Автореферат и диссертация по медицине (14.00.10) на тему:Влияние лазерной терапии на клинико-иммунологические параметры при гастроинтестинальной форме сальмонеллеза

ргс ол

г {) №17

На правах рукописи

Карпов Сергей Георгиевич

Влияние лазерной терапии на клинико-иммунологические параметры при гастроинтестинальной форме сальмонеллеза

Специальность - 14.00.10 - "Инфекционные болезни "

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации иа соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Казань, 1997

Работа выполнена на кафедре инфекционных болезней Казанского государственного медицинского университета.

Научный руководитель- доктор медицинских наук,

профессор Д.Ш.Еналеева. Официальные оппоненты- доктор медицинских наук,

профессор Д.К.Баширова - доктор медицинских наук В.Н.Цибулькина Ведущее учреждение - Российская медицинская академия

последипломного образования.

Защита состоится 'Й\У"_£^£И_1997г. в Я часов на заседании диссертационного Совета К.074.12.04 при Казанской государственной медицинской академии по адресу: 420012, г.Казань, ул. Муштари, 11.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанское государственной медицинской академии (ул.Муштари,11).

Автореферат разослан ' а^с^/ъ-сл 1997 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета доктор медицинских наук, профессор

Т.И.Келина

Введение

Актуальность темы. Последние годы характеризуются повсеместным подъемом заболеваемости сальмонеллезом как в нашей стране, так и за рубежом. Высокая заболеваемость сальмонеллезом, временная потеря трудоспособности, развитие возможного бактерионосительства у части больных, остающихся источником заражения для других лиц, определяют его социально - экономическую значимость. Кроме того остаются нерешенными вопросы этиотропного и принципы рационального патогенетического лечения этого заболевания.

В настоящее время известно, что нарушения иммунитета при развитии сальмонеллезной инфекции сопровождаются выраженной супрессией пролиферации Т-лимфоцитов, резким угнетением фагоцитирующих клеток и развитием дефицита гуморальных факторов защиты (Н.Д.Ющук, В.М.Фролов и соавт.,1993). Дисбаланс клеточных показателей иммунитета и дефицит местной продукции секреторного иммуноглобулина А влияют на местный иммунологический гомеостаз, способствуя формированию длительного бактерионосительства, продолжающегося от полутора - трех месяцев до полутора лет ( С.Г.Пак, М.Х.Турьянов и соавт., 1988; Р.А.Рашидова,1988; Н.Д.Ющук, В.М.Фролов, 1993). Вследствии этого, актуальным остается поиск оптимальных иммуномодулирующих методов лечения сальмонеллезной инфекции для устранения возможного бактерионосительства.

С целью коррекции иммунного ответа при сальмонеллезе предпринимаются многочисленные попытки поиска новых иммуномодулирующих препаратов, а также немедикаментозных методов иммуностимуляции.

Обширнейший экспериментальный и клинический материал, накопленный в последние годы в области лазерной терапии, позволяет предположить возможность использования низкоинтенсивного лазерного

излучения для модуляции иммунологической реактивности организм; при различных иммунодефицитных состояниях.

Вышеуказанное определило цель и задачи исследования.

Цель исследования.

Оценка клинико - иммунологических параметров у больных ( гастроинтсстинальной формой сальмонеллеза, получавших в состав» комплексной терапии низкоинтенсивное инфракрасное лазерно( излучение.

Задачи исследования.

1. Изучить состояние параметров клеточного и гуморальной иммунитета у больных гастроинтестиналыюй формой сальмонеллеза с различной степенью тяжести в динамике заболевания.

2.Выяснить влияние низкоинтенсивного инфракрасного лазерногс излучения с различной длительностью экспозиции на клиник} заболевания и иммунологические параметры больных сальмонеллезом.

3.Разработать рациональный метод лазеротерапии для комплексного лечения гастроинтестинальных форм сальмонеллеза.

Научная новизна исследования.

1.Впервые изучено воздействие низкоэнергетическогс инфракрасного лазерного излучения на клинико - иммунологические параметры при интестинальной форме сальмонеллеза.

2.Разработана методика применения лазеропунктуры с оптимальным режимом воздействия при различных формах тяжести интестинального сальмонеллеза.

3.Впервые предложен лечебный метод с использованием низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучения для профилактики бактерионосительства у больных, перенесших гастроинтестинальную форму сальмонеллеза.

Теоретическая значимость .

Дано клинико - иммунологическое обоснование эффективности применения лазеропунктуры в комплексной терапии больных гастроинтестинальной формой сальмонеллеза и профилактики бактерионосительства у переболевших.

Практическая ценность.

1.Рекомендовано использование инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения контактным методом воздействия на рефлексогенные зоны в качестве дополнения к патогенетической терапии при тяжелом и среднетяжелом течении гастроинтестинальной формы сальмонеллеза.

2.Рекомендован разработанный метод лазерорефлексотерапии для профилактики бактерионосительства у больных перенесших острую форму интестинадыюго сальмонеллеза.

Внедрение результатов исследования.

Разработанные практические рекомендации нашли применение в отделении острых кишечных инфекций клинических инфекционных больниц N 1 и N 2 г.Казани.

Положения, выносимые на защиту:

1.У больных интестинальной формой сальмонеллеза имела место иммуносупрессия на клеточном и гуморальном уровне в острую фазу заболевания. Выраженность супрессии сопоставима с тяжестью течения заболевания.

2.Иммунологическая недостаточность клеточных и гуморальных факторов иммунитета в периоде ранней реконвалесценции (7-9день от начала заболевания) способствует повторному бактериовыделению и формированию бактерионосительства.

3.Выявлено коррегирующее влияние лазеротерапии на клинико-иммунологические параметры больных с гастроинтестинальной формой сальмонеллеза и на повторное бактериовыделение.

Материалы диссертации доложены на конференции молодых ученых, посвященной 70-летию кафедры инфекционных болезней КГМУ (Казань, 1994), на Международной конференции "Клиническое и экспериментальное применение новых лазерных технологий" (Казань, 1995), на обществе инфекционистов Республики Татарстан (Казань, 1997).

Публикации: по теме диссертации опубликовано 7 научных работ.

Структура и обьем диссертации.

Диссертация изложена на 98 страницах машинописного текста, состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы (72 отечественных и 61 иностранных источников ). Работа включает 7 рисунков и 15 таблиц.

Клиническая характеристика больных и методы исследования

Обследозано 164 больных с гастроинтестинальной формо£ сальмонеллеза в возрасте от 16 до 60 лет, из них 52% - мужчин, 48% • женщин, а также 34 практически здоровых лиц. Все больные поступал!-в стационар в первые 3 дня болезни.' Легкая форма заболевание наблюдалась у 10 (6%) больных, среднетяжелая у 92 (56%) и тяжела* форма у 62 (38%).

Диагноз сальмонеллеза был подтвержден выделением возбудителе из фекалий в 90,1% случаев, в 9,9% случаях - на основании клинико эпидемиологических данных и данных серологии. В высеве домшшрова; ссровар Salm, enteritidis (97,3%), в 2,7% высевалась Salm. derby Гастроэнтеритический вариант течения наблюдался у 116 (70,7%}

больных, гастроэнтероколитический- у 48 ( 29,2%) человек, энтероколитический - у 2 (1,2%).

Всем больным проводилась общепринятая терапия: сальмонеллезный бактериофаг в течении 5 дней, стол N 4 по Певзнеру, поливитамины, ферментативные и антигистаминные препараты и при необходимости сердечные гликозиды. Коррекция водно-электролитных потерь осуществлялась назначением официнальных солевых растворов

Курс лазеротерапии ( группа из 96 чел.) проводился аппаратом для лазерной терапии АЛТМ-1-2 (ПО "Элекон" г.Казань) с использованием инфракрасного излучения полупроводниковых лазеров. В работе выбран режим непрерывного излучения с длиной волны 0,85 мкм мощность лазерного излучения на выходе световода 20 мВт. Воздействие лазерного излучения на организм осуществлялось контактным (накожным) методом на биологически активные зоны общие и сегментарные.

Курс лазеротерапии состоял из 5 ежедневных сеансов. Лечение больных проводилось в утренние часы после завтрака. Зоны акупунктуры и их сочетание для проведения лазерорефлексотерапии были заимствованы из традиционной восточной медицины, по ранее описанным методикам для проведения лазерорефлексотерапии (С.Д.Плетнев, 1981; В.В.Козлов и соавт., 1993; В.Е.Илларионов, 1994).

Лазерная фотостимуляция начиналась с воздействия на зоны акупунктуры общего действия в области кистей рук и нижних конечностей, составляющие базовый рецепт: 014(хе-гу), Е36(цзу-саиь-ли), УС12(чжун-вань), ЫРб(сань-инь-цзяо), МСб(нэй-гуань). Доза на эдну зону составляла 0,4 Дж. Фотостимуляция зон, входящих в базовый рецепт, осуществлялась в течение всего курса лазеротерапии с их 1ередованием по дням недели: понедельник, среда, пятница - 014, Е36

симметрично и VC12, вторник, четверг, суббота - МСб, RP6 симметрично и VC12.

Далее проводилось облучение сегментарных зон проекции органов брюшной полости. При спастических болях внизу живота, воздействовали на зоны акупунктуры - УС4(гуань-юань), при болях в околопупочной области - УСб(ци-хай). С учетом преобладания симптомов гастроэнтерита облучалась зона Е25 (тянь-шу), РС42 (цзинь-чжун) и РС41 (ци-чжун). Экспозиция на рефлексогенные зоны в зависимости от группы больных составляла 60 и 120 секунд, что соответствовало дозе на одну зону 1,2 и 2,4Дж.

В течение одной процедуры воздействовали на 6-8 зон акупунктуры. Суммарная доза облучения за 1 сеанс лазеротерапии не превышала 6,8Дж (при экспозиции 60 сек. на сегментарные зоны) и 11,6Дж (при экспозиции 120 сек.).

Исследование факторов клеточного и гуморального иммунитета проводилось в иммунологической лаборатории Центра профилактике и борьбе со СПИД Республики Татарстан под руководством заведующего лабораторией И.Г. Мустафина.

В работе использовалась гепаринизированная (20-25 ЕД гепарина на 1 мл крови) и цельная венозная кровь. Забор крови производился дважды: в день поступления больного (1-3 день болезни) и в периоде ранней реконвалесценции (7-9 день болезни).

Мононуклеарные клетки выделяли из гепаринизированной крови по методу A.Boum (1968) на фиколл-верографине. После выделения клетки отмывали раствором Хенкса и доводили концентрацию до 2х106/мл.

Иммунофенотипирование лимфоцитов. Определение популяций и субпопуляций лимфоцитов проводили в непрямой реакции иммунофлуоресценции с моноклональными антителами серии ИКО МП

"ДИАГНОТЕХ" (г.Москва) по методике разработчиков (А.Ю.Барышников и соавт., 1993). В работе использованы моноклональиые антитела ИКО-90 (CD3), ИКО-86 (CD4), ИКО-31 (CD8), ИКО-116 (CD16), ИКО-105 (CD25), ИКО-1 (HLA-DR). В качестве вторых антител применяли Р(аЬ)2-фрагменты кроличьей антисыворотки против иммуноглобулинов мыши, меченных флуоресцешшзотиоционатом. Учет реакции иммунофлуоресценции проводили на проточном цитофлуориметре "FACScan" (Becton Dickinson, USA). В каждой пробе анализировали 5000 клеток.

Сывороточные иммуноглобулины А, М, G определяли методом гурбидиметрии на биохимическом анализаторе ФП-901 М по методике Т.И. Лукичевой и соавт. (1991), Н.М. Кудряшовой и соавт. (1993).

Общекомплементарную активность сыворотки крови изучали по 50% гемолизу эритроцитов барана по E.A.Kabat, M.Mayer (1977).

Циркулирующие иммунные комплексы исследовали методом преципитации полиэтиленгликолем - 6000 по M.Dygeon et al. (1977).

Фагоцитарную' активность нейтрофилов (ФАН) оценивали по ;пособности клеток захватывать St. aureus. При этом определяли ФАН -троцент нейтрофилов, фагоцитировавших стафилококк, ФЧ ^фагоцитарное число) - среднее число St.aureus., захваченных одной <леткой, АФП (абсолютный фагоцитарный показатель) - общее количество частиц St.aures, фагоцитированных нейтрофилами.

Метаболическую активность нейтрофилов определяли в НСТ- тесте шонтанном и индуцированном вариантах по методу В.Н.Рас et al.( 1968) з модификации М.Е.Виксмана и А.Н.Маянского (1979). В шдуцированном НСТ-тесте в качестве стимулятора применяли шрогенал в конечной концентрации 0,5 мкг/мл.

Статистическая обработка цифрового материала проводилась общепринятыми методами вариационной статистики с помощью пакета

программ MSTAT для персональных компьютеров по методу "Hypotesis test for means" для парных значений.

Результаты исследования и их обсуждение

Установлено, что у больных с гастроинтестинальной формок сальмонеллеза в остром периоде (1-3 день болезни) отмечались сходные изменения во всех звеньях иммунитета, степень выраженности которы? была пропорциональна тяжести течения заболевания (табл.Ы!).

У больных с легким и среднетяжелым течением наблюдало« угнетение иммунной системы по Т-клеточному звену, выражающееся i снижении абсолютного и относительного количества зрелых Т-лимфо цитов (CD3+), Т-хелперов/индукторов (CD4+), при высоком относите льном содержании активированных лимфоцитов (CD25+ и HLA-DR).

Фагоцитарное звено иммунитета характеризовалось увеличением общего числа нейтрофилов, их высокой метаболической активностью ] спонтанном и индуцированном НСТ-тесте, снижением функциональной резерва, при неизмененной фагоцитарной активности нейтрофильны: гранулоцитов.

В гуморальных факторах иммунитета отмечалось повышен» циркулирующих иммунных комплексов.

При тяжелом течении заболевания наблюдались более глубоки! изменения в клеточном звене иммунитета, выражающиеся в подавленш пролиферации всех изучаемых популяций и субпопуляций Т-лимфоцито1 (CD3+, CD4+, CD8+),NK-клеток, с резким снижением относительноп числа активированных клеток (CD25+, HLA-DR), снижениег иммунорегуляторного индекса и угнетением фагоцитарной активност! нейтрофилов.

На фоне общепринятой терапии в периоде ранне] реконвалесценции (7-9 день болезни) у больных с легкой формо; сальмонеллеза (10 чел.) происходило полное восстановление популяций

Иммунограммы больных сальмонеллезом в острую фазу заболевания

показатели здоровые легкое средней Рс тяжелое Рс

лица течение тяжссш легк течение сред

п=34 п=10 п= 92 теч. п=€2 тяж

лейкоциты ЛФ/мз л 5,0+0,5 5,6ifl,7 5,5+0,5 5,7+0,52

ЛИмф.'103/мКЛ % 1,86+0,09 1,7+0,08 1,43+0,14* 1,47+0,09**

38,5+1,8 30,7+1,2** 26,9+2,9* 26,0+3,0*

CD3 ■ 103/мкл 1,5+0,07 1,02+0,07** 0,86+0,09** 0,75+0,06**

% 73,3+1,4 60,5+1,9* 57,5+2,5** 51,6+2,9**

CD4-103/mm 0,74+0,04 0,69+0,06 0,5+0,07* # 0,46+0,08**

% 42,2+1,6 38,4+1,2* 36,7+1,0* 29,8+1,3** **

CD8-103/MICI О,53+О,й1 0,49+0,08 0,38+0,05* 0,32+0,08*

% 28,9+1,8 29,3+1,6 26,6+2,3 22,0+1,97**

Tx/Ts 1,6+0,09 1,5+0,15 1,49+0,17 1,33+0,11*

CD16'103/mki 0,27+0,07 0,24+0,03 0,18+0,02* * 0,18+0,023*

% 14,0+1,2 14,3+1,1 11,1+0,98* 11,0+0,7*

CD25'103/MIOI 0,17+0,01 0,28+0,02* 0,29+0,04* 0,087+0,02** **

о/ /О 8,7+0,9 16,7+2,1** 18,5+2,2** 5,8±1,0* **

HLA-DR 103/м л 0,2+0,02 0,32+0,03** 0,29+0,019* 0,12+0,019*

% 11,6+1,2 17,9+1,1** 19,9+1,86** 7,6+0,98* **

нещр.-103/мкл 2,7+0,05 3,6+0,43* 3,8+0,48* 3,7+0,49*

V /о 55,5+1,95 63,4+2,5 67,3+3,0* 65,1+3,4*

FAN st. aureus 75,9+2,9 75,8+2,4 73,9+3,4 63,5+4,2* *

1>Ч микроб чаепп. 5,2+0,29 5,0+0,4 5,5+0,36 5,09+0,54

АФП 11146,8+922,5 14614,0+938,6* 15033,0+1540,1* 12232,2+2264,7

микробтсл/мкл

слон. НСГ, % 9,1+3,07 32,9+4,5** 32,8+5,3** 35,9+4,8*

стим. НСГ, % 32,5+4,8 49,5+4,7* 46,4+4,2* 50,8+5,6*

функциональн.

резерв напр. 23,5+3,4 15,6+2,5* 13,6+1,9** 14,9+2,3*

комплемент 57,4+2,2 60,1+3,8 59,9+6,8 61,0+5,3

HCg<jE/NW СЫВ.

Ig А, г/л 2,03+0,14 2,1+0,16 2,2+0,19 2,12+0,23

Ig М , г/л 1,99+0,14 2,0+0,15 1,9+0,16 1,77+0,2

Ig G, г/л 12,1+0,72 12,8+0,9 12,5+0,8 12,6+1,0

ЦИК, усл.ед 0,029+0,0029 0,04+0,003* 0,038+0,004* 0,039+0,0036*

Примечания: внутри столбиков проставлены знаки достоверности по сравнению с группой здоровых лиц ; * Р<0,05 : ** Р<0,005

и субпопуляций Т-лимфоцитов, активированных лимфоцитов дс значений группы здоровых лиц. Относительный нейтрофилез сменяла относительным лимфоцитозом, с восстановлением функционально! активности нейтрофилов, что свидетельствовало о переход« нейтрофильных грану лоцитов в "состояние покоя". Отмечало« повышение содержания сывороточных иммуноглобулинов класса А и М снижение уровня ЦИКов.

При среднетяжелой форме сальмонеллеза (36 чел.) после обычно! терапии (см. табл.№2) в период угасания клинических синдромо! происходила активация Т-клеточного звена иммунитета, что выражалоа в лимфоцитозе, увеличении основных субпопуляций лимфоцитов Однако, процентное содержание зрелых Т-лимфоцитов (СБЗ+) хоть ! увеличивалось на 26,6%, по сравнению с острым периодом заболевания но не достигало значений группы доноров. Сохранялось повышенно! количество активированных лимфоцитов, экспрессирующих СБ25+ I НЬД-БИ антигены, что свидетельствовало о незавершенносп инфекционного процесса.

Изменения в фагоцитарном звене характеризовались снижение!» относительного количества нейтрофилов. Сохранялась, как и в острог* периоде, высокая активность микробицидньгх систем нейтрофилов, пр1 низких показателях их фагоцитарной активности и функциональной резерва.

В гуморальных параметрах иммунитета отмечалось повышен» содержания только и высокий уровень комплементарной активное^ сыворотки, при снижении количества ЦИКов.

При тяжелом течении заболевания у больных (21 чел.) на 7-9 деш болезни сохранялась лимфопения со снижением основных субпопуляцш Т-лимфоцитов (СОЗ+, CD4+, СБ8+), оставался низким иммунорс гуляторный индекс, как в острую фазу заболевания (см. табл.№3).

Иммушграммы Гюлыц.гу сальмонеллсаом со среднетяжатым течением в динамике заболевания

показатели здоровые острая фаза ранняя Pc

лшз рекоивалесцснция острой

п=34 п=36 п=36 фазой

гейкоцшы 5,0+0,5 5,4+0,34 6,5+0,37** • *

Э 3/мкл

Имф.'103/МКЛ 1,86+0,09 1,5+0,16* 2,6+0,25** *

% 38,5+1,8 29,5+2,9* 42,7+4,6 *

;D3 'ЮЗ/МЮТ 1,5+0,07 0,84+0,08** 1,8+0,2 **

% 73,3+1,4 55,5+2,5** 67,5+2,07* *

"Di -10 3/мкл 0,74+0,01 0,53+0,07* 1,18+0,14** **

о/ /о 42,2+1,6 35,6+2,3* 44,2+2,25 *

;D8 -Ю3/МКЛ 0,53+0,04 0,4+0,04* 0,78+0,1* **

% 28,9-М,8 26,6+1,6 32,0+2,0 ■ • *

Tx/Ts 1,6+0,09 1,4+0,1 1,6+0,15

:D16 -Ю3/МКЛ 0,27+0,07 0,18+0,03* 0,37+0,0 8

о/ /о 14,0+1 ,2 10,4+0,98* 13,5+1,85

:Б25-Ю3/мкя 0,17+0,01 0,29+0,04** 0,33+0,02**

/о 8,7+0,9 19,05+2,2** 12,7+1,4* ' #

4LA-DR.103A ют 0,2+0,02 0,27+0,02* 0,36+0,08*

о/ /о 11,6+1,2 18,9+1,8 * 12,2+1,8 *

цейгр 103/мкл 2,7+0,05 3,6+0,4* 3,5+0,23**

% 55,5+1,95 63,3+2,9* 54,0+2,9 *

-AN st. aurais,% 75,9+2,9 72,9+3,4 75,5+3,8

1)4 .микроб.час! . 5,2+0,29 4,7+0,36 4,3+0,37*

АФП 11146,8+922,5 13046,6+918,8 11073+1827,8

квофоблел/мю

спон. НСТ, % 9,1+3,07 31,6+4,6** 24,2+3,8 *

сгим. ИСТ, % 32,5+4,8 44,1+4,54* 38,0+3,45

фуиашоиальн.

резерв нейтр. 23,5+3,4 12,5+2,5* 15,8+3,4*

комплемент 57,4+2,2 6 1,7+8,3 79,4+10,5**

НС 5ОЕ/МЛ СЫВ

Ig Л , г/л 2,03+0,14 2,4+0,2 2,7+0,2*

Ig M, г/л 1,99+0,14 1,89+0,14 1,9+0,21

Ig G, г/л 12,1+0,72 . 12,2+0,68 13,1+0,8

ЦИК, усл.ед 0,029+0,0029 0,038+0,004* 0,029+0,0045

Примечание внутри столбиков проставлена достоверность по сравнению с группой здоровых лиц

* -Р<0,05 ,** - Р<0,005

Количество активированных лимфоцитов (CD25+, HLA-DR) не превышало показатели группы доноров. Резко возрастало на 72% относительное количество NK- клеток.

В отличие от легкого и среднетяжелого, при данном варианте течения заболевания на изучаемых сроках сохранялся относительный нейтрофилез. Фагоцитарная активность нейтрофильных гранулоцито! (по показателям ФАН,ФЧ) у больных была значительно сниженной, ш фоне высокой активности микробицидных систем клеток.

На этих сроках не наблюдалось ожидаемого повышенш сывороточного IgA. Более того, отмечалось снижение количеств; иммуноглобулина М, по сравнению с группой доноров на 20%, чте свидетельствовало об отсутствии иммунного ответа на антиген i способствовало затяжному течению заболевания.

Таким образом, при общепринятой схеме леченш гастроинтестинальных форм сальмонеллеза в начале второй недел! заболевания при среднетяжелом, и в особенности, при тяжелом теченш сохраняется угнетение реактивности иммунной системы, чте сопровождается, как показали проведенные исследования, повторнь^ выделением сальмонелл в копрокультуре: при среднетяжелом течении - i 16,3% случаев, при тяжелом - в 47,6% случаев.

Учитывая это обстоятельство, необходимо дифференцированс проводить терапию больных сальмонеллезом с применением иммуно модуляторов. Немногочисленные попытки включения иммуно модуляторов, таких как реаферон, лейкинферон, спленин в комплек< терапии больных сальмонеллезом были успешными и сопровождали« нормализацией иммунного статуса больных и прекращением повторной выделения сальмонелл (B.C. Зуев, Н.Я. Спивак и соавт.,1991; И.И Папушина, И.И. Ногачевский и соавт.,1992; В.М.Фролов, И.А Пересадин 1993; P.Thygesen, L.Branolt et al.,1994).

Иммунограммы больных сальмонаттезом тяжелого течения в динамике заболевания

показатели здоровые острая фаза ранняя Рс

лица реконвалесценция острой

п=34 п=21 п= 21 фазой

□ лейкшшы ■ 5,0+0,5 5,76+0,5 6,8+0,5 *

■103/мкл

лимф.-Ю3/мкл 1,86+0,09 1,4+0,16* 2,1+0,16 *

V /о 38,5+1,8 24,3+3,1** 30,7+2,5*

СРз-103/мкл 1,5+0,07 0.62+0,09 ** 1,26+012 **

% 73,3+1,4 48,7+1,0 ** 61,4+2,9** *

С04-103/мкл 0,74+0,04 0,39+0,1** 0,65+0,as *

о/ /О 42,2+1,6 27,6+2,3 ** 30,8+2,9 *

CDS-103/mici % 0,53+0,04 0,29+0,08 * 0,5+0,07 V

28,9+1,8 20,5+1,9** 24,8+1,6*

Tx/Ts 1,6+0,09 1,31+0,18 1,24+0,15*

СБ16-103/мкл 0,27+0,07 0,18+0,028* 0,35+0,03 * *

о/ /о 14,0+1,2 10,5+0,6 * 18,07+1,16* *

CIV 10 3/мкл 0,17+0,01 0,08+0,01** 0,17+0,01 **

% 8,7+0,9 5,2+1,3* 8,1+1,2

HLA-DR 10 3 А кл 0,2+0,02 0,12+0,029 * 0,25+0,05 *

% 11,6+1,2 8,3+1,1* 12,1+1,6 *

напр. 10 3/mkj 2,7+0,05 3,9+0,57 ** 4,4+0,5 **

% 55,5+1,95 66,5+3,6** 64,8+3,7*

FAN st. ams.% 75,9+2,9 64,4+4,1** ' 62,2+3,4**

ФЧ.микроб.час •. 5,2+0,29 4,97+0,43 4,1+0,17 ** *

АФП. 11146,8+922,5 12790,9+2396,4 11220,9+1457,2

микроб .тел / мкл

стон. НСГ,% 9,1+3,07 34,9+7,3 ** 29,8+5,6*

сшм. НСГ,% 32,5+4,8 48,8+7,4 * 44,9+4,2*

функциональн. 23,5+3,4 13,9+3,4* 15,1+2,6*

резерв нешр.

комплемент 57,4+2,2 62,8+7,0 70,5+5,5**

НС50Е/МЛ сыв

Ig А, г/л 2,03+0,14 2,13+0,29 2,05+0,2

Ig М х/л 1,99+0,14 1,99+0,35 1,6+0,13*

Ig G, г/л 12,1+0,72 14,0+1,0 13,1+1,7

ЦИК, усл.ед. 0,029+0,0029 0,039+0,005* 0,029+0,(ХМ

Примечание: внутри столбиков проставлена достоверность по сравнению с группой здоровых лиц

* - Р<0,05 **- Р<0,005

В последние годы накоплен обширнейший материал об иммуномодулирующем действии лазерного излучения (JI.A. Егорова,

A.B. Лутай и соавт.,1996; А.Х. Касымов, Н.Т. Саидов и соавт.,1996;

B.П. Булавкина, И.А. Новикова и соавт.,1995; и многие другие).

Имеются данные об использовании лазерного излучения и в клинике острых инфекционных заболеваний: при лечении острых вирусных гепатитов (В.В. Макарова, В.Н. Солнцева, 1995; И.М. Хаертынова, Д.К. Баширова, 1996), при роже (В.Е. Егоров, В.А. Дербенев, 1995; В.Х. Фазылов, Д.Ш. Еналеева, И.А. Андрюшко 1996), при дифтерии (A.B. Сундуков, Н.Д. Ющук и соавт., 1995), при острой пневмонии (JI.A. Егорова, A.B. Лутай и соавт., 1996), при острых кишечных инфекциях у детей (К.Г. Петрашвилли, 1991) и др. Однако, в доступной нам литературе мы не нашли работ по применению лазерного излучения при лечении сальмонеллеза.

Изучение влияния низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучения на клиническое течение и иммунологические параметры у больных с гастроинтестинальной формой сальмонеллеза и разработка метода лазеротерапии явились задачами настоящего исследования.

Пятидневный курс лазеротерапии проводился у 96 больных в сочетании с общепринятой схемой лечения сальмонеллеза. Группы были сформированы по тяжести течения заболевания и дозе лазерного воздействия. Больные со среднетяжелым течением болезни (56 человек) были разделены на две группы: 25 человек получали лазеротерапию с экспозицией 60 секунд на сегментарную зону (ЛИ-60) (суммарная доза облучения за сеанс не превышала 6,8Дж) и 31 человек - с экспозицией 120 секунд на сегментарную зону (ЛИ-120) (суммарная доза облучения не превышала 11,6Дж). Подобным же образом были сформированы группы больных с тяжелым течением заболевания: 21 человек получали ЛИ-60 и 19 человек - ЛИ-120. В группу сравнения

Показатели клинической эффективности применения НИЛИ при тяжелой форме сальмонеллеза

Рисунок №1

бактериовыделение в периоде

ранней реконвалесценции 47,60%

14,30%

0%

общепринятая терапия

п=21

комплексная терапия (ЛИ-60)

п=21

комплексная терапия (ЛИ-120)

п=19

□ лихорадка

□ диарея койко-день

входили больные, получавшие только обычную терапию (контрольна: группа).

Включение низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучени; (НИЛИ) в комплексную терапию больных со среднетяжелым и особенно, с тяжелым течением сальмонеллеза оказалось эффективным \ сокращало продолжительность основных ведущих синдромо; заболевания: интоксикационного, абдоминального и диарейного Сокращался средний койко-день (см.рис.№1).

Особенно важно отметить, что при комплексной терапии > максимальной (из использованных) дозой НИЛИ у больных с тяжелы? течением не наблюдалось повторного выделения сальмонелл I фекалиями в периоде ранней реконвалесценции. При использованш меньшей дозы НИЛИ эффективность лечения была несколько ниже сохранялся повторный высев сальмонелл в 14,3% случаев. У больных с< среднетяжелым течением сальмонеллеза при обоих режимах НИЛ]/ выделения возбудителя с фекалиями в периоде ранней реконвалесценцш не наблюдалось.

Более быстрое клиническое выздоровление и отсутствие повторной бактериовыделения в периоде ранней реконвалесценции в групп* больных, получивших 5-ти дневный курс лазеротерапии, по все! вероятности, связаны с действием НИЛИ на иммуно логическу к реактивность больных.

Был проведен сравнительный анализ иммунограмм больных получивших комплексную терапию с включением различных доз НИЛ1': (основные группы) с иммунограммами больных, находившихся нг обычном общепринятом лечении.

Результаты изучения показали эффективность комплексно! терапии с включением ЛИ-120 на все исследованные параметрь клеточного и гуморального иммунитета у больных со среднетяжелым и

Иммунограммы больных сальмонеллезом со ерсднстяжслым течением до лечения и после 5 дневного курса комплексной терапии /ЛИ с экспозицией 60 и 120 сек./

показатели острая рсшквалссценцня острая реконвалесценцня Рс

фаза после комп. тер. фаза после компл. тер. между

ЛИбОсск ЛИ 120сек. группами

1=25 п=25 п=31 п=31 осгр.ф. рекон.

лейкоциты 5,7+0,54 5,88+0,37 5,6+0,7 5,47+0,37

х103/мкл

лимфх103/мю 1,4*0,25 2,7+0,26** 1,4+0,14 2,1+0,2* *

% 26,9+3,0 46,4+4,3** 26,9+3,0 38,2+2,4* *

CD3X103/miot 0,79±0,1 1,7+0,4** 0,97+0,1 1,5±0,17*

% 57,8+3,5 69,9+2,0* 59,1+2,5 72,9+2,5

. CD4X 103/мкл 0,45+0,05 0,99+0,03** 0,54+0,09 0,94+0,1*

% 36,7+1,5 44,8+1,95* 37,8+1,4 44,8+1,95*

CD8 х103/мкл 0,35±0,07 0,77+0,1** 0,4+0,05 0,66+0,04** **

% 23,б±1,б 27,8+1,4* 29,5+2,7 33,0+2,2

Tx/Ts 1,6+0,23 1,5+0,2 1,63+0,19 1,47+0,15*

CD16 х103/мкл 0,14+0,02 0,3+0,22** 0,21+0,02 0,36+0,04** *

% 11,0+ 0,8 11,2+3,3 12,5+2,5 17,9+2,4 **

CD23X103/MK,I 0,3+0,05 0,26+0,05 0,28+0,038 0,27+0,037

% 21,4+2,6 9,6+1,8** 15,0+2,2 11,5+1,3 **

HLA-DRX103/MI л 0,26+0,02 0,32+0,02* 0,27+0,018 0,33+0,05*

% 18,8+1,69 12,4+1,8* 19,0+2,09 15,2+1,5

нсшр.х103/мю 4,1+0,4 2,9+0,2* 3,8+0,64 2,9+0,2 **

% 71,8+2,3 44,3+3,5** 65,9+3,9 55,0+2,2* **

FAN st. aureus °A 74,7+3,9 71,4+5,4 74,1+2,8 79,6+3,1

ФЧ микроб.част . 5,8+1,3 6,5+0,4* 5,8+1,3 4,8+0,5

АФП 18336,4+2755,6 13318,0+2779,0 13716+2678,9 11979,1+1688,5 **

микроб.тел/ мк, i

слон. НСГ,% 34,0+6,8 15,6+2,3* 32,9+4,6 14,4+2,6*

сшм. НСТ,% 46,5+3,1 37,6+3,3* 48,6+4,9 34,9+4,7* **

функ.резерв 11,57+2,6 22,0+3,4* 15,7+1,4 21,5+3,1

комплемент 58,8+7,3 60,4+3,7 59,2+4,9 61,4+5,05

НС50Е/МЛСЫВ

Ig А, г. /л 2,1+0,17 2,7+0,21* 2,1+0,17 2,7+0,2*

Ig М, г/л 1,87+0,13 2,5+0,2* 2,04+0,2 2,64+0,13*

Ig G, г/л I 11,7+0,94 12,2+1,7 13,7+0,8 16,1+0,7* **

ЦИК, усл. ед 0,037+0,003 0,03«),005 0,039+0,001 0,032+0,004

Примечание: и ¡утри колонок проставлена достоверность по сравнению с острой фазой заболевания

*- Р<0,05, **Р<0,005

тяжелым течением сальмонеллеза. Сравнительная характеристик методов лечения приведена в таблицах №4 и №5.

Как видно из таблиц, в основных группах больных, получавши: ЛИ-120, в отличие от групп сравнения происходило более полно восстановление параметров клеточного иммунитета: возрастал количество лимфоцитов и их основных субпопуляций (СВЗ+, СВ4-+ СВ8+), восстанавливался иммунорегуляторный индекс, увеличивалос количество активированных лимфоцитов (СБ25+, НЬА-ОЮ. На это: фоне отмечалось восстановление фагоцитарной активности нейтрофилоЕ нормализация их функциональной активности и функциональног резерва. Повышалась комплементарная активность сыворотки крови возрастало содержание иммуноглобулинов классов А, М, О.

Таким образом, лазерная физиотерапия повышает ; восстанавливает функциональную активность Т- и В- лимфоцитов гармонируя соотношение местного и гуморального иммунитета обеспечивает увеличение исходно сниженного числа Т-лимфоцитов повышает уровень иммуноглобулинов, и возрастание фагоцитарно] активности нейтрофильных гранулоцитов.

Включение низкоингенсивного инфракрасного лазерного излучени: в комплекс терапии больных сальмонеллезом приводило ] восстановлению реактивности иммунной системы, дающее возможность : более короткий срок освободиться от возбудителя заболевания.

Проведенное исследование показало целесообразность включен® разработанного нами метода лазерной рефлексотерапии в лечебньп комплекс больных со среднетяжелым и, в особенности, с тяжелы? течением гастроинтестинальной формы сальмонеллеза.

Иммунограммы больных сальмонсллезом тяжелой <|юрмы в острый период и через 5 дней после комплексной терапии /ЛИ с экегкхимией ВО и 120сск./.

показатели острая реконвалесцснщш острая реконвалесценция Рс

фаза после комп. тф. фаза после компл. тер. между

ЛИбОсек ЛИ 120сек. группами

п=21 п=21 п=19 п=19 остр.ф. рекон.

лейкоциты 5,5+0,56 6,2+0,39 5,5+0,5 6,9+0,8

х103/мкл

штф.х103/мкл 1,5+0,14 2,6+0,2** 1,52+0,11 2,6+0,18 **

% 27,2+2,4 41,4+2,4** 26,4+3,6 37,5+2,4*

СБ3х103/мкл 0,78+0,11 1,7+0,15** 0,8+0,28 1,9+0,29*

% 52,1+3,0 62,3+2,1* 54,1+4,5 71,3+3,8* *

С04х103/мкл. 0,42+0,08 0,95+0,1** 0,.58+0,07 1,2+0,2*

% 28,1+2,4 36,6+2,1** 32,0+2,2 46,0+2,8 ** *

СВ8х103/мкл 0,34+0,068 0,63+0,068* 0,35+0,06 0,68+0,1 *

% 22,6+2,1 26,6+1,6 22,9+1,9 26,0+1,32

Тх/Тв 1,21+0,12 1,5+0,39 1,4+0,07 1,75+0,15*

СБ,бхЮ3/мкл. 0,18+0,01 0,25+0,04 0,19+0,02 0,31+0,05*

% 11,7+1,6 10,0+1,5* 12,8+1,2 11,3+1,3

СБгз х103/мкл. 0,0&±0,016 0,31+0,01** 0,09+0,04 0,34+0,07**

о/ /0 6,1+1,0 11,7+1,4* 6,1+0,8 13,0+1,4**

НЬА'Е)гх103/м1 л 0,11+0,02 0,25+0,01 0,13+0,01 0,67+0,1** *

% 6,0+0,7 9,7+1,2* 8,6+1,05 24,7+2,3** **

наяр.хЮ3/ мю 3,6+0,4 3,4+0,2 3,5+0,5 4,4±0,8 *

% 63,2+2,2 54,6+3,2** 65,7+6,3 63,9+5,0 *

ИДЫ $1 аиге1В,% 62,4+3,97 70,0+3,8 63,8+4,5 78,1+4,1*

ФЧ .микроб.част 5,1+0,5 5,1+0,34* 5,2+0,71 4,9+0,3*

АФП 11494,3+1381 13138,5+998,4 12413,4+291,79 16838,4+2840,8 **

мпероб.тся/мге

слон. НСТ,% 33,8+3,59 26,8+6,2* 39,0+3,6 22,3+2,4 **

сшм. НСГ,% 49,1+5,6 44,8+3,2 51,6+3,9 45,8+2,3 *

функциональн. 15,3+2,5 18,0+2,7 15,6+2,0 23,5+2,4* *

резерв нейтр.

комплемент 59,6+3,7 59,1+3,8 60,8+5,2 80,5+6,9* ##

НСзоЕ/'мл сьш

^ А, г/л 2,05+0,29 2,6+0,1* 2,18+0,11 2,6+0,17*

Мд-/л 1,67+0,15 2,1+0,13* 1,67+0,14 2,5+0,19**

г/л 10,8+0,83 12,3+0,78 12,9+1,3 13,6+1,2

ЦИК, усл.ед. 0,038+0,002; 0,031+0,005 0,01+0,003 0,028+0,002** *

Примечаше: виутри колонок проставлена достоверность по сравнению с острой фазой заболевший * -Р<0,05, ** Р<0,005

ВЫВОДЫ

1.У больных гастроинтестиналыюй формой сальмонеллеза (на 1-день заболевания) наблюдалась супрессия Т-клеточного зве? иммунитета, повышение функционально-метаболической активное! нейтрофилов при снижении их функционального резерва на фог повышенного уровня ЦИКов. Степень выраженности иммунологически сдвигов зависела от тяжести течения инфекционного процесса.

2;В периоде ранней реконвалесценции (на 7-9 день болезни) I фоне традиционной терапии при легкой форме сальмонелле; происходило полное восстановление основных показателей Т-клеточног иммунитета и системы фагоцитоза с нарастанием урош иммуноглобулинов А и М. При среднетяжелой форме наблюдалос восстановление некоторых показателей клеточного иммунитета сохраняющимся низким функциональным резервом нейтрофилов. Пр тяжелом течении заболевания продолжало иметь место недостаточное! Т-клеточного звена и системы фагоцитоза, что сопровождалос повторным бактериовыделением у 47,6% больных.

3.Включение инфракрасного низкоинтенсивного лазерног излучения в комплекс терапии больных со среднетяжелым и тяжелы течением гастроинтестиналыюй формы сальмонеллеза сокращас продолжительность основных клинических синдромов заболевани (интоксикационного, абдоминального, диарейного) и снижает частот повторного бактериовыделения в периоде ранней реконвалесценции.

4 .Пятидневный курс лазерорефлексотерапии в сочетании с обычно общепринятой терапией позволяет в более короткий срок восстановит функциональную активность Т-клеточного звена иммунитет; нормализует систему фагоцитоза, стимулирует выработк

иммуноглобулинов класса А.М.О, приводя к санации организма с

озбудителя уже в периоде ранней реконвалесценции (на 7-9 день олезни).

5.Интенсивность и характер изменений функциональной активности ммунокомпетентных клеток зависили как от дозы воздействия азерного облучения, а так и от исходных показателей клеточной ктивности. Исследования доказали оптимальность дозы инфракрасного азерного излучения в 11,6Дж (экспозиция 120 сек на сегментарную ону) для лечения среднетяжелой и тяжелой формы течения альмонеллеза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1.Для комплексного лечения больных со среднетяжелым и собенно с тяжелым течением гастроинтестинальной формы альмонеллеза с целью иммунокоррекции рекомендуется включение в :омплексную терапию низкоинтенсивного инфракрасного лазерного ¡злучения, способствующего сокращению продолжительности острых [роявлений заболевания и санации организма от возбудителя.

2.При среднетяжелом и тяжелом течении гастроинтестинальной оормы сальмонеллеза рекомендуемым режимом для инфракрасного ¡азерного излучения является: непрерывное излучение с длиной волны |,85 мкм мощностью на выходе световода 20 мВт, с суммарной дозой за »дну процедуру не менее 11,6Дж. Лазеротерапию начинать с воздействия [а базисные акупунктурные зоны 014, ЕЗб, УС12, ИР6, МС6 (доза -1,4 Дж на каждую зону), с последующим облучением сегментарных зон /С4, УС6, Е25, РС42, РС41 (в дозе 2,4 Дж на каждую зону), количество используемых точек не должно превышать 10 за один сеанс шеротерапии. Курс лазеротерапии составляет 5 дней.

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1.С.Г.Карпов, И.Г.Мустафин. Включение лазеропунктуры комплексную терапию больных сальмонеллезом (клиник иммунологическая характеристика). // Материалы Республиканскс научно-практической конференции "Новые методы диагностики лечения", - Казань, 1994.-С.243-245.

2.С.Г.Карпов, Л.Г.Амиров. Применение низкоинтенсивного лазера комплексном лечении сальмонеллеза. // Материалы международнс конференции " Клиническое и экспериментальное применение новь лазерных технологий ". -Москва-Казань, 1995. -С.193-195.

3.С.Г.Карпов, И.Г.Мустафин. Влияние низкоэнергетичсско1 инфракрасного лазерного излучения на клинико-иммунологичесш параметры при сальмонеллезе. // Материалы научно-практическс конференции молодых ученых, посвященной 70 - летию кафедр инфекционных болезней КГМУ.-Казань, 1995.-С.З-4.

4.В.Х.Фазылов, С.Г.Карпов, И.М.Хаертынова, Р.К.Галеев Я.Х.Садекова, И.М.Зиганшин. Лазеротерапия в клинике инфекционнь болезней. // Тезисы докладов Республиканской научно-практическс конференции "Новые методы диагностики и лечения" -ч.-2 -Казан; 1996. -С.81-83

5.С.Г.Карпов И.Г.Мустафин, Д.Ш.Еналеева, Э.И.Хайрутдинов Низкоинтенсивное инфракрасное лазерное излучение в комплексно лечении сальмонеллеза. // Тезисы докладов Республиканской научи» практической конференции "Новые методы диагностики и лечения" -ч 2. -Казань, 1996. -С.40-42.

6.С.Г.Карпов, И.Г.Мустафин, Э.И.Хайрутдинова. Влияш низкоэнергетического инфракрасного лазерного излучения г бактерионосительство при сальмонеллезе. / / Сборник тезисов докладе научно-практической конференции молодых ученых КГМА.-Казан! 1996.-С.46-48.

7.С.Г.Карпов, И.Г.Мустафин. Лазеропунктура в комплексной терапи больных сальмонеллезом. // Физическая медицина. -1996.т.5 -N1 2.С.14-16.