Влияние пептида дельта-сна на продолжительность жизни и развитие опухолей у мышей

Войтенков, Владислав Борисович

Диссертации по медицине → Геронтология и гериатрия

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.53) на тему:Влияние пептида дельта-сна на продолжительность жизни и развитие опухолей у мышей

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Войтенков, Владислав Борисович Санкт-Петербург 2009 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.53

Автореферат диссертации по медицине на тему Влияние пептида дельта-сна на продолжительность жизни и развитие опухолей у мышей

На правах рукописи

ВОЙТЕНКОВ Владислав Борисович

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДА ДЕЛЬТА-СНА НА ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ И РАЗВИТИЕ ОПУХОЛЕЙ У МЫШЕЙ

14.00.53 — геронтология и гериатрия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург -2009

003466035

Работа выполнена в отделе канцерогенеза и онкогеронтологии ФГУ НИИ онкологии им. H.H. Петрова Росмедтехнологий

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Анисимов Владимир Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, доцент, кандидат медицинских наук, Чалисова Наталья Иосифовна

доктор медицинских наук Евсюкова Елена Владимировна

Ведущая организация:

ГОУ ДПО ФАЗСР «Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования» Росздрава РФ

Защита ^^сертации состоится <г<э оч* 2009 г. в (Ъ zz. часов на заседании диссертационного совета Д601.001.01 при Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН по адресу: 197110, Россия, Санкт-Петербург, пр. Динамо, д.З

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН (197110, Россия, Санкт-Петербург, пр. Динамо, д.З).

Автореферат разослан «/г]» 0% 2009 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета

кандидат биологических наук, доцент С5" ^ Козина Л.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время происходит быстрое увеличение в популяции доли пожилых людей и рост связанной с возрастом патологии [Анисимов В.Н., 2003]. Именно поэтому поиск препаратов, обладающих способностью к замедлению процесса старения и повышению качества жизни пожилых, является одной из основных задач геронтологии и гериатрии.

В последние годы большое внимание уделялось изучению регуляторных пептидов - класса веществ, обладающих способностью к поддержанию стабильности функций организма в норме и патологии [Хавинсон В.Х., Анисимов В.Н., 2003]. К этому классу относится и дельта-сон индуцирующий пептид (ДСИП), эндогенный нонапептид, открытый в 1976 г [Monnier М., Schoenenberger С.А., 1976] ДСИП является нейропептидом [Стрекалова Т.В., 1998], участвующим в большинстве межмедиаторных взаимодействий [Михалева И.И., 2003].

Многочисленные экспериментальные исследования позволили установить, что наиболее важными физиологическими эффектами ДСИП являются: регуляция процессов перекисного окисления липидов путем повышения выработки супероксидисмутазы (СОД) и других ферментов антиокислительной защиты, стимуляция выработки гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) и повышение сродства рецепторов к ней, продопаминергическое действие, антистрессорная активность, выражающаяся в снижении летальности и клинических проявлений при различных типах стресса, иммуномодулирующее и антидиабетическое действия, мембраностабилизирующий эффект, противоишемическое действие [Ульянинский JI.C. с соавт., 1992; Шандра A.A. с соавт., 1995; Сергутина A.B., Герштейн JI.M., 2000; Судаков К.В. с соавт., 2003; П.Е. Умрюхин с соавт., 2003].

Вещества с подобными эффектами часто обладают в силу своих свойств геропротекторной активностью [Анисимов В.Н., 2003]. При изучении активности геропротекторов важной является оценка различных параметров старения, а также физического и эмоционального состояния, отражающих общее состояние и качество жизни.

Сложное и разностороннее взаимодействие между процессами старения и канцерогенеза диктует необходимость изучения этих процессов в совокупности [Anisimov V.N., 1987]. Вещества, обладающие геропротекторной активностью, могут оказывать различное воздействие на канцерогенез: как усиливать, так и ослаблять его [Анисимов В.Н., 2003; Blask D.E. et al., 2004].

Действие ДСИП на спонтанный канцерогенез изучено недостаточно [Попович И.Г., 2003], в связи с чем представляется обоснованным его исследование. Данные о влиянии ДСИП на индуцируемый канцерогенез отсутствуют.

Таким образом, изучение возможного геро- и онкопротекторного действия ДСИП с использованием моделей оценки физической силы, интеллекту ально-мнестических качеств, эмоционального состояния подопытных животных, канцерогенов различного механизма действия и разной органной специфичности является весьма актуальным направлением экспериментальной геронтологии.

Дель исследования. Изучить влияние дельта-сон индуцирующего пептида на продолжительность и качество жизни мышей, процессы перекисного окисления липидов, спонтанный и индуцированный канцерогенез.

Задачи исследования

1) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на продолжительность жизни мышей.

2) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на показатели локомоторной активности мышей в тесте «открытое поле» и тесте удержания на струне.

3) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на показатели эмоционального состояния и стресс-устойчивости мышей в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт».

4) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на когнитивные показатели мышей в тесте «восьмилучевой радиальный лабиринт».

5) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на показатели активности ферментов антиоксидантной защиты у мышей в норме и в условиях светового стресса (постоянного освещения).

6) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на спонтанный канцерогенез у мышей.

7) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на канцерогенез легких, индуцируемых уретаном у мышей.

8) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на канцерогенез опухолей мягких тканей, индуцируемых бенз(а)пиреном у мышей.

Научная новизна. В работе впервые исследовано влияние препарата пептида дельта-сна на показатели поведения мышей в тестах «приподнятый крестообразный лабиринт», «восьмилучевой радиальный лабиринт», продемонстрировано его анксиолитическое и стресс-протективное действие. Показано, что препарат пептида дельта-сна обладает геропротекторной активностью с продлением жизни последних 10% мышей на 16%. В работе доказано, что постоянное освещение даже небольшой длительности приводит к достоверным сдвигам перекисного окисления липидов в организме подопытных животных. Продемонстрировано антиоксидантное действие препарата пептида дельта-сна в условиях постоянного освещения. Показано, что препарат пептида дельта-сна оказывает достоверное

замедляющее действие на развитие спонтанных опухолей у мышей и канцерогенез легких.

В работе впервые изучено и проанализировано влияние препарата пептида дельта-сна на индуцируемый уретаном и бенз(а)пиреном канцерогенез. Показано, что введение препарата пептида дельта-сна не обладает проканцерогенным действием ни в одной из использованных моделей.

Научно-практическая значимость работы

Полученные результаты могут служить экспериментальным обоснованием для дальнейшего изучения геро- и онкопротекторного потенциала препарата пептида дельта-сна, разработки научно-обоснованных рекомендаций по применению препарата пептида дельта-сна в качестве геропротектора и с целью профилактики злокачественных новообразований.

Результаты исследования внедрены в научно-исследовательскую работу отдела канцерогенеза и онкогеронтологии НИИ онкологии им. H.H. Петрова.

Положения, выносимые на защиту

1) Введение препарата пептида дельта-сна в дозе 5 мкг/кг увеличивает среднюю продолжительность жизни последних 10% выживших мышей.

2) Препарат пептида дельта-сна оказывает достоверное стресс-протективное влияние на поведение мышей в условиях теста открытого поля, достоверное анксиолитическое и стресс-протективное действие у мышей в условиях теста «приподнятый крестообразный лабиринт».

3) Препарат пептида дельта-сна достоверным образом не изменяет когнитивные показатели мышей в тесте «восьмилучевой радиальный лабиринт».

4) Препарат пептида дельта-сна повышает активность супероксиддисмутазы мозга и общей антиокислительной активности печени в условиях постоянного освещения.

5) Препарат пептида дельта-сна оказывает достоверное замедляющее действие на время возникновения опухолей при спонтанном канцерогенезе у мышей.

6) Препарат пептида дельта-сна не оказывает проканцерогенного действия при канцерогенезе легких, индуцируемом уретаном, и при канцерогенезе мягких тканей, индуцируемом бенз(а)пиреном у мышей.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, из них 2 статьи в рецензируемых журналах по перечню ВАК Минобрнауки РФ.

Связь с планом НИР

Работа выполнялась в соответствии с научной тематикой отдела канцерогенеза и онкогеронтологии НИИ онкологии им. проф. H.H. Петрова.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 131 странице, документирована 15 таблицами и иллюстрирована 23 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, изложения собственных результатов (5 глав), обсуждения полученных результатов, выводов и библиографического указателя, включающего 347 источников, в том числе 163 отечественных и 184 иностранных.

Апробация диссертации

Результаты работы были доложены и обсуждены на VI Европейском конгрессе Международной ассоциации геронтологии и гериатрии (Санкт-Петербург, 2007), III научно-практической геронтологической конференции с международным участием «Пушковские чтения» (Санкт-Петербург, 2007), V конференции молодых ученых России «Фундаментальные науки v прогресс клинической медицины» (Москва, 2008), Конгрессе с международным участием «Пароксизмальный мозг. Мультидисциплинарнык подход к проблеме» (Санкт-Петербург, 2008).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальные животные и исследуемые препараты

Препарат пептида дельта-сна «Дельтаран» (дельтарат лиофилизированный, предоставлен фирмой «НТЦ КОМКОН») состоит и-собственно пептида дельта-сна (нонапептид структуры Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu) и наполнителя - глицина. Препарат ампулированный каждая ампула содержит 0,003 мг пептида дельта-сна.

В эксперименте по изучению воздействия введения дельтарана нг индуцированный уретаном и бенз(а)пиреном канцерогенез препарат вводил! подкожно последовательными курсами по 5 дней в дозе 5 мкг/мышь в сутга ежемесячно в течение 1 недели, с началом через неделю после введеню канцерогенов.

В эксперименте по изучению влияния дельтарана на интенсивносп свободнорадикальных процессов в условиях нормального освещения i светового стресса дельтаран вводили подкожно однократным 5-ти дневные-курсом в дозе 5 мкг/мышь в сутки.

В опытах использовали 260 самок мышей линии SHR, полученных из питомника «Рапполово» РАМН. Животные содержались по 10 особей в полипропиленовых клетках. Они получали стандартный лабораторный корм и водопроводную воду без ограничений. Основная группа животных содержалась при режиме освещения 12:12 часов и температуре 22±2°С.

В первой серии экспериментов мыши в течение всей жизни, начиная с трехмесячного возраста, получали препарат пептида дельта-сна «Дельтаран» по вышеописанной схеме, или физиологический раствор хлористого натрия подкожно по 0,1 мл 0,9% раствора.

Всех мышей ежемесячно взвешивали. Каждые 2 месяца, в те же сроки, что и взвешивание, производили определение количества потребляемого корма из расчета массы съеденного корма в граммах на одну мышь и количества потребленной воды из расчета объема выпитой воды на одну мышь. Каждые 3 месяца до достижения возраста 1 года исследовали двигательную активность мышей, их мышечную силу и утомляемость. В возрасте 21 месяца у последних выживших мышей была проведена заключительная оценка двигательной активности, мышечной силы и утомляемости. За животными наблюдали до их естественной гибели. После смерти регистрировали день гибели животного и рассчитывали среднюю продолжительность жизни мышей, возраст 90% смертности, максимальную продолжительность жизни, скорость старения популяции, а также время удвоения смертности (MRDT).

В возрасте 12 месяцев у мышей изучали эмоциональный фон и анксиолитическое действие дельтарана и плацебо с использованием методики приподнятого крестообразного лабиринта (ПКЛ) со сравнением показателей с молодыми 3-х месячными мышами. Группа 3-месячных животных состояла из 20 мышей-самок линии SUR, содержавшихся в таких же условиях, как и 12-месячные мыши, получавшие дельтаран и физраствор.

В возрасте 12 месяцев проводили оценку рабочей памяти с использованием методики восьмилучевого радиального лабиринта (D.S. Olton, R.S. Samuelson, 1976) со сравнением показателей с группой 3-х месячных мышей.

Во второй серии экспериментов проведена оценка влияния дельтарана на процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) у двух групп мышей-самок линии SHR в возрасте 3 месяца в условиях нормального и постоянного освещения в течение 7 дней. Оценивали влияние дельтарана на уровни железо-индуцированной хемилюминесценции, общую антиокислительную активность (ОАА) и уровни супероксидцисмутазы и глутатионпероксидазы головного мозга и печени.

В третьей и четвертой сериях экспериментов по оценке воздействия введения дельтарана на индуцированный уретаном и бенз(а)пиреном канцерогенез использовано 140 мышей-самок линии SHR в возрасте 2 мес. Условия содержания были аналогичны таковым у животных, использованных в первой серии экспериментов.

Методика оценки двигательной активности мышей в тесте «открытое поле»

Животных по одному помещали в установку «открытое поле» (Hall C.S.,1934). В течение 10 минут наблюдали за перемещениями мыши, фиксируя количество пересеченных квадратов поля, число вертикальных стоек, число реакций груминга морды, тела и гениталий, количество актов дефекации. После каждой проверки пол открытого поля протирали с целью исключения ориентировочной реакции животного. Тестирование проводили в возрасте 6, 9,12 и 18 месяцев в дневное время в интервале с 10 до 17 часов.

Методика изучения мышечной сипы и физической утомляемости мышей

Измерение мышечной силы и утомляемости проводили в возрасте 6, 9, 12 и 18 месяцев. Мышей подвешивали на струну, натянутую на высоте 75-80 см, так, чтобы они цеплялись передними лапами и висели на ней до момента утомления и падения. Время, через которое мыши переставали цепляться за струну и падали, фиксировалось как «время удержания». Через 20 минут мышей подвешивали второй раз и снова измеряли время удержания.

Методика приподнятого крестообразного лабиринта

Животное помещали в приподнятый крестообразный лабиринт (Буреш Я. и др., 1991) на центральную площадку головой к открытому рукаву и в течение 5 минут регистрировали время принятия решения, время пребывания животных в открытых и закрытых рукавах и на центральной площадке, количество переходов между рукавами, количество выходов на крайние оконечности открытых рукавов.

Методика восьмилучевого радиального лабиринта

Животных трех групп: получавших физраствор и дельтаран 12-месячных и группу 3-месячных мышей подвергали режиму депривации, при котором пища в течение 1 суток была недоступна. Сохранялся свободный доступ к воде. Через 1 сутки животных помещали в восьмилучевой радиальный лабиринт (Буреш Я. и др., 1991). Оценивали время пребывания в лабиринте с момента помещения корма до посещения мышью всех 8 лучей и количество ошибок.

Изучение влияния дельтарана на процессы перекисного окисления липидов в норме и в условиях постоянного освещения

Использовано 40 мышей-самок линии SHR разводки вивария НИИ онкологии им. H.H. Петрова в возрасте 3 месяцев, которых рандомизированно разделили на 4 группы. Каждая группа мышей в течение 7 дней получала дельтаран или плацебо и содержалась при определенном световом режиме. Мышам одной группы в течение 5 дней подкожно вводили дельтаран по вышеописанной схеме, вторая группа получала физиологический раствор. Обе эти группы неделю находились в условиях нормального освещения. Третья и четвертая группы также получали по вышеуказанной схеме ДСИП или плацебо, соответственно, однако в течение 7 дней находились в условиях постоянного освещения (светового стресса). По прошествии срока 7 дней животных выводили из эксперимента. Для исследования брали образцы тканей мозга и печени мышей, определяли интенсивность хемилюминесценции (реакция Фентона), общую антиокислительную активность, активность супероксидцисмутазы (с использованием НАДН и ЭДТА) и активность глутатионпероксидазы (с использованием реакции расщепления гидроперекиси третбутила).

Изучение влияния дельтарана на канцерогенез легких, индуцированный уретаном

70 трехмесячных мышей-самок линии SHR были рандомизированно разделены на 2 группы по 35 особей. Всем животным однократно внутрибрюшинно был введен уретан (НИИ онкологии им. H.H. Петрова Росмедтехнологий), растворенный в изотоническом растворе хлористого натрия, в дозе 1 г/кг. Первая группа получала дельтаран подкожно 5-ти дневным курсом в дозе 5 мкг/мышь в сутки. Второй группе вводили по 0, 1 мл 0,9% физиологического раствора подкожно в сутки в течение 5 дней. Обе группы получали курсы дельтарана и физиологического раствора ежемесячно в течение всего эксперимента.

Длительность эксперимента составила 32 недели, по истечении которых оставшиеся в живых животные были выведены из эксперимента. Всех павших и выведенных из эксперимента животных вскрывали. На аутопсии исследовали кожные покровы и внутренние органы.

Методика изучения влияния дельтарана на канцерогенез мягких тканей, индуцированный бенз(а)пиреном

70 трехмесячных мышей-самок линии SHR были рандомизированно разделены на 2 группы по 35 особей. Всем животным под кожу поясничной области вводили бенз(а)пирен (Fluka, Busch, Швейцария), растворенный в стерильном оливковом масле в дозе 2 мг/мышь в объеме 0,1 мл.

Первая группа получала дельтаран в вышеописанных дозировках и путях введения. Второй группе вводилось по 0, 1 мл 0,9% физиологического раствора подкожно в сутки в течение 5 дней ежемесячно в течение всего эксперимента.

Длительность эксперимента составила 32 недели, по истечении которых оставшиеся в живых животные были выведены из эксперимента. Всех павших или умерщвленных по завершении эксперимента животных вскрывали, проводилось патоморфологическое исследование.

)

Патоморфологическое исследование

Всех павших животных вскрывали. На аутопсии осматривали кожу и все внутренние органы.

Все опухоли, а также ткани и органы, подозрительные на наличие опухолевого роста, вырезали и фиксировали в 10% нейтральном растворе формалина. После рутинной гистологической обработки ткани заливали в парафин. Гистологические срезы толщиной 5-7 мм окрашивали гематоксилином и эозином и изучали микроскопически. Использовали гистологическую классификацию опухолей, предложенную МАИР [Turusov V.S., Mohr S., 1990].

Статистическая обработка результатов исследования

При статистической обработке результатов использовали методы вариационной статистики с применением пакетов статистических программ STATGRAPH и STADIA. Рассчитывали параметры уравнения регрессии для кривых возрастной динамики веса тела. Достоверность различий оценивали по t- критериям Стьюдента [Гублер Е.А., 1978].

Основным методом статистической обработки результатов эксперимента по влиянию дельтарана на процессы перекисного окисления липидов в норме и в условиях светового стресса был двухфакторный дисперсионный анализ. На первом этапе проверяли равенство выборочных дисперсий по критерию Левина. После проведения дисперсионного анализа средние значения выборок сравнивали при помощи t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони для множественных сравнений [Гланц С., 1998].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние делътарана на массу тела, потребление корма и воды у мышей

Достоверных отличий по средней массе тела между мышами, получавшими дельтаран, и контрольными животными обнаружено не было.

До последнего месяца жизни введение дельтарана на количество потребляемого мышами корма достоверно не влияло, в течение последнего месяца жизни мыши, получавшие дельтаран, потребляли достоверно большее количество корма, чем в возрасте 4 мес, а также больше, чем наиболее старые мыши группы контроля.

Потребление воды у последних 10% мышей в обеих группах было достоверно большим, чем в начале эксперимента.

Влияние дельтарана на возрастную динамику двигательной горизонтальной и вертикальной активности и ориентировочной реакции у мышей

В группе мышей, получавших дельтаран, как и в группе контроля, горизонтальная активность, то есть число пересеченных квадратов, уменьшившись на 27% к возрасту 9 месяцев по сравнению с исходным уровнем, в дальнейшем не изменялась и оставалась таковой до конца жизни животных. Количество пересеченных квадратов последними 10% оставшихся в живых мышей, в возрасте 21 месяц, составляло в среднем 200 пересеченных квадратов на мышь, отличаясь от показателя для тех же мышей в возрасте 3 мес. всего на 12%. Последние оставшиеся в живых 10% мышей имели в целом более высокую горизонтальную активность, чем умершие ранее животные, которым вводили дельтаран, - в среднем на 17%.

Показатели вертикальной активности мышей, получавших дельтаран, уменьшившись к возрасту 15 месяцев на 50% по сравнению с возрастом 3 месяца, не изменялись на протяжении всей их дальнейшей жизни. По сравнению с группой контроля у мышей, получавших дельтаран, отмечалось существенное замедление возрастного уменьшения вертикальной активности - в возрасте 15 месяцев мыши, получавшие дельтаран, совершали на 74% больше стоек, чем животные группы контроля (р <0.01) (Рис. 1).

Различие между группами по количеству вертикальных стоек было достоверным, начиная с возраста 12 мес, и оставалось таковым до смерти животных. Как и в случае с горизонтальной активностью, вертикальная активность последних оставшихся в живых мышей, получавших дельтаран, по достижении ими возраста 21 мес была несколько выше, чем у ранее умерших 15-месячных животных.

Рис. 1. Влияние дельтарана на возрастную динамику вертикальной активности мышей.

Частота реакций груминга и актов дефекации в открытом поле у мышей, получавших дельтаран, как и у мышей группы контроля оставалась более или менее неизменной в течение всей жизни животных.

Мыши, получавшие дельтаран, имели на 15-17% лучшие показателе мышечной силы и утомляемости, чем мыши группы контроля, однако этс различие ни в один временной период не было статистически достоверным.

Влияние дельтарана на эмоциональный фон и стресс-устойчивость у мышей

При проведении теста в приподнятом крестообразном лабиринте ) мышей, получавших дельтаран, выявлены существенные отличия от группь контроля (табл. 1).

У группы 3-месячных мышей общее время, проведенное в темны> участках лабиринта, составляло в среднем 223,2± 11,1 секунды, не отличаяа достоверно от 237,8±12,5 секунд, которые в среднем в темных участка> проводили 12-месячные мыши группы контроля. Получавшие дельтараь животные пребывали в темных участках лабиринта на 42% меньше, чеь мыши группы контроля (р<0,05).

Таблица 1

Показатели поведения мышей в приподнятом крестообразном лабиринте

Группа животных Возраст, (мес") Время принятия решения (с) Время в темных рукавах (с) Время в светлых рукавах (с) Количество переходов между рукавами Кол-во выходов на отдаленные участки

3-х месячные 3 11,1±2,3 223,2±11,1 60,8±10,4 1,7±0,4 1

Контроль 12 16,7±2 >37,8±12,5 45,6±11,2 1,8±0,3 1

Дельтаран 12 14,6±2,4 62,5±14,9* 122±14,5* 0,8±0,3* д*

* - различие достоверно по сравнению с контролем 12-мес., р<0,05.

Время пребывания в светлых участках лабиринта у получавших дельтаран мышей было на 63% большим, чем в группе контроля (р<0,05).

Показателем стрессированности и двигательной активности в незнакомых условиях мышей является также количество переходов между светлыми и темными участками лабиринта. В группах 3-месячных мышей и 12-месячного контроля оно практически не отличалось. Мыши, получавшие дельтаран, совершали достоверно (р<0,05) меньшее количество переходов между рукавами, за счет длительного нахождения на открытых участках лабиринта. В целом они совершали на 66% меньше переходов между рукавами.

Важным показателем является количество выходов животных на крайние участки открытых рукавов лабиринта. В группе, получавшей дельтаран, этот показатель был существенно большим, чем в группах 3-месячного контроля и 12-месячного контроля.

Влияние дельтарана на показатели рабочей памяти у мышей

3-месячные мыши проводили в лабиринте в среднем на 44% меньше времени, чем 12-месячные мыши группы контроля и получавшие дельтаран животные (р < 0,05). Животные группы, получавшей дельтаран, проводили в лабиринте в среднем на 4% меньше времени, чем мыши группы контроля. Это отличие достоверным не является.

Среднее количество ошибок на одну мышь во всех трех группах было сходным, наименьшим оно было в группе, получавшей дельтаран, и наибольшим - в группе 12-месячных контрольных мышей, однако различие достоверным не было.

В целом полученные данные свидетельствуют о том, что применение дельтарана приводило к некоторому общему улучшению рабочей памяти

мышей по сравнению с контролем, однако это явление носило характер тенденции (р > 0,05).

Интересным является тот факт, что между молодыми 3-месячными мышами и взрослыми животными в возрасте 12 месяцев не наблюдалось достоверных отличий по показателям рабочей памяти.

Влияние делътарана на окислительные процессы в норме и в условиях постоянного освещения у мышей

Световой стресс в группе контроля вызывал некоторое повышение активности СОД в печени (на 14%) и существенное снижение активности ГП в мозгу у мышей (на 60%) (р<0.05) (табл. 2).

Таблица 2

Показатели активности окислительных процессов в тканях мозга и печени мышей при нормальном освещении и в условиях светового стресса {постоянного освещения)

Орган Головной мозг Печень

Световой режим 12 ч.: 12 ч. Постоянное освещение 12 ч.: 12 ч. Постоянное освещение

Группа Ре2' -индуцированная хемилюминесценция (10 у.е./мг белка)

Контроль 38,94±1,08 48,64±0,68## 63,95±1,60 67,47±1,73

Дельтаран 47,57±1,36 44,78±0,82 54,47±4,51 52,75±3,44

Общая антиокислительная активность (у.е./мг белка)

Контроль 0,616±0,0211 0,631±0,019 0,393±0,012 0,362±0,018

Дельтаран 0,676±0,0093 0,625±0,018 0,343±0,019 0,446±0,012**

Активность супероксиддисмутазы (у.е./ мг белка)

Контроль 29,25±1,92 34,56±3,97 21,94±2,23 23,23±1,79

Дельтаран 31,19±2,00 40,18±1,60# 30,06±2,64 22,04±1,52#

Активность глутатионпероксидазы (ммоль/мин/ мг белка)

Контроль 0,108±0,022 0,146±0,011 0,815±0,238 0,339±0,091

Дельтаран 0,108±0,024 0,095±0,016 0,149±0,041 0,107±0,028*

* - по сравнению с контролем, р<0.05. ** - по сравнению с контролем, р <0.001.

# - по сравнению с условиями нормального освещения, р<0.05. ## - по сравнению с условиями нормального освещения, р<0.001.

В группе контроля в условиях постоянного освещения достоверно (р<0.001) увеличивалась железо-индуцированная хемилюминисценция в головном мозгу. Все остальные изменения в группе контроля при световом стрессе, весьма многочисленные, достоверными не являлись. Таким образом, можно констатировать, что световой стресс вызывал в условиях данного опыта повышение окислительной нагрузки на организм подопытных животных.

Введение дельтарана в условиях стандартного освещения достоверно не изменяло состояние свободнорадикальных систем в головном мозге и печени мышей. В условиях светового стресса в группе, получавшей дельтаран, наблюдалось достоверное увеличение общей антиокислительной активности в печени (на 19%), и снижение активности ГП в печени (на 70%) (р<0.05) а также тенденция к повышению активности СОД в мозге (на 15%).

Таким образом, если в условиях стандартного освещения введение дельтарана не приводило к изменению показателей окислительной активности, то в условиях светового стресса препарат достоверно увеличивал общую антиокислительную активность в печени, активность СОД в печени и снижал активность ГП в мозге (табл. 2).

Влияние дельтарана на продолжительность жизни и спонтанный канцерогенез у мышей 57й?

В группах контроля и дельтарана динамика выживаемости не отличалась вплоть до достижения мышами возраста 450 дней, когда количество животных в группе, получавшей дельтаран, в два раза превысило число доживших мышей группы контроля. Эта тенденция устойчиво сохранялась (Рис. 2). До возраста 500 дней в группе получавших дельтаран мышей дожило в 4 раза больше животных, чем в контроле (р < 0.01) (табл. 3).

Таблица 3

Влияние дельтарана на динамику выживаемости мышей-самок линии ЯНЛ

Группа животных Количество мышей, доживших до возраста (дни)

150 200 365 400 450 500 550 600 640

Контроль 40 38 25 И 5 ■ 2 1 1 0

Дельтара н 39 37 24 13 10 8* 7* 6* 1

*р < 0.01 - различие по сравнению с группой контроля.

К 600 дням в группе дельтарана осталось в живых в шесть раз больше животных, чем в группе контроля. Дельтаран достоверно увеличивал время жизни последних 10% мышей.

Рис. 2. Влияние дельтарана на продолжительность жизни мышей-самок 8Н11.

Средняя продолжительность жизни мышей без опухолей в группе, получавшей дельтаран, была больше на 5% по сравнению с группой контроля (р < 0.01).

При изучении спонтанного канцерогенеза у мышей, получавших дельтаран и в группе контроля выявлено, что введение дельтарана оказывало достоверное замедляющее воздействие на динамику возникновения опухолей (рис. 3).

У мышей, получавших дельтаран, опухоли появлялись позже в среднем на 102±15 суток, чем в группе контроля. Это различие было статистически достоверно (р < 0.01).

Возраст, суг

Рис. 3. Влияние дельтарана на время появления новообразований у мышей-самок

Таблица 4

Влияние дельтарана на частоту и типы опухолей у мышей

Показатель Контроль Дельтаран

Количество мышей 40 40

Количество мышей с опухолями 12 (30%) 10(25%)

Количество мышей со 4 3

злокачественными опухолями

Общее количество опухолей 14 11

Общее количество злокачественных 4 3

опухолей

Количество опухолей на одну мышь 1,16 1,1

с опухолями

Средняя продолжительность жизни 360 ±21.8 409 ±31.8

мышеи с опухолями, дней

Локализация и тип опухолей:

Молочная железа: 9 7

аденокарцинома 3 2

Количество

мышей с метастазами

Лейкоз 2 0

Аденокарцинома легких 1 1

Злокачественная лимфома 2 3

Аденокарциномы молочных желез в группе, получавшей дельтаран, возникали позже в среднем на 90±13 суток и мыши с ними жили дольше на 12%, чем животные группы контроля (табл. 4).

Влияние дельтарана на развитие опухолей легких, индуцируемых уретаном, у мышей

Введение дельтарана сопровождалось тенденцией к уменьшению частоты и множественности опухолей как в общей группе мышей, так и среди мышей-опухоленосителей (табл. 5). Среднее число опухолей на 1 мышь в группе контроля составило 0,51 ±0,9, у получавших дельтаран животных - 0,46±0,9. Множественность опухолей у мышей группы контроля составила 2,71±0,6, то есть в целом была небольшой. В группе получавших дельтаран животных множественность составляла 2,26±0,56, то есть была меньшей, чем в группе контроля, на 17%.

Статистически достоверных отличий ни по одному показателю не наблюдалось. Проканцерогенного влияния введение дельтарана не оказывало.

Таблица 5

Влияние дельтарана на частоту, множественность и размеры опухолей легких, индуцированных уретаном, у мышей

Показатель Уретан + физраствор Уретан + дельтаран

Число животных 35 35

Число животных с опухолями, % 18(51%) 17(46%)

Среднее число опухолей на 1 мышь, М ± m 0,46±0,9 0,51±0,9

Множественность опухолей в общей группе 2,71±0,6 2,26±0,56

Множественность среди мышей с опухолями 5,28±0,9 4,94±0,92

Число животных с опухолями крупного размера, (%) 3 (3,1 %) 2 (2,5 %)

Число животных с множественными опухолями, (%) 17(94,4%) 14 (87,5%)

Влияние дельтарана на канцерогенез, индуцируемый бенз(а)пиреном, у мышей

Введение дельтарана не оказывало существенного эффекта на канцерогенез, индуцируемый БП у мышей. Однако отмечается отсутствие в группе мышей, получавших дельтаран, множественных метастазов, имевших место в группе контроля, а также некоторое изменение макроскопической картины опухолей в виде более редкого появления некротизации и изъязвления кожных покровов над опухолями. Достоверных отличий по показателям средней продолжительности жизни и средней продолжительности мышей с опухолями в данном эксперименте получить не удалось. Проканцерогенного влияния введение дельтарана не оказывало (табл. 6).

В результате проведенных исследований было установлено, что препарат пептида дельта-сна «дельтаран» оказывает геропротекторный и антистрессорный эффект. Кроме этого, наблюдается торможение спонтанного канцерогенеза. Дельтаран не оказывал стимулирующего влияния на индуцированный уретаном и бенз(а)пиреном канцерогенез у мышей.

Установлено, что дельтаран не оказывает существенного воздействия на массу тела мышей и не влияет на потребление ими корма и воды вплоть до последних месяцев жизни животных.

Масса тела животных в группе контроля и в группе, получавшей дельтаран, не отличались друг от друга, то есть мыши, которым вводили дельтаран, несмотря на большее потребление в конце жизни корма и воды, не весили больше мышей контрольной группы. Таким образом, у мышей-долгожителей, получавших дельтаран, имело место увеличение аппетита и потребления корма и воды без существенного увеличения массы тела. Данная находка коррелирует с обнаруженным высоким уровнем горизонтальной и вертикальной активности этих животных. Можно предполагать, что у мышей-долгожителей, получавших дельтаран, наблюдалось определенной степени замедление старения функций организма, что, в конечном счете, и определило увеличение продолжительности их жизни.

Таблица 6

Влияние дельтарана на частоту, множественность и размеры опухолей мягких тканей, индуцированный бенз(а)пиреном у мышей, продолжительность жизни опухоленосителей

Показатель БП + физраствор БП + дельтаран

Число животных 35 35

Общее число животных с опухолями, (%) 28(80 %) 27 (77,1 %)

Число животных с метастазами, (%) 3 (8,6%) 2 (5,7%)

Средний размер опухоли, мм, М ± ш 27,3±1,4 29,3 ±0,81

Время обнаружения первой опухоли, сут. 120 120

Число животных, доживших до конца опыта, (%) 3 (8,6 %) 2 (5,7 %)

Средняя продолжительность жизни животных, сут., М±т 202,3 ± 24,9 201,7 ±5,8

В связи с этими результатами находится выявленный эффект дельтарана на горизонтальную активность животных в тесте «открытое поле». При отсутствии достоверных различий между группами на протяжении всей жизни животных, у мышей-долгожителей, получавших дельтаран, среднее количество пересеченных квадратов в конце жизни было выше, чем у ранее умерших получавших дельтаран мышей и животных группы контроля, соответствуя таковой у 6-7-ми месячных особей.

Обусловленное введением дельтарана увеличение количества вертикальных стоек у мышей наблюдалось на протяжении всего эксперимента. В группе, получавшей дельтаран, имело место замедление возрастного снижения этого показателя. Начиная с возраста 12 месяцев, различие между группами было достоверным. Старые мыши, получавшие дельтаран, в возрасте 15 месяцев совершали на 74% больше вертикальных

стоек, чем мыши группы контроля. Этим отражается их большая заинтересованность в окружающей среде и большая устойчивость к стрессирующим мышь условиям открытого поля. По этому показателю группа последних 10% мышей, получавших дельтаран, отличалась как от аналогичных мышей группы контроля, так и от ранее умерших получавших дельтаран особей. Мыши-долгожители совершали больше стоек, соответствуя по этому показателю 9-месячным мышам своей группы.

В тесте «приподнятый крестообразный лабиринт» установлено, что препарат пептида дельта-сна обладает достоверным анксиолитическим и, соответственно, стресс-протективным эффектом. Животные получавшей его группы проявляли значительно меньшую настороженность в лабиринте и значительно большее время исследовали открытые участки лабиринта.

Обращает на себя внимание то, что 12-месячные получавшие дельтаран мыши по показателю времени, проведенного в открытых участках лабиринта, существенно превосходили не только 12-месячных мышей контрольной группы, но и молодых 3-месячных мышей. Мыши контрольной группы были наименее активными в открытых участках лабиринта, предпочитая большую часть времени находиться в имитации норки. Получавшие же дельтаран мыши проявляли исследовательскую активность, превосходящую таковую у молодых 3-месячных мышей.

По показателю выходов на крайние участки лабиринта различие между группами также достоверно. Получавшие дельтаран мыши в 9 раз чаще осуществляли выходы на крайние оконечности светлых рукавов. Такое поведение животного расценивается как признак стресс-устойчивости [Dunn A.J. et al., 1987; Kinsley C.H. et al., 2006].

Таким образом, суммируя все полученные в приподнятом крестообразном лабиринте результаты, можно утверждать, что у мышей введение дельтарана сопровождалось выраженным анксиолитическим эффектом, что соответствует и антистрессорному эффекту [Тодоров И.Н., Тодоров Г.Н.,2003].

При оценке продолжительности жизни в группах выявлено, что последние 10% мышей, получавших дельтаран, жили дольше. До возраста 500 дней в группе дельтарана дожило в 4 раза больше животных, чем в контроле, к 600 дням в группе дельтарана осталось в живых в шесть раз больше животных, чем в группе контроля.

Дельтаран по результатам данного эксперимента может быть отнесен к геропротекторам II типа, увеличивающим длительность жизни долгоживущих особей [Emanuel N.M., Obukhova L.K., 1978].

Результаты исследования показателей горизонтальной и вертикальной активности мышей свидетельствуют о том, что у получавших дельтаран мышей, а особенно ее последних 10%, качество жизни превосходило таковое в контрольной группе. Мыши в возрасте 21 месяца, получавшие дельтаран, по ряду показателей биологического возраста соответствовали 6-9 месячным животным, то есть у них наблюдалось определенное замедление старения.

Нарушение режима освещения ведет к повышению окислительной нагрузки на организм. Можно предполагать, что подобное повышение окислительной нагрузки имеет следствием ускоренное старение. Дельтаран в условиях постоянного освещения проявил стресс-протективное действие, у получавших дельтаран мышей наблюдалось достоверное увеличение общей антиокислительной активности печени, тенденция к повышению активности СОД в мозге и снижение активности ГП в печени.

В нашей работе дельтаран не оказывал стимулирующего действия на спонтанный канцерогенез. Более того, введение препарата достоверно замедляло процесс возникновения опухолей.

Данные наших исследований свидетельствуют об отсутствии у дельтарана какого-либо действия на канцерогенез легких и мягких тканей, индуцируемый уретаном и бенз(а)пиреном.

ВЫВОДЫ

1. Препарат дельта-сон индуцирующего пептида дельтаран оказывает геропротекторное действие у мышей линии 8НК., достоверно удлиняя продолжительность жизни последних 10% животных на 16%. Увеличивается также средняя продолжительность жизни мышей без новообразований - на 4,6%.

2. Применение дельтарана у мышей приводит к замедлению старения по показателям ориентировочной реакции у всей группы, у последних 10% животных имеет место выраженное замедление старения по показателям двигательной активности, ориентировочной реакции, потреблению воды и корма.

3. Применение дельтарана оказывает выраженный анксиолитический и антистрессорный эффект в модели приподнятого крестообразного лабиринта.

4. Применение дельтарана сопровождается достоверным антиокислительным эффектом на модели кратковременного светового стресса у мышей. Содержание мышей в условиях постоянного освещения сопровождается активацией ПОЛ и усилением свободно-радикальных процессов.

5. Дельтаран оказывал угнетающее действие на спонтанный канцерогенез у мышей линии БНЯ, увеличивая сроки первого появления опухолей и продлевая среднюю продолжительность жизни мышей с опухолями.

6. На моделях индуцируемого уретаном и бенз(а)пиреном канцерогенеза дельтаран не оказывал проканцерогенного действия.

Практические рекомендации

Полученные данные позволяют обосновать рекомендации при разработке схем применения дельтарана в гериатрической практике, особенно у долгожителей, а также в онкологической практике для профилактики онкологических заболеваний.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Влияние пептида дельта-сна на свободнорадикальные процессы в головном мозгу и печени мышей при различных световых режимах/

B.Б. Войтенков, И.Г. Попович, А.В. Арутюнян и др.//Успехи геронтол. - 2008. -Т. 21, № 1.-С. 53 -55.

2. Войтенков В.Б. Анксиолитический эффект введения препарата пептида дельта-сна/В.Б. Войтенков, И.Г. Попович, В.Н. Анисимов// Матер, конгресса с междунар. участием "Пароксизмальный мозг. Мультидисциплинарный подход к проблеме", СПб.: Изд-во СПб НИПНИ им. В.М. Бехтерева. - 2008. -

C. 97 - 98.

3. Войтенков В.Б. Влияние дельтарана на возрастную динамику некоторых биомаркеров старения и поведенческих реакций у мышей// В.Б. Войтенков, В.Н. Анисимов//Тез. докл. Всеросс. конф. "Перспективы фундаментальной геронтологии". - СПб.: Изд-во "Коста", 2006. - С. 28.

4. Войтенков В.Б. Возрастная динамика поведенческих реакций у мышей и анксиолитические эффекты пептида деЛьта-сна/В.Б. Войтенков, И.Г. Попович//Вестн. СПбГМА им.И.И. Мечникова. - 2007, № 4. - С. 142 - 144.

5. Войтенков В.Б. Регуляция пептидом дельта-сна процессов перекисного окисления липидов в мозгу и печени мышей в условиях нормального и постоянного освещения/В.Б. Войтенков, И.Г. Попович// Тез. докл. III научно-практ. геронтологической конф. с международным участием "Пушковские чтения", СПб.: Изд-во "Спектр". - 2007. - С. 171.

6. Войтенков В.Б. Регуляция препаратом петида дельта-сна окислительных процессов в мозгу и печени мышей линии SHR при различных режимах освещения. Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины // Тез. V конф. молодых ученых России с международным участием. - М.: Изд-во ММА им. И.М. Сеченова. - 2007. - С. 91 - 92.

7. Voytenkov V. Influence of preparation of delta-sleep inducing peptide "Deltaran" on age-related changes of some aging biomarkers and behavioral reactions in mice/V.Voytenkov, I. Popovich// Abstr. VI European Congress «Healthy and active ageing for all Europeans» International association of gerontology and geriatrics, 5-8 July, 2007. Adv. in Gerontology. - 2007. - Vol. 20, № 3 - P. 75.

ВОЙТЕНКОВ Владислав Борисович ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДА ДЕЛЬТА-СНА НА ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТЬ ЖИЗНИ И РАЗВИТИЕ ОПУХОЛЕЙ У МЫШЕЙ И Автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.53. - СПб., 2009. - 22 с.

Подписано в печать 18.03.2009. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Печать офсетная. Печ. л. 1,0.

_Тираж 100 экз. Заказ ._

Отпечатано с готового оригинал-макета. ЗАО «Принт -Экспресс» 197101. С.-Петербург, ул. Большая Монетная, 5 лит. А

Оглавление диссертации Войтенков, Владислав Борисович :: 2009 :: Санкт-Петербург

Введение.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Геропротекторы.

1.2. Пептидные биорегуляторы.

1.3. Дельта-сон индуцирующий пептид.

1.3.1. Химическая структура и характеристика.

1.3.2. Дельта-сон индуцирующий пептид в межмедиаторных взаимодействиях.

1.3.3. Дельта-сон индуцирующий пептид как ГАМК-ергический агент.

1.3.4. Дельта-сон индуцирующий пептид как антистрессорный и антиоксидантный агент.

1.3.5. Препарат на основе дельта-сон индуцирующего пептида и его эффекты в клинике.

ГЛАВА 2. Материал и методы исследования.

2.1. Препарат и пути введения.

2.2. Животные и их содержание.

2.3. Методика оценки двигательной активности мышей в тесте «открытое поле».

2.4. Методика изучения мышечной силы и физической утомляемости мышей.

2.5. Методика приподнятого крестообразного лабиринта.

2.6. Методика восьмилучевого радиального лабиринта.

2.7. Патоморфологическое исследование.

2.8. Методика определения воздействия дельтарана на процессы перекисного окисления липидов в норме и в условиях светового стресса.

2.9. Изучение влияния дельтарана на канцерогенез легких, индуцированный уретаном.

2.10. Изучение влияния дельтарана на канцерогенез легких, индуцированный бенз(а)пиреном.

2.11. Статистическая обработка результатов опытов.

ГЛАВА 3. Влияние дельтарана на биомаркеры старения и продолжительность жизни мышей.

3.1. Влияние дельтарана на массу тела мышей.

3.2. Влияние дельтарана на потребление корма и воды у мышей.

3.3. Влияние дельтарана на продолжительность жизни мышей.

ГЛАВА 4. Влияние дельтарана на показатели физической активности, мышечной силы и утомляемости, рабочую память и эмоциональный фон мышей.

4.1. Влияние дельтарана на возрастную динамику двигательной горизонтальной и вертикальной активности и ориентировочной реакции у мышей.

4.2. Влияние дельтарана на возрастную динамику мышечной силы и утомляемости у мышей.

4.3. Влияние дельтарана на эмоциональный фон и стресс-устойчивость у мышей.

4.4. Влияние дельтарана на показатели рабочей памяти у мышей.

ГЛАВА 5. Влияние дельтарана на окислительные процессы в норме и в условиях светового стресса у мышей.

ГЛАВА 6. Влияние дельтарана на спонтанный канцерогенез у мышей.

ГЛАВА 7. Влияние дельтарана на индуцированный канцерогенез легких и мягких тканей у мышей.

7.1. Влияние дельтарана на частоту, множественность и размеры опухолей легких, индуцированных уретаном у мышей.

7.1.1. Влияние дельтарана на патоморфологию опухолей легких.

7.2. Влияние дельтарана на канцерогенез опухолей мягких тканей, индуцированный бенз(а)пиреном у мышей.

7.2.1. Влияние дельтарана на частоту, множественность и размеры опухолей мягких тканей.

7.2.2. Влияние дельтарана на продолжительность жизни и выживаемость опухоленосителей.

7.2.3. Влияние дельтарана на патоморфологию опухолей мягких тканей.

ГЛАВА 8. Обсуждение.

Выводы.

Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Войтенков, Владислав Борисович, автореферат

Актуальность проблемы

В настоящее время происходит быстрое увеличение в популяции доли пожилых людей и рост связанной с возрастом патологии [Анисимов В.Н., 2003]. Именно поэтому поиск препаратов, обладающих способностью к замедлению процесса старения и повышению качества жизни пожилых, является одной из основных задач геронтологии и гериатрии.

В последние годы большое внимание уделялось изучению регуляторных пептидов - класса веществ, обладающих способностью к поддержанию стабильности функций организма в норме и при различных патологических процессах [Хавинсон В.Х., Анисимов В.Н., 2003]. К этому классу веществ относится и дельта-сон индуцирующий пептид (ДСИП), эндогенный нонапептид, открытый в 1976 г [Monnier М., Schoenenberger С.А., 1976]. ДСИП является нейропептидом [Стрекалова Т.В., 1998], участвующим в большинстве межмедиаторных взаимодействий [Михалева И.И., 2003].

Многочисленные экспериментальные исследования позволили установить, что наиболее важными физиологическими эффектами ДСИП в организме являются: регуляция процессов перекисного окисления липидов путем повышения выработки супероксиддисмутазы (СОД) и других ферментов антиокислительной защиты, стимуляция выработки тормозного медиатора - гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК), а также повышение сродства рецепторов к ней, продопаминергическое действие, антистрессорная активность, выражающаяся в снижении летальности и клинических проявлений при различных типах стресса, иммуномодулирующее и антидиабетическое действия, выраженный мембраностабилизирующий эффект, протективное действие при различных ишемических состояниях [Ульянинский JI.C. с соавт., 1992; Шандра A.A. с соавт., 1995; Сергутина A.B., Герштейн JI.M., 2000; Судаков К.В. с соавт.,2003; Умрюхин П.Е. с соавт., 2003].

Вещества с подобными эффектами часто обладают в силу своих биологических свойств геропротекторной активностью [Анисимов В.Н., 2003]. При изучении активности геропротекторов весьма важной является оценка различных параметров старения, а также физического и эмоционального состояния, отражающих общее состояние и качество жизни.

Сложное и разностороннее взаимодействие между процессами старения и канцерогенеза диктует необходимость изучения этих процессов в совокупности [Anisimov V.N., 1987]. Известно, что вещества, обладающие геропротекторной активностью, могут оказывать различное воздействие на канцерогенез: как усиливать, так и ослаблять его [Анисимов В.Н., 2003; Blask D.E. et al., 2004].

Действие ДСИП на спонтанный канцерогенез изучено недостаточно [Попович И.Г. с соавт., 2003], в связи с чем представляется обоснованным его исследование. Данные о влиянии ДСИП на индуцируемый канцерогенез отсутствуют.

Таким образом, изучение возможного геро- и онкопротекторного действия ДСИП с использованием моделей оценки физической силы выносливости, интеллектуально-мнестических качеств, эмоционального состояния подопытных животных, канцерогенов различного механизма действия и разной органной специфичности является весьма актуальным направлением экспериментальной геронтологии.

Цель исследования

Изучить влияние дельта-сон индуцирующего пептида на продолжительность и качество жизни мышей, процессы перекисного окисления липидов, спонтанный и индуцированный канцерогенез.

Задачи исследования

1) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на продолжительность жизни мышей.

6) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на спонтанный канцерогенез у мышей.

7) Изучить влияние препарата пептида дельта-сна на канцерогенез легких, индуцируемых уретаном у мышей.

Научная новизна

В работе впервые исследовано влияние препарата пептида дельта-сна на показатели поведения мышей в тестах «приподнятый крестообразный лабиринт», «восьмилучевой радиальный лабиринт», продемонстрировано его анксиолитическое и стресс-протективное действие. Показано, что препарат пептида дельта-сна обладает геропротекторной активностью с продлением жизни последних 10% мышей на 16%. В работе доказано, что постоянное освещение даже небольшой длительности приводит к достоверным сдвигам-процессов перекисного окисления липидов в организме подопытных животных. Продемонстрировано антиоксидантное действие препарата пептида дельта-сна в условиях постоянного освещения. Показано, что препарат пептида дельта-сна оказывает достоверное замедляющее действие на развитие спонтанных опухолей у мышей и канцерогенез легких.

Научно-практическая значимость работы

Полученные результаты могут служить экспериментальным обоснованием для дальнейшего изучения геро- и онкопротекторного потенциала препарата пептида дельта-сна, разработки научно-обоснованных рекомендаций по применению препарата, пептида дельта-сна в качестве геропротектора и с целью профилактики злокачественных новообразований.

Результаты исследования внедрены в научно-исследовательскую работу отдела канцерогенеза и онкогеронтологии НИИ онкологии им. H.H. Петрова.,

Положения, выносимые на защиту

1) Введение препарата пептида дельта-сна в дозе 5 мкг/мышь увеличивает среднюю продолжительность жизни последних 10% выживших мышей.

2) Препарат пептида дельта-сна оказывает достоверное стресс-протективное влияние на> поведение мышей в условиях теста открытого поля, достоверное анксиолитическое и стресс-протективное действие у мышей в условиях теста «приподнятый крестообразный лабиринт».

4) Препарат пептида дельта-сна повышает активность супероксиддисмутазы в головном мозгу и общей антиокислительной активности печени в условиях постоянного освещения.

Публикации

Связь с планом НИР

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 163 страницах, документирована 15 таблицами и иллюстрирована 23 рисунками. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, изложения

Заключение диссертационного исследования на тему "Влияние пептида дельта-сна на продолжительность жизни и развитие опухолей у мышей"

выводы

1. Препарат дельта-сон индуцирующего пептида дельтаран оказывает геропротекторное действие у мышей линии 8Ш1, достоверно удлиняя продолжительность жизни последних 10% животных на 16%. Увеличивается также средняя продолжительность жизни мышей без новообразований - на 4,6%.

5. Дельтаран оказывал угнетающее действие на спонтанный канцерогенез у мышей линии 81®., увеличивая сроки первого появления опухолей и продлевая среднюю продолжительность жизни мышей с опухолями.

Практические рекомендации

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Войтенков, Владислав Борисович

1. Анисимов В.Н. Физиологические функции эпифиза (геронтологический аспект) // Рос. физиологический журн. 1997. - Т.83, № 8. - С. 1-13.

2. Анисимов В.Н. Современные представления о природе старения // Успехи современной биол.- 2000.- Т. 120. С. 146-164.

3. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. -СПб.: Наука, 2003. 468 с.

4. Анисимов В.Н., Виноградова Г.А. Световой режим, мелатонин и риск развития рака // Вопр. онкол. 2006. - Т. 52, № 5. - С. 491-498.

5. Анисимов В.Н., Соловьев М.В. Эволюция концепций в геронтологии // СПб.: Эскулап, 1999. -130 с.

6. Анисимов В.Н., Арутюнян A.B., Хавинсон В.Х. Мелатонин и эпиталамин угнетают процесс перекисного окисления липидов у крыс // Доклады АН. -1996. Т. 348, № 2. - С. 265-267.

7. Анисимов В.Н., Батурин Д.А., Айламазян Э.К. Эпифиз, свет и рак молочной железы // Вопр. онкол. 2002. - Т.48, № 4-5,- С. 524-535.

8. Арутюнян A.B., Дубинина Е.Е., Зыбина H.H. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма. СПб., 2000. С. 34-37.

9. Арушанян Э.Б., Арушанян Л.Г. Эпифизарный мелатонин как антистрессорный агент // Экспер. и клин, фармакол. 1997. - Т.60, № 6. -С.71-77.

10. Ахундов P.A., Джафарова С.А., Алиев А.Н. Поиск новых противосудорожных агентов на основе никотинамида // Эксперим. и клиническая фармакология. 1992. - Т. 55, № 1.- С. 27-29.

11. Ашмарин И.П., Кругликов Р.И. Пептиды, обучение, память (принцип полифункциональности) //Нейрохимия. 1983. - Т.2, № 3.- С. 21-36.

12. Ашмарин И.П., Королева C.B., Мясоедов Н.Ф. Синактоны -функционально связанные комплексы эндогенных регуляторов // Эксперим. и клинич. фармакология. 2006. - Т.6, № 5.- С. 3-6.

13. Базян A.C. Взаимодействие медиаторных и модуляторных систем головного мозга и их возможная роль в формировании психофизиологических и психопатологических состояний // Успехи физиол. наук. 2001. - Т 32, № 3. - С. 3-22.

14. Бериташвили И.С. Память позвоночных животных М.: Наука. - 1974. -212 с.

15. Боголепов H.H., Коплик Е.В., Кривицкая Г.Н. и др. Структурно-функциональная характеристика нейронов сенсомоторной коры головного мозга у крыс с различной устойчивостью к эмоциональному стрессу // Бюл. эксп. биол. мед.-2001.-Т. 132, №8.-С. 124-128.

16. Болдырев A.A. Карнозин. Биологическое значение и возможности применения в медицине. М.: Изд-во МГУ. 1998. - 320 с.

17. Бондаренко Л.А. Современные представления и функции и физиологии эпифиза // Нейрофизиология. 1997. - Т.29, № 3. - С. 212-232.

18. Бондаренко Т.И., Калмыкова Ю.А., Шустанова Т. А. и др. Фармакологическая эффективность дельта-сон индуцирующего пептида при экспериментальном остром панкреатите // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2002. - Т. 65, №2. - С.:44-48.

19. Бондаренко Т.И., Кричевская A.A., Крупенникова Е.Ю. и др. Влияние пептида дельта-сна на состояние мембран эритроцитов при действии низких температур//Физиол. журнал СССР.- 1985.-Т.71, №3.- С.279.

20. Бондаренко Т.И., Кричевская A.A., Шейкина И.В. и др. Влияние пептида дельта-сна на содержание адреналина в тканях крыс в норме и при действиихолодового стресса // Украинский Биохимический Журнал. 1990. - Т.62, № 5.-С. 34-38.

21. Бондаренко Т.И., Милютина Н.П., Михалева И.И. и др. Мембраностабилизирующий эффект дельта-сон индуцирующего пептида при стрессе. // Бюл. эксп. биол. мед. 1998. - Т. 112, № 9.- С. 325-327.

22. Брусенцов А.И., Мороз В.В., Супрун С.А. и др. Изменения бластогенной трансформации лимфоцитов у крыс в условиях пикротоксинового киндлинга //Росс, физиол. журнал им. И.М. Сеченова. 1998. - Т. 84, № 3.- С. 233-237.

23. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д.П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. // М., «Высшая школа», 1991.420 с.

24. Буров Ю.В., Юхананов Р.Ю., Майский А.И. Содержание пептида, индуцирующего дельта-сон (DSIP) в мозге крыс с различным уровнем алкогольной интоксикации // Бюл. эксп. биол. мед. 1982. - Т. 94, № 9.- С. 67-70.

25. Виленский Д.А., Левицкая Н.Г., Андреева Л.А и др. Влияние хронического введения семакса на исследовательскую активность и эмоциональное состояние белых крыс // Росс, физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 2007. - Т. 93, № 6. - С. 661-669.

26. Виноградова И.А. Сравнительное изучение влияния различных световых режимов на психоэмоциональные проявления и двигательную активность крыс // Вестник НГУ. 2006. - Т. 4, № 2. - С. 69-77.

27. Войтенков В.Б., Борисова Е.В. Опыт применения препарата дельтаран (пептида дельта-сна) в комплексной терапии бокового амиотрофического склероза \\ Росс, биомед. журн.- 2005. .Т. 6. - С. 515-520.

28. Войтенко H.H. Влияние пренатального повышения уровня дельта-сон индуцирующего пептида на агрессивное поведение в тесте резидент-интрудер и на моноаминоксидазу мозга среднеагрессивных мышей А/Не // Нейрохимия. 2007. - Т. 24, № 3. - С.224-231.

29. Ворлоу Ч.П., Деннис М.С., Ван Гейн и др. Инсульт: практическое руководство для ведения больных // М.: Политехника. 1998. - 629 с.

30. Воробьев В.В., Шибаев Н.В., Прудченко И.А. и др. Частота и структура биоэлектрической активности мозга крыс под действием пептида дельта-сна и его аналогов // Журн. высш. нервной деят. им. И.П. Павлова. 1992. - Т. 42, № 5.- С. 977-985.

31. Воскресенская О.Г., Ким П.А., Голубович В.П. и др. Антидепрессантное действие тетрапептида Ac-D-Met-Pro-Arg-Gly при его остром и хроническом введении крысам // Бюлл. экспер. биол. мед. 1999. - Т. 141, № 3. С. 345-347.

32. Гайдарова Е.В., Кузнецов И.Э., Натрус Л.В. Морфофункциональные изменения нейронов аденогипофизарной зоны гипоталамуса при действии низкой температуры окружающей среды // Архив клинической и экспериментальной медицины. -1999.- Т.8., № 1. С. 69-76.

33. Герштейн JI.M., Доведова Е.Л., Хрусталев Д.А. Морфохимическая характеристика структур мозга крыс после воздействия дельта-сон индуцирующего пептида на фоне хронического введения амфетамина // Морфология. 2004. - Т. 125., №3. - С.74-77.

34. Герштейн Л.М., Сергутина A.B., Рахманова В.А. Морфохимическое исследование гиппокампа крыс Август при системном действии амфетамина и введении на его фоне пептида дельта-сна // Бюл. эксп. биол. мед. 2006. - Т. 141, №4.- С. 455-457.

35. Герштейн Л.М., Сергутина A.B., Рахманова В.А. Морфохимические проявления хронического действия амфетамина в мозгу и их коррекция с помощью пептида дельта-сна//Биохимия.- 1993.- Т. 8. С. 555-557.

36. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1998. 459 с.

37. Головкин В.И. Клиническое изучение дельта-сон индуцирующего пептида (ДСИП) в комплексной терапии нейробореллиоза // Росс, биомед. журн. 2001. - Т. 2.- С. 50.

38. Головкин В.И. Клиническое применение дельта-сон индуцирующего пептида (ДСИП) при рассеянном склерозе // Росс, биомед. журн. 2001. - Т. 2. - С. 52.

39. Горизонтов П.Д. Общая характеристика и значение реакции стресса // Вестник АМН СССР. 1975. - Т. 8. - С.ЗО - 35.

40. Григорьев В.В., Иванова Т.А., Кустова Е.А. и др. Действие дельта-сон индуцирующего пептида на пре-и постсинаптические структуры в нейронах коры, гиппокампа и мозжечка головного мозга крыс // Бюл. эксп. биол. мед. -2006. Т. 142, № 8.- С. 149-152.

41. Грицюте JI.A. Экспериментальные опухоли легких. М.: «Медицина», 1975.- 145 с.

42. Грицюте JI.A. Об экспериментальных опухолях легких, вызванных у мышей уретаном //Вопросы онкологии. 1955. - Т. 8.- С. 18-25.

43. Гублер Е.Г. Количественные методы анализа результатов медицинских исследований. Д.: Медицина, 1978. - 296 с.

44. Гурчин Ф.А., Гурчин А.Ф., Королева Н.Ю. и др. Использование препарата «Дельтаран» у больных эпилепсией // Нейроиммунология. 2002. -С. 75-77.

45. Дмитриев Г., Бонитенко Е.И., Иванов М., Башарин В. Экспериментальное обоснование применения пептидных препаратов в практике спортивной фармакологии // Росс, биомед. журнал. 2006. - Т. 7, № 5. - С. 47-54.

46. Доведова E.JI. К механизму действия пептида дельта-сна на фоне введения L-ДОФА // Бюл. эксп. биол. мед. 1989. - Т. 107, № 4. - С. 440-442.

47. Доведова E.JI., Ашмарин И.П. Действие «пептида дельта-сна» на активность моноаминоксидаз и ацетилхолинэстеразы в субклеточных фракциях из различных образований кролика in vivo // Бюл. эксп. биол. мед. -1982.-Т. 94, №5.-С. 56-58.

48. Дильман В.М. Четыре модели медицины. М.: Медицина, 1987. - 288 с.

49. Дубина Т.Л., Разумович А.Н. Введение в экспериментальную геронтологию. Минск. Наука и техника. - 1975. - 168 с.

50. Дюмаев K.M., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС.- М.: Медицина, 1995. 125 с.

51. Зенков Н.К., Мельникова Е.Б. Особенности развития окислительного стресса при патологии нервной системы // Бюл. эксп. биол. мед. 1994. -Т.113, №2. С.- 207-210.

52. Зарубина И.В., Нурманбетова Ф.Н., Шабанов П.Д. Антигипоксанты при черепно-мозговой травме. Спб.: Элби-Спб. 2006. - 207 с.

53. Иванов М.Б., Башарин В.А., Бонитенко Е.Ю. Фармакологическая коррекция острого тяжелого отравления этанолом // Росс, биомед. журнал. -2005.-Т. 5.- С. 456-464.

54. Иванов М.Б., Башарин В.А., Бонитенко Е.Ю. и др. Влияние дельта-сон индуцирующего пептида на ГАМКА-рецепторные структуры в эксперименте // Росс, биомед. журнал. 2006. - Т. 6. - С. 672-682.

55. Казаков В.Н., Снегирь М.А., Снегирь А.Г. и др. Пути взаимодействия нервной, эндокринной и иммунной систем в регуляции функций организма. // Архив клинической и экспериментальной медицины. 2004.- Т. 13, № 3. - С. 3-10.

56. Карманова И.Г., Максимук В.Ф., Воронцов И.В. и др. Анализ действия нейропептида, вызывающего дельта-сон у кошек и белых крыс \\ Журн. эволюционной биохимии и физиологии. 1986. - Т. 15, № 5. - С. 588-589.

57. Карпенко Л.Д., Ароян Е.В., Менджерицкий А.М., Филин H.H. Эффект дельта-сон индуцирующего пептида и серотонина на нейроны улитки // Журн. высш. нервной деят. им. И.П. Павлова. 1994. - Т. 44, № 2. - С. 342-347.

58. Ковальзон В.М. Гипногенные свойства аналогов пептида Б81Р: структурно-функциональные взаимоотношения // Известия АН, сер. биол. -2001.-№4.-С. 467-474.

59. Ковальзон В.М., Стрекалова Т.В. Дельта-сон индуцирующий пептид -тридцать лет спустя. Нейрохимия. -2006. Т. 23, № 4. - С. 1-7.

60. Ковальзон В.М., Цибульский В.Л. Имеются ли гипногенные свойства у синтетического пептида, вызывающего дельта-сон? // Журн. Высшей нервной деятельности. 1980. - Т. 30, №. 5. - С.1064-1066.

61. Козлов М.В., Урнышева В.В., Шишкина Л.Н. Взаимосвязь параметров системы регуляции перекисного окисления липидов и морфофизиологических показателей печени мышей // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. 2008. - Т. 44, № 4. - С.398-402.

62. Козловская Г.В., Калинина М.А., Голубева Н.И. Дельтаран новый нейропептид в лечении пограничных психических нарушений у детей // Росс, биомед. журнал. - 2005. - Т. 6.- С. 648-661.

63. Комаров Ф.И., Рапопорт С.И., Малиновский Н.К. Мелатонин в норме и патологии. М.: 2004. - 321 с.

64. Коплик Е.В., Судаков К.В. Эффекты септальных повреждений на уровни бета-эндорфина и дельта-сон индуцирующего пептида в гипоталамусе и крови крыс, подвергнутых эмоциональному стрессу // Новости медико-биол. наук. 2004. - № 2. - С. 5-12.

65. Коплик Е.В., Урбанич Р. Пептид, вызывающий дельта-сон, в механизмах изменения кровотока в коре головного мозга, вызванного раздражением вентромедиального гипоталамуса и корковоых структур // Проблемы физиологии гипоталамуса. 1987. - Вып. 21. С. 82-87.

66. Коплик Е.В., Хованская Т.П. Динамика уровня серотонина и гистамина в условиях острого эмоционального стресса у крыс на фоне введения пептида дельта-сна // Эмоции и поведение: системный подход. М. 1984. С.311-312.

67. Коплик Е.В., Ведяев Д.Ф., Михалева И.И. Пептид дельта-сна как фактор, повышающий устойчивость животных к эмоциональному стрессу // Докл. АН СССР. 1982.- Т.267. № 1.С.230-233.

68. Коплик Е.В., Грызунов Ю.А., Добрецов Г.Е. Альбумин крови в механизмах индивидуальной устойчивости крыс к эмоциональному стрессу //Рооссийский физиологический журнал им. И.М. Сеченова,- 2002. Т.88, № 6.-С. 707-714.

69. Коплик Е.В., Салиева P.M., Горбунова A.B. Тест открытого поля как прогностический критерий устойчивости к эмоциональному стрессу крыс линии Вистар // Журн. высшей нервной деятельности. 1995. - Т. 45.- С. 775781.

70. Костарев С.И. Опыт применения препарата «Дельтаран» в практической нейрохирургии // Росс, биомед. журнал. 2005. - Т. 6.- С. 130-131.

71. Крушинский JI.B. Формирование поведения животных в норме и патологии. М.: Наука. 1960. 260 с.

72. Крыжановский Г.Н. Пластичность в патологии нервной системы // Журнал неврологии и психиатрии. 2001. - № 2. - С.4-6.

73. Крыжановский Г.Н., Шандра A.A., Годлевский JI.C. и др. Явления паркинсонического синдрома при введении дельта-сон индуцирующего пептида в черную субстанцию крыс // Бюл. эксп. биол. мед. 1990. - Т. 107, № 1.-С. 119-121.

74. Крыжановский Г.Н., Шандра A.A., Годлевский Л.С. и др. Влияние пептида дельта-сна на эпилептическую активность в коре большого мозга крыс и кошек. // Бюл. эксп. биол. мед. 1987. - Т. 104, № 11. - С. 582-585.

75. Кузник Б. И., Морозов В. Г., Хавинсон В. X. Цитомедины: 25-летний опыт экспериментальных и клинических исследований. СПб.: Наука, 1998. -310 с.

76. Куценко С.А. Основы токсикологии // Росс, биомед. журнал. 2006. - Т. 4. -С. 188-284.

77. Лебедева Н.В. Ноотропы в неврологии //Фармакология ноотропов: экспериментальное и клиническое изучение. М., 1989. С. 125-128.

78. Лысенко A.B., Альперович Д.В., Ускова Н.И. и др. Особенности метаболического обеспечения адаптогенных эффектов дельта-сон индуцирующего пептида и пирацетама при гипероксии // Биохимия. 1999. -Т. 64, № 6. - С.782-789.

79. Лю Б.Н. Старение, возрастные патологии и канцерогенез. Алматы.: КазНТУ.- 2003. - 808 с.

80. Маклецова М.Г., Михалева И.И., Прудченко И.А. и др. Влияние дельта-сониндуцирующего пептида на биосинтез макромолекул в тканях головного • мозга грызунов, подвергнутых стрессу // Бюл. эксп. биол. мед. 2006. - Т. 141, №4.-С. 400-403.

81. Малышенко Н.М., Каштанов С.И., Брошкин C.B. и др. Сравнительный анализ изменений межцентральных взаимоотношений мозга при действии пептида дельта-сна и АКТГ //Физиол.журн. СССР. 1986. - Т. 72, № 1. - С. : 116-132.

82. Меерсон Ф.З., Сухих Г.Т., Михалева И.И. Предупреждение стрессорного снижения активности естественных киллеров оксибутиратом натрия и пептидом дельта-сна //Докл. АН СССР. 1984. - Т. 274, № 2. - С. 482-484.

83. Менджерицкий А.М., Лысенко A.B., Ускова Н.И. Протеолитические процессы в мозге и сыворотке крови крыс при гипокинезии и адаптивном влиянии дельта-сон индуцирующего пептида // Биохимия.- 1997. -Т 60, № 4. -С. 585-591.

84. Менджерицкий A.M., Лысенко A.B., Ускова Н.И. и др. Исследование механизма противосудорожного эффекта дельта-сон индуцирующего пептида в условиях повышенного давления кислорода // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1996. - Т. 82, № 1. - С.59-63.

85. Менджерицкий A.M., Маклецова М.Г., Карпухина И.М. ГАМК, глутаматдекарбоксилазная активность и глутамат мозга крыс с интрацистернальным введением ДСИП // Нейрохимия. - 1987. - Т.6, № 3. - С. 422-431.

86. Менджерицкий A.M., Михалева И.И., Матсионис А.Е. и др. Дельта-сон индуцирующий пептид как модулятор ультраструктуры синапсов // Морфология. 1994. - Т. 106, № 4-6. - С. 55-63.

87. Менджерицкий A.M., Ускова Н.И., Чораян И.О. и др. Хронобиологический эффект пептида дельта-сна и система ГАМК в мозгу крысы.// Нейрохимия. 1990. - Т. 9, № 2. - С.582-585.

88. Михалева И.И. Пептид дельта-сна: наш путь от мифического фактора сна к эффективному лекарственному препарату дельтаран // Росс, биомед. журнал. 2003. - Т. 3. - С.279-307.

89. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения). СПб.: Наука. 1996. - 74 с.

90. Морозов В. Г. Хавинсон В. X. Новый класс биологических регуляторов многоклеточных систем цитомедины // Усп. совр. биол. - 1983. - Т. 96. - С. 339-352.

91. Морозов В. Г., Хавинсон В. X., Малинин, В. В. Пептидные тимомиметики. СПб.: Наука, 2000. - 158с.

92. Назаренко И.В., Михалева И.И., Волков A.B. Влияние пептида дельта-сна на постреанимационное восстановление функций ЦНС // Фундаментальные проблемы реаниматологии. М., 2000. - С. 251-262.

93. Неговский В.А., Гурвич A.M., Золотокрылина Е.С. Постреанимационная болезнь. М.: Медицина, 1987. - 450 с.

94. Ноздрачев А.Д., Поляков E.JI. Начала физиологии. СПб.: Лань. 2001. -1088 с.

95. Обухова Л.К. Химические геропротекторы и проблема увеличения продолжительности жизни // Успехи химии. 1975.- Т. 44, № 10. - С. 19141925.

96. Обухова Л.К., Эмануэль Н.М. Роль свободнорадикальных реакций окисления в молекулярных механизмах старения живых организмов // Успехи химии. 1983. - Т. 52. - С. 353-372.

97. Олейник Т. Л., Разумовская А. М. Влияние эпиталона на возрастную динамику состояния сетчатки крыс при наследственной пигментной дистрофии // Бюл. эксп. биол. мед. 2001.- Т. 124, № 3. - С. 34-37.

98. Петров H.H. Руководство по общей онкологии. Медгиз, 1961. - 234 с.

99. Пименова Т.Н. Действие дельта-сон индуцирующего пептида на гемодинамику // Патол. физиол. эксп. тер. 1991. - Т. 6. - С. 16-28.

100. Платонов И.А., Яснецов В.В. Эффект дельта-сон индуцирующего пептида на развитие острого токсического отека мозга // Бюл. эксп. биол. мед. 1992.-Т. 114, № 11. - С. 463-464.

101. Помыткин И.А., Колесова O.E. Влияние естественной генерации тяжелых изотопологов воды на скорость генерации Н202 митохондриями // Бюл. эксп. биол. мед.-2006.-Т. 142, № 11. С. 514-516.

102. Попова Н.С., Доведова Е.Л. Амфетаминовая гиперфункция дофаминергической системы и пептид дельта-сна // Российский Физиологический журнал им. И.М. Сеченова.- 1998.- №1-2. С. 24-29.

103. Попова Н.С., Доведова E.J1. Системные, клеточные и молекулярные перестройки, обусловленные воздействием пептидов с разной опиоидной активностью // Физиол. журнал СССР. 1987. - Т. 75, № 6. - С.730-737.

104. Попова Н.С., Адрианов О.С., Бесков Р. и др. Влияние пептида дельта-сна на межцентральную интеграцию в условиях экспериментальной эпилепсии // Бюл. эксп. биол. мед. -1989. Т. 108. № 8. С. 147-150.

105. Попова Н.С., Доведова E.JL, Бесков Р. и др. Функциональные и биохимические перестройки в условиях гиперфункции дофаминовой системы// Физиол. журнал СССР. 1989. - Т. 75, № 8. - С.1075-1079.

106. Попович И.Г., Войтенков Б.О., Анисимов В.Н. и др. Влияние пептида дельта-сна на продолжительность жизни и развитие спонтанных опухолей у мышей // Доклады Академии Наук, 2003, Т. 388, № 5. С. 701-703.

107. Прудченко И.А., Сташевская J1.B., Михалева И.И. и др. Синтез и биологические свойства ряда новых аналогов пептида дельта-сна. I. Антиэпилептическое действие. // Биоорган, химия. -1993. Т. 19, № 1. - С.43-45.

108. Пшенникова М.Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии // Патолог, физиология и экспериментальная терапия. 2000-. Т. 2. -С. 24-31.

109. Рихирева Г.Т., Соколова И.С., Рылова А.В. и др. Изменения скорости биосинтеза белков в органах мышей при действии дельта-сон индуцирующего пептида и психоэмоционального стресса // Изв. РАН. 1995. -Т. 2.-С. 142-148.

110. Романенко В.И. Мелатонин как возможный эндогенный лейкемогенный (бластомогенный) агент // Гематол. Трансфуз. 1983. - Т. 2. - С. 47-50.

111. Романенко В.И. Сравнительная оценка бластомогенной активности метоксильных дериватов серотонина // Дисс. канд. мед. наук. Всесоюзный онкол. центр. -М.: 1985.

112. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новыхфармакологических веществ. Под ред. И.А. Хабриева М.: ИИА «Ремедиум»,f2000.-301 с.

113. Салиева P.M., Коплик Е.В., Каменев З.А., Полетаев А.Б. Пептид, вызывающий дельта-сон, в крови и гипоталамусе у крыс с различной устойчивостью к эмоциональному стрессу // Бюл. эксп. биол. мед. 1989. - Т. 10.- С. 264-266.

114. Салиева P.M., Коплик Е.В., Каменов З.А., Полетаев А.Г. Влияние бета-эндорфина и пептида, вызывающего дельта-сон, на устойчивость к эмоциональному стрессу // Бюл. эксп. биол. мед. 1989. - Т. 107. № 4. С. 464-466.

115. Семьянов A.B. Диффузная внесинаптическая передача посредством глутамата и ГАМК // Журнал высшей нервной деятельности. 2004.- Т. 3. -С.21-27.

116. Семьянов A.B., Годухин О.В. Клеточно-молекулярные механизмы фокального эпилептогенеза // Успехи физиол. наук. 2001. - Т. 32, № 1. - С. 60-78.

117. Сергутина A.B., Герштейн JI.M. Нейрохимическая характеристика действия дельта-сон индуцирующего пептида при гиперактивности дофаминергической системы крыс Вистар // Бюл. эксп. биол. мед. 2000. - Т. 130, № 11.-С. 536-538.

118. Сидельников В.О., Баткин A.A., Парамонов В.А. и др. Современные принципы патогенетической терапии ожогового шока // ВМЖ. 2003. - Т. 12. - С. 34-39.

119. Слепушкин В.Д., Пашинский В.Г. Эпифиз и адаптация организма. Томск: изд. ТУ, 1982.-210 с.

120. Стрекалова T.B. Дельта-сон индуцирующий пептид (ДСИП): проблемы эндогенного происхождения и биологической активности // Нейрохимия. -1998. Т. 15, № 3. - С. 227-239.

121. Судаков К.В. Системные механизмы эмоционального стресса. 1981. М.: Медицина.- 353 с.

122. Судаков К.В. Антистрессорные эффекты пептида, вызывающего дельта-сон. //Физиологич. ж. СССР им. И.М. Сеченова. 1991. - Т. 77. - С. 1-12.

123. Судаков К.В. Индивидуальная устойчивость к эмоциональному стрессу.- 1998. М.: Горизонт. 236 с.

124. Судаков К.В. Пептид, вызывающий дельта-сон, в церебральных механизмах эмоционального стресса // Журн. эволюц. биохим. и физиол. -2003. Т. 39, № 6. - С. 598-608.

125. Судаков К.В., Коплик Е.В., Салиева P.M. и др. Прогностические критерии устойчивости к эмоциональному стрессу // Эмоциональный стресс. Физиологические и медико-социальные аспекты. Харьков. 1990. С. 12-19.

126. Судаков К.В., Юматов Е.А., Душкин В.А. Генетические и индивидуальные различия сердечно-сосудистых нарушений у крыс при экспериментальном стрессе // Вестн. АМН СССР. 1981. - № 12. С.32-39.

127. Твердохлиб В.П., Коновалова Г.Г., Ланкин В.З., Меерсон Ф.З. Влияние адаптации к гипоксии на активность антиоксидантных ферментов в печени животных, перенесших стресс // Бюл. эксп. биол. мед. 1988. - Т. 106, №11.- С. 528-532.

128. Тодоров И.Н., Тодоров Г.И. Стресс, старение и их биохимическая коррекция. М: Наука, 2003.- 456 с.

129. Ульянинский Л.С., Звягинцева М.А. Симпатическая регуляция сердечного ритма дельта-сон индуцирующим пептидом и в условиях его дефицита // Бюл. эксп. биол. мед. 1991. - Т. 112, № 7.- С. 7-9.

130. Ульянинский Л.С., Архангельская М.И., Звягинцева М.А. и др. Пептид дельта-сна и его аналоги в регуляции сердечно-сосудистых функций:антистрессорное действие // Эксперим. и прикл. физиология. Психоэмоциональный стресс. 1992. - Т.1. С. 86-102.

131. Ульянинский Л.С., Иванов В.Т., Михалева И.И. и др. Пептид дельта-сна как модулятор сердечной деятельности: теоретические рекомендации для практики // Журн. косм. биол. и авиакосм, медицины. 1990. - Т.З.- С.23-28.

132. Умрюхин П.Е. Дизоцилпин и циклогексимид блокируют эффекты подавления пептидом дельта-сна экспрессии гена c-fos в паравентрикулярном ядре гипоталамуса у крыс// Новости медико-биологических наук. 2004. - Т. 2, - С. 49—52.

133. Умрюхин П.Е. Пептид, вызывающий дельта-сон, блокирует возбуждающие эффекты глутамата на нейронах мозга у крыс // Бюл. эксп. биол. мед. 2002.- Т. 134, № 7. - С. 9-12.

134. Умрюхин П.Е., Анохин К.В., Раевский К.С. Дизоцилпин блокирует эффекты подавления пептидом дельта-сна экспрессии гена c-fos в паравентрикулярном ядре гипоталамуса у крыс // Российский физиологический журн. им. И.М. Сеченова. -2003. Т.89., № 1.- С.3-7.

135. Ускова Н.И., Лысенко A.B., Менджерицкий A.M. Сравнительное изучение противосудорожных эффектов путресцина и структурных аналогов индуцирующего дельта-сон пептида // Вестник РАМН. 1996. - Т. 9. - С. 2730.

136. Фролькис В.В. Регулирование, приспособление и старение. Л.: Наука, 1970.-432 с.

137. Фролькис В.В., Мурадян Х.К. Экспериментальные пути продления жизни. Л.: Наука. 1988. - 248 с.

138. Хавинсон В.Х., Анисимов В.Н. Пептидная биорегуляция и старение. СПб.: Наука. 2003. - 223 с.

139. Хавинсон В.Х., Баринов В.А., Арутюнян A.B., Малинин В.В. Свободнорадикальное окисление и старение. СПб.: Наука, 2003. - 327 с.

140. Хавинсон В.Х., Шутак Т.С. Применение эпиталамина при инсулиннезависимом сахарном диабете // СПб.: ИКФ «Фолиант». 2000-61с.

141. Хавинсон В.Х., Морозов В.Г. Препараты эпифиза и тимуса в геронтологии. СПб. Цитомед. 1992. - 50 с.

142. Хавинсон В. X. Тканеспецифическое действие пептидов // Бюл. эксп. биол. мед. 2001. - Т. 132. - С.228 - 229.

143. Харитонов C.B., Плотникова H.A., Кемайкин С.П. Динамика изменений морфологических и биохимических показателей при коррекции индуцированного опухолевого роста антиоксидантами // Вестник Волгогр. ГМУ-2005. — № 1 (13).-С. 20-22.

144. Хватова Е.М. Клиническое изучение препарата «дельтаран» при лечении дисциркуляторной энцефалопатии атеросклеротического генеза // Росс, биомед. журнал. -2001. Т. 2. - С. 13-23.

145. Хрусталев Д.А., Доведова E.JI. Активность ферментов обмена некоторых биогенных аминов в структурах мозга крыс линии Август при действии пептида дельта-сна. // Нейрохимия. 2005. - Т. 22. - С. 44-49.

146. Худоерков P.M. Цитохимические и морфологические изменения нейронов головного мозга под влиянием пептида дельта-сна // Бюл. эксп. биол. мед. -1998.-Т. 126, №.1. С. 98-100.

147. Черкес JI.A., Аптекарь С.Г., Волгарев М.Н. Опухоли печени, вызванные селеном // Бюл. эксп. биол. мед. 1962. - Т. 53, № 3. - С. 78-83.

148. Шабалов Н.П., Скоромец A.A., Шумилина А.П. и др. Ноотропные и нейропротекторные препараты в детской неврологической практике // Вестник BMA. 2000. - Т. 2.- С. 37.

149. Шандра А.А., Годлевский JI.C., Брусенцов А.И. и др. Эффекты дельта-сон индуцирующего пептида в условиях ишемического повреждения головного мозга у крыс. // Росс, физиологич. журнал им. И.М. Сеченова. -1997. Т.83, № 3,- С. 95-99.

150. Шандра А.А., Годлевский JI.C., Вастьянов Р.С. и др. Роль дельта-сон индуцирующего пептида в формировании нейропатологических синдромов // Физиологич. журнал. 1995. - Т. 9. - С. 13-23.

151. Шандра А.А., Годлевский Л.С., Мазарати A.M. и др. Влияние дельта-сон индуцирующего пептида, противосудорожных препаратов и никотинамида на генерализованную судорожную активность// Бюл. эксп. биол. мед. -1989. -Т.107, .№2. -С.211-214.

152. Шандра А.А., Годлевский Л.С., Крыжановский Г.Н. и др. Влияние пептида дельта-сна на судорожную активность при коразоловом киндлинге // Бюл. эксп. биол. мед.- 1988.-Т. 106, №9.-С. 169-171.

153. Штеренго Г.Н. Экспериментальная физиология. М.: Мир. 1974. - 350 с.

154. Юматов Ю.А., Певцова Е.И., Мезенцева Л.Н. Физиологически адекватная экспериментальная модель агрессии и эмоционального стресса // Журн. высш. нерв, деятельности. 1988. - Т.38, №1. - С. 350-354.

155. Agnati L.F., Bjelke В., Fuxe К. Volume versus wiring transmission in the brain: a new theoretical frame for neuropsychopharmacology // Med. Res. Rev. -1995.-Vol.15. N. l.-P. 33-45.

156. Alperovich D.V., Lysjenko A.V., Matsionis A.E. et al. Biochemical mechanisms underlying neuroprotective effect of delta-sleep inducing peptide under hypoxia // Hyp. Med. J. 1997. - Vol. 5. N. 4. - P. 3-7.

157. Ames B.N., Shigenaga M.K., Hagen T.M. Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging. // Proc. Natl. Acad. Sci.- 1993.- Vol. 90, N. 17.- P. 7915-7922.

158. Anisimov V.N. Carcinogenesis and aging. Vol. 1,2. Boca Raton: CRC Press, 1987.- 148 p.

159. Anisimov V.N. Effects of exogenous melatonin a review // Toxicol. Pathol. - 2003. - Vol. 31, No. 6. - P. 589-603.

160. Anisimov V.N. The light-dark regimen and cancer development // Neuroendocrinol. Lett. 2002. - Vol. 23. - P. 28-36.

161. Anisimov V.N. Life span extension and cancer risk: myths and reality // Exp. Gerontol. 2001. - Vol. 36. - P. 1101-1136.

162. Anisimov V.N. Ageing and the mechanisms of carcinogenesis: some practical implications // J. Exp. Clin. Cancer. Res. 1998. - Vol. 17. - P. 264-268.

163. Anisimov V.N., Khavinson V.K., Morozov V.G. Immunomodulatory synthetic dipeptide L-Glu-L-Trp slows down aging and inhibits spontaneous carcinogenesis in rats // Biogerontology. 2000. - Vol. 1. - P. 55-59.

164. Anisimov V.N., Khavinson V.K., Morozov V.G. Twenty years of study on effects of pineal peptide preparation: Epithalamin in experimental gerontology and oncology. //Ann. N.Y. Acad. Sci. 1994. - Vol. 719. - P. 483-493.

165. Anisimov V.N., Zavarzina N.Y., Zabezhinski M.A et al. Melatonin increases both life span and tumor incidence in female CBA mice // J. Gerontol. Biol. Sci. -2001,-Vol. 56A.-P. B311-B323.

166. Andre M.A., Van Dijk, Guido A. Schoenenberger. Biochemical evidence for DSIP specific binding sites in the rat brain // Endogenous sleep substances and sleep regulation.-1984.Tokyo. JSC Press. P.167-178.

167. Arendt J. Melatonin and the Mammalian Pineal Gland // London, Chapman and Hall. 1995.-331 p.

168. Banks W.A., Kastin A.J., Coy D.H. DSIP crosses the blood-brain barrier in dogs: some correlations with protein binding // Pharmacol, biochem. behav. 1982. -V. 17, N. 5. - P. 1009-1014.

169. Barrington E.J.W. Evolutionary and comparative aspects of gut and brain peptides //Br. Med. Bull. 1982. - Vol. 38. - P. 227-232.

170. Bartsch C., Bartsch H., Blask D.E., Cardinali D.P., Hrushesky W.J.M., Mecke D. The pineal gland and cancer. Neuroimmunoendocrine mechanisms in malignancy (Eds.) // Berlin: Springer. 2001. - 578 p.

171. Barja de Quiroga G., Lopez-Torres M., Perez-Campo R. et al. Effect of cold acclimation on GSH, antioxidant enzymes and lipid peroxidation in brown adipose tissue // Biochem. J. 1991. - V.277. - P.289-293.

172. Bes F., Hofman, W., Schuur J., Van Boxtel C. Effects of delta sleep-inducing peptide on sleep of chronic insomniac patients. A double-blind study // Neuropsychobiology. 1992. - Vol. 26.- P. 193-197.

173. Bjartel A. Delta-sleep inducing peptide: a mammalian regulatory peptide. Localization, immunochemical characterization, biosynthesis and functional aspects. Lund, Sweden. 1990. - P.217.

174. Blask D.E. Melatonin in oncology / In: H.S. Yu, R.J. Reiter (Eds.), Melatonin biosynthesis, physiological effects, and clinical applications // CRC Press, Boca Raton, 1993, pp. 447-475.

175. Bodnar A.G., Ouellette M., Frolkis M., Holt S.E., Chiu C.P., Morin G.B., Harley C.B., Shay J.W., Lichtsteiner S., Wright W.E. Extension of life-span by introduction of telomerase into normal human cells // Science. 1998. - Vol.279.-P. 349-352.

176. Bohr V.A., Anson M.A., DNA damage, mutation and fine structure DNA repair in aging // Mutat. Res. -1995.- P. 25-34.

177. Bruley-Rosset M; Florentin I; Mathe G. Macrophage activation by tuftsin and muramyl-dipeptide. // Mol. and cellular biochem. 1981 - Vol. 41. - P. 113-8.

178. Burden R.H. Superoxide and hydrogen peroxide in relation to mammalin cell proliferation // Free Radic. Biol. Med. 1995. - Vol. 18. - P. 775-794.

179. Canuto R.A., Muzio G., Biocca M.E. et al. Lipid peroxidation in rat AH-130 hepatoma cells enriched in vitro with arachidonic acid // Cancer Res. 1991. - Vol. 51.-P. 4603-4608.

180. Cardinal R.N., Parkinson J.A., Hall J., Everitt B.J. Emotion and motivation: the role of the amygdala, ventral striatum, and prefrontal cortex // Neurosci. Biobehav. Rev. -2002.- Vol. 26.- P. 321-352.

181. Carr M.N., Bekku N., Yoshimura N. Identification of anxiolytic ingredients in ginseng root using the elevated plus-maze test in mice // Eur. J. Pharmacol. 2006. -Vol. 531. P. 160-165.

182. Charnay Y., Leger L., Golaz J. et al. Immunohistochemical mapping of delta-sleep inducing peptide in the cat brain and hypophisis. Relationships with the LHRH system and corticotropes // Journ. of Chemical Neuroanatomy. 1990. -V.3. - P. 397-407.

183. Charnay Y., Bouras C., Vallet P.G. et al. Immunohistochemical distribution of delta sleep-inducing peptide in the rabbit brain and hypophisis // Neuroendocrinology. 1989. - Vol. 4. P. 175-179.

184. Charnay Y., Bouras C., Vallet P.G et al. Immunohistochemical colocalisation of delta sleep-inducing peptide and luteinizing hormone-releasing hormone in rabbit brain neurons // Neurosci. 1989. - Vol. 31. P. 495-505.

185. Charnay Y., Vallet P.G., Guntern R. et al. Distribution of delta-sleep inducing peptide in the brain of rabbits: study by immunofluorescense // C. r. acad. sci. -1988,- Vol. 306. P. 529-553.

186. Chiodera P., Volpi R., Capretti L. et al. Different effects of delta-sleep-inducing peptide on arginine-vasopressin and ACTH secretion in normal men // Horm. Res. 1994. - Vol. 42, N. 6. - P. 267-272.

187. Chuhma N., Zhang H., Masson J. et al. . Dopamine neurons mediate a fast excitatory signal via their glutamatergic synapses // J. Neurosci. 2004. -Vol. 24. -P. 972-981.

188. Constantinidis J., Bouras C., Guntern R. et al. . Delta sleep-inducing peptide in the rat brain: an immunohistological microscopic study // Neuropsychobiology. 1983. -Vol.10 N2-3. -P 94-100.

189. Conti A., Haran-Ghera N., Maestroni G.J.M. Role of pineal melatonin and melatonin-induced-immuno-opioids in murine leukemogenesis // Med. Oncol. Tumor Pharmacother. 1992. - Vol. 9. - P. 87-92.

190. Cutler R. Oxidative stress: it's potential relevance to human disease and longevity determinants // Age. 1995. - Vol. 18. - P. 91-96.

191. Dajas F., Rivera-Megret F., Blasina F. et al. Neuroprotection by flavonoids // Braz. J. Med. Biol. Res.-2003.-Vol.36. N. 12. P. 1613-1620.

192. De Kloet. Hormones and stressed brain // Ann. N.Y. Acad. Sei. 2004. - Vol. 1018.-P. 1-15.

193. De Wied D. Neuropeptides in learning and memory processes // Behav. Brain Res. 1997. - Vol.83. - P. 83-90.

194. Dick P., Grandjean M.E., Tissot R. Successful treatment of withdrawal symptoms with delta-sleep inducing peptide, a neuropeptide with potential agonistic activity on opiate receptors // Neuropsychobiology. 1983,- Vol. 10.- P. 205-208.

195. Dilman V.M. Development, aging and disease. A new rationale for the intervention strategy // Chur. Harwood Academic Publ. 1994. - 387 p.

196. Dreher D., Junod A.F. Role of oxygen free radicals in cancer development // Eur. J. Cancer. 1996. - Vol. 32A. - P. 30-38.

197. Dunn A.J., Berrige C.W., Dunshem P. Behavioral tests: their interpretation and significance in the study of peptide action // Neuromethods. New York. -1987.- P. 229-247.

198. Edvinsson L., Minthon L., Ekman R. et al. Neuropeptides in cerebrospinal fluid of patients with Alzheimer's disease and dementia with frontotemporal lobe degeneration // Dementia and geriatric cognitive disorders. 1993. - Vol. 4, N. 3-4. -P. 57-63.

199. Ekman R., Larsson I., Malmquist M. et al. Radioimmunoassay of delta-sleep inducing peptide using an iodinated p-hydroxyphenylpropionic acid derivative as tracer // Regul. pept. 1983. - Vol. 6. - P. 371-378.

200. Emanuel L.M., Obukhova L.K. Types of experimental delay in aging patterns //Exp. Gerontol. 1978. - Vol. 13. - P. 25-29.

201. Evangelou A., Kalpouzos G., Karkabounas S. et al. Dose-related preventive and therapeutic effects of antioxidants-anticarcinogens on experimentally induced malignant tumors in Wistar rats // Cancer Lett. 1997. - Vol. 115. - P. 105-111.

202. Faure A., Reynolds S.M., Richard M.J. et al. Mesolimbic dopamine in desire and dread: enabling motivation to be generated by localized glutamate disruptions in nucleus accumbens // The Journ. of Neurosci. -2008.- Vol.28. N. 28. P. 71847192.

203. Feldman S. C., Kastin A. J. Localization of neurons containing immunoreactive delta sleep-inducing peptide in the rat brain: an immunocytochemical study //Neuroscience. 1984. - Vol. 2. - P. 303-317.

204. Ferreira M.L., Marubayashi U., Coimbra C.C. The medial preoptic area modulates the increase in plasma glucose and free fatty acid mobilization inducedby acute cold exposure // Brain Research Bulletin. 1999. - Vol. 49, N. 3. - P. 189-193.

205. Friedman T.C., Garcia-Borreguero D., Hardwick D. Decreased delta-sleep and plasma delta-sleep inducing peptide in patents with Cushing syndrome // Neuroendocrinology. 1994. - Vol. 60. - P. 626-634.

206. Fujiwara Y., Orkin S.H., Van Etten R.A. Essential role for the peroxiredoxin Prdxl in erythrocyte antioxidant defence and tumour suppression // Nature. -2003.- Vol. 424, N. 6948. P. 561-565.

207. Giusti M., Carraro A., Porcella E. et al. Delta sleep-inducing peptide administration does not influence growth hormone and prolactin secretion in normal women // Psychoneuroendocrinology. -1993. -Vol. 18, N. 1. P. 79-84.

208. Goldstein R. The involvement of arginine vasotocin in the maturation of kitten brain // Peptides. 1984. - Vol. 5. - P. 25-28.

209. Graf M.V., Kastin A.J. Delta-sleep inducing peptide (DSIP): an update // Peptides. -1986.- Vol.7. P.l 165.

210. Graf M.V., Zadina J.E., Schoenenberger G.A. Amphetamine-induced locomotoric behavior of mice is influenced by DSIP // Peptides. 1982. - Vol.3. P. 729.

211. Hall C.S. The method of open field // J. Comparative Psychology. 1934. - N. 18.-P. 385-403.

212. Hammer A., Ferro M., Tillian H.M. et al. Effect of oxidative stress by iron on 4-hydroxynonenal formation and proliferative activity in hepatomas of different degrees of differentiation // Free Radic. Biol. Med. 1997. - Vol. 23. - P. 26-33.

213. Harman, D. Aging: a theory based on free radical and radiation chemistry // Journ. of Geront. 1956. - Vol. 11. N3. P. 298-300.

214. Harman D. Free-radical theory of aging: increasing the functional life-span // Ann. N.Y. Acas. Sci. 1994. Vol. 717. P. 257-266.

215. Hamilton T. Influence of environmental light and melatonin upon mammary tumor induction // Br. J. Surg. 1969. - Vol. 56. - P. 764-766.

216. Hayflick L. The limited in vitro lifetime of human diploid cell strains // Exp. Cell. Res. 1965. - Vol. 37. - P. 614-637.

217. Heilig M., Sjogren M., Blennow K. et al. Cerebrospinal fluid neuropeptides in Alzheimer's disease and vascular dementia // Biol. Psychiatry. 1995. - Vol. 38, N. 4.-P. 210-216.

218. Hegbrant J., Thysell H., Ekman R. Elevated plasma levels of opioid peptides and delta sleep-inducing peptide but not of corticotropin-releasing hormone in patients receiving chronic hemodialysis // Blood Purif. 1991. - Vol. 9, N. 4. -P. 188-194.

219. Hosli E., Schoenenberger G. A., Hosli L. Autoradiographic localization of binding sites for the delta sleep-inducing peptide ( 3H.DSIP) on neurons of cultured rat brainstem // Brain research.-1983. Vol. 279, N 1-2. - P 374-376.

220. Iyer K.S., McCann S.M. Delta-sleep inducing peptide (DSIP) stimulates growth-hormone (GH) release in the rat by hypothalamic and pituitary actions // Peptides. 1987. - V. 8. - P.45-52.

221. Iyer K.S., McCann S.M. Delta sleep inducing peptide (DSIP) inhibits somatostatin release via a dopaminergic mechanism // Neuroendocrinology. 1987. -Vol. 46 - P.93-95.

222. Jaffe W. G. Carcinogenic Action of Ethyl Urethane on Rats // Cancer Res. -1947.-Vol. 7. P. 107-111.

223. Jerne K.N. Idiotypic networks and other preconceived ideas // Immunological Reviews 1984. -Vol. 79. - P. 5-24.

224. Joels M., Krugers J., Verkuyl J.M. Modulation of glutamatergic and GABA-ergic neurotransmission by corticosteroid hormones and stress // Handbook of stress and brain. 2005. - P. 525-544.

225. Jutkiewicz-Sypniewska J., Zembron-Lacny A., Puchala J. et al. Oxidative stress in burnt children // Adv. Med. Sci. 2006. - Vol. 51. P. 316-320.

226. Kafi S, Monnier M, Gallard JM. The delta-sleep inducing peptide (DSIP) increases duration of sleep in rats // Neurosci. Lett. -1979.- Vol. 13, N 2 P. 169172.

227. Karbownik M., Lewinski A., Reiter R.J. Anticarcinogenic actions of melatonin which involve antioxidative processes: comparison with other antioxidants // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2001. - Vol. 33. - P. 735-753.

228. Kawanishi S., Hiraku Y, Oilcawa S. Mechanism of guanine-specific DNA damage by oxidative stress and its role in carcinogenesis and aging // Mutat. Res.- 2001.- Vol. 488. N.l P. 65-76.

229. Khvatova E.M., Samartzev V.N., Zagoskin P.P. et al. Delta sleep inducing peptide (DSIP): effect on respiration activity in rat brain mitochondria and stress protective potency under experimental hypoxia // Peptides.- 2003. Vol. 24. N. 2. -P. 307-311.

230. Kedar N.P. Can We Prevent Parkinson's and Alzheimer's Disease? // Journ. of Postgraduate Medicine. 2003. - Vol.49, N.3. - P. 236-245.

231. Kelley A.E., Baldo B.A., Pratt W.E. et al. Corticostriatal-hypothalamic circuitry and food motivation: integration of energy, action and reward // Physiol. Behav. 2005. - Vol.86. - P. 773-795.

232. Kinsley C.H., Lambert K.G. The Maternal Brain. // Scientific American. -2006. Vol. 294, - P. 72-80.

233. Kohn R.R. Effect of antioxidants on life-span of C57BL mice // J. Geront. -1971.-Vol. 26.-P. 378-380.

234. Kovacs G.L., De Wied D. Peptidergic modulation of learning and memory processes // Pharmacol. Rev. 1994. - Vol. 4, N. 3. - P. 269-290.

235. Krieger D.T. An overview of neuropeptides. // Neuropeptides in neurologic and psychiatric disease. -1986. Raven Press, New York. - P. 1-32.

236. LaBella F.S., Vivian S. Effect of p-aminoproponitrile on prednisolone on survival of male LAFj mice // Exp. Geront. 1975. - Vol. 10. - P. 185-188.

237. Laszlo O. J. Antibacterial peptides isolated from insects // Journ. of Peptide Sci. 1994. - Vol. 6. N. 10, - P. 497 - 511.

238. Le Roith, Shiloach D., Berlowitz J. et al. Are messenger molecules in microbes the ancestors of the vertebrate hormones and tissue factors? // Fed. Proc.- 1983.—Vol. 42. P. 2602-2607.

239. Lev N., Ickowicz D., Barhum Y. et al. Experimental encephalomyelitis induces changes in DJ-1: implications for oxidative stress in multiple sclerosis // Antioxid. Redox. Signal. 2006. - Vol. 8, N. 11-12.- P. 1987-1995.

240. Lewis M.E., Khachaturian R.H., Sohafer M.K.H. et al. Anatomical approaches to the study of neuropeptides and related mRNA in he central nervous system // Neuropeptides in neurologic and psychiatric disease // Raven Press, New York. 1986.-P. 79-110.

241. Lindstrom L., Ekman R., Walleus H. et al. Delta-sleep inducing peptide in cerebrospinal fluid from schizophrenics, depressives and healthy volunteers // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 1985. - Vol. 9, N. 1. - P. 83-90.

242. Lipina L.Y., Mikchnevich N.V. Antibodies to delta-sleep inducing peptide in ultralow doses: effect on the behavior of male mice with anxiety and depressive syndrome. // Bull, of Exp. Biol, and Med., 2003. Suppl. 1, P.140-142.

243. Lipman R.D., Bronson R.T., Wu D. et al. Disease incidence and longevity are unaltered by dietary antioxidant supplementation initiated during middle age in C57BL/6 mice // Mech. Ageing Dev. 1998. - Vol. 103. P. - 269-284.

244. Loskutova L.V., Shtark L.B. Efficiency of ultralow doses of antibodies to SI00 protein and delta-sleep inducing peptide in rats with anxious depression. //Bull, of Exp. Biol, and Med., 2003. Suppl. 1, P. 20-22.

245. Maldonado-Irizzary C.S., Swanson C.J., Kelley A.E. Glutamate receptors in the nucleus accumbens shell control feeding behavior via the lateral hypothalamus // J. Neurosci. 1995. - Vol. 15. - P. 6779-6788.

246. Mathon N.F., Lloyd A.C. Cell senescence and cancer // Nat.Rev. Cancer. -2001.-Vol.1. P. 203-213.

247. Mariani E., Polidori M.C., Cherubini A. et al. Oxidative stress in brain aging, neurodegenerative and vascular diseases: an overview // Journ. of chromatography. -2005.-P. 1-11.

248. Mayevsky A., Ziv I. Oscillations of cortical oxidative metabolism and microcirculation in the ischemic brain // Neurol. Res. 1991. - Vol.13, N. 1. - P. 39-47.

249. McCay C.M., Crowell M.F., Maynard L.A. The effect of retarded growth upon the length of life span and upon the ultimate body size // J. Nutr. 1935. -Vol. 10.-P. 63-79.

250. Medina D., Shepherd E. Selenium-mediated inhibition of mouse mammary tumorigenesis // Cane. Lett. 1980. - Vol. 8. P. 241-245.

251. Miller R.A. Aging and immune function // Fundamental immunology. Raven publ. 1999. - P. 965-974.

252. Monnier M., Schoenenberger C.A. Characterization, sequence, synthesis and specificity of a delta (EEG) sleeping inducing peptide // Sleep/ Koella, Basel, 1976. -P. 257-263.

253. Monnier M., Dudler L., Geachter H. et al. Delta-sleep inducing peptide (DSIP): EEG and motor activity in rabbits following intravenous administration // Neurosci. Lett. 1977. - Vol. 6, N. 1,- P. 9-13.

254. Moon H.D., Simpson M.E., Li C.H., et al. Neoplasms in rats treated with pituitary growth hormone. III. Reproductive organs // Cancer Res. 1950.- Vol. 10.N.9.P. 549-556.

255. Najimi M., Bennis M., Moyses E., et al. Distribution of delta-sleep inducing peptide in the newborn and infant human hypothalamus: and immunohistochemical study // Biol. res. 2001. - Vol. 34. N 1. - P. 456-473.

256. Nakamura A., Nakashima M., Sakai K. et al. Delta-sleep-inducing peptide (DSIP) stimulates the release of immunoreactive Met-enkephalin from rat lower brainstem slices in vitro // Brain Res. 1989. - Vol. 481, N. 1. - P. 165-168.

257. Nemeroff C.B. The role of GAB A in the pathophysiology and treatment of anxiety disorders // Psychopharmacol. Bull. 2003. - Vol. 37. - P. 133-146.

258. Nettleship A., Henshaw P.S. Induction of pulmonary tumors in mice with ethyl carbamate (urethane) // J. National Cancer Inst. 1943. - Vol. 4. - P. 309-319.

259. Neumann C.A., Krause D.S., Carman C.V. et al. Background data and variations in tumor rates of control rats and mice // Prog. Exp. Tumor. Res. 1983. -Vol. 26.-P. 241-258.

260. Nishino T., Takeuchi T., Takechi T. et al. Evaluation of anxiolytic-like effects of some short-acting benzodiazepine hypnotics in mice // Journ. of Pharmacological Sci. 2008. - Vol. 107. - P. 349-354.

261. Noteborn H.P., Graf M.V., Ernst A. et al. Purification and characterization of DSIP-like material from ovine pineal glands: possible peptide-protein interaction // J. Pineal Res.- 1988. Vol.5. N. 2. P.161-177.

262. Nyberg F., Thornwall M., Hetta J. Aminopeptidase in human CSF which degrades delta-sleep inducing peptide (DSIP) // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1990.-Vol. 167.N.3.P. 1256-1262.

263. Oaknin S., Troiani M.E., Webb S.M. et al. Influence of delta-sleep inducing peptide on melatonin synthesis in the rat pineal gland // Neurosci. Lett. 1986. -Vol. 70. N. l.P. 127-131.

264. Olton D.S., Samuelson R.J., Remembrance of places passed: spatial memory in rats // J. Exp. Psychol. Anim. Behav. Proc. 2000. - Vol. 2. - P. 97-116.

265. Orr W.C., Sohal R.S. Extension of life-span by overexpression of superoxide dismutase and catalase in Drosophila melanogaster // Science. — 1994. Vol. 263. -P. 1128-1130.

266. Ouichou A., Zitouni M., Raynaud F. et al. Delta-sleep-inducing peptide stimulates melatonin, 5-methoxytryptophol and serotonin secretion from perfused rat pineal glands // Neurosignals. 1992. - Vol. 1. N. 2. P. 10-23.

267. Ouichou A., Pevet P. Implication of tryptophan in the stimulatory effect of delta-sleep-inducing peptide on indole secretion from perfused rat pineal glands // Biol. Signals. 1992. - Vol. 1. N. 2. P. 78-87.

268. Ozava D. Biphasic effect of thyrotropin-releasing hormone on membrane K+ permeability in rat colonal pituitary cells // Brain Res. 1981. - Vol. 209.- P. 240244.

269. Palmier R.D. Is dopamine a physiologically relevant mediator of feeding behavior? // Trends Neurosci. 2007. - Vol. 30. - P. 375-381.

270. Parpura V., Basarsky T.A., Liu F. et al., Glutamate-mediated astrocyte-neuron signalling //Nature. -1994. V.369, № 6483. - P. 744-747.

271. Pearse A.G.E. The cytochemistry and ultrastructure of polypeptide hormone-producing cells of the APUD series, and the embryologic, physiologic, pathologic implications of the concept // J. Histochem. Cytochem. 1969. - Vol. 17. - P. 303313.

272. Perry R.H. Dockray G.J., Dimaline R. Neuropeptides is Alzheimer's disease, depression and schizophrenia // J. Neurol. Sci. 1981. - Vol. 51, N. 3. - P. 465472.

273. Pierpaoli W., Maestroni G.J. Melatonin: a principal neuroimmunoregulatory and anti-stress hormone: its anti-aging effect // Immunol. Lett. 1987. - Vol. 16. — P. 355-361.

274. Pierpaoli W., Dall'Ara A., Pedrinis E. et al. The pineal control of aging: the effects of melatonin and pineal grafting on survival of older mice // Ann. NY Acad. Sci. 1991. - Vol. 621. - P. 291-313.

275. Puglisi-Allegra S., Cabib S. Pharmacological evidence for a role of D2 dopamine receptors in the defensive behavior of the mouse // Behav. Neural. Biol.- 1988.-Vol. 50.-P. 98-111.

276. Raessi S., Audus K.L. In vitro characterization of blood-brain barrier permeability to delta sleep-inducing peptide // Reprod. dev. 1989. - V. 29, N 6. -P. 689-702.

277. Reynolds S.M., Berridge K.S. Glutamate motivational ensembles in nucleus accumbens: rostrocaudal shell gradients of fear and feeding // Eur. J. Neurosci. -2003.-Vol.17.-P. 2187-2200.

278. Roth G.S., Ingram D.K., Cutler R.G. et al. Biological effects of caloric restriction in primates // Успехи геронтол. 1999. - Т. 3. С. 116-120.

279. Rudman D., Feller A.G., Nagraj H.S. et al. Effects of human growth hormone in men over 60 years old // N. Engl. J Med. 1990 - Vol. 323, N. 1. - P. 1-6.

280. Salvioli M., Bonafe M., Capri M. et al. Mitochondria, aging and longevity: a new perspective // FEBS Lett. 2001. - Vol. 492. - P. 9-13.

281. Sannie C. Carcinogenic action and absorption and fluorescence spectra of 1:2-benzpyrene // Biochem. Journ. 1936. - Vol. 30. N. 4. P. 704-706.

282. Scanziani M. GABA spillover activates postsynaptic GABA (B) receptors to control rhythmic hippocampal activity // Neuron. -2000. V.25. №3. P. 673-681.

283. Schoenenberger C.A., Schneider-Helmert D. Psychophysiological function of DSIP // Trends Pharmacol. Sei. 1983. - Vol.4. - P.307-318.

284. Scholle S., Zwacka G., Eckman R. et al. Plasma levels of DSIP in infants in the first year of life and SIDS risk // Regul. pept. 1992. - Vol. 39. - P. 29-33.

285. Schroeder H.A., Mitchener M. Selenium and tellurium in rats: effect on growth, survival and tumors // J. Nutr. 1971. - Vol. 101.- P. 1531 -1540.

286. Skulachev V.P. Aging and the programmed death phenomena // Topics in Current Cenetics Model systems in ageing.- 2003.- Springer-Verlag Berlin Heidelberg. P. 191-238.

287. Shandra A.A., Godlevskij L.S., Brusentsov A.I. et al. Delta sleep-inducing peptide, its analogs and the serotoninergic system in the development of anticonvulsant action. // Neurosci. Behav. Physiol. 1998. - Vol. 28, N. 5. - P.: 521-526.

288. Shandra A.A., Godlevskij L.S., Brusentsov A.I. et al. Effects of delta-sleep-inducing peptide on NMDA-induced convulsive activity in rats // Neurosci. Behav. Physiol. 1998. - Vol. 28, N. 6. - P. 694-697.

289. Shandra A.A., Godlevskii R.S., Vast'yanov A.I. et al. Effect of intranigral dosage with delta-sleep-inducing peptide and its analogs on movement and convulsive activity in rats // Neurosci. Behav. Physiol. 1996.- Vol. 26, N.6. - P. 567-571.

290. Shandra A.A., Godlevskii L.S., Mazarati A.M. et al. The influence of the delta-sleep-inducing peptide on convulsive activity // Neurosci. Behav. Physiol. -1993. -Vol. 23, N. 5. P. 480-485.

291. Schultz W. Behavioral dopamine signals // Trends Neurosci. 2007.- Vol. 30. P. 203-210.

292. Schulz P., Lustenberger S., Degli Agosti R. et al. Plasma concentration of nine hormones and neurotransmitters during usual activities or constant bed rest for 34 H // Chronobiol. Int. 1994. - Vol. 11, N. 6. - P. 367-380.

293. Sohal R.S. Role of oxidative stress and protein oxidation in the aging process // Free Radical Biol. Mad. 2002. - Vol. 33. - P 37-44.

294. Seidel G., Adermann K., Schindler T. et al. Solution structure of Porcine delta sleep-inducing peptide immunoreactive peptide A homolog of the shortsighted gene product // J. Biol. Chem. 1997. - V. 272, N. 49. - P. 30918-30927.

295. Schneider-Helmert D. DSIP in insomnia // Eur Neurol.- 1984. Vol. 23. N. 5. -P. 358-63.

296. Spoeth-Schwalbe E., Schoefer A., Uthgenannt D. et al. Delta-sleep-inducing peptide does not affect CRH and meal-induced ACTH and Cortisol secretion // Psychoneuroendocrinology. 1995. - Vol. 20. - P. 231-237.

297. Stanojlovich O.P., Zivanovic D.P., Susie V.T. The effects of delta sleep-inducing peptide on incidence and severity in metaphit-induced epilepsy in rats // Pharmacol Res. 2002. - Vol. 3. - P. 241-7.

298. Stanojlovich O.P., Zivanovic D.P., Mirkovic S.D. et al. Antiepileptic activity of delta-sleep inducing peptide and its analogue in metaphit-provoked seizures in rats. // Seizure. -2005.- Vol. 14, N. 4. P: 240-247.

299. Stenback F., Shubilc P. Carcinogen-induced skin tumorigenesis in mice: Enhancement and inhibition by ultraviolet light // Cancer Res. Clin. Oncol.-1973.- Vol. 79. N.4. P. 234-40.

300. Stratford T.R., Kelley A.E. Evidence of a functional relationship between the nucleus accumbens shell and lateral hypothalamus subserving the control of feeding behavior// J. Neurosci. 1999.-Vol. 19. P. 11040-11048.

301. Smith K.S., Berridge K.C. The ventral pallidum and hedonic. reward: neurochemical maps of sucrose "liking" and food intake // J. Neurosci. -2005. -Vol.25. P. 8637-8649.

302. Subramanian A., Kothari L.S. Suppressive effect by melatonin on different phases of 9,10-dimethyl-l,2-benzanthracene (DMBA)-induced rat mammary gland carcinogenesis // Anticancer Drugs. 1991. - Vol. 2. - P. 297-303.

303. Subramanian A., Kothari L. Melatonin, a suppressor of spontaneous murine mammary tumors//J. Pineal Res. 1991.-V. 10.-P. 136-140.

304. Sudakov K.V., Umryukhin P.E., Koplik E.V. et al. Delta-sleep inducing peptide (DSIP) and AKTH (4-10) analogue influence fos-induction in the limbic structures of the rat brain under emotional stress // Stress. -2001. Vol. 1- P. 11-17.

305. Sudakov K.V., Umryukhin P.E., Rayevsky K.S. Delta-sleep inducing peptide and neuronal activity after glutamate microiontophoresis: the role of NMDA-receptors // Pathophysiology. 2004. - Vol. 11. - P. 81-86.

306. Taber M.T., Fibiger H.C. Feeding-evoked dopamine release in the nucleus accumbens: regulation by glutamatergic mechanisms// Neuroscience. 1997. - Vol. 76.-P. 1105-1112.

307. Tabler J., Borbely A.B. Effects of delta-sleep inducing peptide (DSIP) and arginine vasolocin (AVT) on sleep and motor activity in the rat // Waking Sleeping. -1980.-N4. P. 139-153.

308. Timiras P.S. Physiological basis of aging and geriatrics // CRC Press. 2003. -432 p.

309. Wise R.A. Role of brain dopamine in food reward and reinforcement // Philos Trans R Soc Lond B. Biol. Sci. 2006. - Vol. 361. P. 1149-1158.

310. Todorov I.N. Public enemy number 1 -stress: a practical guide to the effects of stress and nutrition on the aging process and life extension. N.Y.: Nova Sci. Publ., 2001. 247 p.

311. Turusov V.S., Mohr U. (Eds.) Pathology of Tumours in Laboratory Animals. Vol. I. Tumours of the Mouse. 2nd ed. IARC Sci. Publ. No. 111. Lyon: IARC, 1994.

312. Tsunashima K., Kato N., Masui A. et al. The effect of delta sleep-inducing peptide (DSIP) on the changes of body (core) temperature induced by serotonergic agonists in rats // Peptides. 1994. - Vol. 15. N.l. P. 61-65.

313. Okajima T., Hertting G. Delta-sleep inducing peptide (DSIP) inhibited GRF-induced ACTH-secretion from rat anterior pituitary gland in vitro // Hormone and Metabolic Res. 1987. - V. 18. - P. 497-503.

314. Van Dijk A.M., Schoenenberger G.A. Endogenous Sleep substances and Sleep Regulation, ed. S. Inoue and A.A. Borbely // Utrecht: VNU Science Press. -1985.- P. 167-178.

315. Vallet P.G., Charnay Y., Boura C. et al. Colocalisation of delta sleep inducing peptide and luteinizing hormone releasing hormone in neurosecretory vesicles in rat median eminence // Neuroendocrinology. 1991. - Vol. 53. P.103-106.

316. Vgontzas A.N., Friedman T.C., Chrousos G.P. et al. Delta sleep-inducing peptide in normal humans and in patients with sleep apnea and narcolepsy // Peptides.-1995.- Vol. 16,N. 6 P.l 153-1156.

317. Waldhauzer F., Kovacs J., Riter E. Age-related changes in melatonin levels in humans and its potential consequences for sleep disorders // Exp. Geront. 1998. -Vol. 33.-P. 759-772.

318. Walleus H., Widerlov E., Ekman R. Decreased concentrations of delta-sleep inducing peptide in plasma and cerebrospinal fluid from depressed patients // Nordic J. Psychiat. 1985. - Vol. 39. Suppl. 11. - P. 63.

319. Watson S.J., Akil H. Immunocytochemistry of peptides // Strategies for studying the role of peptides in neuronal function. 1983. - Soc. for Neurosci. Washington, D.C. - P. 83-92.

320. Wei Y.H. Oxidative stress and mitochondrial DNA mutations in human aging //Proc. Soc. Exp. Biol.and Med., 1998. Vol. 41, № 3. P. 311-318.

321. Weindruch R., Sohal R.S. Caloric intake and aging // The New Engl. J. Med. 1997. - Vol. 337. - P.986-994.

322. Weindruch R., Walford R. The retardation of aging and disease by dietary restriction // Springfield, III.: C.C. Thomas. 1988. - 310 p.

323. Westrin A., Engstom G., Ekman R. et al. Correlations between plasma-neuropeptides and temperament dimensions differ between suicidal patients and healthy controls // Journal of affective disorders. 1998. - Vol. 49, N. 1.- P. 45-54.

324. Wikkelso C., Ekman R., Westergren I. et al. Neuropeptides in cerebrospinal fluid in normal-pressure hydrocephalus and dementia // Eur. Neurol. -1991. Vol. 31,N. 2.-P. 88-93.

325. Willner P. The validity of animals models of depression // Psychopharmacology. -1984.-Vol. 83, N. l.-P. 1-16.

326. Yaraf M., Kastin A.J. Delta-sleep inducing peptide (DSIP) -like material exists in peripheral organs of rats in large dissociable formsW Proc. Soc.Exp.Biol.Med.- 1984.- V.177. № 1.- P.197-204.

327. Yehuda S., Mostofsky D.I. Circadian effects of beta-endorphin, melatonin, DSIP, and amphetamine on pentylenetetrazol-induced seizures // Peptides. -1993. -Vol.14, N. 2.-P. 203-205.

328. Young A.M., Key B.J. Antagonism of the effects of DSIP by naloxone in rats // Neuropharmacol. 1985. - Vol. 23, N. 7. - P. 1347-1350.

329. Zlokovic B.V., Susie V. T., Davson H. et al. Saturable mechanism for delta sleep-inducing peptide (DSIP) at the blood-brain barrier of the vascularly perfused guinea pig brain // Peptides. 1989. - Vol. 10, N. 2. - P. 249-54.

330. Zs-Nagi I., Harman D., Kitani K. Pharmacology of aging process. Methods of assessment and potential interventions // Ann. NY. Acad, of Sei. 1994. - Vol.717. - P. 456-467.J