Клинико-диагностическое значение иммунохимического анализа белкового спектра ликвора при заболеваниях нервной системы

Белопасов, Владимир Викторович

Диссертации по медицине → Нервные болезни

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.13) на тему:Клинико-диагностическое значение иммунохимического анализа белкового спектра ликвора при заболеваниях нервной системы

АВТОРЕФЕРАТ

Клинико-диагностическое значение иммунохимического анализа белкового спектра ликвора при заболеваниях нервной системы - тема автореферата по медицине

Белопасов, Владимир Викторович Москва 1997 г.

Ученая степень: доктора медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.13

Автореферат диссертации по медицине на тему Клинико-диагностическое значение иммунохимического анализа белкового спектра ликвора при заболеваниях нервной системы

^ о*

^ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ Со ^ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

^ «V АСТРАХАНСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ

МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

На правах рукописи УДК 616.831-005 - 055.2

БЕЛОПАСОВ Владимир Викторович

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИММУНОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА БЕЛКОВОГО СПЕКТРА ЛИКВОРА ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ

14.00.13 - нервные болезни

Автореферат диссертании на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Москва -1997

Работа выполнена в Астраханской государственной медицинской академии (ректор - академик, доктор медицинских наук, профессор И.Н.ПОЛУНИН)

НАУЧНЫЕ КОНСУЛЬТАНТЫ:

доктор медицинских наук, профессор В.П. Чехонин доктор медицинских наук, Б.И. Бенькович

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН И.В. Ганнушкина

доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН В.А. Карлов

доктор медицинских наук, профессор А.А. Терентьев

ВЕДУЩЕЕ УЧРЕЖДЕНИЕ: Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Защита состоится "_"_1997_г. в_

часов на заседании Диссертационного Совета (Ц 084-14. 03) Российского государственного медицинского университета по адресу: 117869, Москва, ул. Островитянова, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета.

Автореферат разослан "_"_1997_г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета

доктор медицинских наук, профессор П.Х. Джанашия

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. После того, как Quincke в 1891 году ввел в клиническую практику люмбальную пункцию, интерес к изучению СМЖ не угасает. Это объясняется, с одной стороны, важным значением СМЖ для функционирования ЦНС, с другой, тем, что по изменению ее состава можно судить о характере патологических процессов, происходящих в оболочках и самом веществе головного и спинного мозга. С этих позиций результаты исследований СМЖ для клинициста (невропатолога, нейрохирурга) трудно недооценить.

На протяжении более полувека визуальная оценка, бактериологическое и цитологическое исследования СМЖ являлись одним из основных критериев постановки диагноза у больных с поражениями нервной системы. Изменениям общего белка и белкового состава СМЖ не придавалось должного значения, так как наличие гиперпротеинрахии было свойственно не только опухолевым заболеваниям ЦНС, но и воспалительным, сосудистым, дегенеративным. Остальные биохимические методы оценки СМЖ, за некоторым исключением, считались малоинформативными и не нашли широкого применения в повседневной практике (Г.П. Бург-ман, Л.Ф. Лобкова, 1968; А.П. Фридман, 1971; АЛО. Макаров, 1984; Дж.Ф. Зильва, П.Р. Пэннелл, 1988). Однако в последние десятилетия существующая точка зрения о недостаточной информативности исследования белков ликвора для установления диагноза, определения стадии и прогноза патологического процесса была существенно пересмотрена, чему в немалой степени способствовало развитие фундаментальных наук.

Особое внимание клиницистов, в силу своей специфичности, возможности обнаружения патологических ингредиентов в микро-

количествах, привлекли методы иммунодиффузии, иммуноэлек-трофореза, радиоиммунологический и иммуноферментный. С их помощью удалось установить, что нормальная СМЖ содержит от 20 до 40 индивидуальных белков (Е.М. Цветанова, 1986). При патологических процессах, даже если он и не сопровождаются деструктивными процессами в мозговой ткани, в СМЖ возможно появление аномальных белков. Хотя, в большинстве своем, белки СМЖ имеют сывороточное происхождение, часть из них несомненно являются белками ЦНС (органоспецифические, нейроспе-цифические белки), а часть, как показали последние исследования (Р.Р. ВаШеП, 1982; Ю.А. Малашхия, М.Г. Геладзе, 1988), синтезируются стволовыми иммунокомпетентными клетками, локализующимися как в самой ЦНС, так и в СМЖ.

Вместе с тем, биологическая роль и диагностическая ценность многих белков СМЖ остается неясной. Отчасти это объясняется тем, что СМЖ подвергается лабораторному анализу гораздо реже, чем другие биологические среды организма. Поэтому с теоретической и практической точки зрения важно выявить "антигенные спектры" СМЖ, характеризующие то или иное заболевание ЦНС, установить возможность использования отдельных антигенов СМЖ или их комплекса в качестве специфических маркеров для постановки нозологического диагноза, а также степени и роли деструкции отдельных элементов нервной ткани (астроцитов, олигодендроглиоцитов и т.п.) в патогенезе нейропатологических синдромов.

Цель и задачи исследования. Целью работой явилось определение клинической ценности плазменных и нейроспецифических белков СМЖ как маркеров патологического процесса, установление их взаимосвязи с белками крови, разработка дифференциаль-

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

На протяжении более полувека визуальная оценка, бактериологическое и цитологическое исследования СМЖ являлись одним из основных критериев постановки диагноза у больных с поражениями нервной системы. Изменениям общего белка и белкового состава СМЖ не придавалось должного значения, так как наличие гиперпротеипрахии было свойственно не только опухолевым заболеваниям ЦНС, но и воспалительным, сосудистым, дегенеративным. Остальные биохимические методы оценки СМЖ, за некоторым исключением, считались малоинформативными и не нашли широкого применения в повседневной практике (Г.П. Бург-ман, Л.Ф. Лобкова, 1968; А.П. Фридман, 1971; А.Ю. Макаров, 1984; Дж.Ф. Зильва, П.Р. Пэннелл, 1988). Однако в последние десятилетия существующая точка зрения о недостаточной информативности исследования белков ликвора для установления диагноза, определения стадии и прогноза патологического процесса была существенно пересмотрена, чему в немалой степени способствовало развитие фундаментальных наук.

количествах, привлекли методы иммунодиффузии, иммуноэлек-трофореза, радиоиммунологический и иммуноферментный. С их помощью удалось установить, что нормальная СМЖ содержит от 20 до 40 индивидуальных белков (Е.М. Цветанова, 1986). При патологических процессах, даже если он и не сопровождаются деструктивными процессами в мозговой ткани, в СМЖ возможно появление аномальных белков. Хотя, в большинстве своем, белки СМЖ имеют сывороточное происхождение, часть из них несомненно являются белками ЦНС (органоспецифические, нейроспе-цифические белки), а часть, как показали последние исследования (Р.К ВаШе«, 1982; Ю.А. Малашхия, М.Г. Геладзе, 1988), синтезируются стволовыми иммунокомпетентными клетками, локализующимися как в самой ЦНС, так и в СМЖ.

но-диагностических критериев и методов контроля за течением патологического процесса у больных с основными заболеваниями нервной системы. В соответствии с целью были решены следующие задачи:

1. Проведен иммунохимический анализ белков СМЖ и сыворотки крови при основных заболеваниях нервной системы (неврологические проявления остеохондроза, черепно-мозговая травма, хронические воспалительные заболевания оболочек головного мозга, эпилепсия, нарушения мозгового кровообращения, опухоли ЦНС).

2. Проанализированы особенности изменений в СМЖ и сыворотке крови нейроспецифических и межорганных антигенов.

3. Выяснено при каких заболеваниях нервной системы усиливается продукция того или иного белка и какова ее зависимость от степени повреждения структур головного мозга, стадии и характера патологического процесса.

4. Установлено за счет каких нейроспецифических белков развивается феномен аутосенсибилизации.

5. Изучена возможность поступления в СМЖ при заболеваниях ЦНС онкофетальных антигенов.

6. Оценено значение нммунохнммческих тестов для диагностики активности патологического процесса при хронических заболеваниях оболочек головного мозга.

7. Выявлены изменения антигенного состава мозга, СМЖ и сыворотки крови в зависимости от гистогенеза и степени прогрессии (злокачественности) опухолей ЦНС.

8. Обоснованы преимущества иммунохимических тестов перед традиционно применяющимися методами ликвородиагности-ки.

9. Даны конкретные рекомендации по использованию имму-нохимических тестов в практике работы неврологических и нейрохирургических отделений.

Научная новизна работы:

1) в СМЖ идентифицированы два термостабильных межорганных антигена (ТМ-1, ТМ-2) и естественный фактор ингибиции активности антител класса М;

2) проведено комплексное исследование межорганных и ней-роспецифнческих антигенов в биологических средах при основных заболеваниях нервной системы;

3) изучена частота и уровни нейроспецифических антигенов онГМ, агГМ и ААТ к ГалЦ в СМЖ;

4) установлена взаимосвязь уровней нейроспецифических белков (а|ГМ, агГМ, вРАР, аг-ГП) и ферритина при повреждении структурных элементов головного и спинного мозга;

5) на примере травматической болезни мозга показана зависимость синтеза плазменных антигенов (ферритина, шФП, РгМГ) от стадии развития патологического процесса, что позволяет использовать их для периодизации заболевания;

6) определены критерии объективизации с помощью плазменных и нейроспецифических антигенов активности патологического процесса в отдаленном периоде заболевания, когда при клинической оценке диагностируется резидуальная симптоматика;

7) выявлен феномен антигенного усложнения опухолевых тканей мозга по межорганным и упрощения по нейроспецифиче-ским антигенам;

8) в сравнительном аспекте изучены антигенные композиции и "мозаика" основных ферментов и изоферментов опухолей ЦНС,

их зависимость от гистоструктуры и степени дифференцировки тканей.

Практическая значимость работы. Установлено количественное содержание плазменных и нейроспецифических белков, частота и титры ААТ к ГалЦ в СМЖ и крови при основных заболеваниях нервной системы.

Выявлены особенности изменений антигенного состава СМЖ и сыворотки крови в зависимости от вида патологии.

Результаты исследования позволяют рекомендовать использование иммунохимических тест-систем на нейроспецифические и плазменные антигены у больных с заболеваниями нервной системы с целью:

1) определения характера повреждения (деструкция, воспаление, пролиферация), стадии и степени выраженности патологического процесса, уровня нейросенсибилизации организма больного в острой и хронической стадии заболевания;

2) оценки выраженности местного и общего иммунного ответа;

3) определения антигенной композиции опухолевой ткани мозга, уточнения гистоструктуры и степени злокачественности (прогрессии);

4) лабораторной диагностики повреждения мозговых структур при церебральных арахноидитах;

5) дифференциальной диагностики органических и функциональных заболеваний ЦНС, сотрясения и ушиба головного мозга легкой степени; дискогенно-васкулярных радикуло- и миелопатнй;

6) контроля за течением патологического процесса и эффективностью проводимого лечения.

Основные положения выносимые на защиту:

1) Особенности антигенных спектров СМЖ и сыворотки крови при неврологических проявлениях остеохондроза, черепно-мозговой травме, церебральных арахноидитах, эпилепсии, нарушениях мозгового кровообращения;

2) Антигенный состав СМЖ, крови и тканей мозга при опухолевых заболеваниях ЦНС;

3) Иммунологические реакции при развитии деструктивных и воспалительных процессов в головном мозгу;

4) Перспективы использования иммунохимического исследования белков СМЖ и сыворотки крови для диагностики и разработки новых методов лечения больных с заболеваниями нервной системы.

Внедрение в практику. По результатам исследований разработаны и утверждены Центральной проблемной комиссией по неврологии методические рекомендации республиканского значения:

1. Иммунохимические методы идентификации гистогенеза и степени прогрессии (злокачественности) опухолей центральной нервной системы.

2. Клиническая оценка иммунохимических методов исследования белков ликвора.

Получено удостоверение (№1043) от 10 сентября 1992 г. на рационализаторское предложение "Способ диагностики деструкции мозговой ткани при церебральных арахноидитах".

Материалы работы включены в программу Всероссийской школы-семинара по иммунохимии, освещаются при преподавании неврологии и нейрохирургии на лечебном и педиатрическом факультетах Астраханской медицинской академии.

Иммунохимические тесты на нейроспецифические, плазменные белки применяются для диагностики, контроля и оценки патологических процессов в неврологических и нейрохирургических отделениях П-ой областной клинической больницы им. проф. И.Н. Аламдарова, городской больницы № 3 г. Астрахани, лаборатории иммунохимии НИИОСП им. В.П. Сербского (г. Москва).

Апробация работы: Официальная апробация диссертации состоялась на конференции кафедры неврологии и нейрохирургии Российского государственного медицинского университета (протокол № 3 от " 7 " октября 1997 г.).

Основные положения работы изложены в центральной печати, в докладах VI Всесоюзного съезда невропатологов и психиатров (1975), Всесоюзной научной конференции по иммунопатологии нервных и психических заболеваний (1983), II Международном симпозиуме по иммунореабилитации (1990), IX Европейском конгрессе нейрохирургов (1991), I Международном конгрессе вертеб-роневрологов (1992), VIII Всероссийском пленуме судебных медиков (1993), I Международном конгрессе по иммунореабилитации (1994), IV Международной конференции "Нейроиммунология, нейроинфекции, нейроимидж" (1995), 23 конференции Европейских биохимических обществ (1995), на заседаниях Астраханского научного общества неврологов, областных научно-практических конференциях сотрудников, медицинской академии и врачей Астраханской области (1975-95 г.г.), заседании Астраханского областного научного общества иммунологов (1994).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 44 научных статей. Список приводится в конце автореферата.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 227 страницах, содержит 17 рисунков, 26 таблиц, выписки из историй болезни. Состоит из 5 глав, в первой главе дана общая характеристика работы (введение), во второй - обзор литературы, в третьей - представлены материалы и методы исследования, в четвертой - результаты собственных исследований, в пятой - обсуждение полученных данных, выводы, практические рекомендации. Библиографический указатель включает 250 отечественных и 170 зарубежных источников.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обследование проведено на контингенте больных (586 чел.) с наиболее часто встречающейся патологией нервной системы (таблица 1).

Таблица 1

Распределение больных по нозологическому диагнозу

Нозологические Число больных

| группы

1 Неврологические проявления остеохондроза 98 !

I Черепно-мозговая травма 142

! Хронические воспалительные заболевания

! оболочек головного мозга (церебральные 72 1

; арахноидиты)

; Эпилепсия 83 j

| Нарушения мозгового кровообращения 84 ;

I Опухоли центральной нервной системы 107

1 Инфаркт миокарда 81

| Доноры 80

! В С Е Г О: 747 чел. i

Наряду с оценкой неврологического статуса, использовали

методы общеклинической, лабораторной, инструментальной (ЭХО-ЭГ, ЭЭГ), рентгенологической диагностики (рентгенография черепа и позвоночника, ПЭГ, миелография, КТ, ЯМР, каротидная

ангиография).

Кроме нммунохимического исследования образцов СМЖ и сыворотки крови неврологических больных, были изучены сыворотка крови доноров (80 чел.), больных инфарктом миокарда (81 чел.), образцы дефинитивной (60) и опухолевой ткани. Ткань мозга получали при аутопсии и операционных вмешательствах. Забор крови проводили из локтевой вены, СМЖ - при люмбальной пункции. Образцы сыворотки, плазмы и СМЖ сохраняли при температуре - 20°С.

Содержание общего белка в СМЖ определяли по О.Н. Lovvryet al., (1951).

Фракционный состав СМЖ изучали методом классического иммуноэлектрофореза (Р. Grabar, С. Willams, 1953). Количественную оценку основных классов иммуноглобулинов в СМЖ осуществляли методом радиальной иммунодиффузии в геле по G. Mancini et al. (1965). Для определения естественного фактора инги-бнции активности антител класса М использовали РИГА в модификации А.А. Шепелева (1990). Фактор некроза опухолей (ФНО-а) исследовали иммуноферментным методом на твердофазном носителе "сэндвич" - типа по методике, разработанной Институтом иммунологии Минмедпрома РФ.

Методом двойной иммунодиффузии в агаре по О. Ouchterlony (1958) в аранжировке Н.И. Храмковой и Г.И. Абелева (1961) в СМЖ, сыворотке крови, дефинитивной и опухолевой ткани мозга были изучены:

1. Ферритин (Ф. саН-глобулин) - термостабильной железосодержащий белок широкой специфичности.

2. Термостабильный межорганный протеин - ТМ-1.

3. Термостабильный межорганный протеин - ТМ-2.

4. Aribc|)aiSS(aiSS) - межорганный антиген широкой специфичности.

5. АльфагМВ (агМВ) - межвидовой глобулин мозга.

6. Лактоферрин - железосодержащий гликопротеин.

7. EeTaiBH (ßiBH) - антиген межорганной специфичности (мозг-печень).

8. Альфагмикроглобулин (шМГ) - органоспецифический антиген плаценты.

9. Бета!PET (Р]РЕТ)глобулин белки широкой

10. Бета|РИВ (ßiPHB) глобулин - межорганной

11. Гамма-РИВ (уРИВ)глобулин специфичности

12. С-реактивный протеин (СРП) - острофазовые

13. АльфагСагАОпротеин белки

14. АльфаI ВЕ (aiBE) - термостабильный органоспецифический антиген головного мозга человека.

15. АльфагСС (azCC) - гетероорганный канцероцеребраль-ный антиген.

С помощью радиоиммунологического анализа в СМЖ и сыворотке крови идентифицированы:

1. Ферритин

2. Альфа1фетопротеин (шФП)

3. Раково-эмбриональный антиген (РЭА)

4. Бетагмикроглобулин фгМГ)-

Использовали стандартные технические приемы (Г.А. Ткачева с соавт., 1983) и тест-наборы отечественных и зарубежных фирм. Радиометрию проводили на счетчике "Гамма-1".

Количественная оценка неГфоспецнфнческих белков агГМ ("альфа¡глобулин мозга) и (Х2ГМ (альфагглобулин мозга) в СМЖ осуществлялась методом двухцентрового варианта иммунофер-ментного анализа на основе колоночной иммунносорбционной хроматографии (В.П. Чехонин, Г.В. Морозов, 1987). "Сэндвич" вариант твердофазного иммуноферментного анализа применяли для определения глиального кислого фибриллярного белка (вРАР) и аг гликопротеида мозга (аг-ГП). Аутоантитела к гликолипидным антигенам олигодендроглии - галактоцереброзидам (ААТ к ГалЦ) в СМЖ и сыворотке крови выявляли РСК (микромодифнкация О.С. Лучаковой, Н.П. Тарановой, 1987).

Активность ферментов (лактатдегидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, эстеразы, кислой и щелочной фосфатаз) в дефинитивной и опухолевой ткани мозга изучали иммунохимиче-скими (электрофорез в полиакриламидном геле) и гистохимическими методами с количественной оценкой гистохимических реакций с помощью сканирующего цитофотометра.

Достоверность полученных результатов определяли методами вариационной статистики с использованием критерия I по таблице Стыодента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Из изученных нами плазменных и нейроспецифических белков в СМЖ и сыворотке крови больных с неврологическими заболеваниями с наибольшим постоянством выявляются ферритин, нейроспецифические белки (сиГМ, агГМ, СРАР, аг-ГП) и бетаг-микроглобулин.

Повышение концентраций ферритина в СМЖ и крови отмечается при всех заболеваниях нервной системы, сопровождающих-

ся деструкцией мозговой ткани. Максимальные уровни ферритнна в СМЖ обнаружены при опухолях ЦНС (208,65±28,59 иг/мл). Далее по убыванию располагаются больные с ушибами головного мозга (129,96+17,23 иг/мл), геморрагическим (123,53±12,9 нг/мл) и ишемическим (75,33±30,9 нг/мл) инсультами, днскогенно-васкулярными миелопатиями (27,14±4,71 нг/мл), постинфекционным (24,55±4,03 нг/мл) и посттравматическим (20,06+2,67 нг/мл) арахноидитами головного мозга, эпилепсией (17,21+1,82 и 16,86+1,60 нг/мл). Минимальная концентрация ферритина (8,20±1,15 нг/мл) найдена при сотрясении головного мозга.

Та же закономерность прослеживается при исследовании сывороток крови больных с неврологическими заболеваниями методом радиоиммунотестирования (таблица 2).

Высокие уровни ферритина в СМЖ больных с тяжелой черепно-мозговой травмой, при спинальных и мозговых инсультах можно объяснить с одной стороны, деструкцией нервных клеток, с другой, нарушением проницаемости ГЭБ в направлении мозг-кровь, так как содержание ферритина в крови при этих заболеваниях намного выше, чем в СМЖ. Очевидно те же причины в сочетании с избыточной продукцией белка малигнизированными клетками опухолевой ткани лежат в основе повышенного уровня ферритина в СМЖ больных с опухолями ЦНС.

Секреция ферритина свойственна клеткам и ретикулоэндо-телиальной системы (S. Levi et al., 1988). В связи с этим не вызывает удивления факт наличия гиперферритинрахии и гиперферрити-немии при церебральных арахноидитах. Согласно С.И. Кусель и P.C. Стойка (1985) уровни ферритина и выраженность клеточной пролиферации находятся в прямой зависимости.

Таблица 2

Содержание ферритина в сыворотке крови и СМЖ у больных с заболеваниями нервной системы

Группы обследованных | Сыворотка | крови (нг/мл) ! СМЖ 1 (нг/мл) ;

| Опухоли головного мозга | 343,03+43,04 ] 208,65±28,59 ]

I Геморрагический инсульт ; 205,3±23,6 1 123,53+12,9 ]

: Ишемический инсульт I 183,0+11,1 75,33±30,9 |

1 Ишемическая миелопатия 1 233,0±37,66 ] 27,14±4,71 1

| Церебральный арахноидит: | 1 посттравматический 1 1 постинфекционный | 147,67±19,01 1 228,13+26,93 | 20,06+2,67 | 24,55±4,03 |

I Эпилепсия: 1

; травматическая ; : постинфекцнонная ! 172,35+16,93 | 130,71±29,52 ) 17,21 + 1,82 16,86+1,60 1

; Ушиб ГОЛОВНОГО МОЗГЭ 1 221,92±33,75 1 129,96+17,23 1

I Сотрясение головного мозга : 166,0±24,7 \ 8,20+1,15 ]

1 Контроль I 35,0±4,05 ! 5,94+0,71

С другой стороны, имеется определенный параллелизм меж-

ду содержанием ферритина в СМЖ и крови и выходом нейроспе-цифических антигенов. Чем выраженнее неврологическая симптоматика и тяжелее состояние больных, тем большее количество антигена поступает в СМЖ (таблица 3). Максимальные уровни ней-роспецифических белков в СМЖ наблюдаются при геморрагическом инсульте и черепно-мозговой травме, когда имеет место гема-торахия. Повышенно содержание антигенов и при длительных хронических заболеваниях ЦНС - церебральном арахноидите и эпилепсии.

Для обширных поражений головного мозга характерна активизация аутоиммунных процессов. При тяжелой черепно-мозговой травме ААТ к ГалЦ обнаруживаются в крови у 100% больных, в СМЖ - у 89,6%, при геморрагическом инсульте частота выявления ААТ к ГалЦ в обеих средах достигает 100%. Меньшую

частоту нахождения ААТ к ГалЦ в СМЖ больных с тяжелой черепно-мозговой травмой, по-видимому, можно объяснить тем, что присутствие крови в СМЖ было только у 52 из 88 чел. Диагностически значимые титры достигали 1:512.

Таблица 3

Содержание нейроспецифических белков в СМЖ у больных с заболеваниями нервной системы

Группы | Нейроспецифические белки

обследованных ; а|Гм(пкг/мл) агГМ(пкг/мл) ОРАР (нг/мл) агГЩнг/мл)

Опухоли головного I мозга: | нейроэктодермальные; 864,0±283,8 мезенхимные ; 491,7+247,8 метастазы | 370,0±126,1 1124,31317,7 458,31256,4 620,0+272,8 116,6121,8 64,6121,5 102,4115,7 103,2120,4 51,2117,2 102,4+28,0

Геморрагический | 742,851161,62 инсульт : 857,141136,02 123,42126,52 119,60114,42

Ишемический | 172,22±44,96 инсульт ! 205,55141,20 66,77113,18 55,46110,00

Ишемическая | до 50 миелопатия I до 50 до 16 до 15,6

Церебральный I арахноидит: ; посттравматический ! 793,33+214,07 постинфекционный I 1708,061462,52 800,01211,68 1798,331472,65 96,0115,73 177,54130,39 71,18112,38 156,88131,84

Эпилепсия: ; травматическая ; 2906,811429,8 постинфекционная 1 1225,01351,4 2094,91779,9 1375,01423,3 191,3142,7 248,0162,2 160,3+42,5 201,6161,6

Ушиб головного мозга! 646,151242,74 530,761146,92 113,23124,74 91,56119,65

Сотрясение головного! до 50 мозга ! до 50 44,0112,0 20,6+2,88

Контроль ; до 50 до 50 до 10 до 12,8

ААТ к ГалЦ у больных с опухолями ЦНС чаще выявлялись

в крови, чем в СМЖ (72,7% и 40,0% соответственно). Обращает внимание высокий титр антител (1:128 - 1:512), по сравнению с СМЖ (1:32 - 1:64). Какой-либо закономерности в частоте выявления и нарастания титра антител в зависимости от гистоструктуры опухолей не обнаружено. Развития сенсибилизации к мозговым антигенам есть прерогатива не только острых, но и хронических

патологических процессов (таблица 4).

Таблица 4

Аутоантитела к галактоцереброзидам

Группы обследованных Частота Диагностически ) обнаружения (%) | значимые титры | (1:16 и выше)

Сыворот | | Сыворотка | СМЖ ка крови ! СМЖ 1 крови 1 !

Инсульт: геморрагический ишемическнй 100,0 1 100,0 | 1:256 - 1:512 ! 1:128 - 1:512) 100,0 [ 64,6 1 1:16- 1:128 1 1:16 - 1:1281

Ишемическая миелопатия 84,2 | 68,9 | 1:64- 1:256 | 1:16- 1:1281

Опухоли ЦНС 72,7 ! 40,0 ! 1:128-1:512! 1:32-1:64 !

Эпилепсия: травматическая постинфекционная 100,0 | 33,3 | 1:64- 1:512 | 1:32- 1: 25б|

Церебральный арахноидит: посттравматический постинфекционный 83,3 1 42,8 | 1:64- 1:512 : 1:32- 1:64 1 ! 23,5 ! - ; 1:16-1:128!

Тяжелая черепно-мозговая травма (острый период) 78,9 | 39,4 | 1:64- 1:256 | 1:64 - 1:5121

Повышение концентрации нейроспецифических антигенов и

титров ААТ к ГалЦ при арахноидитах головного мозга и эпилепсии, по-видимому, есть следствие повторной волны ухудшения иммунологических показателей, связанных с аутоагрессивным вторичным повреждением мозга. Наличие феномена нейросенсибилп-зации у больных эпилепсией и отдаленными последствиями нейро-инфекцип и травм головного мозга любой степени тяжести давно установленный факт. Вторичный выход мозговых антигенов в кровь и СМЖ весьма характерны для аутоиммунных реакций при данной патологии (В.И. Горбунов, И.В.Ганнушкина, 1996).

Поэтому есть все основания говорить, что уровни нейроспецифических антигенов и титр ААТ к ГалЦ не столько отражают

этиологию заболевания, сколько характеризуют активность процессов аутонейросенсибилизации и степень деструкции определенных типов нервных клеток, в частности, нейроглии.

Содержание бетаг-микроглобулина в крови и СМЖ было умеренно повышенно при всех видах, изученной патологии (таблица 5).

Таблица 5

Содержание Рг—МГ в сыворотке крови и СМЖ .9.аботгева имямII119^в11ой сг1схел.1Ь1

1 Группы 1 обследованных Сыворотка крови \ (мг/л) 1 СМЖ (мг/л) 1

! Опухоли головного мозга 3,36±0,43 1 2,06±0,32 j

! Геморрагический инсульт 3,71±0,96 j 1,65+0,18 j

I Ишемический инсульт 2,02±0,28 \ 1,34±0,25 j

; Ишемическая миелопатия 1,96±0,15 i 1,44+0,46 !

! Церебральный арахноидит: ! постгравматический I постинфекционный 2,39±0,14 \ 4,32±1,12 i 1,72±0,14 | 1,93+0,35 i

| Эпилепсия: ; травматическая ; постинфекционная 2,51±0,23 | 2,04±0,17 \ 1,70±0,13 I 1,40±0,16

! Ушиб головного мозга 3,26±0,34 1 1,87±0,24 1

1 Сотрясение головного моз-; га 2,43+0,34 j 1,77±0,41 j

| Контроль 1,83+0,17 [ 1,14+0,46

Большинство исследователей (B.C. Клименко с соавт., 1982; Э.Д. Чеботарева с соавт., 1991) склонно считать, что это связано с клеточными превращениями - активизацией лимфоидных элементов и нейроглии, хотя возможен и интратекальный синтез Рг-МГ. Будучи физиологическим компонентом крови и СМЖ, Рг-МГ при многих заболеваниях выступает в качестве маркера аутоиммунных реакций. Результаты исследования иммуноглобулинов в СМЖ с использованием стандартных наборов иммуносывороток не отличались от литературных данных. При заболеваниях головного и спинного мозга наблюдается в той или иной степени выраженное

повышение синтеза IgG. Гиперпродукция IgG определяется не столько этиологией заболевания, сколько выраженностью иммунного ответа. При арахноидэндотелиомах, по нашим данным, преобладает продукция IgA, при атипичных злокачественных новообразованиях головного мозга (анапластические астроцитомы, ги-гантоклеточные глиобластомы) в СМЖ увеличивается содержание IgM (6 мг% и более). Уменьшенное образование IgA характерно для эпилепсии и церебральных арахноидитов.

Новым в плане оценки гуморального иммунитета в СМЖ является обнаружение естественного фактора ингнбирования (ЕИФ) активности макромолекулярных антител, относящихся к классу IgM. Из обследованных нами 99 чел. с разнообразной патологией нервной системы (черепно-мозговая травма, опухоли ЦНС, эпилепсия, церебральный арахноидит и неврологические проявления остеохондроза позвоночника) ЕИФ в СМЖ выявлен у 9 (9,9%). Отсутствие функционирования ЕИФ, согласно данным литературы (Н.В. Журавлева, Н.К. Родосская, 1988; A.A. Шепелев, 1990), указывает на высокую напряженность естественного иммунитета и, наоборот, наличие его - признак развития вторичного иммунодефицита ("позднодействующей супрессии").

Уровни альфа-фетопротеина (ai-ФП) в крови и СМЖ при изученных нами патологических процессах заметно не отличались от контрольных показателей. Подавление синтеза ai-ФП в крови и СМЖ наблюдали в острый период тяжелой черепно-мозговой травмы, при опухолях ЦНС, эпилепсии, в крови - при геморрагических инсультах. Возрастание уровня ai-ФП в СМЖ до 7,09 нг/мл было найдено только в восстановительном периоде травматической болезни мозга. Это согласуется с результатами других иссле-

дований (В.М. Мирошников, 1992), при которых наблюдали снижения уровня а|ФП при отягощении состояния больных и повышение при активации регенеративных способностей. Железосодержащий гликопротеин - лактоферрин в СМЖ при заболеваниях нервной системы обнаруживался редко (в 7,7% случаев), лишь при наличии гнойных осложнений (менингиты, абсцессы). При прорыве ГЭБ у больных с заболеваниями нервной системы в СМЖ также выявлялись положительные реакции на термостабильные межорганные тканевые антигены - ТМ-1 и ТМ-2 (в 5,2% - 29,4% случаев в зависимости от вида патологии), в сыворотке крови, преимущественно у больных с арахноидэндотелиомой головного мозга (14,3%), определен альфа|-органоспецифический глобулин мозга (шВЕ).

Не удалось идентифицировать в СМЖ фактор некроза опухолей (при опухолях ЦНС), аг-мнкроглобулин, раковоэмбрио-нальный антиген. Содержание последнего увеличивалось только в крови при наличии метастазов рака легкого (максимальная концентрация белка достигала 315 нг/мл).

Возможности нозологический диагностики заболеваний нервной системы с помощью плазменных и нейроспецифических антигенов весьма ограничены и даже количественный уровень того или иного белка в СМЖ не может быть определяющим критерием.

При рефлекторных синдромах пояснично-крестцового остеохондроза качественный состав белков СМЖ, соотношение анодных и катодных фракций, содержание основных классов иммуноглобулинов и нейроспецифических белков не претерпевает изменений и практически не отличается от аналогичных показателей у здоровых лиц. При стойкой и длительной компрессии нерв-

ных корешков в СМЖ может наблюдаться повышенное содержание общего белка, глобулиновых фракции, возрастание концентрации си-ФП (4,4±0,44 нг/мл) и ферритина (13,25+1,09 нг/мл), что, по нашему мнению, связано с нарушением гематоликворного барьера.

Развитие реактивного воспаления в оболочках (эпидурит, арахнорадикулит) и ишемии спинного мозга (миелопатия) сопровождается возрастанием в СМЖ содержания общего белка, иммуноглобулинов класса в, преобладанием белков катодной группы (Р2 и у-глобулинов). Наряду с этим, увеличивается процент (53,8%) максимального выявления ферритина и соответственно его концентрация в СМЖ (27,14±4,71 нг/мл). Уровень сиФП равен 3,0+0,35 нг/мл, что несколько выше нормы. По сравнению с больными с корешковыми компрессионными синдромами при спинальных инсультах в СМЖ повышается содержание нейроспецифических антигенов: СХ1-ГМ, СС2-ГМ, ОРАР - в 2 раза, агГП - в 1,5 раза. В крови и СМЖ регистрируется присутствие ААТ к ГалЦ: в крови у 78,4% больных, в СМЖ - у 68,9% в титрах заметно превышающих контрольные показатели (1:16 и выше).

Нарастание концентрации нейроспецифических антигенов и ААТ к ГалЦ в обоих средах отражает развитие нейросенсибилиза-ции и выраженность деструктивных процессов в ЦНС.

У больных с легкой черепно-мозговой травмой (сотрясение головного мозга) при иммуноэлектрофорезе СМЖ заметных отклонений в протеинограммах не найдено, преимущественно определялись "легкие" белки - преальбумин, альбумин, трансферрин. Концентрация нейроспецифических белков очФП и агГМ в СМЖ не превышала контрольных показателей (50 пкг/мл), содержание

вРАР и агГП составило соответственно 44,0±12,0 нг/мл и 20,6±2,88 нг/мл (р<0,001). ААТ к ГалЦ в СМЖ и крови отсутствовали или титры их были ниже диагностических (1:4 - 1:8) - у 25% больных. В крови и СМЖ отмечено повышение уровней ферритина и Рг-МГ (таблицы 2 и 5). Один из них (ферритин) характеризует реакцию организма больного на нейротравму (деструкцию мозговой ткани), увеличение концентрации другого связано с активизацией факторов неспецифической иммунной защиты, пролиферацией клеточных элементов.

Для больных с тяжелой черепно-мозговой травмой свойственно увеличение в СМЖ содержание общего белка, белков анодной и, особенно (до 72%), катодной фракции (Рг- и у- глобулинов), иммуноглобулинов класса в, возможно, обнаружение термостабильных межорганных тканевых антигенов - ТМ-1 и ТМ-2 (в 5,2 и 6,7% случаев). По сравнению с больными с легкой черепно-мозговой травмой концентрация сиГМ в СМЖ увеличивается почти в 13 раз, аг-ГМ - в 10,6 раз, вРАР - в 2,5, агГП - в 4,5 раза (таблица 3). В СМЖ (39,4%) и сыворотке крови (78,9%) определяются аутоантитела к глиальным структурам. Максимальный титр ААТ к ГалЦ в СМЖ достигает 1:512, в сыворотке крови - 1:256, что отражает высокий уровень сенсибилизации к мозговым антигенам. Активно реагируют на нейротравму и белки плазменного происхождения. Уровень ферритина в 16 раз превышает аналогичный показатель у больных с легкой черепно-мозговой травмой, в крови - в 1,8 раза (таблица 2). Столь резкая разница в содержании белка объясняется значительным поступлением в СМЖ продуктов деградации белков крови и паренхимы мозга. Синтез сиФП и Р2-МГ подавляется или усиливается в зависимости от стадии развития

травматической болезни мозга: в остром периоде содержание шФП в СМЖ и крови умеренно снижается (1,69+0,43 нг/мл и 2,43+0,40 нг/мл - соответственно), РгМГ - повышается (1,87±0,24 мг/л и 3,26±0,34 мг/л), в период стабилизации нарушенных функций имеются обратные соотношения, в связи с чем указанные белки можно рассматривать как стадиоспецифические.

У больных с церебральным арахноидитом без эпилептических припадков в СМЖ наблюдается уменьшение содержания пре-альбумина, альбумина, и умеренное увеличение глобулинов, появление термостабильных межорганных антигенов ТМ-1 (18,7%), ТМ-2 (13,4%), регистрируются высокие уровни нейроспе-цифических антигенов. При постинфекцнонном арахноидите головного мозга возрастает уровень всех исследуемых нейроспеци-фических белков (оиГМ - 1708,06+462,52 пкг/мл - диапазон колебаний 50-3200 пкг/мл; агГМ - 1798,33±472,65 пкг/мл, диапазон колебаний - 50-3200 пкг/мл, вРАР - 177,54+30,39 нг/мл, диапазон колебаний - 16-512 нг/мл; агГП - 156,88±31,84 нг/мл, диапазон колебаний - 12,8-819 нг/мл), при посттравматическом арахноидите - преимущественно ои-ГМ и аг-ГМ (сиГМ - 793,33±214,07 пкг/мл, агГМ -800,0+211,68 пкг/мл, диапазон колебаний - 50-3200 пкг/мл). Они чаще (соответственно 73,4 и 68,8%), чем вРАР и агГП обнаруживаются в СМЖ. Аутосенсибнлизация к антигенам нервной ткани (ГалЦ) также больше выражена у больных с посттравматическим арахноидитом головного мозга. ААТ к ГалЦ в титрах 1:64 - 1:512 присутствовали в СМЖ у 42,8% больных, в крови - у 83,3%. Помимо, увеличения концентрации ненроспецифических белков в СМЖ и крови у больных с хроническими заболеваниями оболочек го-

ловного мозга отмечалось повышенное содержание ферритина ( в 3-4 раза), незначительное - РгМГ, снижение концентрации оиФП, выход более чем у половины больных в кровь белков острой фазы С-реактивного и агАС протеинов (соответственно 67,8% и 57,1%), что делало обоснованным назначение не только иммуномодули-рующей, но и противовоспалительной терапии.

Близкие к указанным изменения антигенного состава СМЖ и крови наблюдались у больных с эпилепсией (таблицы 2 и 3). Нами не установлена коррелятивная связь между содержанием ней-роспецифических антигенов в СМЖ (вне приступа) и частотой эпилептических припадков в анамнезе. Наименьшая концентрация белков найдена при фокальных припадках. Уровни сцФП и Р2МГ были близки к контрольным.

Мозговые инсульты, особенно геморрагический, сопровождаются повышением в СМЖ уровня у-глобулинов, увеличением содержания иммуноглобулинов в и М, ферритина. Независимо от вида инсульта в кровь поступают "острофазовые", активно секре-тируемые антигены - СРП и агС, Р|-РЕТ-глобулин. Частота их обнаружения при ишемических инсультах составляет для СРП-77%, агАС-43,7%, Р|-РЕТ-глобулина - 45,8%, при геморрагическом соответственно 72,2% и 52,7% и 36,1%. Элиминация острофазовых белков в ток крови при этой патологии есть ни что иное как проявление неспецефической острофазовой иммунной реакции на массивную деструкцию мозговой ткани. Существенно возрастает в СМЖ содержание нейроспецифических белков (таблица 3). При кровоизлияниях в мозг изменения антигенного состава выражены больше, чем при инфарктах мозга. В равной степени это относится к уровню аутоантител. При ишемическом инсульте ААТ к ГалЦ в СМЖ

определяются у 64,6% больных в титрах 1:8 - 1:128, при геморрагическом - у 100% больных в титрах 1:128- 1:512.

На протеинограммах СМЖ нейроонкологических больных обращает внимание преобладание белков катодной группы, что косвенно указывает на значительное нарушение проницаемости ГЭБ. Об этом же свидетельствует появление в СМЖ термостабильных межорганных антигенов ТМ-1 (29,4%) и ТМ-2 (13,6%). В СМЖ заметно возрастают уровни ^О и а при мультиформ-ных глиобластомах - ^М. Содержание ферритина в СМЖ ниже (208,65±28,59 нг/мл), чем в крови (343,03+43,04 нг/мл) и не определяется гистоструктурой опухоли, чего нельзя сказать об уровне нейроспецифических белков. Из таблицы 3 видно, что он выше у больных с глиомами и метастазами рака легкого. Аутоантитела к ГалЦ, выявляются чаще и более высоких титрах (1:128 - 1:512) в крови (72,7%), чем в СМЖ (40%) независимо от природы опухоли. В составе сыворотки крови у больных с опухолями головного мозга, наряду с ферритином, идентифицируются острофазовые белки (СРП, агАС) и тканевые антигены широкой межорганной специфичности (шББ, (51-РИВ и у-РИВ глобулины). При мезенхимных опухолях отмечается более широкий набор антигенов, чем при нейроэктодермальных и эпителиальных. Пестрота антигенного "ландшафта" крови и СМЖ у нейроонкологических больных, наряду с другими факторами, определяется перестройкой белков ткани мозга в процессе малигнизации. Исследование 107 экстрактов опухолей ЦНС и 60 экстрактов дефинитивного мозга показало, что усложнение антигенного спектра опухолей происходит за счет накопления межорганных антигенов, антигенного упрощения - за счет потери нейроспецифических белков (рис. 1). Первый феномен

характерен для мезенхимных опухолей, второй - для нейроэкто-дермальных.

Рис.1. Накопление нейроспецифических и межорганных антигенов в дефинитивной и опухолевой ткани мозга

человека

□ Опухолевая ткань мозга

¡Дефинитивная ткань мозга

Анализируя антигенный профиль опухолевых тканей и "мозаику", содержащихся в них ферментов и изоферментов можно уточнить гистогенез опухоли, степень ее зрелости, разграничить доброкачественный и злокачественный процесс.

Для прижизненной оценки деструктивного процесса у больных с заболеваниями нервной системы лучше использовать методы радиоиммунологического и иммуноферментного анализа ферри-тина и нейроспецифических белков в биологических средах (СМЖ,

сыворотка крови). Данные антигены выявлены при всех изученных нами нозологических формах. Чем выраженнее патология ЦНС, тем выше уровни белков. Кроме того, определение сиГМ, С12ГМ, ОРАР и агГП в качестве маркеров астроцитов имеет важное значение для проведения тонкой дифференциальной диагностики локализации патологического процесса, так как позволяет точно ответить на вопрос какие структуры больше поражены - белое или серое вещество, сама нервная клетка или окружающая ее нейрог-лия.

Анализ антигенного состава СМЖ и сыворотки крови приобретает еще большую значимость, когда клинически объективные признаки повреждения мозга у больных отсутствуют. Несоответствие выраженности субъективной и объективной неврологической симптоматики ставит врача в затруднительное положение, обуславливает диагностические ошибки и дефекты в лечении и трудоустройстве больных. Нахождение в СМЖ и сыворотке крови высоких концентраций белков-маркеров повреждения мозговых структур обеспечивает объективность врачебно-трудовой и судебно-медицинской экспертизы в связи с наличием неоспоримых доказательств деструкции мозговой ткани, делает диагноз обоснованным и, что весьма существенно, позволяет оценить активность патологического процесса при так называемой резидуальной симптоматике - "легких органических знаках поражения ЦНС". Высокие концентрации нейроспецифических белков и феррнтпна свидетельствуют о продолжающейся гибели структурных элементов, низкие - о том, что процесс приостановлен. На основании иммуно-химических исследований СМЖ и сыворотки крови становится возможным обнаружение повреждения мозгового вещества при

отсутствии заметных морфологических изменений на ПЭГ, при компьютерной и магниторезонансной томографии. С другой стороны, при хронических заболеваниях головного мозга (эпилепсия, церебральные арахноидиты) ферритин и нейроспецнфические белки служат индикатором наличия и развития атрофического процесса. Тесты на нейроспецифические белки неоценимы также при проведении дифференциальной диагностики между функциональными и органическими поражениями ЦНС, сотрясением и ушибом головного мозга, дискогенно-васкулярной радикулоишемией и миелопатией. При неврозах, сотрясении головного мозга, радику-лоишемии концентрация нейроспецифических белков в СМЖ не превышает диагностически значимых показателей. Об активности воспалительного процесса у больных с церебральным арахноидитом лучше судить по уровню белков "острой фазы", особенно СРП, который в более высоких концентрациях обнаруживается в сыворотке крови.

Таким образом, исследование плазменных и нейроспецифических антигенов в СМЖ и сыворотке крови больных с заболеваниями нервной системы позволяют не только охарактеризовать интимные механизмы патогенеза, но и предложить лабораторные тесты для определения деструктивного и воспалительного процессов в тканях мозга, проведения дифференциальной диагностики и для контроля за лечением.

Углубления теоретических разработок по антигенному "профилю" СМЖ при различных заболеваниях нервной системы, получение моноспецифических антител к нейроспецифическим антигенам открывает новые перспективы для вмешательства в течение патологического процесса, одним из них является иммунноад-сорбционный способ защиты мозга от аутоантительной агрессии

путем извлечения из кровотока антител к нейроспецифическим белкам.

ВЫВОДЫ:

1. В СМЖ и сыворотке крови больных с заболеваниями ЦНС определяются антигены узкой и широкой органной специфичности. К антигенам узкой специфичности относятся глиальные белки - а|ГМ, агГМ, вРАР и агГП. Из межорганных антигенов с наибольшим постоянством присутствует плазменный белок - фер-ритин.

2. Возможности нозологической диагностики заболеваний нервной системы с помощью обнаружения в СМЖ и сыворотке крови нейроспецифических и плазменных антигенов ограничены. Их выход в СМЖ и кровь предопределяется структурными изменениями мозговой ткани, размером очага поражения, характером и стадией патологического процесса.

3. Нарастание уровней нейроспецифических белков в СМЖ наблюдается при массивной деструкции нервной ткани (тяжелая черепно-мозговая травма, инсульты) и длительно текущих хронических заболеваниях ЦНС, сопровождающихся развитием атрофии вещества мозга (церебральные арахноидиты, эпилепсия). У больных с опухолями ЦНС уровни нейроспецифических белков в СМЖ зависят от направленности гистогенеза и степени дифференциров-ки новообразования. Относительно низкие концентрации мозговых антигенов отмечены при легкой черепно-мозговой травме и ишемической миелопатии.

4. Индикаторами иммунного ответа в СМЖ являются плазменные белки-иммуноглобулины, Р2-МГ, естественный фактор ингибирования активности антител класса М.

5. Повреждения клеточных структур нервной ткани и ГЭБ вызывает развитие у больных с заболеваниями нервной системы феномена аутонейросенсибилизации: в СМЖ и сыворотке крови обнаруживаются высокие титры ААТ к галактоцереброзидам, специфическим маркерам олигодендроглиальных и миелиновых мембран. ААТ к ГалЦ чаще и в больших титрах присутствуют в крови. Особенно высока продукция антител при геморрагическом инсульте. У больных с неврологическими проявлениями остеохондроза (радикулопатии, рефлекторные синдромы) и сотрясением мозга ААТ к ГалЦ не обнаруживаются.

6. Максимальные уровни ферритина в СМЖ и сыворотке крови выявляются при опухолях ЦНС (глиомы, метастазы), далее следуют больные с ушибами головного мозга, геморрагическим и ишемическим инсультом. Концентрация белка в СМЖ при этой патологии заметно выше, чем у больных с эпилепсией, церебральным арахноидитом и сотрясением головного мозга.

7. Раковоэмбриональный антиген и аг-плацентраный микроглобулин в СМЖ больных с заболеваниями нервной системы не определяются. В крови, реже в СМЖ, увеличение продукции онко-фетальных антигенов (шФП и РЭА) имеет место при метастазах в головной мозг опухолей внутренних органов.

8. Иммунохимические тесты на нейроспецифические, межорганные антигены, ААТ к ГалЦ с количественной их оценкой в СМЖ и сыворотке крови рекомендуется использовать при комплексном обследовании больных с заболеваниями нервной системы для оценки степени выраженности деструктивного процесса и характеристики аутоиммунных реакций.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Определение повышенных уровней нейроспецифических белков (шГМ, агГМ, вРАР, аг-ГП) и ААТ к ГалЦ в СМЖ и сыворотке крови больных с заболеваниями нервной системы имеет значение:

а) для диагностики:

- повреждения клеточных структур ткани мозга;

- нарушения проницаемости ГЭБ в направлении мозг-СМЖ, мозг-кровь;

- аутосенсибилизации организма к антигенам нервной ткани.

б) для дифференциальной диагностики:

- органических и функциональных заболеваний головного и спинного мозга;

- сотрясения и ушиба головного мозга легкой степени;

- дискогенно-васкулярных радикуло- и миелопатнй.

в) для контроля за течением патологического процесса и эффективностью проводимой терапии.

г) для выработки показаний к использованию иммуноадсор-бентов.

2. Концентрация ферритина в СМЖ и сыворотке крови может быть использована в качестве неспецифического маркера деструкции мозговой ткани.

3. Развитие тканевых воспалительных реакций характеризуют в СМЖ уровни иммуноглобулина О, Р2-МГ, лактоферрина; в сыворотке крови дополнительным маркером являются острофазовые белки (агАС, СРП).

4. Повышение в сыворотке крови больных с опухолями ЦНС онкофетальных антигенов (сиФП, РЭА) является одним из призна-

ков метастатической природы новообразования.

5. Важным условием выявления гистологического типа и степени прогрессии опухолевых тканей мозга является учет распределения в них нейроспецифических и межорганных антигенов, а также активности ферментов и изоферментов при комплексном исследовании материала биопсий.

6. Для идентификации нейроспецифических белков в СМЖ и сыворотке крови необходимо использовать методы иммунофер-ментного анализа, ААТ к ГалЦ - микромодификацию РСК, ферри-тина, Рг-МГ, онкофетальных антигенов - радиоиммунологический анализ, белков "острой фазы", иммуноглобулинов - метод имму-нодиффузионного титрования в агаре.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Белопасов В.В., Кулагин П.П., Чишиева М.А. и др. Им-

мунохимнческая идентификация органоспецифических и межорганных антигенов в сыворотке крови больных с нарушениями мозгового кровообращения // Шестой Всесоюзный съезд невропатологов и психиатров: Тез. докладов. — М., 1975. - т. II. - С. 178-180.

2. Корявкина В.П., Аламдаров И.Н., Шиянов А.Д., Белопасов В.В., Дорфман Р.В. Гистохимическая и электрофоретическая характеристика активности и топографии некоторых энзимов, изоферментов опухолей центральной нервной системы // Энзимо-логия новообразований. - Саратов, 1981.-С. 73-81.

3. Корявкина В.П., Аламдаров И.Н., Белопасов В.В., Дорфман Р.В. Исследование некоторых энзимов опухолей центральной нервной системы в зависимости от клинического течения и гистогенеза новообразования // Маркеры опухолей. - Саратов, 1981. - С. 96-98.

4. Чишиева М.А., Кулагин П.П., Белопасов В.В. и др. Им-мунохимическая идентификация нейроспецифических антигенов в составе экстрактов опухолей мозга человека // Иммунопатология нервных и психических заболеваний. Тез. докл. Всесоюзн. научн. конф.-М„ 1983.-С. 146-147.

5. Белопасов В.В., Балашов В.И. К оценке системы фибри-нолиза у больных с острыми нарушениями мозгового кровообращения // Краткие тез. докл. 64-ой итоговой научн. сессии АГМИ. -Астрахань, 1983.-С. 14.

6. Аламдаров И.Н., Белопасов В.В., Чишиева М.А., Кулагин П.П. Некоторые итоги изучения органоспецифических антигенов при опухолевых и неопухолевых заболеваниях головного мозга // Там же. - С. 20-21.

7. Шульгина А.П., Белопасов В.В. Оценка иммунологического статуса у больных с черепно-мозговой травмой // Там же. - С. 30-31.

8. Белопасов В.В., Шульгина А.П., Никулина Д.М. Имму-нохимическое изучение белков спинномозговой жидкости у больных с опухолями мозга и черепно-мозговой травмой // Краткие тез. 65-ой научн. конф. медиков Астраханской области. - Астрахань, 1984.-С. 35-36.

9. Шульгина А.П., Никулина Д.М., Белопасов В.В. Имму-нохимическое изучение белков ликвора у различных неврологических больных // Медицинские проблемы биохимии: Тез. докл. - Кемерово, 1985.-С. 13-15.

10. Белопасов В.В., Шульгина А.П., Страмова H.A. Обнаружение некоторых тканевых антигенов в ликворе больных с заболеваниями центральной нервной системы // Тез. докл. 67-й облает, науч.-практ. конф. медиков Астраханской области. - Астрахань,

1986.-С. 112-113.

11. Белопасов В.В., Страмова H.A. Изучение белкового спектра спинномозговой жидкости при опухолевых заболеваниях головного мозга // Тез. докл. 68-й итоговой научн. сессии сотрудников ин-та и облает, научн-практич. конф. врачей Астраханской области. - Астрахань, 1987.- С. 163-164.

12. Пухов Е.Б., Белопасов В.В., Страмова H.A., Шайдакова Н.В. Белковый состав ликвора при сотрясении головного мозга // Тез. докл. итог, научн. сессии сотрудников ин-та и облает, научн-практич. конф. врачей Астраханской области. - Астрахань, 1988. -С. 213-214.

13. Кулагин П.П., Чишиева М.А., Белопасов В.В. Нейроспе-цифические антигены в дифференцировке опухолей головного мозга человека // Гистохимические и иммунохнмические маркеры злокачественных опухолей: Сб. научн. трудов. - Саратов, 1988. - С. 4548.

14.Белопасов В.В., Пухов Е.Б., Козина H.A., Кравец A.A. Изучение содержания ферропротендов в ликворе больных с заболеваниями центральной нервной системы II Тез. докл. области, научн-практич. конф. сотрудников мед. ин-та и врачей Астраханской области. - Астрахань, 1990. - С. 211-212.

15. Белопасов В.В., Кулагин П.П., Чишиева М.А. и др. Маркерные возможности некоторых эмбриоспецифических, органных и межорганных антигенов в диагностике опухолевых и неопухолевых заболеваний головного мозга II Реабилитация иммунной системы. Тез. докл. 11-го Международного симпозиума. - Цхалтубо, 1990.-С. 40-41.

16.Аламдаров И.Н., Локтионова А.И., Белопасов В.В. О значении рентгено-контрастных и иммунохимических исследова-

ний в установлении этиологии симптоматической эпилепсии // Тез. докл. облает, науч.-практич. конф. сотрудников мед. ин-та и врачей Астраханской области. - Астрахань, 1991.-С. 174-175.

17. Пухов Е.Б., Козина H.A., Белопасов В.В. Содержание ферритина в крови и ликворе при различных клинических формах травматической болезни мозга//Там же. - С. 185-186.

18. Шепелев A.A., Белопасов В.В., Болдырев A.B. Клиническая значимость выявления вторичного иммунодефицита, обусловленного действием естественного фактора ингибиции активности антител класса M // Там же. - С. 216-217.

19. Белопасов В.В., Пухов Е.Б., Никулина Д.М., Ничога В.Д., Козина H.A. Изменение белков ликвора при тяжелой черепно-мозговой травме // Некоторые актуальные вопросы хирургии. -Астрахань, 1991.-С. 76-77.

20. Belopasov V.V., Chishiyeva М.А., Chechonin V.P. Antigen profile of brain tissues, blood sera and CSF under CNS tumor // 9-th Europ. Congr. of neurosurgery: abstr. - M., 1991. - P. 597

21. Белопасов B.B., Ведищев A.A., Чехонин В.П., Лучакова О.С. Белки спинномозговой жидкости как маркеры повреждения у больных с неврологическими проявлениями остеохондроза // Вер-теброневрология. - 1992. - № 2. - С. 66-69.

22. Белопасов В.В., Кравец A.A. Определение естественного фактора ингибиции активности антител класса M в ликворе больных с заболеваниями нервной системы. Естественное ингибнрова-ние активности и подавление синтеза антител класса M // Сб. научи. трудов - Саратов, 1993. - С. 3-8.

23. Пухов Е.Б., Белопасов В.В., Чехонин В.П., Лучакова О.С. Содержание нейроспецифических белков в ликворе больных с травматическими арахноидитом головного мозга // Материалы

юбилейной научн. конф. Астраханского гос. мед. ин-та. - Астрахань, 1993.-С. 249-251.

24. Белоиасов В.В., Шамилина Т.А. Специфические антигены мозга в спинномозговой жидкости больных с мозговым инсультом //Там же.-С. 253-254.

25. Пухов Е.Б., Белопасов В.В. Оценка аутоиммунных сдвигов при травматической болезни головного мозга // Тез. докл. заседаний Астраханского обл. научн. об-ва иммунологов. - Астрахань, 1994.-С. 9-10.

26.Belopasov V.V., Loktionova A.I., Chishieva М.А., Morozov S.G. Antigen Composition characteristics of Blood serum and CSL in Patients with CNS Tumors // Int. J. Immunorehabilitation.-1994.-N 1.-P.53-54.

27. Белопасов В.В., Хрусталева H.A., Гроппа С.А. и др. Им-мунохимические показатели структурного повреждения мозговой ткани в различные периоды травматической болезни головного мозга // Ж. невропатол. и психиатрии. - 1994. - Т 3. - С. 74-77.

28. Пухов Е.Б., Белопасов В.В., Чехонин В.П., Лучакова О.С. Информативная значимость некоторых иммунохимических показателей ликвора и крови у больных с травматической болезнью головного мозга // Актуальные вопросы хирургии. - Астрахань, 1994.-С. 181-184.

29. Белопасов В.В. Перспективы использования определения уровней нейроспецифических белков и антител к галактоцеребро-зидам в сыворотке крови и ликворе для оценки тяжести черепно-мозговой травмы // Лабораторные методы исследования в судебной медицине и задачи судебно-медицинской науки и практики по их совершенствованию: Материалы VIII Всероссийского пленума судебных медиков. - Ижевск, 1994. - С. 121-123.

30.Белопасов В.В., Пухов Е.Б., Шубин Е.Б., Старастюк Н.Д. Изменения антигенного состава крови и ликвора в зависимости от тяжести черепно-мозговой травмы / Первый съезд нейрохирургов России: Тез. докл. - Екатеринбург, 1995. - С. 31-32.

31.Белопасов В.В. Иммунологические маркеры активности воспалительного и деструктивного процесса при хронических заболеваниях оболочек мозга // Нейроиммунология, нейроинфекция, нейроимидж: Сб. трудов международ, конференции. - Санкт-Петербург, 1995. - С. 11-12.

32. Белопасов В.В., Чехонин В.П., Лучакова О.С. Диагностика структурных повреждений мозговой ткани с помощью современных иммунохимических методов исследования // Актуальные вопросы современной микробиологии, вирусологии и иммунологии: Сб. научн. работ. - Астрахань, 1995. - С. 9-10.

33. Чехонин В.П., Рябухин И.А., Белопасов В.В. и др. Имму-ноферментный анализ антител к нейроспецифическим белкам в оценке состояния функции гематоэнцефалического барьера // Мо-ноклональные антитела в нейробиологии. - Новосибирск, 1995. - С. 160-169.

34.Nikulina D.M., Shulgina А.Р., Belopasov V.V., Sevidova N.A., Nichoga V.D. Blood-brain barrier condition évaluation in brain disorders // 23rd Meeting of the Fédération of European Biochemical Societies: abstr. - Basel, 1995.-p. 175.

35. Морозов С.Г., Чехонин В.П., Белопасов В. В. и др. //Иммуноферментный анализ ферритина в диагностике опухолей головного мозга. -Вопросы мед. химии. -1995, т.41, №2.- с.43-45.

36. Сухарев А.Е., Белопасов В.В., Уклистая Т.А., Якубовская Р.И. Клиническая оценка иммунохимических маркеров при раке легкого // Пульмонология: Сб. резюме VI Национал, конгресса по

болезням органов дыхания. - Новосибирск, 1996. - с. 67.

37. Ажкамалов С.И., Белопасов В.В. Маркеры деструктивного процесса при эпилепсии // Эпилепсия: Тез. докл. - М., 1996. - С. 3-4.

38. Белопасов В.В., Аламдаров И.Н. Роль некоторых патогенетических факторов в развитии и прогрессировании сосудистых заболеваний головного мозга II Тр. Астрах, мед. академии. - Астрахань, 1996.-С. 162-167.

39. Белопасов В.В. Диагностическая значимость тестов на нейроспецифические белки у больных эпилепсией // Актуальные проблемы неврологии: Сб. научн. трудов. - Днепропетровск, 1996. -С. 83-84.

40. Способ диагностики деструкции мозговой ткани при церебральных арахноидитах. Удостоверение на рационализаторское предложение № 1043 (10.09.92 г.) (соавт. Пухов Е.Б.).

41.Иммунохимические методы идентификации гистогенеза и степени прогрессии (злокачественности) опухолей центральной нервной системы. Методические рекомендации. - Астрахань, 1996, 16 с. (соавт.: Кулагин П.П., Чншиева М.А., Корявкина В.П.).

42. Белопасов В.В. Клиническая оценка иммунохимических методов исследования белков ликвора. Методические рекомендации. - Астрахань, 1996. - 14 с.

43. Чехонин В.П., Рябухин И.А., Белопасов В.В. и др. //Иммуноферментный анализ антител к нейроспецифическим белкам в оценке состояния функции гематоэнцефалического барьера. -Иммунология 1996.-№2. -с.67-69.

44. К вопросу о механизмах аутоагрессии антител к нейроспецифическим белкам через ГЪБ. //Российский психиатрический журнал. -1997-№1. -с.43-45.

30. Белопасов В.В., Пухов Е.Б., Шубин Е.Б., Старастюк Н.Д. Изменения антигенного состава крови и ликвора в зависимости от тяжести черепно-мозговой травмы / Первый съезд нейрохирургов России: Тез. докл. - Екатеринбург, 1995. - С. 31-32.

31. Белопасов В.В. Иммунологические маркеры активности воспалительного и деструктивного процесса при хронических заболеваниях оболочек мозга // Нейроиммунология, нейроинфекция, нейроимидж: Сб. трудов международ, конференции. - Санкт-Петербург, 1995.-С. 11-12.

болезням органов дыхания. - Новосибирск, 1996. - с. 67.

38. Белопасов В.В., Аламдаров И.Н. Роль некоторых патогенетических факторов в развитии и прогрессировании сосудистых заболеваний головного мозга // Тр. Астрах, мед. академии. - Астрахань, 1996.-С. 162-167.

Похожие научные работы

Каталог диссертаций