Влияние кофейной кислоты на сердечно-сосудистую систему в эксперименте

Чуклин, Роман Евгеньевич

Диссертации по медицине → Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.06) на тему:Влияние кофейной кислоты на сердечно-сосудистую систему в эксперименте

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Чуклин, Роман Евгеньевич Курск 2012 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.03.06

Автореферат диссертации по медицине на тему Влияние кофейной кислоты на сердечно-сосудистую систему в эксперименте

На правах рукописи / /

ЧУКЛИН РОМАН ЕВГЕНЬЕВИЧ 7]

ВЛИЯНИЕ КОФЕЙНОЙ КИСЛОТЫ НА СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТУЮ СИСТЕМУ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕ PAT диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Курск - 2012

1 1 ОПТ 2012

005052861

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Ивашев Михаил Николаевич

Официальные оппоненты:

Провоторов Владимир Яковлевич - доктор медицинских наук, профессор, Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, заведующий кафедрой инфекционных болезней и эпидемиологии

Покровская Татьяна Григорьевна, доктор медицинских наук, Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», профессор кафедры фармакологии и фармацевтических дисциплин ИПМО

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Защита диссертации состоится г. в ^ часов

на заседании диссертационного совета Д 208.039.03 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России.

Автореферат разослан « » 12 г.

Пашин Евгений Николаевич

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В официальной медицине все большее внимание уделяется применению средств растительного происхождения для профилактики и терапии начальных стадий расстройств сердечно-сосудистой системы. Активно изучается фенольные соединения с одним ароматическим кольцом. К этой группе соединений относятся простые фенолы, фенолоспирты, феноло-кислоты (оксикоричные кислоты), кумарины, хромоны, лигнаны. Оксикорич-ные кислоты (п-кумаровая, кофейная, феруловая и синаповая) в различных комбинациях, в свободном виде или в составе гликозидов и сложных эфиров содержатся во многих высших растениях. Наиболее распространены в природе кофейная кислота и ее производные (хлорогеновая и ее изомеры), оказывающие противовоспалительное и желчегонное действие (Назарова Л. Е., 2012 г.).

Разносторонняя активность феруловой кислоты косвенно свидетельствует о возможной активности кофейной кислоты при поражениях сердечной мышцы и мозговой ткани, которая также как и феруловая кислота относится к оксикоричным кислотам и содержится в больших количествах в природных источниках. Согласно литературным данным в растительных объектах и прополисе содержание кофейной кислоты в процентном отношении превосходит содержание феруловой кислоты (Дьякова И. Н., 2008 г.; Оганова М. А., 2010 г.).

Несмотря на большую группу лекарственных средств, применяемых при патологии сердечной мышцы, частота поражения миокарда остается высокой (Перфильева В. Н., 2009 г.). Аритмическая болезнь сердца, одна из патологий миокарда, которая часто приводит к нарушению мозгового кровообращения.

Учитывая многофакторный характер патогенеза поражений сердца и мозга, можно считать целесообразным поиск препаратов - кардио- и церебро протекторов с политропными фармакологическими свойствами для устранения дисфункции миокарда и мозгового кровообращения и предупреждения необратимых изменений в кардиомиоцитах и нейронах мозга. Следует также принимать во внимание то, что лекарственных средств для адекватной терапии патологии кровоснабжения и функционирования сердца и мозга ограничен, поэтому поиск потенциальных активных веществ актуален до настоящего времени.

Информации по кофейной кислоте в интернете (более 6 тысяч источников) много, но сведений о влиянии чистой кофейной кислоты на показатели деятельности сердца и кровоснабжения мозга в доступной нам литературе не обнаружено. Учитывая то, что у феруловой кислоты установлена сердечнососудистая активность (Дьякова И. Н., 2008 г.; Оганова М. А., 2010 г.; Назарова Л.Е., 2012 г.), и эта кислота является близким соединением по химической структуре к кофейной кислоте можно предположить наличие сердечнососудистой активности, что и определило выполнение настоящего научного исследования.

Цель исследования.

Изучение влияния кофейной кислоты на показатели работы сердечной мышцы и церебральной гемодинамики лабораторных животных в условиях экспериментальной нормы и патологии.

Задачи исследования: 1.1. Изучить острую токсичность на белых мышах и крысах и раздражаю' щее действие кофейной кислоты и аналогом по химическому строению феруловой кислотой на куриных эмбрионах и слизистой глаз морских свинок.

2. Изучить влияние кофейной кислоты на уровень системного артериально-' го давления и частоту сердечных сокращений, индексы работы миокарда нормотензивных животных в сравнении с аналогом по химическому строению феруловой кислотой, препаратами аминалоном, кавинтоном, фенотропилом.

3 Изучить эффекты кофейной кислоты при моделировании гипоксических ' состояний головного мозга (циркуляторная и гипоксическая гипоксии на белых лабораторных крысах и мышах) в сравнении с феруловой кислотой, фенотропилом.

4. Изучить влияние кофейной кислоты на выживаемость животных на моделях хлоркальциевой, адреналиновой, аконитиновой, хлоридбариевой та-хиаритмиях в сравнении с антиаритмическими препаратами верапами-лом, этацизином, лидокаином и феруловой кислотой.

5. Изучить влияние кофейной кислоты на уровень мозгового кровотока в условиях экспериментальной нормы на нормотензивных животных и в сравнении с феруловой кислотой, препаратами аминалоном, кавинтоном, фенотропилом.

6 Изучить влияние кофейной кислоты на уровень мозгового кровотока в условиях экспериментального ишемического инсульта в сравнении с ок-сикоричной кислотой - феруловой кислотой, препаратами аминалоном, кавинтоном, фенотропилом».

Научная новизна исследования. Впервые показано, что кофейная кислота достоверно влияет на показатели центральной гемодинамики у бодрствующих животных, оказывает кардиопротективное действие при внутрибрю-шинном введении, достоверно уменьшая индекс энергетических затрат сердца. Впервые установлено, что кофейная кислота достоверно снижает максимальное левожелудочковое и конечное диастолическое давление у бодрствующих крыс.

Кофейная и феруловая кислоты обладают антигипоксическим действием при циркуляторной и гипоксической гипоксиях, также оказывают защитное действие на сердечную мышцу при моделировании летальных тахиаритмий, увеличивают продолжительность жизни экспериментальных животных.

Кофейная кислота и феруловая кислота достоверно увеличивают уровень мозгового кровотока при курсовом применении, при этом существенно не влияют на показатели системной гемодинамики.

Кофейная кислота и феруловая кислота восстанавливают объемную скорость мозгового кровотока при моделировании тотальной ишемии мозга.

Практическая значимость. Проведенные фармакологические исследования на животных позволили установить кардиопротекторное и церебропро-текторное действия кофейной и ферулой кислот.

Полученные результаты свидетельствуют о перспективности применения

изученных лекарственных веществ в клинической практике, о возможности расширения показаний к применению комплексных средств, содержащих кофейную и феруловую кислоты в медицинской практике и о целесообразности дальнейших исследований в этом направлении».

Внедрение результатов научных исследований. Данные экспериментального исследования, имеющие отношение выявленной сердечно - сосудистой активности феруловой кислоты, используются в обучающих лекционных курсах кафедр физиологии и клинической фармакологии «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Личный вклад автора. Автором проанализированы отечественные и зарубежные источники по теме диссертационного исследования, проведены серии экспериментов, получены и обобщены результаты исследования, проведена статистическая обработка и анализ полученных данных (доля участия 100%).

В публикациях в соавторстве доля участия диссертанта более 80%.

В публикациях № 1, 2, 3 автором лично проведена статистическая обработка полученных результатов, № 5, 6, 7 - моделирование дизайна исследования, в публикации № 4, 5 — научное обоснование и обобщение полученных результатов.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы представлены на: 63 - научной конференции Пятигорской государственной фармацевтической академии «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции», Пятигорск, 2008 г.; 12-ой Российской конференции ЮНЕСКО "Экология и здоровье": Ессентуки, 2008 г.; Х1У Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации, Тель-Авив, Израиль, 2009 г.; Межвузовской научной конференции, посвященной памяти профессора Владислава Васильевича Пичугина и 75-летию Курского государственного медицинского университета, Курск, 2009 г.; ХУ Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", г. Москва, 2010 г.; 4-ой Всероссийской с международным участием научно-методической конференции «Фармобразование 2010». Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Поиск новых физиологически активных веществ Воронеж, 2010 г.; Российской научно-практической конференции «Нарушения мозгового кровообращения: диагностика, профилактика, лечение» Пятигорск, 2010 г.; ХУ1 Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации, Париж, Франция, 2011 г.). Апробация диссертации проведена на научно-практической конференции кафедр фармакологии и патологии, клинической фармакологии, биологической химии и микробиологии, органической химии, фармакогнозии, токсикологической химии, организации управления экономики фармации факультета последипломного образования, биологии и физиологии Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации. По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ в том числе 3 работ в журналах, рекомендуемых ВАК для диссертационных работ.

Положения, выносимые на защиту

1. Результаты фармакологической активности кофейной кислоты на показатели кардиодинамики у крыс в условиях экспериментальной нормы;

2. Результаты эффективности кофейной кислоты, в сравнении с феруловой кислотой у белых крыс при летальных тахиаритмиях;

3. Результаты фармакологической активности кофейной кислоты на показатели церебральной гемодинамики у экспериментальных наркотизированных животных;

4. Результаты эффективности кофейной кислоты, в сравнении с феруловой кислотой у наркотизированных белых крыс при моделируемой патологии центральной нервной системы (тотальной сосудистой ишемии мозга).

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов и списка используемой литературы, включающего 172 источника, из них 130 отечественных и 42 зарубежных авторов. Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста, содержит таблиц - 18, рисунков - 5.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объекты исследования:

Опытные группы животных получали изучаемый препарат кофейная кислота и препарат сравнения феруловая кислота.

Изучаемое средство - кофейная кислота применяли в дозировках 10; 50 и 100 мг/кг: внутрибрюшинно в теплом (37 ОС) виде.

Изучаемое средство - феруловая кислота применяли в дозировках 10; 50 и 100 мг/кг: внутрибрюшинно в теплом (37 ОС) виде.

Оба препарата вводили однократно и в отдельных сериях экспериментов курсовым методом в течение 14 дней. Чистая кофейная и феруловая кислоты представлены фирмой «Викинг» г. Москва.

Скрининг по антигипоксической активности и на показатели кардиогемо-динамики осуществлялся по 3 дозам с выбором наиболее активной дозы по кофейной кислоте.

Контрольной группе животных вводили в эквивалентном объеме раствор физиологический (0,9% раствор натрия хлорида).

Для наркоза использовали хлоралгидрат в дозе 300 мкг/кг, внутрибрюшинно.

В качестве препаратов сравнения были взяты аминалон, кавинтон, фено-тропил, верапамил, этацизин, лидокаин в установленных ранее (в экспериментальных условиях) эффективных дозах. В экспериментальных исследованиях, выполненных раннее, были установлены эффективные дозы для препаратов сравнения, которые и использовали в данном исследовании: аминалон в дозе -50 мг/кг; кавинтон в дозе - 10 мг/кг; фенотропил в дозе - 50 мг/кг; верапамил в дозе - 20 мг/кг, этацизин в дозе - 1 мг/кг; лидокаин в дозе - 5 мг/кг.

В случае перерасчета доз с человека на животных использовали специальный коэффициент. Перерасчет доз с человека (средний вес 70 кг) на животных - белых крыс - 5,9 в сторону увеличения (Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред.

В. П. Фисенко. - М., 2000. - 398 е.).

Лабораторные животные.

Экспериментальные исследования проведены на наркотизированных и бодрствующих белых крысах, белых мышах, морских свинках. Регистрацию параметров гемодинамики миокарда изучали на крысах стока Wistar массой 210±10г.

Животные содержались на стандартном режиме вивария: температура окружающего воздуха 22+2 ОС, 12-часовой синхронизированный световой режим, комбинированный корм и вода ad libitum.

Оборудование, инструменты и реактивы.

Компьютерная программа "Bioshell" на базе персонального компьютера IBM AT 486, позволяющая регистрировать показатели кардиогемодинамики в реальном масштабе времени, полиэтиленовые катетеры, одноразовые датчики СП-01 (США), шприцы, набор хирургических инструментов: скальпель, ножницы, щипцы, пинцеты, иглы для внутримышечного введения (Lyer).

Дизайн эксперимента.

Эксперимент начали с изучения острой токсичности и раздражающего действия кофейной и феруловой кислот. Следующий этап - изучение на кар-диогемодинамику и систему мозгового кровообращения лабораторных животных: на системную гемодинамику и работу сердца нормотензивных бодрствующих крыс, уровень мозгового кровотока у наркотизированных животных. В последующем изучали эффекты кофейной и феруловой кислот на моделях та-хиаритмий и уровень мозгового кровотока при моделировании тотальной ишемии мозга.

Все экспериментальные работы проводили согласно "Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ" (под ред. Р. У. Хабриева, 2005).

Модели аритмий (адреналиновая, аконитиновая, хлоридбариевая, хлор-кальциевая аритмия) вызывали по стандартным методикам, описанной в руководстве «Методы поиска и доклинического исследования специфической активности потенциальных сердечно-сосудистых средств» (П. А. Галенко-Ярошевский, В. В. Гацура, 2005).

Тотальная ишемия головного мозга у наркотизированных белых крыс воспроизводилась пережатием обеих сонных артерий у белых крыс на 10-15 мин на фоне системной артериальной гипотензии (забор крови через катетер, системное артериальное давление снижали до 40 мм.рт.ст). Артериальное давление в данном случае мерили ртутным манометром, уровень мозгового кровотока с использованием метода водородного клиренса.

Изучение острой токсичности проводили согласно "Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ" (под ред. Р. У. Хабриева, 2005) с определением LDS0.

Критериями оценки острой токсичности служили картина интоксикации и выживаемость животных в течение 48 часов. Дальнейшее наблюдение проводили в течение 2* недель, причем в первые 6 часов после введения мыши находились под непрерывным наблюдением. При изучении острой токсичности

субстанций, вводили вещества в разных дозах. Для определения нагрузки на организм животного максимальным объемом жидкости, проводили параллельные исследования с использованием физиологического раствора в эквивалентном объеме.

Оценку раздражающего действия проводили тестом на хорион-аллантоисной оболочке куриного эмбриона, НЕТ - САМ test

Продолжали исследования на переднем сегменте глаза морских свинок. Исследования по раздражающему действию веществ (опыт) и плацебо (контроль) было проведено in vivo на слизистой оболочке глаза морских свинок.

Статистическая обработка данных.

В таблицах диссертации данные представлены в виде средних арифметических и ошибки среднеквадратичного отклонения. Исходные данные приведены в абсолютных значениях, а изменения, которые произошли после введения препаратов, приведены в процентном отношении к исходным показателям. Статистическую обработку полученных результатов производили с использованием Т-критерия Стьюдента для независимых рядов. Различия считались достоверными при уровне значимости Р<0,05 для парных выборок по критерию Стьюдента. Результаты опытов сравнивали с исходными показателями, с раствором физиологическим натрия хлорида и с зарегистрированными препаратами. Расчёты результатов проводились в пакете компьютерной программы Microsoft Excel 2000. Изменения исследуемых показателей считались статистически значимыми при Р<0,05.

Лабораторные животные и биоматериалы.

Понятие биомоделирования предполагает существование двух объектов — модели и прототипа, т.е. животного и человека. В нашей работе использовались экспериментальные животные (крысы, мыши, морские свинки), а также куриные эмбрионы, которые в результате воздействия на них феруловой и кофейной кислоты и препаратов сравнения подвергались соответствующему исследованию и анализу и служили основой для экстраполяции в отношении человека.

При планировании эксперимента на животных мы руководствовались биоэтическими принципами «трех R» (replacement - замена болезненных для животных экспериментов опытами, не причиняющими страданий; reduction -уменьшение числа опытов с животными; refinement - улучшение методики с целью облегчения страданий подопытных животных) [53]. Впервые принципы биоэтики были изложены У. Рассел и Р. Берч в 1959 году в книге «Принципы гуманной экспериментальной техники» [53]. Ими обоснована концепция гуманного использования животных в экспериментах, которая получила название - «Биоэтическая концепция трех R».

В наших исследованиях опытные группы животных получали феруловую и кофейную кислоту в указанных дозировках. Контрольная группа животных получала в эквивалентном объеме раствор физиологический. В качестве препаратов сравнения использовали аналоги по фармацевтической группе. В экспериментах использовались в качестве реактивов: физиологический раствор натрия хлорида 0,9%, этанол 80%.

Выполнение биологических исследований на лабораторных животных

проводились с учетом Рекомендации по этике Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (2000) и принципами гуманной экспериментальной техники по программе UFAW [54, 55, 56]. В этой связи, эксперимент спланирован на основе углубленного изучения проблемы по данным литературы; эксперимент обоснован и направлен на получение результатов, не достижимых другими методами; при проведении эксперимента были приняты меры, позволяющие избежать излишних физических страданий экспериментальных животных.

Результаты, по сериям экспериментальных исследований, проведенных ранее в этой лаборатории, в адекватных условиях были использованы в настоящей диссертационной работе.

Животные выращены в виварии ПятГФА, (г. Пятигорск), содержались на стандартном режиме вивария: температура окружающего воздуха 22±2°С, 12-часовой синхронизированный световой режим, комбинированный корм и вода ad libitum.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Изучение безопасности применения кофейной и феруловой кислот.

Кофейную кислоту вводили в дозах: 10, 100, 500, 1000 и 3100 мг/кг) в дозе 3100 мг/кг при внутрибрюшинном введении соединение не вызывало гибель животных в течение 14 суток, то есть не обладало выраженным токсическим действием. В течение всего периода наблюдения кожные покровы лабораторных животных были в норме, слизистые не изменили свою окраску. В ходе эксперимента не было отмечено снижения или увеличения потребления воды и пищи. На протяжении всего исследования по выявлению токсических эффектов исследуемого соединения животные равномерно прибавляли в весе. В результатах опыта достоверно значимых отклонений в массе экспериментальных животных выявлено не было.

Таким образом, проведенные исследования по острой токсичности позволили сделать вывод о том, что кофейная кислота по Hodge и Sterner и классификации К.К. Сидорова может быть отнесено к 5 классу токсичности и является практически нетоксичным соединением.

По результатам раздражающего действия на хорион-аллантоисную оболочку куриного эмбриона и на передний сегмент глаза морских свинок, выбрана оптимальная степень разведения в воде с минимальным повреждающим действием на слизистые оболочки млекопитающих: 5% суспензия кислоты кофейной и 5% суспензия кислоты феруловой. На основании экспериментальных данных установлено, что кофейная и феруловая кислоты не обладают раздражающим действием у куриных эмбрионов. Разведение кислоты кофейной 5%, обладает слабым раздражающим действием, индекс раздражающего действия 1,33 балла, кислота феруловая 5% обладает также слабым раздражающим действием, с индексом 1,34 на переднем сегменте глаз морских свинок

2. Изучение влияние кофейной н феруловой кислот на кардиогемо-динамику.

Кофейная кислота и феруловая кислота достоверно понижали уровень артериального давления у бодрствующих крыс при применении в дозах 50; 100

мг/кг, при этом частота сердечных сокращений значимо не изменялась (кофейная кислота в дозе 100 мг/кг понижала ЧСС на 9%).

Впервые установлено, что кофейная кислота в дозах 50 и 100 мг/кг и фе-руловая кислота в дозах 50 и 100 мг/кг оказывают оптимизирующее влияние на показатели кардиогемодинамики. Так, снижается конечно-диастолическое давление в полости левого желудочка сразу после систолы; увеличивается скорость нарастания систолы и увеличивается скорость расслабления сердечной мышцы; повышается индекс Верагута (индекс сократимости миокарда).

Кофейная кислота, при назначении в максимальной дозе - 100 мг/кг оказывает положительное влияние на показатели общей и сердечной гемодинамики. е

Кофейная кислота (кофейная кислота) может применяться у больных в

комплексном лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы, так как в экспериментальных исследованиях показана биологическая активность соединения на показатели сердечно-сосудистой системы.

Для дальнейших экспериментальных исследований при моделируемых патологических состояний миокарда и мозгового кровообращения выбрана кофейная кислота в дозе 100 мг/кг, феруловая кислота (аналог по химическому

строению) в дозе 100 мг/кг.

3. Изучение влияния кофейной и феруловой кислот на выживаемость

животных при гипоксии и тахиаритмиях.

Изучены эффекты кофейной кислоты в дозе 100мг/кг при моделировании гипоксических состояний головного мозга (циркуляторная и гипоксическая гипоксии) в сравнении с феруловой кислотой (аналог по химическому строению), фенотропилом (аналог по фармакологическому эффекту). Данные по циркуля-торной гипоксии представлены в таблице 5.1.1.

Таблица 1.

Влияние кофейной и феруловой кислот на выживаемость крыс при циркуля-эй гипоксии мозга (профилактическое курсовое введение) (М±т, А%)

торной 1

Исследуемые Вещества

Дозы, мкг/кг

Кол-во животных

Кол-во выживших животных

Через 24 часа

Абс. %

Через 48 часа

Абс %

Через 72 часа

Абс. %

Физ. Раствор

Кофейная к-та

100

ВО

Феруловая к-та

100

Фенотропил

Эксперименты проведены на 40 белых беспородных крысах, обоего пола, массой 220-250 г, выращенных в стандартных условиях вивария.

Критерием эффективности антигипоксического действия была выживаемость животных в течение 72 часов после двусторонней перевязки сонных ар-

терий. Исследуемые кофейная и феруловая кислоты вводили однократно внут-рибрюшинно в течение 14 дней и в последний день за 120 минут до окклюзии сонных артерий в дозе 100 мг/кг. Контролем служил физиологический раствор в эквивалентном объеме. В качестве препарата сравнения использовали фено-тропил в дозе 50 мг/кг. Исходные данные приведены в виде абсолютных значений, изменения представлены в виде абсолютных данных и процентном отношении к исходу. Экспериментальные данные позволяют утверждать, что кофейная и феруловая кислоты обладают антигипоксическим эффектом, сравнимым с ноотропным лекарственным средством фенотропилом.

При моделировании гипоксической гипоксии эксперименты проведены на 40 белых беспородных мышах, обоего пола, массой 22-25 г, выращенных в стандартных условиях вивария. Критерием эффективности антигипоксического действия было увеличение времени жизни мышей в герметически закрытом пространстве с гиперкапнией («баночная» гипоксия). Исследуемые кофейная и феруловая кислоты вводили однократно внутрибрюшинно в течение 14 дней и в последний день за 120 минут до проведения эксперимента в дозе 100 мг/кг. Контролем служил физиологический раствор в эквивалентном объеме. В качестве препарата сравнения использовали фенотропил в дозе 50 мг/кг. Исходные данные приведены в виде относительных значений, изменения представлены в процентном отношении к исходу. Экспериментальные данные позволяют утверждать, что кофейная и феруловая кислоты обладают антигипоксическим эффектом по сравнению с контролем, однако препарат сравнения фенотропил оказывал более выраженный антигипоксический.

Таблица 2.

Влияние кофейной и феруловой кислот на выживаемость мышей при гипокси-

ческой гипоксии мозга (профилактическое курсовое введение) (М±ш, А%)

Исследуемые вещества Дозы, мг/кг Кол-во животных Среднее время жизни

Минуты Д% от контроля

Физ. Раствор 10 27,2±9,0 -

Кофейная кислота 100 10 55,8 ±5,2* +105,0 %

Феруловая кислота 100 10 52,3 ±4,3* +92,3 %

Фенотропил 50 10 78,9 ±2,2* +190,0%

Примечание: * - достоверно относительно физ. раствора р<0,05.

Адреналиновая модель тахиаритмии

Исследования на адреналиновой модели тахиаритмии показали, что в контроле (введение аритмогенного соединения адреналина в дозе 100 мкг/кг) среднее время жизни животных составило 22,1±3,2 секунды (в большинстве опытов фибрилляция желудочков, приводящая к летальному исходу, возникала на 12-18 секунде). Кофейная кислота при курсовом назначении в течение 14 дней достоверно увеличивала время жизни животных на 100%, лидокаин на

118%, этацизин на 82% по сравнению с контролем. Таким образом, кофейная кислота в дозе 100мг/кг массы тела животных, при курсовом профилактическом назначении достоверно увеличивает продолжительность жизни белых крыс по сравнению с контрольными опытами. В сравнительном аспекте эффект кофейной кислоты регистрировали на уровне таких антиаритмических официнальных средств, как лидокаин и этацизин. Учитывая то, что лидокаин применяется в основном при желудочковых тахиаритмиях, а этацизин и верапамил при пред-сердных тахиаритмиях можно предположить, что кофейная кислота оказывает антиаритмическое действие на модели адреналиновой тахиаритмии.

■ Кофейная кислота 100мг/кг ш Феруловая кислота 100мг/кг в Этацизин 1мг/кг 8 Верапамил 20мг/кг я Лидокаин 5мг/кг В Контроль

сек

Рис. 1. Влияние кофейной кислоты, феруловой кислоты, верапамила, лидокаина и этацизина (профилактическое курсовое введение -14 дней) на выживаемость крыс при адреналиновой (100 мкг/кг) тахиаритмии. Примечание: * - р<0,05 - достоверно относительно контроля.

■ Кофейная кислота 100мг7кг к Феруловая кислота 100мг/кг «Этацизин 1мг/кг в Верапамил 20мг/кг и Лидокаин 5мг/кг и Контроль

Рис.2. Влияние кофейной кислоты, феруловой кислоты, верапамила, лидокаина и этацизина (профилактическое курсовое введение - 14 дней) на выживаемость крыс при аконитиновой (40-50 мкг/кг) тахиаритмии Примечание: * - р<0,05 - достоверно относительно контроля.

сек

Аконитиновая модель тахиаритмии

Аконитин, как известно, модифицирует быстрые натриевые каналы в клетках миокарда и тем самым увеличивает вхождение в миокардиальную клетку ионов натрия. В результате инфузии аконитина в контрольной группе животных летальный исход у белых крыс с момента введения аритмогенного фактора наступала в среднем на 13 секунде.

Как следует из представленных данных, кофейная кислота при профилактическом курсовом введении в дозе 100 мг/кг в течение 14 дней достоверно увеличивает время до полной остановки сердца животных, что и показано на рисунке 2.

Хлоридбариевая модель тахиаритмии

Бария хлорид способен угнетать калиевую проводимость. Обычно после введения хлорида бария в дозе 4 мг/кг развивается аритмия и последующая гибель животных.

Как следует из представленных данных, кофейная кислота при профилактическом курсовом введении в дозе 100 мг/кг достоверно увеличивают выживаемость животных. При этом кофейная кислота наиболее активна, достоверно увеличивает время до полной остановки сердца животных более чем на 90%.

80 -Л .....„ -

^ --------- «Кофейная кислота 100мг/кг

. х Н^ННИ--------------------я Феруловая кислота 100мг/кг

50 х НЩ —»Этацизин 1 мг/кг

40 З^^ННЦН^^ ^Э __»Верапамил 20мг/кг

30 . ■ Р®ИИ _ «Лидокаин 5мг/кг

10 х н! — ■ Контроль

о 'ивЯШШШШЯЯШШШШШшр'

сек

Рис. 3. Влияние кофейной кислоты, феруловой кислоты, верапамила, лидокаина и этацизина (профилактическое курсовое введение -14 дней) на выживаемость крыс при хлоридбариевой (4 мг/кг) тахиаритмии Примечание: * - Р<0,05 - достоверно относительно контроля

Исследования на хлоридбариевой модели тахиаритмии показали, что в контроле (введение аритмогенного соединения хлорида бария в дозе 4000 мкг/кг) среднее время жизни животных составило 30,3±3,1 секунды (в большинстве опытов фибрилляция желудочков, приводящая к летальному исходу, возникала на 23-29 секунде). Кофейная кислота при курсовом назначении в течение 14 дней, в дозе 100 мг/кг достоверно увеличивал время жизни животных на 100% (показатель достоверен), лидокаин (курсовое назначение в течение 14 дней в дозе 6 мг/кг) на 93%, этацизин на 80% по сравнению с контролем. Хлоридкальциевая модель тахиаритмии

Вызванные хлоридом кальция аритмии (как и при применении аконити-

на) являются наиболее тяжелыми и мало поддающимися воздействию антиаритмических средств.

60 50

80 70

30 20 10 0 :

в Кофейная кислота 10Омг/кг а Феруловая кислота 100мг/кг а Этацизин 1 мг/кг

■ Верапамил 20мг/кг

■ Лидокаин 5мг/кг в Контроль

сек

Рис.4.Влияние кофейной кислоты, феруловой кислоты, верапамила, лидокаина и этацизина (профилактическое курсовое введение -14 дней) на выживаемость крыс при хлоридкальциевой (200 мг/кг) тахиаритмии Примечание: * - Р<0,05 - достоверно относительно контроля

В результате инфузии хлорида кальция в контрольной группе животных летальный исход наступал в среднем через 15 секунд. На модели хлоридкальциевой аритмии исследуемое соединение и препараты сравнения лидокаин и этацизин оказали достоверный положительный эффект. Продолжительность жизни животных существенно увеличивается из-за снижения количества фибрилляций желудочков.

Исследования на хлоридкальциевой модели тахиаритмии показали, что в контроле (введение аритмогенного соединения хлорида кальция в дозе 200 мг/кг) среднее время жизни животных составило 15,2±2,6 секунды (в большинстве опытов фибрилляция желудочков, приводящая к летальному исходу, возникала на И - 12 секунде). Кофейная кислота увеличивала время жизни животных на 73%, лидокаин (курсовое назначение в течение 14 дней в дозе 6 мг/кг) на 83%, этацизин на 80% по сравнению с контролем.

Таким образом, кофейная кислота и феруловая кислота достоверно увеличивают продолжительность жизни крыс и мышей при циркуляторной и ги-поксической гипоксии, что и привело к положительному эффекту кофейной кислоты и феруловой кислоты при моделируемых тахиаритмиях. Наиболее выраженный эффект впервые зарегистрировали для кофейной кислоты при курсовом назначении препаратов в дозе 100 мг/кг массы тела животных.

4. Изучение влияния кофейной кислоты на церебральную гемодинамику.

Влияние кофейной кислоты на церебральную гемодинамику крыс в условиях экспериментальной нормы

Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что кофейная и феруловая кислоты достоверно увеличивают скорость мозгового кровотока (таб-

лица 3). Так, кофейная кислота в дозе 100мг/кг массы тела животного оказывала достоверное увеличение уровня мозгового кровотока начиная с 30 минуты наблюдения, и этот эффект регистрировали до конца экспериментального исследования. Феруловая кислота в дозе 100 мг/кг при курсовом профилактическом введении увеличивала мозговой кровоток на 45, 60 и 90 минутах наблюдения. Сравнивая выраженность эффекта двух веществ следует выделить кофейную кислоту, как более эффективный по влиянию на мозговой кровоток в условиях экспериментальной нормы (таблица 1).

Кофейная и феруловая кислоты в данной серии экспериментов не оказывали существенного влияния на артериальное давление и частоту сердечных сокращений у наркотизированных крыс. На основании проведенных экспериментов регистрировали только тенденцию к понижению уровня измеряемых показателей: артериального давления и частоты сердечных сокращений.

Таблица 3.

Влияние кофейной и феруловой кислот на объемную скорость мозгового кро-

/1 г . ___О___/ 1 ЛЛ_I . ..... 0/_ Т» Tirtvrt ттчА

Время после введения Контроль Кофейная к-та (100мг/кг) Феруловая к-та (100мг/кг)

Исход 102±3,6 108±5,2 104±6,1

Через 5 мин 1,4±1,3 1,3±1,2 1,5±1,2

15 мин -1,1±0,7 6,8±4,6 3,8±1,9

30 мин -2,9±2,2 8,8±2,2* 10,2±1,6*

45 мин 1,6±1,2 12,2±2,1* 10±4,1*

60 мин -2,5±1,9 19±4,2* 9,5±5,4

90 мин -2,3±1,8 16±3,1* 8±1,8*

Примечание: * - Р<0,05 - достоверно относительно исхода.

Влияние кофейной и феруловой кислот на церебральную гемодинамику крыс в условиях экспериментальной патологии

Постишемические цереброваскулярные феномены воспроизводили путём двухсторонней окклюзии сонных артерий в течение 10-12 минут, при снижении АД до 40 мм рт.ст. После ишемии осуществляли реинфузию крови в артериальную систему животного и проводили регистрацию мозгового кровотока (МК)

методом водородного клиренса. Кофейную кислоту в дозе 100мг/кг и феруло-вую кислоту в дозе 100 мг/кг вводили внутрибрюшинно в течение 14 дней. Регистрацию показателей проводили в течение 90 минут после последнего введения препаратов. Известно, что в постишемическом периоде ярко проявляются цереброваскулярные феномены: вначале наблюдается короткий период гиперперфузии, а затем мозговой кровоток падает значительно ниже нормы (феномен гипоперфузии). Данные контроля представлены в таблице 4.

Предварительное курсовое введение кофейной кислоты в дозе 100 мкг/кг вызывало уменьшение выраженности как 1, так и второй фазы постишемиче-ских цереброваскулярных феноменов (рисунок 4). Такой же эффект выявлен впервые и для феруловой кислоты в дозе 100 мг/кг.

Кофейная и феруловая кислоты предотвращают развитие второй фазы постишемических цереброваскулярных феноменов, то есть существенно повышают уровень мозгового кровотока у животных после ишемического инсульта. Полученные данные свидетельствуют о выраженном церебропротекторном действии кофейной и феруловой кислот при моделируемой патологии - ишемии головного мозга.

Рис.5. Влияние кофейной и феруловой кислот на динамику постишемических цереброваскулярных феноменов

Примечание: * - Р<0,05 - достоверно относительно исхода.

Таким образом, в условиях экспериментальной ишемии мозга исследуемые соединения при их профилактическом введении существенно изменяют динамику развития постишемических цереброваскулярных феноменов, уменьшают степень проявления реактивной гиперемии и тормозят развитие фазы невосстановления мозгового кровотока у экспериментальных животных. Полученные данные позволяют рекомендовать дальнейшее экспериментальное и, возможно, клиническое изучение оксикоричных кислот: в первую очередь кофейную кислоту и фсруловую кислоту в комплексном лечении нарушений рит-

мической деятельности в проводящей системе миокарда. Для терапии патологии мозгового кровообращения, в комплексном лечении, также можно рекомендовать к назначению изученные соединения при курсовом назначении. Соединения оказали равную активность при сравнении с ранее изученными препаратами кавинтон, аминалон и фенотропил.

ВЫВОДЫ

1. При изучении острой токсичности и раздражающего действия на животных выявлено, что кофейная кислота и аналог по химическому строению феру-ловая кислота относятся к классу относительно безопасных соединения и не обладают выраженным раздражающим эффектом.

2. Установлено, что кофейная и феруловая кислоты оказывают оптимизирующее влияние на показатели кардиогемодинамики. Так, снижается артериальное давление, конечно-диастолическое давление в полости левого желудочка сразу после систолы; увеличивается скорость нарастания систолы и уменьшается скорость расслабления сердечной мышцы; повышается индекс Верагута (индекс сократимости миокарда).

3. Выявлено, что кофейная и феруловая кислоты оказывают кардиопротектив-ное действие, существенно увеличивают продолжительность жизни экспериментальных животных при моделируемых летальных тахиаритмиях по сравнению с контрольными опытами.

4. Выявлено, что кофейная и феруловая кислоты оказывают антигипоксическое действие на моделях циркуляторной и гипоксической гипоксиях.

5. Кофейная и феруловая кислоты при курсовом применении существенно увеличивают уровень мозгового кровотока у животных в условиях экспериментальной нормы.

6. Кофейная и феруловая кислоты при курсовом профилактическом применении в течении 14 дней существенно уменьшают выраженность патологических цереброваскулярных феноменов (гиперперфузии и гипоперфузии), что значительно уменьшает риск отека ткани нервной системы в период первой фазы - гиперперфузии и также уменьшает процент смертности животных в период второй фазы - гипоперфузии.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Чуклин, Р. Е. Влияние кофейной кислоты на системную гемодинамику / Р. Е. Чуклин, М. II. Ивашев // Клиническая фармакология и терапия. - 2009. - № 6. - С. 307-308.

2. Изучение эффектов некоторых аминокислот при гипоксической гипоксии / Р. Е. Чуклин, К. Т. Сампиева, М. Н. Ивашев, Г. М. Ога-нова, А. К. Гусейнов // Биомедицина. - 2010. - № 4. - С. 122-123.

3. Чуклин, Р. Е. Влияние кофейной кислоты на сердечный ритм / Р. Е. Чуклин, М. Н. Ивашев // Клиническая фармакология и терапия. -2010.-№6.-С. 71-72.

4. Чуклин, Р. Е. Изучение биологически активных соединений для реабилитации патологий сердечно-сосудистой системы / Р. Е. Чуклин [и др.] // Аллергология и иммунология. - 2011. - Т. 12, № 1. - С. 43.

5. Фармакологическая коррекция патологии мозгового кровообращения в эксперименте / Р. Е. Чуклин [и др.] // Нарушения мозгового кровообращения: диагностика, профилактика, лечение : тез. докл. Рос. науч,-практ. конф. (20-21 мая 2010 г.). - Пятигорск, 2010. - С. 42.

6. Фармакологическая активность соединений синтетического и природного происхождения / А. В. Арльт, А. М. Куянцева, А. В. Сергиенко, Т. А. Лысенко, С. А. Кулешова, В. С. Давыдов, Г. В. Масликова, Н. С. Ляхова, Е. Е. Зацепина, К. X. Саркисян, Р. Е. Чуклин, М. Н. Ивашев // Человек и лекарство : тез. докл. 17 Рос. нац. конгр. (12-16 апр. 2010 г.). -М., 2010.-С. 569.

7. Фармакологическое изучение аминокислотных препаратов при моделированной патологии / А. В. Сергиенко, М. У. Алиева, И. А. Савенко, К. Т. Сампиева, Ю. С. Струговщик, А. К. Гусейнов, Р. Е. Чуклин // Человек и лекарство : тез. докл. 17 Рос. нац. конгр.(12-16 апр. 2010 г.). - М., 2010.-С. 716.

8. Чуклин, Р. Е. Поиск физиологически активных соединений / Р. Е. Чуклин [и др.] // Пути и формы совершенствования фармацевтического об-

разования. Поиск новых физиологически активных веществ : материалы 4 Всерос. с междунар. участием науч.-метод. конф. «Фармобразование 2010» (20-22 апр. 2010 г.). - Воронеж, 2010. - Ч. II. - С. 243-245.

9. Чуклин, Р. Е. Влияние кофейной кислоты и феруловой кислоты на показатели системной гемодинамики и кардиогсмодинамики в условиях экспериментальной нормы / Р. Е. Чуклин // Экология и здоровье : сб. науч. тр. - Ессентуки, 2010. - Вып. 14. -С.148-155.

Ю.Чуклин, Р. Е. Изучение антигипоксического эффекта некоторых биологически активных веществ в условиях экспериментальной гипоксиче-ской гипоксии мышей / Р. Е. Чуклин [и др.] // Экология и здоровье : сб. науч. тр. - Ессентуки, 2009. - Вып. 13. - С. 136-146.

11.Чуклин, Р. Е. Нарушения мозгового кровообращения и его коррекция (обзор) / Р. Е. Чуклин [и др.] // Экология и здоровье : сб. науч. тр. - Ессентуки, 2008. - Вып. 12. - С. 119-140.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АД - артериальное давление

ДАД - диастолическое артериальное давление

ЛЖД - левожелудочковое давление

НП — нитропруссид натрия

САД - систолическое артериальное давление

ЧСС - частота сердечных сокращений

СТАТИСТИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ

р — уровень статистической значимости * - достоверность различий, р<0,05

Подписано к печати «20» июля_ 2012 г. Формат бумаги 60x84 1/16 Бумага книжно - журнальная. Печать ротапринтная.

Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ №

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (357532, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11)

Оглавление диссертации Чуклин, Роман Евгеньевич :: 2012 :: Курск

СОДЕРЖАНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Научная новизна работы

Практическая значимость результатов исследования

Основные положения, выносимые на защиту

Внедрение результатов исследования в практику

Объем и структура диссертации

Апробация полученных результатов исследования

Публикации

ГЛАВА 1. ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ ФАРМАКОТЕРАПИИ НАРУШЕНИЯ СИСТЕМЫ КРОВООБРАЩЕНИЯ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Краткий обзор физиологии сердечно-сосудистой системы.

1.1.1. Работа сердца и объем кровоснабжения

1.1.2. Механизмы регуляции уровня давления

1.1.3. Изменение объема циркулирующей крови

1.1.4. Способы регистрации параметров гемодинамики

1.2. Основные механизмы и факторы, влияющие на возникновение тахиаритмий сердца и патологии системы мозгового кровообращения

1.2.1. Тахиаритмии

1.2.2. Инсульты

1.3. Основные направления кардиопротекторной фармакотерапии. Обзор кардиопротекторных средств

1.3.1. Принципы терапии сердечио-сосудистых заболеваний

1.3.2. Фармакотерапия тахиаритмий

1.3.3. Фармакотерапия инсультов

1.4. Фармакологическая характеристика исследуемых препаратов

1.4.1. Феруловая кислота

1.4.2. Кофейная кислота

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Чуклин, Роман Евгеньевич, автореферат

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Несмотря на большую группу лекарственных средств, применяемых при патологии сердечной мышцы, частота поражения миокарда остается высокой (Перфильева В.Н., 2009г.). Аритмическая болезнь сердца, одна из патологий миокарда, которая часто приводит к нарушению мозгового кровообращения.

Частота патологии мозгового кровообращения (инсульты) в России ежегодно растет, летальность достигает 35% (в 2005г. - 350 тысяч инсультных поражений; в 2007г. - 400 тысяч; в 2010г. - 450 тысяч; в 2011г. - 480 тысяч). Около 10% больных, переживших острую стадию заболевания, остаются инвалидами, полностью лишенными возможности самообслуживания; а не более 20% из них возвращаются к трудовой деятельности (статистический отчет Минздрава РФ за 2005г., 2007г., 2010г., 2011г. - данные сайта МЗ РФ).

В официальной медицине все большее внимание уделяется применению средств растительного происхождения для профилактики и терапии начальных стадий расстройств сердечно - сосудистой системы. Активно изучается фенольные соединения с одним ароматическим кольцом. К этой группе соединений относятся простые фенолы, фенолоспирты, фенолокислоты (ок-сикоричные кислоты), кумарины, хромоны, лигнаны. Оксикоричные кислоты (п-кумаровая, кофейная, феруловая и синаповая) в различных комбинациях, в свободном виде или в составе гликозидов и сложных эфиров содержатся во многих высших растениях. Наиболее распространены в природе кофейная кислота и ее производные (хлорогеновая и ее изомеры), оказывающие противовоспалительное и желчегонное действие. Хлорогеновая кислота в больших количествах присутствует в зернах кофе, листьях черники обыкновенной, арники горной, ромашки лекарственной и др. Сумма кофейной, хлорогеновой, феруловой, кумаровой и других кофеилхинных кислот оказывает гипоазотемический эффект, усиливает функцию почек, стимулирует антитоксическую функцию печени. Оксикоричные кислоты содержатся также в эхинацее, корнях лопуха, в боярышнике, ревене.

В настоящее время имеется обширная информация о биологической активности соединения - феруловой кислоты (Назарова Л.Е., 2002-2008, Абисалова, И.Л., 2004, Дьяков A.A., 2002, Дьякова И.Н., 2003, Огурцов Ю.А., 1988 - 1995, Оганова М.А., 2006-2008, Zhonghua Yan Ке Za Zhi., 2003, Yao Xue Xue Bao., 2005, L.R. Fassbender., 2005). Наиболее важна информация об антиоксидантной и церебропротективной активности феруловой кислоты, полученная рядом авторов в экспериментальных исследованиях (Дьякова И.Н., 2003, L.R. Fassbender., 2005, Назарова Л.Е., Дьякова И.Н., 2006.).

Согласно литературным данным и по данным исследований, проведенных на кафедре физиологии Пятигорской государственной фармацевтической академии, под руководством доц.Назаровой Л.Е. - феруловая кислота обладает следующими видами активности:

1. Феруловая кислота обладает радиопротекторной активностью (И.Л.Абисалова).

2. Феруловая кислота обладает антигипоксической активностью, увеличивая продолжительность жизни мышей при гиперкапнической и гемической гипоксиях (Дьякова Ирина Николаевна).

3. Феруловая кислота обладает церебропротекторной активностью (Дьякова Ирина Николаевна).

4. Феруловая кислота обладает антиоксидантной активностью (Оганова Марина Альбертовна).

5. Феруловая кислота подавляет экспрессию генов апоптоза.

6. Феруловая кислота проявляет способность активировать митоз и синтез ДНК, что предполагает способность ускорять неовазогенез в постишеми-ческом периоде.

7. Феруловая кислота обладает противовоспалительными свойствами, инги-бирует цикл арахидоновой кислоты и тем самым уменьшает образование провоспалительных и проагрегантных факторов.

8. Феруловая кислота уменьшает нарушения, возникающие при введении глутамата в пренатальном периоде у крыс.

Сравнительный анализ химического состава экстрактов болгарского и бразильского прополисов (высокотемпературная спиртовая экстракция). Количество химического вещества (%).

Кофейная и феруловая кислоты

Компонент прополиса Болгарский Бразильский прополис прополис

Бензиловый эфир кофейной кислоты 1,64

Кофейная кислота 2,61 0,57

Фенилэтиловый эфир кофейной кислоты 2,10

Пентеновый эфир кофейной кислоты 0,74 изомер 1)

Пентеновый эфир кофейной кислоты (изомер2) 1,41

Итого по кофейной кислоте и ее изо- 8,50 0,57 мерам

Феруловая кислота 0,40 0,40

Пентеновый эфир феруловой кислоты (изомер 1) 0,97

Пентеновый эфир феруловой кислоты (изомер2) 0,79

Итого по феруловой кислоте и ее изо- 2,16 0,40 мерам

Наиболее распространены в природе кофейная кислота и ее производные (хлорогеновая и ее изомеры). Кофейная кислота в больших количествах, чем феруловая присутствует в зернах кофе, листьях черники обыкновенной, арники горной, ромашки лекарственной и др. Оксикоричные кислоты, в том числе кофейная, содержатся также в эхинацее, корнях лопуха, в боярышнике, ревене.

Сумма кофейной, хлорогеновой и других кофеилхинных кислот оказывает следующие эффекты по данным литературы:

1. Гипоазотемический эффект.

2. Усиливает диуретическую функцию почек.

3. Стимулирует антитоксическую функцию печени.

4. Оказывает противовоспалительное действие.

5. Оказывает желчегонное действие. Исследования аспирантки кафедры фармакогнозии Луневой И.Л. артишока колючего в 2001-2009г.г. показали, что содержание кофейной кислоты в сумме определенных флавонои-дов достигает 38,1%. При изучении биологической активности на кафедре фармакологии был выявлен выраженный гепатопротективный эффект и желчегонная активность.

6. Комплексные средства (экстракты и настойки из плодов боярышника), в которые входит и кофейная кислота, были изучены на показатели сердечно- сосудистой системы, уровень мозгового кровообращения аспирантами кафедры фармакологии Хаятулла Насрулла Масуди 1992-1995; Ляховой Н.С., 2004-2008. Аспиранткой Благодырь М.Н. на кафедре фармакологии в течение 1989-1992г.г. изучались синтетические аналоги коричных кислот (соединения были представлены проф. Э.Т.Оганесяном).

7. К оксикоричным кислотам относится феруловая кислота, которая была изучена аспирантом Дьяковым A.A. (2000-2002) на показатели сердечнососудистой системы в условиях экспериментальной нормы и патологии, и которая может быть взята как вещество сравнения при изучении кофейной кислоты на сердечно- сосудистую систему.

Несмотря на большое количество информации по кофейной кислоте в интернете (более 6 тысяч источников), сведений о влиянии чистой кофейной кислоты на показатели деятельности сердца и кровоснабжения мозга в доступной нам литературе не обнаружено.

Чистая кофейная кислота, в настоящее время продается 2-мя фирмами «Викинг» и АРМ г.Москва; также синтез кофейной кислоты осуществлялся на кафедре технологии лекарств Пятигорской государственной фармацевтической академии (доцент Н.Н.Гужва) и на кафедре органической химии (проф.Оганесян Э.Т.).

Следует также принимать во внимание то, что лекарственных средств для адекватной терапии патологии кровоснабжения и функционирования сердца и мозга ограничен, поэтому поиск потенциальных активных веществ актуален до настоящего времени.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для достижения цели в работе определены следующие задачи:

1. Изучить острую токсичность на белых мышах и крысах и раздражающее действие кофейной кислоты и аналогом по химическому строению феруло-вой кислотой на куриных эмбрионах и слизистой глаз морских свинок.

2. Изучить влияние кофейной кислоты на уровень системного артериального давления и частоту сердечных сокращений, индексы работы миокарда нор-мотензивных животных в сравнении с аналогом по химическому строению феруловой кислотой, препаратами аминалоном, кавинтоном, фенотропи-лом.

3. Изучить эффекты кофейной кислоты при моделировании гипоксических состояний головного мозга (циркуляторная и гипоксическая гипоксии на белых лабораторных крысах и мышах) в сравнении с феруловой кислотой, фенотропилом.

4. Изучить влияние кофейной кислоты на выживаемость животных на моделях хлоркальциевой, адреналиновой, аконитиновой, хлоридбариевой та-хиаритмиях в сравнении с антиаритмическими препаратами верапамилом, этацизином, лидокаином и феруловой кислотой.

6. Изучить влияние кофейной кислоты на уровень мозгового кровотока в условиях экспериментального ишемического инсульта в сравнении с оксико-ричной кислотой - феруловой кислотой, препаратами аминалоном, кавинтоном, фенотропилом.

Научная новизна работы

Впервые показано, что кофейная кислота достоверно влияет на показатели центральной гемодинамики у бодрствующих животных, оказывает кар-диопротективное действие при впутрибрюшинном введении, достоверно уменьшая индекс энергетических затрат сердца. Впервые установлено, что кофейная кислота достоверно снижает максимальное левожелудочковое и конечное диастолическое давление у бодрствующих крыс.

Кофейная и феруловая кислоты обладают антигипоксическим действием при циркуляторной и гипоксической гипоксиях, также оказывают защитное действие на сердечную мышцу при моделировании летальных тахиарит-мий, увеличивают продолжительность жизни экспериментальных животных.

Практическая значимость результатов исследования

Проведенные фармакологические исследования на животных позволили установить кардиопротекторное и церебропротекторное действия кофейной и ферулой кислот.

Полученные результаты свидетельствуют о перспективности применения изученных лекарственных веществ в клинической практике, о возможности расширения показаний к применению комплексных средств, содержащих кофейную и феруловую кислоты в медицинской практике и о целесообразности дальнейших исследований в этом направлении.

Основные положения, выносимые на защиту 1. Результаты фармакологической активности кофейной кислоты на показатели кардиодинамики у крыс в условиях экспериментальной нормы;

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты теоретических и практических исследований включены в план НИР кафедры анатомии, физиологии и данные о фармакологической активности соединений включены в курс лекций. По результатам научного исследования написано информационное письмо, на основании которого оформлены акты внедрения.

Связь с планом НИР ГБОУ ВПО Пятигорская ГФА Минздравсоц-развития России

Диссертационная работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации в соответствии с планом научно-исследовательских работ академии.

Объем и структура диссертации

Работа представлена на 135 страницах текста компьютерного набора, иллюстрирована 18 таблицами, 5 рисунками. Состоит из введения, обзора литературы, глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы 172 источников, включающего 130 отечественных и 42 зарубежных авторов.

Апробация полученных результатов исследования

Основные положения диссертационной работы доложены на:

1. 63 - научной конференции Пятигорской государственной фармацевтической академии «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции», Пятигорск, 2008г.;

2. 12-ой Российской конференции ЮНЕСКО "Экология и здоровье": Ессентуки, 2008г.;

3. Х1У Международном конгрессе по реабилитации в медицине и имму-нореабилитации, Тель-Авив, Израиль, 2009г.;

4. Межвузовской научной конференции, посвященной памяти профессора Владислава Васильевича Пичугина и 75-летию Курского государственного медицинского университета, Курск, 2009г.;

5. ХУ Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", г. Москва, 2010г.;

6. 4-ой Всероссийской с международным участием научно-методической конференции «Фармобразование 2010». Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Поиск новых физиологически активных веществ Воронеж, 2010г.;

7. Российской научно- практической конференции «Нарушения мозгового кровообращения: диагностика, профилактика, лечение» Пятигорск, 2010г.;

8. ХУ1 Международном конгрессе по реабилитации в медицине и имму-нореабилитации, Париж, Франция, 2011г.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе 3 в журналах рекомендуемых ВАК РФ.

Заключение диссертационного исследования на тему "Влияние кофейной кислоты на сердечно-сосудистую систему в эксперименте"

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. При изучении острой токсичности и раздражающего .действия на животных выявлено, что кофейная кислота и аналог по химическому строению феруловая кислота относятся к классу относительно безопасных соединения и не обладают выраженным раздражающим эффектом.

3. Выявлено, что кофейная и феруловая кислоты оказывают кардиопротек-тивное действие, существенно увеличивают продолжительность жизни экспериментальных животных при моделируемых летальных тахиаритми-ях по сравнению с контрольными опытами.

4. Выявлено, что кофейная и феруловая кислоты оказывают антигипоксиче-ское действие на моделях циркуляторпой и гипоксической гипоксиях.

6. Кофейная и феруловая кислоты при курсовом профилактическом применении в течении 14 дней существенно уменьшают выраженность патологических цереброваскулярных феноменов (гиперперфузии и гипоперфу-зии), что значительно уменьшает риск отека ткани нервной системы в период первой фазы - гиперперфузии и также уменьшает процент смертности животных в период второй фазы - гипоперфузии.

Заключение.

Таким образом, кофейная и феруловая кислоты достоверно влияют на отдельные показатели системной и центральной гемодинамики в условиях экспериментальной нормы. Наиболее выраженный эффект впервые зарегистрировали для кофейной кислоты в дозе 100 мг/кг, и для феруловой кислоты также в дозе 100 мг/кг. Для феруловой кислоты сердечно - сосудистая активность была установлена в экспериментальных исследованиях, выполненных в Пятигорской государственной фармацевтической академии под руководством доцента Назаровой Л.Е. Выявленная сердечно - сосудистая активность для кофейной кислоты установлена впервые. Учитывая влияние кофейной кислоты на отдельные показатели общей гемодинамики и кардиоге-модинамики можно прогнозировать терапевтический и профилактический эффекты при таких патологических состояниях, как гипоксии, тахиаритмии и нарушениях мозгового кровообращения.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Чуклин, Роман Евгеньевич

1. Абисалова, И.Л. Изучение радиопротекторного действия кислоты фе-руловой: дис. канд. фармац. наук: 14.00.25 / Абисалова Ирина Леонидовна. Пятигорск, 2004.- 152 с.

2. Акопян, В.П. Физиология, патофизиология и фармакология мозгового кровообращения / В.П. Акопян, Л.С. Балян Тбилиси, 1988.-С.8.

3. Акопян, В.П. Гипокинезия и мозговое кровообращение /В.П. Акопян-М.: Медицина, 1999.-240 с.

4. Артериальные гипертензии / С.Б. Шустов, В.А. Яковлев, В.Л. Баранов, В.А. Карлов. СПб.: «Спец. Лит.», 1997.-320 С.

5. Афанасьев, Ю.И. Гистология: учеб. для студ. мед. вузов / Ю.И. Афанасьев, H.A. Юрина. -М.: Медицина, 1989.-672 е.,

6. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. 2-е изд., перераб. и доп. / М.П. Беленький - Л.: Медицина, 1963-149 с.

7. Бехтерева, Н.П. Здоровый и больной мозг человека / Н.П. Бехтерева -Л.: Медицина, 1980. 206 с.

8. Биохимия мозга: Учеб. Пособие / Под ред. И.П. Ашмарина, П.В. Сту-калова, Н.Д. Ещенко. СПб.: Изд-во Санкт-Петербург. Ун-та, 1999. -328 с.

9. Биохимия человека: в 2-х томах. Пер. с англ. / Марри, Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. -М.: "Мир", 2000. Т. 1 -381 е., ил., Т.2-414 с.

10. Благодырь, М.Н. Влияние некоторых амидов, альфа-ациламидов коричных кислот на мозговое кровообращение: автореф. дис. канд. фар-мац, наук: 14.00.25/ Благодырь Марина Николаевна. Пятигорск, 1992.- 18 с.

11. Большаков О.П., Незнанов Н.Г., Бабаханян Р.В. Дидактические и этические аспекты проведения исследований на биомоделях и на лабораторных животных // Качественная клиническая практика, №1, 2002.

12. Боровиков, В.П. Statistica: искусство анализа данных на компьютере / В.П. Боровиков СПб.: Питер, 2001. - 239 с.

13. Бородина, Ю.В. Предсказание активности пролекарств с помощью компьютерной системы PASS / Ю.В. Бородина, Д.А. Филимонов, В.В. Поройков//Хим.- фармац. жури. 1996.-Т.30, №12. - С. 39-42.

14. Вайсфельд, И.Л. Гистамин в биохимии и физиологии / И.Л. Вайсфельд, Г.Н. Кассиль. -М.: Наука, 1981.-277 с.

15. Введение в биомеханику пассивного миокарда / В.Я. Изаков, B.C. Мар-хасин, Г.П. Ясников и др.- М.: Наука, 2000.-208с.

16. Возможности влияния мембранопатологических процессов на атероге-нез гипертонической болезни / Л.И. Гапон, М.Ж. Шафер, А.Н. Кокарев и др. // Кардиология 1993. - №9. - С. 44-46.

17. Гаевый, М.Д. Фармакология мозгового кровообращения / М.Д. Гаевый- М.: Медицина, 1980.-190 с.

18. Галенко-Ярошевский, П.А. Экспериментальные аспекты оптимизации фармакотерапии острой ишемии миокарда / Галенко-Ярошевский П.А., Гацура В.В. М.: Медицина, 2000. - 384 с.

19. Гацура В.В., Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. -М.: Медицина, 1974, 141 с.

20. Гемостимулирующие свойства пантогематогена в условиях миелосу-прессии, вызванной цитостатиками / А.М. Дыгай и др. // Эксперим. и клинич. фармакология. 2000. - Т.63, №6. - С. 34-36.

21. Гипоксии. Адаптация, патогенез, клиника / Под ред. Ю.Л. Шевченко -СПб.: ООО «ЭЛБИ-СПб», 2000. 384 с.

22. Гогин, Е.Е. Гипертоническая болезнь / Е.Е. Гогин М., 1997.- 400 с.

23. Гогин, Е.Е. Гипертоническая болезнь и симптоматические гипертензии / Е.Е. Гогин // Диагностика и лечение внутренних болезней. М.: Медицина, 1991.-С. 21-110.

24. Гольдберг Д.И., Гольдберг Е.Д. Гематология животных / Д.И. Гольд-берг, Е.Д. Гольдберг Томск, 1973.

25. Демченко, И.Т. Измерение органного кровотока с помощью водородного клиренса / И.Т. Демченко // Физиол. журн.-1981 .-Т.67, №1.-С.178-183.

26. Данилова Л.А. Справочник по лабораторным методам исследования /Л.А. Данилова. СПб, 2003 - 733 с.

27. Дьяков, A.A. Кардиопротекторные свойства феруловой кислоты: дис. канд. биол. наук./ Алексей Альбертович Дьяков. Пятигорск, 2002. -141 с.

28. Евсевьева, М.Е. Стрессорная перестройка миокарда / М.Е. Евсевьева // Бюл. эксперим. биологии и медицины -2000.-Т. 130, Вып.10. -С.378-381.

29. Зайчик, А.Ш. Основы общей патологии: Учеб. пособие для студентов мед. ВУЗов: В 2 т. / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. - СПб.: ЭЛБИ, 2000.-Т.2.- С.379-380.

30. Закусов, В.В. Фармакология производных гамма-амномасляной кислоты. / В.В. Закусов, Р.У. Островская, А.П. Сколдинов Тарту, 1983.-С.54-55.

31. Ивашев, М.Н. Изучение центральной гемодинамики с использованием компьютерной программы «BEAT» / М.Н. Ивашев, Т.А. Лысенко, В.А. Коршунов // Человек и лекарство: Тез. докл. 4 Рос. нац. конгр. 2-6 апр. 1997г.- М, 1997.- С.263.

32. Кабанова, Л.А. Гемодинамические нарушения при мозговом инсульте и их коррекция / Л.А. Кабанова // Вопросы цереброваскулярной патологии. Саратов, 1983.-С.54-57.

33. Каркищенко H.H. Альтернативы биомедицины Том 2. Классика и альтернативы фармакотоксикологии. -М.: Изд-во ВПК, 2007,448 с.

34. Каркищенко H.H. Основы биомоделирования. М.: Изд-во ВПК, 2004, 608 с.

35. Катикова, О.Ю. Влияние мексидола на состояние гомеостаза и пере-кисное окисление липидов при интоксикации парацетамолом / О.Ю.

36. Катикова // Эксперим. и клин, фармакол. 2002. - Т.65, №6. - С. 5356.

37. Клиническая биохимия / Под ред. К.Дернера: Пер. с нем. М.: Мир, 2000.-480с.

38. Ковалев, Г.В. Поиск веществ, активирующих ГАМК-ергическую систему, новое направление в создании антигипертензивных средств / Г.В. Ковалев, И.Н. Тюренков // Фармакология и токсикология.-1989.-№1.-С.5-11.

39. Кольман Я. Наглядная биохимия: Пер. с нем./ Кольман Я., Рем К. -Г. -М.: Мир, 2000.-469 с.

40. Коршунов, В.А. Особенности сердечно-сосудистого действия антидепрессанта тетриндола: Дис. . канд.фармац.наук. / В.А. Коршунов -Пущино, 2000.- 138 с.

41. Кост, Е.А. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования: справ. /Е.А. Кост-М.: Медицина, 1975. -383 с.

42. Кушаковский, М.С. Первичная артериальная гипертензия: болезнь регуляции или форма компенсации / М.С. Кушаковский // Кардиология -1983. Т. 23, №5. - С. 102-104.

43. Кушаковский, М.С. Первичная артериальная гипертензия: болезнь регуляции или форма компенсации / М.С. Кушаковский // Кардиология -1983.-Т. 23, №5.-С. 102-104.

44. Липовецкий, Б.М. Инфаркт, инсульт, внезапная смерть: Факторы риска, предвестники, профилактика / Б.М. Липовецкий СПб.: «Спец. Лит.», 1997.- 191с.

45. Лищук, В.А. Математическая теория кровообращения / В.А. Лищук -М.: Медицина, 1991.-255с.

46. Лобжанидзе, П.В. Церебральная гемодинамика при острых нарушениях мозгового кровообращения ишемического характера: Автореф. дис. .канд. мед. наук / П.В. Лобжанидзе. СПб., 1993.-22 с.

47. Лукьянова, Л.Д. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний / Л.Д. Лукьянова М., 1989.-С.11-44.

48. Макарова, Н.В. Статистика в Excel / Макарова Н.В., Трофимец В .Я. -М.: Финансы и статистика, 2002. 368 с.

49. Маркель А.Л. Метод комплексной регистрации поведенческих и вегетативных реакций у крыс при проведении теста "открытое поле" / А.Л. Маркель, P.A. Хусаинов // Журн. высш. нервн. деятельности.-1976.-Т.31, вып. 6. -С.345-353.

50. Маркель, А.Л. К оценке основных характеристик поведения крыс в тесте "открытое поле" / А.Л. Маркель // Журн. высш. нервн. деятельности.-^ 1 .-Т.31, вып. 2. -С.433-443.

51. Маркель, А.Л. Факторный анализ поведения крыс в тесте открытого поля / А.Л. Маркель, Ю.К. Галактионов, В.М. Ефимов // Журн. высш. нервн. деятельности им. Павлова.-1988.-Т.ЗЗ, вып.5.-С.855-863.

52. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т./ М.Д. Машковский. 14-е изд., перераб. и доп.- М.: Новая волна, 2002. - 2 т.

53. Меерсон, М.Г. Роль стресса в патогенезе ИБС / Ф.З. Меерсон, М.Г. Пшенникова, A.A. Уголев // Кардиология 1982. -№5. - С. 54-61.

54. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемиче-ских повреждений сердца/Ф.З. Меерсон М.Д984.-С.121.

55. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемиче-ских повреждений сердца / Ф.З. Меерсон М.: Медицина, 1984. - 270 с.

56. Методика определения антиокислительной активности химических соединений / С.Г. Благородов и др. // Хим. -фармац. журн. 1987. - №3. - С. 292-294.

57. Механика кровообращения / К. Каро, Т. Педли, Р. Шротер и др.: Пер. с англ. М.: Мир, 1981.- 624с.

58. Михайлов, П. Медицинская косметика: пер. с болг./П.Михайлов. М.: Медицина, 1985.- 208 с.

59. Многократные измерения параметров системной и регионарной гемодинамики у бодрствующих крыс / О.С. Медведев, А.Н. Мурашев, Ф.Е. Меерцук и др. // Физиол. журн. СССР им. Сеченова. 1986. - Т.72, №5.-С. 253-256.

60. Морман, Д. Физиология сердечно-сосудистой системы / Морман Д., Хеллер JL: Пер. с англ.- Спб.: Питер, 2000.-250с.

61. Мурашев, А.Н. Руководство по экспериментальной физиологии кровообращения / Мурашев А.Н., Медведев О.С., Давыдова С.А. Саратов: Изд-во Саратовского ун-та, 1992. - 42с.

62. Мурашев, А.Н., Руководство по экспериментальной физиологии кровообращения. / А.Н. Мурашев, О.С. Медведев, С.А. Давыдова Саратов: Изд-во Саратов, ун-та, 1992.-42с.

63. Мчедлишвили, Г.И. Механизмы регуляции мозгового кровообращения / Г.И. Мчедлишвили // Успехи физиол. наук. 1980. - Т.12, ЖЗ.-С.75-83.

64. Норма в медицинской практике. Справ, пособие. М.: МЕДпресс,2002.- 144 с.

65. Нормальная физиология / Под ред. К.В. Судакова.-М.: МИА.1999. С.193-197.

66. О психологическом профиле больных ИБС и его связи с некоторыми экзогенными факторами риска / К.С. Вирсаладзе, Г.В. Кавтарадзе, E.H. Иванова и др. // Кардиология 1984. - №25. - С. 73-76.

67. Общая патология человека: Руководство для врачей: В 2 т. -2-е изд., перераб. и доп. / Под. ред. А.И. Струкова и др.- М.: Медицина, 1990. -Т.1.- С.284-297.

68. Общий курс физиологии человека и животных: В 2 т.: Учебник для биол. и мед. спец. Вузов / Под ред. А.Д. Ноздрачева М.: Высш. шк, 1991.- Т.2.-512с.

69. Огурцов Ю.А. Изучение антиоксидантного и гепатопротекторного действия новых синтетических производных коричной кислоты: дис. . канд. мед. наук /Огурцов Юрий Александрович Пятигорск, 1993. -139 с.

70. Огурцов, Ю.А. Антиоксидантная активность некоторых производных коричной кислоты / Ю.А. Огурцов // Всерос. науч.-практич. конф. молодых ученых, посвящен. 70-летию декрета о национализации аптек (1998; Куйбышев): тез. докл. Куйбышев, 1988.-С. 208.

71. Основы физиологии человека: В 2 т. / Под ред. Б.И. Ткаченко.- СПБ, 1994.-Т. 1.-566 с.

72. Основы физиологии человека: Учебник / Под ред. H.A. Агаджаняна. -М.: Изд-во Рос. ун-та дружбы народов, 2000.-408с.

73. Особенности реакции системы крови на введение циклофосфана / З.П. Булкина и др. // Материалы 2-го съезда фармакологов Укр. СССР, 30 мая 1 июня 1973 г. - Львов - Киев, 1973 - С. 28-29.

74. Пат. 4687761 США, МКИ Ф 61 К 31/705. // Liu J. (США). Заявл. 09.05.85; опубл; 18.08.87.

75. Палеев, Н.Р. Исследование центрального и периферического кровообращения: Руководство по кардиологии: В 2 т. / Н.Р. Палеев, И.М. Кае-вицер // Методы исследования сердечно-сосудистой системы М.: Медицина, 1982.-Т.2.-С.22-55.

76. Патологическая физиология: В 2 т. / Под ред. А.И. Воложина, Г.В. По-рядина. М.: МЕДпресс, 2000,- Т. 2. - 528 с.

77. Патологическая физиология: т 1. / Под ред. А.И. Воложина, Г.В. Поря-дина. М.: МЕДпресс, 2000. - Т.2. -528 с.

78. Перфилова, В. Н. Кардиопротекторные свойства структурных аналогов ГАМК: дис. доктора биол. наук: 14.00.25 / Перфилова Валентина Николаевна. Волгоград, 2009. - 348 с.

79. Платонов, А.Е. Статистический анализ данных в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е. Платонов М.: Изд-во РАМН, 2000. - 354 с.

80. Полевой, В.В. Физиология растений: учеб. для биол. спец. вузов / В.В. Полевой М.: Высш. шк., 1989. - 464 с.

81. Постнов, Ю.В. Первичная гипертензия как патология клеточных мембран / Постнов Ю.В., Орлов С.Н. М.: Медицина, 1987. - 190 с.

82. Постнов, Ю.В. Первичная гипертензия как патология клеточных мембран/ Постнов Ю.В., Орлов С.Н. М.: Медицина, 1987. - 190 с.

83. Профилактическая фармакология в кардиологии / Под ред. В.И. Метелицы, Р.Г. Оганова. -М.: Медицина, 1988.-384 с.

84. Реакция медуллярного вещества надпочечников на действие экстремальных факторов различной природы / H.A. Хлусов и др. // Бюлл. эксперим. биологии и медицины 1997. - Т. 123, № 3. - С. 293 - 295.

85. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica / Реброва О.Ю. М.: Ме-диаСфера, 2003.-312 с.

86. Регистр Лекарственных Средств России. РЛС Энциклопедия лекарств 9-е изд. перераб. и доп./гл.ред. Ю.Ф. Крылов -М.: РЛС - 2002.- 1504 с

87. Регуляция мозгового кровотока при раздражении вестибулярного аппарата / А.И. Бекетов, М.Г. Гук, О.С. Штепа и др. // Вопросы нервной регуляции мозгового кровообращения. -Кишенев, 1983.-С.64-66.

88. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под редакцией В.П. Фисенко. — Москва. 2000г.-398с.

89. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению фармакологических веществ: рук-во /под ред. Р.У. Хабриева М: Медицина, 2005.-832 с.

90. Селье, Г. Стресс без дистресса / Г. Селье М.: Медицина ,1976.126 с.

91. Сернов, JI.H. Элементы экспериментальной фармакологии. / Сернов Л.Н., Гацура В.В., М.,2000. -351с.

92. Современные подходы к лечению артериальной гипертонии // Клинич. фармакология и терапия.- 1999.-№3.- С.5-6.

93. Сорокина, Е.И. Физические методы лечения в кардиологии / Е.И. Сорокина М.: Медицина, 1989. - 384 с.

94. Справочник биохимика: Пер. с англ. / Досон Р., Элиот Д., Элиот У., Джонс К. М.: "Мир", 2000. - 543с.

95. Стрелков Р.Б. Статистические таблицы для ускоренной оценки фармакологического эффекта. // Фармакология и токсикология. 1986.-№4-С.100-104.

96. Ташаев, Ш.С. Об адаптивной функции симпатической иннервации мозговых сосудов при быстрых изменениях системного артериального давления. / Ш.С. Ташаев // Бюл. эксперим. биологии и медицины.-1980.-№ 11.-543 с.

97. Теплов, С.И. Нейрогенная регуляция кровоснабжения сердца и головного мозга / С.И. Теплов -Л.: Наука, 1980.-131 с.

98. Терапевтический справочник Вашингтонского университета. 2-е рус. изд. Ред. Ч. Кэри, х. Ли, К. Велтье: Пер. с англ.- М.: Практика, 2000г.-900с.

99. Терновая, C.B. Фармакологическая защита генома кроветворных клеток при действии циклофосфана в эксперименте: автореф. дис. . канд. мед. наук / C.B. Терновая. Томск, 2001 -24 с.

100. Титов, С.А. Роль оринтеровочного и оборонительного компонентов в поведении белых крыс в условиях «открытого поля» / С.А. Титов, A.A. Каменский // Журн. высш. нервн. деятельности им. Павлова.-1980.-Т.ЗО, вып.4.-С.704-708.

101. Ткаченко, Б.И. О соотношении венозного возврата крови к сердцу и давления в правом предсердии. / Б.И. Ткаченко, В.И. Евлахов, И.З. Поясов//Бюл. эксперим. биологии и медицины.-2001.-№5.-С.501-503.

102. Тюренков, И.Н. Лекарственные гипертензии и гипертонические кризы / И.Н. Тюренков // Клиническая медицина.- 2002.- № 9.- С. 18-21.

103. Угрюмов, В.М. Регуляция мозгового кровообращения / В.М. Угрюмов, С.И. Теплов, Г.С. Тиглиев- Л.: Медицина, 1984.-С.9-34.

104. Улумбеков, Э.Г. Гистология: учеб. для студ. мед. вузов / Э.Г. Улумбе-ков, Ю.А. Чебышев. М.: ГОЭТАР-МЕД, 2001. - 960 с.

105. Факторы риска ИБС и атеросклероза у жителей Таллинна: связь с возрастом, полом, этнической принадлежностью / О.И. Волож, М.Э. Саа-ва, И.П. Тур. и др. // Кардиология 1991. - №7. - С. 20-24.

106. Фатенков, В.Н. Биомеханика сердца в эксперименте и клинике / В.Н. Фатенков М.: Медицина, 1990-158с.

107. Федеральное руководство по использованию лекарственных средств (формулярная система). Выпуск V. М.: «Эхо», 2004. - С.ЗЗ.

108. Физиология и патофизиология сердца: В 2 т. / Под ред. Сперелакиса Н.: Пер. с англ. М., 1990. - Т.2.-130 с.

109. Фомин, H.A. Физиология человека / H.A. Фомин М.: Просвещение, Влада, 1995.-416 с.

110. Холестериноз / Лорухин Ю.М., Арчаков А.И., Владимиров Ю.А. и др.

111. M.: Медицина, 1983. 333 с.

112. Цитопрокторные эффекты настойки надземной части Fragaria vesca L. в условиях интоксикации циклофосфаном / С.Г. Аксиненко и др. // Раст. ресурсы.-2003.-Т. 39, вып. 4.-С. 130-133.

113. Чурина, С.К. Особенности развития и течения инфаркта миокарда у мужчин в возрасте до 50 лет / С.К. Чурина, И.Е. Ганелина, C.B. Черниговская // Терапевт, арх. 1979. - №4. - С.74-78.

114. Чурина, С.К. Эколого-физиологические аспекты формирования артериальной гипертензии в условиях Ленинграда / С.К. Чурина // Физиол. журн. 1988. - Т. 4, № 11. — С. 1615-1621.

115. Широков, Е.А. Коррекция нарушений центральной гемодинамики -важнейший компонент экстренной терапии ишемического инсульта. / Е.А. Широков, A.B. Поткин, B.C. Виленский // Неврологич. вестн. -1993.-Т.25, №2.-С.45-47.

116. Шулутко, Б.И. Артериальная гипертензия / Шулутко Б.И., Перов Ю.Л.-СПб.: Медицина, 1993. 304 с.

117. Шулутко, Б.И. Изменения ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и иммунологических показателей при эссенциальной и симптоматической артериальной гипертензии / Шулутко Б.И., Балясникова Т.Н. // Клинич. медицина. 1993. - Т.71, N 6. - С. 24-27.

118. Шхвацабая, И.К. Гипертоническая болезнь / И.К. Шхвацабая // Превентивная кардиология. М.: Медицина, 1987. - С. 203-239.

119. Эмоциональный стресс в условиях нормы и патологии человека / Губа-чев Ю.М., Невлеев Б.В., Карвасарский Б.Д. и др. Л.: Медицина, 1976. -165 с.

120. Эпидемиологические аспекты ИБС, артериальной гипертензии и атеро-генных изменений липидного состава крови у мужчин и женщин Ленинграда 20-69 лет / Б.М. Липовецкий, Д.Б. Шестов, С.И. Плавинская идр. // Терапевт, арх. 1984. - №4. - С.44-48.

121. Яковлев, Г.М. Типы кровообращения здорового человека: нейрогумо-ральная регуляция минутного объема кровообращения в условиях покоя / Г.М. Яковлев, В.А. Карлов // Физиология человека-1992.-Т.16, №6.-С.86-108.

122. A possible role of the dietary fibre product, wheat bran, as a nitrite scavenger / M.E. Muller et al. // Food Chem. Toxicol. 1988. - Vol. 26. - P. 841-845.

123. Antioxidant and antigenotoxic effects of plant cell wall hydroxycinnamic acids in cultured HT-29 cells/ L.R. Fassbender et al. // Mol. Nutr. Food Res.-2005. Vol. 49, N 6. - P. 585-593.

124. Effect of ferulic acid on the proliferation of nerve cells of retinas in vitro/ G.L. Li et al.// Zhonghua Yan Ke Za Zhi. 2003. - Vol. 39, N 11. - P. 650-654.

125. Effect of sodium ferulate on malondialdehyde production from the platelets of rats/ Z.Z. Yin et al. // Zhongguo Yao Li Xue Bao. 1986. - Vol. 7 - P. 336-339.

126. Effects of ferulic acid on E-selectin expression in activated endothelial cell and leukocyte-endothelial cell adhesion/ X.L.Wang et al. // Yao Xue Xue Bao. 2005. - Vol. 40, N 5. - P.410-413.

127. Effects of paracetamol on glutation S-transferase activity in mice / H. Wang et al. // Chung-Kuo-Yao-Li Hsueh-Pao. 1993. - Vol. 14. - P. 41-44.

128. Graf, E. Antioxidant potential of ferulic acid/ E. Graf // Free Radic. Biol. Med. 1992. - Vol. 13, N 4. - P. 435-448.

129. In vitro and in vivi effects of ferulic acid on gastrointestinal motility: inhibition of cisplatin-induced delay in gastric emptying in rats / O.A. Badary et al. // World J Gastroenterol 2006. - Vol. 12, №33 - P. 5363 - 5367.

130. Inhibition of 4-nitroquinoline-l-oxide-induced rat tongue carcinogenesis by naturally occurring plant phenolics caffeic, ellagic, chlorogenic and ferulic acids / T. Tanaka et al. // Carcinogenesis. 1993. - Vol. 14, № 7. - P. 1321-1325.

131. La foie sous haute protection / T. Poynard // Gastroent. Clin. Biol. 1989. -Vol. 13, №6-7. -P. 542-543.

132. Mechanism of inhibitory action of sodium ferulate on liver lipid peroxidation in mice / D.F. Wu et al. // Zhongguo -Zhong-Yao-Za-Zhi. 1996, May. - Vol. 21, № 5. - P. 297 - 299.

133. Phenolic antioxidant and inhibition of hepatotoxicity from N-dimethylnitrosamine formed in situ in the rat stomach / B.D. Astill et al.// Fd. Cosmet. Toxicol. 1977. - Vol. 15-P. 167-171

134. Plant polyphenols inhibit benzoyl peroxide-ced superoxide anion radical production and diacyglyceride formation in formation in murine peritoneal macrophages / A. Kaul et al. // Nutr-Cancer. 1999.- - Vol. 35, № 2. - P. 207-211.

135. Plant polyphenols inhibit benzoyl peroxide-induced superoxide anion radical production and diacylglyceride formation in murine peritoneal macrophages / A. Kaul et al. // Nuter-Cancer. 1999. - Vol. 35, № 2. - P. 207-211.

136. Poliphenols inhibit promotion phase of tumori-genesis: relevance of superoxide radicals / A. Kaul et al. // Nutr-Cancer. 1998. - Vol. 32, № 2. - P. 81-85.

137. Protection of biomembrane fatty acids by antioxidants studied with gas chromatography/ J.G. Lu et al. // Yao-Hsueh-Hsueh-Pao. 1991. - Vol. 26, N6.-P. 406-410.

138. Protectiv effect of ferulic acid on y-radiation-induced micronuclei, dicentric aberration and lipid peroxidation in human lymphocytes/ P.N. Rajendra et al.//Mutation research. 2006. - Vol. 603. - P. 129-134.

139. Protective effect of sodium ferulate on damage of the rat liver mitochondria induced by oxygen free radicals/ Y.H. Lin et al. // Yao-Hsueh-Hsueh-Pao.- 1994.-Vol. 29, N3.-P. 171-175.

140. Rukkumani, R. Hepatoprotective role of ferulic acid: a dose-department study / R. Rukkumani/ J Med Food 2004 - Vol. 7, № 4 - C. 456 - 461.

141. Sodium ferulate alleviated paracetamol-induced liver toxicity / H. Wang et al. // Chung-Kuo-Yao-Li Hsueh-Pao. 1994. - Vol. 15, №1. - P. 81-83.

142. Sodiun ferulate alleviates prednisolone induced liver toxicity in mice / D.F. Wu et al. // Yao-Xue-Xue Bao. 1995. - Vol. 30, № 11 p. 801-805.

143. Some approaches to prevention of endogenes formation of N-itosamines in humans/P.P. Dikun et al. //IARC Sci Publ. 1991. ^P. 552-557.

144. Russell W.M.S., Burch R.L. The Principles of Human Experimental Technique. London, UK: Methuen, 238 pp., 1959.

145. A method for repeated high-fidelity micromanometer measurement of intracardiac pressures / Fanton J.W., Lott L.E., Lott K.A. et al. // J. Invest. Surg.- 1996.-N.3.- P. 167-173.

146. A novel procedure for daily measurements of hemodynamical, hematological, and biochemical parameters in conscious unrestrained rat / Blouin A.,

147. Molez S., Pham D. et. al. // J. Pharmacol. Toxicol. Methods.- 2000.- N.3.-P.489-505.

148. Blood sample analysis and monitoring of hemodynamic parameters and renal function in the conscious rat / Hohenfellner M., Schmausser U., Klein H.G. et al. // J. Invest. Surg. 1992.-N.4.-P.383-387.

149. Collins, R. Blood pressure, antihypertensive drug treatment and the risk of stroke and coronary heart disease / Collins R., MacMahon S. // Br. Med. Bull.-1994.-N.50.-P.277-298.

150. Durrington, P. Preventiv cardiology / P. Durrington London, 1993. - 72 p.

151. Folkow, B. How hypertension develops: the latest theory / B. Folkow // Am. in Mid-life Male. 1990. - Vol. 11. - P. 3 - 4.

152. Friedman, M. Type A behavior pattern: its association with coronary heart desease / M. Friedman, R. Rosenman // Ann. Clin. Res. 1971. - Vol. 3. -P. 300-312.

153. Grossman, W. Cardiac catheterization, angiograpy and intervention / Eds. by W. Grossman, D.S. Baim.-Baltimore, 1996.-P.333.

154. Kannel, W. Sudden coronary death; the Framingam study / W. Kannel, II. Thomas // Ann. N-J. Acad. Sci. 1982. - Vol. 29. - P. 154-163.

155. Kido M., Aoyama A., Ichimori S., Fukinada N. An animal model of cerebral infarction homologous blood clot emboli in rast // Stroke. 1991r. Vol. 13. No 4. P.505-508.

156. Krbek, F. Die psychischen Reaktionstypen "A" und "B" ihre Bedeutung bei der Gesundheitsberatung von Fuhrun gskraften / F. Krbek // Arbeitsmed. Sozialmed. - 1985. - Vol. 20. - P. 13-15.

157. Mc Jill, H. Sex and atherosclerosis / H. Mc Jill, M. Stern // Ather. Rev. -1979.-Vol. 4.-P. 157-242.

158. Murdaugh, C. Coronary heart disease in women / C. Murdaugh, R. CTRourke // Curr. Probl. Cardiol. 1988.-Vol. 13.-P.79-156.

159. Ng, L. Leucocyte sodium transport in acromegaly / L. Ng, D.J. Evans // Clin. Endocrinol. 1987. - Vol. 26, №4. - P. 471-480.

160. Platou, E.S. Acute electrophysiologic and blood pressure effects of amiodarone and its solvent in the dog / E.S. Platou, H. Refsum // Acta Pharmacol Toxicol (Copenh)- 1986-№58(3).-P. 163-168.

161. Raab, V. Адренергическо-холонергическая регуляция обмена веществ и функций сердца / V. Raab // Достижения кардиологии. М.: Медицина, 1959.-С. 67-152.1. Благодарности: