэградский И.11. ).

3. Биологическая характеристика мнкобактерни туберкулеза в Якутии у впервые выявленных бы-;?ериош;дрлител<?й больных легочным туберкулезом // Адаптация челэвою и животных: Тез.докл. п Всесоюзного симпозиума "Биологические проблемы Севера".-Якутск,1086. -С.61-С2 (Соавг. Черногралскнй И.П., Горохова Т. В., Захаров В.Т., и др. ) •

4. Первичная лекарственная устойчивость при впервые выявленном легочном туберкулезе//Теэ.докл. 4 реопубл.науч.-практ.конфер.молодых ученых, и спец. носвяц. С? с"езду КПСС.-Якутск, 1986,- С. 113-114 (Соавт.Ким Н,Б..Афанасьева Ю.П.).

5. Бактериологическая диагностика туберкулеза легких у впервыз выявленных больных по некоторым районам Сев»?ра:Межвуз. сб. науч. тр./ ЯГУ.-Якутск, 1987.-с.46-40 (Соавт. Черноградский И.П..Афанасьева Ю.П. ).

6. Бактериологическое обследование на туберкулез лиц и? групп риска : Ыетод. рекомендации / ЯФ НПО "Фтизиопульмонология". -Якутск, 1989.-8 с (Соавт.Черноградскмп И.П.,Шаноев Ч.Д..Захаров и др.).

?. Иммунологический метод идентификации М.tuberculosis и М. bovis (BCß) на основе применения моноклонаиышх антител //Пробл. туберкулеза.-19891-N 5 .- С.43-46 (Соавт.Андросова М.В., Владимирским. А.).

3. Биологические особенности резервуара тубиркулезной инфекции

* . _

в некоторых административных территориях Якутии по данным централизованной картотеки / Cö. науч. ст.- ЯНИИТ.-Якутск,1986.- С. 131-133 (Ссапт.Захаров З.Т. .Горохова Т'.З. .Черноградский).

3. Применение икмуноферментного анализа для видовой идентификации М.tuberculosls и М.bovis с использованием моноклональных антител //Применение лшунофгрменгного анализа в медицине:?^.докл.респ. научной конфер,- Харьков,1089.-С.80-82 (Со-аат.Андросова М.3., Владимирский У./«).

10. Еактериовыделение при туберкулезе в условиях Якутии //Вопроси адаптации человека на Севере: Ме.чзуз.сб.науч.тр./ЯГУ.- Якутск, 1990.-С.11-14 (Соавт.Чориоградскин И.П., Захаров В.Т.).

11. Бактериологическое обследование на туберкулез лиц из групп риска //Про'л.тусеркулеза.-ЖО.-МЗ.-С. 13-15 (Соавт.Черногрздский 'Л.П., Захаров В. Т. .Düiceo Ч.Д и др.).

12. Методик:» приготовления и использования полуфабрикатов яичных питательных сред ллл снабжения бактериологических пунктов и лабораторий: Метод, рекомендации/ Я? НГ10" Стизиопульмонология". -Якутск,1991.-7с (Ссавт.Черисградский К.П., Захаров В.Т..Горохова Т В*

13. Характеристика бактериопыделения у больных туберкулезом легкнх-хителей Якутии//Пробл.туберкулеза.-1992.- N 3-4.-С.49-51 (Соавт.Черноградский И. П., Захаров 5. Т. .Горохова?. В).

14. Актуальные вопроси бактериологической диагностики туберкулеза в регионе Якутии //11 с"езд фтизиатров.-Санкт-Петербург, lS9".-0.¿EG-iLSl (Соавт.Черноградский 'А.П. .Захаров З.Т. .Горохова Т.В).

15. Эпидемиология бычьего вида инксбактерт": туберкулеза в Рес-публпг.с Саха(Якутия) // Социально-эпидемиологические проблемы ту-

ркулела в территориях Крайнего Севера: Тез. межрегион, науч.-

прей«, конфер. 11-12 ¡¡ояб, 1992.- Якутск, 1392,- С. 93-9? (Соавт.Чер-ноградский И,П.).

16. Видовая идентификация микобактерий туберкулеза в условиях Республики Саха(Якутия)//Социально-эпидемиологические проблемы туберкулеза в территориях Крайнего Севера: Теэ. межрегион,науч. -практ. конферЛ1-12 нояб.1992.-Якутск,1692.-С. 90-92.

4