Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы

Зугаирова, Одьга Нуцаловна

Диссертации по медицине → Геронтология и гериатрия

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.30) на тему:Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Зугаирова, Одьга Нуцаловна Санкт-Петербург 2010 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.01.30

Автореферат диссертации по медицине на тему Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы

На правах рукописи

0034Э1959

ЗУГАИРОВА Ольга Нуцаловна

ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ПРОЦЕССОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ И АПОПТОЗА ФОЛЛИКУЛЯРНЫХ КЛЕТОК ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

14.01.30 - геронтология и гериатрия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 8 ФЕВ 2010

Санкт-Петербург - 2010

003491959

Работа выполнена в отделе клеточной биологии и патологии Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН

Научный руководитель:

доктор медицинских наук

Коновалов Сергей Сергеевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук

Кветная Татьяна Викторовна

доктор биологических наук

Белушкина Наталья Николаевна

Ведущая организация:

ГОУВПО «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова» ФАЗСР

Защита диссертации состоится У)^^/7^*^ 2010 г. в /¿9 часов на заседании диссертационного совета'Д 601.001.01 при Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН по адресу: 197110, Россия, Санкт-Петербург, пр. Динамо, д. 3.

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН (197110, Россия, Санкт-Петербург, пр. Динамо, д. 3).

Автореферат разослан « ^У » _2010 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета доктор биологических наук, доцент

Козина Л.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы

Среди многообразия факторов, способных оказывать повреждающее действие на живой организм, особое место занимает ионизирующая радиация. Опасность негативного воздействия радиационного излучения связана с бурно развивающейся в последние десятилетия атомной энергетикой и широким применением в медицине радиоизотопных методов диагностики и лечения. Эффекты действия ионизирующего излучения запускают в живом организме каскад биохимических процессов, приводящих к преждевременному старению на всех уровнях организма - клеточном, тканевом, органном.

Учитывая эти обстоятельства, детальное изучение биологических эффектов радиации на жизнедеятельность организма человека приобретает все большую актуальность как для биомедицины в целом, так и для геронтологии в частности.

Щитовидная железа является самым радиочувствительным органом из всех жизненно важных органов. Поэтому важно провести сравнительное изучение эффектов облучения щитовидной железы в зависимости от возраста, так как функция щитовидной железы изменяется при старении организма, и ионизирующая радиация может еще более усугубить возникновение возрастных дисфункций, что существенным образом отразится как на взаимосвязанной деятельности нейроэндокринной системы, так и на функции других органов и систем, прежде всего, сердца и сосудов.

Ki-67 - клеточный маркер пролиферации, экспрессия которого неодинакова в клетках щитовидной железы людей разных возрастных групп [Saad A.G. et al, 2006], а также белок Р53, осуществляющий контроль над течением процессов клеточного цикла, а также за отсутствием в геноме повреждений, которые могли бы привести к дальнейшему развитию патологии. Р53-зависимый апоптоз - мощный селектор, позволяющий избежать накопления мутаций, а, в случае, когда они уже возникли, Р53-зависимый апоптоз позволяет элиминировать такие потенциально опасные для организма клетки [Новиков B.C., 1996]. Белок Р53 играет важную роль и в первичном ответе организма на действие радиации. Подтверждением этого являются результаты эксперимента по облучению мышей. Массовый апоптоз, происходящий в радиочувствительных тканях мышей Р53-дикого типа вскоре после облучения гамма-излучением, не наблюдается у Р53-негативных животных [Meritt A.J. et al., 1994; Cui Y.F. et al., 1995; Komarova E.A. et al., 1997; Hasegawa M. et al., 1998].

Цель и задачи исследования

Целью данной работы явилось изучение возрастной динамики процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы у человека и крыс как при естественном, так и при индуцированном (радиационном) старении.

В рамках указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. Изучить корреляции между пролиферативной активностью и апоптозом клеток щитовидной железы у лиц пожилого и старческого возраста.

2. Оценить корреляции между пролиферативной активностью и апоптозом в щитовидной железе у крыс при индуцированном старении (действии ионизирующей радиации в сублетальных дозах).

3. Сравнить возрастную динамику пролиферативной активности и апоптотического потенциала клеток щитовидной железы у человека и крыс

4. Оценить повреждающий геротропный эффект ионизирующего излучения на щитовидную железу крыс и экстраполировать возможные последствия на щитовидную железу человека.

Научная новизна

Впервые проведено исследование уровня пролиферации тиреоцитов людей пожилого, старческого возраста и долгожителей, а также уровня пролиферации тиреоцитов облученных и необлученных крыс разных возрастных групп. Полученные данные свидетельствуют о том, что с возрастом, как у людей, так и у крыс, антипролиферативные процессы и апоптоз доминируют над процессами пролиферации в щитовидной железе, что является одной из причин старческой инволюции органа.

Установлено снижение экспрессии пролиферотропного белка Кл-67 на фоне увеличения экспрессии проапоптозного фактора Р53. Подобные данные получены и при исследовании щитовидных желез крыс.

При воздействии ионизирующей радиации в щитовидных железах, как молодых, так и старых крыс резко возрастает антипролиферативная активность и, соответственно, уровень апоптоза. В то же время при общем снижении числа активно делящихся тиреоцитов, в некоторых клетках отмечается повышение концентрации белка пролиферации К-67, что отражается на очаговой интенсификации процессов пролиферации за счет клеток, сохранивших способность к росту и делению. Во всех возрастных группах животных баланс пролиферативной активности и апоптоза при индуцированном старении (после облучения) достоверно смещается в сторону антипролиферативной активности и клеточной гибели.

Практическая значимость

Полученные результаты позволяют расширить представления о механизмах возрастной инволюции щитовидной железы и разработать в дальнейшем пути профилактики радиационных повреждений, приводящих к преждевременному старению органа, что может существенным образом отразиться на деятельности нейроэндокринной системы, а также на работе других органов и систем, прежде всего, сердца и сосудов.

Положения, выносимые на защиту

1. Обнаружена корреляция между пролиферативной активностью и апоптозом клеток щитовидной железы у лиц пожилого и старческого возраста.

2. При естественном старении в щитовидной железе человека и крыс происходит смещение баланса процессов пролиферации и апоптоза в сторону антипролиферативных процессов и усиления апоптоза.

3. При индуцированном (радиационном) старении в щитовидной железе крыс зарегистрировано достоверное усиление процессов клеточной гибели, прежде всего, фолликулярных тиреоцитов. При этом выраженность процесса апоптоза усугубляется с увеличением возраста крыс, подвергнутых облучению.

Связь с научно-исследовательской работой Института

Диссертационная работа выполнялась в соответствии с планом НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав, выводов и указателя литературы. Глава 1 (обзор литературы) представляет собой анализ данных литературы по функциональной морфологии щитовидной железы, а также особенностях экспрессии белков Ю-67 и Р53, являющихся маркерами

пролиферации и апоптоза. Глава 2 посвящена описанию материалов и методов, используемых в данном исследовании. Глава 3 представляет собственные экспериментальные данные изучения возрастной динамики экспрессии белков Ю-67 и Р53 в клетках щитовидных желез человека и крыс. В разделе «заключение» обсуждаются полученные результаты. Текст диссертации изложен на 103 страницах, иллюстрирован 26 рисунками. Список литературы содержит 156 источников, из которых отечественных -25.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ. Из них 1 статья в журнале по перечню ВАК Минобрнауки РФ и 11 тезисов докладов.

Апробация и реализация диссертации

Материалы диссертации доложены на Весенней геронтологической конференции (Белгород, 2009); Геронтологических чтениях (Белгород -Новополоцк, 2009); IV Международном конгрессе «Человек, спорт, здоровье» (Санкт-Петербург, 2009); конференции «Фундаментальная наука и клиническая медицина» (Санкт-Петербург, 2009).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Характеристика исследуемого материала

Объектом исследования послужили щитовидные железы людей разных возрастных групп, полученных при аутопсиях, проведенных в больнице св. Георгия (Санкт-Петербург). Весь материал был разделен на 3 группы:

1. Люди пожилого возраста (60-74 лет, п = 43);

2. Люди старческого возраста (75-89 лет, п = 34);

3. Долгожители (90 лет и старше, п = 22).

Также исследования были проведены на 40 самцах крыс линии Вистар. Все животные были разделены на 4 группы:

1 - необлученные крысы 3-месячного возраста (молодые животные);

2 - необлученные крысы 24-месячного возраста (старые животные);

3 - облученные крысы 3-месячного возраста (молодые животные);

4 - облученные крысы 24-месячного возраста (старые животные).

Гистологические методы

Фрагменты щитовидных желез фиксировали в нейтральном растворе формалина (рН=7), проводили через спирты, ксилолы и заливали в парафин по стандартной методике. Для морфологического изучения срезы окрашивали гематоксилином и эозином.

Гистохимические и иммуногистохимические методы

Для верификации экспрессии в тканях щитовидных желез белков Ki-67 и Р53 был использован иммуногистохимический метод. Срезы толщиной 3-5 мкм помещали на предметные стекла, покрытые пленкой из поли-Ь-лизина. Использовали первичные моноклональные антитела к Ki-67 (1:500, Dako), Р53 (1:500, Dako). В качестве вторых антител использовали биотинилированные антитела (Dako). Визуализацию окрасок проводили с применением комплекса авидина с биотинилированной пероксидазой (ABC-kit), с последующим проявлением пероксидазы хрена диаминобензидином (все реагенты от Dako).

Количественная оценка результатов исследования

Количественную оценку результатов исследования проводили с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из микроскопа Nikon Eclipse Е400, цифровой камеры Nikon DXM1200, персонального компьютера на базе Intel Pentium 4, программного обеспечения «АСТ-1» (версия 2.12) и «Видеотест-

Морфология» (версия 5.0). Определяли три параметра: оптическую плотность (в относительных единицах), среднюю яркость (в относительных единицах) и суммарную площадь иммуноокрашенных структур (в %).

Методы статистической обработки результатов исследования

Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерной программы Statistica 6.0. Для проверки неоднородности 3 групп использовали непараметрический критерий ANOVA Kruskal-Wallis; для оценки неоднородности 2 групп использовали непараметрический критерий Mann-Whitney U test. Для анализа распределения использовали критерий Шапиро-Уилка.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Верификация экспрессии белка Ki-67 в щитовидных железах людей разных возрастных групп

При светооптическом исследовании наблюдается снижение экспрессии белка Ki-67 в тиреоцитах людей с возрастом. У людей пожилого возраста она наблюдалась практически во всех тиреоцитах, тогда как в группе долгожителей лишь в единичных случаях.

Статистическая обработка данных подсчета оптической плотности иммуноокрашенных тиреоцитов выявила достоверное (Р < 0,05) снижение оптической плотности тиреоцитов с экспрессией белка Ki-67 с возрастом: достоверные различия обнаружены между 1 и 3 группами людей (Р<0,05) (рис. 1а). Максимальное среднее значение этого показателя зафиксировано в группе людей пожилого возраста (0,185 у.е.), минимальное среднее значение оптической плотности установлено для группы долгожителей (0,113 у.е.).

Было проведено сравнение средних значений средней яркости для иммуноокрашенных тиреоцитов разных возрастных групп (рис. 16). Значения данного показателя оказываются инвертированы, поскольку компьютерная программа Morphology 5.0. позволяет сравнить среднюю яркость с

абсолютным черным: чем ярче окрашена структура, тем ниже значение средней яркости.

Статистическая обработка данных выявила достоверное (Р<0,05) снижение средней яркости тиреоцитов с экспрессией белка Кл-67 с возрастом: достоверные различия обнаружены между 1 и 3 группами людей (Р<0,05). Максимальная яркость была зафиксирована в группе людей пожилого возраста (170,917 у.е.), минимальное среднее значение яркости установлено для группы долгожителей (194,663 у.е.).

Было проведено сравнение средних значений суммарной площади иммуноокрашенных тиреоцитов по маркеру Ю-67 для разных возрастных групп.

Статистическая обработка данных выявила достоверное (Р<0,05) снижение значений суммарной площади иммуноокрашенных структур с возрастом: достоверные различия обнаружены между 1 и 3 группами людей (Р<0,05) (рис. 1в). Наибольшее среднее значение иммуноокрашенных тиреоцитов наблюдается в группе людей пожилого возраста (57,154%), тогда как наименьшее значение этот показатель принимает в группе долгожителей (25,056%).

Верификация экспрессии белка Ю-67 в щитовидных железах крыс

разных возрастных групп при индуцированном (радиационном)

старении

Для верификации экспрессии белка Кл-67 в фолликулярных клетках щитовидных желез облученных и необлученных крыс были выбраны 2 возрастные группы: крысы 3-месячного возраста (молодые животные) и крысы в возрасте 24 месяцев (старые животные).

На срезах щитовидных желез облученных крыс обеих возрастных групп встречаемость окрашенных тиреоцитов визуально снижается по сравнению с необлученными крысами.

0,2 0,15 0,1 0,05

т #

^ 1х \

,,м 1 ■—Т 11 ^ -Г"--^ ■1

Возрастные группы

250 -200 -150 • 100 -50 -0 -

возрастные группы

* ^

70605 <5 505 I 40-

I 13°-

'II20-

о 1

возрастные группы

Рис. 1. Экспрессия белка К-67 в клетках щитовидной железы человека. Группа 1 - люди пожилого возраста; группа 2 - люди старческого возраста; группа 3 - долгожители, а - оптическая плотность иммуноокрашенных структур; * - достоверное отличие 1 группы от 3 (Р<0,05); б - средняя яркость иммуноокрашенных структур; * - достоверное отличие 1 группы от 3 (Р<0,05); в - суммарная площадь иммуноокрашенных структур, %; * -достоверное отличие 1 группы от 3 (Р<0,05).

Оценивали два параметра: оптическую плотность и суммарную площадь иммуноокрашенных структур.

Подсчет суммарной площади иммуноокрашенных структур и последующая статистическая обработка полученных данных показали, что с вероятностью Р<0,05 происходит снижение количества тиреоцитов, экспрессирующих белок Кл-67, в группе крыс, подвергшихся воздействию

ионизирующей радиации. В группе облученных молодых крыс этот показатель принимает значение 0,908 ± 0,023%, в то время как для группы необлученных молодых крыс суммарная площадь иммуноокрашенных структур составляет 3,209+0,028%. Снижение суммарной площади иммуноокрашенных структур происходит и в группе крыс 24-месячного возраста. Здесь этот показатель для облученных животных принимает значение 0,798 ± 0,013%, а для необлученных - 2,700 ± 0,021% (рис. 2а).

Подсчет оптической плотности иммуноокрашенных клеток выявил увеличение экспрессии белка Кл-67 в тиреоцитах крыс, подвергшихся воздействию ионизирующей радиации. При статистической обработке значений оптической плотности иммуноокрашенных тиреоцитов группы крыс 3-месячного возраста (0,892 ± 0,027 у.е. для облученных животных и 0,702 ± 0,019 у.е. для необлученных) и группы крыс 24-месячного возраста (1,013 ± 0,041 у.е. для облученных животных и 0,799 ± 0,010 у.е. для необлученных) было показано, что значения оптической плотности статистически значимо (Р<0,05) выше у облученных животных в каждой возрастной группе (рис. 26).

Было проведено исследование уровня пролиферации тиреоцитов людей пожилого, старческого возраста и долгожителей, а также уровня пролиферации тиреоцитов облученных и необлученных крыс разных возрастных групп.

На основании оценки оптической плотности, средней яркости и суммарной площади иммуноокрашенных фолликулярных клеток щитовидных желез людей, можно сделать вывод о том, что с возрастом пролиферативные процессы в щитовидной железе становятся все менее выраженными, что и является одной из причин старческой инволюции органа.

Данные, полученные на крысах, показали, что уровень пролиферации ткани щитовидной железы также снижается с возрастом, но только за счет снижения количества клеток, экспрессирующих пролиферативный белок И-

67. После воздействия ионизирующей радиацией, количество клеток, способных к росту и делению, резко падает, но уровень экспрессии пролиферативного белка Кл-67 в оставшихся активных клетках повышается. Возможно, это является компенсацией.

После облучения сохраняется тенденция к снижению числа активно делящихся тиреоцитов и повышению в них концентрации белка пролиферации Ю-67.

возрастные группы

1,2

Змее 24 мес

возрастные группы

Рис. 2. Экспрессия белка Кл-67 в клетках щитовидной железы облученных и необлученных крыс разных возрастных групп, а - суммарная площадь иммуноокрашенных тиреоцитов, %; * - достоверное отличие групп облученных животных от необлученных (Р<0,05); # - достоверное отличие групп крыс 24 месяцев от крыс 3 месяцев (Р<0,05); б - оптическая плотность иммуноокрашенных тиреоцитов; * - достоверное отличие групп облученных животных от необлученных (Р<0,05); # - достоверное отличие групп крыс 24 месяцев от крыс 3 месяцев (Р<0,05).

Верификация экспрессии белка Р53 в щитовидных железах людей разных возрастных групп

При светооптическом исследовании наблюдается увеличение экспрессии белка Р53 в тиреоцитах людей с возрастом. Экспрессия белка Р53

у людей пожилого возраста наблюдается в единичных случаях, тогда как в группе долгожителей практически во всех тиреоцитах.

Оценивали 3 параметра: оптическую плотность, среднюю яркость и суммарную площадь иммуноокрашенных структур.

Статистическая обработка данных оптической плотности иммуноокрашенных тиреоцитов выявила достоверное (Р<0,05) увеличение оптической плотности тиреоцитов с экспрессией белка Р53 с возрастом: достоверные различия (Р<0,05) наблюдаются между 1 и 3 группами (рис. За). Минимальное среднее значение этого показателя было зафиксировано в группе людей пожилого возраста (0,138 ± 0,019 у.е.), максимальное среднее значение оптической плотности установлено для группы долгожителей (0,186 ±0,021 у.е.).

Статистическая обработка данных средних значений средней яркости для разных возрастных групп выявила достоверное (Р<0,05) увеличение средней яркости тиреоцитов с экспрессией белка Р53 с возрастом: достоверные различия (Р<0,05) наблюдаются между 1 и 3 группами (рис. 36). Минимальная яркость была зафиксирована в группе людей пожилого возраста (191,135 ± 10,896 у.е.), максимальное среднее значение яркости установлено для группы долгожителей (163,106 ± 13,787 у.е.).

Подсчет суммарной площади иммуноокрашенных структур по белку Р53 позволил сделать вывод о сохранении значения этого показателя на протяжении исследуемого отрезка онтогенеза человека (рис. Зв). Было проведено сравнение средних значений суммарной площади иммуноокрашенных структур по маркеру Р53 для разных возрастных групп. Максимальное среднее значение (51,823%) выявлено для группы людей пожилого возраста, минимальное (39,867%) - для группы долгожителей. Тем не менее, тенденции к снижению экспрессии белка Р53 не наблюдается, т.к. ошибки этих величин перекрываются между собой. Статистическая обработка данных также не выявила различий между тремя выборками (Р=0,49).

Верификация экспрессии белка Р53 в щитовидных железах облученных и необлученных крыс разных возрастных групп

Для верификации экспрессии белка Р53 в фолликулярных клетках щитовидных желез облученных и необлученных крыс были выбраны 2 возрастные группы: крысы 3-месячного возраста и крысы 24-месячного возраста.

Проведен количественный анализ по 2 параметрам: оптическая плотность и суммарная площадь иммуноокрашенных структур.

Подсчет суммарной площади иммуноокрашенных структур и последующая статистическая обработка полученных данных показали, что с вероятностью Р<0,05 количество тиреоцитов, экспрессирующих белок Р53, увеличивается с возрастом, как среди облученных крыс, так и среди необлученных. В группе облученных крыс 3-месячного возраста этот показатель принимает значение 4,101 ± 0,029%, в то время как для группы необлученных крыс 3-месячного возраста суммарная площадь иммуноокрашенных структур составляет 1,903 ± 0,024%. Повышение суммарной площади иммуноокрашенных структур происходит и в группе крыс 24-месячного возраста. Здесь этот показатель для облученных животных принимает значение 5,295±0,021%, а для необлученных -3,100+0,018% (рис. 4а).

При статистической обработке значений оптической плотности иммуноокрашенных тиреоцитов группы крыс 3-месячного возраста (1,105 ± 0,018 у.е. для облученных животных и 0,806 ± 0,022 у.е. для необлученных) и группы крыс 24-месячного возраста (1,197±0,025 у.е. для облученных животных и 0,999 ± 0,038 у.е. для необлученных) было показано, что значения оптической плотности статистически значимо (Р<0,05) выше у облученных животных в каждой возрастной группе (рис. 46).

| 0,05-

Возрастные группы

250 л 200 -15010050 -0-

Возрастные группы

I §:

| |

I I

100 ео 60 40 20 о

возрастные группы

Рис. 3. Экспрессия белка Р53 в клетках щитовидной железы человека. Группа 1 - люди пожилого возраста; группа 2 - люди старческого возраста; группа 3 - долгожители, а - оптическая плотность иммуноокрашенных структур; * - достоверное отличие 1 группы от 3 (Р<0,05); б - средняя яркость иммуноокрашенных структур; * - достоверное отличие 1 группы от 3 (Р<0,05); в - суммарная площадь иммуноокрашенных структур, %.

Было проведено исследование уровня апоптотической активности тиреоцитов людей пожилого, старческого возраста и долгожителей, а также уровня антипролиферативной активности тиреоцитов облученных и необлученных крыс разных возрастных групп.

^Облученные крысы

Необлученные крысы

возрастные группы

1.5

ПОблученные крысы

Ш Необлученные крысы

3 мес

24 мес

возрастные группы

Рис. 4. Экспрессия белка Р53 в клетках щитовидной железы облученных и необлученных крыс разных возрастных групп, а - суммарная площадь иммуноокрашенных тиреоцитов, %; * - достоверное отличие групп облученных животных от необлученных (Р<0,05); # - достоверное отличие групп крыс 24 месяцев от крыс 3 месяцев (Р<0,05); б - оптическая плотность иммуноокрашенных тиреоцитов; * - достоверное отличие групп облученных животных от необлученных (Р<0,05); # - достоверное отличие групп крыс 24 месяцев от крыс 3 месяцев (Р<0,05).

На основании оценки оптической плотности, средней яркости и суммарной площади иммуноокрашенных фолликулярных клеток щитовидных желез людей, можно сделать вывод о том, что экспрессия проапоптотического белка Р53 и количество экспрессирующих этот белок клеток увеличивается с возрастом.

Данные, полученные на крысах, показали, что после воздействия ионизирующей радиацией экспрессия проапоптотического белка Р53 в тиреоцитах и количество таких тиреоцитов резко увеличивается.

Оценка баланса пролиферации и апоптоза в разных возрастных группах людей, а также облученных и необлученных крыс

Оценка баланса пролиферации и апоптоза в тиреоцитах в разных возрастных группах проводилась на основании оценки уровней экспрессии белка пролиферации Ю-67 и проапоптотического белка Р53 по двум параметрам: оптическая плотность и суммарная площадь иммуноокрашенных структур.

Баланс пролиферации и апоптоза на основании оценки оптической плотности у людей с возрастом смещается в сторону апоптоза (рис. 5а).

Экспрессия белка Р53 коррелирует (г = -0,977) с экспрессией белка Кл-67. Значения разницы в уровнях экспрессии белков Ю-67 и Р53 следующие: 0,047 - в группе людей пожилого возраста; -0,04 — в группе людей старческого возраста; -0,073 в группе долгожителей. Разница в уровнях экспрессии белков Ю-67 и Р53 соотносится с возрастом человека: чем больше возраст пациента, тем больше экспрессия белка Р53 превалирует над экспрессией белка Кь67. Таким образом, с возрастом баланс пролиферации и антипролиферативной активности смещается в сторону антипролиферативной активности.

Баланс пролиферации и апоптоза на основании оценки суммарной площади иммуноокрашенных тиреоцитов у людей с возрастом изменяется, смещаясь в сторону апоптоза (рис. 56).

Корреляционный анализ полученных данных показал, экспрессия белка Ю-67 коррелирует с экспрессией белка Р53 (г=0,966). Значения разницы в уровнях экспрессии белков К-67 и Р53 следующие: 2,331 - в группе людей пожилого возраста; -14,976 - в группе людей старческого возраста и -14,811 в группе долгожителей. Разница в уровнях экспрессии белков Кл-67 и Р53 соотносится с возрастом человека: чем больше возраст пациента, тем больше экспрессия белка Р53 превалирует над экспрессией белка Кл-67.

« 5

у о

а а

^ I

с £

О §

0,25

0,05

возрастные группы

Ибелок Ю-67 Щ белок Р53

1 &

I I §.

й Е

06елок №-67 Ш белок Р53

2 3

возрастные группы

Рис. 5. Баланс уровней экспрессии Кл-67 и Р53 у людей разных возрастных групп. Группа 1 - люди пожилого возраста; группа 2 - люди старческого возраста; группа 3 - долгожители, а - оптическая плотность иммуноокрашенных структур; * - достоверное отличие 1 группы от 3 (Р<0,05); б - суммарная площадь иммуноокрашенных структур, %; * -достоверное отличие 1 групп от 3 (Р<0,05).

Баланс пролиферации и апоптоза в щитовидной железе на основании оценки оптической плотности у необлученных крыс с возрастом изменяется; процесс апоптоза начинает сильнее доминировать над процессами пролиферации (рис. 6а).

Значения разницы в уровнях экспрессии белков Кл-67 и Р53 следующие: -0,104 - в группе 3-месячного возраста и -0,2 - в группе крыс 24-месячного возраста. Разница в уровнях экспрессии белков К-67 и Р53 соотносится с возрастом крыс: чем старше крыса, тем больше экспрессия белка Р53 превалирует над экспрессией белка Кл-67.

Баланс пролиферации и апоптоза на основании оценки суммарной площади иммуноокрашенных тиреоцитов у необлученных крыс с возрастом смещается в сторону апоптоза (рис. 66).

Значения разницы в уровнях экспрессии белков К1-67 и Р53 следующие: 1,306 - в группе крыс 3-месячного возраста; -0,4 - в группе крыс 24-месячного возраста. Разница в уровнях экспрессии белков Ю-67 и Р53 соотносится с возрастом крыс: чем старше крыса, тем больше экспрессия белка Р53 превалирует над экспрессией белка Ю-67.

1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0

§ *

8 #

и к:

а* о

3 О

I Е

о э

* р. -- !:- - ^ _Т — 1 ВбелокР53

мшитв1.-1=', .Г„..кяЫ____ вк|5яй £мя5яя яяяваяя шт« ■•■■■■в ааяйяяя ря

Еа я ...... —4 ра«в1»яяаа| .-I1 ; ВЯЯЯЯЯЯЯЯЯ^—~-~"'^' | яяааяая вяяаяяя -------."■■■'", . --1

■ М ВЯЯЯЯ^ 1 ■'■'■ 1 J (•■■■■■■•а 1 ......Ея ■амямлаар.! ш-......1 ,--- —-"-■И я яяяяя яяя |м —==3 ваадваввшс-^. „ =55

Змее

возрастные группы

ИЗбелок №-67 белок Р53

возрастные группы

Рис. 6. Баланс уровней экспрессии Кь67 и Р53 у необлученных крыс разных возрастных групп, а - оптическая плотность иммуноокрашенных структур; * - достоверное отличие крыс 3 мес. от крыс 24 мес. (Р<0,05); б -суммарная площадь иммуноокрашенных структур, %; * - достоверное отличие крыс 3 мес. от крыс 24 мес. (Р<0,05).

Анализ параметров оптической плотности показал, что баланс пролиферации и апоптоза у облученных крыс 3 мес. по сравнению с необлученными крысами 3 мес. изменяется: процесс апоптоза начинает сильнее доминировать над процессами пролиферации (рис. 7а).

Значения разницы в уровнях экспрессии белков Кл-67 и Р53 следующие: -0,104 в группе необлученных крыс 3-месячного возраста и -0,213 — в группе облученных крыс 3- месячного возраста.

Анализ оптических плотностей показал, что баланс пролиферации и апоптоза у облученных крыс 24 мес. изменяется по сравнению с необлученными крысами 24 мес. (рис. 76).

Значения разницы в уровнях экспрессии белков Кь67 и Р53 следующие: -0,2 в группе необлученных крыс 24-месячного возраста и -0,184 - в группе облученных крыс 24-месячного возраста.

¡3 белок «¡-67 Ш белок Р53

облученные крысы 3 мес

Ш! белок К1-67 белок Р53

необпученные крысы 24 мес

облученные крысы 24 мес

Рис. 7. Баланс уровней экспрессии Кд-67 и Р53 по оптической плотности у облученных и необлученных крыс разных возрастных групп. * -достоверное отличие облученных животных от необлученных (Р<0,05).

Анализ суммарной площади иммуноокрашенных структур показал, что баланс пролиферации и апоптоза у облученных крыс 3 мес. по сравнению с необлученными крысами 3 мес. смещается в сторону апоптоза (рис. 8а).

Значения разницы в уровнях экспрессии белков Кл-67 и Р53 следующие: 1,306 в группе необлученных крыс 3-месячного возраста и -3,193 - в группе облученных крыс 3-месячного возраста.

Анализ суммарной площади иммуноокрашенных структур показал, что баланс пролиферации и апоптоза изменяется у облученных крыс 24 мес. по сравнению с необлученными крысами 24 мес. (рис. 86).

Значения разницы в уровнях экспрессии белков К1-61 и Р53 следующие: -0,4 в группе необлученных крыс 24-месячного возраста и -4,497 в группе облученных крыс 24-месячного возраста.

Полученные данные указывают на то, что с возрастом, как у людей, так и у крыс, антипролиферативные процессы и апоптоз начинают доминировать над процессами пролиферации, что является одной из причин старческой инволюции органа.

П белок Ю-67 е белок Р53

облученные крысы 3 мес

В белок №-67 В белок Р53

облученные крысы 24 мес

Рис. 8. Баланс уровней экспрессии Кл-67 и Р53 по суммарной площади иммуноокрашенных структур у облученных и необлученных крыс разных возрастных групп. * - достоверное отличие облученных животных от необлученных (Р<0,05).

У людей до 75 лет процессы пролиферации в щитовидной железе преобладают над процессами апоптоза, но к 90 годам антипролиферативные процессы и апоптоз окончательно доминируют над пролиферацией. На это указывает и снижение экспрессии пролиферативного белка Ка-67 на фоне увеличения экспрессии проапоптозного фактора Р53, и снижение количества тиреоцитов, экспрессирующих белок Ю-67, на фоне увеличения количества

тиреоцитов, экспрессируюгцих белок Р53. Подобные данные были получены и при исследовании щитовидных желез крыс.

При воздействии ионизирующей радиации в тиреоцитах как молодых, так и старых крыс резко увеличивается количество повреждений, возрастает антипролиферативная активность и, соответственно, возможный уровень апоптоза. В то же время количество клеток, способных к активному делению и росту, резко уменьшается. При этом наблюдается интенсификация процессов пролиферации за счет клеток, сохранивших способность к росту и делению. Во всех возрастных группах животных баланс пролиферативной активности и апоптоза после облучения достоверно смещается в сторону антипролиферативной активности и клеточной гибели.

ВЫВОДЫ

1. При старении происходит снижение пролиферативной активности тиреоцитов в щитовидной железе человека.

2. Индуцированное старение (воздействие ионизирующей радиации) приводит к уменьшению суммарной площади экспрессии белка Кл-67 в щитовидной железе старых крыс, однако усиливает пролиферативную активность тиреоцитов в молодом возрасте, что является потенциально неблагоприятным для формирования опухолевых очагов в щитовидной железе.

3. Зарегистрировано возрастное усиление процессов апоптоза клеток щитовидной железы у человека

4. Воздействие ионизирующей радиации приводит к активации процессов апоптоза в щитовидной железе крыс различного возраста. Сравнение показателей экспрессии проапоптозного фактора Р53 у необлученных животных свидетельствует об усилении под действием радиации естественных инволютивных процессов, способствующих программированной клеточной гибели.

5. На основании оценки баланса процессов пролиферации и апоптоза в щитовидной железе человека и крыс показано преобладание антипролиферативных процессов при старении.

6. Воздействие ионизирующей радиации приводит к смещению баланса между процессами пролиферации и апоптоза в щитовидной железе крыс в сторону усиления клеточной гибели.

7. Однотипность динамики баланса пролиферативной активности и апоптоза клеток щитовидной железы у человека и крыс позволяет экстраполировать результаты экспериментальных исследований на человека.

8. Возрастное снижение пролиферативной активности тиреоцитов у человека и смещение баланса процессов пролиферации и апоптоза про действии радиации в сторону клеточной гибели, прогрессирующее с возрастом у крыс, позволяет рассматривать старение как фактор, снижающий риск возникновения радиационно индуцируемого рака щитовидной железы

Практические рекомендации

1. При исследовании биопсий щитовидных желез пациентов пожилого и старческого возраста рекомендуется оценивать экспрессии белков Кл-67 и Р53 для оценки риска возникновения и прогноза неопластического роста.

2. При облучении щитовидных желез в пожилом и старческом возрасте выбор диапазона дозовой нагрузки может быть расширен за счет снижения риска развития неопластической трансформации.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статья в журнале, включенном в Перечень ВАКМинобрнауки РФ

1. Динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы человека и крыс при естественном и радиационно-индуцированном старении/О.Н. Зугаирова, В.О. Полякова, С.С. Коновалов//Медико-биологические и социально-психологические проблемы безопасности в чрезвычайных ситуациях. — Санкт-Петербург. -2009. - № 4. - С. 54-58.

Тезисы докладов

2. Верификация экспрессии протеина Р53 в щитовидной железе человека при старении/О.Н. Зугаирова, С.С. Коновалов, В.О. Полякова//Матер. Весенней геронтологической конференции. - Белгород. - 2009. - С. 27- 28.

3. Возрастная динамика пролиферативной активности фолликулярных клеток щитовидной железы человека/О.Н. Зугаирова, С.С. Коновалов,

B.О. Полякова//Матер. Весенней геронтологической конференции. -Белгород. - 2009. - С. 28-29.

4. Возрастные изменения экспрессии факторов пролиферации и апоптоза в щитовидной железе крыс при моделировании ускоренного старения/О.Н. Зугаирова, В.О. Полякова, С.С. Коновалов//Геронтологические чтения. - Белгород - Новополоцк. - 2009. -С. 13-14.

5. Показатели клеточного обновления в щитовидной железе при возрастной инволюции/О.Н. Зугаирова, В.О. Полякова, С.С. Коновалов//Геронтологические чтения. - Белгород - Новополоцк. — 2009. -С. 14-15.

6. Показатели клеточного обновления в щитовидной железе человека как маркеры возрастной адаптации организма/О.Н. Зугаирова, В.О. Полякова,

C.С. Коновалов//1У Международный конгресс «Человек, спорт, здоровье». - Санкт-Петербург. - 2009. - С. 129.

7. Изменение уровня синтеза белка Ki-67 в щитовидной железе как показатель возрастного снижения адаптации к физическим нагрузкам/О.Н. Зугаирова, В.О. Полякова, С.С. Коновалов/ЛУ Международный конгресс «Человек, спорт, здоровье». - Санкт-Петербург. - 2009. - С.128-129.

8. Возрастная динамика экспрессии белка Р53 в фолликулярных клетках щитовидной железы человека как основа планирования физических нагрузок/О.Н. Зугаирова, В.О. , Полякова, С.С. Коновалов/ЛУ Международный конгресс «Человек, спорт, здоровье». - Санкт-Петербург. -2009.-С. 127-128. .1

9. Возрастная динамика пролиферации и апоптоза в щитовидной железе человека/О.Н. Зугаирова, В.О. Полякова//Фундаментальная наука и клиническая медицина. - Санкт-Петербург. - 2009. - С. 140-141.

ЮЛострадиационные нарушения динамики клеточного обновления в щитовидной железе крыс разного возраста/О.Н. Зугаирова, В.О. Полякова//Фундаментальная наука и клиническая медицина. - Санкт-Петербург. - 2009. - С. 139-140.

11.Экспрессия белка пролиферации Ki-67 в нейроиммуноэндокринных клетках щитовидной железы людей разных возрастных групп/ О.Н. Зугаирова, С.С. Коновалов, В.О. Полякова//ХУ11 Всероссийская конференция «Нейроиммунология». - Санкт-Петербург. - 2009. - С. 42.

12.Возрастная динамика экспрессии белка Р53 в нейроиммуноэндокринных клетках щитовидной железы/О.Н. Зугаирова, С.С. Коновалов, В.О. ПоляковаУ/XVII Всероссийская конференция «Нейроиммунология». -Санкт-Петербург. - 2009. - С. 42-43.

Зугаирова Ольга Нуцаловна ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ПРОЦЕССОВ ПРОЛИФЕРАЦИИ И АПОПТОЗА ФОЛЛИКУЛЯРНЫХ КЛЕТОК ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ// Автореф. дис. канд. биол. наук: 14.01.30 - СПб., 2010. - 26 с.

Подписано в печать 20.01.2010. Формат 60*84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная. Печ. л. 1,0. Тираж ¡00 экз. Заказ 49. Отпечатано с готового оригинал-макета. ЗАО "Принт - Экспресс" 197376, С.-Петербург, ул. Большая Монетная, 5 лит. А

Оглавление диссертации Зугаирова, Одьга Нуцаловна :: 2010 :: Санкт-Петербург

Список сокращений.

Введение.

Обзор литературы.

Глава 1. Щитовидная железа и старение: морфофункциональные аспекты.

1.1. Основные сведения об анатомии, гистофизиологии, особенностях эволюции и онтогенетического развития щитовидной железы.

1.1.1. Эволюция щитовидной железы.

1.1.2. Онтогенетическое развитие щитовидной железы у человека.

1.1.3. Гисто физиология щитовидной железы.

1.1.4. Регуляция функций щитовидной железы.

1.1.5. Роль щитовидной железы в старении целостного организма.

1.1.6. Возрастные изменения щитовидной железы и ее старение.

1.2. Функциональная роль нейроиммуноэндокринных взаимодействий в щитовидной железе.

1.3. Особенности экспрессии белков Ki-67 и Р53 в щитовидной железе.

1.3.1. Особенности экспрессии белка Ki-67 в щитовидной железе.

1.3.2. Особенности экспрессии белка Р53 в щитовидной железе.

1.4. Радиоактивное излучение как модель преждевременного старения.

1.4.1. Последствия облучения для людей и животных.

1.4.2. Радиоактивное облучение и рак щитовидной железы.

Результаты собственных исследований.

Глава 2. Материал и методы исследования.

2.1. Исследуемый материал.

2.2. Методы исследования.

2.3. Протокол постановки иммуногистохимического (авидин-биотинового) метода.

2.4. Компьютерный анализ микроскопических изображений и статистическая обработка результатов.

Результаты исследования и их обсуждение.

Глава 3. Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы.

3.1. Верификация экспрессии белка Ki-67.

3.1.1. Верификация экспрессии белка Ki-67 в щитовидных железах людей разных возрастных групп.

3.1.2. Верификация экспрессии белка Ki-67 в щитовидных железах крыс разных возрастных групп при индуцированном (радиационном) старении.

3.2. Верификация экспрессии белка Р53.

3.2.1. Верификация экспрессии белка Р53 в щитовидных железах людей разных возрастных групп.

3.2. 2. Верификация экспрессии белка Р53 в щитовидных железах облученных и необлученных крыс разных возрастных групп.

3.3. Оценка баланса пролиферации и апоптоза в разных возрастных группах людей, а также облученных и необлученных крыс.

Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Зугаирова, Одьга Нуцаловна, автореферат

Актуальность темы

Среди многообразия факторов, способных оказывать повреждающее действие на живой организм, особое место занимает ионизирующая радиация. Опасность негативного воздействия радиационного излучения связана не столько с потенциально возможным применением ядерного оружия, сколько с бурно развивающейся в последние десятилетия атомной энергетикой и широким применением в медицине радиоизотопных методов диагностики и лечения. Кроме того, следует учитывать, что эффекты действия ионизирующего излучения запускают в живом организме каскад биохимических процессов, приводящих к преждевременному старению на всех уровнях организма - клеточном, тканевом, органном.

Щитовидная железа является самым радиочувствительным органом из всех жизненно важных органов. При этом важно провести сравнительное изучение эффектов облучения щитовидной железы в зависимости от возраста, так как функция щитовидной железы изменяется при старении организма, и ионизирующая радиация может еще более усугубить возникновение возрастных дисфункций, что существенным образом отразится как на взаимосвязанной деятельности нейроэндокринной системы, так и на функции других органов и систем, прежде всего, сердца и сосудов.

Помимо йодсодержащих гормонов, щитовидная железа продуцирует ряд биологически активных веществ, влияющих на различные физиологические процессы. В данной работе проведена оценка экспрессии двух таких веществ, являющихся маркерами основных биологических процессов, обеспечивающих функционирование щитовидной железы и лежащих в основе неопластической трансформации - пролиферации и апоптоза клеток. Такими биологически активными веществами являются белок Ki-67 - клеточный маркер пролиферации, экспрессия которого неодинакова в клетках щитовидной железы людей разных возрастных групп [Saad A.G. et al., 2006], а также белок Р53, осуществляющий контроль над течением процессов клеточного цикла, а также за отсутствием в геноме повреждений, которые могли бы привести к дальнейшему развитию патологии. Р53-зависимый апоптоз - мощный селектор, позволяющий избежать накопления мутаций, а, в случае, когда они уже возникли, Р53-зависимый апоптоз позволяет элиминировать такие потенциально опасные для организма клетки [Новиков B.C., 1996]. Белок Р53 играет важную роль и в первичном ответе организма на действие радиации. Подтверждением этого являются результаты эксперимента по облучению мышей. Массовый апоптоз, происходящий в радиочувствительных тканях мышей Р53-дикого типа вскоре после облучения гамма-излучением, не наблюдается у Р53-негативных животных [Meritt A.J. et al., 1994; Cui Y.F. et al., 1995; Komarova E.A. et al., 1997; Hasegawa M. et al., 1998].

Исходя из указанных предпосылок, целью данной работы явилось изучение возрастной динамики процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы у человека и крыс, как при естественном, так и при индуцированном (радиационном) старении.

В рамках указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

Научная новизна

Установлено снижение экспрессии пролиферотропного белка Ki-67 на фоне увеличения экспрессии проапоптозного фактора Р53. Подобные данные получены и при исследовании щитовидных желез крыс.

При воздействии ионизирующей радиации в щитовидных железах, как молодых, так и старых крыс резко возрастает антипролиферативная активность и, соответственно, уровень апоптоза. В то же время при общем снижении числа активно делящихся тиреоцитов, в некоторых клетках отмечается повышение концентрации белка пролиферации Ki-67, что отражается на очаговой интенсификации процессов пролиферации за счет клеток, сохранивших способность к росту и делению. Во всех возрастных группах животных баланс пролиферативной активности и апоптоза при индуцированном старении (после облучения) достоверно смещается в сторону антипролиферативной активности и клеточной гибели.

Практическая значимость

Положения, выносимые на защиту

Связь с научно-исследовательской работой Института

Диссертационная работа выполнялась в соответствии с планом НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМЫ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 3 глав, выводов, указателя литературы и приложения. Глава 1 (обзор литературы) представляет собой анализ данных литературы по функциональной морфологии щитовидной

Заключение диссертационного исследования на тему "Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы"

выводы

1. При старении происходит возрастное снижение пролиферативной активности тиреоцитов в щитовидной железе человека.

2. Индуцированное старение (воздействие ионизирующей радиации) приводит к уменьшению суммарной площади экспрессии белка Ki-67 в щитовидной железе старых крыс, однако усиливает пролиферативную активность тиреоцитов в молодом возрасте, что является потенциально неблагоприятным для формирования опухолевых очагов в щитовидной железе.

3. Зарегистрировано возрастное усиление процессов апоптоза клеток щитовидной железы у человека

8. Возрастное снижение пролиферативной активности тиреоцитов у человека и смещение баланса процессов пролиферации, и апоптоза при действии радиации в сторону клеточной гибели, прогрессирующее с возрастом у крыс, позволяет рассматривать старение как фактор, снижающий риск возникновения радиационно индуцируемого рака щитовидной железы.

Практические рекомендации

1. При исследовании биопсий щитовидных желез пациентов пожилого и старческого возраста рекомендуется оценивать экспрессии белков Ki-67 и Р53 для оценки риска возникновения и прогноза неопластического роста.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Зугаирова, Одьга Нуцаловна

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия / М.: Медицина, 1990.384 с.

2. Акмаев И.Г. Современные представления о взаимодействияхрегулирующих систем: нервной, эндокринной и иммунной // Успехи физиол. наук. 1996. - Т. 27, № 1. - С. 3-19.

3. Акоев И.Г. Проблемы постлучевого восстановления / М.: Атомиздат, 1970.-368 с.

4. Бабаева А.Г. Кроветворные и лимфоидные органы. В кн.: Структурные основы адаптации нарушенных функций: Руководство / Под ред. Д.С.Саркисова. М.: Медицина, 1987. — С. 328-342.

5. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Химическая защита от лучевого поражения / М.: Изд-во МГУ, 1985. 247 с.

6. Иванов А.А., Кузнецов В.П., Уланова A.M. Противолучевые терапевтические свойства лейкинферона // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 1. - С. 3-8.

7. Кветной И.М., Южаков В.В. Окрашивание ткани эндокринных желез и элементов АПУД-системы. Микроскопическая техника: Руководство / М.: Медицина, 1996. 532 с.

8. Конопляников А.Г. Радиобиология стволовых клеток / М.: Энергоатомиздат, 1984. 120 с.

9. Краевский Н.А. Острая лучевая болезнь. В кн.: Патологическая анатомия радиационных поражений. Кн.2. / М.: Медгиз, 1962. -С. 17-26.

10. Кудряшов Ю.Б. Лучевое повреждение "критических систем". В кн.: Лучевое поражение (острое лучевое поражение, полученное в эксперименте). М.: Изд-во МГУ, 1987. С. 572.

11. Лобанок Л.М., Малыхина А.П. Эффекты пролонгированного гамма-облучения и гипоксии на биоэлектрическую активность клеток миокарда // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 2.-С. 201-206.

12. Москалев Ю.И. Отдаленные последствия воздействия ионизирующих излучений / М.: Медицина, 1991. 464 с.

13. Новиков B.C. Программированная клеточная гибель / СПб.: Наука, 1996.-276 с.

14. Пальцев М.А., Кветной И.М. Руководство по нейроиммуноэндокринологии / М.: Медицина, 2006. — 384 с.

15. Полак Д., Ван Норден С. Введение в иммуноцитохимию: современные методы и проблемы / М.: Мир, 1987. 74 с.

16. Саркисов Д.С., Аруин Л.И. Обновление структур организма. В кн.: Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций / Под ред. Д.С.Саркисова. М.: Медицина, 1987. С. 20-36.

17. Степанова Е.Н. Надпочечники. В кн.: Структурные основы адаптации нарушенных функций / Под ред. Д.С.Саркисова. М.: Медицина, 1987.-С. 310-319.

18. Студитский А. Н. Эндокринные корреляции зародышевого развития высших позвоночных / М.: Изд-во АН СССР, 1947. 136 с.

19. Тонков В.Н. Учебник нормальной анатомии человека / М.: Медгиз.1953.- 504 с.

20. Тяжелова В.Г. Кинетический принцип в межвидовых экстраполяциях / М.: Наука, 1988.-194 с.

21. Чернышева М.П. Гормоны животных. Введение в физиологическую эндокринологию / СПб.: "Глагол", 1995. 530 с.

22. Южаков В.В., Кветной И.М. APUD-механизм в эндокринных и неэндокринных клетках. Возможное значение биогенных аминов в патогенезе пострадиационных дисфункций. В кн.: Хирургия эндокринных желез / СПб.: 1995. С. 211-213.

23. Avdeenko I., Khmelnitskii O.K. Morphological characteistics of the thyroid of adults from St-Petersburg (using a sample study data) // Arkh Patol. 2001. - V. 63, N. 4. - P. 22-26.

24. Barrera-Hemandez G, Zhan Q, Wong R, Thyroid hormone receptor is a negative regulator in p53-mediated signaling pathways // DNA Cell Biol. 1998. - V. 17, N. 9. - P. 743-750.

25. Barrington E.J.W. Some endocrinological aspects of the protochordata. In: Gorbman A, editor. Comparative Endocrinology / New York: John Wiley & Sons Inc. 1959. - P. 250.

26. Blasco M.A., Serrano M., Matheu A. et al. Delayed. ageing through damage protection by the Arl7p53 pathway // Nature. 2007. -V. 448, N. 7151.-P. 375-379.

27. Bizhanova A., Kopp P. Minireview: The sodium-iodide symporter NIS and pendrin in iodide homeostasis of the thyroid // Endocrinology. — 2009.-V. 150, N. 3.-P. 1084-1090.

28. Bocian-Sobkowska J., Wozniak W., Malendowicz L.K. Morphometric studies on the development of the human thyroid gland. II. The late fetal life // Histol Histopathol. 1997. - V. 12, N. 1. - P. 79-84.

29. Boehm B.O., Steinert M., Dietrich J.W. Thyroid examination in highly radiation-exposed workers after the Chernobyl accident // Eur J Endocrinol. 2009. - V. 160, N. 4. - P. 625-630.

30. Call G., Zannini M., Rubini P. et al. Conditional inactivation of the Ecadherin gene in thyroid follicular cells affects gland development but does not impair junction formation // Endocrinology. 2007. - V. 148, N6.-P. 2737-2746.

31. Carvalho D.P., Ferreira A.C. The importance of sodium/iodide symporter (NIS) for thyroid cancer management // Arq Bras Endocrinol Metab. -2007.-V. 51, N. 5.-P. 672-682.

32. Casarett G.W. Radiation Histopathology // Boca Raton: CRC Press. -1980. V.l. -P.160; V. 2.-P. 176.

33. Chanal H.S., Drake W.M. The endocrine system and ageing // J Pathol. -2007. V.211, N. 2. - P. 173-180.

34. Chen H., Emura S., Yao X.F. Shoumura S. Morphological study of the parathyroid gland and thyroid С cell in senescence-accelerated mouse (SAMP6), a murine model for senile osteoporosis // Tissue Cell. 2004. V. 36,N. 6.-P. 409-415.

35. Chiamolera M.I., Wondisford F.E. Minireview: Thyrotropin-releasing hormone and the thyroid hormone feedback mechanism // Endocrinology. — 2009. — V. 150, N. 3. P. 1091-1096.

36. Chiovato L., Mariotti S., Pinchera A. Thyroid diseases in the elderly // Baillieres Clin Endocrinol Metab. 1997. - V. 11, N. 2. - P. 251-270.

37. Clerc J. Thyroid nodule // Rev Prat. 2005. - V. 31, N. 2. - P. 137-148.

38. Correa da Costa V.M., Moreira D.G., Rosenthal D. Thyroid function and aging: gender-related differences // Journal of Endocrinology. 2001. — V. 171,N. l.-P. 193-198.

39. Cui Y.F., Zhou P.K., Woolford L.B. et al. Apoptosis in bone marrow cells of mice with different p53 genotypes after gamma-ray irradiation in vitro // J Environ Pathol Toxicol Oncol. 1995. - V. 14, N. 3-4. - P. 159-163.

40. Davis P.G. Cytokines and growth factors and thyroid hormone // Curr Opin

41. Endocrinol Diabetes Obes. 2008. - V. 5, N. 5. - P. 428.

42. De Escobar G.M., Ares S., Berbel P. et al. The changing role of maternal thyroid hormone in fetal brain development // Semin Perinatol. 2008. -V. 32, N. 6.-P. 380-386.

43. De Felice M., Postiglione M.P., Di Lauro R. Minireview: thyrotropin receptor signaling in development and differentiation of the thyroid gland: insights from mouse models and human diseases // Endocrinology. -2004. V. 145, N. 9. - P. 4062-4067.

44. De Groef В., Van der G.S., Darras V.M., Kuhn E.R. Role of corticotropin-releasing hormone as a thyrotropin-releasing factor in non-mammalian vertebrates // Gen Comp Endocrinol. 2006. V. 146, N. 1. - P. 62-68.

45. Denham M.J., Wills E.J. A clinico-pathological survey of thyroid glands in old age // Gerontology. 1980. - V. 26, N. 3. - P. 160-166.

46. Doganay L., Puyan F.O., Oz F. et al. Regenerative hyperplasia of follicular epithelium in chronic lymphocytic thyroiditis // Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2005. - V. 13, N. 4. - P. 353-357.

47. Drechsel H.F.E. Beitrage zur Chemie einiger Seethiere. II. Uber das Achsenskelett der Gorgonia cavolini // Z Biol. 1896. - V. 33. - P.85.

48. Dvorakova M., Bilek R., Cerovska J. et al. The volumes of the thyroid gland in adults aged 18-65 years in the Czech Republic determination of the norms // Vnitr Lek. - 2006. - V. 52, N. 1. - P. 57-63.

49. Dubois A., Walker R.I. Prospects for management of gastrointestinal injury associated with the acute radiation syndrome // Gastroenterology. -1988. V. 95, N. 2. - P. 500-507.

50. Duffy Jr B.J., Fitzgerald P J. Cancer of the thyroid in children: a report of 28 cases // J Clin Endocrinol Metab. 1950. - V. 31. - P. 1296-1308.

51. Dumont J.E., Lamy F., Roger P.P., Maenhaut C. Physiological and pathological regulation of thyroid cell proliferation and differentiation by thyrotropin and other factors // Physiological Rev. 1992. - V. 72. -P. 667-697.

52. Dunn A.D. Studies on iodoproteins and thyroid hormones in ascidians // Gen Comp Endocrinol. 1980. - V. 40, N. 4. - P. 473-483.

53. Elisei R. Routine serum calcitonin measurement in the evaluation of thyroid nodules. 2008. - V. 22, N. 6. - P. 941-953.

54. Endl E., Gerdes J. The Ki-67 protein: fascinating forms and an unknown function // Exp Cell Res. 2000. - V. 257, N. 2. - P. 231-237.

55. Erickson L.A., Jin L., Wollan P.C. et al. Expression of p27kipl and Ki-67 in benign and malignant thyroid tumors // Mod Pathol. 1998. - V. 11, N. 2.-P. 169-174.

56. Faggiano A., Coulot J., Bellon N. et al. Age-dependent variation of follicular size and expression of iodine transporters in human thyroid tissue // J Nucl Med. 2004. - V. 45, N. 2. - P. 232-237.

57. Fikaris A.J., Lewis A.E., Abulaiti A. et al. Ras triggers ataxia-telangiectasia-mutated and Rad-3-related activation and apoptosis through sustained mitogenic signaling // J Biol Chem. 2006. - V. 281, N. 46. -P. 34759-34767.к

58. Feichter G.E., Goerttler К. Age-related nuclear size variability thyreocytes in thyroid aspirates // Anal Quant Cytol. 1983. - V. 5, N. 2. -P. 75-78.

59. Fenq Z., Hu W., Rajakopal G., Levine A.J. The tumor suppressor p53 -cancer and aging // Cell Cycle. 2008. - V. 7, N. 7. - P. 842-847.

60. Ferrari E., Cravello L., Falvo F. et al. Neuroendocrine features in extrem.^ longevity // Exp Gerontol. 2008. - V. 43, N. 2. - P. 88-94.

61. Gardas A., Lewartowska A., Sutton B.J. et al. Human thyroid peroxidase (TPO) isoforms, TPO-1 and TPO-2: analysis of protein expression Graves' thyroid tissue // J Clin Endocrinol Metab. 1997. - V. 82, N. lX^ -P. 3752-3757.

62. Gromakova I. A., Konovalenko O.A. Effectes of aging and life-prolongii^^diet on thyroid regulation of protein synthesis // Bull Exp Biol Med, 2004. V. 137, N. 3. - P. 276-279.

63. Habra M., Sarlis N.J. Thyroid and aging // Rev Endocr Disord. 2005 V. 6, N. 2.-P. 145-154.

64. Harvey M., Vogel H., Lee E.Y. et al. Mice deficient in both p53 and I^Jb develop tumors primarily of endocrine origin // Cancer Research.» 1995.-V. 55.-P. 1146-1151.

65. Hasegawa M., Zhang Y., Niibe H. et al. Resistance of differentiating spermatogonia to radiation induced apoptosis and loss in p53-deficierit mice // Radiat Res. 1998. - V. 143, N. 3. - P. 263-270.

66. Herman W.A., Lacka K. Thyroid gland and the aging process of -the men // Pol Merkur Lekarski. 2006. - V. 20, Supl. 117. - P. 345-349.

67. Huang Y.H., Tsai M.M., Lin K.H. Thyroid hormone dependent regulation of target genes and their physiological significance // Chang Gung Med J. 2008. - V. 31, N. 4. - P. 325-334.

68. Hulbert A.J. Thyroid hormones and their effects: a new perspective // Biol Rev Camb Philos Soc. 2000. - V. 75, N. 4. - P. 519-631.

69. Katoh R., Bray C.E., Suzuki K. et al. Growth activity in hyperplastic and neoplastic human thyroid determined by an immunohistochemical staining procedure using monoclonal antibody MIB-1 // Hum Pathol. -1995. V. 26, N. 2. - P. 139-146.

70. Kazakov V.S., Demidchik E.P., Astakhova L.N. Thyroid cancer after Chernobyl // Nature. 1992. - V. 359, N. 6390. - P. 21-22.

71. Klecha A.J., Barreiro Arcos M.L., Frick L. Immune-endocrine enteractions in autoimmune thyroid diseases // Neuroimmunomodulation. 2008. -V. 15, N. l.-P. 68-75.

72. Klein J.R. The immune system as a regulator of thyroid hormone activity // Exp Biol Med. 2006. - V. 231, N. 3. - P. 229-236.

73. Kluge В., Renault N., Rohr K.B. Anatomical and molecular reinvestigation of lamprey endostyle development provides new insight into thyroid gland evolution // Dev Genes Evol. 2005. - V. 215, N. 1. -P. 32-40.

74. Koenig R.J. Thyroid hormone receptor coactivators and corepressors // Thyroid. 1998. -V. 8, N. 8. - P. 703-713.

75. Komarova E.A. , Zelnick C.R., Chin D. et al. Intracellular localization of p53 tumor supressor protein in y-irradiated cells is cell cycle regulated and determined by the nucleus // Cancer Res. 1997. - V. 57, N. 23. — P. 5217-5220.

76. Kratzsch J., Pulzer F. Thyroid gland development and defects // Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 2008. - V. 22, N.l - P. 57-75.

77. Krishna V., Chatterjee К. Thyroid development revisiting a foxeing case // Endocr Pract. - 2009. -V. 15, N. 1. - P. 61-62.

78. Krohn K., Strieker I., Emmrich P. et al. Cold thyroid nodules show a marked increase in proliferation markers // Thyroid. 2003. — V. 13, N. 6. -P. 569-575.

79. Kvetnoy I.M., Yuzhakov V.V., Molotkov A.O. et al. Diffuse neuroendocrine system: structural and functional effects of radiation injury to APUD-cells // Scanning Micr. 1996. - V.10, N. 1. -P. 261-276.

80. Lacka K., Herman W. Aging and endocrine glands // Pol Arch Med Wewn.- 2005. V. 113, N. 6. - P. 594-602.

81. Lantsov D.S. Proliferative activity of thyroid papillary microcarcinoma // ArkhPatol.- 2006. V. 68, N. 5.-P. 16-19.

82. Lee E.B., Tihan Т., Scheithauer B.W. et al. Thyroid transcription factor 1 expression in sellar tumors: a histogenetic marker? // J Neuropathol Exp Neurol. 2009. - V. 68, N. 5. - P. 482-488.

83. Leloup J. Iodoperoxydase branchiale et absorption des iodures chez l'Anguille. Mecanisme thyroidien de controle // Gen Comp Endocrinol. -1967.-V. 9.-P. 514.

84. Letsas K.P., Frangou-Lazaridis M., Skyrlas A. et al. Transcription factor-mediated proliferation and apoptosis in benign and malignant thyroid lesions // Pathol Int. 2005. - V. 55, N. 11. - P. 694-702.

85. Lewinski A., Karbownik M. Melatonin and the thyroid gland // Neuro Endocrinol Lett. 2002. - Suppl. 1. - P. 73-78.

86. Lietz H. C-cells: source of calcitonin. A morphological review // Curr Top Pathol.-1971.-V. 55.-P. 109-146.

87. Loskutova E.A. Morphological changes of the thyroid gland in rats of various ages following total body roentgen-irradiation // Journal Meditsinskaya Radiologiya. 1959. - V. 4, N. 6. - P.51-55.

88. Maclntire I. Calcitonin // Sci Basis Med Annu Rev. 1968. - P. 242-253.

89. Malaguarnera R., Vella V., Vigneri R., Frasca F. p53 family proteins in thyroid cancer // Endocrine-Related Cancer. 2007. - V. 14. -P. 43-60.

90. Manaios L., Tsiambas E., Alevizaki M. et al. Comparative topoisimerase Iia and ki 67 protein expression in papillary thyroid carcinoma based on tissue microarrays and image analysis // J BUON. 2008. - V. 13, N. 4. - P. 537-541.

91. Martin-Lacave I., Borrero M.J., Utrilla J.C. et al. С cells evolve at the same rhythm as follicular cells when thyroidal status changes in rats // J Anat. 2009. - V. 214, N. 3. - P. 301-309.

92. Mason K.A., Withers H.R., McBride W.H. et al. Comparison of the gastrointestinal syndrome after totalbody or totalabdominal irradiation // Radiation Research. 1989. - V.l 17, N. 3. - P. 480-488.

93. Matheu A., Maraver A., Serrano M. The Arf/p53 pathway in cancer and aging // Cancer Res. 2008. - V. 68, N. 15. - P. 6031-6034.

94. Mehrotra P., Gonzalez M., Johnson S. et al. Mcm-2 and Ki-67 have limited potential in preoperative diagnosis of thtyroid malignancy // Laryngoscope.-2006.-V. 116,N.8.-P. 1434-1438.

95. Merrit A.J., Potten C.S., Kemp C.J. et al. The role of p53 in spontaneous and radiation-induced apoptosis in the gastrointestinal tract of normal and p53-deficient mice // Cancer Res. 1994. - V. 54, N. 3. - P. 614-617.

96. Mian C., Lacroix L., Alzieu L. Sodium iodide symporter and pendrinexpression in human thyroid tissues // Thyroid. 2001. - V. 11, N. 9. -P. 825-830.

97. Mooij P., Drexhage H.A. Interactions between the immune system and the thyroid. Regulatory networks in health and disease // Thyroidology. -1992. — V. 4, N.l.-P. 45-48.

98. Morganti S, Ceda GP, Saccani M, et al. Thyroid disease in the elderly: sexrelated differences in clinical expression // J Endocrinol Invest. 2005. — V. 28,N. 11.-P. 101-104.

99. Мштау-Zmijewski F., Lane D.P., Bourdon J.C. p53/p63/p73 isoforms: an orchestra of isoformsto harmonise cell differentiation and response to stress // Cell Death and Differentiation. 2006. - V. 13. - P. 962-972.

100. Mu§at M., Vax V.Y., Borboli N. et al. Cell cycle dysregulation in pituitary oncogenesis // Front Horm Res. 2004. - V. 32. - P. 34-62.

101. Nagataki S., Shibata Y., Inoue S. et al. Thyroid diseases among atomic bomb survivors in Nagasaki // JAMA. 1994. - V. 272, N. 5. -P. 364-370.

102. Nelson E.R., Habibi H.R. Thyroid receptor subtypes: structure and function in fish // Gen Comp Endocrinol. 2009. - V. 161, N. 1. -P. 90-96.

103. Nikiforov Y., Gnepp D.R. Pediatric thyroid cancer after the Chernobyl disaster. Pathomorphologic study of 84 cases (1991-1992) from the Republic of Belarus // Cancer. 1994. - V. 74, N. 2. - P. 748-766.

104. Ogasawara M. Overlapping expression of amphioxus homologs of the thyroid transcription factor-1 gene and thyroid peroxidase gene in the endostyle: insight into evolution of the thyroid gland // Dev Genes Evol. -2000. V. 210, N. 5. - P. 231 -242.

105. Ognibene A., Petruzzi E., Troiano L. et al. Age-related changes of thyroid function in both sexes // J Endocrinol Invest. 1999. - V. 22, N. 10. -P. 38-39.

106. Oliver M., Eeles R., Hollstein M. et al. The IARC TP53 database: new online mutation analysis and recommendations to users // Human Mutation.-2002. -V. 19. P. 607-614.

107. Paschke R. TSH degradation by stress? // Dtsch. Med. Wochenschr. -2005.-V. 130, N. 21.-P. 1337.

108. Pateiuk A.V., Kuznik B.I., Rusaeva N.S. et al. Ontogenetic aspects of morphological and functional characteristics of the thyroid gland in birds // Adv Gerontol. 2008. - V. 21, N. 4. - P. 688-692.

109. Peeters R.P. Thyroid hormones and aging // Hormones (Athens). 2008. -V. 7,N. l.-P. 28-35.

110. Pharoah P.O. Thyroid hormones and embryogenesis // J Pediatr. 2009. -V. 155, N.3. -P. 455-456.

111. Poloz T.L., Shkurupiy V.A. Potentialities of differential immunohistochemical diagnosis of some follicular tumors of the thyroid gland // Bull Exp Biol Med. 2008. - V. 146, N. 6. - P. 794-796.

112. Prost G., Вernier-Valentin F., Munari-Silem Y. et al. Connexin-32 acts as a downregulator of growth of thyroid gland // Am J Physiol Endocrinol Metab. 2008. - V. 294, N. 2. - P. 291-299.

113. Puzianowska-Kuznicka M., Pietrzak M., Turowska O. et al. Thyroid hormones and their receptors in the regulation of cell proliferation // Acta Biochim Pol. -2006.-V. 53, N. 4.-P. 641-650.

114. Raphael S. J. The meanings of markers: ancillary techniques in diagnosis of thyroid neoplasia // Endocr Pathol. 2002. - V. 13, N. 4. - P. 301-311.

115. Rehman S.U., Cope D.W., Senseney A.D. et al. Thyroid disorders in elderly patients // South Med J. 2005. - V. 98, N. 5. - P. 543-549.

116. Reiners C., Demidchik Y.E., Drozd V.M. et al. Thyroid cancer in infants and adolescents after Chernobyl // Minerva Endocrinol. 2008. - V. 33, N. 4.-P. 381-395.

117. Rodier F., Campisi J., Bhaumik D. Two faces of p53: aging and tumor suppression // Nucleic Acids Res. 2007. - V. 35, N. 22. - P. 7475-7484.

118. Rodtcheko A., Namba H., Saenko V., Ohtsuru A., Starenki D., Meirmanov

119. S., Polona I., Rogounovitch Т., Yamashita S. Radiation-induced senescence-like terminal growth arrest in thyroid cells // Thyroid. 2005. -V. 15, N. 4. -P. 306-313.

120. Ron E., Lubin J.H., Shore R.E. et al. Thyroid cancer after exposure to external radiation: a pooled analysis of seven studies // Radiat Res. — 1995. -V. 141, N.3. P. 259-277.

121. Safer J.D., Persons K., Holick M.F. A thyroid hormone deiodinase inhibitor can decrease cutaneous cell proliferation in vitro // Thyroid. — 2009.-V. 19,N. 2, — P. 181-185.

122. Salmaso C., Bagnasco M., Pesce G. et al. Regulation of apoptosis in endocrine autoimmunity: insights from Hashimoto's thyroiditis and Graves' disease // Ann N Y Acad Sci. 2002. - V. 966. - P. 496-501.

123. Sato K., Shimode Y., Hirokawa M. et al. Thyroid adenomatous nodule with bizarre nuclei: a case report and mutation analysis of the p53 gene // Pathol Res Pract. -2008. V. 204, N. 3. - P. 191-195.

124. Savin S., Cvejic D., Nedic O. et al. Thyroid hormone synthesis and storage in the thyroid gland of human neonates // J Pediatr Endocrinol Metab. — 2003.-V. 16, N. 4. P. 521-528.

125. Schneider A.B., Ron E, Lubin J. et al. Dose-response relationships for radiation-induced thyroid cancer and thyroid nodules: evidence for the prolonged effects of radiation on the thyroid // J Clin Endocrinol Metab. -1993.-V. 77, N. 2.-P. 362-369.

126. Scholzen Т., Gerdes J. The Ki-67 protein: From the known and the unknown // Journal of Cellular Physiology. 2000. - V. 182, N. 3. -P. 311-322.

127. Semenenia I.N. Functional significance of the thyroid gland // Usp Fiziol Nauk. 2004. - V. 35, N. 2. - P. 41-56.

128. Shahedian В., Shi Y., Zou M. et al. Thyroid carcinoma is characterized by genomic instability: evidence from p53 mutations // Molecular Genetics and Metabolism.-2001.-V. 72.-P. 155-163.

129. Shimizu Т., Usuda N., Yamanda T. et al. Proliferative activity of human thyroid tumors evaluated by proliferating cell nuclear antigen/cyclin immunohistochemical studies // Cancer. 1993. - V. 71, N. 9. -P. 2807-2812.

130. Shore R.E. Issues and epidemiological evidence regarding radiation-induced thyroid cancer // Radiat Res. 1992. - V. 131, N. 1. - P. 98-111.

131. Sigurdson A.J., Ronckers C.M., Mertens A.C. et al. Primary thyroid cancer after a first tumour in childhood (the Childhood Cancer Survivor Study): a nested case-control study // Lancet. 2005. - V. 365. -P. 2014-2023.

132. Siironen P., Nordling S., Louhimo J. Immunohistochemical expression of Bcl-2, Ki-67, and p21 in patients with papillary thyroid cancer // Tumour Biol. 2005. - V. 26, N. 1. - P. 50-56.

133. Sirota D.K. Thyroid function and dysfunction in the elderly: a brief review // Mt Sinai J Med. 1980. - V. 47, N. 2. - P. 126-131.

134. Soda G, Antonaci A, Bosco D et al. Expression of bcl-2, c-erbB-2, p53, and p21 (wafl-cipl) protein in thyroid carcinomas // J Exp Clin Cancer Res.-1999.-Y. 18,N. 3.-P. 363-367.

135. Szisch V., Papandroukalis N., Fanouraki E. et al. Ontogeny of the thyroid hormones and Cortisol in the gilthead sea bream, Sparus aurata //Gen CompEndocrinol.-2005.-Y. 15, N. 1-2.-P. 186-192.

136. Tata J.R. Amphibian metamorphosis as a model for the developmental actions of thyroid hormone // Mol Cell Endocrinol. 2006. - V. 246. -N. 1-2.-P. 10-20.

137. Terry N.H., Travis E.L. The influence of bone marrow depletion on intestinal radiation damage // Intern J Rad Oncol Biol Phys. 1989. -V. 17, N. 3. - P. 569-573.

138. Thomas L.B. Harrison A.L., Stemple J.C. Aging thyroartytenoid and limb skeletal muscle: lessons in contrast // J Voice. 2008. - V. 22, N. 4. -P. 430-450.

139. Thompson D.E., Mabuchi K., Ron E. et al. Cancer incidence in atomic bomb survivors. Part II: solid tumors, 1958-1987 // Radiat Res. 1994. -V. 137.-P. 17-67.

140. Tisell L.E., Oden A., Muth A. et al. The Ki67 index a prognostic marker in medullary thyroid carcinoma // Br J Cancer. 2003. - V. 89, N. 11. -P. 2093-2097.

141. Tong W., Chaikoff I.L. Activation of iodine utilization in thyroid-gland homogenates by cytochrome С and quinones // Biochim Biophys Acta. -I960.-V. 37.-P. 189-191.

142. Turgut В., Ozdemir O., Erselcan T. Evaluation of the p53 tumor suppressorgene mutation in normal rat salivary gland tissue after radioiodine application: an experimental study // Adv Ther. — 2006. V. 23, N. 3. — P. 456-468.

143. Varga I., PospisilovaV., Gmitterova K. et al. The phylogenesis and ontogenesis of the human pharyngeal region focused on the thymus,parathyroid, and thyroid glands 11 Neuro Endocrinol Lett. 2008. - V. 29, N. 6.-P. 837-845.

144. Viallard J.F., Lacombe F., Belloc F. et al. Molecular mechanisms controlling the cell cycle: fundamental aspects and implications for oncology // Cancer Radiother. 2001. - V. 5, N. 2. - P. 109-129.

145. Wang H.M., Huang Y.W., Huang J.S. et al. Anaplastic carcinoma of the thyroid arising more often from follicular carcinoma than papillary carcinoma//Ann Surg Oncol. -2007. V. 14, N. 10.-P. 3011-3018.

146. Williams D. Cancer after nuclear fallout: lessons from the Chernobyl accident // Nat Rev Cancer. 2002. - V.2, N. 7. - P. 543-549.

147. Williams D. Twenty years" experience with post-Chernobyl thyroid cancer // Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 2008. - V. 22, N. 6. -P. 1061-1073.

148. Weissel M. Thyroid dysfunction in aged persons // Wien Med Wochenschr.- 2005. V. 155, N. 19 - 20. - P. 458-462.

149. Wu Y, Koenig R.J. Gene regulation by thyroid hormone // Trends Endocrinol Metab. 2000 - V. 11, N. 6. - P. 201 -211.

150. Zhang J., Lazar M.A. The mechanism of action of thyroid hormones // Annu Rev Physiol. 2000. - V. 62. - P. 439-466.

151. Ziad el A., Ruchala M., Breborowicz J. et al. Immunoexpression of TTF-1 and Ki-67 in a coexistent anaplastic and follicular thyroid cancer with rare long-life surviving // Folia Histochem Cytobiol. 2008. - V. 46, N. 4. -P. 461-464.

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.30) на тему:Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы

Автореферат диссертации по медицине на тему Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы

Оглавление диссертации Зугаирова, Одьга Нуцаловна :: 2010 :: Санкт-Петербург

Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Зугаирова, Одьга Нуцаловна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Возрастная динамика процессов пролиферации и апоптоза фолликулярных клеток щитовидной железы"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Зугаирова, Одьга Нуцаловна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций