Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Влияние полипептидов печени на иммунитет, гемостаз и неспецифическую резистентность организма в эксперименте

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО НАРОДНОМУ ОБРАЗОВАНИЮ

ОРДЕНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ имени ПАТРИСА ЛУМУМБЫ

На правах рукописи

ВИТКОВСКИЙ Юрий Антонович

УДК 612.35 : 547.964.4 : 612.017.1 : 616—005.1—08

ВЛИЯНИЕ ПОЛИПЕПТИДОВ ПЕЧЕНИ НА ИММУНИТЕТ, ГЕМОСТАЗ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКУЮ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОРГАНИЗМА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

(14.00.17 —- нормальная физиология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

М о с к и а — 1 9 и О

Работа выполнена на кафедре нормальной физиологии Читинского государственного медицинского института.

Научный руководитель —

доктор медицинских наук, профессор Б. И. Кузник.

доктор медицинских наук, профессор В. П.Кулик, доктор медицинских наук, профессор В. А. Макаров.

Ведущая организация — Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины АМН СССР (г. Ленинград).

в анного сове-

та ... родов имени

Патриса Лумумбы по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 8.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Университета дружбы народов имени Патриса Лумумбы по адресу: Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6.

Автореферат разослан « 1990 года.

Ученый секретарь

специализированного совета К 053.22.13, кандидат медицинских наук, доцент

Научный консультант —

доктор медицинских наук В. X. Хавинсон.

Официальные оппоненты:

1990 года

Т. М. СОБОЛЕВА

но через иммунную систему замедляет свертываемость крови и тормозит фибринолиз.

При острой и хроническом токсичес'шх гепатитах у крыс ге-паднк нормализует пигментный обмен, уменьшает ферменте?,шю, устраняет признают гопатспеллхжгрпоЯ недостаточности и тромбоге-моррагический синдром (ТГС), усиливает репаративнне процессы в печени. При хроническом гепатите в печени крыс гепалин сникчлт содержание соединительной ткани.

Установлено, что токсичеасоз поралание печени СХ:14 сопровождается изменением состава полипептилов в больном оогане м снижением их иммунореяктивнч* свой*;*» «оночьяоквни»» г»р«итнч Р , ¡качестве терапевтического средства полностью нормализует полипептидный профиль печени и восстанавливает способность пептидов увеличивать экспрессию рецепторов на Т- и В-лимфоцитах.

Терапевтическое действие гепалина сходно с ткмалином, но он обладает более выраженными органотропными свойствам!!. Комбинированное применение гепалина и тималина оказывает более сла-СиД тсрапевтнчесгаЯ зфЬаст. чей их ивалипапанног» приилиАниа.

ррактич'-сг-ал цокнет» Полученные дата« свидетель-

ств;,гг: о гепчл;»:'. одногруэнно оказдалть действие

аа кмимунмтст, г.'мостг», илея^ш^ячлеку« рзэиотентност?» орга-н:;п!.п и. з сгязя с эти;,;, благоприятно плиять па трчонио 'острого ¡5 хронического токсических г^п'хтитоь. Обнаруженные нам« фзктм позволяют предположить, что п пудупям гопалин найдет клиническое ирт/енение в фармакотерапии болезней почини. Для &Т5«Х целей 2 настоящее подготовлена документация для фарййзыитето.

Полученные Факты внедрены а учебный процесс кафедр ноо-и патологической фкэклгогчч ялтинского ч&дицияекого ж»-

По материалам диссертация оформлено 1 изобретение, б рацио-ямиааторёких продлоганиЛ, опубликовало 4 работы.

ДГфеЗпцпп м.бо-ш. чередований были йоло'^ны ?т

IX, л, XI «зявузовских конференциях молодых ученых по проблей» "Физиология и патология иммуногенеза м гемоотпеа" (Чйта, 1065-1089), на 1 сьоздо физиологов Сибири п бального Гостога (йососкбкрск, 1987), на Бсесоювноз клучной конференции "Роль пептидных биорегуляторов (цитошдинов) в регуляция гошостаза" (Ленинград, 1987), на Всесоюзном съеаде физиологов (Кишинев, ■ 1987), на Всесоюзной конференция "Иммунокоррвкция при чифегаш-

3

ониой патологии" (Ленинград, 1G88), аа регионарной научной коц-фо рондик "Эксиеришнтальная и юшшчзская иммунология на Востока страны" (Красноярск, 128Q).

Обьем раОотц. Диссертация излоюна па 165 страницах основного текста, иллюстрирована 34 таблицами и 54 рисункаш. Работа состоит из введения, 7 глав, вьшодов и списка литературы, вклю-чаадрго 270 источников (167 отечаственнш: и 103 оарубогашх).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования Сшш проведаны на 532 беспородних больк крысах, 16 кроликах, крови £55 'вдоровцх доноров и P.Q больних ожоговой болеонью П-Ш степени.

Шлипоптиды из печош; получали раоработщпши нами ориги-шнш иотодоы уксусно-кислой экстракции с последующи ОСШйДО-шшы, очисткой и лиофилиаацией препарата.

Гель-хроыатография подипепткдов проводилась по общепринятой штодика (Остерман Л Л 1S85) в иодифисации С. Г. Калашникова (1QG7) tía стандартной колонке аминокислотного анализатора Hitachi KLA-Б (Япония), заполненной поливиниловой голом uapmi T0Y0PEARL фирмы T0Y0S0DA (Япония). D качество маркеров ьалоч^у-лярной ыасси пептидов использовали аланшг, цитохрои С i; ыкогло-Оин фирмы Serva (Швеция).

Влияние полипептидов пзченн на экспрессию рецепторов лимфоцитов оцшшаля по количеству Т-актшшюс, Т-общш: и Б-лшЬоцитов (Jondal М et al., 1972; Когшп В. ot al., 1Q7G)", посла инкубации клеток с полипептидаш в течение 1 часа Исследований влияния гапалина па ютрацнд лейкоцитоз под слоэн ага-роаы проводили в прямой и непрямой реакциях (врииэлъ Г., 1207).

Влияние гепалпна на ккслородаависюдло процессы в нэПтроС::-йж. изучали в тесте восстановления шггросинего уетрасояил, ккс-»¡щношшеша» процосси - по содораашш лиаосошлыш кздш-EU£ баллов (Пйгарйвскай ЕЕ. и сосет., 1001). Сагацитарнув ак-гшюсть цойтрофилов исследовали с добавленной суточной культури стафилококка по штоду ЕЕ Васильева и соавт. (1972).

Ешзшэ гепааша на обауа гешлнтичэскую шсглбнссть крови ецзш&адн по стопой;; лизиса вригроцнтов кроаш«* (альтерпагштЗ иугь активации сиатош когдшиэнта) и по геиэлцау секслОияизи-раьад^ш аатителаш эритроцитов барана (г-г.йссищсгий путь aa?ru-ШСЫ сиетзш коышйизнта) (¡йадов Л а , Солякоа £ С.. 1S32; Adrien Р. О., 1983; Tañaba S, et al., 1С86). 4 • ''

Оценку действия гепалина на сосудисто-тромбоцитарный гемостаз осуществляли по агрегации тромбоцитов (Born СЗ., 1902). В качестве индукторов агрегации использовали АДФ, адреналин, тромбин, коллаген и ристамицин.

О влиянии гепалина на коагуляционный гемостаз судили по тромбоэластограмме (Ваша ал и соавт., 1080), времени ре-кальцификацни плазмы (Borgarhof H., Roka L, 1954), каолин-кв-фалиновому времени (Larien W.O. et al.. 1068), протромбиновому времени (Quick A. J. , 1943), тромбииовому времени (Sirmay Е., 1057). этаноловому тесту (Godai H. et ¿1., 1S66). Фибркнолитя-ч^оку» активность определяли по времени львиоа оуглобулиновоге, сгустка (Kowareyk К., Buliik К. , 1S54), и плоззди лизиса фибри-м-Г'ст. пластин (Astrup T. et al., 1952).

Острый токсический гепатит у крыс вызывали ежедневным однократным введением в течение 4-х дней ССЦ на подсолнечном масле (i:i по обьему) в дозе 0,5 мл на 100 г массы, у кроликов - в такой же дозе на 1 кг массы. Хронический гепатит у крыс индуцировали введением маслянного раствора CCI4 в доэе 0,2 мл на 100 г ыассы тела через день в течение 60 дней. Лечение гепалииом прн остром гепатите осуществляли в дозе 1 мг на крысу в течение 7 дней, при хроническом - 1 мг на крысу з точение 20 дней. В качестве препарата сравнения при остром гепатите использовали си-репар в дозе х иг на крысу в течение 7 дней. Тималин прн хроническом гепатите вводили по 1 мг на крысу в течение 20 дней.

Определение биохимических показателей (аланин- и аспартат-ашшотраясферазы, суммарной лактатдогидрогеназы, шэлочной фосфатовы) сыворотки крови проводили наборами реактивов фирмы "Ла-хэма" (ЧССР). Билирубин и его фракции определяв по 'методу Jeridrassik и соавт. (1936).

Для морфологических исследования обработку материала (ку- ■ сочки печени и селезенки) проводили по общепринятым методам (Ромейс R, 1954; Кисели Д., 1962). Окрас icy препаратов производили гематоксилин-эоаином, по Ван-Гкзопу, Харту н фуксслшю« Вэйгерта, В препаратах подсчитывали число митозов па 100 полой арония, планиметрически определяли' содержание совдтпггвлыюя ткани в печени и определяли иидекп п:ри.<иртгиъных трактов.

Все получение дшшш обработаны катодом вариационной статист кки и вычислен показатель достоверности различий ( Венчиков А.И., Венчиков RA., 1974).

2-;:-13 в "

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Влияние полипептидов печени на иммунитет и неспецифическую резистентность организма

В опытах in vitro установлено, что гепалин достоверно увеличивает число Т-активных лимфоцитов у здоровых доноров. Со стороны Т-обвдх и В-лимфоцитов достоверных различий с контроле« на выявлено. Однако лимфоциты больных ожоговой болезньь более сильно реагировали на действие полипептидов печени. При инкубации таких лимфоцитов с гепашюм в концентрациях 10 и 100 икг/ил достоверно повивалось количество как Т-активных, так и Т обвдх лимфоцитов. На В-лимфоцитах увеличивалась экспрессия рецепторов лишь прл дозе гепалина 100 ют/ил. Проведенные исследования свидетельствуют, что полипептиды печени в большей сто-пони оказывают активирующее влияние на Т-лимфоциты и изнее онач>яельнов - на В-лимфоциты.

При научении влияния гепалина на миграцию лейкоцитов под слооы агарозы в пряной и непрямой реакциях нами решались следующие вопросы: а) присущи ли гепалину антигенные свойства; б) вызывает ли гепалин секрецию лимфоцитами лтфкинов, тормозящих миграцию лейкоцитов при стимуляции штогенаш. Результаты исследования показали, что гепалин в прямой реакции достоверно усиливал миграций лейкоцитов, прочей этот зффзкт носил дозоза-висишй характер.

В непрямой реакции оказалось, что добавление в кулътураль-ную среду роста лимфоцитов гепалина, также как к его повторное введение, сувдэстьепио на влияло на миграцию лейкоцитов, что свидетельствует об отсутствии сенсибилизации лимфоцитов препаратов Однако повторное внесение ФГА в среду роста, содержаний гепааш, сопровождалось достоверным торшкзниеы миграции лейкоцитов. Предварительное шинирование лимфоцитов с СГА в течение суток и последуйте введение гепалина привело г; аналогичному раоультату. ОсоОекио выражай эффект торютлиж при культивировании яш&эцнтов в среде, содержащей одновременно гошшш и ЕГА.

Пркводоиньв результаты свидетельствуют о to и, что гепсшш па обдадаэт антигеннь&гн свойстваш, по вызывает сокрощпя лзазфо-гаков, ?ордазящцх ииграцкю лейкоцитов. Однако введение юггоге-цов иа Соио гошшша приводи к уоиданню торшганщ миграции 6

лвймо цотов.

Известно, что метаболические сдвиги, сопровождающие переход м?крсфага и полиморфноядерного нейтрофила в активное состояние, практически идентичны. "Дыхательный взрыв", являясь 5ш>-чевым моментом актквагг-ffi фагоцитов, псвволяет маркировать переход клеток к активное состоянии Исходя из этого мы изучали злиякио гепалина на кислородзавиепмк* процессы нейтрофилот» периферической крови человека в тесте восстановления нитросине-го тетразолия (КСТ-тест). Как покяяя.«и исследования инкубация kwok з присутствии гепалина значит? -г.»«.о повышала количество КС? - п о л о *!-гге л (: > я Форм нейтрофилов. При »концентрации 10 мкг/мя. число клеток, содержащих диформазанпв"» Т"^'"---. 2ыло » у. а я» гг, чем я "-""трг-а. Ув»^ии<>ятг концентрации гепалина в 'гт^йционной среде приводило к росту КСТ-положительных форм. При концентрации гепалина 250 «кг/мл и 2,5 мг/мл НСТ-положи-телъные нейтрофилы в 4 раза превышали контрольные показатели.

Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что полипептиды печени значительно повышают фагоцитарную активность клеток, стимуляруя цепь биохимических реакций, сопровождающихся потреблением кислорода

х^гакционаяькое состояние фагоцит."*. такие характерипуюг но-¡¿<?рментн~~:' л:'?ссомаль!Ы-? чятионнуб которые составляй?

кислороднезаззсиму» микробнцидну» систему фагоцита. По г.одержа-иио *vr:<:< белков иохнс сулить, с одной стороны, о потенциальной способности, фагоцитирундас клеток к выполнению несяецифической антимикробной функции, а с другой - о степени активации фагоцита (по снн.хешга содержания катионных белков). Это обстоятельство позволило при«--»ить гизосомальный катионный тест (ЛКГ) для оценки влияния гепалина на функциональную активность нейтрофн-

Исследованиям! установлено, что средний цитохимический коэффициент (СЦК) фагоцитов в контрольной серии составлял 1,61 + 0,001. Инкубация клеток с гепалиноы приводит к выраженное скитанию содержания лияосочагыгмя катконкых балкой. При втом откажется обратная зависимость СЦК нейтрсфнлов от концентрация гепалина з инкуОициснной смеси. Наибов резкое сннтение С1Щ яайлпдается при максимальной дове гепалина 2,5 мг/мд до 1.05 + 0,02 (р < 0,001).

Реэудьтатн данной серии опытов свидетельствуют о способ-

7

иости гепалина активировать фагоцитарную функцию нейтрофилов, сопровождающуюся выходом иэ гранул нефсртнтных катионных белков.

Исследования по влиянию гепалина на фагоцитарную реакцию нейтрофилов по отношению к микробной тест-культуре подтвердили результаты, полученные в ЛКТ и КСТ-тесте. Фагоцитарный показатель нейтрофилов на фойе гепалина превышал контрольные цифры во всех вариантах опыта. Пептиды печени в концентрации 10 мкг/мд повышли его до 64,1 + 1,3% по сравнению с контролем, где он равен 48,6 + 1,7% (р < 0,001). Увеличение дозы гепалина приводило к возрастанию количества фагоцитирующих клеток. Одновременно с этим повышался фагоцитарный индекс с 4,4 + 0,2 в контроле до 5,7 + 0,1 при доэе 10 мкг/мл и 7,3 + 0.3 при 2,5 мг/мл гепалина (р < 0,001). Воздействие гепалина на нейтрофилы приводило к увеличению вавершенности Фагоцитоза. Применение шнмаль-иой довы препарата (10 мкг/мл) увеличивало показатель завершенности фагоцитоза до 81,2 + 1,9%. против 64,2 + 1,6% в контроле (р < 0,001). Повышение довы гепалина усиливало эффект,а при максимальной дозе 2,5 иг/ал он был меньше (78,0 + 2,4%), что, очевидно, свивало о большим числом фагоцитированных микробных тел, нз-ао чего в течение короткого срока инкубации Фагоцит не успевал разрушить ваяваченныз микроорганизмы.

Таким образом, все тесты, характеризующие фагоцитарныо функции. убедительно доказывают, что генаяин обладает активирующим влиянием на фагоциты.

Одной из важных систем неспецифической ревистентности организма является система комплемента, активация которой в !to-шчном итоге приводит к образованию мзмбршю-атакуюнрго конп-лэкса, способствувдрго разрушению измененных »снеток. Крош того, компоненты системы комплемента выступают в качества иеспе-цнфичоокого регулятора кшушюго ответа (Laham В. J. ot ni., 10S2; (íbnth J. L., 1083). Одновременно система конплзкентв является свявувдш в веком шяду системами иммуногенеза и геностгша (Еувинк RЯ, ШОИКОВ ЕЕ, 1081, 1982; Локкина IE, 1988).

Ш оцэнивади влияние гепалина па классический и матерпа-tœ&ua пути дотации скот ему кошлемента. Установлено, что го-E3JQ!H а охштаг in vitro ннгкбкрует систему кошшмэита Тек, ге-юаийчйокад ектявность сыворотки, обусловлеинаа активацнай шэсоического пута, подавлялась в 2 раза и составляла 87,2 + д

3,12, В ТО ЕрйШ 1GJÎ В шпгрола она ЛОСТ!!РГ„",- 71,0 i (р < 0,001). Шиео зираганнсэ кмгиОируи&ю з&чяиие г-ьпсилш отзывал на альтернативный путь активацию в опыте гемолиз есггзв-аяя 30,8 ± б,ОХ против 43,8 + 3,СХ (р < 0.05).

Госшируя oiCktiûHHoo, молво придти «с ¿^¿¿у, чго гепвлин wnootUKjer выраженное влкшо ш» иуыушпо'.: номчппс? !>..'«-х>горсь «a ли^ощггах, спосо-Зствуе-.' «pu .пп'/ул^у Агсг^гг»-

...1 .UkkiiOKltHOB, T0piK№«!WX Д« HjO"

. i' >,. ¿ус-.-! СЪСЯ^У;). Ih-C"" ,<;.,us,CTiwy.";;

ivc; а {«слйродиеэазисимыв процессы а фагоци-

тах, а тштз общую фагоцитарную п^ир^ссп

м^н»«,' гспзся;« в альтэрнатив-

пых пути активации системы комплемента

2. Влияние гепаляна на систему геиостаоа В опытах in vitro установлено, что полипоптиды печени в максимальной доае 1 иг/m но вызывает спонтанной агрегации тромбоцитов, а также не влияют на АД»-, троибкн-, адреналин-, коллаген- и ристш,4ицин-индуцнро ванну» агрегацию троыЗоцитов. Наблюдения in vitro пасазд**, что rc-r:-.—ni иказызаег ииги-

b.'aiHilHij по. rtovi yJUithOliiilin Г«гИ1>.лг;К?, Г4> •

?.. ! T. î4-»ï лоа jfv.:; ¡.мяыо yfCiaavoicrf, Сдьиг»; пока«*-

; .-. .. ip-iHweWSiiC i Ui?»*«*' Щ! ТС ¡...цкИ^.-о, ОДНО

-V ; -, С ■ ->i v: Iji.; ':,,;■ j -1■": ■ jC-,',, , v, <! ,1.. , AGootji^Jsoiii-.i-.-" с-.р^лу, Кссльдус^;полнив s J. У^^иЫнЛ;; ispob-. i-i L J_ Hi, 1 С Про-

i,m iZ.'c с ¡tuuijjo^-j, a ù пколлиаи концентрации

¿ou ыкг/ia - до 378,8 + 28,6 о (р < 0,001),

S CHWAuA ÎH \ iliu I i'liiCuvi V 'i âl,'j^j.U«'

, < itjuMthi v iviCtlij, ' -i ! ¿U U*. mm амЯОШМЮТ уВ&ЯИЧдНИЭ ' ЛЙ-

sKca зугдоОулииовога сгустка о 205,5 * 26,б мни (контроль) до

£80,5 + 28,3 шш (ОПШ) (р < 0,05). С уй«дичонпеи

маадш sioi- bfàeiet уои-вдйй.ется к т,]-. доо« »«, «¡.«вд «»i

i-i.-ui û cryoïfta /scMîViii'aij vù£,7 миь (p v 0,0ûi).

ïtc^i.VthOoithmm ¡¿¿*0*1М ¿TtapHHOBMX НЛ««Т5П1 уст^шоьлини, ч»0

гспадхп; и« ¿liiituiaef '¿aûpmia, иис&шы t еьовд о bjus«mw au ¡ipûfaainaa'j'ap а &к:.,шшч>|> пашш^г«»«« (отсутствие зоны juiatî-са на вепрогретых н nporpatus пластинах) и отрептокиназу (отсутствие рааницы аон лианоа в непрогратыж пластинах). Однако

9

гвпалин ваметно уменьшал вону лмвиса фибрина, вызванную фибри-нолиэином (р < 0,001).

Приведенные данные позволяют утверждать, что гепалин обладает непосредственным антипротеаэным действием.

В отдельной серии опытов изучалось влияние супернатанта суточной культуры лимфоцитов при различных вариантах активации (гепалином и ФГА) на свертывание крови и фибринолиз. Опыты показали, что интак>ная среда, среда роста интактных лимфоцитов, а также среда роста лимфоцитов в присутствии гепалина и ФГА в отдельности по сравнению с контролем (добавление в плазму физиологически. о раствора) уменьшали время рекальцификации и лизиса вуглобулинов. Этот эффект был наиболее вырален для среды роста в присутствии ФГА. Уменьшение времени рекальцификации и фибри-нолиза связано, очевидно, как с присутствием в среде роста сы-ворот1СИ. содержаний активаторы этих процессов, так и с выделением активаторов при жизнедеятельности лимфоцитов. Вместе с тем, культивирование лимфоцитов с одновреме-нным присутствием гепалина а ФГА привело к обратным, результатам. Введение такой среды роста 8 системы вызывало резкое удлинение времени рекальцификации плазмы и торможение фибринолиза. Этот факт можно объяснить тем. Что лимфоциты в процессе такой активации выделяют ингибиторы се-риновых протеаз. В пользу подобных рассуждений говорит отсутствие эффекта в контрольных сериях от/га.

Таким образом, проведенные исследования позволяют заключить. что полипептиды печени способны замедлять свертывание крови и тормозить фибринолиз непосредственно и опосредованно через иммунную систему при митогенной стимуляции.

3. Влияние гепалина на течение острого и хронического токсических гепатитов в эксперименте

Установлено, что при остром токсическом гепатите у крыс снижается масса тела в среднем на 25Х от исходной. Они плохо принимали пишу, снижалась активность, но повышалась агрессивность, наблюдались диспепсические явления, шерсть приобретала грявно-зкелтый цвет. Со стороны гемостаза выявлено укорочение основных периодов тромбоэластограммы (R, k, Т). У таких животных отмечалось умэньсение времени рекальцификации плазмы и ли-аиса вуглобулинов, увеличение протромбннового и каолин-кефали-нового времени, в 80Х случаев был положительным этанояовый тест. Кроме того выявлялась повышенная агрегация тромбоцитов на 10

АДФ и рксташцин. Все эти дан;:« позволила говорить о пгиггчки у большинства больных крыс гиперкоагуляционной стадии ТГС.

У крыс с острым токсический гепатитом чикдоли Скп-

sniú'uocic-tx показателей сьг2орс?к;г: т:л;.г п par л

¡.víu.wcptimu общего билирубина ¿а конъыгированноП и »»-кпчт-г^ирогг.т!!;?? фрагаи'.А, поллсг. :".'i. плотно?- йсоФ-лтпзы

> уза. Ш и ACT - в 4 раза, о'-агД ДЩ* а 2 раса. Оти дая-UK увкдетельствуюг о егмг.г.о)/;- г"' -¡л ".'¡го*

rn¡. : с; 5сгс1?и'-!ос::")го и,;;? ~ .-с

сирепара для лечения крыс с острым токсическим гепатитом не прикопило «•

В случай применения гепалнна масса у бозыпя крыс ткон-глдыю приблизилась к интактнки кквотиыи. Спи лучше принимали гвду, у них не наблодалось диспепсических явлений, дает шерсти терял "болезненный" оттенок.

Использование гепалина в качестве лекарственного средства при острой гепатите привело к вырагонныи избиениям п систе>«> гемостаза. Ознсаныо периоды (?., и, ?) л.'-чэя-

x^t-'c л-Г^т-г^о crwrir-iim -^г-"'

j-ICTUO:' "i уплм. Tí -»гч— ~-г-с.т:нп-

чеет бил пояоэтггелы'Ь": только s ЙПХ сдула: фуКК'П'Г-

¿i.- - ii.'W-^ лгр^гагц'л, чyro" .••

Ир»- ;:¡.-^iri5}iií Л2- « рис-ганициноы соответствовали показателям интактных крыс.

IT, v.:¿у.-.-.Wv.*:/п у 'пч::; - -

______Ж-С !• ' '¡U1L' - Z,Z imoá. сиДерГЗЛШЭ ОбГВГО бИЛТПрубШШ,

особенно конъЕгированкой Фракции (3,5 раза), и умопьпашет активности ферментов длг, ACT, ДЯГ, галочной фосфатовы до норш.

Шлучйнни» »simi-rr V >л?с .»ytnnri?

Í;-'-с:.«, ¿ ¡¡сГ nitivj.rwrr -• - •;;про

ГГС, хоАвстотичвс»«го, i~rcrr.tr ;cго <л*йдрс»-'ог. п гз-исгщолдхшграой недостаточности.

Л;ша;аум острого тонического гепатита у кролиюв при хэ-чзшш гвпаяинои ишда теку» гэ тендецщш, как и у крыс.

При гель-хроматографии полипептидов, выделенных ив печени,

11

токсическом гепатите

интактные крысы

—..... криси, получавшие гвпалин

- недвчанныв крысн

30

20-

10.

РОК Т-оосио ЛИМфОЦИТЫ

I

г

Т-ахтивные лимфоциты

В-лимфоциты

I

Рва.2. Влияние поднпоптидов печени крыо при оотрон гепатите на авспросснв рецепторов лимфоцитов

I. Контроль. 2. Интактные крыоы. 3. Недзчвннив криои, 4. Крисы, получавшие гепалын 12

%

СОнарукзио, ЧТО 7 ИвЛЭЧЗНКЬЙ О 00тр.к."4 ТОКЯЦЧЗШвЭ.! Г«П?Л!1-

тоирэоко ушпыошы?» плоте.'зл тпъъ, *гто птус-гомсгву*;? о плк-

*пп:е.'а»ои сндезнип концентрации пвпгпдои. П-т хром^тсграм^т лн-лглягсс* диадошш ряда биологически иттши ллз-

ГС.'йо? ДУ,-"*'?У> 5ТС;ТСТМ«И МСГйМ!-* р. Г"0';!1"

г.: цпкялсгсоп I}. У криз, «илучамш яэчзниа гапп-

.ТП*!""', "гр-Гйуярп^'лр^'гг-!'!^ -г-.т, р.»,

«лисдпого прогул (рио. 1). Шрпдг (! ГТ'Г: •¿к^тоиЛ'ЛО, 470 1ШН-

пептшш ПЙЛлилдяи» «Г"-""^У" г" .«П;«»»»

-•-":." • 'Л'" .:П1; В "С гф'. »<"' ИГ"' ; 'Г''.«пм ¡л ¡Ю.чу-

'«иаааи 4-«ц»лий, усиливали экспрессия решпторов на Т- и В-лимфоцитах. '.I ¡«мши«пти»^» !"*""1"ГТ

шА лИпсгтт-лг ( «•>«

Действие гополина при хроничоском токсическом гепатите ем оценивала в сравнении о юл<уио!«ррнгяру>етп< препаратом тимали-аом. Ото рэЕвниа продиктовано омишпт причинами. Ро-пораыа, гопалин тек га как и тталии, окавыгеет йлиянве на кммушяот. По-вторих, гепатит сопровождается рзавитиом вторичного иммунодефицита и ТГС. включение зет в схему язношю гепатитов теши»

2р120*ИТ К Сиггпо^у ■■■ нор""РГ««« МЧ^Ч'Л.гстчгмя-

глг; и коагулологичсеких покп2т«.у>й а Г. }« лог'пт. 4

' л - ' ''■ ;; У' 'П } 1 РВЯ) , И у."'*'1"'' V ^(Ч ИТ--- ' >',г г' ^ " -

.:,•*»•. *:; •.т-чс.ччеокон V «гг.;»*; !* гг.*

.......^си чили до уровня иптактю«» купированию ТГО,

ЗЦачтгоЛЫЮ'лУ СНИЗЗШПО поляр*»»"« (*»>»"■«'»•' "^«•»нтицт»

: ;; -¿ишлши при хрсгаг?эв1?он гвватнгэ 3 мэиъ-глй степени повлияло на прнЗмяу в в?ог?, но доотопврко отт'т-гссл> от недг^шп- !фет. этом £ стопами титят

"П ' ! 7£? «»/л. »' •• 1Г'"^ 4 а лр 2 %/А,

а у натаюпшх крш - ^ (р < о.-'УИ).

гспахиюм. аодосао «шаляяу, привода к Олагопреягиш сдзи-гам а гемостазтлогнчэозша и бетхтатзскнх показателях. Со»5-

13

таимое лришноиио обоих препаратов по эффекту уступает изолированному их использованию.

При патошрфологическом исследовании срезов печени крыс с острым и хроническим токсическими гепатитами выявлено стимули-рудао влияние гегшина на точение ре парат ив них процессов в органе. У крио, получавших препарат, обнаружены менее выраяенида деструктивно-дистрофические изменения в паренхиме и строме пе-чони, При этой сд/»..о проявлялись признаки воспаления. В просвета ояиничных печеночных артерий, гон и центральных вен долек Пвчони обнаружу остаточные признаки ТГС в виде расслаивания ¡фоли, агр гато» и сладкой фприонм« элементов, но в отличие от Лйхочриних групп, отсутствовали признаки сосудистого шока. Дес-tpyiwiiwia-дистрофические иаменения строиы печени, вызванные ТГС, бшш ueitce выратаны у крыс, попавших как гопалин, так и тиш-Лин. Наряду о :<?1Ш в печени »тотных с хронически« гопатнтоы, получавших гепгшш, отдачалось достоверное уисньшние разрастания се&дшштолъной ткшш (3,78 + 0,43Х против 6,4? * 0,511 в контроле, р < 0,001). Сочотшшоо приыоненио гопгшша и тиьшмиа спиидло этот пошттйль до 4,05 ± 0,631 {р < 0,05), Введение го-шшша при остром гепатите помвахо количество ыитоэов с 03,6 ♦ 2,04 йо £86,1 i 4,2 на 100 полей вроняя (р < 0,001). Прн хроик* щенои гепатита увеличение числа шггоэоа было ийсмшальмьы » олучао признания гепаямиа до 162,6 ± (р < 0.001). тгишин йоый&я этот показатель только до 143,0 + 1,93 (р < 0.0Ш), а СОЧЭТШШОО npUWOlIOHUÓ йрагтрЗТй» - ДО 133,1 * 2,48 (р < 0,001).

Уэрфсшгнчвекая картина соязэанки вря мочении гегшйкои кйракторнэоашшоь шшикшиши прояьшшмй тот с сохранении иоргшьноя структуры основной иассы (юддагенавьк, йргирофяяша м «шытгсеош ьойокои, что привело и сохранен® впйщггегъноп !«и>ьзди шашноинаа одфадной тшш.

TüiQiw ооразоы, шрфологичаский Шфтина свидетельству»? о быршшиом й&Эмрате&иоы йзЬетьни гонщика на строцг в парэихи-щ взчзцн и

U

выводы

1. РаериОош! орипшэдьшй способ йцдэдомн Г.«липбп?иаи» im'-ыых, оОлёЛшашх вырэдзняым тгромодш^««1" »»iiî?s:f3?f ti по-

ДГЛаа-Ч»' ¿'СЛОйНОS НШШеКООДШе ":хч<«ли»!".

Гл'диаеи-пша, ацаошшис- из йвчоьи и внесеноиэ в ir/яьту-

¿7 i„.кусвн, r'v.'ni-in^rv ¿y.onp.'r'j.;:1?;; ¿е.'улпо

1'л ла ! к 2- wjaJowïux здсрсаих г. Сельаил ^ ахо^тчачм имиуклд^'кинт&'.я». Псд ялкинк'с волкнептяй-'-.*! поедни j-siwttpwo»

.^Aiuniwon; пр^Д^ри^с;::.;:1^ •■:■!:>'i.- ..■--: * -iiivi-ci-1 »Фиу/тс-хрни гоползша я ФГА вьэиваат секрецию лиифашов, ловы-

ESEiMîm* V^POTP'fr^ibîIîîTI ,ZC£wu«iui> <V wî"A И кп»™«оя™» ""Z^ZZÏZi

"ч" ««г^ет -ci^wZstrro«. гвпслша з еддь'гурал? ной

среде стнмулируо? ¡оюдородоовисимш и гаюлороднопаписюшо процессы в неЛтрофилах, а тшсга повышает ¡к Согсцитарнуы ajcrîm-«ость.

3, Гспалин поннтгдот общую гоиодитичоскую активность крови,

. ннгибируя классический и адьторясшшнып пути аяивации системы геидшмэита.

4, Геп&дик 5 oRwrax m vitr-o обладает Бырагаиныи антипро-

ОНО» &одгда>;с'.' сы-ргийшггссс:, Kposi. vopbrj&ti/ ^¡«¡.¿¿¿^ «iç.Tarjsî ;

ii S;. соиравс.-.^иг-:;)! со;,; rt,'<-.):" ьнri'feiCj^i.

с2ортм»;;;ш ¡•¿■сфи и ФаОрплслпаа ь окруаяф» среду.

С. IVtW-iwaiiO reikiwiinu с скспс'Ца/.пи-«.и.М1а« ас-

ÏM- ti юшкыкиш i oiiu'n^aun корсал^иус?

чос;-»»й » :у^стквиогогкчсши. noiï&mvio;«;. Гепалия oicaatsaeï си; t^^'4'i^t.a -«¡ял««« ¡¡a увамратнвяыо процессы в пареяхидо печать укоиьшаот достррстшиго-дистрофксес;^ ь »,« i-».«

i: iii'iMiiiï';;i ■■•••kî ¡--^¡.¡пнг« ni'.'.ianiwc^i.i'ù;;

«i.vribbiiàUiui Oii4 В печени ИОШИЯвТСЯ |»ЧОСТВОШШа состав подяпоптидоо н сашшгся их имыунорвшегшшыз свойства. Цркиэяеяко гаяалкяа с тораневтичзскоД до лью воемаашшшйат

npcjtt"!. nOjninC'fiïlyt'Ji» S Й'^чиак U ПК СПССООМСС'П» «CSUtimïi» UlUi u^jaciiit pummofon un I- и С-аи14ошггах.

r. îopane»tM°44H!}$ дейстзкз ronsuiiuu no ериапошы. s ллй «р.ч biX'iiupiUîjHTûjbtiRï ïc}33ii4scia<x гояахшаа отди'йехся Оома auwMtoâ Gitf'<*Mo& иаяравлаиностьа Коибннировашшо upiaa-яааиэ ташм и гепалина сингаат твралевткчесюШ еффзкт, достигав».^ при нволированном применении препаратов.

СПИСОК РАБОТ. ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕШ ДИССЕРТАЦИЙ

1. ВитковскиЯ й А. Участие пептидов пвчапи в физиологических и патологических процессах // Роль пептидных биорегуляторов (цитоыединов) в регуляции гошостаэа. - Л., 1087. - с. 21-22.

2. Витковский И А. Влияние полипептидов печени на иммунитет и течение острого и хронического гепатита в эксперименте // Вкспориыентальная и клиническая ишунология на Востоке страны. - Красноярск, 1968. - т.1. - С. 83.

а ВитковскиЯ 0. А., Укхадьцов А. Е Влияние полипептидов пзчэпи па течение хронического гепатита // Иымуяокоррекцня при инфекционной патологии. - Д., 1088, - С. 1а

ВитковскиЯ £1 А. Влияние цитоиединов печени на течение острого и хронического гепатита в экспериьзэнтв // Цитошдины. -Чита, 108а - С. 24-27.

Тематический план TSvO г., .'» 256

Подписано к печати 1,03.90 г. I-Ó4I52. Гор:-.ат GCxOG/¡6. FoTanpi'HTHan; пгчать. Усл.пгч.л. 1,0, Ус.н.г.г.-отт. 1,Г«.Тч Уч.-изд.д. 0,Уо. Ткр-.х 100 -!".з. Заказ 24»)» Гесгтогно

1'здат-зльстго Ун'^г-епеитста к-ггпср _1• rcii-i г '■■СС.'Л'О. 7\. ■ г:1'."- • : - -j

Тяпогрлткп «здетольстга г-куз,

ул. Í рдмок'.т изо, о