Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Влияние морфина гидрохлорида на морфо-функциональное состояние щитовидной железы и некоторые звенья ее регуляции у крыс

РГ6 од

- 8 ОПТ 1996

На правах рукописи

ЮМИНОВА Наталья Александрорнз

ВЛИЯНИЕ МОРФИНА ГИДРОХЛОРИДА НА МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И НЕКОТОРЫЕ ЗВЕНЬЯ ЕЕ РЕГУЛЯЦИИ У КРЫС

14.00.23 — гистология, цитология, эмбриология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Саранск 1996

Работа выполнена в Ижевской ордена Дружбы народов государственной медицинской академии.

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор В. А. Глумова; член-корреспондент Российской Академии медицинских наук, доктор медицинских наук, профессор Н. Н. Бого-лепов.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Ю. А. Челышев; кандидат биологических наук, доцент Т. В. Демидова.

Ведущее учреждение: Российский государственный медицинский университет.

Защита диссертации состоится «___» _ 1996 г.

в _ часов на заседании Диссертационного совета Д063.72.03

при Мордовском государственном университете им. Н. П. Огарева по адресу: 430000, г. Саранск, ул. Большевистская, 68.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Мордовского государственного университета им. Н. П. Огарева (ул. Большевистская, 68).

Автореферат разослан «_» _ 1996 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета кандидат биологических наук,

доцент П. П. Кругляков

Номер государственной регистрации 01.94.00.11302

С Стая характеристика работы

Актуальность проблемы. В последние годы наблюдается ' обострение проблемы морфинной наркомании, что связано со способностью морфина вызывать помимо анальгетического. мощный наркогенный эффект и быстрое развитие толерантности, психической и физической зависимости (Вальдман А. В. с соавт..1989; Дунаевский В. В. с соавт. .1991: Herz A. et al. .1990; Wilder-Smith С.H. et al.. 1991). В связи с этим представляет несомненный интерес изучение воздействия морфина гидрохлорида на щитовидную железу - орган, играющий важную рель в функциональном статусе нэ роэндокринной систем?;, обладающий широким диапазоном гормональных влияний на различные системы организма (Балабол-кин М.И.. 1989: Fisher D.А..'1991; Robbiiis J.et al.. 1992). Изменение функциональной активности щитовидной железы приводит к развитию гормонального дисбаланса, что отражается на течении различных физиологических процессов: нарушается дифференци-ровка и морфогенез клеток развивающегося мозга (Ноздрачеа А. Д. с соавт., 1993; Hetzel B.S. et al , 1987), внутриклеточный метаболизм органов-мишеней (Edmonds С.S.. 1987; Reed L.P.. 1988), процессы адаптации организма к неблагоприятным факторам внутренней и внешней среды (Гурмн В.Н. с соавт.. 1S93).

Интенсивность интратиреоидного гормоногенеза и экструзии секреторного материала Фолликулярными клетками цнтоеидной хе~ лезк в кровоток зависит от вырабатывающих ТТГ бета-базофильньм тиротрояоцитов Зденогилофиза и. в Конечной инстанции, детерминируется тиролиберин-продуцирующими ядрами гипоталамуса (Исакова Л. С.. 1991; Лосэв Н.И.. 1993; Угрхжов М. В.. 1989; iilKoderava И. et al. .1993).

. Морфин наибольшее влияние оказывает на те образования ЦНС. где локализуются опиатные рецепторы, з том числе и гипоталамус (Морозов Г. В.., Боголепов H.H. ,1984; Герц А. с соавт., 1989; ЗвартауЭ.З. с соавт., 1989). Правомочен) полагать, что изменение функциональной активности нейросекреторных клеток гщготаламического тиреотропного центра не может не отразиться на рсех звеньях, гипогаламо^-аденогипофизарно- тиреоидтой систему. теснейшим сбразоч взаимодействующих по. принципу положительной и отрицательной обратной связи (Акмаев Й.Г..1992;Bauer К-, 1987,1988;-Bruhn Т.О. et al., 1994; Dun tas L et al. .'988).

Морфин изменяет эндокринный фон организма, влияя на ско

" Si ~

pooTii наработки il кругооборот многих биогенных амшюв и гормонов (Tlong G.K.L. et al..1992), что также можэт отразиться нЗ Функциональном состоянии щитовидной желег-y (Еылетанина Т. А. с ооавт.. 1996; CabanШas A.M, et al. J9S4).

Из iiciuieseHG и непосредственное влияние уорфиар. вь щито-впдиуа железу. чото,^ая Оогйтс ианерЕирсваня (а периферические нервы таюка смеют опиатьие рецептора • Сергеев П.В.. ШиманоЕС-кий Л. К.. 1937; Хугаева В: К. .1991; Gupt C.B. et al. .1989). обильно кровоонабжачтоя. содержит значительно^ количество лаб-рочитоз м С-кпегск. относящихся к АР1Ш-с;:стеме (Длеылн Б.В.. 1939. Del core Я. et а1.,19ЭЗ. Stevens A. eï al. .1392) и участвующих zo ьнутриорганней регуляции (Павлов А.В. с соавт,,1S94. Горлилова И.В..1933; Pearse A.G.,1992).

.Таким образом, учитывая разнообразный характер негативного гшяш'я морфина на нервную и эндокриннув системы и роль щи-ч-ооипно:) железы в поддержании гомеоотаза организма, мы сочли актуальным изучениэ ланчей проблемы.

Цзль и задачи исследования. Основной целью настоящего мое/;;лован1:я явилось проведение сравнительного анализа функциональных и морфологических параметров щитовидной келеаы и гипо-таламо-аденсгипофкзарной системы крыс при хронической морфин-

ной ннгоксйкр.цкя.

В соответствии с целью исследования были сформулированы елидуюций задачи:

:. Изучить структур.чо-ФункциональиыЛ статус щитовидной железы при хроническая введении мррзшна гидрохлорьда в возраставши;-: с учетом толерантности до 40 иг/кг дозах.

2.Оценить в пкяние морфина гидрохлорида в стабильных, вводимых без учета толерантности, дозах 10-20 мг/'кг на мор-ф(1 --фу нг.цк о н а ль н о е состояние щитовидной железы.

3.Проанализировать изменения структуры и Функции щито-' видной железу при хроническом введении морфина гидрохлорида в концентрациях дс 4 мг/кг.

4.Сопоставить выраженность функциональных, дегениративних к компенсаторно-пластических преобразований в щитовидной железе с дозой вводимого морфина гидрохлорида, длительность» курса инъекций, развитием абстиненции.

5. Изучить морфологические изменения б нейросекреторннх клетках тиреотропного центра гипоталамусе и бета-Сазофи.пьныу тнротропоцитах аденогипоФиза при хронической морфи;ыой кнток-

- з-

с:'ка;;ин разними дозами.

Научная новизну. С использованием •современник методов исследования. включая элемтдапю-микроскопический и радиоиммунологический, проведен анализ структурно-фунмгионалыюгс состояния системы "гипоталауус-аленст'мпофиз -иглтоеидна?. жзлсза" крис при воздействии на их организм морфина гидрохлорида. Выявлена зависимость между изменениям!; структуры и функции щи-тоеидной хелозы компе^сзторко-пруГспосоОнт^ьнсто характера, и дозуЙ вводимого мсрФина гидрохлорияа. длительность» периода нлркьтизации. наличием или отсутствием аС-стш-^нда»'. Важным моментом являются пслуч'.'ннке данные о топ, что даже при сравнительно невысоких ¿до 4 мг/кг! дозах вводимого наркотического вещества сбнарухсенн отчетливые сдвиги гормонального профиля ад-товидной железы. СЕядоюльстБуюьдао о вовлечении последней в процессы адаптации организм, при хроническо:! моренной интоксикации. На основе изученных морфологичесччх показателей центральных звечьез регуляции ¡цлтевидной хзлезн - гипоталамуса и аденогипофиза - сделан вырол о Функциональном напряжении железистых и нейросекреторных клеток указанных органов. Перспективны;.: является системный подход к изучений влияния морфина гидрохлорида >:з щатовилнул железу, которое может Сип как опосредованным изменениями функциональной активности гипотапамо-шлоФнзарной системы, тек и непосредственным. обусловленный ср-г ая о с пе циф! 1I г о с т ь ю интссиднок железы.

йфяит существующие представления о зависимости изменений функционирования гитюталамо аденог;шофлаарко-тиреоид.чоН систе-•цч при формирован»;;) морфинной зависимости и абстиненции, что позволяет Солее- полно оценить влияние денного наркотического анальгетик;! на организм в целом. Новые факты по сравнительно!) характеристике структурно -^ункционвлъных параметров зитоькдноЯ железы в норме и при хронической морфкниой интоксикации ярдл--ятся полезными в интерпретации некоторых механизмов внутрнор-ганногс Гомеостаза и подчеркивают валкость комплексного анализа тиреоид^ых компонентов с условиях наркотизации. Результата исследования могут бь;ть исилльгаваны в дальнейших научных работах по изучению зияния на организм лабораторных животных морфина г*щсхлсрида и мсрфнноподоОньк препаратов. Причем поскольку относительно нкзкче ( 1-10 мг/кг ) лозк морфина гилрг'хлорида вызыеают гиенге Ви'риь'екныо. но сходнее с высокими

- **. -

(ЗС-4.С мг/кг) морфо-функциокань'нье изменения в щитовидной х.с-дезе шло полагать о возможности использования малых (до Ю нг/хг) доз препарата для моделирования хронического морфнн-кого аффокте. Кроме того, эти данные могут быть полезны в медицинской практике при прогнозировании последствий, плакировании лечения и разработке новых лекарственных средств и тактических приемов для купирования морфинчой зависимости к аботпнектного синдрома.

Внедрение, Полученные результата внедрены с учебный процесс при преподавании вопросов неЕрозпдокрнчной регуляции на кафелрях медицинской Оиологии и нормальней физиологии Ижевске;"! Государственной мздициьской академии.

апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуж-дечи на заседаниях Удмуртского отделения Всероссийского сА-щеоуса анатомов, гистологов и эмбриологов (1Э95.1996). 3-го Зсероосийского Съезда морфологов (г.Тюмень,1994), республика,: с кс? научно-практической конференции "Актуальные вопросы патологической и нормальной мор(1)ологии" (г. Ижевск, 1995). заседаниях Ученого Совета педиатрического факультета ИГМА (2 934.19%)

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных раОо7', из них 4 - в центральных изданиях.

На задчту взносятся следующие основные положения:

1.Как низкий (до 4 мг/кг), так и высокие (дс 40 мг/кг) дезу морфина гидрохлоркда вызызают активацию сцитовидной железы, проявляющуюся в повышении в плазме крозк уровня тиреоидных гормонов - трийодтиронина и тироксина.

2, Норфологические и ультраструктурные перестройки клеток тиреоидноП паренхимы, подтверждающее гиперфункциональное состояние органа, обратимы к носят-компенсаторно-приспособитель-ный характер.

о. Степень экспрессии морфологических изменений тирС-оидной паренхимы и гормонального профиля щитовидной железы зависят от дозы вводимого морфикэ гидрохлорида и длительности курса инъекций.

4.Функциональное напряжение тиреоидного згштелия при хронической морфкнной интоксикации монет быть обусловлено как активацией центрального (трансгипэфизарного) пути регуляции, так и мобилизацией механизмов внутркорганного гомеостаза.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 14В

страницах и состоит из введения, 4 глав,заключения и указателя .литературы. Текст, иллюстрирован 42 микрофотографиями, С графиками и содержит 7 таблиц. Библиография включает жчочников, в том числе 213 на русском языке.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ • Рабата выполнена на 100. беспородных белых крысах-самцах в возрасте 2-3 месяцев, массой тела 180-200 граммов. •Использование, в качестве экспериментального материала только оампов крыс обусловлено половым диморфизмом физиологическое активности эндокринных органов, 8 частности, щвтовиднои аелезк (Глумова В.А.. 1981; Торшалове И.Ю.,1993; Zabel М. et а]., 1987).

В соответствии с целями и задачами исследования опытным животным вводили ежедневно два раза в день внутрибргашно однопроцентный раствор морфина гидрохлорида в стабильных или возрастающих с учетом толерантности дозах ¡1,4,10.20,30.40 мг/кг) курсами различной.продолжительности (2,3.4 недели). В одной из серий с введением 20 мг/кг морфина гидрохлорида применили прерывистый режим наркотизации с целью создания дополнительного стресса в результате временной отмены препарата. Забой животных производили непосредственно после окончания курса инъекций или .через 1 неделю,' за время которой прбдполз-галось'развитие абстиненции (Вальдман А. В: с: соавт., 1988: Дунаевский В. В. с соавт.. 199i). Животные контрольных групп получали етеднзЕно два раза в дс-я^ внутрибрвшянно соот-еетствукдае объемы ' изотонического . раствора хлорида натрия Чтабл. 1). -

Объекты исследования: ситовидная железа, плазма крови, йсдиобазальный отдел гипоталамуса. аденогипсфиз.

Животные забивались посредством декапитации./Всс процедуры проводились в строго контролируемых .условиях, материал от опытных и контрольных животных каждой серии, обрабатывался одновременно . '-Для световой микроскопии одну из долей щитовидно'; железы, гипофиз и гипоталамус фиксировали в жидкости Бузна или растворе нейтрального формалина и заливали' в парафин по общепринятой методике. После изготовления серийных срезов ?ол;йшой;. 5-6 мкм часть препаратов- из Раздой серии скрашивали гематскси лин-зоэияом," часть - толусдичоьги синиц. Отдельные срезы гиио-Цжза окрашивали альяепгдм^тксгаом По Хальми. Срезы щитовидной хелезк подвергали стереометряческому анализу: определялась еу-

Та&лица i

Распределение нивотных по экспериментальным группам.

1' ...............■ 1 Экспериментальные группы i ........... Кол-во животных i Номер| серии¡

¡Контрольная групца 25 К 1

возрастающие с учетом толерантности от 10 до 130 мг/кг/сут. дозы в течение 2 недель 5 5 I | 1а |

|Возраст:ивде. с учетом толерантности от 10 до КО мг/кг/сут. дозы в течете 4 недель 5 5 н i tía 1

1 Без учета толерантности 10 мг/кг/оут. |в течение 3 недель 5 5 ИЗ | •Illal

1 Без учета толерантности 20 мг/кг/сут. !е течение 3 педель . 5 5 iV 1 IVa |

1 Без учета толерантности 20 мг/кг/сут. |в течение 10 дней ' 5 V |

¡Без учета толерантности 20 мг/кг/сут. |режиме "10 дней инъекций-7 дней перерыв-иней инъекций" в 10 5 5 VI 1 Vía i

1 Баз учета толерантности 1 мг/кг/сут. 1 в течение 3 недель 5 5 VII 1 Vila! i

(Возрастающие с учетом толерантности от 1 Iмг/кг/сут.;.дозы в течение 4 недель | ' до 4 ..... 5 5 i VIH I VII la 1 .......i

Примечание: а - в этих сериях забой яивотнык осуществлялся че-1-ез 1 неделю после отмени морфина гндрохлорида

_ у ..

сота тироцитов и диаметр фолликулов с помощью окуляр-ми:-.ромет-ра. Объемную плотность структурных компонентов железы агроксн-мировали стереометрической сеткой Г. Г.Автьндилора (1S84). Микрофотографирование срезов производили на микроскопе НКСПАМ. МФН-11.

Для электронно-микроскопического исследования фрагменты органов инкубировали в растворах трехпроцентного гл»таральд<з-гида и однопроцентной •четырехокиси осмия «а фосфатном буфере (рН 7.4) с последующим обезвоживанием в батарее спиртов и'ацетонов восходящей концентрации и заключали в смесь смоп эпон-аралдит M (Fluka, США). Ультратонкие срезы, полученные на микротоме."УМТП-4" (СССР) и "LKB-3" (Швеция), по необходимости контрастировали уранилацетатом, изучали и фотографировали на электронных микроскопах "ЭМБ-ЮОАК" (СССР) и JEM-100C (Япония).

С целью получения более полного представления о морфофи-зиологии щитовидной нелезы помимо морфологического изучения было проведено радиоиммунологическое исследование плазмы крови крыс на содержание тиреоидных гормонов - трийодтиронина (ТЗ) и тироксина (Т4) наборами "Трийодтиронин" и "Тироксин" (Минск). Результаты подвергали статистической обработке.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Эксперименты были начаты с наивысших из использованиях нами доз морфина гидрохлорида (возрастающих до 30-Ю мг/кг} г, целью прогерки предположения о развитии морфо-фуккциоиальных сдвигов в щитовидной нелезе при хронической чорфинной интоксикации. Аналогичные дозировки препарата применялись в опытах по хронической морфинизации лабораторных животных многими исследователями (Константинопольский М. А. с соавт.,1S92; Сушкова В.В.с соавт. ,1992; Тронников С.И. ,1994; Cftuciikova N.N. et al., 1996; Laan J.W. et al., 1991)¡поскольку они позволяют моделировать быстрое развитие лекарственной -загасимостл и абстинентного синдрома после отмены наркотического вещества.

Как показали наши исследойания (табл.2) введение морфина, гидрохлорида в возрастающих с учетом толерантности от 10 до 30 мг/кг в течение 2 недель (серия I) и от 10 до 40 мг/кг в течение 4 недель (серия II) сопровождается достоверным повышением уровня s плазме крови тиреоидных гормонов - трийодтиронина и тироксина (соответственно на 147,1 и 155.3% в серим I; на 73.4 и Г04.3* в серки II) - к моменту окончания курса

- е -

Таблица 2

Показатели гормонального профиля щитовидной железы-и индекс» конверсии тироксина (Т4) в трийодтиронин (ТЗ)

, С в; ни-.

I____

Прик

!1лрамегры| ТЗ 1 "Т 1 Т4 | ■ ТЗ/Т4 I

. ямоль/'л 1 нмоль/л | ! 1 усл.ед. 10 |

0.51 - С. 07* 1 1 ! 51,23 + 5,20 | 0.98 + 0,03 |

• 100« ! 100% | I

т ; 1,26-< 0.21 1132,31 + 7,25*| 0,095 + 0.04 |

247.1% 1 255,355 | 96,9% |

} 0,56 + 0.06 1 71,05 + 4.30*| 0,79 + 0,06* I

110.0% ! 137,1% | 80,6% |

_ 1 } 0.91 + 0.09* 1157.74 + 8.10*| 0,67 + 0.03* I

178,4% 1 304.3% | 58.2% |

Па | 0,99 + 0.19 1 87,31 + 7,51*| 1.13 + 0.04* 1

194.1% 1 168,5% I 115.3% I

III 1 0.58 + 0.08 1 49.22 + 2,76 | 1.18 + 0.05* 1

113,7% 1 95,6% | 120,4% I

Ша 1 0,69 + 0,04 1 46,35 +4.15 | 1.94 + 0.07* |

135,3% ' 1 89,4335 | . 152,0% .. I

IV I 0,84 + 0.06* .1138,57 + Э.20*| 0,61 + 0,01* |

164,7% 1 267,4% | 62.2% . I

1Ча | 0,61 + 0,05 Л 45.99 +3.16 | 1,32 + 0.03* I

119.6* 1 89.55? | 134.63 |

V 1 0.60 + 0,08 1 83.21 + 7.07*1 0.73 + 0.03* 1

117,6% I . 160.6е* | 74.5% I

VI 1 1,46 + 0, 14* 1 55,60 + 8.12*1 1,48 + 0.06* 1

286. ЗЯ 1 .190.2* ! 151.0% I

У1а - 1 0,38 + 0.9* 1 95.75 + 5.23»! 1.0 + 0,04 I

188.2% 1 184,75? « 10?. 0% 1

VII 1 0,57 + 0.07 I 55,75 +6,31 | 1.02 + 0.06 !.

111.8% 1 107,6% | . 104,1% I

УПа 1 0.46 0.05 1 71.11 +6.20 I 0,65 + .0,02* 1

90,2% ■ 1 137,2% | 66,38 1

VIII 1 0.67 + 0,07 1 69.59 + 4.98 | 0.96 + 0.05 1

<33,4* 1 134,3% I 98.0% 1

VI Па ! 0,55 + 0. 05 I 65.75 +6,42 1 0,84 + 0.04* I

! 107.8 : 1 126.9% | л......... .. -1 85,1% | 1

ечшпс-: »• р^-0.05 - достоверность различий в сравнении с контролем

инъекций. Через-1 неделю после отмены препарата содержание обоих гормонов в серии I приближается к показателям контрольных животных, в серии II - при падении уровня тироксина содержание трийодтиронина продолжает нарастать, по-видимому,вследствие усиленной конверсии Т4 в 73.Известно, что. морфина гидро-хлоряд, как и другие опиаткув .анальгетики, нарушает постоянство внутренней среды организма, вызывая развитие ряда адаптивных реакций (Калюжный Л. В. с соавг .11)93; Сур коса Л. А. с соавт., 1989; .СИск 3.0. еЬ а1.,1992; УапаяПа Т. еЪ а1.. 1989). Отмена препарата является новым возмущающим фактором, нарушающим го-меостатическое равновесие, что актуализируется в виде абстинентного синдрома (Вальдман А. В. с соавт., 1988; КооЬ С.Р'.е1 а1., 1992; Ьаап е1 а1., 1991). Усиление обратного превращения

тироксина в трийодтиронин е условиях развития абстиненции мы расцениваем как компенсаторную реакцию, имеющую целью мобилизацию адаптивных потенций организма (известно, что трийодтиронин в 5-6 раз превосходит тироксин по активноеги и в ?-3 раза по скорости кругооборота -' Алешин Б.В.. Губский В.И.,1963; Туракулов Я.X..1986).

Морфологический анализ структурных перестроек тиреоидных комплексов • свидетель». ;вует о гиперфункциональном состоянии щитовидной железы (табл.3). В гистологических срезах преобладают фолликулы средних и малих размеров, иногда неправильной формы. Отмечается Формирование микрофолликулов. Высота тироци-тов достоверно- увеличена по сравнению с контролем. Сравнение же показателей каждой серии на высоте введения морфина гидрохлорида.и через 1 неделю после отмены не дает достоверных различий, На ультраструктурном уровне в тироцитах обнаруживается расширение канальцев цитоплазматического ретикулума, обилие полисом, секреторных гранул, большое- количество митохокдрц;:, появление инвагинаций кариолеммы, укрупнение микроворсинок.

Щитоеиднйя железа в норме и при различных экспериментам-них воздействиях. представляет собой целостную взаимосвязанную систему. В этом плане в исследованиях с введением морфина гидрохлорида в концентрациях. до 30-40 мг/кг представляет большой интерес реакция парафоллшеулярных клеток щитовидной железы. Значительное расширение канальцев ДОС и цистерн пластинчатого комплекса, большое число секреторных гранул в цитоплазме свидетельствуют о высокой степени'функционального напряжения С-клеточной популяции. Отмечается увеличение плещад!:

Таблица 3

Средние показатели высоты тироцитов и диаметра фолликулсв

¡Ce 1 Параметры I •>!!я 1 Высота тироцитов (мкм) . 1 Диамето фолликулов I (мкм) 1

i 1 Контроль 1 4.50 + 0,12 49.4 + 0,9 1

1 I 1 Г 5,30 + 0,13* . 47,8 + 2,10 1

1 - -1 ' la 1 5,16 + 0,15» 49,8 + 1.18 1

i. ... i. h! i п • 1 5.25 + 0.13* 48.5 + 0,89 ' 1

IIa 1 i 5,23 + 0,11* • 48,0 + 2.12 1

i i f- 1 ! III .1 i 4. 60 + 0,14 48,6 + 2,64 1

i illa 1 i 4.91 + 0,16* 46.2 + 2,59 1

i I . I г г/ ¡ i 5.16 + о. i-* * 51.4 + 1.33 1

1 1 . IVa 1 i 5.29 + С, 2 * 46,4 + 1.26 1

1 -! 1— 1 V 1 i 5,0 н 0,15 *„ 51,4 + 1,29 !

VI 1 1 5.12 + 0,10» 48.5 2,05. 1

1...... 1 1 Via 1 5,10 + 0,14* ' 48. 6 + 1,59 1

1 ! i VII 1 i 5,21 0, 12» 50.6 + 1, 94 . 1

1 ■ ■ 1 1 Vila 1 i 5.14 + 0.14* ■ 47.6 + 2,15 1

V 1 1 VIII 1 i 4,59 + 0. 11 51.8 + 1.23 1

1 1 1 ....... 1 Villa i i 4.65 + 0. 1.4 52.3 + 0.94 [ i

Примечание: *-рО. 05 - достоверность различий в сравнении с контролем

- il -

■ контакта между тироцитами и парафолликулярными клетками благодаря появлению инвагинаций . цитолеммы, что указызает на активацию взаимодействий фолликулярного и С-клеточного аппарата щитовидной железы. В настоящее время широко обсуждаются механизмы эффекторных влияний кальцитониноцитов, их способность регулировать .биоаминовое окружение тиреоидного фолликула в связи с принадлежностью к APUD-системе (Алешин Б.В.,1989; Виноградов С.В., 1989; Johnson К.Е. 1931; Stevens A. et al., 1992) и важной ролью в поддержании внутриорганного гомеос-таза -при различных видах воздействий (Павлов A.B. с соавт.. 1994;Pearse A.G.,1992).Гормональные продукты С-клеток, в частности,. кальцитонин и кальцитонин-ген-родственный пептид, способны выступать в качестве возможных нейромедиаторов (Ашмарин И. ГГ., Каменская H.A., 1988), повышая чувствительность тироци-тов к действию тиротропина ( Сандомирская Л. Д., 1984; Семенов В.В. с соавт..1987,1996). Указанные изменения.в кальцитонино-цитах могут служить дополнительным механизмом активации- фолликулярного эпителия интовидной железы при хронической морфин-ной интоксикации.

В соотношении тканевых компонентов снижается содержание коллоида вследствие его резорбции, возрастает удельный вес железистого эпителия и соединительнотканной стрсмы, е которой развивается выраженный отек (табл.4). Сосуды полнокровны с явлениями стаза, иногда сладжирования • эритроцитов,, что особенно выражено при развитии абстиненции. Обращает на себя внимание большое количество обильно гранулированных лаброцитов и инфильтрирующих строку эозинофилов, что может свидетельствовать о тканевой иммунной реакции в ответ на введение высоких (до 40 мг/кг) доз морфина гидрохлорида. Последнее наряду с активацией С-клеточного аппарата может указывать на мобилизацию механизмов поддержания внутриорганного гомеостаза при непосредственном воздействии морфина, гидрохлорид'а на ^щитовидную железу.

Интенсивность интратиреоидного гормоногенеза и экструзии секреторного материала фолликулярными клетками в кровеносное русло зависит от ТТГ-продуцйрующих элементов аденогипофиза и, б конечной инстанции, детерминируется гипоталамусом • (Лосев H.H..' 19ЭЗ; Угрюмов М.В., 1989; Nlkodemova М. et.al.. 1993). Ти-реотропная функция аденогипофиза предполагает обратную информацию q характере эффекторных изменений инициируемого органа с целью оценки, соизмеримости своих влияний. Высокоорганизованная

Таблица 4

Процентное соотношение тканевых компонентов щитовидкой

железы

1 1 г 1 Параметры!Фолликулярный [ |С=рия |эпителий (/?) 1 1 Коллоид (%) 1 Строма (X) 1

\ к 1 51.7 1 + 0.8 | 1 28.9 •■0.9 \ 19.4 + 0.6 |

I I 1 1 54,2 1 + 1 0.2* | 23.8 + 0,9* | 22,0 + 0.4* |

1 1а 1 I 52,9 1 + 0,8 ! 24,2 0.5* | 22,9 + 0.6* |

1 11 1 1 1 54,7 1 + 1 0.8* | | 21.4 + 0.4* | 24.9 + 0,7* |

1 Па • 1 1 54.1 0.6* | 1 23,4 + 0.8 | 22.5 + 0.9 |

1 иг 1 52,1 1 + 1 0.2 | 1 28.0 + 0,2 | 19,9 + 0,5 |

1 Ша 1 1 51,5 1 + 1 0.8 .1 1 27,8 + 0.9 I 20.7 + 0.3 .|

1 IV ■ 1 1 '54,8 I + 1 0.4* I ,1 22.7 + 0.5* I 22,5 + 0.3* |

1Уа 1 54.0 1 + ч 0.8* I 1 23,2 + 0.9* I 22.8 + 0.8* |

1 V 1 1 51.9 1 + 1 о, 6 Г 1 29.3 + 0.4 | 18,8 + 0.1 1

1 VI 1 1 54.1 1 +- 1 0,3* I 1 21.. 1 +0,4* | 1 24,8 + 0.7 |

1 У1а- 1 1 54.6 1 + 1 0.5* I 1 23,0 + 0.8» 1 22.4 + 0.6 |

1 . VII 1 1 52.3 1 + 1 0.3 I 1 25,1 + 0.7* | 21,6 + 0.8 |

VI 1а 1 | 53,9 1 + 1 0.7 | 1 23,9 + 0.5* I 20,2 0.5 |

1 VIII 1 1 54.3 1 + 1 0,6* Г 1 24,7 + 0.8* | 21.0 + 0.8 !

1 У111а | 1 1 53.0 1 . + 1 0.7 | 26,2 + 0.9 I | .20.8 + 0.5 I I

Примечание: *-р-£0, 05 - достоверность различий в сравнении с контролем

система взаимодействующих по принципу положительной и отрицательной обратной связи (Акмаев И. Г. ,1992а; Duntas L. et ai., 1988; Bruhn Т.О. et al.. 1994) структур гипстадамо-аденоптс-физарно-тиреоидного комплекса обеспечивает динамическое Постоянство внутренней среды тиреоидной паренхимы и, следовательно, адекватный уровень тиреоидных гормонов в крови, необходимый для поддержания гомеостаза целостного организма. По «/нению большинства авторов (Исакова Л. С.,1991; Угрдаов М.В.,1989; 1з~ hlkawa К. et al. . 1984,1983; Segersori Т. Р. et ai., 1937; Taylor T. et al.,1988) способностью сецернвровать TRH (гиреоиднкй рили-зинг-гормон) обладают нейросекреторные нейроны паравентрику-лярного, вентромедизтьного, аркуатного ядер гипоталамуса. При введении морфина гидрохлорида в возрастающих до 30-40 мг/кг дозах в нейросекреторных клетках указанных структур гипоталамуса при светооптическом изучении,препаратов отмечаются изменения, характеризующие усиление функциональной активности: ядра клеток крупные, имеют ровный или с умеренными инвагинациями контур кариолеммы,хорошо выраженное ядрышко. В перикарионе заметны участки просветления (результат тигролиза), встречаются нейроны с очень светлой цитоплазмой, что может свидетельствовать об усилении выведения нейросекреторных продуктов. Бета-базоФильные тиротропоциты аденогипофиза характеризуются' интенсивной альдегид фуксинофильной зернистостью. При электронно-микроскошческач. исследовании обращает на себя внимание преимущественная концентрация секреторных гранул в.области сосудистого полиса, В отдельных клетках, напротив,наблюдается резкое опустошение,по всей видимости,вследствие ЕЫброса секрета в кровоток.

При введении морфина гидрохлорида без учета толерантности в дозе 10 мг/кг в течение 3 недель наблюдается незначительное повышение содержания в плазме крови трийодткронина (на 13,"/%). который через 1 неделю после отмены препарата продолжает нарастать (до 135,355) на фоне падения уровня тироксина даже ниже контрольных показателей (до 89,43%),что свидетельствует об усилении периферического дейодчрования Т4 в метаболически более активный ТЗ. Инъекции морфина гидрохлорида в стабильной ¡концентрации 20 мг/кг в течение 3 недель вызывает достоверное повышение содержания в плазме обоих гормонов (ТЗ - на 64.73 , Т4 - на 167, А°в). Через неделю после отмены показатели возвратятся к контрольному уровне, причем содержание. Т4 ниже конт-

рольных значений, при параллельном росте индекса, конверсии на

Наиболее выраженными сдвиги гормонального фона оказались з серии с прерывистым курсом наркотизации в режиме "10 дней инъекций - 7 дней перерыв - 10 дней инъекций". К окончанию курса отмечено ' резкое повышение уровня ТЗ и Т4-(соответственно до 236,3% и 190,2%). еще через 1 неделю содержание три-йодтиронина ощутимо снижается. . а тироксина - остается практически без изменений. Таким образом, при введении более высоких доз морфина гидрохлорида и создании дополнительного стресса в результате временной отмены препарата, наблюдается заметно более ¿сраженная активация функции щитовидной, железы, расцениваемая как компенсаторная реакция на морфинный аффект. Структурную изменения также наиболее выражены в серии с прерывистым введением препарата и в целом подобны таковым при высоких (до 30 -40 г.1г/кг) дозах (отечность и инфильтрация стромы, застойные явления в интраорганных сосудах, преобладание фолликулов среднего и малого диаметра, резорбция коллоида, гипертрофия тиро-цитов). электронно-микроскопически отмечаются признаки активации бэлоксинтезирующих органелл тироцитов и С-клеток щитовидной железы.

Морфологические изменения' в тиролиберин-продуцирующих элементах гипоталамуса и бета-тиротропоцитах аденогинофиза позволяют заключить об усилении экструзии секрета к моменту окончания курса инъекций, по прошествии недели после отмены препарата обильная грануляция указывает на активацию процессов синтеза и депонирования секретируемых продуктов.'

Большой интерес представляют результаты исследований с введением относительно низких доз морфийа гидрохлорида. (1-4 мг/кг). поскольку указанные концентрации соответствуют употребляемым больными морфинней зависимостью (Вальдман А. В., 1988; Морозов Г.В., Боголепов H.H. ¿1984; Дунаевский В.В.,Стяжкин В.Д..1991).Закономерности структурно-функциональных перестроек механизмов регуляции в эксперименте могут быть использованы для сравнительного анализа и.экстраполяции, в определенной степени, результатов на человека. .

При введении 1 мг/кг морфина гидрохлорида в течение 3 недель уровень в плазме крови тиреоиДных гормонов после прекращения инъекций был умеренно повышен (ТЗ - до '111. 855 ,Т4 - до 107.6%). через неделю после отмены содержание трийодтиронина

падало ниже контрольных цифр; а тироксина продолжало нараС • тать. При использовании возрастающих с учетом толерантности от 1 до 4 мг/кг доз препарата в течение < «где.чь зарегистрировано более отчетливое повышение урбвня гиниодтироничз (да 131,4%) и тироксина (до 134,3%*, через неделю после отмены показатели ciffl.ía^TO.f?. ;с контрольным Значениям. В целом лика

мика изменений гормонального профиля щитовидной железы.в опытах данной серии подобна наблюдаемой при введении морфина гидрохлорида в возрастающих от 10 до 30 мг/кг дозах, но характеризуется значительно меньшей амплитудой колебаний. Интересно отметить тенденцию к прогрессирующему снижению индекса коньер ■ сии тироксина в трийодтиронин на фоне низких доз морфина гидрохлорида в отличие от более высоких,где после отмены пренара та, как правило, направленное на компенсацию потребностей opea низма периферическое дейодирование тироксина протекает более интенсивно.

Структура щитовидной железы,.. изучаемая с помощью света вой микроскопии, имеет менее выраженные в сравнении с копт ролем изменения. Так. наблюдается умеренное снижение объемной плотности интралюминального коллоида при параллельном нараста нии сдельной площади эпителия, обусловленного не столько пипер трофией фолликулярных клеток, сколько их гиперплазией и форми рованием микрофолликулоз. Ультраструктурные изменения свидетельствуют .об участии значительной части клеточных элементов в процессах синтеза, секреции и элиминации тиреоидннх гор монов в кровеносное русло и выражаются в расширении ядерных пор гироцитов, .гипертрофии ядрышка, расширении канальцев цкто-плазматического ретикулума, накоплении в цитоплазме большого количества секреторных гранул. В нейросекреторных клетка^ гипоталамуса и тиротропоиитах аденогипофиза имеет место активация. синтеза и депонирования секреторных гранул.

Таким образом, заканчивая анализ результатов наших исследований, следует подчеркнуть, что в ответ на введение мордаа гидрохлорида щитовидная железа крыс реагирует усилением функциональной активности, морфологические перестройки также лод-тяервдают гиперфушциональное состояние органа. Тот факт, что да:?е низкие (1-4 мг/кг) дозы препарата вызывают изменение гормонального профиля щитовидной железы, является свидетельством зыйжий чувствительности тирепидной 7кану, к п^нлоеднннч воз-Деиствнзм. После отмены морфина гидрохпорида уровень гормешеб

- к; -

имеет тенденцию к нормализации. Процесс-этот идет быстрее при введении препарата в меньших дозах и укорочении курса инъекций.

Трудно сделать.однозначный вывод, опосредованно ли морфина гидрохлорид влияет на щитовидную железу через активацию

«»игральных звеньев регуляции - гипоталамуса и аденогипофиза.

или кмг Л' место непосредственное воздействие данного -наркоти-

Чгского эняльгетика ка тиреоидные элементы. Последнее нельзя

Асклачитъ ¡;ocKc\RbKv щитовидная железа богато иннорвируется (а . . периферические нервы также имеют опиатные рецепторы - Герц А..

Миллан М.. 1989; Хугаева В.К., 1991; Gupt C.B. et al.. 1989) и кровоонаблсается. Выявленные нами значительные изменения С-кле-точного аппарата железы, активация эозинофилов и лаброцитов, участвующих во внутриорганной регуляции, служат тому подтверждением. -Сопоставление результатов наших исследований с данными литературы, содержащей сведений о влиянии на эндокринную систему' и,. ь частности, на щитовидную келезу фармакологических, стреосогешшх, температурных и других воздействий (Вылегжанина Т.А. с соает.. 1996; Глумова В. А., 1981; Рящиков С.Н., 1989; Усенко ё.с..193S) позволяет констатировать, что структурная и функциональная лабильности щитовидной,железы имеет компенсаторно-приспособительный характер и направлена на поддержание гомеостаза.

Таким, образом, взэдение морфина .гидрохлорида вызывает выраженные структурные и функциональные • перестройки тиреоидной ткани, заключающиеся в увеличении высоты тироцитов. уменьшении среднего диаметра фолликулов, резорбции интралюминального кол-лсида, повышении объемной плотности стромального компонента.■ Эти изменения •расцениваются как морфологические проявления функционального напряжения органа, направленного .на ..мобилизацию адаптивных, реакций организма при хронической морфинной интоксикации. • .

ВЫВОДЫ

1; Морфина гидрохлорид .вызывает акти&ацию функционирования щитовидной железы, что проявляется в повышении уровня ти- . реоидных гормонов - трийодтиронина (ТЗ) и тироксина (Т4) - в .плазме крови. Степень усиления Функциональной активности органа зависит от дозы препарата: она наиболее выражена при вводе-

кии возрастающих да мг/кг концентраций морфина гидрсхле--рила, а также инъекциях яг, чг/кг прерывистым курсе??.

2. Морфологические пленения органных структур щитовидной хвлззы вариабельны в за&мсикости от рода экспериментальных воздействий и носят компенеатсрко-приспосоОит^лькыЛ характер. В условиях дополнйтельвд'о стресса (временная отмена препарата в серии VI) и при введении возрастающих до 40 мг/кг доз отмечены: достовернее увеличение высоты тироцктоз с гипертрофией и гииериназией органелл. уменьийнле среднего диаметра фолликулов. интенсивная вакуолизация и резорбция коллоида, расширение и гиперемия ме:::Фолликулярных капилляров с явлениями стлг»а и слад-жирования эритроцитов. отечность соьдикичольнсткаг'иой с троны.

3. Введение относительно низких (1-4 мг/кг,1 доз морфина гапрохлорида вызывает аналогичны^ изменения тиреоидных структур и гормонального профили железы. однако степень их экспрессии отличается от результатов 1.1-1. VI серий (проявляется прямая зависимость "доза-эффект").

4. Морфо-функциональные изменения щитовидной железы н.^елт обратимый характер. Через 1 неделю после отмены морфина гид-рохлори.ца уровень тиреоидных гормонов имеет тенденцию к снижению и ириближзется к контрольным показаниям. Однако индекс конверсии тироксина в трийодтиргиш, как правило, нарастает (за исключением серий экспериментов с дезами 1-4 мг/хг), что является компенсаторной реакцией, направленной на поддержание эФФекторны/ влияний тиреоидных гормонов на органы-мишени в условиях развития абстиненции.

5. и|г.товидная железа в экспериментальных Клониях реагирует как единая высокоорганизованная система: помимо тироци-гов, реактивные изменения отмечены со стороны С-клвточной популяции (увеличение площади контакта с тироцитами, гипертрофия органелл, активация синтеза, накопления и экструзии секреторных гранул), вовлеченность тучных клеток (увеличение их числа, гипертрофия, накопление гранул секрета), миграция эозинофилое в Соединительнотканную с/рэму Все вышеизложенное свидетельствует с мобилизации внутриорганных механизмов регуляции щите-ридной железы в ответ на прямое действие морфина гидрохлорида.

6. Морфикная наркотизация активизирует центральный 1трансгипо$изарный) путь регуляции Функционирования щитовидкой нелезы. о чем свидетельствуют структурные изменения нийросек-

- 1С* -

реторных клеток гипоталамуса и б«га~базо.рильных т^ротропоцитов аденогипофиза. При этом аффект также зависит от дозы ?зводлмого препарата: на фоне введения, низких концентраций проявляются признаки усиления секреции. во:.>цействне высоких доз. морфина гидрохлорида вызывает экструзию секретируемсго материала.

СПИСОК РАБОТ. ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Чучкоаа H.H., Гминоеа Н. А.. Коляхеза НИ., Калинина A.B. Влияние различных доз морфина при Формировании хронической морфинной интоксикации: Tes. дом. науч. -практ. конф. молодых ученых. поев. 60-детиа Ижевского гос. кед ин-та. -!!жевлк, 1093. - С. 101-.ЮЗ

?.. Чуйкова И. И. . Сабельников №. Е.. Юмкнова Н. К. Нейрогли-алонме взаимоотношения при длительных воздействиях малых, дез морфина. 'VCб. ст. "Актуальные вопросы фундаментальней к прикладной медицинской морфологии". - Смоленск. 19Э4. - С. 149-150.

3. Глумола В. А., Юминова Н (.., ЧучковаН. Н.. Баженов А. Н. Влияние морфина гидрохлорида на морфо-функциональное состояние вдтоыупой железы крыс. //Морф. сб. ст. мед. ВУЗов России "Актуальнее вопросы медицинской морфологии".- Ижевск, 1994 -Вып. 3. - С\ 28-31.

4. Юминопа Н. А.. Глумова В.К-. Чучкова H.H. Структурно -фуг'кц/!о;;чльная организация щитовидной железы крае в норме и при морфинаой интоксикации. //Российские морфологические ведомости,- К. .1995,- М 2. - С. 85-88.

5. Чучкозл H.H., Глумова Б. л . Юминова H.A.. Марков В. Н.. Семенов ß. В. К. ьопросу комплексной морфе-функциональной оценки нейрозидсжрилноП регуляции а эксперименте. /'/Св. с г. '"Достиле-Ш'Я и перспективы ЙГ'МА".- Ижевск. - с.21 -24.

К'минпва н. Л Изменения норфо-фуякциональных параметров щитовидной железы крыс при морфинной интоксикации: Натер, peert. науч.-практ. конф. "Актуальные вопросы патологической и нормальной морфологии", - Ижевск, iS35.- С. 7fi.

7 Глуь<е&э В. К.. Марков В. Н., Рябков С. Н.. Красноперое P.A.. Чучксва Я.Н-. ЮминсБа Н К . Семенов В. В. Комплексная оценка механизмов интеграции датовидк'зй ж?лезы в эксперименте. /Лруды И1Ж. - Ижевск. 1*95. - Г. 33. - С. 49-5?.

8. Чуйкова И. Н.. ЮмчноЕа U.A. Сравнительный анализ абстинентного линдрока у ¡фыС с морфпиной интоксикацией разными до-ззми: Матер, роса. науч. -практ. кенф. "Актуальные вопросы па-

тологической и нормальной морфологии". - Ижевск, Ш95.- С. 64.

S. Юнинсва h.a. Изменение морФо -функциональны:: параметров щитовидной железы крыс лрк воздействии малых, доз морфина гидрохлорида. //Российские морфологические ведомости.- М. ,1996. -N. 4. - С. 141-144.

10. Глумова.0.А.. Чучкова Н.Н., Юминова ¡I.A. Реактивные и пластические изменения органов нейроэндокршмоЯ систем» в норме и эксперименту. //Морфология. - С. - л., 1996. - Т. 109. К. г.

Подписано в печать 05.Ос.96. Тираж 100 экз. Заказ * 1093.

Объединение "Пс-тгрефия"