Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Тканевые и сывороточные острофазовые белки в клинической оценке неспецифических заболеваний и рака легких (клинико-иммунохимическое исследование)

Министерство здравоохранения РСФСР АСТРАХАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ км. А. В. ЛУНАЧАРСКОГО

На правах рукописи

УДК 616.24.07.—097 СУХАРЕВ Александр Евгеньевич

тканевые и сывороточные острофазовые

белки в клинической оценке неспецифических заболеваний и рака легких

(клинико-иммунохимическое исследование)

14.00.14 — Онкология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

г. Астрахань — 1992 г.

Работа выполнена в Астраханском государственном меди-' """"ком институте им. А. В. Луначарского МЗ РСФСР и Мо- :", , сковском научно-исследовательском институте им. П. А. Герцена (директор — чл.-корр. АМН СССР, профессор В. И. Чис-сов).

НАУЧНЫЕ КОНСУЛЬТАНТЫ:

Чл.-корр. АМН СССР доктор медицинских наук профессор В. И. Чиссов.

Кандидат биологических наук, руководитель отделения модификаторов и протекторов противоопухолевой терапии Р. И. Якубовская.

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

доктор медицинских наук профессор А. X. Трахтенберг; доктор медицинских наук профессор А. А. Терентьев; доктор медицинских наук профессор А. М. Герасимов.

Ведущая организация — научно-исследовательский институт онкологии Томского научного центра АМН СССР.

Защита состоится 21 апреля 1992 г. в 14.00 час. на заседании специализированного совета при МНИОИ им. П. А. Герцена МЗ РСФСР (125284, г. Москва, 2-й Боткинский проезд, дом 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке МНИОИ им. П. А. Герцена.

Автореферат разослан « » марта 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук,

профессор И. А. Максимов

: uf№fl№

l'ÏEK»

mt ОБЩАЯ ХШлГЕРЙСТИКА РАБОТЫ jffifjffip ззсть проблемы. До данным обобщенной онкологической статис-

тики, рак легкого более чем в 50? случаев вначале регистрируется под "шсками" острой, затякной и хронической пневмония. С другой стороны, имеет место и гипердиагностика рака легкого, когда за это заболевание принимаются затяжные пневмонии, ограниченный пневглэ-склероз, доброкачественные опухоли и другие "шаровидные" образования в легких, из-за чего иногда "предпринимаются ненужные оперативные вмешательства. В результате диагностических трудностей, обусловленных отсутствием специфических для рака клинических и лабораторных признаков, с момента появления первых симптомов заболевания и установления правильного диагноза рака легкого проходит от 3-6 до 18 месяцев и более,-а каадый второй больной умирает з первый год с момента взятия на'учет (Р.И.Вагнер и соавт.,1986,3.С.Кациан, ¿.'.Д.Гвльфэнд,1986, Е.З.Хоагова я соавт. ,1984, И.А.Макскмов и сэава, 1983, З.Д.Сильвестров,1986,' АД.Траггенберг, 1587, Н.Е.Яхонтов и соавт.,1984). Счатаэтся, что связанно смертности от рака легкого зависит от улучиэния ранней а дифференциальной диагностики и своевременного лечения заболеваний бронхолзточной системы, а это, ь свое очередь, трабует повышения эффективности профосмотрсв и выявления груш повышенного онкологического риска, поскольку именно в этих группах наиболее часто выявляют ранний рак (А.Й.Арион, 1989, С.Ю.Козввеиков и соавт. ДЭЗ?, В.П.Сильвестров, 1.986, З.И.Чиссов и соавт.,1983,1989,1930, Р.И.Вагнер,1987, А.Х.Трахтенберг,1987, G.Eood 1990).

Вместе с тем,,, нерешенной проблемой остаемся уточняющая диагностика уже выявленного рака легкого, поскольку до настоящего вре-•мени набор критериев для определения степени двф£оренцнровки опухолей ограничен и несовершенен, в то se время такие критерии край-

на необходима для выбора стратегий и тактики лечения и црзгзззгр. ваши (В.А.Смирноза й сэавт., 1390, Н.С.ОергееваДЭЭ!, о.г.ессЬвпЗ

Такии образом, современные пульмонология и онкология нуждаются в разработке новых диагносткчесхгх тестов к алгоритмов для выявления бронхолеточной патология при скрининге, а также для ра! ней диагностики рака легкого. На сегодняшний день, одним из вазш путеЁ дня решения этих задач является изучение антигенного состава малигнизарованных тканей и по ас к иммунохимаческих ¡¿аркеров зл: качественных опухолей. С учетом данных обширного литературного мг териала я клинического опыта, мы считаем перспективными два осно! нн:с направления практического использования шмунохимичэских тес тов на глсоцйированн'-ые с опухолями. антигены: I) йммунохамичвска> идентификация антигенных компонентов в тканях с целью уточнения степени дифферекцировки и направленности гистогенеза злокачественных опухолей (Н .Т. Райхлян,. Е.А. Смирнова,1984,

'I .S4ehi.ro 1989,КЛоз1шао-Ьо вt =1. , 1989); 2) иммунэхимя-ческое определение опухолевых маркеров в биологических жидкостяз в скрининге, дифференциальной диагностике и мониторинге заболевания (А.И.АрионД98Э, Л.С.Бассалык и соавт.,1989, Ю.С.Татаринов, 1990).

В результате иымунохишческого изучения антигенного состава шлигнизированноЁ . легочной ткани человека за дариод с 197? по 1982 гг ш обнаружили в ней несколько антигенов различной тканевой специфичности (А.Е.Сухарев, 1983) и причин к необходимости кэ;,шлексной оденкв их клинической значимости. Цель работы. Определение клакической ценности ассоциированных с опухолями легких тканевых и сывороточных острофазовых антигенов и разработка новых тестов в ишунохимических исследованиях брон-

холеточной патологии. Задэчя работы.

I .Виделить очищенные антигены я подучить моноспецифяческие тест-системы на ассоциированные с опухоляни легких тканевые я сывороточные острофазовые белки: ферритин, лактоферрин, плацентарную сэлочнуп фосфатазу (П2[5), териостабкльний и тэрмолабялышЗ: нзо-гнзи^ш неспецифической тканевой зстеоази (НТЭ), С-рзактизннй протеин (СШ), фибриноген и'продукты его деградации (ПДФ). ■ 2. .Разработать для использования в: клинической практике новые диагностические тесты и алгоритмы в скрининге и мониторинга па-, тологаи дыхательных путей, для выявления групп довкзеннэго цор-. бидкого опека. . л '

. 3. Выявить взаиаосвязь мвацу антигвнншя. измеЕеаиямя в малагяз-зированной легочной ткани и степенью ее дафференцировки,

4. Выяснить, клиническое значение количественных изменений -уровней феррЕтика, лактоферрина, 'СРП и ПДФ в сыворотке крсвл

- при неспецяфическях заболеваниях я раке легких.

5. Разработать .новый метод дифференциальной диаглостяка псевдоту-морозннх образованна, доброкачественных опухолей и рака легких

на ссновз комплексного определения реакций сывороточных остробазовых бзлков к рентгенологической картины легких з условиях искусственной .гипертермия, вызванной бактериальными .липополисаха-ридой, (гапэртеркическего вшуномодуляторного стресса). 5. Выявить ^закономерности и взаимосвязь реакций осгрофазовых белков в сыворотке крови, плевральных экссудатах, мокроте г слюне при бронхолегочной патологии, определить их клиническое;зпачанз9. 7. Разработать ишунохимаческие тесты мониторинга острофазОЕЫх антигенов в послеоперационных плевральных экссудатах■для контроле-"- -за течением послеоперационного периода к своевременно го'/об--

нарушения осложнений.

8. Разработать неинвазивный окринингавый тест путем определения острофазовых белков в слэна для массовых профосиотрэв. : Научная новизна.

1) в легочной ткани впервые идентифицирован, неизвестный ранее, ме&органшй антиген-тканевая карбоксил-эстераза, состоящая из. двух изоформ с электрофоретической подвижностью бета- и гамма- . глобулинов. Обнаружено свойство этого энзима' приобретать тэрмо-стабилъность в малигнизированных тканях легкого и других органов..

2) Впервые обнарукена зависимость концентрации тканевых антигенов: ферритина, лактоферрана, ПИР а НТЭ от степени дифференцяровка раковых опухолей легкого. Найденная закономерность открывает пер-, спектару дальнейшего совершенствования ишунохимической и иывдно-ыорфологической классификации злокачественных новообразований легких. " ' , ' ;

3) Впервые выявлены особенности количественного содерзаная лактоферрана в сыворотке крови, зависящие от географической среды обитания, наличия воспалительного или опухолевого процесса, воздей-, ствия на органа?!! кортакостероидов, цитостатиков, гаьга-облучения и кммуяомодулятора. ' . •

4) Впервые разработан и применен метод зкмуномодуляторного гяпер-терыического стресса, при котором обнаруяенн разные типы рзагиро-

■вания острофазовых антигенов: СРП, ДЦФ, лактоферрина и 1ШЦ> под влиянием бактериального лидоцолисахарида при неспецифических заболеваниях, доброкачественных опухолях и раке легких.

5) Впервые установлена патогенетическая взаимосвязь реакции ост-рофазовнх антигенов сыворотка крови и аналогичных.белков в плевральных экссудатах, бронхиальном секрете я слюне при бронхолеточной патологии.

Поактэтвскзя ценность пзботн. Едэрзне разработана и гсаодьзэваш б кл-лнл?.э следуйте диагностические тести:

1) способ определения степени дайрэреицдровки рака легкого по спектру тканевых антлгеноз в опухолях;

2) способ определения степени эндобронхата по антигенному составу мокроты;

3) способ определения поражения печени у больных радом лэг.тагэ су тем яденгдфдкация ЩЗ в сыворотке крови;

4) метод контроля за•теченсем послеоперационного периода и своевременной диагностики оаложнаняй у больных, перенесазх операции на легких, заключающийся з оценке реакций острофазознх антиг-эноз

а послеоперационных длезральянх экссудатах;

5) способ дифференциальной дагностики рака легкого я гоевдоту-мэрэзных образований в легких с использованием метода згладвомоду-ллторной гапертершз в комплексна! оценке реакций скзосоточксх острофэзовых белков в рентгенологической картины легких;

6) алгоритм дкагностзки рака и дополнительные показания и цротиводоказанзя к срочный к плановым опергцаяд при легочной патологзл;

7) новый скрзкинговнй тест .для выявления лиц дозызёпкого мзрбзд-ного риска к больных с воспалительны;,ш заболевая/ямя и злокачественными новообразованиями бронхолегочной езетемы и панкреато-дуодеЕальной зоны на основе исследования острофазових'белков в сделанной слше.

Основные дологвЕДЯ. занесенные на задиту.

I) Иммунохшичэская характеристика раковых опухолей легких разной степени диффзрвнцзрэвди;

3) Еягунзхгакческая характеристика антигенного состава енворотки крови у больных неспецафлческгага заболеваниями в ракой легких;

-s3} катод ивднэмэдудятзрнэго рипертермачесяэгэ стресса и да#з-ренцлалью-дяагностичвские отличая реакций сивороточнкх остро-фазозкх апт'лгенов у больных легочной патологией; i) особенности антигенных спектров бронхиального секрета и елань: при брокхолаточной патологии u их использование ара разработке скринингоэдх программ.

Апообацпя работы, Основные положения работы отражены в докладах на 17 съезде патологоанатомов Укр.СС? (Донецк,1986), Всесоюзных конференциях "Эпидемиология, профилактика и ранняя диагностика злокачественных новообразований" ЧТо.мск, 1957, 1990), У1 Всероссийском съезде фтизиатров (Кемерово,1987), I Всесоюзном конгрессе по болезням органов дыхания (КиезДЭЭО), 17. Всесоюзном съезде гастроэнтерологов (1Д-1, IS9Q), Всесоюзно'"! кэнгёэрэнцяз "Метаболические нарушения и их коррекция в онкологии" (U.,1991).Всероссийской конференции "Влияние антропогенных факторов на морфогенез и структурные преобразования органов" (Астрахань, 1991), Научно-практических конференциях и сессиях Астраханского мединститута и заседаниях Астраханского областного научно-практического

общества хирургов (1984-1991); n_th "осVaster trophoblaat Conference '"Si, ¡7 .York, 1983),13-th Meet.Tnt.Soo.Riol. "ed. <""53^,Moscow,

1990).

Публикация. По материалам диссертации опубликовано 35 научных работ, получены положительные решения на 2 и авторское свидетельство на I изобретение, удостоверения на 4 рацпредаояения. Структура и объем диссертации.

Диссертация написана в виде монографии на 298 страницах машинописного текста-, состоит из 10 глав. В первой главе дана общая характеристика работу (введение), во второй - представлена материалы я метода исследования,.главы 3-7 посвяданы отдель-

ним антигенам с изложением данных литературы и собственных исследований до какому белку, в глазах 8-9 предста&чеТй^-сгрига-нальны!< комплексны^ нетод&&сследования, а в 10-3 - обсуждение полученных результатов, выводы и практические рекомендация. Список использованной литературы представлен 487 источниками, аз них 112 отечественных и 375 иностранных. Диссертация содержит 62 таблицы и 28.рисунков. -

; МАТЕРИАЛЫ И МЕТОД! ИССЛЕДОВАНИЯ . ,3 работе использованы даннне кликико-рбнтгенологяческого, инструментального я лабораторного обследования 1096 больных легочной патологией (воспалительные заболевания -405, туберкулез-178, рак легкого -512) л 515 больных с незлокачественными заболеваниям! л злокачоствзнншп новообразованиями других органов (мастопатии, гастродуоденита, панкреатиты, вирусные к хронические гепатиты, циррозы печени, рак молочных желез, цищэзода, желудка, яяшзчншга, печени, поджелудочной жэлэзы, почея, яичников-тела л шейки матки, опухолевые геыобластазн) из областного онкологического диспансера, 2-й городской и 1-й областной 'клииилеог-гоЗ. больащ г.Астрахани за период с 1Э80 по 1390 г." В том числг исследовали 140 образцов патологически измененной легочной ткани, 1553 - сывороток крови, 8&-алевральнкх экссудатов, 230- цок-роты л 291 - сяшн-

Контролем служила 264 сыворотка крови и 972 образца слюнн здоровых взрослых людей, образцу нормальной легочной ткани я других органов (судебдо-медицлнский материал) 24 взрослых лпдей, а такзз 42 длодоз 15-40 недель внутриутробного развития, погаб-ашх от. случайных причин.'; .:

В группе, больных ралом легкого с 1-Н стадией былр 92 человека (18%), 12 стадией - 292 (57,2%) и 1У стадйей-128,424,65).

среди них соотноаение мужчин и жешин составило 14:1.

Для получения очищенных антигенов использовали методы вод-носолевой и бутаноловой экстракции тканей (А.А.Николаэв а соавт., I98I,F.Lehman, 1974), выделения и очистки белков, вклачая препаративный гель-электрофорез (Э.Гааль и сэазт. ,1982), осаздение сульфатом аммония, сульфа том кадмия, этанолом, ацетоном (Л. Н. Г печева и соавт. ,1979,S.lehman, 1974), диализ, ионообменную высот-ко эффективную хроматографию и гель-фильтрацию (А.А.Николаев и соавт., 1981, Л.А.Остерман, 1983). Моноспецпфяческле антпсыво-ротки получили иммунизацией кроликов выделенными препаратами соответствующих антигенов по обвдпринятым схемам (Ю.Н.Токарев и соавт., 1987) с последующей элиминацией" балластных" антител иммуносорбцией (Х.Фркыель,1979, А.ы.Уорд, Д.Т.Уагеэ, ISSI).

Ввиду строгой видовой специфичности антигенов человека, определение их функции и роли может быть выполнено только на человеке. В связи с этим возникает-необходимость использования .различных клинических ситуаций в качестве своеобразных моделей. Такими моделями могут служить следующие системы: I) "мать-плод", "организм-опухоль", "травма-регенерация", "воспаление-ремиссия"; 2) иммуномодуляторное воздействие на организм; 3) антигенные спектры биологических жидкостей в динамике болезни; 4)антигенные спектры опухолей различной направленности гистогенеза и да фра рэ кодировки; 5) антигенные спектры культуры клеток человека на разных этапах дифференцировки и злокачественной трансформации.

. В своей работа ыы стремились, по-возмояности, использовать многие 1 аз перечисленных моделей.

Для идентификации антигенов в исследуемом материале с по- . мощью собственных и"коммерческих мокоспецифических антисывороток использовали следуюидае методика: I) простую и радиальную

Емцунэддффузкю в агаровом геле (Н.И.Храмкова, Г.И.Абелов,1961); 2) аналитический, встречный и ракетный ишуноэлектрофорез, диск-электрофорез и изээлектрическое фокусирование в полкакрплаиадном геле (Ф.И.Когларов и соавт. Д97о, Л.А.0стэрманДЭ83, Э.Гааль и соавт. ,1932); 3) яимунэфермантный и радиолдауналэгячасклй методы (Л.А.ОстермакД933, У.'-Пяъ-оЗЛ, 1987); 4) шдлукомзрфалзгические-непряиой юялунофлуоресценции и иммунопвроксидазный (К.К.Пугачев и. соавт.,1990); 5) электронная микроскопия (Е.Т.Райхлин, Е.А.Смирнова ,1984); 6) специальное окрашивание иглмуноцрецшитатов на белки, гелезо, эстеразу, щелочную и кислую фосфатазы с применением соответствутадгх ингибиторов и денситэметряи" (Ф.Л.Лейтес ДУ71, З.Лойда и соавт.,1982, Д.Г. Бабайцев, 1981); 7) определение концентрация елка до Лоуря ЧХ.ФримельД979).

Достоверность полученных результатов определяли методами вариационной статистики с использованием критерия 1 по таблице Стьпдекта (К.ВЛййстрах и соавт. ,1957, З.К.Куднецов,1975), При разработка диагностических тест-систем учитывалась из чувствительность и, специфичность (Л.Бассалык и соавт. Д98Э). Обработка мокроты, ¡¿окзот? собирали утром натсдак з чистке стеклянные флакончики.Для уменьшения вязкости мокроты и удобства забора ее пипеткой добавляли коммерческий препарат ацетил-цис-теин из расчета 10 мг на I мл мокроты.Смесь инкубировали при 37°С в течение 2 часов, дра гтом наступало спонтанное разделение мокроты на два слоя: осадок я надосадочнув жидкость. По-следнта исполъзозаля ддя ивдунзхкмзческого исследования. Слипа. Слюну собирали по 2-3 мл утром натощак или чэраз 1-2 часа посла дрзеиа наци в чистке стеклянные флакончики,, хранил;! при -6°с и оттаивали перед исследованием. Штогеналовьм твстЛирогенал (липополисахарад 3*-ЬурЬ± )

вводали Бнутри-'.каечна ежедневно или через дэкь ударными дозами' по '20 , 40 , 60 , 80, ICO, 120, 1-Ю, 200 маг, вызывая повьгаание температуры тела до 38,5 - 39,5°C.3a I сутки, во время и через I и 5 суток после курса плрогеналовой пробы у больных исследовали кровь на содержание СРП, ДЩ5, лактоферрина, ПЩ£ л количествэ лейкоцитов. Одновременно оценивали общее, состояние я рентгенологичэскув картину в легких.Полученные данные использовала в алгоритме дифференциальной диагностики псевдоодухолевых образований и рака легких.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. '5еоэятпн.Феэзятпн - железосодержащий адь5а9-глобулгн с изл.иассой около Í5GG0G дальтон, синтезируется в клетках РйС, обладает üizpo-Koil межорганной специфичностью и пшунзхиизческз идентичен ферри-тинаи легкого, печени, плаценты, почек, селезенка и других органов Ü.H.Грачева,1979,Alperte , 1985).В экстрактах легочной ткани здоровых взрослых ладей содержание ферритина равно 2,15+0,35 ыг/МО г. ткани, а в сыворотке крови - 113,6+17,2 нг/ал у кугчнн z 25,3+

+5,2 нг/мя у женщин.

По полученным данным, при неспецифическкх воспалительных заболеваниях, туберкулеза и раке .легких отмечается различной степени повышение концентрации ферритина в экстрактах тканей, сыворотке крови, появление его в мокроте и плевральных экссудатах.Так,'в экстрактах легочной ткани содержание .ферритина повышено по срав--нению с нормой при ХЕШ в 2 раза, хронических абсцессах и туберкулезе i в 20-30 раз, а в экстрактах Фиброзно измененной легочной ткани, где преобладает соединительная ткань - более чем в 50 раз.

В шлигнизированной ткани легких количество ферритина примерно в 6 раз больше, чем в легочной ткани здоровых и завясит от гистогенеза и степени дифззеренцировка опухоли.Его концентрация достоверно выде при периферическом раке, чем при центральном

(созтзегстзонко, 18,75+2,29 и 7,11+1,53 мг/IСО г ткана).При этэ.м, высокодкффережпрозанякй рак характеризуется более зысокпк(19,4+4,3 ¡¿r/lLG ткани) содержанием антигена, чем иизкодяф^ерэнцироЕйший (4,3+ +1,2 ¡¿г/IOC г, табл 5).;Ьг.1укзгистэхи::нчэски ферритин локализуется препдущэстзьшю в соединительнотканной стропе опухолей и околоопухо-лазэй соединительной ткани.S литературе также имеются указания на то, что ферритин может слуяить маркером степени дисфференцировки рэха

Исходя ;:з сведений о продукция ферритина клэткаьа ?ЭС и его участии в 1Г.ЗД коре гулят орных реакциях (S»bevi et al, 1988,L. Sirota et al.1989 ) можно полагать, что данный .белок, как маркер соединительной ткани, :.:окет оказаться полезным яри изучении ее реакций вокруг патологического очага при воспалении, деструкции и малягнизацни(L.Sehiaffa-nati et al. ,'985).

Результата из них исследована! (рэдиоавдунологаческам методом) согласуется с данными дитератураС Alperte et cl. Д2-85, , 1986,

ft.Steirhoif , 1988) и свидетельствуют о закономерно^ повышении уровней сывороточного ферритина при хронических песдецийических за-болезантях до 166,4+22,5 нг/мл, при туберкулезе - до 323,4+42,4зг/ш1 и при раке легких - от 200 до I00G «г/мл и более яо мэре чрогресся-. рования процесса(табл.I).

Ферритин зедет себя как острзфазовый балок и многие воспалительно-деструктивные процессы в легочной ткани сопровождаются не только гпперферритйнемдей, но и появлением этбго антигена в плевральных экссудатах и мокроте.Но наше:,у мнению, увеличение концентрации сывороточного ферритина дря диспансерна.' наблюдения за больных; НХЗЛ в динамике зызэ 200 аг/мя, наряду с другим хланазэ-дабо-рагорн!л.:и показателями, .шляется серьезным основание:/; для углубленного обследования больного вэ наличие рака легкого.

V больных, леченных по поводу рака легкого, повкаеяие ксацент-

рация феррптина в процессе наблюдения может свидетельствовать с больиол вероятностью о рецидивировании или метастазировзнпи опухоли

Таблица I.

Концентрация фарритина в сыворотке крови доноров . и больных с легочной патологией (РИА).

Средняя концентрация ¿ерриглна нг/:,;

у мужчин

у :".9нцин

число нас лтсдекпн

н?/:гл

число на:

истоая пневмония ХЫЗЛ:

а)хроклчэскяЗ бронхит

б)бронхиальная астма

в)пнез;,!окониоз электросварщиков

Туберкулез легких:

а)инфильтратавный

б )фиброзно-кавернозшй

Рак легкого:

а)1-П стадии

б)Ш-1У стадии

Метастазы в легкие рака молочной гелэзы

Практически здоровые люди (доноры)

24 136,8+22,6

Í2 7

15

"32 19

20 89

О

30

15Г,0+2С,5 63,7+23,9

- Г* L rln

¿00,4+-í¿,0-

216,7+38,4* 323,4+42,4*

255, 7+II ,7й 1020,7+156,8*

113,6+17,2

iu II2,3-t-3e,

33 87,5+28,3

9 64,4+24,6

4 147,5+3,5

23 133,4+41,2

9 211,4+51,4

5 191,3+39,4 •13 439,1+68,5

18 255,4+39,5

30 25,3+5,2

Примечание: к разница по сравнению со здоровыми в каздой группе достоверна (р <0,001;.

По нашил данные, частота обнаружения и концентрация Зерригина в плевральных экссудатах при неспецифическом плеврите достоверно кике, чем при раковом (соответственно 0,2 мгЗ и 1,2+0,3 :лгй).Более

васокл'л уровень йерриткна в плевральных выпотах при злокачественных новообразованиях э плевральной полости, по сриичонии с нэспеца-$аческаав шюврнтакг отмечен а другими авторами (ги:и.1а^л,1935, '92с,Л.Т1глоп et сЛ., 1963 ). В мокроте фзрригин обнаруживается методом емь^кэдйщйуэного анализа е 23,3" при заострении ХВЗХ, абсцэдирования легочной ткан;* и в 13,8?, - при Ш-1У стадиях рака легкого.3 литературе таких сведений мы не встретили.Полученные данные свидетельствуют о возможней связи мэаду появлением ^аоргтана в мокроте и дзструктивно-кагноитвль-нкмд процессам;; в легком и могут алеть дополнительное дпагностическое значение.

Дактзфаприн.Лакто&ероинСЛФ)- ззлезосэдергааей плакэпротегн' с ^зл. массой 81С0С+50СС) даль.тон, источником которого в организме являются вторичные гранулы Езйтоофклов(сывороточный лактоферрин) и клетка железистого зпителия(секретэрный лактоферрян).

3 экстрактах легочной ткани отмечается повышение количества ЯЗ'рря воспалительных заболеваниях и раке легких в два .раза по сравнению с нормой (соответственно, 7,7+1,5; 5,6+1,9 л 3,5+1 ,?мг/Ш) г ткани).Известно, что содержание ЛФ в сыворотке крови здоровых колеблется от 130 до 1600 кг/ыи ( по данным разных лабораторий) я может быть определено лишь кммунофэрментным илл радиотпльтунодогл-ческим методамиIз.СЬипз э* а1.,-985,-т-каг1е е£.а1., 1924,3.1^521 аЬ аХ.^Эв^-^лоВШ-зЪ е* а1.,1978).

шатодои иммунофзрментного анализа мы обнаружили, что средняя концентрация ¿Э в сыворотке крозп здоровых взрослых лвдей г.Астра-хаки равва 1002+20,4 нг/ул (разница между мужчинам;», а.кекщикамя недостоверна), что в 2-3 раза выше, чем у жителей г.Москвы .Ц.Ю.Ьасильеа, Г.И.Авдеев,1985).Если учесть, что источником сывороточного Ш являются Л5&:оц41тыСт.Га7аисЬ1,-т*ИгЛгшаЬв,'!937

ка фона характерной для астраханцэв лейкопении (3-5 хЮ^/л) относительная гиперлактоферринемия выглядит парадоксальной :: как бы компенсаторной.Вероятно, необходимо дальнейшее изучение Л4>,как .маркера клеток мпзлоидного ряда.с позиции влияния географических ила других факторов на организм человека.

Повышение концентрации сывороточного Л5 отмечается лрл ХЕШ, .острой анеклоняй, раке легкого, яэлудэчно-кпзэчзэго тракта л лл.\йо гракуломатозв(табл.2) .Снижение Л5 в сыворотке наблвдвзтся аод вл:*я н;тем преднизалона, противоопухолевых цлтсстатиков и гамма-облуче-ная(табл.З).Результаты исследования уровня оборотного Л^ з дз-

(аэвнзеязе при остром воспалительном прэцзсоч и онг.~енпе г.:1;: выздоровлении) позволяет отнести этот антиген к зстрофазовым белками')..Д..Николаев, Н.Л.Ал'дакоза ,1355, ¿¿о-;) (тэол. г).

Удобной иэззлью для изучения острофазового харак-зр& Д* слу-также исследование послеоперационных алев зальных зыпотоз больных, перенесших операции на легких «Так,, в процессе -нормальной репарации в плевральной полости повышение концентрации Л^ в первые 1-3 суток до 4,9 мкг/мл сменяется понижением до 0,4 - "О ,3мкг/мд к периоду прекращения экссудации.В случаях нагноения в пдезраль-ной полоста концентрация ЛФ в плевральной згзости увеличивается до 14,3 мкс/ды и вновь снижается при успезной санации.

Учитывая вшунохимйчэскую идентичность сывороточного и секреторного ЛФ и предположив общность патогенетических реакций обоих вариантов антигена, кн определила его содержание в'мокроте п слзз-не.В последних концентрация ЛФ оказалось намного вызе, чем в скво-роткз крови, что позволило о&йтись простыми методами идентификация ¡простой или радиальной иммунодиффузией в агаре, без пммунофер-ментного анализа .Выяснилось, что при остром воспалительном процессе в брзнхолегочноа системе концентрация Лй в мокроте равна 1213+.134,2 мкг/мл в начале заболевания, а затем снинаатся до

Таблица 2

ияредалешэ лякго-^еррина в сыворотке юоел больных.

йй п/п

Оызооотка кэоъл

Зсего ■ обследовано

лонцентрйиил нг/ид

I. Здоровые взрослые (всего) 104 1002,7+20,4

УУЗЧЗЕЫ 56 1112,5+72,8

хендакк - .- ' Я8 993,1+64,8

2. •Рак легкдх П - Ц ст. 63 1655,4+6Ь,3

периферически! 25 1520,3+120,3

центральный 38 1730,3+43,2К

3., ХД31 \ 64 • 1479,9+22,1

4. Туберкулез легкдх 100 1552,9+152,3

5. Острая пневмония 28 2556,4+208,2®

6. Мастодатдя '13 . 1748,9+44,3х

7. Рак молочной железы ст. 24 1597,1+35,4

3. Рак иаткг. П-И ст. 17 1558,2+45,1

9. Л Г М П-Е1 (А.Б)ст. 6 . , 2197,,0+160, 3*

10, . Рак гшдевода П-Ш ст. 14 1836,4+113,2*

II. . гак желудка ¡3-1У ст. 20 1945,2+121,32

12, . Рак 'кяшечндка 15-17 ст. 10 2088,3+75,4"г

13. , Рак печени .11 893,0+393,0

14. . Вирусный гепатит 17 940,0+269,0

15. . Хронически! геяатят 16 1С58,9+3/3,0

16. . Цирроз печени.' 19 1075,0+370,0

Ус - примечание: разница-достоверна, по сравнен» со эдорозгллп

Та&юада 3. .

Динамика лактофзррина в крова онкологических больных в процессе хя-миолуч-ового лечения.

Зпц Число

лечения больных

. Уровни сызороточного лактоферркна

исходный уровень

в процессе лечения в % от исходногоСз конце каздэй недели)

в .1 до лечения ■ I - -д ■ недели 2 лечения 17

иэдэльтй курс) 16 100 57+24 15+21 63+12 95+3

Лутезая терапия

(3-1 педзльшгё курс) 10 100 100 62ч<54 41+27 7-4+18

Таблица 4. ..

Динамика уровня сывороточного Лф в крова больных легочной патологией под влиянием противовоспалительного лечения. '

• Надела, заболевания

. - г -

- число £5 число ЛФ*

больных н^/мл больных - егДи

Острая пневмония ' 28 2566,4+208,2 12 ' 1201,2+118;,!

Обострение ХИЗЛ 84 1479+22,1 23 1150+291,3

Астатический бронхит34 4 1450+20,3. 4 231+34,2"

Рак лзгкого ПчЛ ст. (лзделл наолэдения в

с га ц:: о на ре) 25 1520,3+120,3 38 1730,3+43,2

к -цолучзлл предкязоаок

Ъримётлниё: ' 1 "

Установлено, что г.няер-ядл гидэлактофзррннемия у всох больных

с гпрозоядавтач,соответственно,ле£коцятозои или лейкопенией,однако зстрэчавтея в 2 раза чаще, чем последние.

118,2+3 мкг/ал при выздоровлении яла ре;,¡не спи. При рано легкого количество в мокроте колеблется от 336,1+248,2 гаг/мт до 422,6+185,3 ынг/мл 2 зависит от выразенкопти лараканкрозногэ г.;^-паления легочной ткани и бронхов.

3 слюне 1-1 определяется в гораздо ценьаей концентрации, чем в мокроте ( о» 3 до 100 шг/вд), но с той аа закономерностью повышения уровня при острой воспалении в дыхатэлькой сисгомэ я екпления при выздоровлении.

Такии образом, полученные данные позволяй? считать,"что Ж>, как острсфазозый. антиген, мока- быть использован в лабораторной диагностике и контроле за лечением воспалительных заболеваний к злокачественных опухолей легких.

Кая будет отмечено-ниже, изучение в слюне перспективно с точки .зрения поиска нэвнх бескровных табораюоннх скринингов;:* тастор.

Плацентарная ¡пелочкая фоефатьзаШ'р). Я$> относят к раязвопла-центаэннм антигенам.Фермент синтезируется в плацентарном сшщк'мо -трофэбласте и поступает в кровоток катерн после 12 недель бэреион-ностп в количества от 1,0 до 40,0 Ед/дитр.Кроме плаценты, ¡ВД? обнаруживается з легочной ткаи плод'-в, а также в небольших количествах в неизмененных тканях шейки натки, тамуез, яичек и легких здорэвих взрослых людей.

Повышение синтзза(ресинтез) ПЩ1 наблюдается у вчроелкх людей в тканях' легких печени, яичек, матки при малягЕлзацил этих орга-.нов, при этом повышается уровень ШДФ в сыворотке крови и серозных экссудатах ( И.Эе <л а1,

19В7,Ч.ВЪ1еЪтап& е* а!.,"19в2,Ве 0+,

- ПНР чмеэт обпяе антигенные дэтермикаяты с тошсэкядошэЯ щелочной фоейагазой (ТЛ&), з связи с чей оба знзига реагируют с

аитасывораткой к ПЩ£ з шгыунохпмзческах реакциях <"г«Р-егеег о-ь а1., '1937.1989, т1а-СЬеп£ «иа ей а1. ,1936,К.Н&]г.«а'л'а et а!,,19831.

Па данным литературы, в сыворотке крови здорэвнх взрослых ладей и лиц с незлокачественными заболевания;« вгутрэннпх органов количество ЯЩ-1» колеблется от С до 1,8 ЕД/л.У больных злокачествен-шиа новообразованиями легких печени, гениталий, яичек и др.органов уровень ГШР в сыворотке кроэя повтсается до I - 4,7 ЕД/лСЛ.Н.Паздн-цова Я др.1989, 7!го'Э,Т>Л1о11а*;,1983,:0е 'оогае /-. в*

Со.дер.'сандз ПДг в злокачественных опухолях легких, как показано КЗ!.:П ЩГЛуИОХ2В.!2ЧеСКХ.И, ЮТ.^УЕОГгсТСХДИЗЧЭСХКЛ 2 ЭЛЗКТООКН'ОЬШК-розкэдпчэск:-ш методами, отражает степень дифференцировки и направленность гистогенеза рача легкого(?абл.5).

Так, наибольшая активность и концентрацяя Ш35 этмечаэтся в к:гзкод::ф5зренц;:розанных аденокарциношх легкого, по сравнению с высо;содкй>эрекц'.1ровакны1>1и ялоскоклеточньги опухолям.

Цв обнаружил такяа в околзодухолевой 'легочной ткана и клетках шддозадного п баззльного слоев кожа у больных ракоа легкого и другой злокзчестзенныгл: опухолями.Возмонно, что это вызвано гл^шзалестзчв^кда синтезов ПЩ5 я согласуется с концеяпдвй Б.С.капота о системном действии опухоли на организм и возникновение. яаранзодласт"лческ:1х сяядротв (В.С.Сааэт, 197?).

;.1ето;;о:й ветре-шо го с-мукоэязктрзфзреза ЕДФ к 1Ц$-аодобннй -тонкокиаечний вариант, по наыдм данным, выявляются в сывоооткэ кров:-', больных раком легких и других органов, как правило, в поздних стадиях заболевания.Удалось показать, что повышенна 1Щ> в сыворотке. прозл до 4 - 32 ЕД Боданского при злокачественных опухолях ^¿•сповлзЕО реактивным гепатитом или ¡лета ста загля в печень.При этом вдяонплось, что тест на'ПДй в 3 раза чувствительнее других печеночных проб.

Эти данные могут иметь практическое значение, поскольку частота нераспознанных печеночных осложнений ирл лечении онкологических больных достаточно высока (В.Абрамов и др.1981, А.Арион, 1989,Хазанов 1988) .Обнаружение ЕР в сыворотке крови методом встречного вдуноэлектрофореза, по наиему мнения, является показанием к углубленному обследованию функции'я морфологии печени перед назначением того или иного вида специального лечения онкологическим больным. ' ' ;

НасдепжЬаческая тканевая зсгэрзза(НТЭ).3 экстрактах легочной, ткани мы идентифицировала не описанный ранее, антяген-тканевуэ эстеразу, состоящую аз. двух изоформ с злектрофоретической'подвиг-' ностью бета - и гамма -глобулинов о мол.массой около ßSOQQ каждая, обладавшая способностью расщеплять альфа- к бета-кафтллацетат а относящаяся к группе карбоксилэстераз.Тханевая эстераза легочной ткани' пммунохзашческя идентична тканевка зстеразан других органов (поэтому названа нами неспецифической), но отличается от них меньшей термоустойчивостьюи при 5S°C. в "течение 60 минут еа ферментативная активность угнетается. ' '' .По сравнению с НГЭ нормальной легочной ткани, НТЭ з злокачественных" опухолях легких более термостабильна и ее активность сохраняет, ся лрз нагревании экстрактов или.срезов тканей до 60°С в течение 10-15 минут. -

Повышение порога термостабалънооти НГЭ .отмечачтся я в злокачественных опухолях других органов.(печени, почек, колодка, толстой кшики).Это свойство ЕГЭ. связзно с гакма-эстеразой,количество которой при малигнязация возрастает.

.Небольшое повышение терыостабпльности КГЗ(56°С-60 шн),.' ■наблюдается в 20$'случаев в легочной ткани при ЯШ, -туберкулезе и доброкачественных опухолях бронхов".

Мы обнаружили, что НТЭ способна элиминироваться в мокроту при воспалительных заболеваниях и.раке броахолегочной системы, щи чем, при раке легкого частота обнаружения её термостабильной иззфорглы почти в два раза выше.

''- Из литературы известны факты приобретения свойств термостабильности антигенами и ферментами в опухолевых тканях за счет,как полагают, эпагеномных или. генетических изменений в механизме синтеза (И.В.Борэзин, 1985) .Выявленное нами свойство терюстабильнэс ти НТЭ в злокачественных-опухолях легких и других органов мэзет , представить теоретический интерес, с точки зрения канцерогенеза.

Идентификация НТЭ в оцухолевых тканях легкого, имеет з 'Црнкла, Еое значаще.Так, содержанле НГЭ з экстрактах рака легкого зависи от степени дифЗ ер е нциро в ки злокачественных новообразований(табл.5 Б высокодиф|ерэнцйровакшлс. опухолях концентрация ВИЗ равна 19,2+ +3,2 мгДОО г ткани, а в нязкздяфференцированных - 3,6+1,5 аг/ЮО ткани (р<0,001). . ■ .' . . .

По нашш данным, использование НТЭ в комплексе с ферритиной, лактоферрином и плацентарной щелочной фосфатазой в качестве шоке дий£еренцирозки опухолей, может оказаться полезным дая разработки дополнительных параметров июлунохими-;еско£ и. шжуногистохаиическо характеристики рака легкого, поскольку до настоящего, времени.четк критериев .дифференцяровки не разработано.

Сывороточные остроДазовые* антигены.К их числу относят более 20 белков различной степени реактивности С1-1^^!1 еъ а1.,1937,А,к 1984) типичными представпгехчил которых являются С-реактивный сротепнССРП), а также фибриноген и продукты его деградации(1!^).

СРП.СЩ - гамиа-глобулин с молекулярной массой около 140С00, состоящий из 5 субъединиц по типу радиальной симметрии сянтезиру« ся в печени и начинает определяться иммувэхшическпми .методами в

Результаты определения ассоциированных с опухолью антигенов в экстрактах раковых опухолей легкого"

Таблица 5.

Форритин Лактофэррин Тканевая зстараза Шгацинтарная ЩФ мг/ЮОг.тв. мг/ДЮг.тк. мс/ЮОг.тк, ЕД Водаиского

Гистологический тип без учета степени дшЗДероициродкп:

•адонокарцанош ялоскоклеточшгё 22 26 8.6± 5,4. 7,3 ± 4,2 . 5,6 4,2 + + 0,7 0,3 11,9 + в.о ± 2,0 1.1 х,6 3.4 + + 0,0 1,0

недцффэрекцггрпаандаЛ! иилкоклеточный) Степень диффвршщировкл без учета гиотологичсс-кого типа; 16 6,0 ¿3,1 •2,1 1.x 2,8 + 1,1 7,3 ± 2,1

шаоьод&йеренцирошн-нпй 7 19,1 + 4,3 .6,5 ОД 19,2 ± 3,2 1,0 -н 0,5

укереннодпффвренциро-ваншй 22 6.8 ± 4,6 4,2 + 0,4 7,0 + 3,3 3,5 1,6

Ш1зк0дйф1,ервнцирзвги;-ний (¿.ШЛКОКЛОГЭЧПИЙ) .18 1,3 + 1,2 2,1 1,1 3,6 + 1,3 8,2 + 1.-1

сызорзтке крови через насколько чэсов после поврегденая(неироз, . воспаление, травма). Его татр достигает максимума через 48-72 ча-еа.. Концентрация СРП вике 12 кг/л считается повышенной и может доходить до 5QO кг/л при патологии(ft»coldberger ct al. ,-¡987, £.Rrützmeier,l9S9 ). снижаясь до нормы по мере выздоровления .

йзвеошш такие свойства СРП,,как способность блокировать аг-' грегацпю тромбоцитов в некрофилов и стабилизировать их-мембраны, индуцировать реакции фагоцитоза, а так^е участвовать в гладаолэтических реакциях противоопухолевой защиты (ь.Яаит et al,,-i987,T.Kill-pa1^igk,^.'Direllüf19e5,H«ilallerf■T.'I!'ehr,*198fi>S»'t'isc et

Повышение уровня СРП.в сыворотке крови у большинства бальных со злокачественными новообразованиями различных органов нередко встречается при нормальных показателях других лабораторных тестов, ' что дало основание считать этот антиген одним' из наиболее ин$зрг^а-тивных опухолевых маркеров( L.Fowell,l979,E.Zacbedi,Mortenseii 19561.

Достаточно высокая концентрация СРП в сыворотке крови при патологии. позволяет определить-его методом идаунодаффузионяэго анализа СИДА). . . ... '

По нашим данным, СЕЕТ в сыворотке крови в количестве 7,0+1,5иг£ встречается при воспалительных заболеваниях легких б 81,2^ случаев , в ;,ерзди неделю после поступления на стационарное лечение. В процессе лечения в выздоровления уровень СРП снижается до 1,0 иг??,а ■ частота/.онарутения - до. что соответствует результатам и-других '

5.скворэтке крови здоровых людей СШ методом ИДА не олреде-лязтся.

При раке легкого концентрация и частота обнаружения СРП в

снворотке крови возрастает ао кори прогресви.рова'йл процесса: от 2,0 + 0,2 кг;' при первой стадия до 6,0 + 0,6 глг'.-i и ну:!

четвертой.

Положительные пробы на СРП при легочной патология в несколько раз чаще ассоциируются с рентгенологическими изменениями з лог-ких, яознзензой СОУ а лейкоцитозов, чем СРП—отрицательные, что свидетельствует о высокой информативности z объективности серологического иммунохимического теста на СРП.

Практическое значение мо;.;ет и:.;зть определение СРП и в других биологических .гладкостях. Так, средняя концентрация СРП в хтавраль-ных экссудатах яри ракз легкого (25,5+7,0 иг%) достоверно выгэ, чем при неспецифнческом плеяратэ (4,5+1,5 мг£). Хроме того, как будет показано вике, определенна концентрации СИ1, наряду с другая остродазовыгдл белками, з динамика в' доелаоперационных плвз-ральных экссудатах мокат помочь в диагностике начинающегося нагноения в плевральной полости. Наконец, наш аиервкв обнаружено аэ-• язление СРП з мокроте больных с нагноятельнкии а деструктивный процесса;,® в легких (абцесс, рак) в 23 % случаев, что такие uo-:s3T ¿меть дополнительное диагностическое значение.

Продукта до г pa да ни л гЬлбопнэгвяа (НЛО)

3 последнее вое.мя удаляется большое внимание здон-

тхфикациа ПД2 в сыворотке крови гля да гностика ДЗС-сзядрогд у больных с острили и хроническими заболеваниями п злокачественными новообразования:.® различных органов, в том числе я легких.-(З.Г.Лнчез, 1935, Е.С.Якззенка и.соазт. ,IS67,vJ*r!e^N 1383).

При гнойно-деструктивных ослоан-знлях с яорвзх суток от.мзчае?ся появление определимых иццунохгалическямн методами количеств 1Щ? з сыворотке крова, а затем их тсчезковэкие по мэре выздоровления. Отсутствие снижения и стабилизация высокого уровня плохой

срогностичоский признак. При злокачественных новообразованиях последнее обусловлено генерализацией процесса (П.П.Яковекко г: др. Î&37.1... Eaoh^rr.fci,,г. г-bmoli ,S.woassesa.,1933 ) .

Полученные нами дакнае согласится с результатами исследования HLw других авторов и свидетельствуют о повышении содержания ПДФ (до 1/2 тптра в ИДА) з сиворотжах крови при острой пневмония и обострении XrioÉ з 43,в первые дни заболевания, а затем скп-sqhîie до куля при выздороглекии. •

При, раке легкого' частота выявления ПДФ в сыворотках крови -• возрастает .yz 13',?- при I-H стадиях до 52,85 - при S -1У-3.

Определение 11ДФ в сыворотке крови не имеет преимущества перед тестом ка-СРП, поспольку частота обнаружения и количество Щф ниже. Однако, идентификация ЦДф в комплексе с другиля острофазо-вымя белками в сыворотке и. особенно, как будет показано ншге, в Елевралыая; экссудатах,-мокроте и слоне имеет существенную диагностическую и прогностическую ценность.

Исследование эсгройззобю: антигенов в условиях гипертеомяческого стресса -

При разработке новых диагностических тесюв, ш исходили из того, что закономерные реакции рстрошазовкх белков, в виде повышения концентрации при воспалительно-деструктивных, процессах и сни-генкя прг выздоровлении, на практика проявляются на всегда и бывают замаскированы ложноотрицательными анализами при мнпмом клиническое выздоровлении (Р.Й.Вагвер и соавт. ,1986, Е.В.Козлова и соавт.,1964,В.Г.Мосие,1976, В.П.Снльвестров,1986).

Идея данного метода заключается в том, чтобы с помощью не-

сп^шйяческого тест-раздраяителя "встряхнуть" организм больного

!

к,вызвать адекватные заболеванию реакции острзашовнх белков, пзадра:.кв2ге':Е силу определенных причин .еря мнимом клиническом

-25, благополучии.

В качества неспецифяческого тест-раэдразителя о:ила' зибрапа искусственная лихоразка (гяяёртзрмичэский стресс), зызыва^ая знутршлыаечнш введение:! бактериального лапополяса:-:арпда-апроге-нала со специально.разработанной схеме. Применэняэ талуномоилятор-ной гипертермии позволило выявить разные типы реагирования острофазовых антигенов в легочной ткани в зависимости от вида легочной патология.

Реакция СРП. Обнаружено три типа реагирования СРП относительно исходного урозня:

1) отсутствие реакции при стабильной рентгенологической картине (отрицательные пробы) при ограниченном пневмосклерозе, доброкачественных опухолях;

2) повыденае титра з 2-8 раз при стабильной рентгенологачзеко* картине при активном патологическом процессе з легочной тханя (рак, туберкулез);

3) понязенаа титра (возможно кратковременное повышение э начале курса ишунос табуляция) на фоне резорбции тканей на рентгенограммах (затяжные сегментарные пневмония).

Реакгдя ТЕР. Повышение частоты зстречаешсти «тб.э^ до 3-1,5-3) я титра DES? (cI/2 до 1/8) после иммуностлмуляцдя отмечается линь яря ракз легкого, йт незлокачественной лагочяоЗ патологии пробы сывороток на EHjS остались отрицательными.

Реатаия 1Ш> я ДО. Частота обнаружения ПДФ 2 ЯФ после пярогено-герапая возрастает параллельно в 2-3 раза у всех групп больных, т.е. носит неслецифяческяй характер.

Та;спл образом, определение GPÜ и ГШ?5 з условиях зскусствж-ной гяпертераял при легочной патологии мояно исполвзозать в неясных случаях для уточнения диагноза. Применение аирогедглозога

теста позволяет выделить группы больных.с заболеваниями легких, нугд-авщгхсй либо ь дэлькеЬаем кэноерватквнот лечения и наблюдении (зэтягные ееэзмонпи, ограниченный пневмосклероз), либо в операции (опухоли, ей cru, туое икуло!,ш J. ■ .

Прь. эток: отмэчается положительный терапевтический эффект за счет резорбции пневмонических очагоз или уменьшения участков шев-иоскдэроза. - '

данный метод может быть рекомендован при этапах дифференциальной диагностики за тяглых пневмоний, рала и других, "шаровидных" образований в легких после проведенной противовоспалительной, дезаигокснкационной терапии в илрокой клинической практике. , Пгб5пап»ныа экссудаты. Одной из удобных моделей для ьзучеюш реакций острофазовых белков являются послеопераешэнные плевральиы экссудаты больных, перенесших резекции легких. Определение в дз-ваыгке Шр, .CRI, ЛФ и ферргтина в плевральной кидкостя выявило некоторые закономерности в появлении этих антигенов.

Так, в первые мшг/гы и чзсн после операции в экссудате отмечается высокие татр (до X/5I2) ПЦФ, а затем его снижение в течение 1-2 суток до I/4-1/2 титра в пррцессе нормальной регенерация

до выздоровления. Через. 6-8 часов.после операционной'травмы в

* - •

плевральной нвдкзстн появляется СРП, титр которого нарастает к . ¿-3 суткам до I/16-1/32 и постепенно crasaется, наряду с ПД£, до прекращения. аксоудацгй. ■'•,.'

■ ¿í- начинает определяться в плевральном экссудате, через IG-I2 часов в количестве 4-3 .игк/шг ^методом 11ДА1, а • затем снижается дп 0,4-0,6 мег/мл к концу 2-к недели.

Через 4-G суток после операции.в плевральной ыгдкостз сбна-рузггааетая üeppsras в количестве 5-10 мкг/шг и достигает,-уровня 2G-4.Q щц/оя в концу 2-й неделе» , сопровождая процесс облитерации

длэвральной полости фаброзязй соадшптелькой тканью.

Эт.-: порядок появления англ генов в плевральной падкзстз наругается лр-д зоспалзнхя ала нагноении з алезрадькой полости. Возникновение осложнения характеризуется значительным поддел:::,; (в 2-16 раз) концентраций ГШ, CPU si Л<1, по сразивши с арвднз?-длм уровней этих антигенов, за I--3 суток до клинического ярояз-леняя воспалительной реакции..

По мэра успешной санацди плевральной залэстн титр остро^--з>зах белзоз сагзэется до нормальных зад?, тогда как л?я воиг.т,-H339HU3 стойкой заяле«а плезри знсэкз2 вровень указандих га»г.!?<г-нэв, особенно 1Ц5 » сохраняется.

По K32SM7 шв82», зтя дакние тозэ? доагтаческзз гн&тенкэ а точки зрения контроля за лечением я aporasjk?jssh^i г,слохченп2.

Лр^ме 'Того, сравнение антигенных сябктроз плове.:. гы-гой Kjora пол несяэцдбячеоком экссзгдатпвном плеврите Э *П-изек) .раковом плеврите (3 человек) и «теме плэзрк (5 бэльксг) дерзало достоверно более зыезяэе содержание СРЯ и "рррптяна при дзтастатаческогл одезрлтэ.по сравнения с Ееслецитическам экссу-датпзнтл-, тог '.а как плевральная яидкость при эгаплемо плевры отличается более высоким уровнем Л-5, л наоборот, нлзкд.л количеством СРП, чех ари рака легкого (табл.о).

Таблица о

Со держание остройазэвых антигенов а плоег-здьенх экссудатах при воспалительных заболеваниях ;; оакэ легких ( в мгЗ).

, , вр??з .б-ах;ПДЗ__: . . .: . 0Л1.....;.....■¿gcotfSi

деопецпйический экосудатлзный

плеврит 9 7,1+3,4 4,о+1,5 0,2+0,1

?акэз!й плеврит 9 83,2+28,2 2,1+1,2 25,5+7,0 1,2+0,5

жппемз плевр;-,' о 92,0+36,3 14,3+2.3 7,5+1,5 Q,7+Q,i

Яодучааные результаты следует учитывать пра разработке алгоритма дкагносгаки алевритов неясной отвологик, наряду с такими да б opa торкал: показателями, как количество общего белка, лактат-дегадрогеназы, амдлазы, PÜA в т.д.(Р.У,Лай?, ISb5,s,Tajn>¡r? -igss). И'.глукохпч-ччвскэ.ч xanatm;пиптита антигенного состава иокооту и слякн

Мокрота. Нам впервые выявлена элиминация в мокроту ферритана, НГЭ, Лй, ДПР, СРП а спектра сывороточных-белков от альбуьина до гамггз-глобулшгов, частота обнаружения которых и концентрация коррелируют с Бнралзнностью воспалительно-деструктивных процессов з орокхо-логочной система, независимо от этнологии заболевания.

Икмунэхимаческоч исследование мокроты при легочной патологии позволило разработать способ диагностики степени экдобронхкта (авторское свидетельство й I4I5I3I) и использовать его в контроле за санацией бронхиального дерева.

Плша.З слюне, ло вашим данным, практическое значение имеет определение ЛФ и

. Обследование больалгп рдда -практически здоровых людей различных социальных групп, а такке лиц с патологией дыхательных путей и Евлудочво-кипэчкого тракта, позволило выявить следующие закономерности содержания ЛФ и ПМ в слвне.

I.Частота обнаружения повышенных концентраций J® и ИДг в слйне практически здоровых людей достоверно вызе у рабочих предприятий с лрофзредностями, чем у служащих этих предприятий, а так7/.е у студентов и сельских кителей (контроль).

¿.Частота обнаружения повышенных концентраций ЛФ в слше повышается с.возрастом,'"что, по нашему мнению, связано с солее длительным контактом с неблагоприятными факторами и увеличением числе лиц с отклонениями в состоянии здоровья в более старшем

зэзрастз.Достоверных разлдчзй з содеряанаи в зависимости от

возраста нэ обнаружено.

3.L.J-.I скрининге :¡ мониторинга 25 и в слоне на;ли вь\чздэра четкая связь повыиения уровней обоих белков с патологией дыхательных путэЛ и дздудэчно-кдяачного тракта: яри остром л аллоргическлм ринитах и рик^зрингитах- з 7С.З', острой пневмонии - в '3,i1( раке легкого - в 93,3'", обострении хронических гастродуоденитов, холецдстопанкреатдтов в 86,7=5 и сахарном диабете - в 7I,37Í.

овязи о эти:.!, мы считаем, что пммуяохпмическое псслодозаиле остротаззвых белков з слшз мояно рекомендовать для скрннингт-ых

i Ы В О Д L¡

Г.Дана клиническая оценка результатов иммунохиыяческого

исследования тканевых и сывороточных острофазовых антигенов :лй>

/

фэрратина, плацентарной щелочной фосфатазк ÍIEji), ттапевой эсте-разы CtTi'j), О-реактизного протеина (СРП), фибриногена л продуктов эго деградация (H3¿) в тканях и С.чологичэскдх жидкостях больных иэспеци!:1чески:,ш воеаалатеяьннма забэлеванаямз а раком легких, разрабо••экн извне дпагносттчэскде тесты, которые использованы в скрининге и мониторинге заболевания, а так>:е з контроле за лечением.

2.3:!язлзно альтернативное растре деление железосодержащих се.ткоз в уллптнпзированных легочных тканях: преп;,тудэств8цаое накопление ¿эррптпка з сзедянатольноткэнЕкг элементах стропы опухолей и околоопухолезой легочнол ткана и, наоборот, более высокая концентрация лакгоферрика в эпителиальных кдотяпх опухоли, по сравнении с ее строкой и околоопухолевой. ткакыа.Такое соотношение .делезосодэргздпх антигенов, обладающих шлмунэрегулятозны-ми сззйстващз, полет быть использовано прд изученг.и азадуоотно-

аеяиа клеток опухоли, соединительнотканной строма з паранео-шгастлчасксй ткани е канцерогенезе.

3.Количественное содержание ферритпна, лактоферрина, Шй>

я НТЭ в опухолях зависит от направленности гистогенеза и етелеш: дпфуерепцировки рака легкого.Более высокие концентрации ферзитина, лакгофвррдяа, ЯГЭ и низкий уровень IIIS' отмечаются при вь'сзао-диЗфорезцированном длоскоклеточноц раке легкого.Для низкодифререк-цированного плоскоклеточного в тлкоклеточного рака легкого xsjsk-, терны повышение количества ПЩЬ г снзкение содержания других антигенов .Найдешая закономерность открывает перспективы дальнейшего совершенствования морфологической классификации рака легкого.

4.Изучение профилей ферритина, лактофзррина, Ш*>, СРП, Ц^ в сыворотке крови при бронхолеточной патологии позволило установить отличия е уровнях этих антигенов при незлокачественных заболеваниях и раке легкого.Разработаны диагностические тесты для определения воспалительных и деструктивных процессов в ткани легкого,

а текае воспалительных или метастатических поражений печени, на основе которых более четко определены показания к противопоказания к срочны:.; г плановым операциям.

5 .Выявлена возможность использования серологического теста на лактоферрин в контроле за хжпо - лучевой терапией злокачественных опухолей, наряду с показателями лейкоцитарной формулы пери-$с.Ч'ИЧ8ской крови.Обнаружено, что яммуяохзиический тэст на лакто-феррин £ два раза чувствительнее метода подсчета числа лейкоцитов.

^.Разработан z внгдрэн в клинику метод идауномодудяторного гипе,) т ермич е с ко г о стресса, который аолокен в осеозу клпнико-имуЕохимачвекой диагностики затяжной пнэвмоииа, доброкачественных опухолей а рака легкого за счет использования особенностей реакций остройаззвых белков сыворотки крови и реакции легочной

ткани под воздействием кммуяомодулятора пирогенала;

'/.Разработан я применен в клинике метод контроля за течением послеоперационного периода у бальных после лоб - и пульмонокгомий, заключающийся в динамическом определении реакции острофазовых б ел;« в в аослзоперациошшх плевральных окссудатах.Ловышенио количества ЩЦ', СРП, Лй предяествует нагноительному процессу п сопровождает его, тогда как уменьшение - наблидается при стихании воспаления.Повышение уровня ферритина в плевральных экссудатах отмечается на заключительных стадлях репарации при соединительнотканной облитерации плевральной полости.

8.Обнаружены явления элиминации тканевых (ферритан, лакто-геррян, неспецяфячзская тканевая эстараза) и сывороточных острофазовых белков (альбумин, СРЕ, альфа-, бета- и гамма-глобу-лзны) в бронхиальный, секрет при воспалительных заболеваниях а раке легких.

Разработаны .диагностические тесты, позволяющие определять степень выраженности зндобронхита по характеру антигенного спектра мокроты.

9. Разработан новыЯ метод выявления групп морбидсого риска при скрининге, который включает в себя икмунохимдческле тесты но определения остро$азовых белков в смешанной елвнэ человека. Зн-лзлена зависимость повышения з слвнэ уровня лактоферрина и появления Пд5 от степени воспалительных процессов в слизистых днза-тзльяых путей я яелудочяо-кпшечногэ тракта. ■ Яоактяпеские оекзиендзср;и

I. При оценке гистологического типа и степени дкфТеренцп-ровп злокачественных опухолей легких, кроме результатов гистологического заключения, необходимо учитывать количество фвррати-за, ЛФ, НТо, в срезах а экстрактах опухолей н^уяощрфолог::-

-32-

ческкш к ишунодиффузаонннми кзтодаыи.

2. Для идентификации в сызоротке крови ферзигина и лакто-фэррина необходимо использовать метода радиоиммунологического^и иммуяоберментного анализов, для определения СРП и ПДФ- метод. имкуЕодиффузяоЕНого титрование в агаре,' а дая -¿Щ1 - метод встречного шлмунозлектрофореза с последующей энзимохишческоХ окраской ншуноэлектрофорэграмм.

3. При диспансерном наблюдение за больными хроническими несп&цзфическима заболеваниями легких необходимо комплексное исследование сывороток крови в динамике на содержание остройа-зовых антягеиов. Так,, подъем уровней ферритика более 211,4+51,4 пг/мл, 1Ф- более 1112+72,8 нг/мл, появление ПЩ5, СРП и ДД2> позволяют заподозрить яролиферативно-деструктквнь'й процесс в легочной ткани (туберкулез, рак) и требуют углубленного обследования е лечения больного.

4. Исследование сывороточных острофазовых.антигенов целесообразно при диспансерном наблюдении за больными раком легкого Ш клинической группы. Повыаенсе их концентрации по сравнаниэ с исходным уровнем является одним из признаков рецидирированкя пли ыстастазирозакия опухоли.-

5. У больных раком легких, которым предполагается специализированное лечение, необходимо исследовать 1Щ> в екзоротке кровк в динамике для исключения реактивного гепатита или метастазов в печень, не выявляемых обычннш печеночными пробами.

6. При определении еявэроточпого лактоферрина следует пом-. нить, что его концентрация у здоровых могет колебаться в зависимости от географической среда обитания, в частности от 200600 нг/кл у москвичей до 800-1200 нгД*л у астраханцав. Одним

аз факторов, влияющих на уровень лактоферрика в сыворлл.е мокет быть га:, ла-облучение.

С учетом того, что источником сывороточного лзктофэррина является нзйтрофилы, определение этого антигена в крови, наряду с другими лабораторными тестами, целесообразно в контроле за лечением воспалительных заболеваний легких, а такте при назначении противоопухолевой хкмио-лучевой терапии, визиваюдей побочное угнетение кроветворения.

8.3 случаях затрудненной дифференциальной диагностики, так зазываемых,"шаровидных" образований легких,необходимо с лечебно-диагностической целью применять метод яимуяомодуляторной гипзр-термии путем внутримышечного введения плрсгенала по специальной схеме с одновременны;-! исследованием в динамике реакция остро-разовых белков и рентгенологической картийы в легких.

9.У больных, перенесших операции на легких, целесообразно исследовать острофазовые белки в послеоперационных плевральных экссудатах в динамике для.своевременного выявления нагноения в плевральной полости и контроле за лечением.

10.При боонхолесочной патологии в контроле за санацией бронхиального дерева целесообразно исследование антигенного спектра мокроты для оценки степени выраженности эндобронхзта л гнойно-деструктивных изменений е бронхо-легочной система.

11.При массовых обследованиях и профосиотрах рекомендуется •в качестве скриняягового теста определение в слюне лактсферрзга г. ПД5, повышение концентрации которых обусловлено восдалгтэлышмЕ заболеваниями и злокачественными новоооразоваяияиа дыхательных путей и аанкреатодуоденальной зоны.

Внедрение в практику.

В результате проведенного исследования разработан а шедроя

ряд диагностических тестов для оценки степени дифференцаровкя раковых опухолей легких, степени выраженности эндобронхита, для определения -поражения печени у онкологических больных, выявления активности пзто-логачеекогс процесса в легких, а также прогнозирования и обнаружения нагноения в плевральной полости после операций нг легких.

Разработан принцип иимуномодуляторной гипертермии, который положен в основу нового дифференциально-диагностического а лечебного

подхода при, так называемых,"ааровядных" образованиях в легких.

Создан принципиально новый скришщговый тест, основанный на определении некоторых сывороточных острофазовкх антигенов в смешанной слене.

Результаты исследования в настоящее время используются:

- в научных исследованиях ШШ и клинических кафедр АГМИ иг.;.А.В.Луначарского, в лаборатории иммунологии ШШй им. и.А. Герцена;

- з практической работе пульмонологического'я торакального отделений

1-ой областной клинической больницы..и 2-о2 городской больницы г.Аст-ра хан::;

- в практической работе 'Ассоциации враче! Астраханской области. '

Рацпредложения и изобретения

I. Способ определения активности фосфатаз и эстераз в хроматографических фракциях. Рацпредложение # 675 от 19.12.1984г. ■ .

2_- Гистознзлаохицическгй способ определения направленности дифферен-

цкровки рака легкого. Рацпредложение Л 642. от 01.02.1984г.

3. Способ определения печёночной патологии у онкологических большх.

-Заявка на изобретение № 4133719/14 от 14.10.1983г. Положительное резение.

4. Способ определения степени эндобронхита. Авторское свидетельство на изобретение 1415191 (1988г.).

5. Способ количественной.оценки активности дактат-дегидрогеназы и е фракций. Рацпредложение й 364 от 16 сентября 1988г. ;

6. Способ определения активности патологического процесса в легких. р£.1ШГ«лложсние ^.890, заявка на'изобретение (1989 г.).ПоложЕтельЕое

СГМСОК РАЮТ.СП^ТИЮМШХ по ТЕМЕ даЕРТАЩМ

Х.йммунсхкмический гссцхо^ к лзучению парзносплагт'ичяских: син-ipcyon./ ' 3 сб.Диагностик я лечение рака легкого-Груш Ш&А tu П. А.Гериона,М. -IS84-69-73 (еоавт.Н. А. Андреева,Ю.Х.ХзЯрулин).

2.йммунсхимическая идентификация кчнцероплацентарнь**- антигенов з моче человег-са.// 8 сб.Тел.б5-й науч.конф.мепиков Агтр.обл., Астрахань-1984 (соавт.Д. А.Костина).

3.Монет ли сывороточный альбумин служить маркером "острой" '¡&-зы зоспаления? //В еб.бо-й науч. кскф.меаи коз Астраханской об.'., Астрахань-1985-с.69 ( еоавт.Н,А.Андреева).

4.Плацентарная шелочная фосфатзза в сыворотке крсьл как противопоказание к операции при раке легкого.//MPS- 195Ь-У1-л6 (coas-:. Н. А.Талукдер.О. А.БабенкоД.Д. Аблаева).

о.Содержание альфа^-феррспрстекда в опухолевых и околеолухоле-вьч тканях при раке легкого.//МРЖ-1986-У I-IÍ-Б (соавт.Я.А.Талухдер, Я.Н.Грачёва).

б.йммукохимические методы-в диагностике рака легкого./Д'РЕ-1986-У1-Я® 10 (еоавт.Н. А.Талукдер, А.3. Мотькин я up.).

7.Обнаружение термостабильньк тканевые эстераз в легочной «-хани и мокроте больных раком легких.//Вопросы енколегяя-1986-гг 2-с.82-83(еоавт.Н.А.Андреева).

8.Морфологическая и клиническая оценка плацентарной щелочной фосфатззы при некоторые злокачественные опухолях человека.//3 сб. 1У съезда патологоанатомов Укр.ССР-Донецк- 1986-е.67(coaет.М.Н.Добренький,С. В.Ксзлов,Ю.Х.Хэйрулик)

9.Продукция йзофермента' щелочной фссфатнзы плацентарного гипа в сколоЕерхузечнсй гранулеме.//В яурн."Стсматология"-1967-£1 -с. 16-18(соавт.Л.И.Фрейдин,А.А.Николаев,С.Б.Козлсв,Ю.Х.Хайрул1;н).

Ю.Иммунохимические методы в изучении дредоановых заболеваний и рака'легких.//В сб.Эпидемиология,профилактика и ранняя хн'згнос-

•тикз злокачественны«: повообр 130з-дн:!Й-Томск-1Э87-с. 225-226,

11.11ммунсх/.г.ыческое изучение сывороточных "острсфа&овьк" белков крови и тканевых протеинов б мокроте при специфической не-сп орфической легочной патологии .//В кн.Тез.дсхл. У1 ¿ЗсерсссиРско-гс> гьеоца фгпзиатроь-Кемероес-I?S7-c. 160-KI (Д. М.Н/кулика,Г. А.ТруС никое.H.А.Талукцер.Л. И.Кучкова).

К.Определение пзоонзлмов плацентарной аелочноГ; фосфат&зь; методом встречного иммуноэлеггрофорезя t сывооогк^- крови больных' с гепатобллизрной г.етологяей. //.п а бор-, торное зело- I9£7-'i 8-е. 872-5~4 (соавт.К. С. Яценко,Б-И-Богэцуч ,Ю. З.ЗзГгчулис).

13.К вопросу с перестройке онкологических исслегч0Еак-/?. (з г.Аст-prsxr5Kî:).//ii сб. Тез. до«, к итоговой шуч.сесс;:;: АПИ-Астрахмць-ISSo-c. 127-128.

14.Содержание ферритина в легочной ткани при рзке а ХНЗД.// 3 ян.Пролиферация рак-Саротов-1988-с. В-24(соав'1. А.Л.Бсгетсе, С.В.Козлов i: др.).

Ез.Илмукохш.кческое -исследование лактоферрикэ з сыворотке крови бсльнкх.//МРЕ-ХУ11Î-1985-Jf IC-c. .публ. 1157 (соавт.А. А.Николаев, К.Ю.Васильев и др.).

Iö.Источники продукции лактоферринз' в норме и патологии.//МРЖ, XXI,* 1589,3,публ.4S5.(соавт.А.А.Николаев,М.Ю.Знсильев и'др.).

57. Клиническое значение кммунохимреского исследования сыЕсрс-точлыч и тканевых белков в мокроте/Дер.архив,1988,№12.с.66-69 (соазг. Г. А. Трубников, Д. М.Никулина к др.),

К Сценка состояния пищеварительных к дыхательных органов по, «штигенноцу спектру елгаь: и мокр с ты. //3 сб.Обл.науч -лракт.конф. •Астрахань, IS39,с. 20(соавт. Н. А.Талукдер.Т 3. Габуковз ,Л. И. Зрейдин).

15.Белки .смешанной слюны человека при гальзакозе и прожкевом стоматите.//Стсмзтоло гия, 1989-,Xü,с 54-55(соавт.Д.il.Фрейдин).

20.Ферр;ггины ткздей и биологически* жидкостей я нор?.« л патологии (обграздел Ü11I,J I,публ.7.

¿I.Клиническое значение исследований некоторых пстрефпзсзыч протеинов,изоферментов гликолиза гри р^ке легкого vi XH3J1//3 сб. L Все-соаз.конгр.по болезням органов дыхания.Киев,9-12 окт.1990 (соавт. Г. А.Трубккков Д. 3. Габукова).

22. Клиническое значение иммунотимячсокич '/еследоззниЗ некоторые острофазовьгх протеинов при заболеваниях- печен*//3 ct.l'J Зсесоет. съезд гастроэнтерологов 17-2G охт.1993 (Г. А. Трубнике и. Л. Черешне}.

23.Стимуляция .синтеза С-реактивного протеина пирогеналом при незлокачественные заболеваниях и раке легкого// ¿Зопр онкология.

№ 5.т.Зо,с.935-939,(соагт. Л.Е.Илвхкна. А.й. Воробьев,Н, А.Талутпср). . 24. Уровень сывороточного яактоферриня з норме и при патология// Зопр. мед. хтми, 1930,т.35,№ 3,с.Ы-83(соа-вт. А. А.Николаев,й. Васильев)

25 .Лактоферркн л лейксциты крови у онкологически-*- больные// Лабор.дело, 1950,Г? 5,с.33-35(ссзвт. А. А.Николаев,М. К). Заскльоч).

26.Лактоферрин и продукты, дегра дации фибриногена в слете// Лабор. дело, IS9I,5, с. 20-24( соавт. А. А. Никола ев, К. Н. Никола esa, Н. А.Суореза).

27.0 перспективах иммунохимичееккх я иммукоморфояогических исследований при легочной патологаи//В сб.жт.13сесоиз.кокф."Метаболически е нарушения и их коррекция в онкологии','4-5 июня 1991,0.95-97.

28.Влияние бактериального ляпсполисахарида на реакцию яымунорэ-гуляторньх белков при воспалительных заболеваниях v. -опухолях легких у. человека//там же.с.96 -99(ссзгт.Г.А.Трубников. А. А. Никола ез)'. '<, 29.Результаты иммунохшичеснич исследований карбоксилостерагн в аугопсийкоЯ легочной ткани к б мокроте больных ХНЗЛ и раком легкого/Дам же,с. 103,105 (соавт. Г. А. Трубников,А. А.Николаев).

-3830 Пселецовпние ферритаяг у больные с неспецифической легочной . 1 i тол - гй е г;, туб ер кул ез ои я ралом легких//там же,с. 105-106(созе?-Г'. А. Трубников. Б.Д.Ничога.ЛХ.Хайрулян) '

31 .12Л!,унс1Г1ив!ческое изучение острофазозых белков б слюне у ре-. бсткикэв предприятий с про«звоцстБенными вредностям:://;?. шт. Всероссийской конф. "¿лклггле зь-гропогенныч' факторов на морфогенез и структурные преобразования органов"Астрахань,I9SI.149- 1Ь0(соавт.Т.Н.Ермолаева. А.Д.Николаев и др.").

32. Кпикмко-диагностическое значение исследований с о дерет ни?.' ферт рйткнз б сыворотке кос ей ж мокроте при, легочной патологик/Л'ер. 2рткзЛ991.» 12,с.20-341 соавт.Г.А.Трубников,В.Д.Ничогз). ''33. Способ определениг степени э:щоброн-<гта//Бклл.Открытия, йзеб-.

реаекия, ^.с.1771ссавт.й.А.Талукаер) .

^.Jnzruaochenicci Trauriceorphologic studies of plccenta-- associated proteins ia jncology//5fcl.3iol. and Tegulation of the PI;cents.Tien Iork,49S3/J?9 O'SA1». . •

35. Reaction of Itsar: csacer-associatsa antigens in hyjertheraic streEn//0ncodeTraIcp=s-±3l proteins and clinical applications.18-th Mset.Int.Soc .Bicl.ited-,etascow,USSR, 7990.