Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Влияние неионогенных поверхностно-активных веществ Стеарокс-920 и ОС-20 на иммунную систему

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ КАЗАХСКОЙ ССР

ШЧНО-1ШТВДОЕШШЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЗШ-ЦЕйШОШ, МИКРОБИОЛОГОМ И Ш5ЕКЩЖНЫХ БОЛЕЗНЕЙ

На прапах рукописи

Е^ЕАПОВА Санкя Туржбенойз

ш 616.-056:612.017.11/12

ВЛИЯНИЕ НЕКОЯОГЕКНЫХ ПОВЕРХНОИНО-АКШЕШ ВЕЩЕСТВ СТЕАР0НС-920 И 0С-20 НА 1ШУННЛ) СИСГЗ'У

(Спещ!2лы1сс?ь 14.00.35 - Аллергология и югмунологпя)

АВТОРЕЗ'-ЕРАТ

диссертации на соискание учете'! степени кандидата кедкккнкаис каук

ДИА-АТА - 91 г.

Работа выполнена в Актюбинском государственной' кедицннском институте I ректор - профессор А.С.&тагуло:

НАУЧНЫЙ РЯЮВОдаЗЕЛЬ РАБОТЫ: доктор медицинских наук профессор К.У.Касеиов.

ОйЩАЛЫШЕ ОППОНЕНТЫ:

1. Доктор медицинских наук профессор С.М.Плешсова.

2. Кандидат медицинских наук с.н.с. Н.А.Сатыбалдиева

ОДУЩЕЕ УЧРЕ2Д2НИЕ: 2 Московский медицинский институт Ем.Н.И.Пирогова. Защита состоится " ^ " 19Э1г. на

заседании специализированного совета К 079.05.01. при Казахском НИИ апидемчологил, микробиологии и инфекционных болезней ( 480002,г.Алма-Ата, ул.Пастера, 3

С диссертацией иогно ознакомиться б научной библио ке института.

Автореферат разослан 0 " 1991г.

Учены? секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук,

ст.научней сотрудник К.Ы.Нуркина

:::- 'Актумшость_псоблеьи. Одаой аз важных задач современной амунОлогии является поиск икмуностимулируицих веществ с це-:ью повышения иммунного потенциала организма человека. По 1,ше-жа Р.В.Петрова, весьма перспективным является направление по юзданкп новых иммуностимуляторов на основе искусственного жктеза низкошлекулярных препаратов с иммуностныулирупщиш звойстваыи.

Интерес к различным неионогенным поверхностно-активным гещестЕам у специалистов в области медицинской биологии объясняется широким примененном их в технологических процессах с ;зльэ снижения статической электризации тела. Они использу-атся как дегазифицирующие и солюбилизирущие агенты на различных этапах вццеления биологически активных вецестз из клеток ■яйфоорганизмоз. Широко применяются в парфюмерной промышленности, входят в состав различных лекарственных препаратов, гекккгококковой вакцины, вакцины "Грипповая".

В то ~е время остается невыясненным вопрос элияния ПАВ та иммунную реактивность. Изучению данной проблемы посвкце-гы работы О.В. Давыдова и Т.В.Воронцовой (1975), Ю, С. Кривошейка и соаз. (1589,1990), И.Н.Топчиевой и соав. (1390),

В связи с вышеуказанным представляет интерес выяснение запроса об шяуностимуяирущем действии ПАВ, и в частности аеиоиогенных поверхкостно-актнвных веществ.

Дель_и_задачя исследовакад. Ц-эльо данной работы явилось изучение т^уиостяыулирущего еффекта НПАЗ Стеаронс-920 и ЭС-20 пр;: различных путях воздействия ка организм.

Для реализации такой цели были поставлены следующие ■ задачи:

1. Исследовать влияние НПАВ Стеарскс-920 и 0С-20 на продукции антител при иммунизации, как при накожном, так и инъекционном введении.

2. Определить влияние НПАВ на содержание блядкообразую-щих клеток в селезенке интактных животных.

3. Изучить влияние НПАВ на реакцию локального гемолиза на фоне изменений метеорологических условий.

4. Выяснить изменение популяционного состава лимфоцитов периферической крови при воздействии НПАВ.

Нападая новизна. Впервые нами, установлено, что НПАВы Стеарокс-920 и 0С-20 как при накоаном, так и при инъекционном введении сказываэт выраженный иммуноспшулирущий эффект

Также установлено, что препарат оксиэтидированной жирной кислоты Стеарокс-920 обладает более выраженным иммуностимулирующим действием, чем препарат оксиэтилированного высшего кирного спирта 0С-20.

Впервые нами установлено, что метеорологические условия оказывают влияние на содержание в селезенке подопытных животных антнтелообразунцих клеток (АОК) в реакши локального

гемолиза. Число их возрастало на фоне холодного атмосферного фронта и ветренной погоды, хотя животные постоянно находились ч отапливаемом помещении, лишенном сквозняков. Уменьшалось на фоне прохождения атмосферного фронта теплого типа. НПАВ оказывали иммуностимулирующий эффект при любых метеосиноптических условиях.

Определенный уровень электрического поля атмосферы, тесно связанный с состоянием атмосферных процессов, необходим для нормального функционирования иммунной системы. Искусственное сншшниэ его воздействия вызывало сбой в функциониро-

вании иммунной системы организма.

Правттееская_це!ЩОсть. Установление иммуностимулирующего эффекта НПАВ мояет найти применение в экспериментальной иммунологии, в вакцино-сывороточном производстве.

Установление факта неблагоприятного влияния искусственного снижения фона естественного ЗИП атмосферы на состояние иммунной системы долено привлечь внимание специалистов, интересующихся здоровьем я функциональным состоянием лиц, ис-. пнтыващих по роду своей деятельности ЭШ-экранирование(под-водная лодка, иногоыестныэ барокамеры, космический корабль и т.д.).

1Ьлоя:5Ш1я,_ЕНН£С1?же_на запятую

I. Наионогеиикэ ПАВ 0С-20 я Стеарокс-920 активярувт механизмы гуморального иммунитета, о чем свидетельствуют кратные увеличения продукции антител при ишунизации, количества антителосбразутщ клеток в селезенке, выявляемых по реакции локального гемолиза при добавлении в инкубируемую среду чужеродных эритроцитов и комплемента. Предварительное подкожное введение этих веществ увеличивает выход живых лимфоидных клеток иэ селезенки.

Z. Введение в органиол НПАВ ужз через I час вызывает значительный лейкоцитоз, прежде всего за счет увеличения количества лимфоцитов.„Лейко- и лиифоодтозы являются стойкими, сохраняются в течение 5 суток.

3. Меняется соотношение популяционного состава лимфоцитов периферической крови: в первые гее часы возрастает содержание нулевых клеток, в последующем практически постоянны обнаружение увеличения числа В- и Д-лимфоцитов»

4. Содержание или функциональная активность антитело-образующих клеток в селезенке вдтакпшх животных, находящихся

о.

в закрытом отапливаемом помещении, зависят от ряда метеорологических факторов. Опыты с электромагнитным ОМ) экранированием биологических объектов свидетельствует о том, что для нормального функционирования иммунной системы необходим определенный фон естественного электромагнитного поля (ЭМП) атмосферы. НПАВ активируют иммуннув систему вне зависимости от состояния метеорологических условий.

Вшущеше результатов исследования^ Данные о влиянии метеорологических факторов на результаты исследования состояния бляшкообраэования спленоцитами внедрены как нормати-" вы в экспериментальной иммунологии в ЦйИЛе Актабкнсксго медицинского института. .Данные об иммуностимулирующем эффекте НПАЕ используются в лекционной курсе кафедры патофизиологии АкШИ.

Ап£оба1р?я Еаботы^ По основные положениям диссертации авторои сделаны доклады:

1. На ХХУШ, XXIX научных конференциях профессорско-преподавательского состава Актабинского госмедкнстктута (1989, 1930гг.}.

2. На межобластной конференции "Молодые ученые-практичес-кому здравоохранения", апрель 1989г., Актюбинск.

3. На I Всесоюзном съезде иммунологов, ноябрь, 1989г., г.Сочи. .■ *

4. На Республиканской научной конференции патофизиологов, сентябрь, 1990г., г„Алма-Ата.

Публикации^ По теме диссертации опубликовано 6 научных работ..

Объем и стцукт^рз да^оты^. Диссертация состоит из введения, дада глав, обсуждения, выводов. Содержит 133 страниц

машинописного текста, 8 таблиц, 4 рисунка. Указатель литературы включает 145 названий работ, из них 116 отечественных авторов, 10 иностранных, 19 патентных.

Автод. выражает глубокую признательность научному руководителю работы - доктору медицинских наук профессору Касенову Кожантаю Уразозичу за предоставление теш, помощь и научные консультации в процессе выполнения диссертационной работы.

Материал и методы исследования. В эксперименте испытаны препараты 0С-20 и Стеарокс-920. 0С-20 препарат полиэти-ленгликоля на основе первичных яирных спиртов, воскообразной консистенции, 1-плавления 33-37°, растворим в воде, не токсичен. Сгеарокс-920- полиэтиленгликоля моностеарат, на основе высших жирных кислот, твердой консистенции, растворим в воде, Т-плавления 45°, не токсичен.

Эксперименты осуществлены на 497 нелинейных крысах и 241 морских свинках. Предварительно были изучены токсические и анафилоктогенные свойства данных НПАВ.

При определении продукции антител агглютинирующего типа инактивированнюл корпускулярным антигенсм-взаесьо кишечной палочки применили обычный метод приготовления вакцины« Суточную культуру микроба, выращенную на косом агаре, смывали стерильным изотоническим раствором хлористого натрия и таким образом получали маточную взвесь. Затем ее оттит^вы-вали по стандарту мутности до 3 млрд. взвеси, кипятили в течение 1,5 часа. Иммунизация осуществлялась двукратным подкоя-ным введением 0,1 мл. взвеси с недельным интервалом. Еще через I неделю осуществлялся забор крови для определения титра антител с помочью реакции агглютинации. Антигеном в этой реакции слунила вакцина из эиирихииколэ^использоаанкая для иммунизации.

Для изучения продукции антитоксина при иммунизации стафилококковым анатоксином на фоне Стеарокса-920 и 0С-20 применили донорский стафяяокковый анатоксин, взятый на станции переливания крови.

Данные результатов при выявлении двух НПАВ на продукцию антител (гемолизинов) изучено в опытах ¿Л пЬО . Это осуществлялось по известному методу локального гемолиза Ерне-Нордина (1865). Принцип метода заключается в том,что при контакте лимфоидных клеток с чужеродными эритроцитами образуются антитела типа гемолизинов, выявляемые на основе локального гемолиза вокруг антителообразуюцей клетки (АОК) при добавлении в инкубируемую среду комплемента. В результате гемолиза образуются участки просветления, называемые обычно .бланками.

Изучено антителообразованиё вне организма, но в безгеле-вой среде по методу Каннингеыа (19651.Исследовано влияние ПАВ на фоне различий в метеорологических условиях, которым подвергался организм яшвотного в день забоя, а так.т.е влияние частичного электромагнитного экранирования.

Контакт лиыфоидкых клеток с чужеродными эритроцитами (барана) и последующий гемолиз иммунной клетки в результате образования гемолизинов (в присутствии комплемента) позволяет определить количество антитело образующих меток АОК

С

(в пересчете на 10 живых лиифоидных клеток селезенки/.Замена бараньих эритроцитов аутологичньаш позволила определить число аутоантителообразуящих клеток (АУОК).

В опытах на морских свинках массой 300-400г. изучали влияние неионогеннш: ПАВ (НПАВ) на соотношения популяций лимфоцитов перифирнческой крови. Кровь получали пршшзненной пункцией сердиа с помощь о длинной широкой иглы. Лимфоциты

а.

ввделяли разделением в градиенте плотности с помощью верогра-фина (14,5? раствор, рН 7,35) по Бейшу в модификации Х.М. Векслера,

Использован метод, описанный Т.И.Гришиной и С.Мюллер (1978), позволяющий одновременно выявить Т-,В- и Д- розет-кообразующие лимфоциты перифирической крови.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЛИЯНИЕ КЛАВ НА ПРОДУКЦИЮ АНТИТЕЛ. АНТИТЕЛА АГГЛШИ-

НИРУЩЕГО ТИПА ПРИ ИШНИЗАЦИИ ВАКЦИНОЙ Е.С01У.

Двукратная иммунизация корпускулярным антигеном гретой вакцины Е.со££ контрольной группы животных обусловило образование антител, определяемых с помогцьи реакции агглютинации до титра 1:80 (отрицательный логарифм титра по основанию 2 -6,32 ~ 0,098). Такой титр антител выявлен.через 2 недели со дня первой вакцинации.

При дополнительном подковном введении, но в участок иной, чем инъекция вакцины, препарата оксиэтилированного гарного спирта ОС-20 происходило увеличение титра антитела уке до 1:95 (отрицательный % ~ * 0,05), при сравнении с дачными контрольной группы Р < 0,05. Это при введении препарата в дозе 0,75 иг/ЮОг. массы тела животного.

Еще более эффективным.иммуностимулятором оказался препарат оксиэтилированной вирной кислоты- Стеарокс-920. При введении препарата в двух дозах титр антител бил равен соответственно 1:177 и 1:350. То есть, по этим данным можно сделать вывод, что Стеарокс-920 обладает примерно в 1,5 раза более выраженным ишуностимулирувщим эффектом чем 0С-20.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИММУНИЗАЦИИ С2МШЮК0КК0ВШ АНАТОКСИНОМ.

Двукратная с недельным интервалом иммунизация стафилококковым анатоксином по 0,1 мл. сопровоадалась продукцией антитоксина в контрольной группе, состоящей из 24 крыс, в титре 1:13 (отрицательный *>—3,67). Сочетание иммунизации с подкожным введением препарата оскиэтилированного жирного спирта 0С-20 приводило к усилению антителогенеза, причем, заметен эффект дозы: при инъекции в дозе 0,75 мг/100г. двукратно параллельно с иммунизацией, через 2 недели со дня начала иммуногенного воздействия титр анатоксина составил 1:22 (отрицательный % титра— 4,42), а в дозе 1,5 мг/100г.— 1:32 (5,01 + 0,1).

Препарат оксиэтилированной жирной кислоты (стеариновой) Стеарокс-920 оказывал еще большее иммуностимулирующее действие, чем ОС-20. На фоне двух его введений по 0,75 мг/ЮОг. титр антитоксина был таким же (1:32), как при инъекшш 0С-20 по 1,5 мг/100 г.. А при введении Стеарокс-920 в дозе вдвое большей титр (1:60) превышал уровень антитоксина, выявленный на фоне меньшей дозы (1:32).

ВЛИЯНИЕ НПАВ НА СОДЕШНИЕ БЛЯШ00БРАЗУЩИХ КЛЕТОК В СЕЛЕЗЕНКЕ

С учетом данных опытов предыдущих серий испытали ПАВ только в дозе 1,5 ыг/ЮО г. подкожно, дозу в 0,75 ыг/ЮО г. посчитали недостаточно эффективной. Растворы ПАВ вводили в объеме по 0,1 мл.. В контрольной группе животных после инъекшш физраствора В'объеме 0,1 мл. были статистически несущественные колебания содержания кивых лимфоидных клеток в 1мл. селезеночной взвеси при стандартах условиях ее приготовления.

ГО.

Введение обоих ПАВ способствовало лучшей выживаемости лнмфоидшог оеток селезенки на фоне забоя животных и последующих манипуляций с взятой тканью. Причем, инъекция Стеарокс-920 через I час не отражалась на результатах исследования: если в контрольных опытах было II,36 + 0,99 млн. живых лимфоидных клеток в I мл. селезеночной взвеси, то в основной группе было в среднем 10,83 + 1,26 млн.'(р>0,05). При исследованиях через 5 часов выявлено 10,04 + 0,18 млн. клеток в. контроле и 12,8 + 0,62 млн. (р < 0,001) после введения Стеарокс-920, через 24 часа —соответственно 10,01 + + 0,08 и 12,95 + .0,04 млн. Ср< 0,001). Столь же существенна степень выживаемости лимфоидных клеток селезшки после взедения другого неионогенного ПАВ —0С-20. Через 5 часов было— 12,60 + 0,62 млн.(в контроле 10,04 + 0,18 млн. р< 0,001).

Основной показатель в реакции. Ерне-Нордина- число бляш-кообразущих клеток среди I млн. живых лимфоидных клеток селезенки многократно возрастал после инъекции обоих ПАВ, причем уже через I час и эффект сохранялся по крайней мере более суток. В контрольной группе животных в разные сроки исследования число бляшкообразующих (антителообразущих) клеток

С!

колебалось от 3,20 + 0,43 до 2,28 + 0,18 на 10 жияых лим-фггалннх клеток селезенки (р<0,05). У подопытных животных, подвергшихся забоо через I час после инъекции Стеарокс-920, АСК превышал показатель в контроле в 2,5 раза и равнялось 8,65 + 2,02 (р <0,05). Еще более высокие показатели выявлены через 5 часов —10,55 + 1,46 (р<0,01) и через 24 часа--13,12 + 1,73 (р< 0,001). Несколько меньшим активатором бляшкообразования оказался препарат 0С-20 в такой же дозе

И.'

— 1,5 мг/ЮОг.- Через 5-часов после его введения число АОК

" А

составило 8,75 + 1,2 на 10 живых лимфоидных клеток селезенки, что при сравнении с контролем (3,16 + 0,69) имеет разлив чие высокой степени достоверности (р< 0,01). Через 24 часа- 11,39 + 2,19, против 2,28 + 0,18 (р< 0,01) в контроле.

РЕАКЦИЯ ЛОКАЛЬНОГО ГЕМОЛИЗА НА ФОНЕ ПЕРЕМЕН В МЕТЕОРОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРАХ И ВОЗДЕЙСТВИЯ ПАВ.

Опыты проведены в осенне-зимний период на 173 крысах, которые постоянно находились в условиях оддого и того же отапливаемого помещения. Оно имело центральное отопление, наружная стенка состояла целиком из стеклоблоков, не имело целей, окно кеболызое— 50 х 50см.. То есть животные практически не испытывали непосредственного) влияния колебаний термодинамических свойств погоды (температуры, ветра, осадков). Влияние их могло быть опосредованным— через изменение естественного электромагнитного ноля (ЗМП) атмосферы. Это было доказано в диссертационных работах А.Ы»Арингазиной (1937), К.П.Омаровой (1988), С.Н.Мусабаевой (1987), Д.Ж.Бркмива (Г989), выполненных в лаборатории кафедры патофизиологии Актшбинского госмединститута.

С целью снижения воздействия ЗМП атмосферы нами сделана попытка 331- экранирования группы животных размещением в ящиках, покрытых снаружи тонкоячеистой металлической сеткой с размерами ячеек 2-3 мм.

. 5М - экранирование осуществлено в опытах на 33 животных: последующий забой и исследование на 20 из них пришелся на дни с устойчивой погодой, 7- с холодным и 6- с теплым атмосферным фронтом. 107 крыс составили "контроль", но эта

груша после иммунологического исследования с учетом метеосиноптических данных на момент забоя в свои очередь условно подразделена на три подгруппы. Анализ был ретраспективным: после завершения иммунологических исследований получены из местной гидрометеорологической обсерватории сведения о синоптических условиях в дни осуществления соответствующих опытов. С учетом этих данных выделены: контроль I, который подразумевает результаты, полученные в дни с устойчивой погодой; контроль—II, подразумевающий исследования также на интакт-ных животных, но в дни прохождения атмосферного фронта холодного типа; контроль— III— з дни в теплым атмосферным фронтом.

Результаты исследования количества антигелообразущих клеток в селезенке свидетельствует о существенном влиянии на этот показатель прохождения атмосферного фронта обоего типа. На фоне устойчивой погоды в контрольной группе яиеот-ных (контроль I) число АОК составило в среднем 12,9+ 0,54 на I0Ö живых лимфоидных клеток селезенки.

3 группе животных контрольной серия (контроль 2) при забое их на фоке прохождения холодного атмосферного фронта число АОК возросло до 20,07 0,8 (р< С,001) при сравнении с контролем - I. На фоне теплого фронта в контрольной группе животных (контроль 3) происходило снижение числа АОК: 11,3 + ~ 0,5; р<0,05 при сравнении с контролем I.

При забое животных в дни с ветреней; погодой (> 7м/с) в контрольной, группе выявлено существенное увеличение, по сравнению с контролем- I, числа АОК до 14,7 + 1,1 (р< 0,001). В аналогичной группе в безветренную погоду (< 4м/с) обнаружено статистически достоверное (р 0,001 при сравнении и с

I3-.

предыдущей группой и с контролем I) снижение числа АОК -7,8 + 0,56 на Ю6 кивых дкмфогдаых клеток селезенки. Параллельно проведены опыты с целью определения характера выработки аутоантителообраэуыцих клеток (АУОК).

Результаты исследования АУОК сходны с данными по АОК.На фоне холодного фронта наблюдалось увеличение до 5,45 + Q,25 (контроль I —4,0 + 0Д8;р< 0,001), а на фоне теплого фронта снижение до 2,8 + 0,13 (р< 0,001). При сравнении числа АУОК на фоне ветреной.: и безвегреной погоды была тенденция к снижению при безветрии ( 3,3. ■+ 0,26) и к увеличению при наличии ветра (3,7+? 0,31). Но различие не достигло статистически значимого уровня (Р>0,05).

Накожное воздействие 1,5% водным раствором неионогенно-го ПАВ ОС-20 приводило к резкому увеличению числа АОК во всех сериях исследований. В серии исследований на фоне устойчивой погоды оно равнялось. 19,0 + 1,09 на Ю^живых лим-фовдных клеток селезенки, что в 1,5 раза превышает число АОК в контроле.I. Как мы отметили, холодный фронт способствовал увеличению количества АСК; дополнительное воздействие препаратом 0С-20 еще в большей степени активировал реакцию бдяшкообразования. Результаты равны соответственно 20,0 + + 0,8 (контроль 2) и 27,0 + 1,5 (р<0,001). Если прохождение теплого фронта способствовало некоторому угнетению бляш-кообразования, то воздействие 0С-20 на этом фоне значительно активировало этот процесс. Результаты исследования были практически такими же (18,8 ~ 1,08), как и при устойчивой погоде (19,0 + 1,09).

Высоким стимулирующим эффектом обладал препарат и на фоне ветреной.', и, наоборот, безЕетреной:. пог^ы. В обоих случаях

степень иммуностимуляции была почти.двукратной. На фоне безветреной погоды показатель в контроле равен 7,8 +0,56; в опыте— 13,5 + 0,95; ветреной погоды 14,7 + 1,1 и 23,1 + + 2,4.

Таковы же закономерности увеличения числа АУОК: при безветреной погоде соответственно - 3,3 + 0,26 и 7,9 + -+ 0,91, при наличии ветра- 3,7 + 0,31 и 7,0 + 0,63. На фо-неустойчивой погоды- 4,0 + 0,18 и 6,5 + 0,49 (р <0,001). Поскольку холодный фронт сам по себе увеличивает число АУОК, то дополнительное воздействие НПАВ хотя и вызывало увеличение таких клеток, но не до статически значимой величины. Число их равно 6,5 + 0,5: оно существенно превышает Р< 0,001) уровень в контроле I, но не в контроле 2 (4 = = 1,9). На фоне теплого фронта, который способствует уменьшению числа АУОК, применение НПАВ привело к более чем двукратному росту их количества 6,5 + 0,45; против 2,8 + + 0,13 в контроле 3.

Электромагнитное (Эй) экранирование животных, несмотря на его частичный характер, вызвало сдвиги в количественном содержании и АОК, и АУОК. Количества их существенно отличались от данных в контрольных группах животных, находившихся в сходных условиях, за исключением экранирования. Причем, направленность сдвигов по АОК и АУОК была, как правило, противоположной.

На фоне устойчивой погоды (М- экранирование способствовало достоверному (Р< 0,05) снижению количества АОК, но увеличению АУОК. Число АУОК в контроле равнялось 12,9 + 0,54 на 10^ живых лимфоидных меток селезенки, в группе с ЗМ -экранированием— 10,5 + 0,7. Число АУОК, наоборот, в 1,5 раза превышало в этой группе—6,0 + 0,7, чем в контроле 4,0+

+ 0,18.

При прохождении холодного атмосферного фронта наблвда-лось почти двукратное увеличение количества АУОК (10,6 + + 1,24), против 5,45 + 0,25, в контроле (р* 0,001). Число АОК сникено на фоне экранирования (17,2 + 1,15), в контроле было 20,0 + 0,8 (р<0,001).

Прохождение теплого атмосферного фронта вызывало угнетение реакции локального гемолиза при постановке и с чужеродными (АОК), и с аутологичными (АУОК) эритроцитами. Они соответственно были равны в контроле -3 11,3 + 0,5 и 2,8 40,13

с

на 10 еивых лимфоидных клеток селезенки. На фоне дополнительного экранирования происходило еце большее снижение коли-

(Г

чества и тех, и других бляшнообразущих клеток: соответственно до 5,45 ^ 0,39 и 1,2 + 0,14; в обоих случаях при сравнении с контролем- 3 ; р< 0,001.

Ш- экранирование привело к некоторому сглаживанию, нивелировании влияния на количество АОК ветреной погоды. Если на фоне безветреной погоды оно составило в контроле 7,8 + + 0,56, а при наличии ветра происходило увеличение до 14,7+ + 1,1, то 851- экранирование и ветре число АОК равнялось 12,2 + 1,0. При сравнении со вторым контролем ■:= 1,7 (р>0,05) Ш-экранирование в отсутствие ветра вообще не влияло на содер канне и АОК, и АУОК. Число АОК равнялось 7,6 + 0,68, в контро ле было 7,8 + 0,56; АУОК- соответственно 4,2 + 0,37 и 3,3 + + 0,26 (-¿в 1,95 р>0,05). Но при наличии ветра и одновременно ЗМ- экранирования происходило почти двукратное увеличение

с

числа АУОК: в контроле 3,7 + 0,31; в опыте 6,7 + 0,58 на 10° живых лимфоидных клеток (р< 0,01).

Проведенные нами исследования подтвердслл нашу предварительную) гипотетическую догадку сб информационной роли при

погодных флуктуациях колебаний параметров ЭМП атмосферы. Об этом свидетельствуют существенные различия по данным, полученным в опытах с ЭМ- экранированием и без такового.

ВЛИЯНИЕ НПАВ НА СОСТАВ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ.

На опытах на 66 морских свинках изучено влияние препарата оксизтилированного жирного спирта 0С-20, а в опытах на 97 свинках- действие Стеарокс-920, 30-составили контроль.

Стеарокс-920 НПАВ. Стеарокс-920 бызывэл лимфоцитоз уже через I час после инъекции. Лимфоцитоз наблюдался при введении препарата в дозе—0,1 мг/100 г.. Увеличение, по сравнению с контролем, было у&е на 60%. Из-за небольшого числа наблюдений (6 животных) степень общего лейкоцитоза не достигала статической достоверности (I: - 1,86), нонесоыненио, что при продолжении опытов— увеличении вдела наблюдений рост был бы суще-щественным. Даже при ограниченных наблюдениях различия в общем количестве лейкоцитов в опыте и в контроле составили Введение препарата в двух дозах- 0,05 и 0,1 мг/ХСОг. через I час вызывало прежде всего значительное увеличение количества нулевых клеток: соответственно на и 5Параллельно происходило существенное снижение числа Т-лимфоцитоз: на ЗОя при применении НПАВ в обеих дозах.

Количество В-лимфоштов на фоне ПАВ в дозе 0,1 мг/ЮОг. возрасло, по сравнению с контролем, в три раза при исследовании через I час. Инъеквдя в дозе вдвое меньшей не сопровождалась достоверным изменением содержания В-лимфоштов, а такаэ Д-лимфоцитов. При введении в дозе 0,1 мг/100 г. число Д-лим-фоцитоз вдвое превышало показатель контрольной группы, соответственно 553 + 116 и 250 + 30 в мкл.

Сопоставление результатов исследования популяционного состава лимфоцитов свидетельствует о наличии эффекта дозы: значу тельные изменения выявлены на фоне большей дозы введенного подкожно вещества.

При заборе крови через сутки после инъекции препарата исследования показали прежде всего правомерность такого заключения. Лейкоцитоз и лимфоцитов статистически достоверными были на фоне дозы 0,1 мг/100г., но не 0,05 мг/100г. Инъекция препарата в большей дозе через сутки вызывало суще ственное увеличение числа нулевых клеток и Д- лимфоцитов. Г вышение числа Д-лимфоцитов в опыте, по сравнению с контроле было почти трехкратным в относительных величинах (14,1 и 5? и четырехкратным в абсолютных количествах (1029 + 62) и (250 + 300 в ыкл.). Преимущественное увеличение абсолютной показателя объясняется резким общим лимфоцитоэом. Стеарокс-920 в обеих дозах через I сутки проводил к явному увеличен: количества В-лшфоцитов. Наблюдается дозозависимый эффект: на фоне больпей концентрации увеличение по сравнению с контролем было двукратным, а при применении вещества в дозе м< ньшей-полуторократным.

Исследования, проведенные через 5 суток после введени: данного КЛАВ, свидетельствует о стойком характере возникши: изменений. Так, общее количество лейкоцитов в опытной rpynj превышало показатель в контроле на 30%, лимфоцитов на 34%. Анализ популяционных соотношений лимфоцитов позволяет уста новить почти вдвое увеличение числа нулевых клеток в опыте чем в контроле 3645 + 322 и 1903 + 148 в мкл.; а тэкже пол; торскратное различие в количестве Д-лимфоцитов 406 + 70 и 250+ 30 в ыкл. При исследовании в этот срок уже-не отмечен столь постоянное увеличение в ранние периоды числа В-лимфо

цитов. Но нужно учесть, что была использована очень малая доза вещества —0,05 мг/100г.

Определение популяционного соотношения лимфоцитов периферической крови показало разнонаправленкость их изменений в разные сроки после воздействия 0С-20. Через I час происходило резкое (на 60%) увеличение числа Т-лимфоцитов и более чем двукратный рост количества Д-лимфоцитоя. Все это происходило на фоне резкого уменьшения числа нулевых клеток.

Через сутки изменение соотношения популяций лимфоцитов проявилось уже раз кил ростом количаетва'-В-лимфоцитов и по-прегнему Д-лимфоцитов, такие результаты были установлены при применении препарата в двух дозах—0,05 и 0,1 мг/100г. Увели чениа В-лкмфоцитов в относительных цифрах (в %) было в обоих случаях двукратным: в контроле —14,55?, в опытах- 30,1 и 33,2$; в абсолютных количествах (в шел»)— примерно трехкратные - 745 клеток в контроле, 2658 и 2555 клеток в опытных группах. Большее увеличение абсолютного показателя объясняется значительным ростом общего количества лимфоцитов. При изменении препарата в меньшей дозе выявлено такзе существенное увеличение числа нулевых клеток и уменьшение количества Т-лшфсцитов. На фоне большей дозы (0,1 мг/100 г.) относительное содержание таких клеток такяе значительно уменьшилось (в контроле -35$, в опыте- 18«), но в связи с общим лкм-фоцитозом не произоило статистически достоверного изменения абсолютного количества Т-лшфоцитов.

Такой характер изменений в потуляциенных ссотношениях лимфоцитов крови сохранился и через 5 суток после подкожного введения препарата в дозе 0,1 мг/ЮОг.. На фоне общего лейкоцитоза и лимфоцитоза значительно увеличенными были количества В—лифоцитов я Д-лиыфоцйтоэ, а таете кулевых клеток.

Число В-диифоцитов увеличено, по сравнении с контролем, вдвое: соответственно 1813 + 130 и 745 + 105 клеток в шел.. Рост количества нулевых клеток был полугорократным: 3136 + 195 против 2056 +■ ИЗ в ыкл.

Накожное применение 0C-2Q, к тому se многократное (5 раз) вызывало лейко- и лимфацитоз за счет существенного увеличения числа Т-димфоцитов. По сравнению с нонтролем оно увеличено более чем в два раза: 1799 + 95 в мкл. в контроле и 4810 + 73 в опыте.

При накогном воздействии этим препаратом выявлены общий лейкоците и дшфоцктоз.

ВЫВОДЫ

1. Нейоногенные поверхностно-активные вещества 0С-20 и Стеарокс-920, являюащеся соответственно препаратами оксиэти-лированных высших кирных спиртов и жирных кислот, резко усиливают образование антител при сочеатнии иммунизации с подкожным введением водных растворов этих веществ. Иммуностимулирующий зффэкт Стеарокс-920 более выражен.

2. Оба вещества многократно увеличивают содержание в селезенке антителообразующих САШ) и аутоангителообразуацих (АУШ) клеток. Эффект проявляется уга через час после подковного введения давотным растворов испытанных КЛАВ, обнаруживается и через I сутки.

3. Введение НПАВ уже в блигайшие часы приводит к существенному увеличению Егкравя содержания лейкоцитов, прежде всего за счет лимфоцитов, с изменением их популяционного состава. Такие сдвиги являются стойкими, выявляются по крайней царе в течение 5 суток, а) Отмечается тенденция увеличения содержания нулевых клеток, б) Постоянным является и увеличение В-лимфоцитов, в значительной мере к Д-ликфоцктов, что

является предпосылкой для активного функционирования гуморального звена иммунитета. Менее определены изменения в содержании Т-лимфоцитов.

4. На содержание антителообразушцих клеток в селезенке лабораторных животных, находящихся в закрытом отапливаемом помещении, оказывают выраженное влияние метеорологические условия. Количество АОК и АУОК значительно возрастает при прохождении холодного атмосферного фронта, ветреной:, погоды. Снижается на фоне теплого атмосферного фронта. НПАВ СС-20 при наконном воздействии увеличивает количество бляшкообра-зунцих клеток в селезенке вне зависимости от метеорологических условий.

5. Электромагнитное экранирование кнтакткых животных способствует уменьшению числа АОК и, наоборот, увеличении количества АУОК, что мокно оценивать как неблагоприятное воздействие. Изменения указывают на депрессию механизма иммунной защиты при возможном контакте с чужеродным агентом и наличие готовности к аутоиммунным реакциям.

6. Полученные данные свидетельствует о необходимости " определенного фона естественного электромагнитного поля (ШП) атмосферы для адекватного функционирования иммунной системы.

7. Испытанные НПАВ обладает низкой токсичностью при инъекционном введении ¿тавотным, не проявляют аллергических признаков. Имеет очень низкую бактерицидную активность, в особенности 0С-20.

СПИСОК ОПЗБЛИКОШШШХ БАБ0Т ПО МАТЕИШШ

. даажрщии.

Г.Сундетов Ж,С., Щумбалова С.Т. Влияние неионогенных поверхностно-активных веществ на антителообразованкя /Гигиена окрухаицей среды и здоровье человека.-Актюбинск,

IS89r., с.75-76.

2. Сундетов Ж.С., ЕумбаловаС.Г. Изучение токсических

и аллергических свойств в неионогенных поверхностно-активных веществ "00-20" и "Стеарокс-920" //Гигиена округлшцей среды и здоровье человека.- Актюбинск, -1989.-с. 76-77.'

3. Касенов К.У., Сундетов Ж.С.(ЕумбадоваС.Т. Иммуномо-делируюций эффект неионогенного ПАЕ пСтеарокс-920"//Тез. докл.1 Всесоюзного съезда кяиунодогов, 15-17 ноября 1989. -Сочи, 1989.,т.I. - с.

4. Сундетов Е.С., Иумбалова С.Т. Влияние неионогенных ПАВ на соотношения популяций лимфоцитов крови у морских свинок //Актуальные вопросы патофизиологии в современной медицине:- Материалы республиканской научной конференции патофизиологов, 27-28 сентября 1990.-Ашаг-:Ата, 1990.-с.85.

5. Щумбалова С.Т., Жанабаева С.К. Иммуносгтлулирупщий эффект неионогенного ПАВ "0С-20" //Тез.докл.ХХ1Х научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава Актюбинском медицинского института.-Актюбинск, 1990. -с.33-39.

6."Касенов К.У., Щумбалова С.Т. и соавторы. Влияние ПАВ с антистатическими свойствами на енкоторые показатели иммунитета //К. Гигиена Труда и профессиональных заболеваний. -Москва, 1991, № 2 ..