Возможность трансовариальной передачи боррелий у таежного клеща (Ixodes Persulcatus Schulze) в природных очагах

Нефедова, Валентина Валерьевна

Диссертации по медицине → Эпидемиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Возможность трансовариальной передачи боррелий у таежного клеща (Ixodes Persulcatus Schulze) в природных очагах

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Нефедова, Валентина Валерьевна Москва 2003 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.00.30

Автореферат диссертации по медицине на тему Возможность трансовариальной передачи боррелий у таежного клеща (Ixodes Persulcatus Schulze) в природных очагах

На прашахрукописи

НЕФЁДОВА Валентина Валерьевна

ВОЗМОЖНОСТЬ ТРАНСОВАРИАЛЬНОЙ ПЕРЕДАЧИ БОРРЕЛИЙ У ТАЁЖНОГО КЛЕЩА (IXODESPERSULCATUSSCHULZE) В ПРИРОДНЫХ ОЧАГАХ

14.0030 - эпидемиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2004

Работа выполнена в ГУ Научно-исследовательском институте эпидемиология и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи РАМН

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор ЭЛ. Кореяберг

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор В.В. Тарасов

доктор медицинских наук И.А. Шагинян

Ведущая организация:

ГУ Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН

Защита состоятся января 2004 г. в «11» часов на заседании диссертационного совета

Д 001.007.02 в ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (123098, г. Москва, ул. Гамалеи, д. 18)

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН

Автореферат разослан <ъ29ъ декабря 2003 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

ЕЛ. Русакова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Патогенные для человека виды боррелий - Borrelia burgdorferi sensu lato, передающиеся иксодовыми клещами, вызывают самостоятельные заболевания, выделенные в группу иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) или инфекций группы Лайм-боррелиоза (Э.И. Коренберг, 1993, 1996). Это классические облигатно-трансмиссивные природно-очаговые инфекции с острым и/или хроническим течением, при которых возможны поражения кожи, нервной, сердечно-сосудистой системы, печени, опорно-двигательного аппарата. По уровню заболеваемости ИКБ занимают в России одно из ведущих мест среди природно-очаговых зоонозов. За четыре последних года (1999-2002 гг.) было зарегистрировано 31902 случая ИКБ, что составило в интенсивных показателях от 5.1 до 5.8 на 100 тыс. человек.

Эколого-эпидемические и таксономические связи боррелий с иксодовыми клещами имеют две существенные особенности. Во-первых, тесную экологическую и коэволюционную связь с определенной сравнительно небольшой таксономической группой иксодовых клещей рода Ixodes (W. Buigdorfer et al, 1983; H. Hoogstraal, 1986; J.F. Anderson, 1989; W. Burgdorfer, S.F. Hayes, 1989; H.A. Филиппова, 1990; N.A. Filippova, 1991; J.E. Keirans et al., 1992), - группой Ixodes persulcatus (или комплексом 1.(1.) ricinus/persulcatus). Во-вторых - отсутствие специфических связей разных геновидов боррелий с определенным видом переносчика и возможность микстинфицирования последних (Э.И. Коренберг, 1999; НА. Филиппова, 1999).

На большей части лесной зоны Евразии основной эпидемически значимый переносчик Borrelia burgdorferi sensu lato - таежный клещ {Jxodes persulcatus Schulze), причем на людей нападают, главным образом, взрослые особи (Е. I. Korenberg et al., 2001, 2002). Уровень их зараженности боррелиями - это один из главных показателей эпизоотического состояния природного очага и его потенциальной эпидемической опасности (Э.И. Коренберг, Ю.В.

Ковалевский, 2000; Е. I. Korenbeig et aL, 2002). Он определяется процессами горизонтальной (между резервуарными хозяевами) и вертикальной (трансфазовой) и, возможно, трансовариальной) передачи спирохет.

По имеющимся немногочисленным фрагментарным данным частота трансовариальной передачи боррелии у клеща /. persulcatus варьирует от 0% до 100% (Du Yong et aL, 1990; M. Nakao, К. Miyamoto, 1992; Ю.С. Балашов, JLA. Григорьева, 1997; Ю.С. Балашов и др., 1998; Я А. Григорьева, КА. Третьяков, 1998; H.V. Dubinina, 2000). На этом основании высказаны самые разные, порой взаимоисключающие мнения: от отрицания возможности трансовариальной передачи боррелии (М. Nakao, К. Miyamoto, 1992) до придания этому феномену очень важного значения (Ю.С. Балашов, Л.А. Григорьева, 1997; Ю.С. Балашов и др., 1998; Л.А. Григорьева, КА Третьяков, 1998). Изоляты боррелии были получены в очень редких случаях от голодных личинок Z ricinus, собранных в Северной Африке (Н. Younsi et al, 2001), АтЫуотта americanum в США (T.L. Scbulze et aL, 1986), /. persulcatus в России (Н.Б. Горелова, не опубликованные данные). Также единичные изоляты были получены' из биоптатов или крови лабораторных животных, на которых кормили личинок /. ricinus, собранных в природных очагах (G. Stanek et al., 1986, В. Hammer et al, 2002) или от напитавшихся личинок, происходивших от инфицированных в лаборатории клещей (Н.Е. Krampitz, 1986). Методами темнопольной микроскопии живые боррелии были обнаружены у голодных личинок следующих видов: /. scapularis (E.M. Bosler et aL, 1983, J. Piesman et aL, 1986), A. americanum (T.L. Schulze et aL, 1986), / ricinus (Z. Hubalek, J. Halouzka, 1998), /. persulcatus (Ю.С. Балашов, Л А. Григорьева, 1997; Ю.С. Балашов и др., 1998). Эти данные плохо сопоставимы и не поддаются количественной оценке. В целом значимость трансовариальной передачи боррелии как одного из факторов, определяющих «уровень зараженности взрослых клещей и, следовательно, влияющего на риск зараженности человека и интенсивность эпидемического проявления природных очагов ИКБ, оставалась, слабо изученной. Это определило цель и задачи диссертационной работы.

Цель работы

Изучить возможность трансовариальной передачи боррелий у их важнейшего переносчика в Евразии - клеща /. persulcatus, и оценить частоту этого феномена у естественно зараженных клещей в природных очагах.

Задачи исследования

1. Провести сравнительную оценку результативности индикации боррелий у естественно зараженных клещей традиционным методом темнопольной микроскопии и методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР) с праймерами, специфичными в отношении консервативных последовательностей В. burgdorferi 16S рРНК гена;

2. Оценить вероятность присутствия боррелий в яйцах, полученных от спонтанно зараженных клещей /. persulcatus;

3. Оценить результативность трансовариальной передачи путём индикации боррелий в голодных личинках дочернего поколения, полученных из яйцекладок спонтанно зараженных самок /. persulcatus;

4. Проанализировать значение трансовариальной передачи боррелий у таёжного клеща как одного из факторов, способных влиять на интенсивность эпизоотического процесса и эпидемического проявления природных очагов ИКБ в нашей стране.

Научная новизна:

- впервые на репрезентативном материале показана эффективность применения метода ПЦР для изучения трансовариальной передачи боррелий у их основного переносчика - клеща /.persulcatus;

- получены данные, подтверждающие наличие геномной ДНК В. burgdorferi sensu lato в яйцах спонтанно инфицированных самок клеща / persulcatus, что свидетельствует о способности зараженных самок инфицировать свои яйцекладки;

- впервые на репрезентативном материале оценена степень результативности трансовариальной передачи боррелий спонтанно зараженными самками /. рвтыкаЫ голодным личинкам дочернего поколения;

- проанализировано значение вертикальной передачи боррелий у таёжного клеща для их циркуляции в природных очагах ИКБ в России.

Практическая значимость. Показано, что при определении уровня зараженности клещей /. рвгзыкаШя боррелиями более дорогой и сложный метод ПЦР по своей результативности не имеет существенных преимуществ перед темнопольной микроскопией витальных препаратов. Поэтому в практической работе санэпидслужбы при осуществлении мониторинга за состоянием природных очагов ИКБ массовые исследования клещей с этой целью могут осуществляться методом темнопольной микроскопии витальных препаратов.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на 11 Интернациональных курсах по биологии переносчиков инфекций (Чехия, Чешские Будеёвице, июнь 2001 г.), межрегиональной научно-практической конференции по природно-очаговым инфекциям, посвященной 80-летию Омского НИИПИ (Омск, октябрь 2001 г.), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием по иксодовым клещевым боррелиозам (Ижевск, ноябрь 2002 г.) и на VII Интернациональном Потсдамском симпозиуме по клещевым инфекциям (Германия, Берлин, март 2003 г.).

Апробация диссертации состоялась на научной конференции отдела природно-очаговых инфекций ГУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН 15 октября 2003 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ.

Объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, двух глав обзора литературы, собственных исследований, включающих описание материалов и методов, результаты и их обсуждения, заключения и выводов и списка литературы, включающего 333 источника, из них 272 зарубежных. Работа изложена на 119 страницах, иллюстрирована 8 таблицами, 16 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Работа основана на результатах исследований разными методами голодных и напитавшихся самок /. persulcatus, яиц и голодных личинок дочернего поколения из их кладок. Сравнительный анализ результативности индикации В. burgdotferi sensu lato методами темнопольной микроскопией и ПЦР выполнен на голодных самках 7. persulcatus собранных в природе. Для изучения феномена вертикальной передачи боррелий использовали потомство спонтанно инфицированных особей таёжного клеща.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Клещи. Голодные взрослые клещи /. persulcatus собраны с растительности на флаг в мае-июне 1999 г. в период сезонного максимума их численности в Чусовском районе Пермской области, на территории, где циркулируют Borrelia garinii и В. qfzelii. По данным многолетних исследований общий уровень зараженности голодных имаго по результатам темнопольной микроскопии составляет здесь в разные годы 29,5-60,8% (EJ. Korenberg et aL, 1999).

Живых клещей разного пола помещали в отдельные пробирки, и некоторое время содержали при температуре +4 °С. Из них для работы были отобраны три группы клещей (табл. 1;рис. 1).

Первая группа - голодные самки /. репыкаШ, которых исследовали методом микроскопии фиксированных мазков на присутствие боррелий в яичниках.

Вторая группа - голодные самки, параллельно тестированные методами темногольной микроскопии и ПЦР на зараженность боррелиями.

Третья группа - напитавшиеся самки, отобранные для экспериментального изучения феномена трансовариальной передачи боррелий; клещей содержали в лабораторных условиях в отдельных пробирках с дифференцированной влажностью по методике Е.Н. Нельзиной(1951).

В общей сложности, от 20 напитавшихся и завершивших яйцекладку самок I. рвтыкаЫ были получены 19 яйцекладок, 17 из которых дали вылинявших личинок. Яйца и голодных личинок, отобранных из разных частей каждой кладки, исследовали параллельно несколькими методами: посевом на среду BSK II, ПЦР и микроскопией фиксированных мазков.

Таблиц* 1. МАТЕРИАЛ

ИССЛЕДОВАНО МЕТОДЫ

ПОСЕВ НА СРЕДУ ВЯК П ПЦР МИКРОСКОПИЯ ФИКСИРОВАННЫХ МАЗКОВ ТЕМНОПОЛЬНАЯ МИКРОСКОПИЯ ВСЕМИ МЕТОДАМИ

ГОЛОДНЫХ САМОК - 205 96 205 301

НАПИТАВШИХСЯ САМОК - 20 - - 20

ЯИЦ 600 7710 1633 - 9993

голодных личинок 600 781 1416 _ 2797

Рисунок I. ОБЩАЯ СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

В качестве отрицательных контролей при микроскопии фиксированных мазков и ПЦР использована самка /. ricinus, полученная из лабораторной колония незараженных клещей Института Зоологии, Швейцария, а также яйца и личинки из её кладки.

Лабораторные животные. Кормление клещей для получения яйцекладок производили на беспородных белых мышах разного пола, 2-4 месячного возраста.

Изоляты. Специфичность,ПЦР оценивалась на панели образцов ДНК разных видов спирохет из музея боррелий лаборатории переносчиков инфекций НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН:

а) группы В burgdorferi sensu lato - Borrelia qfzelii (типовой штамм Ip-21, выделен В.Н. Крючечннковым от взрослого клеща /. persulcatus в 1987 г. из Ленинградской области); Borrelia garinii (изолят Ipl-4906, выделен Н.Б. Гореловой от напитавшейся личинки Z persulcatus в 2000 г. из Пермской области); В. burgdorferi sensu stricto (типовой штамм В31 АТСС 35210, выделенный от клеща Ixodes dammini в 1982 г. в США, предоставленный Dr. A. Barbour, и штамм TxGW, изолированный от больного человека в 1986 г. в США, предоставленный Dr. R. Johnson); Borrelia valaisiana (изолят Ir-4804, выделен КБ. Гореловой от клеща Ixodes ricinus в 2000 г. из Краснодарского края);

б) группы возвратных клещевых лихорадок - Borrelia persica (штамм Батыр НТ-20, выделен Е.П. Резник в 1988 г. от клещей Ornithodorospapillipes из Узбекистана); Borrelia recurrentis (кровь мышей, инфицированных культурой, предоставленной Prof. J. Chalupsky, Чехия); Borrelia hermsii, серотип С (изолят, выделен из крови больного в 1990 г. в США, предоставлен Dr. A. Barbour);

в) лептоспир - Leptospira biflexa серовар patoc Patoc I (из музея лаборатории лептоспярозов НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН).

Для контроля и правильной интерпретации результатов ПЦР использована ДНК В. qfzelii типового штамма 1р-21.

Темнопольная микроскопия. Витальные препараты из голодных самок готовили но описанному раннее способу (Ю.В. Ковалевский и др., 1990) с использованием обезжиренных предметных стекол не более 1,2 мм толщиной и покровных стекол 18 х 18 мм. Материал (содержимое средней кишки) равномерно распределяли по площади 0.7-0.8 см2. Препараты просматривали под общим увеличением 600х, с иммергируемым дистиллированной водой темнопольным конденсором ОИ -13. В каждом препарате просматривали 250 полей зрения при общем увеличении х600.

Микроскопия фиксированных мазков. Содержимое яйца, раздавленного препаровальной иглой, наносили на предметное стекло. Препараты из голодных личинок и яичников голодных самок готовили по описанному ранее методу (МЛ. Левин и др., 1993). Мазки высушивали, фиксировали над пламенем спиртовки и затем окрашивали по Романовскому-Гимза с докраской 1% раствором кристаллического фиолетового в течение 30 мин. В каждом препарате просматривали 250 полей зрения при общем увеличении х600.

Концентрацию боррелий в витальных и фиксированных препаратах выражали средним количеством микробных клеток на 100 полей зрения, используя количественные статистически обоснованные градации (Ю.В. Ковалевский и др., 1991).

Культуральный метод. Яйца и голодных личинок исследовали группами: яйца - по 50 экземпляров в каждой, а личинок - по 10 экземпляров в каждой. Перед посевом их промывали в стерильных чашках Петри в 70° этаноле, стерильной дистиллированной воде и 0.9% №СЬ Посевы материала яиц проводили внесением их суспензии, полученной после измельчения в гомогенизаторе, в 200 мкл среды или путем прокалывания оболочки яиц, находившихся в культуральной пробирке, препаровальной иглой. У личинок под бинокуляром асептически удаляли гнатосому и конечности, а тело клеща переносили непосредственно в пробирку со средой (Н.Б. Горелова и др., 1996). Посев материала проводили на среду Б8К П без антибиотиков. Для культивирования использовали стерильные полистириновые пробирки с герметически завинчивающимися крышками,

объемом 2 мл, на 3/4 заполненные средой. Посевы инкубировали при 32 °С в течение 2 мес. Наличие боррелий в них контролировали еженедельным просмотром 100 полей зрения под микроскопом с темнопольным конденсором при общем увеличении х600.

Метод ПЦР.

Подготовка проб. Предназначенные для исследования образцы, промытые в 70° этаноле и дистиллированной воде, высушивали на фильтровальной бумаге и помещали в 1,5 мл пробирки типа "Eppendorf, которые хранили при -70° до момента исследования. Выделение геномной ДНК боррелий" из биологических образцов проводили с помощью гуанидинтиоцианата и фенола/хлороформа по методике А.Е. Гущина, Э.М. Халилова (1996). При необходимости пробы хранили при -20 °С.

Амплификация. Полимеразную цепную реакцию проводили в четырехканальном термоциклере "Терцик" НПО «ДНК-Технология» (Россия, Москва). Реакционная смесь объемом 25 мкл включала реакционный буфер (67 мМ Трис-HCL. рН 8,6; 16,6 мМ (NH4)2SO4*, 2,5 мМ MgCl2; 0.001% Тритон Х-100; 0,12 мг/мл БСА), дезоксирибонуклеотидтрифосфаты (dATP, dCTP, dGTP, dTTP) в конечной концентрации 0,2 мМ, 15 pmol каждого праймера, 1,5 ед. фермента Taq-полимеразы и 10 мкл исходной ДНК-матрицы. На поверхность смеси наносили 15 мкл стерильного вазелинового масла. Использованы консервативные прайм еры (ВВ1 и ВВ2), фланкирующие фрагмент Borrelia burgdorferi 16S рРНК гена размером 244 пары нуклеотидов (Т. Adam et aL, 1990). Олигонуклеотиды синтезированы амидофосфитным методом в ЗАО «Синтол» (Россия, Москва). Амплификацию ДНК осуществляли по J.A. Salinas-Melandez et aL (1995) с некоторыми коррективами. Программа ПЦР для В. burgdorferi sensu lato включала: 5 циклов при 94 °С - 1 мин., 40 °С - 1 мин., 72 °С - 1 мин., затем 30 циклов в режиме 94 °С - 1 мин, 50 °С - 1 мин., 72 °С - 1 мин. Специфичность метода составила 100%. Чувствительность - 100 боррелий в анализируемой пробе.

Анализ амплифицироеанной ДНК проводили методом горизонтального электрофореза в 1-2% агарозном геле в присутствии бромистого этидия и трис-ацетатного буфера при

напряжении 165 В. Для анализа агарозных гелей использована видеосистема "DNA Analyzer" с программами "Gel-Imager" и "Gel-analysis" версии 1.0.

Статистическая обработка экспериментальных данных. Для определения различий между количественными признаками двух групп использовался критерий Стыодента. При р<0,05 различия считались достоверно значимыми. Для определения различий по количественным признакам использовался метод Фишера, критерий хи-квадрат.

Для расчета возможной индивидуальной зараженности яиц в кладках напитавшихся самок таёжного клеща применена формула В.Н. Беклемишева (1963):

Р0=еи, М=-1пР0, где Ро - указанная вероятность; е - основание натуральных логарифмов; М- среднее число зараженных клещей (яиц) на одну партию во всем материале.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Сравнение результативности методов индикации боррелий темнопольной» микроскопией и полимеразной цепной реакцией (ПЦР)

Для оценки целесообразности применения метода ПЦР с целью изучения трансовариальной передачи В. burgdorferi sensu lato была исследована его результативность в сравнении с обычным методом выявления боррелий темнопольной микроскопии/

Результаты обоих сравниваемых методов индикации боррелий свидетельствовали о высоком уровне зараженности клещей (48,8% и 61,0%), однако, методом ПЦР было выявлено примерно на 10% больше инфицированных особей, чем темнопольной микроскопией (табл. 2). При этом различия показателей зараженности клещей, полученных разными методами, вполне достоверны (критерий Стьюдента t=2.5).

Т*(ЛШМ 2. ОБЩИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ БОРРЕЛИЯМИ ГОЛОДНЫХ КЛЕЩЕЙ ШЮЕЗ РЕКЯЛЬСАТиЗ МЕТОДАМИ ТЕМНОПОЛЬНОЙ МИКРОСКОПИИ И ПЦР

МЕТОД ИССЛВДОВАНО КЛЕШЕЙ НЗ НИХ ЗАРАЖЕНО ЧИСЛО ИНФИЦИРОВАННЫХ КЛЕЩЕЙ, НЕ ВЫЯВЛЕННЫХ СРАВНИВАЕМЫМ МЕТОДОМ >

АБС •/. (Р±2т,) АБС. •/. <Р42т,)

ТХМНОПОЛЬНАЯ МИКРОСКОПИЯ 205 ■ 100 48ДО.0 • 5 5.ОДЗ

ПЦР • 205 125 61,0±63 30 24,1±7,6

В большинстве случаев (около 70% исследованных особей) оба метода показали идентичные результаты, но, данные в общей сложности по 35 клещам из 205 (26.9±7.8%) не совпали. Главным образом это произошло из-за того, что методом ПЦР удалось обнаружить возбудителя у 30 клещей, у которых он не был выявлен темнопольной микроскопией. Вместе с тем 5 проб, подготовленных из достоверно зараженных клещей, оказались негативными в ПЦР.

Результаты исследования клещей методом ПЦР при разном уровне их индивидуальной зараженности, выявленной темнопльной микроскопией, показывают, что этот метод позволил выявить боррелий у 28,6% клещей, которые были отнесены к числу незараженных на основании просмотра. 250 полей зрения в каждом из соответствующих витальных препаратов. Вместе с тем ПЦР не выявил в общей сложности примерно 8% клещей, содержавших боррелий в достаточной концентрации (более 10 на 100 полей - зрения). Несомненно, ПЦР дает лучшие результаты по сравнению с темнопольной микроскопией витальных. препаратов, когда образец содержит очень небольшую концентрацию бактериальных клеток. Высокий уровень зараженности клещей, выявленный методом ПЦР, основан на обнаружении возбудителя у особей, содержащих единичные спирохеты. В природных очагах ИКБ переносчики, содержащие большое количество возбудителя,

составляют лишь незначительную часть зараженных клещей; преобладают особи, содержащие минимальное количество боррелий (Ю.В. Ковалевский и др., 1991,2001; Уи.У. Коуйеуйку, Е.1. Когепрещ, 1995). В целом, наши данные показывают, что при выявлении зараженности клещей боррелиями, метод ПЦР, несмотря на несколько большую чувствительность, не имеет существенных преимуществ перед темнопольной микроскопией.

Вероятность присутствия боррелий в яйцах, полученных от спонтанно зараженных клещей /. рет1саШ8

В соответствии с предложением "" Ви^сЫм, М.О.Я. Vaгma (1967), мы оценивали уровень трансовариальной передачи и её* интенсивность двумя показателями: 1) процентом самок передавших агент своему потомству и 2) процентом инфицированного потомства происходившего от инфицированной самки.

В яичниках 3 голодных самок из 96 исследованных (около 3%) методом микроскопии фиксированных мазков были выявлены спирохеты. ДНК боррелий обнаружена также у 16 (80,0+17,9%) напитавшихся самок из 20 исследованных, что свидетельствовало о потенциальной возможности их трансовариальной передачи.

Всего от самок получено 19 яйцекладок. ДНК боррелий выявлена примерно в пятой части пулов по 10 яиц и в трети пулов по 20 яиц, полученных от напитавшихся самок. Способность зараженных самок передавать боррелий трансовариально подтверждается выявлением ДНК боррелий в 65 пробах (36,5+7,2%) из 178 по 20 яиц и в 81 пробе (21,4+4,2%) из 378 по 10 яиц. Возможная индивидуальная зараженность яиц в кладке, рассчитанная по формуле В.Н, Беклемишева, по результатам исследования пулов по 10 яиц составила 0,5 - 23,0%, а по данным исследования пулов по 20 яиц - 0,4 - 8,0%. Тем не менее, средние значения индивидуальной зараженности яиц из этих кладок составили 2,4 и 2,2%, соответственно (рис. 2).

Рисунок 2. ПОКАЗАТЕЛИ ЗАРАЖЕННОСТИ ЯИЦ, ИССЛЕДОВАННЫХ ГРУППОВЫМ СУСПЕНЗИОННЫМ МЕТОДОМ, В РАЗНЫХ КЛАДКАХ (РАССЧИТАНО ПО ФОРМУЛЕ В.Н. БЕКЛЕМИШЕВА, 1963)

В для пулов по 10 яиц □ для пулов по 20 яиц

1 2 3 4 5 в 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 IT 19 20 сиюии

ммчтия

Кладки, полученные от напитавшихся самок Ixodes persulcatus

Однако в 370 яйцах, исследованных индивидуально методом ПЦР, ДНК боррелий не обнаружена. Микроскопия 1683 фиксированных мазков, приготовленных из яиц и попытки изолировать В. burgdorferi sensu lato путем посева на среду BSK II яиц, также не дали положительных результатов.

Частота (вероятность) присутствия боррелий в голодных личинках

Боррелий выявлены только в нескольких препаратах личинок, происходивших из одной и той же кладки. Самка, отложившая эту кладку, была единственной (из 16 инфицированных), передавшей боррелий через яйца личинкам дочернего поколения. Уровень зараженности личинок, вылинявших из яиц этой кладки, составил всего 7%, а степень их индивидуальной инфтшрованности была очень низка: 0.4-0.8 боррелий на 100 полей зрения. У голодных

личинок, вылинявших из инфицированных яйцекладок, ДНК боррелий не обнаружена. Негативными оказались также и посевы.

Полученные данные свидетельствуют о присутствии геномной ДНК боррелий в яйцах, полученных от спонтанно зараженных самок. /. persulcatus и, следовательно, о принципиальной возможности трансовариальной передачи ими этих спирохет. Однако, у личинок, вылинявших из этих яиц, ДНК боррелий отсутствовала или, возможно, была в чрезвычайно низкой концентрации. Это свидетельствует об уменьшении числа яиц, инфицированных боррелиями или о потере возбудителя на этапе развития' яиц и вылинивания личинок. Нельзя исключить также возможность гибели боррелий в процессе овогенеза, что подтверждается малым количеством их в яйцах и личинках.

Реализация трансовариальной передачи возбудителей, как известно, зависит от частоты генерализованной-инфекции в материнском организмепереносчиков ит возможности проникновения инфицирующего агента в генеративные органы членистоногих до окончания формирования наружной кутикулярной оболочки яиц, причем концентрация агента должна быть достаточной для преодоления "яйцевого барьера" (A. Aeschlimann, 1958; W. Buigdoifer, M.G.R. Varaia, 1967).

Для боррелий группы ИКБ кишечник клеща (W. Buigdorfer et aL, 1988; W. Buigdorfer, S.F. Hayes, 1989; Э.И. Коренберг, 1996), по всей видимости, является нормальной средой их обитания и репродукции, а гемолимфа не является для этих спирохет средой, в полной мере отвечающей их жизненным потребностям (J.L. Benach et al., 1987; R.S. Lane, W. Burgdorfer, 1987; W. Burgdorfer. et aL, 1988; W. Burgdorfer, S.F. Hayes, 1989). Генерализованная инфекция у клещей рода hodes явление заметно более редкое, чем у клещей рода Ог-nithodoros - переносчиков аргасовых клещевых боррелиозов. По данным Г.Г. Москвитиной и др. (1995) генерализованная инфекция выявлена у 12,9% особей L persulcatus. В нашем исследовании, боррелий присутствовали в яичниках у 3 голодных самок таежного клеща из 96 исследованных (примерно 3%), или 11,5% от общего числа инфицированных самок.

Поэтому, как показывают наши данные, вертикальная передача спирохет В. burgdorferi sensu lato иксодовыми клещами /. persulcatus происходит реже, чем возбудителей АКБ, у которых она обычно наблюдается более чем в половине случаев (А.Н. Скрынник, 1954; А. Aeschlimann, 1958; В.В. Слесаренко, ICA Дунаевский, 1964; W. Burgdorfer, MGJL Varma, 1967; MS. Gaber et aL, 1984).

По нашим данным процент спонтанно зараженных самок /. persulcatus, передавших боррелий трансовариально личинкам дочернего поколения, составил 6,2%. Процент личинок, получивших спирохеты через яйца - 0,5%. Это свидетельствует о том, что трансовариальная передача боррелий • своему потомству редко осуществляется • зараженной • самкой L persulcatus. В тех случаях, когда она имеет место, не все личинки в её кладке могут быть заражены спирохетами.

Итак, судя по полученным нами данным, трансовариальная передача боррелий у клеща /. persulcatus возможна, но её вероятность очень мала. На функционирование природных очагов ИКБ в России, решающее воздействие, по всей видимости, оказывают процессы горизонтальной и трансфазовой передачи возбудителя, причем определяющее влияние на уровень зараженности голодных взрослых клещей /. persulcatus, очевидно, оказывают показатели инфицированности напитавшихся нимф. По данным многолетних исследований общий уровень зараженности личинок по результатам посева на среду BSK II составляет в разные годы для голодных 0-2,2%, для снятых со зверьков - 8,3-59,1%. Изучение многолетней динамики эпизоотической активности природных очагов, проведенное нами в составе эпидотряда лаборатории переносчиков инфекций, выявило тесную корреляцию уровня зараженности взрослых, клещей боррелиями с многолетними колебаниями численности лесных полевок рода Clethrionomys (рис. 3).

Коэффициент корреляции (г) между уровнем зараженности клещей боррелиями и обилием этих зверьков в предшествующем году составил для нимф 0.73, а для имаго 0.84. Подобная динамика эпизоотической активности природных очагов ИКБ в Приуралье, в конечном счете, определяет многолетнюю динамику их эпидемического проявления.

ВЫВОДЫ

1. Результаты впервые проведенного параллельного исследования голодных самок bodes persulcatus, собранных в природе, на зараженность боррелиями методами темнопольной микроскопии и ПЦР с праймерами, специфичными в отношении

консервативных последовательностей В. burgdorferi 16S рРНК гена, показали, что метод ПЦР как более чувствительный может быть применен для изучения трансовариальной передачи боррелии. Этим методом боррелии выявлены примерно у 30% самок, у которых их не удается обнаружить при микроскопии 250 полей зрения в каждом витальном препарате. Вместе с тем для массовых исследований клещей /. persulcatus из природных очагов на зараженность боррелиями более дорогой и сложный метод ПЦР не имеет существенных преимуществ перед темнопольной микроскопией витальных препаратов.

2. Показано, что спонтанно инфицированные самки таёжного клеща, как правило, способны передавать боррелии трансовариально' яйца из их кладок содержат ДНК В. burgdorferi sensu lato. Однако индивидуальная зараженность яиц в кладках незначительна и составляет в среднем менее 2,5%.

3. Впервые установлено, что дальнейшая вертикальная передача боррелии от яиц личинкам дочернего поколения происходит избирательно и крайне редко: ДНК боррелии не выявлена при исследовании методом ПЦР более 750 личинок из кладок зараженных самок. Микроскопией фиксированных препаратов типичные боррелии выявлены только у 7% личинок в потомстве одной инфицированной самки; по данным, полученным этим методом, доля личинок, получивших боррелии от инфицированных самок, составляет во всех их кладках примерно 1,4%. Индивидуальная инфицированность этих личинок была очень низкой и составила 0.4-0.8 боррелии на 100 полей зрения.

4. Впервые показано, что трансовариальная передача Borrelia burgdorferi sensu lato у их важнейшего в Евразии переносчика - таежного клеща /. persulcatus, практически не имеет заметного значения для поддержания циркуляции этих спирохет, формирования показателей зараженности взрослых клещей следующей генерации, и, следовательно, слабо влияет на эпидемическое проявление природных очагов ИКБ.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Нефёдова В.В., Коренберг Э.И., Нестеренко Л.Н., Гинцбург А.Л., Ковалевский Ю.В., Горелова Н.Б. Сравнительная оценка результативности индикации боррелий в иксодовых клещах (Ixodidae) методами темнопольной микроскопии и полимеразной цепной реакции (ПЦР)//Паразитология. -2001. - Т. 31, вып. 1,- С. 3-8;

2. Нефёдова В.В., Коренберг Э.И., Шашина Н.И., Нестеренко JLH. Индикация Borrelia burgdorferi sensu lato в яйцах спонтанно зараженных клещей Ixodes persulcatus // В кн.: Актуальные аспекты природно-очаговых болезней. Омск, 2001. - С. 116-117;

3. Нефёдова В.В., Коренберг Э.И., Горелова Н.Б., Москвитина Г.Г., Шашина Н.И. Результаты изучения вертикальной передачи боррелий спонтанно инфицированными самками таежного клеща // В кн.: Клещевые боррелиозы. Ижевск, 2002. - С. 210-212;

4. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Горелова Н.Б., Нефёдова В.В. Многолетняя динамика эпизоотической активности природных очагов ИКБ Западного Урала // В кн.: Клещевые боррелиозы. Ижевск, 2002. - С 149-151;

5. Ковалевский Ю.В., Горелова Н.Б., Нефёдова В.В. Уровень зараженности и степень инфицированности боррелиями голодных клещей Ixodes persulcatus разного пола // В кн.: Актуальные аспекты природно-очаговых болезней. Омск, 2001. - С. 118-119;

6. Москвитина Г.Г., Коренберг Э.И., Нефёдова В.В., Ковалевский Ю.В., Горелова Н.Б. Динамика содержания боррелий в спонтанно зараженных голодных имаго таежного клеща // В кн.: Клещевые боррелиозы. Ижевск, 2002. - С. 205-207;

7. Nefedova V.V., Korenberg ЕЛ., Gorelova N.B., Kovalevskii Y.V. Studies on the transovarial transmission of Borrelia burgdorferi sensu lato in the Ixodes persulcatus tick // VII International Potsdam Symposium on Tick-Borne Diseases (IPS-VII) - Berlin, 2003. - C. 14;

8. Нефёдова В.В. Индикация Borrelia burgdorferi sensu lato в личинках таежного клеща, полученных от спонтанно инфицированных самок// Мед. паразитол. - 2003. - №3. - С.

Принято к исполнению 25/12/2003 Исполнено 26/12/2003

Заказ № 481 Тираж: 100 экз.

ООО «НАКРА ПРИНТ» ИНН 7727185283 Москва, Балаклавский пр-т, 20-2-93 (095)318-40-68 www.autoiefeiat.ru

Ш -2 674

Оглавление диссертации Нефедова, Валентина Валерьевна :: 2003 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ

БОРРЕЛИОЗОВ КАК ПРИРОДНО-ОЧАГОВЫХ ИНФЕКЦИЙ.

1.1. ИКБ как классические клещевые облигатно-трансмиссивные инфекции.

1.2. Основные переносчики и резервуарные хозяева ИКБ.

1.3. Феномен трансовариальной передачи боррелий.

1.3.1. Трансовариальная передача возбудителей трансмиссивных инфекций, передающихся клещами семейства Ixodidae.

1.3.2. Трансовариальная передача возбудителей аргасовых клещевых боррелиозов.

1.3.3. Трансовариальная и трансфазовая передача спирохет группы клещевых возвратных лихорадок у иксодид.

1.3.4. Трансовариальная и трансфазовая передача боррелий группы ИКБ.

ГЛАВА 2. ЭКОЛОГО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗОВ В ПЕРМСКОЙ ОБЛАСТИ.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 4. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ

ИНДИКАЦИИ БОРРЕЛИЙ В ИКСОДОВЫХ КЛЕЩАХ.

4.1. Сравнение результативности методов индикации боррелий темнопольной микроскопией и полимеразной цепной реакцией.

4.2. Обсуждение результатов.

Введение диссертации по теме "Эпидемиология", Нефедова, Валентина Валерьевна, автореферат

Актуальность проблемы. Патогенные для человека виды боррелий Borrelia burgdorferi sensu lato, передающиеся иксодовыми клещами, вызывают самостоятельные заболевания, выделенные в группу иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) или инфекций группы Лайм-боррелиоза (Э.И. Коренберг, 1993, 1996). Это классические облигатно-трансмиссивные природно-очаговые инфекции с острым и/или хроническим течением, при которых возможны поражения кожи, нервной, сердечно-сосудистой системы, печени, опорно-двигательного аппарата. По уровню заболеваемости ИКБ занимают в России одно из ведущих мест среди природно-очаговых зоонозов. За четыре последних года (1999-2002 гг.) было зарегистрировано 31902 случая ИКБ, что составило в интенсивных показателях от 5.1 до 5.8 на 100 тыс. человек.

Эколого-эпидемические и таксономические связи боррелий с иксодовыми клещами имеют две существенные особенности. Во-первых, тесную экологическую и коэволюционную связь с определенной сравнительно небольшой таксономической группой иксодовых клещей рода Ixodes (W. Burgdorfer et al., 1983; H. Hoogtraal, 1986; J.F. Anderson, 1989; W. Burgdorfer, S.F. Hayes, 1989; H.A. Филиппова, 1990; N.A. Filippova, J 991; J.E. Keirans et al., 1992), - группой Ixodes persulcatus (или комплексом 1.(1.) ricinus/persulcatus). Во-вторых - отсутствие специфических связей разных геновидов боррелий с определенным видом переносчика и возможность микстинфицирования последних (Э.И. Коренберг, 1999; Н.А. Филиппова, 1999).

На большей части лесной зоны Евразии основной эпидемически значимый переносчик Borrelia burgdorferi sensu lato - таежный клещ (Ixodes persulcatus Schulze), причем на людей нападают, главным образом, взрослые особи (Е. I. Korenberg et al., 2001, 2002). Уровень их зараженности боррелиями - это один из главных показателей эпизоотического состояния природного очага и его потенциальной эпидемической опасности (Э.И. Коренберг, Ю.В. Ковалевский, 2000; Е. I. Korenberg et al., 2002). Он определяется процессами горизонтальной (между резервуарными хозяевами) и вертикальной (трансфазовой) и, возможно, трансовариальной) передачи спирохет.

По имеющимся немногочисленным фрагментарным данным частота трансовариальной передачи боррелий у клеща I. persulcatus варьирует от 0% до 100% (Du Yong et al., 1990; M. Nakao, К. Miyamoto, 1992; Ю.С. Балашов, JI.А. Григорьева, 1997; Ю.С. Балашов и др., 1998; Л.А. Григорьева, К.А. Третьяков, 1998; H.V. Dubinina, 2000). На этом основании высказаны самые разные, порой взаимоисключающие мнения: от отрицания возможности трансовариальной передачи боррелий (М. Nakao, К. Miyamoto, 1992) до придания этому феномену очень важного значения (Ю.С. Балашов, Л.А. Григорьева, 1997; Ю.С. Балашов и др., 1998; Л.А. Григорьева, К.А. Третьяков, 1998). Изоляты боррелий были получены в очень редких случаях от голодных личинок I. ricinus, собранных в Северной Африке (Н. Younsi et al., 2001), Amblyomma amcricanum в США (T.L. Schulze et al., 1986), /. persulcatus в России (Н.Б. Горелова, не опубликованные данные). Также единичные изоляты были получены из биоптатов или крови лабораторных животных, на которых кормили личинок I. ricinus, собранных в природных очагах (G. Stanek et al., 1986, В. Hammer et al., 2002) или от напитавшихся личинок, происходивших от инфицированных в лаборатории клещей (Н.Е. Krampitz, 1986). Методами темнопольной микроскопии живые боррелии были обнаружены у голодных личинок следующих видов: I. scapularis (E.M. Bosler et al., 1983, J. Piesman et al., 1986), A. americanum (T.L. Schulze et al., 1986), I. ricinus (Z. Hubalek, J. Halouzka, 1998), I. persulcatus (Ю.С. Балашов, Л.А. Григорьева, 1997; Ю.С. Балашов и др., 1998). Эти данные плохо сопоставимы и не поддаются количественной оценке. В целом значимость трансовариальной передачи боррелий как одного из факторов, определяющих уровень зараженности взрослых клещей и, следовательно, влияющего на риск зараженности человека и интенсивность эпидемического проявления природных очагов ИКБ, оставалась слабо изученной. Это определило цель и задачи диссертационной работы.

Цель работы

Задачи исследования

2. Оценить вероятность присутствия боррелий в яйцах, полученных от спонтанно зараженных клещей I. persulcatus;

3. Оценить результативность трансовариальной передачи путём индикации бор-релий в голодных личинках дочернего поколения, полученных из яйцекладок спонтанно зараженных самок 1. persulcatus;

Научная новизна:

- впервые на репрезентативном материале показана эффективность применения метода ПЦР для изучения трансовариальной передачи боррелий у их основного переносчика - клеща I. pcrsulcatus;

- получены данные, подтверждающие наличие геномной ДНК В. burgdorferi sensu lato в яйцах спонтанно инфицированных самок клеща I. persulcatus, что свидетельствует о способности зараженных самок инфицировать свои яйцекладки;

- впервые на репрезентативном материале оценена степень результативности трансовариальной передачи боррелий спонтанно зараженными самками I. persulcatus голодным личинкам дочернего поколения;

- проанализировано значение вертикальной передачи боррелий у таёжного клеща. для их циркуляции в природных очагах ИКБ в России.

Практическая значимость. Показано, что при определении уровня зараженности клещей 1. persulcatus боррелиями более дорогой и сложный метод ПЦР по своей результативности не имеет существенных преимуществ перед темнопольной микроскопией витальных препаратов. Поэтому в практической работе санэпидслужбы при осуществлении мониторинга за состоянием природных очагов ИКБ массовые исследования клещей с этой целью могут осуществляться методом тем-нопольной микроскопии витальных препаратов.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ.

Заключение диссертационного исследования на тему "Возможность трансовариальной передачи боррелий у таежного клеща (Ixodes Persulcatus Schulze) в природных очагах"

выведи

1. Результаты впервые проведенного параллельного исследования голодных самок Ixodes persulcatus, собранных в природе, на зараженность боррелиями методами темнопольной микроскопии и ПЦР с праймерами, специфичными в отношении консервативных последовательностей В. burgdorferi 16S рРНК гена, показали, что метод ПЦР как более чувствительный может быть применен для изучения трансовариальной передачи боррелий. Этим методом боррелии выявлены примерно у 30% самок, у которых их не удается обнаружить при микроскопии 250 полей зрения в каждом витальном препарате. Вместе с тем для массовых исследований клещей /. persulcatus из природных очагов на зараженность боррелиями более дорогой и сложный метод ПЦР не имеет существенных преимуществ перед темнопольной микроскопией витальных препаратов.

2. Показано, что спонтанно инфицированные самки таёжного клеща, как правило, способны передавать боррелии трансовариально: яйца из их кладок содержат ДНК В. burgdorferi sensu lato. Однако индивидуальная зараженность яиц в кладках незначительна и составляет в среднем менее 2,5%.

3. Впервые установлено, что дальнейшая вертикальная передача боррелий от яиц личинкам дочернего поколения происходит избирательно и крайне редко: ДНК боррелий не выявлена при исследовании методом ПЦР более 75 О личинок из кладок зараженных самок. Микроскопией фиксированных препаратов типичные боррелии выявлены только у 7% личинок в потомстве одной инфицированной самки; по данным, полученным этим методом, доля личинок, получивших боррелии от инфицированных самок, составляет во всех их кладках^ примерно 1,4%. Индивидуальная инфицированность этих личинок была очень низкой и составила 0.4-0.8 боррелий на 100 полей зрения.-4. Впервые показано, что трансовариальная передача Borrelia burgdorferi sensu. lato у их важнейшего в Евразии переносчика - таежного клеща I. persulcatus„ практически не имеет заметного значения для поддержания циркуляции этиос. спирохет, формирования показателей зараженности взрослых клещей следующей: генерации, и, следовательно, слабо влияет на эпидемическое проявление: природных очагов ИКБ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Сравнительный анализ результативности индикации боррелий у естественно зараженных голодных самок Ixodes persulcatus методами темнопольной микроскопии и ПЦР с праймерами, специфичными в отношении консервативных последовательностей Borrelia burgdorferi 16S рРНК гена, показал довольно близкую результативность этих двух методов. Методом ПЦР выявлена зараженность значительного числа клещей, у которых боррелии не обнаружены при микроскопии 25 О полей зрения в препарате от каждой особи. Тем не менее, в целом для изучения уровня зараженности клещей в природе метод ПЦР не имеет преимуществ перед темнопольной микроскопией.

О потенциальной возможности трансовариальной передачи боррелий свидетельствует обнаружение спирохет яичниках 3 (3,1 ±3,5%) голодных самок, а у напитавшихся самок (80,0±17,9%) из 20 - ДНК боррелий ПЦР методом. ДНК боррелий так же выявлена примерно в пятой части пулов по 10 яиц и в трети пулов по 20 яиц, полученных от напитавшихся самок. По показателям зараженности яиц, полученным групповым суспензионным методом, по формуле В.Н. Беклемишева (1963) рассчитана возможная индивидуальная зараженность яиц в кладке. По результатам исследования пулов по 10 яиц она составила 0,5 - 23,0%, а по данным инфицированное™ пулов по 20 яиц - 0,4 - 8,0%. Однако, у личинок, вылинявших из этих яиц, ДНК боррелий отсутствовала или, возможно, была в чрезвычайно низкой концентрации. Это может свидетельствовать о потере возбудителя на этапе развития яиц и вылинивания личинок. Типичные боррелии выявлены только в нескольких препаратах личинок, происходивших из одной и той же кладки. Самка, отложившая эту кладку, была единственной из 16 инфицированных, передававшей борре-лии через яйца личинкам дочернего поколения. Уровень зараженности личинок, вылинявших из яиц этой кладки, составил всего 7%, а степень их индивидуальной инфицированности была очень низка - 0.4-0.8 боррелий на 100 полей зрения. Общий уровень зараженности голодных личинок дочернего поколения по результатам светлопольной микроскопии составил примерно у 0,5%.

Судя по полученным нами данным, трансовариальная передача боррелий у клеща 1. persulcatus возможна, но её вероятность очень мала: ДНК В. burgdorferi sensu lato в исследованных личинках не была выявлена, а доля личинок, у которых боррелии обнаружены микроскопией (даже с учетом спирохе-то-подобных клеток) и число спирохет, содержащихся в этих инфицированных клещах, весьма невелики. Представленные данные позволяют думать, что трансо-вариальный путь передачи В. burgdorferi sensu lato у важнейшего в Евразии переносчика - клеща /. persulcatus, практически не имеет заметного значения в поддержании циркуляции этих спирохет и формировании показателей зараженности взрослых клещей следующей генерации.

На функционирование природных очагов ИКБ в России, решающее воздействие, по всей видимости, оказывают процессы горизонтальной и трансфазовой передачи возбудителя, причем определяющее влияние на уровень зараженности голодных взрослых клещей I. persulcatus, очевидно, оказывают показатели инфицированности напитавшихся нимф.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2003 года, Нефедова, Валентина Валерьевна

1. Алексеев А.Н. Система клещ возбудитель и ее емерджентные свойства. - СПб., 1993. - 204 е.;

2. Алексеев А.Н., Кондрашова З.Н. Организм членистоногих как среда обитания возбудителей. Свердловск, 1985. -180 с;

3. Алыпова И.И., Коренберг Э.И, Воробьева Н.Н. Риск заражения иксодовыми клещевыми боррелиозами населения различных ландшафтных подзон Пермской области // Мед. паразигол. 2002. - №1. - С. 37-40;

4. Балашов Ю.С. Иксодовые клещи паразиты и переносчики инфекций. - Спб., 1998. - 288 е.;

5. Балашов Ю.С., Григорьева Л.А. Локализация боррелий в организме клеща Ixodes persulcatus (Ixoddae) // Доклады Академии наук. -1997.-T.352.-Ns 1.-С. 130-132;

6. Балашов Ю.С., Григорьева ЛА Трансовариальная передача боррелий Borrelia burgdorferi s.l. таежным клещом Ixodes persulcatus (IxocSdae) //Доклады Академии наук. -1998. Т. 363. - № 3. - С. 422-424;

7. Балашов Ю.С., Амосова Л.И., Григорьева Л.А. Трансовариальная и трансфазовая передача боррелий таежным клещом Ixodes persulcatus (IxocSdae) // Паразитология. -1998. Т. 32, вып. 6. -С. 489-494;

8. Балашов Ю.С., Григорьева ЛА, Оливер ДжХ Локализация боррелий в организме клеща Ixodes persulcatus на разных стадиях развития // Паразитология. -1997. Т. 31, вып. 2. - С. 97-103;

9. Беклемишев В.Н. К изучению зараженности клещей переносчиков энцефалита методом биопробы // Вопросы вирусологии -1963. - № 1- С. 240-242;

10. Горелова Н.Б., Коренберг Э.И., Филиппова НА, Постик Д. Первая изоляция патогенных для человека боррелий от клещей Ixodes pavlovskyi Pom. II Доклады Академии наук. 2001. - Т. 378. - № 4. - С. 558-559;

11. Горелова Н.Б., Коренберг Э.И., Ковалевский Ю.В. и др. Изоляция боррелий от клеща Ixodes trianguliceps (Ixodidae) и возможное значение этого вида в эпизоотологии иксодовых клещевых боррелиозов // Паразитология. -1996.-Т. 30, вып. 1.-С. 13-18;

12. Горелова Н.Б., Коренберг Э.И., Postic D. и др. Первая изоляция Borrelia burgdorferi sensu stricto в России // ЖМЭИ. 2001. - №4. - С. 10-12;

13. Григорьева ЛА, Третьяков КА Особенности паразитарной системы иксодовые клещи боррелии - мелкие млекопитающие на Северо-Западе России // Паразитология. -1998. - Т. 32, вып. 5. - С. 422-430;

14. Дайтер АБ. Трансовариальная и транслермальная передача Coxiella bumeti у клещей Hyalomma asiaticum и их роль в экологии Q-риккетсиоза II Паразитология -1977. Том 11, вып. 5. - С. 403-411;

15. Информационный сборник статистических и аналитических материалов. Раздел 13: Анализ деятельности центров Госсанэпиднадзора Российской Федерации по лабораторным исследованиям на клещевой энцефалит и болезнь Лайма за 1996-2000 гг.;

16. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Дауйотас С.В. Оценка разлитых способов приготовления витальных препаратов для выявления боррелий у иксодовых клещей II Мед. паразигол. -1990. № 1. - С. 33-35;

17. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Никиточкин ИТ. Оптимизация способа оценки зараженности и степени индивидуальной инфицированности клещей боррелиями II Мед. паразигол. -1991. № 3. - С. 18-21;

18. Ковалевский Ю.В., Крючечников В.В., Коренберг Э.И. Сравнительная оценка двух методов индикации боррелий клещах переносчиках болезни Лайма // Мед. паразигол. -1988. - № 5. -С. 75-77;

19. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Кутлина Т.В., Устинова OA Нормы просмотра препаратов при исследовании нимф иксодовых клещей методом темнопольной микроскопии в очагах боррелиоза II Мед. паразитол. 1996. - № 4. -С. 18-21;

20. Кондрашова З.Н., Котельникова Г.М. Поведение вируса клещевого энцефалита в клещах Ixodes F>^^«nsulcatus разного происхождения II Мед. паразитоа 1975. - № 1. - С. 25-29;

21. Коренберг Э.И. Боррелиозы. II В кн.: В.И. Покровский (ред.). Руководство по эпидемиологии инфоюшдионных болезней. М., Медицина, 1993. Т. 2. - С. 382-391;

22. Коренберг Э.И. Иксодовые клещевые боррелиозы как группа заболеваний человека и главные итоги ее дез-^^менияв России II Журн. инфекц. патол. -1996.-3 (4). С. 22-24;

23. Коренберг Э.И. Таксономия, филогенетические связи и области формообразования спирохет рода ВогтеПа, передающихся иксодовыми клещами II Успехи современной биологии. -1996. -116 (4). С. 389-406;

24. Коренберг Э.И. Взаимоотношения возбудителей трансмиссивных болезней в микстинфицированных и ««сводовых клещах (Ixodidae) II Паразитология. -1999. Т. 33, вып. 4. - С. 273-289;

25. Коренберг Э.И. Эрлихиозы новая для России гроблема инфекционной патологии II Мед. паразитол. — 1 Э99. - № 4.-С. 10-16;

26. Коренберг Э.И. Изучение и профилактика микст-инфекций, предающихся иксодовыми клещами /X Вестник Российской Академии мед. наук. 2001. - № 11. - С. 41-45;

27. Коренберг Э.И., Ковалевский Ю.В. Основные черты эко-эпидемиологии клещевые энцефалита IIВ кн.: П вооблемы клещевых и паразитарных заболеваний. СПб., 2000. С. 13-20;

28. Коренберг Э.И., Горелова Н.Б., Postic D., Котти Б.К. Новые для России виды боррелий возможные во^з-^Зудители иксодовых клещевых боррелиозов II Журн. микробиол. -1999. - № 2 - С. 3-5;

29. Коренберг Э.И., Крючечников В.Н., Ковалевский Ю.В. и др. Клещ Ixodes persulcatus Schulze новый п*==*у>еносчик Borrelia burgdorferi //Доклады Академии наук СССР -1987. -Т. 297. - № 5. - С. 1268-1270;

30. Коренберг Э.И., Щербаков С.В., Баннова Г.Г. и др. Зараженность клещей Ixodes persulcatus возбу^жг*ителями болезни Лайма и клещевого энцефалита одновременно II Паразитология -1990. Т. 24, вып. 1. - С. 102- "1 d>5;

31. Коренберг Э.И., Щербаков С.В., Ковалевский Ю.В. и др. Передача Borrelia burgdorferi от нимф к иплгкго Ixodes persulcatus Schulze II ДАН СССР. -1988. Т. 302. - № 3. - С. 759-760;

32. Кучерук В.В. Итоги развития учения о природной очаговости болезней человека и дальнейшие задачи. ГЧ/1 , 1972. -С. 131;

33. Левин М.Л., Ковалевский Ю.В., Пискунова А.Ю., Щеголева Т.В. Оценка степени индившл^сщуальнойинфицированности клещей возбудителем болезни Лайма путем микроскопии фиксированных препарапго tai // В кн.: Проблемы клещевых боррелиозов. М„ 1993. С. 157-162;

34. Лесников ПР., Лесникова М.В., Лаунер Л.Б. и др. Опыт параллельного выявления боррелий методом темнопольной микроскопии и в реакции непрямой иммунофлюоресценции у иксодовых клещей // В кн.: .^эпгериалы VIII съезда эпидемиологов. М., 2001. С. 352;

35. Литвин В.Ю., Коренберг Э.И. Природная очаговость болезней: развитие концепции к исхо/д,-^^ века // Паразитология. -1999. Т. 33, вып. 3. - С. 179-191;

36. Лыков В. А., Митрофанова Ю.Г. Материалы по распространению и экологии Ixodes persulcatus P. Sch. е» Пермской области// В кн.: Вопросы Арахноэнтомолоти. Ученые записки № 249. Пермь, 1971. С. 10-38;

37. Масузава Т., Наумов Р.Л., Кудекен М., Харитоненков ИХ. Обнаружение Borrelia burgdorferi senst^a stricto в Московской области, Россия // Мед. паразитол. 2001. - № 2. - С. 52;

38. Мещерский Г.И. К вопросу об Artrophia cutis idiopathica progressiva acuisita II Проблемы |у/1<=х2ковского венерологического и дерматологического общества -1898 -1899. № 8. - С. 135-136;

39. Москвитина Г.Г., Коренберг Э.И., Слилман Э., Щеголева Т.В. О частоте генерализованной инфекции у взрослых голодных клещей Ixodes в очагах боррелиозов России и США II Паразитология. -1995. Т. 29, вып. 5. - О 353-359;

40. Наумов Р.Л., Васильева И.С., Гутова В.П., Ершова АС. Размножение возбудителей болезни Лайма Borrelia burgdorferi в клещах Ixodes persulcatus // Паразитология. -1998. Т. 32, вып. 5. - С. 412-421;

41. Никольский П.В. Демонстрация случая пятнистой атрофии кожи II В кн.: Дневник 6-го Конгресса Российских медиков памяти Н.И. Пирогова. -1896. Вып. 12 - С. 89;

42. Павловский Е.Н. Аргасовые клещи (семейство Argasidae) (ред. ПА Петрищева) II В кн.: Переносчики возбудителей природноочаговых болезней. Москва, 1962. С. 263-290;

43. Петрищева ПА Клещи Omithodoros и боррелии клещевого рекурренса IIВ кн.: Биологические взаимоотношения кровососущих членистоногих с возбудителями болезней человека. Москва, 1967. С. 233-245;

44. Петров В.Г. О трансовариальной передаче возбудителя туляремии у клещей Dermacentor marginatus Schulze // Мед. паразитол. -1962. № 1. - С. 62-66.;

45. Писемский Н.Н. Случай идиопатической приобретенной атрофии кожи // Мед. обозрение -1902. № 37. - С. 710713;

46. Подборонов В.М., Бердыев А Защитные механизмы иксодоидных клещей и их прокормителей (паразитохозяинные взаимоотношения). Ашхабад, Ылым. 1991.-240 е.;

47. Поспелов АН Руководство к изучению кожных болезней. • М., 1905. 650 е.;

48. Поспелов А.И. Два случая самостоятельной атрофии кожи у взрослых II Мед. обозрение -1906. № 26. - С. 565574;

49. Сидоров В.Е. Полость тела аргасовых клещей, как среда обитания спирохет и бруцелл // Журн. Микробиод, эпидемиол. и иммунобиол. -1960. Вып. 6. - 91-97;

50. Симкин Г.Н. Биогеоценозы таёжного леса (на примере Пермской области). Изд-во Московского Университета, 1974.-176 с.;

51. Скрынник АН. Роль различных видов клещей Omithodoros в передаче спирохет клещевого возвратного тифа // Зоологический журн. -1954. Том XXXIII, вып. 2. - С. 319-322;

52. Слесарен ко В.В., Дунаевский КА О трансовариальной передаче спирохет клещевого возвратного тифа у Alectorcbius asperus // Мед. паразитол. 1964. - Том XXXIII, вып. 6. - С. 744-745;

53. Уманский К. Г., Сарманова ЕС., Панов Г.П. Существует ли эритематозная форма клещевого энцефалита? II Клещевой энцефалит и другие арбовирусные инфекции. Москва, Минск, 1962. - С. 182-183;

54. Филиппова НА II Энтомологическое обозрение. -1969. Т. 48. - № 3. - С. 675;

55. Филиппова НА Таежный клещ Ixodes persulcatus Schulze (Acarina, Ixodidae). Морфология, систематика, экология, медицинское значение. Л.: Наука, 1985. С. 204;

56. Филиппова НА Таксономические аспекты переносчиков возбудителя болезни Лайма II Паразитология. -1990. Т. 24, вып. 4,-С. 257-267;

57. Филиппова НА Симпатрия близкородственных видов иксодовых клещей и её возможная роль в паразитарных системах природных очагов трансмиссивных болезней // Паразитология. -1999. Т. 33., вып. 3. - С. 223-241;

58. Шаповап АН., Кузнецова Р.И., Чурилова АА О клещевой эритеме // В кн.: Проблемы клещевых боррелиозов. Под ред. Э.И. Коренберга. М., 1993. - С. 56-65;

59. Шашина Н.И. Общая продолжительность жизненного цикла II В кн.: Таежный клещ Ixodes persulcatus Schulze (Acarina, Ixoddae). Морфология, систематика, экология и медицинское значение (ред. НА Филиппова). Наука, Ленинград 1985. - С. 275-277;

60. Шашина Н.И., Иоффе ИД. Развитие яиц некоторых видов иксодовых клещей (IxocSdae) при различной влажности II Мед. паразитол. -1980. № 5. - С. 79-85;

61. Adam Т., Gassmann G.S., Rasiah С., Gobel U.B. Phenotypic and genotypic analysis of Borrelia burgdorferi isolates from various sources II Infec. Immun. -1991. Vol. 59. - P. 2579-2585

62. Adam Т., Graf В., Neubert U., Gobel U.B. Detection and classification of Borrelia burgdorferi by direct sequencing of 16S rRNA amplified after reverce transcription//Med. Microbiol. Lett -1992.-Vol. 1.-P. 120-126;

63. Aeschlimann A Development emmbryonnaire d'Ornithodorus moubata et transmission transovarienne de Borrelia duttone //Acta Tropica. -1958. Vol. 15. - P. 15-64;

64. Afzelius A. Verhandlungen der Dermatologischen Gesellschaft zu Stockholm, 28 Oct 1909II Arch. Dermatol. Syphilis -1910.-Vol. 101.-P. 404-407;

65. Afzelius A Erythema chronicum migrans II Acta Derm. Venerol. -1921. Vol. 2. - P. 120-125;

66. Ai С.-Х., Wen Y.-X., Zhang J.-G. et al. Clinical manifestations and epidemiological characteristics of Lyme disease in Hailin County, Heilongjiang Province, China II Ann. N.Y. Acad. Sci. -1988. Vol. 539. - P. 302-313;

67. Alekseev A.N., Oubinina H.V. Exchange of Borrelia burgdorferi Between Ixodes persulcatus (IxocSdae: Acarina) Sexual Partners II J. Med.Entomol. -1996. Vol. 33 (3). - P. 351-354;

68. Alekseev A, Dubinina H., Rijpkema S. Some peculiarities of Borrelioses foci functioning in the Baltic Regions of Russia: disease nosoforms, pathogen genospecies and vectors behaviour// Bull. Scand. Soc. Parasitol. 1997. - Vol. 7, N 1. - P. 46;

69. Alekseev AN., Dubinina H.V., Rijpkema S.G.T., Schouls L.M. Sexual transmission of Borrelia garinii by male Ixodes persulcatus (Ixodidae, Acarina) II Exp. App. Acarology -1999. Vol. 23 (2). - P. 165-169;

70. Alekseev AN., Dubinina H.V., van De Pol I., Schouls L.M. Identification of Ehrlichia spp. and Borrelia burgdorferi in Ixodes Ticks in the Baltic Regions of Russia II J. Clin. Microbiol. 2001. - Vol. 39 - P. 2237-2242;

71. Anderson J.F. Epizootology of Borrelia in Ixodes tick vectors and reservoir hosts II Rev. Infect. Dis.- 1989. Vol. 11. - P. 1451-1459;

72. Anderson J.F., Magnarelli LA, Burgdorfer W., Barbour G. Spirochetes in Ixodes dammini and mammals from Connecticut//Amer. J. Trap. Med. Hyg. -1983. -Vol. 32. P. 818-824;

73. Anderson J.F., Magnarelli L.A, LeFebvre R.B. et al. Antigenically variable Borrelia burgdorferi isolated from cottontail rabbits and Ixodes dentatus in rural and urban areas II J. Clin. Microbiol. -1989. Vol. 27. - P. 13-20;

74. Angelov L., Arnaudov D., Kostova E, Liptehen G. Studies of epizootiological processes with Lyme Borreliosis in Bulgaria II Infectology. -1993. Vol. XXX (5). - P. 12-14;

75. Angelov L., Dimova P., Berbencova W. Clinical and laboratory evidence of the tick Omithodoros marginatus as a vector of Borrelia burgdorferi in some areas of sporadic Lyme disease in Bulgaria II Europ. J. Epidemiol. 1996. - Vol. 12. - P. 499-502;

76. Baferstedt B. Uber lymphadenosis benigna cutis II Acta Dermato-Venereologica (Stockholm). -1943. Suppl. 24. - P. 1202;

77. Bannwarth A Chronische limphozytare Meningitis, entzundliche Polyneuritis und "Rheumatismus' II Arch. Psychiat. Nerven krankheiten -1941. Vol. 113. - P. 284-376;

78. Bannwarth A Zur klinik und Pathogenese der "chronischen lymphocytaren Meningitis" II Arch. Psychiat. Nerven krankheiten -1944. Vol. 117. - P. 161-185;t

79. Baptista S., Quaresma A., Kurtenbach K. et al. Lyme Borreiiosis spirochetes in ticks from Mainland Portugal // VII Intern. Potsdam Symposium on Tick-Borne Disease. 13-14 March 2003, Berlin, Germany;

80. Baranton G., Postic D., Saint Girons I. et al. Delineation of Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia garinii sp. nov., and group VS461 associated with Lyme borreiiosis // Int J. SysL Bacterid. -1992. Vol. 42 - P. 378-383;

81. Barbour A.G. Isolation and cultivation of Lyme dsease spirochetes II Vale J. Biol. Med. -1984. Vol. 57. - P. 521-525;

82. Barbour A.G., Fish F. The biological and social phenomen of Lyme dsease // Sci. -1993. Vol. 260.-P. 1610-1616;

83. Barbour A.G., Maupin G.O., Teltow G.J. et al. Identification of an unoitivable BorreSa species in the hard tick Amblyomma americanum: possible agent of a Lyme dsease-like illness // J. Infect Dis. -1996. Vol. 173. - P. 403-409;

84. Beaty B.J., Marquardt W.C. The Biology of Disease Vectors. University Press of Colorado, 1996. 632 p.;

85. Beklemishev A.B., Dobrotvorsky A.K, Livanova N.N. et al. Different genospedes of Borrelia burgdorferi sensu lato dominante in Ixodes persulcatus ticks in West Siberia and Far East Russia // Int J. Med. Microbiol. 2002. - Vol. 291, Suppl 33. - P. 203;

86. Bellet-Edimo R., Gem R, Betschart B. Frequence and efficiency of transovarial transmission of Borrelia burgdorferi in Ixodes ricinus И VII Int Congr. Lyme Borreiiosis, San Francisco, 1996. P. 39;

87. Benach J.L, Coleman J.L, Skinner RA, Bosler EM. Adult Ixodes dammini on rabbits: a hipothesis for the development and transmission of BorreSa burgdorferi II J. Infect Dis. -1987. Vd. 155. - P. 1300-6;

88. Benjamowitsch E, Maschkilleisson C.N. Weitere Beitfrage zur Frage tier de Atrophie der Haut II Acta Dermato-Venereologica -1933. Suppl. XIV. - P. 313-341;

89. Bissett M.L Hill W. Characterization of Borrelia burgdorferi strains isolated from Ixodes paa'ffcus ticks in California II J. Clin. Microbiol. -1987. Vol. 25. - P. 2296-301;

90. Bosler EM., Ormiston J.L, Hanrahan J.P., Benach J.L Prevalence of the Lyme dsease spirochete in populations of white-tailed deer and white-footed mice II Yale J. Bidog. Med. -1984. Vd. 57. - P. 651-659;

91. Bosler EM., Coleman J.L, Benach J.L et al. Natural dstribution of the Ixodes dammini spirochete II Science 1983. -Vol. 220.-P. 321-322;

92. Brown R.N., Lane R.S. Lyme dsease in California: A novel enzootic transmission cycle of BorreSa burgdorferiSdence -1992.-Vol. 256.-P. 1439-1442;

93. Buchwald A. Ein Fall von dffuser idopathischer Haut atrophie II Arch. Dermatd. Syphilis -1883. Vd. 10. - P. 553-556;

94. Bunikis J., Luke C. J., Bunikiene E et al. A surface-exposed region of a novel outer membrane protein (P66) of Borrelia spp. is variable in size and sequence II J. Bacterid. -1998. Vd. 180 (7). - P. 1618-23;

95. Bunikis J., Olsen В., Fingerle V. et al. Molecular polymorphism of the Lyme dsease agent Borrelia garinii in northern Europe is influenced by a novel enzootic Borrelia focus in the North Atlantic II J. Clia Microbid. -1996. Vol. 34. - P. 364368;

96. Burckhardt J.L Zur Frage der Fdlikel- und Keimzentrenbildung in der Haut// Frankfurter Zeitschrift fur Pathologic. -1911. -Vd. 6.-P. 352-359;

97. Burgdorfer W. Analyse des Infektionsveriaufes bei Ornithodoros moubata (Murray) und der naturlichen Ubertragung von Spirochaeta duttonii II Ma Trop. -1951. Vd. 8. - P. 193-262;

98. Burgdorfer W. Discovery of the Lyme cfsease spirochete and its relation to tick vectors // Yale J. Biol. Med -1984. Vol. 57.-P. 515-520;

99. Burgdorfer W., Gage K.L Susceptibility of the black-legged tick, Ixodes scapularis, to the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi 1Ш. Bakt Hyg. -1986. -263. P. 15-20;

100. Burgdorfer W., Hayes S.F. Vector-Spirochete Relationships in Louse-Bome and Tick-Borne Borrelioses with Emphasis on Lyme Disease II Advances in disease Vector Research. -1989. Vol. 6. - P. 128-150;

101. Burgdorfer W, Varma M.G.R. Trans-stadial and Transovarial development of Disease Agents in Arthropods II Annual Review Entomology. -1967. Vol. 12. - P. 347-376;

102. Burgdorfer W., Hayes S.F., Benach J.L Development of Borrelia burgdorferi in ixocid licks vectors In Lyme Disease and Releated Disorders II J. L Benach, E.M. Bosler, Ed: Annals of the New York Academy of Sciences. -1988. Vol. 539. - P. 172-179;

103. Burgdorfer W., Anderson J.F., Gem L et al. Relationship of Borrelia burgdorferi to its arthropod vectors II Scan. J. Infect Dis. Suppl. -1991. Vol. 77. - P. 3540;

104. Burgdorfer W., Barbour A.G., Hayes S.F. et al. Lyme disease a tick-bome spirochetosis? II Science. -1982. - Vol. 216. -P. 1317-1319;

105. Burgdorfer W., Barbour A.G., Hayes S.F. et al. Erythema chronicun migrans a tickbome spirochetosis // Acta Tropica. -1983. - Vol. 40. - P. 79-83;

106. Burgdorfer W., Lane R.S., Barbour A.G. et al. The western black-legged tick, Ixodes pacificus: A vector of Borrelia burgdorferi II Am. J. Trap. Med Hyg. -1985. Vol. 34. - P. 925-930;

107. Burgess EC., Patrican LA. Oral infection of Peromyscus marvculatus with Borrelia burgdorferi and subseqquent transmission by Ixodes damminillPm. J. Trap. Med. Hyg. -1987. Vol. 36. - P. 402-407;

108. Burkot T.R., J. Piesman, Wirtz RA Quantitation of Borrelia burgdorferi outer suface protein A in bodes scapularis: fluctuations during the tick life cycle, doubling times and loss while feeding II J. Infect Dis. -1994. Vol. 170. - P. 883-9;

109. Canica M.M., Nato F., du Merle L et al. Monoclonal antibodes for identification of Borrelia afzelii sp. nov. associated with late cutaneous manifestations of Lyme borreliosis // Scand. J. Infect Dis. -1993. Vol. 25. - P. 441-448;

110. Casjens S., Huang W.M. Linear chromosomal physical and genetic map of Borrelia burgdorferi, the Lyme disease agent II Mol. Microbiol. -1993. Vol. 8. - P. 967-980;

111. Chernesky MA Powassan virus transmission by ixoclid ticks infected after feedng on viremic rabbits injected intravenously //Canada J. Microbiol.-1969.-Vol.15.-P. 521-530;

112. Costero A., Grayson MA Experimental transmission of Powassan virus (Flaviviridae) by b(odes scapularis ticks (Acari, Ixodidae) //Am. J. Trap. Med Hyg. -1996. Vol. 55. - P. 536-546;

113. Craine N.G., Nuttall PA, Marriott A.C., Randolph S.E Role of grey squirrels and pheasants in the transmission of Borrelia burgdorferi sensu lato, the Lyme dsease spirochete, in the U.K. II Folia Parasitol. -1997. Vol. 44. - P. 155-160;

114. Crawen R., Dennis D. Isolation of Borrelia burgdorferi from Ixodes spinipalpis ticks in California and Colorado // Lyme Disease Surveillance Summary -1993. Vol. 4 (4). - P. 1-2;

115. Davidson B.E., MacDougall J., Saint Girons I. Physical map of the linear chromosome of the bacterium Borrelia burgdorferi 212, a causative agent of Lyme dsease, and localization of rRNA genes// J. Bacterid. -1992.-Vol. 174, N 11, -P. 3766-74;

116. Davidson M.M., Evans R., Ling C.L et af. Isolation of Borrelia burgdorferi from ticks in the Highlands of Scotland // J. Med Microbiol. -1999. Vol. 48 (1). - P. 59^5;

117. Demaerschalck I., Messaoud A.B., Kesel D.E et al. Simultaneous presence of dfferent Borrelia burgdorferi genospecies in biological fluids of Lyme disease patients II J. Clin. Microbiol. -1995. Vol. 33. - P. 602-608;

118. Dolan M.C., Lacombe EH., Piesman J. Vector Competence of Ixodes muris (Acari: Ixoddae) of Borrelia burgdorferi // J. Med. Entomol. 2000. - Vol. 37 (5). - P. 766-768;

119. Dou Guilan, Yang Zhen. A Study on the dssemination of Lyme Disease by Ixodes persulcatus II Chinese J. Vector Biology Control. T. 1, N 2. - P. 117-119;

120. Du Yong, Tou Xiyan, Wu Xiaoming, Qien Zhang. Dissemination and Transovarial Transmission of Borrelia burgdorferi in Ixodes persulcatus (Acari: Ixodidae) // Chin. Vector. Biol. Contr. J. -1990. Vol. 1 (6). - P. 367-369;

121. Dubinina H.V. Some peculiarities of the mating behavior in Ixodes persulcatus and Ixodes ricinus ticks (Acarina, Ixodidae): Differences in a sexual transmission of the species of BorreSa/l Acarina 2000. - Vol. 8 (2). - P. 125-131;

122. Estrada-Pena A., Oteo J A, Estrada-Pena R. et al. Borrelia burgdorferi sensu lato in ticks (Acarina: Ixoddae) from two different foci in Spain//Exp. Appl. Acarol.-1995.-Vol. 19.-P. 173-180;

123. Faye O., Comet J.P, Camicas J.L et al. Experimental transmission of Crimean-Congo hemorrhagic fever vims: role of 3 vector species in the maintenance and transmission cycles in Senegal II Parasite (French) -1999. Vol. 6 (1). - P. 27-32;

124. Felsenfeld O. Borrelia, human relapsing fever, and parasite-vector-host relationships II Bacteriol. Rev. -1965. Vol. 29, N 1.-P. 46-74;

125. Felsenfeld Oscar. Borrelia Strains, Vectors, Human and Animal Borreliosis. St Louis: Warren H. Green, Inc., 1971;

126. Filippova NA A hypothesis for the paleogenesis of the dstribution of the man vectors for Lyme Disease II In: F. Dusbabek, V. Bukva (eds.). Modem Acarology, Academia, Praque and SPB Academic Publishing The Hague. -1991. -Vol. 1. P. 109-118;

127. Fingerle V., Munderloh U.G., Liegl G., Wilske B. Coexistence of EhriicNae of the phagocytophila group with Borrelia burgdorferi in Ixodes ridnusirom Southern Germany//Med. Microbiol. Immunol. (Bert.). -1999. Vd. 188 (3). - P. 145-9;

128. Fingerle V., Bergmeister H.t Liegl G. et al. Prevalence of Borrelia burgdorferi sensu lato in Ixodes rianus in southern Germany//J. Spiroch.Tick-BomeDis.-1994.-Vd. 1.-P. 41-45;

129. Fingerle V., Michel H., Hettche G. et al. Borrelia burgdorferi s.l. Osp-A-types are widely spread in Bavaria but show dstinct local patterns//VII Intern. Potsdam Symposium on Tick-Borne Disease. 13-14 March 2003, Berlin, Genmany;

130. Fish D., Papero M. Laboratory maintenance of a novel relapsing fever spirochete transmitting by Ixodes scapularis IIIX International Conference on Lyme Borreliosis and other tick-bome dsease. August 18-22,2002, New York, New York. O-88;

131. Fraenkel С.J., Garpmo U., Berglung J. Determination of Novel Borrelia genospecies in Swecfsh Ixodes ricinus ticks // J. Clin. Microbiol. -2002. Vol. 40. - P. 3308-3312;

132. Fukunaga M., Yanagihara Y., Sohnaka M. The 23S/5S ribosomal RNA genes (nl/rrf) are separate from the 16S ribosomal RNA gene (rrs) in Borrelia burgdorferi, the aeb'dogical agent of Lyme disease// J. Gen. Microbiol. -1992 Vol. 138. - P. 871-7;

133. Fukunaga M., Sohnaka M., Nakao M., Miyamoto K. Evalution of Genetic Divergence of Borrelia Isolates from Lyme Disease Patients in Hokkaido, Japan, by rRNA Gene Probes II J. Clin. Microbiol. -1993. Vol. 31. - P. 2044-2048;

134. Fukunaga M, Hamase A, Okada K, Nakao M. Borrelia tanukii sp. nov. and Borrelia turdae sp. nov. found from ixodid ticks in Japan: rapid spedes identification by 16S rRNA gene-targeted PCR analysis II Microbiol. Immunol. -1996. Vol. 40. P. 877-81;

135. Fukunaga.M., Takahashi Y., Tsuruta Y.et al. Genetic and phenotypic analysis of Borrelia miyamotoi sp. nov., isolated from the ixodid tick Ixodes persulcatus, the vector for Lyme disease in Japan /I Int J. Syst Bacterid. -1995. Vd. 45. - P. 804-810;

136. Gaber M.S., Khalil G.M., Hoogstraal H. Borrelia croa'durae: venereal transfer in Egyptian Orrotfiodoros erraticus ticks II Exp. Parasitd. -1982. Vd. 54. - P. 182-4;

137. Gaber M.S., Khalil G.M., Hoogstraal H., Aboul-Nasr A.E Borrelia crocidurae localization and transmission in Omithodoros erraticus and O. savignyi II Parasitdogy -1984. Vol. 88 (Pt 3). - P. 403-13;

138. Garin C., Buajdoux J. Paralysie par les tiques II J. Med de Lyon -1922. Vd. 71. - P. 765-767;

139. Gazumyan A., Schwartz J.J., Livens D., Schwartz I. Sequence analisis of the ribosomal RNA operon of the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi II Gene -1991. Vd. 146. - P. 57-65;

140. Gem L, Lebet N. Development of Borrelia burgdorferi in Ixodes ricinus during blood meal: loss of borreliae and reinfection from the host IIVII lntem.Congr.Lyme borreliosis. San Frantisco. -1996. - P. 379;

141. Gern L, Rais O. Effident transmission of Borrelia burgdoferi between cofeedng Ixodes ricinus ticks (Acari: Ixodidae) // J., Med. Entomd. -1996. Vd. 33. - P. 189-192;

142. Gern L, Toutoungi LN., Ни C.M., Aeschlimann A. Ixodes (Phdeoixodes) hexagonus, an effident vector of Borrelia burgdorferi in the laboratoiy// Med. Vet Entomd. -1991. Vd. 5. - P. 431-435;

143. Gil H., Banal M.( Garcia-Perez A.L et al. Observations of Borrelia burgdorferi infection in Ixodid ticks in two endemic regions from the North of Spain IIVIII Int Conference. 1999;

144. Gray J.S., Kahl O., Janetzki-Mittman C. et al. Acquisition of Borrelia burgdorferi by Ixodes ricinus ticks fed on the European hedgehog, Erinaceus europaeus LII Exp. App.l Acarol. -1994. Vd. 18 (8). - P. 485-91;

145. Gupta S.K., Schonberg A, Hiepe Th. Prevalence of ticks in relation to their role as vector of Borrelia burgdoferi under autochthone conditions II Appl. Parasitd. -1995. Vd. 36 (2). - P. 97-106;

146. Gustafson R., Gardulf A, Svenungsson B. Comparison of Culture, Indirect Immunofluorescence and Dark-Field Microscopy for detection of Spirochetes from Ixodes ricinus Ticks II Eur. J. Clin. Microbid. Infect Dis. -1989. Vd. 8, N. 6. -P. 570-572■

147. Gustafson R., Svenungsson В., Gardulf A. et al. Prevalence of tick-bome encephalitis and Lyme borreliosis in a defined Swedish population II ScandI J/ Infec/ Dis. -1990. Vd. 22. - P. 297-306;

148. Gylfe A., Olsen В., Strasevicius D. et al. Isolation of Lyme disease Borrelia from puffins Fratercula arctica and seabird ticks (Ixodes uriae) on the Faeroe Islands // J. Clin. Microbid. -1999. Vd. 37. - P. 890-896;

149. Halouzka J., Juricova Z., Matiova Z., Hubalek Z. Borreliae in larval Ixodes ricinus ticks II Med. Vet. Entomol. 1995. -Vol. 9.-P. 205-206;

150. Hammer В., Meiners Т., Marangoni A et al. Borrelia burgdorferi sensu lato transmission from tick vector to host Experimental evidence of the invdment of the larval stage Ixodes nanus II Int J. Med. Microbiol. 2002. - Vd. 291. - Supp. 33.-P. 211;

151. Hayden J.D., Ho SA, Hawkey P.M. et al. The promises and pitfalls of PCRII Rev. Med. Microbiol. -1991. Vd. 2. - P. 129-137;

152. Heldrlch J., Schonberg A, Steuber S. et al. Investigation of Scin Samples from Red Foxes {Vulpes vulpes) in Eastern Brandenburg (Germany) for the Detection of Borrelia burgdorferi s.l. II Zentr. Bacterid. -1999. -289.-P. 666-672;

153. Hellerstrom S. Erythema chronicum migrans Afzelii II Acta Derm. Venerol. (Stockh.). -1930.-№11.-P. 315-321;

154. Herxheimer K., Hartmann K. Uber Acrodermatitis chronica atrophicans II Arch. Dermatol. Syphilis -1902. Suppl. 61. -P. 57-76;

155. Hoogstraal H. II Bull. Entomd. Soc. Amer. -1986. V. 32 - №1. - P.22;

156. Hu CM, Humair PF, Wallich R, Gern L Apodemus sp. rodents, reservoir hosts for Borrelia afzelii in an endemic area in Switzerland II Zentr. Bakterid. -1997. 285. - P. 55864;

157. Hubalek Z. Halouzka J. Prevavalence rates of Borrelia burgdorferi sensu lato in host-seeking Ixodes nanus ticks in Europe II Parasitol. Res. -1998. Vd. 84. - P. 167-172;

158. Hubbard M.J., Baker AS., Cann K.J. Distribution of Borrelia burgdorferi s.l. spirochaete DNA in British ticks (Argasidae and Ixodidae) since the 19th century, assessed by PCR// Med. Vet Entomd. -1998. Vol. 12 - P. 89-97;

159. Humair P.F., Gern L Relationship between Borrelia burgdorferi sensu lato spedes, red squirrels (Scuims vulgaris) and Ixodes ricinus in enzootic areas in Switzerland II Acta Tropica -1998. Vd. 69. - P. 213-227;

160. Humair P.F., Rais O., Gem L Transmission of Borrelia afzeSi from Apodemus mice and Clethrionomys vdes to Ixodes ricinus ticks: dfferential transmission pattern and overwintering maintenance II Parasitology -1999. Vd. 118 (Pt 1). - P. 33-42;

161. Humair PF., Postic D., Wallich R., Gern L An avian reservdr Turdus memla) of the Lyme disease spirochetes // Znt BakL -1998. 287. - P. 521-538;

162. Jaenson T.G.T., Talleklint L Incompetence of roe deer as reservoir of the Lyme borreliosis spirochete II J. Med. Entomol. -1992. Vd. 29. - P. 813-817;

163. Jaenson T.G.T., Talleklint L Lyme borreliosis spirochaetes in Ixodes ricinus (Acari: Ixiddae) and the varying hare on isolated islands in the Baltic Sea // J. Med Entomd. -1996. Vd. 33. - P. 339-343;

164. Jaenson T.G.T., Bergstrom S., Burman N. et al. Spiroketirrfecterade fastingar (Ixodes ricinus) risk for angrepp aven i Norriand II Lakartidningen. -1989. - Vd. 86. - P. 2584;

165. Jauris S., Fuchs R., Motz M. et al. Genetic heterogenity of the genes coding for the outer surface protein С (OspC) and the flagellin of Borrelia burgdorferi II Med. Microbid. Immund. -1993. Vd. 1821. - P. 37-50;

166. Johnson B.J.B., Happ C.M., Mayer LW., Piesman J. Detection of Borrelia burgdorferi in Ticks by species-specific amplification of the flagellin gene II Am. J. Trap. Med. Hyg. -1992. Vd. 47 (6). - P. 730-741;

167. Johnson R.S., Schmid G.P., Hyde F.W. et al. Borrelia burgdorferi sp. nov.: etiologic agent of Lyme dsease II InL J. Syst. Bacterid. 1984. - Vd. 34. - P. 496-497;

168. Jonsson M., Noppa L, Barbour AG., Bergstrom S. Heterogeneity of outer membrane proteins in Borrelia burgdorferi -comparison of osp operons of tree isdates of different geographic origins It Infect Immun. 1992. - Vd. 60. - P. 18451853;

169. Junttila J., Peltomaa M., Soini H. et aL Prevalence of Borrelia burgdorferi in Ixodes ricinus Ticks in Urban Recreational Areas of Helsinki // J. Clin. Microbiol. -1999. Vol. 37. - P. 1361-1365;

170. Kaiser A., Seitz A., Strub 0. Prevalence of Borrelia bugdorferi sensu lato in the Nightingale (Luseinia megarhynchos) and ofter passerine birds И Int J. Med. Microbiol. -2002. Vol. 291, Suppl. 33. - P. 75-79;

171. Kawabata H., Masuzawa Т., Yanagihara Y. Genomic analysis of Borrelia japonica sp. nov. isolated from Ixodes ovatus in Japan // Microbiol. Immunol. -1993. Vol. 37. - P. 843-848;

172. Kawabata H., Baba S, Iguch! К et al. Lyme cfsease in Japan and its possible incriminated tick vector, Ixodes persulcatus II J. Infect Dis. -1987. Vol. 156. - P. 854;

173. Kawabata H., Tashiby H., Yamada K. et al. Polymerase Chain Reaction Analysis of Borrelia Species Isolated in Japan II Microbiol. Immunol. -1994. -Vd. 38 (8). -P. 591-598;

174. Kimura K., Isogai E., Isogai H. et al. Detection of Lyme dsease spirochaetes in the skin of naturally infected wild Sika deer (Cervus nippon yesoensis) by PCR//Appl. Environm. Microbiol, -1995. Vol. 61. - P. 1641-1642;

175. Kirstein F., Rijpkema S4 Molkenboer M., Gray S. Local Variations in the Distribution and Prevalence of Borrelia burgdorferi Sensu Lato Genomospecies in Ixodes ricinus Ticks II Appl. Envir. Microbiol. -1997. Vol. 63, N 3. - P. 11021106;

176. Kirstern F., Rijpkema S., Molkenboer M., Gray S. The dstribution and prevalence of Borrelia burgdorferi genomospecies in Ixodes ricinus ticks in Ireland II Europ. J. Epidemiol. -1997. Vol. 13. - P. 67-72;

177. Korenberg E I., Gorelova N. В., Kovalevskii Y. V. Ecology of Borrelia burgdorferi sensu lato in Russia II In J. Gray, O.Kahl, R.S. Lane, G. Stanek (eds.) CAB International Lyme Borreliosis: Bidogy, Epidemiology and Control. 2002. - P. 175-200;

178. Korenberg El., Kovalevskii Yu.V., Karavanov A.S., Moskvitina G.G. Mixed infection by tick-borne encefalitis vims and Borrelia in tick II Med. Vet Entomol. -1999. Vol. 13. - P. 204-208;

179. Korenberg El., Kruchechnikov V.N., Ananyina Yu.V., Chernukha Yu.G. Preregui sites of the Existence of Lyme Disease in the USSR II Zntr. Bkt Mikrobid. Hyg. -1986. A 263. - P. 471-473;

180. Korenberg El., Gorban LYa., Kovalevskii Yu.V. et al. Risk for Human Tick-Borne Encephalitis, Borrelioses, and Double Infection in the Pre-Ural Region of Russia II Emerg. Infect Dis. 2001. - Vd.7, № 3. - P.459-462;

181. Kovalevsky Yu.V., Korenberg EL Differences in Borrelia infections in adult Ixodes persulcatus and Ixodes ricinus ticks (Acari: Ixoddae) in populations of north-western Russia II Exp. Appl.-Akarol. -1995. V. 19. - P.19-29;

182. Krampitz H.E In vivo Isolation and maintenance of some wild Strains of European hard tick spirochetes in mammalian and arthropod II Zbl. Bakt Hyg. -1986. A 263. - P. 21-28;

183. Kurtenbach K.I., Carey D., Hoodless AN. et al. Competence of pheasants as reservoirs for Lyme Disease spirochetes H J. Med Entomol. -1995. Vd. 35. - P. 77-81;

184. Kurtenbach К., Peacey M., Rijpkema S.G.T. et al. Differential Transmission of the Genospecies of Borrelia burgdorferi Sensu Lato by Game Birds and Small Rodents in England//Appl. Envir. Microbiol. -1998. -Vol. 64, N 4. P. 1169-1174;

185. Labuda M., Danielova V., Jones LD., Nuttall PA Amplification of tick-bome encephalitis virus infection during co-feeding of ticks // J. Med Entomd. -1993. Vol. 7. - P. 339-42;

186. Labuda M., Kozuch 0., Zuffova E. et al. Tlck-bome encephalitis vims transmission between ticks cofeedng on specific immune natural rodent hosts 11 Virology. -1997. Vol. 235. - P. 138-143;

187. Lane R.S., Burgdorfer W. Transovariai and transstadial passage of Borrelia burgdorferi in the Western Black-legged tick, Ixodes padficus (Acari: Ixoddae) //Am. J. Trop. Med. Hyg. -1987. Vol. 37 (1). - P. 188-192;

188. Lane R.S., Burgdorfer W. Spirochetes in mammals and ticks (Acari: Ixoddae) from a focus of Lyme borreiiosis in California II J. Wild Dis. -1988. Vol. 24. - P. 1-9;

189. Lane R.S., Piesman J., Burgdorfer W. Lyme borreiiosis: relation of its causative agent to its vectors and hosts in North America and Europe //Ann. Rev. Entomol. -1991. Vol. 36. - P.587;

190. Lane R.S., Burgdorfer W., Hayes S.F., Barbour A.G. Isolation of a Spirochete from the Soft Tick, Ornithodoros coriaceus: A Possible Agent of Epizootic Bovine Abortion II Sdence. -1985. Vol. 230 (4). - P. 85-87;

191. Lane R.S., Peavey CA, Padgett K.A., Hendson M. Life History of Ixodes (Ixodes) jelSsoni (Acari: Ixodidae) and its Vector Competence for Borrelia burgdorferi sensu lato II J. Med. Entomol. -1999. Vol. 36. - P. 329-340;

192. Lebech A.M., Hindersson P., Vuust J., Hansen K. Comparison of in vitro culture and polymerase chain reaction for detection of Borrelia burgdorferi in tissue from experimentally infected animals // J. Clin. Microbiol. -1991. Vol. 29. - P. 731-737;

193. Le Fleche A., Postic D., Girardet K. et al. Characterization of Borrelia lusitaniae sp. nov. by 16S ribosomal DNA sequences analysis II InL J. SysL Bacterid. -1997. Vd. 47. - P. 921-925;

194. Leuba-Garcia S., Kramer M.D., Wallich R. et al. Characterization of Borrelia burgdorferi isdated from dfferent organs of Ixodes ricinus ticks cdlected in nature. II Zbl. Bakt -1994. Vd. 280. - P. 468-475;

195. Levine J.F., Wilson M.L, Spielman A. Mice as reservdrs of the Lyme dsease spirochete II Am. J. Trop. Med. Hyg. -1985. -Vol. 34. -P. 355-360;

196. Liang J.G., Zhang Z.F. Analisis of rRNA gene restriction fragment length pdimorphism of Borrelia burgdorferi sensu lato isolates in China II Chin. J. Microbid. Immund. -1996. Vd. 16. - P. 359-362;

197. Liebisch G., Sohns В., Bautsch W. Detection and Typing of Borrelia burgdorferi Sensu Lato in Ixodes ricinus Ticks Attached to Human Skin by PCRII J. Clia Microbid. -1998. Vd. 36. - P. 3355-3358;

198. LipschQtz B. Ober eine seltene Erythemform (Erythema chronicum migrans) //Arch. Dermatol. Syphilis -1913. Vd. 118. - P. 349-356;

199. LipschQtz B. Weiterer Beitrag zur Kenntnis der "Erythema chronicum migrans* II Arch. Dermatol. Syphilis -1923. Suppl. 143.-P. 365-374;

200. Livens D., Varde S., Iyer R. et al. Genetic Diversity of Borrelia burgdorferi in Lyme Disease Patients as Determined by Culture versus Direct PCR with Clinical Specimens II J. Clin. Microbiol. 1999. - Vol. 37. - P. 565-569;

201. Livesley MA, Carey D., Gem L, Nuttall PA Problems of isolating Borrelia burgdorferi from ticks collected in United Kingdom foci of Lyme disease // Med. Vet Entomol.-1994.-Vol.8.-P. 172-178;

202. Macaluso K.R., Sonenshine D.E., Ceraul S.M., Azad A.F. Infection and transovarial transmission of rickettsiae in Dermacentor variabilis licks acquired by artificial feeding // Vector Borne Zoonotic Diseases 2001. - Vol. 1 (1). - P. 45-53;

203. Magnarelli LA., Swihart R.K. Spotted fever groups Rickettsiae or Borrelia burgdorferi in Ixodes cooki (Ixodidae) in Connecticut // J. Clin. Microbiol. -1991. Vol. 29. - P. 1520-1522;

204. Magnarelli LA., Anderson J.F., Fish D. Transovarial transmission of Borrelia burgdorferi in Ixodes dammini (Acari: Ixodidae) II J. Inf. Dis. -1987. Vol. 156. - P. 234-236;

205. Magnarelli LA., Anderson J.F., Apperson C.S. et al. Spirochetes in ticks and antibodies to Borrelia burgdorferi in white-tailed deer from Connecticut, New York State, and North Carolina // J. Wild. Dis. -1986. Vol. 22 (2). - P. 178-188;

206. Marconi R.T., Konkel M.E., Garon C.F. Variability of osp genes and gene products among species of Lyme disease spirochetes II Infect Immunol. -1993. Vol. 61. - P. 2611-2617;

207. Marshall III W.F., Telford III S.R., Rys P.N. et al. Detection of Borrelia burgdorferi DNA in Museum Specimens of Peromyscus leucopus/IJ. Inf. Dis. -1994. Vol. 170. - P. 1027-1032;

208. Mast W.E, Burrows W.M. Erythema chronicum migrans in the United States IIJ Amer. Med Assoc. 1976. - Vol. 236. -P. 859-860;

209. MasuzawaT., Fukui Т., Miyake M. et al. Determination of members of a Borrelia afzeBi-related group isolated from Ixodes nipponensis in Korea as Borrelia valaiaanall Int J. Syst Bacterid. -1999. Vol. 49 (Pt 4). - P. 1409-15;

210. Masuzawa Т., Takada N., Kudeken M. et al. Borrelia sinica sp. nov. Lyme dissease-related Borrelia species isolated in China II Int. J. Syst Evol. Microbiol. 2001. - Vol. 51 (Pt 5). - P. 1817-1824;

211. Mather T.N., Mather M.E. Intrinsic competence of three ixodid ticks (Acari: Ixoddae) as vectors of the Lyme disease spirochete II J. Med. Entomd. -1990. Vd. 27.- P. 646-650;

212. Mathiesen DA, Oliver J.H., Jr., Kolbert C.P. et al. Genetic heterogeneity of Borrelia burgdorferi in United States II J. Infect Dis. -1997. Vol. 175. - P. 98-107;

213. Matuscka F.R., Fischer P., Heiler M. et al. Capacity of European animals as reservoir hosts for the Lyme disease spirochete II J. Infect Dis. -1992. -Vol. 165. P. 479-483;

214. Matuschka F.R., Heiler M., Eiffert H. et al. Diversionary role of hoofed game in the transmission of Lyme disease spirochetes //Am. J. Trop. Med Hyg. -1993. Vol. 48. - P. 693-699;

215. Matuschka F.R., Ohlenbusch A, Eiffert H. et al. Characteristics of Lyme Disease spirochetes in archived European ticks II J. Inf. Dis. -1996. Vol. 174. - P. 424-426;

216. Maupin G.O., Gage K.L, Piesman J. et al. Discovery of an enzootic cycle of Borrelia burgdorferi in Neotoma mexicana and Ixodes spinipalpis from northern Colorado, an area where Lyme dsease is nonendemic II J. Infect Dis. -1991. Vol. 170.-P. 636-643;

217. Missone M.C., Van Impe G., Hoet P.P. Genetic heterogeneity of Borrelia burgdorferi sensu lato in Ixodes nanus ticks collected in Belgium II J. Clin. Microbiol. -1998. Vol. 36. - P. 3352-3354;

218. Miyamoto K., Nakao M., Sato N. Mori M. Isolation of Lyme dsease spirochetes from ixodd tick in Hokkado, Japan II Acta Tropica -1991. Vol. 49. - P. 65-68;

219. Miyamoto K., Nakao M., Uchikawa K., Fujita H. Prevalence of Lyme Borreliosis Spirochetes in Ixodd Ticks of Japan, with special Reference to a New Potential Vector, Ixodes ovatus (Acari: Ixoddae) II J. Med. Entomd. -1992. Vd. 29 (2). - P. 216-220;

220. Molloy P.S., Persing D.H., Berardi V.P. False-positive Results of PCR testing for Lyme dsease II Clin. Infect. Disease -2001.-Vol. 33(3).-P. 412-413;

221. Monin R., Gern L, Aeschlimann A. A Study of the Different Modes of Transmission of Borrelia burgdorferi by Ixodes ricinus II Stanek (Ed), Lyme Borreliosis II: Zbl. BacL Suppl. -1989. Vol. 18. - P. 14-20;

222. Nakao M., Miyamoto K. Negative finding in detection of transovarial transmission of Borrelia burgdorferi in Japanese ixodid ticks, Ixodes persulcatus and Ixodes ovatus II Jpn. J. Sanit Zool. -1992. Vd. 43. - N 4. - P. 343-345;

223. Nakao M., Miyamoto K. Isolation of spirochetes from Japanese ixodd ticks, Ixodes tanuki, Ixodes turdus, and Ixodes columnae // Jpn. J. Sanit Zod. -1993. Vd. 44. - P. 49-52;

224. Nakao M., Sato Y. Refeeding activity of immature ticks of Ixodes persulcatus and transmission of Lyme dsease spirochete by partially fed larvae II J. Parasitol. -1996. Vd. 82 (4). - P. 669-72;

225. Nakao M., Miyamoto K, Fukunaga M. Lyme dsease spirochetes in Japan: enzootic transmission cycles in birds, rodents, and Ixodes persulcatus ticks III Infect Dis. 1994. - Vd. 170, №4. - P.878-882;

226. Nakao M., Miyamoto K., Fukunaga M. Borrelia japonica in nature: genotypic identification of spirochetes isolated from Japanese small mammals II Microbid. Immund. -1994. Vol. 38. P. 805-8;

227. Nuttall P., Randolph S., Carey D. et al. The ecology of Lyme borreliosis in the UK II In: Axford J.S., Rees D.H.E. (eds.) NATO ASI Series, Series A life Sciences. -1994. Vd. 260. - P. 125-129;

228. Old I.G., MacDougall J., Saint Girons I., Davidson B.E. Mapping of genes on the linear chromosome of the bacterium Borrelia burgdorferi: possible locations for its origin of replication // FEMS Microbid. Lett -1992. Vd. 99. - P. 245-250;

229. Oliver J.H., Jr. Lyme Borreliosis in the Southern United States: a review// J. Parasitd. -1996. Vd. 82 (6). - P. 926-935;

230. Oliver J.H., Jr., Stallknecht D.E, Chandler F.S. et al. Detection of Borrelia burgdorferi in laboratory-reared Ixodes dammini (Acari: Ixoddae) fed on experimentally inoculated white-tailed deer // J. Med Entomol. -1992. Vol. 29. - P. 980984;

231. Olsen В. Birds and Borrelia In: PhD thesis, Umea University, Umea, Sweden, 1995.

232. Park K.H., Chang W.H., Schwan T.G. Identification and characterisation on Lyme dsease spirochetes, Borrelia burgdorferi sensu lato, isolated in Korea // J. Clin. Microbiol. -1993. Vol. 31. - P. 1831-1837;

233. Paster B.S., Pelletier DA, Dewhirst F.E et al. Phylogenetic position of the spirochetal genus Christispira II Appl. Environ. Microbiol. -1996. Vd. 62. - P. 944-946;

234. Patrican LA Absence of Lyme dsease spirochetes in larval progeny on naturally infected Ixodes scapularis (Acari: Ixoddae) fed on dogs II J. Med. Entomd. -1997. Vd. 34. - P. 52-55;

235. Persing D.H., Telford S.R., Spielman A, Barthold S.W. Detection of Borrelia burgdorferi infection in Ixodes dammini ticks with polymerase chain reaction II J. Clin. Microbiol. -1990. Vd. 28. - P. 566-572;

236. Persing D.H., Telford S.R., Rys P.N. et al. Detection of Borrelia burgdorferi DNA in museum specimens of Ixodes dammini ticks//Sdence. -1990. Vd. 249. - P. 1420-1423;

237. Picken R.N., Cheng Y., Strle F. et al. Patient isolates of Borrelia burgdorferi sensu lato with genotypic and phenotypic similarities to strain 25015II J. Inf. Dis. -1996. Vd. 174. - P. 1112-1115;

238. Pies man J. Transmission of Lyme Disease Spirochetes (Borrelia burgdorferi) II Exp. Appl. Acarology. -1989. Vd. 7, N 1. -P. 71-81;

239. Piesman J., Sinsky R.J. Ability of Ixodes scapularis, Dermacentor variabilis. and Amblyomma americanum (Acari: Ixodidae) to acquire, maintain, and transmit Lyme dsease spirochetes Borrelia burgdorferi) II J. Med Entomd. -1988. -Vol.25.-P. 336-339;

240. Piesman J., Oliver J.R., Sinsky R.J. Growth kinetics of the Lyme Disease spirochete (Borrelia burgdorferi) in vector ticks Ixodes dammini) (Acari: Ixoddae) II J. Trop. Med. Hyg. -1990. Vd. 42. - P. 352-7;

241. Piesman J., Donahue J.G., Mather T.N., Spielman A Transovarially acquired Lyme dsease spirochetes (Borrelia burgdorferi) in field-collected larval Ixodes dammini (Acari: Ixoddae)//J. Med Entomol. -1986. Vd. 23. - P. 219-219;

242. Piesman J., Hicks T.C., Sinsky R.J., Obiri G. Simultaneous transmission of Borrelia burgdorferi and Babesia microti by individual nymphal Ixodes dammini ticks II J. Clin. Microbid. -1987. Vd. 25. - P. 2012-2013;

243. Postic D., Assous M.V., Grimont PAD., Baranton G. Diversiti of Borrelia burgdorferi sensu lato evidenced by restriction fragment length pdymorhpism of rrf (5S)-n1 (23S) intergenic spacer amplicons II Int J. Sysl Bacterid. -1994. Vol. 44. - P. 743-752;

244. Postic D., Edlinger C., Richaud C. et al. Two genomic spedes in Borrelia burgdorferi II Res. Microbiol. -1990. Vol. 141. - P. 465-475;

245. Postic D., Marti Ras N. Lane R.S. et al. Expanded dversity among Califomian Borrelia isolates and description of Borrelia bissetti sp. nov. (formerly Borrelia group DN127) II J. Clia Microbiol. -1998. Vd. 36. - P. 3497-3504;

246. Postic, D., Marti Ras N., Lane R.S. et al. Common Ancestry of Borrelia burgdorferi sensu lato strains from North America and Europe II J. Clia Microbid. -1999. Vd. 37. - N 9. - P. 3010-3012;

247. Preac-Mursic V., Wilske V., Schierz G. European Borrelia burgdorferi isdated from humans and ticks. Culture conditions and antibiotic susceptibility II Zbl. Bakl Hyg. -1986. A 263. - P. 112-118;

248. Radda A, Burger I., Stanek G., Wewalka G. Austrian hard ticks as vectors of Borrelia burgdorferi, overview II Zntr. Bkl Mikrobid. Hyg. -1986. A 263,- P. 79-82;

249. Rand P.W., Lacombe E.N., Smith R.P. et al. Competence of Peromyscus marvculatus (Rodentia, Cricetidae) as a reservoir host for Borrelia burgdorferi (Spirochaetares, Spirochaetaceae) in the wild II J. Med Entomd. -1993. Vol. 30. -P. 614-618;

250. Randolph S.E., Gern L, Nutall PA Co-feeding ticks: epidemidogical significance for tick-bome pathogen transmission II Parasitology Today. -1996. Vol. 12, № 12 - P. 472-479;

251. Rennie L, Wilkinson P. J., Mellor P.S. Effects of infection of the tick Omithodoros moubata with African swine fever virus II Med. Vet Entomol. 2000. - Vol. 14 (4). - P. 355-360;

252. Rennie L, Wilkinson P.J., Mellor P.S. Transovarial transmission of African swine fever virus in the argasid tick Omithodoros moubata // Med. Vet Entomol. 2001. - Vol. 15 (2). - P. 140-146;

253. Ribeiro J.M.C., Mather T.N., Piesman J., Spielman A. Dissemination and salivary delivery of Lyme disease spirochetes invector tick (Acari: Ixoddae) // J. Med Entomol. -1987. Vol. 24. - P. 201-205;

254. Rich S.M., Armstrong P.M., Smith R.D., Telford III S.R. Lone Star Tick-Infecting Borreliae are most closely related to the agent of Bovine Borreliosis // J. Clin. Microbiol. 2001. - Vol. 39. - P. 494-497;

255. Rijpkema S., Bruinink H. Detection of Borrelia burgdorferi sensu lato by PCR in questing Ixodes ricinus larvae from the Dutch North Sea Island of Ameland // Exp. Appl. Acarol. -1996. Vol. 20. - P. 381-385;

256. Rijpkema S., Nieuwenhuijs J., Franssen F.F.J., Jongejan F. Infection rates of Borrelia burgdorferi in dfferent instrs of Ixodes ricinus ticks from the Dutch North Sea Island of Ameland //Exp. Appl. Acarol.-1994.-Vol. 18.-P. 531-542;

257. Ryder J.W, Pinger R.R., Glancy T. Inability of Ixodes cooker and Amblyomma americanum Nymphs (Acari: Ixoddae) to transmit Borrelia burgdorferi III Med Entomd.-1992.-Vd. 29(3).-P. 525-530;

258. Salinas-Melendez JA, Tamez-Gonzales R., Welsh-Lozano O., Barrera-Saldana HA Detection of Borrelia burgdorferi DNA in Human Skin Biopsies and Dog Synovial FJiid by the PCR // Rev. Lat- Amer. Microbid. -1995. Vol. 37. - P. 7-10;

259. Samuels D.S., Marconi R.T., Garon C.F. Variation in the size of the ospA containing linear plasmid, but not the linear chromosome, among the three Borrelia spedes associated with Lyme disease // J. Gen. Microbid. -1993. Vd. 139. - P. 2445-2449;

260. Sato Y., Nakao M. Transmission of the Lyme Disase Spirochete, Borrelia garinii, between Infected and Uninfected Immature Ixodes persulcatus during Cofeedng on Mice II J. Parasitd. -1997. Vd. 83 (3). - P. 547-550;

261. Schoeler G.B., Lane R.S. Effidency of transovarial transmission of the Lyme dsease spirochete, Borrelia burgdorferi, in the western blacklegged tick, Ixodes patiticus (Acari: Ixoddae) II J. Med. Entomd. -1993. Vd. 30 (1). - P. 80-86;

262. Schonberg A., Carney C., Kahl O. et al. First Isdation of Borrelia burgdorferi, the Agent of Lyme Borreliosis, from Ixodes nanus (Acari: Ixodidae) in Berlin (West) II Zbl. Bakt Hyg. -1988. A 268. - P. 487-494;

263. Schouls LM., Van De Pol I., Rijpkema S.G.T, Schot C.S. Detection and Identification of Ehrlichia, Borrelia burgdorferi Sensu Lato, and Bartonella Species in Dutch Ixodes ricinus Ticks II J. Clin. Microbid. -1999. Vd. 37, N 7. - P. 2215-2222;

264. Schulze T.L, Bowen G.S., Bosler EM. et al. Lyme Disease in New Jersey II Sdence. -1984. Vd. 224. - P. 601-603;

265. Schulze T.L, Lakat M.F., Parkin W.E et al. Comparison of Rates of Infection by the Lyme Disease Spirochete in Selected Populations of Ixodes dammini and Amblyomma americanum (Acari: Ixoddae) II Zbl. Bakt Hyg. -1986. A 263. - P. 7278;

266. Schwartz J., Gazumyan A, Schwartz I. rRNA gene organization in the Lyme dsease spirochete, Borrelia burgdorferi II J. Bacterid. -1992. Vd. 174. - N11. - P. 3757-65;

267. Schwartz I., Varde S., Nadelman R.B. et al. Inhibition of efficient pdymerase chain reaction amplification of Borrelia burgdorferi DNA in blood-fed ticks // Am. J. Trap. Med Hyg. -1997. Vd. 56 (3). - P. 339-342;

268. Scoles G A, Papero M.f Beati L, Fish D. A Rdapsing Fever Group spirochete Transmitted by Ixodes scapularis Ticks II Vector Borne Zoonotic Disease 2001. - Vd. 1, N 1. - P. 21-34. - Maiy Ann Liebert, Inc.;

269. Scrimenti R.J. Erythema chronicum migrans //Arch. Dermatol. -1970. Vol. 102. -P. 104-5;

270. Sinskl E, Pawelczyk A. Detection of Reservoirs for Lyme Borreliosis in the Mazury District, Poland // Zenl Bl. Bacterid. -1999.-Vd. 289/5 6.-P.698-703;

271. Sonenshine D.E., Ratzlaff R.E., Tpoyern J. et al. Borrelia burgdorferi in Eastern Virginia: Comparison between a Coastal and Inland Locality//Am. J. Trap. Med. Hyg. -1995. Vd. 53 (2). - P. 123-133;

272. Stanczak J., Okroy-Kysop G., Racewicz M. et al. Prevalence of Borrelia burgdorferi sensu lato in the sdected Ixodes nanus (Acari: Ixoddae) population in the Weilburg forest, Hesse. Germany II InL J. Med Microbid. 2002. - 291, Suppl. 33. - P. 206209;

273. Stanek G., Burger I., Hirschel A. et al. Borrelia Transfer by Ticks During Their Life Cyde // Zbl. BacL Hyg. -1986. A 263. -P. 29-33;

274. Steere AC., Broderick T.F., Mafawista S.E Erythema chronicum migrans and Lyme arthritis: Epidemidogic evidence for a tick vector II Am. J. Epidemid. -1978. Vd. 108. - P. 312-321;

275. Steere AC., Grodzicki R.L, Kornblatt AN. et al. The spirochetal etidogy d Lyme dsease II New England J. Medcine. -1983,- Vd.308.-P.733-740;

276. Steere AC., Malawista S.E, Hardin JA et al. Erythema chronicum migrans and Lyme arthritis: The enlarging clinical spectrum //Ann. Internal. Med -1977. Vd. 86. - P. 685-698;

277. Stiernstedt G. Tick-bome Borrelia infection in Sweden II Scand J. Infect Dis. -1985. Suppl. 45. - P. 1-69;

278. Stromdahl E., Kollars T.M., Guitekrez AG. et al. Evidence d Borrelia DNA sequences in Amblyomma americanum ticks IIIX International Conference on Lyme Borreliosis and other tick-bome dsease. August 18-22,2002, New York, New York;

279. Takada N., Ishiguro F., lida H. et al. Prevalence of Lyme Borrelia in ticks, espetially Ixodes persulcatus (Acarina, Ixodidae), in Central and Western Japan// J. Med. Entomd.-1994.-Vd.31(3).-P. 474-478;

280. Talleklint L Lyme borreliosis spirochetes in Ixodes ricinus and Haemaphysalis punctata ticks (Acari: Ixoddae) on three islands in the Baltic Sea // Exp. Appl. Acard. -1996. Vd. 20. - P. 467-476;

281. Talleklint L, Jaenson T.G.T. Maintenance by Hares of European Borrelia burgdorferi in Ecosystems without rodents II J. Med. Entomd. -1993. Vd. 30 (1). - P. 273-276;

282. Talleklint L, Jaenson T.G. Transmission of Borrelia burgdorferi s.l. from mammal reservoirs to the primary vector of Lyme borreliosis, Ixodes ricinus (Acari: Ixoddae), in Sweden II J. Med Entomd. -1994. Vd. 31. (6). - P. 880-6;

283. Talleklint L, Jaenson T.G. Relationship between Ixodes ricinus density and prevalence of infection with Borre//e-like spirochetes and density of infected ticks // J. Med Entomd. -1996. Vd. 33 (5). - P. 805-11;

284. Taseva E. Study of Ixodes ticks (Acarina, Ixoddae) for infection with Borreliae and Ehrlichiae in the parks d Sofia city and its surroundng II Pers. comm., 2001;

285. Telford III S.R., Mather T.N., Moore S.I. et al. Incopetence of deer as reservdrs of the Lyme dsease spirochete // Am. J. Trop. Med Hyg. -1988. Vd. 39. - P. 105-109;

286. Thyresson N. The penicillin treatment d acrodermatitis chronica atrophicans (Herheimer) II Acta Dermato-Venerologica (Stockhdm) -1949. Suppl. 29. - P. 572-621;

287. Toutoungi L.N., Gern L Ability of transovarially and subsequent transstadially infected Ixodes hexagonus tick to maintain and transmit Borrelia burgdorferi in the laboratory// Exp. Appl. Aoarol. -1993. Vol. 17. - P. 581-586;

288. Tylewska-Wierzbanowska S., Kruszewska D., Chmielewski T. Use of indirect immunofluorescence and polymerase chain reaction (PCR) for detection of Borrelia burgdorferi in ticks // Przegl. Epidemiol. (Polish). -1996. Vol. 50. - P. 239-244;

289. Uchikawa K., Mukamatsu K., Miyamoto K, Nakao M. An extensive prevalence of Borrelia burgdorferi, the etiologic agent of Lyme borreiiosis, in Nagano Prefecture, Japan // Jpn. J. Sanit Zool. -1991. Vol. 42. - N 4. - P. 293-299;

290. Vasiliu V., Herser P., Rossler D. et al. Heterogeneity of Borrelia burgdorferi sensu lato demonstrated by an Osp A type specific PCR in synovial fluid from patients with Lyme arthritis // Med Microbiol. Immunol. -1998. - Vol. 187 (2). - P. 97-102;

291. Wallich R., Moter S.E, Simon M.M. et al. The Borrelia burgdorferi flageHun-associated 41-kilodalton antigen (flagellin): molecular cloning, expression, and amplification of the gene//Infect Immun. 1990.-Vol. 58.-P. 1711-1719;

292. Wang G., van Dam A.P., Dankert J. Phenotypic and Genetic Characterization of a Novel Borrelia burgdorferi Sensu Lato Isolate from a Patient with Lyme Borreiiosis // J. Clin. Microbiol. -1999. Vol. 37. - N 9. - P. 3026-3028;

293. Wang G., Van Dam A.P., Schwartz I., Dankert J. Molecular typing of Borrelia burgdorferi sensu lato: taxonomic, epidemiological, and clinical implications II Clin. Microbiol. Rev. -1999. Vol. 12. - P. 633-653;

294. Wang G., Van Dam A.P., Le Fleche A. et al. Genetic and phenotypic analysis of Borrelia valaisiana sp. nov. (Borrelia genomic groups VS116 and M19) II Int J. Syst Bact -1997. Vol. 47. - P. 926-932;

295. Weber K. Erythema-chronicum-migrans-Meningitis eine bacterielle Infections-krankheit II MQnchhen Medzinische Wochenschrift -1974. - Suppl. 116. - P. 1993-1998;

296. Wilske В., Preac-Mursic V., Schierz G. Antigenic heterogeneity of European Borrelia burgdorferi strains isolated from patients and ticks II Lancet -1985. May 11. - P. 1099;

297. Wilson M.L, Gonzalez J.P., Comet J.P., Camicas J.L Transmission of Crimean-Congo hemorrhagic fever virus from experimentally infected sheep to Hyalomma truncatum ticks // Res. Virol. -1991. Vol. 142. - P. 395-404;

298. Wittenbrink M.M., Thiele D., Krauss H. Comparison of dark-field microscopy, culture and polymerase chain reaction (PCR) for detection of Borrelia burgdorferi in field-collected Ixodes ricinus ticks. II Zbl. Bact -1994. Vol. A 281. - P. 183-191;

299. Yano Y., Ishiguro F4 Takada N. Preliminary Observation on Ultrastmcture of Borreliae in Tissues of Ixodes persulcatus II Microbiol.Immunol.-1993.-Vol. 37(11).-P. 905-907;

300. Yin H., Lu W.S., Luo JX et al. Experiments on the transmission of Babesia major and Babes/a bigemina by Haemaphysalis punctata II Veterinary Parasitology -1996. Vol. 67. - P. 89-98;

301. Younsi H., Postic D., Baranton G., Bouattour A. High prevalence of Borrelia lusitarv'ae in Ixodes ricinus ticks iA Tunisia II Europ. J. Epidemid. 2001. - Vd. 17 (1). - P. 53-56;

302. Zakovska A. Monitoring the presence of Borrelia in Ixodes ricinus ticks in Bmo park Pisarky, Czech Republic // Bidogia -2000.-Vd. 55 (6).-P. 661-666;

303. Zhioua E., Gern L, Aeschlimann A. Infection d field-collected Ixodes nanus (Acari: Ixoddae) larvae with Borrelia burgdorferi in Switzerland II J. Med Entomd. -1994. Vd. 31. - P. 763-766;